LU82316A1

LU82316A1 - Mercaptoacyldipeptides a action anti-hypertensive

Info

Publication number: LU82316A1
Application number: LU82316A
Authority: LU
Inventors: M Ondetti; J Pluscec
Original assignee: Squibb & Sons Inc
Priority date: 1979-04-02
Filing date: 1980-04-01
Publication date: 1980-12-16
Also published as: NZ193142A; ATA179480A; GB2045771A; AU5638080A; AU537592B2; ES8104200A1; NO150360C; JPS55133345A; DK140480A; IE49653B1; ZA801527B; GR67752B; FR2453135B1; BE882601A; IT8021110A0; NL8001675A; CH645092A5; PH22024A; GB2045771B; SE8002512L

Description

% - 1

Mercaptoacyldipeptides à action anti-hypertensive

Les composés de formule : ï R2 5 ^-S-ÎCH^-CH-C-A^A., ' ainsi· que leurs esters alkyliques et leurs sels, ont une activité utilisable contre l'hypertension. Dans la formule I ci-dessus et dans l’ensemble du mémoire descriptif, les symboles 10 ont les définitions suivantes : est un atome d'hydrogène ou un radical alcanoyle, benzoyle ou -S- (ch2 > n—CH—C—Ax—A2 î 15 0 1*2 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou phénylalkyle ? n est égal à 0 ou 1 ; et A^ et A2 sont chacun un reste d'a-amino acide ou d'a-20 imino acide qui sont réunis l'un à l'autre par une liaison peptide.

Le terme "alkyle", tel qu'il est utilisé dans l'ensemble du mémoire descriptif, désigne des radicaux ayant de 1 à 7 atomes de carbone.

25 Le terme "alcanoyle", tel qu'il est utilisé dans ' l'ensemble du mémoire descriptif, désigne les radicaux , alcanoyle ayant de 2 à 7 atomes de carbone. Le radical acétyle est le radical alcanoyle préféré.

Les restes d'a-amino acides et d'a-imino acides qui 30 sont représentés par A.^ et A2 peuvent être d'origine naturelle ou synthétique. Des exemples de ces α-amino acides et de ces a-imino acides sont la proline, la 4-hvdroxyproline, la 4,4-éthylènedioxyproline, la 4-méthoxyproline, l'acide 4-thiazolidine-carboxylique, le tryptophane, la glycine, l'alanine, la leucine, 35 l'isoleucine et la valine. Comme indiqué ci-dessus, les radicaux Α^^ et A2 sont réunis par une liaison peptide, c'est-à-dire par la liaison -C-NE* entre le groupement a-carboxyle du reste A.

*» " ί ο L· * 2 et le groupement a-amino ou α-imino du reste A^·

Les raercaptoacyldipeptides de formule I dans lesquels R est un radical alcanoyle ou benzoyle peuvent être préparés par acylation d'un dipeptide de formule : 5 II Αχ - A2 ou bien d'un ester alkylique de ce dipeptide, à l'aide d'un mer-capto-acide de formule : ^2

III I

i , _ R’-S-(CH_) -CH-C-OH ♦ 10 1 2 n |l

O

Dans la formule III et dans l'ensemble du mémoire descriptif, le symbole désigne un radical alcanoyle ou benzoyle. On peut réaliser l'acylation précédente en utilisant l'une quelconque 15 des nombreuses techniques bien connues dans le métier. Par exemple, on peut procéder 3 l'acylation en présence d'un agent de condensation tel qu'un carbodiimide (dont le dicyclo-hexylcarbodiimide est le plus souvent utilisé). Ou bien, on peut activer le mercapto-acide de formule III en formant son 20 anhydride mixte, son anhydride symétrique, son chlorure d'acide ou un ester actif, ou encore en utilisant le réactif K de Woodward ou la N-éthoxycarbonyl-2-éthoxy-l,2-dihydroquinoléine. Pour avoir une meilleure vue d'ensemble des différentes techniques d'acylation, on se reportera 3 Methoden der 25 organischen Chemie (Kouben-Weyl), Vol. XV, part II, page 1 et seq. (1974) .

Un autre mode de synthèse des composés de formule I dans lesquels R est un radical alcanoyle ou benzoyle comprend une acylation séquentielle, par opposition à l'acylation 30 directe déjà décrite, c'est-à-dire l'acylation de 1'amino-acide à l'aide d'un acide mercaptoalcanoylique de formule III (en utilisant le mode opératoire décrit ci-dessus) pour obtenir un amino-acide mercaptoalcanoylique de formule : IV Ro i2 . 35 |

Ri—S—,CH2) n—CH—C—Ai; ** puis l'acylation de 1 ' amino-acide A2 ou de son ester alkylique b ‘ 3 à l'aide d'un amino-acide mercaptoalcanoylique de formule IV.

On peut réaliser l’acylation en utilisant l'une quelconque des techniques bien connues de condensation des amino-acides. Pour passer en revue ces techniques il faut se reporter à Bodanszky 5 et Ondetti, Peptide Synthesis, Interscience Publishers (1966) .

Les composés de formule I dans lesquels est 1'hydrocône peuvent être préparés par aramoniolyse ou hydrolyse alcaline des composés correspondants de formule I dans lesquels est un radical alcanoyle ou benzovle, que l'on peut obtenir 10 en utilisant l'un ou l'autre des modes opératoires décrits ci-dessus. Les composés de formule I dans lesquels est R2 -S-(CH2)-CK-C-A^-Ag peuvent être préparés par oxydation du 0 15 thiol libre correspondant de formule I, à l'aide d'iode.

Des variantes des modes de synthèse précédents seront évidentes pour ceux qui mettront en oeuvre la présente invention. Par exemple, si l'on utilise un ester de ou de A2 dans l'une des synthèses précédentes, on peut obtenir l'acide libre 20 correspondant à partir du produit estérifié, par hydrolyse acide ou alcaline.

Des acides mercaptoalcanoyliques de formule III et des amino-acides mercaptoalcanoyliques de formule IV, ainsi que des procédés pour les préparer, sont décrits dans la littérature ; 25 voir par exemple les brevets U.S. N° 4.046.889, 4.105.776 et 4.053.651.

Les composés selon l'invention forment avec diverses bases minérales et organiques des sels basiques qui entrent également dans le champ d'application de l'invention. Ces sels 30 comprennent les sels d'ammonium, les sels de métaux alcalins comme les sels de sodium et de potassium (qui sont préférés), les sels de métaux alcalino-terreux comme les sels de calcium et de magnésium, les sels formés avec des bases organiques, par exemple le sel de dicyclohexylamine, de benzathine, de N-méthyl-. 35 D-glucamine, d’hydrabamine, les sels formés avec des amino- acides comme l'arginine, la lysine, etc. Les sels non toxiques - et physiologiquement acceptables sont préférables, mais d'autres * sels sont également utilisables, par exemple pour isoler ou to * 4 purifier le produit.

