TWI251590B - New spirocondensed quinazolinones and their use as phosphodiesterase inhibitors - Google Patents

Description

1251590 玖、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明為關於螺三環之衍生物，其製備之方法，及其作 為磷酸二酯酶抑制劑之用途。 【先前技術】 磷酸二酯酶（PDE)藉由水解關键的第二信息腺甞3f，5f-環 單磷酸及鳥糞核甞3\5f-環單磷酸（分別為cAMP及cGMP)成 為其相應之5單麟核苷酸，在各種生物之過程中扮演重要 的角色。因此，PDE活性之抑制會產生cAMP及cGMP細胞 内含量水平之增加，使得有關各種功能反應之特定蛋白質 磷酸化徑路活化。 至少有十一個哺乳動物環核甞酸磷酸二酯酶之同族酵素 ，編號從PDE 1至PDE 11，為基於其主結構，物質之特異性 或對輔因子之敏感性或抑制藥物而被鑑別出。 在這些磷酸二酯酶中，PDE7為對cAMP特異性之PDE。其 生化及藥理特性顯示其為高親和性之cAMP-特異性 PDE(Km=0.2 μΜ)，不被cGMP強度選擇性PDE同族酵素抑 制劑所影響。 PDE7之活性或蛋白質曾在T-細胞系、B_細胞系、呼吸道 上皮（AE)細胞系及數種胚胎組織中被偵測出。 以選擇性PDE7之抑制來增加cAMP之含量水平似乎是一 有力的保證來特異性地封鎖或調控T-細胞及B-細胞媒介免 疫反應。進一步之研究已證明了提升細胞内cAMP之含量水 平能調控發炎及免疫程序。該選擇性的方法或許能避免已 87840.doc 1251590 知選擇性PDE抑制劑（如PDE3或PDE4選擇性抑制劑）相關聯 之副作用，而該副作用限制其用途。 PDE7在T-細胞活化之功能性角色也曾被揭示；因此，選 擇性PDE7抑制劑被選來治療T-細胞有關之疾病。 AE細胞藉由釋放媒介物如花生浸晞酸代謝物及細胞激 素來活躍地參與發炎的呼吸道疾病。PDE7的選擇性抑制可 以是一種供治療AE細胞相關疾病之有用的抗炎方法。 B細胞為過敏反應之習知關鍵角色，因此選擇性PDE7抑 制劑被選來治療B-細胞有關之疾病。 因此，需要一個選擇性PDE7抑制劑，在非常低濃度時具 有活性，即較佳為奈莫耳抑制劑。 WO 88/015 08揭示下式之化合物 R2、 R1

其中R為Η，燒基、烷氧基烷基、輕烷基、函素、氰基、胺 基甲醯基、烷基胺基甲醯基、甲醯基、烷胺基或胺基； X為-(CR4R5)a-NR6-(CR4R5)b-;

Rl，R2，R3及R5為Η或烷基； R4及R6為Η，烷基或芳烷基，a及b為0，1或2以及a+b=0，1 或2 ; R4及R5基於鄰接之碳原子可一起形成碳-碳雙键；以 及卵形的R4及R5基可一起形成螺取代物，-(CH2)d-，其中d 為2至5 ;或其醫藥上可接受的鹽。該化合物被描述作為強心 劑0 87840.doc 1251590 WO 00/66560揭示了下式之化合物

該等化合物被描述為黃體酮受體之調控劑。 【發明内容】 本發明k供式（I)之化合物，其係PDE抑制劑，較佳是pDE7 抑制劑

• m為1，2或3，及 • R1選自CH3，Cl，Br及F以及， • R2選自 。Q^Q^Q'Q4其中， Q1為一單鍵或直鏈或支鏈的（Ci_C6)伸烷基； Q2為一飽和的4至6_員雜環，其包括一或二個選自〇 或N之雜原子； _ Q3為一直鏈或支鏈的亞烷基；

Q4為4至8-員，芳香族或非芳香族之雜環，其包括工 至4個選自〇，S，s(=〇)，s〇2&N<雜原子，該雜原 子視需要以一或數個基取代，較佳為一個，選自〇R 87840 1251590 ，NRR’，CN及（CVC6)烷基，其中R及R，為相同或不 同，選自Η及（Ci-CJ烷基； Q2鍵結至Q1之原子為碳原子，及 Q4鍵結至Q3之原子為碳原子； 〇 ( C 1 - C 6 )坑基’ 該烷基被1至3個基取代，較佳是一個，選自OR4， COOR4，NR4R5，NRC(=0)R4，C(=0)NR4R5 及 so2nr4r5，其中， R為H或（CVC6)烷基； R4為被一或數個基取代之（CrCO烷基，較佳是1至3 個，選自 F、CN、S(=0)R6、S03H、S02R6、SR7、 (C=0)-NH-S02_CH3、C(=0)R7、NR，C(=0)R7、 NR，S02R6、C(=0)NR7R8、0_C(=0)NR7R8及 S02NR7R8 ，其中R’為H或（Ci-CJ烷基，R6為視需要以1或2個 OR”基取代之（CVC6)烷基，其中R”選自Η及（CVC6) 烷基，R7及R8為相同或不同，選自Η及R6 ; _ R5選自R4、Η及（Ci-CJ烷基；或 該烷基為 1) 以1至3個基來取代，較佳是1個基，選自0C(=0)R4 、SR4、S(=0)R3、C(=NR9)R4、C(=NR9)-NR4R5、 NR-C(=NR9)-NR4R5、NRCOOR4、NR_C(=0)-NR4R5 、nr-so2-nr4r5、nr-c(=nr9)-r4及nr-so2-r3與 2) 視需要以1或2個選自OR4、COOR4、C(=0)-R4、 NR4R5、NRC(=0)R4、C(=〇)NR4R5及 S02NR4R5之 87840 -9- 1251590 本發明更有關於式（i)化合物之用途，供醫藥之製造以便 預防或治療疾病，其中，以PDE7抑制劑之治療是適切的。 本發明也提供治療疾病的方法，其中，以PDE7抑制劑治 療疋恰當的，該方法包括以其需要之有效含量之式⑴化合 物投與至哺乳動物。 本發明亦為關於醫藥組合物，其包括式（I)之化合物、伴 隨醫樂上可接受的載劑、賦形劑或傳遞系統。 本發明亦為關於製備式（I)化合物之製備方法。 【實施方式】 本發明提供作為PDE7抑制劑之化合物，具有化學式（I)

