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CH638177A5 - Derives de peptides. - Google Patents

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Publication number
CH638177A5
CH638177A5 CH1273578A CH1273578A CH638177A5 CH 638177 A5 CH638177 A5 CH 638177A5 CH 1273578 A CH1273578 A CH 1273578A CH 1273578 A CH1273578 A CH 1273578A CH 638177 A5 CH638177 A5 CH 638177A5
Authority
CH
Switzerland
Prior art keywords
gly
tyr
ala
mephe
group
Prior art date
Application number
CH1273578A
Other languages
English (en)
Inventor
Barry Arnold Morgan
Original Assignee
Reckitt & Colmann Prod Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Reckitt & Colmann Prod Ltd filed Critical Reckitt & Colmann Prod Ltd
Publication of CH638177A5 publication Critical patent/CH638177A5/fr

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    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/665Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
    • C07K14/70Enkephalins
    • C07K14/702Enkephalins with at least 1 amino acid in D-form
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    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61P1/12Antidiarrhoeals
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    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
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    • C07C275/06Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic and saturated carbon skeleton
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Description

L'invention décrite ici se rapporte à des dérivés de peptides, à des procédés pour les préparer et à des compositions thérapeutiques de ceux-ci.
Suivant cette invention, on fournit des composés de formule:
R>Tyr—B—Gly—D —N—Rx (I)
R8
dans lesquels
R1 est un atome d'hydrogène ou un des groupes: méthyle, allyle, diméthylallyle, propargyle, cyclopropylméthyle, cyclobutylméthyle, ou phénétyle,
B est le groupe - NH - CR3H - CO -dans lequel
R3 est un groupe alkyle en Cj_6 ou CqH2qYCrH2r+i, où q vaut 1 ou 2, r vaut 0 ou 1 et Y est O, S, SO ou S02,
le groupe ayant la configuration D;
D est le groupe — NR5—CR6H — CO—
dans lequel
R5 est un atome d'hydrogène, ou un groupe méthyle,
R6 est un groupe Ar-alkyle en C^,
le groupe ayant la configuration L;
R8 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C[_5, Ar ou Ar-alkyle en C^,
Rx est un groupe (CH2)S—X où s vaut entre 2 et 4 et X est un des groupes NHR9, N+R11 R12R13NR9COR11, NR9COOR11, NR9CONH2, NR°CONR10Rn, N(0)„RuR12, COOR9, CONR9R10, ou OCONR9R10, où: R9 est un atome d'hydrogène, un groupe alkyle en C^, Ar ou Ar-CH2; R10 est un atome d'hydrogène ou un alkyle en C[_3; R11 est un groupe alkyle en C|.3, Ar ou ArCH2; R12 est un groupe alkyle en Cj.j; R13 est un groupe alkyle en Cj_3 et n vaut 0 ou 1 ;
ou bien le groupe: CH2CH2
(CH2)m dans lequel m vaut entre 1 et 3 et Q est l'un des groupes S0,S02, CO, CHOH, N+MeRu, ou N(0)R]I,
Ar est un groupe phényle ou phényle substitué par du chlore, par un des groupes méthyle, hydroxyle ou méthoxyle; et leurs sels d'addition acide.
Les exemples de B comprennent la D-alanine, l'acide D-a-aminobutyrique, la D-valine, la D-norvaline, la D-leucine, la D-norleucine, la D-sérine, la D-thréonine, la D-méthionine et le sul-foxyde de D-méthionine.
Des exemples de D incluent la L-phênylalanine et la N-méthyl-L-phénylalanine.
Un aspect de cette invention consiste en des composés de formule I dans lesquels
R1 est un hydrogène ou un des groupes méthyle, allyle, diméthylallyle, propargyle, cyclopropylméthyle, cyclobutylméthyle, ou phénétyle,
B est le groupe —NH —CR3H—CO—
dans lequel
R3 est un groupe alkyle en C[_6 ou CqH2qYCrH2r+i (où q vaut 1 ou 2, r vaut 0 ou 1 et Y est un des groupes O, S, SO, ou S02),
le groupe ayant la configuration D;
D est le groupe — N R5 — CR6H — CO —
dans lequel R5 est un hydrogène ou un groupe méthyle,
R6 est un groupe Ar-alkyle en Ci_3,
le groupe ayant la configuration L;
R8 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C[_5,
Rx est le groupe (CH2)S—X, où s vaut entre 2 et 4 et X est l'un des groupes NHR9, NRQCORn, NR9CONH2, NR9CONR10Rn, N(0)nR"R12, COOR9, CONR9R10, NR9COOR11 ou OCONR9R10 (dans lesquels R9 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C^; R10 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C[_3; R11 est un groupe alkyle en C[_3; R12 est un groupe alkyle en C^ et n vaut 0 ou 1);
Ar est un groupe phényle ou phényle substitué par du chlore ou par un des groupes méthyle, hydroxyle ou méthoxyle; et les sels d'addition acide de ceux-ci.
Les symboles utilisés ici pour décrire les dérivés d'acides aminés sont ceux qui sont utilisés habituellement dans le domaine de la chimie des peptides et qui sont présentés dans «Biochem. J.» 126, 773 (1972). Tous les résidus d'acides aminés ont la configuration naturelle ou L, sauf si cela est précisé autrement.
L'invention fournit aussi des compositions thérapeutiques contenant un composé de cette formule ou un sel d'addition acide de celui-ci, qui soit acceptable sur le plan pharmaceutique, mélangé avec un diluant ou un support qui soit aussi acceptable sur le plan pharmaceutique.
De tels sels incluent les chlorhydrates, phosphates, citrates et acétates.
Les composés de cette invention présentent une activité pharma-cologique. Par exemple, on a découvert dans le test in vitro qu'ils ont une affinité pour les sites récepteurs d'opiacés et qu'ils peuvent par conséquent être utilisés comme analgésiques, comme antagonistes des narcotiques ou comme agents antidiarrhéiques. Le test employé pour la détection de leur propriété d'antagonistes des opiacés à leurs sites récepteurs est celui qui utilise la stimulation de Tileum de cochon d'Inde hors de l'animal, cela étant décrit par Kosterlitz et al. dans «Brit. J. Pharmacol. and Chemotherapy», 33, 266-276 (1968).
Ils ont aussi démontré une activité analgésique dans le test in vivo de la phénylquinone anticontorsions chez la souris décrit par Hen-dershot et al., «J. Pharmac. Exp. Ther.», 125, 237 (1959) et dans le test de la secousse de la queue d'un rat (administration intraveineuse) décrit par Janssen et al. dans «Arzneim. Forsch.» 13, 502 (1963).
Les composés de cette invention peuvent être préparés par les méthodes standards de la chimie des peptides, c'est-à-dire qu'ils peuvent être produits par couplage séquentiel d'acides aminés
5
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activés et protégés de manière convenable par des méthodes classiques en solution ou par des procédés en phase solide, ou en couplant des fragments consistant en des peptides convenablement protégés.
Les détails concernant la sélection des groupes protecteurs et leur incorporation, de même que les conditions de réaction appropriées à s la formation de liaisons amido(peptidiques) et à l'élimination des groupes protecteurs, peuvent être trouvés dans les références suivantes:
a) Houben Weyl «Methoden der Organischen Chemie», vol. 16, parties I et II, Syntheses von Peptiden (Thieme 1974). io b) Schröder et Lubke «The Peptides», Academic Press (1965).
