TW201806617A

TW201806617A - 穩定之液體醫藥調配物

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Publication number: TW201806617A
Application number: TW106121657A
Authority: TW
Inventors: 李晙源; 韓元鎔; 金水晶; 吳俊錫; 金昭英; 洪秀賢; 申姸暻
Original assignee: 賽特瑞恩股份有限公司
Priority date: 2016-06-30
Filing date: 2017-06-28
Publication date: 2018-03-01
Also published as: PE20190448A1; CA3028238C; JOP20180125A1; PL3479819T3; CO2018013689A2; CN109310628A; HUE066142T2; FI3479819T3; UA122610C2; JOP20180125B1; TN2018000443A1; EP4338752A3; NZ770076A; PH12018502670A1; MX2018015960A; KR102397713B1; MA45562B1; DK3479819T5; EP3479819A1; US20210000743A1

Abstract

本發明提供一種穩定之液體醫藥調配物，其含有：一抗體或其與抗原結合之片段；一表面活性劑；糖或其衍生物；一緩衝液。根據本發明的穩定液體醫藥調配物具有低黏度而含有高含量之抗體，依據其在加速條件與嚴苛條件下之優異穩定性質，其具優異的長期貯存穩定性，且可經皮下注射。

Description

穩定之液體醫藥調配物

本發明係關於一種穩定之液體醫藥調配物。

腫瘤壞死因子-α(TNF-α)是一關於全身發炎的細胞示信蛋白(細胞介素)且為一調節急性期反應的細胞介素。TNF-α涉及各種疾病和病症，包括敗血症、感染、自體免疫疾病，以及移植物排斥。TNF-α激發免疫反應並且引起許多與自體免疫異常如類風濕性關節炎、關節黏連性脊椎炎、潰瘍性大腸炎、成人克隆氏症、小兒克隆氏症、牛皮癬、牛皮癬性關節炎等之臨床相關問題。此類異常可使用TNF-α抑制劑治療。

英夫利昔單抗(Infliximab)是一種可作用為TNF-α抑制劑的嵌合型單株抗體。包含此種抗體的傳統調配物被製備成冷凍乾燥的粉末，其為經重組、稀釋，且使用依據每一疾病所測定的給藥方案進行靜脈內注射。

例如，英夫利昔單抗商品(Remicade)標籤揭示了包含英夫利昔單抗、蔗糖、聚山梨酯80和磷酸鈉的冷凍乾燥調配物。對於靜脈內注射而言，其揭示將可注射水添加到冷凍乾燥調配物中之重組步驟，以及使用可注射鹽水將該含氯化鈉之經重組調配物稀釋的步驟。

然而，如以上說明之傳統調配物的給劑方式(冷凍乾燥→重組→稀釋→靜脈注射)具有花費大、複雜和因為頻繁給劑而引起病患不適、排斥作用和副作用，且給劑者受限於具有醫療訓練者的問題。

阿達木單抗(Adalimumab)也是一種能作用為TNF-α抑制劑的人類單株抗體。含阿達木單抗的液態調配物揭示於例如復邁(Humira)的標籤。此外，韓國專利申請公佈案號10-2014-0134689揭示一含阿達木單抗、磷酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸、甘露醇、氯化鈉和聚山梨酯80(實例1)的液態調配物，以及一含阿達木單抗、磷酸鈉、檸檬酸鈉、檸檬酸、甘露醇、精胺酸、氯化鈉和聚山梨酯80(實例2)的改良液態調配物。

然而，在以上說明含NaCl或KCl做為等張劑之液體醫藥調配物的情形中，可能會引起沉澱和膠凝化的問題，且當該抗體濃度低到大約50mg/ml時，該給劑頻率和給劑週期可能會受限。

因而，吾人需要能克服以上說明之傳統液體醫藥調配物問題，以及包含抗體一尤其是英夫利昔單抗作為TNF-α抑制劑者之穩定液體醫藥調配物。

本發明之一目標是要提供具有低黏度而含有高含量之一抗體的穩定的液體醫藥調配物。

本發明之另一目標是要提供根據在加速條件與嚴苛條件下之優異穩定性質具優異的長期貯存穩定性的液體醫藥調配物。

本發明之還有另一目標是要提供可經皮下給劑的穩定的液體醫藥調配物。

根據本發明一實施例之一穩定的液體醫藥調配物包含：(A) 一抗體或其與抗原結合的片段；(B)一表面活性劑；(C)一糖或其衍生物；和(D)一緩衝液。

在本發明的一實施例中，該抗體(A)可包含一結合至TNF-α的抗體。

在本發明的一實施例中，該抗體(A)可包含英夫利昔單抗、阿達木單抗、賽妥珠單抗(certolizumab pegol)、戈利木單抗，或其混合物。

在本發明的一實施例中，該抗體(A)可包含嵌合型人-小鼠IgG單株抗體。

在本發明的一實施例中，該抗體或其與抗原結合的片段(A)可包括：一輕鏈可變區及一重鏈可變區，所述輕鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：3之胺基酸序列的CDR3結構域；所述重鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：4之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：5之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：6之胺基酸序列的CDR3結構域。

在本發明的一實施例中，該抗體或其與抗原結合的片段(A)可包含：一具有SEQ ID NO：7之胺基酸序列的輕鏈可變區；和一具有SEQ ID NO：8之胺基酸序列的重鏈可變區。

在本發明的一實施例中，該抗體(A)可包含：一具有SEQ ID NO：9之胺基酸序列的輕鏈；和一具有SEQ ID NO：10之胺基酸序列的重鏈。

在本發明的一實施例中，可含有濃度為10至200mg/ml之該抗體或其與抗原結合的片段(A)。

在本發明的一實施例中，該表面活性劑(B)可包含聚山梨酯、泊洛沙姆(poloxamer)，或其混合物。

在本發明的一實施例中，該表面活性劑(B)可包含聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯80或其兩者以上的混合物。

在本發明的一實施例中，該表面活性劑(B)可包含聚山梨酯80。

在本發明的一實施例中，可含有濃度0.02至0.1%(w/v)之該表面活性劑(B)。

在本發明的一實施例中，該糖(C)可包含單醣、雙醣、寡醣、多醣或其兩者以上之混合物，且該糖的衍生物(C)包含糖醇、糖酸，或其混合物。

在本發明的一實施例中，該糖或其衍生物(C)可包含山梨醇、甘露醇、海藻糖、蔗糖，或其兩者以上之混合物。

在本發明的一實施例中，可包含濃度1至10%(w/v)的該糖或其衍生物(C)。

在本發明的一實施例中，該緩衝液(D)可包含乙酸鹽或組胺酸。

在本發明的一實施例中，該緩衝液(D)可具有1至50mM的濃度。

在本發明的一實施例中，該調配物可具有4.0至5.5的pH值。

在本發明的一實施例中，該調配物可不含天冬胺酸、離胺酸、精胺酸，或其混合物。

在本發明的一實施例中，該調配物可不含NaCl、KCl、NaF、KBr、NaBr、Na₂SO₄、NaSCN、K₂SO₄，或其混合物。

在本發明的一實施例中，該調配物可不含一螯合劑。

在本發明的一實施例中，該調配物可在40℃±2℃貯存一個月之後測量具有0.5cp到10cp的黏度，或在5℃±3℃貯存六個月之後測量具有0.5cp到5cp的黏度。

根據本發明之一實施例的穩定的液體醫藥調配物可含有：(A)一抗體或其與抗原結合的片段，其包括有一輕鏈可變區及一重鏈可變區，所述輕鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：3之胺基酸序列的CDR3結構域；所述重鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：4之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：5之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：6之胺基酸序列的CDR3結構域；(B)一表面活性劑；(C)糖或其衍生物；以及(D)一包括有乙酸鹽或組胺酸的緩衝液。

