MXPA06014236A

MXPA06014236A - Inhibicion de la fosfodiesterasa 10 como tratamiento para las afecciones relacionadas con el sindrome metabolico y con la obesidad.

Info

Publication number: MXPA06014236A
Application number: MXPA06014236A
Authority: MX
Inventors: Shawn Clive Black; Earl Michael Gibbs
Original assignee: Pfizer Prod Inc
Priority date: 2004-06-07
Filing date: 2005-05-30
Publication date: 2007-02-14
Also published as: JP2008501776A; WO2005120514A1; EP1755611A1; TW200612957A; CA2568929A1; BRPI0511854A; US20090162286A1

Abstract

La presente invencion proporciona procedimientos para reducir el peso corporal y/o la grasa corporal en animales, por ejemplo, en el tratamiento de pacientes con sobrepeso u obesos (por ejemplo, seres humanos o animales de compania), o como medio para producir carne mas magra en animales de reserva de alimento (por ejemplo, ganado vacuno, pollos, cerdos), procedimientos para tratar diabetes no insulinodependiente (DMNID), sindrome metabolico o intolerancia a la glucosa en pacientes que lo necesitan mediante la administracion de un inhibidor de PDE10 (solo o en combinacion con otro agente terapeutico), kits para los usos terapeuticos anteriormente identificados y procedimientos de identificacion de inhibidores de PDE10 para los usos terapeuticos anteriormente descritos.

Description

INHIBICIÓN DE LA FOSFOD1ESTERASA 10 COMO TRATAMIENTO PARA LAS AFECCIONES RELACIONADAS CON EL SÍNDROME METABOLICO Y CON LA OBESIDAD CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona procedimientos para disminuir el peso y/o la grasa corporal en el tratamiento, por ejemplo, de los pacientes con sobrepeso u obesos, y procedimientos para tratar el síndrome metabólico, la diabetes no dependiente de la insulina, o la intolerancia a la glucosa, mediante la administración de un inhibidor de la fosfodiesterasa 10 (PDE10).

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los individuos diagnosticados como obesos o con sobrepeso padecen un riesgo aumentado de desarrollar otras afecciones relacionadas con la salud como cardiopatía coronaria, ictus, hipertensión, diabetes mellitus de tipo 2, dislipidemia, apnea del sueño, osteoartritis, enfermedad de la vesícula biliar, depresión y ciertas formas de cáncer (por ejemplo, endométrico, mamario, prostético y colóníco). Las consecuencias negativas para la salud de la obesidad hacen que constituya la segunda causa principal de muerte evitable en los Estados Unidos y un asunto importante de salud pública que trasmite un efecto psicosocial y económico significativo a la sociedad (véase, por ejemplo, MacGinnis y Foege, JAMA 270:2207-2212, 1993). La obesidad se reconoce ahora como una enfermedad crónica que requiere tratamiento para reducir los riesgos sanitarios asociados. Aunque la pérdida de peso en sí misma constituye un resultado importante del tratamiento, uno de los objetivos principales del tratamiento de la obesidad es mejorar los índices cardiovasculares y metabólicos para reducir la mortalidad y morbilidad relacionadas con la obesidad. Se ha mostrado que una pérdida del 5-10 % del peso corporal puede mejorar sustancialmente los índices metabólicos y cardiovasculares, tales como la glucosa y la presión sanguíneas, y las concentraciones de lípidos. Por tanto, se cree que una reducción del 5-10 % en el peso corporal puede reducir la mortalidad y la morbilidad. Las fosfodiesterasas nucleotídicas cíclicas (PDE) catalizan la hidrólisis de los nucleótidos cíclicos, tales como los segundos mensajeros cAMP (adenosina 3'5'-monofosfato cíclica) y cGMP (guanina 3'5'-monofosfato cíclica). De este modo, las PDE ejercen un papel regulador fundamental en una amplia variedad de rutas de transducción de señal(Beavo, Physiol. Rev. 75:725-748, 1995). Por ejemplo, las PDEs median en procesos implicados en la visión (Me Laughlin et al., Nat.Genet, 4:130-134, 1993), olfato (Yan et al., proc. Nati. Acad. Sci, USA 92:9677-81 , 1995), agregación plaquetaría (Dickinson et al. Biochem. J. 323:371-377, 1997), síntesis de la aldosterona (MacFarland et al., J. Biol.Chem. 266:136-142,1991 ), secreción de la insulina (Zhao et al, J. Clin. Invest. 102:869-873, 1998), la activación de las células T (Li et al., Science 283:848-51 , 1999), y la relajación del músculo liso (Boolell et al., Int. J. Impot. Res. 8:47-52, 1996; Ballard et al., J. Urol. 159:2164-171 ,1998). Las PDE forman una superfamilia de enzimas que están subdividídas en 11 familias génicas principales (Beavo, Physiol. Rev. 75: 725-748, 1995; Beavo et al,. Mol. Pharmacol. , 46:399-405, 1994; Soderiing et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 95:8991—8996,1998: Fisher et al., Biochem. Biophís. Res. Commun. 246: 570-577, 1998; Hayashi et al., Bíochem. Biophís. Res. Commun. 250: 751-756, 1998; Sideriing et al., J. Biol. Chem, 273 15553-58, 1998; Fisher et al., J. Biol Chem, 273: 15559-15564, 1998; Soderiing et al., Proc. Nati. Acad., Sci.USA 96: 7071-7076, 1999; y Fawcett et al., Proc. Nati. Acad. Sci .USA 97: 3702-3707, 2000). Cada familia génica de PDE codifica una fosfodiesterasa que se distingue funcionalmente por características y perfiles farmacológicos únicos. Además, cada familia muestra distintos patrones de expresión tisulares, celulares y subcelulares (Beavo et al., Mol. Pharmacol, 46:399-405, 1994; Soderiing et al., Proc.. Nati. Acad. Sci , USA 95:8991-8996, 1998; Fisher et al., Biochem. Biophys. Res,. Commun.246: 570-577, 1998; Hayashi et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 250: 751-756,1998; Soderiing et al., J. Biol. Chem. 273:15553-15558, 1998; Físher et al,. J. Biol. Chem.273:15559-15564, 1998; Soderiing et al, Proc. Nati Acad. Sci USA 96:7071-7076, 1999; Fawcett et al.., Proc. Nati, Acad. Sci , USA 97:3702-3707, 2000; Boolell et al., Int. J.

Impot. Res. 8:47-52, 1996; Ballard et al., J. Urol. 159:2164-2171 , 1998; Houslay, Semin. Cell Dev. Biol 9:161-167, 1998; y Torphy et al., Pulm. Pharmacol. Ther. 12: 131-135, 1999). Por tanto, administrando un compuesto que regula selectivamente la actividad de una familia o subfamilia de las enzimas PDE, es posible regular las vías de transducción de señales de cAMP y/o de cGMP de forma histo o celular específica. PDE10 se identifica como una PDE única en base a la información de secuencia de aminoácidos y actividad enzimática distinta. El rastreo de la homología de las bases de datos EST reveló PDE10, a la que a veces se hacía alusión como PDE10A, como el primer y único miembro hasta ahora de su familia PDE10 de fosfodiesterasas (Fujishige et al., J. Biol. Chem. 274:18438-18445,1999; Loughney et al., Gene 234:109-117,1999). Los homólogos humano, de rata y de ratón se han clonado y se han identificado variantes N-terminales de corte y empalme para los genes tanto humanos como de la rata (Kotera et al., Biochem. Biophys. Res. Comm 261 : 551 -557, 1999; Fujíshige et al., Eur. J. Biochem. 266:1118-1127, 1999; Soderiing et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 96: 7071-7076,1999, y Lanfear y Robas, Publicación de Solicitud de Patente de EE. UU n° 2004/0018542); existe un alto grado de homología entre las especies. PDE10 hidrolíza cAMP y cGMP proporcionando AMP y GMP, respectivamente. Los datos actuales sobre la expresión de PDE10 indican que PDE10 se localiza únicamente en los mamíferos respecto a otras familias de PDE. El ARN mensajero para PDE10 está intensamente expresado en los testículos y en el cerebro (Lanfear y Robas, Publicación de Solicitud de Patente de EE. UU n° 2004 /0018542; Fujishige et al., Eur. J. Biochem. 266: 1118-1127,1999; Soderiing et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 96:7071-7076 , 1999; Loughney et al,. Gene 234:109-117, 1999).Autorradiografías de cortes cerebrales murinos marcados con PDE10 antisentido muestran una señal de hibridación altamente específica. Se encuentra una marcación denso, hasta ahora, en tres áreas: cuerpo estriado dorsal (caudado y putamen), cuerpo estriado ventral (núcleo accumbens) y tubérculo olfatorio. En el interior del cuerpo estriado y del núcleo accumbens el ARNm PDE10 se expresa intensamente en las neuronas medianas espinosas del estriado, que representan aproximadamente el 95 % de todas las neuronas que se encuentran en estas estructuras. En otras áreas se aprecia una densidad más baja de mareaje, incluyendo la circunvolución dentada, las capas CA del hipocampo, y en la capa celular granular del cerebelo. Existe una correspondencia muy buena entre las áreas de localización del ARNm de PDE10 y las que clásicamente se asocian con una alta expresión de los receptores de dopamina. En las autorradiografías de emulsión, se encuentra una densa incorporación de granulos de plata a través del cuerpo estriado, núcleo accumbens, y tubérculo olfatorio, y se aprecia que recubren la gran mayoría de los cuerpos celulares neuronales en estas tres áreas. Además, áreas que expresan niveles bajos pero medibles de receptores de dopamina demuestran también una deposición granular, en correspondencia aproximada con su relativa densidad de los receptores DA.

Estas áreas incluyen. Principalmente, los cortezas prefrontales sulcal y medial, así como el la circunvolución dentada y las capas CA del hipocampo (Seeger et al., Brain Res. 985:113-126 , 2003). De acuerdo con los altos niveles del ARNm, se demuestra un alto nivel de la proteína PDER10 en el cuerpo estriado (caudado y putamen), núcleo accumbens, y tubérculo olfatorio. La proteína PDE10 se observa en los cuerpos celulares neuronales y a través del neurópilo. Además, un alto nivel de la proteína PDE10, pero no del ARNm de PDE10, se observa en las regiones cerebrales a las que las neuronas medianas espinosas del medio del cuerpo estriado se proyectan, incluyendo la cápsula interna, globo pálido, núcleo entopeduncular, y la sustancia nigra. Este alto nivel de proteína PDE10 podría provenir de los axones y terminaciones de las neuronas medianas espinosas del cuerpo estriado (Seeger et al, Brain Res. 985:113-126, 2003).

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona procedimientos para disminuir el peso y/o la grasa corporal, y procedimientos para tratar el síndrome metabólico, la diabetes no insulino dependiente (NIDDM), o la intolerancia a la glucosa, medíante la administración de un inhibidor de la PDE10 (solo o en combinación con otro agente terapéutico), así como kíts relacionados, y procedimientos para rastrear los inhibidores de PDE10 para los usos terapéuticos descritos anteriormente.

En una forma de realización preferida, la invención proporciona un procedimiento para tratar a un individuo con objeto de reducir el peso o la grasa corporal, o para tratar la NIDDM, el síndrome metabólico, o la intolerancia a la glucosa, que comprende la administración a un individuo que lo necesite de una cantidad terapéuticamente efectiva de un antagonista de la fosfodiesterasa 10 (PDE 10). En formas de realización preferidas, el individuo es un ser humano, tiene sobrepeso o está obeso, el antagonista de PDE 10 es un antagonista PDE10 selectivo, por ejemplo, papaverina o 6,7-dimetoxi-4-[8-(morfolina-4-sulfoníl)-3,4-dihidro-1 H-isoquinolin-2-il]-quinazolina, y/o el antagonista se administra oralmente. En otra forma de realización preferida, el procedimiento comprende además la administración de un segundo agente terapéutico al individuo, preferentemente un agente anti-obesidad, por ejemplo, rimonabant, orlistat, sibutramina, bromocriptina, efedrina, leptina, pseudoefedrina, o el péptido YY3-36 o sus análogos. Un segundo aspecto de la invención es un procedimiento para identificar un agente que puede utilizarse para reducir el peso o la grasa corporal, o tratar NIDDM, el síndrome metabólico, o la intolerancia a la glucosa, que comprende (i) la administración de un candidato a antagonista de PDE10 candidato a un individuo de prueba, y (¡i) la determinación de si el antagonista de PDE10 es efectivo para reducir la grasa o el peso corporal, o para tratar NIDDM, el síndrome metabólico o la intolerancia a la glucosa, en el individuo de prueba. Como un aspecto relacionado, el procedimiento puede comprender además el ensayo del antagonista de PED10 candidato en una prueba ¡n vitro respecto a su actividad antagonista de PDE10 antes de administrar el antagonista de PDE10 candidato al individuo de prueba. En otras formas de realización preferidas, el individuo de prueba es un animal de laboratorio. También caracterizado como un aspecto de la invención es un kit que comprende un antagonista de PDE10 e instrucciones para administrarlo a un individuo para reducir la grasa o el peso corporal, o para tratar NIDDM, el síndrome metabólico, o la intolerancia a la glucosa en el individuo. Preferentemente, el antagonista de PDE10 es un antagonista selectivo de PDE10, por ejemplo, papaverina o 6,7-dimetoxi-4.-[8-(morfolina -4-sulfonil)-3,4-dihidro-1 H-ísoquinolin-2-il]-quinazolina. En otras formas preferidas, el kit puede comprender además un segundo agente terapéutico, más preferentemente, un agente anti-obesidad, por ejemplo, rimonabant .orlistat, síbutramina, bromocriptina, efedrina, leptina, pseudoefedrina , o el péptido YY3-36, o análogos de los mismos. Los expertos en la técnica comprenderán completamente los términos utilizados en la presente memoria en la descripción y en las reivindicaciones que se adjuntan para describir la presente invención. Sin embargo, si no se dan a conocer de otro modo en la presente memoria, los términos siguientes son tal como se describen inmediatamente a continuación.

