TW201406758A

TW201406758A - 三環性化合物

Info

Publication number: TW201406758A
Application number: TW102122679A
Authority: TW
Inventors: Kiyoshi Nakayama; Yasuyuki Takeda; Noriyasu Haginoya; Hiroyuki Naito; Akiyoshi Mochizuki; Masanori Saitou; Takashi Odagiri; Yoshihiro Shibata; Tomoyuki Tsunemi; Naomi Shimazaki
Original assignee: Daiichi Sankyo Co Ltd
Priority date: 2012-06-28
Filing date: 2013-06-26
Publication date: 2014-02-16
Also published as: WO2014003098A1

Abstract

本發明提供抑制GSK3(glycogen synthase kinase 3)，而對於治療GSK相關之疾病有用之新穎化合物。係提供以下列通式所表示之化合物。□[式中，R1、R2、R3、R4、X1、X2各與說明書中之定義為同義。]所表示之化合物或其鹽。

Description

三環性化合物

本發明係關於具有肝醣合成酶激酶3(GSK3)抑制活性之三環性5-胺基喹啉酮(5-aminoquinolone)衍生物或其鹽。

肝醣合成酶激酶3(GSK3)，係作為將肝醣合成酶予以磷酸化之絲胺酸/蘇胺酸激醯而被發現(非專利文獻1)，現在已知存在α及β2個次型。由GSK3β基因缺損小鼠係胚致死來看(非專利文獻2)，其機能對於細胞的生存為重要，有報告在與癌有密切關連性的Akt信號(非專利文獻3)、Wnt信號等(非專利文獻4)的重要信號中，發揮廣泛的作用。相對於此，有報告GSK3α基因缺損小鼠並非胚致死(非專利文獻5)，而一部分糖代謝相關的機能與正常為不同。但是，其機能基本上係彼此互補，有報告在GSKα及β兩者的基因缺損之情形，會觀測到較強的信號抑制(非專利文獻6)。

GSK3的標的，除了肝醣合成酶以外，尚涵蓋類澱粉蛋白質、早老素(Presenilin)、β連環蛋白、週期素(cyclin)D1等多種(非專利文獻7)，而作為治療標的在各樣的疾病中受到重視。

在癌症領域中，藉由GSK3之β連環蛋白的磷酸化，在細胞內係負責β連環蛋白之分解，因結果會抑制轉錄因子Tcf所中介的基因表現，而其作為大腸癌之抑制因子的地位係廣泛為人接受(非專利文獻4)。

但是，近年來，對於MLL白血病、CML等白血病，有報告藉由GSK3抑制之抗腫瘤活性(非專利文獻8、9)，使用GSK3抑制劑LY2090314之針對急性白血病的臨床試驗也正在進行中。

作為抑制GSK3之化合物，已有多種的骨架被報告(非專利文獻10)，已有報告馬來醯亞胺衍生物(專利文獻1、非專利文獻11)、嘧啶衍生物(專利文獻2、非專利文獻12)、嘧啶酮衍生物(專利文獻3)、吡啶衍生物(專利文獻4)、唑衍生物(非專利文獻13)、喹啉酮衍生物(專利文獻5、非專利文獻14)等。

另一方面，作為具有三環性胺基喹啉酮結構之化合物，已有報告抑制P2Y12之化合物群(專利文獻6)。

先前技術文獻專利文獻

專利文獻1 WO2003/076398

專利文獻2 WO2003/070729

專利文獻3 WO2003/072579

專利文獻4 WO2003/068773

專利文獻5 WO2007/106537

專利文獻6 EP1650192

非專利文獻

非專利文獻1 Eur.J.Biochem. 107 519-527 (1980)

非專利文獻2 Nature 406 86-90 (2000)

非專利文獻3 Nature 378 785-789 (1995)

非專利文獻4 Science 272 1023-1026 (1996)

非專利文獻5 Cell Metab. 6 329-337 (2007)

非專利文獻6 Dev Cell. 12 957-971 (2007)

非專利文獻7 Int. J. Alzheimers Dis. 2011Article ID：505607 (2011)

非專利文獻8 Nature 455 1205-1209 (2008)

非專利文獻9 Blood 119 2335-2345 (2012)

非專利文獻10 Expert Opin.Ther.Patents 15 1315-1331 (2005)

非專利文獻11 Bioorg. Med. Chem. Lett. 15 899-903 (2005)

非專利文獻12 Bioorg. Med. Chem. Lett. 14 2127-2130 (2004)

非專利文獻13 J. Med. Chem 46 3333-3341 (2003)

非專利文獻14 Bioorg. Med. Chem. 20 1188-1200 (2012)

本發明提供新穎的GSK3抑制化合物。又，本發明提供含有GSK3抑制化合物之醫藥，例如抗癌劑。

本案發明人等努力研究之結果，發現具有以下列通式(1)所表示之結構的化合物或其鹽，係具有強大的GSK-3抑制活性，而完成了本發明。

亦即，本發明，係

[1]一種以通式(1)所表示之化合物或其鹽；

[式中，R₁表示羧基、胺甲醯基或氰基，R₂表示甲基或氫原子，R₃表示鹵素原子，R₄表示也可具有選自於下列A群之取代基之哌啶基、也可具有選自於下列A群之取代基之吡啶基、也可具有選自於下列A群之取代基之環己基(cyclohexyl)或氫原子，X₁表示C-H、C-F或N，X₂表示CH₂、N-H或S]

A群：也可經1~3個鹵素原子、羥基或甲氧基取代之C₁-C₆烷基、乙醯基、甲基磺醯基、羥基。

[2]如[1]之化合物或其鹽，其中R₁係羧基或氰基。

[3]一種化合物或其鹽，係選自於以下之群組中之一；

[4]一種肝醣合成酶激酶3(GSK3)抑制劑，包含如[1]至[3]中任一項之化合物或其鹽。

[5]一種醫藥，係將如[1]至[3]中任一項之化合物或其鹽作為有效成分。

[6]一種抗癌劑，係將如[1]至[3]中任一項之化合物或其鹽作為有效成分。

[7]一種醫藥組成物，含有如[1]至[3]中任一項之化合物或其鹽、及藥學上可容許之載體。

[8]一種癌之治療方法，其特徵為：投予如[1]至[3]中任一項之化合物或其鹽。

[9]如[6]之抗癌劑，其中該癌係血癌(白血病、淋巴瘤、多發性骨髓瘤)、腦腫瘤、頭頸部癌、食道癌、胃癌、闌尾癌、大腸癌、肛門癌、膽嚢癌、膽管癌、胰臟癌、消化管間質腫瘤、肺癌、肝癌、間皮瘤、甲狀腺癌、腎臟癌、前列腺癌、神經內分泌腫瘤、黑色素瘤、乳癌、子宮體癌、子宮頸癌、卵巢癌、骨肉瘤、軟部肉瘤、卡波西肉瘤、肌肉瘤、腎臟癌、膀胱癌或睪丸癌。

[10]如[8]之癌之治療方法，其中癌係血癌(白血病、淋巴瘤、多發性骨髓瘤)、腦腫瘤、頭頸部癌、食道癌、胃癌、闌尾癌、大腸癌、肛門癌、膽嚢癌、膽管癌、胰臟癌、消化管間質腫瘤、肺癌、肝癌、間皮瘤、甲狀腺癌、腎臟癌、前列腺癌、神經內分泌腫瘤、黑色素瘤、乳癌、子宮體癌、子宮頸癌、卵巢癌、骨肉瘤、軟部肉瘤、卡波西肉瘤、肌肉瘤、腎臟癌、膀胱癌或睪丸癌。

依據本發明，可提供具有GSK3抑制活性之以上式(1)所表示之新穎三環性化合物。如此的新穎化合物，係作為與GSK3機能相關之疾病之治療藥，例如抗癌劑為有用。

在本發明中，GSK3係指由GSK3基因所編碼之蛋白質。若無特別區別記載，係包括同分異構體GSKα 及GSKβ兩者。GSK3蛋白質，係包括由全長之GSK3基因所編碼的GSK3蛋白質或由GSK3基因變異體(包括缺損變異體、取代變異體或加成變異體)所編碼之GSK3蛋白質等。本發明中，GSK3也包括來自各種動物種的同系物(homolog)。

在本發明中，GSK3抑制劑，係指作為GSK3的激酶之作用的抑制劑。

在本發明中，「腫瘤」及「癌」之用語可互換地使用。又，於本發明中，有時會將腫瘤、惡性腫瘤、癌、惡性新生物、癌腫瘤、肉瘤等總稱為「腫瘤」或「癌」來表達。

在本發明中，「C₁~C₆烷基」，係指碳數1~6之直鏈、分支鏈之烷基。作為「C₁~C₆烷基」，係可列舉例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、第三丁基等。

作為「鹵素原子」，可列舉氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等。

以下說明關於式(1)中之各取代基。

下列通式(1)中，

R₁表示羧基、胺甲醯基或氰基。

R₂表示甲基或氫原子。

R₃表示鹵素原子，而氟原子或氯原子較佳，氟原子尤佳。

R₄表示也可具有選自於上述A群中之取代基之哌啶基、也可具有選自於上述A群中之取代基之吡啶基、也可具有選自於上述A群中之取代基之環己基或氫原子。

在此，哌啶基及吡啶基之鍵結位置不特別限定，但較佳於3位或4位之位置鍵結。

於哌啶基、吡啶基及環己基取代之取代基不特別限定，於哌啶基及吡啶基之情形，較佳在氮原子上取代，作為取代基，尤佳為乙醯基及甲基。作為環己基之取代基，較佳為羥基。

X₁表示C-H、C-F或N。

X₂表示CH₂、N-H或S。

又，本發明之化合物更佳為下列中任一化合物。

當本發明之以通式(1)所表示之化合物具有胺基等鹼性基的情形，可依期望而製成醫藥上可容許之鹽。作為如此之鹽，可列舉例如鹽酸鹽、氫碘酸鹽等鹵化氫酸鹽；硝酸鹽、過氯酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等無機酸鹽；甲烷磺酸鹽、三氟甲烷磺酸鹽、乙烷磺酸鹽等低級烷磺酸鹽；苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽等芳基磺酸鹽；甲酸、乙酸、蘋果酸、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、草酸鹽、馬來酸鹽等有機酸鹽；及鳥胺酸鹽、麩胺酸鹽、天冬胺酸鹽等胺基酸鹽；，較佳為氫鹵酸鹽及有機酸鹽。

