TW317487B

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Publication number: TW317487B
Application number: TW083104127A
Authority: TW
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1993-06-30
Filing date: 1994-05-06
Publication date: 1997-10-11
Also published as: CA2126639A1; EP0631731A1; US5405637A; JP3650420B2; US5589357A; AU672697B2; CA2126639C; CN1105818A; JPH0723717A; PH30826A; ATE205056T1; ES2160606T3; CN1044665C; DE69428165D1; DE69428165T2; AU6598894A; EP0631731B1

Description

經濟部中央標準局員工消f合作社印製 31748Ϋ at Β7 五、發明説明（J ) 本發明相關領域 « 本發明是有關於牛乳蛋白部份水解產物，以及含有該水解產物之抗原性降低的嬰兒配方食品（infant formula )的酵素製備方法。本發明背景資料許多嬰兒配方食品是以牛乳蛋白質爲主。確實會對牛乳蛋白過敏的嬰兒需要其中蛋白質已被水解而只含有最少量殘餘分子結構的嬰兒配方食品。對不會發生過敏的嬰兒而言，具有抗原性降低之嬰兒配方食品有預防疾病發生的好處，因爲它可以延遲或預防激敏作用（sensitization )，否則該作用將引起臨床病症或過敏反應。利用蛋白質水解可使以牛乳蛋白爲主之配方食品的過敏潛在性降低。爲能完美的接近人乳組成，嬰兒配方食品中的牛乳蛋白要含有適當比例的乳清蛋白和酪蛋白。雖然有一部份以完整牛乳蛋白的產品符合所需求的乳清蛋白對酪蛋白的比例，但幾乎所有市面上銷售之部份水解的嬰兒配方食品都是以1 0 0 %乳清蛋白爲主。文獻上所描述的部份水解產物製備方法通常都牽涉到多重步驟的水解，以及在水解後用以除去酵素和/或殘餘的蛋白質的物理分離方法。大部份的方法還牽涉到在水解時的固定p Η値控制。還有就是，除非有加入其他的製程步驟，否則所得到的水解產物通常會含有高鹽量一這對嬰兒配方食品會造成配方上的問題，因爲其中礦物質的含量本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3. 10,000 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 317487 A7 B7_ 五、發明説明（2 ) 通常都需控制在一定量內。美國專利5，0 3 9，5 3 2敘述二步廉的酵素水解方法以得到所需求特性的水解產物。它同時還敘述了經過超高溫度（UHT)滅菌之嬰兒配方食品的製備。美國專利 4，293，571 和 4，981，704 則敍述了以胰蛋白來製備部份水解產物，它牽涉到後一水解隔膜方法以將殘餘的蛋白質和酵素分離掉。蛋白質水解產物一尤其是含有酪蛋白的水解產物，的一個特徵是會有苦味產生，推定是由於具有疏水性末端基團之胜肽釋出以致。此外，蛋白質的乳化性質通常也會隨著水解程度的增加而減少。日本專利1 1 6 0 4 5 8敘述一種牛乳蛋白水解產物（水解程度在5_2 0%)，它具有表面活性並且在像冰棋淋和奶昔（whipping cream)的食物中可顯示乳化活性。然而，在像有進行滅菌方法的液體嬰兒配方食品產品中，對蛋白質水解產物作進一步的變性作用（denaturation)會使其在乳化液中較不具作用性。這在產品分離成乳漿和乳酪時會很明顯。就防止曝露於熱源下的反效果，UHT滅菌作用的高溫一短時間條件通常會比傳統配方食品的蒸氣消毒器（retort)滅菌作用要來得適宜。因此極度希望有部份牛乳蛋白水解產物，它具有抗原性降低，可提供接近人乳組成物的乳清蛋白對酪蛋白比例，改良之滋味，和/或具有改良之乳化活性。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ———1----一1------訂------1 1 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 83. 