其中，R1，R2及m定義如前。 較佳之式（I)化合物原子團為其中R2是（Ci-CO虎基之原子 團，該燒基以選自 OR4、COOR4、NR4R5、NRC(=0)R4、 C(=0)NR4R5及S02NR4R5之原子團所取代，其中， • R為Η或（cvc6)烷基； • R4為以 1至 3個選自 S(=0)R6、S02R6、NR，C(=0)R7 、NR，S〇2R6、C(=0)NR7R8、o-c(=o)nr7r8 及 S02NR7R8之基所取代之（CVC6)烷基，其中R6為 (cvc6)烷基及R’，R7及R8為相同或不同，選自Η 及（Ci-C6)烷基； 87840.doc -11 · 1251590 • R5選自R4、Η及（CVC6)烷基。 較佳地，R2為（CVC4)燒基，該烷基以nr4r5或C卜0)NR4R5 基來取代，其中， • R4 為以選自 S(二〇)CH3、NHC(=0)CH3 及 C(=0)NR7R8之基所取代之（Ci-C6)烷基，其中R7及 R8為相同或不同並選自Η及甲基； • R5選自Η及甲基。 另一較佳的式（I)化合物原子團為其中R2為（C「C6)烷基之 原子團， 該烷基為 1) 以1至3個，較佳為1個，選自〇C(=〇)R4、SR4、 S(=0)R3、NRCOOR4、NR-C(=0)-NR4R5、 nr_so2-nr4r5及nr-so2-r3之基所取代，及 2) 視需要以OH或OCH3取代； 其中， • R選自Η及CH3 ; • R3為（CVC6)烷基，未取代或以1至3個選自F、CN、 S(=0)R6、S03H、S02r6、（C=〇)-NH-S〇2-CH3、OR7 、SR7、COOR7、C(=0)R7、0-C(=〇)NR7R8、NR7R8 、NR，C(=〇)R7、NR，S02R6、C(=〇)NR7R8及 s〇2nr7r8 之基所取代，其中R6為（CVCJ烷基及R’ ’ r7&r8為 相同或不同並選自H及（CrCJ烷基； • R4及R5為相同或不同並選自Η及R3。 較佳地，R2為以S(=0)R3取代的（Ci-C6)烷基’其中R為 87840.doc -12- 1251590 (CVC6)燒基，視需要以1至3個選自S(二0)R6、S〇2r6、nr7r8 、OR7、NR，C〇〇)R7、nr，so2r7、C(=〇)NR7R8 及 0-C(=〇)NR7R8之基所取代，其中r6為（CVC6)烷基及R’，R7 及R8為相同或不同並選自H及（Ci-Cd烷基。 較佳地，R2為以S(=0)R3取代的（Ci-CJ烷基，其中R3為 (Ci-C6)燒基，較佳為甲基。 另一較佳的式⑴化合物原子團為其中R2為q1_q、qLq4 ，其中， _ Q1為一單鍵或直鏈或支鏈之（Ci_C6)伸烷基； _ Q為一飽和的4至6-員含一個氮原子之雜環； _ Q3為一直鏈（(VCO亞烷基； Q4為一 5或6·員，含1至4個氮原子之芳香族雜環，該 雜環視需要以一個甲基取代； _ Q2連結至Q1之原子為碳原子，及 _ Q4連結至Q3之原子為碳原子。 較佳地，R2為Q^Q^qS — Q4，其中 _ Q1為一單键； 個氮原子的雜 環，較佳為 _ Q2為一飽和的4至6-員含一 吖畊； _ Q3為 _CH2-; Q4為-5-員包括2個氮原子的芳 …、 需要以一甲基取代； ‘’展，该雜環視 Q2鍵結至Q1之原子為一碳原子，及 Q4鍵結至Q3之原子為一碳原子。 87840.doc -13- 1251590 “飽和的4至6-員雜環，其包括個選自氮或氧的雜原 子”之實例為十井、心各垸、六氫吨咬、四氫吱喃、四氫吨 喃、嗎福啉及六氫吡畊。 較佳的“含一個氮原子或一個氧原子之飽和4至6-員雜 是U丫啡。 “4至8-員，芳香族或㈣香族之雜環，其包括…個選 自〇、S、s(=o)、so2&n之雜原子，，的實例為異噚唑基、啰 唑基、噻唑基、異嘍唑基、三唑基、啰二唑基、噻二唑基 、吡啶基、吡唑基、咪唑基、吖，井、吡咯烷、六氫吡啶、 四氫呋喃、四氫吡喃、馬弗啉及六氳吡_。較佳地，該雜 環為5或6-員，芳香族的，含丨或2個氮原子。該基之實例為 叶匕咬基、峨峻基及咪嗤基。 本發明所使用之化合物包括式⑴化合物之醫藥上可接受 的何生物，如溶劑合物、水合物、醫藥上可接受的鹽及多 晶型（不同晶格描述者）。式⑴化合物之醫藥上可接受的鹽 包括具有鹼性部分之鹽及具有酸性部分之鹽。屬鹼性部分 I式（I)化合物的醫藥上可接受的鹽應瞭解意指式⑴化合物 之加成鹽’该鹽可由無毒性的無機或有機酸來形成，如溴 酸、鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸、醋酸、琥珀酸、酒石酸、 标橡酸、順丁缔二酸、羥基順丁烯二酸、苯甲酸、延胡索 酸及甲苯續酸鹽’及其類似物。衍生物（I)之各種四級銨鹽 也包含於本發明的該種類化合物。此外，屬酸性部分之式 (I)化合物心醫藥上可接受的鹽應瞭解意指式⑴化合物之一 身又瓜心I 了由播毒的無機或有機驗形成，例如驗金屬及 87840.doc -15- 1251590 驗土族金屬（鈉、钾、鎂及#5)之氫氧化物，胺（二爷基乙二 胺、三甲基胺、六氫峨淀、峨洛燒、芊胺及其類似物）或替 代的四級铵氫氧化物，如氫氧化四甲錄（見"Pharmaceutical salts’，by Berge S.M·等人（1997) J. Pharm. Sci. 66: 1-19，該文 以引用的方式併入本文）。 熟諳此藝者均可使用的本發明之化合物的輔藥用途（見 Bundgaard等人，Acta Pharm. Suec., 1 987; 24: 233-246)也涵 蓋其中。 製備本發明化合物的一般方法 本發明也是有關於製備前述式（I)化合物之方法，該方法 包括以下步騾： (1)將式la之化合物與式R2-LG之化合物反應， (CH2)m