Les composés de formule I, ainsi que leurs esters alkyliques et leurs sels, sont utiles comme agents antihypertenseurs . Ils inhibent la transformation de l'angiotensine 5 I, un décapeptide, en angiotensine II, et sont donc utiles pour réduire ou atténuer l'hypertension due à l'angiotensine. L'action d'une enzyme, la rénine, sur 1 ' angiotensinogène, une pseudoglobuline du plasma sanguin, produit l'angiotensine I. L'angiotensine I est transformée par l'enzyme de transformation 10 de l'angiotensine (ETA) en angiotensine II. Cette dernière est un produit presseur actif qui a été rendu responsable de diverses formes d'hypertension chez diverses espèces de mammifères, par exemple chez les rats et les chiens. Les composés selon 1'invention interviennent dans la séquence angiotensinogène + 15 (rénine) -* angiotensine I -* ETA -* angiotensine II en inhibant l'enzyme de transformation de l’angiotensine et en réduisant ou supprimant la formation du produit presseur, l'angiotensine II. Ainsi, en administrant une composition qui contient au moins un composé de formule I, on atténue l'hypertension due à 20 l'angiotensine chez les espèces de mammifères qui en souffrent. Une dose unique, ou de préférence deux à quatre doses quotidiennes échelonnées, administrées à raison d'environ 0,1 à 100 mg par kilogramme de poids corporel et par jour, de préférence à raison d'environ 1 ä 50 mg par kilogramme de poids corporel et 25 par jour, convient pour réduire la pression sanguine. La * substance est de préférence administrée par voie orale, mais on peut tout aussi bien employer des voies parentérales telles que les voies sous-cutanée, intramusculaire, intraveineuse ou intrapéritonéale.

30 Les composés de formule I peuvent être conditionnés en vue de leur emploi pour la réduction de la pression sanguine sous la forme de compositions telles que comprimés, capsules ou élixirs en vue de leur administration orale, ou bien sous forme de solutions ou de suspensions stériles en vue de 1'administration 35 parentérale. On mélange environ 10 à 500 mg d'un composé ou d'un mélange de composés de formule I avec un véhicule, un porteur, un excipient, un liant, un conservateur, un stabilisateur, un agent de flaveur, etc., physiologiquement acceptables, sous une

In * 5 forme posologique unitaire telle que l’exige la pratique pharmaceutique acceptée. La quantité de principe actif dans ces compositions ou préparations est telle que l'on obtient une posologie convenable dans l'intervalle indiqué.

5 Les exemples suivants sont des formes de réalisation spécifiques de l'invention.

EXEMPLE 1 1-[N-(Acëtylthioacétyl)clycyl]-L-proline

On reprend 1,72 g de glycyl-L-proline dans 10 ml de 10 soude IN, en agitant dans un bain de glace. On ajoute au mélange 5 ml de soude 2N, puis 1,13 g de chlorure de chloracétyle, et on . enlève le bain. Au bout de 3 heures à la température ambiante, on ajoute 836 mg d'acide thiolacétique et 960 mg de carbonate de potassium dans 10 ml d'eau, et on agite le mélange 15 réactionnel pendant 16 heures environ à la température ambiante. On acidifie le mélange réactionnel avec une résine d'échange de cations à base de polystyrène sulfoné, on élue à l'eau, et on concentre à siccité sous vide. On reprend le résidu dans de l'acide acétique et on filtre les matières insolubles 20 (point de fusion supérieur à 320°C). On concentre le filtrat à siccité sous vide et on ajoute un mélange 7:3 de chloroforme et d'acide acétique. On centrifuge le produit et on introduit le liquide surnageant dans une colonne de gel de silice de 60 g, et on élue avec un mélange 7:3 de chloroforme et d'acide acétique, 25 ce qui donne 1,0 g du composé du titre.

EXEMPLE 2 1-fN-(Mercaptoacétyl)glycyl]-L-proline

On traite 1,0 g de 1-[N-(acëtylthioacétyl)glycyl]-L-proline pendant 30 minutes sous argon dans une solution de 6 ml 30 d'eau et de 6 ml de soude concentrée. On concentre la solution sous vide, on l'acidifie avec une résine d'échange de cations à base de polystyrène sulfoné, on l'introduit dans une colonne de la même résine, et on élue à l'eau. A 8C0 mg de la substance ainsi obtenue (plus 200 mg provenant d'une préparation 35 précédente), on fait subir une chromatographie sur une colonne de 30 g de gel de silice avec un mélange 7:3 de chloroforme et d'acide acétique. On introduit ce produit (740 me) dans une colonne de 85 ml de résine d'échange d'anions à base de diëthyl- * Μ * 6 aminoéthvl dextran, et on élue avec un gradient linéaire de bicarbonate d1 ammonium 0,005 M à du bicarbonate d'ammonium 0,5 m (750 ml chacun). On transforme le produit en acide libre à l'aide d'une résine d'échange de cations à base de poly-5 styrène sulfone, puis on traite par 7 ml d'acide acétique et 350 ml de poudre de zinc, en agitant sous une couverture d'arçon pendant 6 heures. On centrifuge la suspension, et on concentre * le liquide surnageant à siccité sous vide, puis on reprend dans l'eau et on lyophilise. On acidifie le produit résultant avec 10 une résine de polystyrène sulfone, on l’introduit dans une colonne de la même résine et on l'élue à l'eau, ce qui donne 365 rag du composé du titre.

Analyse de : C^H^^O^S. 0,3

Calculée : C 42,95 ; K, 5,68 ; N, 11,13 ; S, 12,72.

15 Trouvée : C 42,92 ; H, 5,78 ; N, 10,94 ; S, 12,68.

SH : calculé 1,00 : trouvé 0,98.

EXEMPLE 3

Ester tertio-butylique de (S)-1-[3-(acétylthio)-2-méthyl-l-oxopropyl]-L~prolyl-L-proline oo A une solution de 7,8 ç de 1-[S-3-(acétylthio)-2- mêthyl-l-oxopropyl]-L-proline dans 75 ml de dichlorométhane on ajoute 5,13 ç de L-prolinate de tertio-butyle, et on refroidit la solution ä 5°C. A cette solution on ajoute goutte ä goutte une solution de dicyclohexylcarbodiimide dans 50 ml de 25 dichloromethane. On mene la réaction a la température ambiante pendant 16 heures environ. Après avoir éliminé le précipité, on lave la solution résultante successivement avec de l'eau, du bicarbonate de sodium à 5 %, de l'eau, du bisulfate de potassium à 10 %, et de l'eau, puis on sèche sur sulfate de sodium. Le 30 produit brut (12 g) que l'on obtient après élimination du solvant se solidifie au repos. Une recristallisation dans un mélange d'acétate d'éthyle et de pentane donne le composé du titre, point de fusion 104-106°C.

EXEMPLE 4 35 1- (S-3-mercapto-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl-L-proline

On reprend 12 g d'ester tertio-butylique de l-[S-3-(acétylthio)-2-méthyl-l-oxopropyl]-L-proline dans 60 ml d'acide * Γ' 7 * * trifluoracétique redistillé, et on laisse reposer la solution résultante à la température ambiante pendant une heure. On élimine l'acide trifluoracétique sous vide et on sèche soigneusement le résidu sous un vide poussé pendant 24 heures.

5 On dissout l'huile lourde dans 30 ml de méthanol et on ajoute à la solution 20 ml d'ammoniaque concentrée. On maintient le mélange à la température ambiante pendant une heure, puis on chasse le solvant sous vide et on sèche le résidu huileux et on le traite par 6 ml de dicyclohexylamine. On traite le sel 10 avec de l'éther et une huile précipite. On reprend cette huile dans de l’acétate d'éthvle et on lave la solution avec du bisulfate de potassium à 10 % puis on sèche sur sulfate de sodium. Après avoir éliminé le solvant, on reprend le résidu dans du méthanol et on adsorbe le tout sur du gel de silice. On 15 chasse le solvant et on introduit le gel de silice contenant le produit adsorbé dans une colonne de gel de silice garnie .de chloroforme. On élue la colonne avec du chloroforme, et on réunit les fractions donnant un test de mercaptan positif. On chasse le solvant et on lyophilise le résidu dans L'eau pour 20 obtenir 1,05 g du composé du titre sous la forme d'un solide hygroscopiçue.