3.10,000 經濟部中央標準局貝工消贤合作社印製 317487 A7 B7 五、發明説明（3) 本發明概要本發明是針對蛋白質混合物的部份水解逵物，其中該蛋白質混合物含有乳清蛋白和酪蛋白，水解產物的水解程度在4和1 〇 %之間，以及和含有該部份水解產物的嬰兒配方食品相關。本發明還和蛋白質混合物之部份水解產物的製備方法有關，它包括在含水懸浮液中，使乳清蛋白和酪蛋白的混合物與含有至少1 8 0 0單位/毫克USP胰蛋白酶和至少3 5 0單位/毫克USP胰凝乳蛋白酶的酶混合物接觸，以得到水解程度在4和10%之間。本發明的詳細說明本發明提供一種包含有乳清蛋白和酪蛋白之混合物的部份水解產物一它適用於具有抗原性降低之營養產品的製造，以及提供其製備方法。和先前技術的部份蛋白質水解產物相比，本發明的部份水解產物的乳清蛋白/酪蛋白比例要較接近人乳。此外，本發明的水解產物較宜有改良的滋味和改良的乳化活性。本發明方法可使用其中乳清蛋白和酪蛋白比例較宜接近人乳之混合物的起始原料來進行。蛋白質混合物較宜含有約6 0至8 0%的·乳清蛋白和約4 0至2 0%的酪蛋白，更適宜爲約4 0至6 0%的乳清蛋白和約6 0至4 0% 的酪蛋白。酪蛋白和乳清蛋白百分比是表成以重量爲基準。乳清蛋白的來源可以是乳酪製造時得到的乳清，尤其是本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83.3. 10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央標準局員工消f合作社印製 317487 at B7 五、發明説明（4) 以凝乳劑（rennet)來使酪蛋白凝聚而得到的甜乳清。乳清蛋白也可以超過濾得到之含有約3 5 _ 8 0 %蛋白質的濃縮形式（UF乳清）來使用。該乳清原料可選擇性地以離子交換和/電透析法來進行聡礦物質作用（ED乳清）。酪蛋白來源可以是酸性酶蛋白或無脂牛乳固體（ NFDM)。乳清蛋白和酪蛋白可以濃縮液或粉末形式來使用。基於本發明的目的，將蛋白質稀釋成，或重新組構成（reconstitute )爲毎升含有約1 0至6 0克蛋白質，較宜爲每升含有約4 0茔6 0克蛋白質的溶液。

本發明方法使用胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的混合物，其酵素特性爲互補的。酵素混合物較宜不受其它蛋白酶，比如羧肽酶A和B或亮胺酸胺肽酶，的汙染。混合物中的胰蛋白酶含量等於或大於8 0 0 USP單位/mg，較宜等於或大於1 0 0 0 USP單位/mg，更適宜等於或大於1 8 0 0USP單位/mg。一個USP胰蛋白酶單位爲在5分鐘的化驗時間，pH爲7. 6，25土0. 1°C 和N_苯甲醯基一 L —精氨酸乙酯氯化氫（BAEE>用作底質的條件下，可引起每分鐘有0. 003吸收變化的活性。混合物中的胰凝乳蛋白海含量等於或大於1 5 0 USP單位/mg，較宜等於或大於2 0 0USP單位/ mg，更適宜等於或大於3 5 0USP單位/mg。一個 u S P胰凝乳蛋白酶單位爲在5分鐘的化驗時間，P Η爲 7 · 6，25士0_ 1°C和Ν —乙醯基一L -精氨酸乙酯本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3.10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 Μ ! 317487 at B7 五、發明説明（5 ) (ATE E )用作底質的條件下，可引起每分鐘有 0.0075吸收變化的活性。 ^ 適用於本發明的酶，其市售廠商包括有位在美國，康乃迪克州，Danbury 的 Novo No'r disk Bioindustrials 公司（尤其是其PEM 25 0 OS ).:美國紐約州紐約市的Enzyme Development公司：美國紐約州Purchase的Intergen公司 :美國威斯康辛州Waunakee的Scientific Protein實驗室 Ο 要獲得具有所需求物性的水解產物，則在胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的混合物中，胰蛋白酶對胰凝乳蛋白酶的比通常須在約1. 