MX2008000659A - Nueva combinacion de anticuerpo contra madcam y de inhibidor de caspasa antifibrotico. - Google Patents

Abstract

La invencion se refiere a una nueva combinacion de un anticuerpo contra MAdCAM con un agente contra la fibrosis, tal como un inhibidor de proteasas, preferiblemente un inhibidor de caspasa; la invencion tambien se refiere a composiciones farmaceuticas que comprenden la composicion de la invencion, y el uso de la combinacion para el tratamiento de la fibrosis hepatica.

Description

NUEVA COMBINACIÓN DE ANTICUERPO CONTRA MADCAM Y DE INHIBIDOR DE CASPASA ANTIFIBROTICO MEMORIA DESCRIPTIVA La invención se refiere a una nueva combinación de un anticuerpo contra MAdCAM con un agente contra la fibrosis, tal como un inhibidor de proteasas, preferiblemente un inhibidor de caspasa. La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden la combinación de la invención, y el uso de la combinación para el tratamiento de la fibrosis hepática. La enfermedad hepática crónica es responsable de más de 1 ,4 millones de muertes anuales (WHO (OMS), World Health Report 2004) y en los Estados Unidos está entre las diez causas principales de muerte por enfermedad (CDC, National Center for Health Statistics, 2004). La fibrosis hepática, que es resultado de la inflamación hepática persistente, si no se trata tiene consecuencias graves a largo plazo para la morbidez y mortandad de los pacientes. La fibrosis hepática es uno de los procesos que se produce cuando el hígado es dañado. Tal daño puede ser resultado, por ejemplo, de actividad vírica (por ejemplo, hepatitis crónica de tipos B o C) u otras infecciones hepáticas (por ejemplo, parásitos, bacterias); sustancias químicas (por ejemplo, fármacos, drogas, exceso de alcohol, exposición a contaminantes); procesos inmunológicos (por ejemplo, hepatitis autoinmunitaria); trastornos metabólicos (por ejemplo, trastornos en el almacenamiento de lípidos, glucógeno o metales); o crecimiento canceroso (cáncer hepático primario o secundario). La fibrosis es tanto un signo de daño hepático como un contribuyente potencial a la insuficiencia hepática por medio de la cirrosis hepática progresiva. Existe una grave necesidad médica no cubierta. La presente invención se refiere a una combinación de un anticuerpo contra la molécula de adhesión celular adresina de las mucosas (MAdCAM) con un agente contra la fibrosis, preferiblemente un inhibidor de proteasas, más preferiblemente un inhibidor de caspasa, que es beneficioso para el tratamiento de la fibrosis hepática. La molécula de adhesión celular adresina de las mucosas (MAdCAM) es un miembro de la superfamilia de inmunoglobulinas de los receptores de adhesión celular. Es una de las moléculas de adhesión implicadas en el reclutamiento de linfocitos a los tejidos cuando se requiere, mediante interactuaciones con una molécula de integrina en la superficie de los linfocitos. Se ha demostrado que los anticuerpos que inhiben la unión de MAdCAM a su compañero de unión integrina, a4ß7, por ejemplo, los anticuerpos contra MAdCAM (por ejemplo MECA-367; documentos US 5.403.919. US 5.538.724) o los anticuerpos contra a4ß7 (por ejemplo Act-1 ; documento US 6.551.593), pueden inhibir la extravasación de leucocitos al intestino inflamado y, por lo tanto, pueden ser beneficiosos en el tratamiento de enfermedad inflamatoria del intestino (IBD). Un aspecto de la invención es una combinación de un anticuerpo contra MAdCAM o una porción de unión de antígenos del mismo con un agente contra la fibrosis. Preferiblemente, el agente contra la fibrosis es un inhibidor de proteasas, más preferiblemente un inhibidor de caspasa, incluso más preferiblemente el inhibidor de caspasa es un compuesto de la fórmula I: El compuesto de la fórmula I Fórmula I en la que A, B, R1 y R2 son tal como se definen más adelante. Preferiblemente, el compuesto de la fórmula I se selecciona de: Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fluoro-4-yodofenil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3')5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-clorofenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6,-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-bromofenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fluorofenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6,-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-trifluorometilfenil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-antril)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-terc-butilfenil)oxamil)alaninil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-trifluorometilfenil)oxamil)alaninil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2,6-difluorofenil)oxamil)alaninil]amino-5-(2',3',5\6'-tetrafluorofenox¡)-4-oxopentano¡co; Acido (3S)-3-[N-(N,-(1-naftil)oxamil)alaninil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(4-metoxifenil)oxamil)alaninil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-tñfluorometilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-terc-butilmetilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N,-(2-bencilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fenilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico. Incluso más preferiblemente, el compuesto es Acido (3S)-3-[N- (N'-(2-terc-butilfenil)oxamil)alaninil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico. En un aspecto de la invención el anticuerpo contra MAdCAM o una porción de unión de antígenos del mismo en la combinación es un anticuerpo o una porción de unión de antígenos del mismo que se une específicamente a MAdCAM. Preferiblemente, el anticuerpo o porción es un anticuerpo monoclonal humano o una porción de unión de antígenos del mismo. Preferiblemente, el anticuerpo o porción posee al menos una de las siguientes propiedades: (a) se une a células humanas; (b) tiene una selectividad por MAdCAM comparada con VCAM o fibronectina al menos 100 veces mayor; (c) se une a MAdCAM humana con una K¿ de 3 x 10"10 M o menor; o (d) inhibe la unión de células que expresan a4ß7 a MAdCAM humana. (e) inhibe el reclutamiento de linfocitos al tejido linfoide gastrointestinal. Preferiblemente, el anticuerpo o porción de unión de antígenos inhibe la unión de MAdCAM humana a a4ß y tiene al menos una de las siguientes propiedades: (a) compite cruzadamente con un anticuerpo de referencia por la unión a MAdCAM; (b) compite con un anticuerpo de referencia por la unión a MAdCAM; (c) se une al mismo epítopo de MAdCAM que un anticuerpo de referencia; (d) se une a MAdCAM sustancialmente con la misma Kd que un anticuerpo de referencia; (e) se une a MAdCAM sustancialmente con la misma velocidad de disociación que un anticuerpo de referencia; en la que el anticuerpo de referencia se selecciona del grupo que consiste en: anticuerpo monoclonal 1.7.2, anticuerpo monoclonal 1.8.2, anticuerpo monoclonal 6.14.2, anticuerpo monoclonal 6.22.2, anticuerpo monoclonal 6.34.2, anticuerpo monoclonal 6.67.1 , anticuerpo monoclonal 6.73.2, anticuerpo monoclonal 6.77.1 , anticuerpo monoclonal 7.16.6, anticuerpo monoclonal 7.20.5, anticuerpo monoclonal 7.26.4, anticuerpo monoclonal 9.8.2, anticuerpo monoclonal 6.22.2-mod, anticuerpo monoclonal 6.34.2-mod, anticuerpo monoclonal 6.67.1 -mod, anticuerpo monoclonal 6.77.1 -mod y anticuerpo monoclonal 7.26.4-mod. En otro aspecto de la invención la región variable de la cadena pesada, la región variable de la cadena ligera o ambas del anticuerpo contra MAdCAM son idénticas al menos en un 90% de la secuencia de aminoácidos a la región o regiones correspondientes de un anticuerpo monoclonal que se selecciona del grupo que consiste en: anticuerpo monoclonal 1.7.2, anticuerpo monoclonal 1.8.2, anticuerpo monoclonal 6.14.2, anticuerpo monoclonal 6.22.2, anticuerpo monoclonal 6.34.2, anticuerpo monoclonal 6.67.1 , anticuerpo monoclonal 6.73.2, anticuerpo monoclonal 6.77.1 , anticuerpo monoclonal 7.16.6, anticuerpo monoclonal 7.20.5, anticuerpo monoclonal 7.26.4, anticuerpo monoclonal 9.8.2, anticuerpo monoclonal 6.22.2-mod, anticuerpo monoclonal 6.34.2-mod, anticuerpo monoclonal 6.67.1-mod, anticuerpo monoclonal 6.77.1-mod y anticuerpo monoclonal 7.26.4-mod. Preferiblemente el anticuerpo se selecciona del grupo que consiste en: (a) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 2 y SEC ID N.°: 4, sin las secuencias de señal; (b) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 6 y SEC ID N.°: 8, sin las secuencias de señal; (c) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 10 y SEC ID N.°: 12, sin las secuencias de señal; (d) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 14 y SEC ID N.°: 16, sin las secuencias de señal; (e) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 18 y SEC ID N.°: 20, sin las secuencias de señal; (f)un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 22 y SEC ID N.°: 24, sin las secuencias de señal; (g)un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 26 y SEC ID N.°: 28, sin las secuencias de señal; (h)un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 30 y SEC ID N.°: 32, sin las secuencias de señal; (i)un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 34 y SEC ID N.°: 36, sin las secuencias de señal; (j)un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 38 y SEC ID N.°: 40, sin las secuencias de señal; (k) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 42 y SEQ ID NO: 44, sin las secuencias de señal; (I) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 46 y SEC ID N.°: 48, sin las secuencias de señal; (m) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 52 y SEC ID N.°: 54, sin las secuencias de señal; (n) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 56 y SEC ID N.°: 58, sin las secuencias de señal; (o) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 60 y SEC ID N.°: 62, sin las secuencias de señal; (p) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 64 y SEC ID N.°: 66, sin las secuencias de señal; y (q) un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos que se describen en SEC ID N.°: 42 y SEC ID N.°: 68, sin las secuencias de señal. En un aspecto de la invención, la lisina del extremo C de la cadena pesada puede escindirse del anticuerpo contra MAdCAM de la combinación. En otro aspecto de la invención, el anticuefo monoclonal o una porción de unión de antígenos del mismo se selecciona de los siguientes anticuerpos: (a) la cadena pesada comprende las secuencias de aminoácidos de las CDR1 , CDR2 y CDR3 de la cadena pesada de un anticuerpo de referencia que se selecciona del grupo que consiste en: 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod y 7.26.4-mod. (b) la cadena ligera comprende las secuencias de aminoácidos de las CDR1 , CDR2 y CDR3 de la cadena ligera de un anticuerpo de referencia que se selecciona del grupo que consiste en: 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod y 7.26.4-mod. (c) el anticuerpo comprende una cadena pesada de (a) y una cadena ligera de (b); y (d) el anticuerpo de (c) en el que las secuencias de aminoácidos de las CDR de la cadena pesada y cadena ligera se seleccionan del mismo anticuerpo de referencia. En otro aspecto de la invención, el anticuerpo monoclonal o porción de unión de antígenos comprende: (a) una cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena pesada de un anticuerpo que se selecciona del grupo que consiste en: 1.7.2 (SEC ID N.°: 2); 1.8.2 (SEC ID N.°: 6); 6.14.2 (SEC ID N.°: 10); 6.22.2 (SEC ID N.°: 14); 6.34.2 (SEC ID N.°: 18); 6.67.1 (SEC ID N.°: 22); 6.73.2 (SEC ID N.°: 26); 6.77.1 (SEC ID N.°: 30); 7.16.6 (SEC ID N.°: 34); 7.20.5 (SEC ID N.°: 38); 7.26.4 (SEC ID N.°: 42); y 9.8.2 (SEC ID N.°: 46); 6.22.2-mod (SEC ID N.°: 52); 6.34.2-mod (SEC ID N.°: 56); 6.67.1-mod (SEC ID N.°: 60); 6.77.1-mod (SEC ID N.°: 64); y 7.26.4-mod (SEC ID N.°: 42); (b) una cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de la región variable de la cadena ligera de un anticuerpo que se selecciona del grupo que consiste en: 1.7.2 (SEC ID N.°: 4); 1.8.2 (SEC ID N.°: 8); 6.14.2 (SEC ID N.°: 12); 6.22.2 (SEC ID N.°: 16); 6.34.2 (SEC ID N.°: 20); 6.67.1 (SEC ID N.°: 24); 6.73.2 (SEC ID N.°: 28); 6.77.1 (SEC ID N.°: 32); 7.16.6 (SEC ID N.°: 36); 7.20.5 (SEC ID N.°: 40); 7.26.4 (SEC ID N.°: 44); y 9.8.2 (SEC ID N.°: 48); 6.22.2-mod (SEC ID N.°: 54); 6.34.2-mod (SEC ID N.°: 58); 6.67.1-mod (SEC ID N.°: 62); 6.77.1-mod (SEC ID N.°: 66); y 7.26.4-mod (SEC ID N.°: 68); o (c) la cadena pesada de (a) y la cadena ligera de (b). Todavía otro aspecto de la invención es una combinación de un anticuerpo contra integrina a4ß7 o porción de unión de antígenos del mismo con un inhibidor de caspasa tal como se define en la presente memoria. Preferiblemente, el anticuerpo inhibe la interacción de MAdCAM con integrina a ß7. Más preferiblemente, el anticuerpo es Act-1 humanizado, también denominado MLN02 (documento WO 01/078779). Otro aspecto de la invención es el uso médico de cualquier combinación descrita en la presente memoria, preferiblemente el uso para el tratamiento de la fibrosis hepática, que incluye pero sin limitación, el tratamiento de daño hepático inducido por hepatitis C, enfermedad hepática alcohólica, esteatohepatitis no alcohólica (NASH). Otro aspecto de la invención es un procedimiento de tratamiento de la fibrosis hepática que incluye, pero sin limitación, el tratamiento de daño hepático inducido por hepatitis C, enfermedad hepática alcohólica, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), usando un anticuerpo contra MAdCAM tal como se describe en la presente memoria y un agente contra la fibrosis tal como se describe en la presente memoria. Otro aspecto de la invención es una composición farmacéutica que comprende cualquier combinación que se describe en la presente memoria con un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable. Otro aspecto de la invención es un producto farmacéutico que comprende un anticuerpo contra MAdCAM tal como se describe en la presente memoria y un agente contra la fibrosis tal como se describe en la presente memoria para uso simultáneo, separado o secuencial. Un aspecto adicional de la invención es un kit que comprende un anticuefo contra MAdCAM tal como se describe en la presente memoria y un agente contra la fibrosis tal como se describe en la presente memoria. El agente contra la fibrosis en la combinación de la invención es preferiblemente un inhibidor de proteasas, más preferiblemente un inhibidor de caspasa, e incluso más preferiblemente un compuesto de la fórmula I Fórmula I en la que A es un aminoácido natural o no natural de las Fórmulas lla-i: B es un átomo de hidrógeno, un átomo de deuterio, alquilo, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, 2-benzoxazolilo, 2-oxazolilo sustituido, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo sustituido), (CH2)n-(heteroarilo), (CH2)n-(heteroarilo sustituido), halometilo, CO2R12, CONR13R14, CH2ZR15, CH2OCO(arilo), CH2OCO(heteroarilo), o CH2OPO(R16)R17, donde Z es un átomo de oxígeno o azufre, o B es un grupo de las Fórmulas llla-c: R1 es alquilo, cicloalquilo, (cicloalquil)alquilo, fenilo, fenilo sustituido, fenilalquilo, fenilalquilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, (1 ó 2 naftil)alquilo, (1 ó 2 naftil)alquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, (heteroaril)alquilo, (heteroaril)alquilo sustituido, R1a(R1b)N, o R1cO; y R2 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, (cicloalquil)alquilo, fenilo, fenilo sustituido, fenilalquilo, fenilalquilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, (1 ó 2 naftil)alquilo, o (1 ó 2 naftil)alquilo sustituido; Y en el que: R1a y R1b son independientemente hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, (cicloalquil)alquilo, fenilo, fenilo sustituido, fenilalquilo, fenilalquilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, (1 ó 2 naftil)alquilo, (1 ó 2 naftil)alquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, (heteroaril)alquilo, o (heteroaril)alquilo sustituido, con la condición de que R1a y R1b no pueden ser ambos hidrógeno; R1c es alquilo, cicloalquilo, (cicloalquil)alquilo, fenilo, fenilo sustituido, fenilalquilo, fenilalquilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, (1 ó 2 naftil)alquilo, (1 ó 2 naftil)alquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, (heteroaril)alquilo, o (heteroaril)alquilo sustituido; R3 es alquilo cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, (CH2)n-NH2) (CH2)NHCOR9, (CH2)n-N(C=NH)NH2, (CH2)m-C02R2, (CH2)m-OR10, (CH2)m-SR11, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo,(CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo) o (CH2)n-(heteroarilo), en los que heteroarilo incluye piridilo, tienilo, furilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, pirazinilo, pirimidilo, triazinilo, tetrazolilo, e indolilo; R3a es hidrógeno o metilo, o R3 y R3a tomados conjuntamente son -(CH2)d- donde d es un número entero de 2 a 6; R4 es fenilo, fenilo sustituido, (CH2)m-fenilo, (CH2)m-(fenilo sustituido), cicloalquilo, o cicloalquilo benzocondensado; R5 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R6 es hidrógeno, flúor, oxo, alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo), OR10, SR11, o NHCOR9; R7 es hidrógeno, oxo (es decir, =O), alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R8 es alquilo inferior, cicloalquilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo), o COR9; R9 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo), OR12, o NR13R14; R10 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R11 es alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R12 es alquilo inferior, cicloalquilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R13 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R14 es hidrógeno o alquilo inferior; o R13 y R14 tomados conjuntamente forman un anillo carbocíclico o heterocíclico de cinco a siete miembros, tal como morfolina, o piperazina sustituida en N; R15 es fenilo, fenilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, heteroarilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo), o (CH2)n-(heteroarilo); R16 o R17 son independientemente alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, fenilalquilo, fenilalquilo sustituido, o (cicloalquil)alquilo; R18 y R19 son independientemente hidrógeno, alquilo, fenilo, fenilo sustituido, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o R18 y R 9 tomados conjuntamente son -(CH=CH)2-; R20 es hidrógeno, alquilo, fenilo, fenilo sustituido, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido); R21, R22 y R23 son independientemente hidrógeno, o alquilo; X es CH2, (CH2)2, (CH2)3, o S; Y1 es O o NR23; Y2 es CH2, O, o NR23; a es 0 ó 1 y b es 1 ó 2, con la condición de que cuando a es 1 entonces b es 1 ; c es 1 ó 2, con la condición de que cuando c es 1 entonces a es 0 y b es 1 ; m es 1 ó 2; y n es 1 , 2, 3, o 4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Tal como se usa en la presente memoria, el término "alquilo" quiere decir una cadena lineal o ramificada de Ci a C-?0 carbonos, tal como metilo, etilo, terc-butilo, iso-propilo, n-octílo, y similares. La expresión "alquilo inferior" quiere decir una cadena lineal o ramificada de Ci a C6 carbonos, tal como metilo, etilo, iso-propilo, y similares. La expresión "cicloalquilo" quiere decir un anillo mono-, bi-, o tricíclico que está o completamente saturado o parcialmente insaturado. Ejemplos de un anillo de ese tipo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciciohexilo, cicioheptilo, adamantilo, ciclooctilo, cis o trans decalina, biciclo[2.2.1]hept-2-eno, ciclohex-1 -enilo, ciclopent-1 -enilo, 1 ,4-ciclooctadienilo, y similares. El término "(cicloalquil)alquilo" quiere decir el grupo alquilo definido anteriormente sustituido con uno de los anillos cicloalquilo anteriores. Ejemplos de un grupo de ese tipo incluyen (ciclohexil)metilo, 3-(ciclopropil)-n-propilo, 5-(ciclopentil)hexilo, 6-(adamantil)hexilo, y similares. La expresión "fenilo sustituido" especifica un grupo fenilo sustituido con uno o más sustituyentes que se eligen de halógeno, hidroxi, hidroxi protegido, ciano, nitro, trifluorometilo, alquilo, alcoxi, acilo, aciloxi, carboxi, carboxi protegido, carboximetilo, carboximetilo protegido, hidroximetilo, hidroximetilo protegido, amino, amino protegido, amino monosustituido, amino monosustituido protegido, amino disustituido, carboxamida, carboxamida protegida, N-(alquilo inferior)carboxamida, N-((alquilo inferior)sulfonil)amino, N-(fenilsulfonil)amino o con un grupo fenilo sustituido o no sustituido, de tal forma que en este último caso se produce un grupo bifenilo o naftilo, o en el que dos sustituyentes alquilo adyacentes del anillo fenilo sustituido tomados conjuntamente forman un cicloalquilo proporcionando, por ejemplo, tetrahidronaftilo o indanilo. Ejemplos de la expresión "fenilo sustituido" incluyen un grupo mono-, di-, tri-, tetra, o penta(halo)fenilo tal como 2-, 3-, o 4-clorofenilo, 2,6-diclorofenilo, 2,5-diclorofenilo, 3,4-diclorofenilo, 2-, 3- o 4-bromofenilo, 3,4-dibromofenilo, 3-cloro-4-fluorofenilo, 2-, 3- o 4-fluorofenílo, 2,4,6-trifluorofenilo, 2,3,5,6-tetrafluorofenilo, 2,3,4,5-tetrafluorofenilo, 2,3,4,5,6-pentafluorofenilo, y similares; un grupo mono o di(hidroxi)fenilo tal como 2-, 3-, o 4-hidroxifenilo, 2,4-dihidroxifenilo, sus derivados de hidroxi protegidos y similares; un grupo nitrofenilo tal como 2-, 3-, o 4-nitrofenilo; un grupo cianofenilo, por ejemplo, 2-, 3-, o 4-cianofenilo; un grupo mono o di(alquil)fenilo tal como 2-, 3-, o 4-etilfenilo, 2-, 3-, o 4-(n-propil)fenilo y similares; un grupo mono o dí(alcoxi)fenilo, por ejemplo, 2,6-dimetoxifenilo, 2-, 3-, o 4-(iso-propoxi)fenilo, 2-, 3-, o 4-(t-butoxi)fenilo, 3-etoxi-4-metoxifenilo y similares; 2-, 3-, o 4-(hidroximetil protegido)fenilo o 3,4-di(hidroximetil)fenilo; un mono- o di(aminometil)fenilo o (aminometil protegido)fenilo tal como 2-, 3-o 4-(aminometil)fenilo o 2,4-(aminometil protegido)fenilo; o un mono- o di(N-(metilsulfonilamino))fen¡lo tal como 2-, 3-, o 4-(N-(metilsulfonilamino))fenilo, También la expresión "fenilo sustituido" representa grupos fenilo disustituidos en los que los sustituyentes son diferentes, por ejemplo, 3-metil-4-hidroxifenilo, 3-hidroxi-4-nitrofenilo, 2-hídroxi-4-clorofenilo, y similares. El término "fenilalquilo" quiere decir uno de los grupos fenilo anteriores unido a uno de los grupos alquilo descritos anteriormente, y la expresión "fenilalquilo sustituido" quiere decir que o bien el fenilo o el alquilo o ambos están sustituidos con uno o más de los sustituyentes definidos anteriormente. Ejemplos de tales grupos incluyen 2-fenil-1-cloroetilo, 2-(4'-metoxifenil)etilo, 4-(2',6'-dihidroxifenil)n-hexilo, 2-(5'-ciano-3'-metoxifenil)n-pentilo, 3-(2'6'-dimetilfenil)n-propilo, 4-cloro-3-aminobencilo, 6-(4'-metoxifenil)3-carboxi(n-hexilo), 5-(4'-aminometilfenil)-3-(aminometil)n-pentilo, 5-fenil-3-oxo-n-pent-1-ilo, (4-hidroxinaft-2-il)metilo, y similares. La expresión "naftilo sustituido" quiere decir un grupo naftilo sustituido con uno o más de los sustituyentes identificados anteriormente, y la expresión "(1 ó 2 naftil)alquilo" quiere decir un naftilo (1 ó 2) unido a uno de los grupos alquilo que se describen anteriormente.

