MX2011008717A

MX2011008717A - Analogos de oxintomodulina.

Info

Publication number: MX2011008717A
Application number: MX2011008717A
Authority: MX
Inventors: Joseph M Metzger; Paul E Carrington; George J Eiermann; Donald J Marsh; Alessandro Pocai; Ranabir Sinha Roy; Elisabetta Bianchi; Paolo Ingallinella; Antonello Pessi; Alessia Santoprete; Elena Capito; Richard Dimarchi; Brian Ward
Original assignee: Merck Sharp & Dohme
Priority date: 2009-02-19
Filing date: 2009-12-18
Publication date: 2012-09-28
Also published as: CA2754350C; CN102573872B; ZA201106051B; WO2010096052A1; DK2398483T3; CA2754350A1; US20120165503A1; ES2524477T3; IL214729A; PT2398483E; WO2010096142A1; PL2398483T3; HRP20141215T1; BRPI0924307A2; CN102573872A; PE20120621A1; EP2398483A1; AU2009340439B2; CL2011002036A1; CY1116917T1

Abstract

Se describen análogos de péptido de oxintomodulina (OXM, glucagón-37), que se han modificado para ser resistentes a la segmentación e inactivación por dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV) y para incrementar la vida media in vivo del análogo de péptido mientras que se habilita al análogo de péptido a actuar como un agonista de receptor de GLP-1/glucagón (GCGR) doble. Los análogos de péptido son útiles para el tratamiento de desórdenes metabólicos tales como diabetes y obesidad.

Description

ANÁLOGOS DE OXINTOMODULINA REFERENCIA CRUZADA A SOLICITUDES RELACIONADAS Esta solicitud es una continuación en parte de la Solicitud de Patente Internacional n.° PCT/US2009/034448 presentada el 19 de febrero de 2009, cuyo contenido se incorpora aquí en su totalidad.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN (1) Campo de la invención La presente invención se refiere a los péptidos análogos de la oxintomodulina (OXM, el glucagón-37 ) , que han sido modificados para ser resistentes a la división y a la inactivación de la dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV) y para aumentar in vivo la vida media del péptido análogo al mismo tiempo permitiendo el péptido análogo a actuar como un agonista doble del receptor GLP-l/glucagón (GCGR) , y el uso de péptidos análogos para el tratamiento de trastornos metabólicos como la diabetes y la obesidad. (2) Descripción de la técnica relacionada La hormona oxintomodulina (OXM, glucagón-37) es un producto postraduccional del procesamiento del preproglucagón en el intestino y el sistema nervioso central (SNC) y es secretada por las células L en el intestino en respuesta a la ingesta de alimentos. Descubierta en 1983, la OXM ha sido implicada en la regulación de la ingesta de alimentos y el gasto energético (Jarrouse et al. Endocrinol. 115: 102-105 (1984); Schjoldager et al., Eur. J. Clin. Invest., 18: 499-503 (1988)) . La administración central o periférica de la OXM en ratas produce una disminución en la ingesta de alimentos a corto plazo con mínimos efectos sobre el vaciado gástrico (Dakin et al. Endocrinology, 142: 4244-4250 (2001), Dakin et al. Endocrinology, 145: 2687-2695 (2004)) . La administración repetida intracerebroventricular de la OXM en las ratas resulta en la temperatura central elevada y la reducción en el aumento de peso en comparación con los animales alimentados de a pares, lo que sugiere efectos tanto en la ingesta calórica y el gasto energético (Dakin et al. Am. J.Physiol. Endocrinol. Metab., 283: E1173-E1177 (2002) ) .

En estudios relacionados, la administración periférica de la OXM dosis-dependiente inhibida tanto en la ingesta de comida en inducción rápida y en fase oscura, pero a diferencia del GLP-1, no tuvo ningún efecto sobre el vaciado gástrico. La OXM también redujo los niveles de grelina en ayunas y el aumento de inmunorreactividad de c-fos, en el núcleo arqueado (ARC) . La administración repetida IP de OXM durante siete días causó una reducción en la tasa de ganancia de peso corporal y la adiposidad en ratas (ver Dakin et al. Endocrinology, 145: 2687-2695 (2004) ) .

Los estudios de la acción de la OXM en ratones han demostrado que pese a que la OXM puede activar el glucagón y receptores GLP-1, las acciones anorexígenas de OXM sólo requieren el receptor GLP-1, como ICV OXM inhibe la ingesta de alimentos en ratones knockout receptores de glucagón. Sin embargo, los efectos anorexigenos de la OXM están completamente ausentes en el receptor GLP-1 de los ratones knock-out. Por otra parte, la exendina-4, pero no la OXM, regula el gasto de energía en los ratones. Por lo tanto, la OXM parece ser un agonista débil en el receptor GLP-1, cuando se usa en concentraciones farmacológicas (ver Baggio et al. Gastroenterol . 127: 546-58 (2004)). También se encontró que la OXM también mejora la intolerancia a la glucosa en ratones alimentados con una dieta alta en grasas (Dakin et al., Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 294: E142-E147 (2008) y aumenta la frecuencia cardíaca intrínseca en ratones independiente del receptor GLP-1 (Sowden et al., Am. J. Physiol. Regul. Integr. Com . Physiol. 292: R962-R970 (2007). La OXM también ha demostrado afectar diferencialmente el reclutamiento y señalización de la beta-arrestina del receptor GLP-1 a través de Galpha (Jorgensen et al., J. Pharma. Exp. Therapeut. 322: 148-154 (2007)) y afectar diferencialmente la activación neuronal del hipotálamo después de la inyección periférica de la OXM (Choudhri et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 350: 298-306 (2006)).

En los seres humanos, una sola infusión de 90 minutos por vía intravenosa de OXM en sujetos de peso normal y saludables redujo el grado de hambre y la ingesta de alimentos en una comida tipo buffet en aproximadamente un 19%. La ingesta de calorías acumulada de doce horas se redujo en un 11%, sin informes de náuseas o cambios en la palatabilidad de los alimentos (Cohén et al., J. Clin. Endocrinol. Metab., 88: 4696-4701 (2003); Lykkegaard et al., ADA Scientific Sessions, Abstract #1506-P (2003)). 5 Más recientemente, inyecciones pre-prandial de OXM durante un periodo de cuatro semanas en voluntarios sanos obesos (IMC de 33) condujo a una reducción significativa de la ingesta calórica en el primer día de tratamiento (25%) que se mantuvo a lo largo de el estudio (35% de reducción 10 después de cuatro semanas) (Wynne et al., Diabetes 54: 2390-2395 (2005)). Se observó pérdida de peso sólida al final del estudio en los pacientes tratados (1,9%, corregido por placebo) . Los niveles plasmáticos de OXM fueron similares a los observados en el estudio de 15 perfusión (concentración máxima de aproximadamente 950 pM) .

La ausencia de taquifilaxia y una baja incidencia de náuseas leves y transitorias (alrededor del 3%) a pesar de las relativamente altas dosis necesarias por la estabilidad pobre in vivo de OXM (plasma t 1 2 <12 minutos) hace de 20 esta hormona uno de los pocos blancos de la obesidad tanto de validación humana y un atractivo perfil de tolerabilidad .

OXM tiene una muy corta vida media y se inactiva rápidamente por la dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV) de la 25 superficie celular (Zhu et al., J. Biol. Chem. 278: 22418- 22423 (2002). Sin embargo, los inhibidores de la DPP-IV son de peso neutral en la clínica, lo que sugiere que los niveles de suprafisiológicas de OXM (900-1000 pM) pueden ser necesarios para lograr la pérdida de peso en humanos. Los péptidos análogos de la OXM para inducir la pérdida de peso en los seres humanos han sido objeto de las solicitudes internacional publicadas N ° WO03/022304, WO2004/062685 y WO2006/134340.

La OXM por lo tanto, muestra el potencial como tratamiento para trastornos metabólicos como la diabetes y la obesidad. Sin embargo, a causa de la estabilidad pobre in vivo de la OXM, existe la necesidad de desarrollar análogos de la OXM que pueden ser administrados de forma segura y eficaz para el tratamiento de enfermedades metabólicas como la diabetes y la obesidad. Seria más deseable que se desarrollasen análogos o derivados que se modificasen por la conjugación a fracciones que pudiesen mejorar la estabilidad y la farmacocinética, en particular las modificaciones que confieren resistencia a la división de la DPP-IV. Además, seria deseable proporcionar análogos de la OXM que fuesen capaces de actuar como agonistas dobles de los receptores del receptor GLP-l/glucagón.

COMPENDIO DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona péptidos análogos de la oxintomodulina (OXM, el glucagón-37 ) , que han sido modificados para ser resistentes a la división y la inactivación de la dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV) y para aumentar in vivo la vida media del péptido análogo al tiempo que permite la péptido análogo a actuar como un agonista doble del receptor GLP-l/glucagón (GCGR) , y el uso de tales péptidos análogos para el tratamiento de trastornos metabólicos como la diabetes y la obesidad. En particular, los análogos descritos en este documento reducen la ingesta de alimentos y el peso corporal, aumentan la tasa metabólica, median la secreción de insulina dependiente de la glucosa (GDIS) de los islotes pancreáticos y mejoran la tolerancia a la glucosa, proporcionando asi una opción de tratamiento para las personas afectadas con un trastorno metabólico, tal como el síndrome metabólico, la obesidad, la diabetes, el síndrome metabólico X, la hiperglucemia, la alteración de la glucosa en ayunas, la dislipidemia, aterosclerosis, y otros estados prediabéticos .

Por lo tanto, la presente invención proporciona un péptido que comprende la secuencia de aminoácidos de la oxintomodulina (OX ) un ser humano que se muestra en la SEQ ID NO: 1, en donde el segundo aminoácido de la N-terminal es sustituido por un aminoácido que hace que el péptido sea resistente a la división y a la inactivación por la dipeptidil peptidasa IV, el péptido incluye un lípido o una fracción de colesterol unido covalentemente al péptido; el péptido incluye opcionalmente de una hasta tres sustituciones de aminoácidos, además de la sustitución en la posición 2, y el péptido incluye opcionalmente un grupo protector que, de estar presente, se une al grupo carboxilo terminal del péptido, en el que el péptido es capaz de actuar como un receptor doble GLP-1 y agonista del receptor de glucagón y tiene una vida media sérica superior a vida media sérica de la OXM humana, y las sales farmacéuticamente aceptables de la misma. En otros aspectos, el aminoácido sustituido por el segundo aminoácido de la N-terminal se selecciona del grupo formado por la D-serina y el ácido a-aminoisobutírico .

Se proporciona además un péptido que comprende la secuencia aminoácida de una oxintomodulina (OXM) humana mostrada en la SEQ ID NO: 1, en donde el segundo aminoácido de la N-terminal se sustituye con un aminoácido seleccionado del grupo constituido por la D-serina y -aminoisobutirico ácido, la C-terminal del péptido incluye un residuo de cisteina en el que el grupo tiol de los residuos de la cisteina está covalentemente vinculado a una fracción de colesterol por un ligando hidrofilico, el péptido opcionalmente incluye de uno a tres sustituciones aminoácidas, además de la sustitución en la posición 2; y el péptido incluye opcionalmente un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxilo terminal del péptido, en donde el péptido actúa como un agonista doble del receptor GLP-1 y del receptor del glucagón y tiene una vida media sérica mayor que la vida media sérica de la OXM humana, y las sales farmacéuticamente aceptables de la misma .

Se proporciona además un péptido que comprende la secuencia aminoácida de la oxintomodulina (OXM) humana, como se muestra en la SEQ ID NO: 1, en donde el segundo aminoácido de la N-terminal es sustituido por un aminoácido que hace que el péptido sea resistente a la división y a la inactivación por la dipeptidil peptidasa IV; el péptido incluye un lipido o una fracción de colesterol unido covalentemente al péptido, el péptido incluye una o más sustituciones de aminoácidos en las posiciones de aminoácidos seleccionadas entre el grupo formado por las posiciones 17, 18 y 27; y el péptido incluye opcionalmente un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxilo terminal del péptido, en donde el péptido actúa como un agonista doble del receptor GLP-1 y del receptor del glucagón y tiene una vida media sérica mayor que la vida media sérica de la OXM humana, y las sales farmacéuticamente aceptables de la misma. En otros aspectos, una o más sustituciones aminoácidas seleccionadas del grupo que consiste de ácido glutámico para la arginina en la posición 17, la alanina para la arginina en la posición 18, la norleucina o la O-metil-L-homoserina para la metionina en la posición 27.

Se proporciona además un péptido que comprende la secuencia aminoácida de la oxintomodulina (OXM) humana como se muestra en la' SEQ ID NO: 1, en donde el segundo aminoácido de la N-terminal es sustituido por un aminoácido que hace que el péptido sea resistente a la división y a la inactivación por la dipeptidil peptidasa IV, el péptido incluye un lipido o una fracción de colesterol unido covalentemente al péptido, el péptido incluye opcionalmente de una hasta tres sustituciones aminoácidas, además de la sustitución en la posición 2, el péptido carece de la secuencia aminoácida RNRNNIA (SEQ ID NO: 104), y el péptido incluye opcionalmente un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxilo terminal del péptido, en donde el péptido actúa como un agonista doble del receptor GLP-1 y del receptor del glucagón y tiene una vida media sérica mayor que la vida media sérica de la OX humana, y las sales farmacéuticamente aceptables de la misma .

En otros aspectos, la sustitución aminoácida en la posición 2 es un aminoácido seleccionado del grupo constituido por la D-serina y el ácido cx-aminoisobutírico y la fracción de colesterol está unida covalentemente al grupo tiol de una cisteina por un ligando hidrofilico y el residuo de la cisteina se unen covalentemente a la C-terminal del péptido por un enlace peptidico. En otros aspectos, el péptido incluye, además, una o más sustituciones aminoácidas en las posiciones de aminoácidos seleccionadas entre el grupo formado por las posiciones 17, 18 y 27. En otros aspectos, el péptido incluye, además, una o más sustituciones aminoácidas seleccionadas entre el grupo formado por arginina en la posición 17 al ácido glutámico, arginina en la posición 18 a la alanina, metionina en la posición 27 a la norleucina o O-metil-L-homoserina .

En otros aspectos de cualquiera de los péptidos anteriores, el péptido incluye una fracción de colesterol unida covalentemente al grupo tiol de un residuo de cisteina en el extremo C-terminal del péptido. En ciertos aspectos, la fracción de colesterol es covalentemente al grupo tiol por un ligando hidrofilico. El ligando hidrófilo puede ser un péptido o polímero, tal como un polímero etoxi que incluye de una a diez unidades etoxi . En otros aspectos, el ligando es un polímero hidrofilico etoxi que incluye cuatro unidades etoxi. En otros aspectos del péptido, el péptido incluye una fracción lipídica covalentemente unidos al grupo e-amino de un residuo de lisina covalentemente unido a la C-terminal del péptido, lo que en realizaciones particulares es un palmitoil. En otras realizaciones, el residuo de lisina está vinculado a la C-terminal del péptido por medio de una fracción ligando. En ciertos aspectos, la fracción ligando incluye uno o más residuos del ácido gamma-glutámico y en otros aspectos, la fracción ligando es el ácido l-amino- , 7, 10-tioxo-13-tridecanamín succinímico .

Se proporciona además un péptido análogo de la OXM seleccionado de los péptidos análogos que se presentan en las tablas 1 y 2 y el uso de uno más de los péptidos análogos de la OXM que se presentan en la Tabla 1 y Tabla 2 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno metabólico.

Se proporciona además un análogo de péptido que comprende la estructura Z1-P-L1-Z2 donde P es un péptido que tiene la secuencia aminoácida HX1QGTFTSDYSX2YLDX3X4X5AX6DFVQ LX7NTK (SEQ ID NO: 106) donde Xi es una D-serina, ácido a-aminoisobutírico (aib) , residuol-Amino-l-cyclobutano ácido carbox lico (Acb) , l-Amino-l-cyclohexano ácido carboxilico (Acx) ; ácido alfa-aminobutirico (Abu) ; D- alfa-ácido aminobutirico (D-Abu) ; Ácido aminovalérico Nva) ; beta-ciclopropil-alanina (Cpa) ; propargiglicina (Prg) ; Aliglicina (Alg) ; 2-Amino-2-ciclohexil-ácido propanóico (2-Cha) ; D-tertbutilglicina (D-tbg) ; Vinilglicina (Vg) ; 1-Amino-l-ciclopropano ácido carboxilico (Acp) ; o 1-Amino-l-ciclopentane ácido carboxilico (Acpe) ; X2 es Ser (S) o Lis (K) ; X3 es Ser (S) o Glu (E) ; X4 es un residuo de la arginina (R) o ácido glutámico (E) ; X5 es una arginina (R) o residuo de la alanina (A) ; Xg es Gln (Q) o Lis (K) ; X7 es una metionina (M) , norleucina (Nle) , slufóxido de metionina (m) , o residuo de la O-metil-L-homoserina (o) ; Zi es un grupo opcionalmente presente de protección el cual, si está presente, se une al grupo amino N-terminal, Li es opcional, pero cuando está presente es la secuencia aminoácida RNRNNIA (SEQ ID NO: 104) o una fracción ligando; Z2 es opcional, pero cuando está presente es un residuo de la lisina (K) , un residuo de lisina unido covalentemente a una fracción lipidica, un residuo de lisina unido covalentemente a una fracción de colesterol, un residuo de cisteina (C) , un residuo de cisteina unido covalentemente a una fracción lipidica, un residuo de cisteina unido covalentemente a una fracción de colesterol, y P o Z2 incluye opcionalmente un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxilo terminal, y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo. L1-Z2 puede estar unido con el aminoácido C-terminal de P o a un aminoácido interno de P.

En otros aspectos de los péptidos anteriores, Z2 es un residuo de cisteina, que en realizaciones particulares, pueden ser unidos covalentemente por su grupo tiol a una fracción de colesterol o una fracción lipidica. En otras realizaciones, la fracción de colesterol o la fracción lipidica está covalentemente unida al grupo tiol de la cisteina por un ligando hidrofilico. En ciertos aspectos, el ligando hidrofilico es un polímero etoxi que incluye de una a veinticuatro unidades etoxi, o en aspectos más específicos, el ligando hidrofilico es un polímero etoxi que incluye cuatro unidades etoxi.

En otros aspectos de los péptidos anteriores, Z2 es un residuo de lisina, que en realizaciones particulares, el grupo e-amino de la lisina está covalentemente ligado a una fracción de colesterol o a una fracción lipidica, ya sea directamente o por medio de un ligando hidrofilico. En realizaciones particulares, la fracción lipidica es un palmitoil .

En otros aspectos de los péptidos anteriores, Li es una fracción ligando. En ciertos aspectos, la fracción ligando es una fracción lingando hidrófila. En incluso otros aspectos, la fracción ligando comprende uno o más residuos de gamma-ácido glutámico, y en otros aspectos, la fracción ligando es ácido l-amino-4, 7 , 10-tioxo-13-tridecanamin succinimico.

En realizaciones particulares del péptido anterior, el péptido comprende una estructura seleccionada de OXM70 (SEQ ID NO: 12); OX 110 (SEQ ID NO: 19); OXM115 (SEQ ID NO: 21); OXM177 (SEQ ID NO: 24) ; OXM212 (SEQ ID NO: 27); OXM213 (SEQ ID NO: 28); OX 216 (SEQ ID NO: 29); OXM290 (SEQ ID NO: 46); OX 301 (SEQ ID NO: 51), o OXM325 (SEQ ID NO: 65) . En realizaciones particulares del péptido anterior, el péptido comprende una estructura seleccionada de OXM237 (SEQ ID NO: 31); OXM238 (SEQ ID NO: 32); OXM259 (SEQ ID NO: 33); OXM260 (SEQ ID NO: 34 ) ; OX 261 (SEQ ID NO: 35); OXM262 (SEQ ID NO: 36); OXM263 (SEQ ID NO: 37); OX 264 (SEQ ID NO: 38); OXM265 (SEQ ID NO: 39); OX 266 (SEQ ID NO: 40); OX 267 (SEQ ID NO: 41); OXM268 (SEQ ID NO: 42); OXM306 (SEQ ID NO: 43); OXM307 (SEQ ID NO: 44), y OXM308 (SEQ ID NO: 45) .

En realizaciones particulares del péptido anterior, cuando el péptido carece RNRNNIA (SEQ ID NO: 104), el péptido comprende una estructura seleccionada de OXM291 (SEQ ID NO: 47); OXM292 (SEQ ID NO: 48); OXM293 (SEQ ID NO : 49); OXM294 (SEQ ID NO: 50); OX 302 (SEQ ID NO: 52); OX 303 (SEQ ID NO: 53); OXM304 (SEQ ID NO: 54); OXM305 (SEQ ID NO: 55); OX 311 (SEQ ID NO: 56); OXM312 (SEQ ID NO: 57); OXM314 (SEQ ID NO: 58); OXM313 (SEQ ID NO: 59); OXM317 (SEQ ID NO: 60); OXM318 (SEQ ID NO: 61); OXM319 (SEQ ID NO: 62); OX 323 (SEQ ID NO: 64); OXM327 (SEQ ID NO: 66), o OXM329 (SEQ ID NO: 67) .

En incluso otras realizaciones, cuando el péptido carece RNRNNIA (SEQ ID NO: 104), el péptido comprende la estructura seleccionada de OXM345 (SEQ ID NO: 69) ; OXM355 (SEQ ID NO: 70); OXM357 (SEQ ID NO: 71) ; OXM359 (SEQ ID NO: 72); OXM361 (SEQ ID NO: 73); OXM373 (SEQ ID NO: 74); OXM374 (SEQ ID NO: 75); OX 380 (SEQ ID NO: 76); OXM381 (SEQ ID NO: 77); OXM383 (SEQ ID NO: 78); OXM388 (SEQ ID NO: 79); OXM392 (SEQ ID NO: 80); OXM395 (SEQ ID NO: 81); OXM398 (SEQ ID NO: 82); OXM399 (SEQ ID NO: 83); OXM400 (SEQ ID NO: 84); OX 401 (SEQ ID NO: 85); OXM404 (SEQ ID NO: 86); OXM406 (SEQ ID NO: 87); OXM407 (SEQ ID NO : 88); OXM408 (SEQ ID NO: 89); OXM410 (SEQ ID NO: 91); OXM411 (SEQ ID NO: 92); OXM412 (SEQ ID NO: 93); OX 414 (SEQ ID NO: 95); OX 415 (SEQ ID NO: 96); OXM416 (SEQ ID NO: 97; OXM417 (SEQ ID NO: 98); OXM418 (SEQ ID NO: 99; OX 419 (SEQ ID NO: 100; OXM420 (SEQ ID NO: 101); o OXM421 (SEQ ID NO: 102).

Se proporciona además un análogo de péptido que comprende la estructura Z1-P-L1-Z2 donde P es un péptido que tiene la secuencia aminoácida HX1QGTFTSDYSX2YLDX3X4X5AX6DFVQWLX7NTK (SEQ ID NO:106) donde Xi es una D-serina, ácido oí-aminoisobutirico (aib) , residuo 1-Amino-l-cyclobutano ácido carboxilico (Acb) , 1-Amino-l-cyclohexano ácido carboxilico (Acx) ; ácido alfa-aminobutirico (Abu) ; D- alfa-ácido aminobutirico (D-Abu) ; Ácido aminovalérico Nva) ; beta-ciclopropil-alanina (Cpa) ; propargiglicina (Prg); Aliglicina (Alg) ; 2-Amino-2-ciclohexil-ácido propanóico (2-Cha) ; D-tertbutilglicina (D-tbg) ; Vinilglicina (Vg) ; 1-Amino-l-ciclopropano ácido carboxilico (Acp) ; o 1-Amino-l-ciclopentane ácido carboxilico (Acpe) ; X2 es Ser (S) o Lis (K) ; X3 es Ser (S) o Glu (E) ; X4 es un residuo de la arginina (R) o ácido glutámico (E) ; X5 es una arginina (R) o residuo de la alanina (A) ; ?ß es Gln (Q) o Lis (K) ; X7 es una metionina (M) , norleucina (Nle), slufóxido de metionina m) , o residuo de la O-metil-L-homoserina (o) ; Zi es un grupo protector opcionalmente presente el cual, si está presente, se une al grupo amino N-terminal, Li es opcional, pero cuando está presente es una fracción ligando; Z2 es opcional, pero cuando está presente es un residuo de lisina (K) , un residuo de lisina unido covalentemente a una fracción lipidica, un residuo de lisina unido covalentemente a una fracción de colesterol, un residuo de cisteína (C) , un residuo de cisteina unido covalentemente a una fracción lipídica, un residuo de cisteina unido covalentemente a una fracción colesterol, y P o Z2 incluye opcionalmente un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxilo terminal, y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo. L1-Z2 puede estar unido con el aminoácido C-terminal de P o a un aminoácido interno de P.

En otros aspectos de los péptidos anteriores, Z2 es un residuo de cisteina, que en realizaciones particulares, pueden ser unidos covalentemente por su grupo tiol a una fracción de colesterol o una fracción lipídica. En otras realizaciones, la fracción de colesterol o la fracción lipídica está covalentemente unida al grupo tiol de la cisteína por un ligando hidrofílico. En ciertos aspectos, el ligando hidrofílico es un polímero etoxi que incluye de una a veinticuatro unidades etoxi, o en aspectos más específicos, el ligando hidrofílico es un polímero etoxi que incluye cuatro unidades etoxi.

En otros aspectos de los péptidos anteriores, Z2 es un residuo de lisina, que en realizaciones particulares, el grupo e-amino de la lisina está covalentemente ligado a una fracción de colesterol o a una fracción lipídica, ya sea directamente o por medio de un ligando hidrofílico. En realizaciones particulares, la fracción lipídica es un palmitoil . i En otros aspectos de los péptidos anteriores, Li es una fracción ligando. En ciertos aspectos, la fracción ligando es una fracción lingando hidrófila. En incluso otros aspectos, la fracción ligando comprende uno o más residuos de gamma-ácido glutámico, y en otros aspectos, la fracción ligando es ácido l-amino-4 , 7 , 10-tioxo-13-tridecanamín succinimico.

En realizaciones particulares del péptido anterior, el péptido comprende una estructura seleccionada de OXM291 (SEQ ID NO: 47); OXM292 (SEQ ID NO: 48); OX 293 (SEQ ID NO: 49); OXM294 (SEQ ID NO: 50) ; OXM302 (SEQ ID NO: 52); OXM303 (SEQ ID NO: 53); OXM304 (SEQ ID NO: 54); OX 305 (SEQ ID NO: 55); OXM311 (SEQ ID NO: 56); OXM312 (SEQ ID NO: 57); OXM314 (SEQ ID NO: 58); OXM313 (SEQ ID NO: 59); OXM317 (SEQ ID NO: 60); OX 318 (SEQ ID NO: 61); OXM319 (SEQ ID NO: 62); OXM323 (SEQ ID NO: 64); OXM327 (SEQ ID NO: 66), o OXM329 (SEQ ID NO: 67) .

En incluso otras realizaciones, el péptido comprende la estructura seleccionada de OX 345 (SEQ ID NO: 69); OXM355 (SEQ ID NO:70); OXM357 (SEQ ID NO:71); OXM359 (SEQ ID NO:72); OX 361 (SEQ ID NO:73); OXM373 (SEQ ID NO:74); OXM374 (SEQ ID NO:75); OXM380 (SEQ ID NO:76); OX 381 (SEQ ID NO:77); OXM383 (SEQ ID NO:78); OXM388 (SEQ ID NO:79); OXM392 (SEQ ID NO:80); OXM395 (SEQ ID NO:81); OXM398 (SEQ ID NO:82); OXM399 (SEQ ID NO:83); OXM400 (SEQ ID NO:84); OXM401 (SEQ ID NO:85); OXM404 (SEQ ID NO:86); OXM406 (SEQ ID NO: 87); OXM407 (SEQ ID NO: 88); OX 408 (SEQ ID NO:89); OXM410 (SEQ ID N0:91); 0XM411 (SEQ ID NO:92); OX 412 (SEQ ID NO: 93); OXM414 (SEQ ID NO: 95); OXM415 (SEQ ID NO:96); OXM416 (SEQ ID NO:97; OXM417 (SEQ ID NO:98); OXM418 (SEQ ID NO: 99; OXM419 (SEQ ID NO: 100; OXM420 (SEQ ID NO:101); or OXM421 (SEQ ID NO:102) .

Se proporciona además un análogo de péptido que comprende la estructura Z1-P-L1-Z2 donde P es un péptido que tiene la secuencia aminoácida HX1QGTFTSDYSX2YLDX3X4X5AX6DFVQWLX7NTKRNRNNIA ( SEQ ID NO: 107) donde ?? es una D-serina, ácido a-aminoisobutirico (aib) , residuol-Amino-l-cyclobutano ácido carboxilico (Acb) , 1-Amino-l-cyclohexano ácido carboxilico (Acx) ; ácido alfa-aminobutirico (Abu) ; D- alfa-ácido aminobutirico (D-Abu) ; Ácido aminovalérico Nva) ; beta-ciclopropil-alanina (Cpa) ; propargiglicina (Prg); Aliglicina (Alg) ; 2-Amino-2-ciclohexil-ácido propanóico (2-Cha); D-tertbutilglicina (D-tbg) ; Vinilglicina (Vg) ; 1-Amino-l-ciclopropano ácido carboxilico (Acp) ; o 1-Amino-l-ciclopentane ácido carboxilico (Acpe) ; X2 es Ser (S) o Lis (K) ; X3 es Ser (S) o Glu (E) ; X4 es un residuo de la arginina (R) o ácido glutámico (E) ; X5 es una arginina (R) o residuo de la alanina (A) ; ?? es Gln (Q) o Lis (K) ; X7 es una metionina (M) , norleucina (Nle) , slufóxido de metionina m) , o residuo de la O-metil-L-homoserina (o) ; Zi es un grupo protector opcxonalmente presente el cual, si está presente, se une al grupo amino N-terminal, Li es opcional, pero cuando está presente es una fracción ligando; Z2 es opcional, pero cuando está presente es un residuo de lisina (K) , un residuo de lisina unido covalentemente a una fracción lipidica, un residuo de lisina unido covalentemente a una fracción de colesterol, un residuo de cisteina (C) , un residuo de cisteina unido covalentemente a una fracción lipidica, un residuo de cisteina unido covalentemente a una fracción colesterol, y P o ?2 incluye opcxonalmente un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxilo terminal, y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo. L1-Z2 puede estar unido con el aminoácido C-terminal de P o a un aminoácido interno de P.

En otros aspectos de los péptidos anteriores, ?2 es un residuo de cisteina, que en realizaciones particulares, pueden ser unidos covalentemente por su grupo tiol a una fracción de colesterol o una fracción lipidica. En otras realizaciones, la fracción de colesterol o la fracción lipidica está covalentemente unida al grupo tiol de la cisteina por un ligando hidrofilico. En ciertos aspectos, el ligando hidrofilico es un polímero etoxi que incluye de una a veinticuatro unidades etoxi, o en aspectos más específicos, el ligando hidrofilico es un polímero etoxi que incluye cuatro unidades etoxi.

En otros aspectos de los péptidos anteriores, Li es una fracción ligando. En ciertos aspectos, la fracción ligando es una fracción lingando hidrófila. En incluso otros aspectos, la fracción ligando comprende uno o más residuos de gamma-ácido glutámico, y en otros aspectos, la fracción ligando es ácido l-amino-4, 7, 10-tioxo-13-tridecanamin succinímico.

En realizaciones particulares del péptido anterior, el péptido comprende una estructura seleccionada de OX 290 (SEQ ID NO: 46); OX 301 (SEQ ID NO: 51); OXM321 (SEQ ID NO: 63); OXM325 (SEQ ID NO: 65), o OXM330 (SEQ ID NO: 68) .

En realizaciones particulares del péptido anterior, el péptido comprende una estructura seleccionada de OXM70 (SEQ ID NO: 12); OXM110 (SEQ ID NO: 19); OXM115 (SEQ ID NO: 21); OXM177 (SEQ ID NO: 24 ); OXM212 (SEQ ID NO: 27); OXM213 (SEQ ID NO: 28), o OXM216 (SEQ ID NO: 29).

En realizaciones particulares del péptido anterior, el péptido comprende una estructura seleccionada de OX 237 (SEQ ID NO: 31); OXM238 (SEQ ID NO: 32); OXM259 (SEQ ID NO: 33); OXM260 (SEQ ID NO: 34 ) ; OXM261 (SEQ ID NO: 35); OX 262 (SEQ ID NO: 36); OX 263 (SEQ ID NO: 37); OXM264 (SEQ ID NO: 38); OXM265 (SEQ ID NO: 39); OX 266 (SEQ ID NO: 40); OXM267 (SEQ ID NO: 41); OXM268 (SEQ ID NO: 42); OXM306 (SEQ ID NO: 43); OXM307 (SEQ ID NO: 44), y OXM308 (SEQ ID NO: 45 ) .

