MC1242A1 - Derives peptidiques,procede pour leur preparation et leur application dans des preparations pharmaceutiques - Google Patents

Description

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La présente invention concerne les dérivés peptidiques. Plus particulièrement l'invention concerne des dérivés peptidiques d'acides phosphoniques, un procédé pour leur préparation et les préparations pharmaceutiques qui les contiennent» 5 Les dérivés peptidiques fournis par l'invention sont des composés de formule générale

R2 R1 0 OH

1 1 1/

H9N-CH CO NH CH P (I)

10 OH

où R"5* représente un atorae d'hydrogène, un groupe méthyle ou hydro-

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xyméthyle ou un groupe mono-, di- ou trihalométhyle, R représente un alcoyle inférieur, un groupe hydroxy-(alcoyle inférieur) ou guanidino-(alcoyle inférieur) autre que le groupe caractérisant 15 d'un acide alpha-aminé du type normalement rencontré dans les protéines ; la configuration à l'atome de carbone désigné comme (a) est (R) lorsque R^" représente autre chose qu'un atome d'hydrogène ; et la configuration à l'atome de carbone désigné comme (b) est (L),

20 et leurs sels utilisables en pharmacie.

Dans cette description, le terme "alcoyle inférieur"

sert à décrire un groupe alcoyle à chaîne droite ou ramifiée ayant de préférence jusqu'à 8 atomes de carbone. Comme exemples de tels groupes alcoyle inférieur, on peut mentionner l'éthyle, le propy-

25 le, le butyle, le tert-butyle, le pentyle, l'hexyle,_ etc. Comme

/■ 2

exemples de groupes hydroxy-(alcoyle inférieur) dénotés par R on peut mentionner le 2-hydroxyéchyle, le 3-hydroxypropyle, le 4-hydr xybutyle, etc. Le terme "halo" représente un fluoro, chloro, bromo ou iodo, et on peut donner comme exemples des groupes halométhyles 30 mentionnés ci-dessus le chlorométhyle, le dichlorométhyle, le tri-fluorométhyle, etc.

Lorsque R"*" dans la formule I représente autre chose qu'ur atome d'hydrogène, la configuration à l'atome de carbone désigné par . (a) est (R) ; c'est-à~dire qu'il s'agit de la configuration 35 que l'on obtiendrait en remplaçant le groupe carboxyle d'un acide alpha-aminé rencontré dans la nature par une fraction phosphore.

Comme classe préférée de dérivés peptidiques fournis par

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l'invention, il faut mentionner les composés de formule I où R"1"

représente un atome d'hydrogène ou le groupe méthyle , et leurs sels utilisables en pharmacie. On préfère également les composés

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de formule I ou R représente un groupe alcoyle inférieur, en 5 particulier le groupe éthyle, n-propyle ou n-butyle.

Comme exemples de composés de formule I, on trouve : Xi ' acide (1R) -l-^/IL-fct-aminobutyryl ) amino/-éthylphospho~

nique,

L'acide (1R)-l-(L-norleucylamino)-éthylphosphonique, 10 L'acide (IR)-l-(L-norvalylamino)-éthylphosphonique,

L ' acide' (1R) -l-/L-(o( -aminobutyryl) amino/-méthylphospho-

nique,

L'acide (1R)-l-(L-norleucylamino)-méthylphosphonique, L'acide (1R)-l-(L-norvalylamino)-méthylphosphonique, 15 L'acide (1R)-l-(L-homoarginylamino)-éthylphosphonique,

et

L'acide (1R)-l-(L-homoarginylamino)-méthylphosphonique»

Selon l'invention, on prépare les dérivés peptidiques ci-dessus mentionnés (c'est-à-dire les composés de formule I et

2o leurs sels utilisables en pharmacie) par un procédé dans lequel on condense un composé de formule générale.

R10 0 ^

OR3 .

H0N— fcH P^ (II)

25 ^ OR

où R^° a l'une des valeurs accordée à R"*" ci-dessus o'i représente un groupe hydroxyméthyle protégé ; R3 et R^ représentent chacun un atome d'hydrogène ou un groupe protecteur alcoyle inférieur ; et la configuration à l'atome de carbone (a) est (R) lors-

30 que R"*"° représente autre chose qu'un atome d'hydrogène ;

avec un acide alpha-aminé protégé de formule générale

R20

5 I X

R Cil C ^ (III)

35

(b) \

OH

,20

C , „ 2Q

où R représente un groupe amino protégé ; R a l'une des valeurs

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accordée à R" ci-dessus ou représente un groupe hydroxy-(alcoyle inférieur) ou guanidino-(alcoyle inférieur) correspondant sous forme protégée ; et la configuration à l'atome de carbone appelé (b) est (L),

5 on sépare le groupe ou les groupes protecteur(s) dans le produit de condensation et, si on le désire, on transforme un composé de formule I obtenu en un sel utilisable en pharmacie.

Le groupe amino protégé dénoté par R dans un produit de départ acide aminé protégé de formule III ci-dessus peut être 10 n'importe quel groupe amino protégé bien connu en chimie des pep-tideso Dans une illustration préférée du procédé fourni par l'invention, le groupe amino est protégé par un groupe aralcoxycarbo-nyle, en particulier le groupe benzyloxycarbonyle, ou le groupe tert-butoxyca-rbonyle. Cependant le groupe amino peut également 15 être protégé avec, par exemple-, un groupe formyle, trityle, tri—

fluoroacétyle ou 2-(biphénylyl)-isopropyloxycarbonvle ou peut être sous la forme d'un groupe phtaliraido. Le groupe protecteur présent dans un•groupe hydroxyméthyle protégé R ou un groupe hydroxy-

' 20

(alcoyle inférieur) protégé R peut être n'importe quel groupe

20 protecteur d'hydroxy classique ; par exemple, un groupe aralcoxycar-bonyle (par exemple le groupe benzyloxycarbonyle), un groupe alca-noyle inférieur (par exemple les groupes acétyle, propionyle, etc) un groupe aroyle (par exemple le groupe benzoyle), un groupe alcoyle inférieur (par exemple le groupe tert-butylej ou un groupe 25 aralcoyle inférieur (par exemple le groupe benzyle).

