BEBIDA ESTABLE AL AMBIENTE
Campo de la Invención La presente invención se refiere a una bebida estable al ambiente, particularmente una bebida a base de té, que se conserva por un sistema conservador que comprende ácido cinámico, uno o más aceites esenciales y uno o más adyuvantes de pasteurización que se hacen fungicidas cuando se activan por calor. Antecedentes de la Invención En años recientes, ha existido una elección cada vez más creciente de los consumidores, que desean "apagar" su sed con bebidas de fácil preparación. Muchas de estas están cambiando ahora de las bien conocidas bebidas refrescantes hacia las bebidas a base de té, ya sea carbonatadas o sin carbonatar, y el refrescante "natural" que puedan suministrar. El té contiene una combinación compleja de enzimas, intermediarios bioquímicos y elementos estructurales asociados normalmente con el crecimiento de la planta y la fotosíntesis. También existen muchas substancias naturales que le dan al té su sabor único, astringencia, aroma y color. Muchas de estas se producen por reacciones de oxidación que se presentan durante la etapa denominada de fermentación en la fabricación del té negro. La producción de té se ha
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impulsado por mucho tiempo por métodos tradicionales de procesamiento con solamente un entendimiento fundamental de la química que está involucrada. Como consecuencia, los fabricantes han descubierto que la elaboración de bebidas a base de té estables al ambiente en los volúmenes requeridos para competir con las bebidas refrescantes más tradicionales, no es simplemente un asunto de dar sabor a una bebida refrescante con té. El sabor de una bebida a base de té y su estabilidad se soportan en la estabilidad de la bebida como un todo. Los hongos incluyendo levaduras y mohos que pueden crecer en bebidas a base de té y en otras bebidas refrescantes, se pueden eliminar por tratamiento por calor o al menos controlarse por el uso de conservadores. Algunas bebidas a base de té, están por lo tanto pasteurizadas y se embotellan entonces en vidrio o en recipientes de PET especiales estables al calor. Esto se conoce como "llenado en caliente". Desafortunadamente, esta puede ser una operación costosa que crea un gran problema de desechos que no son ambientalmente amigables. Por lo tanto se ha vuelto más atractivo para los fabricantes, empacar sus productos a base de té en recipientes estándar de PET que pueden ir desde unidades de servicio simple hasta paquetes multiservicios, y mantener la estabilidad del producto usando sistemas conservadores y de sabor hechos a la medida. Esto se conoce como "llenado en
frío" . También es útil en que se puede usar fácilmente un concentrado o polvo de té . Desafortunadamente, el uso de conservadores comunes puede afectar el sabor de una bebida a base de té. Esto es particularmente verdad para el sulfito y el sorbato. Al agregar un sabor fuerte como el limón se puede descompensar el sabor del conservador. Sin embargo, los consumidores están dispuestos a experimentar otros sabores. Además, algunos de esos consumidores que han sido llevados a los productos a base de té, como una alternativa más natural y saludable a las bebidas refrescantes, ven algunas veces a los conservadores como el tipo de aditivo sintético que más bien evitarían. Diversos países tienen reglamentaciones que prohiben el uso de ciertos aditivos para alimentos, incluyendo algunos fungicidas y conservadores en alimentos y bebidas. Las reglamentaciones pueden variar ampliamente, pero hay una clara tendencia para los alimentos que contienen niveles inferiores y más bajos de fungicidas y conservadores químicos, particularmente los sintéticos. De esta manera, hay una necesidad de bebidas a base de té favorablemente con sabor, estables al ambiente, que tengan niveles bajos de conservadores sintéticos. En respuesta a esa necesidad, los inventores actuales han desarrollado ahora una bebida a base de té estable al
ambiente, que se conserva por un sistema conservador que comprende ácido cinámico, uno o más aceites esenciales y uno o más adyuvantes de pasteurización que se hacen fungicidas cuando se activan por calor. Las bebidas que no tienen una base té, que incluyen bebidas de frutas y bebidas refrescantes se pueden estabilizar de una forma similar. Breve Descripción de la Invención La invención puede decirse en términos amplios, como que se refiere a una bebida estable al ambiente, tal como una bebida a base de té, que se conserva por un sistema conservador que comprende ácido cinámico, uno o más aceites esenciales y uno o más adyuvantes de pasteurización que se hacen fungicidas cuando se activan por calor. La bebida preferiblemente de 1 a 175 ppm de ácido cinámico, 1 a 100 ppm de al menos un aceite esencial y el adyuvante de pasteurización, está presente en una concentración de 1 a 100 ppm. Cuando la bebida es una bebida a base de té, contiene preferiblemente de 0.01 a 3% de sólidos de té especialmente alrededor de 0.14%. El adyuvante de pasteurización, es preferiblemente una substancia que no tiene una actividad fungicida apreciable a una temperatura entre 0 y 40 °C, especialmente entre 20 y 35DC, pero muestra una actividad fungicida cuando se calienta a una temperatura entre 40 y 65°C, especialmente entre 45 y
Los adyuvantes de pasteurización particularmente preferidos incluyen acetato de decilo, ácido láurico, aldehido láurico, alcohol láurico, 2-dodecenal, 2-decenoato de etilo, geranilo acetona, acetato de geranilo, que están preferiblemente presentes, en una concentración no superior a 1 mM, preferiblemente no mayor de 0.1 mM. La invención también se puede decir que se refiere a un método para la preparación de una bebida a base de té estable al ambiente, adecuada para el llenado en frío que comprende agregar ácido cinámico, uno o más aceites esenciales y uno. o más adyuvantes de pasteurización, que se hacen fungicidas cuando se activan por calor. La "bebida" para los propósitos de la presente invención, significa cualquier bebida diferente al agua, e incluye bebidas refrescantes, bebidas de frutas, bebidas de base café y bebidas a base de té. El "aceite esencial" para los propósitos de la presente invención, incluye cualquiera de los aceites volátiles en plantas que tienen el olor o sabor de la planta de la cual se extraen. También incluye uno o más de los componentes de ese aceite, que son responsables del, o que al menos contribuyen al, olor o sabor de esa planta. El "té" para los propósitos de la presente invención, significa material en hojas de la Camellia sinensis variedad sinensis o Camellia sinensis variedad assamica . "Té" también
