MX2007000610A - Tratamiento de combinacion para enfermedades malignas no hematologicas usando un anti-cuerpo de receptor de factor i de crecimiento de tipo anti-insulina. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a un metodo terapeutico para el tratamiento de enfermedades malignas no hematologicas que comprende administrar anticuerpos anti-IGF-1 R, particularmente anticuerpos anti-IGF-1 R humanos a un paciente, conjuntamente con la administracion de al menos otro agente terapeutico; la invencion se refiere adicionalmente a composiciones farmaceuticas que comprenden estos anticuerpos y metodos para usar estas composiciones de los mismos para el tratamiento.

Description

TRATAMIENTO DE COMBINACIÓN PARA ENFERMEDADES MALIGNAS NO HEMATOLOGICAS USANDO UN ANTI-CUERPO DE RECEPTOR DE FACTOR I DE CRECIMIENTO DE TIPO ANTMNSULINA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un método de tratamiento para enfermedades malignas no hematológicas que comprende la administración de anticuerpos de receptor de factor I de crecimiento de tipo anti-insulina (IGF-1R), conjuntamente con otros agentes terapéuticos como agentes quimioterapéuticos y terapia hormonal. El sistema señalizador de factor de crecimiento de tipo insulina (IGF) desempeña una función importante en el crecimiento y desarrollo de muchos tejidos y regula el crecimiento global. El factor de crecimiento de tipo insulina (IGF-1) es un polipéptido de 7.5 kD que circula en el plasma en concentraciones elevadas y es detectable en la mayoría de los tejidos. El IGF-1 estimula la diferenciación celular y la proliferación celular, y es necesario por la mayoría de los tipos de células de mamíferos para una proliferación sostenida. Estos tipos de células incluyen, entre otras, fibroblastos diploides humanos, células epiteliales, células de músculos lisos, linfocitos T, células neurales, células mieloides, condrocitos, osteoblastos y células madre de médula ósea. La primera etapa en la trayectoria de transducción que conduce a la proliferación o diferenciación celular estimulada por IGF-1 es la unión de IGF-1 o IGF-2 (o insulina a concentraciones susprafisiológicas) al receptor de IGF-1. El receptor de IGF-1 (IGF-1 R) está compuesto por dos tipos de subunídades: una subunidad alfa (una proteína de 130-135 kD que es completamente extracleular y funciona en la unión de ligandos) y una subunidad beta (una proteína de transmembrana de 95 kD, con dominios de transmembrana y citoplásmicos). Las proteínas de unión a IGF (IGFBP) tienen efectos inhibidores del crecimiento uniéndose competitivamente, al menos en parte, a IGF y evitando su asociación con IGF-1 F. Las interacciones entre IGF-1 , IGF-2, IGF1 R y IGFBP afecta a muchos procesos fisiológicos y patológicos como el desarrollo, crecimiento y regulación metabólica. El IGF-1 R es inicialmente sintetizado como un polipéptido proreceptor de cadena única que es tratado por glicosilación, escisión proteolítica y unión covalente para ensamblarse en forma de un heterotetrámero maduro de 460 kD que comprende dos subunidades alfa y dos subunidades beta. El (o las) subunidade(s) beta posee(n) actividad de tirosina-quinasa activada por ligandos. Esta actividad está implicada en las trayectorias señalizadora que median la acción de ligandos, que incluye la autofosforilacíón de la subunidad beta y la fosforilación de los sustratos de IGF-1 R. Hay una evidencia considerable de una función de IGF-1 y/o IGF-1 R en el mantenimiento de células tumorales in vitro e in vivo. Los niveles de IGF-1 R son elevados en los tumores de pulmón (Kaiser et al., J. Cáncer Res. Clin. Oncol. 119: 665-668, 1993; Moody et al., Life Sciences 52: 1161-1173, 1993; Macauley et al., Cáncer Res., 50: 2511-2517, 1990), mamas (Pollak et al., Cáncer Lett. 38: 223-230, 1987; Foekens et al., Cáncer Res. 49: 7002-7009, 1989; Cullen et al., Cáncer Res. 49: 7002-7009, 1990; Arteaga et al., J. Clin. Invest. 84: 1418-1423, 1989), próstata y colon (Remaole-Bennet et al., J. Clin. Endocrinol. Metab. 75: 609-616, 1992; Guo et al., Gastroenterol. 102: 1101 -1108, 1992). Además, el IGF-1 parece que es un estimulador autocrino de gliomas humanos (Sandberg-Nordqvist et al, Cáncer Res. 53: 2475-2478, 1993),, mientras que el IGF-1 estimulaba el crecimiento de fibrosarcomas que sobreexpresaban IGF-1 R (Butier et al., Cáncer Res. 58: 3021-27, 1998). Además, los individuos con niveles "normales elevados" de IGF-1 tienen un riesgo aumentado de cánceres comunes en comparación con individuos con niveles de IGF-1 en el intervalo "normal bajo" (Rosen et al., Trends Endocrino/. Mefab. 10: 136-41 , 1999). Para un examen de la función que desempeña la interacción de IGF-1 /receptor de IGF-1 en el crecimiento de una diversidad de tumores humanos, véase Macaulay, Br. J. Cáncer, 65: 311 -320, 1992. Actualmente están en uso numerosas clases de agentes antineoplástícos. El docetaxel, uno de un grupo de fármacos denominado "taxanos", que son derivados del corcho y las espinas de árboles Taxus baccata, es el primer agente anticancerígeno que se mostró que tenía una velocidad de respuesta significativamente superior que la doxorubicina, un agente muy activo y ampliamente usado en quimioterapia en el tratamiento de primera línea de cáncer de mamas metastático. El docetaxel es también el primer fármaco quimíoterapéutico como un agente único para demostrar una supervivencia aumentada entre pacientes con cáncer de mamas avanzado en comparación con la combinación de mitomicina C y vimblastina, un régimen comúnmente usado en esta población de pacientes. El tiempo mediano para el progreso y el tiempo para el fallo de tratamiento fueron significativamente más largos para el docetaxel que para la mitomicina C en combinación con vimblastina, y la tasa de supervivencia de un año fue significativamente mayor. Se registraron también resultados prometedores para el docetaxel en otras enfermedades malignas humanas, como los cánceres de ovarios, pulmón, cerebro y cuello, gástrico y pancreático. El paclitaxel, que es también un taxano, se une a los microtúbulos y evita su desestructuración molecular, inhibiendo así la mitosis (división celular). Con eje todavía en su sitio, la célula no se puede dividir en células hijas. El paclitaxel es el más eficaz contra carcinomas de ovarios y carcinomas de mamas avanzados. La terapia hormonal puede ser muy eficaz para rebajar el riesgo de recaída en mujeres con cáncer de mamas positivo a receptores y hormonas, el tamoxifeno es la terapia hormonal que ha durado más tiempo, casi 30 años. Bloquea el efecto de los estrógenos en las células de cáncer de mamas, evitando el crecimiento de las células. El tamoxifeno puede reducir la recaída en 40-50% en mujeres post-menopáusicas, y en 30-50% en mujeres pre-menopáusicas. Rebaja también el riesgo de que se desarrolle un nuevo cáncer de mamas en la mama no afectada, y puede ralentizar el progreso de la enfermedad avanzada.

En los últimos años, han sido usados inhibidores de aromatosa como una terapia hormonal. Este tipo de terapia está recomendada solamente para mujeres post-menopáusicas con cáncer de mamas positivo a receptores de hormonas. Funciona bloqueando la producción de estrógenos en los tejidos de los músculos y grasa, que es la misma fuente de estrógenos en mujeres más allá de la menopausia, después de lo cual los ovarios dejan de producir niveles significativos de estrógenos. El cáncer de próstata es el cáncer más común y la segunda causa de muerte por cáncer en hombres en los Estados Unidos. Aproximadamente un 10% de los casos iniciales de cáncer de próstata presentan enfermedad metastática. Sin embargo, en el resto, las metástasis se desarrollarán a pesar del tratamiento de cirugía, radiación o terapia médica, y las metástasis finalmente resultarán refractarias al tratamiento hormonal. El uso de quimioterapia en cáncer de próstata progresivo refractario a hormonas (HRPC) (independiente de andrógenos) ha estado caracterizado históricamente por una escasa eficacia y una elevada toxicidad. Los regímenes más recientes que contienen docetaxel han mostrado una ventaja de supervivencia sobre los regímenes paliativos previos. A pesar de esta tendencia positiva, la supervivencia mediana de pacientes de HRPC tratados con docetaxel y prednisona es de solamente 18.9 meses; claramente, son necesarios regímenes más eficaces para el tratamiento de pacientes de HRPC. Aunque los tratamientos antí-cancerígenos actualmente disponibles han sido satisfactorios, las respuestas completas a estos tratamientos son observadas con poca frecuencia, y la población de pacientes refractarios a estos tratamientos es todavía grande. Por tanto, es necesario el desarrollo de nuevos regímenes terapéuticos, particularmente los capaces de aumentar o potenciar la actividad anti-tumoral de otros agentes antineoplásticos. Teniendo en cuenta las funciones que IGF-1 e IGF-1 R tienen en estos trastornos como cáncer y otros trastornos proliferadores cuando son sobreexpresados IGF-1 y/o IGF-1 R, han sido producidos anticuerpos para IGF-1 R que bloquean la unión de IGF-1 o IGF-2 a IGF-1 R. Estos anticuerpos son descritos, por ejemplo, en la solicitud de patente internacional n° WO 02/053596, publicada el 11 de Julio de 2002; solicitudes de patentes internacionales n° WO 05/016967 y WO 05/016970, ambas publicadas el 24 de Febrero de 2005; solicitud de patente internacional n° WO 03/106621 , publicada el 24 de Diciembre de 2003; solicitud de patente internacional n° WO 04/083248, publicada el 30 de Septiembre de 2004; solicitud de patente internacional n° WO 03/100008, publicada el 4 de Diciembre de 2003; publicación de patente internacional WO 04/087756, publicada el 14 de Octubre de 2004; y solicitud de patente internacional n° 05/005635, publicada el 26 de Enero de 2005. Debido a la capacidad de bloquear una trayectoria de supervivencia de células tumorales, es deseable usar estos anticuerpos anti-IGF-1 R para tratar el cáncer, particularmente enfermedades malignas no hematológicas, en pacientes para obtener una ventaja clínica mejorada con relación a los regímenes estándar de tratamiento de cáncer solamente.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se dirige a un método para el tratamiento de una enfermedad maligna no hematológica avanzada en un paciente que necesita este tratamiento, que comprende la etapa de administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo anti-IGF-1 R. Más particularmente, la presente invención se dirige a un método que comprende la etapa de administrar al paciente un anticuerpo que se une específicamente a IGF-1 R en combinación con una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un agente seleccionado entre el grupo que consiste en un agente de alquilación, un antagonista de folato, un antagonista de pirimidina, un antibiótico de antraciclina, un compuesto de platino, un taxano, un alcaloide vinca, un análogo de camptotecina, un inhibidor de EGFR y un agente de terapia hormonal. Preferentemente, el anticuerpo es uno que se une específicamente a IGF-1R humano. En una modalidad preferida de la presente invención, el anticuerpo antí-IGF-1 R tiene las siguientes propiedades: (a) una afinidad de unión por IGF-1 R humano de Kd de 8 x 10'9 o menos, (b) inhibición de la unión entre IGF-1 R humano e IGF-1 con una IC50 de menos de 100 nM. En otra modalidad preferida de la presente invención, el anticuerpo anti-IGF-1R comprende (a) una cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3 de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 4.9.2, 4.17.3 y 6.1.1 y (b) una cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3 de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 4.9.2, 4.17.3 y 6.1.1 , o (c) secuencias que tienen cambios a partir de las secuencias de CDR de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 4.9.2, 4.17.3 y 6.1.1 , y dichas secuencias son seleccionadas entre el grupo que consiste en cambios conservadores, en que los cambios conservadores son seleccionados entre el grupo que consiste en la sustitución de residuos no polares con otros residuos no polares, sustitución de residuos polares con carga con otros residuos polares sin carga, sustitución de residuos polares con carga con otros residuos polares con carga y sustitución de residuos estructuralmente similares; y sustituciones no conservadoras, en que las sustituciones no conservadoras se seleccionan entre el grupo que consiste en sustitución de residuos polares sin carga con residuos polares con carga y sustitución de residuos polares con residuos no polares, adiciones y deleciones. La presente invención se dirige también a una composición farmacéutica para el tratamiento de una enfermedad maligna no hematológica que comprende (a) una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo que se une específicamente a IGF-1 R, (b) una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un agente seleccionado entre el grupo que consiste en un agente de alquilación, un antagonista de folato, un antagonista de pirimidina, un antibiótico citotóxico, un compuesto de platino, un taxano, un alcaloide vinca, un inhibidor de topoisomerasa, un inhibidor de EGFR y un agente de terapia hormonal; y (c) un vehículo farmacéuticamente aceptable.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Las Figs. 1A-1 C muestran alineaciones de secuencias de nucleótidos de las regiones variables de cadenas ligeras de seis anticuerpos anti-IGF-1 R humanos unos respecto a otros y respecto a secuencias de líneas germinales. La Fig. 1A muestra la alineación de secuencias de nucleótidos de la región variable de la cadena ligera (VL) de anticuerpos 2.12.1 (SEQ ID N° 1 ) 2.13.2 (SEQ ID N° 5), 2.14.3 (SEQ ID N° 9) y 4.9.2 (SEQ ID N° 13) unos respecto a otros y respecto a la secuencia Vk A30 de línea germinal (SEQ ID N° 39). La Fig. 1B muestra la alineación de la secuencia de nucleótidos de VL de anticuerpo 4.17.3 (SEQ ID N° 17) a la secuencia Vk 012 de línea germinal (SEQ ID N° 41 ). La Fig. 1C muestra la alineación de las secuencia de nucleótidos de VL de anticuerpo 6.1.1 (SEQ ID N° 21 ) a la secuencia Vk A27 de línea germinal (SEQ ID N° 37). Las alineaciones muestran también las regiones CDR de la VL de cada anticuerpo. Las secuencias de consenso de las Figs. 1A-1 C se muestran en SEQ ID N° 53-55, respectivamente. Las Figs. 2A-2D muestran alineaciones de las secuencias de nucleótidos de las regiones variables de cadenas pesadas de seis anticuerpos anti-IGF-1 R humanos unas respecto a otras y respecto a secuencias de líneas germinales. La Fig. 2A muestra la alineación de la secuencia de nucleótidos de VH de anticuerpo 2.12.1 (SEQ ID N° 3) respecto a la secuencia de VH de DP-35 (SEQ ID N° 29). La Fig. 2B muestra la alineación de la secuencia de nucleótidos de VH de anticuerpo 2.14.3 (SEQ ID N° 11 ) respecto a la secuencia VIV-4/4.35 de línea germinal (SEQ ID N° 43). Las Figs. 2C muestran las alineaciones de las secuencias de nucleótidos de VH de anticuerpos 2.13.2 (SEQ ID N° 7), 4.9.2. (SEQ ID N° 15) y 6.1.1 (SEQ ID N° 23) unas respecto a otras y respecto a la secuencia de VH de DP-47 de línea germinal (SEQ ID N° 31 ). La Fig. 2D muestra la alineación de la secuencia de nucleótidos de VH de anticuerpo 4.17.3 (SEQ ID N° 19) respecto a la secuencia de VH de DP-71 de línea germinal (SEQ ID N° 35). La alineación muestra también las regiones de CFT de los anticuerpos. Las secuencias de consenso para las Figs. 2A-2D se muestran en las SEQ ID N° 56-59, respectivamente. Las Figs. 3A-3C muestran alineaciones de las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesadas y ligeras de anticuerpos 2.13.2 y 2.12.1 con las secuencias de línea germinal de las que derivan. La Fig. 3A muestra una alineación de la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de anticuerpo 2.13.2 (SEQ ID N° 45) con la se la secuencia germinal DP-47 (3/23)/D6-19/JH6 (SEQ ID N° 46). La Fíg. 3B muestra una alineación de la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de anticuerpo 2.13.2 (SEQ ID N° 47) con la de la secuencia de línea germinal A30/JK2 (SEQ ID N° 48). La Fig. 3C muestra una alineación de la secuencia de aminoácidos de la cadena pesada de anticuerpo 2.12.1 (SEQ ID N° 49) con la de la secuencia de línea germinal DP-35 (3-11)/D3-3/JH6 (SEQ ID N° 50). La fig. 3D muestra una alineación de la secuencia de aminoácidos de la cadena ligera de anticuerpo 2.12.1 (SEQ ID N° 51) con la de la secuencia de línea germinal A30/Jk1 (SEQ ID N° 52). Para las Figuras 3A-3C, las secuencias de señal están en letras en cursiva, las CDR están subrayadas, los dominios constantes están negrita, las mutaciones concretas (FR) están destacas con un signo más ("+") por encima del residuo de aminoácido y las mutaciones CDR están destacas con un asterisco por encima del residuo de aminoácido. El cuadro A muestra el número de mutaciones en diferentes regiones de las cadenas pesadas y ligeras de 2.13.2 y 2.12.1 en comparación con las secuencias de línea germinal.

