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TWI891670B - 胸腺基質淋巴細胞生成素（tslp）結合抗體之乾粉配製物及其使用方法 - Google Patents

胸腺基質淋巴細胞生成素（tslp）結合抗體之乾粉配製物及其使用方法

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TWI891670B
TWI891670B TW109137435A TW109137435A TWI891670B TW I891670 B TWI891670 B TW I891670B TW 109137435 A TW109137435 A TW 109137435A TW 109137435 A TW109137435 A TW 109137435A TW I891670 B TWI891670 B TW I891670B
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蘇珊 赫
普拉卡什 馬尼克瓦
羅蘭 威廉 科貝克
艾瑪 蘇珊 柯翰
薩巴 加茲維尼
巴列斯特羅斯 大衛 雷楚卡
凱莉莎 貝斯 漢森
德克斯特 約瑟夫 迪沙
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英商梅迪繆思有限公司
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Abstract

本技術總體上涉及對胸腺基質淋巴細胞生成素（TSLP）具有特異性的抗體之乾粉配製物，以及使用該等乾粉配製物適當地經由肺遞送來治療氣喘之方法。

Description

胸腺基質淋巴細胞生成素（TSLP）結合抗體之乾粉配製物及其使用方法
本技術總體上涉及衍生自對胸腺基質淋巴細胞生成素（TSLP）具有特異性的抗體的抗原結合片段之乾粉配製物，以及使用該等乾粉配製物經由肺遞送來治療氣喘（包括輕度、中度和重度氣喘，嗜酸性氣喘和非/低嗜酸性氣喘）之方法。乾粉配製物包括白胺酸和三白胺酸之混合物，其導致配製物特別適於經由吸入來遞送衍生自抗TSLP抗體之抗原結合片段。
氣喘影響了全世界約3億人，包括所有年齡範圍內的人，並且給保健系統和社會（由於工作場所的生產力缺失和家庭的破裂）造成了沈重負擔（「氣喘管理和預防袖珍指南（Pocket Guide for Asthma Management and Prevention）」，全球氣喘防治倡議（Global Initiative for Asthm）；2019）。氣喘引起了例如、氣促、胸悶和咳嗽等症狀，並且該等症狀的發生、頻率和強度會隨時間而變化。症狀通常與支氣管收縮、氣道壁增厚和黏液產生增加相關。氣喘可能具有不同程度的症狀，並可以基於發作次數和嚴重程度得到良好控制或控制不佳。
胸腺基質淋巴細胞生成素（TSLP）（一種上皮細胞衍生的細胞介素，響應於環境和促炎性刺激而產生）導致多種炎症細胞和下游途徑之活化。TSLP在氣喘患者的氣道中增加，並與Th2細胞介素和趨化因子表現以及疾病嚴重程度相關。儘管TSLP對於Th2免疫調節極為重要，但它也可能在其他炎症途徑中起關鍵作用，並且因此與多種氣喘表型有關。
將針對TSLP的抗體（特別是經由吸入）遞送至患者能為氣喘患者（包括每天可能需要低劑量投與的輕度氣喘患者）提供改善的治療方法。
鑒於上述內容，在一方面，本文提供了乾粉配製物，該乾粉配製物包含多種微粒，該等微粒包含：白胺酸、按重量計約1%至約10%的三白胺酸、和抗胸腺基質淋巴細胞生成素（TSLP）抗體之抗原結合片段。
在一些實施方式中，抗胸腺基質淋巴細胞生成素（TSLP）抗體的抗原結合片段包含重鏈可變結構域和輕鏈可變結構域，該重鏈可變結構域包含：包含SEQ ID NO: 1中所列的胺基酸序列的重鏈CDR1序列、包含SEQ ID NO: 2中所列的胺基酸序列的重鏈CDR2序列、和包含SEQ ID NO: 3中所列的胺基酸序列的重鏈CDR3序列，其中重鏈CDR1、2或3中任一個視需要包含單一胺基酸取代，該輕鏈可變結構域包含：包含SEQ ID NO: 5中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR1序列、包含SEQ ID NO: 6中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR2序列、和包含SEQ ID NO: 7中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR3序列，其中輕鏈CDR1、2或3中任一個視需要包含單一胺基酸取代，其中白胺酸和三白胺酸以白胺酸 : 三白胺酸為約0.1 : 1至約30 : 1的濃度比存在。
在另一方面，提供了治療患者的氣喘之方法，該方法包括經由吸入投與第一方面之乾粉配製物。
在另一方面，提供了根據第一方面的乾粉配製物，用於在治療方法中使用，其中該配製物藉由吸入投與。在一些實施方式中，配製物用於在治療氣喘中使用。
本文所述之乾粉配製物能夠實現使用抗TSLP抗體結合片段治療初級護理環境中的氣喘，從而解決未滿足的需求。患有氣喘的受試者典型地藉由經由吸入自遞送藥物組成物（例如長效β促效劑和/或糖皮質激素）來控制氣喘症狀。
然而，現有生物藥物（無論是已批准的還是正在臨床研究中的）為氣喘患者提供了新的治療範例，該等藥物通常無法藉由熟悉的肺途徑遞送至受試者。特折魯單抗（Tezepelumab）（新一代生物藥物）係人免疫球蛋白G2（lgG2）單株抗體（mAb），可與TSLP結合，從而阻止其與TSLP受體複合物的相互作用。在最近的2期、隨機、雙盲、安慰劑對照試驗中，接受皮下注射特折魯單抗的氣喘受試者比那些接受安慰劑的受試者具有更低的臨床上顯著的氣喘發作率（Corren等人 (2017)NEJM [新英格蘭醫學期刊] 377: 936-946）。
本文所述之發明將新一代生物藥物（例如特折魯單抗）之治療優點與對患有氣喘的患者而言更熟悉的投與途徑相結合。因此，本發明能夠實現在初級護理環境中投與此類新一代療法，從而將該等藥物之可用性擴展到專業護理能力之外之受試者。
另外，本文所述之配製物可特別用於治療通常可在初級護理環境中得到控制的中重度氣喘患者。例如，患有全球氣喘防治倡議（GINA）等級為3或更低（適當地GINA等級為2或3）之患者特別適於用本文所述之配製物進行治療。在某些實施方式中，患有GINA等級為3的患者適於用本文所述之配製物進行治療。在某些實施方式中，患有GINA等級為2的患者適於用本文所述之配製物進行治療。此外，藉由直接向肺遞送生物藥物，減少了與全身性投與相關的副作用（例如注射部位炎症）。
另外，配製物提供了對可以在初級護理環境中得到控制之中度-重度氣喘患者或藉由專業護理難以治療的中度-重度氣喘患者進行治療之可能性。例如，配製物可用於治療患有全球氣喘防治倡議（GINA）等級為4-5的中度-重度氣喘患者。適當地，配製物提供了對未控制的中度-重度氣喘進行治療之可能性。適當地，配製物提供了對具有一次或多次發作和頻繁症狀的、中等劑量至高劑量ICS : LABA未控制的中度-重度氣喘進行治療之可能性。
本文使用術語「約」來意指大約（approximately）、在……附近（in the region of）、粗略地（roughly）、或在……左右（around）。當術語「約」與數值範圍結合使用時，它藉由擴展列舉的數值的上限和下限將該範圍加以修飾。通常，術語「約」在本文中用於將數值在該值之上和之下修改10%的變化。
如本文所述，提供了乾粉配製物用於穩定和遞送藥物活性劑。適當地，配製乾粉配製物用於肺遞送，包括藉由乾粉吸入器（DPI）經由吸入進行肺遞送。
如本文所用，「乾粉配製物」係指在粉末組成物中包括多種固體微粒的配製物，該粉末組成物適當地含有小於約20%水分、更適當地小於10%水分、小於約5%-6%水分、或小於約3%水分。如本文所述，乾粉配製物可以用於經由吸入遞送至患者。在其他實施方式中，可以將乾粉配製物進行重構，並且以液體形式藉由口服、靜脈內、腸胃外等方式進行投與。如本文所述，提供的乾粉配製物的優點係增加生產量用於改善可製造性。另外的優點係本文所述之配製物平臺提供了高壓縮堆積密度。這意味著每個遞送單元（例如膠囊內）可以包裝更大質量之粉末。這意味著每個單位遞送可以將高劑量的活性劑遞送至受試者。這種令人驚訝的優點可以藉由降低需要服用的單位劑量之數量來改善患者依從性。另外，高壓縮堆積密度能夠實現遞送更高劑量的活性劑，從而增加了投與劑量範圍上限。這能夠實現以先前不可能的治療有效劑量來遞送活性劑。
如本文所用的「微粒」係指尺寸質量平均直徑（MMD）小於20 μm之固體顆粒。質量平均直徑係微粒平均粒度的量度，其藉由使用合適之方法（包括例如，離心沈降、電子顯微鏡、光散射、雷射繞射等）進行測量。
本文所述之乾粉配製物適當地含有多種微粒。如本文所用，「多種」係指2種或更多種物品，並且適當地是指5種或更多種、10種或更多種、50種或更多種、100種或更多種、500種或更多種、1000種或更多種等。
在實施方式中，乾粉配製物包括多種微粒，該等微粒適當地包含白胺酸；按重量計約1%至約10%的三白胺酸；以及本文所定義的抗TSLP抗體結合片段。除非另有說明，否則「活性劑」係指衍生自抗TSLP抗體的抗原結合片段，如本文所定義。
圖7示出了本文提供的示例性乾粉配製物的微粒之掃描電子顯微照片。在另外的實施方式中，包括多種微粒的乾粉配製物適當地包含約1%至約25%之白胺酸；約1%至約10%的三白胺酸；以及活性劑。
如本文所用，無論是作為單一胺基酸存在還是作為肽的胺基酸組分存在，「白胺酸」係指胺基酸白胺酸（C6 H13 NO2 ），其可以是外消旋混合物或呈其D-或L-形式、以及白胺酸的修飾形式（即，其中白胺酸的一個或多個原子已被另一個原子或官能基取代）。以下提供了白胺酸的化學結構：
如本文所使用的「三白胺酸」係指其中三個白胺酸分子在肽中連接在一起的化學化合物，如白胺酸-白胺酸-白胺酸（Leu-Leu-Leu），C18 H35 N3 O4 。以下提供了三白胺酸的化學結構：
除非另有說明，否則將本文提供的白胺酸和三白胺酸的量提供為配製物的重量百分比（wt%）。由於乾粉配製物幾乎不含水（即使含有水，也非常少），乾粉配製物的重量組分為最終配製物的乾重量百分比。
在包含白胺酸、三白胺酸和抗原結合片段的配製物的實施方式中，該白胺酸和三白胺酸保持在所希望的比例範圍內，該所希望的比例範圍提供了本文所述之改善的壓縮堆積密度特徵，以及提供了允許改善儲存和遞送的所希望的微粒特徵。在實施方式中，白胺酸和三白胺酸在微粒中的重量比（即白胺酸 : 三白胺酸）係約0.1 : 1至約30 : 1。在另外的實施方式中，白胺酸和三白胺酸以白胺酸 : 三白胺酸為約0.1 : 1至約25 : 1、約0.5 : 1至約20 : 1、約1 : 1至約20 : 1、約1 : 1至約15 : 1、約1 : 1至約12 : 1、約1 : 1至約10 : 1、約1 : 1至約7 : 1、約1 : 1至約6 : 1、或約1 : 1、約2 : 1、約3 : 1、約4 : 1、約5 : 1、約5.1 : 1、約5.2 : 1、約5.25 : 1、約5.3 : 1、約5.4 : 1、約5.5 : 1、約5.75 : 1或約6 : 1的重量比存在。
除非另有說明，本文所述之比表現為按重量計的比%（w/w- 也稱為「重量比」），即在本文所述之配製物中的白胺酸重量 : 三白胺酸重量。藉由以下實現該等比：在原料中提供所希望的白胺酸和三白胺酸的mg/mL濃度，然後乾燥以去除原料溶劑，從而形成霧化的微粒，其中將起始濃度比（以mg/mL表現）保持為白胺酸 : 三白胺酸的最終比。
本文描述了白胺酸和三白胺酸的示例性重量百分比，其可以在乾粉配製物中使用以實現該等比。適當地，乾粉配製物包含約5%至約15%的白胺酸和約1%至約5%之三白胺酸。在實施方式中，乾粉配製物包含約8%至約11%的白胺酸和約2%至約4%的三白胺酸，以及在實施方式中，乾粉配製物包含約10.5%的白胺酸和約2%之三白胺酸。
在示例性實施方式中，乾粉配製物包含按重量計約1%至約10%的三白胺酸，更適當地按重量計約1%至約9%、約1%至約8%、約1%至約7%、約1%至約6%、約1%至約5%、約2%至約10%、約2%至約9%、約2%至約8%、約2%至約7%、約2%至約6%、約2%至約5%、約2%至約4%、或約1%、約1.5%、約2%、約2.5%、約3%、約3.5%、約4%、約4.5%、約5%、約5.5%、或約6%之三白胺酸。
在示例性實施方式中，乾粉配製物包含按重量計約1%至約25%的白胺酸，更適當地按重量計約2%至約20%、約3%至約20%、約4%至約20%、約5%至約20%、約5%至約15%、約7%至約12%、約8%至約11%、約9%至約11%、約10%至約11%、或約5%、約6%、約7%、約8%、約8.5%、約9%、約10%、約10.5%、約11%、約11.5%、約12%、約12.5%或約13%的白胺酸。
在合適的實施方式中，乾粉配製物包含按重量計約8%至約11%的白胺酸和約2%至約4%的三白胺酸、更適當地按重量計約9%至約11%的白胺酸和約2%至約3%之三白胺酸。在示例性實施方式中，乾粉配製物包含按重量計約10.5%的白胺酸和約2%之三白胺酸。
如本文所述，令人驚訝的發現在乾粉配製物中使用白胺酸和三白胺酸的組合允許減少製備微粒所需的白胺酸和三白胺酸的總量（與僅含有該等組分中的一種的乾粉配製物相比），同時還提供了所希望的穩定性。在某些實施方式中，與本領域中的配製物相比，本發明之配製物具有增加的壓縮堆積密度，這能夠實現吸入後向患者的肺遞送更高濃度的活性劑。該等改善的特徵似乎與將白胺酸和三白胺酸摻入微粒中相關。
根據本文的實施方式，製備乾粉配製物的示例性方法可以如下進行。使用霧化器將含有乾粉配製物的所希望的最終組分的液體原料霧化成細小薄霧。然後如本文所述，將薄霧乾燥。霧化的液滴含有最初呈液滴形式的溶解組分。隨著液滴乾燥，配製物的不同組分開始以不同的速率飽和並沈澱。如本文所述，在乾粉配製物的微粒的外表面周圍開始形成殼。此殼適當地在該殼外表面包括白胺酸和三白胺酸組分。應該注意的是白胺酸和三白胺酸較佳的是位於微粒的外表面，同時少量的白胺酸和三白胺酸也可以存在於整個微粒。在實施方式中，較高濃度的白胺酸和三白胺酸適當地存在於微粒表面或其附近，而不是靠近微粒中心。在實施方式中，微粒的中心含有大量的活性劑，以及如本文所述之其他賦形劑組分，該等組分適當地呈無定形形式。如本文所用，「大量」的活性劑意指至少約60%的活性劑（即，配製物中的總活性劑）位於微粒中心或微粒中心附近，適當地至少約70%，以及更適當地至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、以及在實施方式中約95%-100%的活性劑位於微粒中心或其附近。
在另外的實施方式中，微粒含有白胺酸和三白胺酸，位於基本上整個微粒，但在微粒表面或其附近含有的量較大。如本文所用，「基本上整個微粒」係指白胺酸和/或三白胺酸呈梯度式位於從微粒外表面至微粒中心，但越靠近中心白胺酸和/或三白胺酸的量適當地越少，並且在實施方式中，活性劑所在的微粒的中心沒有發現白胺酸或三白胺酸。在其他實施方式中，白胺酸和三白胺酸的量在微粒的整個橫截面上可以是基本上均勻的。
在實施方式中，乾粉配製物的基本上每種微粒都包含白胺酸和三白胺酸。即，適當地至少約60%的微粒含有白胺酸和三白胺酸，或至少約70%、和更適當地至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、以及在實施方式中約95%-100%的微粒包含白胺酸和三白胺酸。在實施方式中，乾粉配製物的每種微粒都包含白胺酸和三白胺酸。
