TW498078B - Carbohydrate derivatives - Google Patents

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498078 A7 ___B7___ 五、發明説明（1 ) 本發明係關於具有抗血栓形成活性之糖類衍生物，含 其之藥學組成物，以及使用該糖類衍生物製造藥劑。 具有抗血栓形成活性的糖類衍生物爲已知，例如揭示 在EP 84，999的硫酸化葡萄糖胺聚合醣，揭示在 E P 529，71 5的其他與硫酸化蔔萄糖胺聚合醣相 關的糖類衍生物，具有改進的藥理性質，這些糖類衍生物 缺少葡萄糖胺聚合醣的特徵官能基，沒有羥基、N-硫酸 根及N -乙醯基。 本發明頃經發現式I的糖類衍生物， (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 .其中R1爲Η或CH20S03-; R2與R3彼此獨立地 爲H、 （1 一 6C)烷基或S03_; R4爲OS〇3-或 NHS03-; η爲〇或1; p爲1或2;或其藥學上可被 接受的鹽類，其抗X a活性實質上高於在4 一位置的非還 原端不含類似甘油或類似乙二醇的糖類。 X a因子在血液凝固階段中扮演重要的角色，其.可催 化凝血酶的形成，凝血酶在凝固階段中可控制最後的階段 ，其主要功能是分解血纖維蛋白原而產生血纖維蛋白單體 ,經由交聯而形成不溶性膠體的血纖維蛋白凝塊。 本發明化合物可用於治療及預防凝血酶引起的疾病及 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐) 一 4 一 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 498078 A7 _____Β7_ 五、發明説明（2 ) 與凝血酶相關的疾病，此包括數種形成血栓及凝固階段經 活化的形成血栓前的狀態，其中包括但不限定於靜脈深處 形成血栓、肺栓塞、血栓性靜脈炎、血栓形成或栓塞造成 的動脈閉塞、血管成形術或血管溶解過程中或過程後的動 脈再閉塞、動脈創傷或侵入性心臟手術後的再狹窄、手術 後的靜脈血栓形成或栓塞、極性或慢性動脈硬化、中風、 心肌梗塞、癌症及轉移、及神經變性的疾病，本發明的糖 類衍生物也可作爲平滑肌細胞增殖的抑制劑並供治療血管 形成、癌症及逆轉錄病毒例如HIV。 另外，本發明化合物也可作爲抗凝固劑及在例如滲析 及手術時需要的體外血液通路作爲抗凝固性塗膜使用。 根據本發明較佳的式I糖類衍生物是其中R 2爲（1 —6C)烷基，R3爲SO3-, R4爲〇S〇3-，且R1、 η及p相同於先前之定義，或其藥學上可被接受的鹽類。 •更佳的式I糖類衍生物是其中Ri爲甲基，特別適宜 的式I糖類衍生物是其中η爲1且ρ爲1，最佳的式I糖 類衍生物是其中R1爲C Η20 S 03_。 (1 一 6 C )烷基的稱呼係指含1至6個碳原子的直 鏈或枝鏈烷基，例如甲基、乙基、異丙基、第三丁基、異 戊基、己基等，較佳的烷基爲（1 一 4C)烷基，例.如甲 基、乙基、（異）丙基、正丁基及第三丁基，最佳的烷基 爲甲基。 與帶電部份互補的平衡離子爲藥學上可被接受的平衡 離子，例如氫，或更適宜爲鹼或鹼土金屬離子，例如鈉、 本紙張尺度適财關家標準（CNS ) Α4規格（21GX297公釐) ' ' 一 5 - ---------jg! (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁} 、11 498078 A7 B7 五、發明説明（3 ) 鈣或鎂。 製備根據本發明的糖類衍生物可藉由將經保護的類似 甘油或類似乙二醇的部份偶合至另一個經保護的四糖類非 還原端的4-羥基，該四糖類可根據ffesterduin P.， Bioorg.及 Med. Chem., 2_, 1 2 67- 1 280, 1 9 94 揭示的方法 製備，然後將保護基去除，將化合物硫酸化後，得到式I 的糖類衍生物。