se pretende que incluya el producto de la mezcla de dos o más de algunos de esos tés . Para evitar la duda de la palabra "comprende" , se pretende que signifique incluyendo pero no necesariamente "que consiste de" o "que se compone de". En otras palabras, las etapas u opciones enlistadas no necesitan ser exhaustivas . Excepto en los ejemplos de operación y comparativos, o donde se indica de otra manera explícitamente, todos los números en esta descripción indican cantidades o concentraciones de material, que se deben entender como que se modifican por la palabra alrededor. Breve Descripción de los Dibujos La figura 1, es una gráfica de peso molecular y de valores logPoct de diversos adyuvantes de pasteurización, que permiten el pronóstico de los adyuvantes de pasteurización preferidos . Las figuras 2a y 2b muestran la prevención del crecimiento de levadura por niveles bajos del adyuvante de pasteurización, acetato de decilo, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 3a y 3b muestran la prevención del crecimiento de la levadura por niveles bajos del adyuvante de pasteurización, ácido láurico, aplicado en un té listo para
tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 4a y 4b, muestran la prevención del crecimiento de la levadura por niveles bajos del adyuvante de pasteurización, alcohol láurico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico . Las figuras 5a y 5b, muestran la prevención del crecimiento de la levadura por niveles bajos del adyuvante de pasteurización, acetato de decilo + ácido láurico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 6a y 6b, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, acetato de decilo, en combinación con un componente de aceite esencial, alcohol cúmico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador ácido cinámico. Las figuras 7a y 7b, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, ácido láurico, en combinación con un componente de aceite esencial, alcohol cúmico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 8a y 8b muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, alcohol láurico, en combinación con un componente de aceite esencial, alcohol cúmico, aplicado en un
té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 9a y 9b, muestran el efecto de los adyuvantes de pasteurización mezclados, acetato de decilo más ácido láurico, en combinación con el componente de aceite esencial, alcohol cúmico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 10a y 10b, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, acetato de decilo en combinación con un componente de aceite esencial, dimetil acetal citral, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras lia y llb, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, ácido láurico en combinación con un componente de aceite esencial, dimetil acetal cítral, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 12a y 12b, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, alcohol láurico en combinación con un componente de aceite esencial, dimetil acetal citral, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 13a y 13b, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, acetato de decilo + ácido láurico en
combinación con un componente de aceite esencial, dimetil acetal citral, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador ácido cinámico. Las figuras 14a y 14b, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, acetato de decilo en combinación con los componentes de aceite esencial, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 15a y 15b, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, ácido láurico, en combinación con los componentes de aceite esencial, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 16a y 16b, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, alcohol láurico, en combinación con los componentes de aceite esencial, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 17a y 17b, muestran el efecto de los adyuvantes de pasteurización, acetato de decilo + ácido láurico, en combinación con los componentes de aceite esencial, dimetil acetai citral y alcohol cúmico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 18a y 18b muestran el efecto del adyuvante
de pasteurización, acetato de decilo en combinación con los componentes del aceite esencial, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado en una bebida refrescante sintética en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 19a y 19b, muestran el efecto del adyuvante de ' pasteurización, ácido láurico en combinación con los componentes del aceite esencial, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado en una bebida refrescante sintética en combinación con el conservador, ácido cinámico. Las figuras 20a y 20b, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, acetato de decilo en combinación con los componentes del aceite esencial, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador ácido sórbico. Las figuras 21a y 21b, muestran el efecto del adyuvante de pasteurización, acetato de decilo en combinación con los componentes del aceite esencial, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado en un té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador ácido benzoico. Las figuras 22a y 22b, muestran el efecto de los diversos adyuvantes de pasteurización aplicados a 0-100 ppm en una bebida refrescante sintética, con un contenido cero de té. La figura 23 muestra el efecto de la temperatura en el adyuvante de pasteurización, acetato de decilo, aplicado a 0-200 ppm en un té listo para tomar, 0.14% de té.