3至約18的上述USP單位之間，較宜在約1. 3至約10之間，更適宜在約4至6至間。基於本發明目的，酶的混合物通常是，根據進行水解之全部蛋白質重量爲基準，以約0. 4重量％至約1. 2重量％的量，較宜爲約0. 6重量％至約0. 8重量％的量，來使用。經濟部中央標準局員工消资合作社印製一個在水解前的選擇性初步步驟爲對蛋白質溶液作預加熱以確定乳清蛋白部份一比如血清蛋白（BSA)和免疫球蛋白（尤其是IgG)，有進行變性作用。當以免疫化學方式來評估時（如底下所說明的），該步驟通常可導致殘餘抗原性的降低。該預處理步驟的進行，通常是加熱至約7 5 °C和約8 5 °C之間，並維持在該溫度約1 〇分鐘至3 0分鐘。水解本身通常是在約3 0°C至約5 0°C之間的溫度進行約2至6個小時，較低的溫度上下限相當於較 83. 3. 10,000 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐〉 A7 B7 317487 五、發明説明（6 ) 長的時間上下限，反之亦然。在水解當中，通常並不需要固定pH在一定値，因爲水解通常是在6. 5 - 6 . 8之間的p Η値進行，故無需另外的p Η控制。但無論有無 ΡΗ控制，pH値仍應維持在杓6. 5至8. 0之間。無論水解條件爲何，水解產物較宜進行另外的酶去活化步驟。該酶的去活化可以是一個熱處理，它包括加熱至約8 5°C的溫度，並維持在該溫度約1 0分鐘。另一種選擇則是，酶可在超高溫度下進行滅菌（比如在約1 3 0°C 中約4 5秒）以使去活化，然後產品以液態來貯存。水解產物也可以蒸發或噴灑乾燥法以使乾燥的方式來進行濃縮 0 爲監控水解進行的程度，使用美國藥典（US P )的甲醛滴定法，其中胜肽鍵在水解當中所增加的自由胺基可由氫氧化鈉的滴定來估計。水解程度在4%和10%之間，較宜在5 %和7 %之間。本發明的一個優點爲水解程度要比某些先前方法所達到者要低；然而仍可在抗原性上獲得明顯的降低。使用大小互斥層析法（S E C )來測定水解產物的胜肽分子量分布。使用一支維持在3 7 °C，並使用TFA和乙腈在KC1中的溶液以0. 7ml/分的速度進行沖提的TSK G — 2 0 0 0 SWXL管柱，水解產物中的胜肽是根據其中的分子大小來分離。在2 1 4 nm時的吸收相對滯留時間是以UV偵測器來產生，並和標準蛋白質及已知分子量的胜肽作比較。本發明之部份水解產物的平本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂尊！經濟部中央標準局員工消費合作社印製 83. 3.10,000 經濟部中央標準局負工消费合作社印製分子量（克/葚：§：) MW>5000 5000>MW>3000 3000>MW>2000 2000>MW>1000 1000>M¥>500 MW>500 317487 五、發明説明（7) 均分子量較宜爲2，0 〇〇，最大分子量爲1 9，0 〇〇，並包括如下列分布，以其分子量爲函數，的胜肽： %分子量分布 8.2 14.5 15.8 26.2 17.8 17.5 本發明的水解產物較宜沒有可偵測之完整牛乳蛋白質存在。水解產物中是否有完整牛乳蛋白質的存在，可以十二硫酸鈉一聚丙烯醯胺凝膠電泳法（SDS — PAGE) 來證明。SDS — PAGE是以4至2 0梯度％的三甘胺酸（Trisglycine )凝膠來進行。以SDS來處理1 5微米經水解過的蛋白質，以2 -巯基乙醇還原，加熱並塗覆至各個小徑（丨ane)上。在電泳分離完成後，以銀來對凝膠染色以使殘餘的胜肽顯示出來。利用同一個凝膠，以5 微克的未水解蛋白質起始物來作直接的比較。使用酶一連結的免疫附著（immunosorbent )分析法 (EL I SA)來測定水解產物的殘餘抗原性。將濃度落在分析所建議之線性劑量反應範圍內的未水解牛乳蛋白質固定在固相中。水解產物的製備也是以類似固定的方式來本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4規格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -訂 83. 3.10,000 10 - A7 B7 五、發明説明（8 ) 進行。