MX2009002066A - Analogos de 2-fenoxipirimidinona. - Google Patents

Abstract

Se proveen análogos de 2-fenoxipirimidinona, de la fórmula: (ver fórmula (I)) en donde las variables son como se describe aquí; dichos compuestos son ligandos que se pueden usar para modular actividad de receptor específica in vivo o in vitro, y son particularmente útiles en el tratamiento de condiciones asociadas con activación de receptor patológica en humanos, animales de compañía domesticados y animales de ganado; se proveen composiciones farmacéuticas y métodos para usar dichos compuestos para tratar esos trastornos, como lo son los métodos para usar dichos ligandos para estudios de localización de receptor.

Description

ANALOGOS DE 2-FENOXIPIRIMIDINONA REFERENCIA CRUZADA A SOLICITUDES RELACIONADAS Esta solicitud reclama prioridad a la solicitud provisional de E.U.A. 60/823,258, presentada el 23 de agosto de 2006, que se incorpora aquí por referencia en su totalidad.

CAMPO DE LA INVENCION Esta invención se refiere generalmente a análogos de 2-fenoxipirimidinona que tienen propiedades farmacológicas útiles. La invención además se refiere al uso de dichos compuestos para tratar condiciones relacionadas con activación de receptor de capsaicina, para identificar otros agentes que se unen a receptor de capsaicina, y como sondas para la detección y localización de receptores de capsaicina.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La percepción de dolor, o nocicepción, es mediada por las terminales periféricas de un grupo de neuronas sensoriales especializadas, denominadas "nociceptores". Una amplia variedad de estímulos físicos y químicos inducen la activación de dichas neuronas en mamíferos, conduciendo al reconocimiento de un estímulo potencialmente nocivo. La activación inapropiada o excesiva de nociceptores, sin embargo, puede dar por resultado dolor agudo o crónico debilitante. El dolor neuropático implica transmisión de señal en ausencia de estímulo, y típicamente resulta de daño al sistema nervioso. En la mayoría de los casos, se piensa que el dolor ocurre debido a la sensibilización en el sistema nervioso periférico y central después de daño inicial al sistema periférico (v.gr., mediante lesión directa o enfermedad sistémica). El dolor neuropático es típicamente ardiente, punzante e implacable en su intensidad y algunas veces puede ser más debilitante que la lesión inicial o proceso de enfermedad que lo indujo. Los tratamientos existentes para dolor neuropático son en gran medida inefectivos. Opiatos, tales corrió la morfina, son analgésicos potentes, pero su utilidad es limitada debido a efectos colaterales adversos, tales como adicción física y propiedades de abstinencia, asi como depresión respiratoria, cambios de estado de ánimo y motilidad intestinal disminuida con constipación concomitante, náusea, vómito y alteraciones en el sistema nervioso endocrino y autónomo. Además, el dolor neuropático frecuentemente no tiene respuesta o sólo tiene respuesta parcial a regímenes de opioides convencionales. Los tratamientos que utilizan el antagonista de N-metil-D-aspartato cetamina o el antagonista alfa(2)-adrenérgico clonidina pueden reducir dolor agudo o crónico, y permiten una reducción en consumo de opioides, pero estos agentes a menudo son poco tolerados debido a efectos colaterales.

El tratamiento tópico con capsaicina se ha usado para tratar dolor crónico y agudo, incluyendo dolor neuropático. La capsaicina es una sustancia pungente derivada de las plantas de la familia Solanaceae (que incluye los chiles) y parece actuar selectivamente sobre las fibras nerviosas aferentes de diámetro pequeño (fibras A-delta y C) que se cree que son mediadoras del dolor. La respuesta a la capsaicina se caracteriza por activación persistente de nociceptores en tejidos periféricos, seguido por desensibilización final de nociceptores periféricos a uno o más estímulos. De estudios con animales, la capsaicina parece disparar la despolarización de la membrana de fibras C al abrir canales selectivos de cationes para calcio y sodio. Respuestas similares también son evocadas por análogos estructurales de capsaicina que comparten una porción vainilloide común. Un análogo de este tipo es resiniferatoxina (RTX), un producto natural de plantas de Euphorbia. El término receptor de vainilloide (VR) se acuñó para describir el sitio de reconocimiento de membrana neuronal para capsaicina y los compuestos irritantes relacionados. La respuesta de la capsaicina es competitivamente inhibida (y por lo tanto antagonizada) por otro análogo de capsaicina, capsazepina, y también es inhibida por el bloqueador de canal de cationes no selectivo rojo de rutenio, que se une a VR con no más que afinidad moderada (típicamente con un valor de K¡ no menor que 140 µ?). Receptores de vainilloide de rata y humanos han sido clonados de células de ganglión de raíz dorsal. El primer tipo de receptor de vainilloide que ha identificado se conoce como receptor de vainilloide de tipo 1 (VR1), y los términos "VR1" y "receptor de capsaicina" se usan intercambiablemente aquí para referirse a receptores de rata y/o humanos de este tipo, así como homólogos de mamífero. El papel de VR1 en la sensación de dolor se ha confirmado usando ratones que carecen de este receptor, que no presentan dolor evocado por vainilloide y respuestas alteradas al calor e inflamación. VR1 es un canal de cationes no selectivo con un umbral para apertura que es reducido en respuesta a temperaturas elevadas, pH bajo y agonistas de receptor de capsaicina. La apertura del canal de receptor de capsaicina es generalmente seguido por la liberación de péptidos inflamatorios de neuronas que expresan el receptor y otras neuronas cercanas, incrementando la respuesta al dolor. Después de la activación inicial por la capsaicina, el receptor de capsaicina sufre una desensibilización rápida mediante fosforilación por proteína cinasa dependiente de AMPc. Debido a su capacidad para desensibilizar nociceptores en tejidos periféricos, los compuestos de vainilloide agonistas de VR1 se han usado como anestésicos tópicos. Sin embargo, la aplicación de agonista como tal puede causar dolor ardiente, que limita este uso terapéutico. Recientemente, se ha reportado que los antagonistas de VR1 , incluyendo ciertos compuestos que no son de vainilloide, también son útiles para el tratamiento de dolor (véase, v.gr., publicaciones de solicitud internacional del PCT números WO 02/08221 , WO 03/062209, WO 04/054582, WO 04/055003, WO 04/055004, WO 04/056774, WO 05/007646, WO 05/007648, WO 05/007652, WO 05/009977, WO 05/009980, WO 05/009982, WO 05/049601 , WO 05/049613, WO 06/122200 y WO 06/120481). Por lo tanto, los compuestos que ¡nteractúan con VR1 , pero no inducen la sensación de dolor inicial de compuestos de vainilloide agonistas de VR1 , son deseables para el tratamiento de dolor crónico y agudo, incluyendo dolor neuropático, así como otras condiciones que responden a receptor de modulación de capsaicina. La presente invención satisface esta necesidad, y provee ventajas relacionadas adicionales.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION La presente invención provee análogos de 2-fenoxipirimidinona de la fórmula A: Fórmula A así como sales farmacéuticamente aceptables, solvatos (v hidratos) y ásteres de dichos compuestos. Dentro de la fórmula A: representa un heteroarilo de 5 ó 6 miembros fusionado que contiene 1 , 2 ó 3 heteroátomos en el anillo, dichos heteroátomos siendo independientemente escogidos de O, N y S, con los átomos de anillo restantes siendo carbono, en donde el heteroarilo fusionado es opcionalmente sustituido; preferiblemente el heteroarilo fusionado es sustituido con de 0 a 3, o de 0 a 2, sustituyentes independientemente escogidos de amino, hidroxi, alquilo de C1-C6, hidroxialquilo de C C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C2, halogenoalquilo de CrC6, alcoxi de C-i-C6, éter alquílico de C2-C6, alcanoiloxi de C1-C6, alquilsulfonilamino de Ci-C6l alcanoilamino de Ci-C6, y mono- o di-(alquilo de Ci-C6)amino; Ar es fenilo o un heteroarilo de 5 ó 6 miembros, cada uno de los cuales es opcionalmente sustituido, y cada uno de los cuales es preferiblemente sustituido con de 0 a 4 o de 0 a 3 sustituyentes que son independientemente escogidos de halógeno, ciano, amino, nitro, alquilo de d-C6, alquenilo de C2-C6, alquinilo de C2-C6, halogenoalquilo de C1-C6, hidroxialquilo de C1-C6, alcoxi de C-I-C6, halogenoalcoxi de C1-C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C4, y mono- o di-(alquilo de CrC6)amino; y R3 representa de 0 a 4, o de 0 a 3, sustituyentes, dichos sustituyentes son preferiblemente independientemente escogidos de halógeno, hidroxi, ciano, amino, nitro, alquilo de CrC6, alquenilo de C2-C6, alquinilo de C2-C6, halogenoalquilo de C1-C6, hidroxialquilo de C1-C6, alcoxi de C C6, halogenoalcoxi de C1-C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C4, mono-0 di-(alquilo de C C6)amino, y mono- o di-(alquilo de Ci-C6)aminosulfonilo. La presente invención además provee análogos de 2-fenoxipirimidinona de la fórmula I: así como sales farmacéuticamente aceptables, solvatos (v.gr., hidratos) y ésteres de dichos compuestos. Dentro de la fórmula I: y R3 son como se describe parea la fórmula A; X es N o CH que es opcionalmente sustituido con un sustituyente representado por Ri ¡ y R1 representa de 0 a 3 sustituyentes; dichos sustituyentes son preferiblemente independientemente escogidos de halógeno, ciano, amino, nitro, alquilo de C C6, alquenilo de C2-C6, alquinilo de C2-C6, halogenoalquilo de C1-C6, hidroxialquilo de C-i-C6, alcoxi de C C6, halogenoalcoxi de C C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C4, y mono- o di-(alquilo de C C6)amino. Dentro de ciertos aspectos, los compuestos de la fórmula A y fórmula I son moduladores de VR1 y presentan una K¡ no mayor que 1 micromolar, 500 nanomolar, 100 nanomolar, 50 nanomolar, 10 nanomolar o 1 nanomolar en una prueba de unión a receptor de capsaicina y/o que tienen un valor de CE50 o CI50 no mayor que 1 micromolar, 500 nanomolar, 100 nanomolar, 50 nanomolar, 10 nanomolar o 1 nanomolar en una prueba in vitro para la determinación de receptor de actividad agonista o antagonista de capsaicina. En ciertas modalidades, dichos moduladores de VR1 son antagonistas de VR1 y no presentan actividad agonista detectable en una prueba in vitro de activación de receptor de capsaicina (v.gr., la prueba provista en el ejemplo 6, aquí) a una concentración igual a la Cl50l 10 veces la Cl50 o 100 veces la CI50. Dentro de ciertos aspectos, los compuestos provistos aquí son marcados con un marcador detectable (v.gr., radiomarcado o conjugado con fluoresceína). La presente invención además provee, dentro de otros aspectos, composiciones farmacéuticas que comprenden por lo menos un análogo de 2-fenoxipirimidinona en combinación con un vehículo o excipiente fisiológicamente aceptable. Dentro de aspectos adicionales, se proveen métodos para reducir conductancia de calcio de un receptor de capsaicina celular, que comprende poner en contacto una célula (v.gr., neuronal, tal como células del sistema nervioso central o ganglios periféricos, uroteliales o pulmonares) que expresa un receptor de capsaicina con por lo menos un modulador de VR1 como se describe aquí. Dicho contacto puede ocurrir in vivo o in vitro y generalmente se lleva a cabo usando una concentración de modulador de VR1 que es suficiente para alterar la unión de ligando de vainilloide a VR1 in vitro (usando la prueba provista en el ejemplo 5) y/o transducción de señal mediada por VR1 (usando una prueba provista en el ejemplo 6). Además se proveen métodos para inhibir la unión de ligando de vainilloide a un receptor de capsaicina. Dentro de ciertas modalidades, la inhibición tiene lugar in vitro. Dichos métodos comprenden poner en contacto un receptor de capsaicina con por lo menos un modulador de VR1 como se describe aquí, bajo condiciones y en una cantidad o concentración suficiente para inhibir detectablemente unión de ligando de vainilloide al receptor de capsaicina. Dentro de otras modalidades, el receptor de capsaicina está en un paciente. Dichos métodos comprenden poner en contacto células que expresan un receptor de capsaicina en un paciente con por lo menos un modulador de VR1 como se describe aquí en una cantidad o concentración que sería suficiente para inhibir detectablemente unión de ligando de vainilloide a células que expresan receptor de capsaicina clonado in vitro. La presente invención además provee métodos para tratar una condición que responde a modulación de receptor de capsaicina en un paciente, que comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos un modulador de VR1 como se describe aquí. Dentro de otros aspectos, se proveen métodos para tratar dolor en un paciente, que comprenden administrar a un paciente que padece (o está en riesgo de) dolor una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos un modulador de VR1 como se describe aquí. Además, se proveen métodos para tratar comezón, incontinencia urinaria, vejiga sobrerreactiva, síntomas menopáusicos, tos y/o hipo en un paciente, que comprende administrar a un paciente que padece (o está en riesgo de) una o más de las condiciones anteriores una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos un modulador de VR1 como se describe aquí. Dentro de otros aspectos, se proveen métodos para tratar síntomas menopáusicos en un paciente, que comprende administrar a un paciente que padece (o está en riesgo de) dichos síntomas una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos un modulador de VR1 como se describe aquí. La presente invención además provee métodos para promover pérdida de peso en un paciente obeso, que comprende administrar a un paciente obeso una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos un modulador de VR1 como se describe aquí. Además, se proveen métodos para identificar un agente que se une a receptor de capsaicina, que comprende: (a) poner en contacto el receptor de capsaicina con un compuesto marcado como se describe aquí bajo condiciones que permiten la unión del compuesto al receptor de capsaicina, generando así un compuesto marcado, unido; (b) detectar una señal que corresponde a la cantidad de compuesto marcado, unido, en ausencia de agente de prueba; (c) poner en contacto el compuesto marcado, unido con un agente de prueba; (d) detectar una señal que corresponde a la cantidad de compuesto marcado, unido, en presencia de agente de prueba; y (e) detectar una disminución en la señal detectada en el paso (d), en comparación con las señales detectadas en el paso (b).

Dentro de aspectos adicionales, la presente invención provee métodos para determinar la presencia o ausencia de receptor de capsaicina en una muestra, que comprende: (a) poner en contacto una muestra con un compuesto como se describe aquí bajo condiciones que permiten la unión del compuesto al receptor de capsaicina; y (b) detectar una señal indicativa de un nivel del compuesto unido al receptor de capsaicina. La presente invención también provee preparaciones farmacéuticas empacadas, que comprenden: (a) una composición farmacéutica como se describe aquí en un contenedor; y (b) instrucciones para usar la composición para tratar una o más condiciones que responden a la modulación del receptor de capsaicina, tal como dolor, comezón, incontinencia urinaria, vejiga sobrerreactiva, síntomas menopáusicos, tos, hipo y/o obesidad. En otro aspecto más, la presente invención provee métodos para preparar los compuestos descritos aquí, incluyendo los intermediarios. Estos y otros aspectos de la invención se harán evidentes al referirse a la siguiente descripción detallada.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION Como se señaló antes, la presente invención provee análogos de 2-fenoxipirimidinona. Dichos compuestos se pueden usar in vitro o in vivo, para modular la actividad del receptor de capsaicina en una variedad de contextos.

Terminología Los compuestos generalmente se describen aquí usando nomenclatura estándar. Para compuestos que tienen centros asimétricos, cabe entender que (a menos que se especifique otra cosa) todos los isómeros ópticos y mezclas de los mismos son abarcados. Además, compuestos con dobles enlaces carbono-carbono pueden ocurrir en formas Z y E, con todas las formas isoméricas de los compuestos siendo incluidas en la presente invención a menos que se especifique otra cosa. En donde un compuesto existe en varias formas tautoméricas, un compuesto mencionado no se limita a ningún tautómero específico, sino más bien se pretende que abarque todas las formas tautoméricas. Ciertos compuestos se describen aquí usando una fórmula general que incluye variables (v.gr., R-i, A). A menos que se especifique otra cosa, cada variable dentro de una fórmula se define independientemente de cualquier otra variable, y cualquier variable que ocurra más de una vez en una fórmula se define independientemente en cada ocurrencia. La frase "análogos de 2-fenoxipirimidinona," como se usa aquí, abarca todos los compuestos de la fórmula A, incluyendo aquellos de la fórmula I, así como compuestos de otras fórmulas provistas aquí (incluyendo cualesquiera enantiómeros, racematos y estereoisómeros) y sales farmacéuticamente aceptables, solvatos y ésteres de dichos compuestos.

Una "sal farmacéuticamente aceptable" de un compuesto mencionado aquí es una sal acida o básica que es adecuada para usarse en contacto con los tejidos de seres humanos o animales sin toxicidad excesiva o carcinogenicidad, y preferiblemente sin irritación, respuesta alérgica, u otro problema o complicación. Dichas sales incluyen sales de ácidos minerales y orgánicos de residuos básicos tales como aminas, así como sales alcalinas u orgánicas de residuos ácidos tales como ácidos carboxílicos. Aniones farmacéuticamente aceptables específicos para usarse en formación de sal incluyen, pero no se limitan a, acetato, 2-acetoxibenzoato, ascorbato, benzoato, bicarbonato, bromuro, edetato de calcio, carbonato, cloruro, citrato, diclorhidrato, difosfato, ditartrato, edetato, estolato (etilsuccinato), formiato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolato, glicolilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, yodhidrato, hidroximaleato, hidroxinaftoato, yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, malato, maleato, mandelato, bromuro de metilo, nitrato de metilo, sulfato de metilo, mucato, napsilato, nitrato, pamoato, pantotenato, fenilacetato, fosfato, poligalacturonato, propionato, salicilato, estearato, subacetato, succinato, sulfamato, sulfanilato, sulfato, sulfonatos incluyendo besilato (bencenesulfonato), camsilato (alcanforsulfonato), edisilato (etano-1 ,2-disulfonato), esilato (etanesulfonato), 2-hidroxietilsulfonato, mesilato (metansulfonato), triflato (trifluorometansulfonato) y tosilato (p-toluensulfonato), tanato, tartrato, teoclato y yoduro de trietilo. De manera similar, los cationes farmacéuticamente aceptables para usarse en la formación de sal incluyen, pero no se limitan a amonio, benzatina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina, procaína, y metales tales como aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio y zinc. Los expertos en la técnica reconocerán sales farmacéuticamente aceptables adicionales para los compuestos provistos aquí. En general, una sal ácida o básica farmacéuticamente aceptable puede ser sintetizada a partir de un compuesto progenitor que contiene una porción básica o ácida por cualquier método químico convencional. En breve, dichas sales se pueden preparar haciendo reaccionar las formas de ácido o base libre de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiado en agua o en un solvente orgánico, o en una mezcla de los dos; generalmente, el uso de medio no acuoso, tal como éter, acetato de etilo, etanol, metanol, isopropanol o acetonitrilo, es preferido. Será evidente que el compuesto provisto aquí puede, pero no necesariamente, ser formulado como un solvato (v.gr., hidrato) o complejo no covalente. Además, las diversas formas de cristal y polimorfos están dentro del alcance de la presente invención. Aquí también se proveen profármacos de los compuestos de las fórmulas mencionadas. Un "profármaco" es un compuesto que puede no satisfacer completamente los requerimientos estructurales de los compuestos provistos aquí, pero es modificado in vivo, después de administrarse a un paciente, para producir un compuesto una fórmula provista aquí. Por ejemplo, un profármaco puede ser un derivado acilado de un compuesto como se provee aquí. Los profármacos incluyen compuestos en donde los grupos hidroxi, amino o sulfhidrilo son unidos a cualquier grupo que, cuando se administra a un sujeto mamífero, son digeridos para formar un grupo hidroxi, amino o sulfhidrilo libre, respectivamente. Ejemplos de profármacos incluyen, pero no se limitan a, derivados de acetato, formiato y benzoato de grupos alcohol y amina funcional es dentro de los compuestos provistos aquí. Los profármacos de los compuestos provistos aquí se pueden preparar modificando grupos funcionales presentes en los compuestos de tal manera que las modificaciones son digeridas in vivo para dar los compuestos progenitores. Como se usa aquí, el término "alquilo" se refiere a un hidrocarburo alifático de cadena recta o ramificada. Los grupos alquilo incluyen grupos que tienen de 1 a 8 átomos de carbono (alquilo de Ci-C8), de 1 a 6 átomos de carbono (alquilo de C Ce) y de 1 a 4 átomos de carbono (alquilo de C1-C4), tal como metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, ferf-butilo, pentilo, 2-pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, 2-hexilo, 3-hexilo y 3-metilpentilo. "alquilo de Co-Cn" se refiere a un solo enlace covalente (C0) o un grupo alquilo que tiene de 1 a n átomos de carbono; por ejemplo "alquilo de C0-C4" se refiere a un solo enlace covalente o un grupo alquilo de C C4. En algunos casos, un sustituyente de un grupo alquilo es específicamente indicado. Por ejemplo, "hidroxialquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido con por lo menos un sustituyente hidroxi. "Alquileno" se refiere a un grupo alquilo divalente, como se definió antes. Alquileno de C1-C2 es metileno o etileno; alquileno de C0-C4 es un solo enlace covalente o un grupo alquileno que tiene 1 , 2 ó 3 átomos de carbono; alquileno de Co-C2 es un solo enlace covalente o un grupo alquileno que tiene 1 ó 2 átomos de carbono. "Alquenilo" se refiere grupos alqueno de cadena recta o ramificada, que comprenden por lo menos un doble enlace carbono-carbono insaturado. Grupos alquenilo incluyen grupos alquenilo de C2-C8, alquenilo de C2-C6 y alquenilo de C2-C4, que tienen de 2 a 8, 2 a 6 ó 2 a 4 átomos de carbono, respectivamente, tal como ethenilo, allilo o isopropenilo. "Alquinilo" se refiere a grupos alquino de cadena recta o ramificada, que tienen uno o más enlaces carbono-carbono insaturados, por lo menos uno de los cuales es un triple enlace. Los grupos alquinilo incluyen grupos alquinilo de C2-C8, alquinilo de C2-C6 y alquinilo de C2-C4, que tienen de 2 a 8, 2 a 6 ó 2 a 4 átomos de carbono, respectivamente. Un "cicloalquilo" es un grupo que comprende uno o más anillos saturados y/o parcialmente saturados en los cuales todos los miembros de anillo son carbono, tal como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, adamantilo y variantes parcialmente saturadas de los anteriores, tales como ciclohexenilo. Los grupos cicloalquilo no comprenden un anillo aromático o un anillo heterocíclico. Ciertos grupos cicloalquilo son cicloalquilo de C3-C7, en los cuales el grupo cicloalquilo contiene un solo anillo que tiene de 3 a 7 miembros de anillo, todos los cuales son carbono. Un "(cicloalquilo de C3-C8)alquilo de C0-C4" es un cicloalquilo de C3-C8 enlazado mediante un solo enlace covalente o un grupo alquenilo de C1-C4.