Definiciones Por "inhibidor de PDE10" o "antagonista de PDE10", se quiere significar un agente que reduce o atenúa la actividad biológica del polipéptido PDE10 en una célula. Dichos agentes pueden incluir proteínas, tales como anticuerpos anti-PDE10, ácidos nucleicos, por ejemplo, ácidos nucleicos antisentido de PDE10 o de interferencia del ARN (ARNi), aminoácidos, péptidos, hidratos de carbono, moléculas pequeñas (orgánicas o inorgánicas), o cualquier otro compuesto o composición que disminuya la actividad de un polipéptído PDE10, reduciendo de modo efectivo la cantidad de PDE10 presente en una célula, o disminuyendo la actividad enzimática del polipéptido PDE10. Compuestos que son inhibidores de PDE10 incluyen todos los solvatos, hidratos, sales farmacéuticamente aceptables, tautómeros, estereoisómeros, y profármacos de los compuestos. Preferentemente, un inhibidor de PDE10 de molécula pequeña que se utiliza en la presente invención, tiene un valor menor de 10µM, más preferentemente, menor que 1 µ M, e incluso, más preferentemente, menor que 0.1 µM. Un oligonucleótido antisentido dirigido al gen o al ARNm de PDE10 par inhibir su expresión, se obtiene según técnicas estándar (véase, por ejemplo, Agrawal et al. Methods in Molecular Biology: Protocols for Oligonucleotides and Analogs, Vol 20, 1993). De modo similar, una molécula de interferencia de ARN que funciona para reducir la producción de la enzima PDE10 en una célula puede ser producida según las técnicas estándar conocidas por los expertos en la técnica (véase, por ejemplo, Hannon, Nature 418: 244-251 ,2002; Shi, Trends in Genetics 19:9-12, 2003; Shuey et al., Drug Discovery Today 7: 1040-1046, 2002). Ejemplos de inhibidores de PDE10 incluyen papaverina, tal como se describe en la Publicación de Solicitud de Patente de EE. UU. n° 2003/0032579, así como los compuestos descritos en la. Publicación de Solicitud de Patente de EE. UU n° 60/466.369, clasificada el 18 de febrero de 2004, titulada'Tetrahydroisiquinolinyl Derívatives of Quinasolíne and Isoquiline" que se describen también además en la presente memoria. Cualquier antagonista (inhibidor) de PDE10 utilizado en la presente invención es preferentemente también selectivo respecto a algunas o a todas las otras PDE, preferentemente frente a PDE1A, PDE1 B, PDE1 C, PDE2, PDE3A, PDE3B, PDE4A, PDE4B, PDE4C, PDE4D, PDE5, PDE6, PDE7A, PDE7B, PDE8A, PDE8B, PDE9, y/o PDE11. Por un inhibidor "selectivo" de PDE10, cuando el agente inhibe la actividad de PDE10, se entiende un agente que reduce la actividad de PDE10 con un K¡ de por lo menos 10 veces menos, y preferentemente, por lo menos 100 veces, por lo menos, que la Ki para la inhibición de una o más PDEs distintas. Preferentemente, dichos agentes se combinan con un vehículo o transportador de suministro farmacéuticamente aceptable. Por un inhibidor "selectivo" de PDE10, cuando el agente reduce la cantidad de PDE10 en una célula, se entiende un agente que reduce el polipéptido PDE10 en una célula, pero no uno o más de las otras PDE, tal como se determina por la PCR cuantitativa.

"Actividad de PDE10 disminuida" significa una disminución manipulada en la actividad polipeptídica total de la enzima PDE10, como resultado de interrupción genética o manipulación genética de la función génica de PDE10, que provoca una reducción en el nivel del polipéptido funcional PDE10 en una célula, o como resultado de la administración de un agente farmacológico que inhibe la actividad de PDE10. La frase "farmacéuticamente aceptable" indica que el transportador, vehículo, diluyente, excipiente o excipientes designados, y/o sal es generalmente química y/o físicamente compatible con los otros ingredientes que comprenden la formulación, y compatibles fisiológicamente con su receptor. El termino "profármaco" se refiere a un compuesto que es un precursor de un fármaco, el cual, después de la administración, libera el medicamento in vivo, mediante un proceso químico o fisiológico (por ejemplo, después de haberse llevado a un pH fisiológico o mediante actividad enzimática). Un debate sobre la síntesis y utilización de profármacos se proporciona por Higuchi y Stella, "Prodrugs as Novel Delivery Systems", Vol 14 de la Serie de Símposium ACS, y "Bioreversible Carriers in Drug Desígn", ed. Edgard B. Roche, American Pharmaceutícal Association and Pergamon Press, 1987. Los términos "sales" y "sales farmacéuticamente aceptables", se refieren a sales orgánicas e inorgánicas de un compuesto, de un estereoisómero del compuesto, o de un profármaco del compuesto.

"Sobrepeso" y las afecciones más graves de "obesidad", en una persona adulta de 18 años o más, representan tener un peso superior al peso corporal ideal (más específicamente, una grasa superior a la corporal ideal), definiéndose generalmente por el índice de masa corporal (BMI), que se correlaciona con la grasa corporal total y el riesgo relativo de sufrir una muerte prematura o discapacidad debido a una enfermedad, como consecuencia del sobrepeso o de la afección obesa. El riesgo para la salud aumenta con el aumento en la grasa corporal excesiva. El BMI se calcula por el peso en kilogramos dividido por la altura en metros cuadrados (kg/m2) o, alternativamente, por el peso en libras, multiplicado por 703, dividido por la altura en pulgadas cuadradas (Ibs x 703/pulgadas 2). "Sobrepeso" representa típicamente un BMI de entre 25.0 y 29.9. Obesidad" se define típicamente como un BMI de 30 o más (véase, por ejemplo, National Heart, Lung and Blood Instítute, Clinical Guidelines on the Identification , Evaluation, and Treatment of Overweight and Obesity ¡n Adults, The Evidence Report, Washington, DC: U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publicatíon n° 98-4083,1998). En individuos fuertemente musculados, la correlación entre BMI, grasa corporal y riesgo de enfermedad, es más débil que en otros individuos. Por tanto, la evaluación de si dichos individuos fuertemente musculados tienen de hecho un sobrepeso o son obesos, puede llevarse a cabo de forma más precisa mediante otras mediciones, como la medición directa de la grasa corporal total o la evaluación de la relación cintura-a-cadera.

"Síndrome metabólico", tal como se define en la presente memoria, y según el Cuadro III del Tratamiento para Adultos (ATP III; National Institutes of Health: Third Report of the National Cholesterol Education Program Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III), Executive Summary, Bethesda, MD, National Institutes of Health, National Heart, Lung and Blood Institute. 2001 (publicación del NIH n° 01-3670), se presenta cuando una persona presenta tres o más de los síntomas siguientes: 1. Obesidad abdominal: circunferencia de la cintura > 102 cm en los hombres y > 88cm en las mujeres; 2. Hipertrígliceridemia: > 150 mg/dl (1.695 mmol/l); 3. Bajo colesterol HDL:<40 mg/dl (1.036 mmol/l) en hombres y < 50 mg/dl (1.295 mmol/l ) en mujeres; 4. Presión sanguínea alta: > 130/85 mmHg >17.33/11.33KPa) 5. glucosa alta en ayunas:> 110 mg/dl (>6.1 mmol/l); o según los criterios de la Organización Mundial de la Salud (Alberti and Zimmet, Diabet. Med. 15:539-53,1998), cuando una persona padece diabetes, alteración en la tolerancia a la glucosa, alteración de los niveles de glucosa en ayunas, o resistencia a la insulina, más dos o más de las siguientes anomalías: 1. Presión sanguínea alta: > 160/90 mmHg >21.33/12.00 KPa; 2. Hiperlipidemia: concentración de triglicéridos = 150 mg/dl (1.695 mmol/l) y/o colesterol HDL < 35 mg/dl (0.9 mmol/l) en los hombres y < 39 mg/dl (1.0 mmol/l) en las mujeres; 3. Obesidad central: relación cintura/cadera > 0.90 para los hombres y > 0.85 para las mujeres y/o un BMI > 30 kg/m2; 4. mícroalbuminuria: tasa de excreción de albúmina urinaria >20 µg/min o una relación albúmina/creatinina > 20 mg/kg. "Terapéuticamente efectivo" significa la disminución, respecto al control apropiado, en la grasa corporal, peso corporal, y/o la mejora de uno o más de los síntomas de NIDDM, síndrome metabólico o intolerancia a la glucosa. Otras características y ventajas de la invención se harán incluso evidentes a partir de la descripción detallada siguiente y de las reivindicaciones. Aunque la invención se describe en relación con formas de realización específicas, se entenderá que otros cambios y modificaciones que pueden llevarse a cabo constituyen también parte de la presente invención, y se encuentran asimismo dentro del alcance de las reivindicaciones que se adjuntan. Esta solicitud tiene el propósito de abarcar cualesquiera equivalentes, variaciones, usos o adaptaciones de la invención, que sigan, en general, los principios de la misma, incluyendo las desviaciones de la presente exposición que se encuentran dentro de la práctica conocida o habitual en la técnica, y que sean capaces de establecerse sin experimentación excesiva. Todas las publicaciones, incluyendo las solicitudes de patente publicadas y las patentes expedidas, que se mencionan en la presente memoria, se incorporan completamente como referencia.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Fig 1 muestra los cambios del peso corporal a lo largo del tiempo, en gramos para los cuatro grupos experimentales: ratones de tipo salvaje (WT) con una dieta de pienso (WT-Chow); ratones con genes inactivados de PDE10 (KO) con una dieta de pienso (KO-Chow); ratones de tipo salvaje con una dieta alta en grasas (WT-HFD); y ratones con genes inactivados de PDE10 con una dieta alta en grasas (KO-HFD).Los ratones WT-HFD mostraron un aumento en el peso corporal cuando se compararon con los ratones WT-Chow. Sin embargo, los ratones KO-HFD no experimentaron un aumento similar cuando se compararon con los ratones KO-Chow. La Fig 2 muestra los mismos cambios de peso corporal a lo largo del tiempo, pero expresa el peso corporal como porcentaje del valor basal. La Fig 3 es un gráfico de barras que muestra la composición corporal para los cuatro grupos experimentales después de las dietas de pienso y de grasa abundante. El aumento del peso corporal en los ratones WT-HFD cuando se comparó con los otros grupos, tal como se muestra en las Figs 1 y 2, se correspondió con un aumento en la masa de grasa y en el porcentaje de la grasa corporal.

La Fig 4 es un gráfico lineal que detalla el consumo de la comida a lo largo del tiempo, normalizado para el peso corporal, para los cuatro grupos experimentales. A pesar de la reducida ganancia de peso corporal de los ratones KO-HFD cuando se compararon con los ratones WT-HFD, tal como se muestra en la Fig 1 y en la Fig 2, los ratones KO-HFD consumieron una cantidad igual o ligeramente superior, de la dieta de grasa abundante (HFD), cuando se compararon con los ratones WT. La Figura 5 es un gráfico de barras que muestra niveles de actividad. Se observó una tendencia hacia una actividad disminuida en los ratones PDE10 KO, cuando se compararon con los ratones WT independientes de la dieta. La Figura 6 da a conocer el consumo de oxígeno (V02) y muestra un aumento en el VO2 total en los ratones KO-HFD cuando se compararon con los otros grupos. La Fig 7 muestra que el V02 en reposo (V02) aumenta también en los ratones KO-HFD cuando se compararon con los otros tres grupos experimentales. Las Figuras 8A y 8B son gráficos lineales que muestran los resultados de un ensayo oral de la tolerancia a la glucosa en los cuatro grupos experimentales, utilizando una dieta de pienso (Fig 8A) y una dieta alta en grasa (HFD:Fig 8B). Los ratones con genes ¡nactivados (KO) de PDE10 alimentados con HFD, mostraron una mejoría a la tolerancia a la glucosa cuando se compararon con su tipo homólogo de tipo salvaje (WT).