根據本發明之一實施例的穩定的液體醫藥調配物可包含：(A)90至145mg/ml之一抗體或其與抗原結合的片段，其包括一輕鏈可變區及一重鏈可變區，所述輕鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：3之胺基酸序列的CDR3結構域；所述重鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：4之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：5之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：6之胺基酸序列的CDR3結構域；(B)0.02 to 0.1%(w/v)的表面活性劑；(C)1至10%(w/v)的糖或其衍生物；以及(D)1至50mM之包括有乙酸鹽或組胺酸的緩衝液。

在本發明的一實施例中，穩定液體醫藥調配物可用於皮下注射。

在本發明的一實施例中，穩定液體醫藥調配物在使用前係未經受重組步驟、稀釋步驟或該二步驟的處理。

根據本發明之一實施例的預填充注射筒被填充以穩定液體醫藥調配物。

根據本發明之一實施例的自動注射器包括其中之預填充注射筒。

根據本發明的穩定液體醫藥調配物具有低黏度而包含高含量之抗體，依其在加速條件與嚴苛條件下之優異穩定性質，其具優異的長期貯存穩定性，且可經皮下注射。

穩定的液體醫藥調配物

根據本發明之一穩定液體醫藥調配物包含：(A)一抗體或其與抗原結合的片段；(B)一表面活性劑；(C)一糖或其衍生物；和(D)一緩衝液。

本說明書中使用的「不含」一用詞意指該調配物完全不含該對應成份。此外，該用詞意指該調配物基本上不含對應成份，亦即包含其量不會影響抗體活性與該液體醫藥調配物之穩定性與黏度之對應成份。例如，該用詞意指該調配物包含佔該液體醫藥調配物總重量0至1%(w/v)、0至1ppm(w/v)，或0至1ppb(w/v)之對應成份量。

(A)抗體或其與抗原結合的片段

「抗體」一用詞係指由四個多肽鏈一包括通過二硫鍵交互連接之兩個重鏈和兩個輕鏈所組成的免疫球蛋白分子。其他具有變化結構之天然抗體例如駱駝抗體(camelid antibody)也包括在此定義中。每一重鏈係由重鏈可變區和重鏈固定區所組成。該重鏈固定區是由三個結構域(CH1、CH2和CH3)構成。每一輕鏈是由一輕鏈可變區和一輕鏈固定區構成。該輕鏈固定區是由一結構域(CL)構成。重鏈可變區和輕鏈可變區可進而次分為被稱作互補決定區(CDR)的高可變性區域，被稱為架構區(FR)之較保留不變區域穿插。每一重鏈可變區和輕鏈可變區是由三個CDR和四個FR組成，其從胺基端到羧基端以如下順序安排：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。

在本發明的一實施例中，該醫藥調配物可包含多株抗體、單株抗體、重組抗體、單鏈抗體、雜交抗體、嵌合抗體、人化抗體或其片段做為抗體。專詞「嵌合抗體」係指包含得自一物種之重鏈和輕鏈可變區序列和得自另一物種的固定區域序列之抗體。在本發明的一實施例中，該醫藥調配物可包含嵌合的人-小鼠IgG單株抗體為其抗體。該嵌合的人-小鼠IgG單株抗體是由小鼠的重鏈及輕鏈可變區與和其結合之人的重鏈及輕鏈固定區所構成。該嵌合的人-小鼠IgG單株抗體可根據本技藝中已知的方法產生。例如，英夫利昔單抗可根據美國專利案第6,284,471號說明的方法產生。

在本發明的一實施例中，該醫藥調配物可包含與TNF-α或TNF-α之抗原決定區結合之抗體作為其抗體。與TNF-α或TNF-α之抗原決定區結合之抗體可包含英夫利昔單抗、阿達木單抗、賽妥珠單抗、戈利木單抗(golimumab)，或其混合物。在本發明的一實施例中，該抗體可包含英夫利昔單抗。

在本發明的一實施例中，該抗體或其與抗原結合的片段(A)可包含：一具有SEQ ID NO：9之胺基酸序列的輕鏈；和一具有SEQ ID NO：10之胺基酸序列的重鏈。

該抗體或其與抗原結合的片段的濃度可自由控制在一本質上對於根據本發明的穩定液體醫藥調配物之穩定性與黏度無副作用的範圍內。在本發明的一實施例中，該抗體或其與抗原結合的片段的濃度可為10到200mg/ml。在本發明的另一實施例中，該抗體或其與抗原結合的片段之濃度可為50至200mg/ml。在本發明尚有另一實施例中，該抗體或其與抗原結合的片段之濃度可為80至150mg/ml。在本發明尚有另一實施例中，該抗體或其與抗原結合的片段之濃度可為90至145mg/ml。在本發明還有另一實施例中，該抗體或其與抗原結合的片段之濃度可為110至130mg/ml。若該抗體或其與抗原結合的片段的濃度是在以上說明的範圍內，則高含量之該抗體或其與抗原結合的片段使其可以增加劑量和給劑週期的自由度，並且該醫藥調配物可展現優異之長期穩定性和低黏度。

(B)表面活性劑

表面活性劑的實例包括但不限於聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯(例如：聚山梨酯)、聚氧乙烯烷基醚(例如：Brij)、烷基苯基聚氧乙烯醚(例如：Triton-X)、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(例如：泊洛沙姆、普洛尼克[Pluronic])、十二烷基硫酸鈉(SDS)等等。

在本發明的一實施例中，表面活性劑可包含聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯(聚山梨酯)。該聚山梨酯可包含聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯80或其兩種以上的混合物。在本發明的一實施例中，聚山梨酯可包含聚山梨酯20、聚山梨酯80或其混合物。在本發明的另一實施例中，聚山梨酯可包含聚山梨酯80。

在本發明的一實施例中，表面活性劑的濃度可自由控制在一本質上對於根據本發明的穩定液體醫藥調配物之穩定性與黏度無副作用的範圍內。例如，表面活性劑的濃度可為0.001至5%(w/v)、0.01至1%(w/v)，或0.02至0.1%(w/v)。若表面活性劑的濃度是在以上說明的範圍內，則該醫藥調配物可展現優異之長期穩定性和低黏度。