當本發明之以通式(1)所表示之化合物具有羧基等酸性基的情形，一般可形成鹼加成鹽。作為醫藥上可容許之鹽，可列舉例如鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽等鹼金屬鹽；鈣鹽、鎂鹽等鹼土類金屬鹽；銨鹽等無機鹽；二苄胺鹽、味啉鹽、苯基甘胺酸烷酯鹽、乙二胺鹽、N-甲基葡糖胺鹽、二乙胺鹽、三乙胺鹽、環己胺鹽、二環己胺鹽、N,N’-二苄基乙二胺鹽、二乙醇胺鹽、N-苄基-N-(2-苯基乙氧基)胺鹽、哌鹽、四甲基銨鹽、參(羥基甲基)胺基甲烷鹽等有機胺鹽等。

本發明之以通式(1)所表示之化合物或其鹽，有時也作為游離體或溶劑合物而存在。也有因吸收空氣中之水分等，而作為水合物存在。作為溶劑合物，只要是醫藥上可容許者，並不特別限定，但具體而言，較佳為水合物、乙醇合物等。又，在以通式(1)所表示之本發明化合物中存在氮原子的情形，也可成為N-氧化物體，此等溶劑合物及N-氧化物體也包括在本發明之範圍。

本發明之以通式(1)所表示之化合物，取決於取代基之種類或組合，會存在順式體、反式體等幾何異構物、互變異構物或d體、l體等光學異構物等各種異構物，但本發明之化合物，當未特別限定時，也包括此等全部的異構物、立體異構物及任一比例之此等異構物及立體異構物混合物。

本發明之以通式(1)所表示之化合物，也會於構成之原子之一或多數包含非天然之比例之原子同位體。作為原子同位體，可列舉例如氘(²H)、氚(³H)、碘-125(¹²⁵I)或碳-14(¹⁴C)等。此等化合物係有用於作為治療或預防劑、研究試藥，例如分析試藥、及診斷劑，例如體內影像診斷劑。以通式(1)所表示之化合物的所有同位體變種，不論是否為放射性，均包括在本發明之範圍內。

又，本發明在本發明亦包含，於活體內之生理條件下藉由因酵素、胃酸等的反應，而變換為本發明之醫藥組成物的有效成分之化合物(1)的化合物，亦即發生酵素性氧化、還原、水解等而變化為化合物(1)之化合物或因胃酸等而發生水解等變化為化合物(1)之「醫藥上可容許之前驅藥化合物」。

作為上述前驅藥，當化合物(1)存在胺基時，可列舉該胺基經醯基化、烷基化、磷酸化之化合物(例如該胺基經二十醯基化、丙胺醯基化、戊基胺基羰基化、(5-甲基-2-側氧基-1,3-二氧雜環戊烯-4-基)甲氧基羰基化、四氫呋喃基化、吡咯烷基甲基化、三甲基乙醯氧基甲基化、第三丁基化之化合物等)等，當化合物(1)存在羥基時，可列舉該羥基經醯基化、烷基化、磷酸化、硼酸化之化合物(例如該羥基經乙醯基化、棕櫚醯基化、丙醯基化、三甲基乙醯基化、琥珀醯基化、富馬醯基化、丙胺醯基化、二甲胺基甲基羰基化之化合物等。)等。又，當化合物(I)存在羧基時，可列舉該羧基經酯化、醯胺化之化合物(例如該羧基經乙基酯化、苯基酯化、羧基甲基酯化、二甲胺基甲基酯化、三甲基乙醯氧基甲基酯化、乙氧基羰氧基乙基酯化、醯胺化或甲基醯胺化之化合物等。)等。

本發明之化合物之前驅藥，可依公知方法從化合物(1)來製造。又，本發明之化合物之前驅藥也包括，於廣川書店1990年刊「醫藥品之開發」第7卷分子設計163頁~198頁所記載之於生理的條件會變化為化合物(1)者。

其次，說明關於以通式(1)所表示之化合物之代表性的製造法。本發明之化合物可以利用各種製造法製造，以下所示之製造法為一例，本發明不應限定於此等例來解釋。又，反應時，視需要，可將取代基以適當保護基保護而進行，保護基之種類不特別限定。在此使用之原料可以市售品的形式購入，或為文獻習知之化合物、或可參考實施例或參考例來合成。

[製造法1]

當可取得或合成具有硝基之苯甲酸2的情形，可如以下方式進行合成。後半之中間體6以後之製造步驟，較佳順序係因化合物而異。又，烯胺4中之取代基R，係甲基、乙基、異丙基、第三丁基等烷基，COOR代表酯基。此酯基即使替換為氰基，也能同樣地進行合成。

以下顯示上述示意圖之各步驟(示意圖中，R₂、R₃、R₄、X₁、X₂與上述為同義。)。

步驟1

從化合物1往2之硝基化反應，係於一般已知之硝基化之條件進行(Albright,L.F.；Carr.R.V.C.；Schmitt,R.J.Eds.Nitration；ACS Symposium Series 623,1996)。具體而言，關於容易進行硝基化之基質，可使用乙酸、濃硫酸等作為溶劑，於室溫使用1莫耳~過量莫耳之硝酸鉀實施。當係硝基化不易進行之基質的情形，可將濃硫酸或乙酸酐、三氟乙酸酐作為溶劑，藉由在加熱條件使用大量過剩的硝酸、發煙硝酸而實施。亦有不使用溶劑，僅以發煙硝酸進行硝基化的情形。又，作為硝基源，亦有使用硝酸二銨鈰(IV)等鹽、亞硝酸丁酯等酯的情形。又，也有報告使二氧化氮與臭氧氣體共存之方法(Suzuki,H.；Murashima,T.；Shimizu,K.；Tsukamoto,K.Chem.Lett.1991,817-818)。

步驟2

從化合物往23之變換，係藉由在對於反應不造成不利影響之適當溶劑(二氯甲烷、四氫呋喃等)中，觸媒量之N,N-二甲基甲醯胺存在下，使1~過量莫耳之草醯氯作用而實施。反應時間為30分鐘~24小時，反應溫度為0℃~80℃，較佳為0℃~室溫。作為試藥也可使用亞硫醯氯。一般而言，係將試藥及餾去溶劑之殘渣直接用在下一步驟。

步驟3

從化合物3往5之變換，可藉由在對於反應不造成不利影響之適當溶劑(甲苯、四氫呋喃、乙腈等)中，對於對應的烯胺1莫耳，使1莫耳~數莫耳之醯氯作用而實施。視需要有時也使三乙胺、二異丙基乙胺等鹼1莫耳~數莫耳共存。反應溫度係於0℃~100℃之範圍，較佳為0℃~室溫，當欲進行至環化反應的情形，也可於鹼共存下，加熱至50℃~100℃。反應時間較佳為30分鐘~10小時較理想，又更佳為約30分鐘~3小時。

步驟4

從化合物5往6之環化反應，係在對於反應不造成不利影響之適當溶劑(四氫呋喃、丙酮、乙腈等)中，使用氫化鈉、碳酸鉀等適當的鹼1莫耳~數莫耳來實施。可在反應溫度0℃~100℃之範圍進行。使用氫化鈉時，較佳為0℃~40℃，使用碳酸鉀時，較佳為60℃~100℃。反應時間較佳為約30分鐘~10小時，又更佳為約30分鐘~3小時。

步驟5

從化合物6往7之還原反應，係在對於反應不造成不利影響之適當溶劑(N,N-二甲基甲醯胺、二氯乙烷等)中，於氫氣環境下，對於基質使用10~100wt%之鈀碳觸媒來實施。反應時間係因基質而異，為數小時~數日。反應溫度較佳為約0℃~40℃。從化合物9往10、12往13之還原反應也同樣進行。

也可使用氫氧化鈀、鉑碳觸媒等其他觸媒，於酸性條件使用鐵‧鋅等金屬來還原。又，也可使用連二亞硫酸鈉等鹽。

步驟6

從化合物7往8之取代反應，係在對於反應不造成不利影響之適當的溶劑(N,N-二甲基亞碸、N-甲基吡咯烷酮等)中，對於母核1莫耳使用胺1莫耳~數莫耳而實施。視情形，使三乙胺等鹼1莫耳~數莫耳共存。喹啉酮母核的情形，反應溫度較佳為40℃~150℃，更佳為反應溫度60℃~100℃。反應時間以數小時~數日進行。當啶母核(X1為N原子)的情形，母核的反應性較低，係以反應溫度80℃~120℃、反應時間12小時~數日進行，但較佳為於微波反應裝置，於反應溫度160℃加熱1小時之方法。此外，也可藉由進行使用鈀等金屬觸媒之偶聯反應來合成。於此情形，反應部位係較佳為不是氟原子，而為溴原子、氯原子。作為溶劑，尤佳為1,4-二烷、甲苯，係相對於母核1莫耳，使用胺或芳香族胺1莫耳~數莫耳、作為鹼之碳酸銫、第三丁醇鈉等1莫耳~數莫耳、作為鈀觸媒之參(二亞苄基丙酮)二鈀等0.01~0.1莫耳、作為觸媒配體之4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫噸或2,2’-雙(二苯基膦基)-1,1’-聯萘等0.01~0.2莫耳，以反應溫度70℃~120℃、反應時間6小時~數日來實施。從化合物10往11、從13往14的情形亦同。

步驟7

從化合物6往9之脫酯化，當甲酯、乙酯、異丙酯之情形，係於一般的鹼性條件進行。係於醇等易與水混合之適當的溶劑中，使用1莫耳~大量過剩莫耳之氫氧化鈉水溶液，較佳為約3莫耳至10莫耳。反應溫度為室溫~100℃，較佳為50℃~80℃。反應時間係以約數小時~1日進行。氫氧化鈉以外，可使用氫氧化鉀、氫氧化鋰等。又，視情形，也可選擇如濃鹽酸-乙酸之酸性條件下的反應。另一方面，於第三丁酯之情形，係在對於反應不造成不利影響之適當的溶劑(二氯甲烷等)中，使數莫耳~大量過剩之三氟乙酸作用。反應溫度較佳為0℃~室溫、反應時間較佳為1小時~1日。關於化合物7往10、化合物8往11也同樣進行。