接著，利用兔子抗牛乳蛋白和對兔子I g G有共範反應性的酶所作的一系列培育，則可顯示出其中是否有抗原性可辨認之蛋白質和胜肽的存在。在以質量爲基準下，比較水解產物和未水解蛋白質起始物所得到的結果。本發明水解產物的抗原性降低至少約有8 5%，較宜至少約有 8 5%，更適宜至少約有9 0%，最適宜至少約有9 5% Ο 本發明的水解產物可適用於嬰兒配方食品，可以配方食品工業所通常使用的單元操作方式來加工。這類配方食品和相對應的未水解蛋白質在抗原性降低上的比較是由上述的ELISA方法來測定。和相對應的未水解蛋白質混合物相比，以本發明水解產物製備的本發明嬰兒配方食品在抗原性降低上至少約有 8 0%，較宜爲至少約有8 5%，更適宜爲至少約有9 0 %，最適宜爲至少約有9 5。本發明的嬰兒配方食品可以是粉末，濃縮液或隨時可使用的液體等形式。經濟部中央標準局員工消費合作社印製此外，和以部份水解乳清蛋白製成之相對應嬰兒配方食品相比，本發明的嬰兒配方食品的味道有改良。本發明嬰兒配方食品含有設計用來滿足嬰兒在養份上需求的成份。因此，除了本發明的部份水解產物，一個典型的嬰兒配方食品含有脂質來源，碳水化合物來源和其他像維生素和礦物質的養份。通常會將動物油，植物油，澱粉，蔗糖，乳糖和/或玉米糖漿固體加至嬰兒配方食品中，以供應部份或全部的上述養份。 83. 3.10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁j 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 11 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 317487 A7 B7 五、發明説明（9 ) 本發明的嬰兒配方食品較宜爲養份完整的（nutritionally complete ) 。所謂、養份完整 # 是指在展延的期間內，組成物含有足以維持人體健康生活所需的養份。每1 0 0千卡的全部配方食品含有的部份蛋白質水解產物量通常約1. 8克至約4. 5克：每100千卡的全部配方食品含有的脂質來源量通常爲約3. 3克至約6克 ;每1 0 0千卡的全部配方食品含有碳水化合物來源量通常爲約7克至約14克。嬰兒配方食品中的碳水化合物來源可以是任何技術上已知適用於嬰兒配方食品的合適碳水化合物。典型的碳水化合物包括蔗糖，果糖，葡萄糖，麥芽糖糊精，乳糖，玉米糖漿，經修飾的玉米澱粉，經修飾的茨粉（13?丨(^3 5-t a r c h )，米麩，大豆麩等等。 t 嬰兒配方食品中的脂質來源可以是任何技術中已知適用於嬰兒配方食品的脂質或脂肪。典型的脂質源包括牛乳脂肪，紅花油，蛋黃脂肪，橄欖油，花生油，棕櫚油，棕櫚仁油，大豆油，向日葵油，魚油和其衍生出來的餾分一比如棕櫚油酸甘油酯，中間鏈甘油三酸酯（MCT)，以及脂酸的酯類一其中脂酸爲花生四烯酸，亞油酸，棕櫚酸，硬脂酸，廿二碳六烯酸，廿碳五烯酸，亞麻脂酸，油酸，月桂酸，癸酸，辛酸，己酸等等。預期各種油類的高油酸鹽形式，比如高油酸鹽的向日葵油和髙油酸鹽的紅花油，也適用於此。中間鏈的甘油三酸酯含有濃度通常較傳統油類要高的辛酸和癸酸，也就是說，全部脂酸含量中大約本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 83.3.10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 、?τ 經濟部中央梯绛扃員工消费合作社印裝本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21〇χ297公釐） 83. 3.10,000 A7 B7 五、發明説明（1〇) 有3/4爲辛酸，1/4爲癸酸。含有本發明部份蛋白質水解產物的嬰兒E方食品可選擇性地補充有各種的自由氨基酸，以提供營養均衡的氨基酸含量。道類自由氨基酸的例子包括L —色氨酸，L 一甲氨酸，L —胱氨酸，L —酪氨酸，和L —精氨酸。吾人了解，含有所有維生素和礦物質的營養完整組成物，對日常飲食是很重要的，並且這些組成應該是以營養顯著的量存在。技術熟練人士將可看出，已對某些已知對正常生理作用爲必須的維生素和礦物質建立了最低的需求量。有經驗的人也了解，需提供適當之額外量（過剩）的維生素和礦物質成份，以便能補充這類組成物在處理和貯存時的一些損失。