(C)糖或其衍生物

糖可包含單醣、雙醣、寡醣、多醣，或其兩者以上之混合物。單醣的實例包括但不限於：葡萄糖、果糖、半乳糖等等。雙醣的實例包括但不限於：蔗糖、乳糖、麥芽糖、海藻糖等等。寡醣的實例包括但不限於：果寡醣、半乳寡醣、甘露寡醣等等。多醣的實例包括但不限於：澱粉、糖原、纖維素、幾丁質、果膠等等。

該糖的衍生物(C)可包含糖醇、糖酸，或其混合物。糖醇的實例包括但不限於：甘油、赤蘚糖醇、蘇糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、核醣醇、甘露醇、山梨醇、半乳糖醇、岩藻糖醇、艾杜糖醇、肌醇、庚七醇、異麥芽酮糖醇、麥芽糖醇、乳糖醇、麥芽三糖醇、麥芽四糖醇、聚醣醇等等。糖酸的實例包括但不限於：醛糖酸(甘油酸等等)、酮醣酸(神經胺酸等等)、醣醛酸(葡萄醣醛酸等等)、醛醣二酸(酒石酸等等)及類似者。

在本發明的一實施例中，糖或其衍生物的濃度可自由控制在一本質上對於根據本發明的穩定液體醫藥調配物之穩定性與黏度無副作用的範圍內。例如，糖或其衍生物的濃度可為0.1至30%(w/v)、1至20%(w/v)，或1至10%(w/v)。若糖或其衍生物的濃度可在此範圍內，則該醫藥調配物可展現優異之長期穩定性和低黏度。

(D)緩衝液

用於本發明的緩衝液是一用於將酸或鹼引起之pH變化減至最小的中和物質。緩衝液的實例包括磷酸鹽、乙酸鹽、琥珀酸鹽、葡萄糖酸鹽、麩胺酸鹽、檸檬酸鹽、組胺酸等等。本發明的一實施例中，該緩衝液可包含乙酸鹽或組胺酸。若該緩衝液包含乙酸鹽和組胺酸兩者，則該醫藥調配物的穩定性可能降低。

在本發明的一實施例中，該緩衝液可包含乙酸鹽。乙酸鹽的實例包括但不限於乙酸鈉、乙酸鋅、乙酸鋁、乙酸銨、乙酸鉀等等。為了調整pH，該緩衝液可進一步包含一酸，例如：乙酸。當該緩衝液包含乙酸鹽，其就pH調整和穩定性方面而言可為最佳者。

在本發明的一實施例中，該緩衝液可包含組胺酸。當該緩衝液包含組胺酸時，其可包含組胺酸的鹽，例如：組胺酸的氯化物、組胺酸的乙酸鹽、組胺酸的磷酸鹽、組胺酸的硫酸鹽或等等。為了調整pH，該緩衝液可包含一酸，例如：鹽酸、乙酸、磷酸、硫酸或等等。

在本發明的一實施例中，穩定液體醫藥調配物可不含檸檬酸鹽、磷酸鹽，或其混合物。

在本發明的一實施例中，該緩衝液(或緩衝液陰離子)的濃度可自由控制在一本質上對於根據本發明的穩定液體醫藥調配物之穩定性與黏度無副作用的範圍內。例如，該緩衝液或其陰離子的濃度可為1至50mM、5至30mM，或10至25mM。若該緩衝液或其陰離子的濃度在此範圍則該醫藥調配物可展現優異之長期穩定性和低黏度。

(E)pH

在本發明的一實施例中，穩定液態醫藥組成物的pH可為4.0至5.5，或4.7至5.3。若該pH是在此範圍內，則該醫藥調配物可展現優異之長期穩定性和低黏度。該醫藥調配物的pH可用緩衝液調整。換句話說，若該醫藥調配物包含某含量的緩衝液，其可展現以上說明範圍內之pH而不必使用一分開的pH調整劑。若檸檬酸鹽、磷酸鹽或其混合物被用作為緩衝液，則可能很難顯示pH在以上範圍內。若該醫藥調配物進一步包含酸(例如：鹽酸)或鹼(例如：氫氧化鈉)作為分開的pH調整劑，則該抗體之穩定性可能降低。

(F)其他成分

在本發明的一實施例中，穩定液體醫藥調配物可不含天冬胺酸、離胺酸、精胺酸，或其混合物。若該穩定液體醫藥調配物包含這些胺基酸，其可能變成固態。在本發明的一實施例中，穩定的液體醫藥調配物可包含一種以上胺基酸，以上說明的三種氨基酸除外。在此情形中，穩定液體醫藥調配物可以5%(w/v)以下的量包含一種以上胺基酸，例如：0.001至5%(w/v)、0.001至1%(w/v)、0.01至5%(w/v)、0.01至1%(w/v)、0.1至5%(w/v)，或0.1至1%(w/v)。

在本發明的另一實施例中，穩定液體醫藥調配物可包含牛磺酸。在此情形中，該牛磺酸可以小於5%(w/v)的量包含其中，例如：0.001至5%(w/v)、0.001至1%(w/v)、0.01至5%(w/v)、0.01至1%(w/v)、0.1至5% (w/v)，或0.1至1%(w/v)。

在本發明的一實施例中，穩定液體醫藥調配物可不含金屬鹽，如NaCl、KCl、NaF、KBr、NaBr、Na₂SO₄、NaSCN、K₂SO₄等等。若穩定液體醫藥調配物包含這些金屬鹽，則該調配物可能發生沉澱，並且該調配物可能膠凝化且可能具有很差的穩定性。

在本發明的一實施例中，穩定液體醫藥調配物可不含一螯合劑(例如：EDTA)：若該醫藥調配物包含一螯合劑，則其氧化比率可能增加。

在本發明的一實施例中，穩定液體醫藥調配物可不含保存劑。該保存劑的實例包括氯化十八烷基二甲基苄基銨、六氯銨、苯扎氯銨、氯化本索寧、酚、丁醇、苯甲醇、對羥基苯甲酸烷酯、鄰苯二酚、間苯二酚、環己醇、3-戊醇、間甲酚等等。若該醫藥調配物包含保存劑，則該保存劑可能不會幫助改進該醫藥調配物的穩定性。

在本發明的一實施例中，本發明之穩定液體醫藥調配物可進一步包含本技藝中已知的添加物，其本質上不會影響抗體的活性以及該調配物的穩定性和低黏度。例如，該醫藥調配物可進一步包含一水溶液載劑、一抗氧化劑，或其兩種以上的混合物。該水溶液載劑是一醫藥上可接受的載劑(施用於人類時安全無毒性)並且有用於製備液體醫藥調配物。水溶液的載劑實例包括但不限於：用於注射的無菌水(SWFI)、注射用的抑菌水(BWFI)、無菌鹽水溶液、林格氏液(Ringer’s solution)、右旋糖等等。抗氧化劑的實例包括但不限於抗壞血酸等等。