步驟8

從化合物9往12之醯胺化步驟，亦可在對於反應不造成不利影響之適當的溶劑(二氯甲烷等)中，對於1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基)碳二亞胺等縮合劑加入 HOBt(1-羥基苯并三唑)等酸性添加劑來實施，但較佳為使用(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽((Benzotriazol-1-yloxy)tripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate)1莫耳~數莫耳、三乙胺等鹼數莫耳~大量過剩莫耳、氯化銨等氮源數莫耳~大量過剩莫耳來實施。反應溫度為約0℃~40℃，反應時間為約數小時~數日。又，取決於基質，如在使用草醯氯等製備醯氯後，於反應系加入氨水之簡便方法亦可合成。溶劑係較佳為對於反應不造成不利影響，而易與水混合者(四氫呋喃、乙腈、二烷等)。反應溫度係於約0℃~60℃進行。反應時間為30分鐘~數日，較佳為30分鐘~數小時。另一方面，也可不水解酯，而與氨/甲醇溶液或氨水於封管中加熱來合成。以反應溫度為60℃~100℃、反應時間為半日~數日來進行。關於從化合物10往13、從化合物11往14之步驟也同樣地進行。

步驟9

從化合物14到15之氰基化步驟，也可使三光氣、五氯化磷等脫水劑作用而進行，但較佳採用記載於Tetrahedron Letter,No.21,pp1813-1816，1977之使用三氟乙酸酐的方法。在對於反應不造成不利影響之溶劑(二氯乙烷等)中，使用三氟乙酸酐1莫耳~過量莫耳、三乙胺等鹼 1莫耳~過量莫耳。或也可於作為溶劑兼鹼之吡啶中進行反應。反應溫度較佳為0℃~40℃，反應時間較佳為30分鐘~數日。

[製造法2]

可從不具硝基之苯甲酸，以如以下方法合成。進行環化反應之時機，係因化合物而異。氮源，係可利用苄胺、烯丙胺、疊氮化物、氨等(示意圖中，R、R₂、R₃、R₄、X₁、X₂與上述為同義)。

步驟10

從化合物18往20之N原子導入步驟，可在對於反應不造成不利影響之溶劑(N,N-二甲基甲醯胺等)中，使對甲氧基苄胺類1莫耳~數莫耳作用以進行。較佳選擇對甲氧基苄胺、烯丙胺等容易脫保護之胺。反應溫度為60℃~200℃，較佳為80℃~100℃。反應時間係以數小時~數日來進行。作為其他氮源，也可選擇疊氮化鈉。關於從化合物19往21之步驟，也同樣地進行。

步驟11

從化合物21往11之對甲氧基苄胺之脫保護步驟，可如PROTECTIVE GROUPS in Organic Synthesis 所記載，使用於氫氣環境下使用鈀碳觸媒等之接觸還原、或使用DDQ等之氧化性除去法。較佳為在對於反應不造成不利影響之適當溶劑(二氯甲烷、二氯乙烷等)中，使用三氟乙酸數莫耳~大量過剩，視需要添加觸媒量~數莫耳之苯甲醚的方法。係以反應溫度為室溫~60℃，反應時間從數小時至約半日來進行。之後的變換為羧酸、與取代反應，係與步驟6及步驟7同樣地進行。

使用烯丙胺時，可如PROTECTIVE GROUPS in Organic Synthesis所記載，使用利用烯丙基之異構化之方法實施。較佳為於醇溶液中，使用鈀碳觸媒10~100wt%，使甲烷磺酸或三氟乙酸1莫耳~大量過剩莫耳共存。反應溫度係於室溫~100℃，較佳為60~80℃。反應時間係費時數小時~1日而進行。之後的變換為羧酸、與取代反應，係與步驟6及步驟7同樣地進行

[製造法3]

喹啉環之9位為氫原子之化合物，也可利用相當之苯甲酸，但可利用如以下之將鹵素原子還原性地除去的方法而簡便地合成(示意圖中，R表示酯基、羧基、胺甲醯基、腈，R₂、R₃、R₄、X₁、X₂與上述為同義)。

步驟12

從化合物22往23之還原反應，係使用對於反應不造成不利影響之適當溶劑(二氯乙烷、甲醇、乙醇、含BHT等抗氧化劑之四氫呋喃等)進行。較佳為使用非質子性溶劑與醇之混合溶劑。使用鈀碳等觸媒10~100wt%，較佳為約30~50wt%，於氫氣環境下進行。反應溫度為0~40℃，但較佳為室溫。反應時間係以數小時~數日進行。

[製造法4]

啶型之化合物，可從如下之經溴化之中間體25，以與上述「製造法2」同樣之程序合成。

步驟13

從化合物24往25之溴化反應，係在對於反應不造成不利影響之適當的溶劑(四氫呋喃、二乙醚等)中，使2莫耳以上之甲基鋰或正丁基鋰等適當的鹼作用後，使用溴源(1,2-二溴四氯乙烷或苯基三甲基三溴化銨等)1莫耳~大量過剩莫耳，較佳為約數莫耳來實施。以反應溫度為約-100℃~室溫，反應時間為30分鐘~6小時進行。

[製造法5]

前述烯胺4，可參考如文獻(Synthesis,(7),1162-1170,2006(A法)或Europian Journal Organic Chemistry(3)505-511,2005(B法))之習知方法合成。

本發明之化合物，係抑制GSK3，因而可作為GSK3抑制劑。已知GSK3係涉及糖尿病、阿茲海默病，因而本發明之化合物也可用於該等疾病之治療，但較佳用於癌症治療。

治療的對象之癌的種類，只要是確認對於GSK3抑制劑有感受性之癌即可，不特別限定，但可列舉血癌(白血病、淋巴瘤、多發性骨髓瘤)、腦腫瘤、頭頸部癌、食道癌、胃癌、闌尾癌、大腸癌、肛門癌、膽嚢癌、膽管癌、胰臟癌、消化管間質腫瘤、肺癌、肝癌、間皮瘤、甲狀腺癌、腎臟癌、前列腺癌、神經內分泌腫瘤、黑色素瘤、乳癌、子宮體癌、子宮頸癌、卵巢癌、骨肉瘤、軟部肉瘤、卡波西肉瘤、肌肉瘤、腎臟癌、膀胱癌或睪丸癌。

較佳為可確認MLL(mixed-lineage leukemia)基因之轉座的白血病或急性白血病等血癌、可觀測到GSK3之活化的胰臟癌、大腸癌、神經膠質瘤細胞、黑色素瘤等。

細胞之增殖抑制活性，可使用該技術領域中具有通常知識者通常使用之增殖抑制試驗法檢驗。細胞之增殖抑制活性，可藉由例如，如下列之試驗例2所記載，比較在試驗化合物存在下或非存在下之細胞(例如：腫瘤細胞)增殖的程度來實施。增殖程度，可使用例如測定活細胞之試驗系來檢驗。作為活細胞之測定方法，可列舉例如[³H]-胸腺核苷之納入試驗、BrdU法或MTT分析法等。

又，體內(in vivo)之抗腫瘤活性，可使用該技術領域中具有通常知識者通常使用之抗腫瘤試驗法檢驗。例如可藉由對於小鼠、大鼠等移植各種腫瘤細胞，確認移植細胞之存活後，將本發明之化合物進行經口投予、靜脈內投予等，在數日~數週後，比較於藥劑無投予群中之腫瘤增殖以及於化合物投予群中之腫瘤增殖，來確認本發明之在體內(in vivo)的抗腫瘤活性。

本發明之醫藥組成物，係含有本發明之化合物與藥學上可容許之載體，而可作為靜脈內注射、肌肉內注射、皮下注射等各種注射劑，或是利用經口投予或經皮投予等各種方法投予。藥學上可容許之載體，係指涉及將本發明之化合物或含本發明之化合物的組成物，從某器官或臟器輸送至其他器官或臟器的藥學上可容許之材料(例如：賦形劑、稀釋劑、添加劑、溶劑等)。

作為製劑之製備方法，可因應投予法而選擇適當的製劑(例如：經口劑或注射劑)，並以通常使用之各種製劑之製備法製備。作為經口劑，可例示例如錠劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、片劑、溶液劑、糖漿劑、酏劑、乳劑、或油性或水性之懸浮液等。經口投予的情形，可維持游離體狀態，也可為鹽狀態。水性製劑，可藉由與藥學上可容許之酸形成酸加成物，或製成鈉等鹼金屬鹽來製備。注射劑之情形，可於製劑中使用安定劑、防腐劑或溶解輔助劑等。也可作為使用時製備之製劑，而將亦可含該等輔助劑等之溶液容納於容器後，以冷凍乾燥等製成固體製劑。又，可將一次投予分量容納於一個容器，也可將多次投予分量容納於一個容器。

作為固體製劑，可列舉例如錠劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑、或片劑。該等固體製劑，可以同時含有本發明之化合物及藥學上可容許之添加物。作為添加物，可列舉例如填充劑類、增量劑類、黏結劑類、崩散劑類、溶解促進劑類、濕潤劑類或潤滑劑類，可將此等視需要選擇並混合而製劑化。

作為液體製劑，可列舉例如溶液劑、糖漿劑、酏劑、乳劑、或懸浮劑。該等液體製劑，可同時含有本發明之化合物及藥學上可容許之添加物。作為添加物，可列舉例如懸浮化劑或乳化劑，可將此等視需要選擇並混合，而製劑化。

本發明之化合物，可用於哺乳類，特別是人之癌症治療。投予量及投予間隔，係取決於疾病的場所、患者的身高、體重、性別或病歷，而可根據醫師之判斷適當選擇。對於人投予本發明之化合物之情形，投予量之範圍係每1日約0.01mg/kg體重~約500mg/kg體重，較佳為約0.1mg/kg體重~約100mg/kg體重。對人投予之情形，較佳為每1日1次、或分為2次至4次投予，較佳以適當間隔重複。又，1日量，係根據醫師之判斷，視需要也可超過上述量。

本發明之化合物也可以與其他抗腫瘤劑併用。可列舉例如抗腫瘤抗生素、抗腫瘤性植物成分、BRM(生物學的回應性控制物質)、荷爾蒙、維生素、抗腫瘤性抗體、分子標靶藥、烷基化劑、代謝拮抗劑之其他抗腫瘤劑等。

更具體而言，作為烷基化劑，可列舉例如氮芥、氮芥N-氧化物或是苯丁酸氮芥(chlorambucil)等烷基化劑、卡波醌(carboquone)或是噻替哌(thiotepa)等氮丙啶(aziridine)系烷基化劑、二溴甘露醇或是二溴半乳糖醇(dibromodulcitol)等環氧化物系烷基化劑、卡莫司汀(carmustine)、洛莫司汀(lomustine)、司莫司汀(semustine)、尼莫司汀鹽酸鹽(nimustine hydrochloride)、鏈脲佐菌素(streptozocin)、氯乙鏈脲菌素(chlorozotocin)或是雷莫司汀(ranimustine)等亞硝脲系烷基化劑、白消安(busulfan)、甲苯磺酸英丙舒凡(improsulfan tosilate)或達卡巴嗪(dacarbazine)等。