La figura 24 muestra el efecto de la temperatura en el adyuvante de pasteurización, ácido láurico, aplicado a 0-200 ppm en un té listo para tomar, 0.14% de té. Descripción Detallada de la Invención La bebida estable al ambiente de la presente invención, se conserva por un sistema conservador que comprende ácido cinámico, uno o más aceites esenciales y uno o más adyuvantes de pasteurización que se hacen fungicidas cuando se activan por calor. Ácido cinámico El ácido cinámico (ácido 3 -fenil-2 -propenoico) es un agente saborizante bien conocido para pasteles, bebidas, goma de mascar y helado. Se deriva de la canela, que se ha agregado por mucho tiempo a los alimentos, y se utiliza en la mayoría de los países como un saborizante útil e inocuo. Cuando se disuelve en una bebida a base de té, el ácido cinámico imparte un olor moderadamente resinoso que se parece a la miel y a las flores con un sabor a especias, débil y dulce. Es evidente un efecto saborizante a concentraciones arriba de alrededor de 10 ppm. A concentraciones arriba de 30 ppm el sabor se hace particularmente fuerte. Un beneficio adicional es la supresión de notas indeseables de conservador a partir de químicos tales como los ácidos sórbico y benzoico. De los dos estereoisómeros que existen, el isómero trans es más comúnmente de interés para su uso como
saborizante. Al ácido cinámico se le dio un status GRAS (esto es que se reconoce generalmente como seguro) por la FEMA (Asociación de Fabricantes de Extractos Saborizantes) en 1965. Aunque no existe legislación en la Unión Europea, que evite o limite el uso del ácido cinámico en alimentos o bebidas, el uso máximo normal que se ha estado previamente de acuerdo dentro de la industria es de 31 ppm. Más recientemente 174.9 ppm se ha permitido para las bebidas no alcohólicas. Se conocen diversos derivados del ácido cinámico y se usan en la industria de alimentos. Estos incluyen p-dimetilamino-cinamato, cinamaldehído, acetato de cinamilo, alcohol de cinamilo, benzoato de cinamilo, cinamato de cinamilo, formiato de cinamilo, isobutirato de cinamilo, isovalerato de cinamilo y fenilacetato de cinamilo. Para los propósitos de esta invención, se puede substituir o combinar ácido cinámico con uno o más de sus derivados aunque se necesitarían considerar las concentraciones requeridas para alcanzar los resultados deseados en cualquier impacto en el aroma y el sabor. Aunque no se desea apegarse a la teoría, los inventores actuales creen que el ácido cinámico trabaja como un compuesto activo en la membrana, que un pH bajo incrementa la concentración del ácido cinámico soluble en la membrana, esto es, no funciona como un conservador ácido débil clásico.
La bebida de la presente invención, contiene preferiblemente de 1 a 175 ppm de ácido cinámico, más preferiblemente de 1 a 60 ppm y más especialmente de 1 a 30 ppm. Aceite esencial Los inventores probaron un gran número de antimicrobianos, y encontraron los siguientes por ser adecuados para su uso en el sistema de conservadores de la presente invención. La concentración mínima inhibitoria (MIC por sus siglas en ingles) se da para cada compuesto.
Tabla I : Aceites Esenciales Preferidos COMPUESTO MIC (ppm)
Bencil-4-hidroxibenzoato 68 4-tert-butilciclohexanona 462 Carvona 300 Cinamaldehído 66 Citral 228 Dimetil acetal citral 198 Citronelol 125 Alcohol cúmico 450 Ácido ciclohexanbutírico 68 Acetato de 2-ciclohexiletilo 102 Trans, trans-2 , 4-decadienal 8 Decanal 47 Decanol 24
Dihidrocarveol 540
3 , 7-dimetil-l-octanol 15.8
Ciclohexanpropionato de etilo 184
Piruvato de etilo 1392
Etil vainillina 249
Jasmona 246 o-Metoxicinamaldehído 130
Metil antranilato 310 a-Metil-trans-cinamaldehído 58.4
Metil eugenol 356
Nonanoato de Metilo 90
2-Metil -2 -pentenal 1274
-Metil-2-fenil-2-hexenal 162
Salicilato de metilo 152
Acetato de 4-metil-5-tiazoletanol 1110
Mirtenol 137
Neomentol 156
Ácido nonanoico 63
Lactona ?-nonanoica 63 d-Octalactona 568
Ácido octanoico (caprílico) 115
I-Octanol 247
1-Fenil - 1 , 2 -propanodiona 222
Acetato de piperonilo 242
Benzoato de propilo 66 Pulegona 152 Aldehido sórbico (2 , 4-hexadienal) 86 Terpinen-4-ol 616 Tolualdehido 240 ?-Undecalactona 28 Undecanal 34 1-Undecanol 14 Vainillina 1216
El sistema conservador contiene preferiblemente de 1 a 100 ppm de al menos un aceite esencial. Más preferiblemente, el sistema conservador contiene de 1 a 50 ppm de al menos un aceite esencial, más especialmente de 1 a 32.5 ppm. Algunos de los aceites esenciales antes mencionados, se encuentran particularmente preferidos con respecto a su impacto en el perfil de sabor de las bebidas a base de té que los contienen. Estas se enlistan en la tabla II a continuación. En cada caso, la concentración mínima inhibitoria respectiva (MIC) y su concentración específica preferida también se dan.