其中R1及m定義如前，R2之定義如發明概述中者，LG為驗 存在下的釋出基，如氯鹽、溴鹽、碘鹽、三氟丁磺酸鹽、 甲磺醯鹽、對甲苯磺醯鹽或nosylate，以得到式（I)之化合物

其中R1，R2及m定義如前； 87840.doc -16- 1251590 (2)分離該式⑴之化合物。 醫藥組 本發明之產品以組合之型態投與，其對被治療疾病之特 性及嚴重度為適當的。人類的每日劑量通常在1 mg及1 g的 產PP之間’其可被以1或更多的個別劑量來使用。該組合物 以希望投與之徑路相容的型態來製備，例如錠劑、包衣錠 、膠囊劑、口腔洗劑、噴霧劑、吸入之散劑、栓劑、灌腸 劑、泡沫劑（如直腸泡沫）凝膠或懸浮劑。以熟諳此項技藝者 所热知之方法製備該組合物，並包括從0·5至60%以重量計 之活性主成分（本發明之化合物）及40至99.5%以重量計之 醫藥賦形劑或載劑，該賦形劑適合及相容於活性主成分及 所希望組合物之物理型態。 固體型態製劑包括散劑、錠劑、分散顆粒劑、膠囊劑、 扁囊劑及栓劑。固體載劑可為一或更多種物質，也能作為 稀釋劑、調味劑、助溶劑、潤滑劑、懸浮劑、結合劑或錠 崩散劑；它也可以是包膠物質。對於散劑，該載劑為細的 分散固體，與微細分散之活性組分同於混合物中。於錠劑 ，活性成分與具有必需的結合性適當比率之載劑混合，並 壓縮於所要的形狀及大小。散劑、錠劑、扁囊劑或包膠型 膠囊較佳包含5%至約7〇%之活性成分。適當之载劑為碳酸 鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、乳糖、糖、果膠、糊精、澱粉、 西更耆膠、甲基纖維素、羧甲纖維素鈉、低熔點蠟、可可 脂及其類似物。 錠劑、散劑、扁囊劑及膠囊可用於適合口服投與之固體 87840.doc -17- 1251590 合物有低的IC5G值，典型地最多5 μΜ，較佳為低於1 μΜ， 甚至於低於100 ηΜ。 依據本發明，顯示該發明之化合物為選擇性的PDE7抑制 劑。“選擇性的PDE7抑制劑’’意指一化合物，其對PDE7之IC50 至少5倍低於有別於PDE7之PDE之IC5〇，較佳是至少10倍、 15倍、20倍、30倍、40倍、50倍或100倍低於有別於PDE7 之PDE之IC5〇值。有別於PDE7之PDE較佳意指選自PDE1、 PDE3、PDE4或 PDE5。 特別是，依據本發明：本發明之化合物，更尤其是本敘 述所提供之實例之化合物族，對於酵素PDE7具有之IC50值 ，常100倍低於有別於PDE7之PDE其IC5G值，特別是PDE1 、PDE3、PDE4或 PDE5 〇 本發明之化合物能用於治療各種疾病，因為它們能藉增 加細胞内cAMP之含量水平調控發炎及免疫程序。 能被治療之疾病貫例包括T及B -細胞相關之疾病、自體免 疫疾病、骨關節炎、風濕性關節炎、多發性硬化症、骨質 疏鬆症、慢性阻塞性呼吸道疾病（COPD)、氣喘、癌症如白 血病、後天免疫缺乏徵候群（AIDS)、過敏、腸炎（IBD)、潰 瘍性結腸炎、克隆氏病、胰臟炎、皮膚病如牛皮癖及異位 性皮炎、血管球性腎炎、結膜炎、自體免疫糖尿病、移植 排斥、癲癎、肌肉萎縮或全身性的紅斑性狼瘡。本發明之 化合物特別用於治療氣喘、過敏、異位性皮炎、骨質疏鬆 症及癌症如白血病。 合成本發明之化合物的方法 87840.doc -19- !251590 屬解1