作為各種代謝拮抗劑，可列舉例如6-巰基嘌呤、6-硫鳥嘌呤或是硫肌苷等嘌呤代謝拮抗劑、氟尿嘧啶、替加氟(tegafur)、替加氟‧尿嘧啶、卡莫氟(carmofur)、氟鐵龍(doxifluridine)、溴尿苷(broxuridine)、阿糖胞苷(cytarabine)或是依諾他濱(enocitabine)等嘧啶代謝拮抗劑、甲氨蝶呤或是三甲曲沙(trimetrexate)等葉酸代謝拮抗劑等。

作為抗腫瘤性抗生素，可列舉例如絲裂黴素C、博來黴素、培洛黴素、柔紅黴素、阿柔比星、多柔比星、吡柔比星、THP-阿黴素(adriamycin)、4’-Epi-阿黴素(doxorubicin)或是表柔比星等蒽環(anthracycline)系抗生素抗腫瘤劑、色黴素(chromomycin)A3或放線菌素D等。

作為抗腫瘤性植物成分，可列舉例如長春地辛(vindesine)、長春新鹼(vincristine)或是長春鹼(vinblastine)等長春花生物鹼類、紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)等紫杉類、或依托泊苷(etoposide)或是替尼泊苷(teniposide)等鬼臼毒素(epipodophyllotoxin)類。

作為BRM，可列舉例如腫瘤壞死因子或吲哚美辛(indomethacin)等。

作為荷爾蒙，可列舉例如氫化可的松、地塞米松、甲基潑尼松龍、潑尼松龍、普拉睪酮，倍他米松、曲安奈德(triamcinolone)、羥甲烯龍(oxymetholone)、諾龍(nandrolone)、美替諾龍(methenolone)、磷雌酚(fosfestrol)、乙炔基雌二酚、氯地孕酮(chlormadinone)或甲羥孕酮(medroxyprogesterone)等。

作為維生素，可列舉例如維生素C或維生素A等。

作為抗腫瘤性抗體、分子標靶藥，可列舉曲妥珠單抗(trastuzumab)、利妥昔單抗(rituximab)、西妥昔單抗(cetuximab)、尼妥珠單抗(nimotuzumab)、地諾單抗(denosumab)、貝伐單抗(bevacizumab)、英夫利昔單抗(infliximab)、甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate)、吉非替尼(gefitinib)、厄洛替尼(erlotinib)、舒尼替尼(sunitinib)、拉帕替尼(lapatinib)、索拉非尼(sorafenib)等。

作為其他抗腫瘤劑，可列舉例如順鉑(cisplatin)、卡鉑(carboplatin)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、喜樹鹼(tamoxifen)、他莫昔芬(camptothecin)、異環磷醯胺(ifosfamide)、環磷醯胺、melphalan(馬法蘭)、L-天冬醯胺酸酶、酯葡內酯(aceglatone)、裂褶多糖(sizofiran)、必醫你舒(picibanil)、甲基芐肼(procarbazine)、哌泊溴烷(pipoburoman)、新制癌菌素(neocarzinostatin)、羥基脲、烏苯美司(ubenimex)或克速鎮(krestin)等。

本發明中也包括特徵為投予本發明化合物或其鹽之癌症的預防方法及/或治療方法。

再者，本發明中也包括用於製造前述醫藥之本發明之化合物、其鹽或此等的溶劑合物的用途。

[實施例]

利用以下所示實施例具體地說明本發明，但本發明不限定於此等，並不受此等之任何含意的限定性解釋。又，於本說明書中，未特別記載的試藥、溶劑及起始材料，可從市售之供給來源取得，或可依文獻公知之製法合成。

以下出示本發明相關之參考例與實施例(合成)。

實施例1

(1R)-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-8-{[3-(吡啶-2-基)丙基]胺基}-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

[(4R)-4-甲基-1,3-四氫噻唑-2-亞基]乙酸乙酯

於(2R)-2-胺基丙烷-1-硫醇(5g、39.17mmol)之乙醇溶液(50mL)中，於冰浴下加入三乙胺(5.46mL、39.17mmol)及氰基乙酸乙酯(4.52g、39.17mmol)。將反應液加溫到80℃，攪拌3日。使反應液回到室溫，以氯仿稀釋，並以飽和碳酸氫鈉水溶液及飽和食鹽水洗滌。以無水硫酸鈉乾燥後，以快速矽膠管柱層析(己烷：乙酸乙酯=2：1)精製，獲得油狀物之標題化合物(6.83g)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.12-1.28(6H,m),2.84(1H,dd,J=11.4,6.5Hz),3.33(1H,dd,J=9.9,5.7Hz),3.93-4.03(2H,m),4.08-4.18(1H,d,J=40.0Hz),4.51(1H,s),8.16(1H,brs)

ESI m/z188(M+H)⁺

(步驟2)

(1R)-7,8,9-三氟-1-甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

使2,3,4,5-四氟-6-硝基-苯甲酸(20.80g、86.99mmol)懸浮於二氯甲烷(200mL)，於室溫滴加草醯氯(17.51mL，200.74mmol)及N,N-二甲基甲醯胺1滴，攪拌18小時。對於已將反應液減壓濃縮得到的殘留物之乙腈(200mL)溶液，於冰浴下加入[(4R)-4-甲基-1,3-四氫噻唑-2-亞基]乙酸乙酯(12.53g、66.91mmol)、二異丙基乙胺(34.97mL、200.74mmol)。加熱到90℃，進行4小時攪拌後，將反應液減壓濃縮。將殘留物以乙酸乙酯稀釋，以10%檸檬酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液及飽和食鹽水洗滌。以無水硫酸鈉乾燥後，以快速矽膠管柱層析(flash silica gel chromatography)(氯仿：乙酸乙酯=2：1)精製，獲得固體之標題化合物(10.1g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.39(3H,t,J=7.1Hz),1.51(3H,d,J=6.6Hz),3.05(1H,d,J=11.5Hz),3.63(1H,dd,J=11.5,7.6Hz),4.41(2H,q,J=7.1Hz),5.74-5.81(1H,m)

(步驟3)

(1R)-6-胺基-7,8,9-三氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

將(1R)-7,8,9-三氟-1-甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(3.91g、10.07mmol)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(50mL)，加入10%Pd-C(AD，濕重3g)，於氫氣環境下，於室溫進行30小時攪拌。將觸媒濾去後，將濾液注入水中，濾取析出之固體，藉以獲得固體之標題化合物(2.79g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.43(3H,t,J=7.1Hz),1.44(3H,d,J=6.6Hz),2.95(1H,d,J=11.5Hz),3.55(1H,dd,J=11.5,7.7Hz),4.39-4.49(2H,m),5.68-5.75(1H,m),7.00(2H,s)

(步驟4)

(1R)-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-8-{[3-(吡啶-2-基)丙基]胺基}-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

將(1R)-6-胺基-7,8,9-三氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(2.79g、7.79mmol)溶於二甲基亞碸(50mL)，加入3-(2-吡啶基)丙胺(4.88g、23.36mmol)、三乙胺(7.60mL， 54.50mmol)，於120℃攪拌8小時、於90℃攪拌15小時。將反應液以氯仿稀釋，並以水、飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鈉乾燥。將溶劑以減壓餾去後，以快速矽膠管柱層析(1%甲醇/氯仿→2%)精製，獲得油狀物之標題化合物(3.8g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.39(3H,d,J=6.1Hz),1.42(3H,t,J=7.1Hz),2.04-2.12(2H,m),2.87-2.93(3H,m),3.45-3.56(3H,m),4.39-4.47(2H,m),4.53(1H,br s),5.64-5.74(1H,m),6.74(2H,br s),7.11-7.18(2H,m),7.61(1H,td,J=7.6,1.9Hz),8.51-8.57(1H,m)

(步驟5)

將(1R)-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-8-{[3-(吡啶-2-基)丙基]胺基}-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(3.80g、8.01mmol)溶於乙醇(50mL)，滴加1M氫氧化鈉水溶液(48.05mL，48.05mmol)。將反應液加熱到60℃，攪拌2.5小時。將大部分的乙醇減壓餾去後，於反應液中加入1M鹽酸水(50mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液，以10%甲醇/氯仿萃取。減壓濃縮後，將殘留物以二乙醚、二氯甲烷之混合液固體化、進行濾取，獲得標題化合物(0.59g)固體。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.40(3H,d,J=6.7Hz),2.08-2.15(2H,m),2.88-3.00(3H,m),3.52-3.63(3H,m),5.01(1H,br s),5.72-5.78(1H,m),6.49(2H,br s),7.13-7.18(2H,m),7.62(1H,td,J=7.6,1.8Hz),8.55(1H,d,J=4.3Hz)

HRESIMS計算值C₂₁H₂₀F₂N₄O₃S+H 447.13024，實測值447.12693

實施例2

(1R)-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-8-(甲胺基)-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

(1R)-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-8-(甲胺基)-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

將於實施例1之步驟3所獲得之(1R)-6-胺基-7,8,9-三氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(300mg、0.84mmol)溶於二甲基亞碸(20mL)，添加甲胺鹽酸鹽(452mg、6.70mmol)、三乙胺(254mg，2.51mmol)，於100℃進行19小時攪拌。將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鈉乾燥。將溶劑以減壓餾去後，將殘留物以二乙醚洗滌，獲得固體之標題化合物(288mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.36-1.45(6H,m),2.88(1H,d,J=11.5Hz),3.12-3.18(3H,m),3.49(1H,dd,J=11.5,7.7Hz),4.06(1H,br s),4.36-4.51(2H,m),5.66-5.72(1H,m),6.76(2H,br s)

(步驟2)

將(1R)-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-8-(甲胺基)-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(288mg、0.78mmol)溶於二甲基亞碸(5mL)，滴加1M氫氧化鈉水溶液(4.0mL，4.0mmol)。將反應液加熱到60℃，進行2小時攪拌。將大部分的乙醇減壓餾去後，加入1N鹽酸水(4mL)，以10%甲醇/氯仿萃取。減壓濃縮後，將殘留物以二乙醚、乙醇之混合液固體化、進行濾取，獲得固體之標題化合物(70mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.30(3H,d,J=6.1Hz),3.00-3.11(3H,m),3.14(1H,d,J=11.7Hz),3.58(1H,dd,J=11.7,7.7Hz),5.67-5.81(1H,m),6.38(1H,br s),7.18(2H,br s)

