TWI402071B

TWI402071B - 用於治療嚴重瘧疾之雙噻唑鎓鹽或其前驅物與青蒿素或其衍生物之組合

Info

Publication number: TWI402071B
Application number: TW098103960A
Authority: TW
Inventors: Laurent Fraisse; Henri Vial; Sharon Aurore Wein
Original assignee: Sanofi Aventis; Centre Nat Rech Scient; Univ Montpellier Ii
Priority date: 2008-02-06
Filing date: 2009-02-06
Publication date: 2013-07-21
Also published as: AP2613A; BRPI0907484A2; US20110160254A1; HRP20110858T8; ZA201005611B; FR2926993A1; ES2372148T3; TW201000098A; ECSP10010381A; WO2009115666A3; AR070581A1; MX2010008653A; CR11613A; CL2009000264A1; DK2252286T3; EA022711B1; AP2010005353A0; UY31640A1; CN101980706A; CN101980706B

Description

用於治療嚴重瘧疾之雙噻唑鎓鹽或其前驅物與青蒿素或其衍生物之組合

本發明係關於一種用於治療及/或預防瘧疾的抗瘧疾活性成份、亦即雙噻唑鎓鹽或其前驅物與青蒿素或其衍生物之新穎組合，且亦關於包含該組合之醫藥組合物。

本發明係關於如下文定義之為式(VI)化合物之雙噻唑鎓鹽或其前驅物與青蒿素或其衍生物之組合。在本發明所用之青蒿素衍生物中，可提及例如青蒿琥酯、青蒿甲醚、青蒿乙醚、氫化青蒿素或二氫青蒿素。

該組合展示有利且不可預見之協同作用且從而可用於預防及/或治療瘧疾，尤其嚴重瘧疾。

用於本發明之目的之式(VI)化合物及其前驅物描述於以第EP 1 196 371號公開之專利中。用於本發明之目的之式(VI)之雙噻唑鎓鹽之前驅物對應於EP 1 196 371中之式(I)、(II)、(III)、(IV)及(V)。此專利實際上描述具有抗瘧疾作用之藥物之前驅物，該等前驅物之特徵在於其為能夠產生雙四級銨鹽之產物且其對應於通式(I)：其中-A與A'彼此相同或不同且分別表示下式之基團A₁ 及A'₁ ：其中n為2-4之整數；R'₁ 表示氫原子、視情況經芳基(尤其苯基)、羥基、烷氧基(其中該烷基含有1-5個碳原子)或芳氧基(尤其苯氧基)取代之C₁ -C₅ 烷基；且W表示選自氯、溴或碘之鹵素原子，或離核基，諸如甲苯磺醯基(CH₃ -C₆ H₄ -SO₃ )、基(CH₃ -SO₃ )、CF₃ -SO₃ 基或NO₂ -C6H₄ -SO₃ 基，．或表示基團A₂ ，其表示甲醯基(-CHO)或乙醯基(-CO-CH₃ )，-B與B'彼此相同或不同且分別表示：．基團B₁ 及B'₁ (若A及A'分別表示A₁ 及A'₁ )，B₁ 及B'₁ 表示基團R₁ ，R₁ 具有與上文之R'₁ 相同定義但不可為氫原子；或．基團B₂ 及B'₂ (若A及A'表示A₂ )，B₂ 或B'₂ 為如上定義之基團R₁ ，或下式之基團：其中-Ra表示RS-或RCO-基，其中R為視情況經一或多個羥基、烷氧基或芳氧基取代之直鏈、支鏈或環狀C₁ -C₆ 烷基，尤其C₁ -C₅ 烷基；或胺基及/或-COOH或COOM基團，其中M為C₁ -C₃ 烷基；苯基或苄基，其中苯基視情況經至少一個C₁ 至C₅ 烷基或烷氧基取代，該基團視情況經胺基或經含氮或含氧雜環、-COOH基或-COOM基取代；或基團-CH₂ -雜環，其中雜環為5員或6員雜環且含氮及/或含氧；R₂ 表示氫原子、C₁ 至C₅ 烷基或-CH₂ -COO(C₁ -C₅ )烷基；且R₃ 表示氫原子；視情況經-OH、磷酸酯基、烷氧基(其中烷基為C₁ -C₃ )、芳氧基、烷基羰基氧基、或芳基羰基氧基取代之C₁ -C₅ 烷基或C₂ -C₅ 烯基；或者R₂ 與R₃ 合起來形成含有5或6個碳原子之環；R與R₃ 可連接以便形成含有5至7個原子(碳、氧、硫)之環；當A及A'表示A₁ 及A'₁ 時；或當A及A'表示A₂ (亦即-CHO或-COCH₃ 基團)且B₂ 及B'₂ 表示時，α表示單鍵；．或當A及A'表示A₂ 且B₂ 及B'₂ 表示R₁ 時，α表示下式之基團：或下式之基團：其中(a)表示連向Z之鍵且(b)表示連向氮原子之鍵，-Z表示視情況插有一或多個多重鍵及/或一或多個雜原子O及/或S及/或一或多個芳環的C₆ -C₂₁ 烷基(尤其C₁₂ 或C₁₃ -C₂₁ 烷基)，及此等化合物之醫藥學上可接受之鹽，其限制條件為R'₁ 不表示H或C₁ 或C₂ 烷基，當n=3或4時，R₁ 表示C₁ 至C₄ 烷基且Z表示C₆ 至C₁₀ 烷基。EP 1 196 371亦描述如上所述之前驅物化合物之子群，其對應於通式(II)：其中R₁ 、R'₁ 、W、n及Z如上所定義。

