TWI858698B - 液化澱粉芽孢桿菌pmb05的二次代謝物用以製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑的用途 - Google Patents
液化澱粉芽孢桿菌pmb05的二次代謝物用以製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- TWI858698B TWI858698B TW112117546A TW112117546A TWI858698B TW I858698 B TWI858698 B TW I858698B TW 112117546 A TW112117546 A TW 112117546A TW 112117546 A TW112117546 A TW 112117546A TW I858698 B TWI858698 B TW I858698B
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- pmb05
- bacillus
- amylopectin
- frozen
- grams
- Prior art date
Links
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 title claims abstract description 35
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 title claims abstract description 34
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 title claims abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract 2
- 241000193744 Bacillus amyloliquefaciens Species 0.000 title 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims abstract description 53
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims abstract description 6
- 229920000945 Amylopectin Polymers 0.000 claims description 37
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 19
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 19
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 10
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 10
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 claims description 6
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 6
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 6
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 4
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 3
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 abstract 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 7
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 7
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 4
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 4
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 4
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000005138 cryopreservation Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000005541 medical transmission Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一種液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，係用以製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑，該液化澱粉芽孢桿菌PMB05係寄存於中華民國食品工業發展研究所，其寄存編號為BCRC 910784。該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物係可以供添加於用以冷凍一豬精液的一冷凍稀釋液中，續將包含該豬精液的冷凍稀釋液進行冷凍。
Description
本發明係關於一種液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，特別係關於一種液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物用以製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑的用途。
精液冷凍保存有利於種原之維護，提高優良種畜的利用，物種跨國間交流及備份，並減少疫病傳播風險，於現代化畜殖業發展極具深遠之意義。相較於其他物種，豬冷凍精液使用並不普及；因豬精子對周圍環境較為敏感，解凍後普遍存在活力及受胎率低下等問題，一直不易被廣泛推行。有鑑於此，確實需要提供一種用以提升冷凍豬精液的品質的佐劑。
