TWI481604B

TWI481604B - Novel 5-fluorouracil derivatives

Info

Publication number: TWI481604B
Application number: TW099136471A
Authority: TW
Inventors: Masakazu Fukushima; Shozo Yamada; Ryo Oyama
Original assignee: Delta Fly Pharma Inc
Priority date: 2009-10-27
Filing date: 2010-10-26
Publication date: 2015-04-21
Also published as: AU2010312594A1; JPWO2011052554A1; HK1168344A1; CN102574837B; US8889699B2; KR101441770B1; US20120232103A1; WO2011052554A1; PL2495243T3; ES2619937T3; KR20120083492A; HUE033401T2; AU2010312594B2; EP2495243A1; EP2495243B1; EP2495243A4; CN102574837A; HRP20170406T1; RU2503673C2; JP5008778B2

Description

新穎的5-氟尿嘧啶衍生物

關聯申請的互相參照

本申請係基於2009年10月27日申請之日本國特許出願第2009-246400號說明書(其全部揭示係引用於本說明書中作為參照)而主張優先權。

發明領域

本發明係有關於一種新穎的5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽、及其用途。

發明背景

5-氟尿嘧啶(以下、5-FU)係使用單劑或與其他抗癌劑並用而被廣泛地使用在以消化器官癌作為中心之各式各樣的癌症之治療。但是，5-FU本身的抗腫瘤效果弱而且會出現包含腹瀉、口腔炎等消化器官毒性或骨髓抑制等各式各樣的副作用，對於癌症患者未必可說是容易使用的藥劑。雖然為了解決該等的問題而開發各種口服5-FU衍生物，但是臨床效果不充分。作為其原因，可舉出5-FU係由於在活體內、特別是肝臟或腫瘤組織所含有的二氫嘧啶脫氫酶(以下、稱為DPD(dihydropyrimidine dehydrogenase))會迅速地被分解，相較於投給量，抗腫瘤效果差，5-FU係不僅是癌細胞，亦會被骨髓細胞或消化管黏膜細胞之正常細胞攝取且藉由乳清酸磷酸核糖轉移酶(以下、稱為OPRT(orotate phosphribosyl transferase))而成為活性代謝物，因為顯現細胞障礙亦即毒性，致使抗腫瘤效果與副作用的平衡差。

例如，作為5-FU的衍生物，有報告記載具有DPD阻礙活性及抗腫瘤活性之化合物(參照專利文獻1～3)，該等之中，在專利文獻2具體地記載之下述化合物(1)係通用名為依米特弗(EMITEFUR、亦稱BOF-A2)之眾所周知的化合物，而且已經實施臨床試驗，但是因為副作用而中止開發。

[化1]

如此，因為現狀尚未開發具有抑制在活體內5-FU的分解而增強抗腫瘤效果並且減輕副作用的作用之5-氟尿嘧啶衍生物，為了提升癌症患者的治療效果，開發一種兼具增強抗腫瘤效果且低毒性之新穎的5-氟尿嘧啶衍生物，可說是必要的。

如以上，以往尚未有報告記載一種衍生物，其係藉由一化合物，除了顯示DPD阻礙活性及OPRT阻礙活性之兩種阻礙活性以外亦顯示抗腫瘤活性，因此，被要求開發一種藥劑，其能夠得到兼具對人體腫瘤有強抗腫瘤效果及減輕消化管障礙的效果與毒性之平衡，來提高癌症患者的QOL。

[先前技術文獻] [專利文獻]

[專利文獻1]　特開昭63-201127號公報

[專利文獻2]　特開昭63-301880號公報

[專利文獻3]　國際公開公報WO87/06582

本發明係以提供一種新穎的代謝拮抗抗癌劑，該新穎的代謝拮抗抗癌劑係藉由在活體內具有DPD阻礙作用，同時具有OPRT阻礙作用而使其兼具對腫瘤細胞之強抗腫瘤效果及減輕消化管障礙，亦即效果與毒性平衡優良。

為了解決前述課題，本發明者等重複專心研討。其結果，發現相較於原有的5-FU衍生物，下述通式(I)所表示的5-氟尿嘧啶衍生物(以下亦有簡記為本發明化合物(I)之情形)或其鹽，係具有(1)DPD阻礙作用及(2) OPRT阻礙作用，而且(3)其結果，使其兼具對腫瘤細胞之強抗腫瘤效果及減輕消化管障礙，亦即效果與毒性平衡優良。

本發明係基於如此的知識而完成者。

亦即，本發明係提供以下的項目：

項1.　一種5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，該5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽係由通式(I)所表示，

[化2]

[式中，R¹ 係表示氫原子或羥基的保護基，R² 係表示低級烷氧基低級烷基或四氫呋喃基，X係表示碳原子或氮原子，Y係表示鹵素原子或氰基]。

項2.　如項1之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中通式(I)之基

[化3]

係表示基

[化4]

[R¹ 係表示氫原子、烯丙基、或亦可具有取代基之苄基]、基

[化5]

基

[化6]

[R¹ 係表示氫原子、烯丙基、或亦可具有取代基之苄基]、或基

[化7]

項3.　如項1或2之2-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中R1係表示氫原子、烯丙基、苄基、脂肪族醯基、芳香族醯基或脂環式醯基，R² 係表示低級烷氧基部分的碳數為1～6之低級烷氧基甲基或四氫呋喃基，X係表示碳原子或氮原子，且Y係表示氟原子或氯原子。

項4.　如項1至3中任一項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中R¹ 係表示氫原子、苄基、乙醯基、丙醯基、異丁醯基、三甲基乙醯基、苯甲醯基、對氯苯甲醯基或環戊烷碳醯基，R² 係表示低級烷氧基部分的碳數為1～6之低級烷氧基低級甲基，X係表示碳原子或氮原子，且Y係表示氟原子或氯原子。

項5.　如項1至4中任一項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中R¹ 係表示氫原子或乙醯基，R² 係表示低級烷氧基部分的碳數為1～6之低級烷氧基甲基，X係表示碳原子或氮原子，且Y係表示氯原子。

項6.　如項1至5中任一項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中R¹ 係表示氫原子或乙醯基，R² 係表示低級烷氧基部分的碳數為1～6之低級烷氧基甲基，X係表示碳原子，且Y係表示氯原子。

項7.　如項1至6中任一項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中R¹ 係表示氫原子或乙醯基，R² 係表示乙氧基甲基，X係表示碳原子，且Y係表示氯原子。

項8.一種醫藥，其係含有如項1至7中任一項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽作為有效成分。

項9.　一種抗腫瘤劑，其係含有如項1至7中任一項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽作為有效成分。

項10.　如項9之抗腫瘤劑，其中該抗腫瘤劑的對象亦即腫瘤係選自由頭項頸部癌、食道癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、肝臟癌、膽囊-膽管癌、膽道癌、胰臟癌、肺癌、乳癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮體癌、腎癌、膀胱癌、攝護腺癌、睪丸腫瘤、骨-軟部肉腫瘤、白血病、惡性淋巴腫瘤、多發性骨髓腫瘤、皮膚癌、腦腫瘤及間皮腫瘤(mesothelial tumor)所組成群組之至少一種。

項11.一種癌症的治療方法，其係包含將有效量之如項1至7中任一項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽投給癌症患者之步驟。

項12.一種如項1至7中任一項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽之使用，其係用以製造抗腫瘤劑。

本發明化合物(I)或其鹽係具有優良的抗腫瘤效果，同時能夠減輕消化管障礙等的副作用，作為抗腫瘤劑係有用的。

作為藉由投給含有本發明化合物而能夠治療的疾病，例如惡性腫瘤的情況，可舉出頭項頸部癌、食道癌、胃癌、結腸癌、直腸癌、肝臟癌、膽囊-膽管癌、膽道癌、胰臟癌、肺癌、乳癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮體癌、腎癌、膀胱癌、攝護腺癌、睪丸腫瘤、骨-軟部肉腫瘤、白血病、惡性淋巴腫瘤、多發性骨髓腫瘤、皮膚癌、腦腫瘤及間皮腫瘤等。

用以實施發明之形態

本發明係將下述通式(I)所表示的5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽設作對象：

[化8]