EP 1 196 371亦描述由如上所述之前驅物構成之前驅物化合物之另一子群，其中Z表示C₁₃ 至C₂₁ 烷基。

EP 1 196 371亦描述由如前述子群中所述之前驅物構成之前驅物化合物之子群，其中Z表示-(CH₂ )₁₆ -基團。

EP 1 196 371特定描述選自N,N'-二甲基-N,N'-(5-氯戊基)-1,16-十六烷二胺二鹽酸鹽或N,N'-二甲基-N,N'-(4-氯戊基)-1,16-十六烷二胺二鹽酸鹽之前驅物。

此外，EP 1 196 371描述前驅物之群，其對應於通式(III)：或通式(IV)：或通式(V)：其中Ra、R₁ 、R₂ 、R₃ 及Z係如上文所定義。

EP 1 196 371特定描述如上所述之式(III)、(IV)及(V)之前驅物化合物，其選自：-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1-甲基-2-S-硫苄醯基-4-甲氧基丁-1-烯基]-1,12-二胺基十二烷(TE4c)，-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1-甲基-2-S-(對二乙基胺基甲基苯基羧基)硫基-4-甲氧基丁-1-烯基]-1,12-二胺基十二烷(TE4f)，-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1-甲基-2-S-(對嗎啉基甲基苯基羧基)-硫基-4-甲氧基丁-1-烯基]-1,12-二胺基十二烷(TE4g)，-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1-甲基-2-S-硫苄醯基-4-甲氧基丁-1-烯基]-1,16-二胺基十六烷(TE8)，-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1(2-側氧基-4,5-二氫-1,3-噁噻-4-亞基)乙基]1,12-二胺基十二烷(TE3)；或者選自：-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1-甲基-2-四氫呋喃甲基甲基二硫基-4-羥基丁-1-烯基]-1,12-二胺基十二烷(TS3a)，-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1-甲基-2-丙基二硫基-4-羥基丁-1-烯基]-1,12-二胺基十二烷(TS3b)，-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1-甲基-2-苄基二硫基-4-羥基丁-1-烯基]-1,12-二胺基十二烷(TS3c)，-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1-甲基-2-(2-羥乙基)二硫基-4-羥基丁-1-烯基]-1,12-二胺基十二烷(TS3d)，-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1-甲基-2-丙基二硫基-4-甲氧基丁-1-烯基]-1,12-二胺基十二烷(TS3d)，及-N,N'-二甲醯基-N,N'-二[1-甲基-2-丙基二硫乙烯基]-1,12-二胺基十二烷(TS6b)，或者：-2,17-(N,N'-二甲醯基-N,N'-二甲基)二胺基-3,16-S-硫基-對甲氧基苄醯基-6,13-二氧雜十八烷-2,16-二烯(TE9)，-2,17-(N,N'-二甲醯基-N,N'-二苄基)二胺基-3,16-S-硫基-對甲氧基苄醯基-6,13-二氧雜十八烷-2,16-二烯(TE10)，-3,18-(N,N'-二甲醯基-N,N'-二甲基二胺基-4,17-S-硫苄醯基二十烷-3,17-二烯二酸乙酯(TE12)，-3,18-(N,N'-二甲醯基-N,N'-二苄基)二胺基-4,17-S-硫苄醯基二十烷-3,17-二烯二酸乙酯(TE13)，或最後：-2,15-(N,N'-二甲醯基-N,N'-二甲基)二胺基-1,16-S-硫苄醯基十六烷-1,15-二烯(TE15)，-2,15-(N,N'-二甲醯基-N,N'-二苄基)二胺基-1,16-S-硫苄醯基十六烷-1,15-二烯(TE16)。

此外，EP 1 196 371描述由噻唑鎓鹽之前驅物生成之環狀衍生物，其具有優良抗瘧疾活性且對應於通式(VI)：其中．Rb表示R₁ 或T，T表示下式之基團：其限制條件為當Rc、Rd、R₂ 及R₃ 表示甲基時，或當一方面Rc與Rd且另一方面R₂ 與R₃ 合起來形成含有6個碳原子之芳環時，Z不表示C₆ -C₈ 烷基，Rd表示R₂ 或P，P表示下式之基團： Rc表示R₃ 或U，U表示下式之基團： R₁ 、R₂ 、R₃ 及Z如上所定義，應瞭解，若Rc=R₃ 且Rd=R₂ ，則Rb=T；若Rc=R₃ 且Rb=R₁ ，則Rd=P；且若Rb=R₁ 且Rd=R₂ ，則Rc=U。

根據本發明，式(VI)化合物可為游離鹼、鹽，水合物或溶劑合物之形式。

特定言之，在上述環狀衍生物中，EP 1 196 371提及選自以下各物之衍生物：-1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-羥乙基)噻唑鎓]二溴化物(T3)；-1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-甲氧基乙基)噻唑鎓]二碘化物(T4)；-1,12-伸十二甲基雙(4-甲基噻唑鎓)二碘化物(T6)；-1,16-伸十六甲基雙[4-甲基-5-(2-甲氧基乙基)噻唑鎓]二碘化物(T8)；-3,10-二氧雜伸十二甲基雙[5-(1,4-二甲基)噻唑鎓]二碘化物(T9)；-3,10-二氧雜伸十二甲基雙[5-(1-苄基-4-甲基)噻唑鎓]二溴化物(T10)；-伸十二甲基雙[5-(1-甲基-4-乙氧基羰基乙基)噻唑鎓]二碘化物(T12)；-伸十二甲基雙[5-(1-甲基-4-乙氧基羰基乙基)噻唑鎓]二溴化物(T13)；-伸十二甲基雙[4-(1-甲基)噻唑鎓]二碘化物(T15)；-伸十二甲基雙[4-(1-苄基)噻唑鎓]二溴化物(T16)。

