TWI384990B - 用於治療胃潰瘍之乳酸菌菌株之食品組成物以及醫藥組成物 - Google Patents
用於治療胃潰瘍之乳酸菌菌株之食品組成物以及醫藥組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- TWI384990B TWI384990B TW99101071A TW99101071A TWI384990B TW I384990 B TWI384990 B TW I384990B TW 99101071 A TW99101071 A TW 99101071A TW 99101071 A TW99101071 A TW 99101071A TW I384990 B TWI384990 B TW I384990B
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- strain
- lactic acid
- acid bacteria
- helicobacter pylori
- bcrc
- Prior art date
Links
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 70
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 title claims description 35
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 title claims description 35
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims description 34
- 235000013305 food Nutrition 0.000 title claims description 24
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 6
- 208000007107 Stomach Ulcer Diseases 0.000 title claims description 5
- 201000005917 gastric ulcer Diseases 0.000 title claims description 5
- 241001468157 Lactobacillus johnsonii Species 0.000 claims description 22
- 241000186869 Lactobacillus salivarius Species 0.000 claims description 15
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 claims description 3
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims 2
- 241001122767 Theaceae Species 0.000 claims 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 claims 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 60
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 57
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 21
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 20
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 19
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 19
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 16
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 15
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 15
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 description 14
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 14
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 12
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 12
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 10
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 9
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 8
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 8
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 description 5
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N p-Hydroxyampicillin Natural products O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 4
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 4
- 208000008469 Peptic Ulcer Diseases 0.000 description 4
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 4