在另外的實施方式中，白胺酸和/或三白胺酸可以存在於乾粉配製物中，但是不包含在配製物的微粒內或與該微粒不相關。因此，在實施方式中，可以在乾粉配製物中發現與微粒不相關的游離白胺酸和/或三白胺酸。然而，通常，游離（即，與微粒不相關的）白胺酸和/或三白胺酸的量近似於小於約10%、小於約5%、小於約1%，以及更適當地小於約0.1%的配製物中白胺酸和/或三白胺酸的總量。
在某些實施方式中，本文所述之乾粉配製物具有允許遞送大量活性劑的壓縮堆積密度。「壓縮堆積密度」係指當在以下條件下測量時，粉末的每單位體積的質量（適當地，g/cm3 ）。實例中描述了測量壓縮堆積密度（cBD）的合適的測定（參見例如實例6）。適當地，使用密度分析儀，例如GeoPyc®模型1360密度分析儀（佐治亞州諾克羅斯市的微粒學公司（Micromeritics，Norcross，GA））來測量粉末的壓縮堆積密度（CBD）。在轉移到已用氮氣吹掃的密度分析儀樣本室之前，應在低濕度環境（＜ 5% RH）中適當地製備粉末樣本。記錄粉末樣本的淨重，然後藉由柱塞以每秒250-350個固結步驟（適當地每秒300個固結步驟）的速率向樣本施加10-14 N（適當地12N）之壓縮力。將每個固結步驟中柱塞行進的直線距離轉換為粉末樣本的體積位移。然後，將來自每個固結步驟的測量值平均數轉換為計算的乾粉配製物的堆積密度值，以g/cm3 表現。
適當地，本文所述之乾粉配製物的壓縮堆積密度為至少0.4 g/cm3 ，並且適當地在約0.4 g/cm3 至約1.0 g/cm3 之間，並且更適當地約0.4-0.9 gm/cm3 、約0.4-0.8 gm/cm3 、約0.5-0.8 gm/cm3 、約0.6-0.8 gm/cm3 、或約0.4 gm/cm3 、約0.5 gm/cm3 、約0.6 gm/cm3 、約0.7 gm/cm3 、或約0.8 gm/cm3 。在某些實施方式中，本文所述之乾粉配製物的壓縮堆積密度為從約0.4 gm/cm3 至約0.9 gm/cm3 。在某些實施方式中，本文所述之乾粉配製物的壓縮堆積密度為從約0.5 gm/cm3 至約0.8 gm/cm3 。
圖8A示出了本文所述之乾粉配製物中壓縮堆積密度作為白胺酸和三白胺酸的函數之結果。每一列代表配製物中三白胺酸之量。每列中，白胺酸的量從約1%增長至約20%。如所示，增加三白胺酸的量導致壓縮堆積密度較低，而在每組內增加白胺酸也降低了壓縮堆積密度。為了實現壓縮堆積密度在約0.5 g/cm3 至約0.8 g/cm3 之間，應將三白胺酸的量保持在按重量計低於4%。
本文所述之配製物包含抗胸腺基質淋巴細胞生成素（抗TSLP）抗體的抗原結合片段。有利地，發明人已發現本文所述之配製物能夠實現經由吸入將抗原結合片段直接遞送到肺中。經由吸入遞送抗TSLP抗體的治療活性抗原結合片段有利地允許在初級護理環境中使用生物藥物治療氣喘。
以下提供了TSLP多肽的序列：
如本文所用，術語「抗體」係指包含藉由二硫鍵連接的至少兩條重鏈和兩條輕鏈的蛋白。術語「抗體」包括天然存在的抗體以及所有重組形式的抗體，例如人源化抗體、完全人抗體和嵌合抗體。每條重鏈通常由重鏈可變區（VH）和重鏈恒定區（CH）組成。每條輕鏈通常由輕鏈可變區（VL）和輕鏈恒定區（CL）組成。然而，術語「抗體」還包括其他類型的抗體，例如單結構域抗體、重鏈抗體（即，僅由一條或多條，尤其是兩條重鏈組成的抗體）和奈米抗體（即，僅由單個單體可變結構域組成的抗體）。
抗體結合片段包括：(i) Fab片段，即由重鏈和輕鏈各自的可變區和第一恒定結構域組成的單價片段；(ii) F(ab)2片段，即包含兩個Fab片段的二價片段，這兩個Fab片段在鉸鏈區藉由二硫橋連接；(iii) 由重鏈的可變區和第一恒定結構域CH1組成的Fd片段；(iv) 由抗體的單臂的重鏈和輕鏈可變區組成的Fv片段；(v) scFv片段，即由單條多肽鏈組成的Fv片段；(vi) 由兩個共價連接在一起的Fv片段組成的(Fv)2片段；(vii) 重鏈可變結構域；以及 (viii) 由共價連接在一起的重鏈可變區和輕鏈可變區組成的多體，這種共價連接方式使得重鏈可變區和輕鏈可變區的締合只能在分子間發生，而不能在分子內發生。在實施方式中，本發明之抗體結合片段選自Fab、Fab'、F(ab')2、scFv、微型抗體、或雙抗體。在某些實施方式中，抗體結合片段係Fab。在一些實施方式中，衍生抗原結合片段的抗TSLP抗體係IgG1。
本發明之示例性Fab（本文稱為Fab1 ）的序列包括：
HCDR1 FAB1
HCDR2 FAB1
HCDR3 FAB1
重鏈VH FAB1
LCDR1 FAB1
LCDR2 FAB1
LCDR3 FAB1
輕鏈VL FAB1
FAB1可變重鏈VH（核酸）
FAB1可變輕鏈VL（核酸）
FAB1重鏈（多肽）
FAB1輕鏈（多肽）
FAB1重鏈（核酸）
FAB1輕鏈（核酸）
本文提供的乾粉配製物包含多種微粒，該等微粒包含：白胺酸；按重量計約1%至約10%的三白胺酸；以及抗胸腺基質淋巴細胞生成素（TSLP）抗體的抗原結合片段，其中該白胺酸和該三白胺酸以白胺酸 : 三白胺酸為約0.1 : 1至約30 : 1的濃度比存在。
在某些實施方式中，乾粉配製物內的抗原結合片段包含 a.       重鏈可變結構域，該重鏈可變結構域包含： 包含SEQ ID NO: 1中所列的胺基酸序列的重鏈CDR1序列、包含SEQ ID NO: 2中所列的胺基酸序列的重鏈CDR2序列、和包含SEQ ID NO: 3中所列的胺基酸序列的重鏈CDR3序列，其中重鏈CDR1、2或3中任一個視需要包含單一胺基酸取代，以及 b.      輕鏈可變結構域，該輕鏈可變結構域包含： 包含SEQ ID NO: 5中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR1序列、包含SEQ ID NO: 6中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR2序列、和包含SEQ ID NO: 7中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR3序列；其中輕鏈CDR 1、2或3中任一個視需要包含單一胺基酸取代。
在某些實施方式中，乾粉配製物內的抗原結合片段包含重鏈可變結構域，該重鏈可變結構域包含具有SEQ ID NO: 1中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR1序列、具有SEQ ID NO: 2中所列的胺基酸序列的重鏈CDR2序列、和具有SEQ ID NO: 3中所列的胺基酸序列的重鏈CDR3序列，以及具有SEQ ID NO: 5中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR1序列、具有SEQ ID NO: 6中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR2序列、和具有SEQ ID NO: 7中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR3序列。
在另外的實施方式中，用於在乾粉配製物中使用的抗原結合片段包含重鏈可變結構域和輕鏈可變結構域，該重鏈可變結構域包含SEQ ID NO: 4，並且該輕鏈可變結構域包含SEQ ID NO: 8。在另外的實施方式中，抗原結合片段用於在乾粉配製物中使用，該抗原結合片段包含具有SEQ ID NO: 28中所列的序列的重鏈；以及具有SEQ ID NO: 29中所列的序列的輕鏈。
在另外的實施方式中，用於在乾粉配製物中使用的抗原結合片段包含重鏈可變結構域和輕鏈可變結構域，該重鏈可變結構域係與SEQ ID NO: 4具有至少95%、90%、85%或80%同一性的胺基酸序列，該輕鏈可變結構域係與SEQ ID NO: 8具有至少95%、90%、85%或80%同一性的胺基酸序列。
在另外的實施方式中，用於在乾粉配製物中使用的抗原結合片段包含 (a) 重鏈可變結構域和 (b) 輕鏈可變結構域，該重鏈可變結構域係與SEQ ID NO: 4具有至少95%、90%、85%或80%同一性的胺基酸序列、或由與SEQ ID NO: 30具有至少80%同一性的多核苷酸序列編碼的胺基酸序列，該輕鏈可變結構域係與SEQ ID NO: 8具有至少95%、90%、85%或80%同一性的胺基酸序列、或由與SEQ ID NO: 31具有至少80%同一性的多核苷酸序列編碼的胺基酸序列；或 (a) 之重鏈可變結構域以及 (b) 之輕鏈可變結構域。
本發明之抗原結合片段的另外的輕鏈CDR（LCDR）、輕鏈可變結構域（VL）、重鏈CDR（HCDR）和重鏈可變結構域（VH）序列包括：
LCDR1 FAB2
輕鏈VL FAB2
LCDR1 FAB3 輕鏈VL FAB3
HCDR2 FAB4
重鏈VH FAB4
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Thr Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys His Tyr Ala Glu Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Thr Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Asn Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Pro Gln Trp Glu Leu Val His Glu Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser（SEQ ID NO: 16）
HCDR2 FAB5
重鏈VH FAB5
Gln Met Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Thr Tyr Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ala Val Ile Trp Tyr Asp Gly Ser Asn Lys His Tyr Ala Asp Ser Val Lys Ala Arg Phe Thr Ile Thr Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Asn Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Ala Pro Gln Trp Glu Leu Val His Glu Ala Phe Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser（SEQ ID NO: 18）
LCDR1 FAB6 Gly Gly Gln Asn Leu Gly Ser Lys Ser Val His（SEQ ID NO: 19）
輕鏈VL FAB6
Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gln Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Gln Asn Leu Gly Ser Lys Ser Val His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Trp Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Gly Glu Ala Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu（SEQ ID NO: 20）
LCDR1 FAB7
Gly Gly Asn Gln Leu Gly Ser Lys Ser Val His（SEQ ID NO: 21）
輕鏈VL FAB7
Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gln Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Gln Leu Gly Ser Lys Ser Val His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Trp Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Gly Glu Ala Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu（SEQ ID NO: 22）
LCDR3 FAB8 Gln Val Trp Asp Thr Ser Ser Asp His Val Val（SEQ ID NO: 23）
輕鏈VL FAB8
LCDR3 FAB9 Gln Val Trp Asp Ser Thr Ser Asp His Val Val（SEQ ID NO: 25）
輕鏈VL FAB9
Ser Tyr Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gln Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Leu Gly Ser Lys Ser Val His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Trp Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Gly Glu Ala Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Thr Ser Asp His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu（SEQ ID NO: 26）。
在某些實施方式中，本發明之抗原結合片段的重鏈可變區和輕鏈可變區包含下表中列出的CDR序列的任何組合：
   VH CDR 1 、 2 和 3 VL CDR 1 、 2 和 3
Fab1 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 5、6和7
Fab2 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 11、6和7
Fab3 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 14、6和7
Fab4 SEQ ID NO: 1、15和3 SEQ ID NO: 5、6和7
Fab5 SEQ ID NO: 1、17和3 SEQ ID NO: 5、6和7
Fab6 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 19、6和7
Fab7 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 19、6和7
Fab8 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 5、6和23
Fab9 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 5、6和25
