UA81403C2 - Peptide capable to bind casein kinase ii (ckii) phosphorylating site and to inhibit phosphorylation and use thereof - Google Patents
Peptide capable to bind casein kinase ii (ckii) phosphorylating site and to inhibit phosphorylation and use thereof Download PDFInfo
- Publication number
- UA81403C2 UA81403C2 UA20040705927A UA20040705927A UA81403C2 UA 81403 C2 UA81403 C2 UA 81403C2 UA 20040705927 A UA20040705927 A UA 20040705927A UA 20040705927 A UA20040705927 A UA 20040705927A UA 81403 C2 UA81403 C2 UA 81403C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- peptides
- cells
- ifn
- site
- phosphorylation
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 91
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 title claims abstract description 35
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 102000052052 Casein Kinase II Human genes 0.000 title abstract description 6
- 108010010919 Casein Kinase II Proteins 0.000 title abstract description 6
- SLPJGDQJLTYWCI-UHFFFAOYSA-N dimethyl-(4,5,6,7-tetrabromo-1h-benzoimidazol-2-yl)-amine Chemical compound BrC1=C(Br)C(Br)=C2NC(N(C)C)=NC2=C1Br SLPJGDQJLTYWCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 6
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 title 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 75
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims abstract description 20
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 18
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 14
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 108050007496 Shikimate kinase 2 Proteins 0.000 claims description 7
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 6
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 5
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 claims description 5
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 claims description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 3
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 3
- 230000003902 lesion Effects 0.000 claims description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 2
- 241000701806 Human papillomavirus Species 0.000 claims 2
- 102000008122 Casein Kinase I Human genes 0.000 claims 1
- 108010049812 Casein Kinase I Proteins 0.000 claims 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 abstract description 6
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 abstract description 6
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 230000003993 interaction Effects 0.000 abstract description 5
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 abstract description 2
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 abstract description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 abstract description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 abstract description 2
- 241000341655 Human papillomavirus type 16 Species 0.000 abstract 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 abstract 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 40
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 11
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 7
- 108091008819 oncoproteins Proteins 0.000 description 7
- 102000027450 oncoproteins Human genes 0.000 description 7
- 230000004044 response Effects 0.000 description 7
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 6
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 108010051109 Cell-Penetrating Peptides Proteins 0.000 description 4
- 102000020313 Cell-Penetrating Peptides Human genes 0.000 description 4
- 101100042793 Gallus gallus SMC2 gene Proteins 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 3
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 102000005403 Casein Kinases Human genes 0.000 description 2
- 108010031425 Casein Kinases Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 2
- 206010041067 Small cell lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 2
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 244000309466 calf Species 0.000 description 2
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000010468 interferon response Effects 0.000 description 2
- 208000020082 intraepithelial neoplasia Diseases 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 208000000587 small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 2
- 230000006490 viral transcription Effects 0.000 description 2
- ZFGXZJKLOFCECI-UHFFFAOYSA-N 4-[[4-(4-chlorophenyl)-2-thiazolyl]amino]phenol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1NC1=NC(C=2C=CC(Cl)=CC=2)=CS1 ZFGXZJKLOFCECI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003625 Acrocomia mexicana Nutrition 0.000 description 1
- 244000202285 Acrocomia mexicana Species 0.000 description 1
- 244000005894 Albizia lebbeck Species 0.000 description 1
- 206010059313 Anogenital warts Diseases 0.000 description 1
- 241000269350 Anura Species 0.000 description 1
- 208000031404 Chromosome Aberrations Diseases 0.000 description 1
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 description 1
- 101150013359 E7 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000868422 Homo sapiens Sushi, nidogen and EGF-like domain-containing protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 1
- 101710128836 Large T antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- 206010064912 Malignant transformation Diseases 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 101000726081 Mus musculus Cysteine-rich secretory protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 241001233384 Negha Species 0.000 description 1
- 206010061309 Neoplasm progression Diseases 0.000 description 1
- 244000004005 Nypa fruticans Species 0.000 description 1
- 235000005305 Nypa fruticans Nutrition 0.000 description 1
- 241000468053 Obodhiang virus Species 0.000 description 1
- 241000283965 Ochotona princeps Species 0.000 description 1
- 241000425481 Ocys Species 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 241000514450 Podocarpus latifolius Species 0.000 description 1
- 206010038707 Respiratory papilloma Diseases 0.000 description 1
- 201000000582 Retinoblastoma Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100032853 Sushi, nidogen and EGF-like domain-containing protein 1 Human genes 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 102000044209 Tumor Suppressor Genes Human genes 0.000 description 1
- 108700025716 Tumor Suppressor Genes Proteins 0.000 description 1
- 108010049024 Viral Oncogene Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 101001076308 Xenopus laevis Insulin-like growth factor III Proteins 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 231100000005 chromosome aberration Toxicity 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 1
- 231100000276 dose-dependent cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 description 1
- 230000036212 malign transformation Effects 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100001222 nononcogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 108010043655 penetratin Proteins 0.000 description 1
- MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N penetratin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 108091005981 phosphorylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 229940021993 prophylactic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003014 reinforcing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000754 repressing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000003153 stable transfection Methods 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 108010062760 transportan Proteins 0.000 description 1
- PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N transportan Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CN)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N 0.000 description 1
- 230000005751 tumor progression Effects 0.000 description 1
- 210000002229 urogenital system Anatomy 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
- A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/10—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a tag for extracellular membrane crossing, e.g. TAT or VP22
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
- C12N2710/00011—Details
- C12N2710/20011—Papillomaviridae
- C12N2710/20032—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Virology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
Даний винахід відноситься до галузі молекулярної фармакології, і, зокрема до отримання пептидів, придатних для обробки епітеліальних пухлин, і в основному пухлин, асоційованих з онкогенними типами НРУ.
Головна мета даного винаходу полягає в ідентифікації пептидів, структура яких дозволяє блокувати фосфорилювальний домен казеїнкінази (СКІЇ) внаслідок прямої взаємодії з такою ділянкою. У даному винаході представлено одинадцять циклічних пептидів з різними амінокислотними послідовностями, які інгібують іп міо
СКІІ-фосфорилювання, виявляють цитотоксичність відносно трансформованих НРУ-16 клітин (Сазкі) і, крім того, підвищують чутливість цих клітин до цитостатичної дії інтерферону (ІФН). Крім того, даний винахід відноситься до застосування вказаних пептидів, кон'юЮгованих або злитих з іншими пептидами і хімічними сполуками, які проникають в клітини, а також до застосування і пептидів і хімічних молекул-міметиків.
Даний винахід відноситься до галузі молекулярної фармакології і, зокрема до отримання пептидів, що використовуються для лікування асоційованих з НРМ епітеліальних пухлин, оскільки вони дозволяють блокувати фосфорилювальний домен казеїнкінази ІІ (СКІЇ) шляхом прямої їх взаємодії з такою ділянкою.
СКІЇ являє собою треонін/'сериновий фермент, що бере участь в клітинній проліферації, і в процесі малігнізації він локалізований всередині клітини, головним чином, в ядрі (Тауміс 5., Ми 5., Мапд Н., Рацві В.,
Ваміз А., Аптеа К., 2001, Нігіо!. Нізіораїйної. 16:573-5821.
На основі існуючих даних про високі рівні СКІ! в різних епітеліальних солідних пухлинах було висловлене припущення, що фосфорилювання, яке викликається цим ферментом, є істотною ознакою злоякісної трансформації і маркером пухлинної прогресії (Зеїдіп О.С., І едег Р., 1995, 5сієпсе 267:894-897)| (Рашзі В.А.,
Сарапу М., Тіівіапі Р., ОЮОамі5 А., Адате5 с1., Антей К., 1996, Сапсег І ецЦеге 101:31-35|. З іншого боку, надекспресія СКІЇ у трансгенних мишей приводить до утворення пухлин в молочних залозах через збільшення шляхів передачі М/пі//бета-катенінових сигналів в епітеліальних клітинах цих молочних залоз | ападєзтап-
Воїїад Е., Вотіеп-Моцге ВА., опо О.Н., бопепеПеїп С.Е., Сагай в.О., Звїідіп О.С., 2001, Опсодепе 20:3247- 3257).