La Fig 9A es un gráfico de barras que muestra el efecto sobre la ingesta del alimento, a lo largo del tiempo, del Compuesto NA en ratas CD en ayunas, utilizando el Modelo de Obesidad por Ingesta de Alimento-Ensayo de Alimentación inducida por el Ayuno. El Compuesto HA fue eficaz a 10 mg/kg. Se utilizó Rimonabant (Acomplia™) como un comparador a 3 mg/kg. La Fig 9B es un gráfico de barras que muestra el efecto en la ingesta del alimento a lo largo del tiempo del Compuesto I NA en ratas CD en ayunas, utilizando el Modelo de Obesidad por Ingesta del Alimento - Ensayo de Alimentación inducida por el Ayuno. El Compuesto I NA fue eficaz a 10 mg/kg. Se utiliza Rimonabant (Acomplia™)como un comparador a 3 mg/kg. La Fíg 9C es un gráfico de barras que compara la eficacia del compuesto HA y del Compuesto IIIA en ratas CD en ayunas, utilizando el Modelo de Obesidad por Ingesta de Alimentación -Ensayo de Alimentación inducida por el Ayuno a 10 mg/kg y 32 mg/kg. El Rimonabant (Acomplia) ™ se utiliza como un comparador a 3 mg/kg. La Fig 10 es un gráfico lineal que muestra cambios en el peso corporal en ratones obesos inducidos por la dieta (DIO) tratados con el Compuesto IVA. Los ratones DIO se trataron con el Compuesto IVA a dosis de 15 mg/kg administrada dos veces al día por vía oral. A los ratones control se les administró el vehículo, metilcelulosa al 0.5 %. La Fíg 11 es un gráfico lineal que muestra cambios en la ingesta alimentaria a lo largo del tiempo en ratones obesos inducidos por la dieta (DIO) tratados con el Compuesto IVA Los ratones DIO se trataron con el Compuesto IVA a una dosis de 15 mg/kg administrada dos veces al día por vía oral. A los ratones de control se les administró el vehículo, metilcelulosa al 0.5 %. La figura 12 es un gráfico lineal que muestra cambios en el consumo de oxígeno después del tratamiento de ratones obesos (DIO) inducidos por la dieta con el Compuesto IVA. Los ratones DIO se trataron con el Compuesto IVA a una dosis de 15 mg/kg administrada dos veces al día vía oral. A los ratones de control se les administró el vehículo, metilcelulosa al 0.5 %.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a procedimientos para disminuir el peso y/o la grasa corporal en un animal, por ejemplo, en el tratamiento de pacientes con sobrepeso u obesos (por ejemplo, en seres humanos, o en animales de compañía), o como medios para producir animales de carne más magra en los animales destinados a reserva de carne (por ejemplo, pollos, cerdos, ganado vacuno), y procedimientos para tratar el síndrome metabólico, la diabetes no insulino dependiente, y /o la intolerancia a la glucosa en pacientes que lo requieran, mediante la administración de un inhibidor de PDE10. Tal como se expone en los ejemplos de la presente memoria, los ratones con genes inactivados de PDE10 son relativamente resistentes para desarrollar un aumento en el peso corporal, en la adiposidad, y síntomas de síndrome metabólico, subsiguiente a la exposición a una dieta rica en grasa. Los Ejemplos demuestran que provocar una disminución en la actividad de PDE10 constituye un procedimiento efectivo para reducir el peso y/o la grasa corporales, puede mejorar un síntoma del síndrome metabólico, puede utilizarse, por ejemplo, para tratar pacientes (humanos y animales de compañía) que presentan sobrepeso, son obesos, y/o padecen uno o más síntomas del síndrome metabólíco, y para tratar especies animales destinados a reserva de carne con objeto de producir carne más magra.

Inhibidores ejemplares de PDE10 Los inhibidores de PDE10 son conocidos por los expertos en la técnica y pueden también ser identificados mediante ensayos estándar conocidos por los expertos en la técnica, tales como los expuestos en Fawcett et al., Proc. Nati. Acad. Sci 97:3702-3707,2000 (a los que se hace alusión como PDE1 A), Publicación de Patente de EE. UU. . n° 2003/0032579, Publicación de Patente de EE. UU. . n° 2003/0096323, y que se describen a continuación. Los inhibidores de PDE10 que se utilizan en los procedimientos de la invención, incluyen papaverina (Publicación de Patente U.S. n° 2003/0032579) y los dados a conocer en la Solicitud de Patente U.S. No Provisional n° de Serie 11/062133, presentada el 18 de febrero de 2005, y titulada "Tetrahydroisiquinolinyl Derivatives of Quinasoline and Isoquiline". Los compuestos que se dan a conocer como inhibidores de PDE10 en la Solicitud de Patente de EE. UU. No-Provisional anteriormente considerada, tienen la fórmula siguiente: (I): (") y para las sales farmacéuticamente aceptables, solvatos y profármacos de los mismos, en la que Q es N o CH; en la que R1 y R 2 son cada uno independientemente hidrógeno, halógeno, alqu¡lo(C C9), alquenilo(C2-C9), alquinilo (C2-C9), cicloalquilo. (C3-C8), -0-(alquiloC C9), -O alquenilo (C2-C9), alquilo(C C6), O-(alquilo C-pCe), -C = N, -NO2, -COOR3, -CONR3R4, -NR3R4, -COR4, o -COOH, en el que dicho alquilo, alquenilo y alquinilo son sustituidos opcionalmente con 1 a 3 halógenos ; en el que R3 y R4 son independientemente H, alquilo o alquenilo(C2-C6) , en el que dichos alquilo y alquenilo están opcionalmente sustituidos con de 1 a 3 átomos de halógeno; y, cuando R1 y R2 son independientemente -O-alquilo ,-O-alquenilo o alquilo, alquenilo o alquinilo, R1y R2 pueden estar conectados opcionalmente para formar un anillo de 5 a 6 elementos; R5 y R6 son independientemente hidrógeno, -C(O)-X, -S02-X, - N(Y)-SO2-X o -N(Y)-C(O)-X, en las que X es un grupo alquilo (C C6) no sustituido o sustituido con uno o más halógenos, -O-alquilo (C-?-C6) no sustituido o sustituido con uno o más halógenos, un grupo arilo (Cß-C? ) no sustituido o sustituido con uno o dos sustituyentes, un grupo -NR7R8 o en la que dichos sustituyentes de grupo arilo (C6-C-?4) se seleccionan independientemente de alquilo (C Cß), -O-alquilo (d-Cß), halógeno, -C=N, -NO2, -COOR3, -CONR3R4, -NR3R4, -COR3 y -COOH, y alquilo (d-C6) sustituido con 1 a 3 halógenos; Y es hidrógeno o alquilo (CrC6); n es 0 ó 1 ; R7 y R8 son cada uno independientemente alquilo (C-?-C6) o hidrógeno; Z es oxígeno o NR9, en la que R9 es hidrógeno o alquilo (C?-C6); en la que R10 y R11 son independientemente H, halógeno, C=N, -COOH, -COOR3, -CONR3R4, COR3, -NR3R4, -OH, arilo (C6-C14), heteroarilo de 5 a 12 miembros, alquilo (C-i-Cß), alquenilo (C2-C6), alquínilo (C2-C6) o cicloalquilo (C3-C8), en los que opcionalmente dichos alquilo, alquenilo y alquinilo están independientemente sustituidos con 1 a 3 halógenos. Una realización particular de la invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que Q es N y R1 y R2 son cada uno -OCH3. Otra realización de esta invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que Q es N, R1 y R2 son cada uno -OCH3 y uno o ambos de R5 y R6 son -SO2X o -N(Y)-SO2-X, en las que X e Y son como se definen anteriormente. Una realización preferida de esta invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que Q es N, R1 y R2 son cada uno -OCH3 y uno o ambos de R5 y R6 son -SO2X-, en la que X es 4-metilpiperazina. Otra realización preferida de esta invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que Q es N, R1 y R2 son cada uno -OCH3 y uno o ambos de R5 y R6 son -NH-SO2-X, en la que X es arilo mono- o disustítuido. Preferiblemente, arilo es fenílo o naftilo, opcionalmente sustituido con alquilo (C?-Cß), alcoxi (C C6), -C=N, -NO2, -COOR3, -CONR3R4, -NR3R4, -COR3 y -COOH, en las que R3 y R4 son como se definen anteriormente. Otra realización de esta invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que Q es N, R1 y R2 son cada uno -OCH3 y uno o ambos de R5 y R6 es -N(Y)-C(O)-X, en la que X e Y son como se definen anteriormente. Otra realización de la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que Q es CH, R1 y R2 son cada uno -OCH3 y R5, R6, R10 y R11 son hidrógeno. En otra realización, R10 y R11 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo (CrC6), alquenilo (C2-C6), alquínilo (C2-C6) y cicloalquilo (C3-C8). En dicha realización, Q es preferiblemente N. Son ejemplos de compuestos específicos de fórmula (I) los siguientes: N-[2-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-il]-4-isopropilbencenosulfonamida; N-[2-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-1 , 2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-il]-2,5-dimetilbencenosulfonamida; N-[2-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-il]-2,2-dimetilpropionamída; N-[2-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-il]acetamida; 4-cloro-N-[2-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-il]bencenosulfonamida; N-[2-(6,7-dimetoxiquinazol¡n-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-il]acetamida; N-[2-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-il]-4-etilbenzamida; 4-cloro-N-[2-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-iljbenzamida; 3-cloro-N-[2-(6,7-dimetoxíquinazolin-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisquinolin-7-il]benzamida; 4-terc-butil-N-[2-(6,7-dimetoxiquínazolin-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-il]bencenosulfonamida; N-[2-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-il]-4-etoxibenzamida;; N-[2-(6,7-dimetoxiquinazolín-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-íl]-4-trifluorometilbencenosulfonamída; N-[2-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-1 , 2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-il]-3,4-d¡metoxibencenosulfonamida; 6,7-dimetoxi-4-[8-(morfolino-4-sulfonil)-3,4-dihidro-1/-/-isoquinolin-2-il]quinazolina; 6,7-dimetoxi-4-[8-(4-metilpiperazin-1-sulfonil)-3,4-dihidro-1/-/-isoquinolin-2-il]quinazolina; 4-(7,8-dimetoxi-3,4-dihidro-1 /-/-isoquinolin-2-il)-6-etoxi-7-metoxiquinazolina; 4-(6,7-dimetoxi-3,4-dihidro-1 -/-isoquinolin-2-il)-6-etoxi-7-metoxiquinazolina; 4-(6,7-dimetoxi-3-metil-3,4-dihidro-1 - -isoquinolin-2-il)-6-etoxi-7-metoxiquinazolina; 4-(3,4-dihidro-1/-/-isoquinolin-2-il)-6-etoxi-7- metoxiquinazolina; 4-(3,4-dihidro-1 H-isoquinolin-2-il)-7-metoxiquinazolina; 2-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-ilamina; 6,7-dimetoxi-3',4'-dihidro-1 ?-[1 ,2']büsoqu¡nolinilo y 6,7-dimetoxi-4-(3-propil-3,4-dihidro-1H-isoquinolin-2-il)quinazolína. Es un compuesto preferido de los compuestos enumerados anteriormente la 6,7-dimetoxi-4-[8-(morfolino-4-sulfonil)-3,4-dihidro-1 H-isoquinolin-2-il]quinazolina, que tiene la estructura (IA) siguiente: (IA) Otros inhibidores de PDE10 adecuados incluyen compuestos dados a conocer en la solicitud provisional de EE.UU. n° de serie 60/640405, presentada el 31 de diciembre de 2004 y titulada "NOVEL PYRROLIDYL DERIVATIVES OF HETEROAROMATIC COMPOUNDS". Los compuestos dados a conocer en esta solicitud provisional de EE.UU. incluyen compuestos que tienen fórmula (II) (II) en la que X, Y y Z son cada uno independientemente CH o N, con la condición de que al menos uno o dos de X, Y y Z sean N, pero no los tres; en la que Ri, R2 y R5 son independientemente H, halógeno, C=N, -COOH, -COOR3, -CONR3R , -COR3, -NR3R , -NHCOR3, -OH, arilo (C6-C10), heteroarilo de 5 a 7 miembros, alquilo (C-i-Cß), alquenilo (C2-C6), alquinilo (C2-C6), -O-alquilo (C C6), -O-alquenilo (C2-C6), o cicloalquilo (C3-C8); o, cuando R1, R2 y R5 son independientemente -O-alquilo (C C6), -O-alquenilo (C2-Cß), alquilo (C Cß), alquenilo (C2-C8) o alquinilo (C2-C6), R1 y R2 o R1 y R5 pueden estar opcionalmente conectados formando un anillo de 5 a 6 miembros; en la que R3 y R son independientemente H, alquilo C?-C6 o arilo C6-C10, estando dicho arilo opcionalmente sustituido con uno o más grupos alquilo (C C6); en la que Re y R7 son cada uno independientemente H, -COOR3, -CONR3R4, -COR4, NR3R4, -NHCOR3, -OH, -alquilen (C C6)-OH, -HNCOOR3, -CN, -HNCONHR4, alquilo (CrC6), alcoxi (C2-C6), arilo (C6-C?0), o en la que n es 0 ó 1 ; Z es oxígeno o NR8, en la que R8 es hidrógeno o alquilo (CrCß); en la que Ar es fenilo, naftilo o un anillo heteroarilo de 5 a 6 miembros, estando dicho heteroarilo opcionalmente condensado con un grupo benzo, y conteniendo dicho heteroarilo de uno a cuatro heteroátomos seleccionados de oxígeno, nitrógeno y azufre, con la condición de que dicho anillo heteroarilo no contenga dos átomos de oxígeno adyacentes o dos átomos de azufre adyacentes, y en la que cada uno de los anillos fenilo, naftilo, heteroarilo o heteroarilo benzocondensado anteriores puede estar opcionalmente sustituido con uno a tres sustítuyentes independientemente seleccionados de alquilo (C-i-Cs), cloro-, bromo-, yodo-, fluoro-, hidroxialquil (C-i-Cs)-, alcoxi (C C8)-alquil (d-C8)-, hidroxicicloalquil (C3-C8)-, cicloalcoxi (C3-C8)-, alcoxi (C C8)-cicloalquil (C3-C8)-, heterocícloalquilo de 3 a 8 miembros, hidroxiheterocícloalquilo de 3 a 8 miembros y alcoxi (CrC8)-heteroc¡cloalquilo de 3 a 8 miembros, en los que dichos alquilo, alcoxi y cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con 1 a 3 halos y en los que cada resto cicloalquilo (C3-C8) o heterocicloalquilo puede estar independientemente sustituido con uno a tres grupos alquilo (CrC6) o bencilo; o en la que Ar es un anillo heteroarilo de 5 a 6 miembros, estando dicho heteroarilo condensado con un grupo imidazo, pirido, pirímido, pirazo, piridazo o pirrólo, y conteniendo dicho heteroarilo uno a cuatro heteroátomos seleccionados de oxígeno, nitrógeno y azufre, con la condición de que dicho anillo heteroarilo no pueda contener dos átomos de oxígeno adyacentes o dos átomos de azufre adyacentes, y en la que cada uno de los anillos heteroarilo condensado anteriores puede estar opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes independientemente seleccionados de alquilo (CrC8), cloro-, bromo-, yodo-, fluoro-, haloalquilo (C C8), hidroxialquil (C C8)-, alcoxi (C C8)-alquilo (C C8), -O-alquil (C C8)halo, hidroxicicloalquil (C3-C8)-, cicloalcoxi (C3-C8)-, alcoxi (C?-C8)-cicloalquil (C3-C8)-, heterocicloalquilo de 3 a 8 miembros, hidroxíheterocicloalquilo de 3 a 8 miembros y alcoxi (C?-C8)-heterocicloalquilo de 3 a 8 miembros, en los que cada resto cicloalquilo (C3-C8) o heterocicloalquilo puede estar independientemente sustituido con uno a tres grupos alquilo (C C6) o bencilo; o cuando Ar es un anillo fenilo, naftilo o heteroarilo, cada anillo puede estar opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes independientemente seleccionados de (a) lactona formada a partir de -(CH2)tOH con un -COOH en orto, en la que t es 1 , 2 ó 3; (b) -CONR14R?5, en la que R y R-?5 se seleccionan independientemente de alquilo (C?-C8) y bencilo, o R1 y R?5, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heteroalquilo de 5 a 7 miembros que puede contener de 0 a 3 heteroátomos seleccionados de nitrógeno, azufre y oxígeno además del nitrógeno del grupo -CONR-?4R?5, en los que cuando cualquiera de dichos heteroátomos es nitrógeno, puede estar opcionalmente sustituido con alquilo (C-i-Cß) o bencilo, con la condición de que dicho anillo no pueda contener dos átomos de oxígeno adyacentes o dos átomos de azufre adyacentes; o (c) -(CH2)vNCOR14Ri5, en la que v es 0, 1 , 2 ó 3 y -COR14R15 se toma conjuntamente con el nitrógeno al que están unidos formando un anillo de lactama de 4 a 6 miembros; una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un hidrato o solvato del compuesto o la sal. Los compuestos adecuados que tienen fórmula (II) que pueden utilizarse en la práctica de la presente invención incluyen: 4-[3-alil-4- (quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-1-il]-6,7-dimetoxiquinazolina; 6,7-dimetoxi-4-[3-propil-4-(quinoxalin-2-íloxi)p¡rrolidin-1 -iljquinazolina; éster etílico del ácido 1-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-3-metil-4-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-3-carboxílico; 6,7-dimetoxi-4-[3-metil-3-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-1-iljquinazolina; [1 -(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxi)pírrolidin-3-iljisopropilmetilamina; [1-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-3-il]dietilamina; [1-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-3-il]etilmetilamina; [1-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-3-il]dimetilam¡na; [1-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-4-(quinolin-2-iloxi)pirrolidin-3-il]dimetilamina; [1 -(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-4-(quinolin-3-iloxi)pirrolidin-3-il]dimetilamina; 6,7-dimetoxi-4-[4'-(quinoxalin-2-iloxi)- [1 ,3']bipírrolidinil-1 '-iljquinazolina; 6,7-dimetoxi-4-[3-morfolin-4-il-4-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-1 -iljquinazolina; 6,7-dimetoxí-4-[3-(4-metilpiperazin-1 -il)-4- (quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-1 -iljquinazolina; [1 -(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-3-il]metilamina; N-[1 -(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-3-il]-N-metilacetamida; 6,7-dimetoxi-4-[3- (quinoxalin-2-iloxi)pirrolidín-1 -iljquinazolina; 4-[3-(4-etoxifenoxi)pirrolidin-1 -il]-6,7-dimetoxiquinazolína; 6,7-d¡metoxi-4-[3-(naftalen-2-iloxi)pirrolidin-1-iljquinazolina; 4-[3-(4-ferc-butilfenoxi)pirrolidin-1 -il]-6,7-dimetoxiquinazolina; 4-[1 -(6,7-dímetoxiquinazolin-4-il)pirrolidin-3-iloxiJbenzonitrilo; 6,7-dimetoxi-4-[3-(4-trifluorometoxifenoxi)pirrolidin-1 -iljquinazolina; 4-[3-(3-etoxifenoxi)pirrolidin-1 -il]-6,7-dimetoxiquinazolina; 4-[3-(3,4-dimetoxifenoxi)pirrolidin-1 -il]-6,7-dimetoxiquinazolina; 4-[3-(3-isopropoxifenoxi)pirrolidin-1-il]-6,7- dimetoxiquinazolina; 4-[3-(indan-5-iloxi)pirrolidin-1-il]-6,7-dimetoxiquinazolina; 6, 7-dimetoxi-4-[3-(quinolin-6-iloxi)pirrolidin-1 -iljquinazolina; N4-[3-(bifenil-3-¡loxi)pírrolidin-1-il]-6,7-dimetoxiquinazolina; 6,7-dimetoxi-4-[3-(2-metilquinolin-6-iloxi)pirrolidin-1 -iljquinazolina; 6,7-dimetoxi-4-[3-(7-metoxinaftalen-2-iloxi)pirrolidin-1-il]qu¡nazolina; 6,7-dimetoxi-4-[3-(6-metoxinaftalen-2-iloxi)pirrolidín-1 -iljquinazolina; 6,7-dimetoxi-4-[3-(quinolin-7-iloxi)pirrolidín-1-iljquinazolina; 6,7-dimetoxi-4-[3-(naftalen-1-iloxi)pirrolidin-1 -iljquinazolina; 4-[3-(¡soquinolín-3-iloxi)pirrolidin-1-ilj-6,7-dimetoxiquinazolina; 4-[3-(¡soquinolin-7-iloxí)pirrolidin-1-il]-6,7-dimetoxiquinazolina; 6,7-dimetoxi-4-[3-(pirid¡n-2-iloxi)pirrolidin-1 -iljquinazolina; 6,7-dimetoxi-4-[3-(piridin-3-¡loxi)p¡rrolidin-1-iljquinazolina; 6, 7-dimetoxi-4-[3-(piridin-4-iloxi)pirrolidin-1 -iljquinazolina; 4-[3-(5-cloropirimidin-2-iloxi)pirrolídin-1 -il]-6,7-dimetoxiquinazolina; éster terc-butílico del ácido 3-[1-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)pirrolidin-3-íloxijquinoxalin-6-carbonitrilo; 6,7-dimetoxi-4-[3-metoxi-4-(quinoxal¡n-2-iloxi)pirrolidin-1-iljquinazolina; tetrahidrofurano(pirrolidín-3-ilox¡)quinoxal¡na; 1 -(6,7-dimetoxiquinazol¡n-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxí)p¡rrol¡din-3-ol; [4-bencíl-1 -(6,7-dimetoxiqu¡nazolin-4-il)pirrolidin-3-il]dimetilamina; 6,7-dimetoxi-4-[3- (quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-1-il]cinolina; 6,7-dimetoxí-4-[4'-(quinoxalin-2-iloxi)-[1 ,3']bipirrolidinil-1 '-¡Ijcinolina; [1 -(6,7-dimetoxícinolin-4-il)-4-(quinolin-2-iloxi)pirrolidin-3-il]etilmetilamina; [1 -(6,7-dimetoxicinolin-4-il)-4-(quinolin-2-iloxi)pirrolidin-3-il]dietilamina; 6,7-dimetoxí-4-[3-morfolin-4-íl-4-(quinoxalin-2-iloxí)pirrolidin-1 -iljcinolina; [1 -(6,7-dimetoxicinolin-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxi)pírrolidin-3-il]dietilamina; [1-(6,7-dímetoxicinolin-4-il)-4-(quinoxalin-2- iloxi)pirrolidin-3-il]etilmetilamina; [1-(6,7-dimetoxicinolín-4-il)-4-(quinolin-2-iloxi)pirrolidin-3-il]dimetílamina; 6,7-dimetoxi-4-[3-morfolin-4-il-4-(quinolin-2-iloxi)pirrolidin-1 -iljcinolina; 6,7-dimetoxi-4-[4'-(quinolin-2-iloxi)-[1 ,3'jbipirrolidinil-1 '-iljcinolina; 4-[3-(4a,5,6,7,8,8a-hexahidroquinoxalin-2-iloxí)pirrolidin-1 -ilj-6,7-dimetoxiquinazolina; dimetilamida del ácido 1-(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-2-carboxílico; clorhidrato de [1 -(6,7-dimetoxiquinazolin-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolidin-2-il]metanol; y clorhidrato de 2-[1-(6,7-dimetox¡quinazolin-4-il)-4-(quinoxalin-2-iloxi)pirrolid¡n-2-il]propan-2-ol. Es un compuesto preferido la 6,7-dimetoxí-4-[3-(quinoxalin-2-iloxi)pírrolidin-1 -iljquinazolina, que puede prepararse como se describe en los ejemplos (HA) a continuación. Pueden prepararse otros derivados utilizando procedimientos análogos a este procedimiento. Otro conjunto de inhibidores de PDE10 que son útiles en la práctica de la presente invención incluyen compuestos de quinazolina de la Fórmula (III) siguiente.