最後，EP 1 196 371描述用於獲得以上提及之雙噻唑鎓鹽及雙噻唑鎓前驅物之方法，尤其諸如T3、T4、T6、T8、T9、T10、T12、T13、T15及T16之式(VI)化合物之合成方法。特定言之，T3之合成描述於EP 1 196 371之第18頁。類似地，T3化合物之抗瘧疾活性描述於此相同文獻之第28頁之表13中。

因此，本發明係關於一種包含如上所述式(VI)化合物之雙噻唑鎓鹽或其前驅物及青蒿素或其衍生物作為活性成份之組合。

根據第二標的，本發明係關於如上所述式(VI)化合物之雙噻唑鎓鹽或其前驅物與青蒿琥酯之組合。

根據第三標的，本發明係關於式(VI)化合物之雙噻唑鎓鹽與青蒿琥酯之組合，該雙噻唑鎓鹽選自：-1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-羥乙基)噻唑鎓]二溴化物(T3)；-1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-甲氧基乙基)噻唑鎓]二碘化物(T4)；-1,12-伸十二甲基雙(4-甲基噻唑鎓)二碘化物(T6)；-1,16-伸十六甲基雙[4-甲基-5-(2-甲氧基乙基)噻唑鎓]二碘化物(T8)；-3,10-二氧雜伸十二甲基雙[5-(1,4-二甲基)噻唑鎓]二碘化物(T9)；-3,10-二氧雜伸十二甲基雙[5-(1-苄基-4-甲基)噻唑鎓]二溴化物(T10)；-伸十二甲基雙[5-(1-甲基-4-乙氧基羰基乙基)噻唑鎓]二碘化物(T12)；-伸十二甲基雙[5-(1-甲基-4-乙氧基羰基乙基)噻唑鎓]二溴化物(T13)；-伸十二甲基雙[4-(1-甲基)噻唑鎓]二碘化物(T15)；-伸十二甲基雙[4-(1-苄基)噻唑鎓]二溴化物(T16)。

根據第四標的，本發明係關於式(VI)之雙噻唑鎓鹽(其為1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-羥乙基)噻唑鎓二溴化物(T3))與青蒿琥酯之組合。

在該等標的中，各種活性成份以反映其治癒感染之各自效力之濃度使用。在各種組合中，化合物之各自量視此等活性劑量而定。

存在於本發明之組合中之1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-羥乙基)噻唑鎓]二溴化物(T3)具有以下結構：存在於本發明之組合中之青蒿琥酯具有下式：本發明之標的亦為一種醫藥組合物，其包含如上所定義之式(VI)之雙噻唑鎓鹽或其前驅物(尤其T3)與青蒿素或其衍生物(尤其青蒿琥酯)作為活性成份之組合。

該醫藥組合物含有治療有效劑量之式(VI)化合物之雙噻唑鎓鹽或其前驅物，及青蒿素或其衍生物，亦及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑。該等賦形劑可根據醫藥形式及所想要之投與方法選自熟習該項技術者已知之常見賦形劑。各種化合物之比例範圍係根據其在單藥療法中發揮抗瘧疾活性且反映其治癒感染之各自效力之劑量界定。

適當單位投藥形式包含口服形式(諸如錠劑、軟或硬凝膠膠囊、散劑、顆粒劑及口服溶液或懸浮液)、舌下、經頰、氣管內、眼內或鼻內投藥形式，經吸入、局部、經皮、皮下、肌肉內或靜脈內(推注或灌注)投藥形式，經直腸投藥形式及植入。對於局部投藥，本發明之化合物可以乳膏、凝膠劑、軟膏或洗劑使用。

預想之投藥途徑為口服、經直腸及非經腸途徑，尤其肌肉、直腸內及靜脈內途徑，且尤其經由滴注。

對於非經腸投藥，使用含有藥理學上相容之分散劑及/或潤濕劑(例如丙二醇或丁二醇)的水性懸浮液、等張鹽水溶液或無菌及可注射溶液。必要時懸浮液亦可含有抗氧化性佐劑，或本發明之活性成份可稀釋於適當溶液中，諸如葡萄糖或NaCl，以便隨後經由滴注投與。

非經腸投藥時且尤其經由滴注非經腸投藥時，本發明之組合中之兩種活性成份每一者的每日劑量如上說述較佳為：-式(VI)之雙噻唑鎓鹽，尤其T3：介於0.01 mg/kg與3 mg/kg之間；-青蒿素或其衍生物，尤其青蒿琥酯：介於1 mg/kg與5 mg/kg之間。

可能存在較高或較低劑量適用時的特定情況；該等劑量並不脫離本發明之範圍。根據慣例，適於各患者之劑量係由醫師根據投藥方法及該患者之體重及反應確定。

本發明之組合可投與1至4個連續日，兩種活性成份每一者每日攝入一或多次，較佳每日攝入1至3次(口服或經直腸)或推注。較佳限於4日或4日以下之此治療時間對於大規模及快速減退寄生蟲血症且允許對已免除他或她之致死預後之患者隨後針對瘧疾本身進行治療尤其有利。此後續治療不僅可藉由青蒿素衍生物之單藥療法、藉由任何其他已知之瘧疾療法進行，而且可藉由投與本發明之組合進行。