La condensation d'un composé de formule II avec un acide alpha-aminé protégé de formule III peut s'effectuer solon des procédés bien connus en chimie des peptides ; par exemple, selon le procédé de l'anhydride mixte, de 1'azothydrure, de l'ester activé, 30 du chlorure d'acide, du carbodiimide ou de l'EEDQ (1-éthoxycarbo-nyl-2-éthoxy-l,2-dihydroquinoléine).

Dans un procédé, on peut condenser un composé de formule II avec un acide alpha-aminé protégé de formule III, où le groupe carboxy est un résidu d'anhydride mixte formé avec un acide orga-35 nique ou inorganique. Il est commode de traiter un tel acide alpha-aminé protégé avec une base tertiaire comme une tri(alcoyle inférieur) aminé (par exemple la triéthylamine) ou la N-éthylraorpholine

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dans un solvant organique inerte (par exemple le tétrahydrofuran-ne, le 1, 2-diméthoxyéthane, le dichlorométhane, le toluène,

l'éther de pétrole, etc), et on fait réagir le sel obtenu avec un chloroformi-ate approprié (par exemple un chloroformiate d'alcoy-5 le inférieur comme le chloroformiate d'éthyle ou le chloroformiate d'isobutyle) à basse température» On condense alors de façon convenable in situ l'anhydride mixte ainsi obtenu avec un composé de formule II.

Dans un autre procédé, on peut condenser un composé de 10 formule II avec un acide alpha-aminé protégé de formule III où le t»

groupe carboxy est sous la forme d'un azothydrure d'acide. Cette condensation s'effectue de préférence dans un solvant organique inerte comme le DMF ou l'acétate d'éthyle à basse température.

Il existe encore une autre méthode où l'on peut conden-15 ser un composé de formule II avec un acide alpha-aminé de formule III où le groupe carboxy est sous la forme d'un groupe ester -actif (par exemple le groupe 4-nitrophényle, 2,4,5-trichlorophé-nyle ou N-hydroxysuccinimidester)« Cette condensation s'effectue commodément dans un solvant inerte comme le DMF aqueux ou, lorsque 20 R3 et dans un composé de formule II représentent tous deux un groupe alcoxy inférieur, également dans un alcanol inférieur comme l'éthanol aqueux.

Dans un autre procédé, on peut condenser un composé de formule II avec un acide alpha-aminé protégé de formule III où le

25 groupe carboxy est sous la forme d'un chlorure d'acide. Cette con-\.

densation s'effectue de préférence en présence d'une base et à basse, température.

. Dans un procédé encore différent, on peut condenser un composé de formule II avec un acide alpha-aminé protégé de formule 30 III en présence d'un carbodiimide (par exemple le dicyclohexylcar-bodiimide) ou d'EEDQo Cette condensation peut s'effectuer dans un solvant organique inerte (par exemple le chlorure de méthyle ou un alcanol inférieur comme le méthanol, l'éthanol, etc) à la température ambiante ou à une température inférieure. 35 Le clivage du ou des groupes protecteurs du produit de condensation s'effectue selon des procédés classiques ; c'est-à-dire les procédés effectivement utilisés ou décrits dans la litté-

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rature pour le clivage des groupes protecteurs. Ainsi, par exemple, on peut séparer un groupe aralcoxycarbonyle (par exemple benzyloxycarbonyle), le groupe tert-butoxycarbonyle ou le groupe 2-biphénylyl-isopropyloxycarbonyle par hydrolyse (par exemple par 5 traitement avec de 1'acide bromhydrique dans 11 acide acétique glacial)« On peut également séparer un groupe aralcoxycarbonyle (par exemple benzyloxycarbonyle) par hydrogénolyse (par exemple en présence de palladium sur charbon ou d'oxyde de platine). On peut également séparer le groupe tert-butoxycarbonyle ou 2-biphé-10 nylyl-isopropyloxycarbonyle en utilisant de l'acide chlorhydrique dans le dioxanne. On peut séparer un groupe trityle, par exemple, par traitement avec l'acide acétique dilué» On peut transformer un groupe phtalimido en groupe amino par hydrazinolyse. On peut séparer les groupes protecteurs alcoyle inférieur dénotés par R 15 et par traitement avec de l'acide bromhydrique dans l'acide acétique glacial, ou traitement avec du triméthyl-ehlorosilane ou~ du triméthylbromosilane suivi d'une hydrolyse aqueuse. On appréciera que lorsque plus d'un groupe protecteur est présent,le clivage des groupes protecteurs peut s'effectuer en une seule étape ou en 20 plus d'une étape, selon la nature desdits groupes. Cependant, on préfère utiliser des groupes protecteurs que l'on peut séparer en une seule étape,,

Les composés de formule I ci-dessus sont amphotères et forment des sels utilisables en pharmacie avec les acides forts 25 utilisables en pharmacie (par exemple l'acide chlorhydrique, l'acide bromhydrique, l'acide sulfurique, l'acide méthanesulfonique, l'acide paratoluènesulfonique, etc) et les bases utilisables en pharmacie (par exemple l'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium, etc.).

30 Les produits de départ de formules II et III sont des composés connus ou peuvent être préparés par analogie avec la préparation de composés connus.

•Les dérivés peptidiques fournis par l'invention possèden une activité anti-bactérienne contre une large gamme de bactéries 35 gram-positives et gram-négatives comme Escherichia coli f Staphylo-coccus aureus, Serratia marcescens, Klebsiella aeroqenes, Strcpto-coccus faecalis, Haemophilus influenzae, Bacillus subtilis,

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Salmonella tvphimuriumr Proteus mirabilis. Pseudomonas aeruginosa et Shiqella sonnei.