於圖解卜R1、R2及m定義如發明概述，L(^釋出基如氯鹽 、溴鹽、碘鹽、三氟丁磺酸鹽、甲磺醯鹽、對甲苯磺醯鹽 或 nosylate 〇 利用揭π於PCT/EP02/03594之方法可製備化合物丨a。 以R2-LG在適當溶劑中驗的存在下，與化合物u反應，產 生〇-取代的喳唑啉酮。各種溶劑、操作條件及鹼可被使用 ，及易於由技藝者所決定。例如，沒有任何限制，吾人可 使用碳酸鉀、碳酸铯或氫化鈉為鹼，以二甲基甲醯胺作為 溶劑。 金1成實例 复J歷中間體 复ϋ間體a : 8、氯-5、（[甲基硫]甲氧基）_1，；^螺旋[環己烷_1，4，_喹唑 啉]-2，（3，Η)-酮 將依據揭示於PCT/EP02/03594實例63可製備之8，-氯-5，-幾基_1，Η-螺旋[環己烷-1，4，-喹唑啉]-2，（3Ή)_酮（6 g，2.25 mmol)溶於二甲基甲醯胺（6 mL)之溶液中，加入碳酸钾 ^776 g，5.6 mmol)及氯基甲基硫化甲基（0.26 mL，2.7 mmol)。將該混合物在密封管中，於i〇〇°c攪掉3天。以真空 87840.doc -20- 1251590 蒸餾，將二甲基甲醯胺移除。將水加入殘渣，水層以乙酸 乙酯抽取2次。 將合併乙酸乙酯層以硫酸鈉乾燥，過濾，並在真空中濃 縮。該粗化合物以管柱層析於矽膠上純化（以庚烷固定，以 甲醇0.5%至2%之二氯甲烷溶離出）以得到固體的中間體 a(0.3 g，41%) 〇 純度=93.45% 咕 NMR [(CD3)2SO] δ 7.95 (br s，1H，NH)，7.26 (d，J = 8.8 Hz，1H，CH)，7.02 (br s，1H，NH)，6.69 (d，J = 9·1 Hz，1H， CH)，5_30 (s，2H，CH2)，2_47-2·54 (m，2H)，2·25 (s，3H， CH3)，1.70-1.87 (m5 2H)，1.56-1.67 (m，3H)，1.40-1.54 (m， 2H)，1.21-1.30 (m，1H)。 製備中間體h : 8’-氯_5’-(2·碘基乙氧基）-l，H-螺旋[環己烷·ι，4，_ρ奎唑 淋]-2’（3 ’Η)-酉同 將依據揭示於PCT/EP02/03594實例78可製備之8，-氯 •5^(2-羥基乙氧基）-1Ή•螺旋[環己烷-：ι，4，-喳唑啉]_2，（3Ή)_ 酮（0.6 g，1.93 mmol)溶於無水的二甲基甲醯胺（15 mL)之溶 液中’於氮氣大氣壓下加入碘（2·9 g，ιι·4 mm〇i)及三苯膦 (3 g，11.4 mmol)。該混合物在室溫，黑暗中攪拌！天。以 瘵餾除去二甲基甲醯胺，而殘渣分配於二氣甲烷與Na2S204 之飽和溶液。將有機層以硫酸鈉乾燥，過濾，及減壓下濃 縮’以得到中間體b。 87840.doc -21 - 1251590 «空’ ^h2’ iiII7bai•之壓力達fij。將該反應混合物 在25°C攪拌48小時，定期的注射H2以維持7 的内部壓力 (注意24小時後更換催化劑）。反應已達完全後，經由2個玻 璃墊一大氣壓A氣下以過濾將催化劑移除，將濾液於45它 減壓濃縮至乾。所得之暗橘色固體溶於水（5〇〇 mL)，利用 NaOH水各液（1 N，400 mL)將所得溶液之pH調整至12以上 。所得之褐色懸浮液以第三丁基甲基醚（2χ丨L)萃取。合併 的有機萃取液以水（500 mL)洗滌，以硫酸鈉乾燥，過濾， 4CTC真空濃縮而得到褐色固體之2_氟_5_甲氧基苯胺（18〇 g ，84%)。 4 NMR [(CD3)2SO] δ 6.87 (dd，J = 11」，8·7 Hz，1H)，6 33 (dd，J = 7.7, 3·2 Hz，1H)，6·05 (dt，J = 8.7, 3.2 Hz，1H)，5·11 (br s，2H)，3·65 (s，OCH3，3H); MS (ES) m/z 183 (M+CH3CN+H)+。 於2-氟-5-甲氧基苯胺（35.15 g，249 mmol)溶於醋酸（99 mL)及水（177 mL)，35°C時之攪掉溶液，在N2下，以20分鐘 的時間，加入氰酸鉀（40 g，〇·49 mol)之水（170 mL)溶液。 將該混合物於40°C攪拌20分鐘，及在18至20°C攪拌2小時， 然後倒進水中（500 mL)中止反應。將該粗產物過濾，以水 (1·2 L)，庚燒（50 mL)洗滌，在第三丁基甲基醚（1〇〇 mL)及 乙酸乙酯（5 mL)的混合物中週遭溫度下成漿液5分鐘。將該 產品過濾，以第三丁基甲基醚（30 mL)洗滌，於40°C真空乾 燥，而得到淡褐色固體之N-(2-氟-5-甲氧基苯基）尿素（3 1.75 g，69%)。 87840.doc -23 - 1251590 iH NMR [(CD3)2SO] δ 8.19 (br s，1H)，7.67 (dd，1H)，6·95 (dd，1H)，6·31 (dd，1H)，6·08 (br s，2H)，3.55 (s，3H)。 於聚合磷酸（20 g)之攪拌溶液中，於1〇(rc以5分鐘的時間 ’加入N-(2-氟-5-甲氧基苯基）尿素（9〇〇 mg，4.89 mmol)， 繼而在N2氣下一次加入環己酮（7! 9 mg，7.33 mmol)。將該 混合物於100°C攪拌2小時，冷卻至35°C，倒入水（400 mL) 中止反應。將粗產物過濾，以水（1〇〇 mL)洗。所分離出之 固體，於50°C成漿液於第三丁基甲基醚（8 mL)及乙酸乙酯（4 mL)之混合物中10分鐘，過濾，以第三丁基甲基醚（1〇 mL) 洗滌，40°C真空乾燥，而得到淡褐色固體，純度（97.3%)之 8氟-5’-甲氧基_ΓΗ-螺旋[環己烷-l，4’-喹唑啉]-2’（3’H)-酮 (900 mg，70%) 〇 lH NMR [(CD3)2SO] δ 8.92 (br s? 1H)? 7.04 (app. t5 J = 9.5 Hz，1H)，6.86 (br s，1H)，6.54 (dd，J = 9.1，4·2 Hz，1H)，3.76 (s，3H)，2.36-2.44 (ddd，J = 13.5，13.5，4·4 Hz，2H)， 1.72-1.86 (m，2H)，1.52-1.65 (m，3H)，1·40·1·50 (m，2H)， 1.12-1.24 (m，1H); 13C NMR [(CD3)2SO] δ 153.39, 153.37, 151·65，145.75，143.15，126.87，126·71，116.3，114.78, 114.57，105.37，105-29，57.95，56.77，36.24, 25.45, 20.49; MS (ES+) m/z 265_1 (M+H)+。 