投藥劑量及方法之實例可為對呈現嚴重瘧疾之患者治療之最初24小時(D1)投與2.4毫克/公斤/日(mg/kg/d)之青蒿琥酯及1 mg/kg/d之T3，且在隨後48小時(D2及D3)接著投與1.2 mg/kg/d之青蒿琥酯及0.8 mg/kg/d之T3，青蒿琥酯及T3在D1、於單滴注袋中且在D2及D3、於分開之滴注袋中經由滴注投與。

兩種活性成份各者之投藥可同時進行，或分開進行或隨時間展開(連續投藥)。

當投藥同時進行時，可將兩種活性成份組合於單一醫藥形式內(固定組合)，諸如適合於口服投藥之錠劑或凝膠膠囊，或組合於同一滴注袋中，或適合於直腸內投藥之調配物。

本發明之組合之兩種活性成份(不論其同時或非同時投與)亦可存在於不同醫藥形式中。為此，本發明之組合可呈套組之形式，其一方面包含式(VI)化合物或其前驅物，尤其T3或其鹽、水合物或溶劑合物，且另一方面包含青蒿素或其衍生物，尤其青蒿琥酯，該式(VI)化合物(諸如T3)及青蒿琥酯位於不同隔室中且可同時、分開或以隨時間展開之方式投與(連續投與)。

舉例而言，呈錠劑形式之T3之單位投藥形式可包含以下組份：T3 6 mg甘露糖醇 224 mg交聯羥甲纖維素鈉 6 mg玉米澱粉 15 mg羥丙基甲基纖維素 2 mg硬脂酸鎂 3 mg同樣地，舉例而言，呈錠劑形式之青蒿琥酯之單位投藥形式可包含50或100 mg青蒿琥酯及常用賦形劑，例如乳糖、交聯羧甲纖維素、無水膠狀二氧化矽、微晶纖維素及硬脂酸鎂。

同樣地，舉例而言，包含青蒿琥酯與T3組合之單位投藥形式可包含1.5 mg之T3及50 mg青蒿琥酯，亦及常用賦形劑，諸如上述彼等賦形劑，成人之日劑量可以4次攝入每次一片錠劑或一次攝入4片錠劑達成。

用於直腸投藥之單位形式係使用相同劑量之T3、青蒿琥酯或T3與青蒿琥酯組合，及熟習此項技術者已知之賦形劑。

對於非經腸注射之投藥方法，T3之單位投藥形式可包含(例如)小瓶中之1 mg之T3，亦及熟習此項技術者所熟知之常用賦形劑，諸如甘油及磷酸鹽緩衝液，該小瓶係針對10 kg體重設計。

同樣地，舉例而言，小瓶中之青蒿琥酯及T3之單位投藥形式可包含24 mg之青蒿琥酯及1 mg之T3，亦及常用賦形劑，諸如上述賦形劑，該小瓶係以1小瓶/10公斤體重之比率投與。

本發明之一標的亦為治療及/或預防瘧疾之方法，其包含將有效治療劑量之至少一種式(VI)化合物之噻唑鎓鹽或其前驅物(尤其T3)及有效治療劑量之青蒿素或其衍生物(尤其青蒿琥酯)投與患者，如前描述，該等劑量同時或連續投與至該患者。

本發明亦關於一種如上所定義之用於治療及/或預防瘧疾、尤其嚴重瘧疾之方法。

本發明之一標的亦為包含如上所述之式(VI)化合物之雙噻唑鎓鹽或其前驅物與青蒿素或其衍生物(尤其青蒿琥酯)作為活性成份之組合之用途，其用於製備供治療或預防瘧疾(尤其嚴重瘧疾)用之藥物。

最後，本發明之一標的為-一種用於治療或預防瘧疾之套組，其一方面包含至少一種式(VI)之化合物之雙噻唑鎓鹽，且另一方面包含至少一種青蒿素或其衍生物(尤其青蒿琥酯)，該式(VI)化合物/前驅物及青蒿素/衍生物係在不同滴注袋或隔室中，且可同時或連續投與，及-一種如上所定義之套組，其特徵在於其一方面包含至少一1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-羥乙基)噻唑鎓]二溴化物，且另一方面包含至少一青蒿琥酯。

瘧疾為世界上造成死亡之主要傳染病之一且每年感染超過5億個體，其中每年死亡150萬至300萬。此瘟疫主要影響撒哈拉以南之非洲(sub-Saharan Africa)、東南亞及拉丁美洲(Latin America)。

由按蚊傳遞之四種類型的瘧原蟲屬(Plasmodium genus)寄生蟲(惡性瘧原蟲(P.falciparum )、三日瘧原蟲(P.malariae )、間日瘧原蟲(P.vivax )及蛋形瘧原蟲(P.ovale ))傳播瘧疾。流行於非洲之惡性瘧原蟲為最毒之寄生蟲且係造成該疾病之大部分致死形式的原因。

近幾年觀察到該疾病之急劇上升係由於若干因素，其中有許多惡性瘧原蟲株對於目前所使用之藥物(諸如氯奎(chloroquine)、甲氟奎(mefloquine)、阿莫地奎(amodiaquine))或抗葉酸劑及抗亞葉酸劑(諸如乙胺嘧啶(pyrimethamine)及磺胺多辛(sulphadoxine))具有抗性之因素。

許多罹患瘧疾之個體呈現急性感染，很少展現除輕微貧血及脾體積增大(脾腫大)以外之體征。症狀視瘧疾之種類而定。儘管如此，一般臨床特徵尤其為：感覺不適、體溫過高(發燒)、頭痛、消化問題，諸如噁心、嘔吐及/或腹痛、腹瀉、衰弱、肌肉疼痛、關節痛(關節疼痛)及黃疸。

