TW201802120A

TW201802120A - 抗凝血因子ｘｉ抗體

Info

Publication number: TW201802120A
Application number: TW106119391A
Authority: TW
Inventors: 祝陳; 凱妮絲 P 艾斯華茲; 詹姆士米利根; 伊莉莎白歐德漢; 迪特馬賽伏特; 維許那維甘地; 摩哈瑪塔布吉法
Original assignee: 默沙東藥廠
Priority date: 2016-06-14
Filing date: 2017-06-12
Publication date: 2018-01-16
Also published as: TWI752964B; MA45234A; JP2021101720A; CL2018003565A1; AU2020210233B2; US20200270364A1; US10676536B2; US20230287141A1; NZ786448A; JP2019521978A; US11479615B2; MX2018015757A; KR102379580B1; US12275800B2; IL263272B2; CL2024000367A1; CA3172367A1; GEP20227382B; US11485794B2; KR20190018504A

Abstract

本發明闡述結合人類凝血因子XI之apple 3域且抑制凝血因子XIIa活化FXI以及FXIa活化FIX的抗體。

Description

抗凝血因子ＸＩ抗體

本發明係關於結合人類凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制凝血因子XIIa活化FXI以及FXIa對因子IX (FIX)之活性的抗體。

儘管可利用諸多種類之抗凝血劑(例如維他命K拮抗劑(VKA)、肝素及直接凝血酶抑制劑)，血栓栓塞性病症(包含靜脈及動脈血栓形成)仍係西方世界中之發病及死亡之主要病因(Weitz等人，Chest 2008, 133: 234S-256S；Hawkins, Pharmacotherapy 2004, 24:62S-65S)。該等藥物有效減小血栓形成之風險，但其涉及多個限制。舉例而言，VKA (例如華法林(warfarin))已成為口服抗凝血劑之支柱，但VKA療法之管控因其顯著出血風險、作用之緩慢開始及偏離及多種飲食及藥物相互作用而較為複雜(Hawkins, op. cit.；Ansell J等人，Chest 2008, 133:160S-198S)。非維他命K拮抗劑口服抗凝血劑(NOAC，包含利伐沙班(rivaroxaban)、阿哌沙班(apixaban)、依杜沙班(edoxaban)及達比加群(dabigatran))已顯示至少不差於華法林之效能，且具有較少食物及藥物相互作用並無需監測。然而，NOAC仍增加出血風險，如藉由在其用於心房顫動中之中風預防之註冊試驗中每年發生15%之嚴重或非嚴重臨床相關出血所證實(Connolly等人，N Engl J Med 2009, 361:1139-1151；Patel等人，N Engl J Med 2011, 365:883-891；Granger等人，N Engl J Med 2011, 365:981-992；Giugliano等人，N Engl J Med 2013, 369:2093-2104)。此在很大程度上歸因於NOAC靶向對於正常凝血(止血)至關重要之蛋白質(凝血因子Xa (FXa)及凝血酶)之事實。因此，未滿足性地需要在預防及治療血栓疾病或病症上具有較佳安全特徵之新穎療法。在凝血級聯之經典瀑布模型(圖 1A )中，藉由外因性(組織因子(TF)活化)路徑或內因性(接觸活化)路徑觸發凝血，此兩種路徑皆饋入終止於凝血酶生成及纖維蛋白形成之常用路徑中(Furie & Furie, Cell 1988, 53:505-518；Gailani & Renne , J Thromb Haemost 2007, 5:1106-1112)。在存在於內皮下膜及動脈粥樣硬化病灶中之TF變得暴露於流動血液且與凝血因子VIIa (FVIIa)形成複合物時，開始外因性級聯。TF-FVIIa複合物(外因性X酶複合物)然後觸發常用路徑，亦即活化FX以形成FXa，FXa繼而將凝血酶原轉化成凝血酶。TF-FVIIa複合物亦可活化凝血因子IX (FIX)以形成FIXa。FIXa與凝血因子VIII (FVIIIa)之複合物(內因性X酶複合物)亦可裂解FX受質。在經由接觸活化自帶負電表面(例如膠原及葡糖胺基聚糖)形成FXIIa且藉由FXI、FIX、FX及凝血酶原之依序活化傳遞凝血酶生成時，開始內因性級聯。作為凝血級聯中之終末蛋白酶，凝血酶可進一步藉由以反饋機制直接活化FXI來促進FXIa生成。血小板(全血中之另一重要止血組分)可藉由凝血酶活化且亦可隨後支持FXIa形成。凝血酶生成之FXI依賴性擴增可經由活化凝血酶可活化之纖維蛋白溶解抑制劑(TAFI)而間接調控纖維蛋白溶解。FXI由此與止血系統中之若干組分相互作用且在凝血及血栓形成中發揮關鍵作用(Gailani & Renne op. cit.；Emsley等人，Blood 2010, 115:2569-2577)。凝血因子XI (FXI)係由相同80 KDa亞單元構成之二聚體，且每一始於N-末端之亞單元係由4個apple域(A1、A2、A3及A4)及催化域組成(參見圖 1B )。FXI係以與高分子量激肽原(HK)之複合物形式循環之酶原。HK結合至FXI中之A2域且係用於FXI至FXIa之FXIIa活化之生理學輔因子。FXI中之剩餘apple域亦調介重要生理學功能。舉例而言，結合之FIX外位點局部化於A3中，而結合FXIIa之位點位於A4中。對於FXI二聚合至關重要之殘基亦局部化於A4中(Emsley等人，op. cit.)。近年來，多方工作已證實，FXI在血栓形成之病理學過程中發揮關鍵作用，且對止血之貢獻相對較小，且由此係血栓形成之有前景之靶。證實此觀點之關鍵數據匯總如下：(1)在Ionis Pharmaceuticals Inc. FXI反義寡核苷酸(ASO)階段II試驗(Buller等人，N Engl J Med 2015, 372:232-240)中，對於經受全膝關節成形術之患者，與依諾肝素(enoxaparin)相比，FXI ASO顯著減小靜脈血栓栓塞(VTE)，且往往出血較少；(2)人類基因學及流行病學研究(Duga等人，Semin Thromb Hemost 2013；Chen等人，Drug Discov Today 2014；Key, Hematology Am Soc Hematol Educ Program 2014, 2014:66-70)指示，嚴重FXI缺陷(血友病C)會減小缺血性中風及深層靜脈血栓形成之風險；與之相反，增加FXI濃度涉及VTE及缺血性中風之較高風險；且(3)多方臨床前研究證實，FXI(a)抑制或功能損失會調介明顯血栓保護且不損害止血(Chen等人，op. cit.)。應注意，單株抗體14E11及1A6在狒狒AV分流血栓形成模型中產生顯著血栓減小(美國專利第8,388,959號；美國專利第US8,236,316號；Tucker等人，Blood 2009, 113:936-944；Cheng等人，Blood 2010, 116:3981-3989)。此外，14E11 (因其與小鼠FXI交叉反應)在小鼠急性缺血性中風之實驗模型中提供保護(Leung等人，Transl Stroke Res 2012, 3:381-389)。亦在臨床前模型中報導其他靶向FXI之mAb以驗證作為具有最小出血風險之抗血栓靶之FXI (van Montfoort等人，Thromb Haemost 2013, 110；Takahashi等人，Thromb Res 2010, 125:464-470；van Montfoort, Ph.D. Thesis, University of Amsterdam, Amsterdam, Netherlands，2014年11月14日)。抑制FXI由此係用於新穎抗血栓療法之有前景策略，其與當前標準護理抗凝血劑相比具有改良之益處-風險特徵。當前存在對於用於患有嚴重或晚期腎病(ESRD)之患者之抗血栓療法之較大未滿足醫學需求。在美國，大約有650,000名患者患有嚴重或ESRD且該等患者具有極高之血栓及血栓栓塞性併發症(MI、中風/TIA、周邊動脈疾病(PAD)、血管通路失效)之發生率。ESRD患者亦較一般群體更可能具有出血事件。因任一種類之抗凝血劑通常並未開具於ESRD患者中(因出血風險及缺乏關於非維他命K拮抗劑口服抗凝血劑(NOAC)在ESRD中之數據)，故需要在該等患者中具有可接受之益處-風險特徵之抗血栓療法。