CUADRO A La Figura 4 muestra que los anticuerpos anti-IGF-1 R 2.13.2 y 4.9.2 reducen la señal de fosfotirosína IGF-1 R en tumores 3T3-IGF-1 R.

La Figura 5 muestra que el anticuerpo anti-IGF-1 R 2.13.2 inhibe el crecimiento del tumor 3T3-IGF-1 R in vivo.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se dirige al tratamiento de enfermedades malignas no hematológicas, que incluyen cánceres de mamas, pulmón, cerebro, piel, ovarios, próstata, cabeza y cuello, colon-rectal, gástrico, vejiga, renal, esofágico y pancreático. El tratamiento de cánceres tanto en fases tempranas como avanzadas (metastáticos) está dentro del alcance de la presente invención. En las modalidades preferidas, el método de la presente invención es usado en el tratamiento de cáncer de mamas y cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC). Hay muchas clases de fármacos quimioterapéuticos actualmente en uso para el tratamiento de enfermedades malignas no hematológicas que son adecuados para ser usados en la terapia de combinación de la presente invención. Por ejemplo, los agentes de alquilación son una clase de fármacos que alquilan DNA, y restringen el desenrollado y replicacíón de cadenas. Un agente de alquilación preferido para ser usado en los métodos de la presente invención es ciclofosfamida (CYTOXAN), ifosfamida (IFEX), hidrocloruro de mecloretamína (MUSTARGEN), tiotepa (THIOPLEX), estreptozotocína (ZANOSAR), carmustina (BICNU, GLIADEL WAFER), lomustina (CEENU), y dacarbacina (DTIC-DOME). Un agente de alquilación preferido para ser usado en los métodos de la presente invención es ciclofosfamida. Los antagonistas de folato se unen a dihidrofolato-reductasa (DHFR) e interfieren con la síntesis de pirimidina (timidina). El metotrexato y pemetrexed (ARIMTA) son antagonistas de folato adecuados para ser usados en los métodos de la presente invención. Además de la DHFR, el pemetrexed inhibe también la timidilato-sintasa y glicinamida-ribonucleótido-formil-transferasa, otras dos enzimas dependientes de folato involucradas en la síntesis de timidina. Los antagonistas de pírimidina inhiben las enzimas involucradas en la síntesis de pirimidina. Como análogos de pirimidina, interfieren también con la producción de DNA compitiendo con los nucleótidos normales para la incorporación en la molécula de DNA. Los antagonistas de pirimidina adecuados para ser usados en los métodos de la presente invención incluyen 5-fluorouracilo (5-FU); capecitabina (XELODA), un profármaco de 5'-desoxi-5-fluorouridina (5'-FDUR), que es enzimáticamente convertido en 5-FU in vivo; y gencitabina (GEMZAR). Los antibióticos de antraciclína ejercen un efecto citotóxico inhibiendo el desenrollado de DNA mediante la intercalación entre cadenas de DNA. Las aantraciclicnas y derivados de antraciclinas incluyen hidrocloruro de doxorubicina (ADRIAMICINA, RUBEX, DOXIL), hidrocloruro de epirubicina (ELLENCE, PHARMORUBICINA, daunorubicina (CERUBIDINA, DAUNOXOME), nemorubicina, hidrocloruro de idarubicina (IDAMICINA PFS, ZAVEDOS) y mitoxantrona (DHAD, NOVANTRONA). Las antraciclínas preferidas para ser usadas con la presente invención incluyen doxorubícina y epirubícina. Otros antibióticos citotóxicos son útiles como agentes quimioterapéuticos para el cáncer y son adecuados para ser usados en la presente invención. Estos incluyen dactinomicina (actinomicina D, COSMEGEN), plicamicina (MITHRACINA), mítomicina (MUTAMICINA) y bleomicina (BLENOXANO). Es particularmente preferida la dactinomicina. Los compuestos de platino ejercen su efecto antí-neoplástico medíante intercalación e intercalación entre cadenas de DNA, que exhibe también desenrollado de DNA. Los compuestos de platino útiles en los métodos de la presente invención incluyen cisplantino (PLATINOL) y carboplatino (PARAPLATINO). Los taxanos favorecen la estructuración de microtúbulos al mismo tiempo que inhiben su desestructuración en forma de tubulina, bloqueando así la capacidad de una célula para descomponer el huso mitótico durante la mitosis. Han demostrado una actividad significativa contra muchos tumores sólidos en forma de terapia de agente único y en combinación con otros agentes de quimioterapia. Una modalidad de la terapia de combinación de la presente invención incluye el uso de uno o más taxanos en combinación con el anticuerpo IGF-1 R. Los taxanos adecuados para ser usados en combinación con el anticuerpo IGF-1 R incluyen docetaxel (TAXOTERE) y paclitaxel (TAXOL). Los alcaloides vinca, como los taxanos, son "venenos de husos", actuando sobre los microtúbulos que forman el huso mítótico. Inhiben la mitosis interfiriendo con la estructuración de microtúbulos, evitando que se forme el huso. Los alcaloides vinca incluyen vindesina (ELDISINA), sulfato de vimblastina (VELBAN), sulfato de vincristina (ONCOVIN) y tartrato de vinorelbina (NAVELBINA). Un alcaloide vinca preferido para ser usado en los métodos de la presente invención es vinorelbína. Los análogos de camptotecina actúan a través de la inhibición de topoisomerasa I, una enzima crítica para la replicación y envoltura de DNA. Ls niveles de topoisomerasa I son mayores en las células tumorales que en el tejido normal. Los análogos de camptotecina útil en los métodos de la presente invención incluyen irinotecano (CAMPTOSAR) y topotecano (HYCAMTIN). El irinotecano es particularmente preferido. Los inhibidores de topoisomerasa II interfieren con el procedimiento normal de resellado de la rotura de DNA (como lo hacen los inhibidores de topoisomerasa I), e interfieren también con la separación de cromosomas nuevamente replicados, dando lugar a una mutación clastogénica y a la muerte celular potencial. Los antibióticos de antraciclina anteriormente expuestos exhiben una actividad inhibidora de topoisomerasa II. Los derivados de podofilotoxina, un extracto de podofilio de América del Norte, que es un glucósido antimítótico, son también inhibidores de etopoisomerasa II. Los derivados de podofilotoxina adecuados para ser usados en la presente invención incluyen etopósido (VEPESID), fosfato de etopósido (ETOPOPHOS) y tenípósído (VUMON). El etopósido es particularmente preferido.

Los compuestos dirigidos a la inhibición del receptor de factor de crecimiento epidermal (EGFR) tirosina-quinasa (TK) presentan una clase relativamente nueva de fármacos antineoplásticos que son útiles en el método de la presente invención. Muchos cánceres humanos expresan miembros de la familia de EGFR en la superficie celular. Cuando un ligando se une a una EGFR, establece una cascada de reacciones celulares que dan lugar a una división celular aumentada y ejercen una influencia sobre otros aspectos del desarrollo y progreso del cáncer, que incluyen la angiogénesis, extensión metastática e inhibición de apoptosis. Los inhibidores de EGFR-TK pueden dirigir selectivamente a diana uno de los miembros de la familia de EGFR (EGFR (también conocido como HER1 o ErbB-1 ), HER2/neu (también conocido como ErbB-2), HER3 (también conocido como ErbB-3) o HER4 (también conocido como ErbB-4)), o pueden dirigir a diana dos o más de ellos. Los inhibidores de EGFR-TK adecuados para ser usados en la presente invención incluyen gefitinib (IRESSA), erlotinib (TARCEVA), CI-1033 (Pfizer), GW2016 (GlaxoSmíthKIine), EKB-569 (Wyeth), PKI166 (Novartis), CP-724,714 (Pfizer) y BIBX-1382 (Boeringer-lngelheim). Se describen inhibidores adicionales de EGFR-TK en la solicitud de patente de Estados Unidos n° 09/883,752, presentada el 18 de Junio de 2001. Otra modalidad de la terapia de combinación de la presente invención incluye el uso de terapia hormonal en combinación con el anticuerpo IGF-1 R, particularmente antí-estrógenos en el tratamiento del cáncer de mamas. Algunos tratamientos hormonales compiten con los estrógenos para los sitios de unión en el tejido de las mamas. Estos incluyen citrato de tamoxifeno (NOLVADEX) y fulvestrant (FASLODEX). Análogamente, los antí-andrógenos bloquean los receptores de testosterona y, por lo tanto, son útiles en el tratamiento del cáncer de próstata dependiente de andrógenos. Otros tratamientos hormonales incluyen inhibidores de aromatosa. Esta clase de agentes hormonales inactivan la aromatosa, la enzima que convierte andrógenos en estrógenos. Ejemplos de inhibidores de aromatosa adecuados para ser usados en combinación con el anticuerpo IGF-1 R incluyen anastrozol (ARIMIDEX), letrozol (FEMARA), exemastano (AROMACINA) e hidrocloruro de fadrozol. El exemestano es un inhibidor de aromatasa particularmente preferido para ser usado en los métodos de la presente invención. La administración conjunta del anticuerpo con un agente terapéutico adicional (terapia de combinación) incluye administrar una composición farmacéutica que comprende tanto el anticuerpo anti-IGF-1 R como uno o más agentes terapéuticos adicionales, y administrar dos o más composiciones farmacéuticas separadas, una que comprenda el anticuerpo anti-IGF-1 R y el (o los) otro(s) que comprende(n) el o los agente(s) terapéutico(s) adicional(es). Adicionalmente, aunque la administración conjunta o terapia de combinación (o ligada) significa generalmente que el anticuerpo y los agentes terapéuticos adicionales son administrados al mismo tiempo uno y otro, incluye también la dosificación simultánea, secuencial o separada de los componentes individuales del tratamiento.

La presente invención abarca también la administración de otros agentes terapéuticos además del primero y segundo componentes, ya sea de forma concurrente con uno o más de estos componentes, o bien secuencialmente. Estos agentes terapéuticos incluyen analgésicos, vacunas contra el cáncer, agentes anti-vasculares, agentes anti-proliferadores y agentes anti-eméticos. Los agentes anti-eméticos preferidos incluyen hidrocloruro de ondansetron, hidrocloruro de granisetron y metoclopramida. Cada administración puede variar en su duración desde una administración rápida hasta una perfusión continua. Como consecuencia, para los fines de la presente invención, las combinaciones no están exclusivamente limitadas a las que son obtenidas mediante la asociación física de los constituyentes, sino también a las que permiten una administración separada, que puede ser simultánea o espaciada durante un período de tiempo. Las composiciones según la invención son preferentemente composiciones que pueden ser administradas por vía parenteral. Sin embargo, estas composiciones pueden ser administradas por vía oral o intraperitoneal en el caso de terapias regionales localizadas. Como se apreciará por un experto en la técnica, la elección de los agentes terapéuticos que van a ser usados en combinación con anticuerpos IGF-1 R, y la duración de su uso, se determinarán en parte mediante el tipo y la fase del cáncer que esté siendo tratado. Por ejemplo, en cáncer de mamas temprano (en el que el cáncer no se ha extendido fuera de las mamas), la cirugía y la radiación van seguidas generalmente de una quimioterapia adyuvante o terapia hormonal adyuvante, cualquiera de las cuales puede ser combinada con anticuerpos IGF-1 R en los métodos de la presente invención. La quimioterapia de adyuvantes típicos para el cáncer de mamas temprano incluye ciclofosfamida, metotrexato y 5-FU ("CMF"); 5-FU, doxorubicina y ciclofosfamida ("FAC"); docetaxel, doxorubicina y ciclofosfamida ("TAC"); doxorubicina y ciclofosfamida ("AC"); doxorubicina y ciclofosfamida seguidos de paclitaxel ("AC y T"); y 5-FU, epirubicina y ciclofosfamida ("FEC"). El tamoxifeno es un tratamiento hormonal preferido en esta fase. En el cáncer de mamas localmente avanzado, en el que el cáncer se ha extendido solamente hasta los tejidos de las proximidades o nodulos linfáticos, a menudo se proporciona a la paciente una quimioterapia antes de la cirugía y radiación, que van seguidas a continuación de una terapia hormonal adyuvante. Alternativamente, la cirugía/radiación está seguida de quimioterapia adyuvante, y seguidamente terapia hormonal adyuvante. Los anticuerpos IGF-1 R pueden ser administrados conjuntamente con los agentes de la terapia quimioterapéutica u hormonal, tanto si son usados antes como después de la cirugía/radiación. Los regímenes típicos de quimioterapia para cáncer de mamas localmente avanzado incluyen FAC, AC, FEC y doxorubicina más docetaxel "AT"). El cáncer de mamas metastático se ha extendido a otras partes del cuerpo desde las mamas en donde comenzó. La quimioterapia opcionalmente puede estar precedida de terapia hormonal. La terapia hormonal de primera línea incluye actualmente tamoxifeno y anastrozol. Los regímenes de quimioterapia de primera línea incluyen actualmente FAC, TAC, docetaxel más epirubicina, docetaxel, paclitaxel, capecitabina, vinorelbina y trastuzumab (HECEPTIN). Los tratamientos de segunda línea incluyen docetaxel, solo o en combinación con capecitabina. Los métodos de la presente invención son adecuados para ser usados como terapia de primera línea o bien como terapia de segunda línea. En los Estados Unidos, la combinación de paclitaxel y carboplatino ha sido aceptada como el patrón para el cuidado de tratamiento de primera línea de cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSSCLC) inoperable de fase IIIB (es decir, cáncer que se ha extendido a estructuras cerca del pulmón, o nodulos linfáticos en el mediastino, o a nodulos linfáticos en el otro lado del pecho o en el cuello inferior) y de fase IV (es decir, cáncer que se ha extendido a otras partes del cuerpo o a otros lóbulos de los pulmones). Pero la velocidad de respuesta global es tan solo de aproximadamente 28% para pacientes con estatus de rendimiento 0-1 en estudios de eficacia con una población predominantemente de fase IV. En Europa, el tratamiento de primera línea para NSCLC es gemcitabina y cisplatino. Otros regímenes de tratamiento para NSCLC incluyen paclitaxel solo o con cisplatino y gemcitabina; docetaxel solo o con cixplatino gemcitabina; vinorelbina sola o con gemcitabina; irinotecano solo o con gemcitabina; premetrexed y gefitinib. Es conocido que la señalización a través de IGF-1 R es requerida para la tumorgenicidad de líneas celulares y se ha mostrado que disminuye la citotoxicidad de la quimioterapia, y que el bloqueo de la actividad de IGF-1 R aumenta la eficacia de las terapias actuales y evita el progreso tumoral en modelos de animales. Por lo tanto, era de esperar que un inhibidor de IGF-1 R como los anticuerpos de la presente invención redujera la supervivencia de células tumorales y aumentara la eficacia de la quimioterapia cuando se proporciona en combinación. Cuando se incuban con células, los anticuerpos monoclonales completamente humanos que son inhibidores altamente específicos y potentes de la autofosforilación de receptores inducida por IGF-1 indujeron una regulación descendente de IGF-1 R por internalización de receptores. Las dosis que regularon de forma descendente IGF-1 R en modelos ex vivo de tumores sólidos (31.25-125 µg) correspondían a concentraciones de anticuerpos de 8-40 µg/ml el día 1 y 2-20 µg/ml el día 9. La administración intraperitoneal de los anticuerpos anti-IGF-1 R a ratones atímícos que portaban tumores de la línea celular NIH-3T3 que sobreexpresaba IGF-1 R transfectante dio lugar a una inhibición dependiente de la dosis del crecimiento tumoral. La concentración en suero de anticuerpos anti-IGF-1 R que condujo a una inhibición del crecimiento de 50% fue de 20 µg/ml el día 1 y 13 µg/ml en el día 9. Se extendieron estudios anti-tumorales similares a modelos de xenoinjertos de tumores humanos. Como un agente único, los anticuerpos anti-IGF-1 R inhibieron el crecimiento de diversos modelos de xenoinjertos que incluían carcinomas de mamas, pulmón y colon-rectal.