Les composés de formule I peuvent donc être préparés par condensation d'un composé de formule II:
Y-M,-OH (II) 15
où Y est un groupe N-protecteur approprié et Mj est un acide aminé protégé de manière convenable ou un résidu peptidique, avec un corps de formule III :
H-M2-N-R* (III)
I 20
R8
où M2 est un acide aminé protégé de manière convenable ou un résidu peptidique (où M, et M2 ensemble forment le groupe -Tyr-B-Gly-D- ou un dérivé protégé de cela), suivi par l'élimination des groupes protecteurs. 25
Le couplage de II et III peut être réalisé par des méthodes standards de synthèse des peptides, soit avec, soit sans isolation de la partie activée, correspondant au composé de formule II.
De façon pratique, un dipeptide protégé sur le N- terminal est couplé avec un amide de dipeptide à C- terminal, ou un tripeptide à 3° N- terminal protégé est couplé avec un amide d'acide aminé à C-terminal, suivis dans les deux cas de l'élimination de la protection.
Un groupe de protection de NH utile est le t-butyloxycarbonyle, et un groupe protecteur de —OH particulièrement utile est le radical t-butyle, les deux pouvant être éliminés par traitement du composé 35 protégé à l'acide chlorhydrique dans un solvant tel que l'acide acétique ou l'acétate d'éthyle ou par l'acide trifluoroacétique.
Le composé de formule I dans lequel B est un groupe —NH — CR3H — CO — où R3 est le groupe CqH2qYCrH2r+ ] et dans lequel Y est soit SO, soit S02 peut être préparé à partir d'un 40
composé analogue dans lequel Y est S, celui-ci étant transformé par oxydation par du peroxyde d'hydrogène, par exemple dans un solvant tel que l'acide acétique ou le méthanol. Ils peuvent aussi être préparés en effectuant l'oxydation d'un composé de formule I protégé, suivie de l'élimination de la protection. 45
Les composés de formule I dans lesquels Rx est le groupe (CH2)S —X, et X est le groupe N(0)RnR12, peuvent aussi être préparés à partir de composés analogues dans lesquels X est le groupe NRnR12 par oxydation avec du peroxyde d'hydrogène, par exemple dans un solvant tel que l'acide acétique ou le méthanol, ou par oxydation avec de l'acide mêtachlorperbenzoïque. Cette méthode d'oxydation est aussi applicable à la préparation d'amides d'acides aminés intermédiaires ou des amides de dipeptides contenant le groupe N(0)RnR12.
Les corps de formule I dans lesquels le groupe
—N—Rx est
I
Rs et où Q est le groupe N(0)Rn, SO, ou S02 peuvent être préparés à partir de composés analogues où Q est le groupe NR11 ou S par des méthodes d'oxydation similaires, respectivement.
Les amides d'acides aminés intermédiaires ou les amides de dipeptides contenant ces groupes peuvent être préparés de manière analogue.
Cette invention est illustrée dans les exemples non restrictifs suivants, dans lesquels la température est indiquée en degrés Celsius.
Les abréviations suivantes sont utilisées tout au long du texte:
BOC
t-Butyloxycarbonyle
Bu'
t-Butyle
IBCF
Isobutylchloroformate
Z
Benzyloxycarbonyle
DCCI
Dicyclohexylcarbodiimide
DCU
Dicyclohexylurée
HONSu
N-Hydroxysuccinimide
NMM
N-Méthylmorpholine
DMF
Diméthylformamide
DME
1,2-Diméthoxyéthane
THF
T étrahydrofuranne
Les divers composés et intermédiaires ont été examinés par Chromatographie sur couche mince (CCM) sur des plaques de gel de silice (Kieselgel GF2S4) en utilisant les systèmes suivants:
1E
méthanol/chloroforme
1/2
1F
méthanol/chloroforme
1/19
2B
chloroforme/méthanol/acide acétique
19/9/1
3A
chloroforme/méthanol/acide acétique/eau
60/18/2/3
3B
chloroforme/méthanol/acide acétique/eau
30/18/4/6
3C
chloroforme/méthanol/acide acétique/eau
90/27/2/3
3D
chloroforme/méthanol/acide acétique/eau
30/20/2/3
4A
isobutanol/acétate d'éthyle/acide acétique/eau
1/1/1/1
5B
isobutanol/acide acétique/eau
3/1/1
7B
acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau
60/20/6/11
7C
acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau
120/20/6/11
7D
acétâte d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau
240/20/6/11
7F
acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau
480/20/6/11
8A
chloroforme/isopropanol
3/1
8B
chloroforme/isopropanol
9/1
50
CH,CH2
n
/ \
\ /
(CH2)„
Exemple 1:
L-Tyrosyl-D-aIanylglycyl-L-phénylalanin-2-acétamidoêthylamide Préparation par la méthode suivante:
Tyr
BOC BOC H
Bu'
z
Bu1
Z
D-Ala
Gly
OH
BOC BOC C1©H2®
Phe ohnh2ch2ch2nhcoch3 nhch2ch2nhcooch3
nhch2ch2nhcoch3 nhch2ch2nhcoch3 nhch2ch2nhcoch3
5
638 177
1) BOC-Phe-NH-CH2CH2NHCOCH3
Du BOC-Phe-OH (2,65 g) est dissous dans du CH2C12 (20 ml) et la solution est refroidie à —20 lorsqu'on ajoute de la NMM (1,01 g) et de l'IBCF (1,37 g), suivi de l'addition de H2NCH2CH2NH • COCH3 (1,2 g) 2 min après. On laisse le mélange réactionnel revenir à température ambiante et on le brasse pendant 21 h quand le solvant est évaporé, et la gomme est dissoute dans du chloroforme. La solution est lavée par une solution saturée de NaHC03, par de l'acide citrique à 10% en solution aqueuse, par de l'eau jusqu'à la neutralité et finalement avec une solution saturée de saumure. La phase organique est séchée (Na2S04) et évaporée jusqu'à l'obtention d'un solide qui est recristallisé dans l'acétate d'éthyle pour donner l'amide 1 (3,0 g). Rf 7F : 0,35.
2) Cl~H+ Phe-NHCH2CH2NHCOCH1
On dissout du BOC-Phe-NHCH2CH2NHCOCH3 (3 g) dans du HCl 5M dans de l'acétate d'éthyle (20 ml) et 2,6 M de HCl dans l'acide acétique (5 ml) et on brasse à température ambiante pendant 30 min. Le solvant est évaporé et le résidu est trituré plusieurs fois avec de l'éther diéthylique anhydre. Le chlorhydrate 2 est obtenu sous forme d'un solide hygroscopique (0,45 g). Rf 3B: 0,5.
3) BOC-Gly-Phe-NHCH2CH2NHCOCHs
Préparation par l'une des approches suivantes:
a) On dissout du BOC-Gly-Phe-OH (1,0 g) et du
H2NCH2CH2NHCOCH3 (0,4 g) dans du DMF et refroidit sur un bain sel/glace pendant l'addition de HONSu (0,78 g) et de DCCI (0,668 g).