HRESIMS計算值：C₁₄H₁₃F₂N₃O₃S+H 342.07239，實測值342.06854

實施例3

(1R)-6-胺基-8-{[(2S)-1,4-二烷-2-基甲基]胺基]-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸

於實施例1之步驟3獲得之(1R)-6-胺基-7,8,9-三氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(50mg、0.14mmol)之二甲基亞碸溶液(1ml)中，加入1-[(2S)-1,4-二烷-2-基]甲胺(49mg、0.42mmol)與三乙胺(58μl，0.42mmol)，於100度攪拌一晚。以乙酸乙酯稀釋後以水洗滌，以無水硫酸鈉乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(乙酸乙酯-己烷系)精製，獲得固體。於獲得之固體(55mg)之乙醇懸浮液(1.5ml)中，加入1M氫氧化鈉水溶液(780μl，0.78mmol)，於60度攪拌4小時。以1M鹽酸中和，加入飽和碳酸氫鈉水溶液，以含10%甲醇之氯仿萃取並將溶劑減壓餾去。加入乙酸乙酯，濾取析出物，獲得固體之標題化合物(38mg、69%)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.30(3H,d,J=5.7Hz),3.15(1H,d,J=11.5Hz),3.25(1H,dd,J=11.5,9.7Hz),3.33-3.77(9H,m),5.71-5.78(1H,m),6.26(1H,br s),7.23(2H,br s)

MS(ESI)m/z：428[M+H]⁺

實施例4

(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

(1R)-6-胺基-8-{[(1-第三丁氧基羰基)哌啶-4-基]胺基}-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

將於實施例1之步驟3所獲得之(1R)-6-胺基-7,8,9-三氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(100mg、0.28mmol)、4-胺基-1-第三丁氧基羰基哌啶(190mg、0.95mmol)、N-甲基吡咯烷酮(1ml)之混合物於100℃進行11小時攪拌。將反應混合物分配到乙酸乙酯-飽和碳酸氫鈉水溶液，將有機層以飽和食鹽水洗滌2次，以硫酸鎂乾燥。將溶劑減壓餾去，殘留物以矽膠層析(己烷：乙酸乙酯=8：2→2：8)精製，獲得固體之標題化合物(145mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.38-1.44(10H,m),1.47(9H,s),2.83-2.96(3H,m),3.50(1H,dd,J=11.2,7.6Hz),3.76-3.85(2H,m),4.03-4.10(2H,m),4.39-4.47(2H,m),5.65-5.72(1H,m),6.79(1H,br s)

(步驟2)

(1R)-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-8-(哌啶-4-基胺基)-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

將(1R)-6-胺基-8-{[(1-第三丁氧基羰基)哌啶-4-基]胺基}-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(140mg)溶於二氯甲烷(1ml)，於冰冷下加入三氟乙酸(2ml)，於室溫攪拌30分鐘。將溶劑減壓餾去，獲得標題化合物(155mg)固體。

¹H-NMR(DMSO-D6)δ：1.26(3H,t,J=7.0Hz),1.30(3H,d,J=6.4Hz),1.65-1.75(2H,m),2.00-2.06(2H,m),2.93-3.03(2H,m),3.11(1H,d,J=11.4Hz),3.29-3.36(2H,m),3.55(1H,dd,J=11.4,7.3Hz),3.77-3.86(1H,m),4.20(2H,q,J=7.0Hz),5.56-5.77(3H,m),8.21-8.31(1H,m),8.52-8.59(1H,m)

(步驟3)

將(1R)-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-8-(哌啶-4-基胺基)-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(56mg、0.13mmol)溶於二氯甲烷(1ml)，於冰冷下加入三乙胺(27μl)、乙醯氯(12μl)，於同溫進行0.5小時攪拌。將反應混合物分配到乙酸乙酯-飽和碳酸氫鈉水溶液，將有機層以硫酸鎂乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(氯仿：甲醇=19：1)精製，獲得固體。

將上述所獲得之固體(40mg、0.08mmol)溶於四氫呋喃(0.5ml)-乙醇(0.5ml)，加入1M氫氧化鈉水溶液(0.29ml)，於60℃攪拌8小時。將反應混合物放冷後，於冰冷下加入1M鹽酸(0.3ml)後，分配到乙酸乙酯-飽和食鹽水。將有機層以硫酸鎂乾燥後將溶劑減壓餾去，獲得固體之標題化合物(25mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.37-1.44(2H,m),1.41(3H,d,J=6.3Hz),2.12-2.20(2H,m),2.13(3H,s),2.74-2.83(1H,m),2.98(1H,d,J=11.5Hz),3.16-3.25(1H,m),3.58(1H,dd,J=11.5,7.8Hz),3.83-4.09(3H,m),4.60(1H,d,J=12.9Hz),5.71-5.79(1H,m),6.54(2H,br s)

實施例5

(1R)-8-{[(3S)-1-乙醯基哌啶-3-基]胺基}-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

(1R)-6-胺基-7,8,9-三氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸

於實施例1之步驟3所獲得之(1R)-6-胺基-7,8,9-三氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(11.27g)之乙醇(50ml)懸浮液中，於65℃加熱下，費時10分鐘滴加1M氫氧化鈉水溶液(33.5ml)。於同溫度進行50分鐘攪拌後，冷卻至室溫。於反應液中加入乙酸(1.92ml)，於室溫攪拌，濾取析出之固體，以水洗滌。一邊以真空泵浦加熱到40℃一邊乾燥，而獲得含莫耳純度約7成之目的羧酸體的混合物(3.75g)固體。此中間體不進一步精製而用在次一反應。

ESI-MS m/z：331(M+H)⁺

(步驟2)

將於前步驟所獲得之固體(200mg)、1-[(3S)-3-胺基-1-哌啶基]乙酮(175mg、1.23mmol)及二異丙基乙胺(200μl、1.15mmol)溶於二甲基亞碸(3.0ml)，於100℃攪拌2日。將反應液以乙酸乙酯稀釋，以水、飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鈉乾燥。將溶劑餾去後，付諸矽膠管柱層析(二氯甲烷：甲醇=50：1)，獲得固體之標題化合物(93mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.37-1.43(3H,m),1.53-1.86(3H,m),2.00-2.20(4H,m),2.96(1H,t,J=11.4Hz),3.18-3.66(3.7H,m),3.79-4.07(2.3H,m),4.14-4.36(1H,m),5.66-5.82(1H,m),6.31-6.76(2H,br)

MS(ESI)m/z：453(M+H)⁺

實施例6

(1R)-8-{[(3R)-1-乙醯基哌啶-3-基]胺基}-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸

使用於實施例5之步驟1所獲得之固體及1-[(3R)-3-胺基-1-哌啶基]乙酮，依與實施例5之步驟2同樣的方法，獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.41(3H,d,J=6.0Hz),1.51-1.71(2H,m),1.71-1.89(1H,m),2.05-2.19(4H,m),2.97(1H,t,J=11.2Hz),3.13-3.40(2H,m),3.48-3.66(1.5H,m),3.78-4.01(2H,m),4.08-4.32(1.5H,m),5.65-5.84(1H,m),6.32-6.78(2H,m)

MS(ESI)m/z：453(M+H)⁺

實施例7

(1R)-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-8-{[(3R)-1-(甲基磺醯基)哌啶-3-基]胺基}-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸

使用於實施例5之步驟1所獲得之固體及(3R)-1-(甲基磺醯基)哌啶-3-基胺，依與實施例5之步驟2同樣的方法，獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：-4.45(1H,s),1.40(3H,d,J=6.3Hz),1.66-1.81(2H,m),1.82-2.00(2H,m),2.82(3H,s),2.96(1H,d,J=11.2Hz),3.15-3.27(2H,m),3.28-3.38(1H,m),3.46-3.65(2H,m),4.04-4.16(1H,m),4.43-4.54(1H,m),5.70-5.81(1H,m),6.36-6.68(2H,br)

MS(ESI)m/z：489(M+H)⁺

實施例8

(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

(1R)-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

使3-氯-2,4,5-三氟-6-硝基-苯甲酸(6.24g、24.4mmol)懸浮於二氯甲烷(80ml)，滴加2滴N,N-二甲基甲醯胺，於室溫費時20分鐘滴加草醯氯(4.26ml、48.8mmol)。於室溫進行2小時攪拌後，減壓濃縮，進行甲苯共沸，獲得油狀的殘留物。將上述殘留物的一部分(4.76g)溶於四氫呋喃(60ml)，於冰冷下滴加實施例1之步驟1中所獲得之[(4R)-4-甲基-1,3-四氫噻唑-2-亞基]乙酸乙酯(2.50g、13.4mmol)之四氫呋喃溶液(10ml)。於室溫攪拌1小時後，於反應液中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，以乙酸乙酯萃取。將有機層以飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鈉乾燥。過濾後將溶劑減壓餾去，以矽膠管柱層析(己烷：乙酸乙酯=4：1)粗略精製，獲得油狀物(4.14g)。將上述油狀物溶於四氫呋喃(50mL)，於冰浴下加入氫化鈉(55%，於油中，390mg、9.75mmol)。於室溫攪拌45分鐘後，於冰浴下，在反應液中加入10%檸檬酸水溶液，以乙酸乙酯萃取。將有機層以水、飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鈉乾燥。過濾後餾去溶劑，以矽膠管柱層析(己烷：乙酸乙酯=1：1)精製。將獲得之固體以乙酸乙酯洗滌並濾取，獲得固體之標題化合物(1.74g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.24-1.45(6H,m),3.01(1H,d,J=11.4Hz),3.59(1H,dd,J=10.5,7.3Hz),4.38-4.44(2H,m),6.72-6.78(1H,m)

(步驟2)

(1R)-6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

(1R)-6-胺基-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

將(1R)-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(1.74g、4.30mmol)溶於四氫呋喃(30ml)及N,N-二甲基甲醯胺(15ml)之混合液，加入5%鈀碳(AD，濕重870mg)，在氫氣環境下於室溫攪拌6小時。一邊將觸媒以乙酸乙酯洗滌一邊濾去，將獲得之濾液以水洗滌2次、以飽和食鹽水洗滌1次，並以無水硫酸鈉乾燥。過濾後餾去溶劑，以矽膠管柱層析(己烷：乙酸乙酯=1：1→乙酸乙酯)精製，獲得低極性成分的標題9-氯體(1.15g)、高極性成分的標題9-氫體(174mg)固體。