本文揭露的配製物可以與另外的活性劑組合投與，用於治療氣喘。可以與本文所述之乾粉配製物組合投與的示例性活性劑包括但不限於吸入皮質類固醇（ICS）、支氣管擴張藥（包括長效β促效劑（LABA）、長效抗毒蕈鹼促效劑（LAMA）、短效β促效劑（SABA）和毒蕈鹼β2促效劑（MABA））、抗組胺藥、抗白三烯、PDE-4抑制劑、詹納斯（janus）激酶抑制劑和磷酸肌醇3激酶抑制劑。在某些實施方式中，將另外的活性劑與本文揭露的抗TSLP抗體結合片段一起合併到本發明之配製物中。
在合適的實施方式中，本文所述之乾粉配製物進一步包含玻璃穩定劑以幫助穩定配製物，並且特別是穩定活性劑。「玻璃穩定劑」係指穩定乾粉配製物中的活性劑（適當地多肽）並形成包含該活性劑的無定形固體的賦形劑，該穩定係適當地藉由在乾燥期間取代該活性劑表面的水或以其他方式阻止降解過程來進行。玻璃穩定劑的實例包括無定形糖、聚合糖、緩衝液、鹽、或合成聚合物（例如聚-L-乙醇酸）、以及此類組分的混合物。在合適的實施方式中，玻璃穩定劑係無定形糖。在另外的實施方式中，玻璃穩定劑係緩衝液。在仍另外的實施方式中，本文所述之配製物可以包含無定形糖和緩衝液兩者，這兩者可以一起或分別充當玻璃穩定劑。
用於在本文所述之配製物中使用的示例性無定形糖包括但不限於海藻糖、蔗糖、棉子糖、菊糖、葡聚糖、甘露醇和環糊精。適當地，無定形糖以乾粉配製物的約30%至約70%（重量百分比）存在。在另外的實施方式中，無定形糖以約30%至約65%、約35%至約65%、約35%至約60%、約40%至約60%、約30%至約50%、或約30%、約35%、約40%、約45%、約50%、約55%、或約60%存在。適當地，無定形糖係海藻糖，並且以乾粉配製物重量的約30%-60%、更適當地約35%-55%、或約35%、約40%、約45%或約50%存在於配製物中。
可以包含於乾粉配製物中的示例性緩衝液（適當地作為玻璃穩定劑）包括多種檸檬酸鹽緩衝液（例如檸檬酸鈉）、磷酸鹽緩衝液、組胺酸緩衝液、甘胺酸緩衝液、乙酸鹽緩衝液和酒石酸鹽緩衝液，以及此類緩衝液的組合。可以包含於乾粉配製物中的緩衝液的量的範圍可以從約0.1%至約20%、更適當地約0.5%至約15%、約1%至約10%、約2%至約8%、約3%至約7%、或約1%、約2%、約3%、約4%、約5%、約6%、約7%、約8%、約9%或約10%。
緩衝液還提供了對乾粉配製物的pH的控制，適當地將pH維持在約pH 5至約8之間，例如，pH在約pH 5至約pH 6、或約pH 5.5至約pH 6.5、或約pH 6至約pH 7、或約pH 6.5至約pH 7.5、或約pH 7至約pH 8之間。
在另外的實施方式中，提供了乾粉配製物，其包含約30%-50%的海藻糖、約10%-11%的白胺酸、約1%-3%的三白胺酸、約8%-9%的檸檬酸鹽緩衝液和活性劑，更適當地約39%的海藻糖、約10.5%的白胺酸、約2%的三白胺酸、約8.5%的檸檬酸鹽緩衝液和活性劑。
在另外的實施方式中，提供了乾粉配製物，其基本上由約30%-50%的無定形糖、白胺酸、約1%至約10%的三白胺酸、約1%至約10%的緩衝液和活性劑組成，其中該白胺酸和該三白胺酸以白胺酸 : 三白胺酸為約0.1 : 1至約30 : 1的濃度比存在。在另外的實施方式中，提供了乾粉配製物，其基本上由約30%-50%的無定形糖、約8%至約11%的白胺酸、約2%至約4%的三白胺酸、約1%至約10%的緩衝液和活性劑組成。提供了另外的乾粉配製物，其基本上由約35%-45%的海藻糖、約9%至約11%的白胺酸、約2%至約3%的三白胺酸、約2%至約85%的檸檬酸鹽緩衝液和活性劑組成。在另外的實施方式中，乾粉配製物基本上由約39%的海藻糖、約10.5%的白胺酸、約2%的三白胺酸、約8.5%的檸檬酸鹽緩衝液和活性劑組成。
在「基本上由」所列舉的成分組成的組成物和配製物中，此類組成物和配製物含有所列舉的組分以及實質上不影響要求保護的配製物的基本和新穎特徵的那些組分。實質上不影響要求保護的配製物的基本和新穎特徵的組分係那些不限制白胺酸和三白胺酸穩定乾粉配製物的能力的組分。適當地，基本上由所列舉的成分組成的組成物和配製物特別排除其他胺基酸或三肽胺基酸，但是可以包括另外的糖、緩衝液等。
在示例性實施方式中，提供了乾粉配製物，其包含約30%-50%的海藻糖、約10%-11%的白胺酸、約1%-3%的三白胺酸、約8%-9%的檸檬酸鹽緩衝液和約30%-50%的抗TSLP抗體片段，更適當地約39%的海藻糖、約10.5%的白胺酸、約2%的三白胺酸、約8.5%的檸檬酸鹽緩衝液和約40%的抗TSLP抗體片段。
在另外的示例性實施方式中，提供了基本上由以下組成的乾粉配製物：約30%-50%的海藻糖、約10%-11%的白胺酸、約1%-3%的三白胺酸、約8%-9%的檸檬酸鹽緩衝液和約30%-50%的抗TSLP抗體片段，更適當地約39%的海藻糖、約10.5%的白胺酸、約2%的三白胺酸、約8.5%的檸檬酸鹽緩衝液和約40%的活性劑。
組成本文所述之乾粉配製物的微粒當以氣溶膠形式提供時，適當地具有指定的質量中值空氣動力學直徑（MMAD）。微粒也可具有指定的等效光學體積平均直徑（oVMD）。oVMD也可以稱為粒度分佈（PSD或pPSD）。
如本文所用，「質量中值空氣動力學直徑」或「MMAD」係分散微粒的空氣動力學粒度的量度。空氣動力學直徑用於描述霧化粉末的沈降行為，並且是作為微粒在空氣中具有相同沈降速率的單位密度球體之直徑。空氣動力學直徑涵蓋顆粒形狀、密度以及微粒之物理尺寸。如本文所用，除非另外指出，否則MMAD係指由級聯撞擊（cascade impaction）確定的霧化粉末的空氣動力學粒度分佈的中點或中值。適當地，本文提供的乾粉配製物的微粒具有如下質量中值空氣動力學直徑（MMAD）：約1 μm至約10 μm、更適當地約2 μm至約8 μm、約2 μm至約7 μm、約2 μm至約6 μm、約2 μm至約5 μm、約2 μm至約4 μm、約3 μm至約7 μm、約4 μm至約7 μm、約3 μm至約6 μm、或約2 μm、約3 μm、約4 μm、約5 μm、約6 μm、或約7 μm。
適當地，本文所述之乾粉配製物的細顆粒級分（從吸入裝置射出的空氣動力學粒徑小於5 μm的顆粒的級分）≥ 50%、更適當地 ≥ 60%。此細顆粒級分（FPF）可有助於遞送至患者後在裝置中殘留小於20%、適當地小於15%、小於10%、或小於5%的乾粉配製物之低裝置殘留。
在另外的實施方式中，微粒適當地具有約0.5 μm至約7 μm的等效光學體積平均直徑（oVMD）。等效光學體積平均直徑（oVMD）（equivalent optical volume mean diameter）係指最接近微粒與光的特異性光學相互作用的球體的平均直徑，其中當使用合適的光學技術進行測量時，一半的微粒最接近小於平均值的等效球體，而一半的微粒則最接近大於平均值的等效球體。在示例性實施方式中，微粒具有約0.5 μm至約6 μm、或約1 μm至約5 μm、或約1 μm至約4 μm、或約2 μm至約4.5 μm、或約2.5 μm至約4 μm、或約2 μm至約4 μm、或約2 μm至約3 μm、或約2 μm至約3.5 μm、或約1 μm、約1.5 μm、約2 μm、約2.5 μm、約3 μm、約3.5 μm、約4 μm、約4.5 μm、或約5 μm的等效光學體積平均直徑（oVMD）。
如本文所述，高壓縮堆積密度允許使用相同的遞送體積來遞送更大量的活性劑。某些生物製劑可能需要遞送多達50 mg/劑量或更高劑量的有效負載以進行有效治療。如圖8B圖示所示，白胺酸和三白胺酸的組合可以產生具有較高堆積密度的乾粉配製物，並且因此對於相同量的填充重量而佔據了顯著更小的體積。
以下提供了圖8B中所示的示例性平臺配製物。LTC指示不含三白胺酸（TLeu），但含有白胺酸、海藻糖和檸檬酸鹽緩衝液之配製物；TTC指示不含白胺酸（Leu），但含有三白胺酸、海藻糖和檸檬酸鹽緩衝液之配製物；TLTC指示包含白胺酸和三白胺酸兩者，以及海藻糖和檸檬酸鹽緩衝液。Cit係指檸檬酸鹽緩衝液。Tre係指海藻糖。 [表 1 ]：示例性平臺配製物
平臺 Tre% Leu% TLeu% Cit%
LTC 46 45 0 9
TTC 81 0 11.2 7.8
TLTC 79 10.5 2 8.5
圖8B中以相應填充重量示出了每種配製物的膠囊（3號膠囊）。如所示出的，對於TLTC配製物，三白胺酸和白胺酸的組合允許用100 mg乾粉配製物填充膠囊，同時使膠囊中仍保持一些剩餘空間。其他配製無法填充超過約70-80 mg之填充重量。這代表藉由將白胺酸和三白胺酸組合使用以製備具有高壓縮堆積密度、從而允許高填充重量的配製物而提供顯著改善。
如本文所述，在乾粉配製物中使用白胺酸和三白胺酸還產生具有所希望尺寸（MMAD）以及期望比表面積（SSA）和粗糙度的微粒，從而產生可以適當流動並使用多種吸入平臺遞送至肺之微粒。
將微粒的比表面積（SSA）定義為每單位質量的微粒的總表面積（適當地以m2 /g為單位）。測量SSA之方法係本領域已知的，並且包括例如布魯諾爾-埃梅特-泰勒（Brunauer-Emmett-Teller，BET）測量，其使用測量為相對壓力的函數的氮吸附來評估材料之比表面積。藉由計算對應於微粒表面上的單分子層的吸附氣體的量來確定表面積。此技術測量了外部面積和任何孔隙面積評估值，以確定總比表面積。用於測量BET的儀器係本領域已知的。
在實施方式中，乾粉配製物的微粒的比表面積（SSA）為約3 m2 /g至約8 m2 /g。在合適的實施方式中，多種微粒的SSA係約3.5 m2 /g-7.5 m2 /g、或約4 m2 /g-7 m2 /g、或約4.5 m2 /g-7 m2 /g、或約5 m2 /g-7 m2 /g、或約4.5 m2 /g-6 m2 /g、或約5 m2 /g-6 m2 /g、或約4 m2 /g、約4.5 m2 /g、約5 m2 /g、約5.5 m2 /g、約6 m2 /g、約6.5 m2 /g、或約7 m2 /g。
圖9示出了使用BET測量的比表面積（以m2 /g計）之結果。圖9中的每列代表配製物中三白胺酸的不同量。每列中，白胺酸的量從約1%增長至約20%。插圖顯微照片顯示了在低SSA（左下）和較高SSA（右上）下微粒的物理外觀。如所示，在較低的wt%三白胺酸下，SSA保持在低於約5 m2 /g，但隨白胺酸增加而增大。大於約2%的三白胺酸，SSA增大至大於3.0 m2 /g，並且還隨著百分比白胺酸增加而增大。三白胺酸的量大於約4%時，實現的SSA值大於5.5 m2 /g且接近7.0 m2 /g。使用在約1%-6%之間的三白胺酸以及在約1%-20%之間的白胺酸的量可以容易地實現約4-7 m2 /g的比表面積的期望範圍。如所示，藉由使用低於約6%的三白胺酸的量，可以將白胺酸的量保持在低於10%、甚至低於5%，並且仍然保持期望SSA和具有表面粗糙度之微粒。左上方的顯微照片示出了本文所述之乾粉配製物的微粒形狀，表現出期望尺寸、比表面積和表面粗糙度。
在某些實施方式中，乾粉配製物的壓縮堆積密度為約0.4-1.0 g/cm3 。適當地，乾粉配製物的壓縮堆積密度為約0.5-0.8 g/cm3 。在實施方式中，本文所述之乾粉配製物的壓縮堆積密度為約0.4-0.9 gm/cm3 、約0.4-0.8 gm/cm3 、約0.5-0.8 gm/cm3 、約0.6-0.8 gm/cm3 、或約0.4 gm/cm3 、約0.5 gm/cm3 、約0.6 gm/cm3 、約0.7 gm/cm3 、或約0.8 gm/cm3 。在某些實施方式中，本文所述之乾粉配製物的壓縮堆積密度為從約0.4 gm/cm3 至約0.9 gm/cm3 。在某些實施方式中，本文所述之乾粉配製物的壓縮堆積密度為從約0.5 gm/cm3 至約0.8 gm/cm3 。
乾粉配製物適當地包含如本文所述之玻璃穩定劑，該玻璃穩定劑包括無定形糖或緩衝液，或使用無定形糖和緩衝液兩者。示例性無定形糖包括本文所述之那些，包括海藻糖、蔗糖、棉子糖、菊糖、葡聚糖和環糊精。適當地，無定形糖以約30%至約70%存在；以及在實施方式中無定形糖係海藻糖，其適當地以約35%-60%、或35%-55%存在。
本文描述了用於在乾粉配製物中使用的示例性緩衝液，並且該等緩衝液包括檸檬酸鹽緩衝液、磷酸鹽緩衝液和酒石酸鹽緩衝液。適當地，緩衝液以約1%至約10%存在，以及在實施方式中緩衝液係檸檬酸鹽緩衝液。在某些實施方式中，檸檬酸鹽緩衝液的pH從約pH 5.5至約pH 6.5，例如約pH 5.5、約pH 5.6、約pH 5.7、約pH 5.8、約pH 5.9、約pH 6.0、約pH 6.1、約pH 6.2、約pH 6.3、約pH 6.4或約pH 6.5。在某些實施方式中，檸檬酸鹽緩衝液的pH為約pH 6.4。
在某些實施方式中，本文所述之乾粉配製物包含表面活性劑。如本文所定義的，「表面活性劑」係指降低顆粒凝聚、顆粒黏附在膠囊、容器壁或可吸入遞送裝置的閥元件的表面的分子或化合物。還發現表面活性劑在配製物重構後減少了亞可見顆粒（SVP）的形成。去除或減少SVP的形成簡化了配製物的分析表徵，因為它去除了在製造期間跟蹤SVP形成的負擔。SVP的分析表徵可能涉及開發正交技術以鑒定和量化用於品質控制目的的SVP。因此，去除SVP或將其降低到可接受的水平去除了製造過程中此表徵步驟的必要性，從而將製造流線化。由於來自SVP的藥物釋放動力學係未知的，去除SVP還可使劑量範圍更加可預測。此外，去除SVP可能增加重構後可用於發揮藥理活性的活性劑的量，這可能意味著不僅可以實現更高的遞送劑量，還可以計算出更準確的遞送劑量預測值。較高的遞送劑量還可以例如藉由潛在地減少為提取藥理益處而必須遞送的劑量的數量或頻率而使患者受益。
「亞可見顆粒」（「SVP」）係從約1 µm至約200 µm的肉眼不可見的顆粒。可以藉由重構乾粉配製物和具有渾濁品質的液體來確定亞可見顆粒的存在。可以使用微流成像等技術來確認實際存在SVP。微流成像（或MFI）結合了微流顯微鏡和高解析度成像顆粒分析以定量SVP計數。MFI可以跨越粒度範圍將該等計數進行分類，例如藉由在約1至約200 µm、約2 µm至約200 µm、約5 µm至約200 µm、約10 µm至約200 µm和約25 µm至約200 µm的尺寸範圍內對顆粒計數進行分類。實例表明，與不含表面活性劑的對照配製物相比，在乾粉配製物中包含表面活性劑減少了每個粒度範圍內SVP的存在（例如圖15A）。因此，在某些實施方式中，本文揭露的乾粉配製物包含表面活性劑，其中在重構後，該配製物中亞可見顆粒的數量減少。在一些實施方式中，與不含表面活性劑的等效配製物相比，亞可見顆粒的數量減少。
在某些實施方式中，將尺寸為約25 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於30,000個顆粒/ml，例如25,000個顆粒/ml、20,000個顆粒/ml、15,000個顆粒/ml、10,000個顆粒/ml或5,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約25 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於1,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約25 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於1,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約25 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於100個顆粒/ml。