Серед епітеліальних пухлин ті, які виникають внаслідок НРУ, становлять більшу частину. Наприклад, більшість пухлин сечостатевої системи асоціюється з діяльністю цих онковірусів, і наявність ДНК- послідовностей НРМ виявляється в 99,795 даних пухлин, що виникають з сквамозних клітин шийки матки (МаІрсогтегз У.М., дасор5 М.М., Мапоз ММ., Возсп Р.Х., Кигптег 9У.А., пап К.М., Зпі)деге Р.)., Рей .., Меї|ег б.)., Мипог М., 1999, 9. Раїпої. 189:12-19). ВООЗ також повідомляє про 500000 пацієнтів у всьому світі, що захворюють щорічно на злоякісну пухлину шийки матки ГРаїкіп О.М., І аага Е., Миїг С.5., 1980, Іпі. У. Сапсег 41:184, 19721. На Кубі через цю хворобу щорічно вмирає 370 жінок з діагнозом злоякісна пухлина шийки матки
ІОгоапігайоп Рапатегісапа де Іа Заїца, 1999, Вазіс Сошпігу Неайкй Ргойез юг пе Атегісав, Куба, 206-219).
У залежності від того, чи розвивається малігнізація чи ні, НРМ ділять на онкогенні і неонкогенні папіломавіруси (ГГ огіпс: А. Т., Тетріє Са.РЕ., Кипптап В.)., депзоп А.В., І апсазієг М.О., 1987, 9. Май). Сапсег Іпві. 79:671-677|. НРУ-16 і НРУ-18 асоційовані з інтраепітеліальною неоплазією, яка в більшості випадків малігнізує, але крім того, обидва типи НРУ асоційовані більш ніж з 9095 дисплазій і карциномами шийки матки (Рціпада
У., зпітада М., Оказама К., Рикигпіта М., Каїо І., Еціпада К., 1991 9. деп. Міго!. 72:1039-1044).
Оскільки терапевтична або профілактична вакцина все ще недоступна для радикального лікування (видалення) НРУ-асоційованих злоякісних пухлин, використання інгібіторів вірусної транскрипції і вірусних онкогенних білків стає більш привабливим. Біомодулятори, подібні до ІЕМ, використовують з певною ефективністю відносно деяких НРУ-асоційованих захворювань, подібних до кондиломи, підошовних бородавок і респіраторних папіломатозів (Коготіїаз А.Е., 1 Її 5., Майавзпемекі сх., 2001, Суїюкіпе й СгоуМп Расіог Немівжв 12:157-170)|. В попередніх експериментах з НРМ-трансформованими клітинами (Не а) нами показано, що тривале їх витримування з альфа-ІФН повертає їх до початкового фенотипу і супроводжується інгібуванням експресії МРНК НРУ в цих клітинах | оре2-Осеєїйо О., Регеа 5.Е., Неуєз А., Мідоа Г.., І оре2-Зацга Р., 1993. 9. ІЕМ
Вев 13:369-375|. На цій же клітинній моделі нами встановлено, що альфа-ІФН модулює МРНК НРУ шляхом репресії ендогенної вірусної транскрипції (Регеа 5.Е., І оре2-Осеєїйо О., Сагсіа-Міїап В., Агапа М.9., 1995, 9. ІЕМ а Суюкіпе Вез. 15:495-5011. Відповідно до даних результатів, отриманих на клітинних лініях, в попередньому експериментальному дослідженні пацієнтів, що страждають злоякісною пухлиною шийки матки, ми спостерігали, що обробка за допомогою альфа-ІФН модулює експресію мРНК (Сагсіа-Міїап В., Віоз М.А., Оіах
О., б5імейа М., Сийаг О., Атідо М., Агапа М.)., Регеа 5.Е., 1996, 9. ІЕМ апа СуюкКіпе Нез. 16:709-713).
Незважаючи на багатообіцяючі дані з використання ІФН як регулятора експресії МРНК НРУ, встановлені дані свідчать про варіабельність ІФН-відповіді і про феномен резистентності до даного цитокіну, який в клінічних випробуваннях складає у пацієнтів 40-5095 |(Агапу І., Туппд 5.К., Згапієу М.А., Тотаї М.А., МіПег В.С., Зтійп
М.Н., МеОегтоїй 0.., Зіаде Н.В., 1999, Апіїміга! Рез. 43:55-631. Деякі молекулярні і клінічні факти свідчать про те, що онкогенний білок Е7 грає ключову роль в феномені ІФН-резистентності. Наприклад, повідомлялося, що
Е7 зв'язується з індукованим ІФН фактором транскрипції (р48), викликаючи тим самим ІФН-відповідь внаслідок блокування активації транскрипції (Вагттага Р. апа МеМіМйап М.А.У., 1999, Мігоюду 259:305-313|. Крім того, повідомляється також про зміну в присутності Е7 регуляторного ІФН-чинника (ІВЕ-1) Рак .5., Кіт Е.)., Кпожм/
Н.у., Ниапд Е.5., Маткоопод 5.Е., Огп 5.9., 2000, 9. Віоії. Спет. 275:6764-6769) (Регеа 5.Е., Маззіті Р., Вапке Г., 2000, 9. Мої. Меа. 5:661-666). За результатами клінічних випробувань вважають, що відповідь на ІФН залежить від експресії Е7 в НРУ-вмісних осередках ураження (Егагег І.Н., МеМіМйап М.А.У., 1997, РарйШотаї(овів апа сопауюта аситіпаїе. Сіїпіса! Арріїсайопе ої (пе іпіепегопе (А. Зіщаїй Наїтіз апа А.О. Реппу, єадвз. ) Рр 79-90.
Спартап апа Наї! Меаісаї, І опдоп)|. Онкогенний білок Е7 грає істотну роль в малігнізації що викликається даними онкогенними вірусами. Так, було показано, що індукована Е7 іморталізація первинних клітин приводить до мутацій і хромосомної аберації після початку процесу іморталізації Моцдіп С,Нитреу 0., Сау С,
ВівїптиПег О., 2000, У. Супесої. Орвівї Віо! Нергод. 29:13-20)|. З іншого боку, нами показано, що стабільна трансфекція за допомогою гена Е7 приводить до створення в чутливих пухлинних клітинах феномену ІФН- резистентності |Мого А., Саїїхю А., Зцаге? Е., Агапа М./)., Регєа 5.Е., 1998, Віосп. Віорпув. Не5. Сотт. 245:752- 756). Повідомляється також, що онкогенний білок Е7 зв'язує і блокує функцію пухлинних супресорних генів, подібних до генів ретинобластоми ((АБ) і інсулінподібного фактора росту 3, зв'язуючому білок (ІСЕВР-3),
відповідно, через Суз 24 і С-кінцевий домен (Меміпв 9.В., 1992, Зсіепсе 258:424-429) (ЛмегесКе М/. апа дапзеп- ит Р., 2000, Адмапсез іп сапсег Нев. 78:1-29). Аналогічно до цього показано, що пари бег31/5е132 в білці Е7 є субстратом для ферменту СКІ! (Назніда Т., Мазитоїйю 5., 1990, Віоспет. Віорпуз. Не5. Сотт., 172:958-964| і що цей домен істотний для трансформуючої здатності даного онкогенного білка (Вагроза М.5., Едтопаз С,
Еівнег С, ЗесПпіПег 9У.Т., ому О.А., Моизаєп К., 1990, ЕМВО 9. 9:153-160) |(Спієп МУ.-М., РаїКег 9.М., Зсптіаї-
Сиіттіпдег О0.-С, Вгокег Т.А., Спом І.Т., 2000, Сеїї Стоумй 4 Оінегепіайоп 11:425-435І|, а також для інгібування сигнального каскаду ІФН (|Регєа 5.Е., І оре2-Осеє|о О., Сагсіа МіПап В., Вапкз Г.., Агапа М.., 1996, Ешг. Суюкіпе
Меї. 7:503|.