9-氯體

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.23(3H,d,J=6.0Hz),1.42(3H,t,J=6.9Hz),2.90(1H,d,J=11.0Hz),3.53(1H,dd,J=11.0,6.9Hz),4.40-4.47(2H,m),6.66-6.72(1H,m)

9-H體

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.43(3H,t,J=7.3Hz),1.50(3H,d,J=6.4Hz),2.94(1H,d,J=10.1Hz),3.56(1H,dd,J=10.5,7.8Hz),4.45(2H,q,J=7.0Hz),5.02-5.09(1H,m),6.19(1H,dd,J=11.7,6.6Hz)

(步驟3)

(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

於(1R)-6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(251mg)之二甲基亞碸(2.0mL)溶液中，加入1-乙醯基-4-胺基哌啶(300mg)，於65℃攪拌2日。將溶劑於減壓下餾去後，於殘渣中加入二氯甲烷、飽和氯化鈉水溶液。以二氯甲烷萃取二次，將合併的有機層以無水硫酸鈉乾燥。將溶劑於減壓下餾去，以矽膠管柱(二氯甲烷：甲醇=50：1→30：1)精製殘渣，獲得固體之目的物(327mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.11(3H,d,J=6.4Hz),1.31-1.53(5H,m),1.97-2.23(5H,m),2.74-2.91(2H,m),3.12-3.27(1H,m),3.49(1H,dd,J=11.4,6.9Hz),3.75-3.89(1H,m),3.89-4.02(1H,m),4.28-4.36(1H,m),4.38-4.48(2H,m),4.48-4.58(1H,m),6.37-6.47(1H,m),6.70-7.20(2H,br)

(步驟4)

於(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(327mg)之四氫呋喃(5.0mL)溶液中，加入10%鈀碳觸媒(AD，濕重118mg)，於氫氣環境下攪拌4小時。加入乙醇(2.5mL)，於氫氣環境下進行5小時攪拌後，使用矽鈰石分濾觸媒。將濾液於減壓下濃縮，將殘渣以矽膠管柱(二氯甲烷：甲醇=50：1→5：1)精製，獲得固體之目的物(246mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.07-1.65(8H,m),1.92-2.60(5H,m),2.63-2.80(1H,m),2.86-3.06(1H,m),3.06-4.01(4H,m),4.26-4.72(4H,m),6.14-6.88(4H,m)

(步驟5)

於(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(246mg)之乙醇(50mL)溶液中，加入1M氫氧化鈉水溶液(1595μL)，於70℃攪拌3小時。於反應液中加入1M鹽酸(1600μL)而中和後，加入二氯甲烷、飽和氯化鈉水溶液。以二氯甲烷萃取，將合併的有機層以無水硫酸鈉乾燥。將溶劑於減壓下餾去，以矽膠管柱(二氯甲烷：甲醇=50：1→25：1)精製殘渣，獲得固體之標題化合物(128mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.39-1.71(5H,m),2.01-2.26(5H,m),2.88-3.05(2H,m),3.22-3.36(1H,m),3.55-3.74(2H,m),3.80-3.93(1H,m),4.36-4.55(2H,m),5.09-5.28(1H,m),5.69-5.82(1H,m),6.30-6.57(2H,br)

MS(ESI)m/z：435(M+H)⁺

實施例9

(1R)-6-胺基-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

(1R)-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

於實施例8之步驟2所獲得之(1R)-6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(257mg)之二甲基亞碸(2mL)溶液中，加入4-胺基-1-甲基哌啶(261μL)，於65℃攪拌28小時。將溶劑於減壓下餾去後，將殘渣以矽膠管柱(二氯甲烷：甲醇=50：1→30：1)精製，獲得標題化合物(322mg)固體。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.10(3H,d,J=6.4Hz),1.41(3H,t,J=7.1Hz),1.45-1.67(2H,m),1.92-2.05(1H,m),2.05-2.22(3H,m),2.30(3H,s),2.70-2.89(3H,m),3.48(1H,dd,J=11.0,6.9Hz),3.67-3.82(1H,m),4.29-4.50(3H,m),6.38-6.48(1H,m),6.67-7.16(2H,br)

(步驟2)

(1R)-6-胺基-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

於(1R)-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(322mg)之THF(5.0mL)溶液中，加入10%鈀碳觸媒(113mg)，於氫氣環境下攪拌4小時。加入乙醇(2.5mL)，於氫氣環境下攪拌4.5小時後，加入乙酸(200μL)，於氫氣環境下攪拌6小時。使用矽鈰石分濾觸媒，將濾液於減壓下濃縮。將殘渣以矽膠管柱(僅二氯甲烷→二氯甲烷：甲醇=10：1)精製，獲得標題化合物(280mg)固體。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.43(3H,t,J=7.1Hz),1.49(3H,d,J=6.6Hz),1.55-1.69(2H,m),2.00-2.12(2H,m),2.13-2.25(2H,m),2.32(3H,s),2.74-2.86(2H,m),2.89(1H,d,J=11.2Hz),3.27-3.41(1H,m),3.54(1H,dd,J=11.4,7.7Hz),4.18-4.28(1H,m),4.37-4.50(2H,m),5.02-5.14(1H,m),5.63(1H,d,J=6.6Hz),6.62-6.98(2H,br)

(步驟3)

於(1R)-6-胺基-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(280mg)之乙醇(50mL)溶液中，加入1M氫氧化鈉水溶液(1933μL)，於70℃攪拌3小時。於反應液中加入1M鹽酸(1933μL)，中和後，加入二氯甲烷、飽和氯化鈉水溶液。以二氯甲烷萃取，將合併的有機層以無水硫酸鈉乾燥。將溶劑於減壓下餾去，將殘渣以矽膠管柱(二氯甲烷：甲醇=100：1→30：1)精製，獲得固體之標題化合物(225mg)。

¹H-NMR(CD₃OD)δ：1.42(3H,d,J=6.4Hz),1.56-1.76(2H,m),1.99-2.12(2H,m),2.23-2.38(5H,m),2.86-2.98(2H,m),3.11(1H,d,J=11.4Hz),3.46-3.80(2H,m),5.35-5.51(1H,m),5.98(1H,d,J=6.4Hz)

MS(ESI)m/z：407(M+H)⁺

實施例10

(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於實施例8之步驟5所獲得之(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸(106mg)之二氯甲烷(4.0mL)溶液中，加入氯化銨(123mg)、(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽(183mg)、三乙胺(367μL)，於室溫攪拌5日。於反應液中加入二氯甲烷、飽和氯化鈉水溶液。以二氯甲烷萃取，將合併的有機層以無水硫酸鈉乾燥。將溶劑於減壓下餾去，將殘渣以矽膠管柱(二氯甲烷：甲醇=50：1→15：1)及矽膠管柱(乙酸乙酯：甲醇=50：1→15：1)精製，獲得固體之標題化合物(74mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.41-1.63(5H,m),2.06-2.18(5H,m),2.87(1H,d,J=11.2Hz),2.91-3.02(1H,m), 3.19-3.33(1H,m),3.45-3.65(2H,m),3.80-3.91(1H,m),4.23-4.31(1H,m),4.42-4.52(1H,m),5.03-5.14(1H,m),5.52-5.61(1H,m),5.72(1H,d,J=6.6Hz),6.54-6.95(2H,m),10.02(1H,d,J=5.1Hz)

MS(ESI)m/z：434(M+H)⁺

實施例11

(1R)-6-胺基-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於實施例9之步驟3所獲得之(1R)-6-胺基-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2-二氫-5H-[1,3]噻唑并[3,2-a]喹啉-4-羧酸(123mg)之二氯甲烷(5.0mL)懸浮液中，加入氯化銨(165mg)、(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽(236mg)、三乙胺(485μL)，於室溫攪拌3日。於反應液中加入二氯甲烷、飽和氯化鈉水溶液。以二氯甲烷萃取，將合併的有機層以無水硫酸鈉乾燥。將溶劑於減壓下餾去，以NH矽膠管柱(二氯甲烷：甲醇=100：1→50：1)及NH矽膠管柱(乙酸乙酯：甲醇=20：1→15：1)精製殘渣，獲得固體之標題化合物(74mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.48(3H,d,J=6.3Hz),1.56-1.76(2H,m),2.00-2.12(4H,m),2.14-2.26(2H,m), 2.32(3H,s),2.76-2.86(2H,m),2.86(1H,d,J=11.2Hz),3.30-3.42(1H,m),3.48(1H,dd,J=11.2,7.8Hz),4.25-4.33(1H,m),5.03-5.13(1H,m),5.52-5.60(1H,m),5.70(1H,d,J=6.6Hz),10.04(1H,d,J=4.6Hz)

MS(ESI)m/z：406(M+H)⁺

實施例12

(1R)-6-胺基-7,9-二氟-1-甲基-5-側氧基-8-{[2-(吡啶-2-基胺基)乙基]胺基}-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

(4R)-4-甲基-1,2,3-氧雜四氫噻唑-3-羧酸第三丁酯2,2-二氧化物

於咪唑(10.7g、56.8mmol)、三乙胺(12.5ml、89.6mmol)之二氯甲烷(200ml)溶液，-於50℃，加入亞硫醯氯(3.3ml、44.8mmol)及[(R)-2-羥基-1-甲基乙基]胺甲酸第三丁酯(7.0g、40mmol)之二氯甲烷(100ml)溶液，將混合物於-5~0℃攪拌24小時。於反應液中加入水(300ml)後，分層為二層。將有機層以飽和食鹽水(300ml)洗滌後，以無水硫酸鈉乾燥。於減壓下將溶劑餾去，將獲得之殘留成分溶於乙腈(200ml)。於此溶液中，於冰冷下加入過碘酸鈉(9.4g、44mmol)、氯化釕(83mg、0.4mmol)及水(200ml)，將混合物於-5~0℃攪拌4小時半。於反應液中加入水(300ml)後，以二乙醚(300ml)萃取2次。將萃取液以飽和食鹽水(300ml)洗滌後，以無水硫酸鈉乾燥。於減壓下將溶劑餾去，將獲得之殘留成分以正己烷洗滌，藉以獲得固體之標題化合物(8.3g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.51(3H,d,J=6.3Hz),1.56(9H,s),4.20(1H,dd,J=9.2,2.8Hz),4.37-4.46(1H,m),4.67(1H,dd,J=9.0,6.1Hz)

(步驟2)