(III) donde R es un fenilo sustituido; una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un hidrato o solvato del compuesto o la sal. Un compuesto preferido de Fómula (III) es la 4-(2-Fluoro-fenil)-6,7-dimetoxi-2-piperazina-1-il-quinazolina que puede prepararse tal como se describe en los Ejemplos a continuación (Compuesto I HA). Otros derivados pueden prepararse utilizando procedimientos análogos a los utilizados para preparar el Compuesto I HA en los Ejemplos. Otro tipo de inhibidores de PDE10 que son útiles en la práctica de la presente invención incluyen compuestos dados a conocer en la Solicitud de Patente Provisional de EE.UU 60/642058 presentada el 7 de Enero de 2005, y titulada "HETEOAROMATIC QUINOLINE COMPOUNDS". Compuestos apropiados de esta Solicitud de Patente provisional de EE.UU incluyen compuestos de la Fórmula (IV) siguiente.

(IV) R1 es hidrógeno, halógeno, hidroxilo, ciano, alquilo (C?-C8), alquenilo (C2-C8), alquinilo (C2-C8), alcoxilo (C-?-C8), alquilo halo-sustituido, cicloalquilo (C3-C8), heterocicloalquilo (C2-C7), alquiltio (C?-C8), NR3R3, -O-CF3, -S(O)n -R3, C(O)-NR3R3, o alquilo (CrC8) sustituido con un nitrógeno, oxígeno o azufre, donde cada R3 es cada uno independientemente hidrógeno, alquilo (CrC8), alquenilo (C2-C8), alquinilo (C2-C8), alquilo (d-C8) halo-sustítuído, o cicloalquilo (C3-C8), y n es 0, 1 o 2; R2 es hidrógeno, alquilo (C?-C8), alquenilo (C2-C8), o alquinilo (C2-C8); X es oxígeno, azufre, carbono o nitrógeno, en el que el carbono y el nitrógeno pueden estar sustituidos con un sustituyente seleccionado a partir de alquilo (CrC8), alquenilo (C2-C8), alquinilo (C2-C8), o alquilo (C C8) halo-sustituido. Y es carbono o nitrógeno, siempre que no más de una Y sea nitrógeno, y cuando Y es carbono, esté sustituido con R7, donde R7 es cada uno seleccionado independientemente de hidrógeno, halógeno, hidroxilo, ciano, alquilo (C?-C8), alquenilo (C2-C8), alquínilo (C2-C8)), alcoxilo (CrC8), cicloalquilo (C C8), alquiltio (C?-C8), alquilo (C3-C8) halo-sustiuído, NR8R8, -O-CF3, -S(O)m-R8, y -C(O)-NR8R8, donde R8 es cada uno independientemente hidrógeno o alquilo (C C8) y m es 0, 1 o 2; una sal farmacéuticamente aceptable del mismo o un hidrato o solvato del compuesto o la sal.