本發明的一種液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，係用以製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑。
本發明的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，其中，該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物係可以供添加於用以冷凍一豬精液的一冷凍稀釋液中，續將包含該豬精液的冷凍稀釋液進行冷凍。據此，本發明的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物可以加入該冷凍稀釋液中，與該豬精液共同進行冷凍保存，並且於該豬精液解凍之後，仍可以維持良好的品質，因此該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物可以應用於製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑，為本發明的功效。
本發明的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，其中，該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物於該冷凍稀釋液中的濃度可以為0.04%（v/v）。
本發明的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，其中，該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物係由可以包含以下步驟的方法所製備獲得：於30℃的溫度下，以SYM液態培養基培養液化澱粉芽孢桿菌PMB05 5天，以獲得一培養上清液；及去除該培養上清液中的液化澱粉芽孢桿菌PMB05。
本發明的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，其中，每公升的SYM液態培養基可以包含20克的黑糖、10克的黃豆粉、5克的酵母粉、1.6克的磷酸氫二鉀、0.8克的磷酸二氫鉀及0.3克的硫酸鎂，將酸鹼值調整為7.5之後，以水補至1公升。
為讓本發明之上述及其他目的、特徵及優點能更明顯易懂，下文特舉本發明之較佳實施例，並配合所附圖式，作詳細說明如下：
本發明所述的「液化澱粉芽孢桿菌PMB05」係採集自屏東科技大學實驗田植物根際土壤，且已寄存於中華民國食品工業發展研究所（寄存編號為BCRC 910784），該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的菌種鑑定結果已為中華民國公告第I649419號專利案所揭示，於此不再贅述。
又，本發明所述的「液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物」係指存在於培養該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的液態培養基中，且為該液化澱粉芽孢桿菌PMB05於生長過程中所產生的物質。於本實施例中，係先以營養液態培養基（nutrient broth，簡稱為NB，濃度為8 g/L），於37℃的溫度下培養該液化澱粉芽孢桿菌PMB05約16小時（以150 rpm的轉速進行震盪培養），再於24℃的溫度下，以5500×g的轉速離心3～5分鐘，進而取得該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的菌體沉澱物；接著，將該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的菌體沉澱物重新懸浮於無菌水之中，使該無菌水中的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的濃度約為OD
600為0.3，並取1 mL的懸浮有該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的無菌水，稀釋至10 mL的523液態培養基（其配方係如表1所示）中，於30℃的溫度下培養約8小時（以150 rpm的轉速進行震盪培養）；再次將該523液態培養基中的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的濃度調整約為OD
600為0.3，並取1 mL的懸浮有該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的523液態培養基，稀釋至100 mL的SYM液態培養基（其配方係如表2所示）中，於30℃的溫度下培養約5天（以150 rpm的轉速進行震盪培養），吸取培養上清液，最終以5500×g的轉速離心5分鐘，並經0.22 μm過濾膜（sterile syringe filter）進行過濾，即可以去除該培養上清液中殘留的液化澱粉芽孢桿菌PMB05，以獲得該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物。
表1、523液態培養基的配方
| 成分 | 添加量 |
| 蔗糖（sucrose） | 10 g |
| 酪蛋白水解物 （casein dehydrolysate） | 8 g |
| 酵母菌萃取物 （yeast extract） | 4 g |
| 磷酸二氫鉀 （KH 2PO 4，potassium dihydrogen phosphate） | 2 g |
| 硫酸鎂 （MgSO 4，magnesium sulfate） | 0.3 g |
| 將酸鹼值調整為7.0之後， 以水補至1 L |
表2、SYM液態培養基的配方
| 成分 | 添加量 |
| 黑糖 | 20 g |
| 黃豆粉 | 10 g |
| 酵母粉 | 5 g |
| 磷酸氫二鉀 （K 2HPO 4，potassium hydrogen phosphate） | 1.6 g |
| 磷酸二氫鉀 （KH 2PO 4，potassium dihydrogen phosphate） | 0.8 g |
| 硫酸鎂 （MgSO 4，magnesium sulfate） | 0.3 g |
| 將酸鹼值調整為7.5之後， 以水補至1 L |
詳而言之，在製備冷凍精液的過程中，工者係可以將該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物加入一冷凍稀釋液中，續將採集自公豬的精液加入其中，最終降溫至約-196℃，即可以完成冷凍精液的製備。