Los términos "halo" y "halógeno" se refieren a los grupos fluoro, cloro, bromo o yodo. Estos términos también pueden usarse para describir uno o más halógenos, que son iguales o diferentes. Halógenos preferidos en el contexto de esta ¡nvención son cloro y fluoro. El término "arilo" se refiere a anillos carbocíclicos aromáticos de cinco y seis miembros. Se prefieren los anillos de seis miembros. El término "heteroarilo" se refiere a anillos heterocíclicos de cinco miembros o seis miembros aromáticos opcionalmente sustituidos que tienen de 1 a 4 heteroátomos, tal como átomos de oxígeno, azufre y/o nitrógeno, en particular nitrógeno, o solo o junto con átomos del anillo de azufre u oxígeno. Los siguientes sistemas anulares son ejemplos representativos de los radicales heterocíclicos que denota el término "heteroarilo" (ya sea sustituido o no sustituido): tienilo, furilo, pirrolilo, pirrolidinilo, imidazolilo, isoxazolilo, triazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, tetrazolilo, tiatriazolilo, oxatriazolilo, piridilo, pirimidilo, pirazinilo, piridazinilo, oxazinilo, triazinilo, tiadiazinilo, tetrazol, 1 ,5-[b]piridazinilo y purinilo, así como derivados benzocondensados, por ejemplo, benzoxazolilo, benzotiazolílo, bencimidazolilo e indolilo. Los sustituyentes para los anillos heteroarilo opcionalmente sustituidos anteriores son de uno a tres grupos halo, trihalometilo, amino, amino protegido, sales amino, amino monosustituido, amino disustituido, carboxi, carboxi protegido, sales carboxilato, hidroxi, hidroxi protegido, sales de un grupo hidroxi, alcoxi inferior, alquiltio inferior, alquilo inferior, alquilo inferior sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, (cicloalquil)alquilo, (cicloalquil)alquilo sustituido, fenílo, fenilo sustituido, fenilalquilo, y fenilalquilo sustituido. Los sustituyentes para el grupo heteroarilo son tal como se definen anteriormente, o tal como se describe más adelante. Tal como se usa, junto con los sustituyentes anteriores para los anillos heteroarilo, "trihalometilo" puede ser trifluorometilo, triclorometilo, tribromometílo o triyodometilo; "alcoxi inferior" quiere decir un grupo alcoxi de Ci a C4, de forma similar, "alquiltio inferior" quiere decir un grupo alquiltio de C-i a C4. La expresión "alquilo inferior sustituido" quiere decir el grupo alquilo inferior definido anteriormente sustituido de una a tres veces con un hidroxi, hidroxi protegido, amino, amino protegido, ciano, halo, trifluorometilo, amino monosustituido, amino disustituído, alcoxi inferior, alquiltio inferior, carboxi, carboxi protegido, o una sal carboxi, amino, y/o hidroxi. Tal como se usan, junto con los sustituyentes para los anillos heteroarilo, los términos "(cicloalquil)alquilo sustituido" y "cicloalquilo sustituido" están tal como se definen anteriormente sustituidos con los mismos grupos que se enumeran para un grupo "alquilo sustituido". La expresión "amino monosustituido" se refiere a un grupo amino con un sustituyente que se elige del grupo que consiste en un grupo fenilo, fenilo sustituido, alquilo, alquilo sustituido, acilo Ci a C7, alquenilo C2 a C , alquenilo C2 a C7 sustituido, alquinilo C2 a C7, alquilarilo C7 a C?6, alquilarilo C7 a C-16 sustituido, y heteroarilo. El amino monosustituido puede tener además un grupo protector de amino tal como engloba la expresión "amino monosustituido protegido". La expresión "amino disustituído" se refiere a grupos amino con dos sustituyentes que se eligen del grupo que consiste en fenilo, fenilo sustituido, alquilo, alquilo sustituido, acilo Ci a C7, alquenilo C2 a C7, alquinilo C2 a C7, alquilarilo C7 a C-?6 sustituido, alquilarilo y heteroarilo. Los dos sustituyentes pueden ser iguales o diferentes. El término "heteroaril(alquilo)" denota un grupo alquilo tal como se define anteriormente, sustituido en cualquier posición por un grupo heteroarilo, tal como se ha definido anteriormente. Además, los anillos heterocíclicos de cinco miembros o seis miembros opcionalmente sustituidos anteriores, y los anillos cicloalquilo anteriores, pueden opcionalmente estar condensados con un sistema de anillos aromático de cinco miembros o seis miembros tal como un sistema de piridina o triazol, y preferiblemente a un anillo de benceno. La expresión "grupo protector de carboxi" tal como se usa en la presente memoria se refiere a uno de los derivados éster del grupo ácido carboxílico que se emplea habitualmente para bloquear o proteger el grupo ácido carboxílíco mientras se llevan a cabo reacciones en otros grupos funcionales del compuesto. Ejemplos de tales grupos protectores de ácido carboxílico incluyen t-butilo, 4-nitrobencilo, 4-metoxibencilo, 3,4-dimetoxibencilo, 2,4-dimetoxibencilo, 2,4,6-trimetoxibencilo, 2,4,6-trimetilbencilo, pentametilbencilo, 3,4-metilendioxibencilo, benzohidrilo, 4,4'- dimetoxitritilo, 4,4',4"-trimetoxitritilo, 2-fenilpropilo, trimetilsililo, t-butildimetilsililo, fenacilo, 2,2,2— tricloroetilo, ß-(trimetilsilil)etilo, ß-(di(n-butil)metilsilil)etilo, p-toluenosulfoniletilo, 4-nitrobencílsulfoniletilo, alilo, cinamilo, 1 -(trimetilsililmetil)propenilo y restos similares. La especie de grupo protector de carboxi que se emplea no es crítica en tanto en cuanto el ácido carboxílico derivatizado sea estable en las condiciones de la(s) reacción(es) subsiguiente(s) y pueda eliminarse en el momento apropiado sin alterar el resto de la molécula. La expresión "grupo protector de hidroxi" se refiere a grupos fácilmente escindibles enlazados a grupos hidroxilo, tal como el tetrahidropiranilo, 2-metoxiprop-2-ilo, 1-etoxiet-1-ilo, metoximetilo, ß-metoxietoximetilo, metiltíometilo, t-butilo, t-amilo, tritilo, 4-metoxitritilo, 4,4'-dimetoxitritilo, 4,4',4"-trimetoxitritilo, bencilo, alilo, trimetilsililo, (t-butil)dimetilsililo, 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, y similares. La expresión "grupo protector de amino" tal como se usa en la presente memoria se refiere a sustituyentes del grupo amino que se emplean habitualmente para bloquear o proteger la función amino mientras se hacen reaccionar otros grupos funcionales de la molécula. La expresión "amino monosustituído protegido" quiere decir que hay un grupo protector de amino en el átomo de nitrógeno del amino monosustituido. Ejemplos de tales grupos protectores de amino se enumeran en el documento WO 00/01666. Los términos "aminoácido natural y no natural" se refieren tanto a los aminoácidos naturales como a otros a-aminoácidos no proteinógenos que son utilizados habitualmente por las personas de experiencia en la técnica de la química peptídica al preparar análogos sintéticos de péptidos naturales, que incluyen las formas D y L. Los aminoácidos naturales son glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, serina, metionína, treonina, fenilalanina, tirosína, triptófano, cisteína, prolina, histidina, ácido aspártico, asparragina, ácido glutámico, glutamina, ácido ?-carboxiglutámico, arginina, ornitina y lisina. Ejemplos de a-aminoácidos no naturales incluyen hidroxilisina, citrulina, quinurenina, (4-aminofenil)alanina, 3-(2'-naftil)alanina, 3-(1 'naftil)alanina, metionina sulfona, (t-butil)alanina, (t-butil)glicina, 4-hidroxifenilglicina, aminoalanina, fenilglicina, vinilalanina, propargilglicina, 1 ,2,4-triazol-3-alanina, tironina, 6-hidroxitriptófano, 5-hidroxitriptófano, 3-hidroxiquinurenina, 3-aminotirosina, trifluorometilalanina, 2-tienilalanina, (2-(4-piridil)etil)cisteína, 3,4-dimetoxifenilalanina, 3-(2'-tiazolil)alanina, ácido iboténico, ácido 1-amino-1-ciclopentanocarboxíl¡co, ácido 1-amino-1-ciciohexanocarboxílico, ácido quiscuálico, 3-(trifluorometilfenil)alanina, (ciclohexil)glicina, tiohistidina, 3-metoxitirosina, norleucina, norvalina, aloisoleucina, homoarginina, tioprolina, deshidroprolina, hidroxiprolina, homoprolina, ácido indolin-2-carboxílico, ácido 1 ,2,3,4-tetrahidroísoquinolin-3-carboxílico, ácido 1 ,2,3,4-tetrahidroquinolin-2-carboxílico, ácido a-amino-n-butírico, ciclohexilalanina, ácido 2-amino-3-fenilbutírico, fenilalanina sustituida en la posición orto, meta, o para del resto fenilo con uno o dos de los grupos siguientes: un grupo alquilo Ci a C4, un alcoxi Ci a C4> un halógeno o un nitro, o sustituida una vez con un grupo metilendioxi; ß-2- y 3-tienilalanina; ß- 2- y 3-furanilalanina; ß-2-, 3- y 4-piridilalanina, (ß-(benzotienil-2- y 3-il)alanina; ß-(1- y 2-naftil)alanina; derivados de serina, treonina o tirosina alquilados en O; cisteína alquilada en S, homocisteína alquilada en S, los esteres de O-sulfato, O-fosfato y O-carboxilato de tirosina, 3-(sulfo)tirosina, 3-(carboxi)tirosina, 3-(fosfo)tirosina, el éster de ácido 4-metanosulfónico de tirosina, éster del ácido 4-metanofosfónico de tirosina, 3,5-diyodotirosina, 3-nitrotirosina, e-alquillisina, y d-alquilornitina. Cualquiera de estos a-aminoácidos puede estar sustituido con un grupo metilo en la posición alfa, un halógeno en cualquier posición del resto aromático de la cadena lateral del amino a, o un grupo protector adecuado en los átomos de O, N, o S de los restos de la cadena lateral. Anteriormente se describen grupos protectores adecuados. Dependiendo de la elección de disolvente y otras condiciones conocidas por la persona experta, estos compuestos también pueden tomar la forma cetal o acetal, y el uso de estas formas en la combinación de la invención está incluido en la ¡nvención. Estos compuestos pueden prepararse tal como se describe en el documento WO 00/01666 o en el documento US 6.544.951 , que se incorporan a la presente memoria por referencia en su totalidad. Subgrupos preferidos son los que se enumeran en el documento US 6.544.951. Un compuesto preferido de la fórmula I se selecciona de: Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-bencílfenil)oxam¡l)valinil]amino-5- (2,,3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (SS^-IN-ÍN'-íbenci oxami valiniljamino-d-^'.S'.S'.e'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fenoxifenil)oxamil)val¡nil]amino-5- (2',3',5,,6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftilmetil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6,-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentano¡co; Acido (3S)-3-[N-(N'-(4-cloro-1-naftil)oxam¡l)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-antril)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N,-(fenet¡l)oxam¡l)val¡nil]amino-5-(2,,3',5,,6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(fen¡l)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fenilfenil)oxam¡l)val¡n¡l]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(4-n-heptilfenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(5,6,7,8-tetrahidro-1 -naft¡l)oxam¡l)valinil]am¡no-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-adamantil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3,,5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(4-fluorofenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N,-(2-naftil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-metoxifen¡l)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(N'-N'"-difen¡lamino)oxam¡l)valin¡l]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N,-(4-piridinil)oxamil)val¡n¡l]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-pirazinil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5,,6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1 ,2,3,4-tetrahidro-1-naftil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenox¡)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(3,4,5-trimetoxibencil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5,,6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(benzohidril)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(3-fenoxilfenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-terc-butilfenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N,-(2-piridinil)oxamil)valin¡l]amino-5-(2,,3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N,-(2,3,5,6-tetrafluoro-4-pirid¡n¡l)oxam¡l)val¡n¡l]am¡no-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-yodofenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5,,6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2,6-difluorofenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2,5-D¡-terc-but¡lfenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(5-indanil)oxamil)valinil]amino-5-(2,,3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(met¡l)oxamil)val¡n¡l]am¡no-5-(2\3\5',6'-tetrafluorofenox¡)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(n-heptil)oxamil)val¡nil]amino-5-(2',3',5,,6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (SSJ-S-IN-íN'-íterc-octi oxami valiniljamino-d^'.S'.d'.e'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(ciclohex¡l)oxam¡l)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(5-fenil-3-pirazolil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2,3,4,5-tetrafluorofenil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2,3,4,6-tetrafluorofenil)oxam¡l)valinil]am¡no-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2,3,5,6-tetraclorofenil)oxamil)valinil]amino- 5-(2,,3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2,3,4,5,6-pentafluorofenil)oxamil)valinil]am¡no-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenox¡)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-bencimidazolil)oxamil)valinil]amino-5- (2,,3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1 -nafti oxami valiniljamino-d^'.ß'-difluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)val¡n¡l]amino-5-(2',4,,6'-trifluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)valinil]amino-5- (difenilfosfiniloxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamíl)val¡nil]amino-5- (metilfenilfosfiniloxi)-4-oxopentano¡co; Acido (3RS)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)valin¡l]amino-5-fluoro-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(fenil)oxamil)alaninil]amino-5-(2,,3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(5,6,7,8-tetrahidro-1 -naft¡l)oxam¡l)alaninil]am¡no-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenox¡)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fenilfenil)oxamil)alaninil]amino-5- (2',3,,5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-bencilfenil)oxamil)alaninil]amino-5- (2,3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1 -naftilmetil)oxamil)alanin¡l]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fenoxifenil)oxamil)alan¡nil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(3-fenoxilfen¡l)oxamil)alaninil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(4-fenilfenil)oxamil)alaninil]amino-5- (2',3',5',6,-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(benzohidril)oxamil)alaninil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fenilfenil)oxamil)alaninil]amino-5-(2,-fluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-terc-but¡lfenil)oxamil)alaninil]am¡no-5-(2'-fluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fenilfenil)oxamil)alaninil]amino-5- (difenilfosfinoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1 -naftil)oxamil)alaninil]amino-5- (difen¡lfosfiniloxi)-4-oxopentano¡co; Acido (3S)-3-[N-(N,-(1-naftil)oxam¡l)leucinil]amino-5-(2',4',6 -trifluorofenoxi)-4-oxopentano¡co; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxam¡l)(terc-but¡l)glicinil]amino-5-(2',3',5,,6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)(terc-butil)norleuc¡n¡l]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)(terc-butil)alaninil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)leucinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)leucinil]amino-5- (metilfenilfosfiniloxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1 -naftil)oxamil)leucinil]amino-5-fluoro-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)leucinil]amino-5- (difenilfosfiniloxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-(1 H-tetrazol-5-il)fenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1 -adamantil)fenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(fenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(bencil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(fenetil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fenoxifenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1 -naftil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-naftil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(4-cloro-1 -naftil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(5,6,7,8-tetrahidro-1-naftil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1 ,2,3,4-tetrahidro-1 -naftil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftilmetil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)leucinil]amino-4-oxobutanoico; Especialmente preferidos son los compuestos que se seleccionan de: Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fluoro-4-yodofenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-clorofenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-bromofenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3,,5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fluorofenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-trifluorometilfenil)oxamil)valinil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-antril)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-terc-butilfenil)oxamil)alaninil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-trifluorometilfenil)oxamil)alaninil]amino-5-(2,,3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2,6-difluorofenil)oxamil)alaninil]am¡no-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1 -naftil)oxamil)alaninil]amino-5-(2,,3',5,,6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(4-metoxifenil)oxamil)alaninil]amino-5- (2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-trifluorometilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-terc-butilmetilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-bencilfenil)oxamil)valinil]amino-4- oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fenilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico. Lo más preferiblemente, el compuesto es Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-terc-butilfenil)oxamil)alaninil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico. El anticuerpo contra MAdCAM o porción de unión de antígenos del mismo es preferiblemente un anticuerpo tal como se describe en el documento WO2005/067620, que se incorpora a la presente memoria por referencia en su totalidad. En particular, todas las SEC ID N.° a las que se hace referencia en la presente memoria se refieren a las secuencias que en realidad se describen en el documento WO2005/067620. Preferiblemente el anticuerpo contra MAdCAM que se usa en la invención se une específicamente a MAdCAM. Incluso más preferiblemente, al menos las secuencias de las CDR de dicho anticuerpo son secuencias de CDR humanas, o una porción de unión de antígenos de un anticuerpo humano. Preferiblemente el anticuerpo es un anticuerpo humano, más preferiblemente un anticuerpo que actúa como un antagonista de MAdCAM. Otro aspecto de la invención es el uso en la combinación de la invención de la cadena pesada y/o ligera de dicho anticuerpo contra MAdCAM o la región variable u otra porción de unión de antígenos del mismo, o moléculas de ácido nucleico que codifican cualquiera de los anteriores y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Este aspecto de la invención incluye el uso de fragmentos de cualquiera de los anticuerpos anteriores, que incluyen pero sin limitación fragmentos Fab, fragmentos F(ab')2, fragmentos Fv monocatenarios (scFv). Preferiblemente, el anticuerpo contra MAdCAM es un anticuerpo inhibidor humano contra MAdCAM que se selecciona de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod tal como se describe en el documento WO2005/067620. Preferiblemente, el anticuerpo contra MAdCAM comprende una cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos que se selecciona de SEC ID N.°: 4, 8, 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44, 48, 54, 58, 62, 66 ó 68 tal como se describe en el documento WO2005/067620 (con o sin la secuencia de señal) o la región variable de una cualquiera de dichas secuencias de aminoácidos, o una o más CDR de estas secuencias de aminoácidos. El anticuefo contra MAdCAM preferiblemente comprende una cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos que se selecciona de SEC ID N.°: 2, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34, 38, 42, 46, 52, 56, 60 ó 64 tal como se describen en el documento WO2005/067620 (con o sin la secuencia de señal) o la secuencia de aminoácidos de la región variable, o de una o más CDR de dichas secuencias de aminoácidos. El anticuerpo contra MAdCAM preferiblemente es un anticuerpo humano contra MAdCAM que comprende la secuencia de aminoácidos desde el inicio de la CDR1 hasta el final de la CDR3 de una cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente. El anticuerpo contra MAdCAM que se usa en la invención también puede ser un anticuerpo contra MAdCAM que comprende una o más regiones FR de cualquiera de las secuencias mencionadas anteriormente. El anticuerpo contra MAdCAM que se usa en la combinación de la invención puede incluir también un anticuerpo contra MAdCAM que comprende una de las secuencias de aminoácidos mencionadas anteriormente en las que se han realizado una o más modificaciones. Por ejemplo, las cisteínas del anticuerpo, que pueden ser químicamente reactivas, son sustituidas por otro resto, tal como, sin limitación, alanina o serina. La sustitución puede ser en una cisteína no natural o en una cisteína natural. La sustitución puede realizarse en una región CDR o región marco conservada de un dominio variable o en el dominio constante de un anticuerpo. La sustitución de un aminoácido también puede realizarse para eliminar sitios proteolíticos potenciales del anticuerpo. Tales sitios pueden presentarse en una región CDR o una región marco conservada de un dominio variable o en el dominio constante de un anticuerpo. La sustitución de restos de cisteína y la eliminación de los sitios proteolítícos puede disminuir la heterogeneidad del anticuerpo producto. Los pares de asparragina-glicina, que forman sitios de desamidación potenciales, pueden eliminarse alterando uno o ambos restos. Puede realizarse una sustitución de un aminoácido para añadir o eliminar sitios de glucosilación potencial de la región variable de un anticuerpo que se usa en la invención.