Analyse de * VSHgO :

Calculée : C, 51,99 ; H, 7,17 ; N, 8,66 ; S, 9,92.

Trouvée : C, 52,12 ; H, 7,44 ; N, 8,18 ; S, 9,37.

25 Equivalent de neutralisation : calculé 323, trouvé , 341.

EXEMPLE 5 N-(Acétylthioacétyl)-L-valyl-L-proline

On maintient à la température ambiante pendant 15 30 minutes une solution de 3,1 g de tert-butyloxycarbonyl-L-valyl-L-proline dans 20 ml d'acide trifluoracétique, on chasse le solvant sous vide et on sèche le résidu huileux sous vide pendant plusieurs heures. On reprend l'huile dans 25 ml de diméthylformamide et on ajoute à cette solution 2,2 g d'ester 35 de N-hydroxysuccinimide d'acide acétylmercapto-acéticue. On mène la réaction à pH 7,5 (ajusté à l'aide de triéthylamine) et à la température ambiante pendant 17 heures. Après avoir éliminé * ls solvant, on reprend le résidu dans de l'acétate d'éthyle et - » 8 on lave la solution successivement avec de l’eau, du bisulfate de potassium à 10 %, de l'eau, du bicarbonate de sodium saturé, de l’eau, et finalement on sèche sur sulfate de sodium, ce qui donne 4,8 g du composé du titre sous la forme d'une huile.

5 EXEMPLE 6 N-(Mercaptoacétvl)-L-valyl-L-proline

On reprend 4,8 g de N-(acétylthioacétyl)-L-valyl-L-proline dans un mélange de 12 ml de méthanol et de 7,5 ml d’ammoniaque concentrée, et on maintient la solution résultante 10 à la température ambiante pendant une heure. On ajuste le pH à 7 et on chasse le méthanol sous vide. On acidifie la couche aqueuse restante à pH 2 avec de l'acide chlorhydrique 2 N et on sature la solution de chlorure de sodium. On extrait le produit à l'acétate d'éthyle, on sèche la solution sur sulfate de.

15 sodium et on chasse le solvant sous vide, ce qui donne 2 g de produit, point de fusion 158-162°C. La recristallisation dans l'acétate d'éthyle (avec addition d'une petite quantité de méthanol) donne le produit, point de fusion 162-165°C. Après séchage d'un échantillon à 55°C pendant deux heures, le point 20 de fusion est de 190-192°C.

EXEMPLE 7

Ester éthylique de 1-(S-3-(acétylthio)-2-méthyl-l-oxopropyl-L-prolylglycine

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 3, mais en 25 utilisant 10,4 g de 1-[S-3-(acétylthio)-2-méthyl-l-oxopropyl]-L-proline, 100 ml de dichlorométhane, 5,6 g de l'ester éthylique de la glycine (préparé à partir de 5,58 g du chlorhydrate de l'ester éthylique de la glycine et de 5,6 ml de triéthylamine dans 50 ml de dichlorométhane) et 8,24 g de dicyclohexylcarbo-30 diimide, on obtient 11,2 g du composé du titre, sous la forme d'une huile visqueuse.

EXEMPLE 8

Sel de lithium de la (S)-1-(3-mercapto-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolylglycine 35 On reprend 11,2 g d'ester éthylique de 1-[S-3-(acétyl thio) -2-méthyl-l-oxopropyl] -L-prolyglycine dans 200 ml de méthanol, auquel on a ajouté une solution aqueuse de 9 g de potasse dans 40 ml d'eau. On laisse l'hydrolyse se faire à la température ambiante pendant * _ » 9 deux heures. On chasse le solvant organique sous vide et on ajuste le résidu aqueux à pH 7,0. On extrait le produit à l'acétate d'éthyle, on sèche la solution sur sulfate de sodium et on chasse le solvant sous vide. On reprend le résidu (3,5 g) 5 dans de l'eau et on ajuste le pH à 2,0. On reprend à nouveau l'acide libre dans de l'acétate d'éthyle en utilisant du chlorure de sodium pour réduire la solubilité dans l'eau.

Après élimination du solvant, on lyophilise le résidu dans de l'eau, ce qui donne 2,16 g de la base libre du composé du titre. 10 On reprend le tout dans de l'eau et on ajuste soigneusement le pH à 7,0 à l'aide d'hydroxyde de lithium 0,05 N. On lyophilise la solution pour obtenir 1050 mg du composé du titre, sous la forme d'un solide hygroscopique.

Analyse de C^H^l^O^S.Li : 15 Calculée : C, 47,14 ; H, 6,12 ; S, 11,44 ; Li, 2,48.

Trouvée : C, 46,56 ; H, 6,42 ; S, 11,37 ; Li, 2,43.

EXEMPLE 9 (S)-1-(3-Mercapto-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl-L-alanine

En suivant le mode opératoire des Exemples 3 et 4, 20 mais en utilisant 7,8 g de 1-[S-3-(acétylthio)-2-méthyl-l-oxopropyl]-L-proline, 75 ml de diméthylformamide, 6,2 g de dicyclohexylcarbodiimide, 4,2 g du chlorhydrate de l'ester méthylique de la L-alanine et 4,2 ml de triéthylamine (pH 7,5-8,0), on obtient 8 g de produit. On fait passer ce produit dans 25 une colonne de gel de silice en utilisant l'acétate d'éthyle comme éluant. On obtient deux fractions (R^ = 0,76 et R^ = 0,4, gel de silice, acétate d'éthyle).

On reprend la fraction la pltis lente (2 g ; R_p = 0,4) dans un mélange de potasse et de mëthanol aqueux (1,5 g de 30 potasse dans 7 ml d'eau et 35 ml de méthanol), et on maintient la solution à la température ambiante pendant deux heures. On chasse le solvant organique sous vide et on acidifie la couche aqueuse ä pH 2,0. Après avoir ajouté du chlorure de sodium, on extrait le produit cinq fois avec de l'acétate d'éthyle. On sèche * 35 la solution et on chasse le solvant sous vide. On fait cristalliser le résidu solide dans de l'acétate d'éthyle chaud, * ce qui donne 1 g de produit, point de fusion 128-130°C.

* EXEMPLE 10 *- % 10

Ester méthylique de 1'acëtylthioacétyl-valyl-tryptophane

On agite pendant une heure sous azote une solution de 15 g de .l'ester méthylique du tertio-butyloxycarbonyl-valyl-tryptophane dans 150 ml d'acide trifluoracêtique et 15 ml 5 d'anisole. On concentre la solution sous vide en un résidu huileux.

On refroidit à 0°C une solution de 4,83 g d'acide acétylthioacétique et de 6,18 g d’hydroxybenzotriazole mono-hydraté dans 120 ml de têtrahydrofuranne, et on traite par une 10 solution de 8,16 g de dicyclohexylcarbodiimide dans 60 ml de têtrahydrofuranne. On agite le mélange à 0°C pendant une demi-heure puis à la température ambiante pendant une heure. On filtre l’urée qui a précipité et on concentre le filtrat sous vide en un solide blanc. On dissout l'ester actif dans 90 ml de 15 diméthylformamide, après quoi on ajoute une solution du sel d'acide trifluoracêtique de l'ester méthylique du dipeptide précédent dans 60 ml de diméthylformamide, ainsi qu'une quantité suffisante de N-méthylmorpholine pour maintenir le pH à 7,5, et on agite le mélange résultant pendant 16 heures à la 20 température ambiante. On concentre le mélange réactionnel sous vide en une huile que l'on partage entre de l'acétate d'éthyle et de l'eau. On lave la phase acétate d'éthyle avec de l'acide citrique 2 N, de l'eau, une solution saturée de bicarbonate de sodium, et de l'eau, et on sèche sur sulfate de sodium, puis 25 on concentre en un solide. On fait cristalliser la substance dans ' un mélange d’acétate d'éthyle et de pentane pour obtenir 10 g du composé du titre, point de fusion 110~112°C.