En outre, les présents dérivés peptidiques renforcent-l'activité des antibiotiques y compris la pénicilline, les anti-5 biotiques céphalosporiniques et la D-cyclosérine- Parmi les antibiotiques dont l'action est renforcés par les présents dérivés peptidiques, on peut mentionner 1'amoxycilline, la céphradine, la céphalothine, la céphalexine, la carbénicilline, 1'ampicilline, la pénicilline G, la sulbénicilline, la céphazoline, la céfoxiti-10 ne, la rifampicine, la /"(R) -l-(2-furoyloxy)-3-méthylbutyl/pénicil-line, 1 ' acide ( 6R) 1 *hexahydro-lH-azépin<»l-yl) -méthylène/ami-

no/pénicillanique, le (pivaloyloxy)méthyl (6R) -6-^/*(hexahydro-.lH~ azépin-l-yl)méthylène/iamino/pénicillanate, le céphamandole, la céphaloridine, la céphaloglycine, la phénéthicilline, la méthicil-15 line, la propicilline, la ticaracilline» le sel d'arginine d'amoxycilline, la phosphonomycine, la vancomycine et la îcanamycine*

L'invention fournit donc également une préparation pharmaceutique contenant un dérivé peptidique ci-dessus mentionné et, si on le désire, un antibiotique, en association avec un support 20 pharmaceutique compatible»

Le support présent dans les préparations pharmaceutiques fournies par l'invention peut être n'importe quel support solide ou liquide qui est compatible avec les dérivés peptidiques ci-dessus mentionnés, et avec les antibiotiques lorsqu'il y en a, et 25 qui convient à l'administration thérapeutique. Le support peut

être un support organique ou inorganique convenant à l'administration entérale (pair exemple orale) ou pao-entérale. Comme exemples de tels supports, on peut mentionner l'eau, la gélatine, le lactose, les amidons, le stéarate de magnésium, le talc, les huiles 30 végétales/ la gomme arabique, les polyalcoylèneglycols, le pétro-latum, etc0 Les préparations pharmaceutiques peuvent se présenter sous forme solide (par exemple sous forme de comprimés, de dragées de suppositoires ou de capsules) ou sous forme liquide (par exemple sous forme de solutions, de suspensions ou d'émulsions). Les 35 préparations pharmaceutiques peuvent être soumises à des opération pharmaceutiques classiques comme la stérilisation et peuvent contenir des adjuvants comme des agents de conservation, des agents

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stabilisants, les agents mouillants, des agents émulsifiants, des sels permettant de varier la pression osraotique ou des tampons. Lorsqu'on utilise un tampon, le pH de la préparation pharmaceutique peut naturellement varier dans un intervalle connu en prati-5 que pharmaceutique.

Lorsque les présentes préparations pharmaceutiques contiennent un dérivé peptidique et un antibiotique, le rapport pondéral du dérivé peptidique à 11 antibiotique peut varier dans de larges limites. En général les préparations pharmaceutiques peu-10 vent contenir le dérivé peptidique et l'antibiotique dans un rapport pondéral allant de 1:100 à 100:1, de préférence dans un rapport pondéral allant de 1:64 à 64:1 et en particulier dans un rapport pondéral allant de 1:16 à 16:1.

La dose quotidienne de dérivé peptidique administré seul 15 ou en combinaison avec un antibiotique varie dans de larges limites selon des facteurs comme le dérivé peptidique particulier choisi, l'antibiotique particulier choisi, le mode d'administration et l'infection à traiter0 Par exemple, lorsqu'on administre un dérivé peptidique seul, la dose quotidienne pour 1'administra-20 tion orale peut s'élever à environ 2000 mg à 4000 rtig et la dose quotidienne pour l'administration parentérale peut s'élever à environ 800 mg à 2000 mg. Lorsqu'on administre un dérivé peptidique en combinaison avec un antibiotique, la dose quotidienne pour l'administration orale peut s'élever à environ 750 mg à 1500 mg 25 d'une combinaison du dérivé peptidique et de l'antibiotique et la dose quotidienne pour l'administration parentérale peut s'élever à environ 200 mg à 2000 mg d'une combinaison du dérivé peptidiqva et de l'antibiotique. On appréciera que les doses quotidiennes peuvent être administrées en une ou plusieurs fois et que les chif-30 fres. mentionnés ci-dessus peuvent être modifiés vers le haut ou vers le bas selon les besoins individuels et peuvent être adaptés aux exigences d'une, situation particulière selon l'appréciation du médecin traitant.

Les exemples suivants illustrent le procédé fourni par

35 l'invention -{L

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EXEMPLE 1

^ Préparation du produit de départ :

On dissout 5,0 g (48mMol) d'acide L-alpha-aminobutyrique dans 24 ml d'hydroxyde de sodium 2 N et on refroidit la solution 5 à 0°C. On ajoute alternativement et en plusieurs fois 12,3 g (72 mMol) de chloroformate de benzyle et 18 ml (72 mMol) d'hydroxyde de sodium 4 N tout en agitant pendant 1/2 h de manière que la température n1 excède pas 10°C et que le pH se maintienne aux alentours de 11. On laisse le mélange atteindre lentement la température 10 ambiante puis on l'agite pendant la nuit. On extrait le mélange avec 50 ml de diéthyléther et on sépare les phases aqueuses et organiques. On acidifie la phase aqueuse à pH 2 avec de l'acide chlorhydrique 5 N pour donner un mélange huileux. On extrait ce mélange avec deux fractions de 75 ml de diéthyléther. On sèche les 15 extraits sur sulfate de sodium et on fait évaporer pour donner

9,6 g*d'une huile incolore. On dissout cette huile dans 10 ml d'acétate d'éthyle et on ajoute 100 ml d'éther de pétrole (point d'ébullition 40-60°C) pour donner une solution huileuse qu'on laisse reposer à 0°C. On obtient un précipité cristallin blanc que 20 l'on sépare par filtration, qu'on lave avec de l'éther de pétrole et,qu'on sèche pour donner 8,40 g (73%) d'acide N-benzyloxycarbonyl L-et-aminobutyrique de pf 76°-78°C ; /%/p°= -10,9° ; =*"20,3°

(c = 1% dans l'éthanol).