On laisse le mélange réactionnel revenir à température ambiante, on brasse pendant une nuit, on filtre la DCU et on évapore le solvant. Le résidu est dissous dans du CHC13, lavé par une solution saturée de bicarbonate de sodium (2 x 50 ml), par de l'acide citrique aqueux à 10% (2 x 50 ml) et de l'eau jusqu'à réaction neutre, puis par une solution saturée de saumure. La phase organique est séchée (Na2S04) et évaporée. On soumet le résidu à une Chromatographie sur colonne contenant du gel de silice (45 cm x 2,4 cm). On élue la colonne une première fois avec le mélange CHCl3/isopropanol (19/1) puis avec le mélange CHCl3/isopropanol (4/1). Le composé du titre est obtenu sous la forme d'une gomme (0,60 g). Rf 8B: 0,4; Rf 7F: 0,2.
b) Du BOC-Gly-OH (1,072 g) est dissous dans du CH2C12 et refroidi sur un bain de C02/CC14 solide lors de l'addition de NMM (0,618 g) et d'IBCF (0,836 g). Après avoir reposé 2 min à cette température, on ajoute 1,75 g de CPH+ ■ Phe-NHCH2CH2NHCOCH3 et 0,618 g de NMM, et on laisse la température revenir à la température ambiante. La réaction, après brassage nocturne, est effectuée comme pour 1 ci-dessus. Le résidu est purifié d'après a ci-dessus. Le produit est obtenu sous forme de gomme (0,65 g). Rf 8B: 0,4; Rf 7F: 0,2.
4) BOC-Tyr-(Bu')-D-Ala-Gly-Phe-NHCH2CH2NHCOCH3
i) Du BOC-Gly-Phe-NHCH2CH2NHCOCH3 (0,64 g) est traité par de l'acide chlorhydrique 5,5M dans l'acétate d'éthyle (5 ml) et
15 du HCl 2,6M dans l'acide acétique à température ambiante. Après 45 min, le solvant est évaporé et le résidu est trituré avec de l'éther diéthylique. Le chlorhydrate de dipeptide est obtenu sous la forme . d'un solide hygroscopique (0,54 g). Rf 3D: 0,45.
ii) Du BOC-Tyr-(Bu')-D-Ala-OH (0,6 g) et du Cl-H+Gly-Phe-20 NHCH2CH2NHCOCH3 (0,5 g) sont dissous dans du DMF (3 ml)
et refroidis sur un bain sel/glace lorsqu'on ajoute le HONSu (0,355 g) et le DCCI (0,303 g) suivi de la NMM (1,48 g dans 1,5 ml de DMF). On laisse le mélange réactionnel se réchauffer à température ambiante et on brasse une nuit. On élimine ensuite la DCU par 25 filtration, on évapore le solvant et le résidu est réparti entre de l'acétate d'éthyle et de l'eau. La couche organique est lavée par une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium (2 x 50 ml), de l'acide citrique à 10% (2 x 50 ml), de l'eau jusqu'à réaction neutre, et finalement par une solution saturée de saumure. La phase organique est 30 séchée et évaporée. Le tétrapeptide est obtenu sous forme de gomme (0,65 g). Rf 7C: 0,65; Rf 3D: 0,8.
5) H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-NHCH2CH2NHCOCH3
35 Du BOC-Tyr-(But)-D-Ala-Gly-Phe-NHCH2CH2NHCOCH3 (0,65 g) est traité par un excès de HCl 2,6M dans l'acide acétique pendant 45 min à température ambiante. Le solvant est évaporé et on soumet le résidu à une Chromatographie sur colonne (50 cm x 2,5 cm) contenant du gel de silice et avec le système de solvant 3A. 40 La gomme obtenue est lyophilisée pour donner le composé du titre (0,45 g). Rf 3A: 0,3; [a]2D2= -6,95e (c = 1, DMF).
Exemple 2:
L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-N-mèthyl-L-phënylalanine-3-dimèthyl-aminopropylamide
Tyr
BOC BOC
Cl-H2+
Bu'
Z_
Bu'
z
D-Ala
Gly
MePhe
OH
boc boc ci-h2+
BOC BOC
OH
1
OH
i
NH(CH2)3NMe2
Cl-H2+ -j- NH(CH2)3NMe2HCl NH(CH2)3NMe2 NH(CH2)3NMe2 ■ HCl NH(CH2)3NMe NH(CH2)3NMe • HCl
U
Préparation selon le schéma ci-dessus.
1) BOC-MePhe-NHCH2CH2NMe2
De la N-t-butyloxycarbonyl-N-méthylphénylalanine (2,79 g) et de la NMM (1,01 g) ont été dissoutes dans du dichlorméthane (20 ml) et la solution est refroidie sous agitation à —20°. On ajoute évapore le solvant et le résidu est dissous dans de l'acétate d'éthyle
65 ensuite de l'IBCF (1,37 g) et le mélange est brassé 5 min avant l'addition de NH2CH2CH2CH2NMe2 (1,02 g). La solution est brassée pendant 1 h à —20° puis à température ambiante pendant 12 h. On
638 177
6
(50 ml) et une solution aqueuse de bicarbonate de sodium (saturée, 50 ml). La couche d'acétate d'éthyle est lavée avec une solution aqueuse de bicarbonate de sodium (saturée, 50 ml), de l'eau (2 x 50 ml) et une solution aqueuse à 10% d'acide citrique (2 x 50 ml). Les extraits d'acide citrique sont combinés, rendus basiques par une solution saturée de bicarbonate de sodium et extraits à l'acétate d'éthyle (3 x 50 ml). Les extraits d'acétate d'éthyle sont rassemblés, séchés (Na2S04) et évaporés pour donner le composé du titre sous la forme d'une huile. Rf 1E: 0,24; Rf 3A: 0,37.
2) H-MePhe-NHCH2CH2CH2NMe ■ 2HCI
L'huile obtenue ci-dessus 1 est dissoute dans de l'acétate d'éthyle (10 ml), et on ajoute de l'HCl dans de l'acide acétique (2,63 M, 6 ml) et de l'HCl dans de l'acétate d'éthyle (5,7 M, 6 ml). La solution est brassée pendant 2 h et on évapore le solvant pour obtenir le dichlor-hydrate désiré (2,2 g) sous forme de solide. Rf 1E: 0,02; Rf 3A: 0,03.
3) BOC-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2NMe2
De la t-butyloxycarbonylglycine (1,05 g) et de la NMM (0,606 g) sont dissoutes dans du dichlorméthane (12 ml) et la solution est refroidie avec agitation à —20e. On ajoute de l'IBCF (0,819 g, 6 mM) et le mélange est brassé 5 min avant l'addition du corps 2 ci-dessus (2,02 g) dans du DMF (5 ml). La solution est brassée pendant 1 h à —20 et 12 h à température ambiante puis le solvant est évaporé. Le résidu est dissous dans de l'acétate d'éthyle (50 ml) et une solution aqueuse de bicarbonate de sodium (10%, 50 ml). La phase organique est séparée, lavée par une solution aqueuse de bicarbonate (10%, 3 x 50 ml) et de l'eau (3 x 50 ml). La solution d'acétate d'éthyle est séchée (Na2S04) et évaporée pour donner le composé du titre sous la forme d'une huile. Rf 1E: 0,21 ; Rf 3A: 0,37.