EXEMPLE 11

Sel de lithium du N-(mercaptoacétyl)-L-valyl-L-tryptophane 30 On dissout 5,0 g d'ester méthylique d'acëtylthio- acétyl-valyl-tryptophane dans 52 ml de méthanol, et on ajoute une solution de 2,1 g de potasse dans 10,5 ml d'eau. On agite le mélange sous azote à la température ambiante pendant une heure et demie, après quoi on chasse le méthanol sous vide. On 35 dilue le résidu aqueux avec de l'eau, on extrait à l'acétate d'éthyle et on acidifie à pH 2,0 avec de l'acide chlorhydrique 6 N. On filtre le solide, on le lave à l'eau et on le sèche, ce qui donne 3,4 g de produit. On fait subir au solide une <* - * 11 chromatographie dans une colonne de "Sephadex LH-20" en utilisant comme éluant un mélange 7:3 de méthanol et d'eau, pour obtenir 1,5 g d'une huile. On dissout cette huile dans un mélange 1:1 d'éthanol et d'eau et on ajuste la solution à pH 5 7,0 avec de 1'hydroxyde de lithium 0,1 N. On sépare par filtration une petite quantité de produit insoluble, et on concentre le filtrat sous vide en une huile. On dissout cette huile dans de l’eau et on lyophilise pour obtenir 1,5 g d’un solide hygroscopique.

10 Analyse de .Li :

Calculée : C, 51,54 ; H, 6,25 ; S, 7,65 ; Li, 1,65.

Trouvée : C, 51,94 ; H, 6,03 ; S, 7,28 ; Li, 1,62. Equivalent de neutralisation : calculé 419 ; trouvé 413.

EXEMPLE 12 15 Ester mëthylique de (S)-1-Γ3-(acétylthio)-2-méthyl-l-oxopropyl]-L-prolyl-D-alanine A une solution de 7,8 g de l-[S-3-(acétylthio)-2-méthyl-l-oxopropyl]-L-proline dans 150 ml d'acétonitrile, on ajoute 4,9 g de carbonyldiimidazole à 0°C. On agite le mélange 20 pendant une heure ä cette température, après quoi la solution devient presque limpide et on ajoute 4,2 g de chlorhydrate d'ester méthylique de D-alanine. On ajuste le pH ä 7,5-8,0 avec 4,2 ml de triéthylamine et on agite le mélange réactionnel pendant 17 heures ä la température ambiante. On élimine le précipité et 25 le solvant et on reprend le résidu huileux dans de l’acétate > d'éthyle. On lave la solution successivement avec de l’eau, de l'acide chlorhydrique 0,1 N, de l'eau, du bicarbonate de sodium saturé, de l'eau, et on sèche. Après élimination du solvant, l'huile restante présente une tache à la chromatographie en 30 couche mince (gel de silice, acétate d'éthyle et mélange 9:1 de chloroforme et de méthanol) à = 0,5 avec une trace à R^ = 0,75 (dans l'acétate d’éthyle). Rendement 4 g.

EXEMPLE 13 (S)-1-(3-Mercapto-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl-D-alanine 35 On reprend 4 g d'ester méthylique de (S)-[3-(acétyl- thio)-2-méthyl-l-oxopropyl]-L-prolyl-D -alanine dans un mélange de potasse et de méthanol aqueux (3 g de potasse dans 14 ml d'eau et 70 ml de méthanol), et on maintient la solution à la 12 température ambiante pendant 2 heures. On isole le produit (2,1 g) en utilisant le mode opératoire décrit à l'Exemple 9, p.f. 152-155°C, sous la forme d'un solide cristallin.

Analyse de ^2^20^2°^ : 5 Calculée : C, 49,98 ; H, 6,99 ; S, 11,12.

Trouvée : C, 50,02 ; H, 7,24 ; S, 10,90.

Equivalent de neutralisation : calculé 288 ; trouvé 284.

EXEMPLE 14 1-[N-(mercaptoacétyl)-L-alanyl]-L-proline 10 A une solution de 1,3 g d'acide acëtylthioacétique et de 1,44 g d'hydroxybenzotriazole dans 39 ml de tëtrahydro-furanne, on ajoute 2 g de dicyclohexylcarbodiimide et on agite le mélange à 0°C pendant 30 minutes et à la température ambiante pendant une heure. On sépare le précipité par filtration,· et au 15 filtrat on ajoute de la L-alany1-L-proline sous la forme de son trifluoracétate (préparé à partir de 2,8 g de tert-butyloxy-carbonyl-L-alanyl-L-proline et d'acide trifluoracêtique). On ajuste le pH ä 7,5-8,0 avec de la N-mêthylmorpholine, et on laisse la réaction se faire à la température ambiante pendant 16 20 heures environ. On chasse les solvants sous vide et on dissout le résidu dans un mélange de 18 ml de méthanol et de 18 ml d'ammoniaque concentrée. Au bout de 30 minutes, on concentre le mélange sous vide, on dissout le résidu dans de l’eau et on l'introduit dans une colonne de résine d'échange de cations à 25 base de polystyrène sulfone, en ëluant avec de l'eau. On purifie encore cette substance par chromatographie sur gel de silice (mélange 7:3 d'acide acétique et de chloroforme) et on fait cristalliser dans l'acétate d'éthyle, rendement 850 mg, point de fusion 152-155°C, [a]D - 128° (c, 1,5 dans du méthanol 30 aqueux à 50 S).

EXEMPLE 15

Acide 1-[N-mercaptoacétyl)-L-alanyl]-L-thiazolidine-4-carboxyligue

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais 35 en remplaçant le sel d'acide trifluoracêtique de la L-alanyl-L-proline par le sel d'acide trifluoracêtique de l'acide L-alanyl-L-thiazolidine-4-carboxylique dans le mode opératoire de l'Exemple 14, on obtient le composé du titre.

* 13 EXEMPLE 16 1-[N-(Mercaptoacëtyl)-L-alanyl]-4-méthoxy-L-proline

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais en remplaçant le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-5 L-proline par le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl- 4-méthoxy-L-proline, on obtient le composé du titre.

EXEMPLE 17 1- [N- (Mercaptoacétyl-L-alanyl]-4-hydroxy-L-proline

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais 10 en remplaçant le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-L-proline par le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-4-hydroxy-L-proline, on obtient le composé du titre.

EXEMPLE 18 1-fN- (Mercaptoacëtyl)-L-alanyl]-4,4-éthylènedioxy-L-proline 15 En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais en remplaçant le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-L-proline par la L-alanyl-4,4-éthylènedioxy-L-proline, on obtient le composé du titre.

EXEMPLE 19 20 1- [N- (2-?4ercaptopropanoyl) -L-alanyl l-L-proline

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais en remplaçant l'acide 2-acétylthioacëtique par l'acide 2-acétyl-thiopropionique, on obtient le composé du titre sous la forme d'un solide cireux, p.f. (47°) 54-65°C (décomposition).