TABLA II Aceites esenciales particularmente preferidos COMPUESTO MIC (ppm) Conc (ppm)
Ácido cinámico 148 1-60
Citral 228 1-30 Dimetil acetal citral 198 1-30 Alcohol cúmico 450 1-40 Trans, trans-2 , 4-decadienal 8 1-20
3 , 7-Dimetil-l-octanol 15.8 1-20
Piruvato de etilo 1392 1-40
Mirtenol 137 1-20
Acetato de piperonilo 242 1-20
Adyuvantes de pasteurización activados por calor La pasteurización describe el proceso de la inactivación de enzimas y la reducción de la población de microorganismos, que sucede cuando una bebida se calienta a una temperatura mínima entre 62.5 y 100°C por un periodo dado. Se obtiene una mejor pasteurización al usar temperaturas superiores y tiempos de tratamiento más extensos. En contraste con esto, la presente invención se plantea a partir del hallazgo de que ciertas substancias químicas que no se refieren generalmente por tener alguna actividad fungicida apreciable a, o cerca de, la temperatura ambiente, muestran de hecho una actividad fungicida cuando se calientan hasta alrededor de 50°C. Esto
significa que las bebidas que contienen tales compuestos, se pueden calentar hasta una temperatura de alguna forma inferior a 65°C, y se puede reducir todavía la población de microorganismos hasta niveles que se esperaría que alcancen la pasteurización. Así, los compuestos químicos se pueden describir como adyuvantes de la pasteurización. Pero a diferencia de los métodos basados en pasteurización para estabilizar bebidas, el desempeño del método actual no depende del tiempo o la temperatura. Los inventores actuales, encontraron inicialmente que los compuestos tales como el acetato de decilo, ácido láurico y decenoato de metilo, no tienen actividad fungicida a 30°C, y aún muestran una actividad fungicida importante cuando se calientan a 50°C. Esto los lleva a probar otros compuestos que no tienen actividad fungicida a 30°C. Se encuentra que los compuestos enlistados en la tabla 1 a continuación, muestran de hecho una actividad fungicida importante cuando se calientan a 50 °C. En la tabla, la concentración mínima inhibidora (MIC) se da para cada compuesto así como el peso molecular (P.M.), el logPoc y la calificación de su importancia. Un compuesto se refiere como que es de alta importancia, sí se requiere una concentración baja para mostrar una actividad fungicida substancial. El logPoct, que es el logaritmo del coeficiente de partición del compuesto relevante en octanol, y así una medida de su actividad funguicida, se determinó usando un
programa de cómputo CHEMDRAW™ del paquete de programas de cómputo CHEMOFFICE ULRA ENHANCED 2000™ (versión 5.5) que está comercialmente disponible de CambridgeSoft . TABLA 1 Compuestos que muestran actividad fungicida a 50°C pero no a 30°C COMPUESTO MIC50 (pM) P.M. logPoct Importancia
Ciclohexappropionato de 196 3.49 Alta alilo Hexanoato de amilo 2 186 3.88 Alta Octanoato de amilo 60 214 4.79 Moderada
Benzoina 10 212 2.53 10 Benzoato de bencilo 20 212 3.00 Moderada
Salicilato de bencilo 50 228 2.61 Baja Acetato de bornilo 2 196 2.66 Baja Heptanoato de butilo 5 186 3.88 Alta Laurato de butilo 100 256 6.16 Baja 10-Undecanoato de butilo 40 240 5.46 Moderada
Propionato de carvilo 5 208.3 2.81 Moderada ß-cariofileno 70 204 - Baja Acetato de decilo 1 200 4.34 Alta Butirato de decilo 70 228 5.25 Baja Propionato de decilo 50 214.35 4.79 Alta 2-Dodecenal <0.05 (9 182 4.44 Alta ppm)
Decanoato de etilo 40 200 4..34 Alta
2-decenoato de etilo 1 198 4. .16 Alta
Laurato de etilo 80 228 5. .25 Moderada
Nonanoato de etilo 10 186 3. .88 Alta
Tridecanoato de etilo 100 242 5. .71 Baja
Uhdecanoato de etilo 50 214 4, .79 Moderada
-undecenoato de etilo 50 212 4. .55 Alta
Acetato de geranilo 1 196 - Alta
Geranilo acetona 0.5 194 - Alta
Butirato de geranilo 40 224 - Alta
Propionato de geranilo 12 210 - Alta
Butirato de heptilo 2 186 3. .88 Alta w-6-Hexadecalactona 50 252 - Baja
Hexadecanol 100 242 6. .48 Baja
Hexanoato de hexilo 30 201 4. .34 Alta