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 4
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 208000011906 peptic ulcer disease Diseases 0.000 description 4
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 4
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 102000001284 I-kappa-B kinase Human genes 0.000 description 3
- 108060006678 I-kappa-B kinase Proteins 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 241000186606 Lactobacillus gasseri Species 0.000 description 3
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 description 3
- 102100021904 Potassium-transporting ATPase alpha chain 1 Human genes 0.000 description 3
- 108010083204 Proton Pumps Proteins 0.000 description 3
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 3
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 2
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000008029 eradication Effects 0.000 description 2
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 description 2
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 210000004798 organs belonging to the digestive system Anatomy 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- SUBDBMMJDZJVOS-UHFFFAOYSA-N 5-methoxy-2-{[(4-methoxy-3,5-dimethylpyridin-2-yl)methyl]sulfinyl}-1H-benzimidazole Chemical compound N=1C2=CC(OC)=CC=C2NC=1S(=O)CC1=NC=C(C)C(OC)=C1C SUBDBMMJDZJVOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001131785 Escherichia coli HB101 Species 0.000 description 1
- 206010017815 Gastric perforation Diseases 0.000 description 1
- 206010017835 Gastric ulcer perforation Diseases 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 102100030595 HLA class II histocompatibility antigen gamma chain Human genes 0.000 description 1
- 101710113864 Heat shock protein 90 Proteins 0.000 description 1
- 102100034051 Heat shock protein HSP 90-alpha Human genes 0.000 description 1
- 206010019375 Helicobacter infections Diseases 0.000 description 1
- 101001082627 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen gamma chain Proteins 0.000 description 1
- 101001016865 Homo sapiens Heat shock protein HSP 90-alpha Proteins 0.000 description 1
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 1
- 241000917009 Lactobacillus rhamnosus GG Species 0.000 description 1
- 241000194035 Lactococcus lactis Species 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N Linoleic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-HZJYTTRNSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052797 bismuth Inorganic materials 0.000 description 1
- JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N bismuth atom Chemical compound [Bi] JCXGWMGPZLAOME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 208000021302 gastroesophageal reflux disease Diseases 0.000 description 1