Виходячи з ролі фосфорилювального сайту СКІ! для резистентності НРМ до ІФН і розвитку злоякісної пухлини, можна вважати, що розробка лікарських засобів, що блокують такий домен, могла б стати корисною в терапії злоякісних пухлин. Молекули, що інгібують СКП-фосфорилювальну ділянку в Е7 або в інших клітинних субстратах, досі не описані.
Відносно онкогенного білка Е7, описані лише пептиди, що блокують Нр-зв'язуючий сайт (Суз24) |Мервіег
К.В., Коїетап К.С, 1997, О0556250311 (ОЇ А.І., Вієтеп М.МУ., ЕРО412762 Аг 9102131 і інші С-кінцеві ділянки (39-98) |Рідаєг 9.-0., 2АмегзсНКіє МУ, 2000, ЕРО96990131.
У клінічних або в доклінічних випробуваннях до теперішнього часу описані декілька вакцин-кандидатів, які представляють інтерес для створення СТІ -відповіді, специфічної у відношенні Е7 НРМ |Снеп С, УМапд С.С.,
Нипа С, Рагаоії! О.М., УУи Т., 2000, Массіпе 18:2015-20221 |Спеп С.Н., щі Н., Зип КМУ., Спої! М.А., Рагаої! О.М.,
Ми Т.б., 1999, СЧепе Тнег. 12:1972-1981). Однак спроби, зосереджені на отриманні СТХ-відповіді, зустрічають різні ускладнення, пов'язані з біологією НРУ. Наприклад, онкогенні типи НРМ придушують антигенні МНС класу І, які істотні для СТІ -відповіді (Соппог М.Е., біегп Р.І., 1990, Іпі. У. Сапсег 46:1029-1034|. Крім того, експресія Е7 асоціюється з локальною імуносупресією в оточенні даної злоякісної пухлини, і це могло б також впливати на відповідний вияв СТІ -відповіді (Ге Виапес Н., С'Аппа В., І аспдаг А., 2адигу 9.Р., Вегага .., ІШеїє
О., а'Аіезвіо Р., Найел 5., Сіаппоції С, Вигпу А., Віггіпі В., СаПо ВА.С., 7адигу 0., 1999, Віотед. Рнагтасоїнег. 53:424-431) (І єе 5.9., Спо У.5., ЗПіт У.Н., І єе К.А., Ко К.К., Споє У.К., Раїк 5.М., Нозпіпо Т., Кігп 5., Оіпагенйо
С.А., Мооп Б... 2001, 9. Іттипої. 167:497-504Ї1. Відповідно до вищезгаданих міркувань, очевидно, що об'єднання СТІ -вакцин і фармацевтичних препаратів, направлених на Е7, могло б мати великі перспективи.
Крім того, даний підхід до отримання превентивних НРМ-вакцин приносить велику користь, а ціновий ризик зумовлений різними біологічними і соціальними аспектами, включаючи: 1) тривалий латентний період після первинної інфекції НРУ, 2) слабке розуміння механізму НРУ-інфекції, 3) відсутність тваринної моделі для відповідного розмноження НРУ, 4) видову специфічність і 5) оцінку соціального впливу превентивної НРУ- вакцини, яка може прийматися дуже довго. Тому використання фармацевтичних препаратів, специфічно направлених на вірусні онкогенні білки, могло б створити переваги перед підходами, зосередженими на управлінні імунною системою.
Суть і новизна даного винаходу основані на описі вперше циклічних пептидів, що дозволяють прямо інгібувати фосфорилювальну ділянку СКП, а також цитотоксично впливати іп мімо на клітини карциноми шийки матки НРУ-16. Крім того, дані пептиди підвищують чутливість вказаних клітин до цитостатичної дії!ФнН.
Даний винахід відноситься головним чином до пептидів, здатних зв'язувати фосфорилювальну ділянку
СКІЇ, в якій виявлені наступні послідовності: (а) СМАОСРМОКС (Ід. ес. Мо. І) (б) С55СОМОРАЇ С (Ід. ес. Мо. 2) (с) СОІРОВТАТНАС (Ід. бес. Мо. 3) (4) САКОВТОРИМС (Ід. бес. Мо. 4) (є) СММ5ОРАНІ СТ (Ід. ес. Мо. 5) (0 САМСТМІОЄЕ5С (Ід. Зес. Мо. 6) (4) СНМІАаТМОСС (Ід. Зес. Мо. 7) (п) СРІ МБІ АСНЗС (Ід. ес. Мо. 8) () СКОБУ. ННІ С (Ід. ес. Мо. 9) () СЕОРІТРІ САС (Ід. бес. Мо. 10) (Ю) СОБМНЕ ГО5 (Ід. Зес. Мо. 11)
Даний винахід включає в себе також будь-який гомологічний варіант або міметик з вищезгаданих пептидів, які отримують шляхом синтезу або рекомбінантним способом, а також будь-який злитий пептид, що містить пептиди, описані в приведеному списку. Будь-який пептид, структура якого дозволяє блокувати фосфорилювальну ділянку СКІ! для відповідного субстрату, вважається гомологічним варіантом. Крім того, будь-яку хімічну молекулу (не пептидну), структура якої дозволяє блокувати таку фосфорилювальну ділянку, вважають варіантом міметика.
Інша мета даного винаходу полягає в створенні фармацевтичної композиції, яка включає в себе один або декілька пептидів, описаних в даному винаході, а також відповідний носій.
Крім того, даний винахід включає в себе застосування вищезгаданих пептидів окремо або в поєднанні з будь-якою іншою відповідною молекулою, такою як цитокіни і інтерферони для 1) інгібування проліферації пухлинних клітин, 2) обробки НРУ-асоційованої і не асоційованої злоякісної пухлини і 3) обробки НРУ- асоційованих осередків ураження на передпухлинних стадіях.
Крім того, пептиди згідно з винаходом можна було 6 використати для лікування НРУ-інфікованих пацієнтів, не чутливих до лікування інтерфероном.
В іншому відношенні даний винахід включає в себе певний експресуючий вектор для клітин ссавця, що містить ДНК-послідовність, яка кодує будь-який з вищезгаданих пептидів.
Пептиди згідно з винаходом володіють циклічною структурою і в основному характеризуються здатністю зв'язувати фосфорилювальну ділянку СКІЇ і анулювати таку біохімічну подію. Дані пептиди описані в прикладеному списку. З іншого боку, показані також ефекти іп мімо, що здійснюються пептидами на НРУ- трансформовані клітини.
Описані пептиди характеризують їх здатністю інгібувати фосфорилювання послідовності ВАВЕЕЕТЕЕЕ, раніше описаної як оптимальний консенсусний домен для СКІІ-фосфорилювання (Рготеда СаїУ5661), і ділянки фосфорилювання, що знаходиться в ділянці 28-38 онкогенного білка Е7 НРУ-16.