Octanoato de hexilo 10 228 5, .25 Moderada
Hexanoato de isoamilo 5 186 3. .63 Alta
Laurato de isoamilo 120 270 6, .37 Baja
Salicilato de isoamilo 15 208 2. .71 Moderada
Ácido láurico 0.1 (20 200 4. .49 Alta ppm) Alcohol láurico 0.1 (18.6 186 4. .66 Alta ppm) Aldehido láurico 0.2 (36 184 4, .61 Alta - ppm)
Acetato de laurilo 40 228 5.25 Moderada Acetato de linalilo 10 196 2.78 Moderada Propionato de linalilo 20 210 3.43 Moderada Decanoato de metilo 2 186 4.05 Alta Laurato de metilo 40 214 4.96 Alta Miristato de metilo 60 242 5.88 Baja Nonanoato de metilo 2 172 3.6 Alta Undecanoato de metilo 50 200 4.51 Alta 9-undecenoato de metilo 40 198 3.79 Alta Miristaldehído 40 212 5.53 Moderada Ácido mirístico 50 228 5.41 Alta Nerolidol 1.5 222 4.08 Alta Butirato de nerilo 50 224 2.88 Moderada Isobutirato de nerilo 30 224 3.94 Alta Acetato de nonilo 5 186 3.88 Alta Butirato de octilo 40 200 4.34 Alta -pentadecalactona 60 240 - Baja Ácido pentadecanoico 80 242 5.86 Baja Pentadecanol 75 228 6.03 Baja Hexanoato de fenetilo 10 220 3.99 Alta Octanoato de fenetilo 40 248 4.90 Moderada Isobutirato de 2- 0.1 226 5.04 Alta fenoxiletilo Tetradecanol 50 214 5.57 Moderada Tridecanal 200 5.07 Alta
Ácido tridecanoico 0.2 214 4.95 Alta
Tridecanol 0.05 198 5.11 Alta
2-tridecenal <0.05 (9.8 196 4.90 Alta ppm) 2-undecanona 1 170 3.68 Alta
Muchos de los adyuvantes de pasteurización denominados, proporcionarán una actividad fungicida efectiva cuando se calientan a 50°C o a alguna otra temperatura debajo de 65°C. Sin embargo, ciertos compuestos pueden probar ser más adecuados que otros en términos de su efecto en el sabor de la bebida a base de té. De conformidad con los inventores actuales, se han identificado los siguientes compuestos por ser adyuvantes preferidos de la pasteurización para su uso en el método de la invención: ciclohexanpropionato de alilo, hexanoato de amilo, heptanoato de butilo, acetato de decilo, propionato de decilo, 2-dodecenal, decanoato de etilo, 2-decenoato de etilo, nonanoato de etilo, 10-undecenoato de etilo, acetato de geranilo, geranilo acetona, butirato de geranilo, propionato de geranilo, butirato de heptilo, hexanoato de hexilo, hexanoato de isoamilo, ácido láurico, alcohol láurico, aldehido láurico, decanoato de metilo, laurato de metilo, nonanoato de metilo, undecanoato de metilo, 9-undecenoato de metilo, ácido mirístico, nerolidol, isobutirato de nerilo, acetato de nonilo, butirato de octilo,
hexanoato de fenetilo, isobutirato de 2-fenoxiletilo, tridecanal, ácido tridecanoico, tridecanol, 2-trídecenal y 2-undecanona. Los adyuvantes de la pasteurización están preferiblemente presentes en una concentración no mayor a 1 mM, y especialmente no mayor a 0.1 mM. De esa lista son particularmente preferidos el acetato de decilo, ácido láurico, aldehido láurico, alcohol láurico, 2-dodecenal, 2-decenoato de etilo, geranilo acetona, acetato de geranilo. Aunque no se desea apegarse por la teoría, el modo de acción fungicida de estos adyuvantes de la pasteurización en al menos las bebidas a base de té, se cree que involucran la disrupción de membranas microbianas. Se piensa que a elevadas temperaturas, estos compuestos pueden entrar en membranas y provocar la muerte microbiana por lisis de células. Los inventores postularon que los compuestos antes mencionados, pueden no ser los únicos compuestos que pueden funcionar como adyuvantes de la pasteurización de esta forma. Se pueden definir adyuvantes efectivos de la pasteurización, sobre la base de sus parámetros de Relación de Actividad de Estructura Cuantitativa (QSAR) . Esta definición incluiría los compuestos químicos hasta ahora desconocidos y los conocidos . La lista completa de adyuvantes de la pasteurización antes probados, se gráfico con respecto a su peso molecular y valores logPoct en la figura 1. A partir de esa figura, los