La lisina del extremo C de la cadena pesada del anticuerpo contra MAdCAM que se usa en la ¡nvención puede escindirse. Las cadenas pesada y ligera de los anticuerpos contra MAdCAM pueden incluir opcionalmente una secuencia de señal. En el documento WO2005/067620 se describen en detalle doce anticuerpos monoclonales humanos inhibidores contra MAdCAM preferidos para usar en la combinación de la ¡nvención: 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4 y 9.8.2. Clases y Subclases de anticuerpos contra MAdCAM El anticuerpo puede ser una molécula IgG, una IgM, una IgE, una IgA o una IgD. Preferiblemente el anticuerpo es de clase IgG y es de una subclase lgG1 , lgG2, lgG3 o lgG4. Más preferiblemente, el anficuerpo contra MAdCAM es de subclase lgG2, o lgG4. Más preferiblemente, el anticuerpo contra MAdCAM es de la misma clase y subclase que el anticuerpo 1.7.2, 1.8.2, 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod. 6.77.1-mod o 7.26.4-mod que es lgG2, o 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 ó 9.8.2, que es lgG4, tal como se describe en el documento WO2005/067620. La clase y subclase de los anticuerpos contra MAdCAM puede determinarse por cualquier procedimiento conocido en la técnica. En general, la clase y subclase de un anticuerpo puede determinarse usando anticuerpos que son específicos para una clase y subclase particulares de anticuerpo. Tales anticuerpos están disponibles comercialmente. ELISA, transferencia de Western así como otras técnicas pueden determinar la clase y subclase. De forma alternativa, la clase y subclase pueden determinarse secuenciando todo o una porción de los dominios constantes de las cadenas pesadas y/o ligeras de los anticuerpos, comparando sus secuencias de aminoácidos con las secuencias de aminoácidos conocidas de diversas clases y subclases de inmunoglobulinas, y determinando la clase y subclase de los anticuerpos como la clase que muestra la mayor identidad de secuencias. Selectividad de especie y molécula El anticuerpo contra MAdCAM que se usa en la combinación de la ¡nvención demuestra tanto selectividad de especie como de molécula. El anticuerpo contra MAdCAM puede unirse a MAdCAM humana, de macaco o de perro. Otros anticuerpos contra MAdCAM que se usan en la combinación de la ¡nvención no se unen a una especie de mono del nuevo mundo tal como el tití. Es posible determinar la selectividad de especie para el anticuerpo contra MAdCAM usando procedimientos notorios en la técnica. Por ejemplo, puede determinarse la selectividad de especies usando transferencia de Western, FACS, ELISA o inmunohistoquímica. En una modalidad preferida, es posible determinar la selectividad de especie usando inmunohistoquímica. Un anticuerpo contra MAdCAM que se usa en la combinación de la invención que se une específicamente a MAdCAM tiene una selectividad por MAdCAM comparada con VCAM, fibronectina o cualquier otro antígeno que es al menos 10 veces mayor, preferiblemente al menos 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80 ó 90 veces mayor, lo más preferiblemente al menos 100 veces mayor. Preferiblemente el anticuerpo contra MAdCAM no muestra unión apreciable a VCAM, fibronectina o cualquier otro antígeno distinto de MAdCAM. Puede determinarse la selectividad por MAdCAM del anticuerpo contra MAdCAM usando procedimientos notorios en la técnica siguiendo las enseñanzas de la memoria descriptiva. Por ejemplo, puede determinarse la selectividad usando transferencia de Western, FACS, ELISA, o inmunohistoquímica. Afinidad de unión de anticuerpos contra MAdCAM a MAdCAM Los anticuerpos contra MAdCAM que se usan en la combinación de la invención preferiblemente se unen específicamente a MAdCAM con afinidad alta. Un anticuerpo contra MAdCAM que se usa en la combinación de la invención se une específicamente a MAdCAM con una Kd de 3 x 10~8 M o menor, medida por resonancia de plasmón superficial, tal como BIAcore. Preferiblemente, el anticuerpo se une específicamente a MAdCAM con una K de 1 x 10"8 o menor o 1 x 10'9 M o menor. Más preferiblemente, el anticuerpo se une específicamente a MAdCAM con una Kd de 1 x 10"10 M o menor. Un anticuerpo que se usa en la combinación se une específicamente a MAdCAM con una Kd de 2,66 x 10"10 M o menor, 2,35 x 10"11 M o menor o 9 x 10"12 M o menor. Preferiblemente, el anticuerpo se une específicamente a MAdCAM con una K de 1 x 10'11 M o menor. Preferiblemente, el anticuerpo se une específicamente a MAdCAM sustancialmente con la misma Kd que un anticuerpo que se selecciona de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1 -mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod. Un anticuerpo "sustancialmente con la misma Kd" que un anticuerpo de referencia tiene una Kd que es ± 100 pM, preferiblemente ± 50 pM, más preferiblemente ± 20 pM, todavía más preferiblemente ± 10 pM, ± 5 pM o ± 2 pM, comparada con la Kd del anticuerpo de referencia en el mismo experimento. Preferiblemente, el anticuerpo se une a MAdCAM sustancialmente con la misma K que un anticuerpo que comprende uno o más dominios variables o una o más CDR de un anticuerpo que se selecciona de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod tal como se describe en el documento WO2005/067620. Preferiblemente, el anticuerpo se une a MAdCAM sustancialmente con la misma Kd que un anticuerpo que comprende una de las secuencias de aminoácidos que se seleccionan de SEC ID N.°: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 52, 54, 56, 58, 62, 64, 66 ó 68 (con o sin la secuencia de señal) tal como se describe en el documento WO2005/067620, o su dominio variable. Preferiblemente, el anticuerpo se une a MAdCAM sustancialmente con la misma Kd que un anticuerpo que comprende una o más CDR de un anticuerpo que comprende una secuencia de aminoácidos que se selecciona de SEC ID N.°: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 52, 54, 56, 58, 62, 64, 66 ó 68 tal como se describe en el documento La afinidad de unión de un anticuefo contra MAdCAM a MAdCAM puede determinarse por cualquier procedimiento conocido en la técnica. En una modalidad, la afinidad de unión puede medirse por ELISA competitivo, RÍA o resonancia de plasmón superficial, tal como BIAcore. En una modalidad más preferida, la afinidad de unión se mide por resonancia de plasmón superficial. En una modalidad incluso más preferida, la afinidad de unión y la velocidad de disociación se miden usando un BIAcore. En el documento WO2005/067620 puede encontrarse un ejemplo de determinación de la afinidad de unión. Semivida del anticuerpo contra MAdCAM El anticuerpo contra MAdCAM que se usa en la combinación de la invención tiene una semivida de al menos un día in vitro o in vivo.