25 Analyse de C^H^g^O^S . 1/2^0 :

Calculée : C, 46,63 ; H, 6,76 ; S, 9,89.

Trouvée : C, 46,50 ; H, 6,58 ; S, 9,78.

Titrage de SH : 100%.

EXEMPLE 20 30 1-[N-(3-Mercapto-1-oxopropyl-L-alanyl]L-proline

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais en remplaçant l'acide 2-acétylthioacétique par l'acide 3-acétyl-thiopropionique, on obtient le composé du titre sous la forme d'un solide hygroscopique, p.f. (61°) 75-84°C.

• 35 Analyse de x^x8N2^4^^' 75^0 :

Calculée : C, 45,89 ; K, 6,83 ; S, 11,14.

• Trouvée : C, 45,75 ; H, 6,62 ; S, 10,98.

• Titrage de SH : 99,6 %, * «· % 14 EXEMPLE 21 1~ΓN-(2-Mercaptopropanoyl)-L-alanyl] -4-hydroxy-L-proline

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais en remplaçant l'acide acétylthioacétique par l'acide 2-acétyl-5 thiopropionique et le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanvl-L-proline par le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-4-hydroxy-L-proline, on obtient le composé du titre.

EXEMPLE 22

Acide l-[N- (2-roe.rcaptopropanoyl) -L-alanyl] -L-thiazolidine-4-10 carboxyligue

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais en remplaçant l’acide acétylthioacétique par l'acide 2-acétyl-thiopropionique et le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-L-proline par le sel d'acide trifluoracétique de l'acide 15 L-alanyl-L-thiazolidine-4-carboxylique, on obtient le composé du titre.

EXEMPLE 23 1-fN-(2-Mercaptopropanoyl)-L-alanyl]-4-méthoxy-L-proline

En suivant le mode opératoire de l’Exemple 14, mais 20 en remplaçant l'acide acétylthioacétique par l’acide 2-acétyl-thiopropionique et le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-L-proline par le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-4-méthoxy-L-proline, on obtient le composé du titre.

EXEMPLE 24 25 1-fN-(2-Mercaptopropanoyl)-L-alanyl]-4,4-éthvlënedioxy-L-proline

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais en remplaçant l'acide acétylthioacétique par l'acide 2-acétyl-thiopropionique et le sel d'acide trifluoracétique de la L-30 alanyl-L-proline par la L-alanyl-4,4-éthylènedioxy-L-proline, on obtient le composé du titre.

EXEMPLE 25 1-[N- (2-Mercapto-3-phénylpropanoyl)-L-alanyl]-4-hydroxy-L-proline 35 En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais en remplaçant l'acide acétylthioacétique par l'acide 2-acétylthio-3-phénylpropionique et le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-L-proline par le sel d'acide trifluoracétique de la L- * * 15 \ alanyl-4-hydroxy-L-proline, on obtient le composé du titre.

EXEMPLE 26

Acide 1-[N-(2-mercapto-3-phénylpropanoyl)-L-alanyl]-L-thiazolidine-4-carboxyligue 5 En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais en remplaçant l'acide acétylthioacêtique par l'acide 2-acétyl-thio-3-phénylpropionique et le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-L-proline par le sel d’acide trifluoracétique de l'acide L-alanyl-L-thiazolidine-4-carboxylique, on obtient le 10 composé du titre.

EXEMPLE 27 1-[N- (2-Mercapto-3-phénylpropanoyl)-L-alanyl]-4-méthoxy-L-proline

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais 15 en remplaçant l’acide acétylthioacêtique par l'acide 2-acétyl-thio-3-phénylpropionique et le sel d’acide trifluoracétique de la L-alanyl-L-proline par le sel d'acide trifluoracétique de la L-alanyl-4-mëthoxy-L-proline, on obtient le composé du titre.

EXEMPLE 28 20 1-[N-(2-Mercapto-3-propanoyl)-L-alanyl]-4,4-éthylënedioxy-L-proline

En suivant le mode opératoire de l'Exemple 14, mais en remplaçant l'acide acétylthioacêtique par l'acide 2-acétylthio- 3-phënylpropionique et le sel d'acide trifluoracétique de la L-25 alanyl-L-proline par la L-alanyl-4,4-ëthylènedipxy-L-proline, on obtient le composé du titre.

EXEMPLE 29 1-[N-(Mercaptoacétyl)-L-prolyl]-L-proline

METHODE A

30 On hydrogène 3 g de benzyloxycarbonyl-L-prolyl-L- proline dans un mélange de 50 ml d'éthanol absolu et de 7,5 ml d'acide chlorhydrique N, en présence de palladium à 10 % sur charbon. Au bout de 5 heures, on sépare le catalyseur par filtration et on chasse le solvant sous vide. On dissout le 35 résidu dans un mélange de 15 ml de diméthylformamide et de 1,05 ml de triéthylamine, et on ajoute 1,7 g d'ester de N-hydroxy-succinimide d'acide acétylthioacêtique. Après repos à la * température ambiante pendant 16 heures environ, on chasse les f- » 16 solvants sous vide et on fait subir au résidu une chromatographie sur une colonne de gel de silice (mélange 7:1 de benzène et d'hexane). On dissout cette substance dans 5 ml d'acide trifluoracétique et 2 ml d’anisole et on maintient la 5 solution à la température ambiante pendant une heure. On concentre le mélange réactionnel à siccité, et on dissout le résidu dans 7,7 ml de soude N, en agitant sous argon. Au bout de 15 minutes on neutralise le mélange avec une résine d'échange de cations à base de polystyrène sulfoné, on 10 l'introduit dans une colonne de la même résine, et on élue â l’eau. On fait cristalliser la substance obtenue dans de l'acétate d'éthyle et elle a un point de fusion de 182-183°C.

METHODE B

On ajoute 2,06 g de dicyclohexylcarbodiimide et. 2,3 g 15 de 1-(acétylthioacétyl)-L-proline à une solution de 1,7 g d'ester tertio-butylique de L-proline et de 1,5 g d'hydroxy-benzotriazole dans 15 ml de dichloromëthane refroidis dans un bain de glace. Après agitation à 5°C pendant 16 heures environ, on sépare par filtration le précipité résultant et on 20 lave le filtrat jusqu’à ce qu’il soit neutre. On concentre à siccité la couche organique et on purifie le résidu par chromatographie sur gel de silice et on le fait cristalliser dans un mélange d'éther et d'hexane, ce qui donne une substance ayant un point de fusion de 95-98°C. On élimine le groupement 25 protecteur de ce composé en le traitant successivement avec de l'acide trifluoracétique et de la soude, comme décrit dans la Méthode A.

EXEMPLE 30

Ester méthylique de 1'acétylthioacétyl-L-alanyl-L-tryptophane 30 On a dissous 2,5 g d’acétate d'ester méthylique de L-alanyl-L-tryptophane dans 20 ml de diméthylformamide et on a ajouté 2,0 g d'ester de N-hydroxysuccinimide d'acide acétyl-thioacétique. On a ajusté le pH de la solution à 7,5 avec de la N-méthylmorpholine et on a agité le mélange pendant une nuit à 35 la température ambiante. On a chassé le solvant sous vide et on a repris l'huile .résiduelle dans de l’acétate d'éthyle, on l'a lavée à l'eau, on l'a séchée et on l'a concentrée sous vide en un résidu mousseux (3 g). On a dissous ce résidu dans de l'acétate " » 17 d'éthyle et on l'a fait passer dans une colonne de 1,5 cm x 45 cm contenant 60 g d'alumine basique Woelm (activité I). L'élution à l'acétate d'éthyle a donné 1,6 g d’un solide mousseux qui a donné une tache à = 0,69 sur un 5 chromatographe en couche mince de gel de silice, par élution avec un mélange 3:1 de chloroforme et de méthanol.