舉例而言，工者係能夠以1：1的體積比，將公豬的精液稀釋於BTS稀釋液（其配方係如表3所示）中，並降溫至約17℃。
表3、BTS稀釋液的配方
| 成分 | 添加量 |
| 葡萄糖（glucose） | 37.0 g |
| 乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraacetic acid，簡稱為EDTA） | 1.0 g |
| 檸檬酸鈉（sodium citrate） | 6.0 g |
| 碳酸氫鈉（sodium bicarbonate，NaHCO 3） | 1.25 g |
| 氯化鉀（potassium chloride，KCl） | 0.75 g |
| 以水補至1 L |
接著在於17℃的溫度下，以800×g的轉速離心10分鐘之後，將所得的沉澱物加入一第一冷凍稀釋液（其配方係如表4所示）中，使所獲得的溶液中含有8×10
8個精子，並接續降溫至約4℃。
表4、第一冷凍稀釋液的配方
1：取新鮮雞蛋，吸取蛋黃之後，添加2倍體積的0.17 M的氯化鈉（sodium chloride，NaCl）水溶液（0.17 M），於4℃的溫度下攪拌以確認均勻混合，續於-4℃的溫度下，以10,000 rpm的轉速離心25分鐘，取上清液，再加入總體容量（size of population）為23%的硫酸銨（ammonium sulfate，(NH
4)
2SO
4）水溶液，於4℃的溫度下攪拌以確認均勻混合，再於-4℃的溫度下，以10,000 rpm的轉速離心25分鐘，取上清液，並加入0.14%的抗生素水溶液［含10,000 μg/mL的青黴素（penicillin）及10,000 μg/mL 的鏈黴素（streptomycin）］，接著填入透析膜，每4～6小時換水一次，直到明顯分層的形成（約耗時2～3天）。最終移除清澈液體，留下濃密鮮黃的液體，並於4℃的溫度下，以10,000 rpm的轉速離心25分鐘，以留置針吸取下層水分，保存於4℃備用。
2：將11 g乳糖溶解於滅菌水中，並定量至100 mL，以形成濃度為310 mM的乳糖稀釋液，保存於4℃備用。
3：Equex-STM®（Nova Chemical Sales, Scituate Inc., MA 02066, USA）
| 成分 | 濃度 |
| 低密度脂蛋白 1 | 10%（v/v） |
| 乳糖稀釋液 2 | 89.25%（v/v） |
| STM 3 | 0.75%（v/v） |
接著在於 4℃的溫度下，在30分鐘內分三次加入第二冷凍稀釋液（其配方係如第5表所示），使所獲得的溶液中含有8×10
8個精子，並接續降溫至約-196℃。
第5表、第二冷凍稀釋液的配方
| 成分 | 濃度 |
| 低密度脂蛋白 | 10%（v/v） |
| 乳糖稀釋液 | 77.25%（v/v） |
| STM | 0.75%（v/v） |
| 甘油 | 12%（v/v） |
而在欲解凍的冷凍豬精液時，工者則可以將欲解凍的冷凍豬精液浸入50℃的水中約12秒以進行解凍，續取出其中的經解凍的豬精液，再混合該BTS稀釋液，以將經解凍的豬精液稀釋至最終濃度為4×10
7cells/mL。
為證實該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物確實有助於提升冷凍豬精液的品質，遂進行以下試驗：
本試驗係將如前述之液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物加入如第4、5表所示的第一冷凍稀釋液及第二冷凍稀釋液中，使該第一冷凍稀釋液及該第二冷凍稀釋液中的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的濃度同為0.04%、0.12%或0.20%（v/v），以製備該冷凍精液，並且於解凍之後，測試經解凍之精子的總運動性（total motility，TM）、精子直線速度（straight line velocity，VSL）及直線前進比率（linearity，LIN），以評估精子的活力。又，本試驗的控制組係為經未加入該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的冷凍稀釋液所製備的冷凍精液，經解凍之後所得的精子。
結果如圖1～3所示，在該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的添加濃度為0.04%時，經解凍之精子的的總運動性與精子直線速度均有提升之趨勢，且經解凍之精子的直線前進比率則有顯著提升。
綜上所述，本發明的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物可以加入該冷凍稀釋液中，與該豬精液共同進行冷凍保存，並且於該豬精液解凍之後，仍可以維持良好的品質，因此該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物可以應用於製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑，為本發明的功效。
雖然本發明已利用上述較佳實施例揭示，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者在不脫離本發明之精神和範圍之內，相對上述實施例進行各種更動與修改仍屬本發明所保護之技術範疇，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
無
［圖1］ 以添加有不同濃度的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的冷凍稀釋液所冷凍的豬精液，經解凍之後的精子的總運動性之柱狀圖，其中，標示不同英文字母的柱狀數據之間具有顯著差異（
P＜0.05）。
［圖2］ 以添加有不同濃度的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的冷凍稀釋液所冷凍的豬精液，經解凍之後的精子的精子直線速度之柱狀圖，其中，標示不同英文字母的柱狀數據之間具有顯著差異（
P＜0.05）。
［圖3］ 以添加有不同濃度的液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的冷凍稀釋液所冷凍的豬精液，經解凍之後的精子的直線前進比率之柱狀圖，其中，標示不同英文字母的柱狀數據之間具有顯著差異（
P＜0.05）。