在某些實施方式中，將尺寸為約10 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於100,000個顆粒/ml，例如90,000個顆粒/ml、80,000個顆粒/ml、70,000個顆粒/ml、60,000個顆粒/ml、50,000個顆粒/ml、40,000個顆粒/ml或30,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約10 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於10,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約10 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於1,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約10 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於100個顆粒/ml。
在某些實施方式中，將尺寸為約5 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於200,000個顆粒/ml，例如180,000個顆粒/ml、170,000個顆粒/ml、160,000個顆粒/ml、150,000個顆粒/ml或140,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約5 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於50,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約5 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於10,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約5 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於2,000個顆粒/ml。
在某些實施方式中，將尺寸為約2 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於1 x 106 顆粒/ml、例如0.8 x 106 個顆粒/ml、0.7 x 106 個顆粒/ml、0.6 x 106 個顆粒/ml或0.5 x 106 個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約2 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於100,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約2 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於50,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約2 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於10,000個顆粒/ml。
在某些實施方式中，將尺寸為約1 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於2 x 106 個顆粒/ml、例如1.8 x 106 個顆粒/ml、1.7 x 106 個顆粒/ml、1.6 x 106 個顆粒/ml或1.5 x 106 個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約1 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於200,000個顆粒/ml。在某些實施方式中，將尺寸為約1 µm至約200 µm的SVP的數量減少至低於150,000個顆粒/ml。
在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約25 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過2倍，例如超過3倍、超過4倍、超過5倍、超過6倍、超過7倍、超過8倍或超過9倍。在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約25 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過10倍。
在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約10 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過2倍，例如超過3倍、超過4倍、超過5倍、超過6倍、超過7倍、超過8倍或超過9倍。在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約10 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過10倍。
在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約5 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過2倍，例如超過3倍、超過4倍、超過5倍、超過6倍、超過7倍、超過8倍或超過9倍。在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約5 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過10倍。
在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約2 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過2倍，例如超過3倍、超過4倍、超過5倍、超過6倍、超過7倍、超過8倍或超過9倍。在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約2 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過10倍。在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約2 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過100倍。
在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約1 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過2倍，例如超過3倍、超過4倍、超過5倍、超過6倍、超過7倍、超過8倍或超過9倍。在某些實施方式中，與參考對照相比，在重構後將尺寸為約1 µm至約200 µm的SVP的數量減少超過10倍。
在某些實施方式中，參考對照係缺少表面活性劑的等效配製物。在一些實施方式中，將配製物在水中重構。在一些實施方式中，將配製物重構成活性劑濃度為30 mg/ml。在一些實施方式中，將配製物重構成活性劑濃度為2.5 mg/ml。在一些實施方式中，藉由微流成像（MFI）來確定SVP的數量。在某些實施方式中，使用如實例中所定義之方法藉由微流成像（MFI）來確定SVP的數量。
適於在本文所述之乾粉配製物中使用的示例性表面活性劑包括但不限於聚山梨醇酯-20（PS-20）、聚山梨醇酯-40（PS-40）、聚山梨醇酯-60（PS-60）、聚山梨醇酯-80（PS-80）和泊洛沙姆-188。在某些實施方式中，本文所述之配製物包含濃度範圍為適當地從按重量計約0.27%至按重量計約2.7%、適當地從按重量計約0.27%至按重量計約1.33%、適當地從按重量計約0.67%至按重量計約1.33%的PS-80。在某些實施方式中，配製物包含濃度範圍為從按重量計約0.3%至按重量計約3%的PS-80。在某些實施方式中，配製物包含濃度範圍為從按重量計約0.3%至按重量計約2.5%的PS-80。在某些實施方式中，配製物包含濃度範圍為從按重量計約0.5%至按重量計約2.5%的PS-80。在某些實施方式中，配製物包含濃度範圍為從按重量計約0.5%至按重量計約2%的PS-80。在某些實施方式中，配製物包含濃度範圍為從按重量計約0.5%至按重量計約1.5%的PS-80。
在示例性實施方式中，配製物包含濃度範圍為從約0.67%至約1.33%的PS-80。
在示例性實施方式中，配製物包含濃度為約0.7%（w/w）、約0.8%（w/w）、約0.9%（w/w）、約1.0%（w/w）、約1.1%（w/w）、約1.2%（w/w）、或約1.3%（w/w）的PS-80。在一些實施方式中，配製物包含濃度為約1.1%（w/w）的PS-80。
在示例性實施方式中，組成物包含濃度為0.7% ± 0.35（w/w）、約0.8% ± 0.4（w/w）、約0.9% ± 0.45（w/w）、約1.0% ± 0.5（w/w）、約1.1% ± 0.55（w/w）、約1.2% ± 0.6（w/w）、約1.3% ± 0.65（w/w）、約1.4% ± 0.7（w/w）、約1.5% ± 0.75（w/w）、約1.6% ± 0.8（w/w）或約1.7% ± 0.75（w/w）的PS-80。在一些實施方式中，配製物包含濃度為1.1% ± 0.55（w/w）的PS-80。
在某些實施方式中，本文所述之配製物包含濃度範圍為適當地從按重量計約1%至按重量計約10%的泊洛沙姆-188。在示例性實施方式中，配製物包含濃度範圍為從約0.67%至約2.67%的泊洛沙姆-188（P188）。在某些實施方式中，配製物包含濃度範圍為從按重量計約0.3%至按重量計約3%的P188。在某些實施方式中，配製物包含濃度範圍為從按重量計約0.3%至按重量計約2.5%的P188。在某些實施方式中，配製物包含濃度範圍為從按重量計約0.5%至按重量計約2.5%的P188。在某些實施方式中，配製物包含濃度範圍為從按重量計約0.5%至按重量計約2%的P188。在某些實施方式中，配製物包含濃度範圍為從按重量計約0.5%至按重量計約1.5%的P188。
在示例性實施方式中，配製物包含濃度範圍為從約0.67%至約1.67%的P188。
在示例性實施方式中，配製物包含濃度為約0.7%（w/w）、約0.8%（w/w）、約0.9%（w/w）、約1.0%（w/w）、約1.1%（w/w）、約1.2%（w/w）、約1.3%（w/w）、約1.4%（w/w）、約1.5%（w/w）、約1.6%（w/w）或約1.7%（w/w）的P188。
在示例性實施方式中，乾粉配製物包含約39%的海藻糖、約10.5%的白胺酸、約2%的三白胺酸、約8.5%的檸檬酸鹽緩衝液和活性劑。
本文描述了乾粉配製物的微粒的合適尺寸，以及在實施方式中，多種微粒在以氣溶膠形式提供時具有約2 μm至約4 μm的質量中值空氣動力學直徑（MMAD）。微粒的合適比表面積（SSA）描述於本文中，並且包括例如約4-7 m2 /g之比表面積。適當地，微粒具有約1 μm至約5 μm的等效光學體積平均直徑（oVMD）。
在另外的實施方式中，本文提供了製備乾粉配製物之方法。在實施方式中，該方法適當地包括製備液體原料，該液體原料包含白胺酸、約0.1 mg/mL至約6 mg/mL的三白胺酸、活性劑，以及適當地進一步包含玻璃穩定劑。如果希望，乾粉配製物中可以省略如本文所述之玻璃穩定劑。液體原料還可以包含表面活性劑。藉由將該等組分在液體溶劑中組合來製備液體原料，以創建其中每種組分都被溶解的原料。加熱可以根據希望或需要而添加，以增加各種組分的溶解度從而形成液體原料。示例性液體溶劑包括水（包括去離子水）以及醇與水的稀釋溶液。在實施方式中，在添加並溶解原料的其餘組分後，將活性劑適當地添加至液體原料中。
在製備方法的適合的實施方式中，在液體原料中，白胺酸和三白胺酸以白胺酸 : 三白胺酸為約0.1 : 1至約30 : 1的濃度比存在。如本文所述，當製備液體原料時，白胺酸和三白胺酸提供為mg/mL之量。因此，在此類實施方式中，在液體原料的設定體積中約0.1 : 1至約30 : 1的白胺酸 : 三白胺酸的濃度比對應於在液體原料中按重量計的白胺酸 : 三白胺酸比。在另外的實施方式中，在液體原料中，白胺酸和三白胺酸以白胺酸 : 三白胺酸為約0.1 : 1至約25 : 1、約0.5 : 1至約20 : 1、約1 : 1至約20 : 1、約1 : 1至約15 : 1、約1 : 1至約12 : 1、約1 : 1至約10 : 1、約1 : 1至約7 : 1、約1 : 1至約6 : 1、或約1 : 1、約2 : 1、約3 : 1、約4 : 1、約5 : 1、約5 : 1 : 1、約5.2 : 1、約5.25 : 1、約5.3 : 1、約5.4 : 1、約5.5 : 1、約5.75 : 1或約6 : 1的濃度比存在。
然後可以將液體原料霧化。在某些實施方式中，在霧化前對液體原料進行過濾。在某些實施方式中，將液體原料藉由0.22微米過濾器進行過濾。在某些實施方式中，在添加活性劑之前，對包含白胺酸和三白胺酸的液體原料進行過濾。在某些實施方式中，在添加活性劑之前在霧化之後，對液體原料進行過濾。霧化係指適當地使用加壓氣體（例如CO2 或惰性氣體）將液體原料轉化成細小液滴。用於生產霧化液體原料的示例性裝置係本領域已知的，並且包括使用具有所希望的尺寸和流動特徵的多種霧化噴嘴。用於霧化的示例性參數包括出口溫度為約50°C-90°C，適當地約60°C-80°C、或約70°C；原料進料速率為約8-15 ml/min，適當地約9-14 ml/min、約10-13 ml/min、或約12 ml/min；霧化器氣體流速為約9-15 kg/小時（hr.或h），適當地約10-14 kg/hr、約12-14 kg/hr、或約13 kg/hr；以及乾燥氣體流速為約60-100 kg/hr，適當地約60-90 kg/hr、約70-90 kg/hr、或約80 kg/hr。
然後可以將霧化的液體原料乾燥，並且可以適當地在加熱下並與流動空氣組合以輔助乾燥。乾燥的結果產生了多種微粒。典型的乾燥溫度範圍從約50°C-100°C、或約60°C-100°C、或約70°C-90°C；空氣流速可以近似於約10-40 m3 /小時。
本文描述了示例性玻璃穩定劑，包括無定形糖和緩衝液，以及玻璃穩定劑的合適量。此外，全文還提供了白胺酸和三白胺酸的合適量。作為最終品的乾粉配製物應含有所列舉量的白胺酸和三白胺酸（和其他組分），此類量也用於液體原料。霧化後的乾燥過程的結果係液體溶劑都被去除，並且因此組分的原始乾重的總量對應於乾粉配製物中化合物的最終乾重。本文中也描述了示例性活性劑。
本文所述之製備乾粉配製物之方法適當地提供了具有所希望的記錄的物理特徵的微粒，該等物理特徵包括所希望的壓縮堆積密度、比表面積和尺寸。本文描述了示例性尺寸，如示例性SSA，包括小於約10 m2 /g、適當地約4-7 m2 /g之比表面積。適當地，方法提供了多種微粒，該等微粒具有約1 μm至約5 μm的等效光學體積平均直徑（oVMD），如本文所述；當以氣溶膠形式提供時，約2 μm至約4 μm的質量中值空氣動力學直徑（MMAD）；約0.4 g/cm3 -0.8 g/cm3 的壓縮堆積密度。
製備本文所述之乾粉配製物之方法的優點涉及高生產量製程性質。例如，如果將霧化的流速設置為20 ml/min，則確定以下生產量（以克/小時計）。 [表 2 ]：濃度對生產量之影響