Por "alcoxi," como se usa aquí, se entiende un grupo alquilo como se describió antes unido mediante un puente de oxígeno. Los grupos alcoxi incluyen grupos alcoxi de C1-C6 y alcoxi de CrC4, que tienen de 1 a 6 o de 1 a 4 átomos de carbono, respectivamente. Metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, n-butoxi, sec-butoxi, ter-butoxi, n-pentox¡, 2-pentoxi, 3-pentoxi, isopentoxi, neopentoxi, hexoxi, 2-hexoxi, 3-hexoxi y 3-metilpentoxi son grupos alcoxi representativos. De manera similar, "alqultio" se refiere a un grupo alquilo como se describió antes unido mediante un puente de azufre. "Eter alquílico" se refiere a un sustituyente de éter lineal o ramificado (es decir, un grupo alquilo que es sustituido con un grupo alcoxi). Los grupos éter alquílico incluyen grupos éter alquílico de C2-C8, éter alquílico de C2-C6 y éter alquílico de C2-C , que tienen 2 a 8, 6 ó 4 átomos de carbono, respectivamente. Un éter alquílico de C2 tiene la estructura -CH2-0-CH3. El término "alcanoiio" se refiere a un grupo acilo (v.gr., -(C=O)-alquilo), en el cual los átomos de carbono están en una disposición de alquilo lineal o ramificada y en donde la unión es a través del carbono del grupo ceto. Los grupos alcanoiio tienen el número indicado de átomos de carbono, con el carbono del grupo ceto siendo incluido en los átomos de carbono numerados. Por ejemplo, un grupo alcanoiio de C2 es un grupo acetilo que tiene la fórmula -(C=0)CH3; "alcanoiio de C " se refiere a -(C=0)H. "Grupos alcanoiio de C C6" contienen de 1 a 6 átomos de carbono. El término "alcanoiloxi", como se usa aquí, se refiere a un grupo alcanoilo unido a través de un enlazador de oxígeno (es decir, un grupo que tiene la estructura general -O-C(=0)-alquilo). Los grupos alcanoiloxi incluyen, por ejemplo, grupos alcanoiloxi de C1-C6, que tienen de uno a seis átomos de carbono. "Alcanoilamino", como se usa aquí, se refiere a un grupo alcanoilo unido a través de un enlazador de amino (es decir, un grupo que tiene la estructura general -N(R)-C(=0)-alquilo), en el cual R es hidrógeno o alquilo de ?-?-?ß). Los grupos alcanoilamino incluyen, por ejemplo, grupos alcanoilamino de C C6, que tienen de 1 a 6 átomos de carbono en la porción "alquilo" (es decir, el carbono del puente ceto no se incluye en el número de átomos de carbono indicado). "Alquilsulfonilo" se refiere a grupos de la fórmula -(S02)-alquilo, en los cuales el átomo de azufre es el punto de unión. Los grupos alquilsulfonilo incluyen grupos alquilsulfonilo de C1-C6 y alquilsulfonilo de C1-C4, que tienen de 1 a 6 o de 1 a 4 átomos de carbono, respectivamente. El metilsulfonilo es un grupo alquilsulfonilo representativo. "Alquilsulfonilamino" se refiere a un grupo alquilsulfonilo unido a través de un enlazador de amino (es decir, un grupo que tiene la estructura general -N(R)-(SO2)-alquilo), en el cüal R es hidrógeno o alquilo de ?-?-?ß). Los grupos alquilsulfonilamino incluyen, por ejemplo, grupos alquilsulfonilamino de C1-C6, que tienen de 1 a 6 átomos de carbono. "Aminosulfonilo" se refiere a grupos de la fórmula -(SO2)-NH2, en los cuales el átomo de azufre es el punto de unión. El término "mono- o di- (alquilo de Ci-C6)aminosulfonilo" se refiere a grupos que satisfacen la fórmula -(S02)-NR2, en la cual el átomo de azufre es el punto de unión, y en la cual un R es alquilo de C1-C6 y la otra R es hidrógeno o un alquilo de C1-C6 independientemente escogido. "Alquilamino" se refiere a una amina secundaria o terciaria que tiene la estructura general -NH-alquilo o -N(alquil)(alquilo), en donde cada alquilo se selecciona independientemente de grupos alquilo, cicloalquilo y (cicloalquil)alquilo. Dichos grupos incluyen, por ejemplo, grupos mono- y di-(alquilo de Ci-C6)amino, en los cuales cada alquilo de C-i-C6 puede ser el mismo o diferente. "Alquilaminoalquilo" se refiere a un grupo alquilamino enlazado mediante un grupo alquileno (es decir, un grupo que tiene la estructura general -alquileno-NH-alquilo o —alquileno— N(alquil)(alquilo)) en el cual cada alquilo se selecciona independientemente de grupos alquilo, cicloalquilo y (cicloalquil)alquilo. Los grupos alquilaminoalquilo incluyen, por ejemplo, mono-y di-(alquilo de C -C8)amino-alquilo de CrCe, mono- y di-(alquilo de C Csjamino-alquilo de C C6 y mono- y di-(alquilo de Ci-C8)amino-alquilo de C C4. El "mono- o di-(alquilo de Ci-CsJamino-alquilo de Co-C6" se refiere a un grupo mono- o di-(alquilo de Ci-Ce)amino enlazado mediante un solo enlace covalente o un grupo alquenilo de C1-C6. Los siguientes son grupos alquilaminoalquilo representativos: Será evidente que la definición de "alquilo" como se usa en los términos "alquilamino" y "alquilaminoalquilo" difiere de la definición de "alquilo" usada para todos los otros grupos que contienen alquilo, en la inclusión de grupos cicloalquilo y (cicloalquil)alquilo (v.gr., (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de El término "aminocarbonilo" se refiere a un grupo amida (es decir, -(C=0)NH2). El término "mono- o di-(alquilo de C C6)aminocarbonilo" se refiere a grupos de la fórmula -(C=O)-N(R)2, en los cuales el carbonilo es el punto de unión, un R es alquilo de C1-C6 y el otro R es hidrógeno o un alquilo de CrC6 independientemente escogido. El término "halógeno" se refiere a flúor, cloro, bromo o yodo. Un "halogenoalquilo" es un grupo alquilo que es sustituido con 1 o más halógenos independientemente escogidos (v.gr., los "grupos halogenoalquilo de C-i-Ce" tienen de 1 a 6 átomos de carbono). Ejemplos de grupos halogenoalquilo incluyen, pero no se limitan a, mono-, di- o tri-fluorometilo; mono-, di- o tri-clorometilo; mono-, di-, tri-, tetra- o penta-fluoroetilo; mono-, di-, tri-, tetra- o penta-cloroetilo; y 1 ,2,2,2-tetrafluoro-1-trifluorometil-etilo. Los grupos halogenoalquilo típicos son trifluorometilo y difluorometilo. El término "halogenoalcoxi" se refiere a un grupo halogenoalquilo como se definió antes que es enlazado mediante un puente de oxígeno. Un guión ("-") que no está entre dos letras o símbolos se usa para indicar un punto de unión para un sustituyente. Por ejemplo, -CONH2 es unido a través del átomo de carbono. Un"heteroarilo" es un grupo aromático en el cual por lo menos un anillo aromático comprende por lo menos un heteroátomo seleccionado de N, O y S. Los heteroarilos incluyen, por ejemplo, heteroarilos de 5 y 6 miembros tales como imidazol, furano, furazan, isotiazol, isoxazol, oxadiazol, oxazol, pirazina, pirazol, piridazina, piridina, pirimidina, tetrazol, tiazol y tiofeno. Un "sustituyente," como se usa aquí, se refiere a una porción molecular que es covalentemente unida a un átomo dentro de una molécula de interés. Por ejemplo, un sustituyente de anillo puede ser una porción tal como un grupo halógeno, grupo alquilo, grupo halogenoalquilo u otro grupo que es covalentemente unido a un átomo (preferiblemente un átomo de carbono o nitrógeno) que es un miembro de anillo. Los sustituyentes de grupos aromáticos son generalmente covalentemente unidos a un átomo de carbono de anillo. El término "substitución" se refiere a reemplazar un átomo de hidrógeno en una estructura molecular con un sustituyente, de tal manera que la valencia en el átomo designado no es excedida, y de tal manera que un compuesto químicamente estable fes decir, un compuesto que puede ser aislado, caracterizado y probado para actividad biológica) resulta de la sustitución. Los grupos que son "opcionalmente sustituidos" son no sustituidos o son sustituidos por otro distinto del hidrógeno en una o más posiciones disponibles, típicamente 1 , 2, 3, 4 ó 5 posiciones, por uno o más grupos adecuados (que pueden ser el mismo o diferente). Sustitución opcional es también indicada por la frase "sustituido con de 0 a X sustituyentes," en donde X es el número máximo de posibles sustituyentes. Ciertos grupos opcionalmente sustituidos son sustituidos con de 0 a 2, 3 ó 4 sustituyentes independientemente seleccionados (es decir, son no sustituidos o sustituidos con hasta el número máximo mencionado de sustituyentes). Otros grupos opcionalmente sustituidos son sustituidos con por lo menos un sustituyente (v.gr., sustituido con de 1 a 2, 3 ó 4 sustituyentes independientemente seleccionados). Los términos "VR1" y "receptor de capsaicina" se usan intercambiablemente aquí para referirse a un receptor de vainilloide de tipo . A menos que se especifique otra cosa, estos términos abarcan receptores de VR1 de rata y humanos (v.gr., números de acceso a GenBank AF327067, AJ277028 y NM_018727; secuencias de ciertos ADNc de R1 humano y las secuencias de aminoácidos codificadas se proveen en la patente de E.U.A. No. 6,482,611), así como homólogos de los mismos encontrados en otras especies. Un "modulador de VR1 ," también referido aquí como un "modulador," es un compuesto que modula la activación de VR1 y/o transducción de señal mediada por VR1. Los moduladores de VR1 específicamente provistos aquí son compuestos de la fórmula A, y sales farmacéuticamente aceptables, hidratos y ésteres de los mismos. Ciertos moduladores de VR1 preferidos no son vainilloides. Un modulador de VR1 puede ser un agonista o antagonista de VR1. Ciertos moduladores se unen a VR1 con una K¡ que es menor que 1 micromolar, preferiblemente menor que 500 nanomolar, 100 nanomolar, 10 nanomolar o 1 nanomolar. Una prueba representativa para determinar K¡ en VR1 se provee en el ejemplo 5, aquí. Un modulador se considera un "antagonista" si detectablemente inhibe la unión de ligando de vainilloide a VR1 y/o transducción de señal mediada por VR1 (usando, por ejemplo, la prueba representativa provista en el ejemplo 6); en general, dicho antagonista inhibe la activación de VR1 con un valor de Cl50 menor que 1 micromolar, preferiblemente menor que 500 nanomolar, y muy preferiblemente menor que 100 nanomolar, 10 nanomolar o 1 nanomolar dentro de la prueba provista en el ejemplo 6. Los antagonistas de VR1 incluyen antagonistas neutros y agonistas inversos. Un "agonista inverso" de VR1 es un compuesto que reduce la actividad de VR1 por debajo de su nivel de actividad basal en ausencia de ligando de vainilloide añadido. Los agonistas inversos de VR1 también pueden inhibir la actividad de ligando de vainilloide en VR1 y/o unión de ligando de vainilloide a VR1. La actividad basal de VR1 , así como la reducción en actividad de VR1 debido a la presencia de antagonista de VR1 , se puede determinar a partir de una prueba de calcio, tal como la prueba del ejemplo 6. Un "antagonista neutro" de VR1 es un compuesto que inhibe la actividad de ligando de vainilloide en VR1 , pero no cambia significativamente la actividad basal del receptor (es decir, dentro de una prueba de movilización de calcio como se describe en el ejemplo 6 realizado en ausencia de ligando de vainilloide, la actividad de VR1 es reducida por no más de 10%, preferiblemente por no más de 5%, y muy preferiblemente por no más de 2%; muy preferiblemente, no hay reducción detectable en actividad). Los antagonistas neutros de VR1 pueden inhibir la unión de ligando de vainilloide a VR1. Como se usa aquí un "agonista de receptor de capsaicina" o "agonista de VR1 " es un compuesto que eleva la actividad del receptor por arriba del nivel de actividad basal del receptor (es decir, incrementa la activación de VR1 y/o transducción de señal mediada por VR1). La actividad agonista de receptor de capsaicina se puede identificar usando la prueba representativa provista en el ejemplo 6. En general, dicho agonista tiene un valor de CE50 menor que 1 micromolar, preferiblemente menor que 500 nanomolar, y muy preferiblemente menor que 100 nanomolar o 10 nanomolar dentro de la prueba provista en el ejemplo 6. Un "vainilloide" es cualquier compuesto que comprende un anillo de fenilo con dos átomos de oxígeno unidos a átomos de carbono de anillo adyacentes (uno de dichos átomos de carbono está ubicado para con respecto al punto de unión de una tercera porción que está unida al anillo de fenilo). La capsaicina en un vainilloide representativo. Un "ligando de vainilloide" es un vainilloide que se une a VR1 con una K¡ (determinada como se describe aquí) que es no mayor que 10 µ?. Los agonistas de ligando de vainilloide incluyen capsaicina, olvanilo, N-araquidonoil-dopamina y resiniferatoxin (RTX). Los antagonistas de ligando de vainilloide incluyen capsazepina y yodo-resiniferatoxin. Una "cantidad terapéuticamente efectiva" (o dosis) es una cantidad que, al administrarse a un paciente, da por resultado un beneficio discernible del paciente (v.gr., provee alivio detectable de por lo menos una condición que está siendo tratada). Dicho alivio puede ser detectado usando cualquier criterio apropiado, incluyendo alivio de uno o más síntomas tales como dolor. Una cantidad terapéuticamente efectiva o dosis generalmente da por resultado una concentración de compuesto en un fluido corporal (tal como sangre, plasma, suero, CSF, fluido sinovial, linfa, fluido intersticial celular, lágrimas u orina) que es suficiente para alterar la unión de ligando de vainilloide a VR1 in vitro (usando la prueba provista en el ejemplo 5) y/o transducción de señal mediada por VR1 (usando una prueba provista en el ejemplo 6). Será evidente que el beneficio discernible del paciente puede ser evidente después de la administración de una sola dosis, o puede hacerse evidente después de la administración repetida de la dosis terapéuticamente efectiva de conformidad con un régimen predeterminado, dependiendo de la indicación para la cual se administra el compuesto. Por "estadísticamente significativo," como se usa aquí, se entienden resultados que varían del control al nivel de p<0.1 de significancia como se mide usando una prueba paramétrica estándar de significancia estadística tal como una prueba de T de Student.

Un "paciente" es cualquier individuo tratado con un compuesto provisto aquí. Los pacientes incluyen humanos, así como otros animales tales como animales de compañía (v.gr., perros y gatos) y ganado. Los pacientes pueden estar experimentando uno o más síntomas de una condición que responde a modulación de receptor de capsaicina (v.gr., dolor, exposición a ligando de vainilloide, comezón, incontinencia urinaria, vejiga sobrerreactiva, síntomas menopáusicos, trastornos respiratorios, tos y/o hipo), o puede estar libre de dicho síntoma(s) (es decir, el tratamiento puede ser profiláctico en un paciente considerado en riesgo de desarrollar dichos síntomas).

Análogos de 2-fenoxipirimidinona Como se señaló antes, la presente invención provee análogos de 2-fenoxipirimidinona de la fórmula A. Dentro de ciertos aspectos, los compuestos son moduladores de VR1 que se pueden usar en una variedad de contextos, incluyendo en el tratamiento de dolor (v.gr., dolor neuropático o mediado por nervios periféricos); exposición a capsaicina; exposición a ácido, calor, luz, gas lacrimógeno, contaminantes del aire (tales como, por ejemplo, jumo de tabaco), agentes infecciosos (incluyendo virus, bacterias y levadura), aspersión de pimienta o agentes relacionados; condiciones respiratorias tales como asma o enfermedad pulmonar obstructiva crónica; comezón; incontinencia urinaria o vejiga sobrerreactiva; síntomas menopáusicos; tos o hipo; y/u obesidad. Dichos compuestos también se pueden usar dentro de pruebas ¡n vitro (v.gr., pruebas para actividad de receptor), como sondas para la detección y localización de VR1 y como pruebas estándares en unión a ligando y transducción de señal mediada por VR1. Se ha encontrado, dentro del contexto de la presente invención, que los análogos de 2-fenoxipirimidinona provistos aquí presentan una actividad moduladora de VR1 inesperadamente alta debido, por lo menos en parte, a la porción fenoxi de la fórmula A y fórmula I. Como se señaló antes, representa un heteroarilo de 5 ó 6 miembros opcionalmente sustituido fusionado en el cual 1 , 2 ó 3 miembros de anillo son heteroátomos independientemente escogidos de O, N y S, y los miembros de anillo restantes son carbono. Dentro de ciertas modalidades, es sustituido con de 0 a 2 sustituyentes independientemente escogidos de alquilo de Ci-C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C2 y halogenoalquilo de CrC6. Dentro de modalidades adicionales, es sustituido con de 0 a 2 sustituyentes independientemente escogidos de alquilo de C1-C4, (cicloalquilo de C3-C5)alquilo de Co-C2 y halogenoalquilo de C1-C4.

Dentro de ciertas modalidades, es un heteroarilo de 5 miembros que es sustituido con de 0 a 2 sustituyentes independientemente escogidos de alquilo de C-i-C4> (cicloalquilo de C3-C5)alquilo de C0-C2 y halogenoalquilo de C-1-C4. En otras modalidades, heteroarilo de 5 miembros representado por cualquiera de las fórmulas en las cuales R'4 es hidrógeno, alquilo de C-i-C4, (cicloalquilo de C3-C5)alquilo de C0-C2, halogenoalquilo de CrC4, hidroxialquilo de C-1-C4, alcoxi de C1-C4, alcanoilamino de C-1-C4 o alquilsulfonilamino de C-1-C4. Representativos de dichos grupos incluyen, por ejemplo, en las cuales R2 es, por ejemplo, hidrógeno, ciano, arilo, heteroarilo, halógeno, alquilo de C1-C4, halogenoalquilo de C-i-C4 o cicloalquilo de C3-C5. Dentro de ciertas modalidades, Será evidente que la orientación de las porciones se pretende que sea retenida como se muestra (v.gr., si entonces el núcleo bicíclico Dentro de otras modalidades, es un heteroarilo de 6 miembros que es sustituido con de 0 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de hidroxi, alquilo de C-1-C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C2, halogenoalquilo de Ci-C6, hidroxialquiulo de CrC6 l alcoxi de C1-C6, mono-(alquilo de Ci-C6)am¡no, alcanoilamino de Ci -C6 o alquilsulfonilamino de C1-C6. Representativos de dichos grupos incluyen, por ejemplo, en donde R4 representa de 0 a 3, preferiblemente de 1 a 3, sustituyentes independientemente escogidos de hidroxi, alquilo de C-i-C4, (cicloalquilo de C3-C5)alquilo de Co-C2, halogenoalquilo de Ci-C4, hidroxialquilo de C C4, alcoxi de CrC4, mono-(alquilo de CrC4)amino, alcanoilamino de Ci-C4 o alquilsulfonilamino de d-C . La variable R-i , dentro de ciertas modalidades, representa de 0 a 3, preferiblemente de 1 a 3, sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, ciano, alquilo de C-i-C4 y halogenoalquilo de C C4. Por ejemplo, R representa exactamente un sustituyente (v.gr., en la posición para del anillo Ar) dentro de ciertos de esos compuestos. Dentro de otros de esos compuestos, por lo menos un sustituyente representado por R-i es un halógeno o CN; dicho sustituyente está ubicado en la posición para de una porción Ar de 6 miembros dentro de ciertos de esos compuestos. Será evidente que, dentro de la fórmula I, la posición para se refiere a la posición para al punto de unión de la porción Ar al núcleo de pirimidinona; es decir, la posición 4 del anillo de fenilo que resulta cuando X es CH, y la posición 6 del anillo de piridin-3-ilo que resulta cuando X es N. Dentro de ciertas modalidades, R3 representa de 1 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, ciano, alquilo de CrC4, halogenoalquilo de C1-C4 y alcoxi de C1-C4. En ciertas modalidades, los compuestos de la fórmula I además satisfacen una de las fórmulas ll-VII: Fórmula II Fórmula Fórmula IV Fórmula V Fórmula VI Fórmula VII en las cuales R2 es hidrógeno, alquilo de C1-C4, halogenoalquilo de C^C^ o cicloalquilo de C3-C5; R3 representa de 1 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, ciano, alquilo de C1 -C4, halogenoalquilo de C C4 y alcoxi de C1-C4; R'4 es hidrógeno, alquilo de C C4, (cicloalquilo de C3-C5)alquilo de C0-C2, halogenoalquilo de C1-C4, hidroxialquilo de C1-C4, alcoxi de C1-C4, alcanoilamino de CrC4 o alquilsulfonilamino de CrC4; y R5 es halógeno o CN. En ciertas modalidades de la fórmulas ll-VII, R'4 es H (es decir, dichos compuestos además satisfacen en las cuales las variables son como se describe para las fórmulas ll-VII. Dentro de modalidades adicionales, los compuestos de la fórmula I además satisfacen la fórmula VIII o IX: Fórmula VIII Fórmula IX en las cuales R3 representan de 1 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, ciano, alquilo de C1-C4, halogenoalquilo de Ci-C4 y alcoxi de CrC4; R representa de 0 a 2 sustituyentes independientemente escogidos de hidroxi, alquilo de C C , (cicloalquilo deC3-C5)alquilo de C0-C2, halogenoalquilo de C C4, hidroxialquilo de C1-C4, alcoxi de C1-C4, mono-(alquilo de CrC4)amino, alcanoilamino de CrC4 o alquilsulfonilamino de C-t-C4; y R5 es halógeno o CN. Análogos de 2-fenoxipirimidinona representativos e intermediarios provistos aquí incluyen, pero no se limitan a, aquellos específicamente descritos en los ejemplos 1-3. Será evidente que los compuestos específicos mencionados aquí son representativos únicamente, y no se pretende limitar el alcance de la presente invención. Además, como se señaló antes, todos los compuestos de la presente invención pueden estar presentes como un ácido o base libre, o como una sal farmacéuticamente aceptable. Además, otras formas tales como hidratos y profármacos de dichos compuestos son contempladas específicamente por la presente invención. Dentro de ciertos aspectos de la presente invención, los análogos de 2-fenoxipirimidinona provistos aquí detectablemente alteran (modulan) la actividad de VR1 , como se determina usando una prueba funcional de VR1 in vitro tal como una prueba de movilización de calcio. Como una determinación selectiva inicial para dicha actividad, se puede usar una prueba de unión a ligando de VR1. Las referencias que se hacen aquí a una "prueba de unión a ligando de VR1" se refieren a una prueba de unión de receptor in vitro estándar tal como la que se provee en el ejemplo 5, y una "prueba de movilización de calcio" (también referida aquí como una "prueba de transducción de señal") se puede realizar como se describe en el ejemplo 6. En resumen, para evaluar la unión a VR1 , se puede realizar una prueba de competencia en la cual una preparación de VR1 es incubada con un compuesto marcado (v.gr., 125l o 3H) que se une a VR1 (v.gr., un agonista de receptor de capsaicina tal como RTX) y compuesto de prueba no marcado. Dentro de las pruebas provistas aquí, el VR1 usado es preferiblemente VR1 de mamífero, muy preferiblemente VR1 humano o de rata. El receptor puede ser recombinantemente expresado o naturalmente expresado. La preparación de VR1 puede ser, por ejemplo, una preparación de membrana de células HEK293 o CHO que recombinantemente expresan VR1 humano. La incubación con un compuesto que detectablemente modula la unión de ligando de vainilloide a VR1 da por resultado una disminución o incremento en la cantidad de marcador unido a la preparación de VR1 , en relación con la cantidad de marcador unido en ausencia del compuesto. Esta disminución o incremento se puede usar para determinar la K¡ a VR1 como se describe aquí. En general, los compuestos que reducen la cantidad de marcador unido a la preparación de VR1 dentro de dicha prueba son preferidos. Ciertos moduladores de VR1 provistos aquí detectablemente modulan la actividad de VR1 a concentraciones nanomolares (es decir, submicromolares), a concentraciones subnanomolar, o a concentraciones por abajo de 100 picomolar, 20 picomolar, 10 picomolar o 5 picomolar. Como se señaló antes, los compuestos que son antagonistas de VR1 son preferidos dentro de ciertas modalidades. Los valores de CI5o para dichos compuestos se pueden determinar usando una prueba de movilización de calcio mediada por VR1 in vitro estándar, como se provee en el ejemplo 6.