La combinación de anticuerpos anti-IGF-1 R con paclitaxel o carboplatino se ensayó en los modelos de xenoinjertos de tumores NSCLC humanos H460 y EBC-1. La combinación de anticuerpos anti-IGF-1 R con esos agentes aumentó la inhibición del crecimiento tumoral en comparación con cada agente solo. Salvo que se defina de otra forma en la presente memoria descriptiva, los términos científicos, técnicos y médicos usados en relación con la presente invención deben tener los significados que son comúnmente entendidos por los expertos ordinarios en la técnica. Generalmente, las nomenclaturas y las técnicas usadas en relación con el cultivo de células y tejidos, biología molecular, inmunología, microbiología, genética y química de proteínas y ácidos nucleicos descritas en la presente memoria descriptiva son las que son bien conocidas y comúnmente usadas en la técnica. Las siguientes expresiones y términos, salvo que se indique otra cosa, debe entenderse que tienen los siguientes significados: Un "anticuerpo" se refiere a una inmunoglobulina intacta o a una parte de unión a antígeno de la misma que compite con el anticuerpo intacto para la unión específica. Las partes de unión a antígeno pueden ser producidas por técnicas de ADN recombinante o por escisión enzimática o química de anticuerpos intactos. Las partes de unión a antígenos incluyen, entre otras, Fab, Fab', F(ab')2, Fv, dAb y fragmentos de regiones determinantes complementarias (CDR), anticuerpos de cadena única (scFv), anticuerpos quiméricos, diacuerpos y polipéptídos que contienen al menos una parte de una inmunoglobulina que es suficiente para conferir la unión antígeno específica para el polipéptido.. Las cadenas de inmunoglobulinas exhiben la misma estructura general de regiones concretas FR) relativamente conservadas unidas por medio de tres regiones hipervariables, también denominadas regiones determinantes complementarias o CDR. Las CDR de dos cadenas de cada par están alineadas por medio de las regiones concretas, haciendo posible la unión a un epitopo específico. A partir del N terminal hasta el C terminal, las cadenas tanto ligeras como pesadas comprenden los dominios FR1 , CDR1 , FR2, CDR2, FR3, CDR y FR4. La asignación de aminoácidos a cada dominio está en concordancia con las definiciones de Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1987 and 1991)), o Chothia & Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987); Chothia et al. Nature 342:878-883 (1989). Un "anticuerpo aislado" es un anticuerpo que (1 ) no está asociado con componentes asociados de forma natural, que incluyen otros anticuerpos asociados de forma natural, que lo acompañan en su estado nativo, (2) está exento de otras proteínas de la misma especie, (3) es expresado por medio de una célula a partir de una especie diferente, o (4) no se produce en la naturaleza. Ejemplos de anticuerpos aislados incluyen un anticuerpo anti-IGF-1 R que ha sido purificado por afinidad usando IGF-1 R y es un anticuerpo aislado, un anticuerpo antí-IGF-1 R que ha sido sintetizado por medio de un hibridoma u otra línea celular in vitro, y un anticuerpo anti- IGF-1 R humano derivado de un ratón transgénico. La expresión "anticuerpo quimérico" se refiere a un anticuerpo que contiene una o más regiones de un anticuerpo y una o más regiones de uno o más de otros anticuerpos. En una modalidad preferida, uno o más de las CDR son derivados de un anticuerpo anti-IGF-1R humano. En una modalidad más preferida, todos las CDR son derivados de un anticuerpo anti-IGF-1 R humano. En otra modalidad preferida, las CDR de más de uno de los anticuerpos anti-IGF-1 R humanos son mezclados y se hacen coincidir en un anticuerpo quimérico. Adicionalmente, las regiones concretas pueden ser derivadas de uno de los mimos anticuerpos anti-IGF-1R, a partir de uno o más anticuerpos diferentes, como un anticuerpo humano, o partir de un anticuerpo humanizado. El término "epitopo" incluye cualquier proteína determinante capaz de una unión específica a una inmunoglobulina o receptor de células T. Los determinantes epitópicos consisten habitualmente en agrupaciones de superficies químicamente activas de moléculas como aminoácidos o cadenas laterales de azúcares y tienen habitualmente tres características estructurales de dimensiones específicas, así como características específicas de carga. Un anticuerpo se dice que se une específicamente a un antígeno cuando la constante de disociación es < 1 µM, preferentemente < 100 nM y lo más preferentemente < 10 nM. Cuando se aplica a polipéptidos, la expresión "identidad sustancial" significa que dos secuencias de polipéptidos, cuando están óptimamente alineadas, como mediante los programas GAP BESTFIT usando pesos en los espacios por defecto, comparten al menos un 75% ó 80% de identidad de secuencias, preferentemente al menos 90% ó 95% de identidad de secuencias, incluso más preferentemente al menos 98% o 99% de identidad de secuencias. Preferentemente, las posiciones de los residuos no son iguales y difieren en las sustituciones de los aminoácidos conservadores. Una "sustitución de aminoácido conservador" es una en la que el residuo de aminoácido está sustituido con otro residuo de aminoácido que tiene una cadena lateral (grupo R) con propiedades químicas similares (por ejemplo, carga o hidrofobicidad). En general, una sustitución de aminoácido conservador no cambiará sustancialmente las propiedades funcionales de una proteína. En los casos en que dos o más secuencias de aminoácidos difieran una de otra en sustituciones conservadoras, el porcentaje de identidad de secuencias o grado de similitud puede ser ajustado hacia arriba para corregir la naturaleza conservadora de la sustitución. Los medios para realizar este ajuste son bien conocidos por los expertos en la técnica. Véase, por ejemplo, Pearson, Methods Mol. Biol. 24: 307-31 (1994). Ejemplos de grupos de aminoácidos que tienen cadenas laterales con propiedades químicas similares incluyen 1 ) cadenas laterales alifáticas: glicina, alanina, valina, leucina e isoleucina; 2) cadenas laterales alifáticas-hidroxílo: serina y treonina; 3) cadenas laterales que contienen amidas: asparagina y glutamina; 4) cadenas laterales aromáticas: fenilalanina, tirosina y triptofano; 5) cadenas laterales básicas: lisina, arginina e histidina; y 6) cadenas laterales que contienen azufre son cisteína y metionina. Los grupos de sustitución de aminoácidos conservadores incluyen: valina-leucina-isoleucina, fenilalanina-tirosina, lisina, arginina, alanina-valina, glutamato-aspartato y aspargina-glutamina. Las sustituciones de aminoácidos preferidas son aquellas que: (1 ) reducen la susceptibilidad a la proteolisis, (2) reducen la susceptibilidad a la oxidación, (3) alteran la afinidad de unión para formar complejos de proteínas, (4) alteran las afinidades de unión, y (5) confieren o modifican otras propiedades fisicoquímicas o funcionales de estos análogos. Los análogos pueden incluir diversas mutaciones de una secuencia distintas de la secuencia de péptidos que se producen de forma natural. Por ejemplo, se pueden realizar sustituciones de aminoácidos únicas o múltiples (preferentemente sustituciones de aminoácidos conservadoras) en la secuencia que se produce de forma natural (preferentemente en la parte del polipéptido fuera del (o los) dominio(s) que forman contactos intermoleculares). Una sustitución de aminoácido conservadora no debe cambiar sustancialmente las características estructurales de la secuencia parental (por ejemplo, un aminoácido de sustitución no debe tender a romper la hélice que se produce en la secuencia parental, ni interrumpir otros tipos de estructuras secundarias que caracterizan la secuencia parental). La expresión "en combinación con" abarca la dosificación simultánea, secuencial separada de los componentes individuales del tratamiento. Por ejemplo, el anticuerpo puede ser administrado una vez cada tres días, mientras que el agente terapéutico adicional es administrado una vez al día. El anticuerpo puede ser administrado con anterioridad o con posterioridad al tratamiento del trastorno con el agente terapéutico adicional. Análogamente, el anticuerpo anti-IGF-1 R puede ser administrado con anterioridad o con posterioridad a otra terapia, como radioterapia, quimioterapia, terapia fotodinámica, cirugía u otra inmunoterapia. Los términos "concurrentemente" y "simultáneamente" se usan de forma intercambiable y significan que los compuestos de la terapia de combinación de la presente invención son administrados (1 ) simultáneamente en el tiempo, o (2) en tiempos diferentes durante el transcurso de un esquema de tratamiento común. El término "secuencialmente" como se usa en la presente memoria descriptiva significa la administración del primer componente, seguido de la administración de un segundo componente. Los anticuerpos anti-IGF-1 R pueden ser el primer componente o el segundo componente. Después de la administración de un componente, el segundo componente puede ser administrado de forma sustancialmente inmediata después del primer componente, o el segundo componente puede ser administrado un período de tiempo eficaz después del primer componente; el período de tiempo eficaz es la cantidad de tiempo dada para la modalidad de una ventaja máxima a partir de la administración del primer componente. El término "paciente" incluye mamíferos. En una modalidad preferida, el mamífero es un ser humano. El término "tratar", como se usa en la presente memoria descriptiva, salvo que se indique otra cosa, significa invertir, aliviar, inhibir el progreso o prevenir el trastorno o estado al que se aplica este término, o uno o más síntomas de este trastorno o estado. El término "tratamiento", como se usa en la presente memoria descriptiva, salvo que se indique otra cosa, se refiere al acto de tratar, tal como "tratar" se definió de forma inmediatamente anterior. Los anticuerpos humanos evitan algunos de los problemas asociados con los anticuerpos que poseen regiones variables y/o constantes de ratón o rata. Los más preferidos son anticuerpos anti-IGF-1R humanos completamente humanos. Los anticuerpos anti-IGF-1 R completamente humanos se espera que minimicen las respuestas inmunogénicas y alérgicas intrínsecas a los anticuerpos monoclonales de ratón o derivados de ratón (Mabs) y, por tanto, que aumenten la eficacia y seguridad de los anticuerpos administrados. El uso de anticuerpos completamente humanos se puede esperar que proporcione una ventaja sustancial en el tratamiento de enfermedades humanas crónicas y recurrentes, como la inflamación y cáncer, que pueden requerir administraciones repetidas de anticuerpos. En otra modalidad, la invención proporciona un anticuerpo anti-IGF-1 R que no se une a un complemento. En otro aspecto de la invención, los anticuerpos anti-IGF-1 R se unen a IGF-1 R con una afinidad elevada. En una modalidad, el anticuerpo anti-IGF-1 R se une a IGF-1 R con una Kd de 1 x 10"8 M o menos. En una modalidad más preferida, el anticuerpo se une a IGF-1 R con una Kd de 1 x 10" 9 M o menos. En una modalidad incluso más preferida, el anticuerpo se une a IGF-1 R con una Kd de 5 x 10'10 M o menos. En otra modalidad preferida, el anticuerpo se une a IGF-1 R con una Kd de 1 x 10"10 M o menos. En otra modalidad preferida, el anticuerpo se une a IGF-1 R con sustancialmente la misma Kd que un anticuerpo seleccionado entre 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. En otra modalidad preferida, el anticuerpo se une a IGF-1 R con sustancialmente la misma Kd que un anticuerpo que comprenda una o más CDR de un anticuerpo seleccionado entre 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 0 6.1.1. La invención emplea también un anticuerpo anti-IGF-1 R que se une al mismo antígeno o epitopo que un anticuerpo anti-IGF-1 R humano. La invención puede emplear también un anticuerpo anti-IGF-1 R que compita de forma cruzada con un anticuerpo anti-IGF-1 R humano. En una modalidad preferida. El anticuerpo anti-IGF-1 R humano es 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. En otra modalidad preferida, el anti-IGF-1 R humano comprende una o más CDR de un anticuerpo seleccionado entre 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. La invención se puede poner en práctica también usando un anticuerpo anti-IGF-1 R que comprenda secuencias variables codificadas por un gen humano. En una modalidad preferida, las secuencias variables son codificadas por la familia de genes Vk A27, A30 ó 012. En una modalidad preferida, las secuencias variables son codificadas por una familia de genes V A30. En una modalidad más preferida, la cadena ligera comprende no más de diez sustituciones de aminoácidos de la línea germinal Vk A27, A30 o 012, preferentemente no más de seis sustituciones de aminoácidos, y más preferentemente no más de tres sustituciones de aminoácidos. En una modalidad preferida, las sustituciones de aminoácidos son sustituciones conservadoras. En una modalidad preferida, la VL del anticuerpo anti-IGF-1 R contiene las mismas sustituciones de aminoácidos, con relación a la secuencia de aminoácidos de línea germinal, como uno cualquiera o más de las VL de anticuerpos 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. En otra modalidad preferida, la cadena ligera comprende una secuencia de aminoácidos que es igual que la secuencia de aminoácidos de la VL de 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. En otra modalidad altamente preferida, la cadena ligera comprende secuencias de aminoácidos que son iguales que las regiones CDR de la cadena ligera de 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. En otra modalidad preferida, la cadena ligera comprende una secuencia de aminoácidos de al menos una región CDR de la cadena ligera de 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. La presente invención se puede llevar a cabo también usando un anticuerpo anti-IGF-1 R o parte del mismo que comprenda una cadena pesada humana o una secuencia derivada de una cadena pesada humana. En una modalidad, la secuencia de aminoácidos de cadena pesada deriva de una familia de genes DP-35, DP-47, DP-70, DP-71 o VIV-4/4.35 de VH humano. En una modalidad preferida, la secuencia de aminoácidos de cadena pesada deriva de una familia de genes DP-47 de VH humano. En una modalidad más preferida, la cadena pesada comprende no más de ocho cambios de aminoácidos a partir de DP-35, DP-47, DP-70, DP-71 o VIV-4/4.35 de VH de línea germinal, más preferentemente no más de seis cambios de aminoácidos, e incluso más preferentemente no más de tres cambios de aminoácidos. En una modalidad preferida, el VH del anticuerpo anti-IGF-1 R contiene las mismas sustituciones de aminoácidos, con relación a la secuencia de aminoácidos de línea germinal, en forma de uno cualquiera o más de los VH de los anticuerpos 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. En otra modalidad, las sustituciones de aminoácidos se hacen en la misma posición que las encontradas en uno cualquiera o más de los VH de anticuerpos 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.17.3, 4.9.2 ó 6.1.1 , pero las sustituciones de aminoácidos conservadoras son preparadas en lugar de usar el mismo aminoácido. En otra modalidad preferida, la cadena pesada comprende una secuencia de aminoácidos que es la misma que la secuencia de aminoácidos del VH de 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. En otra modalidad altamente preferida, la cadena pesada comprende secuencias de aminoácidos que son ¡guales que las regiones CDR de la cadena pesada de 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. En otra modalidad preferida, la cadena pesada comprende una secuencia de aminoácidos de al menos una región CDR de la cadena pesada de 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. En otra modalidad preferida, la cadena pesada comprende secuencias de aminoácidos de CDR de cadenas pesadas diferentes. En una modalidad más preferida, la CDR de cadenas pesadas diferentes son obtenidas a partir de 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 ó 6.1.1. En otra modalidad, la invención emplea un anticuerpo anti-IGF-1 R que inhibe la unión de IGF-1 a IGF-1 R o la unión de IGF-2 a IGF-1 R. En una modalidad preferida, el IGF-1 R es humano. En otra modalidad preferida, el anticuerpo anti-IGF-1 R es un anticuerpo humano. En otra modalidad, el anticuerpo o parte del mismo inhibe la unión entre IGF-1 R e IGF-1 con una IC50 de no más de 100 nM. En una modalidad preferida, la IC50 es de no más de 100 nM. En una modalidad más preferida, la IC 0 es de no más de 5 nM. La IC50 puede ser medida mediante cualquier método conocido en la técnica. Normalmente, una IC50 puede ser medida mediante un ensayo ELISA o RÍA. En una modalidad preferida, la IC50 es medida medíante RÍA. En otra modalidad, la invención emplea un anticuerpo anti-IGF-1 R que evita la activación del IGF-1 R en presencia de IGF-1. En otro aspecto de la invención, el anticuerpo provoca la regulación descendente de IGF-1 R a partir de una célula tratada con el anticuerpo. En una modalidad preferida, el anticuerpo es seleccionado entre 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, ó 6.1 .1 , o comprende una región de cadena pesada, cadena ligera o unión a antígeno del mismo. Los anticuerpos humanos pueden ser producidos inmunizando un animal no humano que comprenda parte o la totalidad del lugar de inmunoglobulina humana con un antígeno IGF-1 R. En una modalidad preferida, el animal no humano es un XENOMOUSE®, que es una cepa de ratón tratado por ingeniería genética que comprende fragmentos grandes de los lugares de inmunoglobulina humana y es deficiente en producción de anticuerpos de ratón. Véase, por ejemplo, Green et al. Nature Genetics 7:13-21 (1994) y las patentes de EE.UU. n° 5,916,771 , 5,939,598, 5,985,615, 5,998,209, 6,075,181 , 6,091 ,001 , 6,114,598 y 6,130,364. Véanse también las solicitudes de patentes internacionales n° WO 91/10741 , publicada el 25 de Julio de 191 , WO 94/02602, publicada el 3 de Febrero de 1994; WO 96/34096 y WO 96/33735, ambas publicadas el 31 de Octubre de 1996; WO 98/16654, publicada edl 23 de Abril de 1998; WO 98/24893, publicada el 11 de Junio de 1998; WO 98/50433, publicada el 12 de Noviembre de 1998; WO 99/45031 , publicada el 10 de Septiembre de 1999; WO 99/43049, publicada el 21 de Octubre de 1999; WO 00/09560, publicada el 24 de Febrero de 2.000; y WO 00/037504, publicada el 29 de Junio de 2000. El XENOMOUSE® produce un repertorio humano de tipo adulto que anticuerpos completamente humanos, y genera anticuerpos monoclonales humanos específicos para antígenos. Un XENOMOUSE® de segunda generación contiene aproximadamente 80% de repertorio de anticuerpos humanos a través de la introducción de fragmentos YAC de configuración de línea germinal y tamaño de megabase de los lugares de cadenas pesadas humanas y lugares de cadenas ligeras K. Véase, Méndez et al. Nature Genetics 15:146-156 (1997), Green and Jakobovits J. Exp. Med. 188:483-495 (1998). El antígeno IGF-1 R puede ser administrado con un adyuvante para estimular la respuesta inmune. Estos adyuvantes incluyen adyuvante de Freund completo o incompleto, RIBI (muramil-dipéptidos) o ISCOM (complejos inmunoestimulantes). Estoa adyuvantes pueden proteger el polipéptido de una dispersión rápida secuestrándolo en un depósito local, o pueden contener sustancias que estimulen el hospedante para segregar factores que sean quimiotácticos para macrófagos y otros componentes del sistema inmune. La molécula de ácido nucleico que codifica la región variable de la cadena ligera puede ser derivada del gen Vk A30, A27 o 012. En una modalidad preferida, la cadena ligera es derivada del gen Vk A30. En una modalidad incluso más preferida, la molécula de ácido nucleico que codifica la cadena ligera contiene no más de diez cambios de aminoácidos a partir del gen Vk A30 de línea germinal, preferentemente no más de seis cambios de aminoácidos, e incluso más preferentemente no más de tres cambios de aminoácidos. En una modalidad, el anticuerpo contiene no más de diez cambios de aminoácidos en cualquiera de las regiones VH o VL del anticuerpo anti-IGF-1 R mutado en comparación con el anticuerpo anti-IGF-1 R antes de la mutación. En una modalidad más preferida, no hay más de cinco cambios de aminoácidos en cualquiera de las regiones VH o VL del anticuerpo anti-IGF-1 R mutado, más preferentemente no más de tres cambios de aminoácidos. En otra modalidad, hay no más de quince cambios de aminoácidos en los dominios constantes, más preferentemente no más de diez cambios de aminoácidos, incluso más preferentemente no más de cinco cambios de aminoácidos.