要選擇可使用於嬰兒配方食品的特定維生素或礦物質化合物時，需考慮到化合物其和處理及架貯時相容性的化學本性。 t 礦物質，維生素和其他選擇性可存在於本發明組成物之養份的例子包括維生素A，維生素B6 ，維生素312, 維生素E，維生素K，維生素C，葉酸，硫胺素，肌醇，核黃素，菸鹼酸，生物素，泛酸，膽素，鈣，磷，碘，鎂，銅，鋅，猛，氯，鉀，鈉，硒，鉻，鉬，牛磺酸，和L 一肉鹸。磺物質通常是以鹼的形式加入。除了相容性和安定性的考慮外，特定磺物質和其他維生素的存在及量會隨所設計的嬰兒人口而有些變化。本發明的嬰兒配方食品通常也含有乳化劑和安定劑， -13 - ---ml--：----一：------訂------II (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 _B7____ 五、發明説明（n) 比如黃豆卵磷脂，鹿角菜等等。本發明的嬰兒配方食品還可選擇性含有真它可能有益處的物質，比如乳酸牖鐵素（Uctoferrin )，核苜酸，核苷，免疫球蛋白等等。本發明液體嬰兒配方食品的滲透性（當準備要使用時 )通常約爲1 0 0至5 0 0 ioOsm/公斤水，更通常約爲 2 0 0至5 0 OmOsm /公斤水。如有需要，本發明的嬰兒配方食品可以技藝上熟知的技術，比如像高壓滅菌法或蒸氣消毒法（retorting )等等的熱處理來進行滅菌。本發明的嬰兒配方食品可以技藝上已知可用來貯營養配方食品的任何型式容器，比如玻璃，裝塡紙袋，塑膠，經塗覆的金屬罐等等，來加以包裝。以下的實施例用來說明本發明，但不可解讀爲對其的限制。寅施例1 蛋白質爲在5 0°C時濃度爲4 一 6 %的可溶解蛋白質。這相當於1 0 — 2 5 %的固體，視所使用蛋白質種類而定。預加熱處理包括固定在7 5 °C達3 〇分鐘。使混合物冷卻至5 0°C，並加入酶的混合物。可在3 0 — 5 0 °C的溫度範圍內進行2 — 6小時的水解作用。水解的時間和溫度爲彼此相關的，較低的溫度上下限相當於較長的時間上下限，反之亦然。在水解期間對混合物的P Η値可，也可本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐） 83. 3. 10,000 1.1-ΊΚ--：----ί:------tr------Μ 1 (請先閣讀背面之注意事項再填寫本頁) 14 317487 A7 B7__ 五、發明説明（12) 不用加以控制。爲使酶去活化，使水解產物接受注入溫度爲1 3 5°C的蒸氣達4 5秒。該高溫步驟連崗預加熱處理和酶的水解可生成抗原性降低的水解產物。如有需要，可以氫氧化鉀將PH値調整到至少爲6. 6，以防止在熱處理時有熱凝結產生。實施例2 進行如實施例1的製程，不同的是在進行10分鐘的 8 5°C預加熱處理之前，先以KOH將p Η値調整至 7 . 5。爲使酶去活化，使部份水解產物加熱至8 5 °C並維持在該溫度達10分鐘。如同寅施例1，在後續步驟開始之前，先將pH値調整到至少爲6. 6。在下表中顯示出不同的處理變數以說明根據實施例1 和2之水解產物的製備。在所有的情形中，乳清蛋白：酪蛋白的重量比爲8 0 : 2 0。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 -典！經濟部中央標準局員工消費合作社印製 83.3. 10,000 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -15 - 五、發明説明（13) A7 B7 經濟部中央標準局員工消f合作社印製變數寅施例 %D . Η · 抗原性降低％ (水解產物）胰蛋白酶對 1.3· 胰凝乳蛋白酶比 5.3 2 6.77 92.5 2 6.50 94 . 3 8.8 2 7.24 93.7 酶的濃度 0.8 (蛋白質％) 0 . 6 2 5 . 50 92.7 2 4.88 91 · 3 0.4 2 4 . 72 . 91 . 3 水解時間 2 (小時） 2 1 4 . 53 90.6 2 4.55 91.8 3 1 4.57 92 . 4 3 2 5 . 48 93.9 4 1 5 . 35 92.4 4 2 6 . 50 94 _ 3 6 2 6.73 94.6 水解溫度（°C ) 30 2 4 . 