(5R)-2-(1-乙氧基羰基亞甲基)-5-甲基吡咯啶-1-羧酸第三丁酯

於乙醯乙酸乙酯(5.5g、42.1mmol)之四氫呋喃(100ml)溶液中，於冰冷下加入氫化鈉(55%，於油中，1.8g，42.1mmol)，將混合物於同溫攪拌15分鐘。於反應液中加入正丁基鋰(1.67M，於正己烷中、25.7ml、42.1mmol)，將混合物於同溫攪拌15分鐘。於反應液中加入(4R)-4-甲基-1,2,3-氧雜四氫噻唑-3-羧酸第三丁酯2,2-二氧化物(5.0g、21.1mmol)，將混合物於室溫攪拌17小時。於反應液中加入6M鹽酸(17.5ml)，並於室溫攪拌1小時。於反應液中加入飽和碳酸氫鈉水溶液後，以乙酸乙酯(200ml×3)萃取。將萃取液以飽和食鹽水(200ml)洗滌後，以無水硫酸鈉乾燥。於減壓下將溶劑餾去，將獲得之殘留成分付諸矽膠管柱層析(200g)，將正己烷：乙酸乙酯=10：1溶出組分於減壓下濃縮，藉以獲得固體之標題化合物(3.3g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.19-1.27(6H,m),1.53(9H,s),1.54-1.67(1H,m),1.91-2.06(1H,m),2.87-3.01(1H,m),3.41-3.52(1H,m),4.07-4.16(2H,m),4.23-4.33(1H,m),6.47(1H,s)

(步驟3)

2-[(5R)-5-甲基吡咯啶-2-亞基]乙酸乙酯

於(5R)-2-(1-乙氧基羰基亞甲基)-5-甲基吡咯啶-1-羧酸第三丁酯(3.3g、12.3mmol)之二氯乙烷(60ml)溶液中加入三氟乙酸(6ml)，將混合物於室溫攪拌27小時。於反應液中加入冰水，以碳酸氫鈉水溶液中和後，分離為二層。將水層以氯仿(50ml×2)萃取，合併有機層，以飽和食鹽水(50ml)洗滌後，以無水硫酸鈉乾燥。於減壓下將溶劑餾去，將獲得之殘留成分付諸矽膠管柱層析(50g)，將正己烷：乙酸乙酯=7：1溶出組分於減壓下濃縮，藉以獲得油狀物之標題化合物(1.8g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.23(3H,d,J=6.6Hz),1.25(3H,t,J=7.3Hz),1.45-1.56(1H,m),2.07-2.16(1H,m),2.52-2.68(2H,m),3.84-3.95(1H,m),4.10(2H,q,J=7.1Hz),4.48(1H,s),7.90(1H,br s)

(步驟4)

2-[(5R)-5-甲基吡咯啶-2-亞基]-3-側氧基-3-(2,3,4,5-四氟-6-硝基苯基)丙酸酯乙酯

於2,3,4,5-四氟-6-硝基苯甲酸(3.1g、12.8mmol)之二氯甲烷(50ml)溶液中加入N,N-二甲基甲醯胺(5滴)及草醯氯(3.3ml、38.3mmol)，將混合物於室溫攪拌13小時。將反應液於減壓下濃縮，並懸浮於甲苯(20ml)。於此懸浮液中加入2-[(5R)-5-甲基吡咯啶-2-亞基]乙酸乙酯(1.8g、10.7mmol)之甲苯(10ml)溶液，將混合物於室溫攪拌30分鐘。於反應液中加入飽和碳酸氫鈉水溶液(50ml)後，以乙酸乙酯(50ml×3)萃取。將萃取液以飽和食鹽水(50ml)洗滌後，以無水硫酸鈉乾燥。於減壓下將溶劑餾去，將獲得之殘留成分付諸矽膠管柱層析(60g)，並將正己烷：乙酸乙酯=3：1溶出組分進行減壓下濃縮，藉此獲得油狀物之標題化合物(3.8g)，將其直接用在下一反應。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.10(3H,t,J=7.1Hz),1.39(3H,d,J=6.6Hz),1.63-1.74(1H,m),2.26-2.38(1H,m),3.24(1H,br s),3.44(1H,br s),3.95-4.08(2H,m),4.09-4.22(1H,m),11.52(1H,br s)

(步驟5)

(1R)-7,8,9-三氟-1-甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

於2-[(5R)-5-甲基吡咯啶-2-亞基]-3-側氧基-3-(2,3,4,5-四氟-6-硝基苯基)丙酸酯乙酯(3.8g)之1,4-二烷(30ml)溶液中，加入氫化鈉(55%，於油中，0.53g，12.2mmol)，將混合物於室溫攪拌15小時。於冰冷下，在反應液中加入10%檸檬酸水溶液後，以乙酸乙酯(30ml×3)萃取。將萃取液以飽和食鹽水(30ml)洗滌後，以無水硫酸鈉乾燥。於減壓下將溶劑餾去，將獲得之殘留成分付諸矽膠管柱層析，並將正己烷：乙酸乙酯=1：1溶出組分進行減壓下濃縮，藉以獲得固體之標題化合物(1.1g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.37(3H,t,J=6.8Hz),1.44(3H,d,J=6.8Hz),2.05-2.12(1H,m),2.39-2.51(1H,m),3.36-3.57(2H,m),4.37(2H,q,J=7.1Hz),5.28-5.38(1H,m)

(步驟6)

(1R)-7,8,9-三氟-1-甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

於(1R)-7,8,9-三氟-1-甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(1.1g、3.0mmol)中加入乙酸(8ml)及鹽酸(8ml)，將混合物於80℃進行1小時半攪拌。冷卻後，於反應液中加入冰水，濾取析出物，獲得標題化合物(0.9g)固體。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.50(3H,d,J=6.6Hz),2.20(1H,dd,J=12.8,8.7Hz),2.44-2.58(1H,m),3.54-3.67(1H,m),4.17(1H,dd,J=20.4,9.2Hz),5.41-5.52(1H,m),14.15(1H,br s)

(步驟7)

(1R)-6-胺基-7,8,9-三氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

於(1R)-7,8,9-三氟-1-甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸(0.9g、26mmol)之N,N-二甲基甲醯胺(30ml)溶液加入10%鈀碳觸媒(AD，濕重0.2g)，將混合物於氫氣環境下於室溫攪拌3日。將反應液以矽鈰石過濾後，將濾液以乙酸乙酯(60ml)稀釋，依序以水(30ml×3)、飽和食鹽水(30ml)洗滌後，以無水硫酸鈉乾燥。於減壓下將溶劑餾去，將所獲得之殘留成分以乙醇與二乙醚之混合溶劑洗滌，藉以獲得固體之標題化合物(0.35g)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.41(3H,d,J=6.3Hz),2.04-2.13(1H,m),2.35-2.48(1H,m),3.45-3.58(1H,m),4.08(1H,dd,J=20.0,9.5Hz),5.31-5.41(1H,m),6.81(2H,br s)

(步驟8)

於(1R)-6-胺基-7,8,9-三氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸(100mg、0.32mmol)之二甲基亞碸(3ml)溶液中加入2-(2-吡啶基胺基)乙胺2鹽酸鹽(0.2g、0.96mmol)及三乙胺(0.27mL，1.9mmol)，將混合物於氮氣環境下於100℃進行15小時攪拌。於反應液中加入冰水，以乙酸乙酯(40ml×3)萃取。將萃取液依序以水(40ml×3)、飽和食鹽水(40ml)洗滌後，以無水硫酸鈉乾燥。於減壓下將溶劑餾去，將獲得之殘留成分以分取用薄層矽膠層析(氯仿：甲醇=20：1)精製。將獲得之殘留成分以乙酸乙酯及正己烷之混合溶劑進行固化，藉以獲得固體之標題化合物(25mg)。

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ：1.34(3H,d,J=6.3Hz),2.00(1H,dd,J=12.7,9.0Hz),2.27-2.40(1H,m),3.38-3.50(1H,m),3.70(2H,br s),3.77(2H,br s),4.02(1H,dd,J=19.7,9.6Hz),4.69(1H,s),5.28(1H,br s),6.06(1H,s),6.44(1H,d,J=8.5Hz),6.48(2H,br s),6.63(1H,dd,J=6.8,5.1Hz),7.41(1H,td,J=7.3,2.2Hz),8.12(1H,d,J=3.9Hz)

MS(FAB)：430(M+H)⁺

實施例13

(1R)-6-胺基-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

(1R)-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

將3-氯-2,4,5-三氟-6-硝基-苯甲酸(39g、153mmol)懸浮於二氯甲烷(300ml)，加入草醯氯(40ml)、N,N-二甲基甲醯胺(2滴)後，攪拌17小時。將反應混合物減壓濃縮，並於殘留物中加入甲苯，再度減壓濃縮。再度加入甲苯，將溶劑減壓餾去。

將殘留物溶於甲苯(400ml)，於冰冷下滴加實施例12之步驟3中所獲得之2-[(5R)-5-甲基吡咯啶-2-亞基]乙酸乙酯(26g、154mmol)之甲苯(40ml)溶液。將反應混合物於室溫攪拌1小時後，倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中，以乙酸乙酯萃取。將水層以乙酸乙酯萃取後，合併有機層，以硫酸鎂乾燥，將溶劑減壓餾去。將殘留物溶於丙酮(300ml)，添加碳酸鉀(26g)，進行12小時加熱回流。以1M鹽酸調成弱酸性，以氯仿萃取，以飽和食鹽水洗滌，以硫酸鎂乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(二氯甲烷：乙酸乙酯=10：0→9：1)精製，獲得固體之標題化合物(34.6g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.35-1.39(6H,m),2.01-2.08(1H,m),2.41-2.51(1H,m),3.37-3.53(2H,m),4.34-4.39(2H,m),6.17-6.25(1H,m)

(步驟2)

(1R)-6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

(1R)-6-胺基-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

將(1R)-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(34.6g、89.54mmol)溶於二氯乙烷(200ml)-乙醇(200ml)之混合溶劑，添加10%鈀碳觸媒(AD，濕重7.6g)，於氫氣環境下攪拌16小時。將觸媒濾去後將溶劑減壓餾去，並將殘留物以矽膠層析(二氯甲烷：乙酸乙酯=4：1)精製，獲得固體之氯體標題化合物(22.1g)。

又，亦獲得固體(與雜質之混合物)之氯已還原之化合物(1.15g)的。此化合物不經過進一步精製而用在下一步驟。

9-Cl體

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.29(3H,d,J=6.4Hz),1.39(3H,t,J=7.1Hz),1.90-1.97(1H,m),2.33-2.43(1H,m),3.31-3.37(2H,m),4.39(2H,q,J=7.2Hz),6.14-6.22(1H,m)