(B) Procédé :

25 (i) On dissout 8,30 g (35 mMol) d'acide N-benzoyloxycarbonyl~L-alpha-amino-butyrique et 4,02 g (35 mMol)de N-hydroxysuccinimide dans 75 ml de diméthoxyéthane tout en agitant et on reiroidit la solution à 0°C. On ajoute 7,94 g (38,5 mMol) de dicyclohexylcarbo-diimide et on agite le mélange à 0°C pendant 2 h puis on le laisse 30 reposer à 0°C pendant la nuit. On sépare par filtration le sous-

produit solide. On.fait évaporer le filtrat pour donner le N-hydro-xysuccinimidester de l'acide N-benzvloxycarbonyl-L-alpha-aminobuty-rique sous forme d'une gomme épaisse que l'on utilise sans plus de purification.

35 (ii) On dissout 4,38 g (35 mMol) d'acide (1R)-1-aminoéthylphospho-nique dans un mélange de 40 ml d'eau, 7,07 g (70 mMol) de triéthy-lamine et 40 ml-de DMF tout en agitant. On refroidit la solution

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obtenue à 0°C et on verse rapidement goutte à goutte une solution de 35 mMol de N-hydro.xysuccinimide-ester de l'acide N-benzyloxy-carbonyl-L-<£-aminobutyrique dans 40 ml de DMF, On agite le mélange à 0°C puis on le laisse revenir à la température ambiante tout en 5 agitant pendant la nuit. On filtre le mélange pour retirer une petite quantité de solide. On fait évaporer le filtrat sous un vide obtenu avec une pompe à huile. On dissout le résidu dans un mélange de 30 ml de méthanol et de 10 ml d'eau et on le fait passer à travers une colonne de résine échangeuse de cations (B.D.H., 10 Zerolit 225, SRC 13, RSO^H ; 150 g ; fraîchement régénérée dans le cycle acide), l'ëlution s'effectuant avec le même solvant. On recueille l'éluatacide et on le fait évaporer pour donner un solide blanc légèrement gommeux. On triture ce solide avec 100 ml de diéthyléther et on sépare le diéthyléther par décantation. On 15 dissout le solide résiduel dans un mélange de 100 ml de méthanol et de 50 ml .d'eau et on titre la solution obtenue à pH 4,5 avec de la benzylamine aqueuse 4 N (titre 8,0 ml ; quantité théorique 8,75 ml). Le mélange se solidifie vers la fin de la titration, et on sépare le précipité par filtration, on le lave à l'eau et on 20 sèche pour donner 8,84 g du sel de monobenzylamine de l'acide (1R)-l-^-benzyloxycarbonyl-L-alpha-aminobutyryl)aminq7--éthylphosphoni~ que de Pf 228°-23l°C (déc.) ; -31,3° ; &2° = ~i05° (c =

1% dans l'acide acétique glacial)

(iii) On agite à la température ambiante pendant 6 heures 8,7 g ^ (19,3 mMol) du sel de monobenzylamine de l'acide ( 1R)-l~/(N-benzy-loxycarbonyl-L-f/-aminobutyryl) amino/-éthylphosphonique avec 20 ml d'un mélange d'acide bromhydrique à 45% dans l'acide acétique glacial et de 8 ml d'acide acétique glacial. On ajoute 100 ml d'éther, et une gomme se précipite. Cette gomme est lavée par décantation 30 avec 100 ml de diéthyléther et dissoute dans 100 ml de méthanol. On agite la solution et on ajoute deux fractions de 5 ml d'oxyde de propylène à un pH voisin de 5, ce qui permet d'obtenir un précipité blanc. On laisse le mélange reposer pendant la nuit, on sépare le précipité par filtration, puis on le lave successivement avec du

♦5 r méthanol et du diéthyléther et on sèche pour donner 4,05 g d'acide (1R)-1-(L-alpha-aminobutyryl-amino)-éthylphosphonique brut de

298° (déc.). La recristallisation à partir d'un mélange de 750 m.

10

d'eau et de 1500 ml d'éthanol donne un précipité blanc cristallin qu'on lave avec de l'éthanol puis avec du diéthyléther et qu'on fait sécher ensuite sous vide. On obtient ainsi 3,58 g (88%)

d'acide (1R)-1- (L-^-aminobutyrylamino) -éthylphosphonique de P^ 29 6-5 298° (déc.) ; -33,1° ; = = hydroxyde de sodium 1 N, fraîchement préparé).

EXEMPLE 2

(A) Préparation du produit de départ :

On traite 5,0 g (42,5 mMol) de L-norvaline avec 10,2 g 10 (60 mMol) de chloroformate de benzyle et d'hydroxyde de sodium de la manière décrite dans l'exemple 1 (A). Le produit huileux brut est cristallisé à partir d'un mélange de 10 ml de diéthyléther et de 20 ml d'éther de pétrole (P , 40-60°C) pour donner 8,2 g (77%)

^ o de N-benzyloxycarbonyl-L-norvaline de P„ 85°-87°C ; £&/y. = -9,9° ;

9 n

15 ^*^365 = "26,5° (c = 1% dans l'éthanol).

• (b) Procédé

(i) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple 1(B)

(i) , en partant de 8,1 g (32 mMol) de N-benzyloxycarbonyl-L-norva-line, 3,68 g <32 mMol) de N-hydroxysuccinimide et de 7f21 g (35

20 mMol) de dicyclohexylcarbodiimide on obtient, après trituration du -prpduit huileux avec 25 ml d'éthanol, un produit cristallin blanc. Après addition de 25 ml d'éther de pétrole (Rg^ 40-60°C) et filtration on obtient 9,82 g de N-hydroxysuccimidester de N-benzyloxycar-bonyl-L-norvaline qui est utilisé directement dans l'étape suivante 25 Un échantillon purifié fond à 95-97°C et présente un pouvoir rota-toire -35,1° (c = 1% dans l'éthanol)

(ii) De manière analogue à ce qui a été décrit dans 1'exemple 1(B) (ii) , en partant de 9,82 g (28 mMol) de N-hydroxysuccinimidester de N-benzyloxycarbonyl-L-norvaline et de 3,75 G (30 mMol) d'acide (1R)

30 1-aminoéthylphosphonique, mais en effectuant la trituration avec un mélange de 150 ml de méthanol et de 30 ml d'eau à la place du diéthyléther, on obtient 7,61 g du sel de monobenzylamine de l'acide (1R) -l-/"(N-benzyloxycarbonyl-L~norvalyl) amino7-éthylphosphonique de Pf 225°-230°C (déc.) /^°= -29,9° ; = -98,8° (c = 1%

35 dans l'acide acétique). L'évaporation du filtrat et la trituration du résidu avec 100 ml d'eau chaude suivies par filtration et lavage avec de l'éthanol puis avec du diéthyléther donne une seconde récol'

11

te de 1,99 g de sel de monobenzylamine de l'acide ( 1R)-l~/N-benzy-lôxycarbonyl-L-norvalyl)amino7-éthylphosphonique de 231°-234°C (décomposition) ; - "■ 29,7° ; = -99,2° (c = 1% dans l'acide acétique). Rendement total : 9,60 g (73%).