Se proporcionan además péptidos análogos que son un agonista doble de GLP-l/receptor del glucagón (GCGR) y que contienen un pl de menos de 6,0. Se ha descubierto que los péptidos análogos que comprenden una fracción de colesterol o de ácidos grasos y tienen un pl de menos de 6 tienen una capacidad reducida para estimular degranulación del mastocito celular, determinada por un ensayo secundario in vitro utilizando la linea celular LAD2 del mastocito humano. Por lo tanto, se proporciona además un péptido análogo que comprende la secuencia de aminoácidos HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK (SEQ ID NO: 109) en la que el segundo aminoácido de la N-terminal del péptido se sustituye con un aminoácido que hace que el péptido sea resistente a la división y a la inactivación por la dipeptidil peptidasa IV, el péptido incluye una fracción de colesterol o lipidica unida covalentemente al péptido por un espaciador que comprende uno o más residuos del ácido gamma-glutámico, el péptido opcionalmente incluye de una a tres sustituciones de aminoácidos, además de la sustitución en la posición 2; y el péptido incluye opcionalmente un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxilo terminal del péptido, en la que el péptido análogo tiene un pl de menos de 6,0 y es un agonista doble del receptor de GLP-1 y agonista del receptor de glucagón, y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. En ciertos aspectos, los péptidos análogos tienen un pl de entre 4 y 6, o un pl de alrededor de 5,0, por ejemplo, un pl de alrededor de 5,4.

En otros aspectos, el aminoácido sustituido por el segundo aminoácido de la N-terminal de péptido análogo es seleccionado entre el grupo compuesto por la D-serina, ácido oí-aminoisobutírico, y 1-amino-l-ciclobutano ácido carboxilico .

En ciertos aspectos, el péptido análogo incluye una fracción de colesterol unida covalentemente al grupo tiol de un residuo de cisteina unido covalentemente está al grupo e-amino del residuo de lisina en la posición C-terminal del péptido análogo por un espaciador que comprende uno o más residuos del ácido gamma-glutámico. En una realización adicional, la fracción de colesterol está covalentemente unida al grupo tiol por un ligando hidrofilico, lo que en realizaciones particulares es un polímero etoxi que incluye de uno a doce unidades etoxi por ejemplo, un polímero etoxi que incluye cuatro unidades etoxi .

En ciertos aspectos, el péptido análogo incluye una fracción lipídica unida covalentemente al grupo e-amino de un residuo de lisina: En realizaciones particulares, la fracción active substance or ingredient es un ácido graso, como un palmitoil, miristoil, o la fracción estearoil. En una realización adicional, la fracción lipidica está unida covalentemente al grupo e-amino del residuo de la lisina por uno o más residuos del ácido gamma-glutámico . En una realización adicional, la fracción lipidica está unida covalentemente al grupo e-amino del residuo de la lisina en la C-terminal por uno o más residuos del ácido gamma-glutámico. En una realización adicional, la fracción lipidica está unida covalentemente al grupo e-amino del residuo de la lisina por uno o más residuos del ácido gamma-glutámico y al residuo de la lisina unido al residuo de la lisina en la C-terminal por uno o más residuos del ácido gamma-glutámico.

En otros aspectos, el péptido análogo incluye, además, una o más sustituciones aminoácidas en las posiciones de aminoácidos seleccionadas entre el grupo formado por las posiciones 10, 12, 16, 17, 18 y 27. En realizaciones particulares, el péptido análogo incluye una o más sustituciones aminoácidas seleccionadas del grupo que consiste de la lisina para la tirosina en la posición 10, serina para la lisina en la posición 12, ácido glutámico o ácido a-aminoisobutírico para la serina en la posición 16, ácido glutámico para la arginina en la posición 17, alanina para la arginina en la posición 18, lisina para la glutamina en la posición 20, y norleucina o O-metil-L-homoserina para la metionina en la posición 27.

En otra realización, la tirosina en la posición 10 en péptido análogo se sustituye por una lisina y la fracción lipídica es covalentemente undia al grupo e-amino del residuo de la lisina por uno o más residuos del ácido gamma-glutámico . En otra realización, la glutamina en la posición 20 en el péptido análogo se sustituye con lisina y la fracción lipídica es covalentemente unida al grupo e-amino de la lisina por uno o más residuos del ácido gamma-glutámico. En cualquier realización, el péptido análogo incluye, además, uno o más residuos de ácido gamma-glutámico covalentemente unidos a la C-terminal.

Se proporciona además un análogo de péptido que comprende la estructura Z1-P-M-Z2 donde P es un péptido que tiene la secuencia aminoácida HXlQGTFTSDX2SX3YLDX4X5X6AX7DFVQWLX8NTKX9X1o (SEQ ID NO: 110) donde Xi es una D-serina, a-ácido aminoisobutírico (AIB) , residuo de 1-amino-l-ciclobutano ácido carboxilico (ACB) , 1-amino-l-ciclohexano ácido carboxilico (ACX) , alfa-ácido aminobutirico (Abu ) , D-alfa-ácido aminobutirico (D-Abu) ; ácido aminovalérico (Nva) , beta-ciclopropil-alanina (CPA) ; propargilglicina (PRG) ; alilglicina (ALG) , 2-amino-2-ciclohexil-ácido propanóico (2 -Cha) , D-tertbutilglicina (D-TBG) ; Vinilglicina (Vg) , 1-amino-l-ciclopropano ácido carboxilico (ACP) , o residuos dell 1-amino-l-ciclopentano ácido carboxilico (ACPE) ; X2 es un tirosina (Y) o residuo de lisina (K) ; X3 es serina (S) o residuos de la lisina (K) ; X4 es serina (S) , oí-ácido aminoisobutirico (AIB) , o residuos ácido glutámico (E) ; X5 es una arginina (R) o residuo de ácido glutámico (E) ; X¾ es una arginina (R) o residuo de alanina (A) ; X7 es una glutamina (Q) o residuos de la lisina (K) ; X8 es un metionina (M) , norleucina (NLE) , sulfóxido de metionina (M) , o residuo de O-metil-L-homoserina (o) ; X9 es un residuo de gamma ácido glutámico (YGlu) ; X10 es un residuo o ausente de gamma ácido glutámico (YGIU ) ; ?? es un grupo protector opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo amino N-terminal, M es (i) un residuo de cisteina unido covalentemente a una fracción de colesterol mediante un ligando hidrófilo, (ii) un residuo de lisina covalentemente unido a una fracción lipidica por un espaciador que comprende uno o más residuos del gamma ácido glutámico, o (iii) una fracción lipidica, en la que M está unida covalentemente a la C-terminal o al aminoácido interno de P por un espaciador que comprende uno o más residuos del gamma-ácido glutámico, y Z2 es un grupo de protección opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo carboxilo terminal, y sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en donde el péptido análogo o sal del mismo tiene un pl de menos de 6,0 y es un agonista doble del receptor GLP-1 y agonista del receptor del glucagón. En ciertos aspectos, los péptidos análogos tienen un pl entre 4 y 6, o un pl de 5,0, 5,1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, o 5.9, o un pl de alrededor de 5,4 a 5,5.

En otros aspectos del péptido análogo, M es un residuo de cisteina unido covalentemente a una fracción de colesterol con un ligando hidrófilo y el residuo de cisteina está unido a la C-terminal de P. En otras realizaciones, el ligando hidrofilico es un polímero etoxi que incluye de una a veinticuatro unidades etoxi, que en ciertos aspectos puede incluir, por ejemplo, cuatro unidades etoxi.

En otros aspectos, M es un residuo de lisina unido covalentemente a una fracción lipídica por un espaciador que comprende uno o más residuos del gamma ácido glutámico y el residuo de lisina está unido a la C-terminal de P o M es un residuo de lisina covalentemente unido a una fracción lipídica por un espaciador que comprende uno o más residuos del gamma ácido glutámico y el residuo de lisina está en la posición X2 o X de P. En ciertos aspectos, la fracción lipídica es un palmitoil, miristoil o estearoil.

En ciertos aspectos, el péptido análogo es OXM317 (SEQ ID NO: 60); OXM318 (SEQ ID NO: 61); OXM319 (SEQ ID NO: 62); OXM323 (SEQ ID NO: 64); OXM327 (SEQ ID NO: 66), o OXM329 (SEQ ID NO: 67) . En incluso otras realizaciones, el péptido análogo es OXM345 (SEQ ID NO:69); OXM355 (SEQ ID NO:70); OX 357 (SEQ ID NO:71); OXM359 (SEQ ID NO:72); OXM361 (SEQ ID NO:73); OXM373 (SEQ ID NO:74); OXM374 (SEQ ID NO:75); OXM380 (SEQ ID NO:76); OXM381 (SEQ ID NO:77); OXM383 (SEQ ID NO:78); OXM388 (SEQ ID NO:79); OXM392 (SEQ ID NO:80); OXM395 (SEQ ID N0:81); OX 398 (SEQ ID NO:82); OX 399 (SEQ ID NO:83); OXM400 (SEQ ID NO:84); OXM401 (SEQ ID NO:85); OXM404 (SEQ ID NO:86); OXM406 (SEQ ID NO:87); OXM407 (SEQ ID NO:88); OXM408 (SEQ ID NO:89); OXM410 (SEQ ID N0:91); 0XM411 (SEQ ID NO: 92); OXM412 (SEQ ID NO:93); OXM414 (SEQ ID NO:95); OXM415 (SEQ ID NO:96); OXM416 (SEQ ID NO:97; OXM417 (SEQ ID NO:98); OXM418 (SEQ ID NO:99; OXM419 (SEQ ID NO:100; OXM420 (SEQ ID NO:101); or OXM421 (SEQ ID NO: 102) .

Se proporciona además el uso de cualquiera de los péptidos anteriormente mencionados y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno metabólico.

Definiciones Un agonista GLP-1 es un péptido, molécula pequeña, o compuesto químico que se une al receptor GLP-1 y estimula la misma actividad biológica que el GLP-1. En una realización, un agonista del receptor GLP-1 se une al receptor con al menos 1% de la afinidad como GLP-1 nativo. En otra realización, un agonista del receptor GLP-1 se une al receptor con una afinidad igual o mayor que el GLP-1 nativo .

Un agonista del glucagón es un péptido, molécula pequeña, o compuesto químico que se une al receptor de glucagón y estimula la misma actividad biológica que el glucagon. En una realización, un agonista del receptor de glucagon se une a los receptores con al menos 1% de la afinidad como el glucagon nativo. En otra realización, un agonista del receptor de glucagon se une al receptor con una afinidad igual o mayor que el glucagon nativo.

Como se usa en este documento, un "agonista doble del GLPl/receptor glucagon" es la "molécula coagonista del receptor de GLPl/receptor de glucagon", que presentan actividad tanto en el receptor del glucagon y en el receptor de GLP1. En general, un agonista doble del receptor de GLP1 y del receptor de glucagon y presenta actividad en el receptor de glucagon de al menos un 10% con respecto al glucagon nativo y también presenta actividad en el receptor de GLP-1 de al menos un 10% con respecto al GLP-1 nativo .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 muestra los resultados de un ensayo ex vivo comparando la glucogenolisis de OXM nativa con la de OX (Q3E) . La Figura muestra que OXM nativa induce glucogenolisis en forma de dosis dependiente e induce glucogenolisis total a 1,5 nm y tiene un 50CE aproximado de 0,5 nM, mientras que OXM-Q3E indujo sólo el 58% a 300 nm, de acuerdo con su potencia agonista GCGR pobre.

La Figura 2 muestra los resultados de un experimento in vivo de ocupación del receptor GCG el cual muestra que el glucagon (GCG) a 1,5 mpk dio 84% de ocupación GCGR y OXM 3 mpk dio el 31% de ocupación GCGR, pero que 0XM-Q3E dio 0% ocupación de GCGR.

Las Figuras 3A y 3B muestran los niveles de glucosa en la sangre y las tasas de infusión de glucosa, respectivamente, en respuesta a OXM y OXM-Q3E.

La Figura 4 muestra los resultados de una prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal (IPGTT) en los ratones delgados por vía subcutánea (se) y la administración de XM y 0XM-Q3E.

La Figura 5A muestra la medición ex vivo de la glucogenólisis en el hígado perfundido en la presencia de OXM70, OXM110, 0XM177, 0XM115 y 0XM216.

La Figura 5B muestra la ocupación GGCR tras la administración subcutánea (se) o intravenosa (iv) de OXM70, OXM110, 0XM177, 0XM115 y 0XM216 en comparación con OXM nativa en un ensayo de competición en ratones de tipo salvaj e .

La Figura 6 resume la eficacia aguda in vivo de OXM70 en la reducción de la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratones inducidos a la obesidad por dieta (DIO) establecidos. La ingesta de alimentos se midió alrededor de dos horas y 18 horas más tarde. También se midieron cambios de peso corporal a las 18 horas (durante la noche) * P <0.05 vs vehículo, n = 5-6 por grupo) .

La Figura 7 resume la eficacia aguda in vivo de OXM110 y OXM177 en la reducción de la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratones DIO establecidos. La ingesta de alimentos se midió alrededor de dos horas y 18 horas más tarde. También se midieron cambios de peso corporal a las 18 horas (durante la noche) * P <0.05 vs vehículo, n = 5-6 por grupo) .

La Figura 8 resume la eficacia aguda in vivo de OXM216, OX 115 y OXM177 en la reducción de la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratones DIO establecidos. La ingesta de alimentos se midió alrededor de dos horas y 18 horas más tarde. También se midieron cambios de peso corporal a las 18 horas (durante la noche) * P <0.05 vs vehículo, n = 5-6 por grupo) .

Las Figuras 9A-D muestra los puntos finales farmacológicos de un estudio de peso corporal crónico y de la ingesta de alimentos en ratones DIO para los péptidos análogos OXM110, OXM177 y OXM115 de la OXM. La Figura 9A muestra la variación acumulada en la ingesta de alimentos. La Figura 9B muestra la variación acumulada en el peso corporal. La Figura 9C muestra los niveles básales de glucosa durante varios días del estudio. La Figura 9D muestra de ensayo IPGTT el día 13 del estudio.

La Figura 10 muestra los resultados de una prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal (IPGTT) en ratones delgados para la administración subcutánea de OXM70.

La Figura 11 muestra los resultados de una prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal (IPGTT) en ratones delgados para la administración subcutánea de OXM110.

La Figura 12 muestra los resultados de una prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal (IPGTT) en ratones delgados para la administración subcutánea de OXM177.

La Figura 13 muestra los resultados de una prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal (IPGTT) en ratones delgados para la administración subcutánea de OXM115.

La Figura 14A muestra los efectos de la tasa metabólica de OXM115 en ratones DIO en el tiempo.

La Figura 14B muestra el cambio porcentual en la tasa metabólica causada por OXM115 en ratones DIO.

La Figura 15 resume la eficacia aguda in vivo de varios péptidos +/+ en la reducción de la ingesta de alimentos y en el peso corporal en ratones DIO establecidos .

La Figura 16 muestra una dosis única de varios péptidos +/+ en la ingesta de alimentos en la reducción de la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratones DIO establecidos .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La terapia basada en la OXM tiene el potencial de impactar favorablemente en la obesidad y, en lo que aún tiene que caracterizarse cuidadosamente, los efectos concomitantes sobre la mejora de la diabetes. La eficacia de la pérdida de peso y la reducción de la ingesta de alimentos después de la administración periférica de OXM se ha validado bien en humanos (Wynne y otros, Diabetes 54: 2390-2395 (2005)). Más recientemente, la OXM ha demostrado que incrementa la velocidad metabólica, y específicamente, la actividad relacionada con el gasto energético en los sujetos obesos (Wynne y otros, Int. J. Obes . 30: 1729-1736 (2006) , publicación en línea anticipada, 18 de abril 2006; doi : 10.1038/sj . ij o .0803344 ) . También se ha demostrado que la OXM reduce el peso corporal en humanos (véase, por ejemplo, la publicación de las solicitudes internacionales de patente núms . WO2003/02230 , WO2004/062685 y WO2006/134340) , sin embargo, los efectos del péptido OXM y de los agonistas del receptor de glucagón/receptor de GLP-1 dobles similares (GLP-1R/GCGR) sobre el control glucémico, independientemente de la pérdida de peso, no se han estudiado sistemáticamente. La capacidad de la OXM de tener actividad agonista tanto para el receptor de glucagón como para el receptor de GLP-1, hace que ésta sea un candidato atractivo para el tratamiento de las enfermedades metabólicas en las que es deseable que el tratamiento interactue de forma positiva con los receptores de glucagón y de GLP-1.

La OXM (y él GLP-1) tienen una vida media muy corta y se inactivan rápidamente por la dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV) de la superficie celular. Se pueden incorporar mutaciones al péptido OXM para hacer al péptido resistente a la escisión por la DPP-IV, sin embargo, también se ha encontrado que muchas de estas mutaciones inactivan al péptido nativo o afectan negativamente la capacidad del péptido para interactuar con el receptor de glucagón (GCGR) o el receptor de GLP-1 (GLP-1R) (veáse la publicación de la solicitud internacional de patente núm. WO2007/100535, la cual se incorpora en la presente en su totalidad) . La OXM (y el GLP-1) se depura, además, rápidamente por los ríñones. La conjugación de los péptidos con sustituyentes voluminosos, tales como el polietilénglicol, puede reducir la depuración renal del péptido, sin embargo, se encontró que cuando estos sustituyentes voluminosos se incorporan en el péptido OXM, muchos péptidos análogos de la OXM resultantes tienen una capacidad reducida o no tienen capacidad de interactuar de forma efectiva con el receptor de glucagón. Antes de que se pueda avanzar en terapias efectivas para las enfermedades metabólicas basadas en la administración de péptidos de la OXM, es necesario resolver los problemas asociados con su estabilidad y farmacocinética .

Los péptidos análogos de la OXM descritos en la presente resuelven estos problemas.

En primer lugar, la estabilidad limitada in vivo de la OXM y el GLP-1 nativos, debido a la escisión por la DPP-IV y la depuración renal rápida, lo que requiere una dosificación frecuente (inyecciones s.c. tres veces al día de OXM, infusión continua de GLP-1) a altas dosis en humanos, se ha resuelto mediante la mutación del sitio de escisión de la DPP-IV (el penúltimo residuo en el terminal N) y la lipidacion del péptido OXM para incrementar la vida media (ti/2) in vivo. Se prevé que la t /2 de los péptidos análogos lipidados de la OXM (ya sean acilados o conjugados con una porción de colesterol) en humanos serán apropiados para la administración al menos una vez al día. Los péptidos análogos de la OXM descritos en la presente son más convenientes para los fines terapéuticos que la OXM nativa, la cual requiere dosificación de tres veces al día. En segundo lugar, se prevé que el perfil de tolerabilidad de los polipéptidos de la presente invención sea similar al de la OXM nativa en humanos, el cual puede ser superior al de los miméticos de GLP-1 convencionales, como la exenatida y la liraglutida. La eficacia crónica de los análogos de la OXM descritos en la presente, por lo tanto, puede ser mejor que los miméticos de GLP-lconvencionales, tales como Byetta® (Amylin Pharmaceuticals ) , debido a las náuseas y vómitos mínimos, los cuales, típicamente, han limitado la dosis para los miméticos de GLP-1. A diferencia de éstos, puede no ser necesario el ajuste de la dosis para mitigar las náuseas para los polipéptidos de esta invención.

En tercer lugar, no se han realizado estudios sistemáticos para evaluar el potencial para mejorar el control de la glucosa. Debido a que la OXM es un agonista potente del receptor de glucagón, la expectativa sería que la administración crónica llevaría al control defectuoso de la glucosa (hiperglucemia) . Sin embargo, inesperadamente, los análogos de la OXM descritos en la presente, los cuales incorporan un co-agonismo balanceado del receptor GLP-1 y el GCGR, proporcionan reducciones incrementadas en la ingesta de alimentos y el peso corporal con la administración crónica, y dan como resultado una tolerancia a la glucosa mejorada. Los péptidos análogos de la OXM que tienen actividad agonista doble para el receptor de GLP-1 (GLP-1R) y el receptor de glucagón (GCGR) se indican en la presente como (+/+) . Los péptidos análogos de la OXM que son solamente agonistas de GLP-1 se indican en la presente como ( +/0 ) .

Producir una acción prolongada de los péptidos análogos de la OXM no ha sido sencillo. Nuestros estudios iniciales se centraron en la conjugación sitio-especifica de un sustituyente de poliétilenglicol (PEG) voluminoso en ubicaciones prometedoras a través de todo el péptido. Sorprendentemente, la adición de PEG en todas las posiciones ensayadas resultó en una reducción significativa en la potencia del GCGR y/o el GLP-1R. Por lo tanto, investigamos otros métodos para mejorar las propiedades fármacocinéticas , mientras se mantuvo la actividad del GCGR. La adición de un conjugado de colesterol en varias posiciones en el péptido indicó la conjugación en el terminal vida media como el método más favorable. Los estudios in vitro e in vivo sin embargo, indicaron que la colesterolización resultó en un cambio significativo en la potencia del suero y la disminución de la eficacia in vivo. Por lo tanto, la investigación ulterior resultó en la inclusión no trivial de un enlazador hidrófilo entre el péptido y el grupo colesterol, o la adición directa de una cadena de acilo a un residuo del terminal C.

Las indicaciones primarias en las cuales los análogos de la OXM descritos en la presente se pueden usar, son en el tratamiento de la obesidad y/o la diabetes. Las indicaciones secundarias son el síndrome metabólico, la hiperglucemia, la deficiencia de glucosa en ayunas, y otros estados prediabéticos . Otras indicaciones incluyen todas las indicaciones para el GLP-1, tales como el síndrome de intestino irritable y otras enfermedades de absorción del intestino, isquemia, accidente cerebrovascular y trastornos neurológicos que incluyen la ansiedad, el deterioro cognitivo y la enfermedad de Alzheimer.

Sobre la base de estudios publicados en humanos con OXM, se prevé que los análogos de la OXM descritos en la presente exhiban al menos una eficacia comparable si no superior, y un mejor perfil de seguridad que los agentes contra la obesidad actuales, tales como el orlistat (Xenical® (Roche) , un inhibidor de la lipasa, y la sibutramina (Meridia® (Abbott Laboratories) , un inhibidor de la recaptación de serotonina/norepinefriña, para los cuales la intolerancia gastrointestinal (diarrea, flatulencia) y la hipertensión son los efectos secundarios comunes, respectivamente.

En aspectos particulares, los péptidos análogos de la OX incluyen, opcionalmente, un grupo protector covalentemente unido al grupo amino del terminal N. Un grupo protector covalentemente unido al grupo amino del terminal N del péptido reduce la reactividad del amino terminal bajo condiciones in vivo. Los grupos protectores de amino incluyen -Ci-io alquil, -Ci-io alquil sustituido, -c2-10 alquenil, -C2-10 alquenil sustituido, aril, -Ci-? alquil aril, -C (0) - (CH2 ) ?-ß-COOH, -C(0)-Ci-6 alquil, -C(0)-aril, -C(0)-0-Ci-6 alquil, o -C (0) -0-aril . En modalidades particulares, el grupo protector del amino terminal se selecciona del grupo que consiste de acetil, propil, succinil, bencil, benciloxicarbonil y t-butiloxicarbonil . La desaminación del aminoácido del terminal N es otra modificación que se contempla para la reducción de la reactividad del amino terminal bajo condiciones in vivo.

Los péptidos análogos de la OXM se pueden modificar de manera que tengan un grupo protector covalentemente unido al grupo carboxilo del terminal C, lo que reduce la reactividad del carboxilo terminal bajo condiciones in vivo. Por ejemplo, los grupos de ácido carboxilico del péptido, ya sean del carboxilo terminal o de la cadena lateral, se pueden proporcionar en forma de una sal de un catión farmacológicamente aceptable o se pueden esterificar para formar un C1-6 éster, o se pueden convertir en una amida de fórmula NRR2 en donde R y R2 son cada uno independientemente H o C1-6 alquil, o se pueden combinar para formar un anillo heterocíclico, tal como un anillo de 5 ó 6 miembros. El grupo protector del carboxilo terminal se une preferiblemente al grupo -carbonilo del último aminoácido. Los grupos protectores del carboxilo terminal incluyen, pero no se limitan a, amida, metilamida, y etilamida. Los grupos amino del péptido, ya sean del terminal N o de la cadena lateral, pueden estar en la forma de una sal de adición de ácido farmacológicamente aceptable, tal como el HC1, HBr, acético, benzoico, tolueno sulfónico, maleico, tartárico, y otras sales orgánicas, o se pueden modificar a C]_-6 alquil o dialquil amino o convertirse adicionalmente en una amida.

Los péptidos análogos de la OXM que son capaces de actuar como agonistas dobles de GLP-1 y el glucagón, comprenden la secuencia de aminoácidos de la oxintomodulina (OXM) humana que se muestra en la sec. con núm. de ident.: 1, en la cual el segundo aminoácido del terminal N se sustituye por un aminoácido que hace que el péptido sea resistente a la escisión y a la inactivación por la dipeptidil peptidasa IV, una porción de lipido o de colesterol unida covalentemente al péptido análogo de la OXM, opcionalmente una a tres sustituciones de aminoácidos además de la sustitución en la posición 2; y opcionalmente tiene un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxilo del terminal C del péptido. En otras modalidades, los péptidos análogos adicionalmente carecen de la secuencia de aminoácidos RNRNNIA (sec. con núm. de ident.:104) . En general, los péptidos análogos de la OXM que tienen la estructura anterior, actuarán como un agonista doble del receptor de GLP-1 y del receptor de glucagón y tienen una vida media en suero mayor que la vida media en suero de la OXM humana nativa.

En modalidades más específicas, el péptido análogo a OXM puede representarse por la estructura Z1-P-L1-Z2 en donde P es un péptido que tiene la secuencia de aminoácidos HX1QGTFTSDYSKYLDSX2X3AQDFVQWLX4NTK (sec. con núm. de ident . : 103 ) en donde ?? es un residuo de D-serina o del ácido a-aminoisobutírico (aib) ; X2 es un residuo de arginina (R) o de ácido glutámico (E) ; X3 es un residuo de arginina (R) o de alalina (A) ; X4 es un residuo de metionina (M) , norleucina (Nle) , u O-metil-L-homoserina (o) ; Zi es un grupo protector opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo amino del terminal N, Li es opcional, pero cuando está presente, es la secuencia de aminoácidos RNRNNIA (sec. con núm. de ident. :104) o una porción enlazadora; Z2 es opcional, pero cuando está presente, es un residuo de lisina (K) , un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de lípido, un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de colesterol, un residuo de cisteína (C) , residuo de cisteína unido covalentemente a una porción de lípido; residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de colesterol; y P o Z2 incluye, opcionalmente, un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxi del terminal C; y sales farmacéuticamente aceptables de éstos. L1-Z2 puede unirse al aminoácido del terminal C de P o a un aminoácido interno de P.

En una modalidad adicional, el péptido análogo a OXM puede representarse por la estructura Z1-P-L1-Z2 en donde P es un péptido que tiene la secuencia de aminoácidos HX1QGTFTSDYSKYLDSX2X3AQDFVQWLX4NTK (sec. con núm. de ident. :103) en donde Xi es un residuo de D-serina o del ácido oí-aminoisobutírico (aib) ; X2 es un residuo de arginina (R) o de ácido glutámico (E) ; X3 es un residuo de arginina (R) o de alalina (A) ; X4 es un residuo de metionina (M) , norleucina (Nle) , u O-metil-L-homoserina (o) ; Zi es un grupo protector opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo amino del terminal N, Li es opcional, pero cuando está presente, es una porción enlazadora; Z2 es opcional, pero cuando está presente, es un residuo de lisina (K) , un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de lipido, un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de colesterol, un residuo de cisteina (C) , residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de lipido; residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de colesterol; y P o Z2 incluye, opcionalmente, un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxi del terminal C y sales farmacéuticamente aceptables de éstos. L1-Z2 puede unirse al aminoácido del terminal C de P o a un aminoácido interno de P.

En una modalidad adicional, el péptido análogo a OXM puede representarse por la estructura Z1-P-L1-Z2 en donde P es un péptido que tiene la secuencia de aminoácidos HX1QGTFTSDYSKYLDSX2X3AQDFVQWLX4NTKRNRNNIA (sec. con núm. de ident.:105) en donde Xi es un residuo de D-serina, ácido ot-aminoisobutirico (aib) , ácido 1-amino-l-ciclobutano carboxilico (Acb) , ácido 1-amino-l-ciclohexano carboxilico (Acx) ; ácido alfa-aminobutírico (Abu) D- ácido alfa-aminobutirico (D-Abu) ; ácido aminovalérico (Nva) ; beta-ciclopropil-alanina (Cpa) ; propargilglicina (Prg); alilglicina (Alg) ; ácido 2-amino-2-ciclohexil-propanoico (2-Cha) ; D-tercbutilglicina (D-tbg) ; vinilglicina (Vg) ; ácido 1-amino-l-ciclopropano carboxilico (Acp) ; o ácido 1-amino-l-ciclopentano carboxilico (Acpe) ; X2 es un residuo de arginina (R) o de ácido glutámico (E) ; X3 es un residuo de arginina (R) o de alalina (A) ; X4 es un residuo de metionina (M) , norleucina (Nle) , u O-metil-L-homoserina (o) ; ?? es un grupo protector opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo amino del terminal N, Li es opcional, pero cuando está presente, esla secuencia de aminoácidos RNRNNIA (sec. con núm. de ident.:104) o una porción enlazadora; Z2 es opcional, pero cuando está presente, esun residuo de lisina (K) , un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de lipido, un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de colesterol, un residuo de cisteina (C) , residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de lipido; residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de colesterol; y P o Z2 incluye, opcionalmente, un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxi del terminal C; y sales farmacéuticamente aceptables de éstos. L1-Z2 puede unirse al aminoácido del terminal C de P o a un aminoácido interno de P..

En otras modalidades especificas, el péptido análogo a OXM puede representarse por la estructura Z1-P-L1-Z2 en donde P es un péptido que tiene la secuencia de aminoácidos HX1QGTFTSDYSX2YLDX3X4X5AX6DFVQWLX7NTK (sec. con núm. de ident.:106) en donde X es un residuo de D-serina, ácido a-aminoisobutirico (aib) , ácido 1-amino-l-ciclobutano carboxilico (Acb) , ácido 1-amino-l-ciclohexano carboxílico (Acx) ; ácido alfa-aminobutirico (Abu) D- ácido alfa-aminobutírico (D-Abu) ; ácido aminovalérico Nvá) ; beta-ciclopropil-alanina (Cpa) ; propargilglicina (Prg) ; alilglicina (Alg) ; ácido 2-amino-2-ciclohexil-propanoico (2-Cha) ; D-tercbutilglicina (D-tbg) ; vinilglicina (Vg) ; ácido 1-amino-l-ciclopropano carboxilico (Acp) ; o ácido 1-amino-l-ciclopentano carboxilico (Acpe) ; X2 es Ser (S) o Lys (K) ; X3 es Ser (S) o Glu (E) ; X4 es un residuo de arginina (R) o de ácido glutámico (E) ; X5 es un residuo de arginina (R) o de alalina (A) ; 6 es Gln (Q) o Lys (K) ; X7 es un residuo de metionina ( ) , norleucina (Nle) , sulfóxido de metionina (m) , o O-metil-L-homoserina (o) ; Zi es un grupo protector opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo amino del terminal N, Li es opcional, pero cuando está presente, es la secuencia de aminoácidos RNRNNIA (sec. con núm. de ident.:104) o una porción enlazadora Z2 es opcional, pero cuando está presente, es un residuo de lisina (K) , un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de lipido, un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de colesterol, un residuo de cisteina (C) , residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de lipido; residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de colesterol; y P o Z2 incluye, opcionalmente, un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxi del terminal C; y sales farmacéuticamente aceptables de éstos. L1-Z2 puede unirse al aminoácido del terminal C de P o a un aminoácido interno de P.

En una modalidad adicional, el péptido análogo a OXM puede representarse por la estructura Z1-P-L1-Z2 en donde P es un péptido que tiene la secuencia de aminoácidos HX1QGTFTSDYSX2YLDX3X4X5AX6DFVQWLX7NTK (sec. con núm. de ident.:106) en donde Xi es un residuo de D-serina, ácido a-aminoisobutirico (aib) , ácido 1-amino-l-ciclobutano carboxilico (Acb) , ácido 1-amino-l-ciclohexano carboxilico (Acx) ; ácido alfa-aminobutirico (Abu) ; D- ácido alfa-aminobutirico (D-Abu) ; ácido aminovalérico Nva) ; beta-ciclopropil-alanina (Cpa) ; propargilglicina (Prg) ; alilglicina (Alg) ; ácido 2-amino-2-ciclohexil-propanoico (2-Cha) ; D-tercbutilglicina (D-tbg) ; vinilglicina (Vg) ; ácido 1-amino-l-ciclopropano carboxilico (Acp) ; o ácido 1-amino-l-ciclopentano carboxilico (Acpe); X2 es Ser (S) o Lys (K) ; X3 es Ser (S) o Glu (E) ; X4 es un residuo de arginina (R) o de ácido glutámico (E) ; X5 es un residuo de arginina (R) o de alalina (A) ; ?ß es Gln (Q) o Lys (K) ; X7 es un residuo de metionina ( ) , norleucina (Nle) , sulfóxido de metionina (m) , o O-metil-L-homoserina (o) ; Zi es un grupo protector opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo amino del terminal N, Li es opcional, pero cuando está presente, es una porción enlazadora; Z2 es opcional, pero cuando está presente, es un residuo de lisina (K) , un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de lipido, un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de colesterol, un residuo de cisteina (C) , residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de lipido; residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de colesterol; y P o Z2 incluye, opcionalmente, un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxi del terminal C; y sales farmacéuticamente aceptables de éstos. L1-Z2 puede unirse al aminoácido del terminal C de P o a un aminoácido interno de P.