(G)「穩定的」液態醫藥調配物

在本發明之「穩定的」液態醫藥調配物中之「穩定的」一用詞意指根據本發明的抗體，在生產和/或貯存期間，基本上保留其物理穩定性和/或化學穩定性和或生物穩定性。用於測量蛋白質穩定性的各種分析技術在本技藝中很容易獲得。

物理穩定性可藉由本技藝中已知的方法評估，其包括測量樣品對光之明顯衰減(吸光值，或光密度)。此一光衰減的測量係關該調配物之混濁度。此外，對於物理穩定性而言，高分子量成份的含量、低分子量成份的含量、完整蛋白質的量、顯微鏡下才可見的顆粒之數目等等可被測量。

化學穩定性可藉由例如：測量和定量該抗體的化學變化形式來評估。化學穩定性包括電荷變化(例如：因為去醯胺化或氧化所造成)，其可藉由例如：離子交換色層分析術來評估。對於化學穩定性而言，可測量電荷變異體(酸性或鹼性波峰)。

生物穩定性可藉由本技藝中已知的方法評估，例如：抗原結合親和力可藉ELISA測量。

在本發明的一實施例中，該液態醫藥調配物可經很長的時段保持穩定。

在本發明的一實施例中，「穩定的」液態醫藥調配物一用詞意指能滿足以下標準一種以上之液態醫藥調配物。

混濁度

- 一在40℃±2℃的溫度貯存四週後，以分光光度計測量具有0至0.0300，或0至0.0700吸光值A₆₀₀之液態醫藥調配物；- 一在40℃±2℃的溫度和75±5%的相對溼度於封閉條件下貯存四週後，以分光光度計測量具有0至0.0300，或0至0.0700吸光值A₆₀₀之液態醫藥調配物；

主要成分的含量(主要波峰)

-一其中主成分含量在40℃±2℃的溫度貯存四週後以SE-HPLC測量為98%至100%之液態醫藥調配物； -在40℃±2℃的溫度和75±5%的相對溼度在封閉條件下貯存四週後，以SE-HPLC測量其中主成分含量為98%至100%之液態醫藥調配物；

高分子量成份(滯留時間比主要波峰(完整之IgG)較早之波峰)之含量

-在5℃±3℃的溫度貯存12個月後，以SE-HPLC測量其中高分子量成份之含量為0至1.00%之液態醫藥調配物；-在5℃±3℃的溫度於封閉條件下貯存12個月後，以SE-HPLC測量其中高分子量成份之含量為0至1.00%之液態醫藥調配物；

低分子量成份(一滯留時間比主要波峰(完整之IgG)較晚之波峰)之含量

-在5℃±3℃的溫度貯存12個月後，以SE-HPLC測量其中低分子量成份之含量為0至0.40%之液態醫藥調配物；-在5℃±3℃的溫度於封閉條件下貯存12個月後，以SE-HPLC測量其中低分子量成份之含量為0至0.40%之液態醫藥調配物；

完整免疫球蛋白G之含量

-在5℃±3℃的溫度貯存12個月後，以非還原型CE-SDS測量其中完整免疫球蛋白G之含量(完整之IgG%)為94.0%至100%之液態醫藥調配物；-在5℃±3℃的溫度於封閉條件下貯存12個月後，以非還原型CE-SDS測量其中完整免疫球蛋白G之含量(完整之IgG%)為94.0%至100%之液態醫藥調配物；-在40℃±2℃的溫度貯存四週後，以非還原型CE-SDS測量其中完整免疫球蛋白G之含量(完整之IgG%)為94.0%至100%之液態醫藥調配物；-在40℃±2℃的溫度和75±5%的相對溼度在封閉條件下貯存四週後，以非還原型CE-SDS測量其中完整免疫球蛋白G之含量(完整之IgG%)為94.0%至100%之液態醫藥調配物；

完整之重鏈和輕鏈含量

-一液態醫藥調配物，其中在5℃±3℃的溫度貯存12個月後以還原型CE-SDS測量完整之重鏈與輕鏈含量(完整之HC+LC%)為99.0%至100%；-一液態醫藥調配物，其中在5℃±3℃的溫度於封閉條件下貯存12個月後以還原型CE-SDS測量完整之重鏈與輕鏈含量(完整之HC+LC%)為99.0%至100%；-一液態醫藥調配物，其中在40℃±2℃的溫度貯存四週後以還原型CE-SDS測量完整之重鏈與輕鏈含量(完整之HC+LC%)為98.0%至100%；-一液態醫藥調配物，其中在40℃±2℃的溫度於封閉條件下貯存四週後以還原型CE-SDS測量完整之重鏈與輕鏈含量(完整之HC+LC%)為98.0%至100%；

顯微鏡下才可見的顆粒之數目

-一液態醫藥調配物，其中在5℃±3℃的溫度貯存12個月後以HIAC測量顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<400.00μm)之數目為0至1,000；-一液態醫藥調配物，其中在5℃±3℃的溫度於封閉條件下貯存12個月後以HIAC測量顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<400.00μm)之數目為0至1,000； -一液態醫藥調配物，其中在40℃±2℃的溫度貯存四週後以MFI測量顯微鏡下才可見的顆粒(1.00μm，<100.00μm)之數目為0至30,000；-一液態醫藥調配物，其中在40℃±2℃的溫度和75±5%的相對溼度於封閉條件下貯存四週後以MFI測量顯微鏡下才可見的顆粒(1.00μm，<100.00μm)之數目為0至30,000；-一液態醫藥調配物，其中在40℃±2℃的溫度貯存四週後以MFI測量顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<100.00μm)之數目為0至200；-一液態醫藥調配物，其中在40℃±2℃的溫度和75±5%的相對溼度於封閉條件下貯存四週後以MFI測量顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<100.00μm)之數目為0至200；-一液態醫藥調配物，其中在40℃±2℃的溫度貯存六週後以MFI測量顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<100.00μm)之數目為0至500；-一液態醫藥調配物，其中在40℃±2℃的溫度和75±5%的相對溼度於封閉條件下貯存六週後以MFI測量顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<100.00μm)之數目為0至500；

氧化比率

-一液態醫藥調配物，其中在40℃±2℃的溫度貯存四週後以LC-MS測量重鏈Met 255的氧化比率為0%至2.5%；-一液態醫藥調配物，其中在40℃±2℃的溫度和75±5%的相對溼度於封閉條件下貯存四週後以LC-MS測量重鏈Met 255的氧化比率為0%至2.5%；

電荷變異體

-一液態醫藥調配物，其在40℃±2℃的溫度貯存四週後以 IE-HPLC測量顯示一酸性波峰為20%至35%；-一液態醫藥調配物，其在40℃±2℃的溫度和75±5%的相對溼度於封閉條件下貯存四週後以IE-HPLC測量顯示一酸性波峰為20%至35%；-一液態醫藥調配物，其在40℃±2℃的溫度貯存四週後以IE-HPLC測量顯示一鹼性波峰為33%至40%；-一液態醫藥調配物，其在40℃±2℃的溫度和75±5%的相對溼度於封閉條件下貯存四週後以IE-HPLC測量顯示一鹼性波峰為33%至40%；