治療通常藉由投與氯奎(或在抗氯奎之情況下投與鹼式鹽酸奎寧)進行直至血液中之寄生蟲情況得以改良且消失(通常在3日與5日之間)。隨後患者通常服用由1.5公克磺胺多辛及75 mg乙胺嘧啶構成之單一藥物。

亦使用基於抗葉酸劑及抗亞葉酸劑或者基於馬拉隆(malarone)之其他治療。

由惡性瘧原蟲引起之嚴重瘧疾為一種腦型瘧疾，其為相當高之體溫(40℃)與不論治療如何皆具有不良預後之昏迷之組合，且其致死率有時在成人中高達20%，在兒童中高達15%。嚴重瘧疾之呈現為逐漸的或突然的。其開始為一或多塊肌肉之瞬間且短暫痙攣，隨後解除收縮。其發生於局部或全身。此類瘧疾伴有眼球震顫(眼睛從一側至另一側不斷跳動)，有時伴有頸僵硬及反射紊亂。嚴重瘧疾亦可伴有視網膜出血、低血糖、肺水腫、腎損害、貧血及/或吐血(來源於受損器官之血液回流且其經吞咽且隨後以伴隨嘔吐之出血形式再出現)。

在惡性瘧原蟲導致併發性瘧疾或腦型瘧疾亦及其他嚴重表現形式之情況下，當尚未對此疾病免疫之個體中紅血球之1%或1%以上被寄生時，其為醫學急症。

在嚴重瘧疾之情況下，治療重點為大規模且快速地(在治療開始後24至48小時內)減退寄生蟲血症以便排除死亡預後。一旦寄生蟲血症得到控制且生命預後得到證實，則可投與更多習知抗瘧疾治療，諸如氯奎或鹼式鹽酸奎寧。

由於患者通常罹受嘔吐伴隨嚴重腹瀉，因此難以經口或直腸投藥治療嚴重瘧疾。

1972年自植物黃花蒿(Artemisia annua )中分離且在中國已使用數百年之青蒿素具有強大之抗瘧疾活性。具有改良之藥理學性質之衍生物，諸如青蒿甲醚(artemether)、青蒿乙醚(arteether)及青蒿琥酯(artesunate)亦有市售。

青蒿素及其衍生物(尤其青蒿琥酯)當前為抗惡性瘧原蟲最有效之活性成份之一部分。然而，此等化合物難於產生完全恢復，且記錄到許多增長。因此以單藥療法使用青蒿素或其衍生物可為選擇寄生蟲抗性株之原因。

科學界現提出將活性成份組合且尤其將青蒿素或其衍生物與其他抗瘧疾活性成份組合使用。此等多藥療法(稱為ACT(基於青蒿素之組合療法))自2002年以來已由世界衛生組織(WHO)提出。其提供多個優點：對抗性株之治療功效改良、兩種活性成份之相互保護以防止抗性出現、減少疾病傳播及抗性繁殖。

已知此類型之若干組合。

已提出青蒿甲醚與苯芴醇(lumefantrine)之間之組合(以名稱Coartem出售)，以及青蒿琥酯與阿莫地奎之組合(Arsucam)。

二茂鐵奎(ferroquine)與青蒿素衍生物之組合描述於文獻WO 2006/111647中。

然而，ACT多藥療法之有益作用既不明顯亦不可預見。舉例而言，C.Snyder等人之出版物Experimental Parasitology,115(2007),296-300揭示哌奎(piperaquine)與化合物OZ277之組合似乎比哌奎與青蒿素衍生物(諸如青蒿甲醚)之組合更有前景。

類似地，氯奎與青蒿琥酯之組合並未達成令人滿意之功效程度(Am.J.Trop.Med.Hyg.,2003,69(l) ,19-25及Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene,2003,97 ,429-433)且會導致選擇抗性株，尤其抗氯奎株。

因此，即使WHO提出ACT策略，但搜尋抗瘧疾活性成份之新穎組合仍然不容易且應繼續。

在感染惡性瘧原蟲型(威基派特利瘧原蟲株(strainPlasmodium vinckei petteri ))之瘧原蟲之小鼠中，使本發明之組合經受活體內藥理學及生物化學測試，從而證明其為治療瘧疾所提供之功效及協同效應。

在感染威基派特利瘧原蟲之小鼠中活體內量測1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-羥乙基)噻唑鎓]二溴化物(T3)與青蒿琥酯之組合的抗瘧疾活性此測試中所使用之術語之定義： -ED₅₀ =在感染小鼠中觀察到引起寄生蟲血症降低50%之劑量(mg/kg/d)，-ED₉₀ =在感染小鼠中觀察到引起寄生蟲血症降低90%之劑量(mg/kg/d)，-ip=腹膜內投藥，-iv=靜脈內投藥，-ir=直腸內投藥。

1.所用活體內測試之描述小鼠之感染

在第0日(D0)將懸浮於200 μl Nacl(0.9%)中之10⁸ 個寄生紅血球經由尾靜脈內iv注射接種於雌性「Swiss」小鼠(OF1,22-26 g)(Charles River Laboratories France,59 rue de la Paix,76410 Saint-Aubin-les-Elbeuf)中。所用寄生蟲為威基派特利瘧原蟲型(279 BY株，由Dr.I Landau,Paris,France提供)。

事先使小鼠適應環境兩週。給其隨意提供食物及飲水。

注射10⁸ 個寄生紅血球導致在第1日(D1)寄生蟲血症程度介於5%與10%之間(7.2%±0.2%)。藉由每週用懸浮於磷酸鹽緩衝鹽水(0.9%)中之10⁷ 至10⁸ 個寄生紅血球感染小鼠(藉由腹膜內投藥感染)來維持威基派特利瘧原蟲株。