En resumen, células que expresan receptor de capsaicina se ponen en contacto con un compuesto de interés y con un indicador de concentración de calcio intracelular (v.gr., un colorante sensible al calcio permeable a membranas tal como Fluo-3 o Fura-2 (Molecular Probes, Eugene, OR), cada uno de los cuales produce una señal fluorescente cuando se une a Ca++). Dicho contacto preferiblemente es llevado a cabo por una o más incubaciones de las células en un medio regulador de pH o de cultivo que comprende cualquiera o ambos del compuesto y el indicador en solución. El contacto se mantiene durante una cantidad de tiempo suficiente para permitir que el colorante entre a las células (v.gr., 1-2 horas). Las células son lavadas o filtradas para remover el exceso de colorante y después se ponen en contacto con un receptor de agonista de vainilloide (v.gr., capsaicina, RTX u olvanil), típicamente a una concentración igual a la concentración de CE50, y se mide una respuesta a la fluorescencia. Cuando las células de contacto con agonista se ponen en contacto con un compuesto que es un antagonista de VR1 , la respuesta a la fluorescencia es generalmente reducida por lo menos por 20%, preferiblemente por lo menos 50% y muy preferiblemente por lo menos 80%, en comparación con células que se ponen en contacto con el agonista en ausencia de compuesto de prueba. La CI50 para antagonistas de VR1 provistos aquí es preferiblemente menor que 1 micromolar, menor que 100 nM, menor que 10 nM o menor que 1 nM. En ciertas modalidades, los antagonistas de VR1 provistos aquí no presentan actividad agonista detectable en una prueba in vitro de agonismo de receptor de capsaicina a una concentración de compuesto igual a la CI5o. Ciertos de los antagonistas no presentan actividad agonista detectable de una prueba in vitro de agonismo de receptor de capsaicina a una concentración de compuesto que es 100 veces mayor que la Cl50. En otras modalidades, los compuestos que son agonistas de receptor de capsaicina son preferidos. La actividad agonista de receptor de capsaicina generalmente se puede determinar como se describe en el ejemplo 6. Cuando las células se ponen en contacto con 1 micromolar de un compuesto que es un agonista de VR1 , la respuesta a la fluorescencia es generalmente incrementada por una cantidad que es por lo menos 30% del incremento observado cuando las células se ponen en contacto con 100 nM capsaicina. La CE50 para agonistas de VR1 provistos aquí es preferiblemente menor que 1 micromolar, menor que 100 nM o menor que 10 nM. La actividad moduladora de VR1 también, o alternativamente, se puede evaluar usando una prueba de ganglión de raíz dorsal cultivado como se provee en el ejemplo 7 y/o una prueba de alivio de dolor in vivo como se provee en el ejemplo 8. Los moduladores de VR1 provistos aquí preferiblemente tienen un efecto específico estadísticamente significativo sobre la actividad de VR1 dentro de una o más pruebas funcionales provistas aquí. Dentro de ciertas modalidades, los moduladores de VR1 provistos aquí no modulan sustancialmente la unión de ligando a otros receptores de superficie celular, tales como el receptor de EGF tirosina cinasa o el receptor de acetilcolina nicotínico. En otras palabras, dichos moduladores no inhiben sustancialmente la actividad de un receptor de superficie celular tal como el receptor de factor de crecimiento epidérmico humano (EGF) tirosina cinasa o el receptor de acetilcolina nicotínico (v.gr., la CI5o o CI4o en dicho receptor es preferiblemente mayor que 1 micromolar, y muy preferiblemente mayor que 10 micromolar). Preferiblemente, un modulador no inhibe detectablemente la actividad de receptor de EGF o la actividad de receptor de acetilcolina nicotínico a una concentración de 0.5 micromolar, 1 micromolar o muy preferiblemente 10 micromolar. Las pruebas para determinar la actividad de receptor de superficie celular están comercialmente disponibles, e incluyen los equipos de prueba de tirosina cinasa disponibles de Panvera (Madison, Wl). En ciertas modalidades, los moduladores de VR1 preferidos son no sedantes. En otras palabras, una dosis de modulador de VR1 que es dos veces la dosis mínima suficiente para proveer analgesia en un modelo animal para determinar alivio de dolor (tal como un modelo provisto en el ejemplo 8, aquí) causa sólo sedación transitoria (es decir, que dura no más de ½ del tiempo que dura el alivio del dolor) o preferiblemente sedación no estadísticamente significativa en una prueba de sedación en modelo animal (usando el método descrito por Fitzgerald et al. (1988) Toxicology 49(2-3):433-9). Preferiblemente, una dosis que es cinco veces la dosis mínima suficiente para proveer analgesia no produce sedación estadísticamente significativa. Muy preferiblemente, un modulador de VR1 provisto aquí no produce sedación a dosis intravenosas menores que 25 mg/kg (preferiblemente menores que 10 mg/kg) o a dosis orales menores que 140 mg/kg (preferiblemente menores que 50 mg/kg, muy preferiblemente menores que 30 mg/kg). Si se desea, los compuestos provistos aquí pueden ser evaluados para ciertas propiedades farmacológicas incluyendo, pero sin limitarse a, biodisponibilidad oral (los compuestos preferidos están oralmente biodisponibles a un grado que permite que se obtengan concentraciones terapéuticamente efectivas del compuesto a dosis orales menores que 140 mg/kg, preferiblemente menores que 50 mg/kg, muy preferiblemente menores que 30 mg/kg, muy preferiblemente aún menores que 10 mg/kg, muy preferiblemente todavía menores que 1 mg/kg y muy preferiblemente aún menores que 0.1 mg/kg), toxicidad (un compuesto preferido es no tóxico cuando una cantidad terapéuticamente efectiva se administra a un sujeto), efectos colaterales (un compuesto preferido produce efectos colaterales comparables con placebo cuando una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto se administra a un sujeto), unión de proteína del suero y vida media in vitro e in vivo (un compuesto preferido presenta una vida media in vivo que permite dosificación de cuatro veces al día, preferiblemente dosificación de tres veces al día, muy preferiblemente dosificación de dos veces al día, y muy preferiblemente dosificación de una vez al día). Además, la penetración diferencial de la barrera hematocerebral puede ser deseable para moduladores de VR1 usados para tratar dolor por modulación de actividad de VR1 del SNC de tal manera que la dosis diaria total como se describió antes provee dicha modulación a un grado terapéuticamente efectivo, mientras que los niveles en el cerebro bajo de moduladores de VR1 usados para tratar dolor mediado por nervios periféricos pueden ser preferida (es decir, dichas dosis no proveen niveles en el cerebro (v.gr., CSF) del compuesto suficiente para modular significativamente la actividad de VR1 ). Las pruebas de rutina que son bien conocidas en la técnica se pueden usar para acceder a estas propiedades, e identificar compuestos superiores para un uso particular. Por ejemplo, las pruebas usadas para predecir biodisponibilidad incluyen transporte a través de monocapas de células intestinales humanas, incluyendo monocapas de células Caco-2. La penetración de la barrera hematocerebral de un compuesto en humanos se puede predecir a partir de los niveles en el cerebro del compuesto en animales de laboratorio a los que se da el compuesto (v.gr., por vía intravenosa). La unión a proteina del suero se puede predecir a partir de pruebas de unión a albúmina. La vida media del compuesto es inversamente proporcional a la frecuencia de dosis de un compuesto. Las vidas medias in vitro de los compuestos se puede predecir a partir de pruebas de vida media microsomal como se describe, por ejemplo, dentro del ejemplo 7 de la publicación de solicitud de patente de E.U.A. número 2005/0070547. Como se señaló antes, los compuestos preferidos provistos aquí son no tóxicos. En general, el término "no tóxico" se entenderá en un sentido relativo y se refiere a cualquier sustancia que ha sido aprobada por la United States Food y Drug Administration (Administración de Alimentos y Fármacos de los Estados Unidos; "FDA") para la administración a mamíferos (preferiblemente humanos) o, para cumplir con los criterios establecidos, es susceptible de ser aprobado por la FDA para la administración a mamíferos (preferiblemente humanos). Además, un compuesto no tóxico altamente preferido generalmente satisface uno o más de los siguientes criterios: (1) no inhibe sustancialmente la producción de ATP celular; (2) no prolonga significativamente los intervalos de QT del corazón; (3) no causa agrandamiento sustancial del hígado, o (4) no causa liberación sustancial de enzimas del hígado. Como se usa aquí, un compuesto que no inhibe sustancialmente la producción de ATP celular es un compuesto que satisface los criterios expuestos en el ejemplo 8 de la publicación de solicitud de patente de E.U.A. número 2005/0070547. En otras palabras, las células tratadas como se describe en la misma con 100 µ? de dicho un compuesto presentan niveles de ATP que son por lo menos 50% de los niveles de ATP detectados en células no tratadas. En modalidades más altamente preferidas, dichas células presentan niveles de ATP que son por lo menos 80% de los niveles de ATP detectados en células no tratadas. Un compuesto que no prolonga significativamente intervalos de QT del corazón es un compuesto que no da por resultado una prolongación estadísticamente significativa de intervalos de QT del corazón (como se determina por electrocardiografía) en cobayos, minicerdos o perros bajo administración de una dosis que da una concentración en el suero igual a la CE50 o CI50 para el compuesto. En ciertas modalidades preferidas, una dosis de 0.01 , 0.05, 0.1 , 0.5, 1 , 5, 10, 40 ó 50 mg/kg administrada parenteralmente u oralmente no da por resultado una prolongación estadísticamente significativa de intervalos de QT del corazón. Un compuesto no causa agrandamiento sustancial del hígado si el tratamiento diario de roedores de laboratorio (v.gr., ratones o ratas) durante 5-10 días con una dosis que da una concentración en el suero igual a la CE50 o CI50 para el compuesto da por resultado un incremento en la relación de peso del hígado a cuerpo que es no mayor que 100% sobre los controles. En modalidades más altamente preferidas, dichas dosis no causan agrandamiento del hígado de más de 75% o 50% sobre controles acoplados. Si se usan mamíferos que no son roedores (v.gr., perros), dichas dosis no deben dar por resultado un incremento de relación de hígado al cuerpo mayor que 50%, preferiblemente no mayor que 25%, y muy preferiblemente no mayor que 10% sobre controles no tratados acoplados. Las dosis preferidas dentro de dichas pruebas incluyen 0.01 , 0.05. 0.1 , 0.5, 1 , 5, 10, 40 o 50 mg/kg administradas parenteralmente u oralmente. De manera similar, un compuesto no promueve liberación sustancial de enzimas del hígado si la administración de dos veces la dosis mínima que da una concentración en el suero igual a la CE50 o CI50 en VR1 para el compuesto no eleva los niveles en el suero de ALT, LDH o AST en animales de laboratorio (v.gr., roedores) más de 100% sobre controles tratados con simulador acoplados. En modalidades más altamente preferidas, dichas dosis no elevan los niveles en el suero en más de 75% o 50% sobre controles acoplados. Alternativamente, un compuesto no promueve liberación sustancial de enzimas del hígado si, en una prueba de hepatocitos in vitro, las concentraciones (en medio de cultivo u otras de las soluciones que están en contacto e incubadas con hepatocitos in vitro) que son iguales a la CE5o o CI5o para el compuesto no causan liberación detectable de alguna de las enzimas del hígado en el medio de cultivo por arriba de los niveles de línea basal vistos en el medio a partir de las células de control tratadas con simulador acopladas. En modalidades más altamente preferidas, no hay liberación detectable de alguna de las enzimas del hígado en el medio de cultivo por arriba de los niveles de línea basal cuando dichas concentraciones de compuesto son cinco veces, y preferiblemente diez veces la CE50 o CI5o para el compuesto. En otras modalidades, ciertos compuestos preferidos no inhiben o inducen actividades de enzima de citocromo microsomal P450, tales como actividad de CYP1A2, actividad de CYP2A6, actividad de CYP2C9, actividad de CYP2C19, actividad de CYP2D6, actividad de CYP2E1 o actividad de CYP3A4 a una concentración igual a la CE50 o Cl50 en VR1 para el compuesto. Ciertos compuestos preferidos no son clastogénicos (v.gr., como se determina usando una prueba de micronúcleo de células precursoras de eritrocitos de ratón, una prueba de micronúcleo de Ames, una prueba de micronúcleo espiral o similar) a una concentración igual a la CE50 o Cl50 para el compuesto. En otras modalidades, ciertos compuestos preferidos no inducen intercambio de cromátidas hermanas (v.gr., en células de ovario de hámster chino) a dichas concentraciones. Para propósitos de detección, como se describe con más detalle más adelante, los moduladores de VR1 provistos aquí pueden ser isotópicamente marcados o radiomarcados. Por ejemplo, los compuestos pueden tener uno o más átomos reemplazados por un átomo del mismo elemento que tiene una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o numero de masa diferente de la masa atómica o número de masa diferente usualmente encontrado en la naturaleza. Ejemplos de isótopos que pueden estar presentes en los compuestos provistos aquí incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tales como 2H, 3H, 1C, 13C, 14C, 15N, 180, 70, 31P, 32P, 35S, 8F y 36CI. Además, la sustitución con isótopos pesados tales como deuterio (es decir, 2H) puede dar ciertas ventajas terapéuticas que resultan de mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, vida media in vivo incrementada o requerimiento de dosis reducidos y, por lo tanto, pueden ser preferidos en algunas circunstancias.

Preparación de análogos de 2-fenoxipirimidinona Los de análogos de 2-fenoxipirimidinona generalmente se pueden preparar usando métodos de síntesis estándares. Los materiales de partida están comercialmente disponibles de proveedores tales como Sigma- Aldrich Corp. (St. Louis, MO), o se pueden sintetizar a partir de precursores comercialmente disponibles usando protocolos establecidos. A manera de ejemplo, una vía de síntesis similar a la mostrada en cualquiera de los siguientes esquemas se puede usar, junto con métodos de síntesis conocidos en la técnica de química orgánica sintética. Cada variable en los siguientes esquemas se refiere a cualquier grupo consistente con la descripción de los compuestos provistos aquí. Ciertas abreviaturas usadas en los siguientes esquemas y en otra parte de la presente incluyen: CDCI3 cloroformo deuterado d desplazamiento químico DCM diclorometano DMAP 4-dimetilaminopirídina DMF dimetilformamida DMSO sulfóxido de dimetilo DPPF 1 ,1 '-bis(difenilfosf ino)ferroceno Et etilo EtOAc acetato de etilo EtOH etanol hr hora(s) 1H RMN resonancia magnética nuclear de protones CLAP cromatografía e líquidos de alta presión Hz hertz KO'Bu fer-butóxido de potasio min minuto(s) EM espectrometría de masa (M+1) masa + 1 Pd2(dba)3 tris(dibencilidineacetona)dipaladio(0) RT temperatura ambiente TFA ácido trifluoroacético ESQUEMA 1 50°C ESQUEMA 2 = BroCl ESQUEMA 3 1) Piridina,45°C 2) NaOH 1.0N ac.

H3CO-O-I&-O0CH, COOEt 90°C + Ar-NCS benceno, reflujo H, 3) HC1 ESQUEMA 4 ESQUEMA 5 ESQUEMA 6 l ) Piridina, 45°C En ciertas modalidades, un compuesto provisto aquí puede contener uno o más átomos de carbono asimétricos, de tal manera que el compuesto puede existir en diferentes formas estereoisoméricas. Esas formas pueden ser, por ejemplo, racematos o formas ópticamente activas. Como se señaló antes, todos los estereoisómeros son abarcados por la presente invención. Sin embargo, puede ser deseable obtener enantiómeros individuales (es decir, formas ópticamente activas). Los métodos estándares para preparar enantiómeros individuales incluyen síntesis asimétrica y resolución de los racematos. La resolución de los racematos se puede lograr, por ejemplo, por métodos convencionales tales como cristalización en presencia de un agente de resolución, o cromatografía usando por ejemplo una columna de CLAP quiral. Los compuestos puede ser radiomarcados llevando a cabo su síntesis mediante el uso de precursores que comprenden por lo menos un átomo que es un radioisótopo. Cada radioisótopo es preferiblemente carbono (v.gr., 14C), hidrógeno (v.gr., 3H), azufre (v.gr., 35S), o yodo (v.gr., 125l). Los compuestos marcados con tritio también se pueden preparar catalíticamente mediante intercambio catalizado por platino en ácido acético tritiado, intercambio catalizado con ácido en ácido trifluoroacético tritiado o intercambio catalizado heterogéneo con tritio gaseoso usando el compuesto como sustrato. Además, ciertos precursores pueden ser sometidos a intercambio de tritio-halógeno con tritio gaseoso, reducción de tritio gaseoso de enlaces insaturados, o reducción usando borotrituro de sodio, según sea apropiado. La preparación de compuestos radiomarcados pueden ser realizada convenientemente por un proveedor de radioisótopos especializado en síntesis personalizada de compuestos de sonda radiomarcados.

Composiciones farmacéuticas La presente invención también provee composiciones farmacéuticas que comprenden uno o más compuestos provistos que, junto con por lo menos un vehículo o excipiente fisiológicamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas pueden comprender, por ejemplo, uno o más de agua, reguladores de pH (v.gr., solución salina regulada en su pH neutra o solución salina regulada en su pH con fosfato) etanol, aceite mineral, aceite vegetal, sulfóxido de dimetilo, carbohidratos (v.gr., glucosa, mañosa, sacarosa o dextranos), manitol, proteínas, adyuvantes, polipéptidos o aminoácidos tales como glicina, antioxidantes, agentes quelatadores tales como EDTA o glutatión y/o conservadores. Además, otros ingredientes activos pueden (pero no necesariamente) ser incluidos en las composiciones farmacéuticas provistas aquí. Las composiciones farmacéuticas se pueden formular para cualquier manera apropiada de administración, incluyendo, por ejemplo, administración tópica, oral, nasal, rectal o parenteral. El término parenteral como se usa aquí incluye inyección subcutánea, intradérmica, intravascular (v.gr., intravenosa), intramuscular; espinal, intracraneal, intratecal e intraperitoneal, así como cualquier técnica de inyección o infusión similar. En ciertas modalidades, las composiciones adecuadas para uso oral son preferidas. Dichas composiciones incluyen, por ejemplo, tabletas, trociscos, pastillas, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsión, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elíxires. Dentro de otras modalidades adicionales, las composiciones farmacéuticas se pueden formular como un liofilizado. La formulación para administración tópica puede ser preferida para ciertas condiciones (v.gr., en el tratamiento de condiciones de la piel tales como quemaduras o comezón). La formulación para administración directa en la vejiga (administración intravesicular) puede ser preferida para el tratamiento de incontinencia urinaria y vejiga sobrerreactiva. Las composiciones destinadas para uso oral pueden comprender además uno o más componentes tales como agentes edulcorantes, agentes saborizantes, agentes colorantes y/o agentes conservadores a fin de proveer preparaciones atractivas y palatables. Las tabletas contienen el ingrediente activo en mezcla con excipientes fisiológicamente aceptables que son adecuados para la fabricación de tabletas. Dichos excipientes incluyen, por ejemplo, diluyentes inertes (v.gr., carbonato de calcio, carbonato de sodio, lactosa, fosfato de calcio o fosfato de sodio), agentes granuladores y desintegradores (v.gr., almidón de maíz o ácido algínico), agentes aglutinantes (v.gr., almidón, gelatina o acacia) y agentes lubricantes (v.gr., estearato de magnesio, ácido esteárico o talco). Las tabletas se pueden formar usando técnicas estándares, incluyendo granulación es seco, compresión directa y granulación en húmedo. Las tabletas pueden ser no revestidas o pueden ser revestidas por técnicas conocidas. Las formulaciones para uso oral también se pueden presentar como cápsulas de gelatina dura en donde el ingrediente activo es mezclado con un diluyente sólido inerte (v.gr., carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolina), o como cápsulas de gelatina blanda en donde el ingrediente activo es mezclado con agua o un medio oleoso (v.gr., aceite de cacahuate, parafina liquida o aceite de oliva). Las suspensiones acuosas contienen el material(es) activo en mezcla con excipientes adecuados, tales como agentes de suspensión (v.gr., carboximetilcelulosa de sodio, metilcelulosa, hidropropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto y goma de acacia); y agentes dispersantes o humectantes (v.gr., fosfátidos que ocurren naturalmente tales como lecitina, productos de condensación de óxido de alquileno con ácidos grasos tales como estearato de polioxietileno, productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga tales como heptadecaetilenooxicetanol, productos de condensación de óxido de etileno con esteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol tal como monooleato de polioxietilensorbitol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácido grasos y anhídridos de hexitol tales como monooleato de polietilensorbitán). Las suspensiones acuosas también pueden comprender uno o más conservadores tales como p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes saborizantes y/o uno o más agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina. Las suspensiones oleosas se pueden formular suspendiendo el ingrediente(s) activo en un aceite vegetal (v.gr., aceite de araquis, aceite de oliva, aceite de ajonjolí o aceite de coco) o en un aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante tal como cera de abeja, parafina dura o alcohol cetílico. Los agentes edulcorantes tales como aquellos expuestos anteriormente, y/o agentes saborizantes se pueden añadir para proveer preparaciones orales palatables. Dichas suspensiones se pueden conservar mediante la adición de un antioxidante tal como ácido ascórbico. Los polvos y gránulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de agua proveen el ingrediente activo en mezcla con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión y uno o más conservadores. Loa agentes dispersantes o humectantes adecuados y agentes de suspensión son ilustrados por aquellos ya mencionados anteriormente. Excipientes adicionales tales como agentes edulcorantes, saborizantes y colorantes, también pueden estar presentes. Las composiciones farmacéuticas también se pueden formular como emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un agente vegetal (v.gr., aceite de oliva o aceite de araquis), un aceite mineral (v.gr., parafina líquida) o una mezcla de los mismos. Los agentes emulsionantes adecuados incluyen gomas que ocurren naturalmente (v.gr., goma de acacia o goma tragacanto), fosfátidos que ocurren naturalmente (v.gr., lecitina de soya y ésteres o ésteres parciales derivados de ácido grasos y hexitol), anhídridos (v.gr., monooleato de sorbitán) y productos de condensación de ésteres parciales derivados de ácidos grasos y hexitol con óxido de etileno (v.gr., monooleato de polioxietilensorbitán). Una emulsión también puede coprender uno o más agentes edulcorantes y/o saborizantes. Los jarabes y elíxires se pueden formular con agentes edulcorantes tales como glicerol, propilenglicol, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones también pueden comprender uno o más demulcentes, conservadores, agentes saborizantes y/o agentes colorantes. Las formulaciones para administración tópica típicamente comprenden un vehículo tópico combinado con un agente(s) activo, con o sin componentes opcionales adicionales. Los vehículos tópicos adecuados y componentes adicionales son bien conocidos en la técnica y será evidente que la elección de un vehículo dependerá de la forma física particular y modo de suministro. Los vehículos tópicos incluyen agua; solventes orgánicos tales como alcoholes (v.gr., etanol o alcohol isopropílico) o glicerina; glicoles (v.gr., butileno, isopreno o propilenglicol); alcoholes alifáticos (v.gr., lanolina); mezclas de agua y solventes orgánicos y mezclas de solventes orgánicos tales como alcohol y glicerina; materiales a base de lípidos tales como ácidos grasos, acilgliceroles (incluyendo aceites, tales como aceite mineral, y grasas de origen natural o sintético), fosfoglicéridos, esfingolípidos y ceras; materiales a base de proteína tales como colágeno y gelatina; materiales a base de silicón (tanto no volátiles como volátiles); y materiales a base de hidrocarburo tales como microesponjas y matrices poliméricas. Una composición además puede incluir uno o más componentes adaptados para mejorar la estabilidad o efectividad de la formulación aplicada, tal como agentes estabilizadores, agentes de suspensión, agentes emulsionantes, ajustadores de viscosidad, agentes gelificantes, conservadores, antioxidantes, ¡ncrementadores de penetración de la piel, humectantes y materiales de liberación sostenida. Ejemplos de dichos componentes se describen en Martindale-The Extra Pharmacopoeia (Pharmaceutical Press, London 1993) y Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21 a ed., Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (2005). Las formulaciones pueden comprender microcápsulas tales como hidroximetilcelulosa o microcápsulas de gelatina, liposomas, microesferas de albúmina, microemulsiones, nanopartículas o nanocápsulas.