TNF-α之結合親和力

-一液態醫藥調配物，其在5℃±3℃的溫度貯存12個月後以ELISA測量具有80%至120%之TNF-α之結合親和力；且-一液態醫藥調配物，其在5℃±3℃的溫度於封閉條件下貯存12個月後以ELISA測量具有80%至120%之TNF-α之結合親和力。

在本發明的一實施例中，該醫藥調配物在40℃±2℃的溫度貯存一個月後可具有0.5cp至10.0cp的黏度。在本發明的另一實施例中，該醫藥調配物在5℃±3℃的溫度貯存六個月後測量具有0.5cp至5.0cp的黏度。

製備穩定的液體醫藥調配物之方法

本發明之穩定液體醫藥調配物可利用任何已知方法製備，其不限於某一特殊方法。例如，該穩定液體醫藥調配物可藉由添加緩衝液至含有一表面活性劑與一糖或其衍生物之溶液中而調整該溶液的pH值，然後添加一抗體至該混合物容液來製備。或者，該液態醫藥調配物可藉由在一純化方法的最後步驟製備含某些賦形劑之溶液，然後添加剩下的成份至該溶液來製備。例如，該液態醫藥調配物可藉著製備含抗體、緩衝液和糖或其衍生物的溶液，然後將表面活性劑添加到該溶液來製備。

此外，該調配物的製備方法可包含或不包含冷凍乾燥步驟。

當製備方法不包含冷凍乾燥步驟例時，例如：根據本發明製備的液態醫藥調配物可用滅菌處理，然後立即放入封閉的容器中。

當該製備方法包含冷凍乾燥步驟時，例如，根據本發明製備的液態醫藥調配物可經冷凍乾燥或冷凍乾燥並予貯存，然後可補充或置換被冷凍乾燥和/或貯存所移除或修改的成份，從而製備出根據本發明的液態醫藥調配物。或者，除了可能被冷凍乾燥和/或貯存移除掉的成份以外，僅將根據本發明之液態醫藥調配物的成份冷凍乾燥和/或冷凍乾燥並貯存，然後可將被排除的成份添加到其中，從而製備根據本發明的液態醫藥調配物。

穩定的液體醫藥調配物的使用方法

根據本發明的穩定液體醫藥調配物可用於治療其中TNF-α活性作用為有害因子之疾病。TNF-α活性作用為有害因子之疾病的實例包括但不限於：敗血病、自體免疫疾病、感染性的疾病、移植物排斥、惡性癌、肺病症、腸道病症、心臟病症等等。

在本發明的一實施例中，TNF-α活性作用為有害因子之疾病可選自：類風濕性關節炎、僵直性脊椎炎、潰瘍性大腸炎、成人克隆氏症、兒童克隆氏症、牛皮癬，和乾癬性關節炎之中的疾病。

根據本發明的穩定液體醫藥調配物可以單劑或多劑的形式，或皮下自行注射之形式被提供。

在該液態醫藥調配物中，其他成份包括抗體的濃度說明如上，且該液態醫藥調配物的總體積可為0.2至2.0ml。

該液態醫藥調配物的劑量和給劑時間可依疾病種類、疾病的嚴重性和過程、病患的健康情形和對治療的反應，以及施行治療之醫師判斷而改變，且並不限於一特殊劑量和給劑時間。例如，可根據抗體濃度以1至10mg/kg的劑量施用一或數種含液態醫藥調配物的產品，且可以一週、兩週、三週、一個月、兩個月或三個月的間隔施用同一或相異劑量。

在本發明的一實施例中，穩定液體醫藥調配物在使用前可不經一重組步驟、一稀釋步驟或該二步驟處理。

治療方法和穩定化方法

本發明亦提供一項治療其中TNF-α活性作用為有害因子之疾病病患的方法，該方法包含對病患施以包含：(A)一抗體或其抗原結合片段；(B)一表面活性劑；(C)一糖或其衍生物；以及(D)一緩衝液之穩定液體醫藥調配物。

本發明亦提供一項使液態醫藥調配物中之抗體穩定化的方法，該方法包含製備一含有：(A)一抗體或其抗原結合片段；(B)一表面活性劑；(C)一糖或其衍生物；以及(D)一緩衝液之穩定液體醫藥調配物。

在一該治療方法或該穩定化法的實施例中，抗體(A)可包含一結合至TNF-α的抗體。

在一該治療方法或該穩定化法的實施例中，抗體(A)可包含英夫利昔單抗、阿達木單抗、賽妥珠單抗、戈利木單抗，或其混合物。

在一該治療方法或該穩定化法的實施例中，抗體(A)可包含一嵌合型之人-小鼠IgG單株抗體。

在一該治療方法或該穩定化法的實施例中，抗體(A)或其抗原結合片段可包括：一輕鏈可變區及一重鏈可變區，所述輕鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：3之胺基酸序列的CDR3結構域；所述重鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：4之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：5之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：6之胺基酸序列的CDR3結構域。

在一該治療方法或該穩定化法的實施例中，該抗體或其與抗原結合的片段(A)可包含：一具有SEQ ID NO：7之胺基酸序列的輕鏈可變區；和一具有SEQ ID NO：8之胺基酸序列的重鏈可變區。

在一該治療方法或該穩定化法的實施例中，該抗體(A)可包含：一具有SEQ ID NO：9之胺基酸序列的輕鏈；和一具有SEQ ID NO：10之胺基酸序列的重鏈。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，可包含10至200mg/ml之濃度的該抗體(A)或其與抗原結合的片段。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，表面活性劑(B)可包含聚山梨酯、泊洛沙姆或其混合物。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，表面活性劑(B)可包含聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯80，或其兩者以上之混合物。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，表面活性劑(B)可包含聚山梨酯80。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，可包含0.02至0.1%(w/v)之濃度的表面活性劑(B)。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該糖(C)可包含單醣、雙醣、寡醣、多醣，或其兩者以上之混合物，且該糖的衍生物(C)包含糖醇、糖酸，或其混合物。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該糖或其衍生物 (C)可包含山梨醇、甘露醇、海藻糖、蔗糖或其兩者以上之混合物。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，可包含濃度1至10%(w/v)的該糖或其衍生物(C)。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該緩衝液(D)可包含乙酸鹽或組胺酸。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該緩衝液(D)可具有1至50mM的濃度。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該穩定液體醫藥調配物可具有4.0至5.5的pH值。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該穩定液體醫藥調配物可不含天冬胺酸、離胺酸、精胺酸，或其混合物。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該穩定液體醫藥調配物可不含NaCl、KCl、NaF、KBr、NaBr、Na₂SO₄、NaSCN、K₂SO₄或其混合物。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該穩定液體醫藥調配物可不含螯合劑。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該穩定液體醫藥調配物可不含保存劑。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該穩定液體醫藥調配物可進一步包含一水溶液載劑、一抗氧化劑或其兩者以上的混合物。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該穩定液體醫藥調配物在40℃±2℃的溫度貯存一個月後可測得0.5cp至10cp的黏度，或在5℃±3℃的溫度貯存六個月後測得0.5cp至5cp的黏度。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該穩定液體醫藥調配物可包括：(A)一抗體或其抗原結合片段，其包括有一輕鏈可變區及一重鏈可變區，所述輕鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：3之胺基酸序列的CDR3結構域；所述重鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：4之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：5之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：6之胺基酸序列的CDR3結構域；(B)一表面活性劑；(C)糖或其衍生物；以及(D)一包括有乙酸鹽或組胺酸的緩衝液。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該穩定液體醫藥調配物可包含：(A)90至145mg/ml抗體或其抗原結合片段，其包括有一輕鏈可變區及一重鏈可變區，所述輕鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：3之胺基酸序列的CDR3結構域；所述重鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：4之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：5之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：6之胺基酸序列的CDR3結構域；(B)0.02至0.1%(w/v)的表面活性劑；(C)1至10%(w/v)之糖或其衍生物；以及(D)1至50mM之包括有乙酸鹽或組胺酸的緩衝液。