Щоб охарактеризувати пептиди, описані в даному винаході, сконструювали єдину бібліотеку 11- амінокислотого циклічного пептиду, яка експресується в Рад-ділянці ниткоподібних фагів. Скринінг даної бібліотеки здійснюють з використанням синтетичної 28-38-ділянки Е7 як мішені, якою також кон'югують з біотином для її фіксації на твердій поверхні. Селекцію фагів, що зв'язалися з 28-38-ділянкою Е7, здійснюють шляхом імунодетекції з використанням специфічного антитіла до Рев-ділянки в даному фагу. У кінцевому результаті, ДНК, відповідну відібраним одинадцяти фагам з високою здатністю зв'язування з 2 8-3 8-ділянкою
Е7, секвенують, і відповідні пептиди хімічно синтезують твердофазним методом. Потім отримані синтетичні пептиди виділяють, піддаючи очищенню з допомогою ВЕРХ, аналізують за допомогою мас-спектрометрії, і, нарешті, оцінюють отриману іп міїго- і іп мімо-ефективність.
Згідно з даним винаходом, незважаючи на відмінність амінокислотних послідовностей описаних тут циклічних пептидів, вони однаково інгібують СКІІ-фосфорилювання. Даний факт означає, що взаємодія цих пептидів з фосфорилювальною ділянкою СКП визначається переважно їх структурою, а не самою послідовністю.
У даному винаході також показано, що лінійні пептиди виявляють більш низьку здатність до інгібування фосфорилювальної ділянки СКП. Даний факт посилює значення структури для зв'язувальної здатності пептидів, що розглядаються, з таким доменом. Крім того, даний факт передбачає ефективність інших міметичних молекул, які зв'язуються з фосфорилювальною ділянкою СКІЇ.
Для того щоб досягти здійснення внутрішньоклітинної дії СК)! на ендогенні субстрати, описані пептиди можна хімічно кон'югувати або генетично виростити з проникаючими в клітину пептидами, що відносяться до білків, подібних, в числі інших, до Таї 1 вірусу імунодефіциту людини (ВІЛ-1) |Зспмагге 5.В., Юомау 5.Р., 2000,
Тгтепав Ріпаптасої. 21:45-48), транскрипційного фактора, що кодується геном Огозорніїа Апіепаредіа (Оегозві
О., і співавт., 1996, .). Віої. Спет. 271:18188-18193), білка МР22 вірусу простого герпесу (НЗМ) | Іпддгееп М,, і співавт., 2000, Тгепаз Рпаптасої. сі. 21:99-103), пенетратину (репеїгайп) і транспортану (гапзропап) |(Саперу у., Кажатига К., 2001, Тгтепав Віоїесн. 19:21-28). Для перевірки іп мімо гіпотези даного винаходу дані циклічні пептиди синтетично зливали з проникаючим в клітину пептидом, приведеним для білка Таї 1 ВІЛ-1 (4АККАРОВАВРРОС), і з пептидом для локалізованого в ядрі сигналу, що належить великому антигену Т (КККАКМЕ) 5Х40.
Представлені в даному винаході дані ясно свідчать про те, що циклічні пептиди виявляють дозозалежну цитотоксичність відносно трансформованих НРМУ-16 (СазбкКі) клітин карциноми шийки матки. Ці результати передбачають використання даних пептидів як терапевтичного засобу для обробки злоякісних пухлин одного і того ж гістологічного походження, а також передпухлинних стадій інтраєепітеліальної неоплазії шийки матки.
Крім того, експериментальні дані іп мімо свідчать, що циклічні пептиди виявляються більш ефективними, ніж їх відповідна лінійна форма, підкріплюючи тим самим положення про істотне значення структури пептидів для їх дії.
Крім того, циклічні пептиди, описані в даному винаході, ефективні відносно клітин НеГа, що містять НРУ- 18, а також відносно клітин Н-82, отриманих з клітин недрібноклітинного раку легеня, негативних по НРУ. Ці результати корелюють з результатами, отриманими іп міо в даному винаході і свідчать про те, що пептиди блокують не тільки ділянку СКП, що фосфорилює Е7 НРУ-16, але вони блокують його також і в інших білках, що містять таку ділянку. Той факт, що описані тут пептиди ефективні відносно НРМУ-негативних пухлинних клітин, є аргументом на користь їх можливого використання для інших епітеліальних пухлин. Інші результати даного винаходу свідчать про те, що обробка клітин Сазкі описаними тут циклічними пептидами підвищує чутливість клітин до цитостатичної дії альфа-ІФН. З урахуванням попередніх доказів, що свідчать про те, що ділянка СКІЇ, яка фосфорилює Е7 НРУ-16, необхідна для блокування сигнального каскаду ІФН (|Регєа 5.Е.,
Іоре2-Осе|о О., Сагсіа МіМап В., Вапке І., Агапа М.)., 1996, Еиг. СуюКіпе Меї. 7:503|, описані тут пептиди можна використати, щоб компенсувати звичайну ІФН-резистентність, яка спостерігається при НРУ-інфекдії.
Даний винахід можна віднести також до ДНК, що кодує кожний з описаних тут пептидів. Дану ДНК можна вводити в- експресуючий вектор ссавця і потім трансфікувати і в трансформовані НРУ-16 клітини і в нетрансформовані клітини. Даний вектор, що містить олігонуклеотид, який кодує кожний пептид, можна також використати як альтернативу генній терапії НРУ-асоційованої злоякісної пухлини.
У принципі, описані тут пептиди можна використати при НРУ-асоційованих захворюваннях разом з іншими агентами, а також з терапевтичними вакцинами, створеними на основі клітинної відповіді проти НРУ.
Даний винахід ілюструється нижченаведеними прикладами:
Приклад 1: Вплив пептидів на фосфорилювальну ділянку СКІЇ!: Даний аналіз оснований на іп міо реакції фосфорилювання з використанням субстратно!" послідовності ААВЕЕЕТЕЕЕ, яка являє собою оптимізований консенсусний домен СКІІ-фосфорилювання. Дану реакцію здійснюють в 50мкл 25мМ рН 7,5 Тріс:НСІ, ТмкКі 32гр-УАТФ, 100мкМ АТФ, 2мг/мл субстратного пептиду, 0,2М Масі, 10мМ МосІі і 1 одиниці ферменту СКІЇ (Рготеда). Реакцію інкубують при 37"С протягом 10 хвилин. Потім на хроматографічний папір РЕ-81 (УУпайтапп) наносять 5мкл реакційної суміші у вигляді плями і здійснюють чотири промивання за допомогою 10ММ НзРОх. На закінчення, вимірюють пов'язану з фільтрами радіоактивність, і по рівнях срт визначають ферментативну активність СКІИЇ в кожному зразку. Одночасно в кожний аналіз як внутрішній контроль включають специфічний інгібітор СКІІ, подібний до гепарину. Представлені на Фігурі 1 дані показують, що циклічні пептиди інгібують СКіІ-фосфорилювання на 8095. Лінійні пептиди також інгібують СКІ!І- фосфорилювання ділянки 28-38 в Е7, хоч і в меншій мірі в порівнянні з циклічною формою. Ці дані вказують, що описані тут пептиди інгібують фосфорилювальну ділянку СКІЇ! і дають підставу вважати, що їх структура грає істотну роль в їх взаємодії з послідовностями-мішенями.
Приклад 2: Вплив пептидів на фосфорилювання Е7 НРУ-16: Даний аналіз оснований на іп міо реакції фосфорилювання онкогенного білка Е7 НРУ-16, який експресується в Е.соїї у вигляді злитого білка з глутатіон-
5-трансферазою (251тТ). Перед проведенням ферментативної реакції злитий білок Е7-25Т виділяють шляхом очищення за допомогою хроматографії по спорідненості з використанням гранул глутатіон-сефарози (Рпагтасіа). Дану реакцію здійснюють в 50мкл 25мМ рн 7,5 Тріс:НСІ-буфера, 1 мкКі З2Р-УАТФ, 100мкМ АТФ, 40 мкл вказаних гранул, що містить Е7-С25Т, 0,2М Масі, 10мМ МаСс!І і 1 одиниці СКІЇ (Рготеда). Вказану реакційну суміш інкубують при 37"С протягом 40хв. Після чого гранули промивають три рази за допомогою 0,5мл буфера, і в кінцевому результаті рівень фосфорилювання Е7-245Т аналізують за допомогою 1095-го 505-
ПААГ-електрофорезу. Візуалізацію фосфорильованих білків здійснюють шляхом вияву рентгенівської плівки, експонованої раніше з висушеними гелями. Кількість фосфорильованого білка Е7 визначають денситометруванням. Дані на Фігурі 2 вказують, що описані тут пептиди однаково ефективні в межах інгібування ділянки СКІЇ, яка фосфорилює Е7 НРУ-16.