inventores pronostican que los adyuvantes de pasteurización se pueden definir como aquellos que tienen un peso molecular entre 170 y 230 daltones y un valor logPoct entre 3.5 y 5.5. Extracto de té El extracto de té se puede obtener por cualquier medio adecuado. Preferiblemente, las hojas de té se extraen en agua caliente durante en periodo de entre 20 minutos y 5 horas. El extracto se puede secar para formar un polvo, reconstituirse para formar una bebida acida, o concentrarse para formar un jarabe a partir del cual se puede preparar una bebida de base té. Se conoce que el té tiene ciertas propiedades antibacterianas y antivirales en sí mismo. Se puede exceder una concentración de alrededor del 3% para evidenciar que el té comienza a suprimir el crecimiento de levaduras y mohos. A concentraciones inferiores a esto, lo que es típico para las bebidas de base té, el té actúa como un nutriente que aumenta el potencial para el deterioro microbiano. Otros factores La calidad del agua puede dañar seriamente la estabilidad de una bebida. Es un factor importante cuando se hace una bebida a base de té para llenado en frío. Para ese propósito, será a menudo importante minimizar el contenido de levadura del agua usada en todas las etapas de producción. Los métodos conocidos en el arte incluyen
cloración/descloración y radiación por UV. Las bebidas a base de té estables al ambiente de la invención, pueden ser carbonatadas o sin carbonatar. La carbonatación parece proporcionar un efecto conservador en sí mismo, y por lo tanto la formulación de un producto carbonatado no necesita ser igual que uno sin carbonatar. Las bebidas a base de té contienen comúnmente azúcar o algún otro edulcorante para contrarrestar el sabor algunas veces astringente del té. La mayoría de los microbios que pueden crecer típicamente en las bebidas a base de té, florecen en el azúcar, una fuente de nitrógeno, oxígeno, zinc, magnesio, potasio, fosfato y vitaminas. Por lo tanto es ventajoso limitar el contenido de azúcar hasta 8 a 10 grados brix, aunque se pueden usar hasta 60 grados brix cuando el producto es una mezcla de té. El contenido de oxígeno se puede minimizar por la pre-pasteurización o por algún tratamiento térmico o burbujeo con nitrógeno. El contenido mineral de una bebida a base de té se puede minimizar usando EDTA, citrato o un ablandador de agua. Por ejemplo, los microbios pueden crecer en el té si la concentración de los iones magnesio supera 0.2 ppm, y solamente necesitan niveles de trazas de zinc. Si se desea, el sistema conservador puede incluir también ácido ascórbico, un conservador bien conocido para alimentos que se conocen principalmente como vitamina C.
La presente invención también se refiere a un método para la preparación de una bebida a base de té estable al ambiente, adecuada para llenado en frío. El método comprende agregar ácido cinámico, uno o más aceites esenciales y uno o más adyuvantes de pasteurización que se vuelven fungicidas cuando se activan por el calor. El ácido cinámico es soluble libremente en aceites esenciales, benceno, éter, acetona, ácido acético glacial y bisulfuro de carbono. Sin embargo, el ácido cinámico no es fácilmente soluble en té, y no se desearía contaminar a las bebidas a base de té con ninguno de los productos químicos antes mencionados. Aunque el sistema conservador de la presente invención incluye uno o más aceites esenciales, puede ser necesario incluir una etapa potenciadora de la solubilidad, antes de agregar el ácido cinámico a la solución de té. Eso se puede lograr por secado por rocío del ácido cinámico sobre un polvo portador (que puede basarse opcionalmente en azúcar) y agregar el polvo al té, convertir el ácido a su sal, o disolver el ácido cinámico en una cantidad pequeña de solvente orgánico tal como el etanol o el propilenglicol. Se puede rociar en seco el aceite esencial en la misma forma . La bebida estable al ambiente de la presente invención, se describirá ahora en los siguientes ejemplos con referencia a los dibujos anexos.