4) H-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2NMe2 ■ 2HCI
Le dipeptide protégé 3 est traité selon le procédé utilisé pour 2 ci-dessus pour donner le sel dichlorhydraté désiré 4 (2,0 g) sous la forme d'un solide blanc. Rf 1E: 0,03; Rf 3A: 0,03.
5) BOC-Tyr-(Bu')-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2NMe2
Du BOC-Tyr-(Bu')-D-Ala-OH (1,22 g), du H-Gly-MePhe-
NHCH2CH2CH2-NMe2 • 2HC1 (1,18 g), du HONSu (0,345 g) et de la NMM (0,30 g) sont dissous dans du DMF anhydre (20 ml) et la solution est refroidie à 0°. On ajoute du DCCI (0,68 g) et le mélange est brassé pendant 18 h avant l'évaporation. Le résidu est dissous dans de l'acétate d'éthyle (50 ml) et lavé par une solution aqueuse de bicarbonate de soude (10%, 2 x 50 ml), de l'eau (2 x 50 ml), séché (Na2S04), évaporé à sec. Le résidu est dissous dans du méthanol et versé dans une colonne contenant du gel de silice (35 cm x 2 cm) et élué avec le système 1F. Les fractions contenant le produit désiré sont rassemblées, soumises à une évaporation, et le résidu est dissous dans de l'acétate d'éthyle (100 ml). Les extraits d'acétate d'éthyle sont lavés par une solution aqueuse de bicarbonate de sodium (10%, 3 x 100 ml), séchés et évaporés pour donner le composé tétrapeptidi-que du titre 5 sous forme de solide blanc. Rf 1E: 0,18; Rf 3A: 0,39.
6) H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2NMe2
Le tétrapeptide protégé 5 (500 mg) est dissous dans de l'acétate d'éthyle (5 ml) et une solution de HCl dans de l'acétate d'éthyle (5,7 M, 2,5 ml) est ajoutée à la solution sous agitation. Après 1 h, le mélange réactionnel est filtré et le résidu est lavé à l'éther de pétrole, séché, lyophilisé à partir d'une solution dans l'eau pour donner le 20 produit (380 mg) sous la forme d'un solide blanc. Rf 4A: 0,27; Rf 3B: 0,47; [a]i?8 = +23,6 (c=l; 0,1 HCl).
Exemple 3:
L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-N-méthyl-L-phênylalanine-3-diméthyl-25 aminopropylamide-N-oxyde
1 ) BOC-Tyr-(Bu')-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2 N(0)Me2
Du BOC-Tyr-(But)-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2NMe2 30 (500 mg) est dissous dans du méthanol (10 ml) et on ajoute une solution aqueuse de peroxyde d'hydrogène (30%, 0,16 ml). La solution est brassée pendant 48 h à température ambiante, filtrée et évaporée pour donner le N-oxyde protégé désiré sous forme de gomme. Rf 1E: 0,08; Rf3A: 0,41.
35 2) H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2N(0)Me2
La gomme provenant de 1 ci-dessus est dissoute dans de l'acétate d'éthyle (5 ml) et on ajoute une solution de HCl dans de l'acétate d'éthyle (2,63 M, 1 ml). La solution est brassée pendant 1 h, filtrée, 40 le solide est séché et lyophilisé à partir d'une solution aqueuse pour donner le produit désiré sous forme de poudre blanche (240 mg). Rf 4A: 0,56; Rf 3B: 0,52; [a]f?8= +18,8° (c=l; HC10.1M).
Exemple 4:
L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-N-mëthyl-L-phënylalanine-2-dimëthyl-aminoéthylamide
Préparation d'après la méthode suivante:
Tyr
BOC BOC H
Bu'
z
Bu1
D-Ala
Gly
OH
MePhe
BOC 4- OH NH2CH2CH2NMe2 BOC H- NHCH2CH2NMe
H H- NHCH2CH2NMe22 • HCl NHCH2CH2NMe2 NHCH2 CH2NMe22 • HCl
1) BOC-MePhe-NHCH2CH2NMe2 65 2) H-MePhe-NHCH2CH2NMe2 • 2HCI
Du BOC-MePhe-OH et de la N,N-diméthyléthylènediamine sont On élimine le groupe protecteur de l'amide N-protégé de 1 ci-couplés suivant le procédé de l'exemple 1(1) pour donner l'amide dessus par la méthode de l'exemple 1(2) pour obtenir le chlorhydrate désiré sous la forme d'une huile. désiré sous la forme d'une huile.
7
638 177
3) BOC-Tyr-(Bu')-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2NMe2
Du BOC-Tyr-(Bu')-D-Ala-Gly-OH (700 mg, 1,5 mM) est dissous dans du DMF anhydre (7,5 ml) et on ajoute de la NMM (152 mg, 1,5 mM). La solution est brassée et refroidie à —15; et on ajoute de l'IBCF (205 mg, 1,5 mM). Après 5 min, on ajoute une solution de 2HC1 • H-MePhe-NHCH2CH2NMe2 (568 mg, 1,5 mM) suivi de NMM (303 mg, 3 mM). Après un repos de 18 h, le mélange réactionnel est évaporé et le résidu est réparti entre de l'EtOAc (50 ml) et une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium (50 ml). La couche d'acétate d'éthyle est séparée, lavée avec une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium (50 ml), d'eau (2 x 50 ml) et de saumure (50 ml), séchée (Na2S04) et évaporée. Le résidu est soumis à une Chromatographie sur gel de silice en utilisant le système 7B. Les fractions appropriées sont rassemblées et évaporées pour donner l'amide tétrapeptidique désiré (700 mg) sous la forme d'un solide vitreux.
4) 2HCl- H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2NMe2
On élimine le groupe protecteur du peptide protégé de 3 par la méthode de l'exemple 2(6) pour obtenir le produit désiré. Après lyophilisation, l'amide tétrapeptidique (200 mg) est obtenu sous forme de solide blanc. Rf 7B: 0,04; Rf 3A: 0,07; Rf 4A: 0,23; [a]ft= -24,2 (c=0,50; DMF).
Exemple 5:
L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-L-phënylalaninethiamorpholine-amide-S-oxyde
1) BOC-Phe-N S
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Du BOC-Phe-OH (1,32 g) et de l'IBCF (680 mg) dans du DME (10 ml) sont refroidis à —20° et on ajoute en brassant de la NMM (520 mg) à la solution refroidie. Après 2 min, on ajoute une suspension froide de chlorhydrate de thiamorpholine (690 mg) et de NMM (520 mg) dans du DMF (8 ml). On continue le brassage pendant 30 min à —20° puis pendant la nuit à température ambiante. Après évaporation du solvant, le matériel obtenu est réparti entre de l'acétate d'éthyle et une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium. La couche d'acétate d'éthyle est extraite trois fois par une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, deux fois par une solution d'acide citrique à 10% dans l'eau et finalement par une solution saturée en chlorure de sodium. La solution d'acétate d'éthyle est séchée (Na2S04) et évaporée pour donner le thiamorpholine-amide sous forme de gomme (1,56 g).