Приклад 3: Вплив пептидів на проліферацію клітин, трансформованих НРУ-16 і НРУ-18 (відповідно. Сазкі і НегГа):
У даному аналізі клітини Сабкі або Неї а в концентрації 2х107 клітин/мл висівають в 96-ямкові планшети (Совіаї) з використанням ОМЕМ з доданням 1095 навколоплідної сироватки теляти (ЕС5) ((зірсо). Через 24 години в культуральне середовище вносять пептиди в дозах, що варіюють між 15мкМ і 500мкМ. Інкубацію здійснюють протягом 96 годин в 595 СО», після чого в кожну ямку підливають по 20мкл розчину МТ5 (1,90мг/мл) (Рготеда). Планшети послідовно витримують протягом однієї години в одних і тих же інкубаційних умовах, і на закінчення розраховують поглинання при 490нм. Результати виражають у вигляді процента зростання відносно контролю без пептидів. З цією метою і циклічні, і лінійні пептиди зливають шляхом хімічного синтезу з проникаючим в клітину пептидом Таї-І ВІЛ-1, який здатний проникати в цитоплазму і ядро
Зспмагге 5.8., Юожау 5.Б., 2000, Тгтепа5 РІаптасої. 21:45-48). Отримані в даному експерименті дані показують, що описані тут пептиди надають залежний від дози ефект і на клітини Сабкі (НРУ-16) і на клітини
Нега (НРУ-18) (Фігури ЗА і 3В). Даний приклад показує, що пептиди згідно з винаходом ефективні не тільки у відношенні НРУ-16, але також і у відношенні НРУ-18.
Приклад 4: Вплив пептидів на проліферацію НРУ-негативних пухлинних клітин:
У даному аналізі клітини Н-82 (дрібноклітинний рак легеня) в концентрації 2х10" клітин/мл висівають в 96- ямкові планшети (Совіаг) з використанням ОМЕМ з доданням 1095 навколоплідної сироватки теляти (Ссірсо).
Через 24 години в дане культуральне середовище вносять пептиди в дозах, що варіюють між 15мкМ і 500мкМ.
Інкубацію здійснюють протягом 96 годин в 595 СО», після чого в кожну ямку підливають 20мкл розчину МТ5 (1,90мг/мл) (Рготеда). Планшети послідовно витримують протягом однієї години в одних і тих же інкубаційних умовах, і на закінчення розраховують поглинання при 490нм. Результати виражають у вигляді процента зростання відносно контролю без пептидів. У даному аналізі описані в даному винаході циклічні пептиди, злиті з проникаючим в клітину пептидом Таї-1 ВІЛ-1, використовують, як вказано вище. Отримані в даному експерименті результати показують, що пептиди згідно з винаходом надають залежний від дози ефект на проліферацію клітин Н-82. На фігурі 4 показано, що пептиди згідно з винаходом ефективні не тільки відносно
НРУ-трансформованих клітин, але також і відносно пухлинних клітин іншої локалізації і гістологічних типів, подібних до дрібноклітинного раку легеня.
Приклад 5: Вплив пептидів на НРУ-16-відповідь на обробку ІФН в клітинах Сазкі:
У даному аналізі клітини СабКі висівають в концентрації 2х107 клітин/мл в 96-ямкові планшети (Совіаїг) з використанням ОМЕМ з доданням 1095 ЕС5 ((3ірсо). Через 24 години в дане культуральне середовище вносять 120мкМ кожного пептиду. Через двадцять чотири години додають ІФН в кількості між 1000 і 31,5Од/мл. Інкубацію здійснюють протягом 96 годин в 595 СО», після чого підливають 20мкл МТ5, 1,90мг/мл.
Крім того, планшети витримують протягом однієї години в одних і тих же умовах, і на закінчення зчитують поглинання при 49О0нм. Дані представлені у вигляді процента зростання відносно контролю. У даних експериментах описані в даному винаході пептиди використовують в їх циклічному варіанті, злитими з проникаючим в клітину пептидом, що належить Таї-1-білку ВІЛ, як указано вище. Представлені на Фігурі 5 результати показують, що попередня інкубація клітин Саєкі з описаними в даному винаході пептидами, робить ці клітини чутливими до антипроліферативного впливу альфа-ІФн. Ці дані дають підставу вважати, що описані в даному винаході пептиди корисні; для лікування НРУ-інфікованих пацієнтів, стійких до ІФН-терапії.
Приклад 6: Протипухлинна дія пептиду, який інгібує СКІІ-фосфорилювання в людських пухлинах, імплантованих моделям голих мишей:
У цих експериментах використовують 6-8--ижневих самиць голих мишей ВаїЇБС. Імплантацію злоякісної пухлини здійснюють з використанням клітин Н-125 (недрібноклітинний рак легеня) в концентрації 1000000 клітин/мл, які ресуспендують в сольовому розчині (РВ5). Клітинну суспензію інокулюють підшкірно в черево.
Введення пептиду (послідовність 1 в приведеному списку) здійснюють разом з даними клітинами і продовжують здійснювати через день до завершення одномісячної обробки. У даному аналізі дози варіюють між 1 ї 1Омг/кг маси тіла. Для дослідження протипухлинної дії послідовно міняють параметри. Ці дані демонструють протипухлинну ефективність пептиду, якій інгібує СКИ-фосфорилювання в моделі злоякісної пухлини людини, імплантованій піддослідним тваринам.
Переваги даного винаходу: 1. Створені фармацевтичні засоби з широким спектром застосування, які не тільки використовують при
НРУ-асоційованих захворюваннях, але також і при солідних пухлинах з високим рівнем ендогенної активності
СКП. 2. Той факт, що 28-38-ділянка консервативна у НРУ, дає можливість використати даний фармацевтичний засіб при захворюваннях, асоційованих з різними НРМ-типами. 3. Пептиди у вигляді терапевтичних молекул виявляють низьку антигенність при введенні людині. 4. Терапевтичний засіб, що розглядається, є легким у виготовленні.
Короткий опис фігур:
Фігура 1: Вплив пептидів на СКП-фосфорилювання.
Фігура 2: Вплив пептидів на НРУЕ7-СК11-фосфорилювання.
Фігура ЗА: Вплив пептидів на проліферацію Сазкі-клітин.
Фігура ЗВ: Вплив пептидів на проліферацію Неї а-клітин.
Фігура 4: Вплив пептидів на проліферацію клітин пухлини легеня.
Фігура 5: Вплив пептидів на відповідь НРУ-1б6-трансформованих клітин до дії ІФН.