在一該治療方法之實施例中，該穩定液體醫藥調配物可以皮下注射給劑。

在該治療方法或該穩定化法的實施例中，穩定液體醫藥調配物在使用前可不經一重組步驟、一稀釋步驟或該二步驟處理。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，穩定液體醫藥調配物可在使用前被填充到一預填充的注射筒中。

在一該治療方法或該穩定化法之實施例中，該預填充的注射筒可在使用前被包括在一自動注射器中。

產品

本發明亦提供包含穩定液體醫藥調配物；以及接受該穩定液體醫藥調配物在一封閉狀態的容器之產品。

穩定液體醫藥調配物係如以上之說明。

在本發明的一實施例中，該容器可由如玻璃、聚合物(塑膠)、金屬等等，但不限於此之材料構成。在本發明的一實施例中，該容器為瓶子、小藥瓶、藥匣、注射筒(預充填的注射筒、自動注射筒)、或試管，但不限於此。在本發明的一實施例中，該容器可為玻璃或聚合物的小藥瓶，或玻璃或聚合物之預充填的注射筒。

以上說明之小藥瓶、藥匣、預充填的注射筒或自動注射筒的特定產品形式，以及將該穩定液態醫藥調配物充填到小藥瓶、藥匣、預充填的注射筒或自動注射筒的方法可以容易地取得，或者藉由任何熟習本發明從屬之技術領域者來實施。例如，美國專利第4,861,335號和第6,331,174號等，揭示預填充之特定產品形式和填充方法。例如，美國專利第5,085,642號和第5,681,291號等，揭示自動注射器之特定產品形式和組裝方法。以上說明之用於本發明的小藥瓶、藥匣、預充填的注射筒或自動注射筒可為可購得的產品，或考量該穩定液體醫藥調配物之物理性質、施予調配物的區域、調配物之劑量等等而予分開製造的產品。

在本發明的一實施例中，容器的內部可不用矽油塗佈一層。若用矽油塗佈，則該調配物的穩定性可能降低。該容器可為單劑或者多劑的容器。

在本發明的一實施例中，該產品可進一步包含提供該穩定液體醫藥調配物之使用方法、該調配物之貯存方法，或兩者之說明。該調配物的使用方法包括一治療其中TNF-α作用為一有害因子的疾病之方法，且可包括給劑的途徑、調配物的劑量以及給劑的時間。

在本發明的一實施例中，就商業觀點和使用者觀點，該產品可包括其他所需的器具(例如：針頭、注射筒等等)。

在此之後，本發明將以實例為參考作說明。然而，吾人應瞭解這些實例僅是為了說明的目的，而非意圖要對本發明的範疇加以限制。

實例

以下實驗組實例中使用的抗體是從可購得的類希瑪(Remsima，係由Celltrion公司製造)純化出來的英夫利昔單抗。

用於以下實驗組實例中的液體醫藥調配物之物理穩定性、化學穩定性和生物穩定性是用以方法測量的。

-混濁度

在波長600nm的吸光值是利用一UV-Vis分光光度計測量的。

-主要成份的含量

主要成份的含量(主要波峰%)是利用高壓液相層析法(HPLC)測量的。

-高分子量成份之含量

該高分子量成份之含量(峰前%)是利用依分子大小濾除的高壓液相層析法(HPLC)測量的。

-低分子量成份之含量

該低分子量成份之含量(峰後%)是利用依分子大小濾除的高壓液相層析法(HPLC)測量的。

-完整免疫球蛋白之含量G(完整之IgG%)

利用非還原毛細電泳-十二烷基硫酸鈉(NR CE-SDS)測量完整免疫球蛋白之含量G(%)。

-完整之重鏈與輕鏈含量(完整之HC+LC%)

利用還原毛細電泳-十二烷基硫酸鈉(R CE-SDS)測量完整重鏈與輕鏈的含量(%)。

-顯微鏡下才可見的顆粒之數目

實驗組實例1到4：利用微流量成像(MFI)測量顯微鏡下才可見的顆粒之數目。

實驗組實例5：利用蔽光液體顆粒計數器(型號：HIAC 9703)測量顯微鏡下才可見的顆粒之數目。

-氧化作用

利用液態色層分析術-質譜分析術(LC-MS)藉由胜肽圖譜測量重鏈Met 255的氧化(%)。

-電荷變異體

酸性和鹼性波峰(%)是利用離子交換-高壓液態層析術(IE-HPLC)測量的。

-TNF-α之結合親和力

TNF-α之結合親和力(%)是用酵素連結的免疫吸附檢驗(ELISA)測量的。

-黏度

利用裝備有流動池(B05感測器型式；50μm池深)的微毛細流動系統(視剪切速率：10³到10⁵s^-1)在一500μL注射筒中於25℃±0.1℃測量黏度。

實驗組實例1：比較糖醇與NaCl；比較乙酸鹽/組胺酸緩衝液與檸檬酸鹽/磷酸鹽緩衝液；比較pH 4-5.5與pH 6-7

為了製備用於實驗組實例1的液體醫藥調配物，製備每一緩衝液使其具有所想要的pH，並且對其添加山梨醇或NaCl。然後，對其添加一抗體並添加一表面活性劑，從而製備以下表1中所顯示的樣品。每一成份的特定含量顯示在以下表1之中。該緩衝液的濃度意指對應化合物之分子的/陰離子的濃度。總體積為1ml。

根據實例1至3和比較組實例1至8製備的液體醫藥調配物被貯存在40±2℃的溫度和75±5%的溼度經兩週。結果，包含NaCl的調配物(比較組實例1、2、4、5和7)全部顯示沉澱和似明膠的形式。此外，包含山梨醇但包含檸檬酸鈉的比較組實例3，以及包含山梨醇但包含磷酸鈉的比較組實例8亦顯示似明膠的形式。