Los compuestos preferidos de Fórmula (IV) son 2-[4-(4-piridin-4-il-2H-pirazol-3-il)-fenox¡metil]-quínolina, que pueden prepararse tal como se describe en los Ejemplos a continuación (Compuesto IVA) y 2-[4-(1-Metil-4-piridín-4-il-1 H-p¡razol-3-il)-fenox¡metil]-quinolina. Otros derivados pueden prepararse utilizando procedimientos análogos a los empleados para preparar el Compuesto IVA en los Ejemplos. Se entendrá por los expertos en la técnica que todos los estereoísómeros, tautómeros, solvatos, hidratos, profármacos y sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos listados anteriormente, se incluyen también como inhibidores de PDE10 que pueden utilizarse en la presente invención. Como se ha considerado anteriormente, otros inhibidores de PDE10, incluyendo los inhibidores selectivos de PDE10, pueden identificarse utilizando ensayos estándar conocidos por los expertos en la técnica. Brevemente, un tipo de rastreo para identificar los moduladores selectivos de PDE10 utiliza enzimas nativas aisladas de los tejidos, o enzimas recombinantes aisladas de células huésped transfectadas, por ejemplo, de células Sf9 de insecto (Fawcett, Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 97:3702-07,2000), células de levadura (Loughney et al., Patente de EE.UU. n° 5.932.465) o células COS-7 (Yuasa,. J. Biol. Chem. 275: 31469-79, 2000). Preferentemente, la enzima PDE10 es humana (por ejemplo, Loughney et al., Patente de EE.UU. n° 5.932.465, Lanfear et al., EP 967284), de ratón (por ejemplo, Lanfear et al., EP 967294) o de rata (por ejemplo, SEC ID n° :2). La actividad de PDE10 se mide, por ejemplo, como la tasa de hidrólisis de un sustrato apropiado, [3H] cAMP o [3H]cGMP. Esta actividad se mide, por ejemplo, mediante procedimientos basados en SPA (Fawcett, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 97:3702-07,2000; Phillips et al., documento WO 00/40733, y Thompson et al., Biochem 18:5228,1979 (modificado utilizando el código deproducto TRKQ7090/7100, Amersham Int'l Ltd., Buckhamshire, Inglaterra)). Muestras conteniendo la enzima PDE10 se pusieron en contacto con un sustrato cAMP o cGMP (Sigma Chemical), una porción del cual (por ejemplo, entre y un Y2) estaba marcado con 3H (Amersham). Las reacciones se llevaron a cabo en, por ejemplo, placas de microtitulación (por ejemplo, placas MicrofluorR , Dynex Technologies, Chantilly, VA), y se finalizaron añadiendo perlas SPA de silicato de itrio (Amersham) que contenían un exceso de nucléotido cíclico no marcado. Después de que se dejara que las perlas se asentaran en la oscuridad, las placas se leyeron mediante un lector de microtitulación de placa (por ejemplo, TopCountR, Packard , Meriden, CT). La actividad de PDE10 puede también ensayarse mediante la detección del 32P-fosfato liberado de 32P-cAMP o de 3 P-cGMP (tal como se describe, por ejemplo, en Loughney et al., J. Biol. Chem. 271 : 796-806, 1996, y Loughney, Patente de EE.UU n° 5.932.465), o utilizando anticuerpos para distinguir entre los sustratos PDE, cGMP o cAMP, y sus productos hidrolizados (utilizando, por ejemplo, tecnología Flash Píate™, NEN® Life Sciences products, Boston, MA). Como alternativa para ensayar la actividad catalítica de PDE10, los agentes pueden identificarse como moduladores positivos de PDE10 o moduladores negativos (antagonistas) de PDE10 si modulan indirectamente la actividad catalítica de PDE10, por ejemplo, vía modificación post-traduccional (por ejemplo, fosforilación), modulación de la unión del ligando alostérico (por ejemplo, vía el dominio GAF) (Fawcett, Proc. Nati. Acad. Sci. USA 97: 3702-07, 2000)), o mediante unión a las propias PDE10 en un sitio regulador alostérico o catalítico. Los procedimientos para determinar la fosforilación de PDE10 y la unión del ligando alostérico se describen en la bibliografía (véase, por ejemplo, McAllister -Lucas et al, J. Biol. Chem 270:30671-79, 1995, y Corbin et al., Eur. J. Biochem., 267:2760-67, 2000). Los agentes del ensayo utilizados para rastrear los inhibidores de PDE10 pueden seleccionarse individualmente u obtenerse a partir de una biblioteca de compuestos. Dichos agentes incluyen péptidos, bibliotecas moleculares derivadas de química combinatoria, que consisten en aminoácidos con configuración L- y/o D-, fosfopéptidos, anticuerpos, y compuestos orgánicos e inorgánicos pequeños. Las bibliotecas incluyen bibliotecas biológicas, bibliotecas de compuestos naturales, bibliotecas de peptoides (bibliotecas de moléculas que tienen las funciones de los péptidos, pero con nuevas estructuras no peptídicas que son resistentes a la degradación enzimática, permaneciendo todavía bíoactivas) (véase, por ejemplo, Zuckermann, J. Med. Chem. 37:2678-85,1994), bibliotecas capaces de ser dirigidas espacialmente de forma paralela en fase de solución o en fase sólida, procedimientos sintéticos de bibliotecas que necesiten desenrevesamíento, el procedimiento bibliotecario "una perla un compuesto", y procedimientos sintéticos de bibliotecas que utilizan la selección de cromatografía por afinidad. Ejemplos de procedimientos para la síntesis de bibliotecas moleculares, pueden encontrarse en la técnica, por ejemplo, en DeWitt et al., Proc. Nati .Acad. Sci 90: 6909,1993; Erd et al., Proc. Nati. Acad. Scí. 91 :11422, 1994; Zuckermann et al., J. Med. Chem. 37:2678,1994; Cho et al, Science, 261 :1303, 1995; Carrell et al., Angew.Chem. Int. Ed. Engl 33: 2061 , 1994; y Gallop et al., J. Med. Chem. 37:1233, 1994. Bibliotecas de compuestos pueden presentarse en solución (por ejemplo, Houghten, Biotechniques, 13:412-421 , 1992), o en perlas (Lam, Nature, 354:82-841 ,1991 ), en multimatrices multigénicas (Fodor, Nature 364:555-556, 1993), bacterias o esporas (Ladner, Patente de EE.UU. n° 5.223.409), plásmidos (Culi et al., Proc. Nati. Acad. Sci USA, 89:1865-1869, 1992) o en fagos (Scott et al., Science 249:386-390, 1990; Devlin, Science 249: 404-406, 1990; Cwirla et al., Proc. Nati. Acad. Sci. (USA) 87:6378-6382,1990; Felici, J. Mol. Biol. 222:301-310, 1991 ; Ladner , supra).

Procedimientos de Rastreo Tal como se consideró anteriormente, la invención incluye también procedimientos de rastreo para identificar agentes que puedan utilizarse en los procedimientos terapéuticos que se describen en la presente memoria. Estos procedimientos pueden incluir la determinación de si un agente inhibe a PDE10, seguido por su confirmación de que es efectivo para reducir el peso o la grasa corporal, o para tratar un síntoma del síndrome metabólico, tal como se ha hecho patente anteriormente. Alternativamente, los procedimientos de rastreo pueden simplemente implicar a los agentes de prueba que son conocidos por ser antagonistas de PDE10 respecto a su eficacia en dichos procedimientos terapéuticos.

El ensayo de un agente respecto a su eficacia para inhibir la actividad de PDE10 puede llevarse a cabo utilizando procedimientos que son bien conocidos en la tónica (véase, por ejemplo, Fawcett et al., Proc. Nati. Acad .Sci. 97: 3702-3707, 2000 y en la Publicación de Patente de EE.UU. n° 2003/0032579). La eficacia terapéutica de dichos compuestos activos puede determinarse mediante procedimientos terapéuticos estándar en cultivos celulares o en modelos animales, por ejemplo, para determinar el valor de ED50 (la concentración del compuesto que produce un 50 % del efecto máximo). Una vez que se ha determinado que un agente constituye un antagonista de PDE10 conocido, o si se está ensayando un antagonista de PDE10, el agente puede ensayarse después para confirmar que es efectivo en los procedimientos terapéuticos descritos en la presente memoria. Dicho ensayo puede llevarse a cabo en sistemas de modelos animales apropiados para las situaciones que se describen en la presente memoria. Por ejemplo, los ratones genéticamente obesos (por ejemplo, C57BL (ob/ob), los ratones con obesidad inducida por la dieta (es decir, ratones DIO), o ratas pueden ser tratados con un agente candidato y los efectos del agente en diversos parámetros asociados con las situaciones descritas en la presente memoria, pueden compararse con las de los animales que se han mantenido bajo condiciones similares, con la excepción de que no han sido tratados con el agente candidato. Los parámetros que pueden ensayarse con esta finalidad, incluyen, por ejemplo, peso corporal, grasa corporal, insulina, glucosa, triglicéridos, ácidos grasos libres, adiponectina, hemoglobina A1c, colesterol, leptina y/o fructosamina. Ejemplos de estudios tales como estos, son proporcionados seguidamente en los Ejemplos. Los agentes que se encuentra que tienen un impacto positivo sobre estos parámetros, pueden seleccionarse entonces para ensayar en otros estudios preclínicos o clínicos, como puede determinarse por los expertos en la técnica.

Caracterización de los antagonistas de PDE10 Los agentes antagonistas de PDE10 que se encuentra que muestran un impacto positivo sobre los parámetros pertinentes con los procedimientos terapéuticos que se consideran en la presente memoria, pueden ensayarse en estudios clínicos o pre-clínicos, tal como puede determinarse por los expertos en esta técnica. Los datos obtenidos a partir de los ensayos de cultivo celular y de los modelos animales pueden utilizarse para formular un intervalo de dosis para utilizarse en seres humanos. Las dosis pueden variar, dependiendo de la forma de dosificación utilizada y de la vía de administración. Para cualquier compuesto utilizado en el procedimiento de la invención, la dosis terapéuticamente efectiva puede estimarse inicialmente a partir de los ensayos de cultivo celular. Una dosis puede formularse en modelos animales para alcanzar un intervalo de concentraciones en el plasma en círcuolación que incluya la Cl50. Dicha información puede utilizarse para determinar de modo más preciso las dosis útiles en seres humanos. Los niveles plasmáticos pueden medirse, por ejemplo, mediante cromatografía líquida de alta resolución.

Procedimientos Terapéuticos Un agente que se identifica como un inhibidor de PDE 10 se administra en una dosis suficiente para reducir el peso o la grasa corporales, por ejemplo, reduciendo la masa de uno o más de los depósitos adiposos, o para mejorar un síntoma del síndrome metabólico. Dichas cantidades terapéuticamente efectivas se determinarán utilizando técnicas rutinarias de optímización que dependen de, por ejemplo, la afección del paciente o del animal, la vía de administración, la formulación, el parecer del médico, y otros factores evidentes para los expertos en la técnica a la luz de esta exposición. Los inhibidores de PDE10 adecuados para usar de acuerdo con la presente invención se pueden administrar en solitario pero, en terapia humana, se administrarán generalmente mezclados con un excipiente, diluyente o vehículo farmacéutico adecuado seleccionado con respecto a la vía de administración pretendida y la práctica farmacéutica convencional. Por ejemplo, los inhibidores de PDE10 adecuados para utilizar según la presente invención, o sus sales o solvatos, pueden administrarse oralmente, bucalmente, o sublingualmente, en forma de comprimidos, cápsulas (incluyendo cápsulas de gel blando), multi-particulados, geles, películas, óvulos, elixires, soluciones o suspensiones, que pueden contener agentes colorantes o aromatizantes, para las aplicaciones de la liberación inmediata, retrasada, modificada, sostenida, dual, controlada, o por pulsos. Dichos compuestos pueden también administrarse mediante formas de dosificación de dispersión rápida o de disolución rápida o en forma de una dispersión de alta energía o como partículas revestidas. Formulaciones farmacéuticas apropiadas pueden estar en forma revestida o no revestida, tal como se desee. Dichas composiciones farmacéuticas sólidas, por ejemplo, comprimidos, pueden contener excipientes tales como celulosa microcristalina, lactosa, citrato sódico, carbonato calcico, fosfato calcico dibásico, glicina y almidón (preferentemente almidón de maíz, patata o de tapioca), desintegrantes como almidón glicolato sódico, croscarmelosa sódica y ciertos silicatos complejos, y aglutinantes de granulación tales como polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetil celulosa (HPMC), hidroxipropilcelulosa (HPC), hidroxipropil metilcelulosa acetato succinato (HPMCAS), sacarosa, gelatina y goma arábiga. Adicionalmente, agentes lubricantes como estearato de magnesio, ácido esteárico, gliceril behenato y talco, pueden incluirse. Composiciones sólidas de un tipo similar pueden también utilizarse como cargas en cápsulas de gelatina o cápsulas de HPMC. Excipientes preferidos a este respecto incluyen lactosa, almidón, celulosa, azúcar de leche, o polietilenglicoles de alto peso molecular. Para las suspensiones acuosas y/o elíxires, los compuestos inhibidores de la PDE10 pueden combinarse con diversos agentes edulcorantes o aromatizantes, colorantes o tinturas, con agentes emulsionantes y/o des uspensión y con diluyentes tales como agua, etanol, propilenglicol y glicerina, y sus combinaciones. Las formas de dosificación de liberación modificada y de liberación por pulsos pueden contener excipientes tales como los detallados para formas de dosificación de liberación inmediata, junto con excipientes adicionales que actúan como modificadores de la tasa de liberación, estando éstos revestidos y/o incluidos en el cuerpo del dispositivo. Los modificadores de la tasa de liberación incluyen, pero no se limitan exclusivamente a HPMC, HPMCAS, metilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica, etil celulosa, celulosa acetato, poli (óxido de etíleno), goma xantana, Carbomer, copolímero de metacrilato de amonio, aceite de ricino, hidrogenado, cera de carnauba, cera de parafina, celulosa acetato ftalato, hidroxipropilmetil celulosa ftalato, copolímero de ácido metacrílico, y sus mezclas. Las formas de dosificación de liberación modificada y por pulsos pueden contener uno o una combinación de excipientes de modificación de la tasa de liberación. Los excipientes de modificación de la tasa de liberación pueden estar presentes en el interior de la forma de dosificación, esto es, en el interior de la matriz, y/o sobre la forma de dosificación, esto es, sobre la superficie o el revestimiento. Las formulaciones de dosificación de dispersión rápida o de disolución rápida (FDDF) pueden contener los siguientes ingredientes: aspartamo, acesulfamo potásico, ácido cítrico, croscarmelosa sódica, crospovidona, ácido diascórbico, acrilato de etilo, etil celulosa, gelatina, hidroxipropilmetil celulosa, estearato de magnesio, manitol, metacrilato de metilo, aroma de menta, polietilenglicol, sílice de pirólisis, dióxido de silicio, almidón glicolato sódico, estearil fumarato sódico, sorbitol, xilitol. Los términos que dispersión o disolución, tal como se utilizan en la presente memoria para describir FDDF dependen de la solubilidad de la sustancia farmacológica utilizada, esto es, en casos en los que la sustancia farmacológica es insoluble, puede prepararse una forma de dosificación de dispersión rápida, y, en casos en los que la sustancia farmacológica es soluble, puede preparase una forma de dosificación de disolución rápida. Los inhibidores de PDE10 apropiados para utilizarse, según la presente invención, pueden también administrarse parentalmente, por ejemplo, ¡ntracavemosamente, intravenosamente, ¡ntra-arterialmente, intraperitonealmente, ¡ntratecalmente, intraventicularmente, ¡ntrauretralmente, ¡ntraestemalmente, intracranealmente, intramuscularmente o subcutáneamente, o pueden administrarse mediante infusión o mediante técnicas sin aguja. Para dicha administración parenteral se utilizan mejor en forma de una solución acuosa estéril que puede contener otras sustancias, por ejemplo, bastantes sales, o glucosa, para hacer que la solución sea isotónica con la sangre. Las soluciones acuosas deberán estar apropiadamente tamponadas (preferentemente, a un pH de entre aproximadamente 3 a 9), si es necesario. La preparación de formulaciones parenterales apropiadas bajo condiciones estériles se cumple fácilmente mediante técnicas farmacéuticas estándar bien conocidas por los expertos en la técnica.