2) H-Phe-N~S• HCl i_i /—i
Une solution brassée de BOC-Phe-N S (1,05 g) dans de l'acide acétique (3 ml) est traitée à température ambiante par une solution de HCl dans de l'acide acétique (2,6 M, 3 ml) et à des intervalles de 2 h, par deux portions supplémentaires de 3 ml chacune. Après l'évaporation du solvant et du HCl, le résidu est trituré avec de l'éther diéthylique anhydre, l'éther est décanté et le résidu est à nouveau trituré avec de l'éther anhydre frais pour donner le phényl-alaninethiamorpholine-amide sous la forme d'un solide (738 mg).
3) BOC-Gly-Phe-Fs
Du BOC-Gly-OH (384 mg) est couplé à du Phe-Nj; • HCl (572 mg) par la méthode utilisée ci-dessus pour BOC-Phe-N S en utilisant de 1TBCF'"(258 mg) et de la NMM (424 mg totaux). On obtient 7,4 mg d'amide dipeptidique.
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4) BOC-Tyr-(Bu!)-D-Ala-Gly-Phe-N S
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Du BOC-Gly-Phe-N S (697 mg) est brassé avec une solution aqueuse d'acide trifluoracétique (H20/CF3C00H 1/9; 9 ml) durant 1 Zi h. L'acide est évaporé et le résidu est trituré avec de l'éther diéthylique pour donner une poudre qui est dissoute dans du DMF anhydre (5 ml) et on ajuste le pH à 8 (papier indicateur humidifié) au moyen de NMM. Du BOC-Tyr-(Bu')-D-Ala-OH (680 mg) et du HONSu (211 mg) dans du DMF (3 ml) sont ajoutés, suivis de DCCI
(377 mg), et le mélange est brassé pendant la nuit à température ambiante. Le solide est éliminé par filtration et le filtrat est évaporé pour donner une gomme qui est répartie entre de l'acétate d'éthyle et une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium. La couche d'acétate d'éthyle est lavée deux fois avec une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium puis trois fois avec une solution d'acide citrique à 10% dans l'eau, puis avec de l'eau et une solution saturée en chlorure de sodium. Par séchage (Na2S04) et évaporation, on obtient le thiamorpholine-amide du tétrapeptide protégé (U09 g).
5) Tyr-D-Ala-Gly-Phe-N S
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Le thiamorpholine-amide du tétrapeptide protégé (1,0 g) est brassé dans une solution aqueuse d'acide trifluoracétique (H20/ CF3C02H 1/9; 9 ml) pendant l'A h. Après évaporation et trituration avec de l'éther diéthylique, on obtient un solide qui est purifié par Chromatographie sur gel de silice (CHCl3/CH30H/Ac0H/H20 60/18/1/1,5) puis par Chromatographie sur échangeurs d'ions (résine Séphadex, forme pyridinium, utilisation d'un gradient de 2% de Pyridine dans l'eau à 5% de pyridine, 1% d'acide acétique dans l'eau). Le produit est lyophilisé pour donner le thiamorpholine-amide du tétrapeptide (495 mg).
6) Tyr-D-Ala-Gly-Phe-N S-*O
Du Tyr-D-Ala-Gly-Phe-N S (100 mg) dans l'éthanol (50 ml) est traité avec trois portions successives de peroxyde d'hydrogène à 20 volumes (chacune 0,3 ml) à un intervalle de 45 min en brassant à température ambiante. Après un brassage supplémentaire de 1 h, la solution est évaporée à sec, dissoute dans l'eau (20 ml) et lyophilisée pour donner un solide blanc (98 mg). Rf 3A: 0,25; Rf 7C: 0,06; Rf 5B: 0,38; [a]^5 = +53,1' (c = 0,47 dans HCl 0,1N).
Exemple 6:
L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-N-méthyl-L-phénylalanine-2-aminoéthyl-amide
Du Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2NHZ (préparé selon la méthode de l'exemple 4) (350 mg) est dissous dans du MeOH (20 ml) et ajouté à une suspension de 10% de palladium sur du charbon actif (100 mg) dans l'eau (10 ml). On fait passer un courant d'hydrogène à travers pendant 4 h à 22". On élimine ensuite le catalyseur par filtration et les solvants sont éliminés sous pression réduite. Le résidu est dissous dans une petite portion de 1 % de pyridine dans l'eau et on passe cela sur une colonne contenant de la résine Séphadex SP (éluée en un gradient de 1 % de pyridine aqueuse à 1 % d'acétate de pyridine aqueuse -»5% d'acétate de pyridine aqueuse). On réunit les fractions appropriées et le solvant est éliminé sous vide. Le produit (220 mg) est lyophilisé à partir d'une solution aqueuse. Rf 3B: 0,45; Rf 4A: 0,56; [a]||9= +22,22 (c=0,98; HCl 0,1M).
Exemple 7:
L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-N-méthyl-L-phénylalanine-3-triméthylammoniumpropylamidacétate
1 ) BOC-Tyr-(Bu')-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2N+ Me3 OAc-
Du BOC-Tyr-(But)-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2NMe2 (640 mg) est dissous dans de l'éthanol (5 ml). On ajoute de l'iodure de méthyle (572 mg) et la solution est brassée à température ambiante pendant 48 h. La solution est évaporée, le résidu est dissous dans de l'acétate d'éthyle et passé sur une colonne contenant du gel de silice (40 cm x 2 cm) et élué avec le mélange acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau 90/20/6/11. Les fractions contenant le produit désiré sont rassemblées et on les évapore pour obtenir un solide (320 mg). Rf 3A: 0,17; Rf 3B; 0,74; Rf 4A: 0,47.
2) H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2N+Me3Ac
Le tétrapeptide protégé ci-dessus (300 mg) est dissous dans de l'acétate d'éthyle (10 ml) et on ajoute une solution de HCl dans
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l'acétate d'éthyle (3,9 M, 4 ml) en brassant. Après 1 h, la solution est évaporée et le résidu est dissous dans l'eau et passé sur une colonne contenant de la cellulose CM 52 (35 cm x 3 cm) et élué par un gradient de concentration linéaire entre 0,05% de pyridine aqueuse et 1 % d'acétate de pyridine aqueuse. Les fractions qui contiennent le 5 produit désiré sont rassemblées, évaporées et le résidu est lyophilisé à partir d'une solution aqueuse pour donner le produit désiré sous la forme d'un solide blanc (110 mg). Rf 3B: 0,17; Rf 4A: 0,13; Rf 5B: 0,05; [a]|i0= -37,75 (c=0,5; DMF).
10
Exemple 8:
L-Tyrosyl-D-mëthionylglycyl-N-mëthyl-L-phënylalanine-2-dimèthyl-aminoéthylamide-N-oxyde
1) B0C-Glv-MePhe-NH(CH2)2N(0)Me2 15
Du BOC-Gly-MePhe-NH(CH2)2NMe2 (2,64 g) est dissous dans du méthanol (200 ml) et on ajoute de l'acide métachlorperbenzoïque (1,23 g). Le mélange réactionnel est brassé à 22° pendant 2 h puis on le laisse reposer à 5: pendant 18 h. Le solvant est éliminé sous pression réduite et le résidu est dissous dans de l'acétate d'éthyle 2" (150 ml) et la solution est lavée avec une solution aqueuse saturée en bicarbonate de sodium (2 x 30 ml), séchée (Na2S04) et évaporée pour donner le N-oxyde (1,9 g). Rf 3A: 0,76; Rf 4A: 0,64.