58 89.9 40 2 5.71 91.6 50 2 5.76 94.6 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3. 10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) ,βτ 屬！ A7 B7 五、發明説明（14) 實施例3 對一個液體嬰兒配方食品，將預先溶解的乳糖和礦物質加入實施例1的部份水解產物。在金靥板型的熱交換器上使混合物加熱至7 0°C。接葦加入含有棕櫚油酸，向日葵油，花生油，大豆油，卵磷脂，甘油脂及甘油二脂的脂肪和脂溶性維生素。油類加入混合物之前已先熔解。在預加熱至約7 5 °C時，直接注入蒸氣來使混合物加熱至 1 4 OeC達4 5秒，並以金屬板冷卻器來使冷卻至7 0°C 。然後接著是兩階段的均貧化，首先在1 7 5巴，接著在 3 5巴。然後以金靥板冷卻器來使混合物冷卻至5 — 7°C ，並貯存於中間反應貯存槽，水溶性維生素是在此加入。該方法的整體產品的熱凝結時間超過3 0分鐘。以傳統的高溫蒸氣系統來對產品進行滅菌。液體具有下列的組成物： (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央標準局員工消费合作社印製胜肽 1 . 6 5 % 脂肪 3 . 6 0 % 碳水化合物 6 . 5 2 % 礦物質 0 . 4 8 % 維生素微量實施例4 對另一個液體嬰兒配方食品？以來自寅施例2的水解產物來進行如寅施例3的製程，不同的是直接注入的蒸氣 -17 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3. 10,000 317487_%_ 五、發明説明（15) 溫度爲12 1°C，液體是在14 5°C進行4. 9 7秒的滅菌，並以無菌包裝的容器內。組成物和實施例3者相同。實施例5 對嬰兒配方食品，使用來自實施例1或2的部份水解產物來進行如實施例3的製程，不同的是，產品在1 2 5 巴和5 0巴的兩階段均質化步驟之前未接受蒸氣注入的溫度處理。在進行噴灑乾燥前，可使粉末底質蒸發成5 0% 的固體。粉末具有下列的組成物： (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

胜肽 13.1 % 脂肪 2 8.6 % 碳水化合物 5 1.8 % 礦物質 3 . 8 % 維生素 0 . 2 % 水份 2 . 5 %

1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製至 IX 例施寅如之備。製性法原方抗明之發低本降由出，現的顯示品顯食所方表配下兒如嬰的 5 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3.10,000 -18 - 五、發明説明（16) A7 B7 產品形式（乳清蛋白：酪蛋白實施例~ 抗原性的重量比，蛋白質來源）減少％液體（80:20，UF'乳清，NFDM'_) 寅施例1 , 4 92.4 液體（ 80:2 0,UF乳清，NFDM) 寅施例2 , 4 94 . 3 液體（80 : 2 0 , UF乳清，NFDM) 實施例1 , 3 92.1 液體（8 0 : 2 0 , U F乳清，酪蛋白）實施例1 , 4 81.4 液體（6 0 : 4 0，UF乳清，NFDM) 實施例1 , 4 87.8 液體（6 0 : 4 0 , E D' …乳清，N F D Μ ) 實施例1 , 4 94 . 6 粉末（80:20 ,UF 乳清，NFDM) 實施例2 , 5 92.3 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 'U F =超過濾的 __N F DM二無脂乾燥奶粉 …· E D =電泳實施例6 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS〉A4規格（210X297公釐） 83. 3. 10,000 -19 - 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（17) 一個包括4 0名成員的消费者小組對大致如實施例4 說明之本發明嬰兒配方食品和具有類似成份i但不同的地方在蛋白質成份爲部份水解之1 0 0 %乳清蛋白一的市售嬰兒配方食品（由位在美國加州Glendale的Carnation公司出品的Good StarTM鐵强化嬰兒配方食品）作評估和比較。