本發明提供能夠選擇性結合至凝血因子XI (抗FXI抗體)且抑制凝血及相關血栓形成、較佳地不損害止血之人類抗體。組合物包含能夠結合至凝血因子XI之apple 3 (A3)域之界定表位之抗凝血因子XI抗體。該等抗體藉由在FXIIa作用下抑制酶原形式FXI至其活化形式FXIa之轉化且抑制FXIa調介之FIX活化來展現中和活性。抗體可用於FXI抑制，與抑制許多下游凝血因子(例如FXa及凝血酶)相比，此可賦予臨床相關之抗血栓效應且具有減小之出血併發症風險及由此增加之治療指數。因此，該等抗體提供應用於預防血栓栓塞性併發症(例如心房顫動中之中風預防(SPAF))之治療方式。處於血管血栓形成之風險下且可受益於FXI抑制之一個未服務小組係嚴重及晚期腎病(ESRD)群體，其中因關於出血之問題而不通常使用非維他命K拮抗劑口服抗凝血劑(NOAC)，此導致缺乏臨床試驗經歷。本文之抗體提供用於預防ESRD患者之血栓併發症之新穎抗凝血劑療法。本文之抗體可提供臨床相關之抗血栓效能且在ESRD患者中伴有可接受之出血風險。除ESRD及SPAF外，FXI抑制亦可適用於處於高血栓形成風險下之其他患者群體中。該等應用包含：1)預防矯形外科手術中之靜脈血栓栓塞(VTE)及/或二級預防VTE；2)減少血管重建及/或減少PAD中之重大不良肢體事件(MALE)；3) ACS中之輔助療法。本發明提供一種抗體或抗原結合片段，其包括至少αFXI-18623p家族、αFXI-18611p家族或αFXI-18611家族之抗FXI抗體之6個互補決定區(CDR)；或至少αFXI-18623p家族、αFXI-18611p家族或αFXI-18611家族之抗FXI抗體之6個互補決定區(CDR)，其中6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合，其中αFXI-18623家族之抗體包括具有SEQ ID NO:28或29中所示胺基酸序之重鏈(HC)可變區及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之LC可變區；αFXI-18611p家族之抗體包括具有SEQ ID NO:21或22中所示胺基酸序列之HC可變區及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變區；且αFXI-18611家族之抗體包括具有SEQ ID NO:23或24中所示胺基酸序列之HC可變區及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之LC可變區。在其他實施例中，抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，6個CDR包括αFXI-18623p家族、αFXI-18611p家族或αFXI-18611家族中抗FXI抗體之HC之CDR1、CDR2及CDR3及αFXI-18623p家族、αFXI-18611p家族或αFXI-18611家族之LC之CDR1、CDR2及CDR3或由其組成，其中αFXI-118623家族之抗體包括具有SEQ ID NO:28或29中所示胺基酸序列之HC可變區及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之LC可變區；αFXI-18611p家族之抗體包括具有SEQ ID NO:21或22中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變區及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變區；且αFXI-18611家族之抗體包括具有SEQ ID NO:23或24中所示胺基酸序列之HC可變區及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之LC可變區。在其他實施例中，抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體或抗原結合片段包括具有選自由SEQ ID NO:21、22、23及24組成之胺基酸序列群之胺基酸序列之HC可變區；及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之LC可變區；其中HC可變區框架可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合且LC可變區框架可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體或抗原結合片段包括具有選自由SEQ ID NO:21、22、23及24組成之胺基酸序列群之胺基酸序列之HC可變區；及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之LC可變區。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體或抗原結合片段包括具有選自由SEQ ID NO:28及29組成之胺基酸序列群之胺基酸序列之HC可變區；及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之LC可變區；其中HC可變區框架可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合且LC可變區框架可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體或抗原結合片段包括具有選自由SEQ ID NO:28及29組成之胺基酸序列群之胺基酸序列之HC可變區；及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之LC可變區。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括人類IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之重鏈恆定域。在其他態樣中，恆定域可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。在特定態樣中，恆定域可包括C-末端離胺酸或可缺乏C-末端離胺酸。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括人類IgG1或IgG4同型之重鏈恆定域。在另一態樣中，重鏈恆定域係IgG4同型之域且進一步包含在位置228 (EU編號)使用脯胺酸取代絲胺酸殘基，此對應於SEQ ID NO:16或17之位置108 (位置108之絲胺酸)。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:16、17、18或19中所示胺基酸序列之HC恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括人類κ或λ類型之輕鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之LC恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體或抗原結合片段包括具有選自由SEQ ID NO:33、35、37、39、45、47、49、51、57、59、61、63、69、71、73及75組成之胺基酸序列群之胺基酸序列之HC；及具有SEQ ID NO:26中所示胺基酸序列之LC。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體或抗原結合片段包括具有選自由SEQ ID NO:41、43、53、55、65、67、77及79組成之胺基酸序列群之胺基酸序列之HC；及具有SEQ ID NO:31中所示胺基酸序列之LC。本發明另外提供一種抗體或抗原結合片段，其包括(a)具有SEQ ID NO: 28中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；(b)具有SEQ ID NO: 29中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；(b)具有SEQ ID NO: 21中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；(c)具有SEQ ID NO:22中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；(d)具有SEQ ID NO: 23中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；或(e)具有SEQ ID NO: 24中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及可變域具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)。在其他實施例中，抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在特定實施例中，HC及LC可變區可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。在特定實施例中，HC及LC恆定域可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。在特定態樣中，恆定域可包括C-末端離胺酸或可缺乏C-末端離胺酸。在特定實施例中，HC及LC可變區可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合且HC及LC恆定域可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。在特定態樣中，恆定域可包括C-末端離胺酸或可缺乏C-末端離胺酸。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體進一步包括含有SEQ ID NO:16、17、18或19中所示胺基酸序列之HC恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體進一步包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之LC恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體。在本發明之另一態樣或實施例中，抗體或抗原結合片段包括(a)具有SEQ ID NO: 28中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；(b)具有SEQ ID NO: 29中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；(c)具有SEQ ID NO: 21中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；(d)具有SEQ ID NO:22中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；(e)具有SEQ ID NO:23中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；(f)具有SEQ ID NO: 24中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域；(g) (a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)之變體，其中HC可變區框架包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合；或(h) (a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)或(g)之變體，其中LC可變區框架包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。本發明另外提供一種抗體，其包括(a)具有恆定域及可變域之重鏈(HC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:3中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；(b)具有恆定域及可變域之重鏈(HC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:4中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；或(c)具有恆定域及可變域之重鏈(HC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:8中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:9中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:10中所示胺基酸序列之HC-CDR 3。在其他實施例中，抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括人類IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之重鏈恆定域。在其他態樣中，與人類IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之自然重鏈恆定域之胺基酸序列相比，恆定域可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。在特定態樣中，恆定域可包括C-末端離胺酸或可缺乏C-末端離胺酸。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括人類IgG1或IgG4同型之重鏈恆定域。在另一態樣中，重鏈恆定域係IgG4同型之域且進一步包含在位置228 (EU編號)使用脯胺酸取代絲胺酸殘基，此對應於SEQ ID NO:16或17之位置108 (位置108之絲胺酸)。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:16或17中所示胺基酸序列之IgG4重鏈恆定域。在其他態樣中，恆定域可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:18或19中所示胺基酸序列之IgG1重鏈恆定域。在其他態樣中，恆定域可包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。本發明另外提供一種抗體或抗原結合片段，其包括： (a)具有恆定域及可變域之輕鏈(LC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:5中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:6中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之LC-CDR 3；或 (b)具有恆定域及可變域之輕鏈(LC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:11中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:12中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:13中所示胺基酸序列之LC-CDR 3。在其他實施例中，抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，輕鏈(LC)包括人類κ輕鏈或人類λ輕鏈或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之輕鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:16或17中所示胺基酸序列之IgG4重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:18或19中所示胺基酸序列之IgG1重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。本發明另外提供一種抗體或抗原結合片段，其包括： (a)具有恆定域及可變域之重鏈(HC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:3中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；及 (b)具有恆定域及可變域之輕鏈(LC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:5中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO: 6中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之LC-CDR 3。在其他實施例中，抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，輕鏈包括人類κ輕鏈或人類λ輕鏈或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之輕鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之重鏈恆定域或與自然IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之胺基酸序列相比包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在其他態樣中，恆定域可包括C-末端離胺酸或可缺乏C-末端離胺酸。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括人類IgG1或IgG4同型之重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在另一態樣中，重鏈恆定域係IgG4同型之域且進一步包含在位置228 (EU編號)使用脯胺酸取代絲胺酸殘基，此對應於SEQ ID NO:16或17之位置108 (位置108之絲胺酸)。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:16或17中所示胺基酸序列之IgG4重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:18或19中所示胺基酸序列之IgG1重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。本發明另外提供一種抗體或抗原結合片段，其包括： (a)具有恆定域及可變域之重鏈(HC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:3中所示胺基酸序列之HC-CDR 4；及 (b)具有恆定域及可變域之輕鏈(LC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:5中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO: 6中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之LC-CDR 3。在其他實施例中，抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，輕鏈包括人類κ輕鏈或人類λ輕鏈或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之輕鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之重鏈恆定域或與自然IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之胺基酸序列相比包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在其他態樣中，恆定域可包括C-末端離胺酸或可缺乏C-末端離胺酸。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括人類IgG1或IgG4同型之重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在另一態樣中，重鏈恆定域係IgG4同型之域且進一步包含在位置228 (EU編號)使用脯胺酸取代絲胺酸殘基，此對應於SEQ ID NO:16或17之位置108 (位置108之絲胺酸)。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:16或17中所示胺基酸序列之IgG4重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:18或19中所示胺基酸序列之IgG1重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。本發明另外提供一種抗體或抗原結合片段，其包括： (a)具有恆定域及可變域之重鏈(HC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:8中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:9中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:10中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；及 (b)具有恆定域及可變域之輕鏈(LC)，其中可變域包括具有SEQ ID NO:11中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO: 12中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:13中所示胺基酸序列之LC-CDR 3。在其他實施例中，抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，輕鏈包括人類κ輕鏈或人類λ輕鏈或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之輕鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之重鏈恆定域或與自然IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之胺基酸序列相比包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在其他態樣中，恆定域可包括C-末端離胺酸或可缺乏C-末端離胺酸。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括人類IgG1或IgG4同型之重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在另一態樣中，重鏈恆定域係IgG4同型之域且進一步包含在位置228 (EU編號)使用脯胺酸取代絲胺酸殘基，此對應於SEQ ID NO:16或17之位置108 (位置108之絲胺酸)。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:16或17中所示胺基酸序列之IgG4重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:18或19中所示胺基酸序列之IgG1重鏈恆定域或包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，其中抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中，本發明提供一種抗體，其包括：(a)具有恆定域及可變域之重鏈(HC)，其中可變域包括(i) HC框架及具有SEQ ID NO:8中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:9中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:10中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；(ii) HC框架及具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:3中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；(iii) HC框架及具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:4中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；(iv) (i)、(ii)或(iii)之變體，其中HC CDR 1、HC-CDR 2或CDR 3中之至少一者包括1、2或3個胺基酸取代、添加、缺失或其組合；或(v) (i)、(ii)、(iii)或(iv)之變體，其中HC框架包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合；(b)具有恆定域及可變域之輕鏈(LC)，其中可變域包括(i) LC框架及具有SEQ ID NO:11中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:12中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:13中所示胺基酸序列之LC-CDR 3； (ii) LC框架及具有SEQ ID NO:5中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:6中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之LC-CDR 3；(iii) (i)或(ii)之變體，其中LC CDR 1、LC-CDR 2或LC-CDR 3中之至少一者包括1、2或3個胺基酸取代、添加、缺失或其組合；或(iv) (i)、(ii)或(iii)之變體，其中LC框架包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合；或(c)來自(a)之HC及來自(b)之LC；其中抗體結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。在本發明之其他態樣或實施例中係技術方案18之抗體，其中HC恆定域包括SEQ ID NO:16、17、18或19中所示之胺基酸序列。在本發明之其他態樣或實施例中係技術方案18或19之抗體，其中LC恆定域包括SEQ ID NO:20中所示之胺基酸序列。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 33中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 35中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 45中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 47中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 49中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 51中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 59中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 61中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 63中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 69中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 33中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 71中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 73中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 75中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 39中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 41中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 43中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 53中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 55中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 57中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 65中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 67中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 69中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 77中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 79中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。本發明另外提供交叉阻斷以下抗體之結合或與其競爭結合之抗體或抗原結合片段：包括具有SEQ ID NO: 33、35、37、45、47、49、51、59、61、63、69、71、73或75中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體；或包括具有SEQ ID NO:39、41、43、53、55、57、65、67、69、77或79中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO:31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體，條件係該抗體或抗原結合片段不包括鼠類或大鼠胺基酸序列。在另一實施例中，抗體或抗原結合片段不包括非人類胺基酸序列。在另一實施例中，抗體包括(i)人類IgG1恆定域或其變體或經修飾衍生物或(ii)人類IgG4恆定域或其變體或經修飾衍生物。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體。在另一實施例中，IgG4恆定域係至少包括使用脯胺酸殘基取代位置228 (EU編號)或位置108之絲胺酸(如本文所示)之變體。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係至少在C-末端缺乏離胺酸之變體。在另一實施例中，抗體或抗原結合片段包括含有人類抗體之特徵性框架之可變域序列。本發明另外提供交叉阻斷以下抗體之結合或與其競爭結合之人類抗體或抗原結合片段：包括具有SEQ ID NO: 33、35、37、45、47、49、51、59、61、63、69、71、73、或75中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體；或包括具有SEQ ID NO:39、41、43、53、55、57、65、67、69、77或79中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO:31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。在另一實施例中，抗體或抗原結合片段不包括非人類胺基酸序列。在另一實施例中，抗體包括(i)人類IgG1恆定域或其變體或經修飾衍生物或(ii)人類IgG4恆定域或其變體或經修飾衍生物。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體。在另一實施例中，IgG4恆定域係至少包括使用脯胺酸殘基取代位置228 (EU編號)或位置108之絲胺酸(如本文所示)之變體。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係至少在C-末端缺乏離胺酸之變體。在另一實施例中，抗體或抗原結合片段包括含有人類抗體之特徵性框架之可變域序列。本發明另外提供結合至凝血因子XI (FXI)上之表位且包括胺基酸序列YATRQFPSLEHRNICL (SEQ ID NO:82)及胺基酸序列HTQTGTPTRITKL (SEQ ID NO:83)之抗體或抗原結合片段，條件係抗體或抗原結合片段不包括鼠類或大鼠胺基酸序列。在特定實施例中，藉由氫氘交換質譜測定至表位之結合。在另一實施例中，抗體或抗原結合片段不包括非人類胺基酸序列。在另一實施例中，抗體包括(i)人類IgG1恆定域或其變體或經修飾衍生物或(ii)人類IgG4恆定域或其變體或經修飾衍生物。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係包括至少1、2、3或4個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體。在另一實施例中，IgG4恆定域係至少包括使用脯胺酸殘基取代位置228 (EU編號)或位置108之絲胺酸(如本文所示)之變體。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係至少在C-末端缺乏離胺酸之變體。在另一實施例中，抗體或抗原結合片段包括含有人類抗體之特徵性框架之可變域序列。本發明另外提供結合至凝血因子XI (FXI)上之表位且包括胺基酸序列YATRQFPSLEHRNICL (SEQ ID NO:82)及胺基酸序列HTQTGTPTRITKL (SEQ ID NO:83)之人類抗體或抗原結合片段，條件係該抗體包括(i)人類IgG1恆定域或其變體或經修飾衍生物或(ii)人類IgG4恆定域或其變體或經修飾衍生物。在特定實施例中，藉由氫氘交換質譜測定至表位之結合。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體。在另一實施例中，IgG4恆定域係至少包括使用脯胺酸殘基取代位置228 (EU編號)或位置108之絲胺酸(如本文所示)之變體。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係至少在C-末端缺乏離胺酸之變體。在另一實施例中，抗體或抗原結合片段包括含有人類抗體之特徵性框架之可變域序列。本發明另外提供編碼任一上文所提及之抗體或抗原結合片段之輕鏈可變域或重鏈可變域之經分離核酸分子。本發明另外提供結合至凝血因子XI (FXI)上之表位且包括胺基酸序列YATRQFPSLEHRNICL (SEQ ID NO:82)及胺基酸序列HTQTGTPTRITKL (SEQ ID NO:83)之人類化抗體或抗原結合片段，條件係該抗體包括(i)人類IgG1恆定域或其變體或經修飾衍生物或(ii)人類IgG4恆定域或其變體或經修飾衍生物。在特定實施例中，藉由氫氘交換質譜測定至表位之結合。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體。在另一實施例中，IgG4恆定域係至少包括使用脯胺酸殘基取代位置228 (EU編號)或位置108之絲胺酸(如本文所示)之變體。在另一實施例中，IgG1或IgG4恆定域係至少在C-末端缺乏離胺酸之變體。在另一實施例中，抗體或抗原結合片段包括含有人類抗體之特徵性框架之可變域序列。本發明另外提供編碼任一上文所提及之抗體或抗原結合片段之輕鏈可變域或重鏈可變域之經分離核酸分子。本發明另外提供一種組合物，其包括上文所提及之抗體或抗原結合片段中之任一抗體或抗原結合片段及醫藥上可接受之載劑或稀釋劑。本發明另外提供治療個體之血栓栓塞性病症或疾病之方法，其包括向個體投與有效量之上文所提及之抗體或抗原結合片段中之任一抗體或抗原結合片段。本發明另外提供治療個體之血栓栓塞性病症或疾病之方法，其包括向有需要之個體投與有效量之上文所提及之抗體或抗原結合片段中之任一抗體或抗原結合片段。本發明另外提供上文所提及之抗體或抗原結合片段中之任一抗體之用途，其用以製造用於治療血栓栓塞性病症或疾病之藥劑。本發明另外提供上文所提及之抗體或抗原結合片段中之任一抗體，其用於治療血栓栓塞性病症或疾病。本發明另外提供產生包括以下之抗體或抗原結合片段之方法：(i)具有恆定域及可變域之重鏈，其中可變域包括具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:3或4中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；及(ii)具有恆定域及可變域之輕鏈，其中可變域包括具有SEQ ID NO:5中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:6中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之LC-CDR 3，該方法包括提供包括編碼重鏈之核酸分子及編碼輕鏈之核酸分子之宿主細胞；及在足以產生抗體或抗原結合片段之條件及時間下培養宿主細胞。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之重鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括IgG4同型之重鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:16、17、18或19中所示胺基酸序列之重鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，輕鏈包括人類κ輕鏈或人類λ輕鏈。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之輕鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，宿主細胞係中國倉鼠卵巢細胞或人類胚胎腎293細胞。在本發明之其他態樣或實施例中，宿主細胞係酵母或絲狀真菌細胞。本發明另外提供產生包括以下之抗體或抗原結合片段之方法：(i)具有恆定域及可變域之重鏈，其中可變域包括具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:3或4中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；及(ii)具有恆定域及可變域之輕鏈，其中可變域包括具有SEQ ID NO:5中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:6中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之LC-CDR 3，該方法包括提供包括編碼重鏈之核酸分子及編碼輕鏈之核酸分子之宿主細胞；及在足以產生抗體或抗原結合片段之條件及時間下培養宿主細胞。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之重鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括IgG4同型之重鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:16、17、18或19中所示胺基酸序列之重鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，輕鏈包括人類κ輕鏈或人類λ輕鏈。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之輕鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，宿主細胞係中國倉鼠卵巢細胞或人類胚胎腎293細胞。在本發明之其他態樣或實施例中，宿主細胞係酵母或絲狀真菌細胞。一種產生包括以下部分之抗體或抗原結合片段之方法：(i)重鏈可變域，其包括具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:3或4中所示胺基酸序列之HC-CDR 3或具有SEQ ID NO:8中所示胺基酸序列之HC-CDR 1、具有SEQ ID NO:9中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:10中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；及(ii)輕鏈可變域，其包括具有SEQ ID NO:5中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:6中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO: 7中所示胺基酸序列之LC-CDR 3或具有SEQ ID NO:11中所示胺基酸序列之LC-CDR 1、具有SEQ ID NO:12中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:13中所示胺基酸序列之LC-CDR 3，該方法包括：提供包括編碼重鏈之核酸分子及編碼輕鏈之核酸分子之宿主細胞；及在足以產生抗體或抗原結合片段之條件及時間下培養宿主細胞。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之重鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括IgG4同型之重鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:16、17、18或19中所示胺基酸序列之重鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，輕鏈包括人類κ輕鏈或人類λ輕鏈。在本發明之其他態樣或實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之輕鏈恆定域。在本發明之其他態樣或實施例中，宿主細胞係中國倉鼠卵巢細胞或人類胚胎腎293細胞。在本發明之其他態樣或實施例中，宿主細胞係酵母或絲狀真菌細胞。本發明另外提供一種組合物，其包括上文所提及之任一抗體及醫藥上可接受之載劑。在特定實施例中，組合物包括含有具有C-末端離胺酸之重鏈之抗體及含有缺乏C-末端離胺酸之重鏈之抗體的混合物。在特定實施例中，組合物包括本文所揭示之抗體，其中主要抗體形式包括具有C-末端離胺酸之重鏈。在特定實施例中，組合物包括本文所揭示之抗體，其中主要抗體形式包括缺乏C-末端離胺酸之重鏈。在特定實施例中，組合物包括本文所揭示之抗體，其中組合物中約100%之抗體包括缺乏C-末端離胺酸之重鏈。定義如本文中所使用，「抗體」係指完整免疫球蛋白(包含重組產生形式)且包含任一形式之展現期望生物活性之抗體。因此，其以最廣泛含義使用且特定而言涵蓋但不限於單株抗體(包含全長單株抗體)、多株抗體、多特異性抗體(例如雙特異性抗體)、人類化全長人類抗體、雙互補位抗體及嵌合抗體。「親代抗體」係在改良抗體用於預期用途(例如人類化抗體用作人類治療抗體)之前藉由將免疫系統保留於抗原獲得之抗體。在一實施例中，「抗體」係指包括藉由二硫鍵互連之至少兩個重(H)鏈及兩個輕(L)鏈之醣蛋白或其抗原結合部分。每一重鏈包括重鏈可變區(在本文中縮寫為V_H )及重鏈恆定區。在某些天然IgG、IgD及IgA抗體中，重鏈恆定區包括三個域CH1、CH2及CH3。在某些天然抗體中，每一輕鏈包括輕鏈可變區(在本文中縮寫為V_L )及輕鏈恆定區。輕鏈恆定區包括一個域CL。可將V_H 及V_L 區進一步細分成超變區(稱為互補決定區(CDR))及更保守之區域(稱為框架區(FR))，二者間雜排列。每一V_H 及V_L 由三個CDR及四個FR構成，其自胺基-末端至羧基-末端按下列順序佈置：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重鏈及輕鏈之可變區含有與抗原相互作用之結合域。抗體之恆定區可調介免疫球蛋白與宿主組織或因子(包含免疫系統之各種細胞(例如效應細胞)及經典補體系統之第一組分(C1q))之結合。一般而言，基本抗體結構單元包括四聚體。每一四聚體包含兩對相同多肽鏈，每一對具有一條「輕」鏈(約25 kDa)及一條「重」鏈(約50-70 kDa)。每一鏈之胺基末端部分包含主要負責抗原識別之約100個至110個或更多胺基酸之可變區。重鏈之羧基末端部分可定義主要負責效應物功能之恆定區。通常，人類輕鏈分類為κ及λ輕鏈。另外，人類重鏈通常分類為μ、δ、γ、α或ε，且將抗體之同型分別定義為IgM、IgD、IgG、IgA及IgE。在輕鏈及重鏈內，可變區及恆定區由約12或更多個胺基酸之「J」區接合，其中該重鏈亦包含約10或更多個胺基酸之「D」區。通常參見Fundamental Immunology Ch. 7 (Paul, W.編輯，第2版，Raven Press, N.Y. (1989)。抗體之重鏈可或可不含有末端離胺酸(K)或末端甘胺酸及離胺酸(GK)。因此，在特定實施例中，本文中包括在本文中展示為缺乏末端離胺酸但止於甘胺酸殘基之重鏈恆定區胺基酸序列之抗體進一步包含亦缺乏末端甘胺酸殘基之實施例。此乃因末端離胺酸及有時甘胺酸及離胺酸一起在抗體表現期間裂解。如本文中所使用，「抗原結合片段」係指抗體之片段，亦即保留特異性結合至由全長抗體結合之抗原之能力之抗體片段，例如保留一或多個CDR區之片段。抗體結合片段之實例包含(但不限於) Fab、Fab'、F(ab')₂ 及Fv片段；雙價抗體；單鏈抗體分子(例如sc-Fv)；奈米抗體及自抗體片段形成之多特異性抗體。如本文中所使用，「Fab片段」包括一條輕鏈及一條重鏈之C_H 1及可變區。Fab分子之重鏈可不與另一重鏈分子形成二硫鍵。「Fab片段」可為抗體之木瓜蛋白酶裂解之產物。如本文中所使用，「Fab'片段」含有一條輕鏈及一條重鏈中含有V_H 域及C_H 1域亦及C_H 1域與C_H 2域之間之區域之部分或片段，從而可在兩個Fab'片段之兩條重鏈之間形成鏈間二硫鍵以形成F(ab')₂ 分子。如本文中所使用，「F(ab')₂ 片段」含有兩條輕鏈及兩條含有V_H 域及C_H 1域與C_H 2域之間之恆定區之一部分的重鏈，從而在兩條重鏈之間形成鏈間二硫鍵。F(ab')₂ 片段由此由兩個藉由兩條重鏈之間之二硫鍵結合在一起之Fab'片段構成。「F(ab')₂ 片段」可為抗體之胃蛋白酶裂解之產物。如本文中所使用，「Fv區」包括來自重鏈及輕鏈之可變區，但缺乏恆定區。該等及其他潛在構築體闡述於Chan及Carter (2010) Nat. Rev. Immunol. 10:301中。該等抗體片段之使用熟習此項技術者已知之習用技術來獲得，且該等片段經篩選以與完整抗體相同之方式使用。抗原結合部分可藉由重組DNA技術或藉由酶促或化學裂解完整免疫球蛋白來產生。如本文中所使用，「Fc」區含有兩個包括抗體之C_H 1及C_H 2域之重鏈片段。兩個重鏈片段藉由兩個或更多個二硫鍵且藉由C_H 3域之疏水性相互作用結合在一起。如本文中所使用，「雙價抗體」係指具有兩個抗原結合位點之小抗體片段，該等片段包括在同一多肽鏈(V_H - V_L 或V_L - V_H )中與輕鏈可變域(V_L )連結之重鏈可變域(V_H )。藉由使用過短而不容許同一鏈上之兩個域之間配對之連接體，迫使該等域與另一鏈之互補域配對並產生兩個抗原結合位點。雙價抗體更全面闡述於(例如) EP 404,097；WO 93/11161；及Holliger等人(1993)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448中。關於經改造抗體變體之綜述，通常參見Holliger及Hudson (2005)Nat. Biotechnol . 23:1126-1136。如本文中所使用，「雙特異性抗體」係具有兩個不同重鏈/輕鏈對及由此兩個不同結合位點之人工雜合抗體。舉例而言，雙特異性抗體可包括第一重鏈/輕鏈對(其包括至少包括抗體αFXI-13654p、αFXI-13716p或αFXI-13716之6個CDR之第一抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之實施例的一條重鏈及一條輕鏈)以及第二重鏈/輕鏈對(其包括對除FXI外之所關注抗原具有特異性之第二抗體之一條重鏈及一條輕鏈)。雙特異性抗體可藉由多種方法(包含雜交瘤融合或連接Fab'片段)來產生。例如參見Songsivilai等人(1990) Clin. Exp. Immunol. 79: 315-321；Kostelny等人(1992) J Immunol.148:1547- 1553。另外，雙特異性抗體可形成為「雙價抗體」 (Holliger等人(1993) PNAS USA 90:6444-6448)或形成為「鉀努星(Janusins)」 (Traunecker等人(1991) EMBO J. 10:3655-3659及Traunecker等人(1992) Int. J. Cancer增刊7:51-52)。如本文中所使用，「經分離」抗體或其抗原結合片段至少部分地不含來自產生其之細胞或細胞培養液之其他生物分子。該等生物分子包含核酸、蛋白質、脂質、碳水化合物或其他材料(例如細胞碎屑及生長培養基)。經分離抗體或抗原結合片段可另外至少部分地不含表現系統組分(例如來自宿主細胞之生物分子)或其生長培養基。通常，術語「經分離」意欲係指完全不存在該等生物分子或不存在水、緩衝劑或鹽或不存在包含抗體或片段之醫藥調配物之組分。如本文中所使用，「單株抗體」係指一群實質上均質之抗體，亦即包括該群體之抗體分子之胺基酸序列相同，可以少量存在之可能天然突變除外。與之相比，習用(多株)抗體製劑通常包含眾多在其可變域中具有不同胺基酸序列之不同抗體，該等域通常特異於不同表位。修飾詞「單株」指示抗體之特徵在於自實質上同質之抗體群體獲得，且不應解釋為需要藉由任一特定方法來產生該抗體。舉例而言，擬根據本發明使用之單株抗體可藉由首次由Kohler等人(1975)Nature 256: 495闡述之雜交瘤方法來製備，或可藉由重組DNA方法來製備(例如參見美國專利第4,816,567號)。「單株抗體」亦可使用以下中所闡述之技術自噬菌體抗體庫分離：例如，Clackson等人(1991)Nature 352: 624-628及Marks等人(1991)J. Mol. Biol . 222: 581-597。亦參見 Presta (2005)J. Allergy Clin. Immunol . 116:731。如本文中所使用，「嵌合抗體」係具有來自第一抗體之可變域及來自第二抗體之恆定域之抗體，其中(i)第一及第二抗體係來自不同物種(美國專利第4,816,567號；及Morrison等人(1984)Proc. Natl. Acad .Sci. USA 81: 6851-6855)，或(ii)第一及第二抗體係來自不同同型，例如來自IgG1抗體之可變域及來自IgG4抗體(例如αFXI-13465p-IgG4 (S228P))之恆定域。在一態樣中，可變域係自人類抗體(「親代抗體」)獲得，且恆定域序列係自非人類抗體(例如小鼠、大鼠、狗、猴、大猩猩、馬)獲得。在另一態樣中，可變域係自非人類抗體(「親代抗體」) (例如小鼠、大鼠、狗、猴、大猩猩、馬)獲得，且恆定域序列係自人類抗體獲得。在另一態樣中，可變域係自人類IgG1抗體(「親代抗體」)獲得，且恆定域序列係自人類IgG4抗體獲得。如本文中所使用，「人類化抗體」係指含有來自人類及非人類(例如鼠類、大鼠)抗體之序列之抗體形式。一般而言，人類化抗體將包括全部的至少一個且通常兩個可變域，其中超變環對應於非人類免疫球蛋白之超變環，且全部或實質上全部框架(FR)區為人類免疫球蛋白序列之FR區。人類化抗體可視情況包括人類免疫球蛋白恆定區(Fc)之至少一部分。如本文中所使用，「完全人類抗體」係指包括人類免疫球蛋白胺基酸序列或其變體序列之抗體，該等變體序列包括重組引入之突變以提供與缺乏該等突變之抗體相比具有改良之功能或效能之完全人類抗體。完全人類抗體不包括非人類免疫球蛋白胺基酸序列，例如恆定域及可變域，包含含有除上述突變生成之序列以外之人類序列之CDR。完全人類抗體可包含獲自完全人類抗體庫(其中以電腦模擬生成該庫之多樣性)之抗體或免疫球蛋白之胺基酸序列(參見例如美國專利第8,877,688號或第8,691,730號)。完全人類抗體包含在非人類生物體中產生之抗體，舉例而言，若完全人類抗體係在小鼠、小鼠細胞或衍生自小鼠細胞之雜交瘤中產生，則其可含有鼠類碳水化合物鏈。類似地，「小鼠或鼠類抗體」係指僅包括小鼠或鼠類免疫球蛋白序列之抗體。或者，若完全人類抗體係在大鼠、大鼠細胞或衍生自大鼠細胞之雜交瘤中產生，則其可含有大鼠碳水化合物鏈。類似地，「大鼠抗體」係指僅包括大鼠免疫球蛋白序列之抗體。如本文中所使用，關於抗體或免疫球蛋白之「非人類胺基酸序列」係指非人類哺乳動物胺基酸序列之特徵之胺基酸序列。該術語不包含獲自完全人類抗體庫(其中以電腦模擬生成該庫之多樣性)之抗體或免疫球蛋白之胺基酸序列(參見例如美國專利第8,877,688號或第8,691,730號)。如本文中所使用，「效應物功能」係指可歸因於抗體之Fc區之生物學活性，其可隨抗體同型而變化。抗體效應物功能之實例包含：Clq結合及補體依賴性細胞毒性(CDC)；Fc受體結合；抗體依賴性細胞介導之細胞毒性(ADCC)；吞噬作用；細胞表面受體(例如B細胞受體)之下調；及B細胞活化。每一輕鏈/重鏈對之可變區形成抗體結合位點。因此，一般而言，完整抗體具有兩個結合位點。除在雙功能或雙特異性抗體中外，兩個結合位點通常相同。通常，重鏈及輕鏈二者之可變域包括三個超變區，亦稱為互補決定區(CDR)，其位於相對保守之框架區(FR)內。CDR通常係藉由框架區對準，從而能夠結合至特異性表位。一般而言，自N-末端至C-末端，輕鏈及重鏈可變域二者皆包含FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3及FR4。胺基酸與每一域之比對通常係根據如下之定義：Sequences of Proteins of Immunological Interest , Kabat等人；National Institutes of Health, Bethesda, Md.；第5版；NIH出版號91-3242 (1991)；Kabat (1978) Adv. Prot. Chem. 32:1-75；Kabat等人(1977) J. Biol. Chem. 252:6609-6616；Chothia等人(1987) J Mol. Biol. 196:901-917或Chothia等人(1989) Nature 342:878-883。如本文中所使用，「超變區」係指負責抗原結合之抗體胺基酸殘基。超變區包括「互補決定區」或「CDR」之胺基酸殘基(亦即輕鏈可變域中之CDRL1、CDRL2及CDRL3及重鏈可變域中之CDRH1、CDRH2及CDRH3)。參見Kabat等人(1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest，第5版，Public Health Service,國立衛生研究院(National Institutes of Health), Bethesda, Md. (藉由序列定義抗體之CDR區)；亦參見Chothia及Lesk (1987)J. Mol. Biol . 196: 901-917 (藉由結構定義抗體之CDR區)。如本文中所使用，「框架」或「FR」殘基係指彼等不同於本文定義為CDR殘基之超變區殘基之可變域殘基。如本文中所使用，「保守修飾變體」或「保守取代」係指胺基酸經具有類似特性(例如電荷、側鏈大小、疏水性/親水性、主鏈構象及剛性等)之其他胺基酸取代，從而通常可進行變化而不改變蛋白質之生物活性。熟習此項技術者應認識到，一般而言，在多肽之非必需區中之單一胺基酸取代不會實質上改變生物活性(例如參見Watson等人(1987)Molecular Biology of the Gene , The Benjamin/Cummings Pub. Co.，第224頁(第4版))。另外，結構或功能類似之胺基酸之取代較不可能破壞生物活性。實例性保守取代陳述於下表中。