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 對於治療靜脈血栓形成或抑制平滑肌細胞增殖，本發 明化合物可經由腸道或不經腸道用藥，且對於人體的較佳 每日劑量爲每公斤體重0·001-10毫克，混合藥學 上合適的輔劑例如揭示在標準參考文獻Gennaro et al., Remington’s Pharmaceutical Sciences, (18th ed., Mack Publishing Company, 1 9 9 0,尤其是參見 Part 8: Pharmaceutical Preparations and Their Manufacture )，·本化合物當口服、口含或舌下活性時，可壓製成固體 劑量單位，例如丸劑、片劑，或製成膠囊或栓劑，對於藥 學上合適的液體，本化合物也可以溶液、懸浮液、乳液的 形式作爲注射製劑使用，或作爲噴霧劑使用例如鼻用噴霧 劑。 對於製備劑量單位，例如片劑，可以使用習知的.添加 劑例如填充劑、染料、聚合性黏合劑等，一般而言可以使 用不會干擾活性化合物功能的任何藥學上可被接受的添加 劑，可和組成物用藥的合適載劑包括使用合適劑量的乳糖 、澱粉、纖維素衍生物等或其混合物。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇Χ297公釐) ~ -6 - 498078 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（4 ) 本發明可用下列實例進一步說明。 (在實例中可參見流程圖1與2,中間物及最終產物 的表示可參見流程圖中相對應的編號） 眚例1 製備化合物7及8 製備化合物2 在2 —笮氧基乙醇1 (2 · 84毫升）及氯甲基甲基 硫醚（1 · 59毫升）在乙二醇二甲醚（25毫升）的冷 卻（0°C)溶液中，在氮氣壓下加入6 0%懸浮在礦物油 的氫化鈉（1 · 2克），使混合物在室溫下攪拌2 〇小時 ，在反應混合物中加入甲醇並持續攪拌15分鐘，用醋酸 乙酯（1 0 0毫升）稀釋混合物，隨後用碳酸氫鈉水溶液 及水清洗，有機層經由硫酸鎂乾燥並在真空下濃縮，用矽 膠管柱層析法純化粗產物後得到2 . 5克化合物2。 製備化合物3 化合物3的合成經揭示在Bioorganic and Medicinal Chem i stry, vol 2, no. 11，pp 1267-1280, 1 9 9 4 (P.

Westerduinetal·)。 製備化合物4 將化合物3 (12 5毫克）、化合物（64毫克）及 粉狀分子篩（4埃）在二氯甲烷（1 · 5毫升）中的混合 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 一 7 一 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -、v一口 498078 附件一 Λ :第86106674號專利申請霧 中文說明書修正頁民國89年6月I似b ‘ ！ 五、發明說明（5) ’ 物在氮氣壓下攪拌1 5分鐘，使溶液冷卻（5 °C)並加入 含N -碘化琥珀醯亞胺（6 8毫克）及三氟甲基磺酸（ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 2 · 7微升）在1 · 5毫升1 ，2 —二氯乙烷一二曙烷（ 1/1,體積/體積）的新鮮製備溶液，經1〇分鐘後過 濾紅色的反應混合物，用二氯甲烷稀釋，依序用硫代硫酸 鈉水溶液及碳酸氫鈉水溶液清洗，有機層經由硫酸鎂乾燥 並在真空下濃縮，在懸浮於二氯甲烷一甲醇（2/1 ,體 積/體積）的Sephadex L H - 2 0上用大小排除層析法 純化殘留物，得到1 0 8毫克化合物4。 製備化合物5 在化合物4 (105毫克）在四氫呋喃（7 · 3毫升 )的冷卻（一 5 °C )溶液中，加入3 0 %過氧化氫水溶液 (3 · 8毫升），攪拌10分鐘後，加入氫氧化鋰溶液（ 1.25莫耳濃度，1·7毫升），使混合物在一 5°C下 攪拌2小時，然後使溫度上升至01，經20小時的攪拌 後使溫度上升至2 0 °C並繼續攪拌2 4小時，將反應混合 物冷卻（0°C),隨後加入甲醇（7 · 0毫升）及氫氧化 鈉水溶液（4莫耳濃度，2 · 0毫升），攪拌1小時後， 再度使溫度上升至20 °C並繼續攪拌20小時，將混合物 冷卻（0 °C )，用氫氯酸（2當量濃度）酸化成p Η 3並 用二氯甲烷萃取，有機層用亞硫酸鈉水溶液（5%)清洗 ，經由硫酸鎂乾燥並在真空下濃縮，用矽膠管柱層析法純 化粗產物後得到8 0毫克化合物5。