2) HCl-H-Gly-MePhe-NH(CH2)2N(0)Me2 25
Le N-oxyde protégé ci-dessus (1,8 g) est dissous dans de l'acétate d'éthyle (10 ml) et on ajoute de l'acide acétique à la solution (10 ml). Une solution de HCl dans de l'acétate d'éthyle (3,9 M, 12 ml) est ajoutée et le mélange est brassé à 21° durant 30 min. Le solvant est 30 éliminé sous vide et le solide obtenu est trituré avec de l'éther diéthylique anhydre (2 x 40 ml). Le chlorhydrate de N-oxyde (1,5 g) est recueilli par filtration. Rf 4A; 0,40.
3) BOC-Tyr-(Bu')-D-Met-Gly-MePhe-NH(CH2)2N(0)Me2 35
Du BOC-Tyr-(Bu')-D-Met-OH (1,8 g) est dissous dans du DMF
anhydre (10 ml) et on ajoute du HONSu (0,87 g) à la solution. De l'HCl • H-Gly-MePhe-NH(CH2)2N(0)Me2 (1,5 g) et de la NMM
sont dissous dans du DMF anhydre (20 ml). On mélange les deux solutions, on les refroidit à —10° et on ajoute du DCCI (0,87 g). Le 40
mélange est brassé à —10° pendant 2 h puis à 20° pendant 18 h. Le mélange réactionnel est filtré et la solution clarifiée est évaporée sous vide. La gomme résultante est répartie entre de l'acétate d'éthyle (60 ml) et de l'eau (10 ml), et la phase organique est lavée avec une solution aqueuse à 10% de bicarbonate de sodium (1 x 10 ml) puis est extraite par une solution aqueuse à 10% d'acide citrique (5x15 ml). Le pH de la phase aqueuse est alors ajusté à 7 par du bicarbonate de sodium solide et on extrait par de l'acétate d'éthyle (3 x 40 ml). La phase organique est séchée (Na2S04) et évaporée pour donner une gomme (1,35 g). Rf 3A:.0,48.
4) HCl■ H-Tyr-D-Met-Gly-MePhe-NH(CH2)2N(0)Me2
Du B0C-Tyr-(Bu')-D-Met-Gly-MePhe-NH(CH2)2N(0)Me2 (1,11 g) est dissous dans un mélange d'acide trifluoracétique (36 ml) et d'eau (4 ml) contenant de l'anisole (0,2 ml). Le mélange est brassé pendant 30 min à 22° avant de l'évaporer sous vide. Le produit est purifié par passage sur une colonne contenant du gel de silice en utilisant un système de gradient comme éluant (système de solvants 3A-»2B). Le produit obtenu après le passage sur la colonne de gel de silice est passé sur une colonne contenant de la carboxyméthyl-cellulose qui est éluée avec un gradient de 0,1% de pyridine aqueuse à 1,5% d'acétate de pyridine aqueuse.
Les fractions appropriées sont rassemblées, évaporées et le résidu est lyophilisé plusieurs fois à partir de solution dans l'HCl dilué pour donner le chlorhydrate désiré (341 mg). Rf 3B: 0,31 ; RF 4A: 0,44; Rf 5B; 0,19; [a]H9= +29,30° (c=0,99; HCl 0,1N).
Exemple 9:
L-Tyrosyl-D-méthionyl(sulfoxyde)glycyl-N-mëthyl-L-phênylalanine-2-diméthylaminoéthylamide-N-oxyde
Du HCl • H-Tyr-D-Met-Gly-MePhe-NH(CH2)2N(0)Me2 (418 mg) est dissous dans de l'éthanol (150 ml) et on ajoute du peroxyde d'hydrogène à 100 volumes (1,46 ml). La solution est brassée à 21° pendant 24 h, après quoi le solvant est éliminé sous pression réduite et le produit obtenu est purifié par Chromatographie sur de la cellulose CM en utilisant un gradient de 0,1% de pyridine aqueuse à 1,5% d'acétate de pyridine aqueuse. Le produit sortant de la colonne est lyophilisé plusieurs fois à partir de solutions dans HCl pour donner le chlorhydrate désiré (354 mg). Rf 3B: 0,32; Rf 4A: 0,43; Rf 5B: 0,32; [a]2D°= +9,16° (c=l,05; HCl 0,IN).
Les tables fournissent des détails pour les autres composés de formule I qui ont été préparés par les méthodes ci-dessus.
Ex.
[a]
Rf
Méthode
10
H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-NH(CH2)3CONH2
[a] [yS = + 52,8
3C 0,35
1
(c = 1,04, 0,1N HCl)
4A 0,60
11
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3CONMe2
M D = -43,4
1F 0,15
2
(c = 1, DMF)
3A 0,17
4A 0,53
12
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)2NHCOCH3
[a] {j,5 = +26,1
3A 0,19
2
(c = 1,0,0,1N HCl)
3B 0,85
13
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3C02Me
[a] b9'5 = +23,0
3A 0,41
2
(c = 0,86, 0,IN HCl)
3B 0,62
14
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3C02H
[a] i)9'5 = +25,5
3A 0,22
a
(c = 1,07,0,IN HCl)
3B 0,49
15
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3CONH2
[a] g'5 = +23,1
3A 0,31
b
(c = 1,0,0,IN HCl)
3B 0,32
16
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3NHCOCH3
[a] g = +4,8
3B 0,76
4
(c = 1, DMF)
4A 0,64
7B 0,24
17
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3CONHMe
[a] d = +17,4
4A 0,60
2
(c = 0,52,0,IN HCl)
7B 0,22
a = hydrolyse de l'ex. 11 b = ammonalyse de l'ex. 11.
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D-CD
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00
M
<1
638 177
10
Ex.
[a]
Rf
Méthode
39
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)2NHCONH2
[a] d = +23,5 (c = 0,97, 0, IN HCl)
3A 0,12 4A 0,62 7A 0,50
4
40
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)2OCONH2
[a] g = +25,7 (c = 0,97,0,1N HCl)
3A 0,13 3B 0,54 7A 0,49
4
41
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)2NHCONMe2
CH2CH2Ph
[a] g = +24,8 (c = 0,96,0,IN HCl)
3A 0,15 3B 0,57 7A 0,33
4
42
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N ^
v~T
i il
<NQ ,0,
3A 0,85
4
(CH2)2NMe2
(c = 0,58, 0, IN HCl)
7B 0,46
CH2CH2Ph
43
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N ^
(CH)2N(0)Me2
[a] d = -5,0
3A 0,17
3
(c = 0,58, 0, IN HCl)
3B 0,67
44.
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CHjNHC02CH2Ph
[a] d'5 = +18,3 (c = 0,51,0,IN HCl)
3D 0,76 4A 0,76 7B 0,33
4
45
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2NHC02CH2Ph
[a]F= -38,0 (c = 1, DMF)
3A 0,32 4A 0,73 7B 0,45
4
a = hydrolyse de l'ex. 11 b = ammonalyse de l'ex. 11.