-製備T3及青蒿琥酯之溶液

將產物溶於0.3 M磷酸鹽緩衝液(pH=8.1)中。視劑量而定，T3溶液之最終濃度介於40 mg/l與200 mg/l之間。視劑量而定，青蒿琥酯溶液之最終濃度介於100 mg/l與500 mg/l之間。

產物係經ip投與。投藥體積約為100 μl，但視小鼠之重量而定。

-治療

在D1、D2、D3及D4日、4日每日一次治療小鼠(Peters,W.,J.H.Portus及B.L.Robinson.1975.The chemotherapy of rodent malaria.XXII.The value of drug-resistant strains of P.berghei in screening for blood schizonticidal activity.Ann.Trop.Med.Parasitol.69:155-171；及：Ancelin ML,Calas M.,Bonhoure A.,Herbute S.及Vial H.,In vivo antimalarial activity of mono and bis quaternary ammonium salts interfering with Plasmodium phospholipid metabolism.Antimicrob.Agents Chemother.,2003,47,2598-2605)。每劑量使用四隻小鼠。

根據情況，藉由ip投藥將T3、青蒿琥酯或所溶解之兩種活性成份之混合物給與動物。

寄生蟲血症之量測

在第5日，自小鼠尾部採集數滴血液以便藉由FACS(螢光活化細胞分選器)測定寄生蟲血症且進行血液塗抹。首先藉由FACS針對20 000細胞測定寄生蟲血症。將為FACS所採集之紅血球用戊二醛固定且接著用標記DNA且從而僅標記寄生細胞的螢光染料(YOYO1)標記(Barkan,D.,Ginsburg,H.及Golenser,J.2000.Optimisation of flow cytometric measurement of parasitaemia in plasmodium-infected mice.Int.J.Parasitol.30：649-653)。隨後對塗片上低於15%之寄生蟲血症再計數。將塗片以甲醇固定且接著以姬姆薩染料(Giemsa stain)染色。在顯微鏡下對寄生血球數目進行計數。以2000個細胞之樣品計，以樣本中存在之受感染之紅血球之百分比表示寄生蟲血症。ED₅₀ 及ED₉₀ 值係在D5時測定。在第1日至第10日且接著在第15日、第22日及第47日測定寄生蟲血症。

在D5塗片顯示無寄生蟲痕跡之小鼠在治療結束後再檢查至少一個月，以便偵測任何可能之寄生蟲增長。治癒劑量為確保整個治療批次之動物在一個月之後存活之產品劑量。

測定ED ₅₀ 值

0%抑制對應於在未經治療之感染小鼠中觀察到之寄生蟲血症之平均值。100%抑制對應於低於0.01%極弱寄生蟲血症或無寄生蟲血症。ED_5o 值係藉由以濃度之對數表示之劑量-反應曲線之線性內插法來測定。

2.活體內量測T3及青蒿琥酯對於威基派特利瘧原蟲寄生蟲株之抗瘧疾活性

為證明兩種化合物之間之協同效應，重要的是瞭解其單獨投與時之活性，以便將其以接近其ED₅₀ 之劑量組合。其非經腸投藥之情況對應於嚴重瘧疾之臨床情形。在此情況下，重要的是在治療之最初數日快速減少寄生蟲血症。在測試劑量下，單獨投與之青蒿琥酯在第一天並不減少寄生蟲血症，且在隨後數日亦如此(圖1)。在以1 mg/kg/d之劑量治療4日之後，T3有效減少寄生蟲血症，但在治療第一日後其並不防止寄生蟲血症增加(圖2)。

所得ED50值列於下表1中： ED₅₀ 愈低，活性愈佳。因此，單獨T3(0.55 mg/kg/d)對寄生蟲血症展示之活性比單獨青蒿琥酯(>2.5 mg/kg/d)更佳。此外，劑量為0.5 mg/kg/d之單獨T3在一個月後允許完全恢復(結果未圖示)，而劑量為2.5 mg/kg/d之單獨青蒿琥酯並非如此。

3.活體內量測T3/青蒿琥酯組合對於威基派特利瘧原蟲寄生蟲株之抗瘧疾活性

對於此組合研究，選擇2.5 mg/kg/d之青蒿琥酯劑量(略低於但接近於ED₅₀ )，0.5 mg/kg/d之劑量在4日中對於寄生蟲血症完全無活性。在較低劑量、接近於及高於ED₅₀ 之情況下(亦即0.2、0.5及1 mg/kg/d)評估組合中之T3。

令人吃驚地，如圖3、4及5中所表明，與單獨T3或單獨青蒿琥酯之分開投藥相比，包含T3(在所有上述劑量下)與以2.5 mg/kg/d劑量存在之青蒿琥酯的組合使寄生蟲血症程度顯著減少成為可能。特定言之，重要的是注意到在最初投藥24 h後(第2日)且無論所投T3劑量為多少，皆觀察到小鼠之寄生蟲血症減少，而在此時間點，單獨投與之產物無活性。表II(及圖3、4及5)列出在此第2日所記錄之寄生蟲血症之平均值(每劑量4個動物)。應注意對於劑量為0.2、0.5及1 mg/kg之T3與劑量為2.5 mg/kg之青蒿琥酯的組合而言，在最初投藥24小時後(第2日)存在統計學上之協同效應。治療首日後之此極顯著協同效應在治療嚴重瘧疾之情況下(在該情況下臨床醫師恰好尋求大規模且快速減少患者體內之寄生蟲血症以便排除死亡預後)尤其重要。