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐）- 8 - 498078 A7 _______B7 五、發明説明（6 ) 製備化合物Θ 在化合物5 (80毫克）在水（7毫升）與2 -甲基 一 2-丙醇（7毫升）的溶液中，加入80毫克Pd/C (10%)，將反應混合物放置在氫氣壓下16小時，用 過濾法將觸媒移除，並用2-甲基-2—丙醇/水的混合 物清洗，在真空下濃縮過濾液及清洗液，冷凍乾燥後得到 3 8毫克化合物6。 製備化合物7及8 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 在Dowex 5 0WX8H+管柱中用水溶離化合物6 ( 38毫克）在水（0 · 8毫升）的溶液，將收集的溶離液 蒸乾，用Ν '，N -二甲基甲醯胺蒸發後，將殘留物溶解在 N，N—二甲基甲醯胺（2 · 5毫升），放置在氮氣壓下 並加入三乙胺硫三氧化物複合物（2 8 7毫克），使混合 物在5 0 °C下攪拌過夜，冷卻至〇 °C並加入碳酸氫鈉水溶 液（5 3 3毫克使混合物在2 0 °C下攪拌1小時，濃 縮成少量體積並在懸浮於水：乙腈9:1(體積/體積） 的SephadexG—2 5管柱中脫鹽，粗產物在Dowex5 0 WX 8 N a+管柱中溶離，用離子交換管柱層析法純化（ HPLC，Mono - Q5/5，氯化鈉梯度），得到 12 毫克化合物 7, {[aU° = +31 · 1 (c = l;水 )}及18毫克化合物8,丨1>]?>。= 34 · 8 (c = 0 · 9 3 ;水）卜 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 498078 A7 _______B7_ 五、發明説明（7 ) 實例2 製備化合物1 製備化合物1 0 將苯甲醯基氯（26 · 3毫升）在無水二噚烷（26 毫升）的溶液在1小時內逐滴添加至甘油（1 0克）及吡 啶（109毫升）的冷卻（一 20 t)混合物中，在0°C 下攪拌所得的混合物1 6小時，然後加入水，攪拌1 5分 鐘後，將混合物濃縮至五分之一的體積，用二氯甲烷稀釋 並依序用水、碳酸氫鈉水溶液及水清洗，有機層經由硫酸 鎂乾燥並在真空下濃縮，用矽膠管柱層析法純化所得的油 而得到2 1克化合物1 〇。 製備化合物1 1 •將二甲硫（1 · 45毫升）添加至化合物10 ( 600毫克）在乙腈：二氯甲烷（1 : 1 ，體積/體積， 8毫升）的溶液中，將混合物冷卻至〇 °C並逐滴加入無水 過氧化苯甲醯（3 · 63克）在乙腈··二氯甲烷（1 ·· 1 ’體積/體積，10毫升）的混合物，在20 °C下攪拌 1 6小時後，用二氯甲烷稀釋混合物並依序用碳酸氫.鈉水 溶液及水清洗，有機層經由硫酸鎂乾燥並在真空下濃縮， 用矽膠管柱層析法純化所得的油而分離出4 0 0毫克化合 物1 1。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） " 一 10 - (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 498078 A7 __B7 五、發明説明（8 ) 製備化合物1 2 nal Chemistry 1994, vol 2, no 11, pp.1267-1280揭7K 的步驟製備化洽物1 2。 在得到化合物1 2的反應步驟中，用笮基代替甲基來 保護糖醛酸。 製備化合物1 3 類似於化合物4的方法，將化合物1 1偶合至化合物 1 2而製備化合物1 3。 製備化合物14 將碳酸氫鈉（1 4 2毫克）在水（2毫升）及P d/ C (4 00毫克）的懸浮液添加至化合物1 3 (480毫 克）在2 —甲基一 2 —丙醇（60毫升）的溶液中，將混 合物放在氫氣壓下1 6小時，經由過濾將觸媒移除，並用 2—甲基-2-丙醇/水的混合物清洗，合併的過濾液及 清洗液在真空下濃縮後得到315毫克化合物14,不再 純化而直接使用。 