Una formulación tópica se puede preparar en cualquiera de una variedad de formas físicas incluyendo, por ejemplo, sólidos, pastas, cremas, espumas, lociones, geles polvos, líquidos acuosos y emulsiones. La apariencia física y viscosidad de dichas formas farmacéuticamente aceptables puede ser gobernada por la presencia y cantidad de emulsionante(s) y ajustador(es) de viscosidad presentes en la formulación. Los sólidos son generalmente firmes y no vertibles y comúnmente se formulan como barras o cilindros, o en forma de partículas; los sólidos pueden ser opacos o transparentes, y opcionalmente puede contener solventes, emulsionantes, humectantes, emolientes, fragancias, tintes/colorantes, conservadores y oros ingredientes activos que incrementan o mejoran la eficacia del producto final. Las cremas y lociones a menudo son similares unas a otras, difiriendo principalmente en su viscosidad; tanto las lociones como cremas pueden ser opacas, translúcidas o claras y a menudo contienen emulsionantes, solventes y agentes ajustadores de viscosidad, así como humectantes, emolientes, fragancias, tintes/colorantes, conservadores y otros ingredientes activos que incrementan o mejoran la eficacia del producto final. Los geles se pueden preparar con un intervalo de viscosidades, de viscosidad espesa o alta a viscosidad delgada o baja. Estas formulaciones, igual que las de las lociones y cremas, también pueden contener solventes, emulsionantes, humectantes, emolientes, fragancias, tintes/colorantes, conservadores y otros ingredientes activos que incrementan o mejoran la eficacia del producto final. Los líquidos son más delgados que las cremas, lociones o geles y a menudo no contienen emulsionantes. Los productos tópicos líquidos a menudo contienen solventes, emulsionantes, humectantes, emolientes, fragancias, tintes/colorantes, conservadores y otros ingredientes activos que incrementan o mejoran la eficacia del producto final. Los emulsionantes adecuados para usarse en formulaciones tópicas incluyen, pero no se limitan a, emulsionantes iónicos, alcohol cetearílico, emulsionantes no iónicos como éter oleílico de polioxietileno, estearato de PEG-40, ceteareth-12, ceteareth-20, ceteareth-30, alcohol cetearílico, estearato de PEG-100 y estearato de glicerilo. Los agentes ajustadores de viscosidad adecuados incluyen, pero no se limitan a coloides protectores y gomas no iónicas tal como hidroxietilcelulosa, goma de xantano, silicato de magnesio-aluminio, sílice, cera microcristalina, cera de abeja, parafina y palmitato de cetilo. Una composición de gel se puede formar mediante la adición de un agente gel ficante tal como quitosán, metilcelulosa, etilcelulosa, alcohol polivinílico, policuaternios, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carbómero o glicirrizinato amoniado. Los agentes tensoactivos adecuados incluyen pero no se limitan a agentes tensoactivos no iónicos, anfotéricos, iónicos y amónicos. Por ejemplo, uno o más de copoliol de dimeticona, polisorbato 20, polisorbato 40, polisorbato 60, polisorbato 80, lauramida DEA, cocamida DEA, y cocamida MEA, oleilbetaína, cocamidopropilfosfatidil PG-cloruro de dimonio, y laurelsulfato de amonio se pueden usar entro de las formulaciones tópicas. Los conservadores adecuados incluyen pero no se limitan a antimicrobianos tales como metilparabeno, propilparabeno, ácido sórbico, ácido benzoico, y formaldehído, así como estabilizadores físicos y antioxidantes tales como vitamina E, ascorbato de sodio/ácido ascórbico y galato de propilo. Los humectantes adecuados incluyen, pero no se limitan a ácido láctico y otros hidroxiácidos y sus sales, glicerina, propilengiicol, y butilenglicol. Emolientes adecuados incluyen alcohol de lanolina, lanolina, derivados de lanolina, colesterol, petrolato, neopentanoato de isoestearilo y aceites minerales. Las fragancias y colores adecuados incluyen pero no se limitan a rojo de FD&C No. 40 y amarillo de FD&C No. 5. Otros ingredientes adicionales que se pueden incluir en una formulación tópica incluyen pero no se limitan a abrasivos, absorbentes, agentes antiformadores de torta, agentes antiespumantes, agentes antiestáticos, astringentes (v.gr., hamamelis, alcohol y extractos de hierbas tales como extracto de camomila), aglutinantes/excipientes, agentes reguladores de pH, agentes quelatadores, agentes formadores de película, agentes acondicionadores, propelentes, agentes opacadores, ajustadores de pH y protectores. Un ejemplo de un vehículo tópico adecuado para formulación de un gel es: hidroxipropilcelulosa (2.1%); 70/30 de alcohol isopropílico/agua (90.9%); propilengiicol (5.1%); y Polisorbato 80 (1.9%). Un ejemplo de un vehículo tópico adecuado para formulación como una espuma es: alcohol cetílico (1.1 %); alcohol estearílico (0.5%; Quaternium 52 (1.0%); propilengiicol (2.0%); etanol 95 PGF3 (61.05%); agua desionizada (30.05%); propelente de hidrocarburo P75 (4.30%). Todos los porcentajes son en peso.

Modos típicos de suministrar composiciones tópicas incluyen la aplicación usando los dedos, aplicación usando un aplicador físico tal como un paño, papel tisú, hisopos, palillo o cepillo; aspersión (incluyendo niebla, aerosol o aspersión de espuma); aplicación por goteo; salpicadura; remojo; y enjuague. Una composición farmacéutica se puede preparar como una suspensión acuosa u oleaginosa inyectable. El compuesto(s) provisto aquí, dependiendo del vehículo y concentración usado, puede ser suspendido y disuelto en el vehículo. Dicha composición se puede formular de conformidad con una técnica conocida usando agentes dispersantes, humectantes y/o agentes de suspensión adecuados tales como aquellos mencionado anteriormente. Entre los vehículos y solventes aceptables que se pueden utilizar están agua, ,3-butanodiol, solución de Ringer y solución isotónica de cloruro de sodio. Además, aceites fijados estériles se pueden utilizar como Un saludo, o medio de suspensión. Para este propósito se puede utilizar cualquier aceite fijado blando, incluyendo mono- o diglicéridos sintéticos. Además, ácidos grasos tales como ácido oleico encuentran uso en la preparación de composiciones inyectables, y adyuvantes tales como anestésicos locales, conservadores y/o agentes reguladores de pH se pueden disolver en el vehículo. Las composiciones farmacéuticas también se pueden formular como supositorios (v.gr., para administración rectal). Dichas composiciones se pueden preparar mezclando el fármaco con un excipiente no irritante adecuado que es sólido a temperaturas ordinarias pero líquido a la temperatura rectal y por lo tanto se derretirán en el recto para liberar el fármaco. Los excipientes adecuados incluyen, por ejemplo, manteca de cacao y polietilenglicoles. Composiciones para inhalación típicamente se pueden proveer en forma de una solución, suspensión o emulsión que se puede administrar como un polvo seco o en forma de un aerosol usando un propelente convencional (v.gr., diclorodifluorometano o triclorofluorometano). Las composiciones farmacéuticas se pueden formular para liberación a una velocidad predeterminada. Se puede lograr liberación instantánea, por ejemplo, mediante administración sublingual (es decir, administración por la boca de tal manera que el ingrediente(s) activo es rápidamente absorbido por los vasos sanguíneos debajo de la lengua en vez el tracto digestivo). Las formulaciones de liberación controlada (es decir, formulaciones tales como una cápsula, tableta o tableta revestida que hacen lenta y/o retardan la liberación del ingrediente(s) activo después de la administración) se pueden administrar, por ejemplo, mediante implantación oral, rectal o subcutánea, o mediante implantación en un sitio objetivo. En general, una formulación de liberación controlada comprende una matriz y/o revestimiento que retarda la desintegración y absorción en el tracto gastrointestinal (o sitio de implantación) y por lo tanto provee una acción retardada o una acción sostenida durante un periodo más largo. Un tipo de formulación de liberación controlada es una formulación de liberación sostenida, en la cual por lo menos un ingrediente activo es continuamente liberado durante un periodo a una velocidad constante. Preferiblemente, el agente terapéutico es liberado a una velocidad tal que las concentraciones en la sangre (v.gr., plasma) son mantenidas dentro del intervalo terapéutico, pero por debajo de niveles tóxicos, durante un periodo que es por lo menos 4 horas, preferiblemente por lo menos 8 horas, y muy preferiblemente por lo menos 12 horas. Dichas formulaciones generalmente se pueden preparar usando tecnología bien conocida y administrar, por ejemplo, mediante implantación oral, rectal o subcutánea, o mediante implantación en el sitio objetivo deseado. Los vehículos para usarse dentro de dichas formulaciones son biocompatibles, y también pueden ser biodegradables; preferiblemente la formulación provee un nivel relativamente constante de liberación de modulador. La cantidad de modulador contenido dentro de una formulación de liberación sostenida depende, por ejemplo, del sitio de implantación, la velocidad y duración esperada de liberación y la naturaleza de la condición que se ha de tratar o prevenir. La liberación controlada se puede lograr combinando el ingrediente(s) activo con un material de matriz que como tal altera la velocidad de liberación y/o a través del uso de un revestimiento de liberación controlada. La velocidad de liberación se puede variar usando métodos bien conocidos en la técnica, incluyendo (a) variar el espesor o composición del revestimiento, (b) alterar la cantidad o manera de adición de un plastificante en un revestimiento, (c) incluir ingredientes adicionales, tales como agentes modificadores de liberación, (d) alterar la composición, tamaño de partícula o forma de partícula d la matriz y (e) proveer uno o más pasajes a través del revestimiento. La cantidad de modulador contenido dentro de una formulación de liberación sostenida depende, por ejemplo, del método de administración (v.gr., el sitio de implantación), la velocidad y duración esperada de liberación y naturaleza de la condición que ha de ser tratada o prevenida. El material de matriz, que como tal puede no servir como una función de liberación controlada, es generalmente cualquier materia que soporta el ingrediente(s) activo. Por ejemplo, un material de retraso de tiempo tal como monoestearato de glicerilo y diaestearato de glicerilo se puede utilizar. El ingrediente(s) activo se puede combinar con material de matriz antes de la formación de la forma de dosis (v.gr., una tableta). Alternativamente, o además, el ingrediente(s) activo puede ser revestido sobre la superficie de una partícula, gránulo, esfera, microesfera, lóbulo o comprimido que comprende el material de matriz. Dicho revestimiento se puede lograr por medios convencionales, tales como disolviendo el ingrediente(s) activo en agua u otro solvente adecuado y aspersión. Opcionalmente, los ingredientes adicionales se añaden antes del revestimiento (v.gr., para ayudar a la aglutinación del ingrediente(s) activo al material de matriz o para dar color a la solución). Matriz puede ser revestida con un agente de barrera antes de la aplicación del revestimiento de liberación controlada. Unidades de matriz revestida múltiples, si se desea, pueden ser encapsuladas para generar una forma de dosis final.

En ciertas modalidades, se logra una liberación controlada a través del uso de un revestimiento de liberación controlada (es decir, un revestimiento que permite la liberación de ingrediente(s) activo a una velocidad controlada en un medio acuoso). El revestimiento de liberación controlada debe ser una película continua fuerte que es suave, capaz de soportar pigmentos y otros aditivos, no tóxico, inerte y libre de adhesión. Los revestimientos que regulan la liberación del modulador incluyen revestimientos independientes de pH, revestimientos de dependientes de pH (que se pueden usar para liberar el modulador en el estómago) y revestimientos entéricos (que permiten que la formulación pase intacta a través del estómago y hacia el intestino delgado, en donde el revestimiento se disuelve y el contenido es absorbido por el cuerpo). Será evidente que múltiples revestimientos se pueden utilizar (v.gr., para permitir la liberación de una porción de la dosis en el estómago y una porción a lo largo del tracto gastrointestinal). Por ejemplo. Una porción del ingrediente(s) activo puede ser revestida sobre un revestimiento entérico y por lo tanto liberada en el estómago, mientras el resto del ingrediente(s) activo en el núcleo de la matriz es protegido por el revestimiento entérico y liberado posteriormente en el tracto gastrointestinal. Los revestimientos dependientes de pH incluyen, por ejemplo, laca, acetato-ftalato de celulosa, acetato-ftalato de polivinilo, ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa, copolímeros de ácido metacrílico-éster y zeina. En ciertas modalidades, el revestimiento es un material hidrofónico, preferiblemente usado en una cantidad efectiva para hacer lenta la hidratación del agente gelificante después de la administración. Los materiales hidrofóbicos adecuados incluyen alquilcelulosas (v.gr., etilcelulosa o carboximetilcelulosa), éteres de celulosa, ésteres de celulosa, polímeros acrílicos (v.gr., ácido poli(acrílico), ácido poli(metacrílico), ácido acrílico y copolímeros de ácido metacrílico, copolímeros de metacrilato de metilo, metacrilatos de etoxietilo, metacrilato de cianoetilo, copolímero de pácido metacrílico-alcamida, metacrilato de poli(metilo), poliacrilamida, copolímeros de metacrilato de amonio, copolímero de metacrilato de aminoalquilo, anhídrido de ácido poli(metacrílico) y copolímeros de metacrilato de glicidilo) y mezclas de los anteriores. Dispersiones acuosas representativas de etilcelulosa incluyen, por ejemplo AQUACOAT® (FMC Corp., Philadelphia, PA) y SURELEASE® (Colorcon, Inc., West Point, PA), ambas de las cuales se pueden aplicar al sustrato de conformidad con las instrucciones del fabricante. Polímeros acrílicos representativos incluyen, por ejemplo, varios polímeros de EUDRAGIT® (Rohm America, Piscataway, NJ) que se pueden usar de manera individual o en combinación dependiendo del perfil de liberación deseado, de conformidad con las instrucciones del fabricante. Las propiedades físicas de revestimientos que comprenden una dispersión acuosa de un material hidrofóbico pueden ser mejoradas mediante la adición de uno o más plastificantes. Los plastificantes adecuados para alquilcelulosas incluyen, por ejemplo sebacato de dibutilo, ftalato de dietilo, citrato de trietilo, citrato de tributilo y triacetina. Plastificantes adecuados para polímeros acrílicos incluyen, por ejemplo, ésteres de ácido cítrico tales como citrato de trietilo y citrato de tributilo, ftalato de dibutilo, polietilenglicoles, propilenglicoles, ftalato de dietilo, aceite de ricino y triacetina. Los revestimientos de liberación controlada generalmente se aplican usando técnicas convencionales, tales como mediante aspersión en forma de una dispersión acuosa. Si se desea, el revestimiento puede comprender poros o canales o facilitar la liberación de ingrediente activo. Los poros y canales pueden ser generados por métodos bien conocidos, incluyendo la adición de material orgánico e inorgánico que es disuelto, extraído o lixiviado del revestimiento en el ambiente de uso. Ciertos de dichos materiales formadores de poro incluyen polímeros hidrofílicos, tales como hidroxialquilcelulosas (v.gr., hidroxipropilmetilcelulosa), éteres de celulosa, polímeros sintéticos solubles en agua (v.gr., polivinilpirrolidona, polivinilpirrolidona entrelazada y óxido de polietileno), polidextrosa soluble en agua, sacáridos y polisacáridos y sales de metal alcalino. Alternativamente, o además, un revestimiento de liberación controlada puede incluir uno o más orificios, que pueden ser formados por métodos tales como aquellos descritos en las patentes de E.U.A. Nos. 3,845,770; 4,034,758; 4,077,407; 4,088,864; 4,783,337 y 5,071 ,607. La libreación controlada también se puede lograr a través del uso de parches transdérmicos, usando tecnología convencional (véase, v.gr., patente de E.U.A. No. 4,668,232). Ejemplos adicionales de formulaciones de liberación controlada y componentes de las mismas se pueden encontrar, por ejemplo, en las patentes de E.U.A. Nos. 5,524,060; 4,572,833; 4,587,117; 4,606,909; 4,610,870; 4,684,516; 4,777,049; 4,994,276; 4,996,058; 5,128,143; 5,202,128; 5,376,384; 5,384,133; 5,445,829; 5,510,119; 5,618,560; 5,643,604; 5,891 ,474; 5,958,456; 6,039,980; 6,143,353; 6,126,969; 6,156,342; 6,197,347; 6,387,394; 6,399,096; 6,437,000; 6,447,796; 6,475,493; 6,491 ,950; 6,524,615; 6,838,094; 6,905,709; 6,923,984; 6,923,988; y 6,91 1 ,217; cada una de las cuales se incorpora aquí por referencia para su enseñanza de la preparación de formas de dosis de liberación controlada. Además de o junto con los modos anteriores de administración, un compuesto provisto aquí se puede añadir convenientemente a alimento o agua para beber (v.gr., para administrarse a animales no humanos incluyendo animales de compañía (tales como perros y gatos) y ganado). Las composiciones de alimento para animales y agua para beber se pueden formular de tal manera que el animal tome una cantidad apropiada de la composición junto con su dieta. También puede ser conveniente presentar la composición como una premezcla para la adición a alimento o agua para beber. Los compuestos generalmente se administran en una cantidad terapéuticamente efectiva. Las dosis sistémicas preferidas no son mayores que 50 mg por kilogramo de peso corporal por día (v.gr., variando de aproximadamente 0.001 mg a aproximadamente 50 mg por kilogramo de peso corporal por día), con dosis orales generalmente siendo de aproximadamente 5-20 veces más grandes que las dosis intravenosas (v.gr., variando de 0.01 a 40 mg por kilogramo de peso corporal por día).

La cantidad de ingrediente activo que se puede combinar con los materiales de vehículo para producir una unidad de dosis individual variará dependiendo, por ejemplo, del paciente que está siendo tratado, el modo de administración particular y cualesquiera otros fármacos coadministrados. Las unidades de dosis generalmente contienen entre aproximadamente 10 pg a aproximadamente 500 mg de ingrediente activo. Las dosis óptimas pueden ser establecidas usando pruebas de rutina y procedimientos que son bien conocidos en la técnica. Las composiciones farmacéuticas pueden ser empacadas para condiciones de tratamiento en repuesta a modulación de VR1 (v.gr. , tratamiento de exposición a ligando de vainilloide u otro irritante, dolor comezón, obesidad o incontinencia urinaria). Las composiciones farmacéuticas empacadas generalmente incluyen (i) un contenedor que contiene una composición farmacéutica que comprende por lo menos un modulador de VR1 como se describe aquí y (¡i) instrucciones (v.gr. , etiqueta o inserto de empaque) indicando que la composición contenida se ha de usar para tratar una condición en respuesta a una modulación de VR1 en el paciente.

Método de uso Los moduladores de VR1 provistos aquí se pueden usar para alterar la actividad y/o activación de receptores de capsaicina en una variedad de contextos, tanto in vitro como in vivo. Dentro de ciertos aspectos, los antagonsitas de VR1 se pueden usar para inhibir la unión de agonista de ligando de vainilloide (tal como capsaicina y/o RTX) a receptor de capsaicina in vitro o in vivo. En general, dichos métodos comprenden el paso de poner en contacto un receptor de capsaicina con uno o más moduladores de VR1 provistos aquí, en presencia de ligando de vainilloide en solución acuosa y bajo condiciones de otra manera adecuadas para unión de ligando a receptor de capsaicina. El modulador(es) de VR1 está generalmente presente a una concentración que es suficiente para alterar la unión de ligando de vainilloide a VR1 in vitro (usando la prueba provista en el ejemplo 5) y/o transducción de señal mediada por VR1 (usando una prueba provista en el ejemplo 6). El receptor de capsaicina puede estar presente en solución o suspensión (v.gr., en una membrana aislada o preparación de célula), o en una célula cultivada o aislada. Dentro de ciertas modalidades, el receptor de capsaicina es expresado por una célula neuronal presente en un paciente, y la solución acuosa es un fluido corporal. Preferiblemente, uno o más moduladores de VR1 se administran a un animal en una cantidad tal que el modulador de VR1 está presente en por lo menos un fluido corporal del animal a una concentración terapéuticamente efectiva que es 1 micromolar o menos; preferiblemente 500 nanomolar o menos; muy preferiblemente 100 nanomolar o menos, 50 nanomolar o menos, 20 nanomolar o menos, o 10 nanomolar o menos. Por ejemplo, dichos compuestos se pueden administrar a una dosis terapéuticamente efectiva que es menor que 20 mg/kg de peso corporal, preferiblemente menor que 5 mg/kg y, en algunos casos, menor que 1 mg/kg.