Las SEQ ID N° 2, 6, 10, 14, 18 y 22 proporcionan secuencias de aminoácidos de las regiones variables de seis cadenas ligeras K anti-IGF-1 R. Las SEQ ID N° 4, 8, 12, 16, 20 y 24 proporcionan las secuencias de aminoácidos de las regiones variables de seis cadenas pesadas anti-IGF-1 R. La SEQ ID N° 26 expone la secuencia de aminoácidos y la SEQ ID N° 25 expone la secuencia de ácidos nucleicos que codifica la región constante de la cadena ligera de los anticuerpos anti-IGF-1 R 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 y 6.1.1. La SEQ ID N° 28 expone la secuencia de aminoácidos y la SEQ ID N° 27 expone la secuencia de ácidos nucleicos que codifica la región constante de la cadena pesada de los anticerupos anti-IGF-1 R 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2, 4.17.3 y 6.1.1. Las SEQ ID N° 30, 32, 34, 36 y 44 proporcionan las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesadas de línea germinal DP-35, DP-47, DP-70, DP-71 y VIV-4, respectivamente. La SEQ ID N° 33 proporciona la secuencia de nucleótidos de la cadena pesada de línea germinal DP-70. Las SEQ ID N° 38, 40 y 42 proporcionan las secuencias de aminoácidos de las tres cadenas ligeras K de línea germinal a partir de las cuales derivan las seis cadena ligeras K anti-IGF-1 R. Los anticuerpos anti-IGF-1 R pueden ser incorporados en composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración a un sujeto. Normalmente, la composición farmacéutica comprende un anticuerpo y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Como se usa en la presente memoria descriptiva, "vehículo farmacéuticamente aceptable" incluye cualquiera de la totalidad de disolventes, medios de dispersión, revestimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardantes de la absorción y similares que sean fisiológicamente compatibles. Ejemplos de vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen agua, solución salina, solución salina tamponada con fosfato, dextrosa, glicerol, etanol y similares, así como sus combinaciones. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes como manitol, sorbitol o cloruro de sodio en la composición. Pueden ser incluidas también cantidades menores de sustancias auxiliares como agentes humectantes o emulsionantes, conservantes o tamponantes, que aumentan la vida en almacenamiento o la eficacia del anticuerpo o parte del anticuerpo. Las composiciones farmacéuticas pueden estar en una diversidad de forma. Estas incluyen, por ejemplo, formas de dosificación líquida, semi-sólida y sólida, como soluciones líquidas (por ejemplo, soluciones inyectables e infusibles), dispersiones o suspensiones, comprimidos, pildoras, polvos, liposomas y supositorios. La forma preferida depende del modo previsto de administración y de la aplicación terapéutica. Las composiciones preferidas típicas están en la forma de soluciones inyectables o infusibles, como composiciones análogas a las usadas para la inmunización pasiva de seres humanos con otros anticuerpos. Un modo de administración preferido es el parenteral (por ejemplo, intravenoso, subcutáneo, intraperitoneal, intramuscular o por infusión). En una modalidad preferida, el anticuerpo es administrado por infusión o inyección intravenosa. En otra modalidad preferida, el anticuerpo es administrado por inyección intramuscular o subcutánea. Como se apreciará por el experto en la técnica, la vía y/o el modo de administración variarán dependiendo de los resultados deseados. Las composiciones terapéuticas normalmente deben ser estériles y estables bajo las condiciones de elaboración y almacenamiento. La composición puede ser formulada como una solución, microemulsión, dispersión, liposoma u otra estructura ordenada adecuada para una concentración elevada de fármaco. Las soluciones inyectables esterilizadas pueden ser preparadas incorporando el anticuerpo anti-IGF-1 R en la cantidad requerida en un disolvente apropiado con uno o con una combinación de ingredientes de los anteriormente citados, en la medida necesaria, seguido de esterilización con filtración. Generalmente, las dispersiones son preparadas incorporando el compuesto activo en un vehículo esterilizado que contenga un medio de dispersión básico y los demás ingredientes necesarios entre los anteriormente citados. En el caso de polvos esterilizados para la preparación de soluciones inyectables esterilizadas, los métodos preferidos de preparación son secado a vacío y liofilización que produce un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente adicional deseado a partir de una solución previamente esterilizada con filtración del mismo. La fluidez apropiada de una solución puede ser mantenida, por ejemplo, mediante el uso de un revestimiento como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partículas necesario en el caso de una dispersión y mediante el uso de tensioactivos. La absorción prolongada de composiciones inyectables se puede llevar a cabo incluyendo en la composición un agente que retrase la absorción, por ejemplo, sales de monoestearato y gelatina. En ciertas modalidades, el compuesto activo puede ser preparado con un vehículo que proteja el compuesto frente a una liberación rápida, como una formulación de liberación controlada que incluye implantes, parches transdermales y sistemas de suministro microencapsulados. Pueden ser usados polímeros biodegradables y biocompatibles, como etileno-acetato de vinilo, polianhídridos, poli(ácido glicólico), colágeno, poliortoésteres y poli(ácido láctico). Muchos métodos para la preparación de estas formulaciones están patentados o son generalmente conocidos por los expertos en la técnica. Véase, por ejemplo, "Sustained and Controlled Reléase Drug Delivery Systems", J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978. La composición farmacéutica puede incluir una "cantidad terapéuticamente eficaz" o una "cantidad profilácticamente eficaz" de un anticuerpo o parte del anticuerpo de la invención. Una "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad eficaz, a las dosificaciones y durante los períodos de tiempo necesarios, para conseguir el resultado terapéutico deseado. Una cantidad terapéuticamente eficaz del anticuerpo o parte del anticuerpo puede variar según factores como el estado de la enfermedad, edad, sexo y peso del individuo y la capacidad del anticuerpo o parte del anticuerpo para provocar una respuesta deseada en el individuo. Una cantidad terapéuticamente eficaz es también una a la que cualquiera de los efectos tóxicos o perjudiciales del anticuerpo o parte del anticuerpo sean rebasados por los efectos terapéuticamente ventajosos. Una "cantidad profilácticamente eficaz" se refiere a una cantidad eficaz, a las dosificaciones y durante los períodos de tiempo necesarios, para conseguir el resultado profiláctico deseado. Normalmente, como una dosis profiláctica es usada en sujetos antes de una fase temprana de la enfermedad o en la misma, la cantidad profilácticamente eficaz será menor que la cantidad terapéuticamente eficaz. Los regímenes de dosificación pueden ser ajustados para proporcionar la respuesta óptima deseada. Por ejemplo, puede ser administrado un bolo único, pueden ser administradas varias dosis divididas durante el tiempo o la dosis puede ser proporcionalmente reducida o aumentada en la medida indicada por las exigencias de la situación terapéutica. La composición farmacéutica que comprende el anticuerpo o que comprende una terapia de combinación que comprende el anticuerpo y los demás agentes terapéuticos adicionales puede ser formulada para dosis únicas o múltiples. Es especialmente ventajoso formular composiciones parenterales en forma de dosificación unitaria por la facilidad de administración y uniformidad de la dosificación. La forma de dosificación unitaria, como se usa en la presente memoria descriptiva, se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para los sujetos mamíferos que van a ser tratados; en que cada unidad contiene una cantidad predeterminada de compuesto activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. La especificación para las formas unitarias de dosificación de la invención viene dictada y es directamente dependiente de (a) las características únicas del compuesto activo y el efecto terapéutico o profiláctico particular que va a ser conseguido, y (b) las limitaciones inherentes en la técnica de formación de composiciones de este compuesto activo para el tratamiento de la sensibilidad en individuos. Una formulación particularmente útil es 5 mg/ml de anticuerpo anti-IGF-1 R en un tampón de citrato de sodio 20 mM, pH 5.5, NaCI 140 mM y 0.2 mg/ml de polisorbato 80. El anticuerpo, con o sin un agente adicional, puede ser administrado una vez, o más de una vez durante al menos el período de tiempo hasta que el estado que es tratado sea aliviado o curado. El anticuerpo generalmente será administrado durante tanto tiempo como esté presente el tumor, con la condición de que el anticuerpo provoque que el tumor o cáncer detenga el crecimiento o disminuya en peso o volumen. El anticuerpo será administrado generalmente como parte de una composición farmacéutica como se describió anteriormente. La dosificación de anticuerpo estará generalmente en el intervalo de 0.025-100 mg/kg, más preferentemente 0.05-50 mg/kg, más preferentemente 0.05-20 mg/kg e incluso más preferentemente 0.1-10 mg/kg. Debe apreciarse también que los valores de las dosificaciones pueden variar con el tipo y la gravedad del estado que vaya a ser aliviado. Debe entenderse adicionalmente que para cualquier sujeto particular, los regímenes específicos de dosificación deben ser ajustados a lo largo del tiempo según la necesidad del individuo y el criterio profesional de la persona que administre o supervise la administración de las composiciones, y que los intervalos de dosificación establecidos en la presente memoria descriptiva son solamente ilustrativos y no están destinados a limitar el alcance o la práctica de la composición reivindicada. El anticuerpo puede ser administrado desde tres veces al día hasta una vez cada seis meses. La administración puede ser en un esquema como de tres veces al día, dos veces al día, una vez al día, una vez cada dos días, una vez cada tres días, una vez a la semana, una vez cada dos semanas, una vez al mes, una vez cada dos meses, una vez cada tres meses y una vez cada seis meses. El anticuerpo puede ser administrado por vía oral, mucosal, bucal, intranasal, inhalable, intravenosa, subcutánea, intramuscular, parenteral, intratumoral o tópica. El anticuerpo puede ser administrado en un sitio distante del sitio del tumor. El anticuerpo puede ser administrado también continuamente a través de una minibomba. En ciertas modalidades, el anticuerpo puede ser administrado en una forma de aerosol o inhalable. Un aerosol seco en la forma de partículas sólidas finamente divididas que no se disuelvan ni se pongan en suspensión en un líquido es también útil en la práctica de la presente invención. Las formulaciones farmacéuticas de la presente invención pueden ser administradas en la forma de una pulverización en aerosol usando, por ejemplo, un nebulizador como los descritos en las patentes de EE.UU. n° 4,624,251 , 3,703,173, 3,561 ,444 y 4,635,627.