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000001948 isotopic labelling Methods 0.000 description 1
- 229940059406 lactobacillus rhamnosus gg Drugs 0.000 description 1
- MJIHNNLFOKEZEW-UHFFFAOYSA-N lansoprazole Chemical compound CC1=C(OCC(F)(F)F)C=CN=C1CS(=O)C1=NC2=CC=CC=C2N1 MJIHNNLFOKEZEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N linoleic acid Natural products CCCCC\C=C/C\C=C\CCCCCCCC(O)=O OYHQOLUKZRVURQ-IXWMQOLASA-N 0.000 description 1
- 235000020778 linoleic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N metronidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CCO VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000282 metronidazole Drugs 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229940126409 proton pump inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012857 radioactive material Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000010414 supernatant solution Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
本發明是有關一種食品組成物以及醫藥組成物，特別是一種用於治療胃潰瘍之乳酸菌菌株之食品組成物以及醫藥組成物。
胃幽門螺旋桿菌在1982年時，由Marshall及Warren所發現與消化器官的潰瘍性發炎有關。消化器官的潰瘍性發炎一直以來認為因壓力與生活型態導致胃液分泌過盛，使潰瘍性發炎反覆發生。所以對於此疾病之治療一直朝向抑制胃液分泌或中和胃液酸度，讓疾病獲得緩解。直至1982年發現胃幽門螺旋桿菌的存在，才開始發展抗生素的治療，縮短了消化性潰瘍疾病治療的時程。2005年時，Marshall及Warren以「胃幽門螺旋桿菌及其在發炎與消化器官潰瘍疾病上所扮演的角色(the bacterium Helicobacter pylori and its role in gastritis and peptic ulcer disease)」一題，獲得諾貝爾醫學獎，直接證明此貢獻對於人類醫學上是十分重大的。
消化性潰瘍疾病在現今工商社會是層出不窮的。現代人的壓力、生活型態以及飲食無法定時定量為主因。在消化性潰瘍病人身上，多數伴隨胃幽門螺旋桿菌的感染。病人對於抗生素的治療必須要持續一段時間的延續性，但經常因繁忙的生活而有所忽略，導致菌體有可能產生抗藥性。再者，使用抗生素的治療會一併消滅人體內的有益菌，因而對於人體引發不良之症狀。
以藥物治療胃幽門螺旋桿菌通常得併用多種藥物，這些藥物有抗生素，如四環黴素(amoxicillin)、巨環類抗生素(metronidazole)等、必鹽(bismuth)、質子幫浦阻斷劑(proton pump inhibitor)，如losec、takepron。單獨使用一種抗生素易產生抗藥性，還會讓這些抗藥的菌種趁機坐大，收不到任何效果，故通常會選用兩種抗生素再加上必鹽或是質子幫浦阻斷劑，也就是「三合一療法」。但必鹽的效果似乎不如質子幫浦阻斷劑來的好，故在台灣也少用必鹽。一般療程為兩週，胃幽門螺旋桿菌根除率可達90%。如果只用一種抗生素外加質子幫浦阻斷劑，則根除率減為80%～85%。目前在台灣，健保給付也是以兩週為限，除非有特殊病例需要延長治療或再次治療。除了以上的藥物以外，也有使用乙型抗組織氨藥物取代質子阻斷劑，究竟如何選擇最佳的藥物組合，必需視病人的狀況而定。但是這種三合一療法也有其缺點在，包括副作用的產生，如嘔心、腹瀉、脹氣、暈眩等，常因此影響到病人服藥的順服性。
一般食用含乳酸菌(LAB)之產品僅具有調整腸道的健康效果，雖然有數以萬計的乳酸菌菌株存在自然界，但僅有少數乳酸菌株具有抑制胃幽門螺旋桿菌活性的特質。少數這些菌株所具有的耐酸與耐膽鹽能力、吸附胃黏膜表皮細胞之能力及在通過腸胃道後仍可存活的能力等特性，是篩選有促進健康效果的菌株時的重要依據。時至今日，僅有少數幾株經證明其具有抑制胃幽門螺旋桿菌活性效果之乳酸菌菌株被確認出來。而乳酸菌對身體健康的功能在於菌株(strain)的特異性而非菌種(species)，此種對於人之身體健康有特殊功效之菌株稱為功能性益生菌(Guidelines for the evaluation of probiotics in food；Report of joint FAO/WHO working group on drafting guidelines for the evaluation of probiotics in food；London Ontario,Canada April 30 and May 1,2002：1-7)。
國內外有許多乳酸菌與胃幽門螺旋桿菌反應有關之文獻報導。在針對乳酸菌抑制胃幽門螺旋桿菌活性的能力進行體外之研究方面，由益生菌所產生的結合型亞麻油酸，經由分解IKK-γ(IκB kinase：IκB激酶)及Hsp90(Heat shock protein 90；熱休克蛋白90)複合體，啟動NF-κB(Nuclear factor-kappaB；核轉錄因子-κB)訊息傳遞鏈，在被胃幽門螺旋桿菌感染且發炎的胃部黏膜表皮細胞，產生抗發炎活性(Jung M. Kim,2008)。活性乳酸菌Lactobacillus plantarum
MLBPL1，Lactobacillus rhamnosus
GG，Lactococcus lactis