如上所述，僅在原料中使用三白胺酸（具有5 mg/mL的最大三白胺酸濃度），達到了25 mg/mL的最大固體載荷（與最大溶解度有關）。這導致整體30 g/小時。僅使用60%的白胺酸（具有20 mg/mL的最大白胺酸濃度），達到了33 mg/mL的最大固體載荷，以及40 g/小時的生產量。還示出了僅使用白胺酸和三白胺酸的另外之結果。相反，對於所檢測的含有白胺酸和三白胺酸兩者的三種原料，僅使用8%的白胺酸和2%的三白胺酸可達到250 mg/mL的最大固體載荷以及300 g/小時的生產量。這係本文揭露之方法和配製物優點的令人驚訝和出乎意料的發現，因為可分散的顆粒可以使用相對少量的白胺酸和三白胺酸來提供，但是還允許大量的生產量。在需要大量配製物的情況下，這種高生產量極大地影響了擴大本文所述之乾粉配製物生產的能力。
本文所述之方法和配製物允許生產膠囊、泡罩包裝等，以及其他用於乾粉配製物的合適容器。此類容器可以生產用於10-200 mg的乾粉末（適當地10-100 mg、或25-75 mg或50 mg）或乾粉配製物。此類容器可以適當地遞送0.1-10 mg的乾粉配製物至患者肺部。
在一些實施方式中，使用本文所述之方法提供了可以降低用於在吸入裝置中使用所需的膠囊總量之乾粉配製物。例如，可以將遞送50-100 mg活性劑所需的體積從兩個較大的00膠囊減少到單個3號膠囊。
本文所述之方法還提供了增加包含多種微粒的乾粉配製物的壓縮堆積密度和比表面積的機制。如全文所述，藉由將白胺酸和三白胺酸摻入乾粉配製物中，可以容易的實現約0.4-1.0 g/cm3 （適當地約0.5-0.8 g/cm3 ）的壓縮堆積密度。另外，也可以實現約5-10 m2 /g（適當地約5 m2 /g至約7 m2 /g）之比表面積。在另外的實施方式中，可以形成在本文所述範圍內的微粒尺寸，包括當以氣溶膠形式提供時，微粒的質量中值空氣動力學直徑（MMAD）為約2 μm至約4 μm。
生產乾粉配製物的氣溶膠形式之方法係本領域已知的，並且包括例如使用吸入器裝置，例如乾粉吸入器（DPI）（例如，PLASTIAPE公司（奧斯納戈（Osnago），義大利）的Monodose RS01 DPI）。本文所述之乾粉配製物可以藉由被動或主動吸入裝置分散到氣流中，並保持懸浮在氣體中持續足夠時間量以使至少一部分微粒被患者吸入，從而使一部分微粒到達肺。
本文還提供了治療哺乳動物患者的醫學病症之方法，該方法包括藉由吸入（包括藉由乾粉吸入器）向患者投與如本文所述之乾粉配製物。
可以使用本文所述之方法治療的醫學病症包括影響神經系統、內分泌系統、肌肉系統、心血管系統、消化系統、呼吸系統（並且尤其是肺）、激素系統、免疫系統、生殖系統等的那些醫學病症。
在實施方式中，本文提供了治療患者的TSLP相關的炎性病症之方法。TSLP相關的炎性病症可能由過敏反應或環境刺激物或刺激劑引起。在一些實施方式中，TSLP相關的炎性病症可能是氣喘、慢性阻塞性肺病、過敏性鼻炎、過敏性鼻竇炎、過敏性結膜炎、特應性皮炎或嗜酸性食道炎。
在一些實施方式中，TSLP相關的炎性病症係氣喘，並且所述治療方法包括經由吸入向患者投與包含治療有效量的抗TSLP抗體或抗體片段變體之乾粉配製物。在某些實施方式中，患者係成人。在某些實施方式中，患者係兒童或青少年。
如本文所述，乾粉配製物適當地包括多種微粒，該等微粒包含：白胺酸；按重量計約1%至約10%的三白胺酸；以及抗胸腺基質淋巴細胞生成素（抗TSLP）抗體或抗體變體，其中該白胺酸和該三白胺酸以白胺酸 : 三白胺酸為約0.1 : 1至約30 : 1的濃度比存在。乾粉配製物可以包含約0.3-1.0 g/cm3 的壓縮堆積密度。全文描述了配製物中包含的示例性組分及其量。
如本文所述，經由吸入遞送抗胸腺基質淋巴細胞生成素（抗TSLP）抗體或抗體變體的能力提供了更適於在初級護理環境中使用的遞送機制。
在治療氣喘之方法的實施方式中，將乾粉配製物頻繁地並以較低的劑量投與，而不是全身性投與抗TSLP藥物。在一些實施方式中，可以每天投與配製物。此類實施方式可以更方便的用於受試者或患者。此外，此類實施方式可以減少經由全身性投與可能發生的副作用。
適當地，用於在治療方法中使用的抗體的抗原結合片段包含 重鏈可變結構域，該重鏈可變結構域包含： 包含SEQ ID NO: 1中所列的胺基酸序列的重鏈CDR1序列； 包含SEQ ID NO: 2中所列的胺基酸序列的重鏈CDR2序列； 包含SEQ ID NO: 3中所列的胺基酸序列的重鏈CDR3序列；以及 輕鏈可變結構域，該輕鏈可變結構域包含： 包含SEQ ID NO: 5中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR1序列； 包含SEQ ID NO: 6中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR2序列；以及 包含SEQ ID NO: 7中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR3序列。
在治療方法的另外的實施方式中，抗原結合片段包含重鏈可變結構域和輕鏈可變結構域，該重鏈可變結構域包含SEQ ID NO: 4，並且該輕鏈可變結構域包含SEQ ID NO: 8。
在一些實施方式中，適於用本發明之配製物治療的氣喘形式包括輕度氣喘、中度氣喘、重度氣喘、非嗜酸性氣喘、低嗜酸性氣喘和高嗜酸性氣喘。在某些實施方式中，本發明之配製物可以用於在治療輕度氣喘中使用。在某些實施方式中，本發明之配製物可以用於在治療中度氣喘中使用。在某些實施方式中，本發明之配製物可以用於在治療重度氣喘中使用。在某些實施方式中，本發明之配製物可以用於在治療非嗜酸性氣喘中使用。在某些實施方式中，本發明之配製物可以用於在治療低嗜酸性氣喘中使用。在某些實施方式中，本發明之配製物可以用於在治療高嗜酸性氣喘中使用。
如本文所用的術語「輕度氣喘」和「中度氣喘」係指全球氣喘防治倡議（GINA）等級為3或更低、適當地GINA等級為2或3的氣喘。GINA等級基於以下標準測量氣喘的嚴重程度（參見「氣喘管理和預防袖珍指南」，全球氣喘防治倡議；2019）。
如本文所用，術語「重度氣喘」係指需要高強度治療（例如，GINA步驟4和步驟5）以維持良好控制的氣喘，或儘管接受高強度治療仍未實現良好控制的氣喘（GINA，全球氣喘管理和預防戰略（Global Strategy for Asthma Management and Prevention），全球氣喘防治倡議（GINA），2012年12月）。術語「重度氣喘」也涵蓋中度-重度氣喘。適於用本文所述之配製物治療的中度-重度氣喘可以是具有一次或多次發作和頻繁症狀的、中等劑量至高劑量ICS : LABA未控制的氣喘。在某些實施方式中，將重度氣喘進一步定義為具有2型炎症的嚴重氣喘，其特徵在於血液嗜酸性粒細胞升高（即，血液嗜酸性粒細胞計數 ≥ 150個細胞/µL）和/或FeNO升高（即FeNO ≥ 20 ppb）。
術語「FENO」係指呼出氣一氧化氮，其係支氣管或氣道炎症的生物標誌。FENO由氣道上皮細胞響應於炎性細胞介素（例如TSLP、IL-4和IL-13）而產生。健康成人的FENO水平範圍為從十億分之2至30（ppb）。用於測量FENO的示例性測定包括受試者藉由NIOX MINO®氣道炎症監測儀吸入肺總量，然後以50 ml/sec呼氣10秒（藉由視覺和聽覺提示進行輔助）。
如本文所用，術語「高嗜酸性氣喘」係指篩選血液嗜酸性粒細胞計數 ≥ 250個細胞/µL的氣喘患者。
特別地，配製物提供了對通常可在初級護理環境中得到控制的中重度氣喘進行治療之可能性。例如，患有全球氣喘防治倡議（GINA）等級為3或更低，適當地GINA等級為2或3的患者。GINA等級基於以下標準測量氣喘的嚴重程度（參見「氣喘管理和預防袖珍指南」，全球氣喘防治倡議；2019）。 日間氣喘症狀每週多於兩次； 由於氣喘導致夜醒； 每週使用氣喘緩解劑（reliever）兩次以上；以及
由於氣喘而活動受限。該等標準的評分為零被認為係「良好控制的」。該等標準的評分為1-2被認為係「部分控制的」。該等標準的評分為3-4被認為係「未控制的」。
在一些實施方式中，配製物提供了對可以在初級護理環境中得到控制的中度-重度氣喘患者或藉由專業護理難以治療的中度-重度氣喘患者進行治療之可能性。例如，配製物可用於治療患有全球氣喘防治倡議（GINA）等級為4-5的中度-重度氣喘患者。適當地，配製物提供了對未控制的中度-重度氣喘進行治療之可能性。適當地，配製物提供了對具有一次或多次發作和頻繁症狀的、中等劑量至高劑量ICS : LABA未控制的中度-重度氣喘進行治療之可能性。 其他示例性實施方式
實施方式1係一種乾粉配製物，該乾粉配製物包含多種微粒，該等微粒包含：白胺酸、按重量計約1%至約10%的三白胺酸、和抗胸腺基質淋巴細胞生成素（TSLP）抗體的抗原結合片段，該抗原結合片段包含：a. 重鏈可變結構域，該重鏈可變結構域包含：包含SEQ ID NO: 1中所列的胺基酸序列的重鏈CDR1序列、包含SEQ ID NO: 2中所列的胺基酸序列的重鏈CDR2序列、和包含SEQ ID NO: 3中所列的胺基酸序列的重鏈CDR3序列，其中重鏈CDR1、2或3中任一個視需要包含單一胺基酸取代，以及b. 重鏈可變結構域，該重鏈可變結構域包含：包含SEQ ID NO: 5中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR1序列、包含SEQ ID NO: 6中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR2序列、和包含SEQ ID NO: 7中所列的胺基酸序列的輕鏈CDR3序列，其中輕鏈CDR 1、2或3中任一個視需要包含單一胺基酸取代，其中該白胺酸和該三白胺酸以白胺酸 : 三白胺酸為約0.1 : 1至約30 : 1的濃度比存在。
實施方式2係如實施方式1所述之乾粉配製物，其中該乾粉配製物具有約0.4-1.0 g/cm3的壓縮堆積密度。
實施方式3係如任一前述實施方式所述之乾粉配製物，該乾粉配製物進一步包含玻璃穩定劑。
實施方式4係如實施方式3所述之乾粉配製物，其中該玻璃穩定劑係無定形糖或緩衝液。
實施方式5係如實施方式3所述之乾粉配製物，其中該玻璃穩定劑包含無定形糖和緩衝液。
實施方式6係如實施方式4或實施方式5所述之乾粉配製物，其中該無定形糖選自由以下組成之群組：海藻糖、蔗糖、棉子糖、菊糖、葡聚糖、甘露醇、和環糊精。
實施方式7係如實施方式4-6中任一項所述之乾粉配製物，其中該緩衝液選自由以下組成之群組：檸檬酸鹽緩衝液、磷酸鹽緩衝液、組胺酸緩衝液、甘胺酸緩衝液、乙酸鹽緩衝液和酒石酸鹽緩衝液。
實施方式8係如實施方式4-7中任一項所述之乾粉配製物，其中該無定形糖以按重量計約30%至約70%存在。
實施方式9係如實施方式4-8中任一項所述之乾粉配製物，其中該無定形糖係海藻糖。
實施方式10係如實施方式9所述之乾粉配製物，其中該海藻糖以按重量計約30%-65%存在。
實施方式11係如實施方式4-10中任一項所述之乾粉配製物，其中該緩衝液以按重量計約1%至約10%存在。
實施方式12係如實施方式1-11中任一項所述之乾粉配製物，其中白胺酸 : 三白胺酸的該濃度比為從約1 : 1至約12 : 1。
實施方式13係如實施方式1-12中任一項所述之乾粉配製物，其中白胺酸 : 三白胺酸的該濃度比為從約1 : 1至約7 : 1。
實施方式14係如實施方式1-13中任一項所述之乾粉配製物，其中白胺酸 : 三白胺酸的該濃度比為約5.25 : 1。
實施方式15係如實施方式1-14中任一項所述之乾粉配製物，該乾粉配製物包含按重量計約1%至約7%之三白胺酸。
實施方式16係如實施方式1-15中任一項所述之乾粉配製物，該乾粉配製物包含按重量計約8%至約11%的白胺酸和按重量計約2%至約4%之三白胺酸。
實施方式17係如實施方式1-16中任一項所述之乾粉配製物，該乾粉配製物包含按重量計約10.5%的白胺酸和按重量計約2%之三白胺酸。
實施方式18係如實施方式1-17中任一項所述之乾粉配製物，該乾粉配製物進一步包含表面活性劑，其中該表面活性劑視需要選自聚山梨醇酯-20（PS-20）、聚山梨醇酯-40（PS-40）、聚山梨醇酯-60（PS-60）、聚山梨醇酯-80（PS-80）和泊洛沙姆-188。
實施方式19係如實施方式18所述之乾粉配製物，其中該表面活性劑係PS-80，其中視需要PS-80以從按重量計約0.27%至按重量計約2.7%的濃度範圍存在。
實施方式20係如實施方式18所述之乾粉配製物，其中該表面活性劑係泊洛沙姆-188，其中視需要泊洛沙姆-188以從按重量計約1%至按重量計約10%的濃度範圍存在。
實施方式21係如實施方式1-20中任一項所述之乾粉配製物，其中多種微粒具有約1 µm至約5 µm的等效光學體積平均直徑（oVMD）。
實施方式22係如實施方式1-21中任一項所述之乾粉配製物，其中多種微粒在以氣溶膠形式提供時具有約2 µm至約4 µm的質量中值空氣動力學直徑（MMAD）。
實施方式23係如實施方式2-22中任一項所述之乾粉配製物，其中該壓縮堆積密度為約0.5 g/cm3至約0.8 g/cm3。
實施方式24係如實施方式2-23中任一項所述之乾粉配製物，該乾粉配製物包含約39%的海藻糖、約10.5%的白胺酸、約2%的三白胺酸和約8.5%的檸檬酸鹽緩衝液。
實施方式25係如實施方式1-24中任一項所述之乾粉配製物，其中該多種微粒具有小於約10 m2/g之比表面積。
實施方式26係如實施方式25所述之乾粉配製物，其中該多種微粒具有從約4 mg2/g至約7 m2/g之比表面積。
實施方式27係如任一前述實施方式所述之乾粉配製物，其中該重鏈可變結構域CDR1包含SEQ ID NO: 1中所列的胺基酸序列，該重鏈可變結構域CDR2包含SEQ ID NO: 2中所列的胺基酸序列，該重鏈可變結構域CDR3包含SEQ ID NO: 3中所列的胺基酸序列，該輕鏈可變結構域CDR1包含SEQ ID NO: 5中所列的胺基酸序列，該輕鏈可變結構域CDR2包含SEQ ID NO: 6中所列的胺基酸序列，以及該輕鏈可變結構域CDR3包含SEQ ID NO: 7中所列的胺基酸序列。
實施方式28係如實施方式27所述之乾粉配製物，其中該抗原結合片段包含重鏈可變結構域和輕鏈可變結構域，該重鏈可變結構域包含SEQ ID NO: 4，並且該輕鏈可變結構域包含SEQ ID NO: 8。
實施方式29係如任一前述實施方式所述之乾粉配製物，其中該抗原結合片段選自Fab、Fab'、F(ab')2、scFv、微型抗體、或雙抗體。
實施方式30係如實施方式29所述之乾粉配製物，其中該抗原結合片段係Fab。
實施方式31係如實施方式30所述之乾粉配製物，其中該Fab係人的或人源化的。
實施方式32係如任一前述實施方式所述之乾粉配製物，其中衍生抗原結合片段的抗TSLP抗體係IgG1。
實施方式33係一種治療患者的氣喘之方法，該方法包括經由吸入投與如實施方式1-29中任一項所述之乾粉配製物。
實施方式34係如實施方式33所述之方法，其中該氣喘係輕度氣喘。
實施方式35係如實施方式33所述之方法，其中該氣喘係中度氣喘。
實施方式36係如實施方式33所述之方法，其中該氣喘係重度氣喘。
實施方式37係如實施方式33所述之方法，其中該氣喘係嗜酸性或非嗜酸性氣喘。
實施方式38係如實施方式33所述之方法，其中該氣喘係低嗜酸性氣喘。
實施方式39係如實施方式33-38中任一項所述之方法，其中該氣喘的特徵在於少於三個以下情況：日間氣喘症狀每週多於兩次；由於氣喘導致夜醒；每週使用氣喘緩解劑兩次以上；以及由於氣喘而活動受限。
實施方式40係如實施方式1-32中任一項所述之乾粉配製物，用於在治療方法中使用，其中該配製物藉由吸入投與。
實施方式41係如實施方式37所述在治療氣喘之方法中使用之乾粉配製物。
實施方式42係如實施方式38所述使用的乾粉配製物，其中該氣喘係輕度氣喘。