5 (iii) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple

1(B) (iii), en partant de 9,0 g (19mMol) du sel de monobenzylamine de l'acide (1R) -l-/N-benzyloxycarbonyl-L-norvalyl)amino7~éthyl-phosphonique on obtient, après recristallisation à partir d'un mélange de 80 ml d'eau et de 160 ml d'éthanol, 3,54 g (82%) d'aci-10 de (1R)-1-(L-norvalylamino)-éthylphosphonique de P^ 260°-262°C (décomposition) ; -19,5° ; ~ -75,3° (c = 1% dans l'eau).

EXEMPLE 3

(A) Préparation du produit de départ 15 De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple

1 (A) on traite 5,0 g (38 mMol) de L-norleucine avec 9,7 g (57mMol) de chloroformate de benzyle et d'hydroxyde de sodium. Le produit, la N-benzyloxycarbonyl-L-norleucine est isolé sous, forme d'une huile qui est utilisée dans le procédé sans cristallisation. 20 (B) Procédé

(i) De manière analogue à ce qui a été dit dans l'exemple 1(B)(i), en partant d'environ 38 mMol de N-benzyloxycarbonyl-L-norleucine, de 4,38 g (38 mMol) de N-hvdroxysuccinmide et de 8,65 g (42 mMol) de dicyclohexylcarbodiimide on obtient, après trituration du pro-

25 duit brut huileux avec 100 ml de diéthyléther, 7,47 g de N-hydro-

xysuccinimidester de N-benzyloxycarbonyl-L-norleucine sous forme

20

d'un solide cristallin de P^ 82°-840C ; = -20,7° (c = 1% dans l'acétone).

(ii) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple 1(B) 30 (ii) , en partant de 7,40 g (20,5 mMol de N-hydroxysuccinimidester de N-benzyloxycarbonyl-L-norleucine et de 2,56 g (20,5 mMol) d'acide (1R)-1-aminoéthylphosphonique, mais en procédant à l'étape d'échange d'ions dans le méthanol/eau (5:1) au lieu du méthanol/eau (3:1), on obtient, après évaporation et trituration du produit 35 brut avec l'éther, un solide qui est'digéré avec 150 ml d'eau chaude, refroidi et filtré pour donner 5,64 g (74%) d'acide (1R)-1-/N-benzyloxycarbonyl-L-norleucyl)amino/-éthyl-phosphonique de P^ 192-

LA

194°C (décomposition) ; /%720= -37,8° ; /V355 = -126,5° (c = 0,5% dans l'acide acétique).

(iii) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple 1 (B) (iii), en partant de 5,20 g (14,0 mMol) d'acide (1R)-1-/"(N-5 benzyloxycarbonyl-L-norleucyl) aminq7~éthylphosphonique , on obtient, après recristallisation à partir d'un mélange de 70 ml d'eau et de 280 ml d'éthanol, 3,02 g (91%) d'acide (ÎR)-I-(L-norleucyl-amino)-éthylphosphonique de 254°-256°C (décomposition) ; /&7q° = -18,6° ; /^3g5 = -70,1° (c = 1% dans l'eau). 10 EXEMPLE 4

(a) De manière analogue à ce qui a été dit dans l'exemple 1(B)(ii) et l'exemple 2(B)(ii), en partant de 17,4 g (50 mMol) de N-hydro-xysuccinimidester de N-benzyloxycarbonyl-L-norvaline et de 5,55 g (50 mMol) d'acide aminométhylphosphonique, mais en effectuant la

15 titration abev la benzylamine dans un mélange de 250 ml de méthanol et de 50 ml d'eau, on obtient 17,3 g du sel de monobenzylamine brut du produit désiré, de Pf 195-198° (déc.) (récolte 1). Après êvaporation du filtrat et recristallisation du résidu à partir d'un mélange de méthanol (80 ml) et d'eau (20 ml) on obtient encore 20 2,19 g d'un produit très pur (chromatographie en couche mince) de P^ 180-185° (déc.) ." Rendement total : 19,5 g (86%)

La recristallisation de 0,5 g d'échantillon de la récolte là partir de 10 ml d'eau chaude donne une récolte de 0,39 g du sel de monobenzylamine pur de l'acide (N-benzyloxycarbonyl-L-norvalyl)

2o

25 amino-méthylphosphonique de P^ 203-205° (déc.) ; ^Ç7n = -8,2° ;

OH

/*ê?365 = "21/3° (c = 0,5% dans l'acide acétique).

(b) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple 1 (B) (iii), en partant de 18,9 g (42 mMol) du sel de monobenzylamine de 1' acide (N-benzyloxycarbonyl-L-norvalyl) -aminométhylphosphonique on

30 obtient, après recristallisation à partir d'un mélange de 80 ml d'eau et de 160 ml d'éthanol, 6,65 g (75%) d'acide L-(norvalylamino! méthylphosphonique de P^ '273-275° (déc) ; = + 61,2° , /^y^gg =

+ 224° (c = 0,54%, H20).