於8’ -氣- 5’ -甲氧基- l’H -螺旋[緣己燒-l，4’-p奎峻琳]_ 2，（3，扣-酮（2_34 8，8.84!!1111〇1)溶於〇0“（25〇1111^)之攪拌溶 液，在0至5°C，N2氣下以20分鐘的時間滴加三溴化硼（11.〇7 g，44·2 mmol)。將該混合物於5°C攪拌10分鐘，再逐漸使其 87840.doc -24- 1251590 暖至室溫。於室溫繼續攪拌1 8小時，加入另一部分之BBr3 (5 g，20 mmol)。該混合物再被攪拌24小時，以飽和的NaHC03 溶液（5 00 mL)於10°C中止反應30分鐘。混合物於室溫攪拌1 小時，將水層由二氯甲烷分開，以乙酸乙酯（2x500 mL)萃 取。有機層以飽和的NaHC03溶液（2〇〇 mL)，水（3 00 mL)洗 滌，以無水的MgSCU乾燥，過濾，40°C真空濃縮而得到粗 產物。該粗物質於18至20°C成漿液於第三丁基甲基醚（1〇 mL)5分鐘，過濾，40°C真空乾燥，以得到淡褐色固體，純 度（99.9%)之8’-氟-5’-羥基-1’11_螺旋[環己烷-1，4，-喳唑 淋]-2’（3 ’H) -酉同。 NMR [(CD3)2SO] δ 9.60 (br s5 1H)? 8.80 (br s? 1H)3 6.86 (dd，J = 1〇·〇, 8.9 Hz，1H)，6.82 (br s，1H)，6_31 (dd，J = 8.9, 4.5 Hz，1H)，2.50-2.60 (m，2H)，1.71-1.85 (m，2H)，1.50-1.64 (m，3H)，1.40-1.50 (m，2H)及 1.HM.23 (m，1H); MS (ES+) m/z 251.1 (M+H)+。 里_備中間體d : 3-(甲基硫）丙基甲績酸鹽 於3-甲基硫-1-丙醇（2 mL，19.4 mmol)溶於二氯甲燒（50 mL)及三乙胺（3·2 mL，23·28 mm〇1)之溶液，在一氮大氣 壓下滴加甲磺醯氯（18 mL，23·28 mmol)。將該混合物攪拌 ’以1小時之時間使回溫至室溫，於室溫攪拌2·5小時。減 壓除去一氯甲燒而得到粗中間體d。 盤備中間體e : 8’_氟_5、[3-(甲基硫）丙氧基]-1，H-螺旋[環己烷-1，4，-喹唑 87840.doc -25- 1251590 啉]-2’（3’H)-酮 於中間體c (0.5 g，2 mmol)溶於無水的二甲基甲酸胺（4 mL)之溶液，加入碳酸钾（0.33 1 g，2.4 mmol)及中間體d (2.4 111111〇1)。將該混合物於密封管中1〇〇。(：授拌21.5小時。加入 破酸钾（0.3 31 g，2.4 mmol)及中間體d (2.4 mmol)，將該混 合物於100°C攪拌3天。將二甲基甲醯胺蒸發，殘渣在二氯 甲烷與水間分配。將水層以二氯甲烷萃取2次，以硫酸鈉乾 燥’過滤及減壓濃縮。殘渣經碎膠餅純化，以含〇至3 %甲 醇之二氯甲烷梯度溶離，將殘渣在乙酸乙酯研磨，過濾及 真空乾燥而得到中間體e (〇·22 g，32.5%)。 4 NMR [(CD3)2SO] δ 8·85 (br s，1H，NH)，7.01 (dd，J = 10.1，9·1 Hz，1H，CH)，6.83 (br s，1H，NH)，6.52 (dd，J = 9.1， 4·1 Hz，1H，CH)，4·〇3 (t，J = 6·0 Hz，2H，CH2)，2.67 (t，J = 7·3 Hz，2H，CH2)，2.40-2.55 (m，2H)，2_07 (s，3H，CH3)， 1·98-2·07 (m，2H)，1·73_ι·87 (m，2H)，1.54-1.69 (m，3H)， 1·40-1·51 (m，2H)，1·ΐ(Μ·25 (m，1H)。 製備中間體f : 8’_氣- 5’-[(甲基硫）甲氧基卜丨，H-螺旋[環己烷- 喳唑 啉]-2’（3’H)-酮 於中間體c (0.6 g，2.4 mmol)溶於無水的二甲基甲醯胺（6 mL)<溶液中’加入碳酸鉀（0.795 g，6 mmol)及氯甲基甲硫 酸（0.242 mL，2.8 mmol)。將該混合物在密封管中， 1〇〇 C揽拌28小時。另有氯甲基甲硫醚（〇·242 mL，2·8 mm〇l) 被加於混合物於10〇°C攪拌24小時。將二甲基甲醯胺蒸發， 87840.doc •26- 1251590 殘渣分配於二氯甲烷及水間。水層以二氯甲烷萃取2次，以 硫酸鈉乾燥，過濾、，混合物減磨濃縮。殘流經碎膠餅純化 ，以含0至3%甲醇之二氯甲烷梯度溶離，而得到中間體f (〇 5 g，81%) 〇 H NMR [(CD3)2SO] δ 8_95 (br s，1H，NH)，7.05 (t，1H，CH) 6.86 (br s，1H，NH)，6.56 (dd，1H，CH)，5.28 (s，2H，CH2)， 2.40-2.50 (m，2H)，2.25 (s，3H，CH3)，ι·7〇] 88 (m5 2H)， 1.55-1.68 (m，3H)，1.38-1.55 (m，2H)，ΐ·ι〇] 29 (m，1H)。 製備中間體g 5’-[(l-二苯甲基吖畊-3-基）氧]_8’_氟- i，h-螺旋[環己烷 -1，4’-喹唑啉]-2’（3’H)-酮 於中間體c (3.15 g，12.58 mmol)溶於無水的的二甲基甲 酸胺（25 mL)之落液中加入1 -二苯甲基叶p井_3_基甲續酸鹽（8 g，25.17 mmol)及碳酸鉀（7 g，50.34 mmol)。將該混合物於 100C在氮氣下授摔48小時。將二甲基甲酸胺蒸發，殘淹分 配於二氯甲烷與水之間。該水層以乙酸乙酯萃取2次，以硫 酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。