Preferiblemente, el anticuerpo o su porción tienen una semivída de al menos tres días. Más preferiblemente, el anticuerpo o su porción tienen una semivida de cuatro días o más. Incluso más preferiblemente, el anticuerpo o su porción tienen una semivida de ocho días o más. El anticuerpo o su porción de unión de antígenos que se usa en la invención también puede derivatizarse o modificarse de tal forma que tenga una semivida mayor, tal como se describe más adelante. En otra modalidad preferida, el anticuerpo puede contener mutaciones puntuales para aumentar la semivida en suero, tal como se describe en el documento WO 00/09560. La semivida del anticuerpo puede medirse por cualquier medio conocido para una persona de experiencia ordinaria en la técnica. Por ejemplo, la semivida del anticuerpo puede medirse por transferencia de Western, ELISA o RÍA durante un periodo de tiempo adecuado. La semivida del anticuefo puede medirse en cualquier animal apropiado, tal como un primate, por ejemplo, un macaco o un ser humano. Identificación de epítopos de MAdCAM reconocidos por el anticuerpo contra MAdCAM La invención también proporciona una combinación con un agente contra la fibrosis de un anticuerpo humano contra MAdCAM que se une al mismo antígeno o epítopo que un anticuerpo humano contra MAdCAM que se proporciona en la presente memoria. Además, la invención proporciona la combinación con un agente contra la fibrosis de un anticuerpo humano contra MAdCAM que compite o compite cruzadamente con un anticuerpo humano contra MAdCAM. Preferiblemente, el anticuefo contra MAdCAM humano es 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod. Preferiblemente, el anticuerpo contra MAdCAM humano comprende uno o más dominios variables o una o más CDR de un anticuerpo que se selecciona de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1 -mod o 7.26.4-mod. Preferiblemente, el anticuerpo contra MAdCAM humano comprende una de las secuencias de aminoácidos que se selecciona de SEC ID N.°: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 52, 54, 56, 58, 62, 64, 66 ó 68 (con o sin la secuencia de señal) tal como se describe en el documento WO2005/067620, o un dominio variable del mismo. Preferiblemente, el anticuerpo contra MAdCAM humano comprende una o más CDR de un anticuerpo que comprende una de las secuencias de aminoácidos que se selecciona de SEC. ID. N.°: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 52, 54, 56, 58, 62, 64, 66 ó 68, tal como se describe en el documento WO2005/067620. Puede determinarse si un anticuerpo contra MAdCAM se une al mismo antígeno que otro anticuerpo contra MAdCAM usando una variedad de procedimientos conocidos en la técnica. Por ejemplo, se puede usar un anticuerpo contra MAdCAM conocido para capturar el antígeno, eluir el antígeno del anticuerpo contra MAdCAM, y entonces determinar si el anticuerpo experimental se une al antígeno eluido. Puede determinarse si un anticuerpo compite con un anticuerpo contra MAdCAM uniendo el anticuerpo contra MAdCAM a MAdCAM en condiciones de saturación, y midiendo después la capacidad del anticuerpo experimental de unirse a MAdCAM. Si el anticuerpo experimental es capaz de unirse a la MAdCAM al mismo tiempo que el anticuerpo contra MAdCAM, entonces el anticuerpo experimental se une a un epítopo diferente que el anticuerpo contra MAdCAM. Sin embargo, si el anticuerpo experimental no es capaz de unirse a la MAdCAM al mismo tiempo, entonces el anticuerpo experimental compite con el anticuerpo contra MAdCAM humano. Este experimento puede realizarse usando ELISA, o resonancia de plasmón superficial o, preferiblemente, BIAcore. Para analizar si un anticuerpo contra MAdCAM compite cruzadamente con otro anticuerpo contra MAdCAM, puede usarse el procedimiento de competición que se describe anteriormente en dos direcciones, es decir determinando si el anticuerpo conocido bloquea el anticuerpo experimental y viceversa. Uso de genes de las cadenas ligera y pesada La invención también proporciona la combinación con un agente contra la fibrosis de un anticuerpo contra MAdCAM que comprende una región variable de la cadena ligera codificada por un gen K humano. Preferiblemente, la región variable de la cadena ligera es codificada por una familia génica VK A2, A3, A26, B3, 012 u 018. Preferiblemente, la cadena ligera comprende no más de once, no más de seis o no más de tres sustituciones de aminoácidos a partir de la secuencia de la línea germinal humana VK A2, A3, A26, B3, 012 u 018. Preferiblemente, las sustituciones de aminoácidos son sustituciones conservadoras. Preferiblemente, la VL del anticuerpo contra MAdCAM contiene las mismas mutaciones, comparada con la secuencia de aminoácidos de la línea germinal, que cualesquiera una o más de las VL de los anticuerpos 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod. La invención incluye la combinación con un agente contra la fibrosis de un anticuerpo contra MAdCAM que utiliza los mismos genes VK humano y JK humano que un anticuerpo ejemplificado. El anticuerpo puede comprender una o más de las mismas mutaciones a partir de la línea germinal que uno o más anticuerpos ejemplificados, o el anticuerpo puede comprender sustituciones diferentes en una o más de las mismas posiciones que uno o más de los anticuerpos ejemplificados. Por ejemplo, la VL del anticuerpo contra MAdCAM puede contener una o más sustituciones de aminoácidos que son las mismas que las que están presentes en el anticuerpo 7.16.6, y otra sustitución de aminoácido que es la misma que en el anticuerpo 7.26.4. De esta forma, se pueden mezclar y emparejar diferentes características de unión de los anticuerpos para alterar, por ejemplo, la afinidad del anticuerpo por MAdCAM o su velocidad de disociación del antígeno. Las mutaciones pueden producirse en la misma posición que las que se encuentran en cualesquiera una o más de las VL de los anticuerpos 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1 -mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod, pero se realizan sustituciones conservadoras de aminoácidos en lugar de usar el mismo aminoácido. Por ejemplo, si el aminoácido sustituido comparado con la línea germinal en uno de los anticuerpos 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod es glutamato, se puede realizar una sustitución conservadora con aspartato. De forma similar, si el aminoácido sustituido es serina, se puede realizar una sustitución conservadora con treonina. La cadena ligera del anticuerpo contra MAdCAM puede comprender una secuencia de aminoácidos que es la misma que la secuencia de aminoácidos de la VL de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod. La cadena ligera preferiblemente comprende las secuencias de aminoácidos que son las mismas que las regiones CDR de la cadena ligera de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1 -mod, 6.77.1 -mod o 7.26.4-mod. La cadena ligera puede comprender una secuencia de aminoácidos con al menos una región CDR de la cadena ligera de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod. La cadena ligera puede comprender secuencias de aminoácidos con CDR de diferentes cadenas ligeras que usan los mismos genes VK y JK. Preferiblemente las CDR de diferentes cadenas ligeras se obtienen a partir de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod. Preferiblemente, la cadena ligera comprende una secuencia de aminoácidos que se selecciona de SEC ID N.°: 4, 8, 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36, 40, 44, 48, 54, 58, 62, 64, 66 ó 68 tal como se describe en el documento WO2005/067620 con o sin la secuencia de señal. Preferiblemente la cadena ligera comprende una secuencia de aminoácidos codificada por una secuencia de nucleótidos que se selecciona de SEC ID N.°: 3, 7, 11 , 15, 19, 23, 27, 31 , 35, 39, 43, 47, 53, 57, 61 , 65 ó 67 (con o sin la secuencia de señal) tal como se describe en el documento WO2005/067620, o una secuencia de nucleótidos que codifica una secuencia de aminoácidos que tiene 1-11 inserciones, deleciones o sustituciones de aminoácidos a partir de ella. Preferiblemente, las sustituciones de aminoácidos son sustituciones conservadoras de aminoácidos. El anticuerpo o su porción pueden comprender una cadena ligera lambda. La presente invención también proporciona la combinación con un agente contra la fibrosis de un anticuerpo contra MAdCAM o su porción que comprende una secuencia de gen de VH humana o una secuencia que se deriva de un gen de VH humano. La secuencia de aminoácidos de la cadena pesada puede derivarse de una familia génica de VH humana 1-18, 3-15, 3-21 , 3-23, 3-30, 3-33 o 4-4. Preferiblemente, la cadena pesada comprende no más de quince, no más de seis o no más de tres cambios de aminoácidos a partir de la secuencia génica de la VH humana de la línea germinal 1 -18, 3-15, 3-21 , 3-23, 3-30, 3-33 o 4-4. Las SEC ID N.°: 2, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34, 38, 42 y 46 tal como se describen en el documento WO2005/067620 proporcionan las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesadas de longitud completa de doce anticuerpos contra MAdCAM que pueden usarse en la combinación de la invención. Preferiblemente, la VH del anticuerpo contra MAdCAM contiene las mismas mutaciones, comparadas con la secuencia de aminoácidos de la línea germinal, que cualesquiera una o más de las VH de los anticuerpos 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.4, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod. De forma similar a lo que se describe anteriormente, el anticuerpo comprende una o más de las mismas mutaciones a partir de la línea germinal que uno o más anticuerpos ejemplificados. El anticuerpo también puede comprender diferentes sustituciones en una o más de las mismas posiciones que uno o más de los anticuerpos ejemplificados. Por ejemplo, la VH del anticuerpo contra MAdCAM puede contener una o más sustituciones de aminoácidos que son iguales a las que están presentes en el anticuerpo 7.16.6, y otra sustitución de aminoácido que es la misma que en el anticuerpo 7.26.4. De esta forma, se pueden mezclar y emparejar diferentes características de unión de anticuerpos para alterar, por ejemplo, la afinidad del anticuerpo por MAdCAM o su velocidad de disociación del antígeno. Puede realizarse una sustitución de aminoácido comparada con la línea germinal en la misma posición que una sustitución a partir de la línea germinal que se encuentra en cualesquiera una o más de las VH del anticuerpo de referencia 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1 -mod o 7.26.4-mod, pero la posición está sustituida con un resto diferente, que es una sustitución conservadora comparada con el anticuerpo de referencia. Preferiblemente la cadena pesada del anticuerpo contra MAdCAM que se usa en la combinación de la invención comprende una secuencia de aminoácidos que es la misma que la secuencia de aminoácidos de la VH de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod. Más preferiblemente, la cadena pesada comprende las secuencias de aminoácidos que son iguales a las de las regiones CDR de la cadena pesada de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod. Preferiblemente, la cadena pesada comprende una secuencia de aminoácidos de al menos una región CDR de la cadena pesada de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod, o la cadena pesada puede comprender las secuencias de aminoácidos con CDR de diferentes cadenas pesadas. Preferiblemente, las CDR de cadenas pesadas diferentes se obtienen a partir de 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod. Preferiblemente, la cadena pesada comprende una secuencia de aminoácidos que se selecciona de SEC ID N.°: 2, 6, 10, 14, 18, 22, 26, 30, 34, 38, 42, 46, 52, 56, 60 ó 64 tal como se describe en el documento WO2005/067620 con o sin la secuencia de señal. La cadena pesada también puede comprender una secuencia de aminoácidos codificada por una secuencia de nucleótidos que se selecciona de SEC ID N.°: 1 , 5, 9, 13, 17, 21 , 25, 29, 33, 37, 41 , 45, 51 , 55, 59 ó 63 tal como se describe en el documento WO2005/067620, o una secuencia de nucleótidos que codifica una secuencia de aminoácidos que tiene 1-15 inserciones, deleciones o sustituciones de aminoácidos a partir de ella. Las sustituciones son preferiblemente sustituciones conservadoras de aminoácidos. Ácidos nucleicos, vectores, células huéspedes y procedimientos recombínantes de preparar anticuerpos Los ácidos nucleicos, vectores, células huéspedes y procedimientos recombinantes de preparar estos anticuerpos se describen en el documento WO 2005/067620.