EXEMPLE 5

35 On agite de la N-benzyloxycarbonyl-L-norvaline (45,4 g,

0,181 Mol) dans une solution de dichlorure de méthylène (200 ml)

tout en ajoutant du chorhydrate de diméthyl-aminométhylphosphonate

13

(31,76 g, 0,181 Mol). On refroidit la, suspension obtenue à -12°C en ajoutant goutte à goutte de la triéthylamine sèche (25,3 ml, 0,181 Mol). Après la fin de l'addition, on agite le mélange froid pendant 15 min avant d'ajouter rapidement de l'E.E.D.Q. (56,8 g, 5 0,23 Mol) dans le dichlorure de méthylène (100 ml). On agite ce mélange à froid pendant 2 h puis on 1 ' agite à la température ambiante pendant la fin de semaine.

On lave le mélange avec de l'eau (100 ml) puis avec de l'acide chlorhydrique IN (4 fois avec à chaque fois 100 ml). On 10 ré-extrait l'eau de lavage acide totale avec du dichlorure de méthylène (2 x 50 ml). On lave encore la solution organique avec de l'eau (100 ml) et enfin avec une solution à 15% de KI-ICO^ (3 x 100 ml); puis on sèche sur sulfate de sodium anhydre. On filtre la solution et on concentre. On reconcentre l'huile résiduelle avec 15 du benzène, pour donner un résidu pesant 78,13 g.

On' observe alors les premiers signes de cristallisation. On triture l'huile avec de l'éther anhydre (200 ml) dans lequel il se dissout. Très tôt, la cristallisation se répand dans la solution. On refroidit la solution pendant 1 h, on sépare le solide 20 par filtration, on le lave a l'éther et on le sèche à poids constant sous vide. On obtient 58,2 g d'un produit de 77-80°C.

On absorbe ce produit dans-de l'acétate d'éthyle très chaud (200 ml) et on filtre la solution. Au filtrat refroidi on ajoute de l'éther (200 ml). On ensemence le mélange et on le re-25 froidit pendant la nuit. On sépare le solide par filtration, on le lave à l'éther et on le fait sécher sous vide pour donner 50,64 g d'un résidu de P^ 82-84°C.

• On agite 37,2 g de ^"(N-benzyloxycarbonyl-L-norvalyl) aminq7diméthylphosphonate dans de l'acide bromhydrique à 45% dans 30 l'acide acétique (120 ml) pendant 5 h. Au départ le dégagement de dioxyde de carbone est très rapide. On ajoute de l'éther (500 ml) et on fait ainsi précipiter une huile. On agite le mélange pendant 40 Min, puis on le laisse reposer. On sépare l'éther par décantation et on lave encore l'huile deux fois à l'éther (500 ml à cha-35 que fois) .

On absorbe l'huile dans du méthanol (300 ml) et on agite la solution en ajoutant de l'oxyde de propylène (40 ml). Au bout de

14

5 min environ le produit commence â se séparer par cristallisation. On ajuste le mélange, à pH 4 et on le refroidit pendant la nuit.

On sépare le solide par filtration et on le lave soigneu-5 sement avec du méthanol, puis avec de l'éther. On le sèche sous vide, pour donner un résidu de 20,13 g, ayant un P^ de 288-289°C (déc.).

On absorbe ceci dans de l'eau très chaude (200 ml) et on filtre. On.ajoute au filtrat 400 ml d'éthanol. Après avoir laissé

10 reposer, le produit se sépare par cristallisation. On le refroidit pendant 2 h. On sépare le solide par filtration, on le lave à l'éthanol puis à l'éther, et on sèche sous pentoxyde de phosphore sous vide. On obtient 16,66 g d'acide (L-norvalylamino)-méthylphosphonique de P^ 293-4°C (d). +62,7° (c = 0,5% dans l'eau).

15 EXEMPLE 6

(a) On traite de la L-nitro-homoarginine (2,33 g, 10 mMol, P^ 227-230°, (déc) avec 3,41 g (20 mMol) de chloroforma te de benzyle et d'hydroxyde de sodium de la manière décrite dans l'exemple 1 (A) . Le produit brut huileux est extrait de la solution acidifiée avec ' 20 de l'acétate d'éthyle (deux fois avec 100 ml) au lieu du diéthyléther. Le produit brut huileux, la N-benzyloxycarbonyl-W-nitro-L-homoarginine, obtenu après séchage sur sulfate de sodium et éva-poration, se trouve sous forme d'une gomme qui est utilisée dans l'étape suivante sans plus de purification.

25 (b) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple 1 (B)

(i), mais en utilisant du diméthylformamide (50 ml) comme solvant, on obtient, en partant d'environ 4,2 g (env. 10 mMol) de N-benzylo-xycarbonyl-W-nitro-L-homoarginine brute (obtenue comme ci-dessus), de 1,15 g (10 mMol) de N-hydroxysuccinimide et de 2,27 g (11 mMol)

30 de dicyclohexylcarbodiimide, et après départ de 1,73 g de dicyclohe' xylène et évaporation du filtrat, le N-hydroxysuccinimidester de N-benzyloxycarbonyl-W-nitro-L-homoarginine brut sous forme d'une huile jaune qui est utilisée dans l'étape suivante sans plus de purification.

35 (c) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple 1(B)

(ii) , on fait réagir environ 10 mMol de N-hydroxysuccinimidester de N-benzyloxycarbonyl-W-nitro-L-homoarginine avec 1,25 g d'acide (1R)

15

-1-aminoét.hylphosphonique, mais on effectue le traitement avec une résine échangeuse d'ions RS03H dans le méthanol aqueux (5:1 au lieu de 3:1). On fait évaporer l'éluat acide et on le répartit entre l'eau (300 ml) et l'acétate d'éthyle (150 ml) et on obtient 5 un matériau non soluble. On le sépare par filtration et on le sèche pour donner 1,36 g de produit brut ayant un P^ de 190-193° (déc.), caractérisé par chromatographie en couche mince et RMN (récolte 1).

On sépare les couches du solvant filtré, on fait évapo-10 rer la couche aqueuse jusqu'à siccité et on triture le résidu avec de l'acétone (50 ml) pour donner un précipité blanc. Ce précipité est séparé par filtration et lavé avec de l'acétone, et séché pour donner encore 1,43 g (P^ 184-188°,' déc) .du produit, l'acide (1R)-l/^N-benzyloxycarbonyl-W-nitro-L-homo-arginyl) amino7~éthylphospho-15 nique (récolte 2). Les récoltes 1 et 2 sont utilisées dans l'étape suivante sans plus de purification.