在本發明，在上述通式(I)所表示的5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽亦含有其互變異構體。

具體上，係包含在通式(I)所對應的基

[化9]

係表示基

[化10]

[R¹ 係表示氫原子或羥基的保護基]、基

[化11]

基

[化12]

[R¹ 係表示氫原子、或羥基的保護基]、或基

[化13]

之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽。

在上述通式(I)所表示的各基，具體上，係如以下。

通式(I)中，R¹ 係表示氫原子或氫基的保護基。

作為以R¹ 表示之羥基的保護基，係藉由如加氫分解、電分解及光分解的方法或在人體內加水分解等的生物學方法進行開裂而得到的保護基即可，可舉出例如亦可具有取代基之脂肪族醯基、亦可具有取代基之芳香族醯基或脂環式胺基等的醯基；低級烷氧基碳醯基；低級烷基胺基甲醯基；亦可具有取代基之低級烷基；低級烯基；亦可具有取代基之芳烷基；矽烷基保護基；胺基酸殘基等。

作為脂肪族醯基，可舉出例如甲醯基、乙醯基、丙醯基、丁醯基、異丁醯基、戊醯基、異戊醯基、三甲基乙醯基、己醯基等的碳數1～6的直鏈狀或分枝狀的醯基，作為芳香族醯基，可舉出苯甲醯基、α-萘甲醯基、β-萘甲醯基等。又，該等亦可具有1～3個低級烷基、低級烷氧基、鹵素原子、硝基、羧基等作為取代基。

作為脂環式醯基，可舉出例如環丁烷碳醯基、環戊烷碳醯基、環己烷碳醯基等碳數3～6的環烷基碳醯基。

作為低級烷氧基碳醯基，可舉出例如甲氧基碳醯基、乙氧基碳醯基、正丙氧基碳醯基、異丙氧基碳醯基、正丁氧基碳醯基、異丁氧基碳醯基、第二丁氧基碳醯基、第三丁氧基碳醯基、戊氧基碳醯基、己氧基碳醯基等的碳數2～7的直鏈狀或分枝狀的烷氧基碳醯基。

作為低級烷基胺基甲醯基，可舉出例如甲基胺基甲醯基、乙基胺基甲醯基、丙基胺基甲醯基、丁基胺基甲醯基、戊基胺基甲醯基、己基胺基甲醯基、二甲基胺基甲醯基、二乙基胺基甲醯基等使用碳數1～6的低級烷基一取代或二取代而成之胺基甲醯基。

作為低級烷基，可舉出例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、正己基、異己基等碳數1～6的直鏈狀或分枝狀的烷基。又，該等亦可具有1～3個鹵素原子、低級烷氧基等作為取代基，亦可舉出例如氯甲基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基等的取代烷基。

作為低級烯基，可舉出例如乙烯基、烯丙基、丁烯基、丁二烯基、己三烯基等碳數2～6的直鏈狀或分枝狀的烯基。

作為芳烷基，可舉出例如苄基、二苯甲基、三苯甲基等。又，該等亦可具有1～5個低級烷基、低級烷氧基、鹵素原子、硝基、氰基等作為取代基，以具有1～3個為佳。

作為矽烷基保護基，可舉出例如三甲基矽烷基、第三丁基二甲基矽烷基、甲基二異丙基矽烷基、三異丙基矽烷基、四異丙基二甲矽烷氧基(TIPDS)、二苯基甲基矽烷基等。

作為胺基酸殘基，係表示從胺基酸的羧基除去羥基而形成的基，可舉出來自天然或合成的胺基酸之任一者，作為該胺基酸，可舉出例如甘胺酸、丙胺酸、β-丙胺酸、纈胺酸、異白胺酸等，只要是特開平1-104093號所記載之胺基酸殘基，任一者均可。

在此，作為能夠使用作為取代基之低級烷基可舉出與前述同樣者。

作為低級烷氧基，可舉出例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基、正戊氧基、正己氧基等的碳數1～6的直鏈狀或分枝狀的烷氧基。

作為鹵素原子，可舉出例如氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等。R² 係表示低級烷氧基低級烷基或四氫呋喃基。

在通式(I)中，R² 所表示的「低級烷氧基低級烷基」的「低級烷氧基」部分，可舉出甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基、正戊氧基、正己氧基等的碳數1～6的直鏈狀或分枝狀的烷氧基。作為該低級烷氧基部分，係以碳數1～3的烷氧基為佳，以甲氧基、乙氧基為較佳，以乙氧基為更佳。「低級烷氧基低級烷基」的「低級烷基」部分，可舉出甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、正己基、異己基等碳數1～6的直鏈狀或分枝狀的烷基。作為該低級烷基部分，係以碳數1～3的烷基為佳，以甲基、乙基為較佳，以甲基為更佳。

作為「低級烷氧基低烷基」，可舉出具有上述「低級烷氧基部分」之上述低級烷基。具體上，可舉出例如甲氧基甲基、乙氧基甲基、丙氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基、丙氧基乙基、3-甲氧基丙基、4-乙氧基丁基、6-丙氧基己基、5-異丙氧基戊基、1,1-二甲基-2-丁氧基乙基、2-甲基-3-第三丁氧基丙基、2-戊氧基乙基、2-己氧基乙基等的烷氧基烷基等，以甲氧基甲基、乙氧基甲基、丙氧基甲基為佳，以乙氧基甲基為更佳。

作為四氫呋喃基，可舉出例如2-四氫呋喃基及3-四氫呋喃基，以2-四氫呋喃基為佳。

X係表示碳原子或氮原子。

Y係表示鹵素原子或氰基。通式(I)中，作為Y所表示的鹵素原子，可舉出氟原子、氯原子、溴原子及碘原子。

在本發明的特佳實施形態之各基係如以下：

作為R¹ ，係以氫原子、烯丙基、苄基、脂肪族醯基、芳香族醯基或脂環式醯基為佳，以氫原子、苄基、乙醯基、丙醯基、異丁醯基、三甲基乙醯基、苯甲醯基、對氯苯甲醯基、環戊烷碳醯基為較佳，以氫原子、乙醯基為更佳。

作為R² ，係以低級烷氧基部分的碳數1～6之低級烷氧基甲基或2-四氫呋喃基為佳，以低級烷氧基部分的碳數1～6之低級烷氧基甲基為較佳，以乙氧基甲基為更佳。

作為X，係以碳原子為佳。

作為Y，係以氟原子或氯原子為佳，以氯原子為更佳。

以上所說明的R¹ 、R² 、X及Y的較佳態樣，亦可組合任一者。

本發明的通式(I)所表示的5-氟尿嘧啶衍生物係包含立體異構體、光學異構體、水合物等的溶劑合物及結晶多形物。

本發明的通式(I)所表示的5-氟尿嘧啶衍生物亦可以是鹽，作為鹽，係以藥理學上容許的鹽為佳。作為該等的鹽，可舉出與無機酸的鹽、與有機酸的鹽等。

具體上，作為無機酸的鹽，可例示鹽酸、硫酸、溴化氫酸、碘化氫酸、硝酸、磷酸等。

作為有機酸，可例示甲酸、乙酸、丙酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、乳酸、蘋果酸、檸檬酸、酒石酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、甲磺酸等。

本發明的化合物能夠藉由各種方法來製造得到，出示其一個例子時，例如能夠依照後述的流程圖製造。合成本發明的化合物所必要的原料能夠使用市售或文獻等的製法而容易地製造。流程圖中的取代基係與在通式(I)定義者同樣。

[化14]