在含山梨醇的調配物中，僅實例1、2和3以及比較組實例6未顯示明膠形式。在5±3℃的溫度貯存0、2和4週後測量該調配物的穩定性，且在40±2℃的溫度和75±5%的相對溼度貯存2週和4週後測量其穩定性。測量的結果顯示在以下表2到9之中。

混濁度

如以上表2中可見，調配物中pH值為4且含乙酸鹽作為緩衝劑的實例1就混濁度而言是最佳的，且尤其在40℃貯存四週後顯示0.0300或低於此值的吸光值。此外，吾人可見到pH值為5.5且含組胺酸作為緩衝劑的實例2和3也在40℃貯存四週後顯示0.0700或低於此值的吸光值。

然而，吾人可見到pH值為6且包含磷酸鹽作為緩衝劑的比較組實例6之調配物在40℃貯存二週和四週後顯示出顯著增加的混濁度。

高分子量成份之含量

如以上表3中可見，實例1的調配物在所有條件下均顯示最低之高分子量成份含量。尤其，實例1的調配物在貯存於40℃的溫度四週後顯示1.0%以下之高分子量成份含量。此外，表中可見實例2和3的調配物在貯存於40℃的溫度四週後顯示1.5%以下之高分子量成份之含量。

完整免疫球蛋白G的含量(完整IgG%)

如以上表4中可見，實例1到3之調配物中完整之免疫球蛋白的含量在40℃的溫度貯存四週後顯示為94.0%以上，其值高過比較組實例6的含量。

完整之重鏈與輕鏈含量(完整之HC+LC%)

如以上表5中可見，實例1至3的調配物中完整重鏈與輕鏈含量在40℃的溫度貯存四週後為98.0%以上，較比較組實例6為高。

氧化比率(重鏈Met 255)

如以上表6中可見，實例1至3的調配物中重鏈Met 255的氧化比率在40℃的溫度貯存四週後為2.5%以下，較比較組實例6為低。

電荷變異體(酸性波峰)

如以上表7中可見，實例1至3的調配物中的酸性波峰在40℃的溫度貯存四週後為35%以下，較比較組實例6為低。這指出實例1至3的調配物是穩定的調配物，其中去醯胺化(此一酸性波峰增加的主因)較少發生。

電荷變異體(鹼性波峰)

如以上表8中可見，實例1至3的調配物中的鹼性波峰在40℃的溫度貯存四週後為33%以上，較比較組實例6為高。

顯微鏡下才可見的顆粒(1.00μm，<100.00μm)之數目

如以上表9中可見，實例1至3的調配物中之顯微鏡下才可見的顆粒(1.00μm，<100.00μm)之數目在40℃的溫度貯存四週後為30,000以下，小於比較組實例6。

實驗組實例2：胺基酸的影響

為製備用於實驗組實例2的液體醫藥調配物，因此製備包含乙酸鈉的緩衝液以便有希望的pH值，並且對其添加山梨醇。然後對其添加一抗體並添加一表面活性劑與胺基酸/牛磺酸，從而製備以下表10中所示的試樣。每一成份的濃度顯示在以下表10中。緩衝液的濃度意指乙酸根陰離子的濃度，總體積為1ml。

¹⁾胺基酸或牛磺酸係以5%(w/v)以下之量添加。

比較組實例9、10、11和12的調配物分別包含天冬胺酸、組胺酸、離胺酸和精胺酸，其在50±2℃貯存24小時後變為固體。

對於包含其他胺基酸或牛磺酸的調配物而言，吾人測定在5±3℃和50±2℃貯存24小時的穩定性，但是在這些調配物之間和這些調配物與實例1調配物之間並無顯著的差異。

實驗組實例3：蛋白質濃度；表面活性劑濃度；以及糖的種類。

為製備用於實驗組實例3的液體醫藥調配物，因此製備包含乙酸鈉的緩衝液以使其具有希望的pH值，並對其添加山梨醇、甘露醇、海藻糖或蔗糖。然後對其添加一抗體並添加一表面活性劑，從而製備出以下表11中顯示的試樣。每一成份的含量顯示在以下表11中。緩衝液的濃度意指乙酸根陰離子的濃度。總體積為1ml。

在5±3℃的溫度貯存0、2和4週後測量該調配物的穩定性，並且在40±2℃和75±5%的相對濕度貯存2和4週後測量其穩定性。測量的結果顯示在以下表12至17之中。

蛋白質濃度

高分子量成份之含量

如以上表12中可見，當抗體濃度增加則高分子量成份之含量增加。然而，在抗體濃度為90至145mg/ml的範圍裡，於5℃和40℃貯存四週後高分子量成份之含量普遍為低。

表面活性劑濃度

顯微鏡下才可見的顆粒(1.00μm，<100.00μm)之數目

如以上表13中可見，當表面活性劑的濃度範圍從0.02至0.1%(w/v)，該顯微鏡下才可見的顆粒(1.00μm，<100.00μm)之數目在40℃貯存四週之後為10,000以下。

糖的種類

主要成份(主要波峰)之含量

如以上表14中可見，含山梨醇、甘露醇、海藻糖或蔗糖作為糖的調配物顯示在40℃貯存四週之後主成份含量為98%以上。

電荷變異體(酸性波峰)

如以上表15中可見，含山梨醇、甘露醇、海藻糖或蔗糖作為糖的調配物顯示在40℃貯存四週之後酸性波峰為35%以下。

顯微鏡下才可見的顆粒(1.00μm，<100.00μm)之數目

顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<100.00μm)之數目

如以上表16和17中可見，在含山梨醇、甘露醇、海藻糖或蔗糖作為糖的調配物中，在40℃貯存四週後顯微鏡下才可見的顆粒(1.00μm，<100.00μm)之數目為15,000以下，且顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<100.00μm)之數目在40℃貯存四週後為200以下。

實驗組實例4：表面活性劑的種類與螯合劑的影響

為製備用於實驗組實例4的液體醫藥調配物，因此製備包含乙酸鈉的緩衝液以具有希望的pH值，並對其添加山梨醇。然後對其添加一抗體並添加一表面活性劑或一表面活性劑和一螯合劑之混合物，從而製備出以下表18中顯示的試樣。每一成份的含量顯示在以下表18中。緩衝液的濃度意指乙酸根陰離子濃度。總體積為1ml。

在5±3℃的溫度、25±2℃的溫度和60±5%的相對溼度以及40±2℃和75±5%的相對溼度於封閉條件下貯存0、3和6週後，測量以上表18中所顯示調配物之穩定性。測量的結果顯示在以下表19和20中。

表面活性劑的種類

顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<100.00μm)之數目

如以上表19中可見，含聚山梨酯80作為表面活性劑之實例13調配物中，在40℃的溫度貯存六週後顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<100.00μm)之數目小於100(最小的)，且在含泊洛沙姆188作為表面活性劑之實例15的調配物中，在40℃的溫度貯存六週後顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<100.00μm)之數目為2,000以上(最大的)。