該粗化合物以管柱層析法純 化（矽膠以0%至1%甲醇溶於二氯甲烷來溶離）而得到中間 體 g (3 g，50%) 〇 lU NMR [CDC13] δ 7.34-7.45 (m5 4H)5 7.12-7.32 (m5 6H)5 6.76-6.86 (m，2H，NH及 CH)，6·08 (dd，1H，CH)，5.51 (br s， 1H，NH)，4·78 (m，1H，CH)，4·40 (s，1H，CH)，3.70 (m，2H， CH2)，3.09 (m，2H，CH2)，2.50-2.60 (m，2H)，1.63-1.86 (m， 5H)，1.45-1.60 (m，2H)，1.18-1.34 (m，1H)。 87840.doc -27- 1251590 复體h 5 (吖畊-3-基氧）-8’-氟_1，11_螺旋[環己烷_丨，4、喳唑啉]_ 2，(3，H)-酮 於中間體g (1.86 g，3.94 mmol)溶於無水甲醇（50 mL)之 Λ '夜以20/° (0·634 §)加入Pd(OH)2。將該混合物抽真空， 加入氫。將忒混合物授拌2天，然後經矽藻餅過濾，利用甲 醇作i離劑。將;慮液減壓濃縮。將殘淹在二氯甲燒中研磨 ，過濾，真空乾燥而得到中間體h (〇 95 g，78.8%)。 H NMR [(CD3)2SO] δ 8.88 (br s，1H，NH)，6.98 (dd，J = 9.1， 9·1 Hz，1H，CH)，6.85 (br s，1H，NH)，6.72 (dd，J = 9.1，4·0 Hz，1H，CH)，4.95 (m5 1H，CH)，3·74·3·84 (m，2H，CH2)， 3.47-3.57 (m，2H，CH2)，2.52-2.59 (m，2H), 1.72-1.87 (m， 2H)，1.54-1.69 (m，3H)，1.42-1.53 (m，2H)，1.10-1.27 (m, 1H)。 兔例的M備 實例1 5’-(2-[(2-胺基-2-氧乙基）胺基]乙氧基^，-氯-丨，;^·螺旋[環 己燒-1，4’-p奎嗅淋]-2’（3，H)-酉同 式（I) : R1==C1，R2=-CH2-CH2-NH-CH2-CO-NH2, m=2。 於依據揭示於PCT/EP02/03594，實例98之方法製備的8，-氯-5’-(2-[(2-甲氧基-2-氧乙基）胺基]乙氧基）-1，Η-螺旋 [環己燒 _ 1，4’-p奎唆琳]-2’（3 ’H)-酮（1 .〇 g，2.52 nrniol)溶於乙 醇（20 mL)之攪拌懸浮液中，於室溫加入濃氨水（30 mL，580 mmol)。所得之混合物於60°C攪拌2.25小時。加入另一整分 -28- 87840.doc 1251590 的濃氨水（15 mL，290 mmol)，該混合物於60°C攪:拌3.75小 時。將該溶液於45°C真空蒸餾，及以乙醇（40 mL)共;弗乾燥 而得到灰白色固體殘渣。該粗產物以管柱層析法純化（石夕膠 50 g，以10%甲醇溶於二氯甲烷溶離）在50°C真空乾燥後產 生出白色固體之該標題化合物（0.35 g，4.5 mmol，37.8%)( 純度 99.5%)。 XH NMR [(CD3)2SO] δ 7.98 (br s? 1H? NH)5 7.29 (br s5 1H? NH)，7.26 (d，J = 9.0 Hz，1H)，7.08 (br s，1H，NH)，7.03 (br s， 1H，NH)，6.64 (d，J = 9.0 Hz，1H)，4.02 (t，J = 5.5 Hz，2H)， 3.12 (s，2H)，2.90 (t，J = 5.5 Hz，2H)，2.52 (m，2H)，2.27 (br s，1H，NH)，1·72_1·83 (m，2H)，1.55-1.60 (m，3H)，1.44-1.48 (m，2H)，1.21 (m，1H); 13C NMR [CDC13] δ 174.12, 155.56, 151.35, 134.58, 129.38, 116.32，110.78，107.93，69.03，58.14, 52.69, 49.01，36.18, 25.45, 20.59; MS (LC-MS) m/z 369.2 (M37C1+H)+，367.2 (M35C1+H)+。 實例2 8’氯-5’-([甲基亞硫醯基]甲氧基）4%螺旋[環己烷q〆，—喳 唑啉]-2’（3，H)-酮 式（I) · R =(111，R =CH2-SO-CH3，m=2 於中間體a (0.3 g，0.92 mmol)溶於甲醇（20 mL)及水（5 mL)之溶液中’在〇 c ’加入過氧化鈉（〇·368 g，0·6 mmol) 及NaHC03 (0.302 mg，3.59 mmol)。將該混合物於0°C 攪拌 1 小時’及室溫1小時，然後減壓濃縮。將該殘渣放入二氯甲 87840.doc -29- 1251590 純度=9 8 · 2 5 % lR NMR [(CD3)2SO] δ 7.92 (br s? 1H? NH)? 7.79 (br s, 1H5 NH)，7·24 (d，J = 9·2 Hz，1H，CH)，7.00 (br s，1H，NH)，6·63 (d，J = 8.8 Hz，1H，CH)，4.01 (t, J = 5.5 Hz，2H，CH2)，3.10 (q，J = 6.0 Hz，2H，CH2)，2.92 (t，J = 4·4 Hz，2H，CH2)，2.60 (m，2H，CH2)，1.75 (s，3H，CH3)，1.71-1.83 (m5 3H)5 1.58-1.67 (m，3H)，1.40-1.58 (m，3H)，1.18-1.15 (m，1H) 〇 實例4 8’-氟-5’-[3-(甲基亞硫醯基）丙氧基]-1’^1-螺旋[環己烷-1，4’_ 喳唑啉]-2’（3’H)-酮 式(I) : rLf，R2=CH2_CH2-CH2-SO-CH3, m=2 於中間體e (〇·1 g，〇·29 mmol)溶於甲醇（l〇 mL)及水 (2.5mL)之溶液中，在〇°c，加入過氧化納（〇· 118 g，〇. 192 mmol)及NaHC03 (0.097 g，1 · 152 mmol)。將該混合物擾拌 3 小時’以2小時的時間使回溫至室溫。將曱醇蒸發，殘渣分 配於二氯甲烷與水之間。水層以二氯甲烷萃取2次，以硫酸 鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。殘留物以管柱層析法純化（矽膠 5 g，以1%至2%甲醇含（1%氨水）溶於二氯甲烷）來溶離而得 到標題化合物（0.025 g，24%)。 純度=95.19%