[式中，R^1，係表示烯丙基、或亦可具有取代基之苄基。R² 係表示低級烷氧基低級烷基或四氫呋喃基。Y係表示鹵素原子或氰基]。

異菸鹼酸衍生物(2)的合成

將烯丙醇、苄醇或取代苄醇的鈉或鉀鹽溶解於四氫呋喃、甲苯、二甲基甲醯胺等不會影響反應的溶劑、較佳是二甲基甲醯胺，並在該溶液於室溫添加2,6-二氯異菸鹼酸的鈉鹽。隨後將所得到的混合物於60～100℃加熱攪拌2小時～24小時。較佳是於80℃反應4小時。其使用量係相對於2,6-二氯異菸鹼酸的鈉鹽，使用2～10當量、較佳是4當量的醇化物(alcoholate)為佳。反應結束後，在反應生成物添加水，並且將使用乙酸乙酯等的溶劑振動分離而得到的水層之pH使用1N-鹽酸或乙酸調整為5～6，而且使用乙酸乙酯、乙酸乙酯-正己烷的混合溶劑、甲苯等萃取。使用硫酸鈉、硫酸鎂等乾燥後，濃縮而得到的烯丙氧基、苄氧基或取代苄氧基的異菸鹼酸衍生物(2)(在本說明書中，亦有將該烯丙氧基、苄氧基或取代苄氧基的異菸鹼酸衍生物(2)簡單地表示為異菸鹼酸衍生物(2)之情形)。

步驟1異菸鹼酸醯氯衍生物(3)的合成

將異菸鹼酸衍生物(2)溶解於氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯等不會影響反應的溶劑、較佳是甲苯，在所得到的溶液，於室溫將氯化亞硫醯滴入。其使用量為1～10當量、較佳是5當量。滴入結束後，將所得到的混合物回流攪拌2～8小時、較佳是4小時。反應結束後濃縮並將殘渣直接使用於下步驟。

吡啶衍生物(4)的合成

吡啶衍生物(4)能夠依照特公平5-80451號公報、Heterocycles.第36卷、第1期、145-148、1993年等所記載之方法而得到。

又，該等吡啶衍生物(4)係以羥基吡啶構造及2(1H)-吡啶構造的互變異構體的形式存在。

步驟2酯結合體(5)的合成

將上述得到的吡啶衍生物(4)，溶解於三乙胺、二異丙基乙胺、二甲基苯胺等的有機胺鹼、較佳是對與三乙胺反應不會造成影響的溶劑例如二氯甲烷、乙腈、二甲基甲醯胺、二甲基乙醯胺、較佳是二甲基乙醯胺之混合液，並在冰冷下將在步驟1所得到的異菸鹼酸醯氯衍生物(3)的二甲基乙醯胺溶液滴入。其使用量係相對於吡啶衍生物(4)，使用1.0～1.2當量的異菸鹼酸醯氯衍生物(3)，1.0～1.2當量的有機胺鹼。在室溫使其反應1～4小時後，添加水並使用乙酸乙酯、乙酸乙酯-正己烷的混合溶劑、甲苯等萃取。使用硫酸鈉、硫酸鎂等乾燥後，濃縮且再結晶，而且使用管柱層析法精製後，使用於下步驟。

異酞酸5-氟尿嘧啶一醯胺體(6)的合成

異酞酸5-氟尿嘧啶一醯胺體(6)能夠藉由特開平2-164871號公報所記載之方法而得到的。

步驟3異酞酸5-氟尿嘧啶一醯胺-醯氯體(7)的合成

將異酞酸5-氟尿嘧啶一醯胺體(6)溶解於二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯等不會對反應造成影響的溶劑、較佳是二氯甲烷，並在該溶液於室溫將氯化亞硫醯滴入。其使用量係使用1～4當量、較佳是1.2當量。滴入結束後，將所得到的混合物回流攪拌2～8小時，以4小時為佳。反應結束後，濃縮並將殘渣直接使用於下步驟。

步驟4本發明化合物(I-a)的合成

在步驟2所得到的酯結合體(5)，溶解於三乙胺、二異丙基乙胺、二甲基苯胺等的有機胺鹼、較佳是對與三乙胺反應不會造成影響的溶劑例如二氯甲烷、乙腈、二烷、較佳是二氯甲烷，並在所得到的溶液，於冰冷下將在步驟3所得到的異酞酸5-氟尿嘧啶一醯胺-醯氯體(7)的二氯甲烷溶液滴入。其使用量係相對於酯結合體(5)，使用1.0～1.2當量的異酞酸5-氟尿嘧啶一醯胺-醯氯體(7)，1.0～1.2當量的有機胺鹼。在室溫反應1～4小時後，在反應生成物添加水並使用二氯甲烷等萃取且使用硫酸鈉、硫酸鎂等乾燥後，濃縮且再結晶，並且使用管柱層析法精製後，使用於下步驟。

步驟5本發明化合物(I-b)的合成

依照Greene著「有機合成系統的保護基；protective group in organic synthesis」出版書所記載之方法進行脫保護。

[化15]

[式中、R^1，、R² 、及Y係與前述相同]。

步驟6異酞酸一醯胺-一酯體(8)的合成

使用Chem. Pharm. Bull.第141卷、第9期、1498-1506、1993年所記載之方法，將三甲基矽烷基(TMS)化的吡啶衍生物(4-TMS)溶解於不會對反應造成影響的溶液例如二氯甲烷、乙腈、二甲基甲醯胺、較佳是乙腈，並在冰冷下將異酞酸5-氟尿嘧啶一醯胺-醯氯體(7)的乙腈溶液滴入至所得到的溶液。隨後，將氯化第2錫、四氯化鈦等的路易斯酸滴入。其使用量係相對於吡啶衍生物(4-TMS)，使用0.8～1.0當量的異酞酸5-氟尿嘧啶一醯胺-醯氯體(7)及觸媒量的路易斯酸。在室溫反應1～4小時後，在反應液添加水並使用二氯甲烷等萃取，並使用硫酸鈉、硫酸鎂等乾燥後，濃縮且再結晶，而且使用管柱層析法精製後，使用於下步驟。

步驟7本發明的化合物(I-a)的合成

將異酞酸一醯胺-一酯體(8)，溶解於三乙胺、二異丙基乙胺、二甲基苯胺等的有機胺鹼、較佳是不會對三乙胺的反應造成影響之溶劑、例如二氯甲烷、乙腈、二甲基甲醯胺、較佳是二氯甲烷，並在冰冷下將異菸鹼酸醯氯衍生物(3)的二氯甲烷溶液滴入。其使用量係相對於異酞酸一醯胺-一酯體(8)使用1.0～1.2當量的異菸鹼酸醯氯衍生物(3)、及1.0～1.2當量的有機胺鹼。在室溫反應1～4小時後，在反應液添加水使用二氯甲烷等萃取，並使用硫酸鈉、硫酸鎂等乾燥後，濃縮且再結晶，而且使用管柱層析法精製後，使用於流程圖1所記載之步驟5。

[化16]

[式中，R² 及Y係與前述相同]。

乳清酸醯氯(9)的合成

在乳清酸，添加氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯等不會對反應造成影響的溶劑之同時，或是無溶劑而在室溫將氯化亞硫醯滴入。其使用量係相對於乳清酸，為1～5當量的乳清酸、較佳是4當量。滴入結束後，將所得到的混合物回流攪拌2～8小時、較佳是4小時。反應結束後，濃縮並將殘渣直接使用於下步驟。

步驟8　本發明的化合物(I-c)的合成

將異酞酸一醯胺-一酯體(8)，溶解於三乙胺、二異丙基乙胺、二甲基苯胺等的有機胺鹼、較佳是對與三乙胺反應不會造成影響的溶劑例如二氯甲烷、乙腈、二甲基甲醯胺、較佳是與二氯甲烷之混合液，並在冰冷下乳清酸醯氯(9)的二氯甲烷溶液滴入。其使用量係相對於異酞酸一醯胺-一酯體(8)，使用1.0～1.2當量的乳清酸醯氯(9)，1.0～1.2當量的有機胺鹼。在室溫使其反應1～4小時後，在所得到的反應生成物添加水並使用二氯甲烷等萃取。使用硫酸鈉、硫酸鎂等乾燥後，濃縮且再結晶，而且使用管柱層析法精製。

[化17]