En una modalidad adicional, el péptido análogo a OXM puede representarse por la estructura Z1-P-L1-Z2 en donde P es un péptido que tiene la secuencia de aminoácidos HX1QGTFTSDYSX2YLDX3X4X5AX6DFVQWLX7NT RNRNNIA (sec. con núm. de ident.:107) en donde i es un residuo de D-serina, ácido -aminoisobutirico (aib) , ácido 1-amino-l-ciclobutano carboxilico (Acb) , ácido 1-amino-l-ciclohexano carboxilico (Acx) ; ácido alfa-aminobutirico (Abu) ; D- ácido alfa-aminobutirico (D-Abu) ; ácido aminovalérico Nva) ; beta-ciclopropil-alanina (Cpa) ; propargilglicina (Prg) ! alilglicina (Alg) ; ácido 2-amino-2-ciclohexil-propanoico (2-Cha) ; D-tercbutilglicina (D-tbg) ; vinilglicina (Vg) ; ácido 1-amino-l-ciclopropano carboxilico (Acp) ; o ácido 1-amino-l-ciclopentano carboxilico (Acpe) ; X2 es Ser (S) o Lys (K) ; X3 es Ser (S) o Glu (E) / X4 es un residuo de arginina (R) o de ácido glutámico (E) ; X5 es un residuo de arginina (R) o de alalina (A) ; ?? es Gln (Q) o Lys (K) ; X7 es un residuo de metionina (M) , norleucina (Nle) , sulfóxido de metionina (m) , o O-metil-L-homoserina (o) ; i es un grupo protector opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo amino del terminal N, Li es opcional, pero cuando está presente, es una porción enlazadora; Z2 es opcional, pero cuando está presente, es un residuo de lisina (K) , un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de lipido, un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de colesterol, un residuo de cisteina (C) , residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de lipido; residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de colesterol; y P o Z2 incluye, opcionalmente, un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxi del terminal C; y sales farmacéuticamente aceptables de éstos. L1-Z2 puede unirse al aminoácido del terminal C de P o a un aminoácido interno de P.

En otras modalidades especificas, el péptido análogo a OXM puede representarse por la estructura Z1-P-L1-Z2 en donde P es un péptido que tiene la secuencia de aminoácidos HX1QGTFTSDX2SX3YLDX4X5X6AX7DFVQWLX8NTKX9 (sec . con núm. de ident.:108) en donde Xi es un residuo de D-serina, ácido -aminoisobutirico (aib) , ácido 1-amino-l-ciclobutano carboxilico (Acb) , ácido 1-amino-l-ciclohexano carboxilico (Acx) ; ácido alfa-aminobutirico (Abu) ; D- ácido alfa-aminobutirico (D-Abu) ; ácido aminovalérico Nva) ; beta-ciclopropil-alanina (Cpa) ; propargilglicina (Prg); alilglicina (Alg) ; ácido 2-amino-2-ciclohexil-propanoico (2-Cha) ; D-tercbutilglicina (D-tbg) ; vinilglicina (Vg) ; ácido 1-amino-l-ciclopropano carboxilico (Acp) ; o ácido 1-amino-l-ciclopentano carboxilico (Acpe) ; 2 es Tyr o Lys; X3 es Ser (S) o Lys (K) ; X4 es Ser (S) o Glu (E) ; X5 es un residuo de arginina (R) o de ácido glutámico (E) ; Xg es un residuo de arginina (R) o de alalina (A) ; X7 es Gln (Q) o Lys (K) ; X8 es un residuo de metionina (M) , norleucina (Nle) , sulfóxido de metionina (m) , o O-metil-L-homoserina (o) ; X9 es opcional, pero cuando está presente, es uno o más residuos de ácido gamma glutámico. i es un grupo protector opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo amino del terminal N, Li es opcional, pero cuando está presente, esla secuencia de aminoácidos RNRNNIA (sec. con núm. de ident.:104) o una porción enlazadora; Z2 es opcional, pero cuando está presente, esun residuo de lisina (K) , un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de lipido, un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de colesterol, un residuo de cisteina (C) , residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de lipido; residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de colesterol; y P o Z2 incluye, opcionalmente , un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxi del terminal C; y sales farmacéuticamente aceptables de éstos. L1- 2 puede unirse al aminoácido del terminal C de P o a un aminoácido interno de P.

En cada una de las modalidades anteriores, la porción de lipido o de colesterol puede unirse directa o indirectamente a la cadena lateral de un aminoácido. Cuando el residuo de lipido o colesterol se une indirectamente a la cadena lateral del aminoácido, la porción de lipido o de colesterol se une a la cadena lateral del aminoácido mediante una porción enlazadora. En aspectos particulares, el lipido o el colesterol se unen directamente a la cadena lateral de un aminoácido, el cual entonces se une péptido análogo de la OXM mediante una porción enlazadora (Li) .

En modalidades particulares de los análogos a OXM descritos en la presente, cuando los residuos 16 y 20 son Glu y Lys, respectivamente, las cadenas laterales de dichos residuos pueden participar en un puente lactámico entre dichos residuos Glu y Lys.

En muchas modalidades, la porción enlazadora es un enlazador hidrófilo. La estructura química de la porción enlazadora no es crítica, sin embargo, esta sirve principalmente como un espaciador. No obstante, en ciertas modalidades, la porción enlazadora puede proporcionar por sí misma propiedades mejoradas a los péptidos análogos a OXM. Los ejemplos de porciones enlazadoras, incluyen pero no se limitan a, los aminoácidos y péptidos; enlazadores alquil tales como -NH- (CH2 ) s~C (0) -, en donde s = 2-20, estos enlazadores alquil pueden ser, además, sustituidos por un grupo estéricamente no impedido tal como un alquil inferior (por ejemplo, Ci-6) acil inferior, halógeno (por ejemplo, Cl, Br) , CN, NH2, fenil, y similares; un polímero etoxi que incluye de uno a doce unidades etoxi; Ttds (ácido l-amino- , 7 , 10-trioxa-13-tridecanamina-succinámico) , y uno, dos, tres o más residuos de ácido gamma-glutámico.

En general, la porción enlazadora se une covalentemente al aminoácido del terminal C del péptido (P) y Z2 se une covalentemente a la porción enlazadora. En ciertos aspectos, la porción enlazadora se une covalentemente a un aminoácido interno de P y 2 se une covalentemente a la porción enlazadora. En aspectos adicionales, cuando L1-Z2 se unen covalentemente a un aminoácido interno de P, Xg puede incluir uno o más residuos de ácido gamma-glutámico.

Los péptidos análogos a OXM incluyen los diastereómeros así como sus formas racémica y enantioméricamente pura resuelta. En general, los aminoácidos están en la forma L con aminoácidos particulares en forma D. Como se conoce en la técnica, los aminoácidos individuales pueden representarse como sigue: A=Ala=alanina; C=Cys=cisteína; D=Asp=ácido aspártico; E=Glu=ácido glutámico; F=Phe=fenilalanina; G=Gly=glicina; H=His=histidina; I=Ile=isoleucina; =Lys=lisina; L=Leu=leucina; M=Met=metionina ; N=Asn=asparagina ; P=Pro=prolina; Q=Gln=glutamina; R=Arg=arginina; S=Ser=serina; T=Thr=treonina; V=Val=valina; =Trp=triptófano; and Y=Tyr=tirosina .

La Tabla 1 muestra las estructuras para un número representativo de péptidos análogos a OXM basado en la molécula de OXM de longitud completa que tiene actividad en el receptor de glucagón y el receptor GLP-1 (+/+) . Los péptidos análogo-s a OXM OXM29, 208, 209 y 229 son precursores de los péptidos análogos (péptidos tiolados) que se usaron para la reacción de conjugación con las porciones de bromo-colesterol . oxopropil] tio- } acetato) ; C5 = Cys (CH2CONH2) , correspondiente al residuo de cisteina en el cual la cadena lateral tiol reaccionó con yodoacetamida; C7 = Cys (colest-5-en-3-il l-{ [ (2R) -3-amino-2- (amino) -3- oxopropil] tio-} -2-???-6, 9,12, 15-tetraoxa-3-azaoctadecan-18- oat ) o Cys (0xa4-colesterol) .

Los péptidos análogos a OXM OXM36 y 0XM115 se prepararon a partir de la OXM229, la cual incluye el péptido OXM humano nativo pero con una D-serina en la posición 2 del aminoácido y un residuo de cisteina en el enlace peptidico en el terminal C y en la cual el grupo carboxi del terminal C se amidó. La OXM36 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIAC4-CONH2 (sec. con núm. de ident.:8) en donde C4 es un residuo de cisteina en el cual colest-5-en-3-il { [ (2R) -3-amino-2- (amino) -3-oxopropil] tio- } acetato está unido covalentemente a éste como se muestra a continuación.

La 0XM115 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIAC7-CONH2 (sec. con núm. de ident.:21) en donde el C7 es un colest-5-en-3-il 1- { [ (2R) -3-amino-2- (amino) -3-oxopropil] tio- } -2-oxo-6, 9, 12 , 15-tetraoxa-3-azaoctadecan-18-oato (o Cys (0xa4-colesterol ) ) como se muestra a continuación.

C7 difiere de C4 en que tiene un espaciador hidrófilo formado por cuatro repeticiones de etilenglicol (unidades etoxi) entre el grupo colesterol y la porción de cisteina. El grupo C7 aumenta la solubilidad del conjugado péptido-colesterol resultante. Además, en presencia de plasma sérico, el conjugado péptido-C7 muestra un cambio en suero menos prominente que los conjugados péptido-C4. Se encontró que esto es importante para mantener una actividad óptima balanceada en los dos receptores GLP-1R y receptor de glucagón. Los resultados que se muestran en los ejemplos ilustran este aspecto.

Los péptidos análogos a OX OXM70 y OXM216 se prepararon a partir de la OXM29, la cual incluye el péptido OXM humano nativo pero con ácido -aminoisobutirico en la posición 2 del aminoácido y con un residuo de cisteina en el enlace peptidico en el terminal C y en la cual el grupo carboxi del terminal C se amidó. La OXM70 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQ LMNTKRNRNNIAC4-CONH2 (sec. con núm. de ident.:12) en donde C4 es colest-5-en-3-il{ [ (2R) -3-amino-2- (amino) -3-oxopropil ] tio-}acetato como se muestra para OXM36. El OXM216 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTKRNRNNIAC7-CONH2 (sec. con núm. de ident.:29) en donde el C7 es un colest-5-en-3-il 1-{ [ (2R) -3-amino-2- (amino) -3-oxopropil] tio- } -2-oxo-6, 9, 12, 15-tetraoxa-3-azaoctadecan-18-oato (o Cys (Oxa4-colesterol) ) como para la OXM115.

El péptido análogo a OXM OXM212 se preparó a partir de la OXM208, la cual incluye el péptido OXM humano nativo pero con ácido a-aminoisobutírico en la posición 2 del aminoácido, norleucina en lugar del residuo de metionina en la posición 27, con un residuo de cisteina en el enlace peptídico en el terminal C y en la cual el grupo carboxi del terminal C se amidó. La OXM212 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLnNTKRNRNNIAC4-CONH2 (sec. con núm. de ident.:26) en donde C4 es colest-5-en-3-il{ [ (2R) -3-amino-2- (amino) -3-oxopropil] tio-}acetato como se muestra para la OXM36.

El péptido análogo a OXM OXM213 se preparó a partir de la OXM209, la cual incluye el péptido OXM humano nativo pero con ácido oí-aminoisobutirico en la posición 2 del aminoácido, O-metil-L-homoserina en lugar del residuo de metionina en la posición 27, con un residuo de cisteina en el enlace peptídico en el terminal C y en la cual el grupo carboxi del terminal C se amidó. La OXM213 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLYNTKRNRNNIAC4-CONH2 (sec. con núm. de ident.:28) en donde C4 es colest-5-en-3-il {[ (2R) -3-amino-2- (amino) -3-oxopropil ] tio- } acetato como se muestra para la OXM36.

La OXM237 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQ LmNTKRNRNNIAC7-CONH2 (sec. con núm. de ident.:31). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, Met (O) en la posición 27, y una Cys(Oxa4~ colesterol) (C7) en el lugar de la posición 38.

La OXM238 se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, Met (O) en la posición 27, y una Cys (acetamida) (C5) en el lugar de la posición 38. Este péptido tiene la misma secuencia peptídica de OXM237 y es un péptido de control sin colesterol pero con el tiol de la cisteina bloqueado con acetamida .

La OXM259-OX 268 y OXM306-308 (como se muestra en la Tabla 1) tiene la secuencia de aminoácidos de OXM pero en donde el aminoácido en la posición 2 se sustituyó con un aminoácido no natural para identificar las sustituciones de aminoácido que confieren resistencia a la actividad catalítica de DPP4.

Los péptidos análogos de la OXM que carecen de la secuencia de aminoácidos RNRNNIA (sec. con núm. de ident.:55) pueden exhibir, además, actividad agonista completa en los receptores GLP-1 y glucagón. Estos péptidos análogos de la OXM, junto con algunos péptidos adicionales basados en el péptido de tamaño completo de la OXM, se muestran en la Tabla 2. Estos péptidos análogos de la OXM truncados son variantes del género de péptidos de glucagón K (GcgK) , que se publicaron en la publicación de la solicitud internacional de patente núm. WO2007100535, de propiedad mancomunada. Los péptidos GcgK son péptidos en los cuales la secuencia de la OXM se ha truncado en el terminal C para eliminar los siete residuos de aminoácidos en el terminal C. El péptido resultante es uno de glucagón con un residuo de lisina adicional en el terminal C. Este péptido GcgK es compatible con un patrón de +/+ en el cual los péptidos muestran potencia subnanomolar tanto sobre el GLP-1R como sobre el GCGR. Por el contrario, la OXM nativa muestra potencia nanomolar sobre los dos receptores. Una ventaja adicional del péptido GcgK es que los dos residuos básicos de arginina en el terminal C se eliminaron. Esto fue importante en la construcción de los péptidos análogos lipidados (acilados o colesterilados ) que tienen actividad agonista doble GLP-1/GCGR. Nuestros datos han demostrado que los péptidos análogos lipidados con un pl por encima de 7 se basaron en la secuencia de OXM que estimula la degranulación de los mastocitos, mientras que los péptidos análogos lipidados con un pl de aproximadamente 5, no parecen estimular la degranulación de los mastocitos (véase Ejemplo 11) . Asi, sobre la base de nuestros resultados, para reducir el riesgo de que el péptido estimule la degranulación de los mastocitos, el pl de los péptidos análogos lipidados debe ser de aproximadamente 5. Por lo tanto, en aspectos particulares, los péptidos análogos lipidados tienen un pl menor que 6.0. En aspectos adicionales, los péptidos análogos lipidados tienen un pl entre 4.5 y 6.0. En un aspecto adicional, los péptidos análogos lipidados tienen un pl de aproximadamente 5.4. La reducción del pl se realiza mediante una o más de las siguientes tres estrategias diferentes: 1) la sustitución de los residuos en el péptido, 2) la introducción de un grupo carboxilato en el terminal C, y 3) la introducción de residuos negativos, tales como uno o más residuos de ácido gamma-carboxi-glutámico como espaciadores.

Por lo tanto, en un aspecto de los péptidos análogos de la OXM con un pl menor que 6.0, el grupo acilo o colesterol se une covalentemente al péptido mediante un espaciador que comprende dos residuos de ácido gamma-carboxi-glutámico . Los ejemplos de estos péptidos análogos incluyen los péptidos análogos que se muestran en la Tabla 2. Por ejemplo, los péptidos con un pl de aproximadamente 5.4 incluyen pero no se limitan a OXM345, OXM380, OXM381, OXM392, OX 395, OXM398, OXM399, OXM400 y OXM401. En otro aspecto de los péptidos análogos con un pl menor que 6.0, el grupo acilo o colesterol se une covalentemente a un aminoácido interno en los péptidos análogos mediante un espaciador que comprende uno o dos residuos de ácido gamma-carboxi-glutámico y el péptido además incluye uno o más residuos de ácido gamma-carboxi-glutámico que se unen covalentemente al residuo de lisina en el terminal C. Los ejemplos de estos péptidos análogos incluyen, pero no se limitan a OXM407, OXM408, OXM414 y OXM418. En otro aspecto de los péptidos análogos con un pl menor que 6.0, el grupo acilo o colesterol se une covalentemente al terminal C del péptido mediante un espaciador que comprende un residuos de ácido gamma-carboxi-glutámico y el péptido incluye, además, una o más sustituciones de aminoácidos para reducir el pl del péptido. La OXM374 es un ejemplo de un péptido análogo.

Por lo tanto, se proporciona, además, un péptido análogo que comprende la secuencia de aminoácidos HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK (sec. con núm. de ident.:109) en la cual el segundo aminoácido proveniente del terminal N del péptido se sustituye con un aminoácido que hace al péptido resistente a la escisión y la inactivación por la dipeptidil peptidasa IV; el péptido incluye una porción de lipido o colesterol unida covalentemente al péptido mediante un espaciador que comprende uno o más residuos de ácido gamma-glutámico, el péptido incluye opcionalmente de una a tres sustituciones de aminoácidos además de la sustitución en la posición 2; y el péptido incluye opcionalmente un grupo protector que, si está presente, se une al grupo carboxilo del terminal C del péptido; en el cual el péptido análogo tiene un pl menor que 6.0 y es un agonista doble del receptor de GLP-1 y del receptor de glucagón, y las sales farmacéuticamente aceptables de éstos. En aspectos particulares, los péptidos análogos tienen un pl entre 4 y 6, o un pl de aproximadamente 5.0, por ejemplo, un pl de aproximadamente de 5.4.

En aspectos adicionales, el aminoácido sustituido por el segundo aminoácido proveniente del terminal N del péptido análogo se selecciona a partir del grupo que consiste de D-serina, ácido a-aminoisobutírico, y ácidol-amino-l-ciclobutano carboxilico.

En aspectos particulares, el péptido análogo incluye una porción de colesterol unida covalentemente al grupo tiol de un residuo de cisteina que se une covalentemente al grupo e-amino del residuo de lisina en el terminal C del péptido análogo mediante un espaciador que comprende uno o más residuos de ácido gamma-glutámico. En una modalidad adicional, la porción de colesterol se une covalentemente al grupo tiol mediante el espaciador hidrófilo, el cual, en modalidades particulares, es un polímero etoxi que incluye de una a doce unidades etoxi, por ejemplo un polímero etoxi que incluye cuatro unidades etoxi .

En aspectos particulares, el péptido análogo incluye una porción de lípido que se une covalentemente al grupo e-amino de un residuo de lisina: en modalidades particulares la porción de lípido es un ácido graso, tal como una porción palmitoil, miristoil, o estearoil. En una modalidad adicional, la porción de lípido se une covalentemente al grupo e-amino del residuo de lisina mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico . En una modalidad adicional, la porción de lípido se une covalentemente al grupo e-amino del residuo de lisina en el terminal C mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico. En una modalidad adicional, la porción de lípido se une covalentemente al grupo e-amino del residuo de lisina mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico y el residuo de lisina se une al residuo de lisina en el terminal C mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico .

En aspectos adicionales, el péptido análogo incluye además, una o más sustituciones de aminoácidos en las posiciones de aminoácidos seleccionadas a partir del grupo que consiste de las posiciones 10, 12, 16, 17, 18 y 27. En modalidades particulares, el péptido análogo incluye una o más sustituciones de aminoácidos seleccionadas del grupo que consiste de lisina por tirosina en la posición 10, serina por lisina en la posición 12, ácido glutámico o ácido aminoisobutirico por serina en la posición 16, ácido glutámico por arginina en la posición 17, alanina por arginina en la posición 18, lisina por glutamina en la posición 20, y norleucina u O-metil-L-homoserina por metionina en la posición 27.

En una modalidad adicional, la tirosina en¦ la posición 10 en el péptido análogo se reemplaza con una lisina, y la porción de lipido se une covalentemente al grupo e-amino del residuo de lisina mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico . En otra modalidad, la glutamina en la posición 20 en el péptido análogo se reemplaza con lisina y la porción de lipido se une covalentemente al grupo e-amino de la lisina mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico. En cualquier modalidad, el péptido análogo incluye, además, uno o más residuos de ácido gamma-glutámico unido covalentemente al terminal C.

Se proporciona, además, un péptido análogo que comprende la estructura Z1-P-M-Z2 en donde P es un péptido que tiene la secuencia de aminoácidos HX1QGTFTSDX2SX3YLDX4X5X6AX7DFVQWLX8NTKX9X10 (sec. con núm. de ident.:110) en donde ?? es un residuo de D-serina, ácido -aminoisobutirico (aib) , ácido l-amino-l-ciclobutano carbo ilico (Acb) , ácido 1-amino-l-ciclohexano carboxilico (Acx) ; ácido alfa-aminobutirico (Abu) ; D- ácido alfa-aminobutirico (D-Abu) ; ácido aminovalérico Nva) ; beta-ciclopropil-alanina (Cpa) ; propargilglicina (Prg) ; alilglicina (Alg) ; ácido 2-amino-2-ciclohexil-propanoico (2-Cha) ; D-tercbutilglicina (D-tbg) ; vinilglicina (Vg) ; ácido 1-amino-l-ciclopropano carboxilico (Acp) ; o residuo de ácido 1-amino-l-ciclopentano carboxilico (Acpe) ; X2 es un residuo de tirosina (Y) o de lisina (K) ; X3 es un residuo de serina (S) o de lisina (K) ; X4 es serina (S) , ácido -aminoisobutírico (aib) , o residuo de ácido glutámico (E) ; X5 es un residuo de arginina (R) o de ácido glutámico (E) ; ?ß es un residuo de arginina (R) o de alalina (A) ; X7 es un residuo de glutamina (Q) o de lisina (K) ; X8 es un residuo de metionina ( ) , norleucina (Nle) , sulfóxido de metionina (m) , o O-metil-L-homoserina (o) ; X9 es un residuo de ácido gamma glutámico (yGlu) ; X10 es un residuo de ácido gamma glutámico (yGlu) o está ausente; ?? es un grupo protector opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo amino del terminal N, es (i) residuo de cisteina unido covalentemente a una porción de colesterol por un enlazador hidrófilo, (ii) un residuo de lisina unido covalentemente a una porción de lipido por un espaciador que comprende uno o más residuos de ácido gamma glutámico, o (iii) una porción de lipido, en donde M está unido covalentemente al terminal C o aminoácido interno de P por un espaciador que comprende uno o más residuos de ácido gamma glutámico; y Z2 es un grupo protector opcionalmente presente que, si está presente, se une al grupo carboxi del terminal C; y sales farmacéuticamente aceptables de éstos, en donde el péptido análogo o sal de éste tiene un pl de menos de 6.0 y es un agonista dual del receptor GLP-1 y agonista del receptor de glucagón. En aspectos particulares, los péptidos análogos tienen un pl entre 4 y 6, o un pl de aproximadamente 5.0, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, o 5.9, o un pl de aproximadamente 5.4 a 5.5.

En aspectos adicionales del péptido análogo, M es un residuo de cisteina que se une covalentemente a una porción de colesterol mediante un enlazador hidrófilo, y el residuo de cisteina se une al terminal C de P. En modalidades adicionales, el enlazador hidrófilo es un polímero etoxi que incluye de una a veinticuatro unidades etoxi, el cual en aspectos particulares pueden incluir, por ejemplo, cuatro unidades etoxi.

En aspectos adicionales, M es un residuo de lisina que se une covalentemente a una porción de lipido mediante un espaciador que comprende uno o más residuos de ácido gamma-glutámico y el residuo de lisina se une al terminal C de P, o M es un residuo de lisina que se une covalentemente a una porción de lípido mediante un espaciador que comprende uno o más residuos de ácido gamma-glutámico y el residuo de lisina está en la posición X2 o X7 de P. En aspectos particulares, la porción de lípido es una porción 5 palmitoil, miristoil o estearoil. Los ejemplos de estospéptidos análogos se muestran en la Tabla 2.

Cío = S- [42- (colest-5-en-3-iloxi) -2, 42-dioxo- 6, 9, 12, 15, 18,21, 24, 27, 30, 33, 36, 39-dodecaoxa-3-azadotetracont-l-il] -L-cisteína o Cys (oxai2-colesterol) Cu - S- [78- (colest-5-en-3-iloxi) -2, 78-dioxo- 6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36,39,42,45,48,51,54,57, 60, 63, 66, 69, 72,75-tetracosaoxa-3-azaoctaheptacont-l-il] -L-cisteina o Cys (oxa2 ~ colesterol) C12 = S- [38- (colest-5-en-3-iloxi) -2-oxo- 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36-undecaoxa-3-azaoctatriacont-l-il] -L-cisteina o Cys (oxai2-0-colesterol) Ttds= ácido l-amino- , 7 , 10-trioxa-13-tridecanamina succinimico ??= ácido gamma glutámico El péptido OXM290 es el precursor para OXM301 y OXM291 a 294 son precursores para el resto de los péptidos análogos que se muestran en la Tabla 2. La OXM301 es un 5 análogo que tiene D-Ser en la posición 2 del aminoácido para la resistencia a DPPIV, sustitución de Glu y Ala, respectivamente, por los residuos de Argi7 y Argis, y un grupo C (Oxa4~colesterol) (C7) para las propiedades farmacocinéticas mejoradas in vivo. Las sustituciones en 10 Argi7 y Argi8 se realizaron para aumentar la estabilidad in vivo, ya que estos residuos son sitios primarios de escisión proteolitica .

La OXM302 es un péptido análogo que carece de la secuencia de aminoácidos RNRNNIA (sec. con núm. de 15 ident.:96) en el terminal C (véase la publicación de la solicitud internacional núm. WO2007/100535 propiedad mancomunada, que se incorpora en la presente descripción en su totalidad) . Asi, la OXM302 es un aminoácido más largo que el péptido glucagón en un residuo lisina en el terminal C. En OXM302, la cual tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNT C7-CONH2 (sec. con núm. de ident.:52) hay una D-Ser en la posición 2 del aminoácido para la resistencia a DPPIV y un grupo C (0xa4-colesterol) (C7) para las propiedades farmacocinéticas mejoradas in vivo.

La OXM303 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTKC7-CONH2 (sec. con núm. de ident.:53). La D-Ser en la posición 2 del aminoácido proporciona resistencia a DPPIV, la sustitución de Glu y Ala, respectivamente, por los residuos Argi7 y Arg^g mejora la estabilidad y un grupo C (Oxa4-colesterol ) (C7) mejora las propiedades farmacocinéticas de los péptidos análogos in vivo.

La OXM304 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSERAQDFVQWLMNTKC7-CONH2 (sec. con núm. de ident.:54). La D-Ser en la posición 2 del aminoácido proporciona resistencia a DPPIV, la sustitución de Glu por los residuos Argi7mejora la estabilidad y un grupo C(Oxa4-colesterol) (C7) mejora las propiedades farmacocinéticas de los péptidos análogos in vivo. .

La OXM305 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSERAQDFVQWLMNTKC7-CONH2 (sec. con núm. de ident.:55). La D-Ser en la posición 2 del aminoácido proporciona resistencia a DPPIV, la sustitución de Ala por el residuo Argis mejora la estabilidad y un grupo C(Oxa4-colesterol) (C7) mejora las propiedades farmacocinéticas de los péptidos análogos in vivo.

La 0XM311 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQ LMNTK-K(palmitoil) -C0NH2 (sec. con núm. de ident.:56) . La D-ser en la posición 2 del aminoácido proporciona resistencia a DPPIV y el grupo K(palmitoil) mejora las propiedades farmacocinéticas de los péptidos análogos in vivo.

La OXM312 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQ LMNTKK(palmitoil) -CONH2 (sec. con núm. de ident.:57) . La D-ser en la posición 2 del aminoácido proporciona resistencia a DPPIV, la sustitución de Glu y Ala, respectivamente, por los residuos Argi7 y Argi8 mejora la estabilidad y el grupo K(palmitoil) mejora las propiedades farmacocinéticas de los péptidos análogos in vivo.

La OXM314 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-Ttds-K (palmitoil) -CONH2 (sec. con núm. de ident.:58) . La D-ser en la posición 2 del aminoácido proporciona resistencia a DPPIV y el grupo (palmitoil) mejora las propiedades farmacocinéticas de los péptidos análogos in vivo. El Ttds (ácido l-amino-4, 7, 10-trioxa-13-tridecanamina succinimico) es un enlazador que actúa como un espaciador hidrófilo y flexible entre la secuencia peptidica y el grupo K (palmitoil) .

La OXM313 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQ LMNTK-Ttds-K (palmitoil) -CONH2 (sec. con núm. de ident.:59) . La D-ser en la posición 2 del aminoácido proporciona resistencia a DPPIV, la sustitución de Glu y Ala, respectivamente, por los residuos Argi7 y Argig mejora la estabilidad y el grupo Ttds-K (palmitoil ) mejora las propiedades farmacocinéticas de los péptidos análogos in vivo.

La OXM317 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-YE-C4-CONH2 (sec. con núm. de ident.:60). En el péptido, hay una D-Ser en la posición 2 del aminoácido para la resistencia a DPPIV, y un residuo gamma glutámico unido al colest-5-en-3-il { [ (2R) -3-amino-2-(amino) -3-oxopropil] tio-}acetato (C4) para mejorar las propiedades farmacocinéticas in vivo. El residuo gamma glutámico (??) es un enlazador gue actúa como un espaciador flexible entre la secuencia peptidica y el grupo C4 .

La OXM318 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTK-YE-C4-CONH2 (sec. con núm. de ident.:61) . La D-ser en la posición 2 del aminoácido proporciona resistencia a DPPIV, la sustitución de Glu y Ala, respectivamente, por los residuos Argi7 y Argi8 mejora la estabilidad y el grupo ?? -C4 mejora las propiedades farmacocinéticas de los péptidos análogos in vivo.

La OX 319 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWL NTKC7-CONH2 (sec. con núm. de ident.:62). En el péptido, hay un Aib en la posición 2 del aminoácido para la resistencia a DPPIV, y el grupo C(Oxa4-colesterol) (C7) mejora las propiedades farmacocinéticas de los péptidos análogos in vivo.

La 0XM321 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQ LMNTKRNRNNIA-??- C4-CONH2 (sec. con núm. de ident.:63) . Es un análogo que tiene D-Ser en la posición 2 del aminoácido para la resistencia a DPPIV, la sustitución de Glu y Ala, respectivamente, por los residuos Ar917 Y Ar918 y un grupo C (-colesterol) (C4) mejora las propiedades farmacocinéticas in vivo. Las sustituciones en Argi7 y Argi8 se realizaron para aumentar la estabilidad in vivo, ya que estos residuos son sitios primarios de escisión proteolitica . El residuo gamma glutámico (??) es un enlazador que actúa como un espaciador flexible entre la secuencia peptidica y el grupo C4 .

La OXM323 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTKR-C7-CONH2 (sec. con núm. de ident.:64). La D-Ser en la posición 2 proporciona resistencia a DPPIV, la sustitución de Glu y Ala por los residuos Argi7 y Argis proporciona un péptido con estabilidad mejorada y el grupo C (Oxa4~colesterol) (C7) proporciona un péptido con propiedades farmacocinéticas mejoradas in vivo.

La OX 325 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSÉAAQDFVQWLMNTKRNRNNIAC7-CO2H (sec. con núm. de ident.:65). Es un análogo que tiene D-Ser en la posición 2 del aminoácido para la resistencia a DPPIV, la sustitución de Glu y Ala, respectivamente, por los residuos Ar917 y Argis, y un grupo C (0xa4~colesterol) (C7) mejora las propiedades farmacocinéticas in vivo. Las sustituciones en Argi7 y Argis se realizaron para aumentar la estabilidad in vivo, ya que estos residuos son sitios primarios de escisión proteolitica .

La OXM327 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDSERAQDFVQWLMNTKC7-C0NH2 (sec. con núm. de ident.:66). El Aib en la posición 2 proporciona resistencia a DPPIV, la sustitución de Glu por el residuo Argi7 proporciona un péptido con estabilidad mejorada y el grupo C (Oxa4-colesterol) (C7) proporciona propiedades farmacocinéticas mejoradas in vivo.

La OXM329 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-YE-C4-C02H (sec. con núm. de ident.:67). El Aib en la posición 2 proporciona resistencia a DPPIV y un grupo C (Oxa4-colesterol ) (C7) proporciona un péptido con propiedades farmacocinéticas mejoradas in vivo. El residuo gamma glutámico (??) es un enlazador que actúa como un espaciador flexible entre la secuencia peptidica y el grupo C4 .

La OXM330 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSEAAQDFVQWLMNTKRNRNNIA-??-? (Pam) -CONH2 ( sec . con núm. de ident.:68) . Es un análogo que tiene D-Ser en la posición 2 del aminoácido para la resistencia a DPPIV, la sustitución de Glu y Ala, respectivamente, por los residuos Argi7 y Ar<?18 y un grupo -K (palmitoil) mejora las propiedades farmacocinéticas de los péptidos análogos in vivo. El residuo gamma glutámico (??) es un enlazador que actúa como un espaciador flexible entre la secuencia peptidica y el grupo K(palmitoil) . Las sustituciones en Ar917 Y Ar<318 se realizaron para aumentar la estabilidad in vivo, ya que estos residuos son sitios primarios de escisión proteolitica .

La OXM345 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWL NTK-YE-YE-C4-C00H (sec. con núm. de ident.:69) . Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, dos ácidos gamma-glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciadores entre la secuencia peptidica, y el grupo colesterol, una Cys (colesterol) en la posición 33 (C4) · La 0XM355 tiene la estructura HSQGTFTSDYSSYLDSRRAQDFVQWLMNTK-YE-C4-COOH (sec. con núm. de ident.:70). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, una sustitución Lysi2Ser un ácido gamma-glutámico en la posición 31 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol una Cys (colesterol) en la posición 32 (C4) . Una serina en la posición 12 está presente en la secuencia peptidica de GLP-1. Por lo tanto, se espera que tenga al menos una potencia compatible en el GLP-1R. La sustitución Lysi2Ser elimina una carga positiva la cual resulta en un pl de aproximadamente 5.