在細胞上可減少胃幽門螺旋桿菌的附著約50%，且活性乳酸菌可以抑制被胃幽門螺旋桿菌感染的細胞產生IL-8(Interleukin-8；細胞介白素-8)，降低細胞分泌IL-8的濃度，有助於減少細胞的發炎反應及胃幽門螺旋桿菌接受器CD74的產生(S.Rokka,2008)。
本發明一方面廣義的包含唾液乳酸桿菌(Lactobacillus salivarius
)AP-32菌株，食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910437，或組合唾液乳酸桿菌AP-32菌株，食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910437及約氏乳酸桿菌(Lactobacillus johnsonii
)MH-68菌株，食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910438之生物性培養物，以及生理上可接受的賦形劑或稀釋劑所組成之食品組合物或醫藥組合物。
在另一項具體實施例中，增強抗胃幽門螺旋桿菌能力之生理上可接受之唾液乳酸桿菌AP-32菌株，食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910437，或組合唾液乳酸桿菌AP-32菌株，食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910437以及約氏乳酸桿菌MH-68菌株，食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910438之生物性培養物。
又，另一項具體實施例中，本發明可廣義的包括經由乳酸菌菌株與胃幽門螺旋桿菌競爭、抑制分析及動物試驗、人體臨床試驗所證實具有抑制胃幽門螺旋桿菌活性之任一種前述生物性培養物。
本發明亦可廣義的包括本申請案說明書中分開或總合說明之部分、構成要件與特徵，及任何包含該等部分、構成要件與特徵中任何一者或更多者之任何或全部組合，且若本文所述及之明確完整事物已於與本發明有關之相關技藝中出現已知之同等物時，此等已知之同等物將如同獨立事項併入本文中。
本發明可廣義的包含由下列任一種乳酸菌菌株，其選自以下任一或多種組合之生物性培養物：唾液乳酸桿菌(Lactobacillus salivarius
)AP-32菌株，食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910437及約氏乳酸桿菌(Lactobacillus johnsonii
)MH-68菌株，食品工業發展研究所寄存編號BCRC 910438。
許多文獻指出益生菌可以分泌大量酸性物質，幫助已感染胃幽門螺旋桿菌病人平衡胃內之胃液pH值、破壞胃幽門螺旋桿菌侵蝕細胞後所形成之氨雲、以及與胃幽門螺旋桿菌競爭生存之空間，以達到抑制胃幽門螺旋桿菌活性之功效。
本發明所述之乳酸菌菌株之冷凍乾燥培養物已寄存於台灣食品工業發展研究所，地址為中華民國新竹市食品路331號。寄存之詳細資料如表1所示：
如表一所列已寄存的兩株乳酸菌已發現具有抗胃幽門螺旋桿菌的能力，包括抑制胃幽門螺旋桿菌之活性、對於胃幽門螺旋桿菌抗生素治療所引起之副作用(例如腹瀉等)以及胃部不舒服症狀(例如胃脹氣、胃酸逆流等)有減緩及治療的功能。
根據16S rDNA序列分析以及API細菌鑑定系統分析結果來確認菌株在分類學上的特徵。發現本發明所述之兩株乳酸菌分別為唾液乳
酸桿菌以及約氏乳酸桿菌。上述菌株在形態學及一般性質上的特徵詳細列於表2：
檢視本發明之抗胃幽門螺旋桿菌之乳酸菌株-唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437以及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438對尿素酶的抑制效果，其係將胃幽門螺旋桿菌與前述抗胃幽門螺旋桿菌之乳酸菌分別共同培養後測定培養基內氨的濃度，藉此來驗證上述菌株之抗胃幽門螺旋桿菌的能力。使用如下之實驗步驟：
1.培養胃幽門螺旋桿菌之菌液到達適量之菌數濃度。
2.取適量胃幽門螺旋桿菌之菌液加入適量之乳酸菌培養液之菌液或適量之胃幽門螺旋桿菌之菌液加入適量之Amoxicillin(抑制幽門桿菌生長之正控制組)。
3.混合均勻後將1 mL液體加入斜面培養基作雙相培養法，37℃厭氧環境培養24小時。
4.將步驟3之菌液離心3000 rpm、10分鐘，取上清液，進行尿素酶活性分析試驗。
5.配製尿素酶反應緩衝液：20% urea+0.012% phenol red within PBS，pH 6.5。
6.取10 μL菌液之上清液加入300 μL尿素酶反應緩衝液放入酵素免疫分析法(ELISA)培養皿中，37℃反應1小時。
7.測量550 nm之吸光值，需以尿素酶反應緩衝液作為空白對照組。吸光值愈高，液體愈紅愈鹼，代表胃幽門螺旋桿菌活性愈好，分泌之尿素酶愈多。
數據之統計分析如表3、表4及圖1、圖2所示，以平均值±標準差(Mean±SD)表示之。圖1及圖2所示為當分別以108
至109
個cfu(Colony-Forming Units)唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437或約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438與108
至109
個cfu(Colony-Forming Units)胃幽門螺旋桿菌在厭氧環境下共同培養37℃24小時後，取上清液進行尿素酶活性分析試驗。正控制組為Amoxicillin抗生素，負控制組為E.coli
HB101。
由圖1所示，抗生素濃度為240 μg/mL時，並無法抑制胃幽門螺旋桿菌分泌尿素酶代謝產生氨的能力，所以上清液呈現鹼性，即表示上清液內含高濃度的氨。L.gasseri
、L.rhamnnosus
及240 μg/mL抗生素，皆比唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437、約氏乳酸桿菌MH-68
菌株BCRC 910438及1200 μg/mL抗生素高出近5倍之氨濃度，顯示L.gasseri
、L.rhamnnosus
及240 μg/mL抗生素並未使胃幽門螺旋桿菌失去生物活性。
圖2以E.coli
HB101作為負控制組，計算乳酸菌菌株及抗生素之抑制能力。計算方法為：(E.coli
HB101與胃幽門螺旋桿菌共同培養後之上清液吸光值-乳酸菌與胃幽門螺旋桿菌共同培養後之上清液吸光值)/E.coli