液化澱粉芽孢桿菌PMB05：TW中華民國、中華民國食品工業發展研究所、2017年07月04日、BCRC 910784。
Claims (4)
- 一種液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，係用以製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑，其中，該液化澱粉芽孢桿菌PMB05係寄存於中華民國食品工業發展研究所，其寄存編號為BCRC 910784。
- 如請求項1之液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，其中，該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物係供添加於用以冷凍一豬精液的一冷凍稀釋液中，續將包含該豬精液的冷凍稀釋液進行冷凍。
- 如請求項2之液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，其中，該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物於該冷凍稀釋液中的濃度為0.04%(v/v)。
- 如請求項1~3中任一項之液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物的用途，其中，該液化澱粉芽孢桿菌PMB05的二次代謝物係由包含以下步驟的方法所製備獲得：於30℃的溫度下，以SYM液態培養基培養液化澱粉芽孢桿菌PMB05 5天，以獲得一培養上清液，每公升的SYM液態培養基包含20克的黑糖、10克的黃豆粉、5克的酵母粉、1.6克的磷酸氫二鉀、0.8克的磷酸二氫鉀及0.3克的硫酸鎂，將酸鹼值調整為7.5之後，以水補至1公升；及以0.22μm過濾膜進行過濾，以去除該培養上清液中的液化澱粉芽孢桿菌PMB05。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TW112117546A TWI858698B (zh) | 2023-05-11 | 2023-05-11 | 液化澱粉芽孢桿菌pmb05的二次代謝物用以製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑的用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TW112117546A TWI858698B (zh) | 2023-05-11 | 2023-05-11 | 液化澱粉芽孢桿菌pmb05的二次代謝物用以製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑的用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TWI858698B true TWI858698B (zh) | 2024-10-11 |
| TW202444248A TW202444248A (zh) | 2024-11-16 |
Family
ID=94083810
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW112117546A TWI858698B (zh) | 2023-05-11 | 2023-05-11 | 液化澱粉芽孢桿菌pmb05的二次代謝物用以製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑的用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| TW (1) | TWI858698B (zh) |
Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI373523B (en) * | 2008-12-05 | 2012-10-01 | Taiwan Agricultural Chemicals And Toxic Substances Res Inst Council Of Agriculture | Novel strain of bacillus amyloliquefaciens and its use |
| TWI417052B (zh) * | 2011-02-22 | 2013-12-01 | Univ Nat Kaohsiung Normal | 液化澱粉芽孢桿菌菌株及其用途 |
| TWI430750B (zh) * | 2011-03-31 | 2014-03-21 | Univ Nat Kaohsiung Normal | 一種含具抗紫外線活性之液化澱粉芽孢桿菌發酵產物的生產方法 |
| TWI432142B (zh) * | 2011-06-22 | 2014-04-01 | Univ Nat Kaohsiung Normal | 自泥火山泥漿分離之液化澱粉芽孢桿菌菌株及其用途 |
| TW201740808A (zh) * | 2016-05-18 | 2017-12-01 | 富曼西公司 | 解澱粉芽孢桿菌ｒｔｉ４７２組合物及其於使植物生長獲益及治療植物疾病之使用方法 |
| TWI649419B (zh) * | 2017-07-13 | 2019-02-01 | 國立屏東科技大學 | 液化澱粉芽孢桿菌菌株及其應用 |
| TW201925457A (zh) * | 2017-12-06 | 2019-07-01 | 吳振皓 | 液化澱粉芽孢桿菌菌株、包含其之微生物製劑及其用途 |
| TW202034771A (zh) * | 2018-09-28 | 2020-10-01 | 美商富曼西公司 | 解澱粉芽孢桿菌fcc1256組合物及控制植物病原之方法 |
| TWI729523B (zh) * | 2019-10-05 | 2021-06-01 | 味丹企業股份有限公司 | 液化澱粉芽孢桿菌、液化澱粉芽孢桿菌用於製備抑制或殺死病原菌之組成物之用途及其代謝產物用於製備抑制或殺死病原菌之組成物之用途 |
| TWI737609B (zh) * | 2016-05-18 | 2021-09-01 | 美商富曼西公司 | 有益於植物生長及治療植物疾病之微生物組合物及使用方法 |
| TW202320820A (zh) * | 2021-11-19 | 2023-06-01 | 國立屏東科技大學 | 一種液化澱粉芽孢桿菌組合物用於預防或改善高血脂及相關疾病之用途 |
-
2023