La OX 357 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSRAAQDFVQWLMNTK-YE-C4-COOH (sec. con núm. de ident.:71). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, un ácido gamma-glutámico en la posición 31 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol uno Cys (colesterol) (C4) en la posición 32. La OXM357 difiere de la OXM345 porque tiene solamente un D-Glu mientras que la OXM345 tiene dos D-Glu.

La OXM359 tiene la estructura HSQGTFTSDYSSYLDSRRAQDFVQWLMNT -YE-C7-C00H (sec. con núm. de ident.:72). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, una sustitución Lysi2Ser un ácido gamma-glutámico en la posición 31 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (Oxa4~ colesterol) en la posición 32 (C7) . Asi, la OXM359 difiere de la OXM355 porque tiene C7 (grupo colesterol con el espaciador de tetraetilenglicol ) en lugar de C4 (colesterol sin espaciador de tetraetilenglicol) .

La OXM361 tiene la estructura HSQGTFTSDYS YLDSRAAQDFVQWLMNTK-YE-C7-COOH (sec. con núm. de ident.:73). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, una sustitución ArgisAla un ácido gamma-glutámico en la posición 31 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (Oxa4-colesterol) en la posición 32 (C7 en la tabla) . La sustitución Argi8Ala elimina una carga positiva la cual es importante para el ajuste del valor pl óptimo a 5.

La OXM373 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTK-YE-C4-COOH (sec. con núm. de ident.:74). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, una sustitución Seri6Glu, un ácido gamma-glutámico en la posición 31como espaciadores entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (colesterol) en la posición 32 (C4) . La Glu en la posición 16 está presente en el péptido exendina-4 de manera que se espera que esta sustitución sea al menos compatible con la activación de GLP-1R.

La OX 374 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTK-YE-C7-COOH (sec. con núm. de ident.:75). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, una sustitución SerisGlu, un ácido gamma-glutámico en la posición 31 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys(Oxa4~ colesterol) en la posición 32 (C7) . Asi, la diferencia entre OXM373 y 374 se debe a la presencia del espaciador de tetraetilenglicol unido al grupo colesterol en OXM374.

La OXM380 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-YE-YE-C7-COOH (sec. con núm. de ident.:76). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, dos ácidos gamma-glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (Oxa-j-colesterol) (C7) en la posición 33. La OX 380 tiene la misma secuencia peptidica de la OXM345 pero difiere en el espaciador Oxa4 unido al grupo colesterol.

La OXM381 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWL NT -YE-YE-Cg-COOH (sec. con núm. de ident.:77) . Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, dos ácidos gainma-glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (maleimida-0xai2-colesterol) (C9) en la posición 33. La OXM381 tiene la misma secuencia peptidica de la OX 345 y OX 380 que difiere en el espaciador maleimida-0xai2 unido al colesterol. La estructura de Cg se muestra a continuación.

La OXM383 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-YE-YE-C7-C00H (sec. con núm. de ident.:78) . Se diseñó para contener Aib (?) en la posición 2, dos ácidos gamma-glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (Oxa4-colesterol) (C7) en la posición 33. La OXM383 difiere de la OX 380 solamente con respecto al aminoácido en la posición 2.

La OXM388 tiene la estructura H-Acb-QGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWL NTK-YE-YE-C7-COOH (sec. con núm. de ident.:79) . Se diseñó para contener Acb en la posición 2, dos ácidos gamma-glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (Oxa-j-colesterol ) (C7) en la posición 33. La OX 388 difiere de la OX 380 y 383 solamente con respecto al aminoácido en la posición 2.

La OXM392 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDERRA DFVQWL NTK-YE-YE-CIO-COOH (puente de lactama entre ? y K) (sec. con núm. de ident.:80) . Se diseñó para contener Ser (s) en la posición 2, sustituciones Seri6Glu y Gln20Lys en donde la Glui6 y Lys20 están unidas con un puente de lactama en las cadenas laterales, dos ácidos gamma-glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (0xai2~colesterol) (Cío) en Ia posición 33. El puente de lactama está entre la posición i (16) e i+4 (20) y se usa para estabilizar la conformación alfa helicoidal del péptido y estabilizar el péptido contra la degradación proteolitica .

El grupo Cío difiere del grupo Cg por el enlace tioéter que conecta el grupo tiol de la cisteina al Oxai2~ colesterol. En Cg hay un enlace maleimida tioéter mientras que en Cío nay uno acetamida tioéter. La estructura de Cío se muestra a continuación.

La OXM395 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWL NTK-YE-vE-Cl0-C0OH (puente de lactama entre E y K) (sec. con núm. de ident.:81) . Se diseñó para contener Aib (?) en la posición 2, sustituciones Seri6Glu y un Gln20Lys en donde la Gluig y Lys20 están unidas con un puente de lactama entre las cadenas laterales, dos residuos de ácido gamma glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (Oxai2-colesterol ) (Cío) en la posición 33. El puente de lactama está entre la posición 16 ( i ) y 20 (i+4) y se usa para estabilizar la conformación alfa helicoidal del péptido y estabilizar el péptido contra la degradación proteolítica .

La OXM398 tiene la estructura H-Acb-QGTFTSDYSKYLDERRAKDFVQWLMNTK-YE-YE-CIO-COOH (puente de lactama entre ? and K) (sec. con núm. de ident.:82) . Se diseñó para contener Acb en la posición 2, sustituciones SerigGlu y un Gln20Lys en donde el Glui6 y Lys20 están unidas con un puente de lactama entre las cadenas laterales, dos residuos de ácido gamma glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (0xai2_colesterol ) (Cío) en la posición 33. El puente de lactama está entre la posición 16 (i) y 20 (i+4) y se usa para estabilizar la conformación alfa helicoidal del péptido y estabilizar el péptido contra la degradación proteolítica.

La OXM392, 395 y 398 difieren solamente en el aminoácido que está en la posición 2.

La OXM399 tiene la estructura HSQGTFTSDYS YLDSRRAQDFVQWLMNTK-YE-YE-CIO-COOH (sec. con núm. de ident.:83) . Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, dos residuos de ácido gamma glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (0xai2-colesterol) (Cío) en la posición 33. La OX 399 difiere de la OXM392 solamente en que carece del puente de lactama presente en OXM392.

La OX 400 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-YE-YE-CiQ-COOH (sec. con núm. de ident.:84). Se diseñó para contener Aib (?) en la posición 2, dos residuos de ácido gamma glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptídica, y el colesterol, una Cys (0xai2-colesterol ) (Cío) en la posición 33. El OX 400 difiere de la OXM395 solamente en que carece del puente de lactama presente en OXM395.

La OXM401 tiene la estructura H-Acb-QGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWL NTK-YE-YE-CIO-COOH (sec. con núm. de ident.:85). Se diseñó para contener Acb en la posición 2, dos ácidos gamma-glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (Oxai2-colesterol ) (Cío) en Ia posición 33. La OXM401 difiere de la OXM398 solamente en que carece del puente de lactama presente en OXM398. La OXM399, OXM40, y 401 difieren entre si en el aminoácido en la posición 2.

La OXM404 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-YE-YE-K(YE-palmitoil) -CONH2 (sec. con núm. de ident.:86). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, dos ácidos gamma-glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el grupo palmitoil, una Lys (DE-palmitoil ) en la posición 33. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM406 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDERRAQDFVQWLMNTK-yE-YE-Cio-CONH2 (sec. con núm. de ident.:87). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, una sustitución Seri6Glu, dos residuos de ácido gamma glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (0xai2~colesterol) (Cío) en la posición 33. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM407 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSRRAK (??-palmitoil) DFVQWLMNTK-YEYE-C0NH2 (sec. con núm. de ident.:88) . Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, dos residuos de ácido gamma glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el grupo palmitoil, una Lys (DE-palmitoil) en la posición 33. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OX 408 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSRRAK (??-??-palmitoil) DFVQWLMNTK~YE-CONH2 (sec. con núm. de ident.:89). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, un ácido gamma-glutámico en las posiciones 31, y un grupo palmitoil unido a dos residuos de ácido G-glutámico y al grupo amino de la cadena lateral de una lisina [Lys (DE-LTlE-palmitoil) ] en la posición 20. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM409 tiene la estructura HsQGTFTSDK(yE-YE-palmitoil) SKYLDSRRADFVQWLMNTK-C0NH2 (sec. con núm. de ident.:89). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2 y un grupo palmitoil unido a dos residuos de ácido D-glutámico y grupo amino de la cadena lateral de una lisina [Lys (DE-LTJE-palmitoil ) ] en la posición 10. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM410 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDERRAK(YE-YE-palmitoil) DFVQWLMNTK-CONH2 (sec. con núm. de ident.:91). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2 , una sustitución SerigGlu, y un grupo palmitoil unido a dos residuos de ácido ?-glutámico y al grupo amino de la cadena lateral de una lisina [Lys (GE-GDE-palmitoil) ] en la posición 20. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM411 tiene la estructura HSQGTFTSDK(YE-YE-palmitoil) SKYLDERRAQDFVQWLMNT -CONH2 (sec. con núm. de ident.:92). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, una sustitución Seri6Glu y un grupo palmitoil unido a dos residuos de ácido ?-glutámico y al grupo amino de la cadena lateral de una lisina [Lys (DE-nDE-palmitoil ) ] en la posición 10. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM412 tiene la estructura HsQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-YE-yE-Cii-COOH (sec. con núm. de ident.:93). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, dos residuos de ácido gamma glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (Oxa24_colesterol) (Cu) en la posición 33. El OXM412 difiere de la OXM399 por la longitud del espaciador Oxa unido al grupo colesterol. La estructura de Cu se muestra a continuación.

La OX 413 tiene la estructura H DGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVK(DOTA) WLmNTK-YE-YE-Cio-CONH2 (sec. con núm. de ident.:94). Se diseñó como un péptido para representar el GLP-1R objetivo in vivo. La secuencia contiene Aib en la posición 2, un Asp en la posición 3 para dar selectividad en el GLP-1R, una Lys(DOTA) en la posición 24, un Met(O) en la posición 27, dos residuos de ácido gamma glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptidica, y el colesterol, una Cys (0xai2_colesterol) (Cío) en la posición 33. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C. La estructura de Fmoc-Lys (DOTA) -OH se muestra a continuación.

La OXM414 tiene la estructura HSQGTFTSDK(YE- palmitoil)SKYLDERRAQDFVQWLMNTK-YE-C0NH2 (sec. con núm. de ident.:95) . Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, dos ácidos ?-glutámico en las posiciones 31, una sustitución Seri6Glu y un grupo palmitoil unido al grupo amino de la cadena lateral de una lisina [Lys (palmitoil) ] en la posición 10. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM415 tiene la estructura HsQGTFTSDK(palmitoil) SKYLDERRAQDFVQWLMNTK-YE-YE-CONH2 (sec. con núm. de ident.:96) . Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, un ácido ?-glutámico en las posiciones 31, una sustitución SerigGlu y un grupo palmitoil unido a un residuo de ácido D-glutámico y al grupo amino de la cadena lateral de una lisina [Lys (DE-palmitoil) ] en la posición 10. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM416 tiene la estructura HCXQGTFTSDK(YE-YE-palmitoil) SKYLDERRAQDFVQWL NT -CONH2 (sec. con núm. de ident.:97). Se diseñó para contener Aib (a) en la posición 2, una sustitución SerigGlu y un grupo palmitoil unido a dos residuos de ácido G-glutámico y al grupo amino de la cadena lateral de una lisina [Lys (DE-DGE-palmitoil) ] en la posición 10. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM417 tiene la estructura H-Acb-QGTFTSDK(YE-??-palmitoi1) SKYLDERRAQDFVQWLMNTK-CONH2 (sec. con núm. de ident.:98). Se diseñó para contener Acb en la posición 2, una sustitución Ser]_6Glu y un grupo palmitoil unido a dos residuos de ácido D-glutámico y al grupo amino de la cadena lateral de una lisina [Lys (DE-DDE-palmitoil) ] en la posición 10. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM418 tiene la estructura HSQGTFTSDK(YE-YE-palmitoil)SKYLDaRRAQDFVQWL NTK-YE-CONH2 (sec. con núm. de ident. :99) . Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, un ácido gamma-glutámico en las posiciones 31, una sustitución Ser]_6Aib (a) y un grupo palmitoil unido a dos residuos de ácido D-glutámico y al grupo amino de la cadena lateral de una lisina [Lys (DE-DDE-palmitoil ) ] en la posición 10. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM419 tiene la estructura HaQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-??-??-? (??-palmitoil) -CONH2 (sec. con núm. de ident. :100) . Se diseñó para contener Aib (a) en la posición 2, dos ácidos gamma-glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptídica, y el grupo palmitoil, una Lys (GE-palmitoil) en la posición 33. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OXM420 tiene la estructura H-Acb-QGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK-??-??-? (??-palmitoil) -CONH2 (sec. con núm. de ident. :101) . Se diseñó para contener Acb en la posición 2, dos ácidos gamma-glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptídica, y el grupo palmitoil, una Lys (DE-palmitoil) en la posición 33. El péptido en esta modalidad es amidado en el terminal C.

La OX 421 tiene la estructura HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQ LMNTK-YE-YE-CI2-C00H (sec. con núm. de ident.:102). Se diseñó para contener D-Ser (s) en la posición 2, dos residuos de ácido gamma glutámico en las posiciones 31 y 32 como espaciador entre la secuencia peptídica, y el colesterol, una Cys (Oxai2_0-colesterol ) (Ci2) en la posición 33. El Cys (0xai2-0-colesterol ) difiere de Cys (Oxai2_colesterol) en que tiene el colesterol unido a través de un enlace éter al espaciador Oxai2 . El enlace éter puede conferir más estabilidad hacia el enlace éster presente en el grupo Cys (Oxai2_colesterol ) o Cu. La estructura de Cys (oxai2_0-colesterol) se muestra a continuación.

Composiciones farmacéuticas Además se proporcionan composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más de los análogos de la OXM descritos en este documento para el tratamiento de un trastorno metabólico en un individuo. Tales trastornos incluyen, pero no se limitan a, la obesidad, síndrome metabólico o síndrome X, la diabetes tipo II, complicaciones de la diabetes como la retinopatía, la hipertensión, las dislipidemias, las enfermedades cardiovasculares, los cálculos biliares, la artrosis, y ciertas formas de cáncer. Los trastornos relacionados con la obesidad este documento están asociados con, causados por, o como resultado de la obesidad .

"La obesidad" es una condición en la cual hay un exceso de grasa corporal. La definición operativa de la obesidad se basa en el índice de Masa Corporal (IMC), calculado como el peso corporal por la altura en metros al cuadrado (kg/m2). "La obesidad" se refiere a una condición en la cual un sujeto por lo demás sano tiene un índice de Masa Corporal (IMC) mayor o igual a 30 kg/m2, o una condición en la cual un sujeto con al menos un co-morbilidad tiene un IMC superior o igual a 27 kg/m2. Un "sujeto obeso" es un sujeto por lo demás sano con un índice de Masa Corporal (IMC) mayor o igual a 30 kg/m2 o un sujeto con al menos una co-morbilidad con un IMC superior o igual a 27 kg/m2. Un "sujeto en riesgo de obesidad" es un sujeto por lo demás sanocon un IMC de 25 kg/m2 a menos de 30 kg/m2 o un sujeto con al menos una co-morbilidad con un IMC de 25 kg/m2 a menos de 27 kg/m2.

El aumento de los riesgos asociados con la obesidad ocurren en un índice de masa corporal más bajo (IMC) en los asiáticos. En los países asiáticos, incluyendo Japón, la "obesidad" se refiere a una condición en la cual un sujeto, con al menos una co-morbilidad inducida por la obesidad o relacionada con la obesidad, que requiere una reducción de peso o que podría mejorar con la reducción de peso, tiene un índice de masa corporal mayor o igual a 25 kg/m2. En los países asiáticos, incluido Japón, un "sujeto obeso" se refiere a un sujeto, con al menos una co-morbilidad inducida por la obesidad o relacionada a la obesidad que requiere una reducción de peso o que podría mejorar con la reducción de peso, con un mayor índice de masa corporal igual o superior a 25 kg/m2. En los países asiáticos, un "sujeto en situación de riesgo de obesidad" es un sujeto con un IMC superior a 23 kg/m2 a menos de 25 kg/m2.

Como se usa en este documento, el término "obesidad" está destinado a abarcar a todas las definiciones anteriores de obesidad.

Las co-morbilidades inducidas o relacionadas a la obesidad incluyen, pero no se limitan a, la diabetes, diabetes mellitus no insulino-dependiente-tipo 2, intolerancia a la glucosa, glucosa en ayunas, síndrome de resistencia a la insulina, dislipidemia, hipertensión, hiperuricacidemia, gota, enfermedad coronaria, infarto de miocardio, angina de pecho, síndrome de apnea del sueño, síndrome de Pickwick, hígado graso, infarto cerebral, trombosis cerebral, ataque isquémico transitorio, trastornos ortopédicos, artritis deformante, lumbodinia, emeniopatía e infertilidad. En particular, las co-morbilidades incluyen: la hipertensión, hiperlipidemia, dislipidemia, intolerancia a la glucosa, enfermedades cardiovasculares, apnea del sueño, diabetes mellitus y otras condiciones relacionadas con la obesidad.

"Tratamiento" (de la obesidad y los trastornos relacionados con la obesidad) se refiere a la administración de los compuestos de la presente invención para reducir o mantener el peso corporal de un sujeto obeso. Uno de los resultados del tratamiento puede ser reducir el peso corporal de un sujeto obeso en relación con el peso corporal del sujeto inmediatamente antes de la administración de los compuestos de la presente invención. Otro de los resultados del tratamiento puede ser prevenir recuperar el peso corporal del perdido previamente como resultado de la dieta, el ejercicio o la farmacoterapia . Otro de los resultados del tratamiento puede ser disminuir la ocurrencia y/o la gravedad de las enfermedades relacionadas con la obesidad. El tratamiento adecuado puede resultar en una reducción de la ingesta de calorías o alimentos por el sujeto, incluyendo una reducción en la ingesta total de alimentos, o una reducción de la ingesta de determinados componentes de la dieta, tales como carbohidratos o grasas, y/o la inhibición de la absorción de nutrientes, y/o la inhibición de la reducción de la tasa metabólica, y en la reducción de peso en los pacientes que lo necesitan. El tratamiento también puede resultar en una alteración de la tasa metabólica, tal como un aumento en la tasa metabólica, en lugar de o además de una inhibición de la reducción de la tasa metabólica, y/o en la minimización de la resistencia metabólica que suele producirse con la pérdida de peso.

"Prevención" (de la obesidad y los trastornos relacionados con la obesidad) se refiere a la administración de los compuestos de la presente invención para reducir o mantener el peso corporal de un sujeto con riesgo de obesidad. Uno de los resultados de la prevención puede ser la reducción del peso corporal de un sujeto en situación de riesgo de la obesidad en relación con el peso corporal del sujeto inmediatamente antes de la administración de los compuestos de la presente invención. Otro de los resultados de la prevención puede ser prevenir recuperar el peso corporal del perdido previamente como resultado de la dieta, el ejercicio o la farmacoterapia . Otro de los resultados de la prevención puede ser prevenir que ocurra la obesidad si el tratamiento se administra antes de la aparición de la obesidad en un sujeto con riesgo de obesidad. Otro de los resultados de la prevención se puede disminuir la ocurrencia y/o severidad de la obesidad, los trastornos relacionados con el tratamiento si se administra antes de la aparición de la obesidad en un sujeto con riesgo de obesidad. Por otra parte, si el tratamiento se inició en los sujetos ya obesos, dicho tratamiento puede prevenir la aparición, progresión o gravedad de los trastornos relacionados con la obesidad, tales como, pero no limitado a, la arteriosclerosis , diabetes tipo II, enfermedad ovárica poliquistica, enfermedades cardiovasculares, osteoartritis , trastornos dermatológicos, hipertensión, resistencia a la insulina, hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, y colelitiasis .

Los trastornos relacionados con la obesidad este documento están asociados con, causados por, o como resultado de la obesidad. Algunos ejemplos de trastornos relacionados con la obesidad incluyen comer en exceso y la bulimia, hipertensión, diabetes, elevación de las concentraciones de insulina en plasma y resistencia a la insulina, dislipidemias , hiperlipidemia, cáncer de endometrio, mama, próstata y de colon, osteoartritis, apnea obstructiva del sueño, colelitiasis, cálculos biliares, enfermedades del corazón, ritmo cardiaco anormal y arritmias, infarto de miocardio, insuficiencia cardiaca congestiva, enfermedad coronaria, muerte súbita, accidente cerebrovascular, enfermedad ovárica poliquistica, craneofaringioma, síndrome de Prader-Willi, Síndrome de Frohlich, sujetos con deficiencia de GH, variantes normales de talla baja, síndrome de Turner, y otras patologías que muestran una menor actividad metabólica o una disminución en el gasto energético en reposo como un porcentaje del total de masa libre de grasa, por ejemplo, los niños con leucemia linfoblástica aguda. Otros ejemplos de trastornos relacionados con la obesidad son el síndrome metabólico, también conocido como síndrome X, síndrome de resistencia a la insulina, disfunción sexual y reproductiva, tales como la infertilidad, hipogonadismo en los varones y hirsutismo en las mujeres, trastornos de la motilidad gastrointestinal, tales como reflujo gastro-esofágico relacionado con la obesidad, trastornos de las vías respiratorias, tales como el síndrome de hipoventilación-obesidad (síndrome de Pickwick) , trastornos cardiovasculares, inflamación, tales como inflamación sistémica de la vasculatura, arteriesclerosis, hipercolesterolemia, hiperuricemia, dolor de espalda, enfermedades de la vesícula, gota y cáncer de riñon. Los compuestos de la presente invención son también útiles para reducir el riesgo de los resultados secundarios de la obesidad, tales como la reducción del riesgo de hipertrofia ventricular izguierda.

El término "diabetes", como se usa en este documento, incluye tanto la diabetes mellitus insulino-dependiente (D ID, también conocida como diabetes tipo I) y diabetes mellitus no insulino-dependiente (DMNID, también conocida como diabetes de tipo II). La diabetes tipo I, o diabetes insulino-dependiente, es el resultado de una deficiencia absoluta de insulina, la hormona que regula la utilización de la glucosa. La diabetes tipo II, o diabetes no insulino-independiente (es decir, diabetes mellitus no dependiente de la insulina) , ocurre a menudo en condiciones normales, o incluso con niveles más elevados de insulina y parece ser el resultado de la incapacidad de los tejidos para responder adecuadamente a insulina. La mayoría de los diabéticos tipo II son obesos. Los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento tanto de diabetes tipo I y tipo II. Los compuestos son especialmente eficaces para el tratamiento de la diabetes tipo II. Los compuestos de la presente invención son también útiles para el tratamiento y/o prevención de la diabetes mellitus gestacional.

La Patente de EE.UU. n.° 6,852,690, que se incorpora en este documento en su totalidad, describe métodos para mejorar el metabolismo de los nutrientes que consiste en administrar a un paciente no diabético una formulación con una cantidad nutritivamente efectiva de uno o más nutrientes o cualquier combinación de éstos y uno o más péptidos insulinotrópicos . Los péptidos análogos de la OXM descritos en este documento son insulinotrópicos y pueden ser administrados a pacientes con un metabolismo de la glucosa alterada, como resistencia a la insulina pero sin manifestación de diabetes, así como a pacientes que por alguna razón no pueden recibir la nutrición a través del tubo digestivo. Estos pacientes incluyen los pacientes de cirugía, pacientes en estado de coma, pacientes en estado de shock, pacientes con enfermedad gastrointestinal, pacientes con enfermedad de la hormona del aparato digestivo, etc. En particular, los pacientes obesos, pacientes con aterosclerosis, acientes con enfermedad vascular, pacientes con diabetes gestacional, pacientes con enfermedades hepáticas como la cirrosis hepática, pacientes con acromegalia, pacientes con exceso de glucorticoide tales como con tratamiento de cortisol o enfermedad de Cushing, pacientes con hormonas contrarreguladoras activadas, como se produciría después de un trauma, accidentes, cirugía y similares, pacientes con hipertrigliceridemia y pacientes con pancreatitis crónica pueden ser fácil y convenientemente alimentados de acuerdo con la invención, sin someter al paciente a la hipo o hiperglucemia . En particular, la administración a este tipo de pacientes tiene como objetivo proporcionar una terapia que permita entregar los requerimientos nutricionales y calóricos del paciente lo más rápidamente posible, manteniendo su nivel de glucosa en plasma por debajo del llamado umbral renal a unos 160 a 180 miligramos por decilitro de glucosa en la sangre. Aunque pacientes normales que no tienen los niveles de glucosa apenas por debajo del umbral renal también pueden ser tratados de acuerdo con la invención, como se describe anteriormente, los pacientes con metabolismo de la glucosa alterada, como los pacientes hiperglucémicos cuyo nivel de glucosa en plasma se encuentra apenas por encima del umbral renal también encuentran el tratamiento adecuado para su condición. En particular, este tipo de pacientes que tienen un grado de hiperglucemia por debajo del umbral renal a intervalos intermitentes pueden recibir un tratamiento de combinación de nutrientes y péptidos insulinotrópicos , de acuerdo con cualquiera de los siguientes regímenes. Los pacientes normales no sufren de hiperglucemia también pueden ser tratados con los péptidos análogos descritos en este documento.

Los análogos de la OXM descritos en este documento pueden ser utilizados en una composición farmacéutica cuando se combina con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Estas composiciones comprenden una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más de los análogos de la OXM descritos en este documento y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Tal composición también puede estar compuesta por (además del análogo de la OXM descrito en este documento y un portador) diluyentes, cargas, sales, tampones, estabilizantes, solubilizantes , y otros materiales bien conocidos en la técnica. Composiciones que comprenden los análogos de la OXM descritos en este documento se pueden administrar, si así lo desea, en forma de sales, siempre y cuando las sales sean farmacéuticamente aceptables. Las sales se pueden preparar utilizando los métodos convencionales conocidos por los expertos en el arte de la química orgánica sintética.

El término "individuo" tiene la intención de incluir a los humanos y los animales domésticos o dosmesticadso como perros, gatos, caballos, etc. Por lo tanto, las composiciones que comprenden la fórmula I también son útiles para tratar o prevenir la obesidad y los trastornos relacionados con la obesidad en perros y gatos. Como tal, el término "mamífero" incluye a los animales domésticos como perros y gatos.

El término "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a sales preparadas a partir de bases o ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables, como bases inorgánicas u orgánicas y ácidos inorgánicos u orgánicos . Las sales derivadas de bases inorgánicas incluyen aluminio, amonio, calcio, cobre, hierro, magnesio, hierro, litio, sales de manganeso, manganeso, potasio, sodio, zinc, etc. Particularmente preferidos son las de amonio, calcio, magnesio, potasio y sales de sodio. Las sales derivadas bases orgánicas no tóxicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, aminas sustituidas incluyendo aminas sustituidas naturales, aminas cíclicas y resinas básicas de intercambio de iones, como la arginina, betaína, cafeína, colina, N, ' -dibenciletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol , 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etil-morfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, poliamina resinas, procaina, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina, y similares. El término "sal farmacéuticamente aceptable" incluye, además, todas las sales aceptables, tales como el acetato, lactobionato, bencenosulfonato, laurato, benzoato, malato, bicarbonato, maleato, bisulfato, mandelato, bitartrato, mesilato, borato, bromuro de metilo, bromuro, metilnitrate, edetato de calcio, metilsulfato, camsilato, mucato, carbonato, napsilato, cloruros, nitratos, ácido clavulánico, N-metilglucamina, citrato, sales de amonio, diclorhidrato, oleato, edetato, oxalato, edisilato, pamoato (embonato) , estolato, palmitato, esilato, pantotenato, fumarato, fosfato/difosfato, gluceptato, poligalacturonato, gluconato, salicilato, glutamato, estearato, glicolilarsanilato, sulfato, hexilresorcinato, subacetato, hidrabamina, succinato, bromhidrato, tanato, tartrato clorhidrato, hidroxinaftoato, teoclato, yoduro, tosilato, isotionato, tri-yoduro, lactato, panoato, valerato, y similares, que se pueden utilizar como una forma de dosificación para la modificación de la solubilidad o características de hidrólisis o puede ser utilizado en la liberación sostenida o formulaciones profármaco. Se entenderá que, como se usa en este documento, las referencias a los análogos de la OXM descritos en este documento pretenden incluir también las sales farmacéuticamente aceptables.

Tal como se utiliza en este documento, el término "farmacéuticamente aceptable" significa un material no tóxico que no interfiere con la eficacia de la actividad biológica del principio activo (s) , aprobado por una agencia reguladora del gobierno federal o un gobierno estatal o incluidos en el la Farmacopea de los EE.UU. o de otro tipo de farmacopea generalmente reconocida para su uso en animales y, más concretamente, en los seres humanos. El término "vehículo" se refiere a un diluyente, adyuvante, excipiente o vehículo con el que se administra la terapéutica, e incluye, pero no se limita a tales líquidos estériles como el agua y los aceites. Las características del portador dependerá de la vía de administración. Los análogos de la OXM descritos en este documento pueden estar en multímeros (por ejemplo, heterodímeros u homodímeros) o complejos con sí mismo u otros péptidos. Como resultado, las composiciones farmacéuticas de la invención pueden comprender uno o más análogos de la OXM descritos en este documento en la forma multimérica o complejada.

Como se usa en este documento, el término "cantidad terapéuticamente efectiva" se refiere a la cantidad total de cada componente activo de la composición farmacéutica o método que es suficiente para demostrar un beneficio significativo de pacientes, es decir, tratamiento, curación, prevención o mejoría de la condición médica pertinente, o un aumento en la tasa de tratamiento, curación, prevención o mejora de dichas condiciones.

Cuando se aplica a un ingrediente activo individual, administrado solo, el término se refiere a ese ingrediente solo. Cuando se aplica a una combinación, el término se refiere a la cantidad total de los ingredientes activos que dan como resultado el efecto terapéutico, si se administra en combinación, en serie, o al mismo tiempo.

La composición farmacológica puede comprender uno o más análogos de la OXM descritos en este documento; uno o más análogos de la OXM descritos en este documento y uno o más agentes para el tratamiento de un trastorno metabólico, o la composición farmacológica que comprende uno o más análogos de la OXM descritos en este documento pueden ser utilizados al mismo tiempo con una composición farmacológica que comprende un agente para el tratamiento de un trastorno metabólico. Tales trastornos incluyen, pero no se limitan a, la obesidad, síndrome metabólico o síndrome X, diabetes tipo II, complicaciones de la diabetes, hipertensión, dislipidemias , enfermedades cardiovasculares, cálculos biliares, artrosis, y ciertas formas de cáncer.

Cuando la composición farmacológica corresponde a otro agente para el tratamiento de un trastorno metabólico o el tratamiento incluye una segunda composición que comprende un agente farmacológico para el tratamiento de un trastorno metabólico, el agente incluye, pero no se limitan a, los antagonistas del receptor cannabinoide (CB1), antagonistas del receptor péptido similar al glucagón 1 (GLP-1), inhibidores de lipasa, tetrahidrolipstatina leptina, 2-4-dinitrofenol, acarbosa, sibutramina, fentamina, bloqueadores de la absorción de grasa, simvastatina, mevastatina, ezetimiba, atorvastatina, sitagliptina, metformina, orlistat, Qnexa, topiramato, naltrexona, bupriopion, fentermina, losartán, losartán con hidroclorotiazida, y similares.

Los agentes adecuados para uso en combinación con un compuesto de la presente invención, incluyen, pero no se limitan a: (A) antagonista del receptor U de la neuromedina, como se describe en la publicación de la solicitud internacional n.° WO2007/109135.