HB101與胃幽門螺旋桿菌共同培養後之上清液吸光值×100%。計算之數值即為菌株抑制胃幽門螺旋桿菌生物活性範圍之百分比。如圖2所示，唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437、約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438以及1200 μg/mL抗生素抑制胃幽門螺旋桿菌之能力比其他三組高於76%之多，顯示唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437、約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438有助於降低胃幽門螺旋桿菌之生物活性並進一步抑制胃幽門螺旋桿菌之生長。表3及表4為本發明之菌株及控制組分別與胃幽門螺旋桿菌培養，其上清液之吸光值以及抑菌範圍百分比(means±SD)：
胃幽門螺旋桿菌會分泌尿素酶，分解尿素，產生氨及二氧化碳。因此，13
C呼氣試驗則是使用此特性發展出來的，此方法的原理是胃幽門螺旋桿菌在體內產生尿素酶，用13
C或14
C標記的尿素由受試者服下後，即分解產生帶同位素標記的二氧化碳，收集呼氣標本，用液體閃爍記數器或用氣體核素質譜儀對標記的二氧化碳，靈敏度高，可定量，患者無痛，方法簡單快速，對檢測胃幽門螺旋桿菌是否根治十分可靠。但因14
C有少量放射性物質，故目前均用13
C尿素呼氣實驗法。以抽血檢驗方式收集16位確定曾感染胃幽門螺旋桿菌病人，進行13
C呼氣試驗，其中有8位病人確定為感染胃幽門螺旋桿菌病人：
1.確定病人截至目前為止並無胃潰瘍或胃穿孔之重大症狀。
2.試驗前四週停止服用任何與乳酸菌相關之產品。
3.服用唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437以及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438膠囊，每顆膠囊之含菌量為2×109
cfu/capsule(Colony-Forming Units/capsule)。早晚各一顆，持續服用4週。
4.四週服用完畢，停用兩週後進行13
C呼氣試驗。
5.觀察服用前後13
C呼氣試驗數值之變化。
數據之統計分析如表5及圖3、圖4所示，圖3為病人13
C呼氣試驗數值分佈情形；圖4為13
C呼氣試驗數值，以Mean±SD表示之。圖3所示為8位病人服用唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438膠囊前後，其13
C呼氣試驗數值之分佈及變化。如圖4所示，8位病人服用唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438膠囊前後，其13
C呼氣試驗數值之平均值±標準差，結果顯示病人服用唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438膠囊後，其13
C呼氣試驗數值有顯著降低，明確顯示唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438有抑制人體內胃幽門螺旋桿菌之生長及生理活性。表5所示為病人服用唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438膠囊前後，13
C呼氣試驗數值(means±SD)：表5人體臨床試驗預試驗，服用唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438膠囊前後，13
C呼氣試驗數值。
乳酸菌要發揮抗胃幽門螺旋桿菌的效果除了產酸能力外，更要確認菌株能夠在人體內發揮其與胃幽門螺旋桿菌競爭抑制作用，因此，進行人體臨床試驗是必要之手段。經由人體臨床試驗預試驗結果，本
發明的抗胃幽門螺旋桿菌乳酸菌可以提供治療或舒緩胃幽門螺旋桿菌感染後所造成症狀的醫療用途。本發明所描述的抗胃幽門螺旋桿菌乳酸菌可同時降低胃幽門螺旋桿菌生理活性並抑制其生長。本發明的一個目標就是繼續朝向達成這些希求或至少提供大眾在胃幽門螺旋桿菌治療上除抗生素外的新選擇，本發明找出對人體無副作用且有益健康的抗胃幽門螺旋桿菌乳酸菌來作為胃幽門螺旋桿菌治療的新選擇。
以上所述之實施例僅是為說明本發明之技術思想及特點，其目的在使熟習此項技藝之人士能夠瞭解本發明之內容並據以實施，當不能以之限定本發明之專利範圍，即大凡依本發明所揭示之精神所作之均等變化或修飾，仍應涵蓋在本發明之專利範圍內。
圖1顯示，分別以108
至109
個cfu(Colony-Forming Units)唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437或約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438與108
至109
個cfu(Colony-Forming Units)胃幽門螺旋桿菌在厭氧環境下共同培養37℃，24小時後，取上清液進行尿素酶活性分析試驗。正控制組為Amoxicillin抗生素。抗生素濃度為240 μg/mL時，並無法抑制胃幽門螺旋桿菌分泌尿素酶代謝產生氨的能力，所以上清液呈現鹼性，表示上清液內含高濃度的氨。L.gasseri
、L.rhamnnosus
及240 μg/mL抗生素，皆比唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437、約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438及1200 μg/mL抗生素高出近5倍之氨濃度。
圖2顯示，分別以108
至109
個cfu(Colony-Forming Units)唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437或約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438與108
至109
個cfu(Colony-Forming Units)胃幽門螺旋桿菌在厭氧環境下共同培養37℃，24小時後，取上清液進行尿素酶活性分析試驗。正控制組為Amoxicillin抗生素，負控制組為E.coli
HB101，計算
乳酸菌菌株及抗生素之抑制能力。計算方法為：(E.coli
HB101與胃幽門螺旋桿菌共同培養後之上清液吸光值-乳酸菌與胃幽門螺旋桿菌共同培養後之上清液吸光值)/E.coli