EXEMPLE 31

Sel de lithium du N-[N-(mercaptoacétyl)-L-alanyl]-L-tryptophane On a agité une solution du produit de l'Exemple 30 10 (1,2 g dans 36 ml de méthanol) avec 6 ml d'une solution de soude IN, sous une atmosphère d'azote, pendant une demi-heure, à la température ambiante. On a ajusté le mélange réactionnel à pH 6 et on a chassé le solvant sous vide. On a partagé le résidu entre de l'acétate d'éthyle et une solution saturée de 15 bicarbonate de sodium (1:1). On a lavé la phase aqueuse à l'acétate d'éthyle, on l'a saturée de chlorure de sodium, on l'a acidifiée ä pH 2,0 et on l'a extraite à l'acétate d'éthyle. On a séché l'extrait S l'acétate d'éthyle avec du sulfate de sodium et on l'a concentré sous vide en un résidu mousseux.

20 On a dissous ce résidu dans une solution d’éthanol aqueux à 50 % et on a ajusté le pH à 7 avec une solution d'hydroxyde de lithium IN. On a concentré cette solution à siccité et on a repris le résidu dans de l'eau et on l'a lyophilisé en un solide blanchâtre (390 mç).

25 Analyse de ,Li.2H20 :

Calculée : C, 49,11 ; H, 5,67 ,* N, 10,73 ; S, 8,18. Trouvée : C, 98,78 ; H, 5,07 ; N, 10,41 ; S, 7,85. EXEMPLE 32 (S)-1-(3-Mercapto-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl-B-alanine 30 A. On a ajouté 3,06 g de chlorhydrate d'ester éthylique de B-alanine et 2,82 ml de triéthylamine à une solution de 5,2 g de l-[S-3-acétylthio)-2-méthyl-l-oxopropyl]- L-proline et de 3,24 g de carbonyldiimidazole à 0°C, et on a agité le mélange résultant pendant une nuit à la température 35 ambiante. On a chassé le solvant du mélange réactionnel et on a extrait le résidu à l'acétate d'éthyle. On a ensuite lavé cet extrait avec de l'eau, avec une solution d’acide chlorhydrique *» ^ IN, a nouveau avec de l'eau, avec une solution saturée de * # 18 bicarbonate de sodium, et encore avec de l'eau, puis on l'a séché sur du sulfate de sodium et on l'a concentré en une huile limpide (3,4 g). L'analyse spectrale a révélé que cette substance était la (S)-1-(3-acétylthio-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl-5 B-alanine, et on 1 'a utilisée telle quelle dans l'étape suivante.

B. On a dissous 3,4 g de la substance provenant de l'étape A dans une solution de 43 ml de méthanol, et on a ajouté 1,7 g de potasse dans 8,6 ml d'eau. On a agité le mélange 10 pendant une heure à la température ambiante, on a ensuite ajouté 50 ml d'eau et on a chassé le méthanol. On a acidifié le résidu aqueux à pH 2,0 avec de l'acide chlorhydrique dilué. On a ensuite chassé le solvant sous vide et on a extrait le résidu au méthanol. Apres séchage, on a chassé le solvant mêthanolique 15 pour laisser subsister une huile (3,2 g) à laquelle on a fait subir une chromatographie dans une colonne de "Sephadex LH-20", et on a élue avec un mélange 1:9 de méthanol et d'eau pour obtenir 1,1 g du composé du titre, sous la forme d'une huile limpide. CCM : une tache à R^ 0,65, gel de silice, méthanol.

20 Analyse de Cl2H20N2O4S :

Calculée : C, 49,99 ; H, 6,99 ; N, 9,71.

Trouvée : C, 49,81 ; H, 7,29 ; N, 8,67.

EXEMPLE 33 (R)-1-fN-(2-mercapto-l-oxo-3-phénylpropyl)-L-alanyl]-L-proline 25 A. Acide (R)-2-acétylthio-3-phënyl-propionique * On a ajouté 32,75 g de nitrite de sodium à une solution refroidie de 51 g de L-phênylalanine et de 125 g de bromure de potassium dans 620 ml d'acide sulfurique 25N, en une heure, tout en maintenant la température du mélange réactionnel 30 à 0°C. On a agité le mélange réactionnel pendant encore une heure à 0° puis pendant une heure à la température ambiante. On a ensuite extrait le mélange réactionnel à l'éther et on a séché l'extrait éthérë sur du sulfate de sodium. On a chassé l'éther pour laisser subsister l'acide (S)-2-bromo-3-phényl-propionique 35 sous la forme d'un résidu huileux (44,9 g) que l'on a distillé à 142-144°C (0,25 mm Hg).

On a agité pendant une heure et quart à la température

** I

ambiante un mélange de 8,7 ml d'acide thioacétique et de 6,8 g * 19 % de potasse dans 225 ml d'acétonitrile. On a refroidi le mélange dans un bain de glace et on a ajouté en 10 minutes 25,3 g d'acide (S) --2-bromo-3-phényl~propionique dans 25 ml d'acéto- nitrile. Après agitation pendant 5 heures, on a filtré le 5 mélange réactionnel et on a chassé le solvant sous vide, et on a redissous le résidu huileux dans de l'acétate d'éthyle et on l'a séché, et on a chassé le solvant pour obtenir 24 g d'acide (R)-2-acétylthio-3-phënyl-propionique brut. On a purifié ce produit brut par formation du sel de dicyclohexylamine en 10 utilisant l'éther comme solvant de cristallisation. On a 25 régénéré l'acide libre, [a]^ +62° (c = 2,8, chloroforme) à l'aide d'acide chlorhydrique, et on l'a extrait à l'acétate d'éthyle.

B. (R)-(2-acétylthio-3-phényl)propionyl-L-alanyl- 15 L-proline

On prépare le produit ci-dessus en faisant réagir l'acide (R)-2-acétylthio-3-phénylpropionique de la partie (A) ci-dessus avec de la L-alanyl-L-proline selon le mode opératoire de l'Exemple 14, p.f. (1240)135-138°C, [a]^5 - 23° (C = 1,4, 20 chloroforme).

C. (R)-1-[N-(2-mercapto-l-oxo-2-phénylpropyl)-L-alanyî}-L-proline

En continuant le mode opératoire de l'Exemple 14 avec le produit de la partie (B) ci-dessus, et en utilisant de la 25 soude ä la place de potasse, on obtient le composé du titre sous 25 la forme d'un solide mousseux, [a]^ - 78,4° (c = 1,1, chlorofor me) .

Analyse de ci7H22N2°4S *2H2° :

Calculée : C, 52,83 ; H, 6,78 ; N, 7,25 ; S, 8,30.

30 Trouvée : C, 52,54 ; H, 6,26 ; N, 7,01 ; S, 8,16.

EXEMPLE 34 (S) -1 [N- (2-mercapto-l-oxo-3-phénylpropyl) -L-alanyî}-L-proline A. Acide (S)-2-acétylthio-3-phénylpropionique En suivant le mode opératoire de la partie (A) de 35 l'Exemple 33 et en remplaçant la L-phénylalanine par la D-phényl-alanine, on obtient le composé du titre so\is la forme de son sel de dicyclohexylamine, p.f. 146-147°C après recristallisation dans l’acétate d’éthyle. On régénère l’acide libre à l'aide * » 20 % d'acide chlorhydrique et on l'extrait à l'acétate d'éthyle, [α]ρ^ “ 70,1° (c, = 1,91, chloroforme).