[式中，X係表示碳原子或氮原子。R³ 係表示羥基的保護基。R² 及Y係與前述相同]。

步驟9 R¹ 為羥基的保護基之本發明化合物(I-e)的合成

將在流程圖2及3所得到的吡啶衍生物(I-d)及通式R³ -Cl所表示的醯氯，溶解於不會對反應造成影響的溶液例如二甲氧基乙烷、二氯甲烷、乙腈、二甲基甲醯胺、二甲基乙醯胺、較佳是二甲氧基乙烷，並在冰冷下將吡啶、三乙胺、二異丙基乙胺、二甲基苯胺等的有機胺鹼、較佳是吡啶滴入。其使用量係相對於吡啶衍生物(I-d)，使用2.2～4.0當量的醯氯、2.2～4.0當量的有機胺鹼。在冰冷下反應0.5～4小時後，在反應液添加水並使用乙酸乙酯、乙酸乙酯-正己烷的混合溶劑、甲苯等萃取。使用硫酸鈉、硫酸鎂等乾燥後，濃縮且再結晶，而且使用管柱層析法精製。

如前述，本發明的化合物(I)或或其鹽係具有優良的抗腫瘤效果，同時能夠減輕消化管障礙等的副作用，作為抗腫瘤劑係有用的。因此，本發明的化合物(I)或其鹽在癌症的治療係有用的。在本發明，所謂癌症的治療亦包含使用放射線、外科手術等進行癌症的處置後，投給用以防止癌症的再發生之本發明化合物(I)或其鹽等。

將本發明化合物(I)或其鹽應用於包含人體之哺乳動物的前述疾病的治療時之投給量、次數等係當然按照治療對象的疾病狀態及病重程度及本發明化合物(I)及其投給路徑而變動。又，該投給量、次數等係按照各個患者的年齡、體重、全身的健康狀態、性別、飲食、投給時刻、排泄速度、並用藥劑、應答等而變動。本發明化合物(I)或其鹽係通常口服或非口服投給。投給量係通常為治療上述疾病的有效量，包含人體之哺乳動物的體重每1kg，1天的用量以設為約0.001～約100mg，以0.01～50mg/kg為佳。另外，依照情況，亦有使用該等範圍以外的用量之情況。

本發明化合物係能夠將其有效量與生理學上被容許的載體配合，並且以錠劑、膠囊、顆粒劑、散劑等的固形製劑；糖漿劑、注射劑等的液狀製劑；軟膏、洗劑、凝膠劑、乳膏劑等的外用製劑等的形式口服或非口服性(外用、吸竹、皮下注射、動-靜脈注射、肌肉內注射、膀胱內注入、腦內注入、點鼻、點眼)投給。

作為藥學上被容許的載體，能夠使用作為製劑原料所常用的各種有機或無機載體物質，且能夠以固體製劑之賦形劑、潤滑劑、結合劑、崩潰劑、液狀製劑之溶劑、溶解輔助劑、懸浮化劑等滲透壓劑、緩衝劑、無痛化劑等的形式調配。又，亦可按照必要使用防腐劑、抗氧化劑、著色劑、甜味劑等的製劑添加物。作為賦形劑的較佳例子，可舉出例如乳糖、D-甘露糖醇、澱粉、結晶纖維素、輕質矽酸酐等。作為潤滑劑的較佳例子，可舉出例如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、滑石粉、膠體二氧化矽等。作為結合劑的較佳例子，可舉出例如結晶纖維素、白糖、D-甘露糖醇、糊精、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯基吡咯啶酮等。作為崩潰劑的較佳例子，可舉出例如澱粉、羧甲基纖維素、羧甲基纖維素鈣、交聯羧甲基纖維素鈉(croscarmelose sodium)、羧甲基澱粉鈉等。作為溶劑的較佳例子，可舉出例如注射用水、醇、丙二醇、聚乙二醇(macrogol)、芝麻油、玉米油等。作為溶劑輔助劑的較佳例子，可舉出例如聚乙二醇、丙二醇、D-甘露糖醇、苯甲酸苄酯、乙二醇、三胺基甲烷、膽固醇、三乙醇胺、碳酸鈉、檸檬酸鈉等。作為懸浮化劑的較佳例子，可舉出例如硬脂醯基三乙醇胺、月桂基硫酸鈉、月桂基胺基丙酸、卵磷脂、羥基氯苯胺(benzalkonium chloride)、氯化苯銨松寧(benzethonium chloride)、一硬脂酸甘油等的界面活性劑、例如聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯啶酮、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥甲基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素等的親水性高分子等。作為緩衝劑的較佳例子，可舉出例如磷酸鹽、乙酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽等的緩衝液。作為無痛化劑的較佳例子，可舉出例如苄醇等。作為防腐劑的較佳例子，可舉出例如對羥基苯甲酸酯類、氯丁醇、苄醇、苯乙基醇、脫氫乙酸類、山梨酸等。作為抗氧化劑的較佳例子，可舉出例如亞硫酸鹽、抗壞血酸鹽等。

[實施例]

以下，舉出參考例、實施例及實驗例而具體地說明本發明，但是本發明不被該等特定的實施形態限定。

參考例1 2,6-二苄氧基異菸鹼酸(化合物2a)的合成

於氬氣流下，在52.5g 55%氫化鈉、1L二甲基甲醯胺，在冰冷攪拌下以每次少量添加57.6g 2,6-二氯異菸鹼酸。隨後，於同溫將93mL苄醇慢慢地滴入。發生氫氣停止後，在該反應物於80℃攪拌4小時後，添加1L水。使用1L乙酸乙酯：正己烷=1：1的混合溶劑振動分離，並使用75.5mL乙酸使水層成為弱酸性，進而添加1.71L水並且過濾取得析出的化合物2a且乾燥。

產率：77.17g(77%)

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

13.60(1H、brs)、7.43-7.29(10H、m)6.81(2H、s)、5.36(4H、s)

熔點：145-147℃。

參考例2 2,6-二-對甲氧基苄氧基異菸鹼酸(化合物2b)的合成

使用對甲氧基苄醇代替苄醇並依照參考例1的方法來合成化合物2b。

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

13.56(1H、brs)、7.39(4H、d、J=8.4Hz)、6.95(4H、d、J=8.6Hz)、5.33(4H、s)、3.77(6H、s)。

參考例3 2,6-二烯丙氧基異菸鹼酸(化合物2c)的合成

使用烯丙醇代替苄醇並依照參考例1的方法來合成化合物2c。

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

13.60(1H、brs)、6.77(2H、s)、6.15-5.99(2H、m)、5.38(2H、dd、J=17.2Hz、J=1.5Hz)、5.23(2H、d、J=10.4Hz)、4.82(4H、d、J=5.4Hz)。

參考例4 4-{2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基}-5-氯-2-羥基吡啶(化合物5a)、2-{2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基}-5-氯-4-羥基吡啶(化合物5b)及2,4-二{2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基}-5-氯吡啶(化合物5c)的合成

在75.45g參考例1所得到的2,6-二苄氧基異菸鹼酸(化合物2a)及800mL甲苯溶液，將98.5mL氯化亞硫醯及1.7mL二甲基甲醯胺滴入，並在80℃攪拌4.5小時。冷卻後餾去溶劑且不精製殘渣之醯氯而溶解於100mL二甲基乙醯胺，來使用於隨後的反應。在31.9g 2,4-二羥基-5-氯吡啶、31.19mL三乙胺、及1.6L二甲基乙醯胺的溶液，於冰冷下將醯氯二甲基乙醯胺溶液滴入。將所得到的混合物在室溫攪拌1小時後，加1.7L水並使用乙酸乙酯：正己烷=3：1的混合溶液來振動分離。使用硫酸鈉乾燥後，餾去溶劑並過濾取得析出的化合物5a且乾燥。

另一方面，將濾液濃縮殘渣使用矽膠管柱層析法(使用乙酸乙酯：正己烷=1：1溶出)精製，各自得到18.94g、4.74g的化合物5b、化合物5c。

化合物5a

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

12.09(1H、brs)、7.91(1H、s)、7.50-7.30(10H、m)、6.99(2H、s)、6.58(1H、s)、5.42(4H、s)

熔點：149-150℃

化合物5b

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

12.26(1H、brs)、8.27(1H、s)、7.50-7.30(10H、m)、6.98(2H、s)、6.86(1H、s)、5.42(4H、s)

熔點：136-138℃(分解)