Les corps suivants sont d'autres composés de cette invention:
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe(p-Cl)-NHCH2CH2N(0)Me2 H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe(p-C,l)-NHCH2CH2N(C))Me2
,CH2CH2CH3
H-T yr-D-Ala-Gly-MePhe-N
\
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N
S
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N ;
CH2CH2N(0)Me2 CH2Ph
CH2CH2N(0)Me2 ,Ph
* CH2CH2N(Q)Me2
H-Tyr-D-Ala-Cly-MePhe-N
^CH2CH2 VsCH2CH2N(Q)Me2
Me
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N
,CH2CH2-<^^ VCH2CH2N(0)Me2
Me
/ \
Me
CH2CH2N(0)Me2
H-Tyr-D-Ala-Cly-MePhe-N
CHzCHz-<f \-Cl
CH2CH2N(Q)Me2
'"Oc
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N 'Cl
CH2CH2N(0)Me2
CH2CH-
H-T yr-D-Ala-Gly-MePhe-N
\
■O
Cl
35 CH2CH2N(0)Me2
ch2CH2^^\ H-Tyr-D-Ala-Cly-MePhe-N \=/
^ CH2CH2N(0)Me2
H-T yr-D-Ala-Gly-MePhe-N
/
CH,CH-
OH
=/ OH
45
CH2CH2N(0)Me2 ch2CH2^^ H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N ^ OH
CH2CH2N(0)Me2
, CH,CH-
H-Tyr-D-Ala-Cly-MePhe-N
\
^ \
CH2CH2N(0)Me2
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N
H-T yr-D-Ala-Gly-MePhe-N
CH2CH-
-OMe
=^-OMe
✓ V
CH2CH2N(0)Me2
CH2CH-
/ V
/ \
OMe
CH2CH2N(0)Me2
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2N(0)MeCH2CH2CH3
H-Tyr-D-A!a-Gly-MePhe-NHCH2CH2N(0)MeCH2CH2Ph
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2NHCONHCH2CH2CH3
11
638 177
H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-N
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N^
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe
OH
H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-N N©C!m1 CH3COOe
Cpm-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N
CH,CH2Ph
CH2CH2N(0)Me2
H-Tyr-D-Abu-Gly-MePhe-NHCH2CH2N(0)Me2
H-Tyr-D-Val-Gly-MePhe-NHCH2CH2N(0)Me2
H-Tyr-D-Leu-Gly-MePhe-NHCH2CH2N(0)Me2
H-Tyr-D-Nle-Gly-MePhe-NHCH2CH2N(0)Me2
H-Tyr-D-Thr-Gly-MePhe-NHCH2CH2N(0)Me2
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePHe-NHCH2CH2NHMe
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2N(0)MeEt
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2N(0)Et2
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2NMeEt
H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2NEt2
Les aminés de départ de formule HNR8RX utilisées dans les préparations des exemples ci-dessus peuvent être préparées, si elles ne sont pas disponibles dans le commerce, par des méthodes connues en soi ou dans le cas d'amines particulières comme suit:
2) H2NCH2NHCONMe2
Le composé ci-dessus, N-benzyloxycarbonyle (1,06 g), subit une hydrogénisation sur 10% Pd/C (100 mg) dans l'éthanol (30 ml) contenant de l'acide chlorhydrique 2M aqueux (2,1 ml) pendant l'A h. Après filtration et évaporation du filtrat, on obtient le composé désiré sous forme de chlorhydrate qui est utilisé sans purification.
Dans le test de Kosterlitz mentionné ci-dessus, des cochons d'Inde mâles ou femelles (de souche Duncan Hartley) sont tués par un coup sur la tête et une partie de l'iléon est séparée et installée dans un bain pour organes de 50 ml de volume. Une contraction est produite par des stimulations à basse fréquence (0,1 Hz) produites par des impulsions carrées de 0,5 ms. Un corps à tester est dissous dans de l'eau distillée pour faire une solution stock de 1 mg/ml de concentration. Des dilutions en série sont effectuées en utilisant de la solution de Krebs pour faire des concentrations de 10 ng, 1 ng et 0,1 ng/ml. Le corps est testé par addition de 0,1-0,3 ml de ces solutions au bain pour organes. Une courbe de réponse en fonction de la dose est alors tracée et comparée avec celle de la méthencéphaline.
Dans le test de la secousse de la queue du rat, on utilise de l'eau chaude (maintenue à 55e ± 1°) comme stimulus nociceptif. Les valeurs suivantes sont des données obtenues avec les composés de cette invention dans les tests de l'iléon du cochon d'Inde (GPI, activité comparée avec celle de la méthencéphaline, dans les tests de Hendershot et al (H&F) et les tests de la secousse de la queue du rat (RTF).
30
Exemple A :
N-( 2-Aminoêthylj-N' ,N'-diméthylurée
1) PhCH2OCONHCH2CH2NHCONMe2
Une solution de chlorure de diméthylcarbamyle (1,39 g) dans de l'éther diéthylique (15 ml) est ajoutée goutte à goutte à une solution brassée de NMM (1,57 g) et de 2-benzyloxycarbonylaminoéthyl-amine (3,02 g) dans de l'éther diéthylique (110 ml). Le mélange est 40 brassé 4 h et on le laisse ensuite reposer 2 d. Après évaporation de l'éther, le résidu solide est réparti entre une solution aqueuse d'acide citrique à 10% et de l'acétate d'éthyle. Les extraits d'acétate d'éthyle sont lavés par une solution aqueuse d'acide citrique à 10%, par une solution saturée en bicarbonate de sodium et une solution saturée en 45 chlorure de sodium puis séchés (Na2S04) et évaporés pour donner un solide (1,7 g). Un échantillon est cristallisé dans un mélange acétate d'éthyle/êther de pétrole (PE 60-80); PF 81-82°.
Exemple
GPI
H&F EDS0
RTF EDS0
No
(X méthencéphaline)
(mg/kg i.v.)
(mg/kg i.v.)
1
2,6
0,01
2
7,2
0,28
2,0
3
4,1
0,00003
1,8
4
8,5
0,003
1,4
22
6,5
0,08 ng/kg
0,32
6
13,0
0,028
0,37
19
23,2
0,24
Morphine
-1,0
0,07
2,2
Les compositions pharmaceutiques peuvent être, par exemple, sous une forme appropriée à l'administration parentérale telle qu'une solution aqueuse ou huileuse stérile injectable ou des suspensions. Le dosage approprié aux administrations sous-cutanées, intraveineuses ou intramusculaires correspond à entre 0,1 et 50 mg/ml d'un composé de cette invention (ou d'une quantité équivalente d'un sel pharmaceutiquement acceptable). Les doses seront d'une manière générale, pour l'élimination de la douleur, comprises entre 0,1 et 100 mg selon la voie d'injection.