Aquí también se proveen métodos para modular, preferiblemente reducir, la actividad transductora de señal (es decir, la conductancia de calcio) de un receptor de capsaicina celular. Dicha modulación se puede lograr poniendo en contacto un receptor de capsaicina (ya sea in vitro o in vivo) con uno o más moduladores de VR1 provistos aquí bajo condiciones adecuadas para unión del modulador(es) al receptor. El modulador(es) de VR1 está generalmente presente a una concentración que es suficiente para alterar la unión de ligando de vainilloide a VR1 in vitro y/o transducción de señal mediada por VR1 como se describe aquí. El receptor puede estar presente en solución o suspensión, en preparación de células aisladas o cultivadas o en una célula dentro de un paciente. Por ejemplo, la célula puede ser una célula neuronal que esté en contacto in vivo en un animal. Alternativamente, la célula puede ser una célula epitelial, tal como una célula epitelial de vejiga urinaria (célula urotelial) o una célula epitelial de vías aéreas que está en contacto in vivo en un animal. La modulación de actividad transductora de señal puede ser evaluada detectando un efecto sobre la conductancia de ión de calcio (también referida como movilización o flujo de calcio). La modulación de actividad transductora de señal puede ser alternativamente evaluada detectando una alteración de un síntoma (v.gr., dolor, sensación de quemadura, bronco-constricción, inflamación, tos, hipo, comezón, síntomas menopáusicos, incontinencia urinaria o vejiga sobrerreactiva) de un paciente que está siendo tratado con uno o más moduladores de VR1 provistos aquí. El modulador(es) de VR1 provisto aquí se administra preferiblemente a un paciente (v.gr., un humano) oralmente o tópicamente, y está presente dentro de por lo menos un fluido corporal del animal mientras modula la actividad transductora de señal de VR1. Los moduladores de VR1 preferidos para usarse en dichos métodos modulan la actividad transductora de señal de VR1 in vitro a una concentración de 1 nanomolar o menos, preferiblemente 100 picomolar o menos, muy preferiblemente 20 picomolar o menos, e in vivo a una concentración de 1 micromolar o menos, 500 nanomolar o menos, o 100 nanomolar o menos en un fluido corporal tal como sangre. La presente invención además provee métodos para tratar condiciones que responden a modulación de VR1. Dentro del contexto de la presente invención, el término "tratamiento" abarca tanto el tratamiento modificador de enfermedad como el tratamiento sintomático, cualquiera de los cuales puede ser profiláctico (es decir, antes del inicio de los síntomas, a fin de prevenir, retardar o reducir la severidad de los síntomas) terapéutico (es decir, después de inicio de los síntomas, a fin de reducir la severidad y/o duración de los síntomas). Una condición "responde a modulación de VR1 " si es caracterizada por actividad inapropiada de un receptor de capsaicina independientemente de la cantidad de ligando de vainilloide presente localmente, y/o si la modulación de actividad de receptor de capsaicina da por resultado el alivio de la condición o síntoma de la misma. Dichas condiciones incluyen, por ejemplo, síntomas que resultan de la exposición a estímulos de activación de VR1 , dolor, trastornos respiratorios (tales como tos, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, bronquitis crónica, fibrosis cística y rinitis, incluyendo rinitis alérgica, tal como rinitis estacional y perenne, y rinitis no alérgica) depresión, comezón, síntomas menopáusicos, incontinencia urinaria, vejiga sobrerreactiva, lesión acústica (v.gr., de la cóclea), tinitus, hiperacusis, diabetes y condiciones prediabéticas (v.gr., resistencia a la insulina o tolerancia a la glucosa), hipo y obesidad, como se describe con más detalle más adelante. Dichas condiciones se pueden diagnosticar y monitorear usando criterios que han sido establecidos en la técnica. Los pacientes pueden incluir humanos, animales de compañía domesticados y ganado, con dosis como se describió antes. Los regímenes de tratamiento pueden variar dependiendo del compuesto usado y la condición particular que se ha de tratar. Sin embargo, para el tratamiento de la mayoría de los trastornos, una frecuencia de administración de 4 veces al día o menos es preferida. En general, un régimen de dosis de 2 veces al día es más preferido, siendo particularmente preferida una dosis de una vez al día. Para el tratamiento de dolor agudo, una dosis individual que rápidamente alcanza concentraciones efectivas es deseable. Sin embargo, se entenderá que el nivel de dosis específico y régimen de tratamiento para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores incluyendo la actividad del compuesto específico utilizado, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, tiempo de administración, vía de administración y velocidad de excreción, combinación de fármacos y la severidad de la enfermedad particular que está bajo terapia. En general, el uso de la dosis mínima suficiente para proveer terapia efectiva es preferido. Los pacientes generalmente pueden ser monitoreados para efectividad terapéutica usando criterios médicos o veterinarios adecuados para la condición que esté siendo tratada o prevenida. Pacientes que experimentan síntomas que resultan de la exposición a estímulos activadores de receptor de capsaicina incluyen individuos con quemaduras causadas por calor, luz, gas lacrimógeno o ácido y aquellos cuyas membranas mucosas son expuestas (v.gr., mediante ingestión, inhalación o contacto ocular) a capsaicina (v.gr., de chiles o en aspersión de pimienta) o un irritante relacionado tal como ácido, gas lacrimógeno, agente(es) infeccioso o contaminante(s) del aire. Los síntomas resultantes (que pueden ser tratados usando moduladores de VR1 , especialmente antagonistas provistos aquí) pueden incluir, por ejemplo, dolor, bronco-constricción e inflamación. El dolor que puede ser tratado usando los moduladores de VR1 provistos aquí puede ser crónico o agudo e incluye, pero no se limitan a, dolor mediado por nervios periféricos (especialmente dolor neuropático). Los compuestos provistos aquí se pueden usar en el tratamiento de, por ejemplo, síndrome de dolor postmastectomía, dolor de muñón, dolor de extremidad fantasma, dolor neuropático oral, dolor de muelas (dolor dental), dolor de dentadura, neuralgia postherpética, neuropatía diabética, neuropatía inducida por quimioterapia, distrofia simpática refleja, neuralgia trigeminal, osteoartritis, artritis reumatoide, fibromialgia, síndrome de Guillain-Barre, meralgia parestética, síndrome de boca ardiente y/o dolor asociado con daño de nervios y raíz, incluyendo dolor asociado con trastorno de nervio periférico (v.gr., atrapamiento de nervios y avulsiones de plexo branquial, amputación, neuropatías periféricas incluyendo neuropatía periférica bilateral, tic doloroso, dolor facial atípico, daño a raíz de nervios y aracnoiditis). Condiciones de dolor neuropático adicionales incluyen causalgia (distrofia simpática refleja - RSD, secundaria a lesión de nervio periférico), neuritis (incluyendo, por ejemplo, neuritis ciática, neuritis periférica, polineuritis, neuritis óptica, neuritis postfebril, neuritis migratoria, neuritis segmental y neuritis de Gombault), neuronitis, neuralgias (v.gr., aquellas mencionadas anteriormente, neuralgia cervicobraquial, neuralgia craneal, neuralgia genicular, neuralgia glosofaríngea, neuralgia migrañosa, neuralgia idiopática, neuralgia intercostal, neuralgia de glándulas mamarias, neuralgia de articulación mandibular, neuralgia de Morton, neuralgia nasociliar, neuralgia occipital, neuralgia roja, neuralgia de Sluder, neuralgia esplenopalatina, neuralgia supraorbital y neuralgia vidiana), dolor relacionado con cirugía, dolor musculoesquelético, síndromes de dolor miofacial, neuropatía relacionada con SIDA, neuropatía relacionada con esclerosis múltiple, dolor del sistema nervioso central (v.gr., dolor debido a daño de tallo cerebral, ciática, y espondilitis anquilosante), y dolor espinal, incluyendo dolor relacionado con lesión de médula espinal. Dolor de cabeza, incluyendo dolores de cabeza que implican actividad de nervio periférico también pueden estar relacionadas como se describe aquí. Dichos dolores incluyen, por ejemplo, dolores de cabeza por sinusitis, de agregación (es decir, neuralgia migrañosa) y tensión, migraña, dolor temporomandibular y dolor de senos maxilares. Por ejemplo, dolores de cabeza por migraña pueden ser prevenidos administrando un compuesto provisto aquí tan pronto como un aura pre-migrañosa sea experimentado por el paciente. Condiciones adicionales que pueden ser tratadas como se describe aquí incluyen dolores de Charcot, Dolores por gases intestinales, dolor de oído, dolor de corazón, dolor muscular, dolor de los ojos, dolor orofacial (v.gr., odontalgia), dolor abdominal, dolor ginecológico (v.gr., dolor menstrual, dismenorrea, dolor asociado con cistitis, dolor de trabajo de parto, dolor pélvico crónico, prostitis crónica y endometriosis), dolor de espalda agudo y crónico (v.gr., dolor de espalda baja), gota, dolor de cicatrices, dolor de hemorroides, dolores dispépticos, angina, dolor de raíz nervioso, neuropatía "no dolorosas", síndrome de dolor regional complejo, dolor homotópico y dolor heterotópico - incluyendo dolor asociado con carcinoma, a menudo referido como dolor de cáncer (v.gr., en pacientes con cáncer de huesos), dolor (e inflamación) asociado con exposición a veneno (v.gr., debido a mordedura de serpiente, mordedura de araña o picadura de insecto) y dolor asociado con trauma (v.gr., dolor post-quirúrgico, dolor de episotomía, dolor por cortadas, dolor musculoesquelético, golpes y huesos rotos y dolor por quemadura, especialmente hiperalgesia primaria asociada con el mismo). Las condiciones de dolor adicionales que se pueden tratar como se describe aquí incluyen dolor asociado con trastornos respiratorios como se describió antes, enfermedades autoinmunes, enfermedades de ¡nmunodeficíencia, accesos repentinos de calor, enfermedad intestinal inflamatoria, enfermedad de reflujo gastroesofágico (GERD), síndrome de intestino irritable y/o enfermedad intestinal inflamatoria. Dentro de ciertos aspectos, los modulares de VR1 provistos aquí se pueden usar para el tratamiento de dolor mecánico. Como se usa aquí, el término "dolor mecánico" se refiere a dolor distinto al dolor de cabeza que no es neuropático o un resultado de exposición a calor, frío o estímulos químicos externos. El dolor mecánico incluye trauma físico (otro distinto a quemaduras térmicas o químicas u otras exposiciones irritantes y/o dolorosas a compuestos químicos nocivos) tal como dolor post-quirúrgico y dolor por cortadas, golpes y huesos rotos; dolor de muelas; dolor de dentadura; dolor de raíz de nervio; osteoartritis; artritis reumatoide; fibromialgia; meralgia parestética; dolor de espalda; dolor asociado con cáncer; angina; síndrome de túnel carpiano; y dolor resultante de fractura de huesos, trabajo de parto, hemorroides, gases intestinales, dispepsia, y menstruación. Condiciones de comezón que se pueden tratar incluyen pruritus psoriática, comezón debida a hemodiálisis, pruritus aguagénica y comezón asociada con vestibulitis vulvar, dermatitis de contacto, picaduras de insectos y alergias de la piel. Las condiciones del tracto urinario que se pueden tratar como se describe aquí incluyen incontinencia urinaria (incluyendo incontinencia de sobreflujo, incontinencia apremiante e incontinencia por estrés) así como condiciones de vejiga sobrerreactiva o inestable (incluyendo hiper-reflexia de detrusor de la vejiga, hiper-reflexia detrusora de origen espinal e hipersensibilidad de vejiga). En algunos de esos tratamientos, el modulador de VR1 se administra mediante un catéter o un dispositivo similar dando por resultado inyección directa de modulador de VR1 en la vejiga. Los compuestos provistos aquí también se pueden usar como agentes antitusivos (para prevenir, aliviar o suprimir tos, incluyendo tos inducida por medicamentos tales como inhibidores de ACE) y para el tratamiento de hipo, para el tratamiento de síntomas de menopausia tales como accesos repentinos de calor, y para promover pérdida de peso en un paciente obeso. Dentro de otros aspectos, los moduladores de VR1 provistos aquí se pueden usar dentro de terapias de combinación para el tratamiento de condiciones que involucran dolor y/o componentes inflamatorios. Dichas condiciones incluyen, por ejemplo, trastornos autoinmunes y respuestas autoinmunes patológicas que se sabe que tienen un componente inflamatorio incluyendo pero sin limitarse a, artritis (especialmente artritis reumatoide), psoriasis, enfermedad de Crohn, lupus eritematoso, síndrome de intestino irritable, rechazo de injerto tejido y rechazo hiperagudo de órganos transplantados. Otras de estas condiciones incluyen trauma (v.gr., lesión a la cabeza o médula espinal), enfermedad cardio y cerebro-vascular y ciertas enfermedades infecciosas. Las dosis adecuadas para modulador de VR1 dentro de la terapia de combinación generalmente son como se describió antes. La dosis y métodos de después de agentes antiinflamatorios se pueden encontrar, por ejemplo, en las instrucciones del fabricante en Physician's Desk Reference.

En ciertas modalidades, la administración e combinación de un modulador de VR1 con un agente antiinflamatorio da por resultado una reducción de la dosis del agente antiinflamatorio requerida para producir un efecto terapéutico (es decir, una disminución en la cantidad terapéuticamente efectiva mínima). Por lo tanto, preferiblemente, la dosis de agente antiinflamatorio en un método de combinación o método de tratamiento de combinación es menor que la dosis máxima contemplada por el fabricante para la administración del agente antiinflamatorio son administración de combinación de un antagonista de VR1. Muy preferiblemente esta dosis es menor que ¾, muy preferiblemente aún menor que V2, y altamente preferiblemente, menor que ¼ de la dosis máxima, mientras muy preferiblemente todavía la dosis es menor que 10% de la dosis máxima contemplada por el fabricante para la administración del agente(s) antünflamatorio cuando se administra sin administración de combinación de un antagonista de VR1. Será evidente que la cantidad de dosis de componente antagonista de VR1 de la combinación necesaria para lograr el efecto deseado puede ser afectada de manera similar por la cantidad de dosis y potencia del componente de agente antiinflamtorio de la combinación. En ciertas modalidades preferidas, la administración de combinación de un modulador de VR1 con un agente antiinflamatorio se logra empacando uno o más moduladores de VR1 y uno o más agentes antiinflamatorios en el mismo empaque, ya sea en contendores separados dentro del empaque o en el mismo contenidos como una mezcla de uno o más antagonistas de VR1 y uno o más agentes antiinflamatorios. Las mezclas preferidas se formulan para administración oral (v.gr., como pildoras, cápsulas, tabletas o similares). En ciertas modalidades, el empaque comprende una etiqueta que contiene indicios que indican que uno o más moduladores de VR1 y uno o más agentes antiinflamatorios se han de tomar juntos para el tratamiento de una condición de dolor inflamatorio. Dentro de aspectos adicionales, los modulares de VR1 provistos aquí se pueden usar en combinación con uno o más medicamentos de alivio de dolor adicionales. Algunos de estos medicamentos también son agentes antiinflamatorios y son los que se listaron anteriormente. Otros medicamentos son agentes analgésicos incluyendo agentes narcóticos que típicamente actúan en uno o más subtipos de receptor de opioides (v.gr., µ, ? y/o d), preferiblemente como agonistas o agonistas parciales. Dichos agentes incluyen opiatos, derivados de opiato y opioides, así como sales farmacéuticamente aceptables e hidratos de los mismos. Ejemplos específicos de analgésicos narcóticos incluyen, dentro de modalidades preferidas, alfentanil, alfaprodina, anileridina, bezitramida, buprenorfina butorfanol, codeína, diacetildihidromorfina, diacetilmorfina, dihidrocodeína, difenoxilato, etilmorfina, fentanil, heroína, hidrocodona, hidromorfona, isometadona, levometorfan, levorfano, levorfanol, meperidina, metazocina, metadona, metorfano, metopon, morfina, nalbufina, extractos de opio, extractos de fluido de opio, opio en polvo, opio granulado, opio en bruto, tintura de opio, oxicodona, oximorfona, paregoric, pentazocina, petidina, fenazocina, piminodina, propoxifeno, racemetorfan, racemorfan, sulfentanil, tebaína y sales farmacéuticamente aceptables e hidratos de los agentes anteriores. Otros ejemplos de agentes analgésicos narcóticos incluyen acetorfina, acetildihidrocodeína, acetilmetadol, alilprodina, alfracetilmetadol, alfameprodina, alfametadol, benzetidina, bencilmorfina, betacetilmetadol, betameprodina, betametadol, betaprodina, clonitaceno, metilbromuro de codeína, N-óxido de codeína, ciprenorfina, desomorfina, dextromoramida, diampromida, dietiltiambuteno, dihidromorfina, dimenoxadol, dimefeptanol, dimetiltiamubuteno, butirato de dioxafetilo, dipipanona, drotebanol, etanol, etilmetiltiambuteno, etonitaceno, etorfina, etoxeridina, furetidina, hidromorfinol, hidroxipetidina, ketobemidona, levomoramida, levofenacilmorfan, metildesorfina, metildihidromorfina, morferidina, morfina metilpromida, metilsulfonato de morfina, N-óxido de morfina, mirofin, naloxona, naltihexona, nicocodeína, nicomorfina, noracimetadol, norlevorfanol, normetadona, normorfina, norpipanona, pentazocaína, fenadoxona, fenampromida, fenomorfan, fenoperidina, piritramida, folcodina, proheptazoina, properidina, propiran, racemoramida, tebacon, trimeperidina y las sales farmacéuticamente aceptables e hidratos de los mismos. Agentes analgésicos representativos específicos adicionales incluyen, por ejemplo, acetaminofen (paracetamol); ibuprofeno; aspirina y otros NSAIDs descritos anteriormente; antagonistas de NR2B; antagonistas de bradiquinina; agentes anti-migraña; anticonvulsivantes tales como oxcarbazepine y carbamazepine; antidepresivos (tales como TCAs, SSRIs, SNRIs, antagonistas de sustancia P, etc.); bloqueadores espinales; pentazocina/naloxona; meperidina; levorfanol; buprenorfina; hidromorfona; fentanil; sufentanil; oxicodona; oxicodona/acetaminofen, nalbufina y oximorfone. Agentes analgésicos adicionales que incluyen agonistas de receptor de CB2, tales como AM1241 , antagonistas de receptor de capsaicina y compuestos que se unen a la subunidad a2d de canales de calcio regulados por voltaje, tales como gabapentin y pregabalin. Agentes anti-migraña representativos para usarse en combinación con un modulador de VR1 provistos aquí incluyen antagonistas de CGRP, ergotaminas y agonistas de 5-HT-i, tales como sumatripan, naratriptan, zolmatriptan y rizatriptan. Dentro de aspectos adicionales, los moduladores provistos aquí se pueden usar, por ejemplo en el tratamiento de trastornos pulmonares tales como asma, en combinación con uno o más agonistas de receptor beta(2)-adrenérgido o antagonistas de receptor de leucotrieno (v.gr., agentes que inhiben el receptor de cisteinil leucotrieno CysLT-?). Antagonistas de CysLTi incluyen montelukast, zafirlukast, y pranlukast. Para el tratamiento o prevención de tos, un modulador de VR1 como se provee aquí se puede usar en combinación con otro medicamento diseñado para tratar esta condición, tal como antibióticos, agentes antiinflamatorios, cistinil leucotrienos, antagonistas de histamina, corticosteroides, opioides, antagonistas de NMDA, inhibidores de bomba de protones, antagonistas de receptor de nociceptin, neuroquinina (NK1 , NK2 y NK3) y bradiquinina (BK1 y BK2), canabinoides, bloqueadores de canales dependientes de Na+ y activadores canales de K+ dependientes de Ca+2 de gran conductancia. Los agentes específicos incluyen dexbromfeniramina más pseudoefedrina, loratadina, oximetazolina, ipratropio, albuterol, beclometasona, morfina, codeína, folcodeína y dextrometorfan. La presente invención además provee terapia de combinación para el tratamiento de incontinencia urinaria. Dentro de esos aspectos, un modulador de VR1 provisto aquí se puede usar en combinación con otro medicamento diseñado para tratar esta condición, tal como terapia de reemplazo de estrógeno, congéneres de progesterona, estimulación eléctrica, bloqueadores de canales de calcio, agentes antiespasmódicos, antagonistas colinérgicos, fármacos antimuscarínicos, antidepresivos tricíclicos, SNRIs, agonistas beta adrenoceptores, inhibidores de fosfodiesterasa, baridores de canales de potasio, agonistas de nociceptin/orfanin FQ (OP4), antagonistas de neuroquinin (NK1 y NK2), antagonistas de P2X3, fármacos musculotróficos y neuromodulación sacral. Agentes específicos incluyen oxibutinin, emepronio, tolterodina, flavoxato, flurbiprofen, tolterodina, diciclomina, propiverina, propantelina, diciclomina, imipramina, doxepin, duloxetina, 1-deamino-8-D-arginína vasopresina, antagonistas de receptor muscarínico tal como tolterodina y agentes anticolinérgicos tales como oxibutinin. Las dosis adecuadas para modulador de VR1 dentro de dicha terapia de combinación generalmente son como se describió antes. Las dosis y métodos de administración de otros medicamentos de alivio de dolor se pueden encontrar, pe, en las instrucciones del fabricante en Physician's Desk Reference. En ciertas modalidades, la administración de combinación de un modulador de VR1 con uno o más medicamentos de dolor adicionales da por resultado una reducción de la dosis de cada agentes terapéutico requerida para producir un efecto terapéutico (v.gr., la dosis de uno o ambos agentes puede ser menor que ¾, menor que ½, menor que ¼ o menor que 10% de la dosis máxima listada anteriormente o contemplada por el fabricante). Para usarse en terapia de combinación, las composiciones farmacéuticas como se describió antes pueden comprender además uno o más medicamentos adicionales como se describió antes. En ciertas composiciones, el medicamento adicional es un analgésico. También se provee aquí preparaciones farmacéuticas empacadas que comprenden uno o más modulares de VR1 y uno o más medicamentos adicionales (v.gr., analgésicos) en el mismo empaque. Dichas peparaciones farmacéuticas empacadas generalmente incluyen (i) un contenedor que contiene una preparación farmacéutica que comprende por lo menos un modulador de VR1 como se describe aquí; (ii) un contenedor que contiene una composición farmacéutica que comprende por lo menos un medicamento adicional (tal como un medicamento para alivio de dolor yo antiinflamatorio) como se describió antes y (iii) instrucciones (v.gr., etiqueta o un inserto de empaque) que indica que las composiciones se han de usar simultáneamente, por separado o secuecialmente para tratar o prevenir una condición que responde a modulación de VR1 en el paciente (tal como una condición en la cual el dolor y/o inflamación predomina).

Compuestos que son agonistas de VR1 se pueden usar adicionalmente, por ejemplo, en control de gente (como un sustituto de gas lacrimógeno) o protección personal (v.gr., en una formulación de aspersión) o como agentes farmacéuticos para el tratamiento de dolor, comezón, síntomas de menopausia, incontinencia urinaria o vejiga sobrerreactiva por desensibilización de receptor de capsaicina. En general, los compuestos para usarse en control de gente o protección personal se formulan y se usan de conformidad con tecnología de gas lacrimógeno o aspersión de gas pimienta convencionales. Dentro de aspectos separados, la presente invención provee una variedad de usos in vitro e in vivo no farmacéuticos para los compuestos provistos aquí. Por ejemplo, dichos compuestos pueden ser marcados y usados como sondas para la detección y localización de receptor de capsaicina (en muestras tales como preparaciones de células o secciones de tejido, preparaciones o fracciones de los mismos). Además, los compuestos provistos aquí que comprenden un grupo reactivo adecuado (tal como un grupo arilcarbonilo, nitro o azida) se puede usar en estudios de mareaje de fotoafinidad de sitios de unión a receptor. Además, los compuestos provistos aquí se pueden usar como controles positivos en pruebas para actividad de receptor, como estándares para determinar la capacidad de un agente candidato para unirse a receptor de capsaicina, o como radiorastreadores para formación de imagen de tomografía de emisión de positrones (PET) o para tomografía computarizada de emisión de fotones individuales (SPECT).

Dichos métodos se pueden usar para caracterizar receptores de capsaicina en sujetos vivos. Por ejemplo, un modulador de VR1 puede ser marcado usando cualquiera de una variedad técnicas bien conocidas (v.gr., radiomarcada con un radtonúclido tal como tritio, como se describe aquí), e incubado con una muestra durante un tiempo de incubación adecuado (v.gr., determinado probando primero un curso de tiempo de unión). Después de la incubación, el compuesto no unido es removido (v.gr., mediante lavado) y el compuesto unido detectado usando cualquier método adecuado para el marcador utilizado (v.gr., a uto radiografía o conteo de escintilación para compuestos radiomarcados; métodos espectroscópicos se pueden usar para detectar grupos luminiscentes y grupos fluorescentes). Como un control, un compuesto marcado que contiene muestra acoplada y una cantidad mayor (v.gr., mayor de 10 veces) de compuesto no marcado puede ser procesado de la misma manera. Una cantidad mayor de marcador detectable permanece en la muestra de prueba que en el control indica la presencia de receptor de capsaicina en la muestra. Pruebas de detección, incluyendo autoradiografía de receptor (mapeo de receptor) del receptor de capsaicina en células cultivadas o muestras de tejido se pueden realizar como se describe en Kuhar en las secciones 8.1.1 a 8.1.9 de Current Protocols in Pharmacology (1998) John Wiley & Sons, New York. Los compuestos provistos aquí se pueden usar dentro de una variedad de métodos de separación de células bien conocidos. Por ejemplo, los moduladores pueden ser enlazados a la superficie interior de una placa de cultivo de tejido u otro soporte, para usarse como ligando de afinidad para inmovilizar y por lo tanto aislar, receptores de capsaicina (v.gr., aislando células que expresan receptor) in vitro. Dentro de una modalidad preferida, un modulador enlazado a un marcador fluorescente, tal como fluoresceína, se pone en contacto con las células, que después son analizadas (o aisladas) por distribución de células activada por fluorescencia (FACS). Los modulares de VR1 provistos aquí además se pueden usar dentro de pruebas para la identificación de otros agentes que se unen al receptor de capsaicina. En general, dichas pruebas son pruebas de unión de competencia estándar, en las cuales el modulador de VR1 marcado, unido, es desplazado por un compuesto de prueba. En breve, dichas pruebas son realizadas: (a) poniendo en contacto el receptor de capsaicina con un modulador de VR1 radiomarcado como se describe aquí, bajo condiciones que permiten unión del modulador de VR1 al receptor de capsaicina, generando asi modulador de VR1 marcado, unido; (b) detectar una señal que corresponde a la cantidad de modulador de VR1 marcado, unido en ausencia de agente de prueba; (c) poner en contacto el modulador de VR1 marcado, unido con un agente de prueba; (d) detectar una señal que corresponde a la cantidad de modulador de VR1 marcado, unido, en presencia de un agente de prueba; y (e) detectar una disminución en la señal detectada en el paso (d), en comparación con la señal detectada en el paso (b). Los siguientes ejemplos se ofrecen a manera de ilustración y no de limitación. A menos que se especifique otra cosa, todos los reactivos y solventes son de grado comercial estándar y se han de usar sin purificación adicional. Usando modificaciones de rutina, los materiales de partida pueden ser variados y pasos adicionales utilizados para producir otros compuestos provistos aquí.

EJEMPLOS Datos de espectroscopia de masa provistos en los siguientes ejemplos son EM de electroaspersión, obtenido en modo de ión positivo con voltaje de cono de 15V o 30V, usando un LCT de tiempo de vuelo de micromasa, equipado con una bomba Waters 600, detector de disposición de fotodiodo Waters 996, automuestreador Gilson 215 y un microinyector Gilson 841. Software MassLynx (Advanced Chemistry Development, lnc; Toronto, Canadá) versión 4.0 se usa para recopilación y análisis de datos. El volumen de muestra de 1 microlitro se inyecta a una columna 50 * 4.6 mm Chromolith SpeedROD C18 y se eluye usando un gradiente lineal de 2 fases a una velocidad de flujo de 6 ml/min. La muestra se detecta usando un conteo de absorbancia total sobre el intervalo de 220-340nm UV. Las condiciones de elusión son: Fase móvil A-95/5/0.05 agua/metanol/TFA; fase móvil B-5/95/0.025 agua/metanol/TFA.

Gradiente: Tiempo (min) %B 0 10 0.5 100 1.2 100 1.21 10 El tiempo de operación total es 2 minutos de inyección a inyección.

EJEMPLO 1 Preparación de Intermediarios representativos Este ejemplo ilustra la preparación de intermediarios representativos útiles en la síntesis de derivados de 2-fenoxipirimidinona A. Etil 3-nitriloalaninato Una mezcla de cianoglioxilato-2-oxima de etilo (50 g, 352 mmoles) en 440 mi de agua se trata cuidadosamente con 340 mi de NaHCÜ3 acuoso saturado, seguido por la adición en porciones de hidrosulfito de sodio (165 g, 950 mmoles). La reacción después se calienta a una temperatura interna de 35°C durante 35 min. Después de enfriarse a T.A., la reacción se saturó con NaCI (aprox. 250 g) y se extrae con CH2CI2 (6 ? 150 mi). Los extractos de CH2CI2 combinados se secan (Na2SO4), se filtran y se concentran bajo vacío para dar el compuesto del título como un aceite café. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.43 (1 H, s), 4.34 (2H, q, J 7.2), 2.30 (2H, bs), 1.35 (3H, t, J 7.2).