(d) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple 1(B) (iii), en partant de 2,7 g (environ 5,7 mMol) d'acide (1R)-1-/N-benzylpxycarbonyl-U;-nitro-L-hcmoarginyl) aminq7-éthylphosphonique 20 (récoltes 1 et 2' ci-dessus) on obtient, après recristallisation

à partir d'un mélange de 15 ml d'eau et de 150 ml d'éthanol, 1,23g d'acide (1R) -1- (L-CJ-nitro-homoarginylamino) -éthylphosphonique de P^ environ 190° (déc) ; -10,6° ; /ÔÇ/355 = -43,5° (c = 0,53%

h2°). .

25 L'évaporation du filtrat et la recristallisation à partir de l'eau (5 ml) et de l'éthanol (100 ml) donne un supplément de d'environ 190° (déc) ; /°Ç/q

0,14 g de produit ayant un P^ d'environ 190° (déc) ; -11,2'

^365 = ~43'2° (c = °'51% H20) *

Rendement total : 1,37 g (71%).

30 (e) On absorbe dans 50 ml d'eau 1,2 g (3,5 mMol) d'acide (îr)-i-l-u/ -nitro-homoarginylamino-éthylphosphonique préparé comme ci-dessus, et on ajoute 0,35 g de Pd à 10% sur charbon de bois. On hydrogène le mélange à la température et à la pression ambiantes jusqu'à la fin de l'absorption (environ 5 h). On filtre le mélange pour reti-35 rer le catalyseur et on fait évaporer le filtrat. On absorbe le résidu solide gommeux dans 15 ml d'eau froide puis on filtre la solution et on la traite avec 120 ml d'éthanol pour donner un précipité

16

qu'on laisse reposer apndant 1 h puis qu'on sépare par filtration.

On obtient 0,76 g d'acide (1R)-1-(L-homoarginylamino)-éthylphos-

20

phonique de Pf environ 195° .(déc) ; ~ -11,9° (c = 0,5% H20)

EXEMPLE 7

5 (i) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple 1(B) (ii) , en partant d'une solution de 45 mMol de N-hydroxysuccinmi-dester de 11 acide N-benzyloxycarbonyl-L-«C-aminobutyrique dans 40 ml de diméthylformamide et 4,44 g (40 mMol) d'acide aminométhylphosphonique, mais en utilisant du méthanol:eau dans une propor-10 tion de 4:1 au lieu de 2:1, on obtient 14,1 g du sel de monobenzylamine de l'acide /"(N-benzyloxycarbonyl-L-«Ç-aminobutyryl) aminq/-méthylphosphonique de P^ .185-195° (déc). Après évaporation du filtrat et recristallisation du résidu à partir d'un mélange de 50 ml d'eau et de 50 ml de.méthanol, on obtient un supplément de 1,6.g 15 de produit sous forme d'un précipité blanc cristallin de P^ 205-208° (déc) ; -6,1° ; -21,1° (c = 0,51% CH3C00H) .

(ii) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple 1(B)

(iii), en partant de 15,6 g (env. 36 mMol) du sel de monobenzylamine de l'acide ^(N-benzyloxycarbonyl-L-sÇ-aminobutyryl) amino/-

20 méthylphosphonique préparé comme ci-dessus, on obtient 5,92 g d'un produit brut, P^ 253-255° (déc). La recristallisation à partir d'un mélange de 60 ml d'eau et de 120 ml d'éthanol donne 4,93 g d'acide L~«Ç-aminobutyrylamino)-méthylphosphonique de Pf 263-265° (déc) ; /&l°+ 57,0° ; ^355 + 212° (c = 0,51% H20) .

25 EXEMPLE 8

(i) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple 3(B)

(ii) , en partant de 2,52 g (7 mMol) de N-hydroxysuccinimidester de N-benzyloxycârbonyl-L-norleucine et de 0,78 g (7 mMol) d'acide aminométhylphosphonique, mais en procédant à l'étape d'échange d'ions

30 dans le méthanol/eau à une proportion de 2:1 au lieu de 5:1 et en titrant l'éluat acide directement avec la benzylamine (en omettant 1'évaporation et la trituration avec l'éther suivies à nouveau par une dissolution dans le méthanol/eau), on obtient, après avoir agité avec 100 ml d'acétone, 0,56 g du sel de monobenzylamine de l'a-35 cide /"(N-benzyloxycarbonyl-L-norleucyl) amino/-méthylphosphonique de Pf185-189° déc). Après évaporation du filtrat et trituration avec 50 ml de diéthyléther on obtient un supplément de 1,9 g de

17

de produit,. P^ 170-180° (déc.).

(ii) De manière analogue à ce qui a été décrit dans l'exemple l(B)(iii), en "partant de 2,40 g (environ 5,2 mMol) du sel de monobenzylamine de l'acide /"(H-benzyloxycarbonyl-L-norleucyl) 5 aminq/~méthylphosphonique, préparé comme ci-dessus, et en utilisant les deux récoltes, on obtient 1,04 g de produit brut de Pf 263-266° (déc.). Après recristallisation à partir d'un mélange de 20 ml d'eau et de 120 ml d'éthanol on obtient 0,88 g d'acide L-norleucyl-amino)-méthylphosphonique de Pf 272-274° (déc.) ; 10 + 63,4° ; ^355 +231° (c = 0,5%, H20).

L'exemple suivant illustre une préparation pharmaceutique caractéristique contenant les dérivés peptidiques fournis par l'invention.

EXEMPLE A

15 On peut préparer une formulation parentérale contenant les ingrédients suivants :

Pour 1000 ml

Dérivé peptidique de formule I 50,0 g

Chlorocrésol 1,0 g pQ

Acide acétique glacial 1,2 g

Solution d'hydroxyde de sodium (0,1 N)

q.s. ad pH 4,5

Eau injectable ad 1000 ml

25

18

Claims (1)

1. REVENDICATIONS 1, Composés de formule générale

   .2 „1 0

   f f I!