Anticuerpos derivatizados y marcados Un anticuerpo o porción de anticuerpo para la combinación de la invención puede derivatizarse o ligarse a otra molécula (por ejemplo, otro péptido o proteína). En general, los anticuerpos o sus porciones se derivatizan de tal forma que la unión de MAdCAM no se ve afectada adversamente por la derivatización o marcado. Por lo tanto, los anticuerpos y porciones de anticuerpos para la combinación de la invención se pretende que incluyan tanto las formas intactas como modificadas de los anticuerpos contra MAdCAM humanos que se describen en la presente memoria. Por ejemplo, un anticuerpo o porción de anticuerpo que se usa en la invención puede ligarse funcionalmente (mediante acoplamiento químico, fusión genética, asociación no covalente u otras) a otra u otras entidades moleculares, tales como otro anticuerpo (por ejemplo, un anticuerpo biespecífico o un diacuerpo), un agente de detección, un agente citotóxíco, un agente farmacéutico, y/o una proteína o péptido que pueda mediar la asociación del anticuerpo o porción de anticuerpo con otra molécula (tal como una región nuclear de estreptavidina o un marcador de polihistidina). Un tipo de anticuerpo derivatizado se produce entrecruzando dos o más anticuerpos (del mismo tipo o de tipos diferentes, por ejemplo, para crear anticuerpos biespecíficos). Los entrecruzadotes adecuados incluyen aquellos que son heterobifuncionales, que tienen dos grupos reactivos distintos separados por un espaciador apropiado (por ejemplo, éster de m-maleimidobenzoil-N-hidroxisuccinimida) u homobifuncionales (por ejemplo, suberato de disuccinimidilo). Tales espaciadores están disponibles en Pierce Chemical Company, Rockford, lll. Otro tipo de anticuerpo derivatizado es un anticuerpo marcado. Agentes de detección útiles con los que puede derivatizarse un anticuerpo o porción de anticuerpo de la invención incluyen compuestos fluorescentes, que incluyen fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, cloruro de 5-dimetilamina-1-naftalenosulfonilo, ficoeritrina, sustancias fosforescentes de lantánido y similares. Un anticuerpo también puede marcarse con enzimas que son útiles para la detección, tales como peroxidasa de rábano, ß-galactosidasa, luciferasa, fosfatasa alcalina, glucosa oxidasa y similares. Cuando un anticuerpo está marcado con una enzima detectable, se detecta añadiendo reactivos adicionales que usa la enzima para producir un producto de reacción que sea discernible. Por ejemplo, cuando está presente el agente peroxidasa de rábano, la adición de peróxido de hidrógeno y diaminobencidina produce un producto de reacción con color, que puede detectarse. Un anticuerpo también puede marcarse con biotina, y detectarse a través de la medición indirecta de la unión de avidina o estreptavidina. Un anticuerpo puede marcarse con un agente magnético, tal como gadolinio. Un anticuerpo también puede marcarse con un epítopo polipeptídico predeterminado que reconoce un testigo secundario (por ejemplo, secuencias de pares de cremalleras de leucina, sitios de unión de anticuerpos secundarios, dominios de unión de metales, marcadores de epítopos). En algunas modalidades, los marcadores se unen mediante espaciadores de diversas longitudes reduciendo el potencial impedimento estérico. Un anticuerpo contra MAdCAM también puede marcarse con un aminoácido radiomarcado. El radiomarcador puede usarse con fines tanto de diagnóstico como terapéuticos. Por ejemplo, el radiomarcador puede usarse para detectar tejidos que expresan MAdCAM por rayos X u otras técnicas de diagnóstico. Además, el radiomarcador puede usarse terapéuticamente como toxina para tejido enfermo o tumores que expresan MAdCAM. Ejemplos de marcadores para los polipéptidos incluyen, pero sin limitación, los siguientes radioisótopos o radionúclidos 3H, 1 C, 15N, 35S, 90Y, 99Tc, 111ln, 125l, 131l. Un anticuerpo contra MAdCAM también puede derivatizarse con un grupo químico tal como polietilenglicol (PEG), un grupo metilo o etilo, o un grupo carbohidrato. Estos grupos pueden ser útiles para mejorar las características biológicas del anticuerpo, por ejemplo, para aumentar la semivida en suero o para aumentar la unión tisular. Esta metodología también sería aplicable a cualquier fragmento o versión de anticuerpos contra MAdCAM que se unen a antígenos.

Composiciones farmacéuticas y kits En un aspecto adicional, la invención proporciona composiciones que comprenden un anticuerpo inhibidor contra MAdCAM humano y procedimientos para tratar sujetos con tales composiciones. En algunas modalidades, el sujeto de tratamiento es un ser humano. En otras modalidades, el sujeto es un sujeto veterinario. En algunas modalidades, el sujeto veterinario es un perro o un primate no humano. El tratamiento puede implicar la administración de uno o más anticuerpos monoclonales inhibidores contra MAdCAM, o sus fragmentos de unión de antígenos, solos o con un vehículo farmacéuticamente aceptable. El anticuerpo inhibidor contra MAdCAM y las composiciones que lo comprenden, pueden administrarse combinados con otro u otros agentes terapéuticos, diagnósticos o profilácticos. Tal como se usa en la presente memoria, "vehículo farmacéuticamente aceptable" quiere decir cualquiera y todos los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y potenciadores o retardadores de la absorción, y similares que son fisiológicamente compatibles. Algunos ejemplos de vehículos farmacéuticamente aceptables son agua, solución salina, solución salina tamponada con fosfato, tampón de acetato con cloruro sódico, dextrosa, glicerol, polietilenglicol, etanol y similares, así como sus combinaciones. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tales como manitol, sorbitol, o cloruro sódico en la composición. Ejemplos adicionales de sustancias farmacéuticamente aceptables son tensioactivos, agentes humectantes o cantidades menores de sustancias auxiliares tales como agentes humectantes o emulsionantes, conservantes o tampones, que mejoran la vida útil en depósito o la eficacia del anticuerpo. Las composiciones que se usan en esta invención pueden estar en una variedad de formas, por ejemplo, formas farmacéuticas líquidas, semisólidas y sólidas, tales como soluciones líquidas (por ejemplo, soluciones inyectables e infundibles), dispersiones o suspensiones, comprimidos, pildoras, tortas liofilizadas, polvos secos, liposomas y supositorios. La forma preferida depende del modo de administración que se pretenda y de la aplicación terapéutica. Las composiciones preferidas típicas están en forma de soluciones inyectables o infundibles, tales como composiciones similares a las que se usan para la inmunización pasiva de seres humanos. El modo de administración preferido es parenteral (por ejemplo, intravenoso, subcutáneo, intraperitoneal, intramuscular, intradérmico). En una modalidad preferida, el anticuefo se administra por infusión o inyección intravenosa. En otra modalidad preferida, el anticuerpo se administra por inyección intramuscular, intradérmica o subcutánea. Si se desea, el anticuerpo puede administrarse usando una bomba, enema, supositorio, o reservorio interno o similares. Las composiciones terapéuticas habitualmente deben ser estériles y estables en las condiciones de fabricación y almacenamiento. La composición puede formularse en forma de una solución, torta liofilizada, polvo seco, microemulsión, dispersión, liposoma u otra estructura ordenada adecuada para una alta concentración de fármaco. Las soluciones inyectables estériles pueden prepararse incorporando el anticuerpo contra MAdCAM en la cantidad necesaria en un disolvente apropiado con un ingrediente o una combinación de ellos de los enumerados anteriormente, según sea necesario, seguido de esterilización. En el caso de los polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los procedimientos de preparación preferidos son desecación a vacío y liofilízación que proporcionan un polvo de ingrediente activo más cualquier ingrediente adicional deseado a partir de una solución previamente estéril del mismo. Generalmente, las dispersiones se preparan incoforando el compuesto activo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión básico y los otros ingredientes necesarios de los que se enumeran anteriormente. Las características deseadas de una solución pueden mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de tensioactivos y el tamaño de partícula deseado en el caso de una dispersión mediante el uso de tensioactivos, fosfolípidos y polímeros. La absorción prolongada de composiciones inyectables puede conseguirse incluyendo en la composición un agente que retarde la absorción, por ejemplo, sales de monoestearato, materiales poliméricos, aceites y gelatina. Los anticuerpos de la combinación de la presente invención pueden administrarse mediante una variedad de procedimientos conocidos en la técnica, aunque para muchas aplicaciones terapéuticas, la vía/modo de administración preferido es la infusión subcutánea, intramuscular, intradérmica o intravenosa. Como apreciará el experto en la técnica, la vía y/o modo de administración variará dependiendo de los resultados deseados. En ciertas modalidades, las composiciones de anticuerpos pueden prepararse con un vehículo que protegerá el anticuerpo de una liberación rápida, tal como una formulación de liberación controlada, que incluye implantes, parches transdérmicos y sistemas de administración microencapsulada. Pueden usarse polímeros biocompatibles, y biodegradables, tales como etilen vinil acetato, polianhídrídos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres y ácido poliláctico. Muchos procedimientos para la preparación de tales formulaciones están patentados o son conocidos de forma general por los expertos en la técnica. Véase, por ejemplo, Sustained and Controlled Reléase Drug Delivery Systems (J. R. Robinson, editor Marcel Dekker, Inc., New York (1978)). En ciertas modalidades, un anticuerpo contra MAdCAM de la combinación de la invención puede administrarse por vía oral, por ejemplo, con un diluyente inerte o un vehículo comestible asimilable. El compuesto (y otros ingredientes, si se desean) también pueden incluirse en una cápsula de gelatina de cubierta dura o blanda, comprimirse en forma de comprimidos, o incorporarse directamente a la dieta del sujeto. Para la administración terapéutica oral, el anticuerpo contra MAdCAM puede mezclarse con excipientes y usarse en forma de comprimidos ingeribles, comprimidos bucales, trociscos, cápsulas, elixires, suspensiones, jarabes, obleas y similares. Para administrar un compuesto de la invención por medios distintos a la administración parenteral, puede ser necesario recubrir el compuesto, o administrar el compuesto conjuntamente con un material para evitar su inactivación. Las composiciones de la invención pueden incluir una "cantidad terapéuticamente eficaz" o una "cantidad profilácticamente eficaz" de un anticuerpo o porción de unión de antígenos de la invención. Una "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad eficaz en dosis y durante periodos de tiempo necesarios para lograr el resultado terapéutico deseado. Una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo o porción de anticuerpo puede variar de acuerdo con factores tales como el estado de enfermedad, edad, sexo y peso del individuo, y la capacidad del anticuerpo o porción de anticuerpo de provocar una respuesta deseada en el individuo. Una cantidad terapéuticamente eficaz es también una en la que cualesquiera efectos tóxicos o perjudiciales del anticuerpo o porción de anticuerpo son compensados por los efectos terapéuticamente beneficiosos. Una "cantidad profilácticamente eficaz" se refiere a una cantidad eficaz, en dosis y durante periodos de tiempo necesarios, para lograr el resultado profiláctico deseado. Típicamente, dado que una dosis profiláctica se usa en los sujetos antes de la enfermedad o en una etapa más temprana, la cantidad profilácticamente eficaz puede ser inferior a la cantidad terapéuticamente eficaz. Las posologías pueden ajustarse para proporcionar la respuesta deseada óptima (por ejemplo, una respuesta terapéutica o profiláctica). Por ejemplo, puede administrarse una única inyección embolada, pueden administrarse varias dosis fraccionadas durante un tiempo o la dosis puede reducirse o aumentarse proporcionalmente según indiquen las exigencias de la situación terapéutica. Especialmente ventajoso es formular las composiciones parenterales en forma monodosis para mayor facilidad de administración y uniformidad de la dosis. La forma monodosis tal como se usa en la presente memoria se refiere a unidades físicamente separadas adecuadas como dosis unitarias para los sujetos mamíferos a tratar; donde cada unidad contiene una cantidad predeterminada de compuesto activo que se calcula que produce el efecto terapéutico deseado, asociado al vehículo farmacéutico requerido. Las especificaciones para las formas monodosis de la invención son dictadas y dependen directamente de (a) las características únicas del anticuerpo contra MAdCAM o su porción y el efecto terapéutico o profiláctico particular a lograr, y (b) las limitaciones inherentes de la técnica de formación de compuestos con anticuerpos para el tratamiento de la sensibilidad en individuos.

Un intervalo ejemplar, no limitante para una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz de un anticuerpo o porción de anticuerpo de la invención es 0,025 a 50 mg/kg, más preferiblemente 0,1 a 50 mg/kg, más preferiblemente 0,1-25, 0,1 a 10 o 0,1 a 3 mg/kg. En algunas modalidades, una formulación contiene 5 mg/ml de anticuerpo en un tampón de acetato sódico 20 mM, a pH 5,5, NaCI 140 mM, y 0,2 mg/ml de polisorbato 80. En otras modalidades, una formulación contiene 10 mg/ml de anticuerpo en 2,73 mg/ml de acetato sódico trihidratado, 45 mg/ml de manitol, 0,02 mg/ml de EDTA disódico dihidratado, 0,2 mg/ml de polisorbato 80, ajustado a pH 5,5 con ácido acético glacial, por ejemplo para uso intravenoso. En otras modalidades, una formulación contiene 50 mg/ml de anticuerpo, 2,73 mg/ml de acetato sódico trihidratado, 45 mg/ml de manitol, 0,02 mg/ml de EDTA disódico dihidratado, 0,4 mg/ml de polisorbato 80, ajustado a pH 5,5 con ácido acético glacial, por ejemplo para uso subcutáneo o intradérmico. Debe observarse que los valores de las dosis pueden variar dependiendo del tipo y gravedad de la afección a aliviar. Debe entenderse además, que para cualquier sujeto particular, debería ajustarse la posología específica en función del tiempo de acuerdo con la necesidad del individuo y el juicio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las composiciones, y que los intervalos de las dosis que se describen en la presente memoria son únicamente ejemplares y no se pretende que limiten el alcance o práctica de la composición reivindicada. Otro aspecto de la presente invención proporciona kits que comprenden un anticuerpo contra MAdCAM o porción de anticuerpo de la invención o una composición que comprende tal anticuerpo con un agente contra la fibrosis tal como se describe en la presente memoria. Un kit puede incluir, además del anticuerpo o composición y el agente contra la fibrosis, otros agentes de diagnóstico o terapia. Un kit puede incluir también instrucciones para usar en un procedimiento de diagnóstico o terapia.

Terapia génica Los anticuerpos que se usan en la combinación de la invención pueden administrarse a un paciente que lo necesite mediante terapia génica. El tratamiento puede ser o in vivo o ex vivo. En una modalidad preferida, se administran a un paciente moléculas de ácido nucleico que codifican tanto una cadena pesada como una cadena ligera. En una modalidad más preferida, las moléculas de ácido nucleico se administran de tal forma que se integran de forma estable en los cromosomas de los linfocitos B porque estas células están especializadas en la producción de anticuerpos. En una modalidad preferida, los linfocitos B precursores son transfectados o infectados ex vivo y retransplantados a un paciente que lo necesite. En otra modalidad, los linfocitos B precursores u otras células son infectados in vivo usando un virus recombinante que se sabe que infecta el tipo de célula de interés. Los vectores típicos que se usan para la terapia génica incluyen liposomas, plásmidos y vectores víricos. Vectores víricos ejemplares son retrovirus, adenovirus y virus adenoasociados. Tras la infección o in vivo o ex vivo, los niveles de expresión del anticuerpo pueden controlarse extrayendo una muestra del paciente tratado y usando cualquier inmunoensayo conocido en la técnica o descrito en la presente memoria. En una modalidad preferida, el procedimiento de terapia génica comprende las etapas de administrar una molécula de ácido nucleico aislada que codifica la cadena pesada o una porción de unión de antígenos de la misma de un anticuerpo contra MAdCAM y expresar la molécula de ácido nucleico. En otra modalidad, el procedimiento de terapia génica comprende las etapas de administrar una molécula de ácido nucleico aislada que codifica la cadena ligera o una porción de unión de antígenos de la misma de un anticuerpo contra MAdCAM y expresar la molécula de ácido nucleico. En un procedimiento más preferido, el procedimiento de terapia génica comprende las etapas de administrar una molécula de ácido nucleico aislada que codifica la cadena pesada o una porción de unión de antígenos de la misma y una molécula de ácido nucleico aislada que codifica la cadena ligera o la porción de unión de antígenos de la misma de un anticuerpo contra MAdCAM de la ¡nvención y expresar las moléculas de ácido nucleico. El procedimiento de terapia génica también puede comprender la etapa de administrar otro agente antiinflamatorio o inmunomodulador.