La concentración en suero de anticuerpo puede ser medida mediante cualquier método conocido en la técnica. El anticuerpo puede ser administrado también profilácticamente con el fin de evitar que se produzca un cáncer o tumor. Esto puede ser especialmente útil en pacientes que tengan un nivel "normal elevado" de IGF-1 porque estos pacientes se ha mostrado que tienen un riesgo superior de desarrollar cánceres comunes. Véase Rosen et al., supra. El anticuerpo empleado en el método de la invención puede estar marcado. Esto se puede hacer mediante la incorporación de un marcador detectable, por ejemplo, la incorporación de un aminoácido radiomarcado o la unión a un polipéptido de restos de biotinilo que pueda ser detectado mediante avidina marcada (por ejemplo, estreptavidina que contenga un marcador fluorescente o una actividad enzimática que pueda ser detectada mediante métodos ópticos o colormétricos). En ciertas situaciones, la etiqueta o marcador puede ser también un agente terapéutico. Diversos métodos de marcar polipéptidos y glicoproteínas son conocidos en la técnica y pueden ser usados. Ejemplos de marcadores para polipéptidos incluyen, pero sin limitación, los siguientes: radioisótopos o radionúclidos (por ejemplo H3, C 4, N15, S35, Y90, Te99, ln111, I125, I131), marcadores fluorescentes (por ejemplo, rodamina, fosforescentes lantánidos), marcadores enzimáticos (por ejemplo, peroxidasa de rabanillo, ß-galactosidasa, luciferasa, fosfatasa alcalina), grupos biotinilo quimioluminiscentes, epítopos polipéptidos predeterminados reconocidos por un reportero secundario (por ejemplo, secuencias de pares en zipper de leucina, sitios de unión para anticuerpos secundarios, dominios de unión metálicos, etiquetas de epitopos). En algunas modalidades preferidas, las etiquetas están unidas por brazos separadores de varias longitudes para reducir el impedimento esférico potencial. Los anticuerpos empleados en la presente invención son derivados preferentemente de células que expresan genes de inmunoglobulina humana. El uso de ratones transgénicos es conocido en la técnica para producir estos anticuerpos "humanos". Uno de estos métodos es descrito en la solicitud de patente de EE.UU. n° de serie 08/759,620, presentada el 3 de diciembre de 1996. Véase también Méndez et al. Nature Genetics 15:146-156 (1997); Green and Jakobovits J. Exp. Med. 188:483-495 (1998), patente europea n° EP 0463151 (concesión publicada el 12 de Junio de 1996); y solicitudes de patentes internacionales n° WO 94/02602, publicada el 3 de Febrero de 1994; WO 96/34096, publicada el 31 de Octubre de 1996 y WO 98/24893, publicada el 11 de Junio de 1998. Como se indicó anteriormente, la invención abarca el uso de fragmentos de anticuerpos. Los fragmentos de anticuerpos, como Fv, F(ab')2 y Fab pueden ser preparados medíante escisión de la proteína intacta, por ejemplo, mediante escisión de proteasa o química. Alternativamente, es designado un gen truncado. Por ejemplo, un gen quimérico que codifique una parte del fragmento F(ab')2 incluiría secuencias de DNA que codifican el dominio CH1 y la región conectora de la cadena H, seguido de un codón de detención translacional para producir la molécula truncada.

En una aproximación, pueden ser usadas secuencias de consenso que codifiquen las regiones J de cadena pesada y ligera para designar oligonucleótidos para ser usados como cebadores para introducir sitios de restricción útiles en la región J para una posterior unión de segmentos de la región V a segmentos de la región C humana. El cDNA de la región C puede ser modificado mediante mutagénesis dirigida al sitio para colocar un sitio de restricción en la posición análoga en la secuencia humana. Los vectores de expresión para ser usados en la obtención de los anticuerpos empleados en la invención incluyen plásmidos, retrovirus, cósmidos, YAC, episomas derivadas de EBV y similares. Un vector conveniente es normalmente uno que codifique una secuencia de inmunoglobulina CH o CL humana funcionalmente completa, con sitios de restricción apropiados tratados por ingeniería genética de forma que cualquier secuencia de VH o VL pueda ser fácilmente insertada y expresada. En estos vectores, la partición se produce habitualmente entre el sitio donante de partición en la región J insertada y el sitio aceptor de partición que precede a la región C humana, y también en las regiones de partición que se producen en los exones CH humanos. La poliadenílación y la terminación de la transcripción se producen en sitios cromosomales nativos en dirección descendente de las regiones codificadoras. El anticuerpo quimérico resultante puede estar unido a cualquier promotor fuerte, incluidos LTR retrovirales, por ejemplo, promotor temprano SV-40 (Okayama et al. Mol. Celi. Bio. 3:280 (1983)), virus LTR de sarcoma Rous (Gorman et al. Proc. Nati. Acad. Sci. 79:6777 (1982)), y virus de la leucemia murina Moloney LTR (Grosschedl et al. Cell 41 :885 (1985)); promotres de Ig nativa, etc. Los anticuerpos que son generados para ser usados en la invención no necesitan poseer inicialmente un isotipo deseado particular. En lugar de ello, el anticuerpo generado puede poseer cualquier isotipo y puede ser alterada posteriormente usando técnicas convencionales. Estas incluyen técnicas recombinantes directas (véase, por ejemplo, la patente de EE.UU. n° 4,816,397) y técnicas de fusión célula-célula (véase, por ejemplo, la patente de EE.UU. n° 5,916,771 ). Como se indicó anteriormente, la función efectora del os anticuerpos de la invención puede ser cambiada alterando el isotipo para una lgG1 , lgG2, lgG3, lgG4, IgD, IgA, IgE o IgM para diversos usos terapéuticos. Además de ello, la dependencia de un complemento para la destrucción celular puede ser evitada mediante el uso de productos bioespecíficos, inmunotoxinas o radiomarcadores, por ejemplo. Pueden ser generados anticuerpos bioespecíficos que comprendan (i) dos anticuerpos: uno con una especifidad por IGF-1 R y el otro por una segunda molécula (ii) un único anticuerpo que tenga una cadena específica para IGF-1R y una segunda cadena específica para una segunda molécula, o (iii) un anticuerpo de cadena única que tenga especifidad por IGF-1 R y la otra molécula. Estos anticuerpos específicos pueden ser generados usando técnicas bien conocidas, por ejemplo, Fanger et al. Immunol. Methods 4:72-81 (1994); Wright and Harris, supra; y Traunecker et al. Int. J. Cáncer (Suppl.) 7:51 -52 (1992). Los anticuerpos para ser usados en la invención incluyen también "estructuras kappa" (lll et al. Protein Eng. 10:949-57 (1997)),"miniestructuras" (Martín et al. EMBO J. 13:5303-9 (1994)), "diaestructuras" (Holliger et al. Proa Nati. Acad. Sci. (USA) 90:6444-6448 (1993)) y pueden ser preparadas también "janusinas" (Traunecker et al. EMBO J. 10:3655-3659 (1991 ) y Traunecker et al. Int. J. Cáncer Suppl. 7:51-52 (1992)). Los anticuerpos empleados pueden ser modificados para actuar como inmunotoxínas mediante técnicas convencionales. Véase, por ejemplo, Vitetta Immunol. Today 14:252 (1993). Véase también la patente de EE.UU. n° 5,194,594. Los anticuerpos radiomarcados pueden ser preparados también usando técnicas bien conocidas. Véase Junghans et al. in Cáncer Chemotherapy and Biotherapy 655-686 (2d edition, Chafner y Longo, eds., Lippincott Raven (1996)). Véanse también las patentes de EE.UU. n° 4,681 ,581 , 4,735,210, 5,101 ,827, 5,102,990 (Re 35,500), 5,648,471 y 5,697,902. Los anticuerpos particulares útiles en la práctica de la invención incluyen los descritos en la solicitud de patente internacional n° WO 02/053596, que describe adicionalmente anticuerpos 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 3.1.1 , 4.9.2 y 4.17.3. Como se describe eN esa solicitud publicada, los hibridomas que producen estos anticuerpos fueron depositados en la institución American Type Culture Collection (ATCC), 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209, el 12 de Diciembre de 2000, con los siguientes números de depósito: Hibridoma Depósito n° 2.12.1 PTA-2792 2.13.2 PTA-2788 2.14.3 PTA-2790 3.1.1 PTA-2791 4.9.2 PTA-2789 4.17.3 PTA-2793 Estos anticuerpos son cadenas pesadas de lgG2 o lgG4 completamente humanas con cadenas ligeras kappa humanas. En particular, la invención se refiere al uso de anticuerpos que tienen secuencias de aminoácidos de estos anticuerpos. Los anticuerpos empleados en la invención poseen preferentemente afinidades muy elevadas, que poseen normalmente valores de Kd de aproximadamente 10"9 a aproximadamente 10"11 M, medidas en fase sólida o en fase de solución. Los anticuerpos usados en la presente invención pueden ser expresados en líneas celulares distintas de las líneas celulares de híbridomas.

Las secuencias que codifican el cDNA o clones genómicos para los anticuerpos particulares pueden ser usadas para la transformación de células hospedantes mamíferas o no mamíferas adecuadas. La transformación puede ser mediante cualquier método conocido para introducir polinucleótidos en una célula hospedante que incluye, por ejemplo, envolviendo el polinucleótido en un virus (o en un vector viral) y transduciendo una célula hospedante con el virus (o vector) o mediante procedimientos de transfección conocidos en la técnica como se ilustra, por ejemplo, en las patentes de EE.UU. n° 4,399,216, 4,912,040, 4,740,461 y 4,959,455. Los métodos para la introducción de polinucleótídos heterólogos en células de mamíferos son bien conocidos en la técnica e incluyen, pero sin limitación, transfección mediada por dextrano, precipitación con fosfato de calcio, transfección mediada por polibreno, fusión de protoplastos, electroporación, bombardeo con partículas, encapsulación del (o los) polinucleótido(s) en liposomas, conjugados péptidos, dendrímeros y microinyección directa del DNA en los núcleos. Las líneas celulares de mamíferos disponibles como hospedantes para la expresión son bien conocidas en la técnica e incluyen muchas líneas celulares inmortalizadas disponibles en la entidad American Type Culture Collection (ATCC), que incluyen, pero sin limitación, células de ovario de hámster chino (CHO), NSO0, células HeLa, células de riñon de cría de hámster (BHK), células de riñon de mono (COS) y células de carcinoma hepatocelular humano (por ejemplo, Hep G2). Pueden ser empleadas también células que no son de mamífero, que incluyen células bacterianas, de levadura, de insectos y de plantas. La mutagénesis dirigida al sitio del dominio CH2 de anticuerpos para eliminar la glicosilación puede ser preferida con el fin de evitar cambios en las funciones de ¡nmunogenicidad, farmacocinética y/o efectora que resultan de la glicosilación no humana. El sistema de expresión de glutamina-sintasa es descrita en su totalidad o en parte en relación con las patentes europeas n° 0,216,846, 0,25,6055 y 0,323,997 y la solicitud de patente europea n° 89303964,4. Los anticuerpos para ser usados en la invención pueden ser producidos también transgénicamente a través de la generación de un mamífero o planta que sea transgénico para las secuencias de cadenas pesadas y ligeras de inmunoglobulina de interés y la producción del anticuerpo en una forma recuperable del mismo. Los anticuerpos transgénicos pueden ser producidos en, y recuperados a partir de la leche de cabras, vacas u otros mamíferos. Véanse, las patentes de EE.UU. n° 5,827,690, 5,756,687, 5,750,172 y 5,741 ,957. Las ventajas de la presente invención pueden ser adicionalmente apreciadas mediante la referencia a los siguientes ejemplos. Estos ejemplos está previsto que sirvan para ilustrar modalidades preferidas de la invención y no están destinados en modo alguno a limitar el alcance efectivo de las reivindicaciones.

EJEMPLO I Anticuerpos anti-IGF-1R en combinación con docetaxel en el tratamiento de enfermedades malignas no hematológicas avanzadas Pacientes con enfermedades malignas no hematológicas en fase avanzada (enfermedad medible definida por al menos una lesión que pueda ser exactamente medida y cuyo tamaño sea > 2 cm x 1 cm mediante exploración por tomografía por ordenador (CT) convencional o > 1 cm x 1 cm mediante exploración por CT espiral) recibieron una dosis estándar de docetaxel (TAXOTERE) (hasta 100 mg/m2, usando peso corporal real para calcular el área superficial corporal (BSA)) mediante infusión intravenosa (IV) durante 1 día en el día 1 solamente de cada ciclo. Después de que se completó la infusión de docetaxel, se administraron por vía intravenosa anticuerpos anti-IGF-1 R como se describe en la presente memoria descriptiva en una formulación líquida de 5 mg/ml a una dosis entre 0.1 mg/kg y 10 mg/kg. El régimen de tratamiento se repite después de 21 días, con aumento gradual de la dosis de anticuerpo anti-IGF-1 R, y cada 21 días con posterioridad hasta que el progreso de la enfermedad o la toxicidad inaceptable se desarrolla durante un mínimo de 2 ciclos y un máximo de 17 ciclos. Se proporcionaron anti-eméticos profilácticos en la medida apropiada. El aumento progresivo de la dosis usa un diseño de titulación acelerada que utiliza un esquema de doblamiento de la dosis con 3-6 sujetos por nivel de dosis (cohorte). Con cada nueva cohorte no hubo necesidad de período de espera entre los sujetos. Las cohortes posteriores no pudieron ser abiertas hasta que el primer sujeto al nivel de dosis real hubiera sido observado durante 21 días y los sujetos posteriores hubieran sido observados durante 14 días. Se midieron los siguientes puntos finales: seguridad, tolerabilidad, parámetros farmacocinéticos (PK) del anticuerpo anti-IGF-1 R; respuesta de anticuerpos anti-humanos humanos (HAHA); velocidad de respuesta y tiempo de progreso; y número de células tumorales en circulación (CTC) y de IGF-1 R soluble en circulación.