Para la administración oral y parenteral a pacientes humanos, el nivel de dosificación diario de los inhibidores de la PDE10, para utilizarlos en la presente invención, será habitualmente de entre 1 a 500 mg (en dosis únicas o divididas). Un intervalo preferido de dosificación está entre aproximadamente 1 y aproximadamente 100 mg. La dosificación puede administrarse mediante una dosis única, una dosis dividida diariamente, o una dosis diaria múltiple. Alternativamente, una dosificación continuada, como por ejemplo, a través de una forma de dosificación de liberación controlada (por ejemplo, lenta), puede administrarse diariamente o durante más que un día a su tiempo. Así, por ejemplo, comprimidos o cápsulas de los inhibidores de la PDE10 apropiados para la utilización según la presente invención, pueden contener entre 1 y 250 mg de compuesto activo para la administración única o de dos o más a la vez, según sea apropiado. Los comprimidos o cápsulas preferidos contendrán entre aproximadamente 1 y aproximadamente 50 mg de compuesto activo para la administración única o de dos o más a la vez, según sea más apropiado. El médico en cualquier caso determinará la dosis real que sea más apropiada para cualquier paciente individual, y ésta variará con la edad, peso y respuesta del paciente en particular. Pueden existir, por supuesto, casos particulares en los que son necesarios intervalos de dosificación más altos o más bajos, y que forman parte del alcance de la presente invención.

Los inhibidores de PDE10 apropiados para el uso, según la presente invención, pueden también administrarse intranasalmente o mediante inhalación, y son convenientemente suministrados en forma de un inhalador de polvo seco o de una presentación de pulverizador de un aerosol, a partir de un recipiente presurizado, bomba, pulverizador o nebulizador utilizando un propelente apropiado, por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, un hidrofluoroalcano tal como el 1 ,1 ,1 ,2-tetrafluoroetano (HFA 134A™ o 1 ,1 ,1 ,2,3,3,3,-heptafluoropropano (HFA 227EA™), dióxido de carbono u otro gas apropiado. En el caso de un aerosol presurizado, la unidad de dosificación puede determinarse suministrando una válvula para proporcionar una cantidad medida. El recipiente presurizado, bomba, pulverizador o nebulizador puede contener una solución o suspensión del compuesto activo, por ejemplo, utilizando una mezcla de etanol y el propelente como disolvente, que puede contener además un lubricante, por ejemplo, sorbitan trioleato. Las cápsulas y los cartuchos (fabricados por ejemplo, a partir de la gelatina) para utilizar en un inhalador o insuflador, pueden formularse para contener una mezcla en polvo de un compuesto de la invención y una base apropiada de polvo, tal como lactosa o almidón. Las formulaciones en polvo seco o en aerosol se disponen preferiblemente de tal forma que cada dosis medida o "ráfaga" contiene entre 1 y 50 mg de un inhibidor de PDE10 para el suministro al animal que va a ser tratado. La dosis total diaria con un aerosol estará en el intervalo entre 1 y 50 mg, que puede ser administrada en una dosis única o, más habitualmente, en dosis divididas durante el día. Los inhibidores de la PDE10 que son apropiados para su utilización de acuerdo con la presente invención, pueden también formularse para el suministro mediante un atomizador. Las formulaciones para los dispositivos de atomización pueden contener los siguientes ingredientes como solubilizadores, emulsionantes o agentes de suspensión: agua, etanol, glicerol, propilenglicol, polietilenglicoles de bajo peso molecular, cloruro sódico, fluorocarburos, éteres de polietilenglicol, sorbitan trioleato, ácido oleico. Alternativamente, los inhibidores de PDE10 apropiados para uso de acuerdo con la presente invención, pueden ser administrados en forma de un supositorio u pesario, o pueden aplicarse tópicamente en forma de un gel, hidrogel, loción, solución, crema, pomada o polvo suelto. Los inhibidores de la PDE10 que son apropiados para el uso de acuerdo con la presente invención, pueden también administrarse dérmica o transdérmicamente, por ejemplo, utilizando un parche dérmico. También pueden administrarse mediante las vías pulmonar o rectal. Los inhibidores de PDE10 pueden también administrarse por vía ocular. Para uso oftálmico, los compuestos pueden formularse como suspensiones mícronizadas en soluciones salinas estériles isotónicas y con el pH ajustado, o, preferentemente, como soluciones en soluciones salinas estériles con el pH ajustado e isotónicas, opcionalmente en combinación con un conservante tal como un cloruro de bencilalconio. Alternativamente, pueden formularse en una pomada tal como vaselina. Para la aplicación de forma tópica a la piel, los inhibidores de PDE10 que son apropiados para el uso de acuerdo con la presente invención, pueden formularse como una pomada apropiada, que contiene el principio activo o el agente suspendido o disuelto en, por ejemplo, una mezcla con una o más de las sustancias siguientes: aceite mineral, vaselina líquida, vaselina blanca, propilenglicol, compuesto polioxietileno polioxipropileno, cera emulsionante, y agua. Alternativamente, pueden formularse como una loción o crema apropiadas, suspendidas o disueltas en, por ejemplo, una mezcla de una o más de las sustancias siguientes: aceite mineral, sorbitan monoestearato, un polietilenglicol, parafina líquida, polisorbato 60, cera de esteres de cetilo, alcohol cetearílico, 2-octildodecanol, alcohol bencílico y agua. Los inhibidores de PDE10 que son apropiados para el uso de acuerdo con la presente invención, pueden también utilizarse en combinación con una ciclodextrina. Las ciclodextrinas se conocen porque forman complejos de inclusión y no inclusión con las moléculas fármaco. La formación de un complejo fármaco-ciclodextrina puede modificar la solubilidad, tasa de disolución, biodisponibílidad y/o la propiedad de estabilidad de una molécula fármaco. Los complejos fármaco-ciclodextrina son útiles generalmente para la mayoría de las formas de dosificación y de las vías de administración. Como una alternativa a la formación directa del complejo con el fármaco, la ciclodextrina puede utilizarse como un aditivo auxiliar, por ejemplo, como un transportador, diluyente o solubilizador. Las ciclodextrinas alfa-, beta- y gamma- son algunas de las más habitualmente utilizadas y ejemplos apropiados se describen en las Publicaciones PCT n°s WO 91/11172, WO 94/02518 y WO 98/55148. Generalmente, en humanos, la administración oral es la vía preferida, siendo a menudo la más conveniente. En circunstancias en las que el receptor padece un trastorno de la ingestión, o la imposibilidad de absorber el fármaco después de la administración oral, el fármaco puede administrarse parenteralmente, sublíngualmente o bucalmente. Para uso veterinario, un inhibidor de la PDE10 se administra como una formulación apropiadamente aceptable de acuerdo con la práctica veterinaria normal, determinando el cirujano veterinario el régimen de dosificación y la vía de administración que sea la más apropiada para un animal en particular. Dichos animales incluyen animales de compañía que tienen sobrepeso, son obesos o presentan el riesgo de tener sobrepeso o estar obesos. Otros animales que pueden ser tratados de acuerdo con la presente invención son animales fuente de alimentos con objeto de obtener carne más magra que la que se obtendría sin aplicar el tratamiento, según la presente invención. Los inhibidores de PDE10 que se utilizan de acuerdo con la presente invención pueden también utilizarse conjuntamente con otros agentes farmacéuticos para el tratamiento de enfermedades, afecciones y/o trastornos que se describen en la presente memoria. Por tanto, también se proporcionan procedimientos de tratamiento que incluyen la administración de inhibidores de PDE10 en combinación con otros agentes farmacéuticos. Los agentes farmacéuticos apropiados que pueden utilizarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen agentes antí-obesidad tales como inhibidores de la proteína de transferencia de triglicérido microsómico/secreción de apolípoproteína-B (apo-B/MTP), los inhibidores de la 11ß-hidroxi esferoide deshidrogenasa 1 (11 ß-HSD tipo 1 ), el péptido YY3-36 o sus análogos, agonistas de MCR-4, agonistas de la colecistoquinina-A (CCK-A), inhibidores de la recaptación de las monoaminas (tal como la sibutramina), antagonistas de los receptores-1 canabinoides (tal como rimonabant), agentes simpaticomíméticos, agonistas de los recetores ß3 adrenérgicos, agonistas de la dopamina (tal como la bromocriptina), análogos de receptores de la hormona estimulante de melanocitos, agonistas de 5HT2c, antagonistas de la hormona de concentraciónde la melanina, leptina (la proteína OB), análogos de leptina, agonistas de receptores de leptina, antagonistas de galanina, inhibidores de la lipasa (tales como la tetrahídrolipstatína, es decir, orlistat), agentes anorécticos (tal como un agonista de la bombesína), antagonistas del receptor del neuropéptido-Y (por ejemplo, antagonistas del receptor NPY Y5, tales como los compuestos espiro descritos en las Patentes de EE.UU. n° 6.566.367; 6.649.624; 6.638.942; 6.605.720; 6.495.559; 6.462053; 6.388.077; 6.335.345 ;y 6.326.375; Publicación de Solicitud de Patente de EE.UU. n° 2002/0151456 y 2003/036652; y la Publicación PCT n°s WO 03/010175, WO 03/082190 y WO 02/048152), agentes tiromiméticos, deshidroepiandrosterona o un análogode la misma, agonistas o antagonistas de receptores glucocorticoides, antagonistas del receptor de la orexina, agonistas del receptor péptido 1 de tipo glucagón, factores neurotróficos ciliares (tales como Axokine™ disponible en Regeneran Pharmaceuticals, Inc., Tarrytown, NY y Procter & Gamble Company, Cincinnati, OH), proteínas humanas relacionadas con el agoutí humano (AGRP), antagonistas del receptor de la grelina, antagonistas o agonistas inversos del receptor de la histamina, agonistas del receptor U de neuromedina, y análogos. Otros agentes anti-obesidad, incluyendo los agentes preferidos que se exponen seguidamente en la presente memoria, son bien conocidos, o serán evidentes inmediatamente a la luz de la exposición inmediata, para el experto en la técnica. Especialmente preferidos son los agentes anti-obesidad seleccionados del grupo constituido por oriistat, sibutramina, bromocriptina, efedrina, leptina, rimonabant, pseudoefedrina; péptido YY3-36 o un análogo del mismo; y la 2-oxo-N-(5-fenilp¡razinil)espiro-[isobenzofuran-1(3H),4'-p¡peridinaj-1 '-carboxamída. Preferentemente, los compuestos de la presente invención y las terapias de combinación se administran conjuntamente con ejercicio y una dieta sensata. Los agentes representativos anti-obesidad para utilización en las combinaciones, composiciones farmacéuticas, y procedimientos de la invención, pueden prepararse utilizando procedimientos conocidos por el experto en la técnica, por ejemplo, la sibutramina puede prepararse tal como se describe en la Patente de EE.UU. n° 4.929.629; la bromocriptina puede prepararse tal como se describe en las Patentes de EE.UU n° 3.752.814 y 3.752.888; oriistat puede prepararse tal como se describe en las Patentes de EE.UU. n° 5.274.143; 5.420.305;5.540.917; y 5.643.874; rimonabant puede prepararse tal como se describe en la Patente de EE.UU. n° 5.624.941 ; PYY3- 36(incluyendo los análogos) puede prepararse tal como se describe en la Publicación de EE.UU. n° 2002/0141985 y la Publicación PCT n°. WO 03/027637; y el antagonista del receptor NPY Y5 2-oxo-N-(5-fenilpirazinil)espiro[isobenzofuran-1 (3H),4'-piperidina]-1 '-carboxamída puede prepararse tal como se describe en la Publicación de Patente de EE.UU. n° 2002/0151456.

Kits La invención proporciona también kits o envases farmacéuticos que incluyen antagonistas de PDE10 para utilizar en la prevención y tratamiento de las enfermedades y afecciones que se describen en la presente memoria. Además de uno o más antagonistas de PDE10 en forma de, por ejemplo, comprimidos, cápsulas, o polvos liofilizados, los kits o envases farmacéuticos puede incluir instrucciones para la utilización de los antagonistas en la prevención o tratamiento de dichas enfermedades y afecciones. Los antagonistas pueden proporcionarse en los kits o envases en un frasco o en otra forma apropiada (por ejemplo, un envase blister).

Opcionalmente, los kits o envases farmacéuticos pueden también incluir otros agentes farmacéuticamente activos (véase por ejemplo los agentes listados anteriormente tal como agentes anti-obesidad), y/o materiales utilizados en la administración del fármaco o fármacos, tales como diluyentes, agujas, jeringuillas, aplicadores, y similares. La invención se basa, en parte, en los siguientes resultados experimentales. Aunque la invención se describe en la presente memoria relacionada con formas de realización específicas, se entenderá que otros cambios y modificaciones que pueden llevarse a cabo, son también parte de esta invención y están incluidos también en alcance de las reivindicaciones que se adjuntan. Esta solicitud tiene el propósito de abarcar cualesquiera equivalentes, variaciones, utilizaciones, o adaptaciones de la invención, que siguen, en general, los principios de la invención, incluyendo las desviaciones de la presente exposición que vienen dentro de la práctica conocida o habitual en la técnica, y que son capaces de considerarse sin una experimentación excesiva.

EJEMPLOS Los compuestos que se utilizan en los procedimientos siguientes se prepararon tal como se describe a continuación en la presente memoria.

Rimonabant (también conocido con el nombre comercial de ACOMPLIA) está disponible en Sanofi-Synthelabo Inc., Nueva York, NY; o preparado tal como se describe en la Patente de EE.UU. n° 5.624.941.