化合物5c

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

8.75(1H、s)、7.79(1H、s)、7.50-7.30(20H、m)、7.05(2H、s)、7.02(2H、s)、5.42(8H、s)。

參考例5 2,6-二羥基-3-氯吡啶(化合物4a)的合成

使用15.15g 2,6-二氯-5-氟菸鹼酸作為原料化合物並使用與參考例1同樣的方法而得到的13.30g 2,6-二苄氧基-5-氟菸鹼酸。

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

8.02(1H、d、J=10.2Hz)、7.49-7.28(10H、m)、5.48(2H、s)、5.45(2H、s)

隨後，將5.00g 2,6-二苄氧基-5-氟菸鹼酸溶解於50mL二烷，並添加500mg 20%氫氧化鈀(50%wet)且在氫環境下反應1小時。藉由矽藻土過濾從所得到的反應物除去氫氧化鈀，並餾去溶劑而得到的2.58g 2,6-二羥基-5-氟菸鹼酸。產率：88%

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

7.44(1H、d、J=11.4Hz)、

將2.25g 2,6-二羥基-5-氟菸鹼酸溶解於25mL的二烷，並回流15分鐘。冷卻後餾去溶劑而得到的1.65g化合物4a。產率：99%

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

7.26(1H、dd、J=7.7Hz、J=11.0Hz)、5.45(1H、d、J=6.6Hz)。

參考例6 6-{2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基}-3-氟-2-羥基吡啶(化合物5d)

使用參考例5所得到的化合物4a代替2,4-二羥基-5-氯吡啶並依照參考例4的方法合成化合物5d。

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

7.79(1H、t、J=9.0Hz)、7.47-7.30(11H、m)、6.98(2H、s)、5.42(4H、s)。

參考例7

3-{3-[4-羥基-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物8a)及3-{3-[2-羥基-5-氯-4-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物8b)的合成

將3.46g 1-乙氧基甲基-3-間羥基碳醯基苯甲醯基-5-氟尿嘧啶溶解於50mL二氯甲烷，並在此添加0.9mL氯化亞硫醯、及0.04mL二甲基甲醯胺。將所得到的反應物回流2小時後，餾去溶劑並將殘渣溶解於12mL二氯甲烷來作為醯氯的二氯甲烷溶液。將1.5g 2,4-二羥基-5-氯吡啶在15mL六甲基二矽氮烷中回流6小時後，餾去溶劑並將所得到的殘渣溶解於30mL二氯甲烷，且在冰冷下將上述的醯氯二氯甲烷溶液滴入，隨後添加0.15mL無水氯化錫並在室溫攪拌15小時。使用三乙胺中和後，將溶劑餾去的殘渣使用矽膠管柱層析法(使用乙酸乙酯：正己烷=1：2溶出)精製而得到2.15g化合物8a(產率：45%)及496mg化合物8b(產率：10%)。

化合物8a

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

8.63(1H、t、J=1.6Hz)、8.49(2H、d、J=8.2Hz)、8.45(1H、d、J=6.7Hz)、8.28(1H、s)、7.86(1H、t、J=7.8Hz)、6.91(1H、s)、5.11(2H、s)、3.58(2H、q、J=6.9Hz)、1.11(3H、t、J=7.0Hz)

化合物8b

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

8.65(1H、t、J=3.3Hz)、8.51(2H、dt、J=1.7、7.7Hz)、8.46(1H、d、J=6.6Hz)、7.93(1H、s)、7.89(1H、t、J=7.8Hz)、6.63(1H、s)、5.11(2H、s)、3.58(2H、q、J=7.0Hz)、1.12(3H、t、J=7.1Hz)。

參考例8 3-{3-[4-羥基-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物8a)的另外方法合成

將3.46g 1-乙氧基甲基-3-間羥基碳醯基苯甲醯基-5-氟尿嘧啶溶解於50mL二氯甲烷，並在此添加0.9mL氯化亞硫醯、及0.04mL二甲基甲醯胺。將所得到的反應物回流2.5小時後，餾去溶劑並將殘渣溶解於12mL二甲基乙醯胺來作為醯氯的二甲基乙醯胺溶液。在1.5g 2,4-二羥基-5-氯吡啶、1.57mL三乙胺及15mL二甲基乙醯胺的溶液，於冰冷下將醯氯二甲基乙醯胺溶液滴入。將所得到的反應物在室溫攪拌8小時。加水並使用乙酸乙酯：正己烷=1：1的混合溶液振動分離。將有機層使用硫酸鈉乾燥後，餾去溶劑且將殘渣使用矽膠管柱層析法(使用乙酸乙酯：正己烷=1：1溶出)精製而得到668mg化合物8a。產率：14%

參考例9 2-{2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基}-5-氯-4-羥基吡啶(化合物5b)、4-{2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基}-5-氯-2-羥基吡啶(化合物5a)及2,4-二{2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基}-5-氯吡啶(化合物5c)的另外方法合成

使用參考例1所得到的化合物2a(1g)作為原料化合物，並使用與參考例8同樣的方法而得到醯氯。又，與參考例7同樣地將1.0g 2,4-二羥基-5-氯吡啶TMS化後，使其與醯氯反應。將使用三乙胺中和後且餾去溶劑而得到的殘渣，使用矽膠管柱層析法(使用乙酸乙酯：正己烷=1：1溶出)精製而得到1.38g化合物5b(產率：44%)、675mg化合物5a(產率：21%)、及647mg化合物5c(產率：12%)。

實施例1 3-{3-[4-(2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基)-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基乙基-5-氟尿嘧啶(化合物I-1)的合成

將17g 1-乙氧基甲基-3-間羥基碳醯基苯甲醯基-5-氟尿嘧啶溶解於200mL二氯甲烷，在此添加5.5mL氯化亞硫醯及0.4mL二甲基甲醯胺。將所得到的反應物回流2.5小時後，餾去溶劑並將殘渣溶解於60mL二氯甲烷來作為醯氯的二氯甲烷溶液，並在冰冷下滴入至21.27g參考例4所得到的化合物5a、7.3mL三乙胺及180mL二氯甲烷。將所得到的反應物在室溫攪拌1小時後，將餾去溶劑而得到的殘渣，使用矽膠管柱層析法(使用乙酸乙酯：正己烷=1：1溶出)精製而得到25.5g化合物I-1。產率：71%

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

8.77(1H、s)、8.67(1H、t、J=1.6Hz)、8.54-8.50(2H、m)、8.45(1H、d、J=6.6Hz)、7.88(1H、t、J=7.9Hz)、7.83(1H、s)、7.50-7.30(10H、m)、7.06(2H、s)、5.43(4H、s)、5.11(2H、s)、3.58(2H、q、J=7.0Hz)、1.11(3H、t、J=7.0Hz)

熔點：66-69℃。

實施例2 3-{3-[4-(2,6-二羥基異菸鹼醯氧基)-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-2)的合成

將25.3g實施例1所得到的化合物I-1溶解於800mL二烷並添加2.53g 20%氫氧化鈀(50%wet)且在氫環境下反應1小時。藉由矽藻土過濾從所得到的反應物除去氫氧化鈀，並使用200mL丙酮洗淨。將濾液的二烷、丙酮溶液濃縮且將得到的殘渣使用丙酮-正己烷(1：1)結晶化而得到的13.14g化合物I-2。產率：68%

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

11.57(2H、brs)、8.77(1H、s)、8.67(1H、t、J=1.6Hz)、8.55-8.49(2H、m)、8.45(1H、d、J=6.6Hz)、7.89(1H、t、J=7.9Hz)、7.83(1H、s)、6.47(2H、brs)、5.12(2H、s)、3.59(2H、q、J=7.0Hz)、1.12(3H、t、J=7.0Hz)

熔點：125-129℃。

實施例3 3-{3-[2-(2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基)-5-氯-4-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-3)的合成

使用參考例4所得到的5b代替化合物5a並依照實施例1的方法來合成化合物I-3。

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

8.77(1H、s)、8.71(1H、t、J=1.6Hz)、8.58-8.53(2H、m)、8.46(1H、d、J=6.6Hz)、7.91(1H、t、J=7.9Hz)、7.83(1H、s)、7.50-7.30(10H、m)、7.03(2H、s)、5.43(4H、s)、5.11(2H、s)、3.58(2H、q、J=7.0Hz)、1.12(3H、t、J=7.0Hz)。