樣品是在室溫下提供的，並由小組成員評估。利用9 分的喜歡程度（9 =非常喜歡，1=非常不喜歡）來對嬰兒配方食品的特定和味覺特性一比如苦味，餘昧’ 口感，以及整體滋昧分數。結果如下表所示。本發明配方食品 Good S t a 外觀 7 . 3 6.7' 滋味 4.0 3 . 3* 滋味强度 4.5 4.0 甜度 4.8 4.1* 在奶油中（buttery) 5.0 4 . 5 在肉中 4.4 4.1 苦味 3 . 6 3.6 餘味 3 . 0 3 . 7' 整體表現 4.2 3.6' 喜歡程度 68% 32% 評語苦味8¾ 苦味18¾ 顏色很醜8 % 表示在9 5 %可靠範圍內，樣品彼此間有顯著的差異。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 83. 3.10,000 II ：--.T L ^---Ί------訂- ------名 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 20 A7 B7 五、發明説明（18) 比起Good Start，本發明的嬰兒配方食品要受歡迎得多。參與者的評論指出，本發明嬰兒配方食品之所以會比 Good Start受歡迎，主要是因爲Good Start的苦味本性。藉著特別參考其較佳體系，已對本發明作詳細說明，但要了解的是，只要在本發明的精神和範圍內即可進行變動和變化。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂------名丨經濟部中央橾準局員工消f合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 21 83. 3.10,000

Claims

告 ABCC # 附件一(A ): 第83104127號專利申請案中文申請專利範圍修正本 ' 民國85年12月修正 1 . 一種蛋白質混合物之部份水解產物，其中該蛋白質混合物係含有6 0至8 0重置％之乳清蛋白及4 0至 2 0重量％之酪蛋白，且該部份水解產物係具有（1 )水解程、度介於4至10%之間，（2)藉由ELISA測量，相對於其相對應之未水解蛋白質混合物，抗原性係降低 80 — 99%，及（3)平均分子量爲2，000，最大分子量爲1 9，0 Q Q，且以其莫耳質量爲基準，其肽分佈係如下所示：經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 %分子量分佈 8.2 14.5 15.8 26 . 2 17.8 17.5 (請先閱讀背面之注意事項再蜞寫本頁) 分子暈（克/莫瓦） MW>5000 5000>MW>3000 3000>MW>2000 2000>MW>1000 1000>MW>500 MW>500 該部份水解產物之製備係藉由於6 〇至9 〇〇c之溫度下先期預熱該蛋白質混合物達1 0至5 0分鐘且於3 〇至5 0 °0之溫度及pH値介於6 . 5至8 . 〇之條件下，令該蛋本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐）-1 - ABCD 017487 六、申請專利範圍 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 白質混合物與一酶混合液於水溶性懸浮液中相接觸達2至 6小時，以使該蛋白質混合物之水解程度達4至1 0 %、其中該酶混合液係'包含至少1 8 0 OUSP胰蛋白酶單位 / m g及至’少3 5 OUSP胰凝乳蛋白酶/ mg，且該胰蛋白酶對胰凝乳蛋白酶之USP單位比係介於1.5至 1 〇之間，且隨後該酶混合液之去活化係藉由於7 0至 9 0°C之溫度下加熱該部份水解產物達5至2 0分鐘，或於1 1 0至1 4 0°C之溫度下加熱該部份水解產物達3 0 至6 0秒。 2 .如申請專利範圍第1項之部份水解產物，其係具有藉由E L I S A測量，相對於其相對應之未水解蛋白質混合物，抗原性降低8 5 - 9 9%。 3 .如申請專利範圍第1項之部份水解產物，其係具有藉由EL I SA測量，相對於其相對應之未水解蛋白質混合物，抗原性降低9 Q — 9 9%。