如本文中所使用，術語「表位」或「抗原決定簇」係指抗原(例如FXI)上免疫球蛋白或抗體特異性結合之位點。蛋白質抗原內之表位可自連續胺基酸(通常為線性表位)或藉由蛋白質之三級摺疊並置之非連續胺基酸二者形成(通常為構象表位)。在暴露於變性溶劑時，通常但不始終保留自連續胺基酸形成之表位，而在使用變性溶劑處理時通常丟失由三級摺疊形成之表位。在獨特空間構型中，表位通常包含至少3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15個胺基酸。確定由給定抗體結合表位之方法(亦即表位定位)為業內所熟知，且包含(例如)免疫印跡及免疫沈澱分析，其中測試重疊或連續肽(例如來自FXI)與給定抗體(例如抗FXI抗體)之反應性。確定表位之空間構象之方法包含業內之技術及本文所闡述者，例如x射線結晶學、2維核磁共振及HDX-MS (例如參見Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology，第66卷，G. E. Morris編輯(1996))。術語「表位定位」係指鑒定抗原上參與抗體-抗原識別之分子決定簇之方法。關於兩種或更多種抗體之術語「結合至相同表位」意指該等抗體結合至胺基酸殘基之同一區段，如藉由給定方法所確定。用於確定抗體是否結合至與本文所闡述抗體「相同之FXI上表位」之技術包含(例如)表位定位方法，例如抗原:抗體複合物晶體之x射線分析(其提供表位之原子解析度)及氫/氘交換質譜法(HDX-MS)。其他方法監測抗體與抗原片段(例如蛋白水解片段)或抗原之突變變化形式之結合，其中由於抗原序列內胺基酸殘基之修飾所致之結合損失通常視為可指示表位組分(例如丙胺酸掃描誘變--Cunningham及Wells (1985) Science 244:1081)。另外，亦可使用表位定位之計算組合方法。該等方法取決於所關注抗體自組合噬菌體顯示肽庫親和分離特異性短肽之能力。「與另一抗體競爭結合至靶(例如FXI)」之抗體係指抑制(部分或完全)另一抗體與靶結合之抗體。可使用已知競爭實驗確定兩個抗體是否彼此競爭結合至靶，亦即一個抗體是否抑制另一抗體與靶結合及其抑制程度。在某些實施例中，抗體與另一抗體競爭，且將其至靶之結合抑制至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%。端視抗體係「阻斷抗體」 (亦即，首先與靶一起培育之冷抗體)而定，抑制或競爭之程度可不同。競爭分析可如以下中所述來實施：例如，Ed Harlow及David Lane, Cold Spring Harb Protoc；2006；doi:10.1101/pdb.prot4277，或「Using Antibodies」之第11章，Ed Harlow及David Lane, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., USA 1999。競爭抗體結合至相同表位、重疊表位或毗鄰表位(例如，如由立體阻礙所證明)。其他競爭性結合分析包含：固相直接或間接放射免疫分析(RIA)、固相直接或間接酶免疫分析(EIA)、夾心式競爭分析(參見Stahli等人，Methods in Enzymology 9:242 (1983))；固相直接生物素-抗生物素蛋白EIA (參見Kirkland等人，J. Immunol. 137:3614 (1986))；固相直接標記之分析、固相直接標記之夾心式分析(參見Harlow及Lane，Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press (1988))；使用I-125標記之固相之間標記RIA (參見Morel等人，Mol. Immunol.25(1):7 (1988))；固相直接生物素-抗生物素蛋白EIA (Cheung等人，Virology176:546 (1990))；及直接標記之RIA. (Moldenhauer等人，Scand. J. Immunol. 32:77 (1990))。如本文中所使用，「特異性結合」係指(針對抗原或分子，例如FXI)抗體或其他配體完全或部分地優先與FXI締合且不締合至其他分子、尤其發現於人類血液或血清中之分子。抗體通常以高親和力(由10^-7 M至10^-11 M或更小之解離常數(K_D )反映)特異性結合至其同源抗原。通常將大於約10^-6 M之任何K_D 視為指示非特異性結合。如本文中所使用，「特異性結合」至抗原之抗體係指以高親和力(此意味著K_D 為10^-7 M或更小、在特定實施例中K_D 為10^-8 M或更小、或5 × 10^-9 M或更小或介於10^-8 M與10^-11 M之間或更小)結合至抗原及實質上一致抗原、但不以高親和力結合至無關抗原之抗體。可藉由表面電漿共振測定結合動力學，如中本文之實例1中所闡述。若抗原展現與給定抗原之高度胺基酸序列一致性，例如若其展現與給定抗原之胺基酸序列至少80%、至少90%、至少95%、至少97%或至少99%或更大之胺基酸序列一致性，則該抗原與給定抗原「實質上一致」。舉例而言，特異性結合至人類FXI之抗體亦可與來自某些非人類靈長類動物物種(例如食蟹猴)之FXI交叉反應，但不可與來自其他物種之FXI或與除FXI外之抗原交叉反應。如本文中所使用，「經分離核酸分子」意指基因體、mRNA、cDNA或合成起源或其某一組合起源之DNA或RNA，其不與在自然中在其中發現經分離多核苷酸之多核苷酸之全部或一部分締和，或連接至在自然中不與其相連接之多核苷酸。出於本發明目的，應理解，「包括特定核苷酸序列之核酸分子」不涵蓋完整染色體。「包括」指定核酸序列之經分離核酸分子除指定序列外亦可包含高達10種或甚至高達20種或更多種其他蛋白質或其部分或片段之編碼序列，或可包含控制所列舉核酸序列之編碼區之表現之可操作地連接之調控序列，及/或可包含載體序列。如本文中所使用，「治療(treat或treating)」意指在內部或外部向患有一或多種疾病症狀或懷疑患有疾病之個體或患者投與治療劑(例如含有本發明之任一抗體或其抗原結合片段之組合物)。該藥劑對個體或患者具有治療活性或預防活性。通常，以有效緩解所治療個體或群體中之一或多種疾病症狀(不論藉由誘導該(等)症狀消退或將該(等)症狀之進展抑制任一臨床上可量測程度)之量投與藥劑。有效緩解任一特定疾病症狀之治療劑之量可根據諸如以下等因素而有所變化：患者之疾病狀態、年齡及體重及藥物誘發個體中之期望反應之能力。不論疾病症狀是否已緩解，其可藉由通常由醫師或其他熟練健康保健提供者所使用之任一臨床量測來進行評價以評價該症狀之嚴重程度或進展狀態。該術語進一步包含延緩與病症有關之症狀之發生及/或減小該病症之症狀之嚴重程度。該術語進一步包含改善現有不受控或不期望症狀，預防其他症狀，及改善或預防該等症狀之潛在病因。因此，該術語表示，有益結果已賦予患有病症、疾病或症狀或可能發生此一病症、疾病或症狀之人類或動物個體。如本文中所使用，在應用於人類或獸醫學個體時，「治療」係指治療性治療以及診斷應用。在應用於人類或獸醫學個體時，「治療」涵蓋使本發明之抗體或抗原結合片段與人類或動物個體接觸。如本文中所使用，「治療有效量」係指特定物質足以在所治療個體中達成期望效應之量。舉例而言，此可為抑制FXI活化所需之量或抑制凝血至少192至288小時所需之量，如在aPTT分析中所測定。在投與個體時，通常使用達成已展示達成期望活體外效應之靶組織濃度之劑量。如本文中所使用，「血栓形成」係指在血管內部形成或存在血塊(亦稱為「血栓」)，從而阻塞血液在循環系統中之流動。血栓形成通常係由血液組成、血管壁品質及/或血流性質之異常所引起。血塊形成通常係由血管壁損傷(例如來自創傷或感染)及由血流減緩或停止通過損傷點所引起。在一些情形下，凝血異常會引起血栓形成。如本文中所使用，「不損害止血」意指在向個體或患者投與本文所揭示之抗體或抗體片段後在個體或患者中觀察到較少或沒有可檢測出血。在靶向因子XI之情形下，抑制因子XI至因子XIa之轉化或因子Xia之因子IX活化會抑制凝血及相關血栓形成且不出血。與之相比，抑制因子XI轉化或活性會抑制凝血，但亦誘導出血或增加出血風險。