B. 5-amino-1-metil-1 H-imidazol-4-carboxilato de etilo Una mezcla de 3-nitriloalaninato de etilo (26.7 g, 208 mmoles) y ortoformiato de trietilo (34.6 mi, 208 mmoles) en 340 mi de acetonitrilo se calienta a 90°C y se agita durante 70 min después de enfriarse a T.A., se añade metilamina (25.9 mi de una solución al 33% en peso en EtOH, 208 mmoles) seguido por 20 hr de agitación a TA La mezcla de reacción después se concentra bajo vacío y se disuelve en aprox. 200 mi de HC1 1 N. La solución acuosa se lava con CH2CI2 (3 * 100 mi), se basifica a pH = 9-10 con NaHC03 sólido, y se extrae con CH2CI2 (5 * 100 mi). Los extractos de CH2CI2 combinados se secan (Na2S0 ), se filtran y se concentran para dar un sólido café. El sólido se suspende en EtOAc, se filtra y se lava con Et2O para dar el compuesto del titulo como un sólido blanquecino. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 7.03 (1 H, s), 4.88 (2H, bs), 4.33 (2H, q, J 7.2), 3.45 (3H, s), 1.37 (3H, t, J 7.2).

C. Clorhidrato de 1 -(4-fluorofenil)-9-metil-2-tioxo-1 , 2,3.9-tetrahidro-6H-purin-6-ona 5-Amino-1 -metil-1 H-imidazol-4-carboxilato de etilo (8.45 g, 0.05 moles) y isotiocianato de 4-fluorofenilo (7.65 g, 0.05 moles) se agitan en piridina (125 mi) a 45°C durante 20 hr. La mezcla de reacción se concentra bajo vacío y se diluye mediante la adición de agua enfriada con hielo. La mezcla de reacción se extrae con CH2CI2 (2 ? 250 mi), se lava con agua (200 mi) y se seca sobre MgS04. El filtrado se evapora bajo vacío para dar intermediario crudo como aceite viscoso rojo-anaranjado. El aceite se suspende en solución acuosa al 1 % de hidróxido de sodio (300 mi) y se calienta a 90°C durante 20 hr. La mezcla de reacción se enfría y el sólido se filtra. El filtrado se evapora bajo vacío para reducir el volumen (100 mi). La mezcla se acidifica usando HCI concentrado a pH 4.0 y se deja reposar a T.A. durante la noche. El sólido amarillo que se separa se filtra y se seca a 70°C, para dar el compuesto del título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 7.8 (1 H, s), 7.2-7.4 (4H, m), 3.74 (3H, s).

D. 2-Cloro-1-(4-fluorofenil)-9-etil-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona Clorhidrato de 1-(4-fluorofenil)-9-metil-2-tioxo-1 ,2,3,9-tetrahidro- 6H-purin-6-ona (6.5 g, 0.021 moles) se suspende en un gran exceso de oxicloruro de fósforo (150 mi) y se calienta a 135°C durante 40 hr. La mezcla de reacción se enfria, se evapora bajo vacío, y se somete a azeotropía dos veces con tolueno. El aceite café pegajoso resultante se disuelve en DCM (200 mi) después se neutraliza con NaHC03 saturado (acuoso). La capa acuosa se extrae con DCM (2 200 mi) y se seca (MgS04). El extracto seco se filtra y se concentra bajo vacío para dar producto crudo como un sólido café claro. El producto crudo se purifica por cromatografía en columna instantánea usando 1-2.5% de MeOH/CH2CI2 para dar el compuesto del título como sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 7.75 (1 H, s), 7.2-7.35 (4H, m), 3.85 (3H, s).

E. 3-Aminopiridin-2-carboxilato de etilo Una mezcla de ácido 3-aminopiridin-2-carboxílico (6.4 g, 46.3 mmoles) en 26 mi de EtOH y 8 mi de ácido sulfúrico concentrado se calienta a reflujo durante 2 días. Después de enfriamiento, la mezcla se concentra a aproximadamente 15-20 mi y se vacía en 20 g de hielo. La mezcla se basifica a pH 8-9 con NH4OH concentrado mientras se enfría en un baño de hielo. El precipitado café resultante se filtra y él filtrado se extrae con éter (4 ? 60 mi). Los extractos de éter combinados se lavan con salmuera (4 * 60 mi), se secan (Na2S04), se filtran y se evaporan para dar un sólido amarillo/café. Este sólido se combina con el del filtrado anterior y todo se tritura con éter frío para dar el compuesto del título como un sólido café claro. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 8.08 (1 H, m), 7.21 (1 H, m), 7.03 (1H, m), 5.74 (2H, bs), 4.44 (2H, q, J 7.2, 6.9), 1.45 (3H, t, J 6.9).

F. 3-(4-Fluorofenil)-2-t¡oxo-2,3-dihidropiridor3,2-d1pirimidin-4(1 H)-ona Una mezcla de 3-aminopiridin-2-carboxilato de etilo (2.0 g, 12.0 mmoles) e isotiocianato 4-fluorofenilo (1.84 g, 12.0 mmoles) en 7 mi de piridina anhidra se agita a 45°C durante 21 hr. Después de enfriamiento, la piridina se evapora bajo vacío, y se añade agua con hielo al residuo. La mezcla resultante se suspende en EtOAc y se filtra para dar el compuesto del título como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 8.59 (1 H, m), 7.79 (2H, m), 7.33 (4H, m).

G. 2-Cloro-3-(4-fluorofenil)piridoi3,2-d1pirimidin-4(3H)-ona Una mezcla de 3-(4-fluorofenil)-2-tioxo-2,3-dihidropirido[3,2-d]pirimidin-4(1 H)-ona (2.6 g, 9.5 mmoles) en 30 mi de POCI3 se calienta a 135°C y se agita durante 2 días. Después de enfriarse a TA, se remueve el exceso de POCI3 bajo vacío, y el residuo se somete a azeotropía dos veces con tolueno. La mezcla de aceite/sólido café pegajosa resultante se disuelve en CH2CI2 y se neutraliza a pH 7-8 con NaHC03 saturado. Las capas se separan, y la capa de CH2CI2 se seca (Na2SO ), se filtra y se evapora para dar un sólido pegajoso café. La purificación por cromatografía en columna (gradiente de CH2CI2 a 20% de EtOAc/CH2CI2) da el compuesto del título como un sólido blanquecino. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 8.91 (1 H, m), 8.05 (1 H, m), 7.74 (1 H, m), 7.28 (4H, m).

H. Anhídrido acético-fórmico Anhídrido acético (35.94 g, 352 mmoles) y ácido fórmico (16.20 g, 352 mmoles) se añaden a un matraz de fondo redondo y se calientan a 55°C durante 3 hr. La mezcla de reacción se usa en el ejemplo 11 sin purificación adicional.

I. N-formil-3-nitriloalaninato de etilo 3-Nitriloalaninato de etilo (26.9 g, 210 mmoles) se disuelve en éter anhidro (200 mi), y se enfría en un baño de agua/hielo. Anhídrido acético-fórmico (preparado como una mezcla como se describe antes) se añade gota a gota. Cuando termina la adición, la mezcla de reacción se deja calentar a T.A. y se agita a T\A. durante la noche. La mayor parte de los compuestos volátiles se remueven bajo vacío, y los solventes del residuo se remueven por co-evaporación con tolueno (100 mi ? 4). El aceite rojo obtenido se precipita al raspar en éter, y los sólidos resultantes se recristalizan en éter para dar el compuesto del título como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 8.32 (1 H, s), 7.26 (1 H, s), 6.46 (1 H, bs,), 5.56 (1 H, d, J 7.8), 4.39 (2H, q), 1.37 (3H, t).

J. 5-Amino-1 ,3-tiazol-4-carboxilato de etilo N-formil-3-nitnloalaninato de etilo (1 1.22 g, 71.86 mmoles) se disuelve en benceno anhidro (220 mi). Siguiendo la adición de reactivo de Lawesson (14.53 g, 35.93 mmoles), la suspensión se pone a reflujo durante 24 hr. La mayor parte del solvente se remueve bajo vacio, y el residuo rojo viscoso se absorbe sobre gel de sílice y se carga a una columna de gel de sílice (solvente de elución: EtOAc:hexanos = 50:50). El compuesto del título se obtiene como sólidos amarillos. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 7.87 (1 H, s), 7.26 (1 H, s), 6.01 (2H, broad s), 4.38 (2H, q), 1.41 (3H, t).

K. Clorhidrato de 6-(4-fluorofenil)-5-mercapto[1 ,3]tiazolo[5,4-d1pirimidin-7(6H)-ona 5-Amino-1 ,3-tiazol-4-carboxilato de etilo (1.05 g, 6.10 mmoles) e isotiocianato de 4-fluorofenilo (0.93 g, 6.10 mmoles) se añaden a piridina (3.5 mi) y se calienta a 45°C durante 15 hr. La mayor parte del solvente se remueve bajo vacío, y los sólidos amarillos resultantes se disuelven en CH2CI2 (150 mi) y se lavan con H2O (20 mi ? 2) y salmuera (20 mi ? 2). La fase de CH2CI2 se seca sobre MgSO4, y el solvente se remueve bajo presión reducida. El residuo resultante se trata con solución de NaOH al 1 % (37 mi) y se calienta a 90°C durante 15 hr. La mezcla de reacción se filtra y el filtrado se ajusta a pH 3 mediante la adición de HCI concentrado. La mayoría del agua se remueve bajo vacío y el sólido amarillo que se separa se filtra y se seca para dar el compuesto del título como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8.90 (1 H, s), 7.31 (4H, m).

L. 5-Cloro-6-(4-fluorofenil)ri ,31tiazolor5,4-d1pirimidin-7(6H)-ona Clorhidrato de 6-(4-fluorofenil)-5-mercapto[1 ,3]tiazolo[5,4-d]pirimidin-7(6H)-ona (0.2 g, 0.633 mmoles) se añade a POCI3 (10 mi), y la solución resultante se pone a reflujo a 135°C durante 41 hr. La mayoría de los compuestos volátiles se remueven bajo presión reducida y el solvente residual se co-evapora con tolueno (50 mi ? 3). El sólido oscuro obtenido se disuelve en CH2CI2 (200 mi) y se lava con solución de NaHC03 saturada (100 mi ? 5), salmuera (50 mi ? 2), y se seca sobre MgS04. Después de remover el solvente, la cromatografía en columna de gel de sílice (EtOAc:hexanos = 50:50) da el compuesto del título como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 8.88 ( H, s), 7.26 (4H, m).

M. Clorhidrato de 1 -(4-bromofenil)-2-mercapto-9-metil-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona 5-Amino-1 -metil-1 H-imidazol-4-carboxilato de etilo (3.50 g, 20.69 mmoles) y isotiocianato de 4-bromofenilo (4.43 g, 20.69 mmoles) se añaden a piridina (12 mi). La solución se calienta a 45°C durante 3 hr. La mayor parte del solvente se remueve bajo vacío y el sólido resultante se disuelve en CH2CI2 (300 mi). La solución de CH2CI2 se lava con agua (30 mi ? 2), salmuera (30 mi ? 2), se seca sobre MgS04l y se concentra bajo vacío. El sólido amarillo resultante se trata con solución acuosa de NaOH 1 % (125 mi) y se calienta a 90°C durante 18 hr. La mezcla de reacción se filtra y el filtrado se ajusta a pH 3 mediante la adición de HCI concentrado. La mayoría del agua se remueve bajo presión reducida. El sólido resultante se recoge por filtración, el sólido se somete a azeotropía con tolueno (30 mi ? 3) para dar el compuesto del título como un sólido amarillo. 1H RMN (400 MHz, CD3OD) 8.10 (1 H, s), 7.65 (2H, d), 7.14 (2H, d), 3.85 (3H, s).

N. 1-(4-Bromofenil)-2-cloro-9-metil-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona Clorhidrato de 1-(4-bromofenil)-2-mercapto-9-metil-1 ,9-dihidro- 6H-purin-6-ona (2.05 g, 5.49 mmoles) se añade a POCI3 (87 mi) y la solución resultante se pone a reflujo a 135°C durante 38 hr. La mayoría de los compuestos volátiles se remueven bajo vacío y los solventes residuales se coevaporan con tolueno (50 mi ? 3). El sólido oscuro resultante se disuelve en CH2CI2 (300 mi), se lava con solución saturada de NaHC03 (100 mi ? 5), salmuera (50 mi ? 2), y se seca sobre MgS04. Después de remover el solvente bajo vacío, la cromatografía en columna de gel de sílice (EtOAc:hexanos = 50:50) da el compuesto del título como un sólido amarillo. H RMN (400 MHz, CDCI3) 7.51 (1 H, s), 7.67 (2H, d), 7; 14 (2H, d), 3.83 (3H, s); m/z (ES+) 340.90 (M+).

EJEMPLO 2 Síntesis de derivados de 2-fenoxipirimidinona representativos A. 1-(4-Bromofenil)-9-metil-2-(2,3,4-trifluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona (Compuesto 1 ) 1-(4-Bromofen¡l)-2-cloro-9-metil-1 ,9-dih¡dro-6H-pur¡n-6-ona (150 mg, 0.4417 mmoles) y 2,3,4-trifluorofenol (130.8 mg, 0.8834 mmoles) se añaden a un vial, y la mezcla sellada se calienta con agitación a 140°C durante 23 hr. La cromatografía en columna de gel de sílice (MeOH:CH2CI2 = 0.5:99.5) da el compuesto del título como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 7.66 (3H, m), 7.24 (2H, m), 7.00 (2H, m), 3.58 (3H, s). E (M+ ): 451.08; TR = 1.31 min. La Cl50 determinada como se describe en el ejemplo 6 es 100 nanomolar o menos.

B. 1-(4-Fluorofenil)-9-metil-2-(3,4.5-trifluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona (Compuesto 2) Una mezcla de 2-cloro-1-(4-fluorofenil)-9-etil-1 ,9-dihidro-6H-pur¡n-6-ona (55.6 mg, 0.20 mmoles) y 3,4,5-trifluorofenol (0.40 mmoles) se calienta a 140°C durante 36 hr. Después de enfriarse a T.A., la mezcla cruda se purifica por CLAP preparativa para dar el compuesto del título como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 7.98 (1 H, s), 7.55 (2H, m), 7.45 (2H, m), 7.34 (2H, m), 3.53 (3H, S). m/z = 391.05 (M+1); TR = 0.78 min.

C. 3-(4-Fluorofenil)-2-r2-fluoro-3-(trifluorometil)fenoxilpirido[3,2-dlpirimidin-4(3H)-ona (Compuesto 3) Una mezcla de 2-cloro-3-(4-fluorofenil)pirido[3,2-d]pinmidin-4(3H)-ona (55 mg, 0.20 mmoles) y 2-fluoro-3-trifluoromet¡lfenol (50 µ?, 0.40 mmoles) se calienta a 140°C durante 18 horas. Después de enfriarse a T.A., la mezcla cruda se purifica por cromatografía en columna (gradiente de CH2CI2 a 20% de EtOAc/Ch^Cb) para dar el compuesto del título como un sólido blanco. H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8.71 (1 H, m), 7.83 (2H, m), 7.70 (4H, m), 7.45 (3H, m). EM (M+1): 420.07; TR = 1.13 min. [? 5-(2.4-Difluorofenoxi)-6-(4-fluorofenil)ri ,31tiazolor5.4-dlpirimidin-7(6H)-ona (Compuesto 4) 5-Cloro-6-(4-fluorofenil)[1 ,3]tiazolo[5,4-d]pirimidin-7(6H)-ona (0.2 mmoles) y 2,4-difluorofenol (0.4 mmoles) se añaden a un vial, y la mezcla sellada se calienta con agitación a 140°C durante 48 hr. L cromatografía en columna de gel de sílice (MeOH:CH2CI2 = 0.5:99.5) da el compuesto del título como un sólido ligeramente amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) 8.70 (1 H, s), 7.36 (2H, m), 7.26 (2H, m), 7.14 (1 H, m), 6.94 (2H, m). EM (M+1 ): 376.03; TR = 1.33 min.

E. 4-r9-Metil-6-oxo-2-(2.3.4-trifluorofenoxi)-6.9-dihiclro-1 H-purin-1-il]benzonitrilo (Compuesto 5) 1-(4-Bromofenil)-9-metil-2-(2,3,4-trifluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona (68 mg, 0.1507 mmoles), Zn(CN)2 (10.6 mg, 0.0904 mmoles), Pd2(dba)3 (4.1 mg, 0.0045 mmoles) y 1 , 1 '-b¡s(d¡fenilfosfino)ferroceno (5.0 mg, 0.0090 mmoles) se añaden a DMF (1.2 mi) y H2O (0.012 mi). La mezcla se purga con N2 durante 3 min y después se calienta a 120°C durante 18 hr. La mezcla se hace pasar a través de celite. Se añade agua (30 mi) y la mezcla resultante se extrae con CH2CI2 (50 mi * 4). Después de secar el CH2CI2 sobre MgS04, el solvente se remueve bajo vacío. El producto crudo se purifica por cromatografía en columna (MeOH:CH2CI2 = 2:98) para dar el compuesto del título como un sólido café. H RMN (400 MHz, CDCI3) 7.86 (2H, d, J 8), 7.65 (1 H, s), 7.53 (2h, d, J 8), 6.95 (2H, m), 3.59 (3H, s). EM (M+1 ): 398.03; TR = 1.22 min.

F. 1-(6-Cloropiridin-3-il)-9-metil-2-(3.4,5-trifluorofenoxi)- H-purin-6(9H)-ona (Compuesto 6) Paso 1. 2-Hidroxi-1-(6-cloropiridin-3-il)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona 5-Amino-1-metil-1H-imidazol-4-carboxilato de metilo (1.0 g, 0.006 moles), 2-cloro-5-isociantopiridina (1.0 g, 0.006 moles) y DMAP (0.4 g, 0.003 moles) se suspenden en EtOAc (150 mi) y la mezcla de reacción resultante se pone a reflujo durante la noche. La mezcla de reacción se filtra, se lava con EtOAc, y se concentra bajo vacío. El residuo blanco se suspende en NaOH acuoso al 1% (53 mi) y se agita a 90°C durante 20 hr. La mezcla de reacción se neutraliza con HCI 6N y se extrae con DCM para dar el compuesto del título.

Paso 2. 2-Cloro-1-(6-cloropirid¡n-3-il)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona 2-H¡drox¡-1 -(6-cloropiridin-3-il)-1 ,9-dihidro-6/-/-purin-6-ona reacción anterior se suspende en un gran exceso de oxicloruro de fósforo (150 mi) y se calienta a 135°C durante 24 hr. La mezcla de reacción se enfría, se evapora bajo vacío, y se añade tolueno adicional y se evapora (2?) bajo presión reducida. El aceite café pegajoso resultante se disuelve en DCM (200 mi), y después se neutraliza con NaHC03 saturado (acuoso). La capa acuosa se extrae con DCM (2 * 200 mi) y se seca (MgSO4). El extracto seco se filtra y se concentra bajo vacío para dar producto crudo como un sólido café claro. El producto crudo se purifica por cromatografía en columna instantánea usando 1 -2.5% de MeOH/CH2CI2 para dar el compuesto del título como sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 8.33 (s, H), 7.78 (s, 1 H), 7.58 (d, J = 6 Hz, 1 H), 7.53 (d, J = 6 Hz, 1 H).

Paso 3. l-íe-Cloropiridin-S-iD-Q-metil^-O^.S-trifluorofenoxi I H-purin-6(9H)-ona (Compuesto 6) KO'Bu 1.0 M en isopropanol (2 mi) se añade a la solución de 3,4,5-trifluorofenol (0.29 g, 1.86 mmoles) y se agita durante 20 minutes a T A. A la solución de fenóxido resultante se añade una solución de 2-cloro-1 -(6-cloropir¡din-3-¡l)-1 ,9-dihidro-6/-/-purin-6-ona (0.5 g, 1.69 mmoles) en dimetilacetamida (3 mi) y la mezcla resultante se agita durante la noche a 50°C. La mezcla de reacción resultante se enfría, se extingue con solución saturada de NH4CI, se extrae con DCM (2 * 50 mi) y se seca (Na2S04). La capa orgánica se filtra y se concentra bajo vacío para dar el producto crudo como un sólido café claro. El producto crudo se purifica adicionalmente por cromatografía en columna instantánea usando 5% de MeOH/CH2CI2 para dar el compuesto del título como sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 8.41 (s, 1 H), 7.55-7.81 (m, 2H), 7.4 (brs, 1 H), 6.71-7.02 (m, 2H), 3.85 (s, 3H). EM (M+1): 408.04; TR = 1.48 min. La CI50 determinada como se describe en el ejemplo 6 es 100 nanomolar o menos.

G. 5-(9-Metil-6-oxo-2-(3,4,5-trifluorofenoxi)-6H-pur¡n-1 (9H)-il)picolinonitrilo (Compuesto 7) 1-(6-Cloropiridin-3-il)-9-metil-2-(3,4,5-trifluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona (0.3 g, 0.73 mmoles), Zn(CN)2 (0.43 mg, 3.65 mmoles), Pd2(dba)3 (0.07 g, 0.073 mmoles) y DPPF (0.04 g, 0.073 mmoles) se añaden a DMF (3 mi). La mezcla se purga con N2 durante 3 min y después se calienta a 120°C durante 18 hr. Se añade agua (20 mi) y la mezcla resultante se extrae con DCM (2x20 mi). La capa orgánica se hace pasar a través de celite y Na2S04 y el solvente se remueve bajo vacio. El producto crudo se purifica por cromatografía en columna sobre gel de sílice (MeOH:CH2Cl2 = 2:98) para dar el compuesto del título como un sólido blanco. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) d 8.71 (s, 1 H), 7.90 (s, 2H), 7.68 (s, 1 H), 7.25 (s, 2H), 6.85-6.89 (m, 2H), 3.65 (s, 3H, s). EM (M+1): 399.07; TR = 1.41 min. La Cl50 determinada como se describe en el ejemplo 6 es 100 nanomolar o menos.

EJEMPLO 3 Derivados de 2-fenoxipirimidinona represetativos adicionales Usando modificaciones de rutina, los materiales de partida se pueden variar y pueden utilizarse pasos adicionales para producir otros compuestos provistos aquí. Los compuestos listados en el cuadro I se preparan usando dichos métodos. En la columna marcada como "Cl50" un * indica que la Cl50 determinada como se describe en el ejemplo 6 es 100 nanomolar o menos (es decir, la concentración de dichos compuestos que se requiere para proveer un 50% de disminución en la respuesta a la fluorescencia de células expuestas a un CI50 de capsaicina es 100 nanomolar o menos). El dato de espectroscopia de masa obtenido como se describe antes, se presenta como M+1 en la columna con encabezado de "EM", y los tiempos de retención se proveen en la columna con encabezado "TR," en minutos.