- 2023-05-11 TW TW112117546A patent/TWI858698B/zh active
Patent Citations (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI373523B (en) * | 2008-12-05 | 2012-10-01 | Taiwan Agricultural Chemicals And Toxic Substances Res Inst Council Of Agriculture | Novel strain of bacillus amyloliquefaciens and its use |
| TWI417052B (zh) * | 2011-02-22 | 2013-12-01 | Univ Nat Kaohsiung Normal | 液化澱粉芽孢桿菌菌株及其用途 |
| TWI430750B (zh) * | 2011-03-31 | 2014-03-21 | Univ Nat Kaohsiung Normal | 一種含具抗紫外線活性之液化澱粉芽孢桿菌發酵產物的生產方法 |
| TWI432142B (zh) * | 2011-06-22 | 2014-04-01 | Univ Nat Kaohsiung Normal | 自泥火山泥漿分離之液化澱粉芽孢桿菌菌株及其用途 |
| TW201740808A (zh) * | 2016-05-18 | 2017-12-01 | 富曼西公司 | 解澱粉芽孢桿菌ｒｔｉ４７２組合物及其於使植物生長獲益及治療植物疾病之使用方法 |
| TWI737609B (zh) * | 2016-05-18 | 2021-09-01 | 美商富曼西公司 | 有益於植物生長及治療植物疾病之微生物組合物及使用方法 |
| TWI649419B (zh) * | 2017-07-13 | 2019-02-01 | 國立屏東科技大學 | 液化澱粉芽孢桿菌菌株及其應用 |
| TW201925457A (zh) * | 2017-12-06 | 2019-07-01 | 吳振皓 | 液化澱粉芽孢桿菌菌株、包含其之微生物製劑及其用途 |
| TW202034771A (zh) * | 2018-09-28 | 2020-10-01 | 美商富曼西公司 | 解澱粉芽孢桿菌fcc1256組合物及控制植物病原之方法 |
| TWI729523B (zh) * | 2019-10-05 | 2021-06-01 | 味丹企業股份有限公司 | 液化澱粉芽孢桿菌、液化澱粉芽孢桿菌用於製備抑制或殺死病原菌之組成物之用途及其代謝產物用於製備抑制或殺死病原菌之組成物之用途 |
| TW202320820A (zh) * | 2021-11-19 | 2023-06-01 | 國立屏東科技大學 | 一種液化澱粉芽孢桿菌組合物用於預防或改善高血脂及相關疾病之用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TW202444248A (zh) | 2024-11-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2003517276A (ja) | 体外受精のための系及び連続的培養液 | |
| Lahnsteiner et al. | Sperm motility and seminal fluid composition in the burbot, Lota lota | |
| CN103215208A (zh) | 副猪嗜血杆菌培养基 | |
| JPWO2016152215A1 (ja) | 海産魚類の卵巣の維持方法及び培養液の調整方法、並びに海産魚類の卵又は受精卵の生産方法 | |
| TWI858698B (zh) | 液化澱粉芽孢桿菌pmb05的二次代謝物用以製備提升冷凍豬精液的品質的佐劑的用途 | |
| Giles et al. | Chloroplast survival and division in vitro | |
| CN107372469A (zh) | 一种内皮祖细胞的冻存液及冻存方法 | |
| CN103445882A (zh) | 提高牛冷冻精液精子运动性和体外受精率的方法 | |
| GB2102668A (en) | Turkey semen extender | |
| AU2021104255A4 (en) | Hypothermic preservation solution and method for strongylocentrotus intermedius sperm | |
| CN110959607A (zh) | 一种湖羊精液常温保存的稀释液配方及其稀释方法 | |
| CN111713488B (zh) | 冻存剂及其制备方法与在球虫卵囊的应用 | |
| CN105519521A (zh) | 一种马精液冷冻保存液及其配制方法 | |
| Callow et al. | Cryopreservation of the promastigote form of Leishmania tropica var major at different cooling rates | |
| KR20140137753A (ko) | 글루코오스를 포함하는 개 정액 동결용 희석액 | |
| WO2003022046A1 (en) | Method for cryopreserving mammalian cells and tissues | |
| JP2023170612A (ja) | ブタ生殖細胞の凍結保存液及び凍結保存方法 | |
| CN117084238A (zh) | 一种山羊精子生物膜保护剂及其应用方法 | |
| JP2024071876A (ja) | 細菌組成物の製造方法及び細菌組成物の提供方法 | |
| CN106993605A (zh) | 一种绒山羊冷冻精液稀释液配方 | |
| CN114208816A (zh) | 一种鸭冷冻精液的制备方法 | |
| CN110036950A (zh) | 一种海水养殖虹鳟的人工杂交育种方法 | |
| TWI907990B (zh) | 紅藜萃取物用以製備提升公豬的繁殖性能的佐劑的用途 | |
| TWI873629B (zh) | 液化澱粉芽孢桿菌pmb05的二次代謝物用以製備減少雌豬不孕症的發生率的佐劑的用途 | |
| CN106479962B (zh) | 一种包含Cathepsin L抑制剂的体外胚胎培养液及其在冷冻保存中的应用 |