螯合劑(EDTA)的作用

氧化比率(重鏈Met 255)

表20

如以上表20中可見，將含有螯合劑(EDTA)之比較組實例13到15調配物於40℃貯存六週後，與不含螯合劑(EDTA)之實例13到15調配物作比較，重鏈Met 255的氧化比率增加。

實驗組實例5：長期之穩定性

為製備實驗組實例5中使用的液體醫藥調配物，因此製備包含乙酸鈉的緩衝液以使其具pH5.0，並對其添加山梨醇。然後，對其添加一抗體並添加一表面活性劑，從而製備以下表21顯示的試樣。每一成份的含量均顯示在以下表21中。緩衝液的濃度意指乙酸根陰離子的濃度。總體積為1ml。

於封閉條件下在5±3℃貯存0、3和6個月後，對表21中顯示的調配物之穩定性進行測量。測量結果顯示在以下表22到27之中。

顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<400.00μm)之數目

如以上表22中可見，在5℃貯存12個月後實例16的調配物中顯微鏡下才可見的顆粒(10.00μm，<400.00μm)之數目小至100以下。

完整免疫球蛋白之含量(完整之IgG%)

如以上表23中可見，在5℃貯存12個月後實例16的調配物中完整免疫球蛋白G之含量高達94%以上。

完整之重鏈與輕鏈含量(完整之HC+LC%)

如以上表24中可見，在5℃貯存12個月後實例16的調配物中完整的重鏈與輕鏈之含量高達99%以上。

高分子量成份之含量

表25

如以上表25中可見，在5℃貯存12個月後實例16的調配物中高分子量成份之含量低至1.0%以下。

低分子量成份之含量

如以上表26中可見，在5℃貯存12個月後實例16的調配物中低分子量成份之含量低至0.4%以下。

TNF-α之結合親和力

如以上表27中可見，實例16的調配物之TNF-α之結合親和力在5℃貯存12個月後為95%以上。

於封閉條件下在40±2℃貯存0、0.5和1個月後和在5±3℃貯存6個月後，對實例16的調配物之黏度對進行測量。測量的結果顯示在以下表28之中。

黏度(cP)

表28

如以上表28中可見，實例16的調配物之黏度在40℃±2℃的溫度貯存一個月後保持在低程度(8.0cp)且在5℃±3℃的溫度貯存六個月後保持在低程度(4.0cp)。

SEQ ID NO.1：Gln Phe Val Gly Ser Ser

SEQ ID NO.2：Tyr Ala Ser

SEQ ID NO.3：Gln Gln Ser His Ser Trp Pro Phe Thr

SEQ ID NO.4：Gly Phe Ile Phe Ser Asn His Trp

SEQ ID NO.5：Ile Arg Ser Lys Ser Ile Asn Ser Ala Thr

SEQ ID NO.6：Ser Arg Asn Tyr Tyr Gly Ser Thr Tyr Asp Tyr

SEQ ID NO.7：

SEQ ID NO.9：

SEQ ID NO.10：

Claims

一種穩定液體醫藥調配物，其含有：(A)一抗體或其與抗原結合的片段；(B)一表面活性劑；(C)一糖或其衍生物；以及(D)一包括有乙酸鹽或組胺酸的緩衝液。
之穩定液體醫藥調配物，其中該抗體(A)包括一結合至TNF-α的抗體。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該抗體(A)包括英夫利昔單抗、阿達木單抗、賽妥珠單抗、戈利木單抗或其混合物。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該抗體(A)包括一嵌合型人類-小鼠IgG單株抗體。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該抗體或其與抗原結合的片段(A)係包括：一輕鏈可變區，其包括一個包括有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：3之胺基酸序列的CDR3結構域；以及一重鏈可變區，其包括一個包括有SEQ ID NO：4之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：5之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：6之胺基酸序列的CDR3結構域。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該抗體或其與抗原結合的片段(A)係包括：一具有SEQ ID NO：7之胺基酸序列的輕鏈可變區；及一具有SEQ ID NO：8之胺基酸序列的重鏈可變區。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該抗體(A)係包括：一具有SEQ ID NO：9之胺基酸序列的輕鏈；及一具有SEQ ID NO： 10之胺基酸序列的重鏈。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中包含濃度10mg/ml至200mg/ml之所述抗體或其與抗原結合的片段(A)。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該表面活性劑(B)係包括聚山梨酯、泊洛沙姆或其混合物。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該表面活性劑(B)係包括聚山梨酯20、聚山梨酯40、聚山梨酯60、聚山梨酯80或其兩者以上之混合物。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該表面活性劑(B)係包括聚山梨酯80。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中包含濃度0.02%至0.1%(w/v)之所述表面活性劑(B)。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該糖(C)係包括單醣、雙醣、寡醣、多醣或其兩者以上之混合物，且該糖的衍生物(C)係包括糖醇、糖酸或其混合物。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該糖或其衍生物(C)係包括山梨醇、甘露醇、海藻糖、蔗糖或其兩者以上的混合物。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中包含濃度1%至10%(w/v)之所述糖或其衍生物(C)。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該緩衝液(D)係包括乙酸鹽。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該緩衝液(D)具有1mM至50mM的濃度。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其具有4.0至5.5的 pH值。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該調配物不含天冬胺酸、離胺酸、精胺酸或其混合物。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其中該調配物不含NaCl、KCl、NaF、KBr、NaBr、Na₂SO₄、NaSCN、K₂SO₄或其混合物。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其不含螯合劑。
如申請專利範圍第1項所述之穩定液體醫藥調配物，其在40℃±2℃貯存一個月之後具有0.5cp到10cp的黏度，或在5℃±3℃貯存六個月之後具有0.5cp到5cp的黏度。
一種穩定的液體醫藥調配物，其包括：(A)90mg/ml到145mg/ml之抗體或其與抗原結合的片段，其包括一輕鏈可變區及一重鏈可變區，所述輕鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：1之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：2之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：3之胺基酸序列的CDR3結構域；所述重鏈可變區係包括一個包括有SEQ ID NO：4之胺基酸序列的CDR1結構域、一個包括有SEQ ID NO：5之胺基酸序列的CDR2結構域、及一個包括有SEQ ID NO：6之胺基酸序列的CDR3結構域；(B)0.02%到0.1%(w/v)之表面活性劑；(C)1%到10%(w/v)之糖或其衍生物；以及(D)1mM到50mM之包括有乙酸鹽或組胺酸的緩衝液。
如申請專利範圍第1項至第23項中之任一項所述之穩定液體醫藥調配物，其係用於皮下注射。
如申請專利範圍第1項至第23項中之任一項所述之穩定液體醫藥調配物，其在使用前係不經受重組步驟、稀釋步驟或該二步驟的處理。
一種預填充注射筒，其係經填充以如申請專利範圍第1項至第23項中之任一項所述之穩定液體醫藥調配物。
一種自動注射器，其包含如申請專利範圍第26項所述之預填充注射筒。