СІИСОК ПОСлЛІДОВНОСТВИЙ «ро» Цевтр ен пуженерії і брехуни «РК» Гучпяли дах лжукання раду, зоопійпазного ло пиділомавіруєсь 3 подо Її поних епітехіючисх пуахан «3305 Пеосліловиоеті арх «вх ів «у рмепой мех. З «зн «Ма «М» РКК ях» Сивуєтимо послідовийсть «ак ку» клок сичуачиеко прслиюююєт: еитид і «ак «КУ КЕРОЕ «УМ «1 і
Сус Хек Уві Ага ФМ іх го хан ух Су
Н 5 т хну» 2 «дух «зі вит
МИ сСянустична посліДОВСТЬ. «Мк» «ДУУХ Єпяс снятетичій поспідонності: цептих У ко «дз ВЕР лок «мм пий хау букбеє бе рук дов бек со Ак ем Сук 1 5 їх «Ах У «зе ха» РЕ «213» Синтетячна послідовність «ай хай» Опис синтетичної послідовності: пептид З «ЯМ «21» РЕРТІОЕ
Се ТО кВ З
Сув Сів Ме Рто іп Ат ТЬг Аза ту Ах ух 1 У І «На ен «лій» РТ «щ13» Сивтетичий пеолідаввіть «а» их Оп сиятетичної послідовнисті: всятнА Я «ад «од ВЕР Е кадаг .) ка
Су Аза Кук сив Мякі Ар виго 33 Гук Сув 1 5 ій кох «іх «МІУРВТ «2132 Сичтотична касліловність «ах
Та е Оцис сивину пословності: цента Х «ВМ «З» РЕВЕ «ев «фю .
Сує Тур Ме Бех Рго духа Ні Боб 03 Те ух і 5 10 «Нв «и и
АРК
«дух Сянтетичня послідовність
«ах ха3» Опис синтегичної послідовиюсті: пентнд б каз «1» РЕВЕ
УА) «аце в
Сух Ате Ава Су ТНе Уа! Пе Сів Рле Бет Су і З 10 «027
Не «вет «13» Синтетична послідовність «арх «ва Описснвтетичної послідовності: пити 7 «дю «22У РЕВТІЕ. «В «аку
Сух Нв Тут Пе лів СУ Тк уві Сію СЯу Су» і 5 19 «ау В «де «ДВК «ХУ Синістична послідовність «ах «ваг Опис сивтетичної послідеоввості: лептид 8 «пох «221 РЕВТЦ «вай О.К «а00х В
Суб рго Ге уві ет Тек Агі Авр Ні ет Су і 5 І) ко «ме «ТІ» РЕ «др» Синтепизна послідовність
«000» «203» Опис синтетичної посліловності: пептид У «ДІМ РЕРТТОЕ «2222 (3. (1 «40059
Сук Цуб Сію Бех Тут еп Ні Нів Гев Тез Су 1 5 16 «ой «11 «»12УРЕТ «ІЗ» Синтетична послідовність кору» 23» Оцис синтетичної послідовності: пептид 10 «у» «212 РЕРТІОЄ ха «4002 10
Суз Ре Са Рго Гей Тих Рго Шев Суб Ага Сув 1 5 10 -210511 «141 «12» РЕТ «2132 Синтетична послідовність ох «223» Опис синтетичної послідовності: пентид 1 «о «2212 РЕРТІРЕ «23230 «011
Сух Сип Бет Тут Ні Сів Ге Тей без бів Су 1 5 10
Фі1 ще і 70000 5 Па пеозми 1 Н ! що НІ житах : ! г що щ оБхха ! за 00 Не : о ЗО ІН бейтил ї ! Па оовлтняї З
І 400 Й / ! з Ті ізовнем Й і п-А-- ми хо 2-31 лейва я і а ре Е ЕЗ м дсп ! г і Я і поунав і я х - І і х 2 Н пептиз У Е і Й ї й в. тпептио | ї й Це пслтнд 1: і Яхріиата т
Кн т о оЯЇ аа ! о водютя і воо0о і сн ! то ; Ге овнилі і впро з і їж беутнд Я !
Е 5090 і ІЗ пзитях З с 40000 | Нам пепсин З
Зоо -в і ї ! Ж осоклкдї 120000 : ! м шк : мою) ЩЕ І ження і о й. с--Ж - іш нексам 7 ї
Н 5 ЖЕ з Е а тпеотвА Кк Я ! її 5 Бо шокужз : рі З ї - ін укічах Й Ї ' і ІК вевінаті
Варішеу Й
ДУМИ ТІ І І КА ту і Фі.ЗА і і 129 Кат т: ЗЕЕс Все НН
Н пи уми КВК ТО . ї : Окна и вд же хптохі Н : и я ТОД ЛИЖКИ ПИКА 1
Н « ге ин ак ча СІ
Я по В г 1 тане ВЕ о я ке пемВАЯ їв Мн о ї їй ев Ко св хо Вас ка я М
Н Угри ІК Кос : ч : Е щи М МО КИ Гляже псптхд У и ле п ро о о Й 0
Ж 0 Ве в с бю ї о МАМ Н к ма Мн и, зсїхия т ІЙ
Не Ко о в ко во Ва
НК КОН КОН Н я ій ж юю ах
З ПН ех : ПОН НН о сенат : хи вн 00000 . деки Коко Й певтд і В й ПН ВІ ' ЕК ЕТ КК Н и : о Во сесос: хоБ ВИН ' о 20 450 оо :
Деза пецсилу со Н
Н ФВ :
Н М! ! 12 преп коор кова Тед І
Н с М в КО ртутні і ви ОВ інже! житах
Н ВАК ОК СВОИ ; ! 100 ре МОМ БАБІ З Ре меутох З
Н уп нти шк КО Н
Н ва и ЖЕ и о іже оюнха З а Я 1 к- ул ша оно ен Нв ік о кс ок В нс НЕ 18 В и я Ми Н й Н і е во Еш НИ ох ін певуйнй е Ве ор ОБОВ :
Е Пон нн р А? : нн ше : 5 «о ЯН пек ВК - тепла х ТИКИ У ШИ дяк ат ува ме о
НИ Гоше зн в ех у р-н руд
ШУ ее о Н І й 20 ее Ен ее Н педтни В ї Ви ее ов 1
Пен зеаунл ії
Ки ооо в ко нн ' о СО е БОКУ ОВО СЕК М і о 200 зоб во І : Дазо хептиху (5 І пкинннннлннлшжлжлжлшлшлшлшмлл,лядллнлнмнм мм м мєю,юд,лл м нм о полон : їв. 4 Н ї Мк
І 120 ОО
ВК мя ТК Н і и о во ПИВ
Н в со В: КЕ МШНІ
Мо ЕК ноя
Н м в На Кок и
Я и в ооо Й ї іє о оо Нота
ЖЕ М и М В і БО ЕНН В МОЯ с вия
Тож у НН 1 ї
І Кк оо м ово ИН НА НУ
Е М ії ж БО БИК хро я пев зоре пен аб З
ЩЕ рН нн | Н
З Ех оо ЗА 0 б?
М т КУ . ІН
І Е «п ОБ Моря Іо паював ї
СЕ КЕ КЕКВ оо ЗО Е ! Кр Ок око ЖОВ в Іс ДИ
Н ко и ОН Й сотих і х
Голо 00 : 25 ЕО а ОХ юс, СВЙ панеяі : КОКО тн : пе а В Й ! ! в -
ВОАС МО и : : 0 2. 0 бо Н
Н Дах нептеху СУМ Н х ІЗ а о п нн
: днк, 5 - Н
ОО позов овес : ' ву В КК платті : В ж п їз ПОН у І
Й Мн МЕ ВЖК п ККУ фі пкохно Її ІН : о вв КК ОВВИ певзиі?. З а ІК ІМ Кк око ' ебзна З ІЯ
Ж ду ЕМО же ке КВУ ря бо. т пон НН Н 4 ї
Пи БА ИН ня щі ре іматна Я С
І ОН НН І
Х ОК І І 0 -ж-озеиндя ж БО В й я о и ках х 5 КИ Мо М ЕК : ВІ іх 40 о В І ект
Є Мт КК КЕ В й
Не КУН я В : пет
СЕ КН ее ОО НИ НІ нище п 1 схо и
ПЕН інн ОБИТНЯ й її : ВЕК п А ВВ ТЕ : К
Н ООН я Н рез ВНІ
ИЙ Ша:
Н Гек В ВУ 1 пехікялб З 4 Н пектих І
Е о Боб ее ВИН Е:я ВЕ В
ВО ля : і Фі є Я : г і
Н і ! 1.6. ер смввюоют ссср ресвтвнвєттт !