(B) agentes antidiabéticos, tales como (1) agonistas PPARy, tales como las glitazonas (por ejemplo: ciglitazona; darglitazona; englitazona; isaglitazona (MCC-555), pioglitazona (ACTOS), rosiglitazona (AVANDIA) , troglitazona, rivoglitazone, BRL49653, CLX-0921, 5-BTZD, GW-0207, LG-100641, R483, y LY-300512, y similares, y compuestos descritos en WO97/10813, 97/27857, 97/28115, 97/28137, 97/27847, 03/000685, y 03/027112 y SPPARMS (moduladores selectivos de los PPAR gamma) , tales como el T131 (Amgen) , FK614 (Fujisawa), netoglitazona y metaglidasen, (2) biguanidas como la buformina, metformina y fenformina, y similares, (3 ) inhibidores de la proteina tirosina fosfatasa-?? (PTP-1B) , tales como ISIS 113715, A-401 674, A-364504, IDD-3, IDD 2846, KP-40046, KR61639, MC52445, MC52453, C7, OC-060062, OC- 86839, OC29796, TTP-277BC1, y los agentes descritos en 04/041799, 04/050646, 02/26707, 02/26743, 04/092146, 03/048140, 04/089918, 03/002569, 04/065387, 04/127570, y 2004/167183 de EE.UU., (4) sulfonilureas tales como la acetohexamide, clorpropamida; diabinese, glibenclamida, glipizida, glibenclamida, glimepirida, gliclazida, glipentida; gliquidona; glisolamida, tolazamida y tolbutamida, y similares; (5) meglitinidas, tales como la repaglinida, metiglinida (GLUFAST) y nateglinida, y similares; (6) inhibidores de la alfa glucósido hidrolasa, tales como la acarbosa; adiposina; camiglibosa; emiglitato; miglitol; voglibosa; pradimicina-Q; salbostatina, ERC-711, MDL-25, 637, MDL-73, 945, y MOR 14, y similares; (7) inhibidores de la alfa-amilasa, tales como tendamistato, trestatina, y Al-3688, y similares; (8) secreatagogues de la insulina, tales como linoglirida nateglinida, mitiglinida (GLUFAST) , ID1101 A-4166, y similares; (9) inhibidores de la oxidación de los ácidos grasos, tales como clomoxir y etomoxir, y similares; (10) antagonistas de A2, tales como la midaglizola; isaglidola; deriglidola; idazoxan; earoxan y fluparoxan, y similares; (11) Los miméticos de la insulina o la insulina, tales como la biota, LP -100, novarapid, insulina detemir, insulina lispro, insulina glargina, suspensión de insulina zinc (lenta y ultralenta) ; insulina Lys-Pro, GLP-1 (17-36), el GLP-1 (73-7) (insulintropina) , GLP-1 (7-36) -NH2) exenatida/Exendina-4, exenatida LAR, Linaglutida, AVE0010, CJC 1131, BIM51077, CS 872, TH0318, BAY-694 326, GP010, ALBUGON (fusión GLP-1 con albúmina), HGX-007 (agonista EPAC), S-23521, y los compuestos descritos en 04/022004, WO 04/37859, y similares; (12) no tiazolidinedionas , tales como JT-501, y farglitazar (G -2570/GI-262579) , y similares; (13) antagonistas dobles del PPARa/?, tales ? como el AVE 0847, CLX- 0940, GW-1536, GW1929, GW-2433, RP-297, L-796449, LBM 642, LR-90, LY510919, K-0767, ONO 5129, SB 219994, TAK-559, TAK-654, 677954 (GlaxoSmithkline ), E-3030 (Eisai), LY510929 (Lilly), AK109 (Asahi) , DRF2655 (Dr. Reddy) , DRF8351 (Dr. Reddy) , MC3002 (Maxocore) , TY51501 (ToaEiyo) , naveglitazar, muraglitizar, peliglitazar, tesaglitazar (GALIDA) , reglitazar ( JTT-501) , chiglitazar, y los que se describen en la WO 99/16758, WO 99/19313, WO 99/20614, WO 99/38850, WO 00/23415, WO 00/23417, WO 00/23445, WO 00/50414, WO 01/00579, WO 01/79150, WO 02/062799, WO 03/033481, WO 03/033450, WO 03/033453, y (14) otro tipo de fármacos sensibilizantes a la insulina; (15) agonistas de los receptores VPAC2 ; (16) moduladores GLK, tales como PSN105, RO 281675, 274375 RO y los que se describen en WO 03/015774, WO 03/000262, WO 03/055482, WO 04/046139, WO 04/045614, WO 04/063179, WO 04/063194, WO 04/050645, y similares; (17) moduladores retinoides tales como los descritos en WO 03/000249; (18) inhibidores GS 3beta/GS 3, tales como la 4- [ 2- ( 2-bromofenil ) -4- (4-fluorofenil-lH-imidazol-5- il] piridina, CT21022, CT20026, CT-98023, SB-216763, SB410111, SB-675 236, CP-70949, XD4241 y los compuestos que se describen en WO 03/037869, 03/03877, 03/037891, 03/024447, 05/000192, 05/019218 y similares; (19) inhibidores de la glucógeno fosforilasa (HGLPa), tales como AVE 5688, PSN 357, GPI-879, los que se describen en WO 03/037864, WO 03/091213, WO 04/092158, WO 05/013975, WO 05/013981, 2004/0220229 de EE.UU., y JP 2004-196702, y similares; (20) promotores de consumo de ATP, tales como los que se describen en WO 03/007990; (21) las combinaciones fijas de agonistas de PPARy y metformina, tales como AVANDAMET; (22) agonistas del PPAR pan, tales como GSK 677954, (23) GPR40 (G-proteina del receptor acoplado 40) también llamado SNORF 55, tales como BG 700, y los que se describen en WO 04/041266, 04/022551, 03/099793; ( 24) GPR119 (también llamado RUP3; SNORF 25), tales como RUP3, HGPRBMY26, PFI 007, SNORF 25, (25) antagonistas de los receptores de adenosina 2B, tales como ATL-618, 802-ATL, E3080, y similares; (26) inhibidores de la carnitina palmitoil transferasa, tales como ST 1327 y ST 1326, y similares; (27) inhibidores de la fructosa 1,6-bisphospohatasa, tales como el CS-917, MB7803, y similares; (28) antagonistas de glucagón, tales como AT77077, BAY 694326, GW 4123X, NN2501, y los que se describen en WO 03/064404, WO 05/00781, 2004/0209928 de EE.UU., 2004/029943 de EE.UU., y similares; (30) inhibidores de la glucosa-6-fosfatasa ; (31) inhibidores de la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa (PEPCK ), (32) activadores de la piruvato deshidrogenasa quinasa (PDK) ; (33) agonistas RXR, tales como MC1036, CS00018, JNJ 10166806, y los que se describen en WO 04/089916, 6759546 de EE.UU., y similares; (34) inhibidores de SGLT, tales como AVE 2268, KGT 1251, T1095/RWJ 394718, (35) BLX-1002; (C) agentes reductores de lipidos, tales como (1) secuestradores de ácidos biliares, tales como la colestiramina, colesevelem, colestipol, derivados de dialquilaminoalquilo de un dextrano reticulado; Colestid®; LoCholest® y Questran®, y similares; (2) inhibidores de la H G -CoA reductasa, tales como la atorvastatina, itavastatin, pitavastatina, fluvastatina, lovastatina, pravastatina, rivastatina, rosuvastatina, simvastatina, rosuvastatina (ZD-4522), y similares, en particular, la simvastatina, (3) inhibidores de la HMG-CoA sintasa, (4) inhibidores de la absorción del colesterol, tales como FMVP4 (Forbes Medi-Tech) , KT6-971 (Kotobuki Farmacéutica), FM-VA12 (Forbes Medi-Tech), FM-VP-24 (Forbes Medi-Tech), esteres de estanol, beta-sitosterol, glucósidos de esteróles, tales como la tiquesida y azetidinonas, tales como la ezetimiba, y los que se describen en WO 04/005247 y similares; (5) inhibidores de la acil-coenzima A colesterol aciltransferasa (ACAT) , tales como la avasimiba, eflucimiba, pactimiba (KY505) , SMP 797 (Sumitomo), SM32504 (Sumitomo), y los que se describen en WO 03/091216, y similares; (6) inhibidores de la CETP, tales como JTT 705 (Japan Tobacco), torcetrapib, CP 532632, BAY63 2149 (Bayer) , SC 591, SC 795, y similares; (7) inhibidores de la escualeno-sintetasa; (8) anti-oxidantes , tales como el probucol, y similares; (9) agonistas del PPAR, talescomo el beclofibrato, benzafibrato, ciprofibrato, clofibrato, etofibrato, fenofibrato, gemcabeno, y gemfibrozilo, GW 7647, BM 170744 (Kowa) , LY518674 (Lilly ), GW590735 (GlaxoSmithkline), KRP-101 (Kyorin) , DRF10945 (Dr. Reddy) , NS-220/R1593 (Nippon Shinyaku/Roche, ST1929 (Sigma Tau) MC3001/ C3004 (MaxoCore Pharmaceuticals) , calcio gemcabene, otros derivados del ácido fibrico, tales como Atromid®, Lopid y Tricor®, y los que se describen en 6.548.538 EE.UU., y similares; (10) moduladores del receptor FXR, tales como GW 4064 (GlaxoSmithkline) , SR 103912, QRX401, LN-6691 (Lion Bioscience) , y los que se describen en WO 02/064125, WO 04/045511, y similares; (11) moduladores de los receptores LXR, tales como GW 3965 (GlaxoSmithkline) , T9013137, y XTC0179628 (X-CEPTOR Therapeutics/Sanyo), y los que se describen en WO 03/031408, WO 03/063796, WO 04/072041, y similares; (12) inhibidores de la síntesis de lipoproteínas, tales como la niacina, (13) inhibidores de la renina angiotensina (14); agonistas parciales del PPAR d, tales como los que se describen en WO 03/024395; (15) inhibidores de la reabsorción de los ácidos biliares, tales como BARI 1453, SC435, PHA384640, S8921, AZD7706, y similares, y secuestrantes de ácidos biliares, tales como colesevelam (WELCHOL/CHOLESTAGEL), (16) agonistas del PPARy, tales como GW 501516 (ligando, GSK) , GW 590735, GW-0742 (GlaxoSmithkline), T659 (Amgen/Tularik) , LY934 (Lilly) , NNC610050 (Novo Nordisk) y los que se describen en 097/28149, WO 01/79197, WO 02/14291, WO 02/46154, WO 02/46176, WO 02/076957, WO 03/016291, WO 03/033493, WO 03/035603, WO 03/072100, WO 03/097607, WO 04/005253, WO 04/007439 y JP10237049, y similares; (17) inhibidores de la síntesis de triglicéridos ; (18) inhibidores la proteína microsomal de transporte de triglicéridos (MTTP) , tales como la implitapida, LAB687, JTT130 (Japan Tobacco), CP346086, y los que se describen en WO 03/072532, y similares; (19) moduladores de la transcripción, (20) inhibidores de la escualeno epoxidasa; (21) inductores del receptor de lipoproteínas de baja densidad (LDL) ; (22) inhibidores de la agregación plaquetaria, (23) inhibidores 5-LO o FLAP, y (24) agonistas del receptor de la niacina incluyendo agonistas de los receptores H 74A; ( 25) moduladores del PPAR, tales como los descritos en WO 01/25181, WO 01/79150, WO 02/79162, WO 02/081428, WO 03/016265, WO 03/033453; (26) niacina-cromo ligado, como se describe en WO 03/039535; (27) derivados sustituido del ácido como se describe en WO 03/040114; (28) HDL infundido, tal como LUV/ETC-588 (Pfizer), APO-A1 ilano/ETC216 (Pfizer), ETC-642 (Pfizer), ISIS301012, D4F (Bruin Pharma) , ApoAl, Bioral Apo Al triméricos sintéticos dirigidos a las células en espuma, y similares; (29) inhibidores de la IBAT, tales como BARI143/HMR145A/HMR1453 (Sanofi-Aventis, PHA384640E (Pfizer), S8921 (Shionogi ) AZD7806 (AstrZeneca) , AK105 (Asah Kasei) , y similares; (30) inhibidores de Lp-PLA2, tales como SB480848 (GlaxoSmithkline), 659032 (GlaxoSmithkline), 677116 (GlaxoSmithkline) , y similares; (31) otros agentes que afectan a la composición lipidica incluyendo ETC1001/ESP31015 (Pfizer), ESP-55016 (Pfizer), AGI1067 (ATHEROGENICS) , AC3056 (Amylin) , AZD4619 (AstraZeneca) , y (D) agentes antihipertensivos , tales como (1) diuréticos, tales como las tiazidas, incluyendo la clortalidona, clortiazida, diclorofenamida, hidroflumetiazida, indapamida, hidroclorotiazida, los diuréticos del asa,, tales como la bumetanida, ácido etacrinico, furosemida y torasemida, agentes ahorradores de potasio, tales como la amilorida y triamtereno, los antagonistas de aldosterona, tales como la espironolactona, epirenona, y similares; (2) bloqueadores beta-adrenérgicos, tales como el acebutolol, atenolol, betaxolol, bevantolol, bisoprolol, bopindolol, carteolol, carvedilol, celiprolol, esmolol, indenolol, metaprolol, nadolol, nebivolol, penbutolol, pindolol, propanolol, sotalol, tertatolol, tilisolol y timolol, y similares, (3) antagonistas del calcio, tales como la amlodipina, aranidipina, azelnidipina, barnidipina, benidipina, bepridilo, cinaldipina, clevidipina, diltiazem, efonidipina, felodipina, galopamilo, isradipina, lacidipina, lemildipina, lercanidipina, nicardipina, nifedipina, nilvadipina, nimodepina, nisoldipina, nitrendipina, manidipina, pranidipina y verapamilo, y similares; (4) la enzima convertidora de angiotensina (ACE) , tal como el benazeprilo, captoprilo, cilazaprilo; delaprilo, enalaprilo, fosinoprilo, imidaprilo; losinoprilo; moexiprilo, quinaprilo; quinaprilato, ramiprilo, perindoprilo, perindroprilo; quaniprilo; espirapriol; tenocaprilo; trandolaprilo y el zofenoprilo, y similares; (5) inhibidores de la endopeptidasa neutra, tal como el omapatrilato, cadoxatrilo y ecadotrio, fosidotrilo, sampatrilato, AVE7688, ER4030, y similares; (6) antagonistas de la endotelina, tales como el tezosentán, A308165, y YM62899, y similares; (7) vasodilatadores, tales como la hidralazina, clonidina, minoxidilo, y el alcohol nicotinilo, y similares; (8) antagonistas de la angiotensina II, tales como el candesartán, eprosartán, irbesartán, losartán, pratosartán, tasosartán, telmisartán, valsartán, y EXP 3137, FI6828K y RNH6270, y similares; (9) bloquedores adrenérgicos a/ß, tales como el nipradilolo, arotinololo y amosulalolo, y similares; (10) bloqueadores alfa-1, tales como la terazosina, urapidilo, prazosina, bunazosina, trimazosina, doxazosina, naftopidilo, indoramina, WHIP 164 y XEN010, y similares; (11) agonistas alfa-2, tales como la lofexidina, tiamenidina, moxonidina, rilmenidina y guanobenz, y similares; (12) inhibidores de la aldosterona, y similares; (13) agentes de unión de la angiopoyetina-2 , tales como los descritos en WO 03/030833 y (E) agentes contra la obesidad, tales como los inhibidores de transporte (1) 5-HT (serotonina) , tales como la paroxetina, fluoxetina, fenfluramina, fluvoxamina, sertralina e imipramina, y los que se describen en WO 03/00663, asi como inhibidores de recaptación de la serotonina/noradrenalina, tales como la sibutramina (MERIDIA/REDUCTIL) y el inhibidor de la captación de la dopamina/ inhibidores de la captación de la norepenefriña, tales como el clorhidrato de radafaxina, 353162 (GlaxoSmithkline) , y similares; inhibidores de transporte de (2) NE (norepinefriña) , tales como GW 320659, despiramina, talsupram y nomifensina, antagonistas/agonistas inversos del (3) CB1 (receptor cannabinoide-1 ) , tales como rimonabant (ACCOMPLIA Sanofi Synthelabo) , SR-147778 (Sanofi Synthelabo) , AVE1625 (Sanofi-Aventis) , BAY 65-2520 (Bayer ), SLV 319 (Solvay) , SLV326 (Solvay), CP945598 (Pfizer), E-6776 (Esteve) , 01691 (Organix) , ORG14481 (Organon) , VER24343 (Vernalis), NESS0327 (Universidad de Sassari/Universidad de Cagliari) , y los descritos en las patentes de EE.UU. n°.s. 4,973,587, 5,013,837, 5,081,122, 5,112,820, 5,292,736, 5,532,237, 5,624,941, 6,028,084, y 6,509367; y WO 96/33159 y, WO97/29079, W098/31227, WO 98/33765, WO98/37061, W098/41519, W098/43635, W098/43636, WO99/02499, WO00/10967, WO00/10968, WO 01/09120, WO 01/58869, WO 01/64632, WO 01/64633, WO 01/64634, WO 01/70700, WO 01/96330, WO 02/076949, WO 03/006007, WO 03/007887, WO 03/020217, WO 03/026647, WO 03/026648, WO 03/027069, WO 03/027076, WO 03/027114, WO 03/037332, WO 03/040107, WO 04/096763, WO 04/111039, WO 04/111033, WO 04/111034, WO 04/111038, WO 04/013120, WO 05/000301, WO 05/016286, WO 05/066126 y EP-658546 y similares; (4) agonistas/antagonistas de la grelina, tales como BVT81-97 (Biovitrum) , RC1291 (Rejuvenon) , SRD 04.677 (Sumitomo) , grelina unacilada (TheraTechnologies ) , y los que se describen en WO 01/87335, WO 02/08250, WO 05/012331, y similares; (5) antagonistas/agonistas inversos de la H3 (histamina H3) , tales como la tioperamida, 3- (lH-imidazol-4-il) propil N-( 4-pentenilo) carbamato) , clobenpropit, iodophenpropit, imoproxifan, GT2394 (Gliatech) , y A331440, y los que se describen en WO 02/15905 y O- [3- ( lH-imidazol-4-il ) propanol] carbamatos (Kiec-Kononowicz, K. et al, Pharmazie, 55:349-55 (2000)), antagonistas de los receptores de la piperidina que contienen histamina H3- (Lazewska, D. eü ai. Pharmazie, 56:927-32 (2001), derivados de la benzofenona y compuestos relacionados (Sasse, A. et al., Arco. Pharm.

(Weinheim) 334:45-52 (2001)), N-fenilcarbamatos sustituidos (Reidemeister, S. et al. Pharmazie, 55:83-6 (2000)), y derivados de proxifen (Sasse, A. et al ., J. Med. Chem. 43:3335-43 (2000)) y moduladores del receptor histamina H3, tales como los descritos en WO 03/024928 y WO 03/024929; (6) antagonistas del receptor la hormona concentradora de melanina 1 (MCH1R) tales como T-226296 (Takeda ) , T71 (Takeda/Amgen) , AMGN-608450, AMGN-503796 (Amgen) , 856464 (GlaxoSmithkline) , A224940 (Abbott), A798 (Abbott), ATC0175/AR224349 (Arena Pharmaceuticals ) , GW803430 (GlaxoSmithkine) , BI- 1A (Neurocrine Biosciences) , NGX-1 (Neurogen) , SNP-7941 (Synaptic) , SNAP9847 (Synaptic), T-226.293 (Schering Plough) , TPI-1361-17 (Saitama Medical School/University of California Irvine) , y los descritos en WO 01/21169, WO 01/82925, WO 01/87834, WO 02/051809, O 02/06245, WO 02/076929, WO 02/076947, WO 02/04433, WO 02/51809, WO 02/083134, WO 02/094799, WO 03/004027, WO 03/13574, WO 03/15769, WO 03/028641, WO 03/035624, WO 03/033476, WO 03/033480, WO 04/004611, WO 04/004726, WO 04/011438, WO 04/028459, WO 04/034702, WO 04/039764, WO 04/052848, WO 04/087680; y solicitud de patente japonesa N ° JP 13226269, JP 1437059, JP2004315511 , y similares; (7) agonistas/antagonistas de la MCH2R (hormona concentradora de melanina 2R) (8) antagonistas del NPY1 (neuropéptido Y Yl), tales como BMS205749, BIBP3226, J -115814, BIBO 3304, LY-357897, CP-671906, y GI-264879A, y los descritos en la Patente de EE.UU. n.° 6,001,836 y en WO 96/14307, WO 01/23387, WO 99/51600, WO 01/85690, WO 01/85098, WO 01/85173, WO 01/89528 y, (9) antagonistas del NPY5 (neuropéptido Y Y5), tales como 152,804, S2367 (Shionogi), E-6999 (Esteve), GW-569180A, GW-594884A (GlaxoSmithkline ) , GW-587081X, GW-548118X; FR 235,208; FR226928, FR 240662, FR252384; 1229U91, GI-264879A, CGP71683A, C-75 (Fasgen) LY-377897, LY366377, PD-160170, SR-120562A, SR-120819A, S2367 (Shionogi), JCF-104, y H409/22, y los compuestos descritos en las patentes de EE.UU. n°.s. 6,140,354, 6,191,160, 6,258,837, 6,313,298, 6,326,375, 6,329,395, 6,335,345, 6,337,332, 6,329,395, y6, 340, 683 ; y EP-01010691, EP-01044970, y FR252384 y publicación PCT números WO 97/19682, WO 97/20820, WO 97/20821, WO 97/20822, WO 97/20823, WO 98/27063, WO 00/107409, WO 00/185714, WO 00/185730, WO 00/64880, WO 00/68197, WO 00/69849, WO 01/09120, WO 01/14376, WO 01/85714, WO 01/85730, WO 01/07409, WO 01/02379, WO 01/02379, WO 01/23388, WO 01/23389, WO 01/44201, WO 01/62737, WO 01/62738, WO 01/09120, WO 02/20488, WO 02/22592, WO 02/48152, WO 02/49648, WO 02/051806, WO 02/094789, WO 03/009845, WO 03/014083, WO 03/022849, WO 03/028726, WO 05/014592, WO 05/01493;. y Norman et al, J. Med . Chem. 43:4288-4312 (2000); (10) leptina, tal como la leptina humana recombinante (PEG-OB, Hoffman La Roche) y leptina humana recombinante (Amgen) , (11) derivados de la leptina, tales como los descritos en las patentes n.°s 5,552,524; 5,552,523; 5,552,522; 5,521,283; y WO 96/23513; WO 96/23514; WO 96/23515; WO 96/23516; WO 96/23517; WO 96/23518; WO 96/23519; y WO 96/23520; (12) antagonistas de los opioides, tales como el nalmefeno (Revex®) , 3 metoxinaltrexona, naloxona y naltrexona, y los que se describen en WO 00/21509, (13) antagonistas de la orexina, tales como el SB-334867-A (GlaxoSmithkline ) ; y los que se describen en WO 01/96302, 01/68609, 02/44172, 02/51232, 02/51838, 02/089800, 02/090355, 03/023561, 03/032991, 03/037847, 04/004733, 04/026866, 04/041791, 04/085403, y similares; (14) agonistas del BRS3 (subtipo de receptores de bombesina 3), (15) agonistas de la CCK-A (colecistoquinina-A) , tales como el AR-R 15849, GI 181771, JMV-180, A-71378, A-71623, PD170292, PD 149164, SR146131, SR125180, butabindida, y los que se describen en la patente de EE.UU. n° . 5,739,106; (16) CNTF (factores neurotróficos ciliares), tales como la GI-181771 (Glaxo-SmithKline) ; SR146131 (Sanofi Synthelabo) ; butabindida y PD170,292, PD 149164 (Pfizer), (17) derivados de CNTF, tales como la axokina (Regeneron) ; y los que se describen en WO 94/09134, O 98/22128, O 99/43813 y, (18) agonistas de la SGA (receptor de secretagogos de la hormona del crecimiento), tales como NN703, hexarelina, MK-0677, SM-130 686, CP-424, 391, L-692, 429 y L-163, 255, y los descritos en la Patente de EE.UU. n° . 6358951, la solicitud de patente de EE.UU. n° . 2002/049196 y 2002/022637, WO 01/56592 y, WO 02/32888 y, (19) agonistas del 5HT2c (receptor de la serotonina 2c), tales como APD3546/AR10A (Arena Pharmaceuticals) , ATH88651 (Athersys) , ATH88740 (Athersys), BVT933 (Biovitrum/GSK) , DPCA37215 (B S) , IK264, LY448100 (Lilly), PNU 22394; MANERA 470 (Wyeth ), WAY629 (Wyeth), WAY161503 (Biovitrum) , R-1065, VR1065 (Vernalis/Roche) YM 348, y los descritos en la Patente de EE.UU. n°. 3,914,250, y Publicaciones PCT 01/66548, 02/36596, 02/48124, 02/10169, 02/44152, 02/51844, 02/40456, 02/40457, 03/057698, 05/000849, y similares; (20) agonistas del MC3R (receptor de la melanocortina 3); (21) agonistas del MC4R (receptor de la melanocortina 4), tales como CHIR86036 (Chiron) , CHIR915 (Chiron) , ME-10142 (Melacure) , E-10145 (Melacure) , HS-131 (Melacure) , NBI72432 (Neurocrine Biosciences ) , NNC 70-619 (Novo Nordisk) , TTP2435 (Transtech) y los descritos en las Publicaciones PCT WO 99/64002, 00/74679, 01/991752, 01/0125192, 01/52880, 01/74844, 01/70708, 01/70337, 01/91752, 01/010842, 02/059095, 02/059107, 02/059108, 02/059117, 02/062766, 02/069095, 02/12166, 02/11715, 02/12178, 02/15909, 02/38544, 02/068387, 02/068388, 02/067869, 02/081430, 03/06604, 03/007949, 03/009847, 03/009850, 03/013509, 03/031410, 03/094918, 04/028453, 04/048345, 04/050610, 04/075823, 04/083208, 04/089951, 05/000339 y EP 1460069, 2005049269 EE.UU., y JP2005042839, y similares; (22) inhibidores de la recaptación de monoamina, tales como la sibutratmina (MeridiaO/Reductil®) y sales de estos productos, y los compuestos descritos en las patentes de EE.UU. n°.s 4,746,680, 4,806,570, y 5,436,272, y la Publicación de Patente de EE.UU. n° . 2002/0006964, y WO 01/27068 y WO 01/62341, (23) inhibidores de la recaptación de la serotonina, tales como la dexfenfluramina, fluoxetina, y los de la patente de EE.UU. n° . 6,365, 633,, WO 01/27060 y, WO 01/162341 y, (24) agonistas del GLP-1 (péptido similar al glucagón 1) ; (25) , topiramato (Topimax®), ( 26) compuesto Phytopharm 57 (CP 644673); (27) inhibidores de la ACC2 (acetil-CoA carboxilasa-2) ; (28) agonistas del ß3 (receptor adrenérgico beta 3) , tales como el rafebergron/AD9677/TA 677 (Dainippon/Takeda) , CL-316, 243, SB 418790, BRL-37344, L-796568, BMS-196085, BRL-35135A, CGP12177A, BTA-243, GRC1087 (Glenmark Pharmaceuticals) GW 427 353 (hidrocloruro de solabegron) , Trecadrina, Zeneca D7114, N-5984 (Nisshin Kyorin) , LY-377604 (Lilly), KT07924 (Kissei) , SR 59119A, y los descritos en las Patentes de EE.UU. n.°s 5,705,515, 5,451,677 y W094/18161, W095/29159, W097/46556, O98/04526 W098/32753, WO 01/74782, WO 02/32897, WO 03/014113, WO 03/016276, WO 03/016307, WO 03/024948, WO 03/024953, WO 03/037881, WO 04/108674, y similares; (29) inhibidores de la DGAT1 (diacilglicerol aciltransferasa 1), (30) inhibidores de la DGAT2 (diacilglicerol aciltransferasa 2), (31) inhibidores de la FAS (sintasa de ácidos grasos), tales como la cerulenina y C75; (32) inhibidores de la PDE ( fosfodiesterasa) , tales como la teofilina, pentoxifilina, zaprinast, sildenafil, amrinona, milrinona, cilostamida, rolipram, y cilomilast, asi como los que se describen en WO 03/037432, WO 03/037899; (33) agonistas de la hormona tiroidea ß, tales como KB-2611 ( aroBioBMS ) , y los que se describen en WO 02/15845 y solicitud de patente japonesa n.° JP 2000256190, (34) activadores de la UCP-1 (proteina desacoplante 1, 2 o 3) /sic./, tales como el ácido fitánico, 4- [(E) -2- (5, 6, 7, 8-tetrahidro-5, 5, 8, 8-tetrametil-2-naftalenilo) -1-propenilo] ácido benzoico ( TTNPB) , y ácido retinoico, y los que se describen en WO 99/00123, (35) acil-estrógenos , tales como la oleoil-estrona, descrita en del Mar-Grasa, M. et al, Obesity Research, 9:202-9. (2001); (36) antagonistas de los receptores de glucocorticoides, tales como CP472555 (Pfizer), KB 3305, y los que se describen en WO 04/000869, O 04/075864, y similares; (37) inhibidores de la 11ß HSD-1 (11-beta hidroxi esteroide deshidrogenasa tipo 1) , tales como BVT 3498 (AMG 331), BVT 2733, 3- ( 1-adamantil ) -4-etil-5-(etiltio) -4H-1, 2, 4-triazol, 3- (1-adamantil) -5-(3,4,5-trimetoxifenil) -4-metil-4H-l, 2, 4-triazol, 3-adamantanil- , 5,6,7,8,9,10, 11,12,3 uno-decahidro-1 , 2 , 4-triazol [4,3-a] [11] anuleno, y los compuestos descritos en WO 01/90091, 01/90090, 01/90092, 02/072084, 04/011410, 04/033427, 04/041264, 04/027047, 04/056744, 04/065351, 04/089415, 04/037251, y similares; (38) inhibidores de la SCD-1 (estearoil-CoA desaturasa-1) , (39) inhibidores de la dipeptidil peptidasa IV (DPP-4), tales como la isoleucina tiazolidida, pirolidida valina, la sitagliptina, saxagliptina, NVP DPP728, LAF237 (vildagliptina), P93/01, TSL 225, TMC-2A/2B/2C, FE 999011, P9310/K364, VIP 0177, SDZ 274-444, GSK 823093, E 3024, SYR 322, TS021, SSR 162369, GRC 8200, K579, NN7201, CR 14023, PHX 1004, PHX 1149, PT-630, SK-0403, y los compuestos descritos en WO 02/083128, WO 02/062764, WO 02/14271, WO 03/000180, WO 03/000181, WO 03/000250, WO 03/002530, WO 03/002531, WO 03/002553, WO 03/002593, WO 03/004498, WO 03/004496, WO 03/005766, WO 03/017936, WO 03/024942, WO 03/024965, WO 03/033524, WO 03/055881, WO 03/057144, WO 03/037327, WO 04/041795, WO 04/071454, WO 04/0214870, WO 04/041273, WO 04/041820, WO 04/050658, WO 04/046106, WO 04/067509, WO 04/048532, WO 04/099185, WO 04/108730, O 05/009956, WO 04/09806, WO 05/023762, 2005/043292 EE.UU., y EP 1 258 476; (40) inhibidores de la lipasa, tales como la tetrahidrolipstatina (orlistat/XENICAL) , ATL962 (Alizyme/Takeda) , GT389255 (Genzyme/Peptimmune) Tritón WR1339, RHC80267, lipstatina, teasaponina y fosfato de dietilumbeliferilo, FL-386, AY-121898, Bay -N-3176, valilactona, esteracin, ebelactona A, B ebelactona y RHC 80267, y los que se describen en WO 01/77094, WO 04/111004, y Patentes de EE.UU. n.°s 4,598,089, 4,452,813, 5,512,565, 5,391,571, 5,602,151, 4,405,644, 4,189,438, y 4,242,453, y similares; (41) inhibidores del transporte de ácido graso; (42) inhibidores del transporte de dicarboxilato; (43) iinhibidores del transporte de glucosa, y (44) inhibidores del transporte de fosfato, (45) compuestos biciclicos anorexigenos, tales como 1426 (Aventis ) y 1954 (Aventis), y los compuestos descritos en WO 00/18749, WO 01/32638, WO 01/62746, WO 01/62747 y WO 03/015769; (46) agonistas del péptido YY y PYY, tales como PYY336 (Nastech/Merck) , AC162352 (IC Innovations/Curis/Amylin) , TM30335/T 30338 (7TM Pharma) , PYY336 (Emisphere Tehcnologies) , péptido PEGilado YY3-36, los que se describen en WO 03/026591, 04/089279, y similares, (47) moduladores del metabolismo lipidico, tales como el ácido maslinico, eritrodiol, ácido ursólico uvaol, ácido betulinico, betulina, y similares, y los compuestos descritos en 03/011267; (48) moduladores de factores de transcripción, tales como los descritos en WO 03/026576; (49) moduladores del Mc5r (5 melanocortina receptor), tales como los descritos en WO 97/19952, WO 00/15826 WO 00/15790, 20030092041 EE.UU., y similares; (50) factor neutotropic derivado del cerebro (BDNF) , (51) - moduladores del receptor de la melanocortina 1 (Mclr ) , tales como LK-184 (Procter & Gamble), y similares; (52) antagonistas 5HT6, tales como BVT74316 (Biovitrum) , BVT5182c (Biovitrum), E-6795 (Esteve) , E-6814 (Esteve) , SB399885 (GlaxoSmithkline) , SB271046 (GlaxoSmithkline) , RO- 046 790 (Roche), y similares; (53) proteina de transporte de ácidos grasos 4 ( FATP4) ; (54) acetil-CoA carboxilasa (ACC), tales como los inhibidores de CP640186, CP610431, CP640188 (Pfizer) , (55) C-terminal de los fragmentos de la hormona de crecimiento, tales como AOD9604 (Monash Univ/ etabolic Pharmaceuticals ) , y similares; (56) oxintomodulina; (57) antagonistas de los receptores del neuropéptido FF, tales como los descritos en WO 04/083218, y similares; (58) agonistas de la amilina, tales como Symlin/Pramlintide/AC137 (Amylin) ; (59) extractos de Hoodia y Trichocaulon; (60) BVT74713 y otros supresores del apetito intestinal de lípidos; (61) agonistas de la dopamina, tales como el bupropion (WELLBUTRIN/GlaxoSmithkline), · (62) zonisamida (Zonegran/Dainippon/Elan), y similares.