EJEMPLO II Anticuerpos anti-IGF-1R en combinación con paclitaxel y carboplatino en el tratamiento de cáncer de pulmón de células no pequeñas avanzado En la Parte 1 del estudio, pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC) medible de fase IIIB o fase IV o recurrente (después de cirugía/radiación) que no habían recibido ninguna quimioterapia previa recibieron paclitaxel (TAXOL) a una dosis estándar de 200 mg/m2 mediante infusión IV durante 3 horas. Antes de recibir el paclitaxel, todos los pacientes recibieron medicinas profilácticas anti-alérgicas/eméticas. Se administró carboplatino (PARAPLATINO) mediante infusión IV durante 15-30 minutos; la dosis se calculó basada en la fórmula de Calvert con un área diana bajo la curva (AUC) de 6 mg/ml x minuto. Después de que se completó la infusión de carboplatino, se administraron por vía intravenosa anticuerpos anti-IGF-1 R como se describe en la presente memoria descriptiva enuna formulación de 5 mg/ml a una dosis entre 0.05 mg/kg y 10 mg/kg. El régimen de tratamiento se repitió después de 21 días, con aumento gradual de dosis de anticuerpo anti-IGF-1 R, y cada 21 días con posterioridad hasta que se desarrolle un progreso de la enfermedad o una toxicidad inaceptable, durante un mínimo de 1 ciclo y un máximo de 6 ciclos.

Las dosis se aumentaron gradualmente usando un diseño de titulación acelerada utilizando un esquema de doblamiento de la dosis con 3-6 sujetos por cohorte. Con cada nueva cohorte no hubo necesidad de período de espera entre los sujetos. Las cohortes posteriores no pudieron ser abiertas hasta que el primer sujeto al nivel de dosis real hubiera sido observado durante 21 días y los sujetos posteriores hubieran sido observados durante 14 días. Una vez que los seis pacientes habían sido observados durante 21 días (es decir, se completó un ciclo), comenzó la parte segunda al azar del estudio. La Parte 2 del estudio es un estudio no comparativo al azar de dos brazos de anticuerpo anti-IGF-1 R en combinación con paclitaxel y carboplatino (brazo A) y de paclitaxel y carboplatíno solo (brazo B). En el día 1 de la fase 2, a los pacientes de los dos brazos se les proporcionaron las mismas dosificaciones de palitaxel y carboplatino, durante los mismos períodos de tiempo, como en la primera fase. Después de la administración de carboplatino, a los pacientes del brazo A se les proporcionó también la misma dosis de anticuerpo anti-IGF-1 R que se les proporcionó en la fase 1. La dosis se determinó teniendo en cuenta la seguridad y tolerabilidad demostradas enla fase 1. El tratamiento se repitió después de 21 días, y cada 21 días posteriormente, hasta que se produjo un progreso o una toxicidad inaceptable para un mínimo de 2 ciclos y un máximo de 6. Se midieron los siguientes puntos finales: parámetros PK del anticuerpo anti-IGF-1 R, velocidad de respuesta y tiempo de progreso, CTC, IGF-1 en circulación, IGFBP y IGF-1 R en circulación soluble.

EJEMPLO lll Anti-IGF-1 R en combinación con docetaxel y epirubicina en cáncer de mamas metastático A pacientes que tenían cáncer de mamas metastátíco con al menos una lesión que pudo ser exactamente medida en dos dimensiones y cuyo tamaño era > 2 cm x 1 cm mediante exploración CT convencional o > 1 cm x 1 cm mediante exploración CT espiral se les proporcionó epirubicina 75 mg/m2 en forma de una única infusión de 15 minutos. Después de una pausa de una hora, se administró docetaxel (TAXOTERE) 75 mg/m2 en forma de una única infusión IV, seguida de infusión IV de anticuerpos anti-IGF-1 R como se describe en la presente memoria descriptiva a una dosis entre 0.05 mg/kg y 10 mg/kg. Se proporcionaron anti-eméticos profilácticos en la medida apropiada. El tratamiento se repitió después de 21 días con aumento gradual de la dosis de anticuerpo anti-IGF-1 R, y cada 21 días con posterioridad hasta que se desarrolla un progreso de la enfermedad o una toxicidad inaceptable para un mínimo de 2 ciclos y un máximo de 6. Las dosis se aumentaron gradualmente usando un diseño de titulación acelerada que utilizó un esquema de doblamiento de la dosis con 3-6 sujetos por cohorte. Con cada nueva cohorte no hubo necesidad de período de espera entre los sujetos. Las cohortes posteriores no pudieron ser abiertas hasta que el primer sujeto al nivel de dosis real hubiera sido observado durante 21 días y los sujetos posteriores hubieran sido observados durante 14 días. Se midieron los siguientes puntos finales: parámetros PK, HAHA, velocidad de respuesta y tiempo para el progreso. El tiempo para el progreso y la supervivencia global se calcularon usando el método límite de productos de Kaplan-Meier.

EJEMPLO IV Anti-IGF-1R en combinación con docetaxel y prednisona en el cáncer de próstata refractario a hormonas Los sujetos fueron pacientes con adenocarcinoma metastático de próstata que, después de al menos un tratamiento hormonal (orquiectomía, estrógenos, terapia de LHRH, etc.), tenían niveles de testosterona menores que 50 ng/dl, antígeno específico de la próstata (PSA) por encima de 20 ng/ml y un aumento en PSA > 50% sobre el valor nadir en terapia hormonal medido en 3 ocasiones sucesivas con una separación de al menos una semana. Un régimen de pre-medicación de docetaxel incluye dexametasona oral 8 mg 2 veces al día proporcionada durante 3 días, partiendo un día antes de la administración de docetaxel. Una dosis de 75 mg/m2 de docetaxel (TAXOTERE) (usando el peso corporal real para calcular BSA) fue administrada mediante infusión IV durante 1 hora en el día 1 solamente de cada ciclo. Después de que se completó la infusión de docetaxel, los anticuerpos anti-IGF-1 R descritos en la presente memoria descriptiva fueron administrados por vía intravenosa en una formulación líquida de 5 mg/ml. La prednisona es proporcionada diariamente en dos dosis orales de 5 mg por día, partiendo el día 1. Los anti-heméticos profilácticos pueden ser proporcionados en la medida apropiada. El régimen de tratamiento se repite cada 21 días (± 3 días) hasta que se desarrolla el progreso de la enfermedad o una toxicidad inaceptable, durante un máximo de 10 ciclos. Se midieron los siguientes puntos finales: respuesta PSA, parámetros PK de la población del anticuerpo anti-IGF-1 R, HAHA, número total de CTC y CTC que expresan IGF-1 R. Aunque la invención que antecede ha sido descrita en algún detalle por medio de ilustraciones y ejemplos para los fines de una mayor claridad y comprensión, debe ser evidente para los expertos ordinarios en la técnica, teniendo en cuenta las explicaciones de esta invención, que se pueden hacer ciertos cambios y modificaciones en la misma sin apartarse de las características generales o el alcance de las reivindicaciones anejas.

Claims (1)

1. NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES 1.- El uso de un anticuerpo que se une específicamente a IGF- 1 R en combinación con al menos un agente seleccionado entre el grupo que consiste en un agente de alquilación, un antagonista de folato, un antagonista de pirimidina, un antibiótico citotóxico, un compuesto de platino, un taxano, un alcaloide vinca, un inhibidor de topoisomerasa, un inhibidor de EGFR y un agente de terapia hormonal, en la fabricación de un medicamento útil para el tratamiento de una enfermedad maligna no hematológíca en un paciente. 2.- El uso como se reclama en la reivindicación 1 , en donde el agente es un taxano. 3.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde el taxano es docetaxel. 4.- El uso como se reclama en la reivindicación 2, en donde el taxano es paclitaxel. 5.- El uso como se reclama en cualquiera de las reivindicaciones 3 y 4, en donde el anticuerpo y el taxano son formulados para ser administrables en combinación con un agente terapéutico adicional seleccionado entre el grupo que consiste en carboplatino, cisplatino, gemcitabina, capecitabina, epirubicina y prednisona. 6.- El uso como se reclama en la reivindicación 5, en donde el agente terapéutico adicional es carboplatino. 7 '.- El uso como se reclama en la reivindicación 5, en donde el agente terapéutico adicional es epirubicina. 8.- El uso como se reclama en la reivindicación 5, en donde el agente terapéutico adicional es prednisona. 9.- El uso como se reclama en una cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en donde la enfermedad maligna no hematológica es cáncer de mamas. 10.- El uso como se reclama en una cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en donde la enfermedad maligna no hematológica es cáncer de pulmón. 11.- El uso como se reclama en una cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en donde la enfermedad maligna no hematológica es cáncer de próstata. 12. Una composición farmacéutica para el tratamiento de una enfermedad maligna no hematológica según el método de una cualquiera de las reivindicaciones 1-11 , que comprende: una cantidad terapéuticamente eficaz de un anticuerpo que se une específicamente a IGF-1 R, una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un agente seleccionado entre el grupo que consiste en un agente de alquilación, un antagonista de folato, un antagonista de pirimidina, un antibiótico citotóxico, un compuesto de platino, un taxano, un alcaloide vinca, un inhibidor de topoisomerasa, un inhibidor de EGFR, un agente de terapia hormonal; y un vehículo farmacéuticamente aceptable. 13.- La composición de la reivindicación 12, en la que el anticuerpo tiene las siguientes propiedades: una afinidad de unión para IGF-1 R humano de Kd de 8 x 10~9 o menos; y una inhibición de la unión entre IGF-1 R humano e IGF-1 con una IC50 de menos de 100 mM. 14.- La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 12 ó 13, en la que el anticuerpo comprende al menos uno del grupo que consiste en: (a) una cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3 de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 4.9.2, 4.17.3 y 6.1.1 ; (b) una cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3 de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 4.9.2, 4.17.3 y 6.1.1 ; y (c) secuencias que tienen cambios de las secuencias de CDR de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 4.9.2, 4.17.3 y 6.1.1 , y dichas secuencias se seleccionan entre el grupo que consiste en cambios conservadores, en que los cambios conservadores se seleccionan entre el grupo que consiste en sustitución de residuos no polares con otros residuos no polares, sustitución de residuos polares con carga con otros residuos polares sin carga, sustitución de residuos polares con carga con otros residuos polares con carga y sustitución de residuos estructuralmente similares; y sustituciones no conservadoras, en que las sustituciones no conservadoras se seleccionan entre el grupo que consiste en sustitución de residuos polares sin carga con residuos polares con carga y sustitución de residuos polares con residuos no polares, adiciones y deleciones. 15.- La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 12-14, en que el anticuerpo comprende una cadena pesada que comprende las secuencias de aminoácidos de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3 y una cadena ligera que comprende las secuencias de aminoácidos de CDR-1 , CDR-2 y CDR-3, de un anticuerpo seleccionado entre el grupo que consiste en 2.12.1 , 2.13.2, 2.14.3, 4.9.2, 4.17.3 y 6.1.1. 16.- La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 12-15, en la que el anticuerpo se selecciona entre el grupo que consiste en un anticuerpo que comprende una secuencia de aminoácidos de cadena pesada derivada del gen humano DP-47 y una secuencia de aminoácidos de cadena ligera derivada del gen humano A30. Gly Arg Leu Gly Gln Ala Trp Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala 1 5 10 15 Ser Gly Phe Thr Phe Ser Aep Tyr Tyr Met Ser Trp lie Arg Gln Ala 20 25 30 Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser Tyr lie Ser Ser Ser Gly Ser 35 40 45 Thr Arg Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg 50 55 60 Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala 65 70 75 80 Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val Arg Asp Gly Val Glu Thr Thr 85 90 95 Phe Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr 100 105 110 Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125 Ala Pro Cye Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140 Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160 Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ser Cys Ala 165 170 «210' 5 «211 > 322 2]2 ADN «213a Hosno íapienj <400> 5 gacatccaga tgacccagtt tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatcccgtt tgcacagagg ggtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgtttacaa cataatagtt acccgtgcag ttttggccag 300 gggaccaagc tggagatcaa ac 322 <210> 6 <211> 107 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 6 Asp He Gln Met Thr Gln Phe Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly lie Arg Asn Asp 20 25 30 Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu lie 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Hie Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Aep Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Cys 85 90 95 Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu He Lys 100 105 <210> 7 <211> 375 <212> ADN <213> Hamo sapkns <400> 7 aggtgcagct gttggagtct gggggaggct tggtacagcc tggggggtcc ctgagactct cctgtacagc ctctggattc acctttagca gctatgccat gaactgggtc cgccaggctc 120 cagggaaggg gctggagtgg gtctcagcta ttagtggtag tggtggtacc acattctacg 180 cagactccgt gaagggccgg ttcaccatct ccagagacaa ttccaggacc acgctgtatc 240 tgcaaatgaa cagcctgaga gccgaggaca cggccgtata ttactgtgcg aaagatcttg 300 gctggtccga ctcttactac tactactacg gtatggacgt ctggggccaa gggaccacgg 360 tcaccgtctc ctcag 375 <210> 8 <211> 124 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 8 Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser 1 5 10 15 Leu Arg Leu Ser Cye Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala 20 25 30 Met Aen Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser 35 40 45 Ala He Ser Gly Ser Gly Gly Thr Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Arg Thr Thr Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Lys Asp Leu Gly Trp Ser Asp Ser Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp 100 105 110 Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 115 120 *21? 9 «211» 3CG -.212 ADN < 13=- Homo saj.¿?u <400> 9 tcctccctgt ctgcatctgt aggagacaga gtcaccttca cttgccgggc aagtcaggac 60 attagacgtg atttaggctg gtatcagcag aaaccaggga aagctcctaa gcgcctgatc 120 tatgctgcat cccgtttaca aagtggggtc ccatcaaggt tcagcggcag tggatctggg 180 acagaattca ctctcacaat cagcagcctg cagcctgaag attttgcaac ttattactgt 240 ctacagcata ataattatcc tcggacgttc ggccaaggga ccgaggtgga aatcatacga 300 ac 302 <210> 10 <211> 100 <212> PRT < 13> Homo sapiens <400> 10 Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Phe Thr Cys Arg 1 5 10 15 Ala Ser Gln Asp He Arg Arg Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro 20 25 30 Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu He Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser 35 40 45 Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr 50 55 60 Leu Thr He Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys 65 70 75 80 Leu Gln His Asn Asn Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Glu Val 85 90 95 Glu He He Arg 100 <210» 1 1 «211 - 335 <=212> ADH 2 l-'. Homo íaptris <4 00 > 11 gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc acctgcactg tctctggtgg 60 ctccatcagt aattactact ggagctggat ccggcagccc gccgggaagg gactggagtg 120 gattgggcgt atctatacca gtgggagccc caactacaac ccctccctca agagtcgagt 180 caccatgtca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg aagctgaact ctgtgaccgc 240 cgcggacacg gccgtgtatt actgtgcggt aacgattttt ggagtggtta ttatctttga 300 ctactggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctcag 338 c210> 12 <211> 112 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 12 Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr 1 5 10 15 Val Ser Gly Gly Ser He Ser Asn Tyr Tyr Trp Ser Trp He Arg Gln 20 25 30 Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp He Gly Arg He Tyr Thr Ser Gly 35 40 45 Ser Pro Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr Met Ser Val 50 55 60 Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala 65 70 75 80 Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Val Thr He Phe Gly Val Val Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu He Lys 100 105 « )0-- 15 --211> 3?6 = )2* ADH «213- Homo s¿p?lis <400> 15 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtat cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagatctg 300 ggctacggtg acttttacta ctactactac ggtatggacg tctggggcca agggaccacg 360 gtcaccgtct cctcag 376 <210> 16 <211> 125 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 16 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cya Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Gl? Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Leu 85 90 95 Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu He Lys 100 105 <2 !0> 15 <2 ) ) » 376 <2 !2* ADH 213* Ho¡po s-ipÉnj <400> 15 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtggta gtggtggtat cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagatctg 300 ggctacggtg acttttacta ctactactac ggtatggacg tctggggcca agggaccacg 360 gtcaccgtct cctcag 376 <210> 16 <211> 125 <212> PRT ¿213 > Homo sapiens <400> 16 Glu val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Ala He Ser Gly Ser Gly Gly He Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 5 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Leu Gly Tyr Gly Asp Phe Tyr Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met 100 105 no Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr val Thr Val Ser Ser 115 120 125 21? 17 « 211> 279 « 212* ADN « 13* Hw?w-sp-i«f < 400> 17 caggagacag agtcaccatc acttgccggg caagtcagag cattagtacc tttttaaatt 60 ggtatcagca gaaaccaggg aaagccccta aactcctgat ccatgttgca tccagtttac 120 aaggtggggt cccatcaagg ttcagtggca gtggatctgg gacagatttc actctcacca 180 tcagcagtct gcaacctgaa gattttgcaa cttactactg tcaacagagt tacaatgccc 240 cactcacttt cggcggaggg accaaggtgg agatcaaac 279 <210> 18 <211> 92 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 18 Gly Asp Arg Val Thr He Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser He Ser Thr 1 5 10 15 Phe Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu 20 25 30 He His Val Ala Ser Ser Leu Gln Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser 35 40 45 Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gln 50 55 60 Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Asn Ala Pro 65 70 75 80 Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu He Lys 85 90 <2)0 19 211> 34! «2)2* ADH <213* H ino sapietu <400 > 19 cccaggactg gtgaagcctt cggagaccct gtccctcacc tgcactgtct ctggtggctc 60 catcagtagt tactactgga gttggatccg gcagccccca gggaagggac tggagtggat 120 tgggtatatc tattacagtg ggagcaccaa ctacaacccc tccctcaaga gtcgagtcac 180 catatcagta gacacgtcca agaaccagtt ctccctgaag ctgagttctg tgaccgctgc 240 ggacacggcc gtgtattact gtgccaggac gtatagcagt tcgttctact actacggtat 300 ggacgtctgg ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctca g 341 <210> 20 <211> 113 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 20 Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val 1 5 10 15 Ser Gly Gly Ser He Ser Ser Tyr Tyr Trp Ser Trp He Arg Gln Pro 20 25 30 Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp He Gly Tyr He Tyr Tyr Ser Gly Ser 35 40 45 Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser Arg Val Thr He Ser Val Asp 50 55 60 Thr Ser Lys Aen Gln Phe Ser Leu Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala 65 70 75 80 Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Thr Tyr Ser Ser Ser Phe Tyr 85 90 95 Tyr Tyr Gly Met Aep Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser 100 105 110 Ser <210> 21 <211> 274 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 21 Ala Gly Ala Gly Cys Cys Ala Cys Cys Cys Thr Cys Thr Cy? Cys Thr 1 5 10 15 Gly Thr Ala Gly Gly Gly Cys Cys Ala Gly Thr Cys Ala Gly Ala Gly 20 25 30 Thr Gly Thr Thr Cys Gly Cys Gly Gly Cys Ala Gly Gly Thr Ala Cys 35 40 45 Thr Thr Ala Gly Cys Cys Thr Gly Gly Thr Ala Cys Cys Ala Gly Cys 50 55 60 Ala Gly Ala Ala Ala Cys Cys Thr Gly Gly Cys Cys Ala Gly Gly Cys 65 70 75 80 Thr Cys Cys Cys Ala Gly Gly Cys Thr Cys Cys Thr Cys Ala Thr Cys 85 90 95 Thr Ala Thr Gly Gly Thr Gly Cys Ala Thr Cys Cys Ala Gly Cys Ala 100 105 110 Gly Gly Gly Cys Cys Ala Cys Thr Gly Gly Cys Ala Thr Cys Cys Cys 115 120 125 Ala Gly Ala Cys Ala Gly Gly Thr Thr Cys Ala Gly Thr Gly Gly Cys 130 135 140 Ala Gly Thr Gly Gly Gly Thr Cys Thr Gly Gly Gly Ala Cys Ala Gly 145 150 155 160 Ala Cys Thr Thr Cys Ala Cys Thr Cys Thr Cys Ala Cys Cys Ala Thr 165 170 175 Cys Ala Gly Cys Ala Gly Ala Cys Thr Gly Gly Ala Gly Cys Cys Thr 180 185 190 Gly Ala Ala Gly Ala Thr Thr Thr Thr Gly Cye Ala Gly Thr Gly Thr 195 200 205 Thr Thr Thr Ala Cys Thr Gly Thr Cys Ala Gly Cys Ala Gly Thr Ala 210 215 220 Thr Gly Gly Thr Ala Gly Thr Thr Cys Ala Cys Cys Thr Cys Gly Asn 225 230 235 240 Ala Cys Gly Thr Thr Cys Gly Gly Cys Cys Ala Ala Gly Gly Gly Ala 245 250 255 Cys Cys Ala Ala Gly Gly Thr Gly Gly Ala Ala Ala Thr Cys Ala Ala 260 265 270 Ala Cys <210> 22 <211> 91 <212> PRT <213> Ho o sapiens <400> 22 Arg Ala Thr Leu Ser Cye Arg Ala Ser Gln Ser Val Arg Gly Arg Tyr 1 5 10 15 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu He 20 25 30 Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly He Pro Asp Arg Phe Ser Gly 35 40 45 Ser Gly Ser Gly Thr Aep Phe Thr Leu Thr He Ser Arg Leu Glu Pro 50 55 60 Glu Aep Phe Ala Val Phe Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Arg 65 70 75 80 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu He Lye 85 90 « 10* '23 --211'- 367 '21 * ADN <213 - Hcimo sa Eiv* < 400 > 23 gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgagctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaggt attactggga gtggtggtag tacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagatcca 300 gggactacgg tgattatgag ttggttcgac ccctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360 tcctcag 367 <210> 24 <211> 122 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 24 Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30 Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Gly He Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Aep Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Lys Asp Pro Gly Thr Thr Val He Met Ser Trp Phe Asp Pro Trp 100 105 110 Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 =•210=- 25 «211- 320 = 212=- ADN «213=- Homo .«apB?Í <400> 25 gaactgtggc tgcaccatct gtcttcatct tcccgccatc tgatgagcag ttgaaatctg 60 gaactgcctc tgttgtgtgc ctgctgaata acttctatcc cagagaggcc aaagtacagt 120 ggaaggtgga taacgccctc caatcgggta actcccagga gagtgtcaca gagcaggaca 180 gcaaggacag cacctacagc ctcagcagca ccctgacgct gagcaaagca gactacgaga 240 aacacaaagt ctacgcctgc gaagtcaccc atcagggcct gagctcgccc gtcacaaaga 300 gcttcaacag gggagagtgt 320 <210> 26 <211> 106 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 26 Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe He Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 1 5 10 15 Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 20 25 30 Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 35 40 45 Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 50 55 60 Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 65 70 75 80 His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro 85 90 95 Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 100 105 «2 I0 27 «2 I 1> 973 «212* ADM <400> 27 gcctccacca agggcccatc ggtcttcccc ctggcgccct gctccaggag cacctccgag 60 agcacagcgg ccctgggctg cctggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgtcg 120 tggaactcag gcgctctgac cagcggcgtg cacaccttcc cagctgtcct acagtcctca 180 ggactctact ccctcagcag cgtggtgacc gtgccctcca gcaacttcgg cacccagacc 240 tacacctgca acgtagatca caagcccagc aacaccaagg tggacaagac agttgagcgc 300 aaatgttgtg tcgagtgccc accgtgccca gcaccacctg tggcaggacc gtcagtcttc 360 ctcttccccc caaaacccaa ggacaccctc atgatctccc ggacccctga ggtcacgtgc 420 gtggtggtgg acgtgagcca cgaagacccc gaggtccagt tcaactggta cgtggacggc 480 gtggaggtgc ataatgccaa gacaaagcca cgggaggagc agttcaacag cacgttccgt 540 gtggtcagcg tcctcaccgt tgtgcaccag gactggctga acggcaagga gtacaagtgc 600 aaggtctcca acaaaggcct cccagccccc atcgagaaaa ccatctccaa aaccaaaggg 660 cagccccgag aaccacaggt gtacaccctg cccccatccc gggaggagat gaccaagaac 720 caggtcagcc tgacctgcct ggtcaaaggc ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg 780 gagagcaatg ggcagccgga gaacaactac aagaccacac ctcccatgct ggactccgac 840 ggctccttct tcctctacag caagctcacc gtggacaaga gcaggtggca gcaggggaac 900 gtcttctcat gctccgtgat gcatgaggct ctgcacaacc actacacgca gaagagcctc 960 tccctgtctc cgggtaaa 978 <210> 28 <211> 326 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 28 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 1 5 10 15 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 65 70 75 80 Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Ly: 85 90 95 Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 100 105 110 Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 115 120 125 Thr Leu Met He Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 130 135 140 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Aen Trp Tyr Val Asp Gly 145 150 155 160 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 165 170 175 Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 180 185 190 Leu Asn Gly Lye Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lyß Gly Leu Pro 195 200 205 Ala Pro He Glu Lys Thr He Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 210 215 220 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 225 230 235 240 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp He 245 250 255 Ala Val Gl? Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 260 265 270 Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 275 280 285 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 290 295 300 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 305 310 315 320 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 325 «210* 29 « 11* 2% =212* ADN =213* Homo «a ere <400> 29 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt gactactaca tgagctggat ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtttcatac attagtagta gtggtagtac catatactac 180 gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaagaa ctcactgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaga 296 <210> 30 <211> 98 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 30 Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Ser Trp He Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 Ser Tyr He Ser Ser Ser Gly Ser Thr He Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80 Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 Ala Arg <210> 31 <211> 296 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 31 Gly Ala Gly Gly Thr Gly Cys Ala Gly Cys Thr Gly Thr Thr Gly Gly 1 5 10 15 Ala Gly Thr Cys Thr Gly Gly Gly Gly Gly Ala Gly Gly Cye Thr T r 20 25 30 Gly Gly Thr Ala Cys Ala Gly Cys Cys Thr Gly Gly Gly Gly Gly Gly 35 40 45 Thr Cys Cys Cys Thr Gly Ala Gly Ala Cys Thr Cys Thr Cya Cys Thr 50 55 60 Gly Thr Gly Cys Ala Gly Cye Cys Thr Cys Thr Gly Gly Ala Thr Thr 65 70 75 80 Cys Ala Cys Cys Thr Thr Thr Ala Gly Cys Ala Gly Cys Thr Ala Thr 85 90 95 Gly Cys Cys Ala Thr Gly Ala Gly Cys Thr Gly Gly Gly Thr Cys Cys 100 105 110 Gly Cys Cys Ala Gly Gly Cys Thr Cys Cys Ala Gly Gly Gly Ala Ala 115 120 125 Gly Gly Gly Gly Cys Thr Gly Gly Ala Gly Thr Gly Gly Gly Thr Cys 130 135 140 Thr Cys Ala Gly Cys Thr Ala Thr Thr Ala Gly 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<213> Homo sapiens <400> 37 Gly Ala Ala Ala Thr Thr Gly Thr Gly Thr Thr Gly Ala Cys Gly Cys 1 5 10 15 Ala Gly Thr Cys Thr Cys Cys Ala Gly Gly Cys Ala Cye Cys Cys Thr 20 25 30 Gly Thr Cys Thr Thr Thr Gly Thr Cys Thr Cys Cys Ala Gly Gly Gly 35 40 45 Gly Ala Ala Ala Gly Ala Gly Cys Cys Ala Cys Cys Cys Thr Cys Thr 50 55 60 Cys Cys Thr Gly Cys Ala Gly Gly Gly Cys Cys Ala Gly Thr Cys Ala 65 70 75 80 Gly Ala Gly Thr Gly Thr Thr Ala Gly Cys Ala Gly Cys Ala Gly Cys 85 90 95 Thr Ala Cys Thr Thr Ala Gly Cys Cys Thr Gly Gly Thr Ala Cys Cys 100 105 110 Ala Gly Cys Ala Gly Ala Ala Ala Cys Cys Thr Gly Gly Cys Cye Ala 115 120 125 Gly Gly Cys Thr Cys Cys Cys Ala Gly Gly Cys Thr Cys Cys Thr Cys 130 135 140 Ala Thr Cys Thr Ala Thr Gly Gly Thr Gly Cys Ala Thr Cys Cys Ala 145 150 155 160 Gly Cys Ala Gly Gly Gly Cys Cys Ala Cys Thr Gly Gly Cys Ala Thr 165 170 175 Cys Cys Cys Ala Gly Ala Cys Ala Gly Gly Thr Thr Cys Ala Gly Thr 180 185 190 Gly Gly Cys Ala Gly Thr Gly Gly Gly Thr Cys Thr Gly Gly Gly Ala 195 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(288) <223> n es a, c g o t <400> 39 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gggcattaga aatgatttag gctggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagcgcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgtctacag cataatagtt accctccn 288 <210> 40 <211> 96 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 40 Asp He Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr He Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly He Arg Asn Asp 20 25 30 Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Arg Leu He 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln His Asn Ser Tyr Pro Pro 85 90 95 =:210> 4l <21 I > 23?: «:212 ADN «•213> Homo sapiens < 400 > 41 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180 aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagta cccctcch 288 <210> 42 <211> 96 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 42 Asp He Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr He Thr Cys Arg Ala Ser Gln Se r He Ser Ser Tyr 20 25 30 Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu He 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Pro 85 90 95 MOd3 <211>293 <212>ADN <213> Homo sapiens <400> 43 caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt agttactact ggagctggat ccggcagccc 120 gccgggaagg gactggagtg gattgggcgt atctatacca gtgggagcac caactacaac 180 ccctccctca agagtcgagt caccatgtca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240 aagctgagct ctgtgaccgc cgcggacacg gccgtgtatt actgtgcgag aga 293 <210> 44 <211> 97 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 44 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Gly Ser He Ser Ser Tyr 20 25 30 Tyr Trp Ser Trp He Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu Trp He 35 40 45 Gly Arg He Tyr Thr Ser Gly Ser Thr Aen Tyr Asn Pro Ser Leu Lys 50 55 60 Ser Arg Val Thr Met Ser Val Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Ser Leu 65 70 75 80 Lys Leu Ser Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Arg <210> 45 <211> 470 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 45 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala He Leu Lys Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Tyr Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ser Ala He Ser Gly Ser Gly Gly Thr Thr Phe Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ser Arg Thr 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Leu Gly Trp Ser Asp Ser Tyr Tyr Tyr Tyr 115 120 125 Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 130 135 140 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 145 150 155 160 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 165 170 175 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 180 185 190 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 195 200 205 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr 210 215 220 Tyr Thr Cys Asn Val Aep His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 225 230 235 240 Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cye Pro Ala Pro 245 250 255 Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270 Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cye Val Val Val Aßp 275 280 285 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Aep Gly 290 295 300 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 305 310 315 320 Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 325 330 335 Leu Aen Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 340 345 35?' Ala Pro He Glu Lys Thr He Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp He 385 390 395 400 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415 Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 46 <211> 470 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 46 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Leu Phe Leu Val Ala He Leu Lys Gly 1 5 10 15 Val Gln Cye Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ser Ala He Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val 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Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300 Val Glu Val His Asn Ala Lye Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 305 310 315 320 Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val Hie Gln Asp Trp 325 330 335 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 340 345 350 Ala Pro He Glu Lys Thr He Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lye Asn 370 375 380 Gln val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Aep He 385 390 395 00 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 15 Thr Pro Pro Met Leu Aep Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Aßp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn val Phe Ser Cys 435 440 445 Ser Val Met Hie Glu Ala Leu His Aen His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 47 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 47 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp He Gln Met Thr Gln Phe Pro Ser Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr He Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Gly He Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Arg Leu He Tyr Ala Ala Ser Arg Leu His Arg Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr 85 90 95 He Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 100 105 110 His Asn Ser Tyr Pro Cys Ser Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu He 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe He Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 48 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 48 Met Aep Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 10 15 Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp He Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 3o Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr He Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Gly He Arg Asn Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lye 50 55 60 Ala Pro Lys Arg Leu He Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr 85 90 95 He Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cye Leu Gln 100 105 110 Hiß Aen Ser Tyr Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu He 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe He Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Aep Aen Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 49 <211> 470 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 49 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala He He Lyß Gly 1 5 10 15 val Gln Cys Gln Ala Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cye Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Asp Tyr Tyr Met Ser Trp He Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ser Tyr He Ser Ser Ser Gly Ser Thr Arg Asp Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95 Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Val Arg Asp Gly Val Glu Thr Thr Phe Tyr Tyr Tyr Tyr 115 120 125 Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 130 135 140 Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 145 150 155 160 Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cye Leu Val Lys Asp Tyr 165 170 175 Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 180 185 190 Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 195 200 205 Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Aen Phe Gly Thr Gln Thr 210 215 220 Tyr Thr Cys Asn Val Asp Hi? Lye Pro Ser Asn Thr Lys Val Aep Lye 225 230 235 240 Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 245 250 255 Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270 Thr Leu Met He Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Aen Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300 Val Glu val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn 305 310 315 320 Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp 325 330 335 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro 340 345 350 Ala Pro He Glu Lye Thr He Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn 370 375 380 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp He 385 390 395 400 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415 Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 50 <211> 473 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 50 Met Glu Phe Gly Leu Ser Trp Val Phe Leu Val Ala He He Lys Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Asp Tyr Tyr Met Ser Trp He Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ser Tyr He Ser Ser Ser Gly Ser Thr He Tyr Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Lye Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Aen 85 90 95 Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Val Leu Arg Phe Leu Glu Trp Leu Leu Tyr Tyr 115 120 125 Tyr Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr 130 135 140 Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro 145 150 155 160 Cye Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val 165 170 175 Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala 180 185 190 Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly 195 200 205 Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly 210 215 220 Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys 225 230 235 240 Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys 245 250 255 Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 260 265 270 Pro Lys Asp Thr Leu Met He Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 275 280 285 Val Val Asp Val Ser Hie Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr 290 295 300 Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 305 310 315 320 Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val val His 325 330 335 Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Olu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 340 345 350 Gly Leu Pro Ala Pro He Glu Lys Thr He Ser Lys Thr Lys Gly Gln 355 360 365 Pro Arg Glu Pro Gln al Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met 370 375 380 Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cye Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 385 390 395 400 Ser Aep He Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn 405 410 415 Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 420 425 430 Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val 435 440 445 Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln 450 455 460 Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 465 470 <210> 51 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 51 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp He Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Phe Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Asp He Arg Arg Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Arg Leu He Tyr Ala Ala Ser Arg Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80 pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr He Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 100 105 110 His Asn Aen Tyr Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Glu Val Glu He 115 120 125 He Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe He Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Aen Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cye Glu Val Thr Hie Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lye Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cye 225 230 235 <210> 52 <211> 236 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 52 Met Asp Met Arg Val Pro Ala Gln Leu Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp 1 5 10 15 Phe Pro Gly Ala Arg Cys Asp He Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr He Thr Cys Arg Ala ser 35 40 45 Gln Gly He Arg Aen Asp Leu Gly Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Arg Leu He Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr 85 90 95 He Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Leu Gln 100 105 110 His Asn Ser Tyr Pro Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu He 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe He Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn 145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lye Aep 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lye Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cye Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 53 <211> 326 <212>ADN «213> SECUENCIA ARTIFICIAL <220> <223 > Descripción de Secuencia artificial: Secuencia de Consenso <220 > <22 i> característ?ca_m?sc <222> (289) . (289) <223> n eS a, c, g, o t <400> 53 gacatccaga tgacccagty tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 tcacttgcc gggcaagtca ggrcattaga mrtgatttag gctggtwtca gcagaaacca 120 gggaaagcyc ctaagcgcct gatctatgct gcatccmrwt trcammgwgg ggtcccatca 180 aggttcagcg gcagtggatc tgggacagaa ttcactctca caatcagc g cctgcagcct 240 gaagattttg caacttatta ctgtytacar cataatartt aycckybsns kttyggcsrr 300 gggaccrags tggaratcaw acgaac 326 <210> 54 <211> 322 ^212=- AD1I =213> SECUENCIA A FOlFlCIAt < 220 => < 223 > Descripción de secuencia artificial Secuencia de Consenso <400 > 54 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgyaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcaagtca gagcattagy asctwtttaa attggtatca gcagaaacca 120 gggaaagccc ctaarctcct gatcyatgyt gcatccagtt trcaargtgg ggtcccatca 180 aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240 gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacartr ccccayychc tttcggcgga 300 gggaccaagg tggagatcaa ac 322 <210> 55 <211> 325 *212> ADH <21S» SECUENCIA ARTIFICIAL < 220 > < 223 > Descripción de Secuencia artificial: Secuencia de Consenso <220> <221> caract?ristica_misc <222> (291) .. (291) <223> n es a, c, g, o t <400> 55 gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgya gggccagtca gagtgttmgc rgcagstact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgtw ttactgtcag cagtatggta gytcacctcs nacgttcggc 300 caagggacca aggtggaaat caaac 325 <210> 56 <211> 376 <212> ADN <213> SECUENCIA ARTIFICIAL <220 > <223 > Descripción de Secuencia artificial: Secuencia de Consenso < 400 > 56 caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacyttcagt gactactaya tgagctggat ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggartg ggtttcatac attagtagta gtggtagtac cakakactac 180 gcagactctg tgaagggccc attcaccatc tccagggaca acgccaagaa ctcactgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgy gagagatgga 300 gtggaaacta ctttttacta ctactactac ggtatggacg tctggggcca agggaccacg 360 gtcaccgtct cctcag 376 <210> 57 <211> 358 «=212> ADN <213> SECUENCIA ARTIFICIAL < 220 > <223> Descripción de Secuencia artificial: Secuencia de Consenso <220> <221> caracteristica_ isc <222> (337) .. (337) <223> n es a, c, g, o t <400> 57 caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt arttactact ggagctggat ccggcagccc 120 gccgggaagg gactggagtg gattgggcgt atctatacca gtgggagcmc caactacaac 180 ccctccctca agagtcgagt caccatgtca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240 aagctgarct ctgtgaccgc cgcggacacg gccgtgtatt actgtgcggt aacgattttt 300 ggagtggtta ttatctttga ctactggggc cagrganccc tggtcaccgt ctcctcag 358 <210> 58 <211> 418 <'?2> ADN <213> S ECUENa A ARTIFICIAL <220> <223> Descripción de Secuencia artificial: Secuencia de Consenso <400> 58 caggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtrcag cctctggatt cacctttagc agctatgcca tgarctgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcaget attaetggka gtggtggtab yacatwctac 180 gcagactccg tgaagggccc gttcaccatc tccagagaca attccargam cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtat attactgtgc gaaagatctk 300 ggctrsksyg actyttacta ctactactac ggtatggacg tctggggcca agggacyacg 360 gtgattatga gttggttcga cccctggggc cagggaaccc tggtcaccgt ctcctcag 418 <210> 59 <211> 364 <212> ADN <213* SECUENCIA ARTIFICIAL <220> <223 > Descripción de secuencia artificial: Secuencia de Consenso <400> 59 caggtgcagc tgcaggagtc gggcccagga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60 acctgcactg tctctggtgg ctccatcagt agttactact ggagytggat ccggcagccc 120 ccagggaagg gactggagtg gattgggtat atctattaca gtgggagcac caactacaac 180 ccctccctca agagtcgact caccatatca gtagacacgt ccaagaacca gttctccctg 240 aagctgagyt ctgtgaccgc tgcggacacg gccgtgtatt actgtgccag gacgtatagc 300 agttcgttct actactacgg tatggacgtc tggggccaag ggaccacggt caccgtctcc 360 tcag 364 <210> 60 <211> 15 <212> PRT <2i3> Secuencia artificial <220> <223> Descripción de secuencia artificial: Secuencia de Consenso <400> 60 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser RESUMEN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un método terapéutico para el tratamiento de enfermedades malignas no hematológicas que comprende administrar anticuerpos anti-IGF-1 R, particularmente anticuerpos anti-IGF-1 R humanos a un paciente, conjuntamente con la administración de al menos otro agente terapéutico; la invención se refiere adicionalmente a composiciones farmacéuticas que comprenden estos anticuerpos y métodos para usar estas composiciones de los mismos para el tratamiento. PFIZER P06/2329F FIG.1A 2.13.2K GACATCCAGA TGACCCAGTT TCCATCCTCC CTGTCfTGCAT CTGTAGGAGA 50 A30 GACATCCAGA TGACCCAGTC TCCATCCTCC CTGTCTGCAT CTGTAGGAGA 50 2.14.3k TCCTCC CTGTCTGCAT CTGTAGGAGA 26 2.12.1k TGCAT CTGTAGGAGA 15 4.9.2k GACATCCAGA TGACCCAGTC TCCATCCTCC CTGTCGGCAT CTGTAGGAGA 50 CONSENSO GACATCCAGA TGACCCAGTY TCCATCCTCC CTGTCGGCAT CTGTAGGAGA 50 CDR1 2.13.2K CAGAGTCACC AGCACTTGOC GGGCAAGTCA :ATTAGA AAGGATTTAG 100 A30 CAGAGTCACC AGCACTTGCC GGGCAAGTCA :ATTAGA AAGGATTTAG 100 2.14.3k CAGAGTCACC TGCACTTGCC GGGCAAGTCA :ATTAGA CGGGATTTAG 76 2.12. lk CAGAGTCACC TGCACTTGCC GGGCAAGTCA :ATTAGA CGGGATTTAG 65 4.9.2k CAGAGTCACC AGCACTTGCC GGGCAAGTCA :ATTAGA AGGGATTTAG 100 CONSENSO CAGAGTCACC WGCACTTGCC GGGCAAGTCA :ATTAGA MRGGATTTAG 100 2.13.2K GCTGGT^GCA GCAGAAACCA GGGAAAGCCC CTAAGCGCCT GATCTÍ?JTT?GCT 150 A30 GCTGGT^GCA GCAGAAACCA GGGAAAGCCC CTAAGCGCCT GATCTATGCT 150 2.14.3k GCTGGTHGCA GCAGAAACCA GGGAAAGCTC CTAAGCGCCT GATCTATGCT 126 2.12. lk GCTGGTMTA GCAGAAACCA GGGAAAGCIC CTAAGCGCCT GATCTATGCT 115 4.9.2k GCTGGTlrfrCA GCAGAAACCA GGGAAAGCCC CTAAGCGCCT GATCTATGCT 150 CONSENSO GCTGGT?JGCA GCAGAAACCA GGGAAAGCYC CTAAGCGCCT GATCTATGCT 150 CDR2 2.13.2K GCATCCCGTG TGCACAGAGG GGTCCCATCA AGGTTCAGCG GCAGTGGATC 200 A30 GCATCCAGTG TGCAAAGGGG GGTCCCATCA AGGTTCAGCG GCAGTGGATC 200 2.14. k GCATCCCGTG TACAAAGGGG GGTCCCATCA AGGTTCAGCG GCAGTGGATC 176 2.12. Ik GCATCCCGTG TACAAAGGGG GGTCCCATCA AGGTTCAGCG GCAGTGGATC 165 4.9.2k GCATCCAAAG TACACCGTGG GGTCCCATCA AGGTTCAGCG GCAGTGGATC 200 CONSENSO GCATCCMRWG TRCAMMGWGG GGTCCCATCA AGGTTCAGCG GCAGTGGATC 200 2.13.2K TGGGACAGAA TTCACTCTCA CAATCAGCAG CCTGCAGCCT GAAGATTTTG 250 A30 TGGGACAGAA TTCACTCTCA CAATCAGCAG CCTGCAGCCT GAAGATTTTG 250 2.14.3k TGGGACAGAA TTCACTCTCA CAATCAGCAG CCTGCAGCCT GAAGATTTTG 226 2.12. lk TGGGACAGAA TTCACTCTCA CAATCAGCAG CCTGCAGCCT GAAGATTTTG 215 4.9.2k TGGGACAGAA TTCACTCTCA CAATCAGCCG CCTGCAGCCT GAAGATTTTG 250 CONSENSO TGGGACAGAA TTCACTCTCA CAATCAGCMG CCTGCAGCCT GAAGATTTTG 250 CDR3 2.13.2K CAACTTATTA CTGTÍTGACAW CATAATACGT A:CCGTGCAG TÍG TGGCCAG 300 A30 CAACTTATTA CTGT|C|GACA|G CATAATAEGT ACCC-TCCN- 288 2.14.3k CAACTTATTA CTGT GACAIG CATAATARGT AGCCTCGGAC GTTCGGCCAA 276 2.12. lk CAACTTATTA CTGTt GACAG CATAATA^GT AGCCGCGGAC GTTCGGCCAA 265 4.9.2k CAACTTATTA CTGTtrACAp CATAATACGT ACCCTCGGAC TTTCGGCGGA 300 CONSENSO CAACTTATTA CTGTfYrACAfe CATAATARTT AYCCKYBSNS KTTYGGCSRR 300 2.13.2K GGGACCAAGC TGGAGATCAA AC 322 A30 288 2.14.3k GGGACCAAGC TGGAAATCAT ACGAAC 302 2.12. lk GGGACCAAGC TGGAAATCAT ACGAAC 291 4.9.2k GGGACCAAGC TGGAGATCAA AC 322 CONSENSO GGGACCRAGS TGGARATCAW ACGAAC 326 FIG. IB 1.17.3K ATTGGTATCA GCAGAAACCA GGGAAAGCCC CTAfl AfcTCCT GAT CATl 107 012 ATTGGTATCA GCAGAAACCA GGGAAAGCCC CTAAOCTCCT GAT TAT 3CT 150 CONSENSO ATTGGTATCA GCAGAAACCA GGGAAAGCCC CTAfl RCTCCT GATqYATqYT| 150 CDR2 1.17.3 GCATCCAGTT TACAAGGjTGG GGTCCCATCA AGGTTCAGTG GCAGTGGATC 157 012 GCATCCAGTT TGCAAAGTGG GGTCCCATCA AGGTTCAGTG GCAGTGGATC 200 CONSENSO GCATCCAGTT TRCAÍPGTGG GGTCCCATCA AGGTTCAGTG GCAGTGGATC 200 4.17 3K GGGACCAAGG TGGAGATCAA AC 279 012 288 CONSENSO GGGACCAAGG TGGAGATCAA AC 322