CH159530A - Verfahren zur Gewinnung einer Adenosinphosphorsäure. - Google Patents

Description

      Terfahren    zur Gewinnung einer     Adenosinphosphorsäure.       Durch     Embden   <B> & </B> Schmidt (Zeitschrift  für physiologische Chemie,<B>181, 1929, 130)</B>  ist bekannt geworden,     dass    die von ihnen im  entdeckte     Adenosinphosphorsäure          (i4uskelaclenylsiLure)    von der schon länger       1)ekannten,    aus Hefe durch Spaltung gewon  nenen     Adenosinphosphorsäure        (Hefeadenyl-          säure)    verschieden ist.  



  Es wurde nun gefunden,     dass    man  durch Behandlung von     Adenosintriphosphor-          #,äure    aus Hefe     (Adenylpyrephosphorsäure)     mit     hydrolysierenden    Mitteln bei gewöhn  licher oder schwach erhöhter Temperatur  und Behandeln der gewonnenen Rohextrakte  mit Ballaststoffe abscheidenden Mitteln, be  ziehungsweise     Fällungsmitteln    zu einer       Adenosinphosphorsäure    gelangt, welche von  der     Hefeadenylsäure    verschieden, dagegen  mit der     MuskeladenyIsäure    identisch ist.  



  Als Ausgangsstoff kann die von     Lohmann     (Naturwissenschaften,<B>192-8, 298)</B> beschrie  bene, aus Hefe gewonnene Adenosintriphos-         phorsäure    Verwendung finden. Man kann  auch     Adenosintriphosphorsäure    enthaltende  Präparate verwenden, die man durch Behan  deln von aus Hefe bei niederer Temperatur  gewonnenen     Plasmolysaten    mit Wasser, Ent  fernen von ungelösten Teilen, Behandeln der  Lösung mit Absorptionsmitteln und Fällung  der nach Entfernung der     Absorbate    verblei  benden Lösung mit organischen Lösungs  mitteln erhalten kann. Ebenso lassen sieh  aus Hefe erhaltene, diese Säure enthaltende  Rohextrakte verwenden.

   Man verfährt bei  der Verwendung von aus Hefe gewonnenen  Rohpräparaten zum Beispiel so,     dass    man  zuerst durch Extraktion von Hefe, zum Bei  spiel mit     Triehloressigsäure,    vor oder nach  erfolgter     Plasmolyse,    in bekannter Weise  einen die     Adenosintriphosphorsäure    enthal  tenden Rohextrakt herstellt.  



  Das Verfahren wird zweckmässig so     aus-          ,geführt,        dass    man     Adenosintriphosphorsäure          I     oder diese Säure enthaltende Rohpräparate      in Wasser löst und unter Zusatz von     Uydro-          lysierend    wirkenden Mitteln, wie     Barium-          hydroxyd    oder Natronlauge, oder auch mit  Mineralsäuren, vorzugsweise jedoch bei  alkalischer Reaktion, einer Hydrolyse unter  wirft.

   Hierbei ist es zweckmässig, dem Cha  rakter der bekanntlich weiter     aufspaltbaren          Adenylsäure    durch nicht zu heftige Reak  tionsbedingungen Rechnung zu tragen. Aus  diesem Grunde wählt man zum Beispiel auch  die Temperaturbedingungen vorteilhaft, so,       dass!!    man die Hydrolyse bei gewöhnlicher  oder schwach erhöhter Temperatur, also vor  zugsweise bei Temperaturen von zirka<B>110'</B>  bis zirka<B>50' C</B> ausführt.

   Nach erfolgter  Hydrolyse kann die Lösung von entstande  nen     Abscheidungen    getrennt und aus dem  Filtrat die     Adenosinpliosphorsäure    durch  Zugabe eines     Fällungsmittels    und Abtren  nen der     Adenosinphosphorsäure    von diesem       Fällungsmittel    isoliert oder durch Abtren  nung der Ballaststoffe gereinigt werden.  



  Gegenstand der vorliegenden Erfindung  ist ein Verfahren zur Gewinnung einer       Adenosinphosphorsäure,    welches dadurch ge  kennzeichnet ist,     dass    man aus Hefe gewon  nene     Adenosintriphosphorsäure    mit     hydroly-          sierenden    Mitteln behandelt und aus der  filtrierten Lösung die     Adenosinphosphorsäure     isoliert.  



  Das in der Therapie bei Störungen des  Blutkreislaufes verwendbare Verfahrenspro  dukt ist verschieden von der bisher als aus  Hefe gewinnbar bekannten     Adenosinphos-          phorsä,ure        (llefeadenylsäure),    dagegen iden  tisch mit der bisher nur aus Muskeln darstell  baren     Adenosinphosphorsäure        (Muskeladenyl-          Säure).     



  <I>Beispiele:</I>  <B>1.</B>     Adenosintriphosphorsäure    wird in Was  ser gelöst, mit     Bariumhydroxyd        phenol-          pUtaleinalkalisch.    gemacht und das Ganze  im Brutschrank über Nacht stehen gelassen.  Dann wird von der     Abscheidung        abgeschleu-          dert    und die klare Lösung mit Bleiacetat  und     Arnmoniak    versetzt. Der entstandene  Niederschlag wird abgetrennt, ausgewaschen  und in wässeriger Suspension mit Schwefel-         wasserstoff    zerlegt.

   Das Filtrat vom     Blei-          sulfid    wird auf ein kleines Volumen ein  geengt und mit Aceton gefällt. Durch Ste  hen in der Kälte wird die     Abscheidung    der       Adenosinphosphorsäure    vervollständigt. Das  erhaltene Produkt ist unmittelbar verwend  bar, kann gegebenenfalls aber auch weiter  gereinigt werden.  