Los compuestos específicos que pueden usarse en combinación con los análogos de OXM revelados en la presente incluyen antagonistas/agonistas inversos de CB1, incluyendo los descritos en WO03/077847, que incluyen: N-[3- (4-clorofenil) -2 (S) -fenil-1 (S) -metilpropil] -2- (4-trifluorometil-2-pirimidiloxi) -2-metilpropanamida, N- [3- ( 4-clorofenil) -2- (3-cianofenil) -1-metilpropil] -2- (5-trifluorometil-2-piridiloxi) -2-metilpropanamida, N-[3-(4-clorofenil) -2- (5-cloro-3-piridil) -1-metilpropil] -2- (5-trifluorometil-2-piridiloxi ) -2-metilpropanamida, y sales aceptables farmacéuticamente de los mismos; asi como aquellos en WO05/000809, que incluyen los siguientes: 3-{ 1- [bis (4-clorofenil) metil] azetidin-3-ilideno} -3- (3,5-difluorofenil) -2 , 2-dimetilpropanenitrilo, 1- { 1- [1- (4-clorofenil) pentil] azetidin-3-il } -1- (3, 5-difluorofenil) -2-metilpropan-2-ol . 3- ( (S) - (4-clorofenil) { 3- [ ( 1S) -1- (3, 5-difluorofenil) -2-hidroxi-2-metilpropil] azetidin-1-iljmetil) benzonitrilo, 3- ( (S )-( 4-clorofenil) { 3- [( 1S) -1- (3, 5-difluorofenil) -2-fluoro-2-metilpropil] azetidin-1-il}metil) benzonitrilo, 3- ( (4-clorofenil) {3- [1- (3,5-difluorofenil) -2 , 2-dimetilpropil] azetidin-1-il}metil)benzonitrilo, 3- (( 1S) -1- { 1- [ (S) -( 3-cianofenil) (4-cianofenil) metil] azetidin-3-il}-2-fluoro-2-metilpropil) -5-fluorobenzonitrilo, 3- [ (S) - (4-clorofenil) (3-{(lS)-2-fluoro-1- [3-fluoro-5- (4H-1, 2, 4-triazol-4-il) fenil] -2-metilpropil}azetidin-l-il)metil]benzonitrilo, y 5-((4-clorofenil) {3- [ (1S) -1- (3, 5-difluorofenil) -2-fluoro-2-metilpropil] azetidin-l-il Jmetil ) tiofeno-3-carbonitrilo, y sales aceptables farmacéuticamente de los mismos; asi como: 3-[ (S) - (4-clorofenil) (3-{ (1S) -2-fluoro-1- [3-fluoro-5- (5- oxo-4, 5-dihidro-l, 3, 4-oxadiazol-2-il ) fenil] -2-metilpropil}azetidin-l-il)metil]benzonitrilo, 3- [ (S) - (4 clorofenil) (3-{ (1S) -2-fluoro-l- [3-fluoro-5- (1, 3, 4-oxadiazol-2-il) fenil] -2-metilpropil } azetidin-1-il)metil]benzonitrilo, 3- [ (S) - (3- { (1S) -1- [3- (5-amino-l, 3, 4 oxadiazol-2-il) -5-fluorofenil] -2-fluoro-2-metilpropil } azetidin-l-il) ( 4-clorofenil ) metil ] benzonitrilo, 3-[{S)-(4 cianofenil) (3-{ (1S) -2-fluoro-l- [3-fluoro-5- (5-oxo-4, 5-dihidro-1, 3, 4-oxadiazol-2-il) fenil] -2-metilpropil}azetidin-l-il)metil]benzonitrilo, 3- [ (S) - (3-{ (1S) -1- [3- (5-amino 1, 3, 4-oxadiazol-2-il ) -5-fluorofenil ] -2-fluoro-2-metilpropil} azetidin-l-il) (4 cianofenil) metil] benzonitrilo, 3- [ (S) - ( 4-cianofenil) (3 { (1S) -2-fluoro-l- [ 3-fluoro-5- (1, 3, 4-oxadiazol-2-il ) fenil] -2-metilpropil } azetidin-l-il ) metil ] benzonitrilo, 3-[(S)-(4 clorofenil) (3-{ (1S) -2-fluoro-l- [3-fluoro-5- (1, 2, 4-oxadiazol-3-il) fenil] -2-metilpropil } azetidin-l-il) metil] benzonitrilo, 3- [ (1S) -1- (l-{ (S) - ( 4-cianofenil) [3 (1,2, 4-oxadiazol-3-il) fenil] -metil } azetidin-3-il) -2-fluoro-2-metilpropil] -5-fluorobenzonitrilo, 5-(3-{l-[l (difenilmetil) azetidin-3-il] -2-fluoro-2-metilpropil } -5-fluorofenil) -ltf-tetrazol, 5- (3-{l- [1 (difenilmetil) azetidin-3-il] -2-fluoro-2-metilpropil } -5-fluorofenil) -1-metil-lH-tetrazol, 5- (3-{l- [1 (difenilmetil) azetidin-3-il ] -2-fluoro-2-metilpropil } -5-fluorofenil) -2-metil-2H-tetrazol, 3- [ (4-clorofenil) (3-{2 fluoro-1- [3-fluoro-5- (2-metil-2H-tetrazol-5-il) fenil] -2- metilpropil } azetidin-l-il ) metil ] benzonitrilo, 3- [ (4 clorofenil) (3- { 2-fluoro-1- [3-fluoro-5- ( 1-metil-lH-tetrazol-5-il) fenil] -2-metilpropil } azetidin-l-il) metil] benzonitrilo, 3- [ (4-cianofenil) ( 3- { 2-fluoro-1- [ 3-fluoro-5- ( 1-metil-lH-tetrazol-5-il) fenil] -2-metilpropil } azetidin-l-il) metil] benzonitrilo, 3- [ (4-cianofenil) ( 3- { 2-fluoro-1- [3 fluoro-5- (2-metil-2H-tetrazol-5-il) fenil] -2-metilpropil } azetidin-l-il) metil] benzonitrilo, 5- { 3- [ ( S) - { 3 [ (1S) -1- (3-bromo-5-fluorofenil) -2-fluoro-2-metilpropil] azetidin-l-il} ( 4-clorofenil ) metil] fenil }-l, 3,4-oxadiazol-2 (3H) -ona, 3- [ (1S) -1- (l-{ (S) - ( 4-clorofenil) [3- (5 oxo-4, 5-dihidro-l, 3, 4-oxadiazol-2-il) fenil]metil} azetidin 3-il) -2-fluoro-2-metilpropil ] -5-fluorobenzonitrilo, 3 [ (15) -1- (l-{ (S) - (4-cianofenil) [3- (5-oxo-4, 5-dihidro-l, 3, 4-oxadiazol-2-il) fenil] metil } azetidin-3-il ) -2-fluoro-2 metilpropil] -5-fluorobenzonitrilo, 3- [ (1S) -1- (l-{ (S) - (4 cianofenil) [3- (1,3, 4-oxadiazol-2-il ) fenil ] metil } azetidin-3-il) -2-fluoro-2-metilpropil ] -5-fluorobenzonitrilo, 3- [ (1S) l-(l-{ (S)-(4-clorofenil) [3- (1, 3, 4-oxadiazol-2-il) fenil ] metil } azetidin-3-il ) -2-fluoro-2-metilpropil ] -5-fluorobenzonitrilo, 3- ( ( 1S) -1- { 1- [ ( S) - [ 3- ( 5-amino-l , 3 , 4 oxadiazol-2-il) fenil] (4-clorofenil)metil] azetidin-3-il } -2-fluoro-2 -metilpropil) -5-fluorobenzonitrilo, 3- ( ( 1S) -1- { 1 [ (5) - [3- (5-amino-l, 3, 4-oxadiazol-2-il) fenil] (4-cianofenil) metil] azetidin-3-il } -2-fluoro-2-metilpropil) -5-fluorobenzonitrilo, 3- [ (1S) -1- (l-{ (S) - ( 4-cianofenil) [3 (1,2, 4-oxadiazol-3-il) fenil]metil}azetidin-3-il) -2-fluoro- 2-metilpropil] -5-fluorobenzonitrilo, 3- [ (1S) -1- (l-{ (S) - (4-clorofenil) [3- (1, 2, 4-oxadiazol-3-il) fenil]metil}azetidin-3-il) -2-fluoro-2-metilpropil] -5-fluorobenzonitrilo, 5- [3-( (S) -(4-clorofenil) {3-[ ( 1S) -1- ( 3, 5-difluorofenil) -2-fluoro-2-metilpropil] azetidin-l-il}metil) fenil] -1, 3, -oxadiazol-2 (3H) -ona, 5- [3- ( (S) - (4-clorofenil) {3- [ (1S) -1- (3,5-difluorofenil) -2-fluoro-2-metilpropil] azetidin-1-iljmetil) fenil] -1, 3, 4-oxadiazol-2 (3H) -ona, 4-{ (S) -{3- [ (1S) -1- (3, 5-difluorofenil) -2-fluoro-2-metilpropil] azetidin-1-il} [3- (5-oxo-4, 5-dihidro-l, 3, 4-oxadiazol-2-il) fenil]metil} -benzonitrilo, ACOMPLIA (rimonabant, N- ( 1-piperidinil ) -5- ( 4-clorofenil) -1- (2, 4-diclorofenil ) -4-metilpirazol-3-carboxamida, SR141716A) , 3- ( 4-clorofenil-N' - ( 4-clorofenil) sulfonil-N-metil-4-fenil-4 , 5-dihidro-lH-pirazol-1-carboxamida (SLV-319) , taranabant, N- [ (1S,2S) -3- (4-clorofenil) -2- (3-cianofenil) -1-metilpropil] -2-metil-2- [ [5-(trifluorometil) -2-piridinil] oxi] propanamida, y sales aceptables farmacéuticamente de los mismos.

Los antagonistas NPY5 específicos que pueden usarse en combinación con los análogos de OXM revelados en la presente incluyen: 3-oxo-N- ( 5-fenil-2-pirazinil ) -spiro [isobenzofurano-1 (3H) , 4' -piperidina] -1' -carboxamida, 3-oxo-N- (7-trifluorometilpirido [3, 2-b] piridin-2-il) spiro-[isobenzofurano-1 (3H) , 4' -piperidina] -1' -carboxamida, N- [5-(3-fluorofenil) -2-pirimidinil] -3-oxospiro- [isobenzofurano- 1 (3H) , 4' -piperidina] -1' -carboxamida, trans-3' -oxo-N- (5-fenil-2-pirimidinil) spiro [ciclohexano-1, 1' (3?) - isobenzofurano] -4-carboxamida, trans-3' -oxo-N- [1- (3-quinolil) -4-imidazolil] spiro [ciclohexano-1, 1' (3?) -isobenzofurano] -4-carboxamida, trans-3-???-?- (5-fenil-2-pirazinil) spiro [ 4-azaiso-benzofurano- 1(3H) ,1'-ciclohexano] -4' -carboxamida, trans-N- [5- (3-fluorofenil) pirimidinil] -3-oxospiro [5-azaisobenzofurano-l (3H) , 1' -ciclohexano] -4' -carboxamida, trans-N- [5- (2-fluorofenil) pirimidinil] -3-oxospiro [5-azaisobenzofurano-l (3H) , 1' -ciclohexano] -4' -carboxamida, trans-N- [1- (3, 5-difluorofenil) -4-imidazolil] -3-oxospiro [7-azaisobenzofurano-1 (3H) , 1' -ciclohexano] -4' -carboxamida, trans-3-oxo-N- ( 1-fenil-4-pirazolil ) spiro [ 4-azaisobenzofurano-1 (3H) , 1' -ciclohexano] -4' -carboxamida, trans-N- [1- ( 2-fluorofenil ) -3-pirazolil ] -3-oxospiro [ 6-azaisobenzofurano-1 (3H) , 1' -ciclohexano] -4' -carboxamida, trans-3-oxo-N- ( 1-fenil-3-pirazolil) spiro [ 6-azaisobenzofurano-1 (3H) , 1' -ciclohexano] -4' -carboxamida, trans-3-???-?- (2-fenil-l, 2,3-triazol-4-il)spiro[6-azaisobenzofurano-1 (3H) , 1' -ciclohexano] -4' -carboxamida, y sales aceptables farmacéuticamente de los mismos.

Los inhibidores ACC-1/2 específicos que pueden usarse en combinación con los análogos de OX revelados en la presente incluyen: 1 ' - [ (4, 8-dimetoxiquinolin-2-il) carbonil] -6- ( lfí-tetrazol-5-il) spiro [croman-2 , 4 ' -piperidin] -4-ona; ( 5- { 1 ' - [ ( 4 , 8-dimetoxiquinolin-2-il) carbonil] -4-oxospiro [croman-2, 4 ' -piperidin] -6-il}-2H-tetrazol-2-il) metil pivalato; ácido 5- { 1 ' - [ ( 8-ciclopropil-4-metoxiquinolin-2-il) carbonil] -4-oxospiro [ croman-2 , 41 -piperidin] -6-il}nicotinico; 1 ' - ( 8-metoxi-4-morfolin-4-il-2-naftoil) -6- ( lH-tetrazol-5-il ) spiro [croman-2 , 4 ' -piperidin] -4-ona; y 11 -[ (4-etoxi-8-etilquinolin-2-il) carbonil] -6- ( 1H-tetrazol-5-il) spiro [croman-2 , 4 ' -piperidin] -4-ona; y sales aceptables farmacéuticamente de los mismos. Los compuestos antagónicos MCH1R específicos que pueden usarse en combinación con los análogos de OXM revelados en la presente incluyen: 1- { 4- [ ( l-etilazetidin-3-il) oxi] fenil } -4-[ (4-fluorobenzil)oxi]piridin-2 (1H) -ona, 4-[(4-fluorobenzil) oxi] -l-{4- [ ( l-isopropilazetidin-3-il) oxi] fenil }piridin-2 (1H) -ona, 1- [4- (azetidin-3-iloxi ) fenil ] -4- [ ( 5-cloropiridin-2-il ) metoxi ] piridin-2 ( 1H) -ona, 4- [ (5-cloropiridin-2-il) metoxi] -l-{4- [ ( 1-etilazetidin-3-il) oxi] fenil}piridin-2 (1H) -ona, 4- [ ( 5-cloropiridin-2-il) metoxi] -1- { 4- [ ( l-propilazetidin-3-il) oxi] fenil }piridin-2(lH)-ona, y 4- [ (5-cloropiridin-2-il) metoxi] -1- (4-{ [ (2S) -1-etilazetidin-2-il]metoxi} fenil) piridin-2 (1H) -ona, o una sal aceptable farmacéuticamente de los mismos .

Un inhibidor DPP-IV específico que puede usarse en combinación con los análogos de OXM revelados en la presente es 7- [ (3R) -3-amino-4- (2,4, 5-trifluorofenil) utanoil] -3- ( trifluorometil) -5, 6,7,8-tetrahidro-1, 2, -triazolo [4, 3-a]pirazina, o una sal aceptable farmacéuticamente del mismo.

Los antagonistas/agonistas inversos H3 (histamina H3) específicos que pueden usarse en combinación con los análogos de OXM revelados en la presente incluyen: los descritos en WO05/077905, incluyendo: 3- { 4- [ ( 1-ciclobutil-4-piperidinil) oxi] fenil}-2-etilpirido [2, 3-d] -pirimidin- (3H) -ona, 3-{4- [ ( l-ciclobutil-4-piperidinil) oxi] fenil}-2-metilpirido [4, 3-d] pirimidin-4 (3H) -ona, 2-etil-3- (4-{3- [ (3S) -3-metilpiperidin-l-il] propoxi} fenil) pirido [2, 3-d]pirimidin-4 (3H) -ona 2-metil-3- (4-{3- [ (3S) -3-metilpiperidin-l-il] propoxi } fenil) pirido [ 4 , 3-d] pirimidin-4 (3H) -ona, 3- { 4- [ ( l-ciclobutil-4-piperidinil) oxi] fenil } -2 , 5-dimetil-4 (3H) -quinazolinona, 3- { 4- [ ( l-ciclobutil-4-piperidinil) oxi] fenil } -2-metil-5-trifluorometil-4 (3H) -quinazolinona, 3-{4-[ ( l-ciclobutil-4-piperidinil) oxi] fenil } -5-metoxi-2-metil-4 (3H) -quinazolinona, 3-{4-[ ( l-ciclobutilpiperidin-4-il) oxi] fenil } -5-fluoro-2-metil- (3H) -quinazolinona, 3-{4- [ (l-ciclobutilpiperidin-4-il) oxi] fenil } -7-fluoro-2-metil-4 (3H) -quinazolinona, 3-{4- [ ( l-ciclobutilpiperidin-4-il) oxi] fenil} -6-metoxi-2-metil- ( 3H) -quinazolinona, 3- { - [ (l-ciclobutilpiperidin-4-il) oxi] fenil } -6-fluoro-2-metil-4 (3H) -quinazolinona, 3- { 4- [ ( l-ciclobutilpiperidin-4-il) oxi] fenil}-8-fluoro-2-metil-4 (3H) -quinazolinona, 3-{4- [ (l-ciclopentil-4-piperidinil) oxi] fenil}-2-metilpirido [ 4, 3-d] pirimidin-4 ( 3H) -ona, 3- { 4- [ ( 1-ciclobutilpiperidin-4-il) oxi] fenil } -6-fluoro-2-metilpirido [ 3, -d] pirimidin-4 ( 3H) -ona, 3- { - [ ( 1-ciclobutil-4-piperidinil) oxi] fenil } -2-etilpirido [4 , 3-d] pirimidin-4 (3H) -ona, 6-metoxi-2-metil-3- { 4- [3- ( 1-piperidinil ) propoxi] fenil } pirido [ 3 , 4-d] pirimidin-4 ( 3H) -ona , 6-metoxi-2-metil-3-{4- [3- (1-pirrolidinil) propoxi] feniljpirido [3, -d] pirimidin-4 (3H) -ona, 2 , 5-dimetil-3- { - [3- ( 1-pirrolidinil ) propoxi] fenil } -4 (3H) -quinazolinona, 2-metil-3- { 4- [3- ( 1-pirrolidinil) propoxi] fenil } -5-trifluorometil- (3H) -quinazolinona, 5-fluoro-2-metil-3- {4- [3- ( 1-piperidinil) propoxi] fenil} -4 (3H) -quinazolinona, 6-metoxi-2-metil-3- { 4- [3- ( 1-piperidinil ) propoxi] fenil } -4 ( 3H) -quinazolinona, 5-metoxi-2-metil-3- ( - { 3- [ ( 3S) -3-metilpiperidin-l-il] propoxi} fenil) -4 (3H) -quinazolinona, 7-metoxi-2-metil-3- (4-{3- [ (3S) -3-metilpiperidin-l-il] propoxi} fenil) -4 ( 3H) -quinazolinona, 2-metil-3- ( 4- { 3-[ (3S) -3-metilpiperidin-l-il] propoxi} fenil) pirido [2,3-d] pirimidin-4 (3H) -ona, 5-fluoro-2-metil-3- ( 4- { 3- [ ( 2R) -2-metilpirrolidin-l-il] propoxi } fenil) -4 (3H) -quinazolinona, 2-metil-3- (4-{3- [ (2R) -2-metilpirrolidin-l-il] propoxi} fenil) pirido [4, 3-d] pirimidin-4 (3H) -ona, 6-metoxi-2-metil-3- (4-{3- [ (2R) -2-metilpirrolidin-l-il] propoxi} fenil) -4 (3H) -quinazolinona, 6-metoxi-2-metil-3-(4-{3- [ (2S) -2-metilpirrolidin-l-il] propoxi} fenil) -4 (3H) -quinazolinona, y sales aceptables farmacéuticamente de los mismos .

Los aqonistas CCK1R específicos de uso en combinación con los análogos de OXM revelados en la presente incluyen: ácido 3- (4-{ [1- (3-etoxifenil) -2- (4-metilfenil) -1H -imidazol-4-il] carbonil } -1-piperazinil) -1- naftoico; ácido 3- ( 4- { [ 1- ( 3-etoxifenil ) -2- ( 2-fluoro-4-metilfenil) -1H -imidazol-4-il] carbonil } -1-piperazinil) -1-naftoico; ácido 3- (4-{ [1- (3-etoxifenil) -2- ( 4-fluorofenil) -1H -imidazol-4-il] carbonil } -1-piperazinil ) -1-naftoico; ácido 3- (4-{ [1- (3-etoxifenil) -2- (2, 4-difluorofenil) -1H imidazol-4-il] carbonil } -1-piperazinil) -1-naftoico; y ácido 3- (4-{ [1- (2, 3-dihidro-l, 4-benzodioxin-6-il) -2- (4-fluorofenil) -lH-imidazol-4-il] carbonil } -1-piperazinil ) -1-naftoico; y sales aceptables farmacéuticamente de los mismos. Los agonistas MC4R específicos de uso en combinación con los análogos de OXM revelados en la presente incluyen: 1) ( 5S) -1 ' - { [ ( 3R, 4R) -1- tert-butil-3- (2,3, 4-trifluorofenil) piperidin-4-il ] carbonil } -3-cloro-2-metil-5- [1-metil-l- (1-metil-lH-l, 2, 4-triazol-5-il) etil] -5H-spiro [furo [3, 4-i>] piridina-7, 4 ' -piperidina] ; 2) (5i)-l'- { [ (3R, 4R) -l-tert-butil-3- (2, 3, 4-trifluorofenil) -piperidin- 4-il ] carbonil } -3-cloro-2-metil-5- [1-metil-l- ( 1-metil-lH-1,2, 4-triazol-5-il) etil] -5H-spiro [ furo [3, 4-£>] piridina-7 , 41 -piperidina]; 3) 2- (1 ' -{ [ (3S, 4i) -l-tert-butil-4- (2, 4-difluorofenil ) pirrolidin-3-il] carbonil } -3-cloro-2-metil-5H-spiro [furo [3, 4-i?] piridina-7, 4 ' -piperidin] -5-il) -2-metilpropanenitrilo; 4) 1 ' - { [ ( 3S, 4R) -1- terfc-butil-4- (2 , -difluorofenil) pirrolidin-3-il] carbonil } -3-cloro-2-metil-5- [1-metil-l- (1-metil-lH-l, 2, 4-triazol-5-il) etil] -5H-spiro [furo [3, -¿] piridina-7, 4 ' -piperidina] ; 5) N- [ ( 3R, 4R) -3- ( {3-cloro-2-metil-5- [1-metil-l- (1-metil-lH-l, 2, 4-triazol- 5-il) etil] -1 ?, 5H-spiro [furo- [3, 4-b] piridina-7, 4 ' - piperidin] -1 ' -il } carbonil) -4- (2 , 4-difluorofenil ) -ciclopentil] -N-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina; 6) 2- [3-cloro-1 ' - ( { ( IR, 2R) -2- (2, -difluorofenil) -4-[metil ( tetrahidro-2H-piran-4-il ) amino] -ciclopentil } -carbonil) -2-metil-5H-spiro [furo [3, 4-£>] piridina-7, 4 ' -piperidin] -5-il] -2-metil-propano-nitrilo; y sales aceptables farmacéuticamente de los mismos.

Adicionalmente, otros análogos y miméticos del péptido l(GLP-l) similar al glucagón de la hormona incretina también pueden usarse en combinación con los análogos de OXM revelados en la presente.

Los métodos de administración de las composiciones farmacológicas que conforman uno o más análogos de OXM revelados aquí para úna persona incluyen, pero no se limitan a, intradérmico, intramuscular, subcutáneo, intranasal, epidural y vías orales. Las composiciones pueden administrarse por cualquier vía conveniente, por ejemplo mediante infusión o inyección de bolo, por absorción a través de los revestimientos epiteliales o mucocutáneos (por ejemplo, mucosa oral, rectal y mucosa intestinal, y otras similares) , ocular, y otras similares, y pueden administrarse junto con otros agentes biológicamente activos. La administración puede ser sistémica o local. Además, puede ser de ventaja administrar la composición en el sistema nervioso central mediante cualquier vía adecuada, incluyendo inyección intraventricular e inyección intratecal. La inyección intraventricular puede facilitarse mediante un catéter intraventricular conectado a un depósito (por ejemplo, un depósito de Ommaya) . La administración pulmonar también puede emplearse mediante el uso de un inhalador o nebulizador, y formulación con un agente formador de aerosol. También puede ser deseable administrar el o los análogos de OXM revelados en la presente localmente en el área que necesita tratamiento; esto puede lograrse mediante, por ejemplo, y no limitándose a, infusión local durante la cirugía, aplicación tópica, por inyección, por medio de un catéter, por medio de un supositorio, o por medio de un implante .

Se conocen varios sistemas de administración y pueden usarse para aplicar los análogos de OXM revelados en la presente, incluyendo, pero sin limitarse a, encapsulamiento en liposomas, micropartículas , microcápsulas ; minicélulas; polímeros; cápsulas; comprimidos y otros similares. En una representación, los análogos de OXM revelados en la presente pueden aplicarse en una vesícula, en particular un liposoma. En un liposoma, los análogos de OXM revelados aquí están combinados, además de otros portadores aceptables farmacéuticamente, con agentes amfipáticos como los lípidos que existen en forma agregada como micelles, monocapas insolubles, cristales líquidos o capas laminares en solución acuosa. Los lípidos apropiados para formulación liposomal incluyen, pero no se limitan a, monoglicéridos, diglicéridos , sulfátidos, lisolecitina, fosfolipidos, saponina, ácidos biliares y similares. La preparación de esas preparaciones liposomales está dentro de la habilidad en el campo, como se revela, por ejemplo, en Patente n° 4,837,028 de Estados Unidos y Patente n° 4,737,323 de Estados Unidos. Aun en otra representación, los análogos de OXM revelados en la presente pueden administrarse en un sistema de liberación controlada, incluyendo, pero sin limitarse a: bomba de aplicación (véase, por ejemplo, Saudek, y col., New Engl . J. ed. 321: 574 (1989) y un material polimérico semipermeable (véase, por ejemplo, Howard, y col., J. Neurosurg. 71: 105 (1989)). Además, el sistema de liberación controlada puede colocarse en proximidad al agente terapéutico (por ejemplo, el cerebro), requiriendo asi solo una fracción de la dosis sistémica. Véase, por ejemplo, Goodson, In: Medical Applications of Controlled Reléase, 1984. (CRC Press, Bocea Ratón, Fia.).

La cantidad de las composiciones que conforman uno o más de los análogos de OXM revelados en la presente que serán efectivas en el tratamiento de un trastorno o afección en particular dependerá de la naturaleza de tal trastorno o afección, y puede determinarse mediante técnicas clínicas estándar por aquellas personas con habilidades promedio en el campo. Además, se pueden usar opcionalmente ensayos in vitro para ayudar a identificar los intervalos de dosis óptima. La dosis precisa que debe emplearse en la formulación también dependerá de la vía de administración y de la seriedad de la enfermedad o trastorno, y debe decidirse de acuerdo con el juicio del médico y de las circunstancias de cada paciente. A final de cuentas, el médico a cargo decidirá la cantidad de la composición con la cual tratar a cada paciente individualmente. Inicialmente, el médico a cargo administrará dosis bajas de la composición y observará la respuesta del paciente. Se podrán administrar dosis más grandes de la composición hasta que se obtenga el efecto terapéutico óptimo para el paciente, y en ese punto la dosis no se incrementará más. En general, el intervalo de dosis diaria está dentro del intervalo aproximadamente desde 0,001 mg hasta aproximadamente 100 mg por kg de peso corporal de un mamífero, preferiblemente 0,01 mg hasta aproximadamente 50 mg por kg, y más preferiblemente 0,1 hasta 10 mg por kg, en dosis simples o divididas. Por otra parte, puede ser necesario usar dosificaciones fuera de estos límites en algunos casos. Sin embargo, los intervalos de dosis apropiados para administración intravenosa de las composiciones que conforman el o los análogos de OX revelados en la presente son generalmente de 5 a 500 microgramos (ug) de compuesto activo por kilogramo (kg) de peso corporal. Los intervalos de dosis apropiados para administración intranasal generalmente son aproximadamente 0,01 pg/kg de peso corporal hasta 1 mg/kg de peso corporal. Las dosis efectivas pueden extrapolarse a partir de las curvas dosis-respuesta derivadas de sistemas de prueba modelo in vitro o en animales. Los supositorios generalmente contienen ingrediente activo en el intervalo de 0,5 a 10% por peso; las formulaciones orales preferiblemente contienen del 10 al 95% de ingrediente activo. A final de cuentas, el médico a cargo decidirá la duración apropiada de la terapia usando composiciones que conformen el o los análogos de OXM revelados en la presente de esta invención. La dosificación también variará de acuerdo con la edad, peso y respuesta del paciente individualmente .

También se proporciona un paquete o kit farmacéutico compuesto de uno o más recipientes llenados con uno o más de los ingredientes de las composiciones farmacéuticas y análogos de OXM revelados en la presente. De manera opcional, puede haber asociada con o en los recipientes un aviso en la forma prescrita por parte de una agencia gubernamental que regule la fabricación, uso o venta de productos farmacéuticos o biológicos, cuyo aviso refleje la aprobación de parte de la agencia para la fabricación, uso o venta para administración en humanos.

Todas las referencias que se presentan aquí se incorporan en su totalidad.

Los siguientes ejemplos tienen el propósito de promover un mayor entendimiento de la presente invención.

EJEMPLO 1 La síntesis de los análogos de oxintomodulina (OXM) fue esencialmente como sigue. Los análogos de OX que se muestran en la Tabla 2 a continuación se sintetizaron mediante fase sólida usando química Fmoc/t-Bu en un multisintetizador de péptidos APEX 396 (Advanced Chemtech) , usando un bloque de reacción de 40 pozos. Cada péptido se sintetizó en un pozo individual. Para las amidas de péptidos, se usó 0,1 g de una resina derivatizada de poliestireno aminometilado LL (malla 100-200, 0,41 mmol/g) (Novabiochem) con un ácido inmovilizador Rink modificado p- [ (R, S) -OÍ- [ 9H-fluoren-9-il-metoxiformamido] -2,4-dimetoxibencil] -fenoxiacético (Rink, H., 1987, Tetra edron Lett. 28:3787-3789; Bernatowicz, M. S. y col., 1989, Tetrahedron Lett. 30:4645-4667). Todos los aminoácidos se disolvieron a una concentración 0,5 en una solución de 0,5 M HOBt (hidroxibenzotriazol) en DMF. Las reacciones de acilación se realizaron durante 45 minutos con exceso de seis veces de aminoácido activado sobre los grupos amino libres de resina. Los aminoácidos se activaron con cantidades equimolares de HBTU ( 2- ( lH-benzotriazol-l-il ) -1 , 1 , 3, 3-tetrametiluronio hexafluorofosfato) y un exceso molar doble de DIEA (N, N-diisopropiletilamina) .

En forma alternativa, los péptidos se sintetizaron mediante fase sólida usando química Fmoc/t-Bu en un sintetizador de péptidos Pioneer (Applied Biosystems) . En este caso, se usaron 0,1 g de una resina Fmoc-Linker AM-Champion, 1% entrecruzada (Biosearch Technologies, Inc.) y una resina basada en PEG-PS derivatizada con un ácido inmovilizador Rink modificado p- [ (R, S ) -OÍ- [ 9H-fluoren-9-il-metoxiformamido] -2 , 4-dimetoxibencil] -fenoxiacético (Rink, H., 1987, Tetrahedron Lett. 28:3787-3789; Bernatowicz, M. S. y col., 1989, Tetrahedron Lett. 30:4645-4667). Todas las reacciones de acilación se realizaron durante 60 minutos con un exceso de cuatro veces de aminoácido activado sobre los grupos amino libres de resina, siguiendo la terminación del ensamblado de péptidos en el sintetizador; se realizó doble acoplamiento para N-terminal Aib e His.

Los grupos protectores de cadena lateral fueron: OMpe (0-3-metil-pent-3-il) para Asp; tert-butil para Glu, Ser, D-Ser, Thr y Tyr; tritil para Asn, Cys, Gln e His; y, tert-butoxi-carbonil para Lys, Trp; y, 2,2,4,6,7-pentametildihidrobenzofurano-5-sulfonil para Arg.

Para OXM110 y OXM177, se acilató lisina-palmitoil manualmente mediante reacción con cantidades equimolares de HBTU (2- (lH-benzotriazol-l-il) -1, 1, 3, 3-tetrametiluronio hexafluorofosfato) y un exceso molar doble de DIEA (N,N-diisopropiletilamina) . La reacción de acilación se realizó durante 120 minutos con un exceso de tres veces de acilante activado sobre grupos amino libres de resina.

Al final de la síntesis, las resinas péptidas secas se trataron individualmente con 20 mL de mezcla de escisión, ácido trifluoroacético al 88% (TFA) , fenol al 5%, triisopropilsilano al 2% y agua al 5% (Solé, N. A. and G. Barany, 1992, J. Org. Chem. 57:5399-5403) durante 1,5 horas a temperatura ambiente. Cada resina se filtró y la solución se añadió a éter metil-t-butil frío para precipitar el péptido. Después de la centrifugación, los pellets de péptidos se lavaron con éter metil-t-butil nuevo y frió para eliminar los necrófagos orgánicos. El proceso se repitió dos veces. Los pellets finales se secaron, se volvieron a suspender en H2O, acetonitrilo al 20% y se liofilizaron .

Los péptidos sin procesar se purificaron mediante fase inversa HPLC usando cartuchos de preparación Waters RCM Delta-PakTM C- (40 x 200 mm, 15 µp?) y usando como soluciones de agotamiento (A) TFA al 0,1% en agua y (B) TFA al 0,1% en acetonitrilo. Se usó el siguiente gradiente de solución de agotamiento B: 20%-20% durante cinco minutos y 20%-35% durante 20 minutos para el OXM229 (el precursor tiolatado péptido de OXM36 y 0XM115) , OXM29 (el precursor tiolatado de OX 70 y OXM216) , OXM208 (el precursor tiolatado péptido de OXM212) , y OXM209 (el precursor tiolatado péptido de OXM213) .