HB101與胃幽門螺旋桿菌共同培養後之上清液吸光值×100%。計算之數值即為菌株抑制胃幽門螺旋桿菌生物活性範圍百分比。唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437、約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438及1200 μg/mL抗生素抑制胃幽門螺旋桿菌之能力比其他三組高於76%之多。
圖3顯示，8位病人服用唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438膠囊前後，其13
C呼氣試驗數值之分佈及變化。病人服用唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438膠囊前後，其13
C呼氣試驗數值有顯著降低，明確顯示唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438有抑制人體內胃幽門螺旋桿菌之生長及生理活性。
圖4顯示，8位病人服用唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438膠囊前後，其13
C呼氣試驗數值之平均值±標準差。病人服用唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438膠囊前後，其13
C呼氣試驗數值有顯著降低，明確表達唾液乳酸桿菌AP-32菌株BCRC 910437及約氏乳酸桿菌MH-68菌株BCRC 910438有抑制人體內胃幽門螺旋桿菌之生長及生理活性。
Claims (6)
- 一種食品組合物，包含：用於治療胃潰瘍之乳酸菌菌株，該菌株包含唾液乳酸桿菌(Lactobacillus salivarius )AP-32菌株，寄存編號BCRC 910437，或組合唾液乳酸桿菌AP-32菌株，寄存編號BCRC 910437以及約氏乳酸桿菌(Lactobacillus johnsonii )MH-68菌株，寄存編號BCRC 910438之生物性培養物，上述菌株均寄存於台灣新竹食品工業發展研究所(FIRDI)；以及生理上可接受的賦形劑或稀釋劑。
- 如請求項1所述之食品組合物，其中該賦形劑或稀釋劑為一種食品。
- 如請求項2所述之食品組合物，其中該食品包含醱酵乳、優格、乳酪、乳製飲品乳粉、茶、咖啡或以上之組合。
- 如請求項1所述之食品組合物，其中該乳酸菌菌株為具有活性的菌株。
- 一種治療胃潰瘍之醫藥組合物，包含：用於治療胃潰瘍之乳酸菌菌株，該菌株包含唾液乳酸桿菌(Lactobacillus salivarius )AP-32菌株，寄存編號BCRC 910437，或組合唾液乳酸桿菌AP-32菌株，寄存編號BCRC 910437以及約氏乳酸桿菌(Lactobacillus johnsonii )MH-68菌株，寄存編號BCRC 910438之生物性培養物，上述菌株均寄存於台灣新竹食品工業發展研究所(FIRDI)；以及醫藥上可接受的賦形劑或稀釋劑。
- 如請求項5所述之醫藥組合物，其中該乳酸菌菌株為具有活性的菌株。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TW99101071A TWI384990B (zh) | 2010-01-15 | 2010-01-15 | 用於治療胃潰瘍之乳酸菌菌株之食品組成物以及醫藥組成物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TW99101071A TWI384990B (zh) | 2010-01-15 | 2010-01-15 | 用於治療胃潰瘍之乳酸菌菌株之食品組成物以及醫藥組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW201124146A TW201124146A (en) | 2011-07-16 |
| TWI384990B true TWI384990B (zh) | 2013-02-11 |
Family
ID=45047002
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW99101071A TWI384990B (zh) | 2010-01-15 | 2010-01-15 | 用於治療胃潰瘍之乳酸菌菌株之食品組成物以及醫藥組成物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| TW (1) | TWI384990B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI812128B (zh) * | 2022-03-29 | 2023-08-11 | 豐華生物科技股份有限公司 | 乳酸菌或其發酵物用於維持或改善腸胃狀況的用途 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI451871B (zh) * | 2010-04-30 | 2014-09-11 | Glac Biotech Co Ltd | 用以抑制發炎反應及抗陰道炎之含乳酸菌食品組合物及醫藥組合物 |
| TWI887550B (zh) * | 2022-06-23 | 2025-06-21 | 安根有限公司 | 可預防或治療幽門螺旋桿菌感染的乳酸菌菌株及其相關應用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09241173A (ja) * | 1996-03-01 | 1997-09-16 | Wakamoto Pharmaceut Co Ltd | 乳酸菌を有効成分とする抗胃炎剤、抗潰瘍剤および醗酵食品 |
| US7150986B2 (en) * | 2000-08-25 | 2006-12-19 | Wakamoto Pharmaceutical Co., Ltd. | Lactic acid bacteria-containing probiotics products |
-
2010
- 2010-01-15 TW TW99101071A patent/TWI384990B/zh active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09241173A (ja) * | 1996-03-01 | 1997-09-16 | Wakamoto Pharmaceut Co Ltd | 乳酸菌を有効成分とする抗胃炎剤、抗潰瘍剤および醗酵食品 |