a los dibujos anexos. EJEMPLO 1. Experimentos de té listo para tomar . Las Figuras 2a/2b muestran la prevención del crecimiento de levadura por baj os niveles del adyuvante de la pasteurización, acetato de decilo , aplicado al té listo para tomar, 0 . 14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico . Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD (por sus siglas en ingles , pH 3 . 4 , que contiene 0 - 12 ppm de acetato de decilo y 0 - 60 ppm de ácido cinámico . Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 10 células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180 - 1B . Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25 °C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes . A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll . El adyuvante de la pasteurización tiene poco efecto a baja terrperatura, 20°C Figura 2a, en el crecimiento de la levadura. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico . Las Figuras 3a/3b muestran la prevención del crecimiento de levadura por baj os niveles del adyuvante de la
pasteurización, ácido láurico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, que contiene 0-12 ppm de ácido láurico y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos. Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de la pasteurización tiene poco efecto a baja temperatura, 20°C Figura 3a, en el crecimiento de la levadura. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sínérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico. Las Figuras 4a/4b muestran la prevención del crecimiento de levadura por bajos niveles del adyuvante de la pasteurización, alcohol láurico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, que contiene 0-12 ppm de alcohol láurico y 0-60
ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de la pasteurización tiene poco efecto a baja temperatura, 20°C Figura 4a, en el crecimiento de la levadura . El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico. Las Figuras 5a/5b muestran la prevención del crecimiento de levadura por bajos niveles del adyuvante de la pasteurización, acetato de decilo + ácido láurico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, que contiene 0-12 ppm de acetato de decilo + ácido láurico (relación 9:1) y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces
cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de la pasteurización tiene poco efecto a baja temperatura, 20°C Figura 5a, en el crecimiento de la levadura . El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico. Las Figuras 6a/6b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, acetato de decilo, en combinación con el componente de aceite esencial, alcohol cúmico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 100 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm de acetato de decilo y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos. Los tubos se incuban después durante
14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 2) . Las Figuras 7a/7b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, ácido láurico, en combinación con el componente de aceite esencial, alcohol cúmico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 100 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm de ácido láurico y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos. Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la
presencia de ácido cinámico y componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 3). Las Figuras 8a/8b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, ácido láurico, en combinación con el componente de aceite esencial, alcohol cúmico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 100 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm de alcohol láurico y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos. Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir la supervivencia de las levaduras al crecimiento. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 4) . Las Figuras 9a/9b muestran el efecto de la mezcla de adyuvantes de pasteurización, acetato de decilo + ácido láurico, en combinación con el componente de aceite esencial,
alcohol cúmico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 100 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm de acetato de decilo + ácido láurico (relación 9:1) y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 5) . Las Figuras 10a/10b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, acetato de decilo, en combinación con el componente de aceite esencial, dimetil acetal citral, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 100 ppm de dimetil acetal citral, 0-12 ppm de acetato de decilo y
0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 10 células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir la supervivencia de las levaduras al crecimiento. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 2 \ . Las Figuras lia/llb muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, ácido láurico, en combinación con el componente de aceite esencial, dimetil acetil citral, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 100 ppm de dimetil acetal citral, 0-12 ppm de ácido láurico y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente
en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y los componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 3) . Las Figuras 12a/l2b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, alcohol láurico, en combinación con el componente de aceite esencial, dimetil acetal citral, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 100 ppm de dimetil acetal citral, 0-12 ppm de ácido láurico y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos. Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un
efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 4) . Las Figuras 13a/l3b muestran el efecto de la mezcla de adyuvantes de pasteurización, acetato de decilo + ácido láurico, en combinación con el componente de aceite esencial, dimetil acetal citral, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 100 ppm de dimetil acetal citral, 0-12 ppm de acetato de decilo + ácido láurico (relación 9:1) y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 10células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor 4- adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y los componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 5) . Las Figuras 14a/l4b muestran el efecto del adyuvante de
la pasteurización, acetato de decilo, en combinación con los componentes de aceites esenciales, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contienen 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 25 ppm de dimetil acetal citral, 35 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm acetato de decilo y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 10 células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y los componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 2) . Las Figuras 15a/15b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, ácido láurico, en combinación con los componentes de aceites esenciales, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada
matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 25 ppm de dimetil acetal citral, 35 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm de ácido láurico y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y los componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 3) . Las Figuras 16a/16b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, alcohol láurico, en combinación con los componentes de aceites esenciales, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 25 ppm de dimetil acetal citral, 35 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm de alcohol láurico y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura
requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y los componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 4) . Las Figuras 17a/17b muestran el efecto de los adyuvantes de la pasteurización, acetato de decilo + ácido láurico, en combinación con los componentes de aceites esenciales, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido cinámico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 25 ppm de dimetil acetal citral, 35 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm acetato de decilo + ácido láurico (relación 9:1) y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-IB. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos
antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos. Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y los componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 5) . EJEMPLO 2. Experimentos de bebidas refrescantes sintéticas . Las Figuras 18a/l8b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, acetato de decilo, en combinación con los componentes de aceites esenciales, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado a la bebida refrescante sintética, en combinación con el conservador, ácido cinámico. La bebida refrescante sintética contiene glucosa, 8% p/v, ácido cítrico 3 g/1, ortofosfato de potasio 1 g/1, cloruro de magnesio 0.1 g/g y extracto de levadura 0.1 g/1. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de bebidas refrescante sintético, pH 3.4, todos contienen 25 ppm de dimetil acetal citral, 35 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm acetato de decilo y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces
cerevísiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y los componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 2) . Las Figuras 19a/19b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, ácido láurico, en combinación con los componentes de aceites esenciales, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado a la bebida refrescante sintética, en combinación con el conservador, ácido cinámico. El bebidas refrescante sintético contiene glucosa, 8% p/v, ácido cítrico 3 g/1, ortofosfato de potasio 1 g/1, cloruro de magnesio 0.1 g/g y extracto de levadura 0.1 g/1. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de bebida refrescante sintética, pH 3.4, todos contienen 25 ppm de dimetil acetal citral, 35 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm de ácido láurico y 0-60 ppm de ácido cinámico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2
minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor 4- adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido cinámico y los componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 3) . EJEMPLO 3. Experimentos con ácido sórbico y ácido benzoico . Las Figuras 20a/20b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, acetato de decilo, en combinación con los componentes de aceites esenciales, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido sórbico. Cada matriz de tubos de 30 ml contiene 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 25 ppm de dimetil acetal citral, 35 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm acetato de decilo y 0-150 ppm de ácido sórbico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos. Los tubos se incuban después durante 14 días a
4
°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor . + adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido sórbico y los componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 2) . Las Figuras 21a/21b muestran el efecto del adyuvante de la pasteurización, acetato de decilo, en combinación con los componentes de aceites esenciales, dimetil acetal citral y alcohol cúmico, aplicado al té listo para tomar, 0.14% de té, en combinación con el conservador, ácido benzoico. Cada matriz de tubos de 30 ml contienen 10 ml de té RTD, pH 3.4, todos contienen 25 ppm de dimetil acetal citral, 35 ppm de alcohol cúmico, 0-12 ppm acetato de decilo y 0-150 ppm de ácido benzoico. Los tubos se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El calor + adyuvante de la pasteurización muestran un
efecto sinérgico combinado notable, aumentado además por la presencia de ácido benzoico y los componentes de aceites esenciales, (comparar con la Figura 1) . EJEMPLO 4. Diversos experimentos con adyuvantes de la pasteurización. Las Figuras 22a/22b muestran el efecto de varios adyuvantes de la pasteurización, aplicados a 0-100 ppm a la bebida refrescante sintética, con cero contenido de té. La bebida refrescante sintética contiene glucosa, 8% p/v, ácido cítrico 3 g/1, ortofosfato de potasio 1 g/1, cloruro de magnesio 0.1 g/g y extracto de levadura 0.1 g/1. Se equilibraron hileras de tubos de 30 ml que contienen 10 ml de bebida refrescante sintética, pH 3.4, a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. Los adyuvantes de la pasteurización tienen un pequeño efecto a baja temperatura en el crecimiento de levadura. Temperatura de 50°C + adyuvantes de pasteurización muestra un efecto sinérgico combinado notable.
EJEMPLO 5. Efecto de la temperatura en los experimentos de adyuvantes de pasteurización . La Figura 23 muestra el efecto de la temperatura en el adyuvante de la pasteurización, acetato de decilo, aplicado a 0-200 ppm del té listo para tomar, 0.14% de té. Hileras de tubos de 30 ml que contienen 10 ml de té RTD, pH 3.4, se equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25°C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de la pasteurización tiene un pequeño efecto a baja temperatura en el crecimiento de levadura como le fue el calor hasta 60 °C, sin adyuvante de pasteurización. El calor 4- adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable. La Figura 24 muestra el efecto de la temperatura en el adyuvante de la pasteurización, ácido láurico, aplicado a 0-200 ppm del té listo para tomar, 0.14% de té. Hileras de tubos de 30 ml que contienen 10 ml de té RTD, pH 3.4, se
equilibran a la temperatura requerida durante 7 minutos en un baño de agua, antes de la inoculación con 104células/ml de la levadura Saccharomyces cerevisiae X2180-1B. Los tubos se mantienen a temperatura durante 2 minutos antes de enfriarlos rápidamente en agua fría durante 5 minutos . Los tubos se incuban después durante 14 días a 25 °C para permitir que crezcan las levaduras supervivientes. A los 14 días, el crecimiento se mide por densidad óptica a 600 nm en muestras diluidas xll. El adyuvante de la pasteurización tiene un pequeño efecto a baja temperatura en el crecimiento de levadura como lo fue el calor hasta 60°C, sin adyuvante de pasteurización . El calor 4- adyuvante de la pasteurización muestran un efecto sinérgico combinado notable. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.