CUADRO I Derivados de 2-fenoxipirimidinona representativos 1 -(4-clorofenil)-9-metil-2- (2,4,6-trifluorofenoxi)-1 ,9- 406.99 1.27 dihidro-6H-purin-6-ona 9-etil-1-(4-fluorofenil)-2- (2,4,6-trifluorofenoxi)-1 ,9- 405.03 1.25 dihidro-6H-purin-6-ona 1 -(4-clorofenil)-9-metil-2- (2,3,4-trifluorofenoxi)-1 ,9- 407.00 1.28 dihidro-6H-purin-6-ona 9-etil-1-(4-fluorofenil)-2- (2l3,4-tr¡fluorofenoxi)-1 ,9- 405.04 1.26 dihidro-6H-purin-6-ona 387.06 1.24 - 373.03 1.22 met¡l- noxi)- nn-6- nil)-2- i)-1,9- 405.09 1.11 -ona etil-2- i)-1,9- 407.04 1.3 -ona 4- -(4- 0.89 il-1 ,9- -ona 4- il-1 -(4- hidro- a 1 -(4-clorofenil)-9-metil-2- (2,3,6-tr¡fluorofenox¡)-1 ,9- 407.04 0.62 d¡hidro-6H-purin-6-ona 9-etil-1-(4-fluorofenil)-2- (2,3,5-tr¡fluorofenox¡)-1 ,9- 405.09 0.72 dih¡dro-6H-pur¡n-6-ona 1 -(4-clorofenil)-9-metil-2- (2,3,5-tr¡fluorofenox¡)-1 ,9- 407.04 0.69 dihidro-6H-purin-6-ona 4-{[1-(4-clorofenil)-9- metil-6-oxo-6,9-dihidro- 1 H-purin-2-il]ox¡}-2,3- difluorobenzonitrilo 2,3-d¡fluoro-4-{[1-(4- fluorofenil)-9-metil-6-oxo- 6,9-d¡hidro-1 H-purin-2- ¡l]oxi}benzonitrilo 407.04 1.39 388.09 1.3 2-[2-cloro-3- (trifluoromet¡l)fenoxi]-3- (4-fluorofenil)p¡r¡do[3,2- d]pir¡midin-4(3H)-ona 6-(4-fluorofenil)-5-[2 fluoro-3-(trifluoromet¡l) fenox¡][1 ,3]tiazolo[5,4- d]p¡rimidin-7(6H)-ona 1-(4-clorofen¡l)-2-[2- fluoro-3-(trifluorometil) fenoxi]-9-metil-1 ,9- dihidro-6H-purin-6-ona 1-(4-fluorofen¡l)-2-[2- fluoro-3-(tr¡fluorometil) fenox¡]-9-metil-1 ,9- dih¡dro-6H-purin-6-ona 6-(4-fluorofenil)-5-[3- fluoro-5-(trifluorometil) fenox¡][ ,3]tiazolo[5,4- d]pirim¡din-7(6H)-ona EJEMPLO 4 Células transfectadas y preparaciones de membrana con VR1 Este ejemplo ilustra la preparación de células transfectadas VR1 y preparaciones de membrana que contienen VR1 para usarse pruebas de unión a capsaicina (ejemplo 5).

Un ADNc que codifica receptor de capsaicina humano de longitud completa (SEQ ID NO:1 , 2 ó 3 de la patente de E.U.A. No. 6,482,61 1) es subclonado en el plásmido pBK-CMV (Stratagene, La Jolla, CA) para expresión recombinante en células de mamífero. Células de riñon embrionario humano (HEK293) son transfectadas con la construcción de expresión de pBK-CMV que codifica el receptor de capsaicina humano de longitud completa usando métodos estándares. Las células transfectadas se seleccionan durante dos semanas en un medio que contiene G418 (400 µg/ml) para obtener un acervo de células establemente transfectadas. Clones independientes se aislan de este acervo por dilución limitante para obtener líneas de células estables clónales para usarse en experimentos subsecuentes. Para experimentos de unión a radioligando, las células se siembran en matraces de cultivo de células T175 en un medio sin antibióticos y crecido a aproximadamente 90% de confluencia. Los matraces después se lavan con PBS y se cosechan en PBS que contiene 5 mM de EDTA. Las células se forman en pastillas por centrifugación suave y se almacenan a -80°C hasta probarse. Células previamente congeladas son alteradas con la ayuda de un homogeneizador de tejido en regulador de pH de homogeneización de HEPES enfriado con hielo (5 mM de KCI 5, 5.8 mM de NaCI, 0.75 mM de CaCI2, 2 mM de MgCI2, 320 mM de. sacarosa, y 10 mM de HEPES, pH 7.4). Los homogenados de tejido primero se centrifugan durante 10 minutos a 1000 x g (4°C) para remover la fracción nuclear y residuos, y después el sobrenadante de la primera centrifugación es adicionalmente centrifugado durante 30 minutos a 35,000 * g (4°C) para obtener una fracción de membrana parcialmente purificada. Las membranas son resuspendidas en el regulador de pH de homogeneización HEPES antes de la prueba. Una alícuota de este homogenado de membrana se usa para determinar concentración de proteína mediante el método de Bradford (BIO-RAD Protein Assay Kit, #500-0001 , BIO-RAD, Hercules, CA).

EJEMPLO 5 Prueba de unión a receptor de capsaicina Este ejemplo ilustra una prueba representativa de unión de receptor de capsaicina que se puede usar para determinar la afinidad de unión de compuestos para el receptor de capsaicina (VR1). Los estudios de unión con [3H] Resiniferatoxin (RTX) se llevan a cabo esencialmente como se describe en Szallasi y Blumberg (1992) J. Pharmacol. Exp. Ter. 262:883-888. En este protocolo, la unión de RTX no específica se reduce añadiendo glicoproteína de ácido alfai de bovino (100 µg por tubo) después de que ha terminado la reacción de unión. [3H] RTX (37 Ci/mmol) se sintetiza y se obtiene de Chemical Synthesis y Analysis Laboratory, National Cáncer Institute-Frederick Cáncer Research y Development Center, Frederick, MD. [3H] RTX también se puede obtener de proveedores comerciales (v.gr., Amersham Pharmacia Biotech, Inc.; Piscataway, NJ). El homogenado de membrana del ejemplo 4 se centrifuga como antes y se resuspende a una concentración de proteína de 333 µg/ml en regulador de pH de homogenización. Las mezclas de la prueba de unión se preparan sobre hielo y contienen [3H]RTX (actividad específica 2200 mCi/ml), 2 µ? de compuestos de prueba no radioactiva, 0.25 mg/ml de albúmina de suero de bovino (fracción de Cohn V), y 5 ? 04 - 1 * 105 células transfectadas con VR1 . El volumen final se ajusta a 500 µ? (para pruebas de unión por competencia) o 1 ,000 µ? (para pruebas de unión por saturación) con la solución de regulador de pH de homogeneización con HEPES enfriado con hielo (pH 7.4) descrita anteriormente. La unión no especifica se define como la que ocurre en presencia de 1 µ? de RTX no radioactiva (Alexis Corp. ; San Diego, CA). Para unión por saturación, [3H]RTX se añade en el intervalo de concentración de 7-1 ,000 pM, usando 1 a 2 diluciones. Típicamente 1 1 puntos de concentración se recolectan por curva de unión por saturación. Las pruebas de unión por competencia se llevan a cabo en presencia de 60 pM [3H]RTX y varias concentraciones de compuesto de prueba. Las reacciones de unión se inician transfiriendo las mezclas de prueba a un baño de agua a 37°C y se terminan después de un período de incubación de 60 minutos enfriando los tubos sobre hielo. RTX de unión a membrana se separa de RTX libre, así como cualquier RTX unido a alfa glicoproteína ácida, filtrando sobre filtros de fibra de vidrio WALLAC (PERKIN- ELMER, Gaithersburg, MD) que son pre-remojados con 1.0% de PEI (polietilenimina) durante 2 horas antes de usarse. Se deja secar los filtros durante la noche y después se cuenta en un contador WALLAC 1205 BETA PLATE después de la adición de fluido de escintilación WALLAC BETA SCINT. Los parámetros de unión de equilibrio se determinan ajustando la ecuación de Hill alostérica a los valores medidos con la ayuda del programa de computadora FIT P (Biosoft, Ferguson, MO) como se describe por Szallasi, et al. (1993) J. Pharmacol. Exp. Ther. 266:678-683. Los compuestos provistos aquí generalmente presentan valores de K¡ para receptor de capsaicina menor que 1 µ?, 100 nM, 50 nM, 25 nM, 10 nM, o 1nM en esta prueba.

EJEMPLO 6 Prueba de movilización de calcio Este ejemplo ¡lustra pruebas de movilización de calcio representativas para usarse en la evaluación de compuestos de prueba oara actividad agonista y antagonista. Las células transfectadas con plásmidos de expresión (como se describe en el ejemplo 4) y que por lo tanto expresan receptor de capsaicina humano se siembran y se hacen crecer a 70-90% de confluencia en placas de 96 pozos, fondo claro, paredes negras FALCON (#3904, BECTON-DICKINSON, Franklin Lakes, NJ). El medio de cultivo se vacía de las placas de 96 pozos y colorante sensible a calcio FLUO-3 AM (Molecular Probes, Eugene, OR) se añade a cada pozo (solución de colorante: 1 mg de FLUO-3 AM, 440 µ? de DMSO y 440 µ? de ácido plurónico al 20% en DMSO, diluido 1 :250 en regulador de pH Krebs-Ringer HEPES (KRH) (25 mM de HEPES, 5 mM de KCI, 0.96 mM de NaH2PO4, 1 mM de MgSO4, 2 mM de CaCI2, 5 mM e glucosa, 1 mM de probenecid, pH 7.4), 50 µ? de solución diluida por pozo). Las placas se cubren con lámina delgada de aluminio y se incuban a 37°C durante 1-2 horas en un ambiente que contiene 5% de CO2. Después de la incubación, el colorante se vacía de las placas, y las células se lavan una vez con regulador de pH KRH, y resuspenden en regulador de pH KRH.

Determinación de CEm de capsaicina Para medir la capacidad de un compuesto de prueba agonizar o antagonizar una respuesta de movilización de calcio en células que expresan receptores de capsaicina a capsaicina u otro agonista de vainilloide, la CE50 de la capsaicina agonista se determina primero. 20 µ? adicionales de regulador de pH KRH y 1 µ? de DMSO se añade a cada pozo de células, preparado como se describió antes. 100 µ? de capsaicina en agonista KRH es transferido automáticamente por el instrumento FLIPR a cada pozo. La movilización de calcio inducido por capsaicina se monitorea usando ya sea FLUOROSKAN ASCENT (Labsystems; Frankiin, MA) o instrumentos FLIPR (sistema lector de placa de formación de imagen fluorométrica; Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Los datos obtenidos entre 30 y 60 segundos después de la aplicación de agonista se usan para generar una curva de respuesta a la concentración de 8 puntos, con concentraciones de capsaicina finales de 1 nM a 3 µ?. Software KALEIDAGRAPH (Synergy Software, Reading, PA) se usa para ajustar los datos a la ecuación: y=a*(1/(1 +(b/x)c)) para determinar 50% de concentración excitadora (CE50) para la respuesta. En esta ecuación, y es la señal de fluorescencia máxima, x es la concentración del agonista o antagonista (en este caso, capsaicina), a es Emax, b corresponde al valor de CE50 y c es el coeficiente de Hill.

Determinación de actividad agonista Los compuestos de prueba se disuelven en DMSO, se diluyen en regulador de pH KRH, y se añaden inmediatamente a células preparadas como se describió antes. 100 nM capsaicina (una concentración de CEC90 aproximada) también se añade a las células en la misma placa de 96 pozos como un control positivo. La concentración final de los compuestos de prueba en los pozos de prueba es entre 0.1 nM y 5 µ?. La capacidad de un compuesto de prueba para actuar como un agonista del receptor de capsaicina se determina midiendo la respuesta a la fluorescencia de las células que expresan receptores de capsaicina inducida por el compuesto como función de la concentración del compuesto. Estos datos se ajustan como se describió antes para obtener la CE50, que es generalmente menor que 1 micromolar, preferiblemente menor que 100 nM, y muy preferiblemente menor que 10 nM. El grado de eficacia de cada compuesto de prueba también se determina calculando la respuesta inducida por una concentración de compuesto de prueba (típicamente 1 µ?) en relación con la respuesta inducida por 100 nM de capsaicina. Este valor, llamado por ciento de señal (POS), se calcula mediante la siguiente ecuación: POS=100*respuesta de compuesto de prueba /100 nM respuesta de capsaicina Este análisis provee evaluación cuantitativa tanto de la potencia como eficacia de los compuestos de prueba como agonistas de receptor de capsaicina humano. Los agonistas del receptor de capsaicina humano generalmente inducen respuestas detectables a concentraciones menores que 100 µ?, o preferiblemente a concentraciones menores que 1 µ?, o muy preferiblemente a concentraciones menores que 10 nM. El grado de eficacia en un receptor de capsaicina humano es preferiblemente mayor que 30 POS, muy preferiblemente mayor que 80 POS a una concentración de 1 µ?. Ciertos agonistas son esencialmente libres de actividad antagonista como se demuestra por la ausencia de actividad antagonista detectable en la prueba descrita más adelante a las concentraciones de compuesto por abajo de 4 nM, muy preferiblemente a concentraciones abajo de 10 µ? y muy preferiblemente a concentraciones menores que o iguales a 100 µ?.

Determinación de actividad antagonista Los compuestos de prueba se disuelven en DMSO, se diluyen en 20 µ? de regulador de pH KRH de modo que la concentración final de los compuestos de prueba en el pozo de prueba es entre 1 µ? y 5 µ?, y se añaden a células preparadas como se describió antes. Las placas de 96 pozos que contienen células preparadas y compuestos de prueba se incuban en la oscuridad, a temperatura ambiente durante 0.5 a 6 horas. Es importante que la incubación no continúe más allá de 6 horas. Inmediatamente antes de determinar la respuesta a la fluorescencia, 100 µ? de capsaicina en regulador de pH KRH a dos veces la concentración CE50 determinada como se describió antes es automáticamente añadida por el instrumento FLIPR a cada pozo de la placa de 96 pozos para un volumen de muestra final de 200 µ? y una concentración de capsaicina final igual a la CE50. La concentración final de los compuestos de prueba en los pozos de prueba es entre 1 µ? y 5 µ?. Los antagonistas del receptor de capsaicina reducen esta respuesta por lo menos por aproximadamente 20%, preferiblemente por lo menos por aproximadamente 50%, y muy preferiblemente por lo menos por 80%, en comparación con control acoplado (es decir, células tratadas con capsaicina a dos veces la concentración CE50 en ausencia de compuesto de prueba), a una concentración de 10 micromolar o menos, preferiblemente 1 micromolar o menos. La concentración de antagonista requerido para proveer una disminución de 50%, en relación con la respuesta observada en presencia de capsaicina y sin antagonista, es la CI50 para el antagonista, y es preferiblemente por abajo de 1 micromolar, 100 nanomolar, 10 nanomolar o 1 nanomolar. Los datos se analizan como sigue. Primero, la respuesta de la unidad fluorescente relativa máxima promedio (RFU) de los pozos de control negativo (sin agonista) se sustrae de la respuesta máxima detectada para cada uno de los otros pozos experimentales. Segundo, la respuesta de RFU máxima promedio se calcula para los pozos de control positivo (pozos con agonista). Después, el por ciento de inhibición para cada compuesto probado se calcula usando la ecuación: Por ciento de inhibición = 100 - 100 ? (señal pico en células de prueba / señal pico en células de control) Los datos de % de inhibición se grafican como una función de la concentración de compuesto de prueba y la Cl50 compuesto de prueba se determina usando, por ejemplo, mejor ajuste de los datos con software KALEIDAGRAPH (Synergy Software, Reading, PA) a la ecuación: y = m1*(1/(1 +(m2/m0)m3)) en donde y es el por ciento de inhibición, m0 es la concentración del agonista, mi es la RFU máxima, m? corresponde al compuesto de prueba Cl50 (la concentración requerida para proveer una disminución de 50%, en relación con la respuesta observada en presencia de agonista y sin antagonista) y m3 es el coeficiente de Hill. Alternativamente, compuesto de prueba Cl50 se determina usando una regresión lineal en la cual x es ln(concentración de compuesto de prueba) e y es ln(por ciento de inhibición/(100 - por ciento de inhibición). Los datos con un por ciento de inhibición que son mayores que 90% o menores que 15% son rechazados y no se usan en la regresión. La Cl50 calculada de esta manera es e<-in,ercePción/Pendien,e> Ciertos moduladores preferidos de VR1 son antagonistas que son esencialmente libres de actividad agonista como se demuestra por la ausencia de actividad agonista detectable en la prueba descrita anteriormente a concentraciones de compuesto por abajo de 4 nM, muy preferiblemente a concentraciones por abajo de 10 µ? y muy preferiblemente a concentraciones menores que o iguales a 100 µ?.

EJEMPLO 7 Prueba de células de ganglión de raíz dorsal Este ejemplo ilustra una prueba de células de ganglión de raíz dorsal representativa para evaluar actividad antagonista o agonista de VR1 de un compuesto. DRG se extirpan de ratas neonatales, se disocian y se cultivan usando métodos estándares (Aguayo y White (1992) Brain Research 570:61-67). Después de 48 horas de incubación, las células se lavan una vez y se incuban durante 30-60 minutos con el colorante sensible al calcio Fluo 4 AM (2.5-10 ug/ml; TefLabs, Austin, TX). Las células después se lavan una vez. La adición de capsaicina a las células da por resultado un incremento dependiente de VR1 en los niveles de calcio intracelular que es monitoreado por un cambio en fluorescencia de Fluo-4 con un fluorómetro. Los datos se recopilan durante 60-180 segundos para determinar la señal fluorescente máxima. Para pruebas de antagonista, varias concentraciones de compuesto se añaden a las células. La señal fluorescente después se gráfica como una función de concentración de compuesto para identificar la concentración requerida para lograr un 50% de inhibición de la respuesta activada por capsaicina, o Clso- Los antagonistas del receptor de capsaicina preferiblemente tienen una CI5o por abajo de 1 micromolar, 00 nanomolar, 10 nanomolar o 1 nanomolar. Para pruebas de agonista, varias concentraciones de compuesto se añaden a las células sin la adición de capsaicina. Los compuestos que son agonistas de receptor de capsaicina dan por resultado un incremento dependiente de VR1 en niveles de calcio intracelular que es monitoreado por un cambio en fluorescencia de Fluo-4 con un fluorómetro. La EC50, o concentración requerida para lograr un 50% de la señal máxima para una respuesta activada por capsaicina, es preferiblemente por abajo de 1 micromolar, por abajo de 100 nanomolar o por abajo de 10 nanomolar.

EJEMPLO 8 Modelos animales para determinar alivio de dolor Este ejemplo ¡lustra métodos representativos para evaluar el grado de alivio de dolor provisto por un compuesto.

A. Prueba de alivio de dolor Los siguientes métodos se pueden usar para evaluar alivio de dolor.

Alodinia mecánica Alodinia mecánica (una respuesta anormal a un estímulo inocuo) se evalúa esencialmente como se describe por Chaplan et al. (1994) J. Neurosci. Methods 53:55-63 y Tal y Eliav (1998) Pain 64(3):51 1-518. Una serie de filamentos de von Frey de rigidez variable (típicamente 8-14 filamentos en una serie) se aplican a la superficie plantar de la pata posterior con la fuerza suficiente para doblar el filamento. Los filamentos son mantenidos en esta posición durante no más de tres segundos o hasta que una respuesta alodínica positiva es desplegada por la rata. Una respuesta alodínica positiva consiste en levantar la pata afectada seguido inmediatamente de lamer o agitar la pata. El orden y frecuencia con los cuales los filamentos individuales se aplican, se determinan usando el método de arriba hacia abajo de Dixon. La prueba se inicia con el pelo medio de la serie con filamentos subsecuentes siendo aplicados de manera consecutiva, ascendiendo o descendiendo, dependiendo de si una respuesta negativa o positiva, respectivamente, se obtiene con el filamento inicial. Los compuestos son efectivos en revertir o prevenir síntomas similares a alodinia mecánica si las ratas tratadas con dichos compuestos requieren estimulación con un filamento de Von Frey de fuerza de rigidez más alta para provocar una respuesta alodínica positiva en comparación con ratas no tratadas de control o tratadas con vehículo. Alternativamente, o además, la prueba de un animal en dolor crónico se puede hacer antes y después de administrar el compuesto. En dicha prueba, un compuesto efectivo da por resultado un incremento en la rigidez del filamento necesaria para inducir una respuesta después del tratamiento, en comparación con el filamento que induce una respuesta antes del tratamiento o en un animal que también está en dolor crónico pero se deja sin ser tratado o se trata con vehículo. Los compuestos de prueba se administran antes o después del inicio del dolor. Cuando un compuesto de prueba se administra después del inicio del dolor, la prueba se lleva a cabo 10 minutos a tres horas después de la administración.

Hiperalqesia mecánica Hiperalgesia mecánica (una respuesta exagerada a estímulo doloroso) se prueba esencialmente como se describe en Koch et al. (1996) Analgesia 2(3): 157-164. Las ratas se colocan en compartimientos individuales de una jaula con un piso de metal perforado calentado. La duración de retiro de la pata trasera (es decir, la cantidad de tiempo para el cual el animal mantiene su pata arriba antes de colocarla de nuevo en el piso) se mide después de un leve piquete con alfiler a la superficie plantar de cualquier pata trasera. Los compuestos producen una reducción en hiperalgesia mecánica si hay una disminución estadísticamente significativa en la duración de retiro de la pata trasera. El compuesto de prueba se puede administrar antes o después del inicio del dolor. Para compuestos administrados después del inicio del dolor, la prueba se lleva a cabo 10 minutos a las tres horas después de la administración.

Hiperalgesia térmica Hiperalgesia térmica (una respuesta exagerada a estímulo térmico nocivo) se mide esencialmente como se describe en Hargreaves et al. (1988) Pain. 32(1):77-88. En resumen, una fuente de calor radiante constante se aplica a la superficie plantar de cualquier pata trasera de los animales. El tiempo para retirar (es decir, la cantidad de tiempo que el calor se aplica antes de que el animal mueve su pata), de otra manera descrito como umbral térmico o latencia, determina la sensibilidad de la pata trasera del animal al calor. Los compuestos producen una reducción en hiperalgesia térmica si hay un incremento estadísticamente significativo en el tiempo para retiro de pata trasera (es decir, el umbral térmico para respuesta o latencia se incrementa). El compuesto de prueba se puede administrar antes o después del inicio de dolor. Para compuestos administrados después del inicio de dolor, la prueba se lleva a cabo 10 minutos a tres horas después de la administración.

B. Modelos de dolor El dolor puede ser inducido usando cualquiera de los siguientes métodos, para permitir la prueba de eficacia analgésica de un compuesto. En general, los compuestos provistos aquí dan por resultado una reducción estadísticamente significativa en dolor como se determina por lo menos por uno de los métodos de prueba anteriormente descritos, usando ratas SD machos y por lo menos uno de los siguientes modelos.

Modelo de dolor inflamatorio agudo Dolor inflamatorio agudo es inducido usando el modelo de carragenano esencialmente como se describe en Field et al. (1997) Br. J. Pharmacol. 121 (8):1513-1522. 100-200 µ? de solución de carragenano al 1-2% se inyecta en la pata trasera de las ratas. Tres a cuatro horas después de la inyección, la sensibilidad del animales a estímulos térmicos y mecánicos se prueba usando los métodos anteriormente descritos. Un compuesto de prueba (0.01 a 50 mg/kg) se administra al animal, antes de la prueba, o antes de la inyección de carragenano. El compuesto se puede administrar oralmente o a través de cualquier vía parenteral, o tópicamente sobre la pata. Los compuestos que alivian dolor en este modelo dan por resultado una reducción estadísticamente significativa en alodinia mecánica y/o hiperalgesia térmica.

Modelo de dolor inflamatorio crónico Dolor inflamatorio crónico es inducido usando uno de los siguientes protocolos: 1. Esencialmente como se describe Bertorelli et al. (1999) Br. J. Pharmacol. 128(6): 1252-1258, y Stein et a. (1988) Pharmacoil. Biochem.

Behav. 31 (2):455-51 , 200 µ? de adyuvante completo de Freund (0.1 mg de M. tuberculosis muerta y secada con calor) se inyecta a la pata trasera de la rata: 100 µ? en la superficie dorsal y 100 µ? en la superficie plantar. 2. Esencialmente como se describe en Abbadie et al. (1994) J Neurosci. 14(10):5865-5871 , a las ratas se inyecta 150 µ? de CFA (1.5 mg) en la articulación tibio-tarsal. Antes de la inyección con CFA en cualquier protocolo, la sensibilidad de línea basal individual a estimulación mecánica y térmica de las patas posteriores del animal se obtiene para cada animal experimental. Después de la inyección de CFA, las ratas son probadas para hiperalgesia térmica, alodinia mecánica e hiperalgesia mecánica como se describió antes. Para verificar el desarrollo de síntomas, las ratas se someten a prueba los días 5, 6, y 7 después de inyección con CFA. El día 7, los animales se tratan con un compuesto de prueba, morfina o vehículo. Una dosis oral de morfina de 1-5 mg/kg es adecuada como control positivo. Típicamente, se usa una dosis de 0.01-50 mg/kg de compuesto de prueba. Los compuestos se pueden administrar como un solo bolo antes de la prueba o una vez o dos veces o tres veces al día, durante varios días antes de la prueba. Los fármacos se administran oralmente o a través de cualquier vía parenteral, o aplicar tópicamente al animal. Los resultados se expresan como por ciento de eficacia potencial máxima (MPE). 0% de MPE se define como efecto analgésico del vehículo, 100% de MPE se define como un retorno del animal a sensibilidad de línea basal de pre-CFA. Los compuestos que alivian dolor en este modelo dan por resultado una MPE de por lo menos 30%.