  <B><U>9.</U></B> An Stelle von     Adenosintriphosphor-          säure    wird ein diese Säure enthaltendes  Produkt dem in Beispiel<B>1</B> beschriebenen  Verfahren unterworfen. Dieses Produkt  kann auf folgende Weise erhalten werden:         :),   <B>kg</B>     Presshefe    werden fein zerrieben und  durch Zusatz von Essigester bei niederer  Temperatur (nicht über<B>15</B>     ')        plasmolysiert.     Der erhaltene dünne Brei wird mit<B>3</B> Liter  destilliertem Wasser bei Zimmertemperatur  eine halbe Stunde verrührt und durch     Ab-          sehleudern    die klare Lösung abgetrennt.

   In  die Lösung werden<B>25</B>     gr        Bentonit    ein  gerührt und von der Fällung     abgeschleudert.     Nunmehr wird die klare Lösung neutrali  siert, im Vakuum auf<B>200</B>     ems    eingeengt  und -unter Rühren in<B>1200</B> cm' reinem  Methylalkohol eingetragen. Die erhaltene       Fällung    wird abgesaugt, mit Methylalkohol  und Äther gewaschen und im Vakuum ge  trocknet.  



  <B>3. 2 kg</B> Brauereihefe werden mit Essig       ester        plasmolysiert.    Das     Plasmolysat    wird  in<B>3</B> Liter kochendes Wasser eingetragen,  die Mischung, durch Einleiten von Dampf  zum Sieden gebracht und rasch abgekühlt.  Die durch     Abschleudern    erhaltene klare Lösung  wird mit Natronlauge deutlich     phenol-          phthaleinalkaliscb.    gemacht und über Nacht  aus<B>50 '</B>erhitzt. Dann wird filtriert. schwach  angesäuert,     Kupfersuliatlösung    zugesetzt und  dann mit einer     Aufschlämmung    von     Cal-          eiumhydroxyd    stark alkalisch gemacht.

    Hierbei erhält man eine Fällung, die die  mit der     #,luskeladenylsäure    identische     Ade-          nosinphosphorsäure    enthält. Die     Kupferkalk-          fällung    wird in bekannter Weise zerlegt und  die erhaltene<B>'</B> Lösung auf     Adenosinphosphor-          säure    weiter verarbeitet.      4. 2<B>kg</B> Hefe werden     plasmolysiert    -und  mit     i3    Liter 5%iger     Trichloressigsäure    ver  rührt.

   Die nach dem     Abschleudern    erhaltene  klare Lösung wird mit Salzsäure auf einen  Gehalt von     l%'    eingestellt und das Ganze  über Nacht in einem kühlen Raum bei etwa  <B>10</B> bis     1,5   <B>' C</B> stehen     --elassen.    Nach dem Fil  trieren     -#vird    die Lösung nach dem Verfahren  von     Druiy    und     Szent-Györgyi        Journ.        of          Physiol..   <B>68,</B> Seite<B>9-16)</B> durch Fällen mit  Bleiacetat, Zerlegen des erhaltenen Nieder  schlages mit Schwefelsäure, Fällung der so  erhaltenen Lösung mit Kupfersulfat,

       Zer-          le-en    des Niederschlages mit     Scliwefelwasser-          stoff    und weitere Fällung mit Zinkacetat       und    Zerlegung des gefällten Zinksalzes mit       Sehm-efelwasserstoff    verarbeitet und als End  produkt die reine kristallisierte     Adenosin-          phosphorsäure    erhalten.

Claims (1)

1. PATENTANSPRUCH: Verfahren zur Gewinnung einer Ade- jiosinphosphorsäure, dadurch gekennzeich net. dass man aus Hefe gewonnene Adenosin- triphosphorsäure mit hydrolysierenden Mit teln behandelt und aus der filtrierten Lösung die Adenosinphosphorsäure isoliert.

   Das in der Therapie bei Störungen des Blutkreislaufes verwendbare Verfahrenspro- dukt ist verschieden von der bisher -als aus Hefe gewinnbar bekannten Adenosinphos- phorsä.1-ire (Hefeadenylsäure), dagegen iden- fisch mit der bisher nur aus Muskeln darstell- baren Adenosinphosphorsäure (Muskeladenyl- sä,ure). UNTERANSPRüCHE: <B>1.</B> Verfahren nach.

   Patentanspruch, dadurch gekennzeichnet, dass man ein aus Hefe gewonnenes, Adenosintriphospliorsä-ure ent haltendes Rohprodukt verwendet. '?. Verfahren nach Patentanspruch, dadurch gekennzeichnet, dass man die Behandlung mit hydrolysierenden Mitteln bei gewöhn licher Temperatur ausführt. <B>3.</B> Verfahren nach. Patentanspruch, dadurch gekennzeichnet, dass man die. Behandlung mit hydrolysierenden Mitteln bei schwach erhöhter Temperatur ausführt. 4.

   Verfahren nach Patentansprucli, dadurch gekennzeichnet, dass man die Hydrolyse bei alkalischer Reaktion durchführt. <B>5.</B> Verfahren nach Patentansprueh, dadurch gekennzeichnet, dass man die erhaltene Adenosinphosphorsäure aus der Lösung durch Zugabe eines Fä.llungsmittels und aus der entstandenen Fällung durch<B>Ab-</B> trennen von dem Fällungsmittel isoliert.

   <B>6.</B> Verfahren nach Patentanspruch und Un teranspruch<B>5,</B> dadu-rcli gekennzeichnet, dass man Schwermetallsalze als Födlungs. mittel verwendet.