B . (S)-(2-acétylthio-3-phényl)propionyl-L-alanyl-L- proline 5 En faisant réagir le produit de la partie (A) ci- dessus avec de la L-alanyl-L-proline selon le mode opératoire de l'Exemple 33 (B), on obtient le composé du titre sous la forme d'un résidu huileux qui, par trituration avec de l'éther éthylique et de l'hexane, se solidifie, p.f. 161-163°C, 10 - 109,6° (c, = 1,5, chloroforme).

C. (S) -1- [N- (2-iÎiercapto-l-oxo-3-phénylpropyl) -L- • alanyîj-L-proline

On obtient le produit du titre en traitant la substance de la partie (B) ci-dessus selon le mode opératoire de l’Exemple 25 15 33 (C), sous la forme d'un solide mousseux, [a]^ - 82,7° (c = 1,5, chloroforme).

Analyse de C17H22N204S*H2° :

Calculée : C, 55,42 ; K, 6,56 ; N, 7,60 ; S, 8,70. Trouvée : C, 55,25 ; H, 6,18 ; N, 7,36 ; S, 8,43.

20 Titrage de SH : 99,1 %.

EXEMPLE 35 N-[N-[2-(Mercaptoroëthyl)-l-oxo-3-phénylpropyl]glycyl]-L-arginine A. N-[2-f(Acétylthio)méthyl]-l-oxo-2-phénylpropyl]- glycine 25 On a mélangé un échantillon de 13 g (0,067 mole) ' d'.acide benzylmalonique avec 7,6 g (0,068 mole) de diméthyl-amine aqueuse à 40 I et 5,4 g (0,068 mole) de formaline à 37 % dans 150 ml d'eau. On a filtré au bout de deux heures le solide volumineux qui s'était formé au bout de 15 minutes, on l'a lavé 30 à l'eau, et on l'a séché partiellement à l'air pour obtenir 20,8 g (théorie : 16,8 g). On a fait fondre le solide dans un bain d'huile à 170° et on l'a chauffé pendant 10 minutes, jusqu'à ce que le dégagement d'amine cesse et que le bouillonnement ait pratiquement cessé. On a acidifié le produit 35 refroidi, un liquide mobile, avec du sulfate acide de potassium à 10 %, on l'a extrait à l'hexane, on l'a séché sur sulfate de sodium et on l'a concentré pour obtenir 6,3 g de solide. On a laissé les filtrats aqueux provenant de la réaction de Mannich * ft 21 ) reposer pendant une nuit puis on les a chauffés à 100°C sur un cône de vapeur jusqu'à ce que le bouillonnement cesse (2 heures). Le refroidissement, l'acidification et l'extraction comme ci-dessus ont donné encore 1,2 g de solide pour un total de 7,5 g 5 (75 %) d'acide benzylacrylique.

On a traité un échantillon de 6,2 g (0,04 mole) d'acide benzylacrylique dans 350 ml de dichlorométhane avec 5,4 g (0,04 mole) de chlorhydrate de çlycinate d'éthyle et 3,9 a (0,04 mole) de triéthylamine. On a refroidi le mélange dans la 10 glace et on ajouté 7,9 g (0,04 mole) de dicyclohexylcarbo-diimide. On a agité le mélange à 25°C pendant une nuit, puis on l'a filtré. On a secoué les filtrats avec du bicarbonate aqueux, du bisulfate de potassium à 10 %, puis avec de l'eau, et on les a séchés sur sulfate de sodium puis on les a 15 concentrés en une huile. On a repris cette huile dans 200 ml de méthanol et on l'a traitée par un excès de soude à 10 %.

On a chauffé le mélange pendant 15 minutes sur un cône de vapeur, puis on l'a concentré en une bouillie aqueuse. On a filtré cette bouillie et on a extrait les filtrats à l'éther. On a acidifié 20 la couche aqueuse avec de l’acide chlorhydrique à 10 % et on l'a extraite au chloroforme, on a séché les extraits sur sulfate de sodium et on les a concentrés en une huile, 7,3 g (80 %) .

On a ajouté 10 ml d'acide thio-acétique à 3,2 g 25 (0,014 mole) du dérivé de glycine, et on a concentré le . lendemain la solution résultante sous vide. La trituration avec de l'éther isopropylique a donné un solide presque blanc pesant 2,9 g. La recristallisation dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'hexane a donné 2,5 g (60 %), p.f. 97-l01°C.

30 Analyse de Cl4H17N04S :

Calculée : C, 56,93 ; H, 5,80 ; N, 4,74 ; S, 10,85.

Trouvée : C, 56,68 ,* H, 5,87 ; N, 4,77 ; S, 10,81.

B. N-[N-[2-[(Âcétylthio)mëthyl]-l-oxo-3-phényl- propy1]glycy^-L-arginine 35 On a dissous un échantillon de 0,3 g (1 mmole) du produit de la partie (A) dans 25 ml de tétrahydrofuranne sec, on a ajouté 0,11 g (1,1 mmole) de triéthylamine et on a refroidi * le mélange à 0°C. Puis on a ajouté 0,11 g (1 mmole) de » 22 chloroformiate d'éthyle, et après avoir agité le mélange pendant 40-minutes à 0°, on l'a filtré dans une solution de 0,17 g (1 mmole) d'arginine dans 10 ml d'eau. Après agitation à 25°C pendant une nuit, on a concentré le mélange en un 5 mélange aqueux que l'on a dilué à 30 ml avec de l'eau et que l'on a extrait doucement (pour éviter la formation d'émulsions) à l’acétate d’éthyle. On a fait subir â la couche aqueuse une * chromatographie sur 50 g d'”Avicel” dans de l’eau, en prenant des fractions de 25 ml. On a réuni les deux fractions positives 10 au test de Sakaquchi et on les a filtrées sur un filtre de polycarbonate "nuclepore", et on les a lyophilisées pour obtenir 0,3 g (63 %) d'une poudre blanche, p.f.· 105-120°, qui, après séchage â 95-l00°C pendant 6 heures sous vide, a confirmé à l’analyse la présence de 1,5 mole d'eau.

15 Analyse de C20H29N5°5S . i f 51^0 :

Calculée : C, 50,19 ; H, 6,74 ;N, 14,63 ; S, 6,70. Trouvée : C, 50,38 ; H, 6,56 ; N, 14,95 ; S, 6,50.

C. N-[N-[2-(Mercaptométhyl)-l-oxo-3-phénylpropyl]-glycyl]-L-arginine 20 On a refroidi dans la glace un échantillon de 0,5 g (1,1 mmole) du produit de la partie (B) et on l'a traité par 4 ml d’ammoniaque concentrée sous argon. Après agitation pendant une heure, on a concentré l'échantillon sous vide en un verre.

On a trituré ce verre avec 25 ml d'acétonitrile pendant deux 25 heures, puis on a fait décanter le solvant et on l'a remplacé par du solvant frais et on a agité pendant deux jours et demi sous argon. On a filtré le solide blanc résultant et on l'a lavé avec de 11acétonitrile et de l'éther. Le séchage à 45° sur potasse, anhydride phosphorique et paraffine sous 0,01 mm Hg 30 pendant une nuit a donné 0,25 g (55 %) de solide, p.f. 120- 137° .