Preparación de 6,7-Dimetoxi-4-[3-(quinoxalin-2-iloxi)-pirrolidin-1 -ill-quinazolina (Compuesto HA) Una mezcla de 2-(pirrolidin-3-iloxi)-quinoxalina (10.5 gramos, 48.9 mmol), 6,7-dimetoxi-4-cloroquinazolina (11.0 g, 48.9 mmol), y carbonato de potasio (33.8 g, 244 mmol) en THF (500 mi) y agua (100 mi), se calentó a 75°C durante 16 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se disolvió en cloruro de metileno. La solución se lavó con NaOH 1 N y se secó mediante un tapón de algodón. La solución se concentró entonces y la espuma marrón resultante se cromatografíó en gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo /metanol 9:1 proporcionando 17.3 g de un polvo blanquecino. La trituración con acetato de etilo /metanol dio lugar a 15.0 g de un polvo blanquecino. El sólido se suspendió en isopropanol y se trató con 1.0 equivalentes molares de ácido sulfúrico. Después de agitar por la noche, los sólidos se recuperaron medíante filtración dando 18.0 g del compuesto del título (HA) como un polvo blanco. Espectro de masas (M + H) m/z= 404.2.

Preparación de 4-(2-Fluoro-fenil)-6,7-dimetoxi-2-piperazin-1 -il-quinazolina (HIA) MÍA Etapa 1 A la solución de 2,4-dicloro-6,7-dimetoxi-quinazolina (555 mg, 2.14 mmol) en dioxano (3.6 mi, 0.5 M), se añadió ácido 2-fluoro fenil bórico (250 mg, 1.78 mmol), triciclohexil fosfina ( 30 mg, 0.06 eq), carbonato de cesio (867 mg, 1.5 eq.), y tris (dibencilídenacetona)dipalad¡o (32 mg, 0.02 eq). La mezcla de reacción se calentó a 100 °C bajo N2 durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de celita y se concentró. La purificación por MPLC utilizando una columna biotage 40 M, eluyendo con acetato de etilo al 5-40 % /hexanos, dio lugar al compuesto del título como un sólido blanco (333 mg, 59 %).

Etapa final A una solución de 2-cloro-4-(2-fluorofenil)-6,7-dimetoxiquinazolina (287 mg, 0.9 mmol) en etanol (2 mi, 0.5 M), se añadió piperazina (386 mg, 5 eq). La mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se concentró y purificó mediante MPLC utilizando una columna biotage 25M, eluyendo con metanol al 0-15 %/cloroformo con hidróxido amónico al 0.5 % proporcionando el compuesto del título como un sólido amarillo (231 mg, 71 %). Masa obtenida: (APCI m/z = 369.1742 para C20H22N4O2F. Peso molecular calculado 369,1727).

Preparación de 2-[4-(4-Piridin-4-il-2H-pirazol-3-il)-fenoximetill-quinolina (Compuesto IVA): IVA Etapa 1 A una solución de 2-clorometil quinolína (2 g, 9.3 mmol) en acetona (47 mi, 0.2 M) se añadieron éster metílico del ácido 4-hidroxi benzoico (1.42 g, 1.0 eq) y carbonato potásico (3.86 g, 3 eq). La mezcla de reacción se calentó a 60 °C durante 16 horas bajo atmósfera de N2, se enfrió a temperatura ambiente y se vertió en hidróxido sódico 1 N (50 ml)/acetato de etilo (100 mi). Las fases se separaron y la fase orgánica se secó con sulfato de magnesio, se filtró y se concentró. Se procesó MPLC biotage utilizando un gradiente de acetato de etilo al 5-30%/hexano sobre una columna 40 M proporcionando el compuesto del título como un sólido blanco (1.66g, 61 %). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 8.18 (d, J = 8.7 Hz, 1 H), 8.07 (d , J = 8.3 Hz, 1 H), 7.95 (M,2H), 7.82 (d, J =7.9 Hz, 1 H), 7.74 (dt.J = 7.1 , 1.7Hz, 1 H), 7.62 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.55 (dt, J = 7.9, 1.2 Hz, 1 H), 7.03 (d, J = 9.1 , 2H), 5.41 (s, 2H), 3.84 (s, 3H); MS: (M+ H m/z = 294.2) Etapa 2 A una solución de éster metílico del ácido 4-(Quinolin-2-ilmetoxi)-benzoico (500 mg, 1.7 mmol) en tetrahidrofurano (8.5 mi) y metanol (3 mi), se añadió NaOH 1 N (3.4 mi, 2 eq). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. A la mezcla de reacción se añadieron 50 mi de salmuera y el pH se ajustó a 3 con HCI 1 N proporcionando un precipitado blanco que se filtró y secó proporcionando el compuesto del título como un sólido blanco (463 mg, 98 %). 1H RMN (400 MHZ, DMSO) d 8.39 (d, J=8.3 Mz, 1 M), 7.99 (m,2M), 7.81 (m,2M), 7.76 (dt, J=8.3, 1.7Hz,1 M), 7.64 (d, J=8.3 Mz, 1 M), 7.60 (dt, J=7.9, 1.3 Mz, 1 M), 7.12(m,2M), 5.41 (s,2M); MS <8M+H m/z=280.2).

Etapa 3 A una solución de ácido 4-(Quínolin-2-ilmetoxi)-benzoico (25.98 g, 93 mmol) se añadieron 250 mi de cloruro de tíonilo bajo N2. La mezcla de reacción se agitó durante 3 horas y el exceso de cloruro de tionilo se eliminó al vacío. El cloruro de ácido se disolvió en tetrahidrofurano (450 mi) y se añadió lentamente trietilamina ( 50 mi, 4 eq). Se añadió clorhidrato de O,N-dimetil hídroxil amina (27 g, 3 eq) y la reacción se agitó durante 18 horas, La mezcla de reacción se situó en un rotavapor eliminando el disolvente, se repartió entre NaOH 1 N y cloruro de metileno, se separó, se secó con sulfato de magnesio, se filtró y se concentró. El producto en bruto se filtró a través de gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 30 -70 %/ hexano dando lugar al compuesto del título como un aceite de color pardo (26.26 g, 87 %); 1H NMR (400 MHz, CDCI3) 58.17 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 8.06 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.81 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.67 (m, 3H), 7.63 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.52 (m,1 H), 7.01 (M, 2H), 5.39 (s, 2H), 3.52 (s,3H) 3.31 (s, 2H); MS: (M+H m/z=323.2).

Etapa 4 A una solución de diisopropilamiduro de litio (1.0 M) en tetrahidrofurano se añadió 4-picolin gota a gota (7.55 mi, 5 eq) a 0°C bajo N2.

Después de 30 minutos, el anión se sometió a enfriamiento hasta -78°C. En un matraz separado de fondo redondo, se disolvió N-Metoxi-N-metil-4- (quínolin-2-ílmetoxi)-benzamida (5.0, 15.5 mmol) en tetrahidrofurano (77 mi, 0.2 M) y se sometió a enfriamiento hasta -78 °C bajo N2. 1.2 eq del anión 4-pícolina se añadieron gota a gota a la solución de amida. Después de 45 minutos, se añadió 1 eq más del anión 4-picolina. Después de 30 minutos adicionales, se añadió gota a gota ácido acético (40 mi) y la reacción se calentó lentamente hasta temperatura ambiente. El producto sólido (sal acetato) se filtró y se repartió entre bicarbonato sódico saturado y diclorometano. Las fases se separaron, se secaron con sulfato magnésico, se filtraron y se concentraron proporcionando el compuesto del título, como un sólido de color tostado (4.41 g, 80 %). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 8.52 (d, J=5.8 Hz, 2H), 8.19 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 8.07 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 7.93 (m, 2H), 7.82 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.75 (m, 1 H), 7.61 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.54 (dt, J= 7.9, 1.0 Hz, 1 H), 7.23 (m,2H) 7.07 (m,2H), 5.42 (s, 2H), 4.19 (s, 2H); MS: (M+H m/z=355.2) Etapa 5 A 2-piridin-4-il-1-[4-(quinolin-2-ilmetoxi)-fenilj-etanona (4.0 g, 11.3 mmol) se añadió dímetoximetil-dimetil amina (10 mi) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 hora. Se concentró dando un rendimiento cuantitativo del compuesto del título, que se utilizó como tal en la etapa siguiente LC/MS; TR= 1.4 min, MS: (M+ H m/z= 410. 2).

Etapa final A una solución de 3-Dimetilamino-2-pir¡din-4-íl-1-[4-(quinolin-2-ilmetoxi)-fenil]-propenona (9.57 g, 27 mmol) en metanol se añadió hidracina hidrato (3.33 g, 40.5 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 hora. El disolvente se evaporó proporcionando un sólido blanco. El sólido se lavó con agua y etil éter. El sólido se recristalizó a partir de etanol caliente /acetato de etilo (10 ml/g), dando lugar a 8.34 g del compuesto del título (IVA:82%). 1H NMR (400 MDz, DMSO) d 8.41 (m, 3H) 8.16 (s, 1 H), 7.97 (m,2H), 7.86 (s, 1 H), 7.75 (t, J= 7.9 Hz, 1 H); 7.68 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.60 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 7.33 (m,2H), 7.18 (m, 2H) 7.15 (d,J=8.3 Hz, 1 H), 5.38 (d, J=13.7 Hz, 2H); MS: (M+H m/z= 379.2).

Procedimientos A ratones con genes de PDE10 inactivados (-/-) machos emparejados por edades (Publicación de Patente de EE.UU.) n° 20003/0121069) (n= 20) y a controles de compañeros de carnada (+/+) de tipo salvaje (n= 20), se les dejó aclimatarse durante 2 semanas antes del comienzo del estudio y se les permitió acceso libre a agua y a pienso Purina 5001 para roedores (Purina, Brentwood, MO). Los ratones se alojaron individualmente y se dividieron en dos grupos: un grupo de control, que permaneció con el pienso de Purina 5001 ; y otro grupo que se cambió a una dieta compuesta de un porcentaje de grasa de 45 kcal % (D12331 Rodent Diet, research Diets, Inc., New Brunswick, NJ) durante las 6 semanas que duró el estudio. La ingesta del alimento se midió en ciclos de 24 horas, 5 días a la semana, (lunes-viernes). Se determinó el peso corporal en el día 0 y a partir de entonces al mismo tiempo que se medía la ingesta alimentaria. La composición corporal se analizó en el día 0 y después de la sexta semana del estudio, utilizando instrumentación PlXImus™ (GE Lunar Corporation, Madison, Wl). Para evaluar la masa de depósito adiposo, se obtuvieron imágenes radioscópicas de 360 ° de los ratones, utilizando un micro sistema de tomografía computarizada (CT), disponible comercialmente (MicroCAT™ , Im Tek Inc., Oak Ridge, TN) con un detector con pantalla CCD/fósforo de alta resolución. El escáner estaba constituido por un campo visual diametral/longitudinal cilindrico de 36 mm/36 mm con una resolución espacial de menos de 50 µM. La fuente de rayos X fue sesgada a 40 KeV con la corriente anódica fijada en 0.4 mA. Los ratones anestesiados se situaron en un lecho radiotransparente para el ratón en una posición supina anatómicamente correcta, con el extremo caudal lo más cercano al micro sistema CT con el extremo rostral mantenido en su lugar contra el tubo de suministro de anestesia. Se obtuvo una imagen radiográfica inicial a 90° respecto al plano del lecho del ratón, para permitir corregir la posición del ratón centrando el área de adquisición del barrido al nivel de la cresta ilíaca de cada ratón. Una vez que se aseguró el alineamiento correcto, se llevó a cabo el barrido de cada animal. Cada barrido estaba constituido por 196 proyecciones individuales con un tiempo de exposición de 250 µs/proyección; el tiempo total de obtención de las imágenes fue aproximadamente de 12 minutos con una resolución de 145 µM. La reconstrucción de la imagen, por medio de la cual las 196 proyecciones obtenidas en el rastreo de micro CT del ratón se manipularon para producir imágenes de la sección transversal bidimensionales del ratón, se llevó a cabo utilizando el Software Micro CATR de Reconstrucción, Visualización y Análisis (Im Tek Inc., Oak Ridge, TN) (Paulus et al., Neoplasia 2:62-70, 2000). Dos conjuntos de imágenes reconstruidas por barrido se generaron para cada ratón, para la determinación de la masa individual del depósito de grasa. El primer conjunto de seis imágenes reconstruidas proporcionó un montaje para el análisis de las masas de depósitos tisulares adiposos inguinales y del epidídimo. El segundo conjunto de reconstrucción estaba constituido por 9 cortes, determinados por marcas intervertebrales y vertebrales medias, y se utilizó para determinar las masas de depósitos tisulares adiposos retroperitoneales y mesentéricos. Para el análisis de las imágenes, las imágenes de mapas de bits reconstruidas se convirtieron a imágenes TIFF. Las imágenes TIFF fueron analizadas a continuación, determinándose las masas de depósitos de grasa utilizando software Scion Image para WindowsR (Scion Corporatio, Frederik MD). Las líneas de demarcación separando los depósitos individuales de grasa se situaron utilizando la herramienta "pincel" (tamaño de píxel n°3) y se determinaron los recuentos totales de píxeles de cada región adiposa mediante el software de Scion Image. Se escogió en este estudio un umbral de intensidad de píxel superior e inferior, determinándose como óptimos unos valores de búsqueda (LUT) de 115-187 para la captura del depósito adiposo. Se calculó el número promedio de pixeles entre cada corte (corten+ corten + 1)/2). El número total de pixeles, representando los depósitos individuales de grasa, se calculó multiplicando el número promedio de pixeles entre cada corte por el número promedio de pixeles de cada corte. Finalmente, el recuento de píxeles se convirtió en masa de depósito con la ecuación siguiente: Masa de depósito (mg)= 0.000915g/µl x 0.000757 µl/voxel x 1000 mg/g x recuento de voxeles. El primer factor corrige la densidad relativa del gliceril trioleato, representativa de la densidad de la forma primaria de almacenamiento de los lípidos en el tejido adiposo, es decir, triglicéridos. El segundo factor es el volumen por píxel y el tercer factor convierte la masa resultante en unidades mg. Después de la determinación de la composición corporal, se determinaron el gasto de energía y el consumo de oxígeno utilizando un sistema Oxymax (Columbus Instruments, Columbus, OH). Se albergaron los ratones en condiciones estándar de laboratorio y se mantuvieron con la dieta experimental. Se aclimataron los ratones a cámaras selladas (20.32 cm x 10.16 cm x 13.97 cm) del calorímetro (un ratón por cámara). Se dispusieron las cámaras en controladores de actividad. Se calibró el calorímetro antes de cada uso, se ajustó el flujo de aire a 1.6 l/min, y se fijaron los tiempos de ajuste y muestreo del sistema a 60 segundos y 15 segundos, respectivamente. Se midieron el consumo de oxígeno, la producción de dióxido de carbono y la actividad ambulatoria cada 10 minutos durante un periodo de 4 horas. Se realizó un ensayo de tolerancia a la glucosa oral después del final de la octava semana del estudio en ratones aproximadamente a las 8:30 AM después de una noche de ayuno. Se recogieron muestras de sangre retroorbital a tiempo cero, y después se administró una carga de glucosa oral de 2 g/kg de peso corporal. Se recogieron muestras de sangre adicionales a 30. 75 y 120 minutos después de la aplicación de glucosa. Se añadieron 25 µl de sangre a 100 µl de solución salina heparinizada al 0.025% en microtubos (Denville Scientific, Inc., Metuchen, NJ). Se centrifugaron los tubos al ajuste más alto en una Microfuge® 12 (Beckman Coulter, Fullerton, CA) durante 2 minutos. Se recogió el plasma para determinación de glucosa plasmática, como se describe detalladamente a continuación. La mañana del último día del estudio, se determinaron los pesos corporales y temperaturas corporales internas, y después se tomaron muestras de sangre a través del seno retroorbital para determinación de glucosa, triglicéridos, colesterol y ácidos grasos libres plasmáticos. Se sacrificaron después los ratones y se recogió aproximadamente 1 mi de sangre en tubos separadores de plasma Microtainer® con heparina de litio (Becton-Dickinson, Inc., Franklin Lakes, NJ). Se centrifugaron los tubos en una Microfuge 12 Beckman al ajuste máximo durante 5 minutos. Se recogió el plasma en tubos Eppendorf de 1.5 mi y se congeló en nitrógeno líquido. Se retiraron también las almohadillas de grasa epididimal, se pesaron y se congelaron instantáneamente en nitrógeno líquido. Se recogieron también biopsias de hígado y músculo. Se almacenaron todas las muestras a -80°C. Se midieron glucosa, triglicéridos, colesterol, hemoglobina A1c y fructosamina plasmáticos utilizando el analizador químico clínico Roche/Hitachi 912, y suministros del kit del fabricante (Roche Diagnostics Corp., Indianápolis, IN). Se midieron los ácidos grasos libres en plasma (FFA) utilizando el analizador anteriormente descrito con un kit NEFA C (Wako Chemicals USA, Richmond, VA). Se midió el cGMD plasmático utilizando el sistema de enzimoinmunoensayo BioTrak™ (Amersham, Píscataway, NJ). Se evaluaron insulina y leptina plasmáticas mediante una técnica similar utilizando el kit de Insulina Mercodia ELISA y el kit de Leptina mLeptin ELISA, respectivamente; ambos fueron suministrados por ALPCO Diagnostics (Windham, NH). Se cuantíficó la adiponectina plasmática utilizando un kit ELISA de adiponectina de ratón (Lineo Research, St. Charles, MO). Se realizaron todos los ensayos según las instrucciones de cada fabricante.