И оо ВК х Н
КЕНЕ и п ПІТ ТК НИ : шо !
Н ж Би пл ОК ДИТЯ От Н ; Бе КИ и М М Н 814 2 Ван Н
НОЯ ій Кт ки ПЕД ВИТИ се ИЕТА :
НЕ он я
ЕЕ і ши 1 Кг
Ех ОН С: й
НИЗ шим шо ПЕКТИ вия 1-5 аткк х т Е кеди ДК КЕШ о Й : : 5 08 ном Ко сво СОФІ :
Н Ки ПУ ЕК Я ННІ І
Не КК т ев ООН НЯ
І пами ТА Ти 1 т хх 08 Пан І я вИНІово З хе ОМ То
НЕ УМ Ди и КИ яння няння
ЕЕ М КН КК ї : й пА ОМ Н
Б о Я Н їж Он и АЖ ! ! МІД т пи и гу КБ Н ' й 2 ет АК І МК ї
Н - Ван Н : ОН и і
Я доро МЕ КО :
Н - ; Н
Н
Н ! : о 1 о З !
Я А іх ' дні "
Claims (13)
1. Пептиди, які зв'язують і інгібують фосфорилювальну ділянку казеїнкінази І! (СКІЇ), які представлені наступними послідовностями, вибраними з групи:
а. СБМАОСРМОКС;
в. С55СОМ5РАЇ С;
с. СОІРОВАВТАТАС;
а. САКОАТОРОМС;
е. СМУМ5РАНІ АТС;
ї. САМСТМІОБ5О;
94. СНУЄАаТтУОСс;
п. СРІМБІ НВОНЗС;
і. СКОБХМІ ННІ С; СРОРІТРІ САС;
К. СО5УНЕ Ш Г О5; а також будь-який гомологічний або міметичний варіант (синтетичний або рекомбінантний) вказаних пептидів.
2. Пептиди за п. 1, які представлені циклічною структурою.
3. Пептиди за пп. 1 або 2, які складають злитий поліпептид.
4. Фармацевтична композиція для інгібування проліферації пухлинної клітини, яка включає в себе один або декілька пептидів за пп. 1-3, а також прийнятний носій.
5. Фармацевтична композиція за п. 4, яка додатково містить цитокін.
6. Фармацевтична композиція за п. 5, де вказаний цитокін являє собою інтерферон (ІФН).
7. Застосування пептидів за пп. 1-3 для інгібування проліферації пухлинної клітини.
8. Застосування за п. 7 для лікування асоційованих і не асоційованих з папіломовірусом людини (НРУ) пухлин.
9. Застосування пептидів для лікування НРУ-асоційованого ураження на стадіях, попередніх малігнізації.
10. Застосування за пп. 7-9, де пептиди використовуються нарівні з цитокінами.
11. Застосування за п. 10, де цитокін являє собою ІФН.
12. Застосування за пп. 7-9, де пептиди використовуються для лікування пацієнтів, уражених НРУ і резистентних до лікування ІФН.
13. Експресуючий вектор ссавця, що містить ДНК-послідовності, які кодують будь-який з пептидів за пп.1-3.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CU20010309A CU23225A1 (es) | 2001-12-20 | 2001-12-20 | PéPTIDOS PARA EL TRATAMIENTO DEL CáNCER ASOCIADO AL VIRUS PAPILOMA HUMANO (VPH) Y DE OTROS TUMORES EPITELIALES |
| PCT/CU2002/000010 WO2003054002A1 (es) | 2001-12-20 | 2002-12-04 | Péptidos para el tratamiento del cáncer asociado al virus papiloma humano (vph) y de otros tumores epiteliales |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA81403C2 true UA81403C2 (en) | 2008-01-10 |
Family
ID=40091679
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA20040705927A UA81403C2 (en) | 2001-12-20 | 2002-04-12 | Peptide capable to bind casein kinase ii (ckii) phosphorylating site and to inhibit phosphorylation and use thereof |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US7374767B2 (uk) |
| EP (2) | EP1491553B1 (uk) |
| JP (1) | JP4056476B2 (uk) |
| KR (1) | KR100642437B1 (uk) |
| CN (1) | CN100368431C (uk) |
| AR (1) | AR037825A1 (uk) |
| AT (1) | ATE520704T1 (uk) |
| AU (1) | AU2002361922B2 (uk) |
| BR (1) | BRPI0215213C1 (uk) |
| CA (1) | CA2471110C (uk) |
| CR (1) | CR7361A (uk) |
| CU (1) | CU23225A1 (uk) |
| DK (1) | DK1491553T3 (uk) |
| DO (1) | DOP2002000548A (uk) |
| ES (1) | ES2371239T3 (uk) |
| HN (1) | HN2002000377A (uk) |
| HR (1) | HRP20040663B1 (uk) |
| IL (2) | IL162633A0 (uk) |
| IS (1) | IS2906B (uk) |
| MA (1) | MA27868A1 (uk) |
| MX (1) | MXPA04005832A (uk) |
| MY (1) | MY133530A (uk) |
| NO (1) | NO333259B1 (uk) |
| NZ (1) | NZ534170A (uk) |
| PE (1) | PE20030861A1 (uk) |
| PT (1) | PT1491553E (uk) |
| RU (1) | RU2290410C2 (uk) |
| SI (1) | SI1491553T1 (uk) |
| TN (1) | TNSN04114A1 (uk) |
| UA (1) | UA81403C2 (uk) |
| UY (1) | UY27602A1 (uk) |
| WO (1) | WO2003054002A1 (uk) |
| ZA (1) | ZA200405514B (uk) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CU23225A1 (es) * | 2001-12-20 | 2007-08-30 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | PéPTIDOS PARA EL TRATAMIENTO DEL CáNCER ASOCIADO AL VIRUS PAPILOMA HUMANO (VPH) Y DE OTROS TUMORES EPITELIALES |
| CU23431B6 (es) * | 2005-05-12 | 2009-10-16 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | Método para la inhibición de la proliferación de células tumorales y el tratamiento del cáncer |
| GB2433740A (en) | 2005-12-23 | 2007-07-04 | Rapid Biosensor Systems Ltd | Detection of tuberculosis infection |
| CU23511B6 (es) * | 2006-02-28 | 2010-04-13 | Biorec B V | Combinación farmacéutica para el tratamiento y/o quimiosensibilización de tumores refractarios a drogas anticancerígenas |
| GB2441131A (en) * | 2006-08-24 | 2008-02-27 | Univ Dundee | Modulation of binding of CK2a to NDPK |
| CN100522992C (zh) * | 2007-02-12 | 2009-08-05 | 中国科学院昆明动物研究所 | 一种环状小肽ba |
| US20110052725A1 (en) * | 2007-03-27 | 2011-03-03 | Takashi Shibata | Therapeutic agent for infectious skin and mucosal disease |
| US20110305706A1 (en) | 2009-02-23 | 2011-12-15 | Scott Thomas Brady | Compositions and Methods for Treating a Disease Mediated by Soluble Oligomeric Amyloid Beta |
| EP2406379A4 (en) * | 2009-03-13 | 2012-09-26 | Egen Inc | COMPOSITIONS AND METHODS FOR RELEASING BIOLOGICALLY ACTIVE RNA |
| CN108712911A (zh) | 2015-12-30 | 2018-10-26 | 科达制药股份有限公司 | 抗体及其缀合物 |
| CU20200103A7 (es) * | 2020-12-18 | 2022-07-08 | Ct Ingenieria Genetica Biotecnologia | Péptido sintético para la inducción de inmunidad antitumoral y antiviral |
| CU24766B1 (es) | 2021-07-09 | 2025-08-13 | Ct Ingenieria Genetica Biotecnologia | Péptidos lineales que inhiben la fosforilación mediada por ck2 |
| CN118370805B (zh) * | 2024-04-29 | 2025-02-14 | 广州中科佰氏健康产业有限公司 | 一种抑菌妇科凝胶及其制备方法 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IE902820A1 (en) | 1989-08-07 | 1991-02-27 | Merck & Co Inc | Peptide inhibitors of human papilloma virus protein binding¹to retinoblastoma gene proteins |
| JPH05310784A (ja) * | 1991-09-04 | 1993-11-22 | Merck & Co Inc | ヒト乳頭腫ウイルスタンパク質と網膜芽細胞腫遺伝子タンパク質との結合のペプチド阻害剤 |
| GB9313556D0 (en) * | 1993-07-01 | 1993-08-18 | British Tech Group | Synthetic peptides of human papillomavirus |