4 IsiMR [(CD3)2SO] δ 8.86 (br s，1H，NH)，7.03 (dd，J ：= 8, 8 Hz，1H，CH)，6.82 (br s，1H，NH)，6.52 (dd5 卜 8, 4 Hz, 1H CH), 4.07 (t, J = 6 Hz, 2H, CH2), 2.88-2.97 (m, 1H, CH2)5 2.77-2.86 (m, 1H, CH2), 2.56 (s, 3H, CH3), 2.40-2.51 87840.doc -31 - 1251590 旋[環己烷-1，4’-喳唑啉]-2’（3’Η)-酮 式（I) : R1==F，R2=1J丫 _-CH2-3-p比峻，m=2 於中間體h(0.4g，1.31 mmol)溶於1，2-二氯乙烷（8mL)，三 乙胺（0.3 64 mL，2.62 mmol)及冰醋酸（〇· 15 mL，2·62 mmol) 之懸浮液中，於〇°C加入外b峻-3_幾基酸（0.378 g，3.93 mmol) 。將所得之混合物攪拌5分鐘，然後在添加三乙醯氧基氫化 硼鈉（1.378 g，5_24 mmol)之前冷卻至〇°c。將該混合物於室 溫攪拌一天，並以飽和的NaHC03溶液鹼化至pH=7-8。將沈 澱過濾，以水洗滌，並以二氯甲烷/甲醇（50/50)結晶以得到 該標題化合物（0.12 g，24%)。 純度=97.7% 1H NMR [(CD3)2SO] δ 12.56 (br s，1H，ΝΗ)，8·87 (br s，1H， NH)，7·62 (br s，1H，NH)，6.96 (dd，J = 9.6, 9·6 HZ，1H，CH)， 6.83 (br s，1H，NH)，6.24 (dd，J = 4, 4 Hz，1H，CH)，6.12 (d， J = 2.2 Hz，1H，CH)，4.76 (m，1H，CH)，3.69 (t，J = 6.6 Hz， 2H，CH2)，3·60 (s，2H，CH2)，3.04 (t5 J = 6·6 Hz，2H，CH2)， 2.36-2.48 (m，2H)，1·69·1·86 (m，2H)，1.59-1.68 (m，1H)， 151-1.59 (m，2H)，1.42-1.51 (m，2H)，1.05-1.22 (m，1H) 生物學的結果 本發明之化合物抑制環狀核甞酸磷酸二酯酶之容量，由 測量其IC5G(抑制該酵素活性50%所需之濃度）來評價。 利用感^^匕蟲病毒（13扣111〇¥4118)表現系統，將？〇£1(1：、 PDE3A、PDE4B2、PDE7A1、PDE7B及PDE11A植人及表現 於昆蟲細胞Sf2 1，該細胞培養上清液直接使用作為酵素 源。 87840.doc -33- 1251590 然後依據改編自W.J_ Thompson等人1979，Advances in Cyclic Nucleotide Research, Vol. 10: 69-92, ed. G. Brooker 等人Raven Press，NY·之方法，進行各種型態PDE酵素活性 之測量。 所使用之基質為經氣化的cGMP (16 Ci/mmol)供PDE1及 PDE11，以及經氚化的 cAMP (35 Ci/mmol)供PDE3、PDE4 及PDE7。該基質之濃度為28 nM供PDE卜PDE11，以及13 nM 供 PDE3、PDE4及 PDE7。 該酵素的反應在30分鐘後，由添加SPA珍酸妃珠子 (Amersham)來停止。 實例1至6之IC5G(pM)被決定，而其實驗值低於1 μΜ。 87840.doc -34-