相關申請案交叉參考本申請案主張於2016年6月14日提出申請之美國臨時申請案第62/349,888號之權益，該申請案之全部內容以引用方式併入本文中。本發明提供結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域之抗凝血因子XI抗體。該等抗FXI抗體係因子XIIa活化FXI之抑制劑且可用於抑制凝血及相關血栓形成而不損害止血(抗血栓適應症)。舉例而言，抗FXI抗體可用於治療及預防靜脈血栓栓塞(VTE)、心房顫動中之中風預防(SPAF)或治療及預防某些醫學器件相關血栓栓塞性病症(例如支架、血管內支架移植物、導管(心臟或靜脈)、連續流心室輔助器件(CF-LVADS)、血液透析、心肺搭橋術及體外膜式氧合(ECMO)、心室輔助器件(VADS))。因此，本文所揭示之抗FXI抗體可用於治療需要療法之患者或個體之血栓栓塞性病症或疾病之療法中。 FXI係具有圖 1B 中所示域結構及凝血級聯之內因性路徑之組成組分之同源二聚體絲胺酸蛋白酶。FXI酶原可由因子XIIa裂解成其活化形式FXIa。FXIa然後活化因子IX且最終觸發凝血酶生成及血塊形成。本文所揭示之抗FXI抗體抑制FXI至FXIa之轉化(參見圖 1A )。自顯示於經改造酵母菌株之表面處之完全人類合成IgG1/κ庫來獲得抗FXI抗體分子。使用FXI或FXIa篩選庫以鑑別能夠以對人類及非人類靈長類動物(NHP) FXI之亞毫微莫耳親和力結合至人類FXI，且不結合至人類及NHP血漿激肽釋放酶(對FXI顯示56%胺基酸一致性之蛋白質)或其他人類凝血級聯蛋白(FII//IIa、FVII/VIIa、FIX/IXa、FX/Xa及FXII/XIIa)之抗體。鑑別出具有該等性質之兩種抗體：αFXI-18611p及αFXI-18623p。該等抗體係包括人類卡帕(κ)輕鏈及人類IgG1 (γ1)同型重鏈之完全人類抗體。抗體選擇性結合至包括位於FXI之apple 3域中之SEQ ID NO:82及83之FXI酶原的表位。該等抗體亦以與FXI酶原相當之親和力結合FXIa。 αFXI-18611p家族之抗體包括分別具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2及SEQ ID NO:3中所示胺基酸序列之重鏈(HC)互補決定區(CDR) 1、2及3及分別具有SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6及SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之輕鏈(LC) CDR 1、2及3。αFXI-18611p家族包含含有包括SEQ ID NO:21或22中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及包括SEQ ID NO:25中之胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域之抗體。 αFXI-18611家族之抗體包括分別具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2及SEQ ID NO:4中所示胺基酸序列之重鏈(HC)互補決定區(CDR) 1、2及3及分別具有SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6及SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之輕鏈(LC) CDR 1、2及3。αFXI-18611家族包含含有包括SEQ ID NO:23或24中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及包括SEQ ID NO:25中之胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域之抗體。 αFXI-18623p家族抗體包括分別具有SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9及SEQ ID NO:10中所示胺基酸序列之HC CDR 1、2及3及分別具有SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12及SEQ ID NO:13中所示胺基酸序列之LC CDR 1、2及3。αFXI-13716p家族包含含有包括SEQ ID NO:28或29中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及包括SEQ ID NO:30中之胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域之抗體。此家族抗體係自不同於先前家族之種系所獲得。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例及使用該等抗體治療抗血栓適應症(例如SPAF)的方法。在特定態樣中，抗FXI抗體至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之HC可變域或HC可變域包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體。在特定態樣中，抗FXI抗體至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之LC可變域或LC可變域包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體。在特定態樣中，抗FXI抗體至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之HC可變域或HC可變域包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體；及αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623家族之抗FXI抗體之LC可變域或LC可變域包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體。在特定實施例中，本文之抗體至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例，且進一步包括人類IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之重鏈(HC)且輕鏈(LC)可為κ類型或λ類型。在其他實施例中，抗體至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例，且另外可為IgM、IgD、IgA或IgE種類。在特定實施例中，人類IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型可包含1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。在特定實施例中，抗體可至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例，且進一步包括IgG4同型之HC恆定域。IgG4框架提供具有較少或並無效應物功能之抗體。在本發明之另一態樣中，抗體可至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例，且進一步包括融合至IgG1同型之HC可變域之IgG4同型之HC恆定域。在本發明之另一態樣中，抗體可至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之HC可變域及LC可變域或HC及LC可變域獨立地包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，且進一步包括IgG4同型之HC恆定域。在本發明之另一態樣中，抗體可至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之HC可變域及LC或HC及LC獨立地包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其變體，且進一步包括IgG4同型之HC恆定域。本發明抗體進一步包含(但不限於)單株抗體(包含全長單株抗體)、多株抗體、多特異性抗體(例如雙特異性抗體)、雙互補位抗體、完全人類抗體及嵌合抗體。一般而言，抗體(例如IgG1或IgG4)之重鏈之胺基酸序列在重鏈恆定域之C-末端具有離胺酸。在一些情況下，為改良抗體產物之均質性，可產生缺乏C-末端離胺酸之抗體。本發明之抗FXI抗體包含存在之C-末端離胺酸之實施例及不存在C-末端離胺酸之實施例。舉例而言，IgG1 HC恆定域可具有SEQ ID NO:18或19中所示之胺基酸序列且IgG4 HC恆定域可SEQ ID NO:16或17中所示之胺基酸序列。在特定實施例中，HC之N-末端胺基酸可為麩醯胺酸殘基。在特定實施例中，HC之N-末端胺基酸可為麩胺酸殘基。在特定態樣中，將N-末端胺基酸修飾成麩胺酸殘基。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI抗原結合片段或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI Fab片段或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例；及包括Fc區之其抗原結合片段及其使用方法。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI Fab'片段或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI F(ab’)₂ 或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI Fv片段或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI scFv片段或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之三個HC CDR或三個LC CDR之抗FXI域抗體或HC或LC CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例。在本發明之一實施例中，域抗體係單一域抗體或奈米抗體。在本發明之一實施例中，域抗體係至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族CDR之奈米抗體或一或多個CDR一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之實施例。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI雙價抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例。本發明另外提供對FXI及另一所關注抗原具有結合特異性之雙特異性抗體及抗原結合片段及其使用方法。雙互補位抗體係對相同抗原上之不同表位具有結合特異性之抗體。本發明另外提供具有第一抗體(其至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR，或一或多個CDR具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例)之第一重鏈/輕鏈對及第二抗體(其對不同於由第一重鏈/輕鏈對識別之表位之FXI表位具有特異性)之第二重鏈/輕鏈對之雙互補位抗體。本發明另外提供抗FXI抗體及其抗原結合片段，其包括：至少包括αFXI-18611p或αFX-18611家族抗體之6個CDR之抗體或一或多個CDR具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例的第一重鏈/輕鏈對；及至少包括抗體αFXI-18623p家族之6個CDR之抗體或一或多個CDR具有一個、兩個或三個胺基取代、添加、缺失或其組合之其實施例的第二重鏈/輕鏈對。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI二價抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例。至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗體或一或多個CDR具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例可以某一方式進行修飾，從而在以莫耳計表示活性時，其保留至少10%之其FXI結合活性(與親代抗體相比，亦即各別αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗體)。較佳地，與親代抗體相比，本發明之抗體或抗原結合片段保留至少20%、50%、70%、80%、90%、95%或100%或更高之FXI結合親和力。亦預計，本發明之抗體或抗原結合片段可包含不實質上改變其生物活性之保守或非保守胺基酸取代(稱為抗體之「保守變體」或「功能保守變體」)。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之經分離抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例；及其抗原結合片段及其使用方法以及其經分離多肽免疫球蛋白鏈及編碼該等多肽之經分離多核苷酸及包含該等多核苷酸之經分離載體。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之單株抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例及其抗原結合片段以及包括複數個經分離單株抗體的單株組合物。本發明另外提供至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI嵌合抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例。本發明包含至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI完全人類抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例及其抗原結合片段及其使用方法。在本發明之一實施例中，完全人類抗FXI抗體或其抗原結合片段係來自轉基因動物(例如小鼠(例如HUMAB小鼠，例如參見美國專利第5,545,806號、第5,569,825號、第5,625,126號、第5,633,425號、第5,661,016號、第5,770,429號、第5,789,650號、第5,814,318號、第5,874,299號及第5,877,397號；及Harding等人(1995) Ann.NY Acad. Sci. 764:536 546；或XENOMOUSE，例如參見Green等人，1999, J. Immunol. Methods 231:11-23))之分離產物，其已經基因修飾以具有完全人類免疫球蛋白基因；或來自表現抗FXI完全人類抗體或其抗原結合片段之免疫球蛋白鏈之噬菌體或病毒之分離產物。在一些實施例中，不同恆定域可附加至衍生自本文所提供CDR之V_L 及V_H 區。舉例而言，若本發明抗體(或片段)之特定預期應用需要改變之效應物功能，則可使用除人類IgG1外之重鏈恆定域，或可利用雜合IgG1/IgG4。儘管人類IgG1抗體提供長半衰期及效應物功能(例如補體活化及抗體依賴性細胞毒性)，但該等活性可能並非所有抗體應用所期望。在該等情況下，舉例而言，可使用人類IgG4恆定域。本發明包含包括IgG4恆定域之抗FXI抗體及其抗原結合片段(例如拮抗劑人類抗FXI抗體及片段)及其使用方法。在一實施例中，IgG4恆定域可在對應於EU系統中之位置228及KABAT系統中之位置241之位置不同於自然人類IgG4恆定域(Swiss-Prot登錄號P01861.1)，其中HC恆定域之位置108之自然絲胺酸(Ser108)經脯胺酸(Pro)代替，從而防止位置106之半胱胺酸(Cys106)及位置109之半胱胺酸(Cys109) (其對應於EU系統中之位置Cys226及Cys229及KABAT系統中之位置Cys239及Cys242)之間可干擾適當鏈內二硫鍵形成之潛在鏈間二硫鍵。參見Angal等人，Mol. Imunol. 30:105 (1993)；亦參見(Schuurman等人，Mol. Immunol. 38: 1-8, (2001)；SEQ ID NO:14及41)。在其他情況下，可使用經修飾以減小效應物功能之經修飾IgG1恆定域，舉例而言，IgG1同型可包含位置233-236之IgG2殘基及位置327、330及331之IgG4殘基之取代以大大減小ADCC及CDC (Armour等人，Eur J Immunol. 29(8):2613-24 (1999)；Shields等人，J Biol Chem. 276(9):6591-604(2001))。在另一實施例中，IgG HC經基因修飾以在當前位置297缺乏天門冬醯胺(Asn)殘基之N-醣基化。用於N-醣基化之共有序列係Asn-Xaa-Ser/Thr (其中Xaa係除Pro外之任一胺基酸)；在IgG1中，N-醣基化共有序列係Asn-Ser-Thr。可藉由使用用於另一胺基酸(例如Gln)之密碼子代替用於編碼HC之核酸分子中位置297之Asn之密碼子來達成修飾。或者，可使用用於Pro之密碼子代替用於Ser之密碼子，或可使用除用於Ser之密碼子外之任一密碼子代替用於Thr之密碼子。該等經修飾IgG1分子具有較小或並無可檢測效應物功能。或者，修飾所有三個密碼子。在本發明之一實施例中，至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之6個CDR之抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例包括具有兩條輕鏈及兩條重鏈(包含恆定區)的全四聚體結構。每一輕鏈/重鏈對之可變區形成抗體結合位點。因此，一般而言，完整抗體具有兩個結合位點。除在雙特異性抗體中外，兩個結合位點通常相同。在具體實施例中，本發明提供表1 中所示之抗FXI抗體。