Para los péptidos OXM110 y 177, se usó el siguiente gradiente de solución de agotamiento B: 32%-32% durante cinco minutos y 32%-42% durante 20 minutos a una velocidad de flujo de 80 mL/min. Se realizó HPLC analítico en un cromatógrafo de Alliance Waters, con una columna ACE C-4 (300 A), 3 um, 150 x 4,6 mm, (CPS analítica n/p ACE-213-1546), a 45 °C, usando H2O, TFA 0,1% (A) y CH3CN, TFA 0,1% (B) como solventes, y el siguiente gradiente lineal: 20%-20% B (en cinco minutos) - 35% B (en 20 minutos) - 80% B (en dos minutos), flujo de 1 mL/min. El péptido purificado fue caracterizado mediante espectrometría de masa de electrorrociado en una plataforma Micromass LCZ. EJEMPLO 2 La síntesis de análogos colesterilados de oxintomodulina (OXM) OXM36, OXM70, OXM115, OXM212, OXM213 y OXM216 fue como sigue.

Las reacciones se procesaron bajo condiciones que permiten la formación de un enlace tioéter. Los péptidos del OXM colesterilado se aislaron entonces usando HPLA de fase inversa y caracterizados en una plataforma Micromass LCZ. Los análogos de OXM36, 70, 212 y 213 se sintetizaron a partir del tiol que contenía el precursor del péptido de OXM OXM229, OXM208 y 209, respectivamente, mediante reacción con el derivado de bromo colest-5-en-3-il bromoacetato teniendo la estructura cholest-S-en-3-yl bromoacetate para producir conjugados ligados a través de un enlace tioéter. Brevemente, se disolvieron 30 mg de precursor de péptido en un mL de DMSO (conc. 30 mg/mL) y se añadió un exceso molar de uno de colest-5-en-3-il bromoacetato disuelto en THF (conc. 20 mg/mL) . Luego se añadió 1% por volumen de DIPEA (N, N-diisopropil-etilamina) a la mezcla; después de 30 minutos de incubación, la solución de péptido se purificó mediante RP-HPLC y se caracterizó en una plataforma Micromass LCZ.

Los péptidos OXM115 y 216 se sintetizaron a partir del tiol que contenia precursor de péptido OXM OXM229 y OXM29 para producir análogos por reacción con el cholest-5-en-3-yl 1 -bromo-2-oxo-6,9,12,15-tetraoxa-3-azaoctadecan- 8-oate para producir conjugados ligados a través de un enlace tioéter. Brevemente, se disolvieron 30 mg de precursor de péptido en 1 mL de DMSO (conc. 30 mg/mL) y se añadió un exceso molar de uno de colest-5-en-3-il 1-bromo- 2-???-6, 9, 12 , 15-tetraoxa-3-azaoctadecan-18-oato en THF (conc. 20 mg/mL) . Luego se añadió 3% por volumen de DIPEA ( , N-diisopropil-etilamina) a la mezcla; después de 30 minutos de incubación, la solución de péptido se purificó mediante RP-HPLC y se caracterizó en una plataforma Micromass LCZ.

EJEMPLO 3 Se procesaron reacciones de PEGilación bajo condiciones que permiten la formación de enlace de tioéster. El péptido OXM PEGilado se aisló entonces usando HPLC de fase inversa o cromatografía de intercambio de ion y cromatografía de exclusión de tamaño (SEC) . Los análogos de OXM PEGilados se caracterizaron usando RP-HPLC, HPLC-SEC y espectrometría de masa MALDI-Tof.

Se sintetizaron péptidos OXM33, 34, 35, 36 y 54 a partir del precursor de péptido OXM OXM229 que contenía tiol para producir análogos con PEG covalentemente ligado a través de un enlace tioéter.

Síntesis de 0XM33 Se disolvieron 10 mg de precursor de péptido (2,2 umoles) en 0,2 mL de HEPES 0,1M pH 7,3, cloruro de guanidinio 6M, 2 mM EDTA. Se añadieron 22 mg de MPEG-MAL-5000 (NEKTAR 2F2MOH01) (4,4 umoles) disueltos en 0,4 mL HEPES 0,1M, pH 7,3 (relación 1:2 mol/mol de péptido a PEG) a esta solución. Después de 1 hora de incubación, el péptido PEGilado se purificó mediante RP-HPLC y se caracterizó a través de MADI-TOF.

Síntesis de OXM34 Se disolvieron 10 mg de precursor de péptido (2,2 Umoles) en 0,2 inL de HEPES 0,1M pH 7,3, cloruro de guanidinio 6M, 2 mM EDTA. Se añadieron 80 mg de MPEG-MAL-20 (NEKTAR 2F2M0P01) (4,0 umoles) disueltos en 0,5 mL HEPES 0,1M, pH 7,3 (relación 1:1.8 mol/mol de péptido a PEG) a esta solución. Después de 1 hora de incubación, el péptido PEGilado se purificó mediante RP-HPLC y se caracterizó a través de MALDI-TOF.

Síntesis de 0XM35 Se disolvieron 10 mg de precursor de péptido (0,92 pinoles) en 0,4 mL de HEPES 0,1M pH 7,3, cloruro de guanidinio 6M, 2 mM EDTA. Se añadieron 70 mg de MPEG2-MAL-40K (NEKTAR 2D3Y0T01) (1,7 umoles) disueltos en 0,8 mL HEPES 0,1 , pH 7,3 en una relación de 1:1.8 mol/mol de péptido a PEG a esta solución. Después de 1 hora de incubación, el péptido PEGilado se purificó mediante RP-HPLC y se caracterizó a través de MALDI-TOF.

El péptido de control OXM54 se preparó mediante incubación del tiol que contenia precursor de péptido con 10 eq. de yodoacetamida en 0,1 M TrisHCl pH 7,5, cloruro de guanidinio 6 . Después de 30 minutos de incubación, el péptido se purificó mediante RP-HPLC y se caracterizó a través de espectrometría de masa de electrorrociado.

Síntesis de OXM103, OXM105, OXM107 y OXM113 Se disolvieron 10 mg de los precursores de péptidos correspondientes (2,26 pinoles) en 2 mL de urea 8M, HEPES 0,1M pH 7,3, 2 mM EDTA. Se añadieron 109 mg de MPEG2-MAL-40K (NEKTAR 2D3Y0T01) (2,71 pmoles) disueltos en H20 (relación 1:1.2 mol/mol de péptido a PEG) a esta solución. Después de 1 hora de incubación, la solución de péptido PEGilada se acidificó a ácido acético 1% y se purificó mediante cromatografía de intercambio de cationes (IXC) en TSK CM-650S con un gradiente lineal de NaCl en acetato de sodio 50 mM pH 4,8. El péptido PEGilado purificado mediante IXC se purificó aún más mediante SEC y se caracterizó a través de MALDI-TOF.

Síntesis de OXM109 Se disolvieron 10 mg de los precursores de péptidos correspondientes (2,25 µp?????) en 2 mL de urea 8M, HEPES 0,1M pH 7,3, 2 mM EDTA. Se añadieron 108 mg de MPEG2-MAL-40K (NEKTAR 2D3Y0T01) (2.7 umoles) disueltos en 2 mL de ¾0 (relación 1:1.2 mol/mol de péptido a PEG) a esta solución. Después de 1 hora de incubación, la solución de péptido PEGilada se acidificó a ácido acético 1% y se purificó mediante cromatografía de intercambio de cationes (IXC) en TSK CM-650S con un gradiente lineal de NaCl en acetato de sodio 50 mM pH 4,8. El péptido PEGilado purificado mediante IXC se purificó aún más mediante SEC y se caracterizó a través de MALDI-TOF.

EJEMPLO 4 Los análogos de péptido OXM que exhiben completa actividad agonista sobre el GLP-1 y los receptores de glucagón que aparecen en la Tabla 2 se sintetizaron como sigue .

Los péptidos OXM290, 291, 292, 293 and 294 que son precursores de OXM301, OXM302, OXM303, OXM304 y OXM305 (véase la Tabla 2) se sintetizaron mediante fase sólida usando química Fmoc/t-Bu en un multisintetizador de péptidos de Simphony Protein Technologies Inc. Para las amidas de péptido, se usaron 0,5 g de una resina derivatizada de poliestireno aminometilado LL (malla 100-200, 0,41 mmol/g) (Novabiochem) con un ácido inmovilizador Rink modificado p- [ (R, S) -a- [ 9H-fluoren-9-il-metoxiformamido] -2, 4-dimetoxibencil] -fenoxiacitico (Rink, Tetrahedron Lett. 28:3787-3789 (1987); Bernatowicz y col., Tetrahedron Lett. 30:4645-4667 (1989)). Todos los aminoácidos se disolvieron a una concentración 0,5 en una solución de 0,5 M HOBt (hidroxibenzotriazol ) en DMF. Las reacciones de acilación se realizaron durante 60 minutos con exceso de ocho veces de aminoácido activado sobre los grupos amino libres de resina. Los aminoácidos se activaron con cantidades equimolares de HBTU ( 2- ( lH-benzotriazol-1-il) -1, 1, 3, 3-tetrametiluronio hexafluorofosfato) , solución 0,5 en DMF, y un exceso molar de dos veces de DIEA (N,N-diisopropiletilamina) , solución 2 M en NMP.

Los grupos de protección de cadena lateral fueron: OMpe (0-3-metil-pent-3-il ) para Asp; tert-butil para Glu, Ser, D-Ser, Thr y Tyr; tritil para Asn, Cys, Gln e His; tert-butoxi-carbonil para Lys, Trp; y, 2,2,4,6,7-pentametildihidrobenzofuran-5-sulfonil para Arg; se usó Boc-His (Trt)-OH en la síntesis.

Al final de la síntesis, las resinas peptídicas secas se trataron individualmente con 25 mL de la mezcla de escisión, ácido trifluoroascético al 82,5% (TFA) , fenol al 5%, tioanisol al 5%, etanditiol al 2,5% y agua al 5% durante 1,5 horas a temperatura ambiente. Cada resina se filtró y el volumen de la solución se redujo, y luego de añadió a éter metil-t-butil frío para precipitar el péptido. Después de la centrifugación, los pellets de péptidos se lavaron con éter metil-t-butil nuevo y frío para eliminar los necrófagos orgánicos. El proceso se repitió dos veces. Los pellets finales se secaron, se volvieron a suspender en H2O, acetonitrilo al 20% y se liofilizaron .

Los péptidos crudos se purificaron mediante fase inversa HPLC usando cartuchos de preparación Waters RCM Delta-PakTM C-4 (40 x 200 mm, 15 µp?) y usando como soluciones de agotamiento (A) TFA al 0,1% en agua y (B) TFA al 0,1% en acetonitrilo. Se usó el siguiente gradiente de solución de agotamiento B: 22%-22% durante 5 minutos y 22%-32% durante 20 minutos para el precursor OXM301, 22%-22% durante 5 minutos y 22%-35% durante 20 minutos para el precursor OX 302, 25%-25% durante 5 minutos y 25%-40% durante 20 minutos para el precursor OXM303, 25%-25% durante 5 minutos y 25%-35% durante 20 minutos para el precursor OXM304 y el precursor OXM305, velocidad de flujo 80 niL/min, longitud de onda 214 nm. Se realizó HPLC analítica en un cromatógrafo Alliance Waters, con un ACE C-4 (300 A) , columna 3 um, 150 x 4,6 mm, (CPS analítica n/p ACE-213-1546) , a 45 °C, usando H20, TFA 0,1% (A) y CH3CN, TFA 0,1% (B) como solventes, y el siguiente gradiente lineal: 25%-25% B (en 5 minutos); 40% B (en 20 minutos); 80% B (en 2 minutos) , flujo de 1 mL/min. Los péptidos purificados se caracterizaron mediante espectrometría de masa de electrorrociado en una plataforma Micromass LCZ .

La síntesis de conjugados C7 fue como sigue. Los péptidos OXM301, OXM302, OXM303, OXM304 y OXM305 se sintetizaron a partir del tiol que contenía precursor de péptido OXM OXM290-294 respectivamente para producir derivados con el grupo C7 ligado covalentemente a través del grupo tioéter del residuo de cisteína en el extremo C terminal. Como ejemplo de derivatización del precursor: se disolvieron 40 mg de precursor de péptido en 1,33 mL de DMSO (conc. 30 mg/mL) y se añadió un exceso molar de 2,1 de colest-5-en-3-il l-bromo-2-oxo-6, 9, 12, 15-tetraoxa-3-azaoctadecan-18-oato en THF (conc. 30 mg/mL). Luego se añadió 5% por volumen de DI PEA (N, N-diisopropil-etilamina) a la mezcla; después de 30 minutos de incubación, se templó mediante la adición en gotas de acetato de amonio (solución de 1 M en agua) hasta obtener turbidez de la solución.

La solución se cargó entonces directamente en cartuchos de fase inversa Waters RCM Delta-Pak™ C-4 (20 x 200 mm, 15 µ??, 300 A) usando como solución de agotamiento acetato de amonio 0,5 M, MetOH al 20%, acetonitrilo al 25% en agua, pH 7,8, a 5 mL/min. Se procesó una solución de agotamiento isocrática durante 15 minutos con esta solución amortiguadora a 30 mL/min. Luego las soluciones de agotamiento se cambiaron a: (A) ácido acético al 0,2%, MetOH al 20% en agua (B) ácido acético al 0,2%, MetOH al 20% en acetonitrilo, y luego se procesó el siguiente gradiente: 25% (B) -35% (B) en 5 minutos; 70%(B) en 20 minutos; 80% (B) en 2 minutos; 80% (B) durante 3 minutos, flujo de 30 mL/minuto, longitud de onda 230 nm.

Los péptidos finales se caracterizaron en un cromatógrafo Alliance Waters, con un ACE C-4 (300 A) , columna 3 um, 150 x 4,6 mm, (CPS analítica n/p ACE-213-1546), a 45 °C, usando H2O, TFA 0,1% (A) y CH3CN, TFA 0,1% (B) como solventes, y el siguiente gradiente lineal: 40%-40% B (en 5 minutos); 70% B (en 20 minutos); 80% B (en 2 minutos), flujo de 1 mL/min. Los péptidos purificados se caracterizaron mediante espectrometría de masa de electrorrociado en una plataforma Micromass LCZ .

EJEMPLO 5 Los péptidos OXM237-OXM308 y OXM345-OXM414 se sintetizaron mediante fase sólida usando química Fmoc/t-Bu en un multisintetizador de péptidos Simphony Protein Technologies Inc. Para las amidas de péptidos se usaron 0,5 g de una resina de tioéteres aminometilados LL (malla 100-200, 0,41 mmol/g) (Novabiochem) derivatizada con un ácido inmovilizador Rink modificado p- [ (R, S ) -OÍ- [ 9H-fluoren-9-il-metoxiformamido] -2, 4-dimetoxibencil] -fenoxiac L tico (Rink, H., 1987, Tetrahedron Lett. 28:3787-3789; Bernatowicz, M.

S. y col., 1989, Tetrahedron Lett. 30:4645-4667). Para ácidos de péptidos, 0,5 g de una resina de tioéter aminometilada LL (malla 100-200, 0,41 mmol/g) (Novabiochem) derivatizada con ácido 4-hidroximetilfenoxiacético . Todos los aminoácidos se disolvieron a una concentración 0,5 en una solución de 0,5 M HOBt (hidroxibenzotriazol) en DMF. Las reacciones de acilación se realizaron durante 60 minutos con exceso de ocho veces de aminoácido activado sobre los grupos amino libres de resina. Los aminoácidos se activaron con cantidades equimolares de HBTU ( 2- ( lH-benzotriazol-l-il ) -1, 1, 3, 3-tetrametiluronio hexafluorofosfato) , solución 0,5 M en DMF, y un exceso molar de dos veces de DIEA (N,N-diisopropiletilamina) , solución 2 M en NMP.

Los grupos de protección de cadena lateral fueron: OMpe (0-3-metil-pent-3-il) para Asp; tert-butil para Glu, Ser, D-Ser, Thr y Tyr; tritil para Asn, Cys, Gln e His; tert-butoxi-carbonil para Lys, Trp; y, 2,2,4,6,7-pentametildihidrobenzofuran-5-sulfonil para Arg; se usó Boc-His (Trt)-OH en la síntesis.

Para los péptidos OXM392, 395 y 398, se incorporaron Glul6 y Lys20 como Glu(Oall) y Lys(Alloc). Al final del ensamblado, las resinas se secaron, se removieron los grupos de protección de Glu(Oall) y Lys (Alloc) y se formó el puente de lactama mediante incubación de la resina con exceso molar de 5 de HBTU y exceso molar de 10 de DIPEA.

Para los péptidos lipidados como el OXM404, 407, 408, 410, 411, 414, 415, 416, 417, 418, 419 y 420, la lisina a ser derivatizada en la cadena lateral se incorporó como Lys (Alloc) . Al final del ensamblado, se removió el grupo de protección Alloc mediante condensación de los residuos del ácido D-carboxiglutámico y ácido palmitico usando HBTU y DIPEA como activadores.

Los péptidos crudos se purificaron mediante fase inversa HPLC usando cartuchos de preparación aters RCM Delta-Pak™ C-4 (40 x 200 mm, 15 µp?) y usando como soluciones de agotamiento (A) TFA al 0,1% en agua y (B) TFA al 0,1% en acetonitrilo. Se realizó HPLC analítica en un cromatógrafo Alliance Waters, con un ACE C-4 (300 A), columna 3 um, 150 x 4,6 mm, (CPS analítica n/p ACE-213-15 6) , a 45 °C, usando H20, TFA 0,1% (A) y CH3CN, TFA 0,1% (B) como solventes. Los péptidos purificados se caracterizaron mediante espectrometría de masa de electrorrociado en una plataforma Micromass LCZ.

La síntesis de los conjugados C5 fue como sigue.

El péptido OXM238 se sintetizó a partir de un tiol que contenía precursor de péptido OXM para producir derivados con la acetamida covalentemente ligada a través de los grupos tioéteres del residuo de cisteína en el extremo C terminal. Como ejemplo de derivatización del precursor: se disolvieron 50 mg de precursor de péptido en solución amortiguadora Tris HC1 0,25 M, EDTA 2mM, urea 6 M pH 8,3 (conc. 30 mg/mL) y un exceso molar de 10 de yodoacetamida disuelta en DMSO (conc. 30 mg/mL). Después de 30 minutos, la reacción está completa. La solución se acidifica con ácido acético y se purifica en HPLC preparativa.

La síntesis de conjugados C4 fue como sigue. Los péptidos OX 345, OXM355, OXM357 y OXM373 se sintetizaron a partir del tiol que contenía precursores de péptidos OXM respectivamente para producir derivativos con el grupo colesterol covalentemente ligado a través del grupo de tioéteres de la cisteína en el extremo C terminal. Como ejemplo de derivatización del precursor: se disolvieron 40 mg de precursor de péptido en DMSO (conc. 30 mg/mL) y se añadió un exceso molar de 2,1 de colest-5-en-3-il 1-bromo-2-oxo-6, 9, 12 , 15-tetraoxa-3-azaoctadecan-18-oato en THF (conc. 30 mg/mL) . Luego se añadió 5% por volumen de DIPEA ( , -diisopropil-etilamina) a la mezcla; después de 30 minutos de incubación, se templó mediante la adición en gotas de acetato de amonio (solución de 1 M en agua) hasta obtener turbidez de la solución.

La solución se cargó entonces directamente en cartuchos de fase inversa aters RCM Delta-PakTM C"4 (20 x 200 mm, 15 um, 300 A) usando como solución de agotamiento acetato de amonio 0,5 M, etOH al 20%, acetonitrilo al 25% en agua, pH 7,8, a 5 mL/min. Se procesó una solución de agotamiento isocrática durante 15 minutos con esta solución amortiguadora a 30 mL/min. Luego las soluciones de agotamiento se cambiaron a: (A) ácido acético al 2%, MetOH al 20% en agua (B) ácido acético al 0,2%, MetOH al 20% en acetonitrilo .

Los péptidos finales se caracterizaron en un cromatógrafo Alliance Waters, con un ACE C-4 (300 A) , columna 3 um, 150 x 4,6 mm, (CPS analítica n/p ACE-213-1546), a 45°C, usando H20, TFA 0,1% (A) y CH3CN, TFA 0,1% (B) como solventes. Los péptidos se caracterizaron mediante espectrometría de masa de electrorrociado en un Micromass.

La síntesis de conjugados C7 fue como sigue. Los péptidos OXM359, OXM361, OXM374, OXM380, OXM383 y OXM388 se sintetizaron a partir del tiol que contenía precursor de péptido OXM para producir derivativos con el Oxa4-colesterol ligado covalentemente al residuo de cisteína en el extremo C terminal. Como ejemplo de derivatización del precursor: se disolvieron 25 mg de precursor de péptido en 1,33 mL de DMSO (conc. 30 mg/mL) y se añadió un exceso molar de 1,1 de colest-5-en-3-il l-bromo-2-oxo-6, 9, 12 , 15-tetraoxa-3-azaoctadecan-18-oato en THF (conc. 30 mg/mL). Luego se añadió 5% por volumen de DIPEA (N,N-diisopropil-etilamina) a la mezcla; después de 30 minutos de incubación, se templó mediante la adición en gotas de acetato de amonio (solución de 1 M en agua) hasta obtener turbidez de la solución.

La solución se cargó entonces directamente en cartuchos de fase inversa Waters RCM Delta-Pak™ C-4 (20 x 200 mm, 15 µp?, 300 A) usando como solución de agotamiento acetato de amonio 0,5 , MetOH 20%, acetonitrilo al 25% en agua, pH 7,8, a 5 mL/min. Se procesó una solución de agotamiento isocrática durante 15 minutos con esta solución amortiguadora a 30 mL/min. Luego las soluciones de agotamiento se cambiaron a: (A) ácido acético al 0,2%, MetOH al 20% en agua (B) ácido acético al 0,2%, MetOH al 20% en acetonitrilo, y luego se procesó el siguiente gradiente: 25% (B) -35% (B) en 5 minutos; 70% (B) en 20 minutos; 80% (B) en 2 minutos; 80% (B) durante 3 minutos, flujo de 30 mL/minuto, longitud de onda 230 nm.

Los péptidos finales se caracterizaron en un cromatógrafo Alliance Waters, con un ACE C-4 (300 A), columna 3 um, 150 x 4,6 mm, (CPS analítica n/p ACE-213-1546), a 45°C, usando H20, TFA 0,1% (A) y CH3CN, TFA 0,1% (B) como solventes. Los péptidos purificados se caracterizaron mediante espectrometría de masa de electrorrociado en una plataforma Micromass LCZ.

La síntesis de conjugados C9 fue como sigue. El péptido OXM381 se sintetizó a partir del tiol que contenía precursor de péptido OXM para producir derivativos con el 0xal2-colesterol ligado covalentemente a través del tioéter de maleimida enlazado al residuo de cisteína en el extremo C terminal. Como ejemplo de derivatización del precursor: se disolvieron 25 mg de precursor de péptido en D SO (conc. 30 mg/mL) y un exceso molar 1,5 de colest-5-en-3-il N-[43-(2, 5-dioxo-2 , 5-dihidro-l.fí-pirrol-l-il) -41-oxo-4, 7, 10, 13, 16, 19, 22, 25, 28, 31, 34, 37-dodecaoxa-40-azatritetracontan-l-oil] glicinato disuelto en THF (conc. 20 mg/mL). Entonces se añadió 2% por volumen de DIPEA (N,N-diisopropil-etilamina) a la mezcla; después de 4-6 horas de incubación, la reacción se templó con ácido acético glacial y se cargó directamente en HPLC de fase inversa y se purificó. Los péptidos finales se caracterizaron en un cromatógrafo Alliance Waters, con un ACE C-4 (300 A), columna 3 um, 150 x 4,6 mm, (CPS analítica n/p ACE-213-1546), a 45 °C, usando H20, TFA 0,1% (A) y CH3CN, TFA 0,1% (B) como solventes. Los péptidos purificados se caracterizaron mediante espectrometría de masa de electrorrociado en una plataforma Micromass LCZ.

La síntesis de conjugados Cío fue como sigue. Los péptidos OXM392, 395, 398, 399, 400 y 401 se sintetizaron a partir del tiol que contenía precursores de péptidos OXM para producir derivativos con el 0xal2-colesterol ligado covalentemente a través de un enlace de tioéter con el residuo de cisteina en el extremo C terminal. Como ejemplo de derivatización del precursor: se disolvieron 25 mg de precursor de péptido en DMSO (conc. 30 mg/mL) y un exceso molar de 1,5 de colest-5-en-3-il l-bromo-2-???-6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36, 39-dodecaoxa-3-azadotetracontan-42-oato en THF (conc. 20 mg/mL). Entonces se añadió 2% por volumen de DIPEA (N, N-diisopropil-etilamina) a la mezcla; después de 4-6 horas de incubación, la reacción se templó con ácido acético glacial y se cargó directamente en HPLC de fase inversa y se purificó. Los péptidos finales se caracterizaron en un cromatógrafo Alliance Waters, con un ACE C-4 (300 A), columna 3 um, 150 x 4,6 mm, (CPS analítica n/p ACE-213-15 6) , a 45 °C, usando H20, TFA 0,1% (A) y CH3CN, TFA 0,1% (B) como solventes. Los péptidos purificados se caracterizaron mediante espectrometría de masa de electrorrociado en una plataforma icromass LCZ .

La síntesis de conjugados Cu fue como sigue. El péptido OXM412 se sintetizó a partir del tiol que contenía precursor de péptido OX para producir derivativos con el Oxa24-colesterol ligado covalentemente a través de un enlace de tioéter con residuo de cisteina en el extremo C terminal. Como ejemplo de derivatización del precursor: se disolvieron 25 mg de precursor de péptido en DMSO (conc. 30 mg/mL) y un exceso molar de 1,5 de colest-5-en-3-il 1-bromo-2-???- 6, 9, 12, 15, 18,21,24,27, 30, 33, 36, 39, 42, 45,48, 51, 54, 57, 60, 63, 6 6, 69,72, 75-tetracosaoxa-3-azaoctaheptacontan-78-oato en THF (conc. 20 mg/mL) . Entonces se añadió 2% por volumen de DIPEA (N, N-diisopropil-etilamina) a la mezcla; después de 4-6 horas de incubación, la reacción se templó con ácido acético glacial y se cargó directamente en HPLC de fase inversa y se purificó.

Los péptidos finales se caracterizaron en un cromatógrafo Alliance Waters, con un ACE C-4 (300 A) , columna 3 um, 150 x 4,6 mm, (CPS analítica n/p ACE-213-1546), a 45 °C, usando H20, TFA 0,1% (A) y CH3CN, TFA 0,1% (B) como solventes. Los péptidos purificados se caracterizaron mediante espectrometría de masa de electrorrociado en una plataforma Micromass LCZ.

La síntesis de conjugados C12 fue como sigue. El péptido OXM421 se sintetizó a partir del tiol que contenía precursor de péptido OXM para producir derivativos con el Oxal2-0-colesterol ligado covalentemente a través de un enlace de tioéter con el residuo de cisteína en el extremo C terminal. Como ejemplo de derivatización del precursor: se disolvieron 25 mg de precursor de péptido en DMSO (conc. 30 mg/mL) y un exceso molar de 1,5 de colest-5-en-3-il 1-bromo-2-oxo-6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36, 39-undecaoxa-3-azaoctatriacont-78-oato en THF (conc. 20 mg/mL). Entonces se añadió 2% por volumen de DIPEA (N, -diisopropil-etilamina) a la mezcla; después de 4-6 horas de incubación, la reacción se templó con ácido acético glacial y se cargó directamente en HPLC de fase inversa y se purificó.

EJEMPLO 6 La Tabla 3 muestra las estructuras para los análogos de OXM y OXM nativos que se revelan en la presente .

Os = Cys (CH2CONH2) , que corresponde a un residuo de cisteína en el que el tiol de cadena lateral se hizo reaccionar con yodoacetamida; C6 = Cys (mPEG) 26okDa, cada uno corresponde a un residuo de cisteína PEGilado a través del tiol de cadena lateral con metoxiPEG lineal (mPEG) o mPEG2mPEG [(mPEG)2] ramificado del MW indicado; C7= Cys (colest-5-en-3-il 1- { [ (2R) -3-amino-2- (amino) -3- oxopropil] tio} -2-0x0-6, 9, 12, 15-tetraoxa-3-azaoctadecan-18- oato] ) o Cys (Oxa4-colesterol ) ) ; C8= Cys (N-etilmaleimidil ) .

C9 = S- { 1- [46- (colest-5-en-3-iloxi) -3, 3 , 46-trioxo- 7, 10, 13, 16, 19, 22, 25,28,31,34, 37, 40-dodecaoxa-4 , 44- diazahexatetracont-l-il] -2, 5-dioxopirrolidin-3-il } -L-cisteina o Cys (mal-oxai2-colesterol) Cío = 5- [42- (colest-5-en-3-iloxi) -2, 42-dioxo- 6, 9, 12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36, 39-dodecaoxa-3-azadotetracont- 1-il] -L-cisteina o Cys ( oxai2~colesterol ) Cu = S- [78- (colest-5-en-3-iloxi) -2, 78-dioxo- 6,9,12,15,18,21,24,27,30,33,36,39,42,45,48,51,54,57,60,63,66,6 9, 72, 75-tetracosaoxa-3-azaoctaheptacont-l-il] -L-cisteina o Cys (oxa24~colesterol) C12 = S- [38- (colest-5-en-3-iloxi) -2-oxo- 6, 9,12, 15, 18, 21, 24, 27, 30, 33, 36-undecaoxa-3-azaoctatriacont-l- il] -L-cisteina o Cys (oxai2-0-colesterol) Ttds= ácido l-amino- , 7 , 10-trioxa-13-tridecanamina succinímico ??= ácido gamma glutámico palmitoil= residuo de ácido graso C14 miristoil= residuo de ácido graso C14 stearoil= residuo de ácido graso C18 EJEMPLO 7 Se demuestra la capacidad de los co-agonistas GLP-1R/GCGR de reducir el peso corporal y la ingesta de alimentos, y de mejorar el control glucémico.

Inicialmente cribamos péptidos en ensayos basados en células de fluorescencia que miden la producción de AMP cíclico (A Pc) , usando líneas de células CHO que manifiestan establemente ya sea GLP-1R recombinante humano 0 GCGR humano. La determinación de la actividad agonista del GLP-1R y GCGR de ratón y humano fue esencialmente como sigue. La células CHO que manifiestan establemente el GLP-1R o GCGR de ratón o humano se cultivaron en medio de Dulbecco modificado de Iscove (IMDM), FBS 10%, L-glutamina 1 mM, penicilina-estreptomicina (100 µ/mL) y 750 \ig G418/mL para tres a cuatro días antes de la cosecha usando medio de disociación libre de enzimas (EFDM, medio de especialidad) . Para determinar la actividad del GLP-1R y GCGR, se diluyeron OXM y OXM-Q3E en solución amortiguadora de ensayo y se incubaron con células en ausencia o presencia de plasma de ratón al 10%, respectivamente, durante 30 minutos a temperatura ambiente. El ensayo se terminó con la adición de la solución amortiguadora de detección del kit LANCE de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Las placas se mantuvieron una hora adicional a temperatura ambiente, y entonces se detectaron niveles de AMPc en aumento mediante la disminución de la señal TR-FRET medida en un contador EnVision ( PerkinElmer) en comparación con una curva estándar de AMPc de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se analizaron los datos con software de análisis de regresión lineal y no lineal, GraphPad Prism.

La evaluación de la utilidad de co-agonistas dobles GLP-lR/GCGR (mimética OXM) contra un agonista selectivo GLP-1R (mimética GLP-1) fue como sigue. Primero, para evaluar la utilidad terapéutica de un agonista GLP-1R/GCGR doble (mimética OXM) , se identificó un péptido relacionado que fue selectivo solo para el receptor GLP-1 (mimética GLP-1) , aunque difiere de la OXM nativa por solo un aminoácido. Este péptido difirió de la OXM nativa por tener un residuo de ácido glutámico (E) en la posición 3 en lugar de glutamina (Q) . Se identificó una segunda mimética GLP-1 que tuvo un residuo de ácido aspártico (D) en lugar de la Q. Se comparó la eficacia de la mimética GLP-1 y de la mimética OXM en mejorar el control metabólico en roedores. Estos péptidos y OXM humana se sintetizaron y purificaron a través de GL Biochem (Shanghái) Ltd.

En la Tabla 4, las potencias in vitro y las afinidades de enlace del receptor de OXM nativa y OXM-Q3E y péptidos OXM-Q3D. La mutación del tercer residuo a partir de la Q neutra hacia un residuo de ácido, por ejemplo D o E, reduce significativamente la potencia de la oxintomodulina nativa para ligar el receptor glucagón, mientras que tiene un efecto mínimo sobre la potencia para el receptor GLP-1.

Evaluamos aún más la capacidad de OXM nativa y OXM-Q3E (GLP-l-mimética) de interactuar con el GCGR in vivo, tanto en un estudio de glucogenólisis ex vivo como en un ensayo de ocupancia de receptor GCGR in vivo. Puesto que la demostración de la eficacia in vivo para péptidos con frecuencia se confunde por propiedades farmacocinéticas inadecuadas, el ensayo de hígado perfundido ofrece un método alternativo ex vivo de evaluar péptidos de prueba para la actividad en el órgano de interés funcionando.