Consumo de oxígeno Para ensayar los efectos de un inhibidor de PDE10 sobre el peso corporal y el consumo de oxígeno, se utilizó un modelo de ratón de obesidad inducida por dieta (DIO). Se indujo la obesidad en ratones manteniéndoles con una dieta con el 45% de grasa durante más de 14 semanas. Se trataron los ratones DIO con compuesto IVA a una dosis de 15 mg/kg, administrada dos veces al día (oral) durante 14 días. Se administró a los ratones control un vehículo de metilcelulosa al 0.5%. Se realizaron las medidas como se describe anteriormente.

Ensayo de alimentación inducida por ayuno Se ensayó también la eficacia de los inhibidores de PDE10 en la reducción de la respuesta de realimentación aguda después de la supresión de alimento. Se hicieron ayunar ratas CD macho durante una noche. Se administró a las ratas un inhibidor de PDE10 (compuesto HA y IIIA en ensayos separados) 30 minutos antes de la vuelta del alimento. Se controló el consumo de alimento y se pesó en momentos predeterminados, y se comparó el efecto de los inhibidores de PDE10 con ratas control tratadas con vehículo.

EJEMPLO 1 Efecto de la inhibición de PDE10 sobre el peso corporal, la grasa corporal y la velocidad metabólica en ratones alimentados con una dieta rica en grasa (ratones KO) La inhibición de PDE10 como resultado de la alteración de genes de PDE10 en ratones KO PDE10 dio como resultado un fenotipo robusto de resistencia al desarrollo de obesidad mientras se consumía una HFD (dieta rica en grasa). Como se muestra en la Fíg. 1 , los ratones de tipo salvaje con HFD demostraron un aumento del peso corporal comparados con los ratones de tipo salvaje alimentados con pienso, mientras que los ratones KO PDE10 alimentados con HFD mantuvieron un peso corporal comparable a los ratones KO PDE10 alimentados con pienso. Cuando se calculó el peso corporal como el porcentaje del peso de la línea base, el fenotipo resistente a la obesidad de los ratones KO PDE10 alimentados con HFD permanece claramente evidente, como se muestra en la Fig. 2. En contraposición con los ratones de tipo salvaje alimentados con HFD, que exhiben un aumento del peso corporal de aproximadamente 30-35% por encima del peso de la línea base en sólo 7 semanas, los ratones KO PDE10 alimentados con HFD aumentaron sólo 5-10% por encima de su peso de línea base, un aumento comparable al observado tanto en ratones KO PDE10 alimentados con pienso como en ratones de tipo salvaje alimentados con pienso. Los resultados de composición corporal mostrados en la Fig. 3 demuestran que la ganancia de peso experimentada por los ratones de tipo salvaje alimentados con HFD era debida a una adiposidad aumentada. Aunque había cierta ganancia de grasa corporal en los ratones KO PDE10 alimentados con HFD, era drásticamente menor comparada con el grupo de tipo salvaje alimentado con HFD (7% frente a 19% del peso corporal total, respectivamente). Las diferencias en el peso corporal entre los ratones de tipo salvaje alimentados con HFD y KO PDE10 alimentados con HFD no podía explicarse por un consumo reducido de alimento o un nivel de actividad aumentado en los ratones KO PDE10. Los ratones KO PDE10 consumieron la HFD en igual grado, o posiblemente incluso en mayor grado, comparados con los homólogos de tipo salvaje (Fig. 4). Además, los ratones KO PDE10 no exhibieron ningún aumento en el nivel de actividad. Por el contrario, los ratones KO PDE10 exhibieron realmente una tendencia hacia actividad reducida comparados con los ratones de tipo salvaje (Fig. 5). Sin embargo, fueron evidentes cambios en la tasa metabólica en los ratones KO PDE10 alimentados con HFD. El consumo de oxígeno (VO2), medido como VO2 total (Fig. 6) o como VO2 en reposo (Fig. 7) aumentó en los ratones KO alimentados con HFD. El VO2 en reposo se elevó un 19% por encima de los valores para los ratones KO PDE10 alimentados con pienso. Los valores de VO2 en reposo para los ratones de tipo salvaje tanto con HFD como con dieta de pienso eran equivalentes a los ratones KO PDE 10 alimentados con pienso.

EJEMPLO 2 Efecto de la inhibición de PDE10 sobre los parámetros metabólicos en ratones alimentados con una dieta rica en grasa (ratones KO) El Cuadro 1 compara metabolitos plasmáticos (media ±DT) de cada uno de los grupos de tipo salvaje y KO PDE10 alimentados con pienso y alimentados con HFD. Mientras estaban en una dieta con pienso, los ratones KO PDE10 exhibieron un peso de almohadilla de grasa, triglicéridos, FFA y leptina reducidos, así como una tendencia hacia una reducción de la cantidad de colesterol y hemoglobina A1c (HbA1c), comparados con ratones de tipo salvaje alimentados con pienso. Aunque la adiponectina mostró una tendencia hacia la reducción en ratones KO PDE10 alimentados con pienso, cuando se normalizaba a gramos de grasa, la adiponectina aumentaba en los ratones KO PDE10. Cuando se alimentan con una HFD, los ratones KO PDE10, comparados con los de tipo salvaje, demostraron una reducción del peso de almohadilla grasa, triglicéridos, FFA, leptina e insulina. Los ratones KO PDE10 alimentados con DRG demostraron también una tendencia hacia cantidades de colesterol, adiponectina y fructosamina reducidas. Como con los ratones alimentados con pienso, los ratones KO PDE10 alimentados con HFD demostraron también un aumento de adiponectina cuando el valor se normalizaba a gramos de grasa.

CUADRO 1 Metabolitos plasmáticos después de dieta rica en grasa Además de ser los ratones KO PDE10 relativamente resistentes al desarrollo de hiperinsulinemia mientras se alimentan con una HFD, los ratones KO PDE10 eran también relativamente resistentes al desarrollo de intolerancia a la glucosa. Como se muestra en la Fig. 8B, el área bajo la curva para los ratones de tipo salvaje alimentados con HFD era mayor que para los ratones KO PDE10 alimentados con HFD. Esta diferencia en la tolerancia a la glucosa no era evidente cuando se comparaban ratones de tipo salvaje alimentados con pienso y ratones KO PDE10 alimentados con pienso (véase la Fig. 8A).

EJEMPLO 3 Efecto de la administración de inhibidor de PDE10 sobre realimentación inducida por ayuno (ratas CD) Se ensayaron compuesto HA, compuesto IIIA y rimonabant en el ensayo de alimentación inducida por ayuno descrito anteriormente. Se ensayó el compuesto HA a 10 mg/kg, 1 mg/kg y 0.1 mg/kg, se ensayó el compuesto IIIA a 32 mg/kg, 10 mg/kg, 3 mg/kg y 1 mg/kg; y se ensayó rimonabant a 3 mg/kg. Tanto el compuesto HA como el compuesto IIIA fueron eficaces a 10 mg/kg. Tanto el compuesto HA como el compuesto IIIA mostraron que reducían la realimentación inducida por ayuno en las ratas de modo dependiente de la dosis, comparados con un compuesto control (antagonista de CB-1 , rimonabant) que es conocido por promover la pérdida de peso en seres humanos (véanse las Fig. 9A, 9B y 9C).

EJEMPLO 4 Efecto de la administración de inhibidor de PDE10 sobre el peso corporal (ratones DIO) Se trataron ratones DIO con compuesto IVA a una dosis de 15 mg/kg administrada dos veces al día (oral). Se administró a ratones control el vehículo, metilcelulosa al 0.5%. El tratamiento con compuesto IVA condujo a pérdida de peso en los ratones DIO (Fig. 10). El inicio de la pérdida de peso fue después de tres días de tratamiento (evidente el 4o día). Hubo también una pequeña reducción de la toma de alimento en los ratones tratados con compuesto IVA que contribuyó a la pérdida de peso (véase la Fig. 11 ). Se determinó el consumo de oxígeno en los ratones tratados con compuesto IV y con vehículo al final del estudio. Hubo un ligero aumento no significativo de consumo de oxígeno en los ratones tratados con compuesto IV (véase la Fig. 12). Estos resultados indican que un tratamiento crónico con un inhibidor de PDE10A puede tener efectos saludables contra la obesidad. Los resultados de los ejemplos descritos anteriormente demuestran que la inhibición de PDE10 es un medio eficaz de reducción del peso corporal, reducción de la grasa corporal y tratamiento de trastornos asociados a una adiposidad aumentada. Estos resultados demuestran también que los inhibidores de PDE10 son también eficaces para tratar trastornos asociados a NIDDM, intolerancia a la glucosa, resistencia a la insulina y síndrome metabólico, además de reducir el peso corporal, la grasa corporal y tratar trastornos asociados a una adiposidad aumentada. Habiendo descrito la invención como antecede se declara como propiedad lo contenido en las siguientes

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- El uso de un antagonista de fosfodiestereasa 10 (PDE10), en la fabricación de un medicamento para tratamiento de un sujeto para reducir la grasa corporal o peso corporal, o para tratar diabetes no insulinodependiente, síndrome metabólico o intolerancia a la glucosa.

2.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde tiene sobrepeso.

3.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 2, en donde el sujeto es obeso.

4.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el antagonista de PDE10 es un antagonista selectivo de PDE10.

5.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el medicamento está adaptado para ser oralmente administrable.

6.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde el sujeto es un ser humano.

7.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 1 , en donde dicho medicamento está adaptado para ser adicionalmente administrable con un segundo agente terapéutico.

8.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 7, en donde el segundo agente terapéutico es un agente antiobesidad.

9.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 8, en donde el agente antiobesidad se selecciona del grupo constituido por rimonabant, oriistat, sibutramina, bromocriptina, efedrina, leptina, pseudoefedrina, péptido YY3-36 y análogos de los mismos.

10.- Un kit que comprende un antagonista de PDE 10 e instrucciones para administrar el antagonista a un sujeto para reducir la grasa corporal, el peso corporal, o para tratar diabetes no insulinodependiente (DMNID), síndrome metabólico o intolerancia a la glucosa en el sujeto.

11.- El kit de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque el antagonista de PDE10 es un antagonista selectivo de PDE10.

12.- El kit de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado además porque comprende además un segundo agente terapéutico.

13.- El kit de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado además porque el segundo agente terapéutico es un agente antíobesidad.

14.- El kit de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque el agente antiobesidad se selecciona del grupo constituido por rimonabant, oriistat, sibutramina, bromocriptína, efedrina, leptina, pseudoefedrina, péptido YY3-36 y análogos de los mismos.