Analyse de C^gH^Nj-O^S.l^S H20 :

Calculée : C, 49,02 ; H, 6,97 ; N, 15,88 ; S, 7,27,

Trouvée : C, 48,89 ; K, 6,67 ; N, 16,17 ; S, 7,28, *

Claims

1. Composés de formule : R2 R1-S- (CH2) n—CH-C—A1-A2, 5 0 ainsi que leurs esters alkyliques et leurs sels, dans la formule desquels : R^ est un atome d’hydrogène ou un radical alcanoyle, R0 I2 1Û benzoyle ou -S-(CH2)n'—^—^1 A2 ' O . R2 est un atome d’hydrogène ou un radical alkyle ou phénylalkyle ; n est égal à 0 ou 1 7 et 15 et A2 sont chacun un reste d’a-amino acide ou d’a- imino acide, réunis l’un à l’autre par une liaison peptide.

2. Composés selon la revendication 1, dans lesquels R2 est l’hydrogène.

3. Composés selon la revendication 1, dans lesquels

20 R^ est le radical alcanoyle.

4. Composés selon la revendication 1, dans lesquels Rj est le groupement : R2 -S- (CH2 ) n Cü—C—Αχ ·Α2 _ 25 0

* 5. Composés selon la revendication 1, dans lesquels R2 est l’hydrogène.

6. Composés selon la revendication 1, dans lesquels R2 est le radical alkyle.

7. Composés selon la revendication 1, dans lesquels R2 est un radical phénylalkyle.

8. Composés selon la revendication 1, dans lesquels n est égal â 0.

9. Composés selon la revendication 1, dans lesquels 35. est égal à 1.

10. Composés selon la revendication 1, dans lesquels est un reste d’a-amino acide et A2 est un reste d’a-imino acide. 24 k

11. Composés selon la revendication 10, dans lesquels A2 est un reste de L-proline.

12. Composés selon la revendication 1, dans lesquels et Ά2 sont chacun indépendamment un,reste de proline, de 5 4-hydroxyproline, de 4,4-êthylènedioxyproline, de 4-méthoxy-proline, d'acide 4-thiazolidinecarboxylique, de tryptophane, de glycine, d'alanine, de leucine, d'isoleucine ou de valine.

13. Composé selon la revendication 1, qui est la 1-[N-(acétylthioacétyl)glycyl]-L-proline.

14. Composé selon .la revendication 1, qui est la 1- (N-mercaptoacëtyl)glycyl]-L-proline.

15. Composé selon la revendication 1, qui est l'ester tertio-butylique de la (S)-l-[3-(acëtylthio)-2-méthyl-l-oxo-propyl]-L-prolyl-L-proline.

16. Composé selon la revendication 1, qui est la 1- (S-3-mercapto-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl-L-proline.

17. Composé selon la revendication 1, qui est la N-(acétylthioacétyl)-L-valyl-L-proline.

18. Composé selon la revendication 1, qui est la N-20 (mercaptoacétyl)-L-valyl-L-proline.

19. Composé selon la revendication 1, qui est l'ester éthylique de la l-[S-3-(acétylthio)-2-méthyl-l-oxopropyl]-L-prolylglycine.

20. Composé selon la revendication 1, qui est le sel 25 de lithium de la 1-(S-3-mercapto-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl- glycine.

21. Composé selon la revendication 1, qui est la (S)-1-(3-mercapto-2-mëthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl-L-alanine.

22. Composé selon la revendication 1, qui est l’ester 30 mêthylique de 1'acétylthioacétyl-valyl-tryptophane.

23. Composé selon la revendication 1, qui est le sel de lithium du N-(mercaptoacétyl)-L-valyl-L-tryptophane.

24. Composé selon la revendication 1, qui est l'ester mêthylique de la (S)-[3-(acétylthio)-2-méthyl-l-oxopropyl]-L- 35 prolyl-D-alanine.

25. Composé selon la revendication 1, qui est la (S)-(3-mercapto-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl-D-alanine. if

26. Composé selon la revendication 1, qui est la 1- 25 » k [N-(mercaptoacétyl)-L-alanyl]-L-proline.

27. Composé selon la revendication 1, qui est la ΙΕ N- ( 3-mercapto-l-oxopropy1]-L-alanyl]-L-proline.

28. Composé selon la revendication 1, qui est 5 1’acétylthioacétyl-L-alanyl-L-tryptophane.

29. Composé selon la revendication 1, qui est le N-[N-(mercaptoacétyl)-L-alany^-L-tryptophane.

30. Composé selon la revendication 1, qui est la (S)— 1-(3-acétylthio-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl-B-alanine.

31. Composé selon la revendication 1, qui est la (S)- 1-(3-mercapto-2-méthyl-l-oxopropyl)-L-prolyl-B-alanine. » 32. Composé selon la revendication 1, qui est la (R)- (2-acétylthio-3-phényl)propionyl-L-alanyl-L-proline.

33. Composé selon la revendication 1, qui est la (R)- 15 1-[N-(2-mercapto-l-oxo-2-phénylpropyl)-L-alanyl]-L-proline.

34. Composé selon la revendication 1, qui est la (S)-(2-acétylthio-3-phényl)propionyl-L-alanyl-L-proline.

35. Composé selon la revendication 1, qui est la (S)-1-[N-(2-mercapto-l-oxo-3-phénylpropyl)-L-alany ^-L-proline.

36. Composition permettant de réduire la pression sanguine chez les mammifères, caractérisée en ce que son principe actif est un composé de formule : R9 I 2 R, —S— (CH0 ) —CH—C—A, —A0 , 1. n U l z 25 d ou un ester alkylique ou un sel physiologiquement acceptable de ce composé, dans la formule duquel : R1 est un atome d'hydrogêne ou un radical alcanoyle, benzoyle ou ^

30 I ^ -S-(CH~)—CH—Ç—A. A9; 2 η ο i z O R2 est un atome d’hydrogène ou un radical alkyle ou phênylalkyle ; 35. est égal à 0 ou 1 ; et et A2 sont chacun un reste d’a-amino acide ou d'a-imino acide, réunis l'un ä l'autre par une liaison peptide. ** 37. Procédé de préparation d'un composé de formule : « 2 6 î2 R— S —(CH2)— CH—Ç—Α—Λ2 , 0 5 ou bien d'un ester alkylique ou d'un sel de ce composé, dans ïa formule duquel R.^ est un atome d'hydrogène ou un radical alcanoyle, benzoyle ou R2 I2 -S-<CH21 n-CH-fi-A1-A2 f

10 O R2 est un atome d'hydrogène ou un radical alkyle ou phényl-alkyle ; n est égal à 0 ou 1 ; et et A2 sont chacun un reste d'a-amino acide ou d'a-iroino acide, réunis l'un à l'autre par * une liaison peptide, 15 caractérisé en ce qu'on acyle, soit directement soit en plusieurs temps, un dipeptide de formule A^-A.·,, ou un dérivé d'ester alkylique de ce dipeptide, avec un mercapto-acide de formule : ^ R' S-(CH_ ) -CH-COOH 1. n 20 dans laquelle R^ est un radical alcanoyle ou benzoyle, de façon à former des produits dans lesquels R1 est un radical alcanoyle ou benzoyle, et on soumet lesdits produits à une hydrolyse classique de façon à former des produits dans lesquels R1 est un atome d'hydrogène, et on oxyde lesdits produits dans lesquels 25 est un atome d’hydrogène de façon à former des produits dans lesquels R1 est un groupement de formule : R0 O . I2 II -S-(CH„ ) -CH-C-Αί-A_ . 2 n 12 «»