如實例3中所闡述藉由氫-氘交換質譜(HDX-MS)實施之表位定位展示，包括上文所提及之HC及LC CDR之抗FXI抗體結合至包括SEQ ID NO:82及SEQ ID NO:83之apple 3域上的特定表位。因此，本文所揭示之抗體結合至FXI之apple 3域且抑制FXIIa活化FXI，且亦表現為FXIa之FIX活化之別位、競爭性抑制劑。表位定位結果表明，αFXI-18623p家族在Apple 3上之「足跡」與FXIa中之結合FIX之外位點重疊。醫藥組合物及投與 為製備抗FXI抗體或其結合片段之醫藥或無菌組合物，將抗體或其抗原結合片段與醫藥上可接受之載劑或賦形劑混合。例如參見Remington's Pharmaceutical Sciences 及U.S. Pharmacopeia: National Formulary , Mack Publishing Company, Easton, PA (1984)且由U.S. Pharmacopeial Convention (USP) 12601 Twinbrook Parkway, Rockville, MD 20852-1790, USA連續更新於網際網路上。可藉由與可接受之載劑、賦形劑或穩定劑混合成(例如)凍乾粉末、漿液、水溶液或懸浮液之形式來製備治療劑及診斷劑之調配物(例如參見Hardman等人(2001)Goodman and Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics , McGraw-Hill, New York, NY；Gennaro (2000)Remington: The Science and Practice of Pharmacy , Lippincott, Williams及Wilkins, New York, NY；Avis等人(編輯) (1993)Pharmaceutical Dosage Forms: Parenteral Medications , Marcel Dekker, NY；Lieberman等人(編輯) (1990)Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets , Marcel Dekker, NY；Lieberman等人(編輯) (1990)Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems , Marcel Dekker, NY；Weiner及Kotkoskie (2000)Excipient Toxicity and Safety , Marcel Dekker, Inc., New York, NY)。在另一實施例中，根據Physicians' Desk Reference 2017 (Thomson Healthcare；第75版(2002年11月1日))將包括本文所揭示之抗體或抗體片段組合物投與個體。投與模式可有所變化。適宜投與途徑較佳係非經腸或皮下投與，其他投與途徑可包含口服、經黏膜、真皮內、直接心室內、靜脈內、鼻內、吸入、吹入或動脈內投與。在特定實施例中，可藉由侵襲性途徑(例如藉由注射)投與抗FXI抗體或其抗原結合片段。在本發明之其他實施例中，可經靜脈內、經皮下、經動脈內或藉由吸入、氣溶膠遞送來投與抗FXI抗體或其抗原結合片段或其醫藥組合物。藉由非侵襲性途徑(例如經口；例如以丸劑、膠囊或錠劑形式)投與亦在本發明範圍內。可使用業內已知之醫學器件投與組合物。舉例而言，可藉由使用皮下針(例如包含預填充注射器或自動注射器)之注射來投與本發明醫藥組合物。亦可使用無針皮下注射器件來投與本文所揭示之醫藥組合物；例如美國專利第6,620,135號、第6,096,002號、第5,399,163號、第5,383,851號、第5,312,335號、第5,064,413號、第4,941,880號、第4,790,824號或第4,596,556號中所揭示之器件。亦可藉由輸注投與本文所揭示之醫藥組合物。投與醫藥組合物之熟知植入物及模組形式之實例包含：美國專利第4,487,603號，其揭示用於以受控速率分配藥劑之可植入微輸注幫浦；美國專利第4,447,233號，其揭示用於以精確輸注速率遞送藥劑之藥劑輸注幫浦；美國專利第4,447,224號，其揭示用於連續藥物遞送之可變流量可植入輸注裝置；美國專利第4,439,196號，其揭示具有多室腔室之滲透藥物遞送系統。許多其他該等植入物、遞送系統及模組為熟習此項技術者熟知。投與方案取決於若干因素，包含治療抗體之血清或組織轉換率、症狀之程度、治療抗體之免疫原性及生物基質中靶細胞之易接近性。較佳地，投與方案遞送足夠治療抗體以改良靶疾病狀態，同時最小化不期望副效應。因此，所遞送生物製劑之量部分地取決於特定治療抗體及所治療病狀之嚴重程度。可利用選擇治療抗體之適當劑量之導則(例如參見Wawrzynczak (1996)Antibody Therapy , Bios Scientific Pub. Ltd,，Oxfordshire, UK；Kresina (編輯) (1991)Monoclonal Antibodies, Cytokines and Arthritis , Marcel Dekker, New York, NY；Bach (編輯) (1993)Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases , Marcel Dekker, New York, NY；Baert等人(2003)New Engl. J. Med. 348:601-608；Milgrom等人，(1999)New Engl. J. Med. 341:1966-1973；Slamon等人(2001)New Engl. J. Med. 344:783-792；Beniaminovitz等人(2000)New Engl. J. Med. 342:613-619；Ghosh等人(2003)New Engl. J. Med. 348:24-32；Lipsky等人(2000)New Engl. J. Med. 343:1594-1602)。對劑量方案進行調節以提供最佳期望反應(例如治療反應)。舉例而言，可投與單次濃注，可隨時間投與若干個分次劑量或可根據治療狀況之緊急程度所指示按比例減少或增加劑量。尤其有利的是，將非經腸組合物調配成劑量單位形式以便於投與及劑量均勻性。如本文所用之劑量單位形式係指適於作為單位劑量供擬治療個體使用之物理離散單位；各單位含有預定量之活性化合物，此預定量經計算與所需醫藥載劑一起產生期望治療效應。本文所闡述劑量單位形式之規格取決於且直接依賴於下列因素：(a)抗體或抗體結合片段之獨特特性及擬達成之特定治療效應，及(b)複合此活性分子以治療個體敏感性之技術中的固有限制條件。(例如參見Yang等人(2003)New Engl. J. Med. 349:427-434；Herold等人(2002)New Engl. J. Med. 346:1692-1698；Liu等人(1999)J. Neurol. Neurosurg. Psych. 67:451-456；Portielji等人(20003)Cancer Immunol. Immunother. 52:133-144)。套組另外提供包括一或多種組分(包含(但不限於)如本文所論述之抗FXI抗體或抗原結合片段)以及一或多種其他組分(包含(但不限於)如本文所論述之另一治療劑)之套組。抗體或片段及/或治療劑可調配為純組合物或與醫藥上可接受之載劑組合於醫藥組合物中。在一實施例中，套組在一個容器(例如在無菌玻璃或塑膠小瓶中)包含抗FXI抗體或其抗原結合片段或其醫藥組合物且在另一容器(例如在無菌玻璃或塑膠小瓶中)包含另一治療劑。在另一實施例中，套組在單一常用容器中包括本發明組合，該組合包含抗FXI抗體或其抗原結合片段或其醫藥組合物與一或多種視情況一起調配成醫藥組合物之治療劑之組合。若套組包含用於非經腸投與個體之醫藥組合物，則套組可包含用於實施該投與之器件。舉例而言，套組可包含一或多個如上文所論述之皮下針或其他注射器件。因此，本發明包含含有注射器件及抗FXI抗體或其抗原結合片段之套組，舉例而言，其中注射器件包含抗體或片段或其中抗體或片段位於單獨器皿中。套組可包含含有關於套組中之醫藥組合物及劑型之資訊之包裝插頁。通常，該資訊有助於患者及醫師有效且安全地使用包封之醫藥組合物及劑型。舉例而言，可在插頁中提供關於本發明組合之下列資訊：藥物動力學、藥效動力學、臨床研究、效能參數、適應症及用途、禁忌症、警告、預防措施、不良反應、超劑量、適當劑量及投與、供應方式、適當儲存條件、參考文獻、製造商/經銷商資訊及專利資訊。製備抗體及其抗原結合片段之方法 亦可以重組產生本文所揭示之抗FXI抗體及其片段。在此實施例中，編碼抗體分子之核酸可插入載體(質體或病毒)中且轉染或轉變宿主細胞，其可表現於宿主細胞中且自宿主細胞分泌。業內已知幾種用以產生重組抗體之方法。可用作用於表現本文所揭示抗體或片段之宿主之哺乳動物細胞系在業內已眾所周知且包含許多可得自美國菌種保存中心(American Type Culture Collection，ATCC)之永生化細胞系。該等細胞系尤其包含中國倉鼠卵巢(CHO)細胞、NSO、SP2細胞、HeLa細胞、幼小倉鼠腎(BHK)細胞、猴腎細胞(COS)、人類肝細胞癌細胞(例如Hep G2)、A549細胞、3T3細胞、人類胚胎腎293 (HEK-293)細胞及許多其他細胞系。經由測定具有高表現程度之細胞系來選擇特佳細胞系。可使用之其他細胞系係昆蟲細胞系(例如Sf9細胞)、兩棲動物細胞、細菌細胞、植物細胞、絲狀真菌細胞(例如裡氏木黴(Trichoderma reesei ))及酵母細胞(例如釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae )或畢赤酵母(Pichia pastoris ))。在特定態樣中，宿主細胞可為原核生物宿主細胞，例如大腸桿菌(E. coli )。在將包括編碼重鏈或其抗原結合部分或片段、輕鏈及/或其抗原結合片段之核酸分子之重組表現載體引入宿主細胞中時，藉由在足以容許抗體在宿主細胞中表現或更佳地抗體分泌至生長宿主細胞之培養基中之條件及時間段下培養宿主細胞來產生抗體。可自培養基回收抗體且進一步純化或處理以產生本發明抗體。在特定態樣中，使用包括編碼以下之核酸分子之表現載體來轉染宿主細胞：包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之至少HC及LC CDRs之HC及LC或其6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合及/或HC及/或LC可變區框架包括0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之實施例。在特定態樣中，使用第一表現載體及第二表現載體轉染宿主細胞，該第一表現載體包括編碼至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合及/或HC及/或LC可變區框架包括0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例之HC CDR之HC的核酸分子，該第二表現載體包括編碼至少包括αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合及/或HC及/或LC可變區框架包括0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例之LC CDR的LC的核酸分子。在特定實施例中，HC及LC表現為融合蛋白，其中HC及LC之N-末端融合至前導序列以促進抗體在分泌路徑中之傳輸。可使用之前導序列之實例包含MSVPTQVLGLLLLWLTDARC (SEQ ID NO:14)或MEWSWVFLFFLSVTTGVHS (SEQ ID NO:15)。可藉由具有SEQ ID NO:34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78或80中所示核苷酸序列之核酸分子來編碼本文之實例性抗體之HC。可藉由具有SEQ ID NO:27或32中所示核苷酸序列之核酸分子來編碼本文之實例性抗體之LC。本發明另外提供包括具有SEQ ID NO: 34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78或80之胺基酸序列之核酸分子之質體或病毒載體。本發明另外提供包括以下核酸分子之質體或病毒載體：編碼αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合及/或HC及/或LC可變區框架包括0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例之HC的核酸分子；及編碼αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合及/或HC及/或LC可變區框架包括0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例之LC的核酸分子。本發明另外提供包括編碼αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之核酸分子之HC的質體或病毒載體；及包括編碼αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體之核酸分子之LC的質體或病毒載體。本發明另外提供包括一或多種包括以下核酸分子之質體或病毒載體之宿主細胞：編碼αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合及/或HC及/或LC可變區框架包括0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例之HC的核酸分子；及編碼αFXI-18611p家族、αFXI-18611家族或αFXI-18623p家族之抗FXI抗體或6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合及/或HC及/或LC可變區框架包括0、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之其實施例之LC的核酸分子。在特定實施例中，宿主細胞係CHO或HEK-293宿主細胞。可使用標準蛋白質純化方法自培養基回收抗體。另外，可使用諸多已知技術來增強本發明抗體(或來自其之其他部分)自產生細胞系之表現。舉例而言，麩醯胺酸合成酶基因表現系統(GS系統)係用於增強某些條件下之表現之常用方式。一般而言，特定細胞系或轉基因動物中所產生之醣蛋白具有用於該細胞系或轉基因動物中所產生醣蛋白之特徵性醣基化模式(例如參見Croset等人，J. Biotechnol. 161: 336-348 (2012)。因此，抗體之特定醣基化模式將取決於用於產生抗體之特定細胞系或轉基因動物。然而，獨立於抗體可具有之醣基化模式，由本文所提供之核酸分子編碼或包括本文所提供之胺基酸序列之所有抗體皆構成本發明。下列實例意欲促進本發明之進一步理解。一般方法 分子生物中之標準方法闡述於以下文獻中：Sambrook、Fritsch及Maniatis (1982及1989年第2版，2001年第3版) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY；Sambrook及Russell (2001) Molecular Cloning, 第3版, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY；Wu (1993) RecombinantDNA, 第217卷, Academic Press, San Diego, CA)。標準方法亦出現於以下文獻中：Ausbel等人(2001) Current Protocols in Molecular Biology，第1-4卷, ohn Wiley and Sons, Inc., New York, NY，其闡述在細菌細胞中之選殖及DNA誘變(第1卷)、哺乳動物細胞及酵母中之選殖(第2卷)、糖偶聯物及蛋白質表現(第3卷)及生物資訊學(第4卷)。闡述包含免疫沈澱、層析、電泳、離心及結晶之蛋白質純化之方法(Coligan等人(2000)當Current Protocols in Protein Science，第1卷, John Wiley and Sons, Inc., New York)。闡述化學分析、化學修飾、轉譯後修飾、融合蛋白之產生、蛋白質之醣基化(例如參見，Coligan等人(2000) Current Protocols in Protein Science，第2卷，John Wiley and Sons, Inc., New York；Ausubel等人(2001) Current Protocols in Molecular Biology，第3卷，John Wiley and Sons, Inc., NY, NY，第16.0.5-16.22.17頁；Sigma-Aldrich, Co. (2001) Products for Life Science Research, St. Louis, MO；第45-89頁；Amersham Pharmacia Biotech (2001) BioDirectory, Piscataway, N.J., 第384-391頁)。闡述多株及單株抗體之產生、純化及分級分離(Coligan等人(2001) Current Protcols in Immunology，第1卷，John Wiley and Sons, Inc., New York；Harlow及Lane (1999) Using Antibodies, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY；Harlow及Lane，見上文)。可獲得表徵配體/受體相互作用之標準技術(例如參見Coligan等人(2001) Current Protocols in Immunology，第4卷，John Wiley, Inc., New York)。可製備單株、多株及人類化抗體(例如參見，Sheperd及Dean (編輯) (2000)Monoclonal Antibodies, Oxford Univ. Press, New York, NY；Kontermann及Dubel (編輯) (2001) Antibody Engineering, Springer-Verlag, New York；Harlow及Lane (1988) Antibodies A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY，第139-243頁；Carpenter等人(2000) J. Immunol. 165:6205；He等人(1998) J. Immunol. 160:1029；Tang等人(1999) J. Biol. Chem. 274:27371-27378；Baca等人(1997) J. Biol. Chem. 272:10678-10684；Chothia等人(1989) Nature 342:877-883；Foote及Winter (1992) J. Mol. Biol. 224:487-499；美國專利第6,329,511號)。人類化之替代方式係使用在噬菌體上顯示之人類抗體庫或轉基因小鼠中之人類抗體庫(Vaughan等人(1996) Nature Biotechnol.14:309-314；Barbas (1995) Nature Medicine 1:837-839；Mendez等人(1997) Nature Genetics 15:146-156；Hoogenboom及Chames (2000) Immunol. Today 21:371-377；Barbas等人(2001) Phage Display: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York；Kay等人(1996) Phage Display of Peptides and Proteins: A Laboratory Manual, Academic Press, San Diego, CA；de Bruin等人(1999) Nature Biotechnol. 17:397-399)。抗體可偶聯至(例如)小藥物分子、酶、脂質體、聚乙二醇(PEG)。抗體可用於治療、診斷、套組或其他目的，且包含偶合至(例如)染料、放射性同位素、酶或金屬(例如膠質金)之抗體(例如參見Le Doussal等人(1991) J. Immunol. 146:169-175；Gibellini等人(1998) J. Immunol. 160:3891-3898；Hsing及Bishop (1999) J. Immunol. 162:2804-2811；Everts等人(2002) J. Immunol. 168:883-889)。可獲得用於流式細胞術之方法，包含螢光活化細胞分選(FACS) (例如參見Owens等人(1994) Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ；Givan (2001) Flow Cytometry, 第2版；Wiley-Liss, Hoboken, NJ；Shapiro (2003) Practical Flow Cytometry, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ)。可獲得用作(例如)診斷性試劑之適於修飾核酸(包含核酸引物及探針)、多肽及抗體之螢光試劑(Molecular Probes (2003) Catalogue, Molecular Probes, Inc., Eugene, OR；Sigma-Aldrich (2003) Catalogue, St. Louis, MO)。闡述免疫系統之組織學之標準方法(例如參見Muller-Harmelink (編輯) (1986) 人類Thymus: Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York, NY；Hiatt等人(2000) Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams及Wilkins, Phila, PA；Louis等人(2002) Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, New York, NY)。可獲得用於測定(例如)抗原片段、前導序列、蛋白質摺疊、功能域、醣基化位點及序列比對之軟體包裝及資料庫(例如參見GenBank, Vector NTI® Suite (Informax, Inc, Bethesda, MD)；GCG Wisconsin包裝(Accelrys, Inc., San Diego, CA)；DeCypher® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, Nevada)；Menne等人(2000) Bioinformatics 16: 741-742；Menne等人(2000) Bioinformatics Applications Note 16:741-742；Wren等人(2002) Comput. Methods Programs Biomed. 68:177-181；von Heijne (1983) Eur. J. Biochem. 133:17-21；von Heijne (1986) Nucleic Acids Res.14:4683-4690)。可自Haematologic Technologies, Inc. Essex Junction, VT獲得人類FXI及FIX酶原；可自Enzyme Research實驗室，South Bend, IN獲得高分子量(HMW)激肽原；且可自Pacific Hemostasis, ThermoFisher, Waltham, MA獲得鞣花酸。實例1 在此實例中，使用下列分析量測抗FXI抗體αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1) (L105)/LCκ及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ及人類FXI酶原或非人類靈長類動物(NHP) FXI酶原之結合動力學。人類 FXI/FXIa 結合動力學分析方案 使用ProteOn XPR36 (Bio-Rad，基於SPR(表面電漿共振)之光學生物感測器)基本上如下所述來測定抗FXI抗體與人類FXI酶原或FXIa之間之蛋白質-蛋白質相互作用的結合動力學及親和力。在所有垂直及水平流動通道中使用0.5%十二烷基硫酸鈉、50mM氫氧化鈉及100mM鹽酸以30 µL/sec流速將GLC低密度感測器晶片洗滌60秒。隨後使用1× EDC/sNHS以30 µL/sec流速活化所有6個垂直流動通道(L1-L6)之海藻酸鹽晶片表面150 sec。然後在所有6個垂直流動通道中以25 uL/sec流速注射鼠類Fc導向抗人類IgG多株抗體(捕獲抗體，在10mM pH 5.0乙酸鈉中稀釋至1.25 µg/mL) 300 sec以藉由胺偶合至內源性離胺酸來使大約300個反應單元(RU)之捕獲抗體結合至每一流動通道之活化晶片表面。然後，將1M乙醇胺HCl注射至所有6個垂直流動通道中以中和剩餘反應性表面胺。然後將抗FXI抗體以5 µg/mL濃度(於10mM pH 5.0乙酸鈉中)在25 µL/min下經60秒分別注射至經捕獲抗體塗覆之不同垂直流動通道(L2、L3、L4、L5或L6)中以達成大約80個RU之飽和捕獲濃度；向垂直流動通道L1注射10 mM pH 5.0乙酸鈉(單獨之緩衝液)作為參考對照。在捕獲抗FXI抗體之後，將運行緩衝液(1× HBS-N、5mM CaCl₂ 、0.005% P20，pH 7.4)注射至所有水平流動通道(A1-A6)中5分鐘且容許在25 µL/min下解離20分鐘以自晶片表面去除任何非特異性結合之抗FXI抗體。為量測人類FXI或FXa至所捕獲抗FXI抗體之締合速率(k_a )，隨後將人類FXI或FXIa之6點滴定液(於運行緩衝液中之0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0 nM稀釋液)平行注射至所有6個垂直流動通道中8分鐘；然後使所結合酶原在25 µL/min下於運行緩衝液中解離60分鐘以量測解離速率(k_d )。使用儀器專用軟體(Bio-Rad)測定結合動力學及親和力(K_D )且展示於表 2 中。非人類靈長類動物 FXI 酶原 /FXIa 結合動力學分析方案 使用ProteOn XPR36 (Bio-Rad，基於SPR(表面電漿共振)之光學生物感測器)來測定抗FXI抗體與非人類靈長類動物(NHP：食蟹猴及恒河猴)FXI酶原或FXIa之間之蛋白質-蛋白質相互作用的結合動力學及親和力。在所有垂直及水平流動通道中使用0.5%十二烷基硫酸鈉、50mM氫氧化鈉及100mM鹽酸以30 µL/sec流速將GLC低密度感測器晶片洗滌60秒。隨後使用1× EDC/sNHS在30 µL/秒流速下活化所有6個垂直流動通道(L1-L6)之海藻酸鹽晶片表面150秒。然後將鼠類Fc導向抗人類IgG多株抗體(捕獲抗體，在10 mM pH 5.0乙酸鈉中稀釋至30 µg/mL)以25 µL/sec流速注射至所有6個垂直流動通道中150秒以藉由胺偶合至內源性離胺酸達成大約4500個反應單元(RU)之捕獲抗體至每一流動通道之活化晶片表面之飽和結合。然後將1M乙醇胺HCl注射至所有6個垂直流動通道中以中和任何剩餘反應性表面胺。然後將抗FXI抗體以0.415 µg/mL濃度(於運行緩衝液(1× HBS-N、5mM CaCl₂ 、0.005% P20，pH 7.4)中)在25 µL/min下經60 sec分別注射至經捕獲抗體塗覆之不同垂直流動通道(L2、L3、L4、L5或L6)以達成大約40 RU之捕獲濃度；向垂直流動通道L1注射單獨之運行緩衝液作為參考對照。在捕獲抗FXI抗體之後，將運行緩衝液注射至所有水平流動通道(A1-A6)中5分鐘且容許在25 µL/分鐘下解離20分鐘以自晶片表面去除非特異性結合之抗FXI抗體。為量測NHP FXI至所捕獲抗FXI抗體之締合速率(k_a )，隨後將NHP FXI或FXIa之6點滴定液(於運行緩衝液中之0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0 nM稀釋液)平行注射至所有6個垂直流動通道中8分鐘；然後使所結合FXI酶原或FXIa在25 µL/min下於運行緩衝液中解離60分鐘以量測解離速率(k_d )。使用儀器專用軟體(Bio-Rad)測定結合動力學及親和力(K_D )。結果展示於表 2 中。