Inhibición de la adhesión dependiente de a437/MAdCAM mediante un anticuerpo contra MAdCAM: La invención también proporciona la combinación con un agente contra la fibrosis de un anticuefo contra MAdCAM que se une a MAdCAM e inhibe la unión y adhesión de células que portan integrina a ß7 a MAdCAM u otros ligandos cognados, tal como L-selectina, a MAdCAM. En una modalidad preferida, la MAdCAM es humana y está en forma soluble o se expresa en la superficie de una célula. En otra modalidad preferida, el anticuerpo contra MAdCAM es un anticuerpo humano. En otra modalidad, el anticuerpo o su porción inhiben la unión entre a ß y MAdCAM con un valor de Cl50 no superior a 50 nM. En una modalidad preferida, el valor de Cl50 no es superior a 5 nM. En una modalidad más preferida, el valor de Cl50 es inferior a 5 nM. En una modalidad más preferida, el valor de Cl50 es inferior a 0,05 µg/ml, 0,04 µg/ml o 0,03 µg/ml. En otra modalidad preferida el valor de Cl50 es inferior a 0,5 µg/ml, 0,4 µg/ml o 0,3 µg/ml. El valor de Cl50 puede medirse mediante cualquier procedimiento conocido en la técnica. Típicamente, el valor de Cl50 puede medirse mediante un ELISA o ensayo de adhesión. En una modalidad preferida, el valor de Cl50 se mide mediante un ensayo de adhesión usando o células o tejido que expresa MAdCAM de forma nativa o células o tejido que han sido genomanipulados para expresar MAdCAM. A no ser que se definan de otro modo en la presente memoria, los términos científicos y técnicos que se usan relacionados con la presente invención tendrán los significados que son entendidos comúnmente por las personas de experiencia ordinaria en la técnica. Además, a no ser que el contexto requiera lo contrario, los términos en singular incluyen el plural, y los términos en plural incluirán el singular. En general, las nomenclaturas que se usan y las técnicas de cultivo celular y tisular, biología molecular, inmunología, microbiología, genética, química de proteínas y de ácidos nucleicos e hibridizacíón que se describen en la presente memoria son las notorias y las que se usan comúnmente en la técnica. Los procedimientos y técnicas de la presente invención generalmente se realizan de acuerdo con procedimientos convencionales notorios en la técnica y tal como se describen en diversas referencias generales y más específicas que se citan y se describen en la presente memoria descriptiva a no ser que se indique lo contrario. Véanse, por ejemplo, Sambrook y cois., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2a ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989) y Ausubel y cois. Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates (1992), y Harlow y Lañe, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990), que se incorporan a la presente memoria por referencia. Las reacciones enzimáticas y las técnicas de purificación se realizan de acuerdo con las especificaciones del fabricante, tal como se logra comúnmente en la técnica o tal como se describe en la presente memoria. Para la síntesis química, análisis químicos, preparación farmacéutica, formulación, y administración y tratamiento de pacientes se usan técnicas estándar. El término "polipéptido" engloba proteínas naturales o artificiales, fragmentos de proteínas y análogos polipeptídicos de una secuencia proteínica. Un polipéptido puede ser monomérico o polimérico. La expresión "proteína aislada" o "polipéptido aislado" es una proteína o polipéptido que en virtud de su origen o fuente de derivación (1 ) no está asociado a los componentes naturalmente asociados que lo acompañan en su estado natural, (2) está libre de otras proteínas de la misma especie (3) es expresado por una célula de una especie diferente, o (4) no se encuentra en la naturaleza. Así, un polípéptido que se sintetiza químicamente o que se sintetiza en un sistema celular diferente de la célula de la que se origina naturalmente estará "aislado" de sus componentes naturalmente asociados. También puede hacerse que una proteína esté sustancialmente libre de componentes naturalmente asociados por aislamiento, usando técnicas de purificación de proteínas notorias en la técnica. Una proteína o polipéptido es "sustancialmente pura," "sustancialmente homogénea" o "sustancialmente purificada" cuando al menos aproximadamente de 60 a 75% de una muestra presenta una sola especie de polipéptido. El polipéptído o proteína may be monomérico o multimérico. Un polipéptido o proteína sustancialmente puros típicamente comprenderán aproximadamente 50%, 60%, 70%, 80% o 90% p/p de una muestra de proteína, más habitualmente aproximadamente 95%, y preferiblemente serán puros en más del 99%. La pureza u homogeneidad de las proteínas puede indicarse por un número de medios notorios en la técnica, tales como electroforesis en gel de poliacrilamida de una muestra de proteína, seguida de visualización de una única banda polipeptidica al teñir el gel con un tinte notorio en la técnica. Para ciertos fines, puede proporcionarse una resolución mayor usando HPLC u otros medios notorios en la técnica para la purificación. La expresión "fragmento polipeptídico" tal como se usa en la presente memoria se refiere a un polipéptido que tiene una deleción en el extremo amino y/o carboxi, pero donde el resto de la secuencia de aminoácidos es idéntico a las posiciones correspondientes de la secuencia natural. En algunas modalidades, los fragmentos tienen al menos 5, 6, 8 ó 10 aminoácidos de longitud. En otras modalidades, los fragmentos tienen al menos 14 aminoácidos de longitud, más preferiblemente al menos 20 aminoácidos de longitud, habitualmente al menos 50 aminoácidos de longitud, incluso más preferiblemente al menos 70, 80, 90, 100, 150 ó 200 aminoácidos de longitud. La expresión "análogo polipeptídico" tal como se usa en la presente memoria se refiere a un polipéptido que comprende un segmento de al menos 25 aminoácidos que tiene una identidad sustancial con una porción de una secuencia de aminoácidos y que tiene al menos una de las siguientes propiedades: (1 ) unión específica a MAdCAM en condiciones de unión adecuadas, (2) capacidad de inhibir la unión de integrina a4ß7 y/o L- selectina a MAdCAM, o (3) capacidad de reducir la expresión de MAdCAM en la superficie celular in vitro o in vivo. Típicamente, los análogos polipeptídicos comprenden una sustitución conservadora de aminoácido (o inserción o deleción) con respecto a la secuencia natural. Los análogos típicamente tienen al menos 20 aminoácidos de longitud, preferiblemente al menos 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150 ó 200 aminoácidos de longitud o más, y a menudo pueden tener una longitud de hasta la de un polipéptido natural de longitud completa. Una "inmunoglobulina" es una molécula tetramérica. En una ¡nmunoglobulina natural, cada tetrámero está compuesto por dos pares idénticos de cadenas polipeptídicas, donde cada par tiene una cadena "ligera" (aproximadamente 25 Kda) y una "pesada" (aproximadamente 50-70 Kda). La porción del extremo amino de cada cadena incluye una región variable de aproximadamente 100 a 110 o más aminoácidos que es principalmente responsable del reconocimiento de los antígenos. La porción del extremo carboxi de cada cadena define una región constante que es principalmente responsable de la función efectora. Las cadenas ligeras humanas se clasifican como cadena ligeras K y ?. Las cadenas pesadas se clasifican como µ, d, y, a o e, y definen el isotipo del anticuerpo como IgM, IgD, IgG, IgA, e IgE, respectivamente. Dentro de las cadenas ligeras y pesadas, las regiones variables y constantes están unidas mediante una región "J" de aproximadamente 12 o más aminoácidos, donde la cadena pesada también incluye una región "D" de aproximadamente 10 o más aminoácidos. Véase de forma general, Fundamental Immunology, capítulo 7 (Paul. W., editor, 2a edición, Raven Press. N.Y. (1989)) (que se incorpora por referencia en su totalidad para todos los fines). Las regiones variables de cada par de cadenas ligera y pesada forman el sitio de unión del anticuerpo de tal forma que una ¡nmunoglobulina intacta tiene dos sitios de unión. Las cadenas de las inmunoglobulinas muestran la misma estructura general de las regiones macro conservadas (FR) relativamente conservadas unidas por tres regiones hípervariables, también denominadas regiones de determinación de complementariedad o CDR. Las CDR de las dos cadenas de cada par están alineadas por las regiones macro conservadas formando un sitio de unión específico de epítopo. Desde el extremo N al extremo C, tanto las cadenas ligera como pesada comprenden los dominios FR1 , CDR1 , FR2, CDR2, FR3, CDR3 y FR4. La asignación de los aminoácidos a cada dominio es acorde a las definiciones de Kabat, Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987 y 1991 )), o Chothia & Lesk, J. Mol. Biol., 196: 901 -917 (1987); Chothia y cois., Nature, 342: 878-883 (1989), cada uno de los cuales se ¡ncorpora a la presente memoria por referencia en su totalidad. Un "anticuerpo" se refiere a una inmunoglobulina intacta o a una porción de unión de antígenos de la misma que compite con el anticuerpo intacto por la unión específica. En algunas modalidades, un anticuerpo es una porción de unión de antígenos del mismo. Las porciones de unión de antígeno pueden producirse mediante técnicas de ADN recombinante o por escisión enzimática o química de anticuerpos intactos. Las porciones de unión de antígenos incluyen, entre otros, los fragmentos Fab, Fab', F(ab')2, Fv, dAb, y la región de determinación de la complementariedad (CDR), anticuerpos monocatenarios (scFv), anticuerpos quiméricos, diacuerpos y polipéptidos que contienen al menos una porción de una inmunoglobulina que es suficiente para conferir unión específica de antígeno al polipéptido. Un fragmento Fab es un fragmento monovalente que consiste en los dominios VL, VH, CL y CH1 ; un fragmento F(ab)2 es un fragmento bivalente que comprende dos fragmentos Fab ligados por un puente disulfuro en la región visagra; un fragmento Fd está constituido por los dominios VH y CH1 ; un fragmento Fv está constituido por los dominios VL y VH de un único brazo de un anticuerpo; y un fragmento dAb (Ward y cois., Nature. 341 : 544-546 (1989)) está constituido por un dominio VH. Tal como se usa en la presente memoria, un anticuerpo que se denomina, por ejemplo, 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.77.2, 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4 ó 9.8.2, es un anticuerpo monoclonal que es producido por el hibridoma del mismo nombre. Por ejemplo, el anticuerpo 1.7.2 es producido por el hibridoma 1.7.2. Un anticuerpo que se denomina 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod o 7.26.4-mod es un anticuerpo monoclonal cuya secuencia ha sido modificada a partir de la de su progenitor correspondiente por mutagenesis dirigida al sitio. Un anticuerpo monocatenario (scFv) es un anticuerpo en el que las regiones VL y VH están pareadas formando una molécula monovalente mediante un enlazador sintético que permite que se formen como una cadena proteínica única (Bird y cois., Science. 242: 423-426 (1988) y Huston y cois., Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 85: 5879-5883 (1988)). Los diacuerpos son anticuerpos biespecíficos, bivalentes en los que los dominios VH y VL están expresados en una única cadena polipeptídica, pero usando un enlazador que es demasiado corto para permitir que los dos dominios de la misma cadena se pareen, forzando así a los dominios a parearse con dominios complementarios de otra cadena y creando dos sitios de unión de antígenos (véase, por ejemplo, Holliger, P., y cois.. Proc. Nati. Acad. Sci. USA. 90: 6444-6448 (1993) y Poljak, R. J.. y cois., Structure, 2: 1121-1123 (1994)). Una o más CDR de un anticuerpo de la invención pueden incorporarse a una molécula o de forma covalente o no covalente produciendo una inmunoadhesina que se une específicamente a MAdCAM. Una inmunoadhesina puede incorporar la(s) CDR como parte de una cadena polipeptídica mayor, puede ligar covalentemente la(s) CDR a otra cadena polipeptídica, o puede incorporar la(s) CDR de forma no covalente. Las CDR permiten que la inmunoadhesina se una específicamente a un antígeno particular de interés. Un anticuerpo puede tener uno o más sitios de unión. Si existe más de un sitio de unión, los sitios de unión pueden ser idénticos entre sí o pueden ser diferentes. Por ejemplo, una inmunoglobulina natural tiene dos sitios de unión idénticos, un anticuerpo monocatenario o fragmento Fab tiene un sitio de unión, mientras que un anticuefo "biespecífico" o "bifuncional" (diacuerpo) tiene dos sitios de unión diferentes. Un "anticuerpo aislado" es un anticuerpo que (1 ) no está asociado a los componentes naturalmente asociados, incluyendo otros anticuerpos naturalmente asociados, que lo acompañan en su estado nativo (2) está libre de otras proteínas de la misma especie, (3) es expresado por una célula de una especie diferente, o (4) no se encuentra en la naturaleza. Ejemplos de anticuerpos aislados incluyen un anticuerpo contra MAdCAM que ha sido purificado por afinidad usando MAdCAM, un anticuefo contra MAdCAM que ha sido producido por un hibridoma u otra línea celular in vitro, y un anticuerpo humano contra MAdCAM derivado de un mamífero o planta transgénico. Tal como se usa en la presente memoria, la expresión "anticuerpo humano" quiere decir un anticuerpo en el que las secuencias de las regiones variable y constante son secuencias humanas. La expresión engloba anticuerpos con secuencias que se derivan de genes humanos, pero que han sido cambiadas, por ejemplo, para disminuir la posible capacidad inmunógena, aumentar la afinidad, eliminar cisteínas o sitios de glucosilación que pueden provocar plegamientos indeseados, etc. La expresión engloba tales anticuerpos producidos por vía recombinante en células no humanas que pueden conferir una glucosilación no típica de las células humanas. La expresión también engloba anticuerpos que han sido producidos en un ratón transgénico que comprende parte o todos los locus de las cadenas pesada y ligera de inmunoglobulina humana.