實施方式43係如實施方式38所述使用的乾粉配製物，其中該氣喘係中度氣喘。
實施方式44係如實施方式38所述使用的乾粉配製物，其中該氣喘係重度氣喘。
實施方式45係如實施方式38所述使用的乾粉配製物，其中該氣喘係嗜酸性氣喘或非嗜酸性氣喘。
實施方式46係如實施方式38所述使用的乾粉配製物，其中該氣喘係低嗜酸性氣喘。
實施方式47係如實施方式38所述使用的乾粉配製物，其中該氣喘的特徵在於少於三個以下情況：日間氣喘症狀每週多於兩次；由於氣喘導致夜醒；每週使用氣喘緩解劑兩次以上；以及由於氣喘而活動受限。實例 實例 1- 抗 TSLP FAB 的產生
使用標準分子生物學和選殖技術，產生了衍生自WO 2009/035577（其藉由援引以其全文併入本文）中揭露的抗TSLP單株抗體「A5」的一系列抗體結合片段（Fab）。簡而言之，將A5的CDR序列選殖到IgG1 Fab支架中，從而產生了本文稱為Fab1 或Fab1的Fab片段。Fab1 的VH和VL序列分別揭露為SEQ ID NO: 4和8。
還從在CDR區中包含突變的Fab1 產生了變體Fab2-9 。表3中示出了Fab 1-9中每一個的VH和VL CDR的組合。 [表 3 ]抗 TSLP Fab1-9 的 CDR 序列
   VH CDR1 、 2 和 3 VL CDR1 、 2 和 3
Fab1 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 5、6和7
Fab2 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 11、6和7
Fab3 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 14、6和7
Fab4 SEQ ID NO: 1、15和3 SEQ ID NO: 5、6和7
Fab5 SEQ ID NO: 1、17和3 SEQ ID NO: 5、6和7
Fab6 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 19、6和7
Fab7 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 19、6和7
Fab8 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 5、6和23
Fab9 SEQ ID NO: 1、2和3 SEQ ID NO: 5、6和25
分析了Fab1 的純度、穩定性和聚集傾向。簡而言之，在30 mM檸檬酸鈉、105 mM海藻糖（pH 6.0）中配製50 mg/mL Fab1 。將樣本放置在40°C和5°C的穩定箱中持續不同的時間段。在不同的時間點，藉由相關的分析技術（例如高性能尺寸排阻層析（HP-SEC））測試樣本。使用來自安捷倫科技公司（Agilent Technologies）（美國加利福尼亞州聖克拉拉）的具有溫度控制自動進樣器、DAD或VWD、以及安捷倫化學工作站（Agilent ChemStation）軟體/OpenLAB ECM CDS的Agilent HPLC系統。還使用了來自東曹生命科學公司（Tosoh Bioscience）（格裡斯海姆（Griesheim），德國）的保護柱：TSKgel柱（7.9 mm ID，目錄號08543）和TSK-Gel G3000SWxl柱（5 µm，250 Å和7.8 x 300 mm，目錄號08541）。所使用的流動相係0.1 M無水磷酸氫二鈉、0.1 M硫酸鈉（pH 6.8）。表4中示出了穩定性和聚集分析之結果。 [表 4 ]Fab1 的穩定性和聚集
5 °C 40 °C
月 % 單體 聚集體 % 片段 % 單體 % 聚集體 % 片段 %
0.0 99.57 0.43 0.00 99.57 0.43 0.00
0.2 99.56 0.44 0.00
0.5 99.51 0.49 0.00 99.31 0.55 0.14
0.7 99.25 0.61 0.14
1 99.48 0.52 0.00 99.13 0.65 0.21
2 99.49 0.51 0.00
3 99.47 0.53 0.00
速率（ m-1 ） -0.03 0.03 0.00 -0.51 0.27 0.25
RSQ 0.6504 0.6504 N/A 0.9296 0.9447 0.8943
還藉由差示掃描量熱法（DSC）測試了Fab1 的穩定性。使用來自瑪律文帕納科公司（Malvern Panalytical）（瑪律文（Malvern），英國）的MicroCal毛細管柱VP DSC進行測試，並使用Origin 7.0軟體（北安普敦，美國麻塞諸塞州）進行數據分析。用配製物緩衝液（30 mM檸檬酸鈉、105 mM海藻糖，pH 6.0）將Fab1 樣本稀釋至5 mg/mL。對於每個獨立運行，藉由自動進樣器將500 µL稀釋的Fab1 樣本和參考（配製物緩衝液）注入DSC樣本和參考細胞中。將溶液在95°C/小時的掃描速度下從25°C加熱到100°C。還獲得了緩衝液（填充在樣本和參考細胞中）掃描作為空白，用於樣本的基線校正。
還使用iCE3分析儀藉由成像等電聚焦（IEF）來確定Fab1 的電荷分佈。iCE3毛細管IEF分析儀、PrinCE MicroInjector自動進樣器，MicroInjection塗層轉移毛細管柱由Protein Simple公司購買和提供。使用帶有碳氟化合物塗層的毛細管柱和內置電解質罐的FC柱（部件號101701，Protein Simple公司）來分析樣本。在整個分析中，將自動進樣器保持在4°C。將Fab1的pI範圍確定為從8.35至8.80。實例 2-FAB1 與具有 PM 親和力的人和食蟹猴 TSLP 結合 藉由BIAcore確定Fab1 與TSLP結合的親和力
使用Biacore 8K SPR儀器（通用醫療集團（GE Healthcare），小查爾方特（Little Chalfont），英國巴克斯）確定Fab1 對表現重組哺乳動物細胞的人和食蟹猴TSLP的特異性和親和力。
S系列C1生物傳感晶片、胺偶聯套組（kit）、基於hepes緩衝鹽水的緩衝液和再生緩衝液均獲得自通用醫療集團，並根據製造商的說明書來使用。使用凍乾的鏈黴親和素（用D-PBS重構）來製備鏈黴親和素表面。簡而言之，將鏈黴親和素在10 mM乙酸鈉（pH 4.5）中稀釋至4 μg mL-1，並藉由標準胺偶聯方法共價固定至S系列C1生物傳感晶片的三個流通池表面。實現了170個響應單位（RU）的最終鏈黴親和素表面。胺偶聯試劑還用於製備對照空白表面（沒有固定的鏈黴親和素），以用作每個流通池內的參考表面。然後將N-末端標記的生物素化TSLP（人和食蟹猴）滴定到每個鏈黴親和素表面上，以使 ＜ 100 RU的Fab1在飽和狀態下結合（Rmax）。低水平的分析物結合確保了質量轉移誘導的假像最小化，尤其是與在動力學測量步驟期間使用的相對較快的50 μL min-1測定流速組合時。以50 μL min-1測定流速注入單體化（monomerized）Fab1的稀釋液（多循環動力學）（在HBS-EP + 緩衝液中2倍稀釋，範圍在1.25至20 nM之間），締合2分鐘，並且解離10分鐘。在整個實驗中，在相同條件下進行多次僅緩衝液注射，以允許對最終傳感圖集進行雙重參考處理。
晶片表面藉由流動兩個30秒的10 mM甘胺酸（pH 1.7）的脈衝完全再生。使用1 : 1朗繆爾（Langmuir）模型確定結合親和力和動力學。
表5中所示的結果證明，Fab1 以相似親和力（2倍以內；分別為46 pM和88 pM）與固定的人和食蟹猴TSLP結合。 [表 5 ]使用 BIAcore 的 Fab1 對人和食蟹猴 TSLP 的親和力
分析物 ka （ M-1 s-1 ） kd （ s-1 ） KD （ pM ）
人TSLP 2.39 E6 1.11 E-4 46.3
食蟹猴TSLP 1.75 E6 1.55 E-4 88.4
藉由動力學排除測定（KinExA）確定結合親和力。
還使用KinExA 3200儀器（美國愛達荷州博伊西的薩皮蒂尼儀器公司（Sapidyne Instruments））來確定Fab1 對人和食蟹猴TSLP的溶液相結合親和力（KD ），並使用KinExA Pro軟體版本4.1.11處理所得數據。已經綜述了KinExA方法（Darling和Brault，2004年）。
將Fab1 與不同濃度的每種人和食蟹猴TSLP預混合，直到達到平衡（使用2倍系列稀釋法來製備至少12個濃度的每種人和食蟹猴TSLP）。然後使用KinExA儀器，藉由用人TSLP包被的珠粒捕獲游離Fab、洗去未結合的物質、並且用商業的物種特異性抗體（Alexa Fluor 647標記的小鼠抗人重鏈和輕鏈特異性抗體（傑克遜免疫研究公司（Jackson Immunoresearch）209-605-088））來螢光檢測結合的Fab1 ，從而測量游離Fab1 之量。藉由總體1 : 1擬合將Fab1 對人TSLP的KD 提取到三個數據集，這三個數據集衍生自人TSLP滴定成1000 pM（實心菱形）、500 pM（倒置實心三角形）或40 pM（空心正方形）固定Fab1 濃度溶液（圖1）。藉由總體1 : 1擬合將Fab1 對食蟹猴TSLP的KD 提取到兩個數據集，這兩個數據集衍生自食蟹猴TSLP滴定成1000 pM（實心菱形）或40 pM（空心正方形）固定Fab1 濃度溶液（圖2）。
將在每種人和食蟹猴TSLP濃度下檢測到的游離Fab1 的量對TSLP的滴定濃度作圖（分別為圖1和2）。KinExA軟體用於計算平衡解離常數（KD）。表6中所示的結果證明，在游離溶液中Fab1 與人TSLP結合的親和力比其與食蟹猴TSLP結合的親和力高1.7倍。 [表 6 ]使用 KinExA 的 Fab1 對人和食蟹猴 TSLP 的可溶相親和力
配位基 親和力（ KD ） pM
人TSLP 8.0（95%置信區間6.27-10.01 pM）
食蟹猴TSLP 13.6（95%置信區間9.07-19.22 pM）
實例 3-FAB1 和特折魯單抗以相似結合特徵與 TSLP 結合
將Fab1 與人TSLP的結合特徵直接與特折魯單抗進行比較。特折魯單抗係人免疫球蛋白G2（lgG2）單株抗體（mAb），可與TSLP結合，從而阻止其與TSLP受體複合物的相互作用。在輕度特應性氣喘患者中進行的概念驗證研究表明，特折魯單抗在吸入過敏原激發後抑制了早期和晚期氣喘響應，並遏制了Th2炎症的生物標誌。目前臨床上正在對特折魯單抗進行研究，以作為治療重度氣喘的專業護理治療。
使用基於均相螢光共振能量轉移（FRET）均相時間分辨螢光（HTRF®，Cis生物國際公司（Cisbio International））的TSLP : mAb結合測定來測定Fab1 的體外結合效力。鏈黴親和素穴狀化合物用於檢測生物素化的TSLP。簡而言之，將未標記的Fab1 的樣本滴定到HTRF測定中，以與DyLight標記的特折魯單抗競爭與生物素化的His-Avi人TSLP的結合。還使用未標記的特折魯單抗和DyLight標記的特折魯單抗（作為陽性對照）進行了競爭測定。
結果表明，Fab1 與特折魯單抗競爭與人TSLP的結合，並以與特折魯單抗相似的效力與人TSLP結合（IC50: Fab1 -0.38 nM；特折魯單抗-0.23 nM-圖3）。還使用Fab2-9 進行了HTRF測定，其表明該等Fab中的每一個也都與特折魯單抗競爭與人TSLP的結合，並以與特折魯單抗相似的效力與人TSLP結合（表7）。 [表 7 ]如藉由 HTRF 測定所確定的 Fab2-9 的 IC50
IC50 nM
Fab2 0.29
Fab3 0.24
Fab4 0.36
Fab5 0.42
Fab6 0.32
Fab7 0.24
Fab8 0.29
Fab9 0.29
實例 4- 在外周血單核細胞（ PBMC ）測定中 Fab1 中和 TSLP 活性
接下來，藉由在用Fab1 治療後測量TSLP誘導的從PBMC的CCL17釋放來確定Fab1 與TSLP的結合在原代細胞測定中是否具有功能性阻斷活性。
根據英國劍橋米迪繆尼有限公司（MedImmune）建立的獻血者程式，從健康供體獲取血液。藉由標準程序使用ficoll梯度分離外周血單核細胞。簡而言之，將20 ml用PBS稀釋的血液（10 ml血液 : 30 ml PBS）鋪層在15 ml ficoll上。將管在室溫下以400 g旋轉40 min，無制動。收集PBMC層，並用50 ml PBS洗滌細胞兩次。將PBMC用血球計數器和錐蟲藍進行計數以排除死細胞，然後重懸於培養基（含10%胎牛血清和1%青黴素/鏈黴素的RPMI）中，然後鋪板到96孔板中。在TSLP結合抗體片段Fab1 的存在下，用TSLP（0.5 ng/ml）刺激細胞48 h。還使用TSLP結合抗體特折魯單抗（作為陽性對照）進行測定。48 h後，根據製造商的方案，去除上清液並使用R & D duoset ELISA測定CCL17的產生。在三個獨立的實驗中使用六個供體進行實驗。
結果表明，Fab1 抑制了從PBMC產生CCL17，其中IC50 為1.39 nM（圖4）。除了使用Fab1 、Fab2 和Fab3 （包含表3中概述的可變重鏈序列和可變輕鏈序列）之外，還重複進行測定，並且獲得了相似的結果（圖5）。實例 5- 在食蟹猴吸入 FAB1 後確定最大耐受劑量和藥物動力學
本研究的目的是確定食蟹猴在經面罩的吸入暴露後霧化的Fab1 的最大耐受劑量（MTD）或最大可行劑量（MFD）和藥物動力學（PK）。
雌性食蟹猴接受單次8 min和20 min的Fab1 吸入（組1和組2，每組三隻動物）。基於25%的肺沈積，組1和組2中遞送到肺的劑量為1和2 mg/kg。組3係重複劑量遞增。一隻雌性和一隻雄性食蟹猴的按如下進行治療：前2天每天吸入8 min，然後每天吸入20 min持續2天，每天吸入60 min持續3天。收集連續血液樣本用於Fab1 血清PK和尿素濃度。收集支氣管肺泡灌洗（BAL）樣本用於Fab1 PK和尿素濃度。使用尿素濃度作為稀釋標誌從BAL計算上皮層液體（ELF）。將混合免疫親和性LC-MS/MS方法用於確定血清和BAL樣本基質中的Fab1 濃度。定量的下限係血清中4 ng/mL和BAL中10 ng/mL。使用Phoenix WinNonlin（7.0版，塞塔拉公司（Certara, L.P.），密蘇里州聖路易斯）對單個血漿PK數據進行非隔室（NCA）分析。
吸入Fab1 後，血清PK、BAL和ELF濃度隨劑量而增加，並且Fab1 濃度具有高度可變性（圖6A-6C）。Fab1的平均血清末端半衰期範圍在9.75至13.6 h之間。在吸入後2至4 hr的中值Tmax 時達到血清Cmax 。吸入後ELF的濃度遠高於血清（＞ 2000倍高），這表明吸入劑量後Fab1 在血清中的分佈低。實例 6 ：評估包含白胺酸和三白胺酸的噴霧乾燥的配製物的物理特徵
以下方法評估了三白胺酸和白胺酸濃度比對顆粒特性的影響。
在10%的總原料固體濃度下，使用相同的製程參數，將不同的三白胺酸、白胺酸和海藻糖（TLT）wt%的總計24種粉末在試驗性規模噴霧乾燥器上進行噴霧乾燥。由於原料在總固體濃度為10%（100 mg/mL）下進行製備，本研究中所有wt%值也與濃度值（mg/mL）相同。表8中示出了每種顆粒賦形劑的濃度值的範圍。 [表 8 ]：顆粒組分組成範圍
組分 最小值 最大值
三白胺酸 0.71 mg/mL 5.72 mg/mL
白胺酸 0.62 mg/mL 19.94 mg/mL
海藻糖 65.84 mg/mL 90.16 mg/mL
檸檬酸三鈉 8.5 mg/mL 8.5 mg/mL