Modelo de dolor neuropático crónico Dolor neuropático crónico es inducido usando la lesión de constricción crónica (CCI) al nervio ciático de la rata esencialmente como se describe en Bennett y Xie (1988) Pain 33:87-107. Las ratas son anestesiadas (v.gr., con una dosis intraperitoneal de 50-65 mg/kg de pentobarbital con dosis adicionales administradas según es necesario). El aspecto lateral de cada extremidad posterior es rasurada y desinfectada. Usando técnica aséptica, se hace una incisión en el aspecto lateral de la extremidad posterior a nivel de apretamiento ligero. El bíceps femoris es contundentemente separado y el nervio ciático es expuesto. En una extremidad posterior de cada animal, cuatro ligaduras sueltamente amarradas se hacen alrededor del nervio ciático aproximadamente 1 -2 mm de separación. En el otro lado el nervio ciático no es ligado y no es manipulado. El músculo se cierra con patrón continuo y la piel se cierra con grapas para heridas o suturas. Se deja que las ratas accedan a alodinia mecánica, hiperalgesia mecánica e hiperalgesia térmica como se describió antes. Los compuestos que alivian dolor en este modelo dan por resultado una reducción estadísticamente significativa en alodinia mecánica, hiperalgesia mecánica y/o hiperalgesia térmica cuando se administran (0.01-50 mg/kg, por vía oral, parenteral o tópica) inmediatamente antes de probar como un solo bolo, o durante varios días: una vez o dos veces o tres veces al día antes de la prueba.

Claims (1)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES 1.- Un compuesto de la fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable o hidrato del mismo, en donde representa un heteroarilo de 5 ó 6 miembros fusionado que contiene 1 , 2 ó 3 heteroátomos independientemente escogidos de O, N y S, con los átomos de anillo restantes siendo carbono, en donde el heteroarilo fusionado es sustituido con de 0 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de amino, hidroxi, alquilo de C-i-C6, hidroxialquilo de Ci-C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C2, halogenoalquilo de C1-C6, alcoxi de C1-C6, éter alquilico de C2-C6, alcanoiloxi de C C6, alquilsulfonilamino de C1-C6, alcanoilamino de ?t?ß, y mono- o di-(alquilo de Ci-C6)amino¡ Ar es fenilo o un heteroarilo de 5 ó 6 miembros, cada uno de los cuales es sustituido con de 0 a 4 sustituyentes que son independientemente escogidos de halógeno, ciano, amino, nitro, alquilo de C1-C6, alquenilo de C2-C6, alquinilo de C2-C6, halogenoalquilo de C^Ce, hidroxialquilo de C1-C6, alcoxi de C C6, halogenoalcoxi de C C6, (cicloalquilo de C3-C7)alqu¡lo de C0-C4, y mono- o di-(alquilo de Ci-C6)amino; y R3 representa de 0 a 4 sustituyentes que son independientemente escogidos de halógeno, hidroxi, ciano, amino, nitro, alquilo de C1-C6, alquenilo de C2-C6, alquinilo de C2-C6, halogenoalquilo de CrC6, hidroxialquilo de Ci-C6, alcoxi de Ci-C6, halogenoalcoxi de C1-C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C4, mono-o di-(alquilo de C C6)amino, y mono- o di-(alquilo de CrC6)aminosulfonilo. 2.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el compuesto tiene la fórmula: en donde: representa un heteroarilo de 5 ó 6 miembros fusionado que contiene 1 , 2 ó 3 heteroátomos independientemente escogidos de O, N y S, y que es sustituido con de 0 a 2 sustituyentes independientemente escogidos de amino, hidroxi, alquilo de C C6, hidroxialquilo de C1-C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C2, halogenoalquilo de C1-C6, alcoxi de Ci-C6, éter alquílico de C2-C6, alcanoiloxi de C1-C6, alquilsulfonilamino de C1-C6, alcanoilamino de C1-C6, y mono- o di-(alquilo de CrC6)amino; X es N o CH que es opcionalmente sustituido con un sustituyente representado por R-i; R1 representa de 0 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, ciano, amino, nitro, alquilo de C1-C6, alquenilo de C2-C6, alquinilo de C2-C6, halogenoalquilo de C-i-C6, hidroxialquilo de C C6, alcoxi de C1-C6, halogenoalcoxi de C C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C4, y mono- o di-(alquilo de C C6)amino; y R3 representa de 0 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, hidroxi, ciano, amino, nitro, alquilo de CrC6, alquenilo de C2-C6, alquinilo de C2-C6, halogenoalquilo de C1-C6, hidroxialquilo de C^-Ce, alcoxi de C1-C6, halogenoalcoxi de C C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C4, mono-o di-(alquilo de Ci-C6)amino, y mono- o di-(alquilo de CrC6)aminosulfonilo. 3.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, caracterizado además porque es un heteroarilo de 5 miembros que es sustituido con de 0 a 2 sustituyentes independientemente escogidos de alquilo de C1-C4, (cicloalquilo de C3-Cs)alquilo de Co-C2 y halogenoalquilo de C1-C4. 4.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado además porque en donde R2 es hidrógeno, alquilo de C1-C4, halogenoalquilo de C1-C4 o cicloalquilo de C3-C5. 5.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, caracterizado además porque es un heteroarilo de 6 miembros que es sustituido con de 0 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de hidroxi, alquilo de C C6, (cicloalquilo de C3-C7)alquilo de C0-C2, halogenoalquilo de C C6, hidroxialquilo de C C6, alcoxi de C-1-C6, mono-(alquilo de C-i-C6)amino, alcanoilamino de C1-C6 o alquilsulfonilamino de C C6. 6.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado además porque en donde R4 representa de 1 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de hidroxi, alquilo de C1-C4, (cicloalquilo de C3-C5)alquilo de C0-C2, halogenoalquilo de C C4, hidroxialquilo de C1-C4, alcoxi de Ci-C4, mono-(alquilo de CrC4)amino, alcanoilamino de C1-C4 o alquilsulfonilamino de C 7.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 2-6, caracterizado además porque Ri representa de 1 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, ciano, alquilo de CrC4 y halogenoalquilo de C1-C4. 8.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado además porque un sustituyente representado por R1 es un halógeno o ciano en la posición para. 9. - El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 7 o la reivindicación 8, caracterizado además porque representa exactamente un sustituyente. 10. - El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-9, caracterizado además porque R3 representa de 1 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, ciano, alquilo de C-|-C6, halogenoalquilo de C C6 y alcoxi de C1-C6. 1 1.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el compuesto tiene la fórmula: en donde: R2 es hidrógeno, alquilo de C1-C4, halogenoalquilo de CrC4 o cicloalquilo de C3-C5; R3 representa de 1 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, ciano, alquilo de C1-C4, halogenoalquilo de C1-C4 y alcoxi de C1-C4; y R5 es halógeno o CN. 12.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el compuesto tiene la fórmula: en donde: R3 representa de 1 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, ciano, alquilo de C1-C4, halogenoalquilo de C-i-C4 y alcoxi de CrC4; y R5 es halógeno o CN. 13.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el compuesto tiene la fórmula: en donde: R2 es hidrógeno, alquilo de C1-C4, halogenoalquilo de C1-C4 o cicloalquilo de C3-C5; R3 representa de 1 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeno, ciano, alquilo de C1-C4, halogenoalquilo de C1-C4 y alcoxi de C1-C4; y R5 es halógeno o CN. 14.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque el compuesto tiene la fórmula: en donde: R3 representa de 1 a 3 sustituyentes independientemente escogidos de halógeo, ciano, alquilo de C-1-C4, halogenoalquilo de C1-C4 y alcoxi de CrC4; R4 representa de 0 a 2 sustituyentes independientemente escogidos de hidroxi, alquilo de C1-C4, (cicloalquilo deC3-C5)alquilo de C0-C2, halogenoalquilo de C1-C4, hidroxialquilo de C1-C4, alcoxi de Ci-C4, mono-(alquilo de Ci-C4)amino, alcanoilamino de C1-C4 o alquilsulfonilamino de C C4; y R5 es halógeno o CN. 15.- El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el compuesto es: 1-(4-bromofen¡l)-9-metil-2-(2,3,4-trifluorofenox¡)-1 ,9-dih¡dro-6H-purin-6-ona; 1-(4-clorofenil)-2-(2,3-difluorofenoxi)-9-metil- ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 1-(4-clorofenil)-2-(2,4-difluorofenoxi)-9-metil-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 1 -(4-clorofenil)-2-[2-fluoro-3-(trifluorometil)fenoxi]-9-metil-1 ,9-dihidro-6H-pur¡n-6-ona; 1-(4-clorofenil)-9-metil-2-(2,3,4-trifluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 1 -(4-clorofenil)-9-metil-2-(2,3,5-trifluorofenoxi)- ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 1 -(4-clorofenil)-9-metil-2-(2,3,6-trifluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 1-(4-clorofeni -g-metil^^^.S-trifluorofenoxiJ- ^-dihidro-eH-purin-e-ona; 1-(4-clorofenil)-9-metil-2-(2,4,6-trifluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 1 -(4-clorofeni -g-metil^-ÍS^.S-trifluorofenox -l .g-dihidro-eH-purin-e-ona; 1-(4- fluorofen¡l)-2-[2-fluoro-3-(tr¡fluorometil)fenoxi]-9-met¡l-1 ,9-dihidro-6H-pur¡n-6-ona; 1-(4-fluorofenil)-2-[3-fluoro-5-(tr'ifluoromet¡l)fenox¡]-9-metil-1 ,9-dih¡dro-6H-purin-6-ona; 1-(4-fluorofen¡l)-9-metil-2-(2,3,4-tr¡fluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 1-(4-fluorofenil)-9-metil-2-(2,3,5-trifluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-pur¡n-6-ona; 1 -(4-fluorofen¡l)-9-metil-2-(2,3,6-tr¡fluorofenox¡)-1 ,9-dih¡dro-6H-purin-6-ona; 1 -(4-fluorofenil)-9-metil-2-(2,4,5-tr¡fluorofenox¡)-1 ,9-dih¡dro-6H-purin-6-ona; 1 -(4-fluorofenil)-9-metil-2-(2,4,6-tnfluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 1-(4-fluorofenil)-9-met¡l-2-[3-(trifluorometil)fenox¡]-1 ,9-d¡hidro-6H-pur¡n-6-ona; 1-(6-clorop¡r¡din-3-il)-9-metil-2-(3,4,5-tr¡fluorofenox¡)-1 H-purin-6(9H)-ona; 2-(2,3-difluoro-4-metoxifenox¡)-1 -(4-fluorofenil)-9-metil-1 ,9-d¡hidro-6H-punn-6-ona; 2-(2,3-difluoro-4-metoxifenox¡)-9-etil-1-(4-fluorofenil)-1 ,9-dih¡dro-6H-purin-6-ona¡ 2-(2,3-difluorofenoxi)-1-(4-fluorofen¡l)-9-met¡l-1 ,9-dih¡dro-6H-purin-6-ona; 2-(2,3-difluorofenoxi)-9-et¡l-1-(4-fluorofenil)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 2-(2,3-d¡metox¡fenoxi)-3-(4-fluorofen¡l)-7-met¡ltieno[3,2-d]pir¡midin-4(3H)-ona; 2-(2,3-dimetilfenox¡)-1-(4-fluorofenil)-9-metil-1 ,9-d¡h¡dro-6H-purin-6-ona¡ 2-(2,4-d¡fluorofenoxi)-1 -(4-fluorofenil)-9-metil-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 2-(2,4-d¡fluorofenoxi)-3-(4-fluorofenil)p¡r¡do[3,2-d]p¡rim¡d¡n-4(3H)-ona; 2-(2,4-difluorofenoxi)-9-etil-1-(4-fluorofenil)-1 ,9-dihidro-6H-punn-6-ona; 2-(2,6-dimetilfenoxi)-1-(4-fluorofenil)-9-metil-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 2-(2-cloro-4-fluorofenoxi)-1-(4-clorofenil)-9-metil-1 ,9-d¡hidro-6H-purin-6-ona; 2-(2-cloro-4-fluorofenoxi)-1 -(4-fluorofenil)-9-metil- ,9-d¡hidro-6H-purin-6-ona; 2-(2-etilfenoxi)-3-(4-fluorofenil)-7-metiltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona; 2-(4-cloro-2-fluorofenox¡)-1 -(4-clorofen¡l)-9-metil-1 ,9-dih¡dro-6H-purin-6-ona; 2-(4-cloro-2- fluorofenox¡)-1-(4-fluorofenil)-9-met¡l-1 ,9-d¡h¡dro-6H-pur¡n-6-ona; 2-(4-cloro-2-fluorofenoxi)-3-(4-clorofenil)-7-metiltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona; 2-(4-cloro-2-fluorofenox¡)-3-(4-fluorofen¡l)-7-met¡lt¡eno[3,2-d]pir¡m¡d¡n-4(3H)-ona; 2-(4-cloro-2-fluorofenoxi)-9-et¡l-1-(4-fluorofenil)-1 ,9-dihidro-6H-pur¡n-6-ona; 2,3-difluoro-4-{[1-(4-fluorofen¡l)-9-met¡l-6-oxo-6,9-dih¡dro-1 H-pur¡n-2-il]oxi}benzonitrilo; 2-[2-cloro-3-(trifluorometil)fenoxi]-3-(4-fluorofenil)pirido[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona; 3-(4-clorofenil)-2-(2,4-difluorofenoxi)-7-metiltieno[3,2-d]pir¡midin-4(3H)-ona; 3-(4-clorofen¡l)-7-metil-2-(2,3,4-trifluorofenoxi)tieno[3,2-d]pir¡m¡din-4(3H)-ona; 3-(4-fluorofen¡l)-2-(2,3,4-trifluorofenoxi)pir¡do[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona; 3-(4-fluorofenil)-2-(2-isopropilfenoxi)-7-met¡ltieno[3,2-d]pirim¡d¡n-4(3H)-ona; 3-(4-fluorofenil)-2-(2-metoxifenoxi)-7-met¡ltieno[3,2-d]p¡rimidin-4(3H)-ona; 3-(4-fluorofenil)-2-[3-(tr¡fluorometil)fenoxi]pirido[3,2-d]p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona; 3-(4-fluorofen¡l)-2-[3-fluoro-5-(trifluorometil)fenoxi]pirido[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona; 3-(4-fluorofen¡l)-4-oxo-2-(2,3,4-trifluorofenoxi)-3I4-dihidrotieno[3,2-d]pinmidine-7-carbonitrilo; 3-(4-fluorofenil)-7-met¡l-2-(2,3I4-tr¡fluorofenox¡)tieno[3,2-d]pirim¡din-4(3H)-ona¡ 3-(4-fluorofen¡l)-7-met¡l-2-(2,3,6-tr¡fluorofenox¡)tieno[3,2-d]p¡rim¡din-4(3H)-ona; 3-(4-fluorofenil)-7-metil-2-(2-metilfenoxi)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona; 4-{[1-(4-clorofen¡l)-9-met¡l-6-oxo-6,9-dih¡dro-1 H-purin-2-il]oxi}-2,3-d¡fluorobenzon¡trilo; 5-(2,3-difluorofenoxi)-6-(4-fluorofen¡l)[1 ,3]tiazolo[5,4-d]p¡r¡m¡d¡n-7(6H)-ona; 5-(4-cloro-2-fluorofenox¡)-6-(4-fluorofenil)[1 ,3]t¡azolo[5,4-d]pir¡midin-7(6H)-ona; 5-(9-met¡l-6-oxo-2-(3,4,5-trifluorofenoxi)-6H-purin-1(9H)-¡l)p¡colinonitr¡lo; 5-[2-cloro-3-(trifluorometil)fenox¡]-6-(4-fluorofen¡l)[1 ,3]t¡azolo[5,4-d]pir¡mid¡n-7(6H)- ona; 6-(4-fluorofen¡l)-5-(2,3,4-trifluorofenox¡)[1 ,3]t¡azolo[5,4-d]pir¡m¡d¡n-7(6H)-ona; 6-(4-fluorofen¡l)-5-(2,3,5-tr¡fluorofenox¡)[1 ,3]t¡azolo[5,4-d]pirimidin-7(6H)-ona; 6-(4-fluorofen¡l)-5-(2,4,5-trifluorofenox¡)[1 ,3]tiazolo[5,4-d]pirimidin-7(6H)-ona; 6-(4-fluorofenil)-5-(3-(trifluorometN)fenoxi)tiazolo[5,4-d]pirimidin-7(6H)-ona; 6-(4-fluorofenil)-5-(3,4,5-trifluorofenoxi)[1 ,3]tiazolo[5,4-d]pirimidin-7(6H)-ona; 6-(4-fluorofen¡l)-5-[2-fluoro-3-(tr¡fluorometil)fenox¡][1 ,3]tiazolo[5,4-d]p¡hmidin-7(6H)-ona; 6-(4-fluorofenil)-5-[3-fluoro-5-(tr¡fluorometil)fenoxi][1 ,3]tiazolo[5,4-d]pirimidin-7(6H)-ona; 9-etil-1 -(4-fluorofenil)-2-(2,3,4-trifluorofenoxi)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; 9-et¡l-1-(4-fluorofenil)-2-(2,3,5-trifluorofenox¡)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona¡ 9-etil-1 -(4-fluorofen¡l)-2-(2,4,5-trifluorofenox¡)-1 ,9-dihidro-6H-purin-6-ona; o 9-et¡l-1 -(4-fluorofen¡l)-2-(2,4,6-tr¡fluorofenox¡)-1 ,9-d¡hidro-6H-purin-6-ona. 16. - El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-15, caracterizado además porque el compuesto no presenta actividad agonista detectable en una prueba in vitro de receptor de agonismo de capsaicina. 17. - El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-16, caracterizado además porque el compuesto tiene un valor de Cl50 de 1 micromolar o menos en una prueba de movilización de calcio de receptor de capsaicina. 18. - Una composición farmacéutica, que comprende por lo menos un compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-17 en combinación con un vehículo o excipiente fisiológicamente aceptable. 19. - El uso de por lo menos un compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-17, para la elaboración de un medicamento útil para reducir conductancia de calcio de un receptor de capsaicina celular en una célula que expresa un receptor de capsaicina en un animal. 20. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 9, en donde la célula es una célula neuronal. 21. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 19, en donde la célula es una célula urotelial. 22. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 19, en donde el compuesto o sal o hidrato del mismo está presente dentro de un fluido corporal del animal. 23. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 22, en donde el compuesto o sal o hidrato del mismo está presente en la sangre del animal a una concentración de 5 micromolar o menos. 24. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 22, en donde el compuesto o sal o hidrato del mismo está presente en la sangre del animal a una concentración de 1 micromolar o menos. 25.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 19, en donde el animal es un humano. 26.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 19, en donde el medicamento está adaptado para ser oralmente administrable. 27. - Un método para inhibir unión de ligando de vainilloide a un receptor de capsaicina in vitro, el método comprende poner en contacto receptor de capsaicina con por lo menos un compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-17, bajo condiciones y en una cantidad suficiente para inhibir detectablemente unión de ligando de vainilloide a receptor de capsaicina. 28. - El uso de por lo menos un compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-17, en la elaboración de un medicamento útil para inhibir unión de ligando de vainilloide a receptor de capsaicina en un paciente, en donde el compuesto está en una cantidad suficiente para inhibir detectablemente unión de ligando de vainilloide a células que expresan un receptor de capsaicina clonado in vitro. 29. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 28, en donde el paciente es un humano. 30.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 28, en donde el compuesto o sal o hidrato del mismo está presente en la sangre del paciente a una concentración de 5 micromolar o menos. 31. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 28, en donde el compuesto o sal o hidrato del mismo está presente en la sangre del paciente a una concentración de 1 micromolar o menos. 32. - El uso de un compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 -17 para la fabricación de un medicamento útil para el tratamiento de una condición que responde a modulación de receptor de capsaicina. 33.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 32, en donde la condición es dolor; asma; enfermedad pulmonar obstructiva crónica; tos; hipo; obesidad; síntomas menopáusicos; incontinencia urinaria; vejiga sobrerreactiva; exposición a capsaicina; quemadura o irritación debido a exposición a calor; quemadura o irritación debido a exposición a la luz; quemadura, broncoconstricción o irritación debido a exposición a gas lacrimógeno, agentes infecciosos, contaminantes del aire o aspersión de pimienta; o quemadura o irritación debido a exposición a ácido. 34.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 32, en donde la condición es dolor y el compuesto o sal o hidrato del mismo está presente en la sangre del paciente a una concentración de 5 micromolar o menos. 35. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 32, en donde la condición es dolor y el compuesto o sal o hidrato del mismo está presente en la sangre del paciente a una concentración de 1 micromolar o menos. 36. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 32, en donde el paciente padece dolor neuropático. 37.- El uso como el que se reclama en la reivindicación 36, en donde el dolor está asociado con una condición seleccionada de: síndrome de dolor postmastectomía, dolor de muñón, dolor de extremidad fantasma, dolor neuropático oral, dolor de muelas, neuralgia postherpética, neuropatía diabética, distrofia simpática refleja, neuralgia trigeminal, osteoartritis, artritis reumatoide, fibromialgia, síndrome de Guillain-Barre, meralgia parestética, síndrome de boca ardiente, neuropatía periférica bilateral, causalgia, neuritis, neuronitis, neuralgia, neuropatía relacionada con SIDA, neuropatía relacionada con esclerosis múltiple, dolor relacionado con lesión de médula espinal, dolor relacionado con cirugía, dolor musculoesquelético, dolor de espalda, dolor de cabeza, migraña, angina, trabajo de parto, hemorroides, dispepsia, dolores de Charcot, gases intestinales, menstruación, cáncer, exposición a veneno, síndrome de intestino irritable, enfermedad intestinal inflamatoria y trauma. 38. - El uso como el que se reclama en la reivindicación 32, en donde el paciente es un humano. 39. - El uso de compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-17, para la elaboración de un medicamento útil para el tratamiento de comezón en un paciente. 40. - El compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el compuesto es radiomarcado. 41. - Un método para determinar la presencia o ausencia de receptor de capsaicina en una muestra, que comprende los pasos de: (a) poner en contacto una muestra con un compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-17, bajo condiciones que permiten la unión del compuesto o sal o hidrato del mismo a receptor de capsaicina; y (b) detectar una señal indicativa de un nivel de unión del compuesto o sal o hidrato del mismo a receptor de capsaicina, y a partir de ello determinar la presencia o ausencia de receptor de capsaicina en la muestra. 42.- El método de conformidad con la reivindicación 41 , caracterizado además porque el compuesto o sal o hidrato del mismo es radiomarcado, y en donde el paso de detección comprende los pasos de: (i) separar compuesto no unido de compuesto unido; y (ii) detectar la presencia o ausencia de radiomarcador unido en la muestra. 43.- Una preparación farmacéutica empacada, que comprende: (a) una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 18 en un contenedor; y (b) instrucciones para usar la composición para tratar dolor. 44. - Una preparación farmacéutica empacada, que comprende: (a) una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 18 en un contenedor; y (b) instrucciones para usar la composición para tratar tos o hipo. 45. - Una preparación farmacéutica empacada, que comprende: (a) una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 18 en un contenedor; y (b) instrucciones para usar la composición para tratar obesidad. 46. - Una preparación farmacéutica empacada, que comprende: (a) una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 18 en un contenedor; y (b) instrucciones para usar la composición para tratar incontinencia urinaria o vejiga sobrerreactiva. 47. - El uso de (i) por lo menos un compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-17, y (ii) ibuprofeno, para la elaboración de un medicamento útil para el tratamiento de dolor en un paciente. 48. - Un método para reducir conductancia de calcio de un receptor de capsaicina celular in vitro, que comprende poner en contacto una célula que expresa un receptor de capsaicina con por lo menos un compuesto o sal o hidrato del mismo de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-17, y reducir así la conductancia de calcio del receptor de capsaicina.