En un aspecto, la invención proporciona un anticuerpo humanizado. En algunas modalidades, el anticuerpo humanizado es un anticuerpo que se deriva de una especie no humana, en la que ciertos aminoácidos de los dominios marco conservado y constante de las cadenas pesada y ligera han sido mutados de forma que pueda evitarse o abrogarse una respuesta inmunitaria en los seres humanos. En algunas modalidades, puede producirse un anticuerpo humanizado fusionando los dominios constantes de un anticuerpo humano con los dominios variables de una especie no humana. Ejemplos de cómo producir anticuerpos humanizados pueden encontrarse en las patentes de Estados Unidos n.° 6.054.297, 5.886.152 y 5.877.293. En algunas modalidades, un anticuerpo humanizado contra MAdCAM de la invención comprende la secuencia de aminoácidos de una o más regiones macro conservadas de uno o más anticuerpos humanos contra MAdCAM de la invención. En otro aspecto, la invención incluye el uso de un "anticuerpo quimérico". En algunas modalidades el anticuerpo quimérico se refiere a un anticuerpo que contiene una o más regiones de un anticuerpo y una o más regiones de otro u otros anticuerpos. En una modalidad preferida, una o más de las CDR se derivan de un anticuerpo humano contra MAdCAM de la invención. En una modalidad más preferida, todas las CDR se derivan de un anticuerpo humano contra MAdCAM de la invención. En otra modalidad preferida, las CDR de más de un anticuerpo contra MAdCAM humano de la invención se mezclan y emparejan formando un anticuerpo quimérico. Por ejemplo, un anticuerpo quimérico puede comprender una CDR1 de la cadena ligera de un primer anticuerpo contra MAdCAM humano puede combinarse con CDR2 y CDR3 de la cadena ligera de un segundo anticuerpo contra MAdCAM humano, y las CDR de la cadena pesada pueden derivarse de un tercer anticuerpo contra MAdCAM. Además, las regiones macro conservadas pueden derivarse de uno de los mismos anticuerpos contra MAdCAM, de uno o más anticuerpos diferentes, tal como un anticuerpo humano, o de un anticuerpo humanizado. Un "anticuerpo neutralizador," "un anticuerpo inhibidor" o anticuerpo antagonista es un anticuerpo que inhibe la unión de a4ß7 o de células que expresan a4ß7, o cualquier otro ligando cognado o células que expresan ligandos cognados, a MAdCAM al menos en aproximadamente un 20%. En una modalidad preferida, el anticuerpo reduce, inhibe la unión de integrina a ß7 o de células que expresan a ß7 a MAdCAM al menos en un 40%, más preferiblemente en un 60%, incluso más preferiblemente en un 80%, 85%, 90%, 95% ó 100%. La reducción de la unión puede medirse por cualquier medio conocido para una persona de experiencia ordinaria en la técnica, por ejemplo, tal como se mide en un ensayo in vitro de unión competitiva. Un ejemplo de medición de la reducción de la unión de células que expresan a ß7 a MAdCAM se presenta en el Ejemplo I. Los fragmentos o análogos de anticuerpos pueden ser preparados fácilmente por personas de experiencia ordinaria en la técnica siguiendo las enseñanzas de esta memoria descriptiva. Los extremos amino y carboxí preferidos de fragmentos o análogos aparecen cerca de los límites de los dominios funcionales. Los dominios estructurales y funcionales pueden identificarse comparando los datos de las secuencias de nucleótidos y/o aminoácidos con bases de datos públicas o patentadas de secuencias. Preferiblemente, se usan procedimientos de comparación informáticos para identificar los motivos de las secuencias o los dominios de conformación de proteínas previstos que se producen en otras proteínas de estructura y/o función conocidas. Son conocidos los procedimientos para identificar las secuencias de proteínas que se pliegan formando una estructura tridimensional conocida (Bowíe y cois., Science, 253:164 (1991 )). El término "koff" se refiere a la constante de velocidad de disociación para la disociación de un anticuerpo del complejo anticuerpo/antígeno. El término "Kd" se refiere a la constante de disociación de una interacción particular entre anticuerpo y antígeno. Se dice que un anticuerpo se une a un antígeno cuando la constante de disociación es < 1 µM, preferiblemente < 100 nM y lo más preferiblemente < 10 nM. El término "epítopo" incluye cualquier determinante proteínico que puede unirse específicamente a una inmunoglobulina o receptor de linfocito T o interactuar de otra forma con una molécula. Los determinantes epitópicos habitualmente consisten en agrupamientos superficiales químicamente activos de moléculas tales como aminoácidos o cadenas laterales carbohidratadas y habitualmente tienen características estructurales tridimensionales específicas, así como características de carga específicas. Un epítopo puede ser "lineal" o "conformacional". En un epítopo lineal, todos los puntos de interacción entre la proteína y la molécula que interactúa (tal como un anticuerpo) se producen linealmente a lo largo de la secuencia primaria de aminoácidos de la proteína. En un epítopo conformacional, los puntos de interacción se producen a través de restos aminoacídicos de la proteína que están separados los unos de los otros. Tal como se usa en la presente memoria, los veinte aminoácidos convencionales y sus abreviaturas siguen el uso convencional. Véase Immunology - A Synthesis (2a Edición, E.S. Golub y D.R. Gren, Editores., Sinauer Associates, Sunderland, Mass. (1991 )), que se incorpora a la presente memoria por referencia. También los estereoisómeros (por ejemplo, aminoácidos D) de los veinte aminoácidos convencionales, aminoácidos no naturales tal como aminoácidos a, a -disustituidos, N-alquil aminoácidos, ácido láctico, y otros aminoácidos no convencionales pueden ser componentes adecuados para los polipéptidos de la presente invención. Ejemplos de aminoácidos no convencionales incluyen: 4-hidroxiprolina, v-carboxiglutamato, e-N,N,N-trimetil-lisina, e-N-acetil-lisina, O-fosfoserina, N-acetilserina, N-formilmetionina, 3-metilhistidina, 5-hidroxilisina, s-N-metilarginina, y otros aminoácidos e iminoácídos similares (por ejemplo, 4-hidroxiprolina). En la notación polipeptídica que se usa en la presente memoria, la dirección hacia la izquierda es la dirección del extremo amíno y la dirección hacia la derecha es la dirección del extremo carboxi, de acuerdo con el uso y convención estándar. El término "polinucleótido" al que se hace referencia en la presente memoria quiere decir una forma polimérica de nucleótídos de al menos 10 bases de longitud, bien ribonucleótidos o desoxirribonucleótidos o una forma modificada de cualquiera de los dos tipos de nucleótidos. El término incluye formas monocatenarias y bicatenarias de ADN. La expresión "polinucleótido aislado" tal como se usa en la presente memoria significará un polinucleótido de origen genómico, de ADNc, o sintético o alguna combinación de los mismos que, en virtud de su origen, el "polinucleótido aislado" (1 ) no está asociado con todo o parte de un polinucleótido en el que se encuentra el "polinucleótido aislado" en la naturaleza, (2) está ligado operablemente a un polinucleótido al que no está ligado en la naturaleza, o (3) no aparece en la naturaleza como parte de una secuencia mayor. El término "oligonucleótido" al que se hace referencia en la presente memoria incluye nucleótidos naturales y modificados enlazados mediante enlaces oligonucleotídicos naturales y no naturales. Los oligonucleótidos son un subconjunto de polinucleótidos que generalmente comprende una longitud de 200 bases o menos. Preferiblemente los oligonucleótidos tienen de 10 a 60 bases de longitud y lo más preferiblemente 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ó 20 a 40 bases de longitud. Los oligonucleótidos son habitualmente monocatenarios, por ejemplo, para las sondas; aunque los olígonucleótidos pueden ser bicatenarios, por ejemplo, para usar en la construcción de un mutante génico. Los oligonucleótidos de la invención pueden ser oligonucleótidos codificantes o no codificantes. La expresión "nucleótidos naturales" al que se hace referencia en la presente memoria incluye desoxirribonucleótidos y ribonucleótidos. La expresión "nucleótidos modificados" al que se hace referencia en la presente memoria incluye nucleótidos con grupos de azúcares modificados o sustituidos y similares. La expresión "enlaces oligonucleotídicos" al que se hace referencia en la presente memoria incluye enlaces oligonucleotídicos tales como fosforotioato, fosforoditioato, fosforoselenoato, fosforodiselenoato, fosforoanilotioato, fosforaniladato, fosforoamidato, y similares. Véanse, por ejemplo, LaPlanche y cois., Nucí. Acids Res. 14: 9081 (1986); Stec y cois., J. Am. Chem. Soc. 106: 6077 (1984); Stein y cois., Nucí. Acids Res., 16: 3209(1988); Zon y cois., Anti-Cancer Drug Design 6: 539 (1991 ); Zon y cois., Oligonucleotides and Analogues: A Practical Approach, páginas 87-108 (F. Eckstein, Editor, Oxford University Press, Oxford Inglaterra (1991 )); Stec y cois., patente de Estados Unidos n.° 5.151.510; Uhlmann y Peyman, Chemical Reviews, 90: 543 (1990), cuyas descripciones se incorporan por la presente por referencia. Un oligonucleótido puede incluir un marcador para la detección, si se desea. Las secuencias "ligadas operablemente" incluyen tanto las secuencias de control de expresión que están contiguas al gen de interés como las secuencias de control de expresión que actúan en posición relativa trans o a una distancia para controlar el gen de interés. La expresión "secuencias de control de expresión" tal como se usa en la presente memoria se refiere a secuencias de polinucleótídos que son necesarias para que se produzca la expresión y procesamiento de secuencias codificantes a las que están ligadas. Las secuencias de control de expresión incluyen secuencias apropiadas de iniciación de la transcripción, de terminación, promotoras y potenciadoras; señales de procesamiento de ARN eficaces, tales como señales de ayuste y poliadenilación; secuencias que estabilizan el ARNm citoplasmático; secuencias que potencian la eficacia de la traducción (es decir, secuencia consenso de Kozak); secuencias que potencian la estabilidad proteínica; y cuando se desee, secuencias que potencian la secreción de proteínas. La naturaleza de tales secuencias de control difiere dependiendo del organismo huésped; en los procariotas, tales secuencias de control generalmente incluyen secuencias promotoras, de sitio de unión de los ribosomas, y de terminación de la transcripción; en los eucariotas, generalmente, tales secuencias de control incluyen secuencias promotoras y de terminación de la transcripción. La expresión "secuencias de control" se pretende que incluya, como mínimo, todos los componentes cuya presencia es esencial para la expresión y procesamiento, y puede incluir también componentes adicionales cuya presencia es ventajosa, por ejemplo, secuencias directoras y secuencias de parejas de fusión. El término "vector" tal como se usa en la presente memoria, se pretende que se refiera a una molécula de ácido nucleico capaz de transportar otro ácido nucleico al que ha sido enlazado. Un tipo de vector es un "plásmido", que se refiere a un bucle de ADN bicatenario circular en el que pueden ligarse segmentos adicionales de ADN. Otro tipo de vector es un vector vírico, en el que pueden ligarse segmentos adicionales de ADN en el genoma vírico. Ciertos vectores tienen capacidad de replicación autónoma en una célula huésped en la que se introducen (por ejemplo, vectores bacterianos que tienen un origen de replicación bacteriano y vectores episómicos de mamífero). Otros vectores (por ejemplo, vectores no episómicos de mamífero) pueden integrarse en el genoma de una célula huésped al ser introducidos en la célula huésped, y por lo tanto son replicados junto con el genoma del huésped. Además, ciertos vectores tienen capacidad de dirigir la expresión de genes a los que están ligados operativamente. Tales vectores son aquellos a los que en la presente memoria se denomina "vectores de expresión recombinante" (o simplemente, "vectores de expresión"). En general, los vectores de expresión de utilidad en las técnicas de ADN recombinante a menudo están en forma de plásmidos. En la presente memoria descriptiva, "plásmido" y "vector" pueden usarse indistintamente ya que el plásmido es la forma de vector que se usa más comúnmente. Sin embargo, se pretende que la invención incluya esas otras formas de vectores de expresión, tales como vectores víricos (por ejemplo, retrovirus, adenovírus y virus adenoasociados con replicación deficiente), que sirven para funciones equivalentes. La expresión "célula huésped recombinante" (o simplemente "célula huésped"), tal como se usa en la presente memoria, se pretende que se refiera a una célula en la que se ha introducido un vector de expresión recombinante. Debería entenderse que tales expresiones se pretende que se refieran no sólo a la célula sujeto en particular sino a la progenie de tal célula. Dado que pueden producirse ciertas modificaciones en generaciones sucesivas debido o a mutación o a influencias del entorno tal progenie, de hecho, puede no ser idéntica a la célula progenitora, pero no obstante están incluidas en el alcance de la expresión "célula huésped" tal como se usa en la presente memoria. La expresión "hibridación selectiva" a la que se hace referencia en la presente memoria quiere decir unir de forma detectable y específica. Los polinucleótidos, oligonucleótidos y sus fragmentos de acuerdo con la invención se hibridan selectivamente con cadenas de ácido nucleico en condiciones de hibridación y lavado que minimizan las cantidades apreciables de unión detectable a ácidos nucleicos no específicos. Pueden usarse condiciones "muy restrictivas" o "altamente restrictivas" para lograr las condiciones de hibridación selectiva, tal como se conoce en la técnica y se describe en la presente memoria. Un ejemplo de condiciones "muy restrictivas" o "altamente restrictivas" es un procedimiento de incubar un polinucleótido con otro polinucleótido, en el que un polinucleótido puede fijarse a una superficie sólida tal como una membrana, en un tampón de hibridación de 6X SSPE o SSC, formamida al 50%, 5X reactivo de Denhardt, SDS al 0,5%, 100 µg/ml de ADN de esperma de salmón fragmentado y desnaturalizado a una temperatura de hibridación de 42°C durante 12-16 horas, seguido de lavado dos veces a 55°C usando un tampón de lavado de 1X SSC, SDS al 0,5%. Véase también Sambrook y cois., referencia anterior, páginas 9.50-9.55. La expresión "identidad porcentual de las secuencias" en el contexto de las secuencias de nucleótidos se refiere a los restos de dos secuencias que son iguales cuando se alinean para obtener la máxima correspondencia. La longitud para la comparación de la identidad de las secuencias puede ser en un tramo de al menos aproximadamente nueve nucleótidos, habitualmente al menos aproximadamente 18 nucleótidos, más habitualmente al menos aproximadamente 24 nucleótídos, típicamente al menos aproximadamente 28 nucleótidos, más típicamente al menos aproximadamente 32 nucleótídos, y preferiblemente al menos aproximadamente 36, 48 o más nucleótidos. Existe un número de diferentes algoritmos conocidos en la técnica que pueden usarse para medir la identidad de las secuencias de nucleótidos. Por ejemplo, las secuencias de polinucleótidos pueden comparase usando FASTA, Gap o Bestfit, que son programas del paquete Wisconsín Versión 10.3, Accelrys, San Diego. CA. FASTA, que incluye por ejemplo los programas FASTA2 y FASTA3, proporciona las alineaciones y la identidad porcentual de las secuencias de las regiones de mejor coincidencia entre las secuencias objeto y de investigación (Pearson, Methods Enzymol., 183: 63-98 (1990); Pearson, Methods Mol. Biol., 132: 185-219 (2000); Pearson, Methods Enzymol. 266: 227-258 (1996); Pearson, J. Mol. Biol., 276: 71-84 (1998); que se incorporan a la presente memoria por referencia). A no ser que se especifique lo contrario, se usan los parámetros por defecto para un programa o algoritmo particular. Por ejemplo, la identidad porcentual de las secuencias entre secuencias de nucleótidos puede determinarse usando FASTA con sus parámetros por defecto (una longitud de palabra de 6 y el factor NOPAM para la matriz de puntuación) o usando Gap con sus parámetros por defecto tal como se proporcionan en el paquete Wisconsin Versión 10.3, que se incorpora a la presente memoria por referencia. La referencia a una secuencia de nucleótídos engloba su complementaria a no ser que se especifique lo contrario. Así, la referencia a una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia particular debería entenderse que engloba su cadena complementaria, con su secuencia complementaria. En la técnica de la biología molecular, los investigadores usan los términos "identidad porcentual de las secuencias" "similitud porcentual de las secuencias" y "homología porcentual de las secuencias" de forma intercambiable. En esta solicitud de patente, estos términos tendrán el mismo significado con respecto únicamente a las secuencias de nucleótidos. La expresión "similitud substancial" o "similitud substancial de las secuencias" cuando se hace referencia a un ácido nucleico o a un fragmento del mismo, indica que, cuando están alineadas de forma óptima con las inserciones o deleciones apropiadas de los nucleótidos con otro ácido nucleico (o su cadena complementaria), existe una identidad entre las secuencias de nucleótidos de al menos aproximadamente 85%, preferiblemente al menos aproximadamente 90%, y más preferiblemente al menos aproximadamente 95%, 96%, 97%, 98% ó 99% de las bases nucleotídicas, medida mediante cualquier algoritmo notorio de identidad de las secuencias, tal como FASTA, BLAST o Gap, según se ha descrito anteriormente. Aplicado a los polipéptidos, la expresión "identidad substancial" quiere decir que dos secuencias peptídicas, cuando están alineadas de forma óptima, tal como mediante los programas GAP o BESTFIT usando pesos de gap por defecto, comparten al menos 75% o 80% de identidad de las secuencias, preferiblemente al menos 90% o 95% de identidad de las secuencias, incluso más preferiblemente al menos 98% o 99% de identidad de las secuencias. Preferiblemente, las posiciones de los restos que no son idénticas difieren en las sustituciones conservadoras de aminoácidos. Una "sustitución conservadora de aminoácidos" es una en la que un resto aminoacídico es sustituido por otro resto aminoacídico que tiene una cadena lateral (grupo R) con propiedades químicas similares (por ejemplo, carga o hidrofobia). En general, una sustitución conservadora de aminoácido no cambiará sustancíalmente las propiedades funcionales de una proteína. En los casos en los que dos o más secuencias de aminoácidos difieran entre sí por sustituciones conservadoras, la identidad porcentual de las secuencias o el grado de similitud puede aumentarse para conseguir la naturaleza conservadora de la sustitución. Los medios para realizar este aumento son notorios para los expertos en la técnica. Véase, por ejemplo, Pearson, Methods Mol. Biol., 24: 307-31 (1994), que se incorpora a la presente memoria por referencia. Ejemplos de grupos de aminoácidos que tienen cadenas laterales con propiedades químicas similares incluyen 1 ) cadenas laterales alifáticas: glicina, alanina, valina, leucina e ¡soleucina; 2) cadenas laterales alifáticas con hidroxilo: serina y treonina; 3) cadenas laterales que contienen amida: asparragina y glutamina; 4) cadenas laterales aromáticas: fenilalanina, tirosina, y triptófano; 5) cadenas laterales básicas: lisina, arginina, e histídina; y 6) cadenas laterales que contienen azufre son cisteína y metionina. Grupos de sustitución conservadora de aminoácidos preferidos son: valina-leucina-isoleucina, fenilalanina-tirosina, lisina-arginina, alanina-valina, glutamato-aspartato y asparragina-glutamina. De forma alternativa, un reemplazo conservador es cualquier cambio que tenga un valor positivo en la matriz del logaritmo de la probabilidad PAM250 que se describe en Gonnet y cois., Science, 256: 1443-45 (1992), que se incorpora a la presente memoria por referencia. Un reemplazo "moderadamente conservadora" es cualquier cambio que tenga un valor no negativo en la matriz del logaritmo de la probabilidad PAM250. La similitud entre secuencias para los polipéptidos típicamente se mide usando programas de análisis de secuencias. Los programas de análisis de proteínas emparejan secuencias similares usando mediciones de similitud asignadas a diversas sustituciones, deleciones y otras modificaciones, que incluyen sustituciones conservadoras de aminoácidos. Por ejemplo, GCG contiene programas tal como "Gap" y "Bestfif que pueden usarse con parámetros por defecto para determinar la homología de las secuencias o la identidad de las secuencias entre polipéptidos con una relación muy estrecha, tal como polipéptidos homólogos de especies de organismos diferentes o entre una proteína natural y un mutante de la misma. Véase, por ejemplo, el paquete Wisconsin Versión 10.3. Las secuencias polipeptídicas también pueden compararse usando FASTA usando los parámetros por defecto o recomendados, un programa FASTA del paquete Wisconsín Versión 10.3. (por ejemplo, FASTA2 y FASTA3) proporciona las alineaciones y la identidad porcentual de las secuencias de las regiones de mejor coincidencia entre las secuencias objeto y de investigación (Pearson (1990); Pearson (2000)). Otro algoritmo preferido para comparar una secuencia de la invención con una base de datos que contiene un gran número de secuencias de diferentes organismos es el programa informático BLAST, especialmente blastp o tblastn, usando los parámetros por defecto. Véase, por ejemplo, Altschul y cois., J. Mol. Biol. 215: 403-410 (1990); Altschul y cois., Nucleic Acid Res. 25: 3389-402 (1997); que se incorporan a la presente memoria por referencia. La longitud de las secuencias polipeptídicas que se comparan para determinar la homología generalmente será de al menos aproximadamente 16 restos aminoacídicos, habítualmente al menos aproximadamente 20 restos, más habitualmente al menos aproximadamente 24 restos, típicamente al menos aproximadamente 28 restos, y preferiblemente más de aproximadamente 35 restos. Cuando se busca en una base de datos que contiene secuencias de un gran número de organismos diferentes, es preferible comparar la secuencia de aminoácidos. Tal como se usa en la presente memoria, los términos "marcador" o '"marcado" se refieren a la incorporación de otra molécula al anticuerpo. En una modalidad, el marcador es un marcador detectable, por ejemplo, la incorporación de un aminoácido radiomarcado o la unión a un polipéptido de restos biotinilados que puedan ser detectados mediante avidina marcada (por ejemplo, estreptavidina que contiene un marcador fluorescente o actividad enzimática que puede detectarse por procedimientos ópticos o colorimétricos). En otra modalidad, el marcador puede ser terapéutico, por ejemplo, un conjugado de fármacos o toxina. En la técnica se conocen diversos procedimientos de marcado de polipéptidos y glucoproteínas y pueden usarse. Ejemplos de marcadores de polipéptidos incluyen, pero sin limitación, los siguientes: radioisótopos o radionúclidos (por ejemplo, 3H, 14C, 15N, 35S, 90Y, 99Tc, 111ln, 125l, 131l), marcadores fluorescentes (por ejemplo, FITC, rodamina, sustancias fosforescentes de lantánido), marcadores enzimáticos (por ejemplo, peroxidasa de rábano, ß-galactosidasa, luciferasa, fosfatasa alcalina), marcadores quimioluminíscentes, grupos biotinilados, epítopos polipeptídícos predeterminados reconocidos por un testigo secundario (por ejemplo secuencias de pares de cremalleras de leucina, sitios de unión de anticuerpos secundarios, dominios de unión de metales, marcadores de epítopos), agentes magnéticos, tales como quelatos de gadolinio, toxinas tales como toxina pertussis, taxol, citocalasina B, gramicidina D, bromuro de etidio, emetina, mitomicina, etopósido, tenopósido, vincristina, vinblastina, colchicina, doxorrubicina, daunorrubicina, dihidroxi antracína diona, mitoxantrona, mitramicina, actinomicína D, 1-deshidrotestosterona, glucocorticoides, procaína, tetracaína, lidocaína, propranolol, y puromícina y sus análogos u homólogos. En algunas modalidades, los marcadores se unen mediante espaciadores de diversas longitudes para reducir el potencial impedimento estérico.