由0.5 mg/kg/d劑量之T3與2.5 mg/kg/d之青蒿琥酯的組合起始，在整個治療持續期間，寄生蟲血症維持在其治療前之初始值，而單獨投與產物則無法維持(表II、圖3、4及5)。

T3化合物對一個月之後小鼠完全恢復起主要作用。以2.5 mg/kg/d共投與之青蒿琥酯並未改良以單獨T3所獲得之治癒劑量。

表III總結上述結果。

因此，當以組合方式投與2種活性成份時，寄生蟲血症在治療之最初4日期間顯著降低。在劑量相當於或甚至低於針對單獨服用兩種活性成份之每一者之投與所測定之劑量的情況下，效果非常大。

特定言之，當T3與青蒿琥酯組合投與時(青蒿琥酯以至少2.5 mg/kg/d之劑量存在)，觀察到寄生蟲血症減少之有益效果。因此應理解該兩種活性成份之組合對該等化合物之一者之最小劑量及該等化合物之一者相對於另一者之比率所限定定之治療窗(在此治療窗內)尤其有效。

在感染威基派特利瘧原蟲之小鼠中獲得之活體內結果證明本發明之青蒿素或其衍生物(尤其青蒿琥酯)與式(VI)化合物之雙噻唑鎓鹽(尤其T3)的組合有利於治療瘧疾(且尤其嚴重瘧疾)。

圖1展示在以青蒿琥酯(AS)ip治療4日期間及之後寄生蟲血症之變化；圖2展示在以T3 ip治療4日期間及之後寄生蟲血症之變化；圖3展示在以0.2 mg/kg/d之T3及2.5 mg/kg/d之青蒿琥酯(AS)ip治療4日期間及之後寄生蟲血症之變化；圖4展示在以0.5 mg/kg/d之T3及2.5 mg/kg/d之青蒿琥酯(AS)ip治療4日期間及之後寄生蟲血症之變化；及圖5展示在以1 mg/kg/d之T3及2.5 mg/kg/d之青蒿琥酯(AS)ip治療4日期間及之後寄生蟲血症之變化。