藉由將賦形劑溶解在水中來製備每種原料（表9）。一旦將所有賦形劑完全溶解，則使用以下製程參數將原料進行噴霧乾燥：出口溫度，70°C原料進料速率，12 ml/min；霧化器氣流，13 kg/hr；以及乾燥氣流，80 kg/hr。選擇參數以獲得用於吸入的乾粉配製物的靶顆粒和氣溶膠特性。以18 g的批量大小製造24種配製物中的每一種，以提供足夠的粉末用於表徵和產品性能評估。將批次隨機化並在兩天內生產。 [表 9 ]：配製物 1-24 的原料濃度
運行 三白胺酸濃度 白胺酸濃度 海藻糖濃度 檸檬酸三鈉濃度 白胺酸 / 三白胺酸的濃度比
mg/mL mg/mL mg/mL mg/mL
1 1.43 13.08 76.99 8.5 9.1
2 0.71 0.62 90.16 8.5 0.9
3 0.71 4.98 85.80 8.5 7.0
4 0.71 19.94 70.85 8.5 28.1
5 1.43 16.20 73.87 8.5 11.3
6 2.86 14.95 73.69 8.5 5.2
7 2.86 9.97 78.67 8.5 3.5
8 2.86 19.94 68.70 8.5 7.0
9 2.86 4.36 84.28 8.5 1.5
10 5.72 19.94 65.84 8.5 3.5
11 0.71 15.58 75.21 8.5 21.9
12 5.72 15.58 70.20 8.5 2.7
13 5.00 11.84 74.66 8.5 2.4
14 0.71 7.48 83.31 8.5 10.5
15 2.86 0.62 88.02 8.5 0.2
16 3.57 18.07 69.86 8.5 5.1
17 5.72 0.62 85.16 8.5 0.1
18 5.72 6.23 79.55 8.5 1.1
19 1.43 11.22 78.85 8.5 7.0
20 0.71 9.97 80.82 8.5 14.0
21 4.29 3.12 84.10 8.5 0.7
22 4.29 16.82 70.39 8.5 3.9
23 5.72 9.97 75.81 8.5 1.7
24 3.57 9.97 77.96 8.5 2.8
測試了所有配製物的以下物理粉末特徵 [表 10 ]：分析的顆粒參數
分析/DOE輸出 儀器
殘餘水分含量 烘箱KF
初級粒度分佈 Sympatec R
玻璃化轉變溫度（Tg） DSC
壓縮堆積密度1 GeoPyc
SEM視覺形態（定性） SEM
比表面積 BET
結晶度（定性） XRPD
顆粒上賦形劑表面覆蓋度 ToF-SIMS
1 壓縮力為300,000 N/m2 ，或者如果使用12.7 mm樣本室，則為38N。
使用GeoPyc®模型1360密度分析儀（佐治亞州諾克羅斯市的微粒學公司（Micromeritics，Norcross，GA））來測量粉末的壓縮堆積密度（CBD）。在轉移到已用氮氣吹掃的密度分析儀樣本室之前，應在低濕度環境（＜ 5% RH）中製備粉末樣本。記錄粉末樣本的淨重，然後藉由柱塞以每秒300個固結步驟的速率向樣本施加12 N之壓縮力。將每個固結步驟中柱塞行進的直線距離轉換為粉末樣本的體積位移。然後，將來自每個固結步驟的測量平均值轉換為計算的堆積密度值，以g/cm3 表現。
結果表明，發現白胺酸和三白胺酸的含量對顆粒特性有顯著影響。三白胺酸被認定為具有最大影響的主要因素，而白胺酸被認定為也具有顯著影響的次要因素。結果總結於表11中。 [表 11 ]：顆粒表徵的結果
分析/DOE輸出 影響
殘餘水分含量 降低水分含量與增加白胺酸含量相關（參見圖 14 ）
初級粒度分佈 未觀察到與白胺酸或三白胺酸相關的趨勢
玻璃化轉變溫度（Tg） 未觀察到與白胺酸或三白胺酸相關的趨勢
壓縮堆積密度1 與三白胺酸主要負相關；與白胺酸次要負相關。cBD在0.45至0.85 g/cm3 之間（圖 8A ）
SEM視覺形態 與三白胺酸和表面粗糙度/皺褶度正相關（圖 11A-11D ）
比表面積 與三白胺酸主要正相關；與白胺酸次要正相關配製物的SSA從2.5至6.5 m2 /g（圖 9 ）
結晶度 較高的白胺酸含量與較低的三白胺酸含量組合實現了更高的結晶度
賦形劑顆粒表面覆蓋度 隨著三白胺酸和白胺酸的wt%的增加獲得更大的表面覆蓋度（高於1.4 wt%而獲得50%的三白胺酸的顆粒覆蓋度）
1 壓縮力為300,000 N/m2 ，或者如果使用12.7 mm樣本室，則為38N。實例 7 - 白胺酸 / 三白胺酸配製物的氣溶膠性能特徵
以下實例在乾粉吸入器裝置中評估了包含白胺酸和三白胺酸的配製物的氣溶膠性能。對表4中列出的24種配製物中的20種測試了表7中列出的氣溶膠性能輸出。使用Monodose RS01裝置（3號膠囊）完成所有產品性能表徵。以60 L/min的流速進行新一代撞擊器（NGI）分析。
根據USP ＜601＞進行級聯撞擊測試，以從乾粉吸入器裝置遞送時測量噴霧乾燥的配製物的氣溶膠性能。所使用的級聯撞擊器設備係新一代撞擊器（NGI；USP41，第＜601＞章）。對於在該等實例中進行的氣溶膠測量，將含有噴霧乾燥的粉末配製物的一個3號HPMC膠囊從乾粉吸入器裝置中分散出來，並按照USP方法學在60 L/min的抽真空下遞送到NGI中。回收NGI每個階段的樣本，並藉由280 nm的UV吸收來測定蛋白質含量。由該等測量計算出的主要氣溶膠性能參數為：a) 細顆粒級分 ＜ 5 µm（FPF ＜ 5 µm），定義為從裝置射出的粉末級分的空氣動力學粒徑測量為 ＜ 5 µm；以及b) 質量中值空氣動力學直徑MMAD。 [表 12 ]：氣溶膠表徵
分析/DOE輸出 使用的儀器/技術
平均質量空氣動力學直徑（MMAD） A. NGI
裝置沈積% B. NGI
% FPF ＜ 5um C. NGI
氣溶膠分析的結果總結在表13中。 [表 13 ]：氣溶膠表徵的結果
分析/DOE輸出 影響
D. MMAD（質量中值空氣動力學直徑） 與三白胺酸強負相關。實現了MMAD值的範圍從1.75至3.25 µm（圖 12 ）。
E. 裝置沈積% 與三白胺酸逐步相關。通常，三白胺酸wt%高於3%導致裝置沈積減少（圖 13 ）。
F. % FPF（細顆粒級分）＜ 5 um 與三白胺酸正相關 與白胺酸負相關。所有測試的20種配製物的FPF均 ＞ 60%，這表明性能良好（圖 14 ）。
實例 8- 產生包含抗 TSLP 抗體結合片段（ Fab ）的白胺酸 / 三白胺酸的可吸入配製物
測試了包含不同Fab的另一種配製物的特徵。使用了抗TSLP Fab，其衍生自特異性結合TSLP（胸腺基質淋巴細胞生成素）的人IgG1單株抗體（參見本文提供的SEQ ID NO: 1-8中所列的序列）。產生包含表14中概述的質量濃度的不同配製物。 [表 14 ]：噴霧乾燥的含有抗 TSLP Fab 的配製物的組成
配製物 抗TSLP Fab [% w/w] 海藻糖 [% w/w] 白胺酸 [% w/w] 三白胺酸 [% w/w] 檸檬酸鹽（pH 6.0） [% w/w]
#1 1 78 10.5 2 8.5
#2 12 67 10.5 2 8.5
#3 40 39 10.5 2 8.5
首先在包含105 mM海藻糖、30 mM檸檬酸鹽（pH 6.0）的液體緩衝液中接收抗TSLP Fab。將白胺酸、三白胺酸、海藻糖和檸檬酸鹽溶解在單獨的水溶液中，然後將其添加到抗TSLP Fab溶液中以產生大量液體原料溶液用於噴霧乾燥。表15總結了為了獲得靶粉末配製物組成物而製備的原料組成物。然後使用表16中列出的製程參數將液體原料溶液進行噴霧乾燥。選擇參數以獲得用於吸入的乾粉配製物的靶顆粒和氣溶膠特性。 [表 15 ]用於噴霧乾燥的液體原料的組成
   配製物#1 配製物#2 配製物#3
抗TSLP Fab[mg/mL] 0.75 9.0 24
海藻糖 [mg/mL] 58.5 50.3 23.4
白胺酸 [mg/mL] 7.9 7.9 6.3
三白胺酸 [mg/mL] 1.5 1.5 1.2
檸檬酸鹽pH 6.0 [mg/mL] 6.4 6.4 5.1
總原料濃度 [mg/mL] 75 75 60
[表 16 ]：關鍵噴霧乾燥製程參數
   配製物#1 配製物#2 配製物#3
出口溫度（°C） 70 70 70
原料進料速率（mL/min） 20 17 3
霧化器氣流（kg/h） 13 13 2.1
乾燥氣流（kg/hr） 155 155 59.5
表17總結了噴霧乾燥配製物的粉末和氣溶膠性能表徵之結果。對於氣溶膠性能測量，用填充在3號HPMC膠囊中並從乾粉吸入器裝置分散的20 mg噴霧乾燥的粉末來測試所有三種配製物。 [表 17 ]噴霧乾燥的含有抗 TSLP Fab 的配製物的粉末和氣溶膠特性
   配製物#1 1% w/w抗TSLP Fab 配製物#2 12% w/w抗TSLP Fab 配製物#3 40% w/w抗TSLP Fab
oVMD [µm]（n = 2） 1.5（d50） 3.5（d90） 1.5（d50） 3.5（d90） 1.9（d50） 4.1（d90）
cBD [g/cm3 ] 0.72 0.70 0.58
SSA [m2 /g] 3.5 4.12 4.6
FPM＜ 5 µm [mg Fab1 ]（n = 3） 0.17 1.9 5.9
FPF＜ 5 µm [%]（n = 3） 95.1 94.3 85.4
MMAD（n = 3） 2.3 2.2 2.7
特別值得注意的是，由於粉末的高堆積密度，成功將50 mg的配製物#3填充到單個3號HPMC膠囊中。高堆積密度（cBD）能夠實現從單個膠囊遞送非常高的有效負載（FPM ＜ 5 µm時約為14 mg，FPF為82%，MMAD為2.4 µm）。
另外，配製物#3顯示出與抗IL-4 Fab配製物#2（cBD = 0.59 g/cm3，SSA = 4.5 m2/g）相似的cBD（0.58 g/cm3）和SSA（4.6 m2/g），這表明粉末特性在包含不同活性成分的藥物配製物之間轉換。實例 9- 三個批量大小的噴霧乾燥的抗 TSLP 配製物的粉末和氣溶膠特性
此實例使用較大的批量大小提供了對抗TSLP Fab白胺酸/三白胺酸配製物的粉末和氣溶膠特性的分析，從而能夠進行非GLP和GLP吸入毒理學研究。擴大規模需要使用替代性規模噴霧乾燥器設備，並調整至噴霧乾燥製程參數，以解決流經系統的熱量和質量的增加以及延長製程運行的需求。
以增加的批量大小製造了三個批次的噴霧乾燥的抗TSLP Fab配製物。該等批次包含：抗TSLP Fab 40% w/w、海藻糖39% w/w、白胺酸10.5% w/w、三白胺酸2% w/w和檸檬酸鹽（pH 6.0）8.5% w/w。表18中示出了每個批次選擇的製程參數。 [表 18 ]批量大小增加的三個抗 TSLP Fab 配製物批次的噴霧乾燥器製程參數
   第1批    第2批    第3批   
原料濃度[mg/mL] 60 75 75
出口溫度（°C） 70 70 70
原料進料速率（mL/min） 3 5 12
霧化器氣流（kg/h） 2.1 2.1 13.3
乾燥氣流（kg/hr） 59.5 59.5 155
總批量大小* 8.5 g 348 g 1.2 kg
噴霧乾燥器 實驗室規模 實驗室規模 中級規模
生產的天/小時 1天/1.1 h 2天/15.9 h 2天/22.4 h
*加工的粉末重量。
用3號HPMC膠囊中的50 mg的粉末填充質量進行第1批的氣溶膠性能測試，而用20 mg填充質量來測試第2批和第3批。儘管隨著批量大小從8.5 g批量大小增加到1.2 kg，oVMD略有增加，但實現了在0.45至0.85 g/cm3 之間的壓縮粉末堆積密度（cBD）。還在不依賴於批量大小的情況下維持了粉末的氣溶膠性能，其中從基於膠囊的吸入器裝置高有效負載的遞送了抗TSLP Fab。證明了配製物的可擴展性，其中對噴霧乾燥器過程進行最少的調整。表19總結了粉末表徵和氣溶膠性能測試的全部結果。 [表 19 ]批量大小增加的三個抗 TSLP Fab 批次的粉末特性和氣溶膠性能
   第1批 第2批 第3批
oVMD [µm]（n = 2） 1.5（d50） 3.2（d90） 1.7（d50） 3.8（d90） 1.9（d50） 4.1（d90）
CBD [g/cm3 ]       0.58
SSA [m2 /g]       4.6
FPM＜ 5 µm [mg抗TSLP Fab]（n = 3） 14.3 5.6 5.9
FPF＜ 5 µm [%]（n = 3） 81.9 83.4 85.4
MMAD [µm]（n = 3） 2.4 2.4 2.7
實例 10 包含表面活性劑的白胺酸 / 三白胺酸配製物的其他表徵。
產生了包含不同量的PS-80的另外批次的三白胺酸/白胺酸配製物。表20中示出了用於產生每個批次的配製物組成和製程參數。否則如實例6中所述產生配製物。
使用實例7中揭露之方法來分析表20中的配製物的氣溶膠特性。分析的結果示於表21中。 [表21]：包含PS-80的配製物的氣溶膠性能
描述 FPF% （＜ 5.0 um） FPM （＜ 5.0 um） （mg） MMAD（um）
40% FAB1 ，對照 78 5.5 2.55
40% FAB1 ，0.27% w/w PS80 77 5.9 2.56
40% FAB1 ，0.67% w/w PS80 70 4.4 2.68
40% FAB1 ，1.33% w/w PS80 75 4.5 2.7
40% FAB1 ，2.00% w/w PS80 82 4.2 2.27
40% FAB1 ，2.67% w/w PS80 68 4.0 2.63
還使用前述實例中之方法來測量聚集體含量、oVMD、殘餘水分含量、Tg、cBD和SSA。粉末特性分析的結果示於表22中。 [表22]：包含FAB1 和不同（w/w）量的PS-80的乾粉配製物的粉末特性。
% w/w PS80 0% 0.27% 0.67% 1.33% 2.00% 2.67%
HP-SEC MPP% 99.3 99.3 99.5 99.5 99.5 99.4
Agg% 0.1 0.1 0.2 0.2 0.1 0.1
   oVMD d10（µm） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
d50（µm） 1.8 1.8 1.8 1.7 1.2 1.5
d90（µm） 4 3.9 4.0 3.9 2.9 4.6
跨度 1.9 1.9 2.0 2.0 2.1 2.7
殘餘水分（%） 1.6 1.6 1.7 1.9 1.9 0.4
Tg 打開（°C） 123 124 121 121 121 124
關閉（°C） 99 98 96 95 96 115
cBD（g/cm3） 0.58 0.60 0.59 0.59 nm* 0.55
SSA（m2/g） 4.60 5.02 4.37 4.05 nm 4.24
*nm - 未測量
分析表明，不論PS-80的%（w/w）量，粉末特性在很大程度上等效於對照配製物。
接下來分析表22中所述之配製物的亞可見顆粒（SVP）的含量。使用微流成像技術（MFI）測量了亞可見顆粒（SVP）計數。MFI結合微流體流動顯微鏡檢查和高解析度成像顆粒分析，以量化SVP計數，並將該等計數在整個粒度範圍內進行分類。在測試之前，將粉末樣本溶解在水中，並輕輕渦旋以確保顆粒分佈均勻，然後將其裝載到Protein Simple MFI 5200（美國加利福尼亞州）上。將結果報告為每ml不同粒度（≤ 1 µm、≤ 2 µm、≤ 5 µm、≤ 10 µm和≤ 25 µm）的計數。圖14A示出了在乾粉配製物中包含0.27%（w/w/）的PS-80降低了重構後每ml SVP的絕對數量。SVP計數減少隨著PS-80濃度的增加而降低。添加0.67%（w/w）PS-80後看到SVP的顯著降低，其中粒徑大於5 µm的SVP的量可以忽略不計。當將配製物重構成濃度為30 mg/ml FAB1 或2.5 mg/ml FAB1 時，觀察到這種趨勢（圖14B）。