Claims (12)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Una combinación de un anticuerpo monoclonal contra

MAdCAM o porción de unión de antígenos del mismo con un agente contra la fibrosis. 2.- La combinación de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque el agente contra la fibrosis es un inhibidor de caspasa. 3.- La combinación de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada además porque el inhibidor de caspasa es un compuesto de la fórmula I

Fórmula I en la que A es un aminoácido natural o no natural de las Fórmulas lla-i:

B es un átomo de hidrógeno, un átomo de deuterio, alquilo, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, 2-benzoxazolilo, 2-oxazolilo sustituido, (CH2)n-cicloalquílo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo sustituido), (CH2)n-(heteroarilo), (CH2)n-(heteroarilo sustituido), halometilo, C02R12, CONR13R14, CH2ZR15, CH2OCO(arilo), CH2OCO(heteroarilo), o CH2OPO(R16)R17, donde Z es un átomo de oxígeno o azufre, o B es un grupo de las Fórmulas llla-c:

R1 es alquilo, cícloalquilo, (cicloalquil)alquilo, fenilo, fenilo sustituido, fenilalquilo, fenilalquilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, (1 ó 2 naftil)alquilo, (1 ó 2 naftil)alquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, (heteroaril)alquilo, (heteroaril)alquilo sustituido, R1a(R1b)N, o R1cO; y R2 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, (cicloalquil)alquilo, fenilo, fenilo sustituido, fenilalquilo, fenilalquilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, (1 ó 2 naftil)alquilo, o (1 ó 2 naftil)alquilo sustituido; Y en el que: R1a y R1b son independientemente hidrógeno, alquilo, cicloalquilo, (cicloalquil)alquilo, fenilo, fenilo sustituido, fenilalquilo, fenilalquilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, (1 ó 2 naftil)alquilo, (1 ó 2 naftil)alquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, (heteroaril)alquilo, o (heteroaril)alquilo sustituido, con la condición de que R a y R1b no pueden ser ambos hidrógeno; R1c es alquilo, cicloalquilo, (cicloalquil)alquilo, fenilo, fenilo sustituido, fenilalquilo, fenilalquilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, (1 ó 2 naftil)alquilo, (1 ó 2 naftil)alquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, (heteroaril)alquilo, o (heteroaril)alquilo sustituido; R3 es alquilo C-?-6, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, (CH2)n-NH2, (CH2)NHCOR9, (CH2)n-N(C=NH)NH2, (CH2)m-C02R2, (CH2)m-OR10, (CH2)m-SR 1, (CH2)n-cícloalquilo, (CH2)n-fenilo,(CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo) o (CH2)n-(heteroarilo), en los que heteroarilo incluye piridilo, tienilo, furilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, pirazinilo, pirimidilo, triazinilo, tetrazolilo, e indolilo; R3a es hidrógeno o metilo, o R3 y R3a tomados conjuntamente son -(CH2)d- donde d es un número entero de 2 a 6; R4 es fenilo, fenilo sustituido, (CH2)m-fenilo, (CH2)m-(fenilo sustituido), cicloalquilo, o cicloalquilo benzocondensado; R5 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R6 es hidrógeno, flúor, oxo, alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo), OR10, SR11, o NHCOR9; R7 es hidrógeno, oxo (es decir, =0), alquilo ¡nferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenílo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R8 es alquilo inferior, cicloalquilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo), o COR9; R9 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo), OR12, o NR13R14; R10 es hidrógeno, alquilo ¡nferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R11 es alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R12 es alquilo inferior, cicloalquílo, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R13 es hidrógeno, alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, (CH2)n-cicloalquilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o (CH2)n-(1 ó 2-naftilo); R14 es hidrógeno o alquilo inferior; o R13 y R14 tomados conjuntamente forman un anillo carbocíclico o heterocíclico de cinco a siete miembros, tal como morfolina, o piperazina sustituida en N; R15 es fenilo, fenilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, heteroarilo, (CH2)n-fenilo, (CH2)n- (fenilo sustituido), (CH2)n-(1 ó 2-naftilo), o (CH2)n-(heteroarilo); R16 o R17 son independientemente alquilo inferior, cicloalquilo, fenilo, fenilo sustituido, naftilo, fenilalquilo, fenilalquilo sustituido, o (cicloalquil)alquilo; R18 y R19 son independientemente hidrógeno, alquilo, fenilo, fenilo sustituido, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido), o R18 y R19 tomados conjuntamente son -(CH=CH)2-; R20 es hidrógeno, alquilo, fenilo, fenilo sustituido, (CH2)n-fenilo, (CH2)n-(fenilo sustituido); R21, R22 y R23 son independientemente hidrógeno, o alquilo; X es CH2, (CH2)2, (CH2)3, o S; Y1 es O o NR23; Y2 es CH2, O, o NR23; a es 0 ó 1 y b es 1 ó 2, con la condición de que cuando a es 1 entonces b es 1 ; c es 1 ó 2, con la condición de que cuando c es 1 entonces a es 0 y b es 1 ; m es 1 ó 2; y n es 1 , 2, 3, o 4; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 4.- La combinación de conformidad con la reivindicación 3, caracterizada además porque el compuesto de la fórmula I se selecciona del siguiente grupo de compuestos: Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fluoro-4-yodofenil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-clorofenil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6,-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-bromofenil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5,,6,-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fluorofenil)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-trifluorometilfenil)oxamil)valinil]amino-5-(2,,3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-antril)oxamil)valinil]amino-5-(2',3',5',6'- tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-terc-butilfenil)oxamil)alaninil]am¡no-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N,-(2-trifluorometilfenil)oxamil)alaninil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2,6-difluorofenil)oxamil)alaninil]amino-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(1-naftil)oxamil)alaninil]amino-5-(2',3\5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(4-metoxifenil)oxamil)alaninil]amíno-5-(2',3',5',6'-tetrafluorofenoxi)-4-oxopentanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-trifluorometilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-terc-butilmetilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-bencilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico; Acido (3S)-3-[N-(N'-(2-fenilfenil)oxamil)valinil]amino-4-oxobutanoico. 5.- La combinación de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada además porque el anticuerpo contra MAdCAM o porción de unión de antígenos del mismo es un anticuerpo monoclonal humano o porción de unión de antígenos. 6.- La combinación de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada además porque el anticuerpo o porción posee al menos una de las siguientes propiedades: (a) se une a células humanas; (b) tiene una selectividad por MAdCAM comparada con VCAM o fibronectina al menos 100 veces mayor; (c) se une a MAdCAM humana con una Kd de 3 x 10"10 M o menor; o (d) inhibe la unión de células que expresan a4ß7 a MAdCAM humana, (e) inhibe el reclutamiento de linfocitos al tejido linfoide gastrointestinal. 7 '.- La combinación de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 5 ó 6, caracterizada además porque dicho anticuerpo o porción de unión de antígenos inhibe la unión de MAdCAM humana a a4ß7, y en la que el anticuerpo o su porción tiene al menos una de las siguientes propiedades: (a) compite cruzadamente con un anticuerpo de referencia por la unión a MAdCAM; (b) compite con un anticuerpo de referencia por la unión a MAdCAM; (c) se une al mismo epítopo de MAdCAM que un anticuerpo de referencia; (d) se une a MAdCAM sustancialmente con la misma Kd que un anticuerpo de referencia; (e) se une a MAdCAM sustancialmente con la misma velocidad de disociación que un anticuerpo de referencia; en la que el anticuerpo de referencia se selecciona del grupo que consiste en: anticuerpo monoclonal 1.7.2, anticuerpo monoclonal 1.8.2, anticuerpo monoclonal 6.14.2, anticuerpo monoclonal 6.22.2, anticuerpo monoclonal 6.34.2, anticuerpo monoclonal 6.67.1 , anticuerpo monoclonal 6.73.2, anticuerpo monoclonal 6.77.1 , anticuerpo monoclonal 7.16.6, anticuerpo monoclonal 7.20.5, anticuerpo monoclonal 7.26.4, anticuerpo monoclonal 9.8.2, anticuerpo monoclonal 6.22.2-mod, anticuerpo monoclonal 6.34.2-mod, anticuerpo monoclonal 6.67.1-mod, anticuerpo monoclonal 6.77.1-mod y anficuerpo monoclonal 7.26.4-mod. 8.- La combinación de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, caracterizada además porque el anticuerpo monoclonal o porción de unión de antígenos del mismo se selecciona de los siguientes anticuerpos: (a) la cadena pesada comprende las secuencias de aminoácidos de las CDR1 , CDR2 y CDR3 de la cadena pesada de un anticuerpo de referencia que se selecciona del grupo que consiste en: 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2, 6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5, 7.26.4, 9.8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1-mod, 6.77.1-mod y 7.26.4-mod. (b) la cadena ligera comprende las secuencias de aminoácidos de las CDR1 , CDR2 y CDR3 de la cadena ligera de un anticuerpo de referencia que se selecciona del grupo que consiste en: 1.7.2, 1.8.2, 6.14.2, 6.22.2, 6.34.2, 6.67.1 , 6.73.2,

6.77.1 , 7.16.6, 7.20.5,

7.26.4, 9.

8.2, 6.22.2-mod, 6.34.2-mod, 6.67.1 -mod, 6.77.1 -mod y 7.26.4-mod. (c) el anticuerpo comprende una cadena pesada de (a) y una cadena ligera de (b); y (d) el anticuerpo de (c) en el que las secuencias de aminoácidos de las CDR de la cadena pesada y cadena ligera se seleccionan del mismo anticuerpo de referencia.

9.- Una combinación de un anticuerpo contra integrina a4ß7 o porción de unión de antígenos del mismo con un inhibidor de caspasa, como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4.

10.- El uso de una combinación como la que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones precedentes para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la fibrosis hepática.

11.- El uso que se reclama en la reivindicación 10, en el que la fibrosis hepática es fibrosis hepática asociada a hepatitis C, enfermedad hepática alcohólica o esteatohepatitis no alcohólica.

12.- Una composición farmacéutica de una combinación como la que se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 con un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.