| US7150986B2 (en) * | 2000-08-25 | 2006-12-19 | Wakamoto Pharmaceutical Co., Ltd. | Lactic acid bacteria-containing probiotics products |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 2003年06月04日，Favourable effect of regular intake of fermented milk containing Lactobacillus johnsonii on Helicobacter pylori associated gastritis，Pantoflickova et al，Aliment Pharmacol Ther 2003 18: 805–813 * |
| 2005年12月，Lactobacillus johnsonii La1 Attenuates Helicobacter pylori-Associated Gastritis and Reduces Levels of Proinflammatory Chemokines in C57BL/6 Mice，Dionyssios et al，CLINICAL AND DIAGNOSTIC LABORATORY IMMUNOLOGY, Dec. 2005, p. 1378–1386 * |
| 2008年02月08日，Strain-specific inhibition of Helicobacter pylori by Lactobacillus salivarius and other lactobacilli，Kieran et al，Journal of Antimicrobial Chemotherapy (2008) 61, 831-834 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI812128B (zh) * | 2022-03-29 | 2023-08-11 | 豐華生物科技股份有限公司 | 乳酸菌或其發酵物用於維持或改善腸胃狀況的用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TW201124146A (en) | 2011-07-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Borges et al. | Probiotic supplementation in chronic kidney disease: a double-blind, randomized, placebo-controlled trial | |
| US11116806B2 (en) | Composite probiotic lactic acid bacteria powder and preparation method and use thereof | |
| TWI542353B (zh) | 用以抗陰道炎之含乳酸菌食品組合物及醫藥組合物 | |
| TWI574633B (zh) | 包含益生菌及益生質成分及礦物鹽及乳鐵蛋白之組合物 | |
| CN102835657B (zh) | 用以抑制发炎反应及抗阴道炎的含乳酸菌食品组合物及医药组合物 | |
| EP2000530B1 (en) | Composition of lactobacillus strains and the application of the composition of lactobacillus strains | |
| CN103655637B (zh) | 胚芽乳酸杆菌cmu995菌株的制药用途 | |
| CN102711778B (zh) | 利用动物双歧杆菌细菌或含有这种细菌的发酵乳制品减轻胃肠炎症的方法 | |
| WO2020063531A1 (zh) | 副干酪乳杆菌et-22及其用途 | |
| Rodríguez et al. | Infectious mastitis during lactation: a mammary dysbiosis model | |
| TWI384990B (zh) | 用於治療胃潰瘍之乳酸菌菌株之食品組成物以及醫藥組成物 | |
| TWI754929B (zh) | 乳酸菌用於提升對腸病毒７１型之抵抗力之用途 | |
| CN101076346B (zh) | 乳酸菌及其在预防腹泻中的应用 | |
| CN102835666B (zh) | 用于治疗胃溃疡的乳酸菌菌株的食品组合物以及医药组合物 | |
| CN104769100A (zh) | 用于治疗幽门螺杆菌感染的嗜热链球菌菌株 | |
| TWI451871B (zh) | 用以抑制發炎反應及抗陰道炎之含乳酸菌食品組合物及醫藥組合物 | |
| CN103987839B (zh) | 能够抑制幽门螺杆菌菌株粘附至上皮细胞的新德式乳杆菌保加利亚亚种菌株 | |
| CN116426442B (zh) | 一种降低体脂及提升抗氧化能力的益生菌及其应用 | |
| Mitra et al. | Novel 3-strain Combinatorial Probiotics Alleviates Symptoms of Inflammatory Bowel Disease in Mice | |
| US12514884B2 (en) | Composition for use in the treatment of group-B streptococcus (GBS) infections | |
| CN118562689A (zh) | 一株抗幽门螺杆菌的凝结魏茨曼氏菌vb320及其应用与培养装置 | |
| TWI392498B (zh) | 戊糖乳桿菌ｌｐｓ１６及其在抑制幽門螺旋桿菌之用途 | |
| CN121427738A (zh) | 一种改善婴幼儿功能性便秘的植物乳植杆菌lp-z6及其应用 | |
| CN117327612A (zh) | 一种能够增加肠道蠕动性的益生菌及其应用 | |
| CN119530074A (zh) | 一种格氏乳杆菌m17c及其组合物 |