如上文所述對第二種含有賦形劑的配製物進行SVP的配製物表徵和分析。在這項研究中，與PS-80對照，將泊洛沙姆188用作賦形劑。
檢查了泊洛沙姆188的多個% w/w量。針對含有PS-80的配製物，用於產生每個配製物批次的配製物組成和製程參數如表20中所述。修改海藻糖的量以補償泊洛沙姆188的可變數。
還使用前述實例中之方法來測量聚集體含量、oVMD、殘餘水分含量、Tg、cBD和SSA。粉末特性分析的結果示於表23中。 [表23]：包含FAB1 和不同（w/w）量的泊洛沙姆-188的乾粉配製物的粉末特性。
%w/w P-188 0 0.67% 1% 1.67% 2.67% 10%
HP-SEC MPP% 99.3 99.5 99.3 99.5 99.5 99.3
Agg% 0.1 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
oVMD d10（µm） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
d50（µm） 1.8 1.9 1.8 1.8 1.7 1.8
d90（µm） 4.0 4.2 3.9 4.2 4.1 4.3
跨度 1.9 2.0 1.9 2.1 2.1 2.1
殘餘水分（%） 1.6 1.3 1.9 1.2 1.2 1.5
Tg 打開（°C） 123 122 121 123 123 122
關閉（°C） 99 102 94 103 103 98
cBD（g/cm3） 0.58 0.60 0.57 0.67 0.75 nm*
SSA（m2/g） 4.60 Nm 4.71 Nm 4.45 nm
*nm-未測量
還使用實例7中揭露之方法來分析泊洛沙姆-188配製物的氣溶膠特性。結果示於表24中。 [表24]：包含泊洛沙姆-188（P188）的配製物的氣溶膠性能
描述 FPF% （＜ 5.0 um） FPM （＜ 5.0 um） （mg） MMAD（um）
40% FAB1 ，對照 78 5.5 2.55
40% FAB1 ，0.67% w/w P188 67 4.5 2.61
40% FAB1 ，1% w/w P188 86 5.4 2.82
40% FAB1 ，1.67% w/w P188 66 4.2 2.76
40% FAB1 ，2.67% w/w P188 70 4.6 2.91
40% FAB1 ，10% w/w P188 56 3.0 3.41
使用以上所述之方法來分析P188配製物的SVP含量。圖15A示出了在乾粉配製物中包含0.67%（w/w）的P188降低了重構後每ml SVP的絕對數量。當將配製物重構成濃度為30 mg/ml FAB1 （圖15A）或2.5 mg/ml FAB1 （圖15B）時，觀察到這種趨勢。實例 11 包含 1.1% （ w/w ） PS-80 的白胺酸 / 三白胺酸配製物的表徵。
在此實例中，分析了包含1%或40%（w/w）Fab1 和1.1%（w/w/）PS-80的乾粉配製物的粉末特性。表25中示出了完整的配製物組成。如實例6中所述製造配製物。 [表25]：包含1.1%（w/w）PS-80和40%（w/w）或1%（w/w）Fab1 的乾粉配製物中的賦形劑按重量計之量。
   Fab1 40%（w/w） Fab1 1%（w/w）
三白胺酸 2 2
白胺酸 10.5 10.5
海藻糖 37.9 76.9
檸檬酸鹽緩衝液 8.5 8.5
在40°C和75%相對濕度（40/75）或25°C和60%相對濕度（25/60）下儲存一個月或三個月後，分析配製物的穩定性。測試了粒度分佈、水分含量和表面皺褶度。圖16A和16B示出了包含40%（w/w）Fab1 的配製物的水分含量和粒度分佈隨時間保持穩定。圖16C示出了顆粒的形態隨時間保持一致。圖17A和17B示出了包含1%（w/w）Fab1 的配製物的水分含量和粒度分佈隨時間保持穩定。圖17C示出了顆粒的形態隨時間保持一致。
分析了重構後在40/75下儲存1或3個月或在25/60下儲存3個月後的SVP的形成。如實例8所述進行分析。圖18A示出了在將40%（w/w）Fab1 配製物重構成Fab1 濃度為30 mg/ml後，在每種條件下形成的SVP的量不變。圖18B示出了在將1%（w/w）Fab1 配製物重構成Fab1 濃度為0.75 mg/ml後，在每種條件下形成的SVP的量不變。
在儲存後還測試了氣溶膠特徵。結果示於表26和27中。 [表26]：緊隨製造以及在40/75下儲存1或3個月或在25/60下儲存3個月後，包含40%（w/w）Fab1 和1.1%（w/w）PS-80的配製物的氣溶膠性能。
T = 0 1 m 40/75 3 m 40/75 3 m 25/60
% FPF（＜ 5 um） 81 87 77 78
FPM（＜ 5 um）（mg） 5.2 5.1 4.7 5.1
MMAD（µm） 2.97 2.77 3.20 3.16
DD（%） 85 87 82 84
[表27]：緊隨製造以及在40/75下儲存1或3個月或在25/60下儲存3個月後，包含1%（w/w）Fab1 和1.1%（w/w）PS-80的配製物的氣溶膠性能。
T = 0 1 m 40/75 3 m 40/75 3 m 25/60
% FPF（＜ 5 um） 79 79 73 73
FPM（＜ 5 um）（mg） 0.12 0.11 0.11 0.1
MMAD（µm） 3.11 3.05 3.24 3.27
DD（%） 77 83 81 78
在每種條件下儲存每種配製物後，還表徵了百分比遞送劑量（DD）。結果示於表26和27中。
在40/75下儲存1或3個月、或在25/60下儲存3個月後，還測試了表25中所述之每種配製物中Fab1 的效力。
使用均相時間分辨螢光（HTRF）來確定效力。HTRF結合了螢光共振能量轉移技術（FRET）與時間分辨測量法（TR）。當兩個螢光團（供體和受體）彼此靠近時，激發供體會促示能量轉移到受體，從而產生FRET信號。在該測定中，與生物素化的人TSLP結合的鏈黴親和素-銪穴狀化合物係供體，而d2標記的抗TSLP mAb係受體。FAB1 與人TSLP結合並阻止標記的mAb結合。這進而增加了供體和受體螢光團之間的距離，並導致FRET信號減弱。
在評估參考標準與測定對照之間或參考標準與測試樣本之間的平行度後，進行約束的四參數對數（4PL）曲線擬合，並藉由將參考標準品的IC50值除以測定對照或每個測試樣本的IC50值並乘以100%來計算FAB1 測定對照和測試樣本的相對效力。
Fab1 的效力水平在等效配製物立即重構（即t = 0）的Fab1 效力的85%至110%之間。
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相關領域的普通技術人員容易清楚的將是在不背離任何該等實施方式的範圍之情況下，可以對本文所述之該等方法及應用做出其他適合修改和適配。以下實例僅出於說明的目的被特此包括並且不旨在係限制性的。
應該理解的是，雖然本文說明和描述了某些實施方式，但是申請專利範圍並不被局限於描述和顯示的部分之具體形式或安排。在本說明書中，已經揭露了示意性實施方式，並且儘管使用了具體的術語，但是它們僅僅在一般意義和描述意義上使用並且不出於限制之目的。鑒於以上傳授內容，可以對該等實施方式進行修改和變化。因此，應該理解的是，該等實施方式能以不同於具體描述之方式進行實踐。
儘管上面已經描述了各種實施方式，但是應當理解，它們僅作為本技術之說明和實例來呈現，而不是作為限制。對於相關領域的技術人員將顯而易見的是，在不脫離本技術的精神和範圍之情況下，可以在形式和細節上進行各種改變。因此，本技術的寬度和範圍不應受任何以上描述的實施方式之限制，而應當僅根據所附申請專利範圍及其等同物來限定。還應該理解，本文討論的每個實施方式的每個特徵以及本文引用的每個參考文獻的每個特徵可以與任何其他實施方式的特徵結合使用。本文討論的所有專利和出版物均藉由援引以其全文併入本文。
無
本技術的前述以及其他特徵和方面可以藉由以下對實施方式的描述而得到更好的理解並且如附圖所示。併入本文中並形成本說明書的一部分的附圖被另外用於說明本技術的原理。附圖不一定係按比例的。
[圖1]示出了如藉由KinExA所測量的Fab1 與人TSLP之結合。
[圖2]示出了如藉由KinExA所測量的Fab1 與食蟹猴（cyno）TSLP之結合。
[圖3]示出了如使用HTRF測定所測量的Fab1 與人TSLP之競爭性結合。
[圖4]示出了Fab1 抑制由TSLP激發的從PBMC之CCL17釋放。
[圖5]示出了Fab1 、Fab2 和Fab3 抑制TSLP誘導的從PBMC之CCL17釋放。
[圖6A-6C]示出了單一劑量遞增（組1和組2）和重複劑量遞增（組3）吸入後的Fab1 血清、BAL和ELF PK曲線。
[圖7]示出了來自根據本文實施方式的乾粉配製物之微粒。
[圖8A]示出了乾粉配製物中的壓縮堆積密度（compressed bulk density）作為白胺酸和三白胺酸的函數之結果。
[圖8B]示出了用本文所述之乾粉配製物填充膠囊。
[圖9]示出了使用BET（以m2 /g計）測量的根據本文實施方式的乾粉配製物的微粒的比表面積之結果。
[圖10]示出了水分含量與白胺酸濃度之間接相關性。
[圖11A-11D]示出了如藉由SEM所檢測的微粒之表面皺褶度。
[圖12]示出了質量中值空氣動力學直徑（MMAD）與白胺酸和三白胺酸wt%值之間之相關性。
[圖13]示出了裝置沈積與白胺酸和三白胺酸wt%值之間之相關性。
[圖14]示出了細顆粒級分（FPF）與白胺酸和三白胺酸wt%值之間之相關性。
[圖15A]示出了將包含40%（w/w）Fab1 和不同濃度聚山梨醇酯-80（PS-80）的配製物重構至30 mg/ml Fab1 的溶液濃度後的亞可見顆粒的數量（圖中「≥」包括200 µm之尺寸上限）
[圖15B]示出了將包含40%（w/w）Fab1 和不同濃度PS-80的配製物重構至2.5 mg/ml Fab1 的溶液濃度後的亞可見顆粒之數量（圖中「≥」包括200 µm的尺寸上限）
[圖16A]示出了將包含40%（w/w）Fab1 和不同濃度泊洛沙姆（poloxamer）-188的配製物重構至30 mg/ml Fab1 的溶液濃度後的亞可見顆粒之數量（圖中「≥」包括200 µm的尺寸上限）
[圖16B]示出了將包含40%（w/w）Fab1 和不同濃度泊洛沙姆-188的配製物重構至2.5 mg/ml Fab1 的溶液濃度後的亞可見顆粒之數量（圖中「≥」包括200 µm的尺寸上限）
[圖17A]示出了將包含40%（w/w）Fab1 和1.1% PS-80的配製物在40°C和75%相對濕度（40/75）下存儲1或3個月以及在25°C和60%相對濕度（25/60）下儲存3個月後的水分含量%
[圖17B]示出了將包含40%（w/w）Fab1 和1.1% PS-80的配製物在40°C和75%相對濕度（40/75）下存儲1或3個月以及在25°C和60%相對濕度（25/60）下儲存3個月後的粒度分佈（PSD）
[圖17C]示出了將包含40%（w/w）Fab1 和1.1% PS-80的配製物在40°C和75%相對濕度（40/75）下存儲1或3個月以及在25°C和60%相對濕度（25/60）下儲存3個月後之顆粒形態
[圖18A]示出了將包含1%（w/w）Fab1 和1.1% PS-80的配製物在40°C和75%相對濕度（40/75）下存儲1或3個月以及在25°C和60%相對濕度（25/60）下儲存3個月後之水分含量%
[圖18B]示出了將包含1%（w/w）Fab1 和1.1% PS-80的配製物在40°C和75%相對濕度（40/75）下存儲1或3個月以及在25°C和60%相對濕度（25/60）下儲存3個月後之粒度分佈（PSD）
[圖18C]示出了將包含1%（w/w）Fab1 和1.1% PS-80的配製物在40°C和75%相對濕度（40/75）下存儲1或3個月以及在25°C和60%相對濕度（25/60）下儲存3個月後之顆粒形態
[圖19A]示出了將包含40% Fab1 和1.1% PS-80（w/w）的配製物重構至30 mg/ml Fab1 的溶液濃度後、在40/75下儲存1或3個月以及在25/60下儲存3個月後的亞可見顆粒之數量
[圖19B]示出了將包含1% Fab1 和1.1% PS-80（w/w）的配製物重構至0.75 mg/ml Fab1 的溶液濃度後、在40/75下儲存1或3個月以及在25/60下儲存3個月後的亞可見顆粒之數量
無

Claims (20)

  1. 一種抗胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)抗體的抗原結合片段，該抗原結合片段包含具有SEQ ID NO：28中所列的序列的重鏈以及具有SEQ ID NO：29中所列的序列的輕鏈，其中該抗原結合片段為Fab。
  2. 一種乾粉配製物，該乾粉配製物包含多種微粒，該等微粒包含：a.按重量計約8%至約11%的白胺酸；b.按重量計約2%至約4%的三白胺酸；以及c.如請求項1之抗胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)抗體的Fab。
  3. 如請求項2之乾粉配製物，其中該乾粉配製物的壓縮堆積密度為約0.4-1.0g/cm3。
  4. 如請求項2之乾粉配製物，其進一步包含玻璃穩定劑。
  5. 如請求項4之乾粉配製物，其中該玻璃穩定劑係無定形糖或緩衝液。
  6. 如請求項4之乾粉配製物，其中該玻璃穩定劑包含無定形糖和緩衝液。
  7. 如請求項5或請求項6之乾粉配製物，其中該無定形糖選自由以下組成之群組：海藻糖、蔗糖、棉子糖、菊糖、葡聚糖、甘露醇和環糊精。
  8. 如請求項7之乾粉配製物，其中該無定形糖為海藻糖。
  9. 如請求項5或請求項6之乾粉配製物，其中該緩衝液選自由以下組成之群組：檸檬酸鹽緩衝液、磷酸鹽緩衝液、組胺酸緩衝液、甘胺酸緩衝液、乙酸鹽緩衝液和酒石酸鹽緩衝液。
  10. 如請求項2至6中任一項之乾粉配製物，其包含按重量計約10.5%的白胺酸和按重量計約2%之三白胺酸。
  11. 如請求項2至6中任一項之乾粉配製物，其進一步包含表面活性劑。
  12. 如請求項11之乾粉配製物，其中該表面活性劑選自由聚山梨醇酯-20(PS-20)、聚山梨醇酯-40(PS-40)、聚山梨醇酯-60(PS-60)、聚山梨醇酯-80(PS-80)和泊洛沙姆-188組成之群。
  13. 如請求項12之乾粉配製物，其中該表面活性劑係PS-80。
  14. 如請求項13之乾粉配製物，其中PS-80以從按重量計約0.27%至按重量計約2.7%、視需要從按重量計約0.67%至按重量計約1.33%的濃度範圍存在。
  15. 如請求項14之乾粉配製物，其中該PS-80以按重量計約1.1%之濃度存在。
  16. 如請求項2至6中任一項之乾粉配製物，其中該乾粉配製物包含多種微粒，該等微粒包含：a.按重量計約10.5%之白胺酸；b.按重量計約2%的三白胺酸；c.包含具有SEQ ID NO：28中所列的序列的重鏈以及具有SEQ ID NO：29中所列的序列的輕鏈之抗胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)抗體的Fab；d.緩衝液；和f.海藻糖。
  17. 一種如請求項2至16中任一項之乾粉配製物之用途，其係用於製備在治療方法中使用之藥物。
  18. 如請求項17之用途，其中該藥物係用於治療氣喘。
  19. 如請求項18之用途，其中該氣喘係輕度氣喘、中度氣喘、重度氣喘、嗜酸性氣喘或非嗜酸性氣喘、或低嗜酸性氣喘。
  20. 如請求項17至19中任一項之用途，其中該配製物係藉由吸入投與。
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