   . CH CO NH CH P

   OH

   5 H0N—CH CO NH CH P (I)

   2 <a> \0H

   où R*1" représente un atome d'hydrogène, un groupe méthyle ou hydro-xyméthyle ou un groupe mono-, di- ou trihalométhyle, R représente un alcoyle inférieur, un groupe hydroxy-(alcoyle inférieur) ou 10 guanidino-(alcoyle inférieur) autre que le groupe caractérisant d'un acide alpha-aminé du type normalement rencontré dans les protéines ; la configuration à l'atome de carbone désigné comme (a) est (R) lorsque R"*" représente autre chose qu'un atome d'hydrogène et la configuration à l'atome de carbone désigné comme (b) est 15 (L),

   et leurs sels utilisables en pharmacie.

   2„ Dérivés peptidiques tels que revendiqués dans la x 2

   revendication 1, ou R représente un groupe alcoyle inférieiar ou hydroxyalcoyle inférieur autre que le groupe caractérisant d'un 20 acide alpha-aminé du type normalement rencontré dans les protéines»

   3. Dérivés peptidiques selon la revendication 1 ou 2, où R"*" représente un atome d'hydrogène ou le groupe méthyle.

   4. Dérivés peptidiques selon l'une des revendications

   2 ✓

   1 - 3, où R représente un groupe alcoyle inférieur.

   2

   25 5. Dérivés peptidiques selon la revendication 4, où R

   représente le groupe éthyle, n-propyle ou n-butyle.

   6. L'acide (1R)-l-/t-Ccx-Aminobutyryl) amino/-éthylphosphonique et ses.sels utilisables en pharmacie.

   7. L'acide (1R)-l-(L-Norleucylamino)-éthylphosphonique 30 et ses sels utilisables en pharmacie.

   8. L'acide (1R)-l-(L-Norvalylamino)-éthylphosphonique et ses sels utilisables en pharmacie.

   9. L'acide (L-(cc-Aminobutyrylamino) -méthylphosphonique et ses sels utilisables en pharmacie.

   35 10o L'acide (L-Norleucylaitiino) -méthylphosphonique et ses sels utilisables en pharmacie0

   „ 11. L'acide (L-Norvalylamino)-méthylphosphonique et ses sels utilisables en pharmacie.

   19

   12« L'acide (1R)-l-(L-HoiTioarginylaBiino)-éthylphosphonique et ses sels utilisables en pharmacie,,

   13. L'acide (L-Homoarginylamino)-méthylphosphonique et ses sels utilisables en pharmacie»

   14» Composés de formule générale

   R20 R10 O OR3

   5 L 1 'I ^

   r CH CO NH CH P

   R" CH CO NH CH P IV

   (b) (a) \

   ^ OR

   où R3 et R^ représentent chacun un atome d'hydrogène ou un groupe

   5

   protecteur alcoyle inférieur, R représente un groupe amino protégé, R"*"0 a l'une des valeurs accordée à R"1" ci-dessus ou représente

   20

   un groupe hydroxyméthyle protégé, et R a l'une des valeurs accor-dée à R ci-dessus ou représente un groupe hydroxyalcoyle infe-rieur ou guanidino(alcoyle inférieur) correspondant sous forme protégée ; la configuration à l'atome de carbone (a) est

   (R) lorsque R10 représente autre chose qu'un hydrogène et la configuration à l'atome de carbone (b) est (L).

   15. L'acide (1R)-l-/*(N-Benzyloxycarbonyl-L-norvalyl)amino 20 éthylphosphonique.

   16. L'acide (1R)-l~/"(N-Benzyloxycarbonyl-W-nitro~L-homo-arginyl)aminq7-éthylphosphonique.

   17. Dérivés peptidiques selon l'une des revendications 1 à 13 comme agents pharmaceutiques,

   25 18. Dérivés peptidiques selon la revendication 17 comme agents antibactériens ou comme agents renforçant l'activité des antibiotiques.

   19. Procédé de préparation des dérivés peptidiques revendiqués dans la revendication 1, procédé dans lequel on condense 30 un composé de formule générale

   R10 O

   OR

   35

   H0N— CH—P ^ (II)

   (al \ 4

   OR . ^

   où R"*"0 àjl'une des valeurs accordée à R"*" ci-dessûs ou représente un groupe hydroxyméthyle protégé ; R^ et R^ représentent chacun un

   20

   15

   atome d'hydrogène ou un groupe protecteur alcoyle inférieur ; et la configuration à l'atome de carbone (a) est (r) lorsque

   R"'"0 représente autre chose qu'un atome d'hydrogène ;

   avec un acide alpha-aminé protégé de formule--générale

   ,20

   0

   X , ,

   R^— CH C (III)

   (b) \

   OH

   ,5

   5 ^ 20

   où R représente un groupe amino protégé ; r à l'une des valeurs

   10 2

   accordées à R ci-dessus ou représente un groupe hydroxy-(alcoyle inférieur) ou guanidino-(alcoyle inférieur) correspondant sous forme protégée ; et la configuration à l'atome de carbone

   (b) est (L), on sépare le ou les groupe(s) protecteur(s) présente s)

   dans le produit de condensation et, si on le désire, on transforme un composé de formule I obtenu en un sel utilisable en pharmacie.

   20. Préparation pharmaceutique contenant un dérivé peptidique tel que revendiqué dans l'une des revendications 1 à 13,

   ou un sel utilisable en pharmacie de ce corps, ...

   en association avec un support pharmaceutique compatible.

   20

   21. Préparation pharmaceutique contenant un dérivé peptidique tel que revendiqué dans l'une des revendications 1 à 13, ou un sel de corps utilisable en pharmacie, et un antibiotique, en association avec un support pharmaceutique compatible.

   22. Dérivé peptidique tel que revendiqué dans la reven-dication 1, ou sel de ce corps utilisable en pharmacie, lorsqu'ils sont préparés par le procédé revendiqué dans la revendication 19 ou par un équivalent chimique évident de ce procédé.

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   Conseil en Propriété Industrielle

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