實施例4 3-{3-[2-(2,6-二羥基異菸鹼醯氧基)-5-氯-4-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-4)的合成

使用實施例3所得到的化合物I-3並依照實施例2的方法來合成化合物I-4。

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

8.77(1H、s)、8.71(1H、brs)、8.57-8.53(2H、m)、8.47(1H、d、J=6.4Hz)、7.92(1H、t、J=7.9Hz)、7.83(1H、s)、6.41(2H、brs)、5.12(2H、s)、3.59(2H、q、J=6.3Hz)、1.12(3H、t、J=7.1Hz)。

實施例5 3-{3-[6-(2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基)-3-氟-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-5)的合成

使用參考例6所得到的5D代替化合物5a並依照實施例1的方法來合成化合物I-5。

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

8.71(1H、t、J=1.5Hz)、8.57-8.53(m、2H)、8.44(1H、d、J=6.6Hz)、8.33(1H、t、J=8.6Hz)、7.90(1H、t、J=7.9Hz)、7.62(1H、dd、J=2.7Hz、J=8.7Hz)、7.46-7.32(10H、m)、5.42(4H、s)、5.12(2H、s)、3.58(2H、q、J=7.0Hz)、1.12(3H、t、J=7.0Hz)。

實施例6 3-{3-[6-(2,6-羥基異菸鹼醯氧基)-3-氟-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-6)的合成

使用實施例5所得到的化合物I-5並依照實施例2的方法來合成化合物I-6。

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

8.71(1H、t、J=1.6Hz)、8.58-8.53(2H、m)、8.44(1H、d、J=6.8Hz)、8.32(1H、t、J=8.6Hz)、7.91(1H、t、J=7.8Hz)、7.60(1H、dd、J=2.8Hz、J=8.6Hz)、6.41(2H、brs)、5.11(2H、s)、3.58(2H、q、J=7.0Hz)、1.11(3H、t、J=7.0Hz)。

實施例7 3-{3-[4-(2,6-二苄氧基異菸鹼醯氧基)-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-1)的合成

在217mg參考例1所得到的化合物2a及4mL甲苯溶液，將0.23mL氯化亞硫醯及0.01mL二甲基甲醯胺滴入，並於80℃攪拌4.5小時。將所得到的混合物冷卻後餾去溶劑且不精製殘渣之醯氯而溶解於2mL二烷，來使用於隨後的反應。在100mg參考例7或參考例8所得到的化合物8a、0.01mL三乙胺、及10mL二烷的溶液，於冰冷下將醯氯二烷溶液滴入。將所得到的混合物在室溫攪拌8小時後，餾去溶劑並使用矽膠管柱層析法(使用乙酸乙酯：正己烷=1：1溶出)精製而得到119mg化合物I-1。產率：92%。

實施例8 3-{3-[2-(乳清醯氧基)-5-氯-4-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-7)的合成

在6g乳清酸添加35mL氯化亞硫醯及0.17mL吡啶並回流20小時後，從所得到的反應物餾去氯化亞硫醯且不精製而將其作為乳清酸醯氯。將0.59g所得到的醯氯及0.78g參考例7所得到的化合物8b溶解於10mL二烷。在該溶液將0.46mL三乙胺的5mL二烷溶液滴入，且在室溫攪拌30分鐘。從所得到的反應物過濾除去不需要物後，餾去溶劑並使用乙酸乙酯及精製水進行分液處理。將所得到的殘渣使用硫酸鎂乾燥後餾去溶劑。將所得到的粗結晶使用10mL正己烷：乙酸乙酯=3：1的混合溶劑洗淨而得到859mg化合物I-7(產率：85%)。

¹ H-NMR(DMSOd₆ ,δPPM):

11.53(1H、s)、11.49(1H、s)、8.78(1H、s)、8.71(1H、s)、8.55(2H、d、J=7.9Hz)、8.47(1H、d、J=6.6Hz)、7.92(1H、t、J=7.9Hz)、7.82(1H、s)、6.35(1H、s)、5.11(2H、s)、3.58(2H、q、J=7.0Hz)、1.12(3H、t、J=7.0Hz)。

實施例9 3-{3-[4-(2,6-二異丁醯氧基異菸鹼醯氧基)-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-8)的合成

將5.0g實施例2所得到的化合物I-2溶解於75mL1,2-二甲氧基乙烷，在冰冷下添加3.07mL異丁醯氯及1.99mL吡啶，並在同溫反應30分鐘。從所得到的反應物餾去溶劑後，添加水並使用乙酸乙酯振動分離。將有機層使用硫酸鈉乾燥後餾去溶劑。將殘渣使用矽膠管柱層析法(使用氯仿溶出)精製，來得到5.37g化合物I-8(產率：87%)。

¹ H-NMR(CDCl₃ ,δPPM):

8.64(1H、t、J=1.5Hz)、8.56(1H、s)、8.52(1H、td、J=7.9Hz、J=1.5Hz)、8.29(1H、td、J=8.0Hz、J=1.5Hz)、7.74(2H、s)、7.73(1H、t、J=7.7Hz)、7.52(1H、d、J=5.3Hz)、7.34(1H、s)、5.18(2H、s)、3.64(2H、q、J=7.1Hz)、2.89(2H、hept、J=6.9Hz)、1.36(12H、d、J=7.1Hz)、1.21(3H、t、J=6.3Hz)。

實施例10 3-{3-[4-(2,6-二氯戊烷碳醯氧基異菸鹼醯氧基)-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-9)的合成

使用環戊烷碳醯氯代替異丁醯氯並使用與實施例9同樣的方法而得到化合物I-9。

¹ H-NMR(CDCl₃ ,δPPM):

8.64(1H、t、J=1.5Hz)、8.55(1H、s)、8.52(1H、td、J=1.5Hz、J=7.8Hz)、8.29(1H、td、J=1.6Hz、J=8.4Hz)、7.74(2H、s)、7.73(1H、t、J=7.8Hz)、7.51(1H、d、J=5.1Hz)、7.33(1H、s)、5.18(2H、s)、3.65(2H、q、J=7.1Hz)、3.06(2H、qu、J=8.1Hz)、2.20-1.40(16H、m)、1.24(3H、t、J=7.1Hz)。

實施例11 3-{3-[4-(2,6-二乙醯氧基異菸鹼醯氧基)-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-10)的合成

使用乙醯氯代替異丁醯氯並使用與實施例9同樣的方法而得到化合物I-10。

¹ H-NMR(CDCl₃ ，δPPM):

8.64(1H、t、J=1.5Hz)、8.56(1H、s)、8.52(1H、td、J=8.0Hz、J=1.4Hz)、8.29(1H、td、J=8.0Hz、J=1.6Hz)、7.78(2H、s)、7.73(1H、t、J=7.7Hz)、7.51(1H、d、J=5.3Hz)、7.35(1H、s)、5.18(2H、s)、3.64(2H、q、J=7.0Hz)、2.38(6H、s)、1.24(3H、t、J=7.0Hz)。

實施例12 3-{3-[4-(2,6-二丙醯氧基異菸鹼醯氧基)-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-11)的合成

使用丙醯氯代替異丁醯氯並使用與實施例9同樣的方法而得到化合物I-11。

¹ H-NMR(CDCl₃ ,δPPM):

8.63(1H、t、J=1.8Hz)、8.55(1H、s)、8.52(1H、d、J=7.9Hz)、8.29(1H、d、J=7.9Hz)、7.77(2H、s)、7.73(1H、t、J=7.8Hz)、7.51(1H、d、J=5.3Hz)、7.35(1H、s)、5.18(2H、s)、3.64(2H、q、J=7.0Hz)、2.69(4H、q、J=7.5Hz)、1.32-1.21(9H、m)。

實施例13 3-{3-[4-(2,6-二-三甲基乙醯氧基異菸鹼醯氧基)-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-12)的合成

使用三甲基乙醯氯代替異丁醯氯並使用與實施例9同樣的方法而得到化合物I-12。

¹ H-NMR(CDCl₃ ,δPPM):