實例2在高分子量 (HMW) 激肽原及鞣花酸存在下抗 FXI 抗體對 FXIIa 之 FXI 至 FXIa 活化之效應 為量測抗FXI抗體αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1) (L105)/LCκ及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ對FXI酶原活化之效應，可使用量測三肽螢光團(GPR-AFC)之FXIa調介之蛋白水解之偶合酶促分析來測定抗體是否本身抑制FXI活化。對於該等實驗而言，將抗FXI抗體FXI酶原一起預培育1小時。藉由在HMW激肽原及鞣花酸存在下添加FXIIa來誘導FXI至FXIa之活化。隨後量測FXIa對三肽螢光團受質之催化活性且量測為酶原活化之讀數。亦在不存在HMW激肽原下運行偶合分析以作為對照。將抗FXI抗體之11點劑量滴定液(始於1 µM濃度，3倍稀釋系列)與人類FXI (Haematologic Technologies, Inc.,目錄編號HCXI-0150，最終濃度為30 nM)及HMW激肽原(Enzyme Research Laboratories，目錄編號HK，最終濃度為280 nM)在25℃下於Corning 3575非結合表面微量板中之50 mM HEPES、150 mM NaCl、5 mM CaCl₂ 、0.1% PEG-8000 (pH 7.4)中一起預培育兩小時。然後藉由添加含有鞣花酸之Pacific Hemostasis APTT-XL試劑(ThermoFisher Scientific，目錄編號100403，100 µM儲備液濃度，最終濃度為2 µM)及新稀釋凝血因子XIIa (Enzyme Research實驗室，目錄編號HFXIIa，最終濃度為50 pM)來引發活化反應。使反應在25℃下進行1小時，此時藉由添加1 µM玉米胰蛋白酶抑制劑(Haematologic Technologies, Inc.，目錄編號CTI-01)來終止反應。藉由Z-GPR-AFC受質(Sigma，目錄編號C0980-10MG，最終濃度為150 µM)之裂解速率且藉由使用Tecan Infinite M200讀板儀在400/505 nm下連續監測螢光10分鐘來檢測新活化FXIa酶促活性。自RFU/min數據再計算每一數據點之抑制%且使用log(抑制劑)對反應4參數方程式利用GraphPad Prism軟體進行分析。結果展示於表 3 中。在不存在 HMW 激肽原及鞣花酸下藉由 FXIIa 將 FXI 活化至 FXIa 將本發明抗FXI抗體之11點劑量滴定液(始於1 µM濃度，3倍稀釋系列)與人類FXI (Haematologic Technologies, Inc.,目錄編號HCXI-0150，最終濃度為30 nM)在25℃下於Corning 3575非結合表面微量板中之50 mM HEPES、150 mM NaCl、5 mM CaCl₂ 、0.1% PEG-8000 (pH 7.4)中一起預培育兩小時。然後藉由添加新稀釋凝血因子XIIa (Enzyme Research Laboratories，目錄編號HFXIIa，最終濃度為15 nM)來引發活化反應。使反應在25℃下進行1小時，此時藉由添加1 µM玉米胰蛋白酶抑制劑(Haematologic Technologies, Inc.，目錄編號CTI-01)來終止反應。藉由Z-GPR-AFC受質(Sigma，目錄編號C0980-10MG，最終濃度為150 µM)之裂解速率且藉由使用Tecan Infinite M200讀板儀在400/505 nm下連續監測螢光10分鐘來檢測新活化FXIa酶促活性。自RFU/min數據再計算每一數據點之抑制%且使用log(抑制劑)對反應4參數方程式利用GraphPad Prism軟體進行分析。結果展示於表 3 中。

總而言之，該等機制研究證實，該等抗FXI抗體藉由防止FXIIa活化FXI及藉由抑制對自然受質之FXIa催化活性而在功能上中和FXI。實例3藉由氫氘交換質譜進行之抗 FXI 抗體之表位定位 藉由使用氫氘交換質譜(HDX-MS)分析來測定αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1) (L105)/LCκ及αFXI-18623p-IgG4 (S228P) (Q1)/LCκ與人類FXI之接觸區域。HDX-MS量測氘在蛋白質之醯胺主鏈中之納入且此納入之變化受氫之溶劑暴露影響。比較單獨抗原試樣及抗體結合試樣中之氘交換程度以鑑別可與抗體接觸之抗原區域。人類因子XI具有SEQ ID NO:81中所示之胺基酸序列。在培育於氘緩衝液中之前，將二聚體因子XI與抗體一起預培育。藉由質譜量測因子XI中之氘納入。自抗體氘化保護之人類因子XI區係表位-A DIFPNTVF (因子XI之殘基185 - 192；SEQ ID NO:82)及表位-B PSTRIKKSKALSG (因子XI之殘基247 - 259；SEQ ID NO:83)。圖 3A 及 3B 展示分別由抗體αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1) (L105)/LCκ及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ結合之FXI胺基酸殘基之氘標記差示熱圖。該等胺基酸序列位於因子XI之Apple 3域上(圖 2 )。在Apple 1、2、4或催化域中觀察到並無顯著氘化變化，從而指示其不涉及αFXI-18623結合。因此，由 αFXI-18623p-IgG4 (S228P) /κ識別之表位包括表位A及表位B。實例4 FIX係FXIa (FXI酶原之活性蛋白酶)之內源性蛋白質受質。FXIa將FIX活化成FIXa，從而維持凝血級聯。FXIa調介之FIX活化之抑制係FXI mAb之一種潛在作用機制(MOA)。為探詢此MOA，研發使用全長FIX酶原之FXIa酶促分析。對小三肽受質之 FXIa 蛋白酶活性 將抗FXI抗體與人類FXIa (Sekisui Diagnostics, Exton, PA，目錄編號4011A，最終濃度為100 pM)在25℃下於Corning 3575非結合表面微量板中之50 mM HEPES、150 mM NaCl、5 mM CaCl₂ 、0.1% PEG-8000 (pH 7.4)中一起預培育2小時。藉由量測Z-GPR-AFC受質(Sigma，目錄編號C0980-10MG，最終濃度為100 µM)之裂解速率且藉由使用Tecan Infinite M200讀板儀在400/505 nm下連續監測螢光10分鐘來量測FXIa酶促活性。抗體之11點劑量滴定之最終濃度以3倍稀釋系列始於1 µM。自RFU/分鐘數據再計算每一數據點之抑制%且使用log(抑制劑)對反應4參數方程式利用GraphPad Prism軟體進行分析。結果展示於表 4 中。藉由 FXIa 將 FIX 活化成 FIXa FIX係FXIa (FXI酶原之活性蛋白酶)之內源性蛋白質受質。FXIa將FIX活化成FIXa，從而維持凝血級聯。FXIa調介之FIX活化之抑制係FXI mAb之一種潛在MOA。為探詢此MOA，研發使用全長FIX之FXIa酶促分析。將抗FXI抗體之11點劑量滴定液(始於1 µM濃度，3倍稀釋系列)與人類FXIa (Sekisui Diagnostics，目錄編號4011A，最終濃度為100 pM)在25℃下於Corning 3575非結合表面微量板中之50 mM HEPES、150 mM NaCl、5 mM CaCl₂ 、0.1% PEG-8000 (pH 7.4)中一起預培育2小時。然後藉由添加FIX (Haematologic Technologies, Inc.，目錄編號HCIX-0040-C，最終濃度為300 nM)來引發活化反應且在25℃下進行1小時，然後藉由添加指向FXI之輕鏈上之催化位點之100 nM抗FXI抗體(WO2013167669中所揭示之抗FXI抗體076D-M007-H04)來終止反應。藉由環己基-GGR-AFC受質(CPC Scientific，目錄編號839493，最終濃度為300 µM)之裂解速率且藉由使用Tecan Infinite M200讀板儀在400/505 nm下連續監測螢光10分鐘來檢測新活化FIXa酶促活性。自RFU/分鐘數據再計算每一數據點之抑制%且使用log(抑制劑)對反應4參數方程式利用GraphPad Prism軟體進行分析。結果展示於表 4 中。

如表 4 中所示，該等抗體在利用合成、三肽螢光團受質之酶促分析中不抑制FXIa催化活性，但兩種抗體皆係利用自然、全長受質之分析之強力抑制劑。此數據與用作FXIa之FIX活化之別位、競爭性抑制劑之抗體以及實例3之表位定位結果一致，從而表明抗體在Apple 3上之「足跡」與FXIa中之FIX結合外位點重疊。實例5硫酸右旋糖酐上之 FXI 至 FXIa 之自身活化 將本發明抗FXI抗體之11點劑量滴定液(始於1 µM濃度，3倍稀釋系列)與人類FXI (Haematologic Technologies, Inc.,目錄編號HCXI-0150，最終濃度為30 nM)在25℃下於Corning 3575非結合表面微量板中之50 mM HEPES、150 mM NaCl、5 mM CaCl₂ 、0.1% PEG-8000 (pH 7.4)中一起預培育2小時。然後藉由添加硫酸右旋糖酐(ACROS，目錄編號433240250，大約MW 800 kDa，最終濃度為1 nM)來引發自身活化反應。使反應在25℃下進行1小時，然後藉由Z-GPR-AFC受質(Sigma，目錄編號C0980-10MG，最終濃度為150 µM)之裂解速率且藉由使用Tecan Infinite M200讀板儀在400/505 nm下連續監測螢光10分鐘來檢測新活化FXIa酶促活性。自RFU/分鐘數據再計算每一數據點之抑制%且使用log(抑制劑)對反應4參數方程式利用GraphPad Prism軟體進行分析。結果展示於表 5 中。

實例6 使用活化部分促凝血酶原激酶時間(aPTT)分析評價抗FXI抗體阻斷活體外凝血之能力。活化部分促凝血酶原激酶時間(aPTT)係量測內因性及常用凝血路徑之活性之凝血測試。活化部分促凝血酶原激酶時間 (aPTT) 分析在檸檬酸鈉血漿中實施測試。藉由自二個性別之健康供體收集血液至檸檬酸鈉管(Sarstedt凝血，9NC/10 mL)中來獲得人類血漿。在1500 × g下離心血液且收集血漿。在每一個別供體上檢查aPTT且彙集在正常範圍內(28-40秒)者，等分且儲存於-80℃下。在商業上獲得來自其他物種之血漿(Innovative Research, Novi, MI)。藉由將抑制劑或媒劑摻加至血漿中來製備測試試樣。培育該等摻加試樣(60分鐘，室溫)，然後在凝血分析儀(STA-R Evolution, Stago Diagnostica, Parsippany, NJ)上運行。一般而言，分析儀實施下列步驟：藉由添加鞣花酸(Pacific Hemostasis, ThermoFisher Scientific, Waltham, MA)來活化FXII，且然後在再鈣化試樣之後量測凝血時間。抑制FXI將導致aPTT凝血時間有所延遲。結果展示於表 6 中。數據表示為相對於媒劑對照凝血時間之增加百分比且報告導致凝血時間增加100% (2×)或50% (1.5×)之濃度。aPTT結果展示於圖 6 、 7 、 8 、 9 及 10 中。