製備化合物1 5 將化合物14 (3 15毫克）溶解在0 · 35當量濃 度氫氧化鈉水溶液（1 0毫升），將反應混合物攪拌過夜 ,然後用1當量濃度氫氯酸將PH調整成8 · 5，用懸浮 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I -「I m —ί ! = = -- - - ---I- I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 -11 - 498078 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 __B7 五、發明説明（9 ) 在水··乙腈：三乙胺90 ·· 10 : 0 . 1 (體積/體積/ 體積）的360以(16\〇-2 5管柱將混合物脫鹽化，收集 適當的溶離份並在真空下濃縮，類似於化合物14揭示的 方法再度使產物氫解，經處理及將過濾液濃縮及清洗後， 用懸浮在水：乙睛：三乙胺90 : 10 : 0 · 1 (體積/ 體積/體積）的Sephadex G — 25管柱將混合物脫鹽化 ，收集適當的溶離份並在真空下濃縮，用水在Dowex 5 0 WX 8 N a+管柱上溶離，最後經冷凍乾燥後得到16 5 毫克化合物1 5 〇 製備化合物1 6 將化合物15 (165毫克）的溶液用N，N —二甲 基甲醯胺蒸發後，溶解在N，N —二甲基甲醯胺（ 1 1 · 0毫升），在反應混合物中加入三乙胺硫三氧化物 複合物（1 . 31克），在50 °C下攪拌16小時後，將 混合物冷卻（0°C)並加入碳酸氫鈉水溶液（2 · 43克 )並在2 0 °C下攪拌1小時，然後在真空下濃縮，用懸浮 於水··乙 9 : 1 (體積/體積）的Sephadex G - 2 5 管柱將殘留物脫鹽，收集適當的溶離份並在真空下濃縮， 在Dowex 5 0WX 8 N a +管柱上溶離後，用氯化鈉梯度 在Q — Sepharose High Load管柱上純化產物，得到 160 毫克化合物 16»{[>U° = + 24 · 0 (c = 0 · 7 7 ;水）}。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 -12 - 498078 f . A7 _ B7_ 五、發明說明（10) 圖示簡要說明 圖1係是製備式I化合物之流程圖 圖2係是製備式I化合物之流程圖 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 訂： i 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210x 297公釐）- 13 -

Claims (1)

1. 498078 k告本I丨· nf:;: 六、申請專利範圍 附件二Λ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 第861G 6 6 74號專利申請案 中文申請專利範圍修正本 民國89年6月修正 1 .式I的糖類衍生物

   其中R1爲Η或CH2〇S03-; R2與R3彼此獨立地爲H、 （1一6(：)烷基或 S 0 3一； R 4爲 0 S 〇 3- ； η爲0或1 ; Ρ爲1或2 ; 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 或其藥學上可被接受的鹽類。 2 .如申請專利範圍第1項之糖類衍生物，其中R2 爲（1-6C)烷基，R3爲S03_, R4爲〇S03_，且 R1、η及ρ相同於先前之定義。 3 ·如申請專利範圍第2項之糖類衍生物，其中R2 爲甲基。 4 ·如申請專利範圍第2或3項之糖類衍生物，其中 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐）— '一 498078 A8 B8 C8 D8 々、申請專利範圍 η爲1且p爲1。 5·如申請專利範圍第2項之糖類衍生物，其中R1 爲 C Η2Ο s 〇3。 6·—種用於治療或預防血栓形成或抑制平滑肌細胞 增殖之藥學組成物，其中含充當活性成份之申請專利範圍 第1項之糖類衍生物及藥學上合適的輔劑。 7.如申請專利範圍第1項之糖類衍生物> 係用於 治療或預防血栓形成或抑制平滑肌細胞增殖。 8 .如申請專利範圍第1項之糖類衍生物，係供製造 藥劑使用，供治療或預防血栓形成或抑制平滑肌細胞增殖 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） _ 2 -