| US5625031A (en) * | 1994-02-08 | 1997-04-29 | Bristol-Myers Squibb Company | Peptide inhibitors of the p33cdk2 and p34cdc2 cell cycle regulatory kinases and human papillomavirus E7 oncoprotein |
| ATE235509T1 (de) | 1998-06-30 | 2003-04-15 | Deutsches Krebsforsch | Peptide zur inhibition von hpv e7 proteinen |
| US6641994B2 (en) | 1999-08-25 | 2003-11-04 | Pharmacia & Upjohn Company | Methods of identifying anti-viral agents |
| AU2001238347A1 (en) * | 2000-02-28 | 2001-09-12 | Hyseq, Inc. | Novel nucleic acids and polypeptides |
| CU23225A1 (es) * | 2001-12-20 | 2007-08-30 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | PéPTIDOS PARA EL TRATAMIENTO DEL CáNCER ASOCIADO AL VIRUS PAPILOMA HUMANO (VPH) Y DE OTROS TUMORES EPITELIALES |
-
2001
- 2001-12-20 CU CU20010309A patent/CU23225A1/es unknown
-
2002
- 2002-04-12 UA UA20040705927A patent/UA81403C2/uk unknown
- 2002-12-04 CN CNB028282698A patent/CN100368431C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-04 US US10/499,458 patent/US7374767B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-04 WO PCT/CU2002/000010 patent/WO2003054002A1/es not_active Ceased
- 2002-12-04 IL IL16263302A patent/IL162633A0/xx active IP Right Grant
- 2002-12-04 AU AU2002361922A patent/AU2002361922B2/en not_active Ceased
- 2002-12-04 EP EP02796490A patent/EP1491553B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-04 SI SI200230967T patent/SI1491553T1/sl unknown
- 2002-12-04 CA CA2471110A patent/CA2471110C/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-04 DK DK02796490.7T patent/DK1491553T3/da active
- 2002-12-04 ES ES02796490T patent/ES2371239T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-12-04 PT PT02796490T patent/PT1491553E/pt unknown
- 2002-12-04 EP EP11168526A patent/EP2383282A1/en not_active Ceased
- 2002-12-04 NZ NZ534170A patent/NZ534170A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-12-04 BR BRPI0215213A patent/BRPI0215213C1/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-12-04 KR KR1020047009771A patent/KR100642437B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2002-12-04 RU RU2004122084/13A patent/RU2290410C2/ru active
- 2002-12-04 HR HRP20040663AA patent/HRP20040663B1/hr not_active IP Right Cessation
- 2002-12-04 MX MXPA04005832A patent/MXPA04005832A/es active IP Right Grant
- 2002-12-04 JP JP2003554718A patent/JP4056476B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-12-04 AT AT02796490T patent/ATE520704T1/de active
- 2002-12-11 MY MYPI20024638A patent/MY133530A/en unknown
- 2002-12-13 AR ARP020104844A patent/AR037825A1/es not_active Application Discontinuation
- 2002-12-17 DO DO2002000548A patent/DOP2002000548A/es unknown
- 2002-12-19 HN HN2002000377A patent/HN2002000377A/es unknown
- 2002-12-20 UY UY27602A patent/UY27602A1/es active IP Right Grant
-
2003
- 2003-01-06 PE PE2003000006A patent/PE20030861A1/es not_active Application Discontinuation
-
2004
- 2004-06-04 CR CR7361A patent/CR7361A/es unknown
- 2004-06-15 MA MA27740A patent/MA27868A1/fr unknown
- 2004-06-16 IS IS7320A patent/IS2906B/is unknown
- 2004-06-17 TN TNP2004000114A patent/TNSN04114A1/en unknown
- 2004-06-20 IL IL162633A patent/IL162633A/en not_active IP Right Cessation
- 2004-07-12 ZA ZA2004/05514A patent/ZA200405514B/en unknown
- 2004-07-20 NO NO20043112A patent/NO333259B1/no not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-04-08 US US12/099,646 patent/US7947287B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7947287B2 (en) | Peptides for the treatment of cancer associated with the human papilloma virus (HPV) and other epithelial tumors | |
| Van der Watt et al. | The Karyopherin proteins, Crm1 and Karyopherin β1, are overexpressed in cervical cancer and are critical for cancer cell survival and proliferation | |
| Yi et al. | Epstein–Barr virus nuclear antigen 3C targets p53 and modulates its transcriptional and apoptotic activities | |
| Izumiya et al. | Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus K-bZIP represses gene transcription via SUMO modification | |
| Pappa et al. | Novel structural approaches concerning HPV proteins: Insight into targeted therapies for cervical cancer | |
| Muralidhar et al. | Human cytomegalovirus mtrII oncoprotein binds to p53 and down-regulates p53-activated transcription | |
| Lee et al. | Apoptin T108 phosphorylation is not required for its tumor-specific nuclear localization but partially affects its apoptotic activity | |
| Chung et al. | Myristylation and polylysine-mediated activation of the protein kinase domain of the large subunit of herpes simplex virus type 2 ribonucleotide reductase (ICP10) | |
| Li et al. | Human papillomavirus E1 proteins inhibit RIG-I/MDA5-MAVS, TLR3-TRIF, cGAS-STING, and JAK-STAT signaling pathways to evade innate antiviral immunity | |
| Li et al. | Human papillomavirus E2 proteins suppress innate antiviral signaling pathways | |
| Massimi et al. | Regulation of the human papillomavirus oncoproteins by differential phosphorylation | |
| HK1068901B (en) | Peptides for the treatment of cancer associated with the human papilloma virus (hpv) and other epithelial tumours | |
| Fang et al. | Modulation of Epstein-Barr virus latent membrane protein 1 activity by intrabodies | |
| JP2021004178A (ja) | 抗腫瘍ペプチドおよびその利用 | |
| EP0406542A1 (en) | A method for detecting precancerous and cancerous cervical intraepithelium | |
| US20050014688A1 (en) | Inducer of apoptosis | |
| CN107485716B (zh) | 可运载功能性分子进入hsv可感染细胞的载体及药物 | |
| Kooistra et al. | Viral apoptosis inducer apoptin senses cell-type dependent nuclear trafficking of the transforming SV40 large T antigen | |
| Alfaifi | The Influence of HPV16 E6 Oncoprotein on the Radiation Resistance of Cervical Cancer | |
| Onder | Characterization of the Nucleocytoplasmic Transport of the Cutaneous HPV8 E7 Protein | |
| Massimi | Functional Studies of the Human Papillomavirus E7 Protein | |
| Noya | Modulation of S-phase re-entry in differentiated keratinocytes by the human papillomavirus E7 gene |