實例7 用於評價抗FXI單株抗體至人類及NHP凝血級聯蛋白之脫靶結合之表面電漿共振分析使用基於表面電漿共振(SPR)之分析(Biacore T200)來測定抗因子FXI mAb αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1) (L105)/LCκ及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ至其他人類及NHP凝血級聯蛋白之潛在非特異性相互作用(表 7 )。將抗FXI mAb以大約500RU捕獲於經抗人類IgG (Fc)捕獲套組(GE Healthcare)固定之CM5感測器晶片上以最小化來自血漿源蛋白質中之共純化Ig之潛在背景。使用陰性對照抗體-抗呼吸道融合病毒(RSV)單株抗體(mAb)作為參考且幫助減小血漿源蛋白質之背景結合。使用5nM FXI之分析物濃度來量測結合動力學；所有其他凝血級聯蛋白係以500 nM之分析物濃度來使用。在30 µL/min、25℃、HBS-EP+、pH 7.4下運行單一濃度注射(n=2)。

如上文所闡述來量測抗因子FXI mAb αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1) (L105)/LCκ及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ至人類、食蟹猴及恒河猴FXI及其他人類及NHP凝血級聯蛋白之結合動力學且展示於圖 11 及圖 12 中)。使用Biacore T200評估軟體將數據擬合至1:1結合模型以測定締合速率常數ka (M^-1 s^-1 ，其中「M」等於莫耳濃度且「s」等於秒)及解離速率常數kd (s^-1 )。使用該等速率常數計算平衡解離常數KD (M)。捕獲於晶片上之αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1) (L105)/LCκ及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ展示針對非FXI凝血級聯蛋白並無交叉反應性(圖 11 及圖 12 )。該等單株抗體展示至人類及食蟹猴(及恒河猴) FXI蛋白質之預期強結合程度。實例8 食蟹猴股動靜脈(AV)分流血栓形成模型在活體內於研發於Merck, Sharp & Dohme Corp. Research實驗室，Kenilworh, NJ USA及Palo Alto, CA USA之食蟹猴股動靜脈(AV)分流模型來表徵αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體之抗血栓效能。研究設計 ：該等研究使用重複設計，其中每一動物在2個連續測試時段中接受2次分流(參見圖 13 研究示意圖)。在第一及第二測試時段期間分別向猴投與不含抗體之媒劑(20mM乙酸鈉、9%蔗糖，pH 5.5)或αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體(劑量範圍為0.01至1.0 mg/kg)。在第一(媒劑)及第二(抗體)測試時段期間量測之血塊重量之間之差決定了抗血栓效能。亦即，在αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體與媒劑暴露期間之較大血塊重量降低將指示較大抗血栓效應。使用上述重複配對設計可容許在動物內對抗血栓效能進行治療前評價相對於治療後評價。AV 分流器放置程序細節 ：為執行此模型，向經麻醉食蟹猴中安裝股動脈及靜脈導管。該等導管使得能夠插入及去除AV分流器。AV分流器係由TYGON管構成，其中一條絲線穿過管開口且懸浮於其中。為放置AV分流器，關閉動脈及靜脈導管以停止血流。然後將AV分流器置於兩個導管之間。導管放置及去除之時刻指示於圖 13 中。在將分流器置於適當位置後，立即打開導管且使血液流經接觸絲線之分流電路。血液接觸絲線之作用會促進血塊形成。使AV分流器保持於適當位置40分鐘。為去除AV分流器，關閉動脈及靜脈導管以停止穿過AV分流器之血流。然後，去除分流器且切開以接近絲線及血塊。將血塊稱重。將數據報告為淨血塊重量，淨血塊重量定係義為總血塊重量減去絲線重量。自在整個實驗中收集之血樣量測凝血生物標記-活化部分促凝血酶原激酶時間(aPTT)及凝血酶原時間(PT)以及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體之循環血漿濃度，如圖 13 中所繪示。使用Sta Compact Max凝血分析儀(Stago Diagnostic, Inc)自收集自食蟹猴之解凍冷凍(-80℃)之檸檬酸化血漿量測aPTT及PT。Stago分析儀使用電磁機械血塊檢測系統量測血塊形成時間。對於aPTT分析而言，將50微升血漿與50 µL鞣花酸混合物(APTT-XL, Pacific Hemostasis；Fisher Diagnostics登錄號10-0402)在37℃下混合3分鐘。向混合物中添加將50微升0.025M氯化鈣(Sta-0.025M CaCl₂ ，Stago Diagnostic, Inc.，目錄編號00367)，且量測至血塊形成之時間。對於PT分析而言，將50微升血漿在37℃下培育4分鐘。藉由添加100 µL促凝血酶原激酶試劑(Neoplastine Cl Plus 10, Stago Diagnostic, Inc.，目錄編號00667)來開始血塊形成之時刻。如下所述來量測血漿。使用基於電化學發光之基因hIgG4免疫分析來量化食蟹猴血漿中之抗體。使用來自Bethyl之生物素化山羊抗人類IgG(H+L) (目錄編號A80-319B)作為捕獲試劑且使用來自Southern Biotech之sulfoTAG標記之小鼠抗人類IgG (Fc特異性) (目錄編號9190-01)作為檢測試劑來確立分析。定性此分析且分析之量化下限經測定為40 ng/mL，其中最小所需稀釋度為100。圖 14A-14D 匯總投與αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體對血栓形成(圖 14A 、圖 14B )、aPTT (圖 14C )及PT (圖 14D )之效應。表 8 匯總αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體對食蟹猴AV分流模型中之血塊重量之效應。表 9 匯總αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體對食蟹猴AV分流模型中之aPTT及PT之效應。

如圖 14A 、14B 及表 8 中所示，αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體顯示血塊重量之劑量-及血漿濃度依賴性降低，其中在血漿[抗體]大於1 µg/mL (約10 nM)時觀察到完整效能(血塊減小90-100%)。如圖 14C 及表 9 中所示，抗體顯示aPTT之劑量-及血漿濃度依賴性增加。2.4 µg/mL (約17 nM) αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體之血漿濃度產生93%之aPTT增加，而29 µg/mL (約200 nM) αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體(在最高測試劑量下)產生143%之aPTT增加。不同於aPTT，如圖 14D 及表 9 中所示，PT在所評估抗體濃度中改變小於10%，此與FXI抑制對內因性凝血路徑之選擇性效應一致。實例9食蟹猴模板出血時間模型。在研發於Merck, Sharp & Dohme Corp. Research實驗室，Kenilworh, NJ USA及Palo Alto, CA USA處之食蟹猴模板出血時間模型中活體內表徵抗FXI mAb αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ之出血傾向。先前已使用此模型來證實使用三元抗血小板療法在多個解剖位點處模板出血時間顯著增加(Cai等人，Eur. J. Pharmacol. 758:107-114 (2015))。為執行此模型，使用加載彈簧之柳葉刀在頰黏膜(內唇)、指墊及尾梢上於誘導出血之不同時間點下來測定模板出血時間。出血時間測試 ：在經麻醉食蟹猴中如下所述來實施出血時間測試。 ● 檢驗每一測試區域(頰黏膜、指墊或尾梢)以鑑別用於出血誘導之適宜切口位點。 ● 為誘導出血，將加載彈簧之柳葉刀抵靠所選測試位點牢固放置且啟動以產生均勻線性切口。柳葉刀規格決定切口尺寸。 ● 使來自切口位點之血液自由流動且進行監測直至出血持續停止30秒為止。此定義出血時間(BT)。記錄每一BT位點之BT。在BT測定期間，使用溫熱無菌乳酸化林格氏溶液(Ringers solution)澆蓋尾梢切口位點，且將指墊位點浸漬於溫熱無菌乳酸化林格氏溶液中。施加乳酸化林格氏溶液可改良觀看該等位點之血流之能力。研究設計 ：每一研究包括在三個測試區域之三個30分鐘模板出血時間測試(BT) (參見圖 15 研究示意圖)。第一BT測定基線出血。第二BT於不含化合物之媒劑(20mM乙酸鈉、9%蔗糖，pH 5.5)之3分鐘靜脈內輸注(4.17 ml/kg) (1號治療)之後70分鐘。第三BT發生於不含化合物之媒劑或αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ (10 mg/kg)之3分鐘靜脈內輸注(4.17 ml/kg) (2號治療)之後70分鐘。監測出血且如上文所闡述來記錄出血時間。記錄每一位點之出血停止時之時間。收集週期血樣以測定αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ抗體之循環血漿濃度、aPTT及PT。每一測試動物具有兩個研究時段。在1號研究時段中，媒劑及隨後之媒劑分別構成1號治療及2號治療。在2號研究時段中，媒劑及隨後之10 mg/kg靜脈內αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ分別構成1號治療及2號治療。測試物品輸注結束及出血時間評價開始之間之70分鐘時間段反映了用於血栓質量測定之AV分流模型中之時刻(在治療後30 min放置分流器+血流穿過分流器40 min)。10 mg/kg靜脈內測試劑量之αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ估計達成αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ基於先前所闡述PK/PD靈長類動物建模研究之預期人類Cmax之10倍。自在整個實驗中收集之血樣量測凝血生物標記-活化部分促凝血酶原激酶時間(aPTT)及凝血酶原時間(PT)以及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ之循環血漿濃度，如圖 15 中所繪示。使用Sta-R Evolution凝血分析儀(Stago Diagnostic, Inc)自收集自動物之解凍冷凍(‑80℃)之檸檬酸化血漿量測aPTT及PT。凝血分析儀使用電磁機械血塊檢測系統量測至血塊形成之時間。對於aPTT分析而言，分析儀在比色杯中混合50 µL血漿與50 µL鞣花酸(APTT-XL, Pacific Hemostasis；Fisher Diagnostics目錄編號10-0402)，然後將其在37℃下培育3分鐘。然後向混合物中添加50 µL 0.025M氯化鈣(Sta-0.025M CaCl2, Stago Diagnostic, Inc.，目錄編號00367)以引發凝血，且量測至血塊形成之時間。對於PT分析而言，將50 µL血漿在37℃下於比色杯中培育4分鐘；藉由添加100 µL溶解之促凝血酶原激酶試劑(Triniclot PT Excel, TCoag, Inc.，目錄編號T1106)來引發凝血。使用基於電化學發光之基因hIgG4免疫分析來量化恒河猴血漿中之αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ。使用來自Bethyl之生物素化山羊抗huIgG (H+L) (目錄編號A80-319B)作為捕獲試劑且使用來自Southern Biotech之sulfoTAG標記之小鼠抗huIgG (Fc特異性) (目錄編號9190-01)作為檢測試劑來確立分析。定性此分析且分析之量化下限經測定為41 ng/mL，其中最小所需稀釋度為100。圖 16A-16F 匯總媒劑及10 mg/kg靜脈內αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ投與在6隻食蟹猴中對頰黏膜(圖 16A 、16D )、指墊(圖 16B 、16E )及尾梢(圖 16C 、16F )模板出血時間之效應。藉由使用媒劑-媒劑作為1號研究時段中之1號及2號治療且使用媒劑- αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ作為2號研究時段中之1號及2號治療比較絕對出血時間(左圖)及出血時間變化百分比(右圖)來評價對出血時間之效應。媒劑與αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ絕對出血時間以及媒劑-媒劑與媒劑- αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ出血時間變化百分比之對比可檢測到，使用αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ投與在此測試劑量下於任一測試位點處之出血時間皆沒有統計學顯著變化。使用10 mg/kg靜脈內測試劑量在食蟹猴出血時間研究中達成之αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ之血漿濃度為290.7±17.2 (平均值±SEM) μg/ml (約1938.2 nM)。血漿aPTT值為31.0±0.5 sec (在基線下)與71.3±1.6 sec (在10 mg/kg靜脈內αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ後) (增加2.3倍)。血漿PT值為12.7±0.1 sec (在基線下)與12.6±0.1 sec (在10 mg/kg靜脈內αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ下) (無明顯增加)。實例10 在恒河猴中經靜脈內投與多次αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ後之藥物動力學(PK)及藥效動力學(PD)評估。在恒河猴中活體內表徵αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ之PKPD性質。該目標在於評估PK性質且在總共兩個週劑量之後確立PK/PD關係。研究設計 。向恒河猴(4隻動物/劑量組)以0.1、0.3、1、3及6 mg/kg之5個劑量濃度投與(靜脈內)無化合物媒劑(10 mM pH 5.5乙酸鈉、7%蔗糖、0.02% PS-80)或αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ。研究之持續時間為22天且收集1.5 mL血液以用於測定藥物濃度及活化部分促凝血酶原激酶時間(aPTT)。自在整個實驗中收集之血樣量測凝血生物標記(aPTT)及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LC之循環血漿濃度，如表 10 中所繪示。

使用Sta-R Evolution凝血分析儀(Stago Diagnostic, Inc)自收集自動物之解凍冷凍(-80℃)檸檬酸化血漿來量測aPTT。凝血分析儀使用電磁機械血塊檢測系統量測至血塊形成之時間。對於aPTT分析而言，分析儀在比色杯中混合50 µL血漿與50 µL鞣花酸(APTT-XL, Pacific Hemostasis；Fisher Diagnostics目錄編號10-0402)，然後將其在37℃下培育3分鐘。然後向混合物中添加50 µL 0.025M氯化鈣(Sta-0.025M CaCl2, Stago Diagnostic, Inc.，目錄編號00367)以引發凝血，且量測至血塊形成之時間。使用基於電化學發光之基因hIgG4免疫分析來量化恒河猴血漿中之αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ。使用來自Bethyl之生物素化山羊抗huIgG (H+L) (目錄編號A80-319B)作為捕獲試劑且使用來自Southern Biotech之sulfoTAG標記之小鼠抗huIgG (Fc特異性) (目錄編號9190-01)作為檢測試劑來確立分析。定性此分析且分析之量化下限經測定為41 ng/mL，其中最小所需稀釋度為100。使用非分室(NCA)方法分析αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ之個別動物血漿濃度-時間數據(Gabrielsson及Weiner, 2000)。使用Phoenix 32 WinNonlin 6.3 (6.3.0.395版，Certara L.P. St. Louis, MO, 2012)估計或計算所有PK參數。非分室分析利用模型201 (靜脈內)。所有濃度數據及PK參數皆捨入至3個有效數字。自PK分析及平均數據計算排除濃度值低於量化下限(＜ LLOQ)之試樣。出於圖形目的，將＜ LLOQ之值設定為個別動物濃度-時間圖線之最小可報告濃度之½。使用S形E_max 反應 (PK/PD)模型且使用GraphPad Prism 7.00版(GraphPad Software Inc)表徵暴露與aPTT之間之關係。在模型中，E_max 值對應於自基線達成之最大aPTT增加且EC₅₀ 值對應於半最大有效濃度。由軟體提供之EC50值之可變性報告為95%置信區間(CI )。結果。 αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ之個別濃度-時間特徵繪示於圖 17A 中。據觀察，所有PK參數皆係非線性。平均清除值自最低測試劑量(0.1 mg/kg)之約8 mL/kg·天降至最高測試劑量(6 mg/kg)之約4 mL/kg·天。aPTT濃度-時間特徵繪示於圖 17B 中。觀察到aPTT之劑量依賴性增加。由S形E_max 模型最佳闡述之αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ之血漿濃度與aPTT之間之關係可充分闡述此關係。αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ之估計EC₅₀ 值約為3.6 µg/mL。

儘管在本文中參照所闡釋實施例來闡述本發明，但應理解，本發明不限於此。熟習此項技術且獲知本文之教示內容者將認識到其範圍內之其他修飾及實施例。因此，本發明僅由本文之隨附申請專利範圍限制。