Animales para los ensayos in vivo: Se compraron ratones macho C57BL/6 magros u obesos inducidos por dieta de 10 a 12 semanas de Taconic Farms (Germantown, NY) y se alojaron en jaulas Tecniplast individuales en instalaciones SPF convencionales. Los ratones se mantuvieron con una dieta de comida regular (Teklad 7012: 13,4% kcal de grasa; Harían Teklad) o una dieta alta en grasa (D12492: 60% kcal de grasa; Research Diets, Inc.) con acceso ad libitum a agua en un ciclo de 12-h de luz/12-h oscuro a menos que se exprese de otra manera. Prueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal . Se distribuyeron ratones C57BL/6N macho por peso en grupos de tratamiento (n=6/grupo) . En la mañana del estudio, se retiró el alimento y se administró a los ratones vía s.c. con vehículo (agua esterilizada) OXM u 0XM-Q3E a 0,01; 0,03; 0,1; 0,3, 1; o 3 mg/kg. 10 minutos antes de exponer a la glucosa. Se determinaron las concentraciones de glucosa en sangre a T= -10 min y T= 0 min (inicio) . Inmediatamente después se expusieron los ratones, intraperitonealmente, con D-glucosa (2 g/kg) . Un grupo ratones tratados con vehículo fue expuesto con solución salina al 0,9% como control negativo. Las concentraciones de glucosa en sangre se determinaron mediante sangrados de la cola tomados a 20, 40 y 60 minutos después de la exposición a la D-glucosa. El perfil de excursión de glucosa en sangre de T = 0 a T = 60 minutos se usó para integrar el área bajo la curva (AUC) para cada tratamiento. Los valores de inhibición porcentuales para cada tratamiento se generaron a partir de datos del AUC normalizados a los controles expuestos a solución salina. Las áreas bajo la curva (AUC) para glucosa (AUC glucosa) se calcularon con el método trapezoidal. Estadísticas. El análisis estadístico se realizó con la prueba de Student de dos colas no emparejada. Los valores P <0,05 se reportaron como significativos.

Ensayo de glucogenólisis del hígado.

Se anestesiaron ratones GCGR humanizados (C57B/6N) (Nembutal IP, 50 mg/kg) en medio del ciclo oscuro. Se canalizó entonces la vena porta y se resecó y perfundió el hígado con una solución amortiguadora de bicarbonato rebs-Henseleit preoxigenada durante 5 a 10 minutos, la cual inicialmente no se recirculó para lavar sustratos endógenos. Posteriormente se colocó el hígado en un tubo de NMR de 20 mm NMR y la solución inicial de Krebs se cambió por un perfusato Krebs-BSA (aprox. 72 mi, 2,5% BSA) , la cual fue recirculada. Inicialmente se realizó espectroscopia 31p NMR para examinar las concentraciones de ATP y de fosfato inorgánico (Pi) para evaluar la viabilidad hepática. Se creó entonces una mezcla visible a 1 c NMR de glucógeno mediante la adición del sustrato gluconeogénico [2-13c] piruvato y cloruro de amonio (~7 mM y 1 mM, respectivamente) al perfusato, y la cantidad de glucógeno 13c contenida en el hígado se monitoreó en tiempo real a través de la resonancia Cl de las unidades glucosilo en glucógeno. Después de 45 minutos, se perfundió OXM, OXM-Q3E, glucagón o vehículo, y la respuesta subsiguiente de las concentraciones de glucógeno se usó para evaluar la activación de GCGR (Bergans y col., NMR Biomed. 16: 36-46, (2003) ) . Secreción de insulina dependiente de glucosa (GDIS) . Para medir la GDIS, se aislaron islotes pancreáticos de ratones mediante el método de colagenasa usando el procedimiento de canalización del conducto pancreático y purificación de gradiente de densidad (Mu y col., Diabetes 55: 1695-704, (2006)) y se incubaron con 2 o 16 mmol/L de glucosa. Se midió la insulina en alícuotas de la solución amortiguadora de incubación mediante ensayo con sustancias inmunoabsorbente unidas a enzimas con un kit comercial (diagnóstico ALPCO, Windham, NH) . El Comité Institucional para el Cuidado y Uso de Animales en Rahway, NJ de Merck Research Laboratories revisó y aprobó los protocolos de estudio de animales.

Se usó espectroscopia de 13c-NMR para monitorear en forma no invasiva las concentraciones de glucógeno y glucosa en respuesta al tratamiento agudo con análogos originales de oxintomodulina en tiempo real. Se anestesiaron ratones que manifestaron GCGR humano (Nembutal IP, 50 mg/kg) aproximadamente en medio del ciclo oscuro. Luego se canalizó y ligó la vena porta y se extirpó el hígado. Posteriormente se colocó el hígado en un tubo de NRM de 20 mm NMR y la solución inicial de Krebs se cambió por un perfusato Krebs-BSA, el cual fue recirculado. Inicialmente se realizó espectroscopia de 31p NMR para examinar las concentraciones de ATP y fosfato inorgánico (Pi) en el hígado, las cuales pueden usarse para evaluar la viabilidad hepática. Posteriormente se creó una mezcla visible de 13c NMR de glucógeno mediante la adición del sustrato gluconeogénico [2-13c] piruvato + NH4CI y se monitoreó en tiempo real la cantidad de glucógeno contenido en el hígado a través de la resonancia Cl de las unidades de glucosilo en glucógeno. Después de aproximadamente 45 minutos, se perfundió OXM o un análogo de péptido OXM y las respuesta subsiguiente de concentraciones de glucógeno se usó para evaluar la activación de GCGR humano. El área de la resonancia Cl de las unidades de glucosilo en glucógeno se representa durante el tiempo en la Figura 1 para hígados que recibieron ya sea análogos de péptido OXM, glucagón 50 pM o medios. Como puede verse enseguida, la OXM nativa induce gluconeogénesis de una manera dependiente de la dosis e induce glucogenólisis total a 1,5, y tiene un EC50 aproximado de 0,5 nM, en comparación, inducido por OXM-Q3E solo aproximadamente 58% a 300 nM, consistente con su baja potencia agonista GCGR.

Dada la capacidad de la OXM de estimular una respuesta de glucogenólisis fuerte, examinamos aún más la ocupancia del receptor GCGR in vivo de OXM y OXM-Q3E en un ensayo de competencia en ratones salvajes. Se dosificó a tres cohortes de ratones ya sea con vehículo (recuentos totales), vehículo y glucagón frío (fijación no específica), o OXM-Q3E en forma subcutánea. Aproximadamente 15 minutos después de la dosis, de administró por vía intravenosa glucagón 125i, y aproximadamente 15 minutos más tarde, se recolectó el hígado y se realizó un ensayo de la radioactividad total. Como se muestra en la Figura 2, el glucagón (GCG) a 1,5 mpk dio una ocupancia del 84%, OXM 3 mpk dio una ocupancia de GCGR del 31%, y 0XM-Q3E dio una ocupancia de GCGR del 0%.

Con el uso de péptidos correspondientes, OXM, OXM-Q3E, investigamos los efectos farmacológicos agudos y crónicos del co-agonismo de ambos receptores en una pinza hiperglucémica y en un estudio de ingesta de alimento (FI) crónica y peso corporal (BW) (Tabla 5) , y en un aprueba de tolerancia a la glucosa intraperitoneal (IPGTT, Figura 3) . Aunque ambos péptidos mejoraron eficazmente la tolerancia a la glucosa, OXM-Q3E superó a la OXM nativa al reducir la desviación de glucosa en modelos de ratones magros y obesos inducidos por dieta (DIO) . Sin embargo, el péptido nativo demostró ser superior en reducir la ingesta de alimento y el peso corporal (ABW: -6% para OXM vs -2,4% para OXM-Q3E a 5 mg/kg) en ratones DIO, un efecto que se atribuye al coagonismo del GCGR. En los dos paradigmas, agudo y crónico, la OXM nativa no causó desviación de glucosa aumentada.

Estudio de clamp hiperglucémico .

Ratones con obesidad inducida por dieta (diet induced obesity, DIO) (16 semanas con una dieta rica en grasas) fueron anestesiados con xilazina y ketamina y cateterizados a través de la vena yugular interna derecha 3 días antes de los estudios in vivo. Se infundió y ajustó 25% de glucosa por la duración del experimento para mantener la hiperglucemia . Debido a la corta vida media de los péptidos (ambos se inactivan rápidamente mediante dipeptidil peptidasa IV y son eliminados por los ríñones (Zhu et al., J. Biol. Chem. 278: 22418-23, (2003))), se infundieron vehículo, OX (~16 g/kg/min) y OXM-Q3E (-16 µg/kg/min) por vía intravenosa durante los últimos 60 minutos del estudio. Se utilizó el catéter venoso para la infusión y se recolectaron muestras de sangre de la vena de la cola. Se controló a cada animal para conocer la ingesta de alimentos y la ganancia de peso después de la cirugía para asegurarse de su completa recuperación. Se realizaron clamps hiperglucémicos en ratones despiertos, libres y cateterizados como se describió anteriormente (Pocai et al., Nature . 43: 1026-31, (2005)). Concretamente, se midió glucosa plasmática mediante glucómetro OneTouch cada 10 minutos durante un periodo de 2 horas . Se infundió por via intravenosa veinticinco por ciento de glucosa (D-glucosa, Sigma) y se ajustó el índice de forma periódica para fijar los niveles de glucosa plasmática (~20 mM) . Una hora después del comienzo de la infusión, se administraron OX (-16 g/kg/min) , 0XM-Q3E (16 µg kg/min) y vehículo (salina estéril) durante el resto del período. Se ajustó el índice de infusión de glucosa (glucose infusión rate, GIR) al peso corporal .

En las Figuras 3A y 3B se muestran los resultados del ensayo de clamp hiperglucémico . Los niveles de glucosa en sangre se mantuvieron en aproximadamente 20 mmol/L durante el clamp. En animales tratados con OXM-Q3E, fue necesario un rápido y contundente aumento de la infusión de glucosa (GIR, índice de infusión de glucosa) para mantener la hiperglucemia en comparación con ratones tratados con vehículo (GIRO-60 55+4 vs . 6±2 mg/kg/min; OX -Q3E vs . vehículo; p<0,05). La OXM aumentó además el índice de infusión de glucosa necesario para mantener la hiperglucemia (GIR0-60= 40+4 vs . 6±2 mg/kg/min; OXM vs . vehículo, p<0,05) pero el aumento del GIR fue aproximadamente 30% menor que el del grupo de OXM-Q3E (GIR0-60= 40±4 vs . 55±4 mg/kg/min; OXM vs . OXM-Q3E respectivamente, p<0,05), y el efecto de disminución de glucosa se demoró (aproximadamente 10 minutos) en comparación con los ratones tratados con OXM-Q3E, *p<0,05 vs . vehículo.

Se comparó el efecto de OXM o 0XM-Q3E en la excursión de glucosa en ratones delgados C57BL/6N. La Figura 4 muestra que tanto los análogos peptidicos nativos como de OXM reducen la excursión glucémica. La administración subcutánea de cualquiera de los dos péptidos, antes del desafio de dextrosa (Plasma Cmax) en una prueba de tolerancia intraperitoneal a la glucosa (IPGTT), reduce de forma significativa la excursión de glucosa dependiendo de la dosis. Una comparación de la dosis efectiva mínima indica que OX -Q3E es aproximadamente 10 pliegues más efectiva para reducir la glucosa que el péptido nativo (EC50 0, 055 nM in vivo y 0,38 nM respectivamente) .

EJEMPLO 8 La OXM nativa tiene una vida media in vivo (t½ ) de aproximadamente 8 a 12 minutos en seres humanos, no adecuada para terapia farmacológica sostenida. Por lo tanto, investigamos la adición de sustituyentes al péptido para reducir la limpieza del riñon.

Se conjugaron varios grupos PEG de peso molecular o N-etil maleimida con el péptido OXM en diferentes ubicaciones en toda la molécula, mediante la conjugación a la cadena lateral de un residuo de cisteína introducido. Las posiciones investigadas para conjugación tanto con Cis-N-etil maleimida como con un grupo Cis-PEG se subrayan en la siguiente secuencia aminoácida para OXM (SEQ ID NO:l) o se colocan en el C-terminal de la OXM.

HSQGT FTSDY SKYLD SRRAQ DFVQW LMNTK RNRNN IA Inesperadamente, la PEGilación (5 a 80 kDa) pareció disminuir severamente la habilidad del análogo peptidico para activar tanto el GCGR como GLP-1R y GCGR. En algunos casos, la introducción de un residuo de cisteina encapsulada con N-etil maleimida fue suficiente para reducir la actividad considerablemente. En el Cuadro 6 se muestran los resultados).

EJEMPLO 9 Como alternativa para la PEGilación, evaluamos varios análogos peptidicos OXM lipidados para mejoras en el perfil farmacocinético.

Inicialmente conjugamos los péptidos con un grupo con colesterol a través de la cadena lateral de cisteina y nuevamente medimos su habilidad para estimular la producción de cAMP en lineas de células transíectadas GCGR y GLP-1R. La conjugación del C-terminal fue la ubicación más favorable para la conjugación y se identificaron análogos OXM con potencias nanomolares bajas de los receptores. Inesperadamente, el análisis de estos péptidos en el ensayo de glucogenólisis del hígado por perfusión ex vivo indicó que la potencia agonista GCGR in vitro no reflejaba de forma correcta la activación de GCGR en el hígado (Ver OXM70 en la Figura 5) . La medición de la potencia agonista en 10 a 20% de plasma agregado al ensayo celular in vitro reveló un "cambio de suero" significativo que redujo de forma efectiva la potencia de la molécula en más de >40-pliegues {Ver Cuadro 7), lo que sugiere que las moléculas colesteroladas se unen al lípido y/o proteína en el plasma, reduciendo la concentración efectiva.

Cuadro 7 Potencias in vitro de análogos peptidicos OXM lipidados seleccionados La Figura 5A muestra la medición ex vivo de glicogenólisis en hígado perfundido en presencia de OXM70, OXM110, OXM177, 0XM115 y OX 216. La Figura 5B muestra la ocupación del GGCR después de la administración subcutánea (s.c.) o intravenosa (i.v.) de OXM70, OXM110, OXM177, OXM115 y OXM216 en comparación con OXM nativa en ensayo por competición en ratones wild-type .

EJEMPLO 10 Para mitigar los efectos de la unión de plasma en el enlace del receptor empleamos una estrategia modificada para mejorar la farmacocinética incorporando un conector hidrófilo entre el péptido y el grupo con colesterol. La adición de un conector tetra-etoxi (Oxa4) entre el grupo con colesterol y el péptido redujo de forma significativa el efecto observado anteriormente cuando se agregó plasma al ensayo basado en células, es decir, redujo el "cambio de suero" a 2 pliegues como se muestra en el Cuadro 8. Además, la sustitución del ácido aminoisobutirico (Aib) o D-Serina (D-Ser) en la posición dos del aminoácido mejoró además la afinidad GLP-1R y GCGR. Confirmamos estas observaciones in vitro tanto en el ensayo de glicogenólisis ex vivo como en el ensayo de unión del receptor GCG {Ver Cuadro 8), obteniendo resultados que confirmaron que la conjugación de un grupo con colesterol unido hidrofílicamente o una cadena acil resultó en la identificación de moléculas que conectaban y activaban el GCGR de forma efectiva.

Análisis farmacodinámico de análogos seleccionados. Evaluamos la eficacia de varios péptidos lipidados para reducir el peso corporal, la ingesta de alimentos (ratones con obesidad inducida por dieta) y mejorar el control glicémico (ratones delgados) después de una administración crónica e intensiva. Como se mostró en las Figuras 6 a 9, después de una única dosis subcutánea, las moléculas lipidadas redujeron de forma significativa 1 ingesta de alimentos y el peso corporal fuertemente y con eficacia sostenida. Como se pronosticaba a partir del análisis in vi tro, los análogos que contienen tanto grupos acil como conectores hidrófilos fueron más significativamente eficaces que los análogos OXM lipidados específicos del sitio para reducir la ingesta de alimentos y el peso corporal en este modelo.

La Figura 6 resume la eficacia aguda in vivo de OXM70 para reducir la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratones con obesidad inducida por dieta establecidos. La Figura 7 resume la eficacia aguda in vivo de OXMllO y OXM177 al reducir la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratones con obesidad inducida por dieta establecidos. La Figura 8 resume la eficacia aguda in vivo de OXM216, OXM115 y OXM177 al reducir la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratones con obesidad inducida por dieta establecidos. En los tres experimentos, se pesaron y medicaron ratones C57BL/6 machos con obesidad inducida por dieta, alimentados ad libitum (aproximadamente 51 g cada uno) tanto con vehículo (agua) como con análogo OXM OXM70, OXM110, OXM177, OXM216 o OXM115 aproximadamente 30 minutos antes de la fase de oscuridad. Se midió la ingesta de alimentos aproximadamente dos horas y 18 horas después. También se midieron los cambios en el peso corporal a las 18 horas (durante la noche) *P < 0,05 vs . vehículo, n = 5-6 por grupo) .

Efectos crónicos del peso corporal y la ingesta de alimentos Para determinar los efectos crónicos de los análogos en el metabolismo de glucosa y energía, se realizaron estudios en un modelo de ratón con obesidad inducida por dieta (DIO) establecido. Se medicaron ratones wild-type C57BL/6N machos, alimentados ad libitum (n = 6 por grupo, peso corporal medio ~50g) con vehículo, 0XM115, ¦OXM177, OXM110 a 3 o 10 mg/kg día por medio (Q2D) durante el transcurso de un estudio de 14 días consecutivos. Se midieron diariamente el peso corporal, la ingesta de alimentos y los niveles de glucosa basal. Como se mostró en las Figuras 9A y 9B, el tratamiento crónico con los análogos lipidados redujo de forma significativa el peso corporal y la ingesta de alimentos dependiendo de la dosis a lo largo de todo el estudio. La Figura 9C muestra la glucosa basal durante el período de tiempo del estudio en I respuesta a los diferentes péptidos .

Todos los péptidos lipidados evaluados redujeron de forma significativa la glucosa basal dependiendo de la dosis a lo largo de todo el estudio en comparación con el día 0 del estudio crónico y con animales tratados con vehículo en el mismo día (p<0,05). Un IPGTT realizado el dia 13, mostró que la tolerancia a la glucosa mejoró después de la administración crónica de análogos lipidados, dependiendo de la dosis (Figuras 9D) .

Mejora de la tolerancia de glucosa Como se mostró en las Figuras 10 a 13, en IPGTT en ratones delgados C57BL/6N, la administración subcutánea de los análogos de péptidos OXM, antes de la medición del desafío de dextrosa para corresponder con el Plasma Cmaxf redujo de forma significativa la excursión de glucemia en sangre dependiendo de la dosis, para todos los análogos lipidados evaluados.

Efectos del índice metabólico Para establecer si la administración del análogo 0XM115 colesterolado unido tetra-etoxi confiere un porcentaje metabólico, se realizó un estudio crónico, con una única inyección de 0X 115. Se aclimataron ratones B6 machos, con obesidad inducida por dieta (peso corporal inicial promedio 55 g) en cámaras de índice metabólico sin alimento a termoneutralidad (T 29°C) . Se usó un período de tres horas de 6:00 a 9:00 a.m. para calcular el índice metabólico en reposo. Se administró de forma subcutánea vehículo (dH20) , OXM115 a 3 o 10 mg/kg a las tres horas en la fase luminosa (9:00 a.m.) . El tiempo total del ciclo se estableció en 20 minutos, consistiendo en una lectura de referencia con un tiempo de estabilización de 70 segundos y un período de medición de 10 segundos como también un tiempo de estabilización de 60 segundos y tiempo de medición de 10 segundos para cada una de las 16 jaulas. Los resultados mostrados en las Figuras 14A y B muestran que la administración de la dosis de OX 115 aumentó de forma dependiente el índice metabólico agudo en ratones con obesidad inducida por dieta.

La Figura 15 resume la eficacia aguda in vivo de OXM303, OXM304 y OXM305 para reducir la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratones con obesidad inducida por dieta establecidos y muestra OXM305 siendo particularmente eficaz para reducir la ingesta de alimentos y el peso corporal. Se pesaron y medicaron de forma subcutánea los ratones C57BL/6 machos, con obesidad inducida por dieta, alimentados ad libitum (aproximadamente 50 g cada uno) con vehículo (agua) o análogos OXM 30 minutos antes del comienzo de la fase oscura. Se midió la ingesta de alimentos dos horas, 18 y 42 horas después.

También se midieron los cambios en el peso corporal a las 18 y 42 horas (durante la noche) *P < 0,05 vs . vehículo, n = 5-6 por grupo) .

La Figura 16 resume la eficacia aguda in vivo de OXM395, OXM399, OXM400 y OXM401 al reducir la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratones con obesidad inducida por dieta establecidos. OXM401 es un péptido de control 0/+ con la secuencia HAibEGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLm TK-YEYE-G(Oxai2Chol) (SEQ ID NO: 99) .

Se medicaron de forma subcutánea los ratones con obesidad inducida por dieta establecidos (~52g cada uno) con vehículo (30%HBC) o péptido 1 mg/kg aproximadamente 30 minutos antes del comienzo de la fase oscura. Se midieron la ingesta de alimentos y el peso corporal durante un período de tiempo de cuatro días (* P < 0,05 vs . vehículo, n = 5 por grupo) .

EJEMPLO 11 Este ejemplo muestra que los péptidos lipidados con un pl superior a 7 basado en la secuencia OXM estimula la degranulación de mastocitos mientras que los péptidos lipidados con un pl de aproximadamente 5 parecen no estimular la degranulación de mastocitos.

Para evaluar el potencial de liberación de histamina de análogos de oxintomodulina, establecimos un ensayo de cribado inverso in vitro usando la linea de mastocitos humanos LAD2. Se incubaron las células LAD2 (50.000 células/pocilio, placa de 96 pocilios) con compuestos durante 30 minutos. Se determinó la degranulación de las células LAD2 mediante la cuantificación de ß-hexosaminidasa liberada en sobrenadantes y en Usados celulares después de la hidróilisis de 4-metilumbelliferil-N-acetil-p-D-glucosaminida . Los resultados se expresan como porcentaje de liberación ß-hexosaminidasa, calculado como por ciento del contenido total. El Cuadro 1 resume la potencia de degranulación (EC50) de análogos OXM en células LAD2. Los resultados sugieren que para reducir la probabilidad de estimular la degranulación de mastocitos, el pl para análogos basados lipidados debería ser aproximadamente 5.

EJEMPLO 12 Este ejemplo presenta cuadros que muestran las potencias in vitro de varios análogos peptidicos en el receptor humano GLP-1 (hGLP-lR) y el receptor del glucagón humano (hGCGR) . Las potencias in vitro que se muestran en el Cuadro 10 o Cuadro 11 se determinaron a partir de los resultados de ensayos que eran similares a los ensayos cAMP basados en células descritos anteriormente en la presente (Cuadro 10) o en los ensayos cAMP basados en células descritos en la Solicitud de patente publicada internacionalmente No. WO2008101017, que se incorpora en la presente en su totalidad, en particular los ensayos cAMP basados en células descritos allí (Cuadro 11) .

Aunque la presente invención se describe aquí con referencia a las modalidades ilustradas, se debe comprender que la invención no se limita a estas. Aquellas personas con experiencia en la técnica y acceso a las instrucciones de la presente reconocerán otras modificaciones y modalidades dentro del alcance de la misma. Por lo tanto, la presente invención queda limitada únicamente por las reivindicaciones aquí adjuntas.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un análogo peptidico que contiene la secuencia de aminoácidos HSQGTFTSDYSKYLDSRRAQDFVQWLMNTK (ID. DE SECUENCIA N. ° : 109) en la que (A) el segundo aminoácido del extremo N del péptido se sustituye por un aminoácido que provoca que el péptido sea resistente a la segmentación y la inactivación por parte de dipeptidil peptidasa IV; (B) el péptido incluye una fracción de colesterol o lipido unida de manera covalente al péptido mediante un espaciador que contiene uno o más residuos de ácido gamma-glutámico; (C) el péptido opcionalmente incluye de una a tres sustituciones de aminoácido además de la sustitución en la posición 2; y (D) el péptido opcionalmente incluye un grupo de protección que, si está presente, se une al grupo carboxilo de extremo C del péptido; donde el análogo peptidico posee pl inferior a 6,0 y es un doble agonista de los receptores de GLP-1 y un agonista de los receptores de glucagón, y las sales de este que son aceptables desde el punto de vista farmacéutico.

2. El análogo peptidico de la reivindicación 1, donde el aminoácido sustituido por el segundo aminoácido del extremo N, se selecciona del grupo que está compuesto por D-serina, ácido a-aminoisobutirico y ácido 1-amino-l-ciclobutano carboxilico.

3. El análogo peptidico de la reivindicación 1, donde el análogo peptidico incluye una fracción de colesterol unida de manera covalente al grupo tiol de un residuo de cisteina que se une de manera covalente al grupo e-amino del residuo de lisina en el extremo C del análogo peptidico mediante un espaciador que contiene uno o más residuos de ácido gamma-glutámico .

4. El análogo peptidico de la reivindicación 3, donde la fracción de colesterol se une de manera covalente al grupo tiol mediante un enlazador hidrofilico.

5. El análogo peptidico de la reivindicación 4, donde el enlazador hidrofilico es un polímero etoxi que incluye de una a doce unidades etoxi.

6. El análogo peptidico de la reivindicación 4, donde el enlazador hidrofilico es un polímero etoxi que incluye cuatro unidades etoxi.

7. El análogo peptidico de la reivindicación 1, donde el análogo peptidico incluye una fracción de lípido unida de manera covalente al grupo e-amino de un residuo de lisina .

8. El análogo peptidico de la reivindicación 7, donde la fracción de lípido es un grupo palmitoil.

9. El análogo peptidico de la reivindicación 7, donde la fracción de lípido está unida de manera covalente al grupo e-amino del residuo de lisina mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico.

10. El análogo peptidico de la reivindicación 7, donde la fracción de lipido está unida de manera covalente al grupo e-amino del residuo de lisina en el extremo C mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico.

11. El análogo peptidico de la reivindicación 7, donde la fracción de lipido está unida de manera covalente al grupo e-amino del residuo de lisina mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico y el residuo de lisina está unido al residuo de lisina en el extremo C mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico.

12. El análogo peptidico de la reivindicación 1, donde el análogo peptidico también incluye una o más sustituciones de aminoácido en posiciones de aminoácidos seleccionadas del grupo que está compuesto por las posiciones 10, 12, 16, 17, 18 y 27.

13. El análogo peptidico de la reivindicación 1, donde el análogo peptidico también incluye una o más sustituciones de aminoácido seleccionadas del grupo que está compuesto por lisina para la tirosina en la posición 10, serina para la lisina en la posición 12, ácido glutámico o ácido -aminoisobutirico para la serina en al posición 16, ácido glutámico para la arginina en la posición 17, alanina para la arginina en la posición 18, lisina para la glutamina en la posición 20, y norleucina u O-metil-L-homoserina para la metionina en la posición 27.

14. El análogo peptídico de la reivindicación 13, donde la tirosina en la posición 10 se reemplaza por una lisina y la fracción de lipido está unida de manera covalente al grupo e-amino del residuo de lisina mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico.

15. El análogo peptídico de la reivindicación 13, donde la glutamina en la posición 20 se reemplaza por lisina y la fracción de lipido está unida de manera covalente al grupo e-amino de la lisina mediante uno o más residuos de ácido gamma-glutámico.

16. El análogo peptídico de la reivindicación 14, donde el análogo peptídico también incluye uno o más residuos de ácido gamma-glutámico unidos de manera covalente al extremo C.

17. El análogo peptídico de la reivindicación 15, donde el análogo peptídico también incluye uno o más residuos de ácido gamma-glutámico unidos de manera covalente al extremo C.

18. El uso de uno o más análogos peptídicos de las reivindicaciones 1 a 17 en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de un trastorno metabólico.

19. Un análogo peptídico que contiene la estructura Z1-P-M-Z2 donde P es un péptido que posee la secuencia de aminoácidos HX1QGTFTSDX2SX3YLDX4X5X6AX7DFVQWLX8NTKX9X10 (ID. DE SECUENCIA N.°: 110) donde Xi es un residuo de D-serina, ácido o¡-aminoisobutirico (aib) , residuo de ácido 1-amino-l-ciclobutano carboxilico (Acb) , ácido 1-amino-l-ciclohexano carboxilico (Acx) ; ácido alfa-aminobutírico (Abu) ; ácido D-alfa-aminobutirico (D-Abu) ; ácido aminovalérico (Nva) ; beta-ciclopropil-alanina (Cpa) / propargilglicina (Prg) ; alilglicina (Alg) ácido 2-amino-2-ciclohexil-propiónico (2-Cha) ; D-tercbutilglicina (D-tbg) ; vinilglicina (Vg) ; ácido 1-amino-l-ciclopropano carboxilico (Acp) ; o residuo de ácido 1-amino-l-ciclopentano carboxilico (Acpe) ; X2 es un residuo de tirosina (Y) o lisina (K) ; X3 es un residuo de serina (S) o lisina (K) ; X4 es un residuo de serina (S) , ácido de a-aminoisobutirico (aib) , o ácido glutámico (E) X5 es un residuo de arginina (R) o ácido glutámico (E) ; X6 es un residuo de arginina (R) o alanina (A) ; X7 es un residuo de glutamina (Q) o lisina (K) ; 8 es un residuo de metionina (M) , norleucina (Nle), sulfóxido de metionina (m) , u O-metil-L-homoserina (o) ; X9 es un residuo de ácido gamma-glutámico (yGlu) ; XlO es un residuo o la ausencia de ácido gamma-glutámico (yGlu) ; 1\ es un grupo de protección opcionalmente presente que, si se está presente, se une al grupo amino de extremo N. M es (i) un residuo de cisteina unido de manera covalente a una fracción de colesterol mediante un enlazador hidrofilico, (ii) un residuo de lisina unido de manera covalente a una fracción de lipido mediante un espaciador que contiene uno o más residuos de ácido gamma-glutámico, o (iii) una fracción de lipido, donde se une de manera covalente al extremo C o al aminoácido interno de P mediante un espaciador que contiene uno o más residuos de ácido gamma-glutámico; y Z2 es un grupo de protección opcionalmente presente que, si se está presente, se une al grupo carboxilo de extremo C; y las sales de este que son aceptables desde el punto de vista farmacéutico, donde el análogo peptidico o la sal de este posee pl inferior a 6,0 y es un doble agonista de los receptores de GLP-1 y un agonista de los receptores de glucagón.

20. El análogo peptidico de la reivindicación 19, donde M es un residuo de cisteina unido de manera covalente a una fracción de colesterol mediante un enlazador hidrofilico y el residuo de cisteina está unido al extremo C de P.

21. El análogo peptidico de la reivindicación 19, donde M es un residuo de lisina unido de manera covalente a una fracción de lipido mediante un espaciador que contiene uno o más residuos de ácido gamma-glutámico y el residuo de lisina está unido al extremo C de P.

22. El análogo peptidico de la reivindicación 19, donde M es un residuo de lisina unido de manera covalente a una fracción de lipido mediante un espaciador que contiene uno o más residuos de ácido gamma-glutámico y el residuo de lisina se encuentra en la posición X2 o X7 de P.

23. El análogo peptidico de la reivindicación 19, donde el enlazador hidrofilico es un polímero etoxi que incluye de una a veinticuatro unidades etoxi.

24. El análogo peptidico de la reivindicación 19, donde el enlazador hidrofilico es un polímero etoxi que incluye cuatro unidades etoxi.

25. El análogo peptidico de la reivindicación 19, donde la fracción de lipido es una fracción de palmitoil .

26. El análogo peptidico de la reivindicación 19, donde el análogo peptidico es OX 317 (ID. DE SECUENCIA N.°: 60); OXM318 (ID. DE SECUENCIA N.°: 61); OXM319 (ID. DE SECUENCIA N.°: 62); OXM323 (ID. DE SECUENCIA N.°: 64); OXM327 (ID. DE SECUENCIA N.°: 66); o OXM329 (ID. DE SECUENCIA N.0 : 67) .

27. El análogo peptidico de la reivindicación 19, donde el análogo peptidico es OXM345 (ID. DE SECUENCIA N.°: 69); OXM355 (ID. DE SECUENCIA N.°: 70); OXM357 (ID. DE SECUENCIA N.°: 71); OXM359 (ID. DE SECUENCIA N.°: 72); OXM361 (ID. DE SECUENCIA N.°: 73); OXM373 (ID. DE SECUENCIA N.°: 74); OXM374 (ID. DE SECUENCIA N.°: 75); OXM380 (ID. DE SECUENCIA N.°: 76); OXM381 (ID. DE SECUENCIA N.°: 77); OXM383 (ID. DE SECUENCIA N.°: 78); OXM388 (ID. DE SECUENCIA N.°: 79); OXM392 (ID. DE SECUENCIA N.°: 80); OXM395 (ID. DE SECUENCIA N.°: 81); OXM398 (ID. DE SECUENCIA N.°: 82); OX 399 (ID. DE SECUENCIA N.°: 83); OXM400 (ID. DE SECUENCIA N.°: 84); OXM401 (ID. DE SECUENCIA N.°: 85); OXM404 (ID. DE SECUENCIA N.°: 86); OX 406 (ID. DE SECUENCIA N.°: 87); OX 407 (ID. DE SECUENCIA N.°: 88); OX 408 (ID. DE SECUENCIA N.°: 89); OXM410 (ID. DE SECUENCIA N.°: 91); OXM411 (ID. DE SECUENCIA N.°: 92); OXM412 (ID. DE SECUENCIA N.°: 93); OXM414 (ID. DE SECUENCIA N.°: 95); OXM415 (ID. DE SECUENCIA N.°: 96); OXM416 (ID. DE SECUENCIA N.°: 97; OXM417 (ID. DE SECUENCIA N.°: 98); OXM418 (ID. DE SECUENCIA N.°: 99; OXM419 (ID. DE SECUENCIA N.°: 100; OXM420 (ID. DE SECUENCIA N.°: 101); o OX 421 (ID. DE SECUENCIA . ° : 102).