經濟部中央標準局员工消費合作社印製 4 .如申請專利範圍第1項之部份水解產物，其係具有藉由E L I S A測量，相對於其相對應之未水解蛋白質混合物，抗原性降低9 5_9 9%。 5 .如申請專利範圍第1項之部份水解產物，其中該酶混合液之用量係基於混合物中蛋白質之重量爲介於 0 . 4至1 . 2 %之間。 6 .如申請專利範圍第1項之部份水解產物，其中於額外之步驟中係藉由蒸發或噴轎乾燥以自該部份水解產物中除去水。本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐）_ 2 _ ABCD 317487 六、申請專利範圍 7 .—種嬰兒配方食品，其係包含如申請專利範圍第 1項之部份水解產物，以及慣用之碳水化合物，脂質，礦物質和維生素。^ 8 .如申請專利範圍第7項之嬰兒配方食品，其係經消毒滅菌。 9 .如申請專利範圍第7項之嬰兒配方食品，其係經高溫蒸氣滅菌。 10 .如申請專利範圍第7項之嬰兒配方食品，其係呈粉末之型式。 1 1 .如申請專利範圍第7項之嬰兒配方食品，其係具有藉由E L I S A測量，相對於其相對應之未水解蛋白質混合物，抗原性降低8 0 — 9 9%。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂- 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4规格(210X297公梦）-3 -

111004 [57]申請專利範圍： 1. 一種蛋白質混合物之部份水解產物，其中該蛋白質混合物係含有60至80重量％之乳淸蛋白及40至20重量％之酪蛋白，且該部份水解產物係具有 ⑴水解程度介於4至10%之間，（2>藉由ELISA測量，相對於其相對應之未水解蛋白質混合物，抗原性係降低 80-99%，及(3)平均分子量爲2,000，最大分子量爲19,000 ，且以其莫耳質量爲基準，其肽分佈係如下所示：分子量(克/莫耳） %分子量分佈 MW> 5000 8.2 5000 > MW > 3000 14.5 3000 > MW > 2000 15.8 2000>MW> 1000 26.2 1000>MW> 500 17.8 MW> 500 17.5 該部份水解產物之製備係藉由於60至 90t：之溫度下先期預熱該蛋白質混合物達10至50分鐘且於30至50C之溫度及pH値介於6.5至8.0之條件下，令該蛋白質混合物與一酶混合液於水溶 5. 性懸浮液中相接觸達2至6小時，以使該蛋白質混合物之水解程度達4至 10%，其中該酶混合液係包含至少 1800USP胰蛋白酶單位/mg及至少 350USP胰凝乳蛋白酶/mg，且該胰蛋 10. 白酶對胰凝乳蛋白酶之USP單位比係介於1.5至10之間，且隨後該酶混合液之去活化係藉由於70至9(TC之溫度下加熱該部份水解產物達5至20分鐘 ’或於110至140Ό之溫度下加熱該 15. 部份水解產物達30至60秒。 2.如申請專利範圍第丨項之部份水解產物，其係具有藉由ELISA測量，相對於其相對應之未水解蛋白質混合物，抗原性降低85-99%。一 8— ⑵ 3 3. 如申請專利範圍第〖項之部份水解產物，其係具有藉由ELISA測量，相對於其相對應之未水解蛋白質混合物，抗原性降低90-99% » 4. 如申請專利範圍第丨項之部份水解產 5. 物，其係具有藉由ELISA測量，相對於其相對應之未水解蛋白質混合物，抗原性降低95-99%。 5. 如申請專利範圍第1項之部份水解產物，其中該酶混合液之用量係基於混 10. 合物中蛋白質之重量爲介於0.4至 1.2%之間》 6. 如申請專利範圍第1項之部份水解產物，其中於額外之步驟中係藉由蒸發或噴霧乾燥以自該部份水解產物中除 15. 4 去水。 7. —種嬰兒配方食品，其係包含如申請專利範圍第1項之部份水解產物，以及慣用之碳水化合物，脂質，礦物質和維生素。 8. 如申請專利範圍第7項之嬰兒配方食品，其係經消毒滅菌》 9. 如申請專利範圍第7項之嬰兒配方食品，其係經高溫蒸氣滅菌。 10. 如申請專利範圍第7項之嬰兒配方食品’其係呈粉末之型式。 11. 如申請專利範圍第7項之嬰兒配方食品’其係具有藉由ELISA測量，相對户其相對應之未水解蛋白質混合物， k原性降低80-99%。 —9—