圖 1A 及圖 1B 展示凝血級聯、FXI、FXI mAb及4種新口服抗凝血劑(NOAC)。圖 1A 係繪示在FXI凝血級聯(亦即由內因性路徑及外因性路徑構成)中之卡通圖。靶向FXI之mAb可經由阻斷XIIa及/或凝血酶之FXI活化或FXIa對FIX之活性來施加功能中和。本文之抗體可對FIX之FXIa調介性活化及至少由FXIIa調介之FXI至FXIa之轉化施加雙重阻斷。展示靶向FXa或凝血酶之4種NOAC(利伐沙班、阿哌沙班、依杜沙班、達比加群)。圖 1B 展示FXI之域結構。FXI係由相同80 kDa亞單元構成之二聚體，且每一始於N-末端之亞單元由4個apple域(1、2、3及4)及催化域(CAT)組成。本文所揭示之抗體結合apple 3域。圖 2 展示因子XI及apple 3域之結構，其具有藉由所鑑別αFXI-18611及αFXI-18623p家族抗FXI抗體免於氘化之肽。展示精胺酸184殘基，其係FIX結合受體外位點中之關鍵殘基。Apple 3域中並無氘化差異之肽係淺灰色。無數據可用之肽係彩色深灰色。未展示催化域。圖 3A 及3B 展示分別由抗FXI抗體αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1) (L105)/LCκ及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ結合之FXI胺基酸殘基之氘標記差示熱圖。圖 4A 、4B 及4C 展示αFXI 18611p及αFXI 18611家族抗體之HC及LC域之胺基酸序列。重鏈及輕鏈CDR分別鑑別為HC-CDR1、HC-CDR-2、HC-CDR3、LC-CDR1、LC-CDR2及LC-CDR3。圖 5A 及5B 展示αFXI 18623p家族抗體之HC及LC域之胺基酸序列。重鏈及輕鏈CDR分別鑑別為HC-CDR1、HC-CDR-2、HC-CDR3、LC-CDR1、LC-CDR2及LC-CDR3。圖 6 展示αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1)(L105)/LCκ (A)及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ (B)在人類血漿中之活化部分促凝血酶原激酶時間(aPTT)分析之結果，其表示為相對於基線之增加%。圖 7 展示αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1)(L105)/LCκ (A)及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ (B)在食蟹猴血漿中之活化部分促凝血酶原激酶時間(aPTT)分析之結果，其表示為相對於基線之增加%。圖 8 展示αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1)(L105)/LCκ (A)及αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ (B)在恒河猴血漿中之活化部分促凝血酶原激酶時間(aPTT)分析之結果，其表示為相對於基線之增加%。圖 9 展示αFXI-18611 IgG4 HC (S228P)(E1)(L105)/LCκ在人類血漿、食蟹猴血漿及恒河猴血漿中之aPTT結果(表示為相對於基線之增加%)之對比。圖 10 展示αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ在人類血漿、食蟹猴血漿及恒河猴血漿中之aPTT結果(表示為相對於基線之增加%)之對比。圖 11 展示BIAcore感測圖，該感測圖展示αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ至人類、食蟹猴及恒河猴FXI及其他人類及NHP凝血級聯蛋白之結合動力學。圖 12 展示BIAcore感測圖，該感測圖展示αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(Q1)/LCκ至人類、食蟹猴及恒河猴FXI及其他人類及NHP凝血級聯蛋白之結合動力學。圖 13 展示食蟹猴AV分流測試範例之示意圖。向預先安裝股動脈及靜脈導管之麻醉猴以0.01-1.0 mg/kg藉由靜脈內濃注投與媒劑或αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ (抗體) (測試物品投與)。如文中所闡述插入AV分流器(插入AV分流器)。血液流經AV分流器40分鐘。血液與懸浮於管內之絲線之間之接觸使得形成血塊。如文中所闡述將血塊稱重。獲得血樣以量測抗體之循環濃度、aPTT及PT (星)。圖 14A-14D 展示αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ (抗體)在食蟹猴AV分流模型中對AV分流血塊形成、aPTT及PT之效應。圖 14A 係在同一動物中經2個連續AV分流之後所量測之血塊重量。在第一分流(1號分流)期間向動物投與媒劑，隨後如所示在第二分流(2號分流)期間投與抗體(0.01-1.0 mg/kg IV)。增加抗體劑量使得形成較小血塊。血塊重量之抑制百分比(圖 14B )及aPTT之變化百分比(圖 14C )隨血漿抗體濃度之增加而增加。與之相比，PT (圖 14D )在所有抗體濃度下保持相對不變。圖 15 展示食蟹猴模板出血時間範例之示意圖。在麻醉食蟹猴中於基線下(在治療之前)及在投與1號治療(媒劑)及2號治療(媒劑或αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ，10 mg/kg IV)之後測定頰黏膜(內唇)、指墊及尾梢上之模板出血時間。如所示，收集用以量測αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ之循環濃度、aPTT及PT之血樣。圖 16A-16F 展示αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ對在食蟹猴中量測之模板出血時間之效應。在頰黏膜(圖 16A 、16D )、指墊(圖 16B 、16E )及尾梢(圖 16C 、16F )中量測模板出血時間。藉由比較絕對出血時間(左圖)及出血時間之變化百分比(右圖)利用媒劑-媒劑作為1號研究時段中之1號治療劑及2號治療劑且利用媒劑- αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ作為2號研究時段中之1號治療劑及2號治療劑使用單尾配對司徒登氏t-測試(Students t-test)來評價對出血時間之治療效應(αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ對媒劑)。圖 17A 展示在恒河猴中投與αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ IV後之濃度-時間特徵。呈現αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ在恒河猴中之血漿濃度-時間特徵。每一劑量組中存在4隻動物。每一線代表特定組之平均值。圖 17B 展示恒河猴中之aPTT-時間特徵。呈現每一劑量組之αFXI-18623p IgG4 HC (S228P)(E1)/LCκ之aPTT-時間特徵。每一劑量組中存在4隻動物。每一符號代表個別動物在每一時間點之aPTT時間特徵。每一線代表特定組之平均值。

Claims

一種抗體或抗原結合片段，其包括： (i) αFXI-18623p家族、αFXI-18611p家族或αFXI-18611家族之抗FXI抗體之至少6個互補決定區(CDR)；或(ii) αFXI-18623p家族、αFXI-18611p家族或αFXI-18611家族之抗FXI抗體之至少6個互補決定區(CDR)，其中6個CDR中之一或多者具有一個、兩個或三個胺基酸取代、添加、缺失或其組合，其中該αFXI-18623家族之抗體包括具有SEQ ID NO:28或29中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變區及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之LC可變區；該αFXI-18611p家族之抗體包括具有SEQ ID NO:21或22中所示胺基酸序列之HC可變區及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變區；且該αFXI-18611家族之抗體包括具有SEQ ID NO:23或24中所示胺基酸序列之HC可變區及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之LC可變區。
如請求項1之抗體或抗原結合片段，其中該6個CDR包括該αFXI-18623p家族、αFXI-18611p家族或αFXI-18611家族之抗FXI抗體之HC之CDR1、CDR2及CDR3及該αFXI-18623p家族、αFXI-18611p家族或αFXI-18611家族之抗FXI抗體之LC之CDR1、CDR2及CDR3。
如請求項2之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段包括具有SEQ ID NO:28或29中所示胺基酸序列之HC可變域之CDR1、CDR2及CDR3及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之LC可變域之CDR1、CDR2及CDR3；或具有SEQ ID NO:21、22、23或24中所示胺基酸序列之HC可變域之CDR1、CDR2及CDR3及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之LC可變域之CDR1、CDR2及CDR3。
如請求項1至3中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括含有SEQ ID NO:16、17、18或19中所示胺基酸序列之HC恆定域。
如請求項1至3中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之LC恆定域。
如請求項1或3之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗體片段包括： (a) 具有SEQ ID NO: 28中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域； (b) 具有SEQ ID NO: 29中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:30中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域； (c) 具有SEQ ID NO: 21中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域； (d) 具有SEQ ID NO: 22中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域； (e) 具有SEQ ID NO: 23中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域； (f) 具有SEQ ID NO: 24中所示胺基酸序列之重鏈(HC)可變域及具有SEQ ID NO:25中所示胺基酸序列之輕鏈(LC)可變域； (g) (a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)之變體，其中該HC可變區框架包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合；或 (h) (a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)或(g)之變體，其中該LC可變區框架包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合。
如請求項6之抗體或抗原結合片段，其中該抗體進一步包括含有SEQ ID NO:16、17、18、19中所示胺基酸序列之HC恆定域。
如請求項6之抗體或抗原結合片段，其中該抗體進一步包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之LC恆定域。
如請求項1至3中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。
如請求項1或3之抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括： (a) 具有恆定域及可變域之HC，其中該可變域包括具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:3或4中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；及 (b) 具有恆定域及可變域之LC，其中該可變域包括具有SEQ ID NO:5中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:6中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之LC-CDR 3。
如請求項10之抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括含有SEQ ID NO:16、17、18或19中所示胺基酸序列之HC恆定域。
如請求項10之抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之LC恆定域。
如請求項1或3之抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括： (a) 具有恆定域及可變域之HC，其中該可變域包括具有SEQ ID NO:8中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:9中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:10中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；及 (b) 具有恆定域及可變域之LC，其中該可變域包括具有SEQ ID NO:11中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:12中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:13中所示胺基酸序列之LC-CDR 3。
如請求項13之抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括含有SEQ ID NO:16、17、18或19中所示胺基酸序列之HC恆定域。
如請求項13之抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之LC恆定域。
如請求項1或3之抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括：具有SEQ ID NO:33、35、37、39、45、47、49、51、57、59、61、63、69、71、73或75中所示胺基酸序列之HC及其包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體；及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之LC及其包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體，其中該抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。
如請求項1或3之抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括：具有SEQ ID NO:41、43、53、55、65、67、77或79中所示胺基酸序列之HC及其包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體；及具有SEQ ID NO: 31中所示胺基酸序列之LC及其包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合之變體，其中該抗體或抗原結合片段結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。
一種抗體，其包括： (a) 具有恆定域及可變域之重鏈(HC)，其中該可變域包括 (i) HC框架及具有SEQ ID NO:8中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:9中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:10中所示胺基酸序列之HC-CDR 3； (ii) HC框架及具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:3中所示胺基酸序列之HC-CDR 3； (iii) HC框架及具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:4中所示胺基酸序列之HC-CDR 3； (iv) (i)、(ii)或(iii)之變體，其中HC CDR 1、HC-CDR 2或CDR 3中之至少一者包括1、2或3個胺基酸取代、添加、缺失或其組合；或 (v) (i)、(ii)、(iii)或(iv)之變體，其中該HC框架包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合； (b) 具有恆定域及可變域之輕鏈(LC)，其中該可變域包括 (i) LC框架及具有SEQ ID NO:11中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:12中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:13中所示胺基酸序列之LC-CDR 3； (ii) LC框架及具有SEQ ID NO: 5中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:6中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之LC-CDR 3； (iii) (i)或(ii)之變體，其中LC CDR 1、LC-CDR 2或LC-CDR 3中之至少一者包括1、2或3個胺基酸取代、添加、缺失或其組合；或 (iv) (i)、(ii)或(iii)之變體，其中該LC框架包括1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸取代、添加、缺失或其組合；或 (c) 來自(a)之HC及來自(b)之LC；其中該抗體結合凝血因子XI (FXI)之apple 3域且抑制FXI活化及/或因子XIa調介之因子IX活化。
如請求項18之抗體，其中該HC恆定域包括SEQ ID NO:16、17、18或19中所示之胺基酸序列。
如請求項18或19之抗體，其中該LC恆定域包括SEQ ID NO:20中所示之胺基酸序列。
一種經分離之核酸分子，其編碼如請求項1至20之抗體或抗原結合片段中任一者之輕鏈可變域或重鏈可變域。
一種組合物，其包括如請求項1至20中任一項之抗體或抗原結合片段及醫藥上可接受之載劑或稀釋劑。
一種如請求項1至20中任一項之抗體之用途，其用以製造用於治療血栓栓塞性病症或疾病之藥劑。
如請求項1至3、18及19中任一項之抗體，其用於治療血栓栓塞性病症或疾病。
一種人類抗體或抗原結合片段，其結合至凝血因子XI (FXI)上之表位(epitope)，其中該表位包括胺基酸序列DIFPNTVF (SEQ ID NO:82)及胺基酸序列PSTRIKKSKALSG (SEQ ID NO:83)，如藉由使用氫氘交換質譜(HDX-MS)分析所測定。
如請求項25之人類抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括(i)人類IgG1恆定域或其變體或經修飾衍生物或(ii)人類IgG4恆定域或其變體或經修飾衍生物。
如請求項25之人類抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括IgG4恆定域，其包括如本文所示在位置228 (EU編號)或位置108之絲胺酸用脯胺酸殘基取代。
一種人類抗體或抗原結合片段，其交叉阻斷以下抗體之結合或與以下抗體競爭結合：包括具有SEQ ID NO: 33、35、37、39、45、47、49、51、57、59、61、63、69、71、73及75中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO: 26中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體；或包括具有SEQ ID NO: 41、43、53、55、65、67、77或79中所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO:31中所示胺基酸序列之輕鏈之抗體。
如請求項28之人類抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括(i)人類IgG1恆定域或其變體或經修飾衍生物或(ii)人類IgG4恆定域或其變體或經修飾衍生物。
如請求項28之人類抗體或抗原結合片段，其中該抗體包括IgG4恆定域，其包括如本文所示在位置228 (EU編號)或位置108之絲胺酸用脯胺酸殘基取代。
一種產生抗體或抗原結合片段之方法，該抗體或抗原結合片段包括： (i)重鏈可變域，其包括具有SEQ ID NO:1中所示胺基酸序列之重鏈-互補決定區(HC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:2中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:3或4中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；或具有SEQ ID NO:8中所示胺基酸序列之HC-CDR 1、具有SEQ ID NO:9中所示胺基酸序列之HC-CDR 2及具有SEQ ID NO:10中所示胺基酸序列之HC-CDR 3；及 (ii)輕鏈可變域，其包括具有SEQ ID NO:5中所示胺基酸序列之輕鏈-互補決定區(LC-CDR) 1、具有SEQ ID NO:6中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:7中所示胺基酸序列之LC-CDR 3；或具有SEQ ID NO:11中所示胺基酸序列之LC-CDR 1、具有SEQ ID NO:12中所示胺基酸序列之LC-CDR 2及具有SEQ ID NO:13中所示胺基酸序列之LC-CDR 3，該方法包括：提供包括編碼該重鏈之核酸分子及編碼該輕鏈之核酸分子之宿主細胞；及在足以產生該抗體或抗原結合片段之條件及時間下培養該宿主細胞。
如請求項31之方法，其中該重鏈可變區包括SEQ ID NO:21、22、23或24之胺基酸序列且該輕鏈可變區包括SEQ ID NO:25之胺基酸序列。
如請求項31之方法，其中該抗體包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型(isotype)之重鏈恆定域。
如請求項31之方法，其中該抗體包括該IgG4同型之重鏈恆定域。
如請求項31之方法，其中該抗體包括含有SEQ ID NO:16、17、18或19中所示胺基酸序列之重鏈恆定域。
如請求項31之方法，其中該輕鏈包括人類κ輕鏈或人類λ輕鏈。
如請求項31之方法，其中該抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之輕鏈恆定域。
如請求項31之方法，其中該宿主細胞係中國倉鼠卵巢細胞或人類胚胎腎293細胞。
如請求項31之方法，其中該宿主細胞係酵母或絲狀真菌細胞。
一種組合物，其包括如請求項1至20中任一項之抗體或抗原結合片段，其中該抗體或抗原結合片段係獲自包括編碼該重鏈之核酸分子及編碼該輕鏈之核酸分子之宿主細胞。
如請求項40之組合物，其中該抗體包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4同型之重鏈恆定域。
如請求項40之組合物，其中該抗體包括該IgG4同型之重鏈恆定域。
如請求項40之組合物，其中該抗體包括含有SEQ ID NO:16、17、18或19中所示胺基酸序列之重鏈恆定域。
如請求項40之組合物，其中該輕鏈包括人類κ輕鏈或人類λ輕鏈。
如請求項40之組合物，其中該抗體包括含有SEQ ID NO:20中所示胺基酸序列之輕鏈恆定域。
如請求項40之組合物，其中該宿主細胞係中國倉鼠卵巢細胞或人類胚胎腎293細胞。
如請求項40之組合物，其中該宿主細胞係酵母或絲狀真菌細胞。