R

Claims (15)

  1. 638 177
    2
    REVENDICATIONS 1. Composé de formule:
    R'Tyr—B—Gly —D—N—Rx (j)
    R8
    dans laquelle
    R1 est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, allyle, diméthylallyle, propargyle, cyclopropylméthyle, cyclobutylméthyle, ou phénéthyle;
    B est le groupe — NH—CR3H—CO—
    dans lequel
    R3 est un groupe alkyle CU6 ou CqH2qYCrH2r+i, où q vaut 1 ou 2, r vaut 0 ou 1, et Y est O, S, SO ou S02, le groupe ayant la configuration D;
    D est le groupe —NR5—CR6H—CO—
    dans lequel
    R5 est un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle,
    R6 est un groupe Ar-alkyle Cj_3,
    le groupe ayant la configuration L;
    R8 est un atome d'hydrogène, un alkyle en C[_5, un groupe Ar ou Ar-alkyle en Cu2,
    Rx est un groupe (CH2)S—X, où s vaut entre 2 et 4 et X est le groupe NHR9, N+RnRuR13, NR9CORn, NR9 COOR11, NR9CONH2, NR°CONR10RU, N(0)nRnR12, COOR9, CONR9R10 ou OCONR9R10, où: R9 est un hydrogène, un alkyle en C]_3, un groupe Ar ou Ar-CH, ; R10 est soit un atome d'hydrogène, soit un groupe alkyle en C]_3; R11 est ou un groupe alkyle en C[_3, un groupe Ar ou Ar-CH2: R12 est un groupe alkyle en Cj_3; R13 est un groupe alkyle en Cj.3; et n vaut 0 ou 1 ; ou bien le groupe
    -N—R* est CH2CH2
    (CH2)m dans lequel m vaut de 1 à 3 et Q est SO, S02, CO, CHOH, N+MeR11 ou N(0)Rn,
    Ar est un groupe phényle ou phényle substitué par du chlore, par un méthyle, un hydroxyle ou un groupe méthoxy; et leurs sels d'addition acide.
  2. 2. Composé selon la revendication 1, caractérisé par le fait que: R8 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C^, et
    X est un groupe NHR9, NR9CORn, NR9CONH2, NR°CONR10Rn, N(0)nRnR12, COOR9, CONR9R10, NR°COORn ou OCONR9R10, où: R9 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C[_3; R10 est un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle en C^; R11 est un groupe alkyle en C^; R12 est un groupe alkyle en C[_3 et n vaut 0 ou 1.
  3. 3. Composé selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé par le fait que B est la D-alanine, la D-valine, l'acide D-a-amino-butyrique, la D-norvaline, la D-leucine, la D-norleucine, la D-sérine, la D-thréonine, la D-méthionine ou le sulfoxyde de D-méthionine.
  4. 4. Composé selon l'une des revendications 1 à 3, caractérisé par le fait que D est la L-phénylalanine ou la N-méthyl-L-phénylalanine.
  5. 5. L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-L-phénylalanine-2-acétamidoéthyl-amide en tant que composé selon la revendication 1.
  6. 6. L-Tyrosyl-D-analylglycyl-N-méthyl-L-phénylalanine-3-diméthylaminopropylamide en tant que composé selon la revendication 1.
  7. 7. L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-N-méthyl-L-phénylalanine-3-diméthylaminopropylamide-N-oxyde en tant que composé selon la revendication 1.
  8. 8. L-Tyrosyl-D-alanylglycyI-N-méthyl-L-phénylalanine-2-diméthylaminoéthylamide en tant que composé selon la revendication 1.
  9. 9. L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-N-méthyl-L-phénylalanine-2-diméthylaminoéthylamide-N-oxyde en tant que composé selon la revendication 1.
  10. 10. L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-N-méthyl-L-phénylalanine-2-aminoéthylamide en tant que composé selon la revendication 1.
  11. 11. L-Tyrosyl-D-alanylglycyl-N-méthyl-L-phénylalanine-y-aminobutyrique-N-méthyl-N-phénylamide en tant que composé selon la revendication 1.
  12. 12. Composé selon la revendication 1, choisi parmi: -
    H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-N S-O
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-(CH2)3-N+Me3CH3COO-
    H-Tyr-D-Met-Gly-MePhe-NH(CH2)2N(0)Me2
    H-Tyr-D-Met(0)-Gly-MePhe-NH(CH2)2N(0)Me2
    H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-MH(CH2)3CONH2
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3CONMe2
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)2NHCOCH3
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3C02Me
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3C02H
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3CONH2
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3NHCOCH3
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)3CONHMe
    H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe-NJ-O
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NH(CH2)4CONMe2 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH2)2CONMe2 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N(Me) (CH2)3CONMe2
    r~\ ■
    H-Tyr-D-Ala-Gly-Phe NN
    ' XMe
    CH2CH2CHMe2
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N
    XCH2CH2NMe2 CH2CH2CHMe2
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N ^
    CH2CH2N(0)Me2 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH2)3NH2
    r~*
    H-T yr-D-Ala-Gly-Phe-N N
    ^^Ph
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH2)2NMePhe
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH2)2N(0)MePh
    MeTyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH2)2NMe2
    MeTyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH2)2N(0)Me2
    H-Tyr-D-Nva-Gly-MePheNH(CH2)2NMe2
    H-Tyr-D-Nva-Gly-MePheNH(CH2)2N(0)Me2
    H-Tyr-D-Ser-Gly-MePheNH(CH2)2NMe2
    H-Tyr-D-Ser-Gly-MePheNH(CH2)2N(0)Me2
    H-Tyr-D-Met-Gly-MePheNH(CH2)2NMe2
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH2)2NHC02C2Hä
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH2)2NHCONH2
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH2)2OCONH2
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheNH(CH2)2NHCONMe2
    CH2CH2Ph
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N ^
    (CH2)2NMe2 CH2CH2Ph
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-N X
    ^(CH2)N(0)Me2 -CH2CH(CH3)2
    H-Tyr-D-Ala-GIy-MePheNHC H
    XCH2NMe2 ,CH2CHMe2 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePheNHC — H
    CH2N(0)Me2
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2NMeCH2CH2CHMe2 H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2N(0)MeCH2CH2CHMe
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    55
    60
    65
    3
    638 177
    H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2NHC02CH2Ph H-Tyr-D-Ala-Gly-MePhe-NHCH2CH2CH2NHC02CH2Ph
  13. 13. Procédé de préparation des composés de formule (I) selon la revendication 1, caractérisé par le fait qu'un composé de formule
    Y—M,—OH
    dans lequel Y est un groupe N-protecteur convenable et M, est un acide aminé protégé correspondant, ou un résidu peptidique correspondant, est couplé à un composé de formule H-M2-N-Rx I
    R8
    dans lequel Rx et R8 sont définis comme ci-dessus et M2 est un acide aminé protégé correspondant ou un résidu peptidique correspondant, où Mi et M, ensemble représentent -Tyr-B-Gly-D- ou un dérivé protégé de cela et B et D sont définis comme ci-dessus, suivi par l'élimination de la protection.
  14. 14. Procédé de préparation d'un composé de formule (I) selon la revendication 1, dans laquelle Rx est un groupe (CH2)S—X où X est un groupe N(0)RnR12, caractérisé par le fait que l'on prépare un composé de formule (I) dans laquelle X est un groupe NRnR12, conformément au procédé selon la revendication 13, et que l'on oxyde le composé ainsi préparé au moyen de peroxyde d'hydrogène ou d'acide métachloroperbenzoïque.
  15. 15. Composition pharmaceutique caractérisée par la présence d'au moins un des composés selon l'une des revendications 1 à 12 ou un sel acceptable sur le plan pharmaceutique de celui-ci, mélangé à un diluant ou à un support acceptable sur le plan pharmaceutique.
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