8.64(1H、t、J=1.5Hz)、8.56(1H、s)、8.52(1H、dt、J=1.5Hz、7.7Hz)、8.29(1H、dt、J=1.6Hz、J=7.9Hz)、7.73(1H、t、J=7.9Hz)、7.69(2H、s)、7.51(1H、d、J=5.3Hz)、7.33(1H、s)、5.19(2H、s)、3.65(2H、q、J=7.0Hz)、1.41(18H、s)、1.24(3H、t、J=7.0Hz)。

實施例14 3-{3-[4-(2,6-二-苯甲醯氧基異菸鹼醯氧基)-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-13)的合成

使用苯甲醯氯代替異丁醯氯並使用與實施例9同樣的方法而得到化合物I-13。

¹ H-NMR(CDCl₃ ,δPPM):

8.64(1H、s)、8.56(1H、s)、8.53(1H、d、J=7.9Hz)、8.30(1H、d、J=8.2Hz)、8.24(5H、d、J=6.6Hz)、7.91(2H、s)、7.77-7.65(3H、m)、7.56-7.39(6H、m)、5.18(2H、s)、3.64(2H、q、J=7.0Hz)、1.24(3H、t、J=7.0Hz)。

實施例15 3-{3-[4-(2,6-二-對氯苯甲醯氧基異菸鹼醯氧基)-5-氯-2-吡啶氧基碳醯基]苯甲醯基}-1-乙氧基甲基-5-氟尿嘧啶(化合物I-14)的合成

使用對氯苯甲醯氯代替異丁醯氯並使用與實施例9同樣的方法而得到化合物I-14。

¹ H-NMR(CDCl₃ ,δPPM):

8.64(1H、s)、8.57(1H、s)、8.52(1H、d、J=7.9Hz)、8.29(1H、d、J=7.9Hz)、8.18(4H、d、J=8.6Hz)、8.03(1H、d、J=8.4Hz)、7.96(2H、s)、7.74(1H、t、J=7.8Hz)、7.65-7.50(4H、m)、7.38(1H、s)、5.18(2H、s)、3.64(2H、q、J=7.0Hz)、1.24(3H、t、J=7.0Hz)。

試驗例1在體外(in vitro)之DPD及OPRT阻礙作用

(a)被驗液的調製(1)：將本發明化合物I-2以成為10mM的方式溶解於乙腈，並將其使用10mM磷酸鉀緩衝液(pH6.0)以成為1mM、100μM、10μM及1μM的方式稀釋而作為被驗液1。將其添加至以下所述的酵素反應液時最後濃度係各自為200、20、2及0.2μM。

(b)被驗液的調製(2)：將作為DPD阻礙劑之5-氯-2,4-二羥基吡啶(CDHP：吉莫斯特(GIMERACIL))以成為10mM的方式溶解於10mM磷酸鉀緩衝液(pH6.0)，並將其以成為1mM、100μM、10μM及1μM的方式稀釋而作為被驗液2。將該等添加至以下所述的酵素反應液時最後濃度係各自為200、20、2及0.2μM。

(c)被驗液的調製(3)：將作為OPRT阻礙劑之檸酸(Citra. A.)以成為10mM的方式溶解於20mM三羥基胺基甲烷-鹽酸緩衝液(pH8.0)，並將其以成為1mM、100μM及10μM的方式使用磷酸鉀緩衝液稀釋而作為被驗液(3)。將該等添加至以下所述的酵素反應液時最後濃度係各自為200、20及2μM。

(d)酵素溶液的調製：使用作為DPD酵素源之8週齡的SD系老鼠的肝臟、及作為OPRT酵素源之移殖-增殖至裸小鼠(nude mouse)而成之人體腫瘤株。亦即將老鼠的肝臟及再次培養移植而成之人體腫瘤株摘出後，立刻以成為25%(w/v)的方式添加含有0.25M蔗糖、5mM氯化鎂、1mM二蘇糖醇(dithreitol)之50mM Tris鹽酸緩衝液(Tris-HCl buffer)(pH8.0)並均勻化後，以105,000g超離心分離60分鐘，並將所得到的上部澄清液各自作為DPD及OPRT酵素液。

(e)酵素反應：DPD酵素反應係依照使用以氚標記化而成的5-FU作為基質之Tatsumi等人的方法[Gann,78：748-755(1987年)]進行反應。又，OPRT酵素反應係依照使用以氚標記化而成的5-FU作為基質之Shirasaka等人的方法[Cancer Res.,53：4004-4009(1993年)]進行反應，來求得對照群(無被驗化合物)與被驗化合物群的活性。被驗化合物之對於DPD及OPRT的阻礙率係使用[1-(被驗化合物添加時的酵素活性/對照群的酵素活性)]×100(%)之式來求取，結果係如表1及表2所表示。

(f)試驗結果：本發明化合物I-2、I-9及I-10係在體外(in vitro)的酵素系應系統會阻礙以5-FU作為基質之DPD活性及OPRT活性，其阻礙活性係與作為對照之GIMERACIL及檸酸大致相同。雖然GIMERACIL及檸酸係不具有制癌活性，但是具有DPD阻礙活性及OPRT阻礙活性。因此，得知本發明的抗腫瘤劑係具有高DPD阻礙活性及OPRT阻礙活性。

試驗例2　化合物I-2對5-FU在癌細胞的活性化(磷酸化)之阻礙效果

(a)被驗液的調製1：將本發明化合物I-2及I-10以成為1mM的方式溶解於經冷卻的生理食鹽水，並將其使用生理食鹽水進而稀釋10倍來調製100μM溶液。

(b)被驗液的調製2：作為5-FU的磷酸化之OPRT阻礙劑，將檸酸(Citra. A.)以成為1mM的方式溶解於冷卻生理食鹽水，並將其使用生理食鹽水進而稀釋10倍來調製100μM溶液。

(c)癌細胞懸浮液的調製：將作為試驗用活(intact)細胞而移植至ICR小鼠的腹腔內並使其增殖後的腹水型肉瘤(sarcoma)180細胞分離後，使用生理食鹽水洗淨並將集中後的細胞粒以成為1.25×10⁷ 個/ml的方式懸浮於漢克(Hank’s)培養液並立刻提升試驗。

(d)細胞內5-FU磷酸化阻礙實驗：於冰中在0.8ml肉瘤180細胞添加0.1ml被驗液及0.1ml 10μM 5-FU溶液並在37℃培養30分鐘。反應後立刻在反應液添加4ml經冷卻的漢克溶液並將細胞洗淨-離心分離。重複該操作2次後，在細胞粒添加2ml冷卻的5%三氯乙酸(TCA)溶液而破壞細胞且將5-FU及其病毒核心(nucleoid)代謝物質萃取。隨後，將該核酸萃取液的一部分塗抹在矽膠60F₂₅₄ 板上並使用氯仿-甲醇-乙酸(17：3：1)混合液展開，並將病毒核心部分剝離，而且測定其放射活性且測定5-FU的磷酸化濃度。以該條件求取相對於對照群(無被驗液)之被驗液1及2對5-FU磷酸化阻礙率。結果如表3所表示。

(e)試驗的結果：本發明化合物I-2及I-10係在30分鐘的反應為濃度依存性地阻礙5-FU的細胞內磷酸化，且在10μM為約20～30%，100μM為50～60%的阻礙率。對此，作為對照之檸酸係在經過30分鐘的反應為不太會阻礙5-FU的細胞內磷酸化，即便100μM亦只有少許5～15%的阻礙。從以上的結果得知本發明的化合物被細胞攝取後，依用量依存性地阻礙OPRT引起之5-FU的磷酸化。

試驗例3人體腫瘤株移植小鼠之抗腫瘤效果及副作用

(a)被驗液的調製1：將本發明化合物I-2，以成為1.5、2.25及3.0mg/ml的方式使其懸浮於0.5%(W/V)羥丙基甲基纖維素(以下略記為HPMC)溶液，並在室溫使用攪拌器攪拌約10分鐘後，於冰冷下進行超音波處理約5分鐘，來得到15mg/kg/day、22 mg/kg/day、30 mg/kg/day的化合物I-2藥液。