Claims (1)

1. 〒文申請專利範圍替換本(94年10月）拾、申請專利範圍：

   R1

   其中， • m為 1、2或 3 ; • R1選自CH3、C卜Br及F ; • R2選自 〇 Q^Q^QLq4，其中， _ Q1為一單鍵； _Q2為一飽和的4或5 -員雜環’其包括一個選自〇或 N之雜原子，或一飽和的6-員雜環，其包括一或 二個選自Ο或N之雜原子； _ Q3為一直鏈或支鏈的（C^Cd亞烷基； _Q4為一 5或6-員芳香族雜環，其包括i至4個選自〇 、S&N之雜原子，該雜環視需要以一或數個選自 OR、NRR’及CN之基所取代，其中R&R，為相同 或不同’選自Η及（C〗-C6)烷基； _ Q2键結至Q1之原子為碳原子，及 _ Q键結至Q3之原子為碳原子，· 1251590 〇（c】-c6)烷基， 該烷基被1個選自nr4r5、NRC(=〇)R4、 c(=o)nr4r5及so2nr4r5之基所取代，其中， R為Η或（(VC6)烷基； _ R4 為被 1 至 3 個選自 S03H、NR’C(=〇)r7、 C(=0)NR7R8及S02NR7R8之基所取代之（CVC6)烷 基，其中R’為Η或（C「C6)坑基’及R及R8為相同 或不同且選自Η及R6，及R6為視需要以1或2個 OR，，基所取代之（CVC6)烷基，其中R”選自η及 (CVC6)烷基；及 _ R5選自R4、Η及（CVC6)烷基；或 該烷基為以1個S(=0)R3基所取代，其中R3為未經取 代之（CVC6)烷基； 或其外消旋型、其異構物及其醫藥上可接受的衍生物。 2.如申請專利範圍第1項之式（I)化合物，其中R2是（CpCJ 烷基，該烷基以選自 NR4R5、NRC(=0)R4、C(=〇)NR4R5 及S02NR4R5之基所取代，其中， • R為Η或（(VC6)烷基； • R4為以 1 至 3 個選自 NR’C(=0)R7、C(=〇)nr7r8 及 S 〇2NR7R8之基所取代之（C 1 - C6)fe基’其中R ’、r7 及R8為相同或不同並選自Η及（CrC6)烷基；及 • R5選自R4、Η及（Ci-C6)烷基。 87840-941019.doc 1251590 3·如申請專利範圍第1項之式⑴化合物，其中R2g(Ci_c4) 烷基，該烷基以NR4R5或C(=0)NR4R5之基所取代，其中， • R4為以選自NHC( = 〇)CH3及C(=〇)NR7R8之基所取 代之（C〗-C6)燒基，其中R7及R8為相同或不同並選 自Η及甲基；及 • R5選自Η及甲基。 4·如申請專利範圍第i項之式⑴化合物，其中R2為以 S(=0)R3所取代之垸基，其中R3為（Cl-C6)烷基。 5·如申請專利範圍第4項之式⑴化合物，其中r3為甲基。 6·如申請專利範圍第i項之式⑴化合物，其中R2為 qlqLq'q4，其中， Q1為一單键； Q2為一飽和的4至6-員含一氮原子之雜環； Q為一直鏈（CrCd伸燒基； Q4為一 5或6-員含1至4個氮原子之芳香族雜環； _ Q2連結至Q1之原子為碳原子，及 _ Q連結至Q3之原子為碳原子。 7.如申請專利範圍第1項之⑴化合物，其中R2為 q^q^qiq4，其中， _ Q1為一單鍵； Q為一飽和的4至6 -員含一氮原子的雜環， 87840-941019.doc l25l59〇 Q3為-CH2-; _ Q4為一 5-員包括2個氮原子的芳香族雜環； _ Q2鍵結至Q1之原子為一碳原子，及 _ Q4鍵結至Q3之原子為一碳原子。 .如申請專利範圍第7項之式（I)化合物，其中Q2為吖畊。 9·如申請專利範圍第！項之式⑴化合物，其中R】選自^及卜 1〇·如申請專利範圍第！項之式⑴化合物，其中历為2。 11 · 一種選自下列之化合物， 5Ά[(2-胺基I氧乙基）胺基]乙氧基 J哀已烷-1，4、喳唑啉]-2，（3，Η)-酮； 8 -鼠-5’·（[甲基亞硫_基]甲氧基）]#螺旋[環己烷 喹唑啉]-2，（3，Η)-酮； 5 U-{[(2-乙醯基胺基）乙基]胺基）乙氧基）_8，-氯- ΐ，Η_ 螺旋[環己烷喹唑啉]-2，（3，Η)-酮； 氟_5、[3-(甲基亞硫醯基）丙氧基pi’H·螺旋[環己烷 -1，4、喹唑啉]_2，（3，H)-酮； 8、氣-5、（[甲基亞硫醯基]甲氧基）β1，Η_螺旋[環己烷 一1，4、喳唑啉]-2，（3，Η)-酮，及 8’_氟-5’-{[1-(ιη-吡唑-3-基甲基）吖畊基]氧卜丨，札螺 旋[環己垸-1，4、喳唑琳]-2，（3，Η)-酮。 12· —種根據申請專利範圍第1至丨丨項中任一項之式⑴化合 87840-941019.doc -4- 1251590 物之用途，其係供製造醫藥品以預防或治療與利用pDE7 抑制劑之治療相關之疾病。 13_如申請專利範圍第12項之用途，其中該疾病選自τ_細胞 相關疾病、自體免疫疾病、骨關節炎、風濕性關節炎、 多發性硬化症、骨質疏鬆症、慢性阻塞性呼吸道疾病 (COPD)、氣喘、癌症如白血病、後天免疫缺乏徵候群 (AIDS)、過敏、腸炎（IBD)、潰瘍性結腸炎、克隆氏病、 胰臟炎、皮膚病如牛皮癖及異位性皮炎、血管球性腎炎 、結膜炎、自體免疫糖尿病、移植排斥、癲癇、肌肉萎 縮或全身性紅斑性狼瘡。 I4·如申請專利範圍第12項之用途，其中該疾病選自氣喘、 過敏及異位性皮炎。 15·如申請專利範圍第12項之用途，其中該疾病為骨質疏鬆 症。 16·如申請專利範圍第12項之用途，其中該疾病為癌症。 17· —種用於治療與利用PDE7抑制劑之治療相關之疾病之 醫藥組合物，其包括根據申請專利範園第1至1 i ,中任一 項之式（I)化合物，伴隨醫藥上可接受的載劑、賦形劑、 稀釋劑或傳遞系統。 87840-941019.doc