Claims

一種用於治療及/或預防嚴重瘧疾之組合，其包含作為活性成份之雙噻唑鎓鹽或其前驅物及青蒿素或其衍生物，其中˙該雙噻唑鎓鹽為式(VI)之化合物：其中Rb表示：-基團R₁ ，其表示：(i)氫原子，(ii)C₁ -C₅ 烷基，其係視情況經芳基、羥基、其中烷基含有1-5個碳原子之烷氧基或芳氧基取代；-或者基團T，T表示下式之基團：其中：R₂ 表示氫原子，C₁ -C₅ 烷基，或-CH₂ -COO-(C₁ 至C₅ )烷基；R₃ 表示(i)氫原子；(ii)C₁ -C₅ 烷基或C₂ -C₅ 烯基，其係視情況經-OH、磷酸酯基、其中烷基為C₁ -C₃ 之烷氧基、芳氧基、烷基羰基氧基或芳基羰基氧基取代；或者R₂ 與R₃ 合起來形成含有5或6個碳原子之環；R₂ 與R₃ 可連接以形成含有5至7個成員之環或雜環，該環或雜環視情況包含一或多個雜原子O及/或S；Z表示C₆ -C₂₁ 烷基，其係視情況插有一或多個多重鍵及/或一或多個雜原子O及/或S及/或一或多個芳環，及此等化合物之醫藥學上可接受之鹽，其限制條件為當Rc、Rd、R₂ 及R₃ 表示甲基時，或當一方面Rc與Rd且另一方面R₂ 與R₃ 合起來形成含有6個碳原子之芳環時，Z不表示C₆ 至C₈ 烷基；Rd表示如上定義之R₂ 或P，P表示下式之基團： Rc表示如上定義之R₃ 或U，U表示下式之基團：應瞭解，若Rc=R₃ 且Rd=R₂ ，則Rb=T；若Rc=R₃ 且Rb=R₁ ，則Rd=P；且若Rb=R₁ 且Rd=R₂ ，則Rc=U，該式(VI)化合物係呈游離鹼或鹽之形式，˙該前驅物係選自式(I)至式(V)之化合物，˙˙該式(I)化合物對應於下式：其中- A與A'彼此相同或不同且分別表示：˙下式之基團A₁ 及A'₁ ：其中n為2-4之整數；R'₁ 表示氫原子，或C₁ -C₅ 烷基，其係視情況經芳基、羥基、其中烷基含有1-5個碳原子之烷氧基或芳氧基取代；且W表示選自氯、溴或碘之鹵素原子，或離核基；˙或者基團A₂ ，其表示甲醯基(-CHO)或乙醯基(-CO-CH₃ )；- B與B'彼此相同或不同且分別表示：˙基團B₁ 及B'₁ (若A及A'分別表示A₁ 及A'₁ )，B₁ 及B'₁ 表示基團R₁ ，R₁ 具有與上文之R'₁ 相同定義但不可為氫原子；或˙基團B₂ 及B'₂ (若A及A'表示A₂ )，B₂ 或B'₂ 為如上定義之基團R₁ ，或下式之基團：其中-Ra表示RS-或RCO-基，其中R為直鏈、支鏈或環狀C₁ -C₆ 烷基，其係視情況經一或多個羥基、烷氧基或芳氧基取代；或胺基及/或-COOH或COOM基團，其中M為C₁ -C₃ 烷基；苯基或苄基，其中苯基視情況經至少一個C₁ 至C₅ 烷基或烷氧基取代，該基團視情況經胺基或經含氮或含氧雜環、-COOH基或-COOM基取代；或基團-CH₂ -雜環，其中雜環為5員或6員雜環且含氮及/或含氧；R₂ 表示氫原子，C₁ 至C₅ 烷基，或-CH₂ -COO(C₁ -C₅ ) 烷基；且R₃ 表示氫原子，或C₁ -C₅ 烷基或C₂ -C₅ 烯基，其係視情況經-OH、磷酸酯基、其中烷基為C₁ -C₃ 之烷氧基、芳氧基、烷基羰基氧基或芳基羰基氧基取代；或者R₂ 與R₃ 合起來形成含有5或6個碳原子之環；R與R₃ 可連接以便形成含有5至7個原子(碳、氧、硫)之環；˙當A及A'表示A₁ 及A'₁ 時；或當A及A'表示A₂ (亦即- CHO或-COCH₃ 基團)且B₂ 及B'₂ 表示時，α表示單鍵；˙或當A及A'表示A₂ 且B₂ 及B'₂ 表示R₁ 時，α表示下式之基團：或下式之基團：其中(a)表示連向Z之鍵且(b)表示連向氮原子之鍵，-Z表示C₆ -C₂₁ 烷基，其係視情況插有一或多個多重鍵及/或一或多個雜原子O及/或S，及/或一或多個芳環，及此等化合物之醫藥學上可接受之鹽，其限制條件為R'₁ 不表示H或C₁ 或C₂ 烷基，當n=3或4時，R₁ 表示C₁ 至C₄ 烷基且Z表示C₆ 至C₁₀ 烷基；˙˙該式(II)化合物對應於下式： ˙˙該式(III)化合物對應於下式： ˙˙該式(IV)化合物對應於下式： ˙˙該式(V)化合物對應於下式：其中Ra、R₁ 、R'₁ 、R₂ 、R₃ 、W、n及Z係如上文所定義，˙該青蒿素或其衍生物係選自青蒿琥酯(artesunate)、青蒿甲醚(artemether)、青蒿乙醚(arteether)、氫化青蒿素或二氫青蒿素。
如請求項1之組合，其中：R₁ 表示C₁ -C₅ 烷基，其係視情況經苯基、羥基、其中烷基含有1-5個碳原子之烷氧基或苯氧基取代；Z表示C₁₂ 或C₁₃ -C₂₁ 烷基，R'₁ 表示氫原子；C₁ -C₅ 烷基，其係視情況經苯基、羥基、其中烷基含有1-5個碳原子之烷氧基或苯氧基取代；W表示選自氯、溴或碘之鹵素原子，或甲苯磺醯基(CH₃ -C₆ H₄ -SO₃ )、基(CH₃ -SO₃ )、CF₃ -SO₃ 基或NO₂ -C₆ H₄ -SO₃ 基；及-Ra表示RS-或RCO-基，其中R為直鏈、支鏈或環狀C₁ -C₅ 烷基。
如請求項1之組合，其特徵在於式(VI)化合物之該雙噻唑鎓鹽係選自：1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-羥乙基)噻唑鎓]二溴化物；1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-甲氧基乙基)噻唑鎓]二碘化物；1,12-伸十二甲基雙(4-甲基噻唑鎓)二碘化物；1,16-伸十六甲基雙[4-甲基-5-(2-甲氧基乙基)噻唑鎓]二碘化物；3,10-二氧雜伸十二甲基雙[5-(1,4-二甲基)噻唑鎓]二碘化物；3,10-二氧雜伸十二甲基雙[5-(1-苄基-4-甲基)噻唑鎓]二溴化物；伸十二甲基雙[5-(1-甲基-4-乙氧基羰基乙基)噻唑鎓]二碘化物；伸十二甲基雙[5-(1-甲基-4-乙氧基羰基乙基)噻唑鎓]二溴化物；伸十二甲基雙[4-(1-甲基)噻唑鎓]二碘化物；伸十二甲基雙[4-(1-苄基)噻唑鎓]二溴化物。
如請求項1至3中任一項之組合，其特徵在於該等活性成份中之每一者係可同時或連續投藥。
一種用於治療及/或預防嚴重瘧疾之醫藥組合物，其包含治療有效劑量之如請求項1所定義之青蒿素或其衍生物及至少一種如請求項1所定義之式(VI)化合物之雙噻唑鎓鹽或其前驅物，且亦包含至少一種醫藥學上可接受之賦形劑。
如請求項5之醫藥組合物，其特徵在於式(VI)化合物之該雙噻唑鎓鹽為1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-羥乙基)噻唑鎓]二溴化物。
如請求項5或6之醫藥組合物，其特徵在於該青蒿素衍生物為青蒿琥酯。
如請求項5或6之醫藥組合物，其特徵在於其適於經口、直腸或注射投藥。
如請求項8之醫藥組合物，其特徵在於其係適於靜脈注射。
如請求項8之醫藥組合物，其特徵在於其係以滴注之形式投予。
一種如請求項1至4中任一項之組合之用途，其係用於製備供治療或預防嚴重瘧疾用之藥物。
一種用於治療或預防嚴重瘧疾之套組，該套組一方面包含至少一種如請求項1所定義之式(VI)化合物之雙噻唑鎓鹽或其前驅物，且另一方面包含至少一種如請求項1所定義之青蒿素或其衍生物，該式(VI)化合物或其前驅物及該青蒿素或其衍生物係置於不同隔室中且可同時或連續投藥。
如請求項12之套組，其特徵在於其一方面至少包含1,12-伸十二甲基雙[4-甲基-5-(2-羥乙基)噻唑鎓]二溴化物，且另一方面至少包含青蒿琥酯。