(b)被驗液的調製2：將本發明化合物I-10，以成為2.57、3.42及42.8mg/ml的方式使其懸浮於0.5%(W/V)羥丙基甲基纖維素(以下略記為HPMC)溶液，並在室溫使用攪拌器攪拌約10分鐘後，於冰冷下進行超音波處理約5分鐘，來得到25.7mg/kg/day、34.2 mg/kg/day、42.8mg/kg/day的化合物I-10藥液。

(c)被驗液的調製3：將本發明的化合物之中不含有檸酸部分的被驗物質(化合物8a)，以成為1.15、1.73及2.3mg/ml的方式使其懸浮於0.5%(W/V)羥丙基甲基纖維素(以下略記為HPMC)溶液，並在室溫使用攪拌器攪拌約10分鐘後，於冰冷下進行超音波處理約5分鐘，來得到11.5mg/kg/day、17.3 mg/kg/day、23mg/kg/day的化合物8a藥液。

(d)被驗液的調製4：將Tegafur(替加氟)-Gimeracil(吉莫斯特)-oteracil potassium(氧酸鉀)的莫耳比為1：0：4：1的調配劑亦即S-1(特許第2614164號公報)，以作為Tegafur量成為0.5、0.75及10mg/ml的方式使其懸浮於0.5%(W/V)羥丙基甲基纖維素(以下略記為HPMC)溶液，並在室溫使用攪拌器攪拌約10分鐘後，於冰冷下進行超音波處理約5分鐘，來得到5.0mg/kg/day、7.5mg/kg/day、10mg/kg/day的S-1藥液。

(e)被驗液的調製5：將被驗物質BOF-A2，以成為1.4、2.1及2.8mg/ml的方式使其懸浮於0.5%(W/V)羥丙基甲基纖維素(以下略記為HPMC)溶液，並在室溫使用攪拌器攪拌約10分鐘後，於冰冷下進行超音波處理約5分鐘，來得到14mg/kg/day、21mg/kg/day、28mg/kg/day的BOF-A2藥液。

(f)試驗：在生後5～6週齡的BALB/cA-nu小鼠的右腋窩部，將事先在同系統的小鼠背部皮下移植並使其增殖後的人體胃癌株(SC-2)摘出並在生理食鹽水中使用剪刀細片化成為約2mm四方者，使用移植針進行皮下移植，且至少1～2星期前飼養後，以各群(1群5～6隻)的腫瘤體積、標準偏差(S.D.)均盡可能均等的方式設定對照群及3用量的各被驗藥群(化合物I-2：3群、化合物8a：3群、S-I：3群、BOF-A2：3群)後(day0)，從第2天起開始藥劑投給。藥劑投給群係以1天1次的比率對體重10g將上述(a)～(d)所表示投給藥液各自以0.1ml的比率使用口服投給用探測器(sonde)連續口服投給14天。

對照群之患癌的各小鼠係依照相同方法只有將0.5%HPMC液連續口服投給14天。

各群的各小鼠的腫瘤體積係使用下述的數式1求取，對治療實驗開始前、第3天、第5天、第8天(1星期後)、第11天、投藥結束後的第15天(2星期後)算出各自腫瘤體積，並求取相對於開始時的腫瘤體積之腫瘤體積比(Relative Tumor Volume；RTV)。抗腫瘤效果係使用數式2，求取相對於對照群在治療期間結束後的day15之各治療群的平均腫瘤增殖阻礙率(IR；%)。又，經過15天的治療期間並觀察有無腹瀉症狀、死亡例並顯示發生數，同時使用數式3所表示的方法求取被驗藥投給結束時相對於開始時之體重變化率。結果係如表4及表5所表示。

[數式1]

腫瘤體積(mm³ )=(長徑)×(短徑)² ×1/2

[數式2]

腫瘤增殖阻礙率(IR；%)=[1-(治療群的平均腫瘤體積)/(對照群的平均腫瘤體積)]×100

[數式3]

平均體重變化率(%)=(Day15的平均體重)-(Day1的平均體重)/(Day1的平均體重)×100

試驗結果：因為本發明化合物I-2及I-10係各自用量依存性地顯示強抗腫瘤效果，同時亦未觀察到明顯地體重減少，且無觀察到顯現腹瀉或毒性死之小鼠，顯示係具有高抗腫瘤效果及低毒性之化合物。對此，在該化合物之不含有檸酸之化合物8a，雖然在使用的用量範圍抗腫瘤效果係依存性增強，但是發現強烈的體重減少及腹瀉而且亦觀察到死亡的例子。又，BOF-A2係與該發明化合物之不含有檸酸之化合物8a顯示同樣的抗腫瘤效果及毒性。亦即雖然BOF-A2在顯示強抗腫瘤效果的用量時，係發現明顯的體重減少及腹瀉且顯示毒性死。在5-FU衍生物Tegafur(替加氟)調配DPD阻礙劑Gimeracil(吉莫斯特)及消化器毒性減輕劑oteracil potassium(氧酸鉀)而成之S-1係與該發明化合物同樣地顯示用量依存性的抗腫瘤效果，同時除了劑量過高之12.5mg/kg/day以外，未觀察明顯的體重減少或發現腹瀉。

從該等可以清楚明白，本發明化合物係具有優良的抗腫瘤效果及減輕副作用的效果，如此的效果係與在抗腫瘤劑領域其有用性被廣泛地認定之S-1同程度。

又，因為相對於S-1係3劑的調配劑，本發明化合物係1化合物，在患者間，能夠期待其代謝物的體內動態產生偏差較小。具體上，為了作為提高5-FU的抗腫瘤效果同時減輕副作用、特別是消化器管毒性之對策，因為3劑的調配係各自的成分係獨立地被吸收而分布，體內動態產生偏差，其反映至5-FU的濃度偏差，會有產生未必能夠達成抗腫瘤效果與毒性平衡之情形。對此，為了達成前述目的而設計之1化合物時，因為被消化管組織吸收後，在體內迅速地被活性化而發揮其功能(從小鼠體放出5-FU、DPD阻礙、抑制消化管障礙)，認為其在活體內的活性代謝物之代謝動態，在患者間的偏差而不同係比調配劑少。

Claims

一種由通式(I)所表示之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽， [式中，R¹ 係表示氫原子或羥基的保護基，R² 係表示低級烷氧基低級烷基或四氫呋喃基，X係表示碳原子或氮原子，Y係表示鹵素原子或氰基]。
如申請專利範圍第1項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中通式(I)之基係表示基 [R¹ 係表示氫原子、烯丙基、或亦可具有取代基之苄基]、基基 [R¹ 係表示氫原子、烯丙基、或亦可具有取代基之苄基]、或基
如申請專利範圍第1項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中R¹ 係表示氫原子、烯丙基、苄基、脂肪族醯基、芳香族醯基或脂環式醯基，R² 係表示低級烷氧基部分的碳數為1~6之低級烷氧基甲基或四氫呋喃基，X係表示碳原子或氮原子，且Y係表示氟原子或氯原子。
如申請專利範圍第1項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中R¹ 係表示氫原子、苄基、乙醯基、丙醯基、異丁醯基、三甲基乙醯基、苯甲醯基、對氯苯甲醯基或環戊烷羰基，R² 係表示低級烷氧基部分的碳數為1~6之低級烷氧基低級甲基，X係表示碳原子或氮原子，且Y係表示氟原子或氯原子。
如申請專利範圍第1項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中R¹ 係表示氫原子或乙醯基，R² 係表示低級烷氧基部分的碳數為1~6之低級烷氧基甲基，X係表示碳原子或氮原子，且Y係表示氯原子。
如申請專利範圍第1項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中R¹ 係表示氫原子或乙醯基，R² 係表示低級烷氧基部分的碳數為1~6之低級烷氧基甲基，X係表示碳原子，且Y係表示氯原子。
如申請專利範圍第1項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽，其中R¹ 係表示氫原子或乙醯基，R² 係表示乙氧基甲基，X係表示碳原子，且Y係表示氯原子。
一種藥品，其係含有如申請專利範圍第1項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽作為有效成分。
一種抗腫瘤劑，其係含有如申請專利範圍第1項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽作為有效成分。
一種如申請專利範圍第1項之5-氟尿嘧啶衍生物或其鹽之用途，其係用以製造抗腫瘤劑。