9-H體

無設備資料

(步驟3)

(1R)-6-胺基-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

將(1R)-6-胺基-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(1.15g)溶於四氫呋喃(10ml)-乙醇(5ml)，加入1M氫氧化鈉水溶液(7.1ml)，攪拌18小時。加入乙酸(0.82ml)，攪拌後濾取不溶物，水洗、乾燥，獲得固體之標題化合物(1.05g)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.32(3H,d,J=6.4Hz),2.00(1H,dd,J=12.4,8.7Hz),2.30-2.42(1H,m),3.47-3.57(1H,m),3.83(1H,dd,J=19.3,8.7Hz),5.01-5.10(1H,m),6.97(1H,dd,J=12.4,6.4Hz),7.81(1H,br s)

(步驟4)

於(1R)-6-胺基-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸(300mg、0.88mmol)、1-甲基-哌啶-4-基胺(350mg)中加入二甲基亞碸(4ml)，於100℃攪拌3小時。將反應混合物冷卻至室溫後，將溶劑減壓餾去。將殘留物以NH矽膠層析(二氯甲烷：甲醇=10：0~8：2)精製，獲得固體之標題化合物(254mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.43(3H,d,J=6.4Hz),1.59-1.83(2H,m),2.02-2.11(3H,m),2.17-2.24(2H,m),2.33(3H,s),2.36-2.45(1H,m),2.77-2.87(2H,m),3.33-3.43(1H,m),3.46-3.58(1H,m),4.06(1H,dd,J=19.5,9.4Hz),4.40-4.46(1H,m),4.76-4.84(1H,m),5.75(1H,d,J=6.4Hz),6.51(2H,br s)

實施例14

(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7-氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

於實施例13之步驟3所獲得之(1R)-6-胺基-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸(300mg、0.88mmol)、1-乙醯基-哌啶-4-基胺(440mg)中加入二甲基亞碸(4ml)，於100℃攪拌3小時。將反應混合物冷卻至室溫後將溶劑減壓餾去。將殘留物分配到氯仿-飽和碳酸氫鈉水溶液，將有機層以硫酸鎂乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(二氯甲烷：甲醇=10：0→9：1)精製，獲得固體之標題化合物(292mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.44(3H,d,J=6.9Hz),1.48-1.55(2H,m),2.05-2.17(6H,m),2.36-2.46(1H,m),2.92-2.99(1H,m),3.24-3.32(1H,m),3.48-3.65(2H,m),3.82-3.90(1H,m),4.03-4.11(1H,m),4.39-4.42(1H,m),4.45-4.52(1H,m),4.78-4.85(1H,m),5.77(1H,d,J=6.4Hz),6.54(2H,br s)

實施例15

(1R)-6-胺基-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

(步驟1)

(1R)-6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

於實施例13之步驟2所獲得之(1R)-6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(4.9g、13.7mmol)中加入乙醇(50ml)，加熱至60℃而成為均勻溶液。於同溫加入1M氫氧化鈉水溶液(41ml)，進行1.5小時攪拌後，加入乙酸 (3.2ml)，冷卻至室溫。濾取析出物，水洗、醚洗後乾燥，獲得固體之標題化合物(4.5g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.33(3H,d,J=6.9Hz),1.99-2.07(1H,m),2.38-2.49(1H,m),3.50-3.61(1H,m),4.01-4.10(1H,m),6.30-6.38(1H,m)

(步驟2)

(1R)-6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於(1R)-6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸(7.3g、22.2mmol)、氯化銨(23.8g、444mmol)中加入二氯甲烷(200ml)，添加(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽(12.1g、23.3mmol)、三乙胺(93ml)，攪拌18小時。將反應混合物以二氯甲烷稀釋，以1M氫氧化鈉水溶液洗滌後，以硫酸鎂乾燥，將溶劑減壓餾去。於殘留物中加入甲醇，濾取不溶物並乾燥，獲得固體之標題化合物(3.54g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.28(3H,d,J=6.6Hz),1.91-1.97(1H,m),2.32-2.43(1H,m),3.51-3.61(1H,m),4.00(1H,ddd,J=19.6,9.8,2.6Hz),5.59(1H,br s),6.19-6.23(1H,m),9.72(1H,s)

(步驟3)

(1R)-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於(1R)-6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺(500mg、1.53mmol)、1-甲基-哌啶-4-基胺(765μl)中加入二甲基亞碸(5ml)，於110℃攪拌2.5小時。將反應混合物冷卻至室溫後將溶劑減壓餾去。將殘留物分配到二氯甲烷-飽和碳酸氫鈉水溶液，並將有機層以硫酸鎂乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以NH矽膠層析(二氯甲烷：乙酸乙酯=10：0~9：1)精製，獲得固體之標題化合物(320mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.16(3H,d,J=6.0Hz),1.48-1.65(2H,m),1.80-1.88(2H,m),1.98-2.03(1H,m),2.07-2.20(3H,m),2.30(3H,s),2.34-2.44(1H,m),2.75-2.84(2H,m),3.14-3.19(1H,m),3.58(1H,dt,J=19.3,8.7Hz),3.73-3.80(1H,m),3.86(1H,dq,J=19.0,4.8Hz),4.50(1H,d,J=7.8Hz),5.51-5.55(1H,m),6.04-6.12(1H,m),6.72-7.20(1H,m),9.85-9.94(1H,m)

(步驟4)

將(1R)-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺(200mg、0.47mmol)溶於甲醇(5ml)-四氫呋喃(5ml)，添加10%鈀碳觸媒(AD，濕重200mg)，於氫氣環境攪拌20小時。將觸媒濾去，將溶劑減壓餾去，將殘留物以NH矽膠層析(氯仿：甲醇=19：1)精製，獲得固體之標題化合物(124mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.40(4H,d,J=6.4Hz),2.00(1H,dd,J=12.6,8.5Hz),2.04-2.11(2H,m),2.16-2.24(2H,m),2.27-2.37(5H,m),2.78-2.85(2H,m),3.32-3.41(1H,m),3.48-3.58(1H,m),4.05(1H,dd,J=19.2,9.2Hz),4.26-4.32(1H,m),4.68-4.75(1H,m),5.47-5.54(1H,m),5.71(1H,d,J=6.9Hz),6.71(2H,br s),10.09-10.17(1H,m)

實施例16

(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7-氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

(步驟1)

(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於實施例15之步驟2中所獲得之化合物(250mg，0.76mmol)、1-乙醯基-哌啶-4-基胺(430mg)中加入二甲基亞碸(1.5ml)，於110℃攪拌4小時。將反應混合物冷卻至室溫後，將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(二氯甲烷：甲醇=10：0~9：1)精製，獲得固體之標題化合物(232mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.16(3H,d,J=6.4Hz),1.35-1.50(2H,m),1.80-1.87(2H,m),2.03-2.20(4H,m),2.35-2.44(1H,m),2.79-2.90(1H,m),3.14-3.25(2H,m),3.53-3.63(1H,m),3.77-3.91(2H,m),3.93-4.02(1H,m),4.44-4.55(2H,m),5.50-5.55(1H,m),6.02-6.11(1H,m),6.80-7.18(1H,m),9.81-9.90(1H,m)

(步驟2)

將(1R)-8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-9-氯-7-氟-1-甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺(230mg、0.51mmol)溶於甲醇(5ml)-四氫呋喃(5ml)，添加10%鈀碳觸媒(AD，濕重272mg)，於氫氣環境下攪拌6小時。濾去觸媒並將溶劑減壓餾去，將殘留物分配到氯仿-飽和碳酸氫鈉水溶液，並將有機層以硫酸鎂乾燥後，將溶劑減壓餾去，獲得固體之標題化合物(149mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.41(3H,d,J=6.4Hz),1.45-1.56(2H,m),1.98-2.04(1H,m),2.08-2.17(5H,m),2.27-2.36(1H,m),2.92-3.01(1H,m),3.24-3.31(1H,m),3.49-3.62(2H,m),3.82-3.88(1H,m),4.01-4.10(1H,m),4.26-4.30(1H,m),4.42-4.51(1H,m),4.68-4.78(1H,m),5.49-5.56(1H,m),5.72(1H,d,J=6.9Hz),6.75(2H,br s),10.08-10.12(1H,m)

實施例17

8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7,9-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

(1-羥基-5,5-二甲基吡咯啶-2-基)乙酸異丙酯

於四氫呋喃(300ml)中，於氬氣環境下添加1.14M二異丙基醯胺鋰/正己烷-四氫呋喃溶液(95ml)，將其冷卻至-78℃。於同溫滴加乙酸異丙酯(11.5ml)，滴加結束後攪拌20分鐘。於其中，於同溫滴加5,5-二甲基-1-吡咯啉N-氧化物(9.0g、78mmol)之四氫呋喃(50ml)溶液，滴加後進行1.5小時攪拌。加入飽和氯化銨水溶液將反應淬滅後，分配到乙酸乙酯-飽和食鹽水，將有機層以硫酸鎂乾燥。將溶劑減壓餾去後，將殘留物以矽膠層析(正己烷：乙酸乙酯=9：1-6：4)精製，獲得油狀物之標題化合物(14.3g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.04(3H,s),1.17(3H,s),1.23(6H,d,J=6.4Hz),1.36-1.46(1H,m),1.51-1.64(1H,m),1.93-2.01(1H,m),2.38(1H,dd,J=14.7,7.8Hz),2.68(1H,dd,J=14.7,5.0Hz),3.29-3.37(1H,m),4.82(1H,br s),4.97-5.07(1H,m)

(步驟2)

(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)乙酸異丙酯

將(1-羥基-5,5-二甲基吡咯啶-2-基)乙酸異丙酯(14，3g、66mmol)溶於二氯甲烷(200ml)，加入三苯基膦(26g、100mmol)、四氯化碳(9.6ml、100mmol)、及三乙胺(14ml)，進行3小時加熱回流。將反應混合物放冷後將溶劑減壓餾去，於殘留物中加入乙酸乙酯，濾去不溶物(2次)，將濾液以矽膠層析(正己烷：乙酸乙酯=10：0-8：2)精製，獲得油狀物之標題化合物(11.5g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.23(6H,d,J=6.3Hz),1.28(6H,s),1.78(2H,t,J=7.7Hz),2.63-2.67(2H,m),4.41(1H,s),4.95-5.04(1H,m),7.84(1H,br s)

(步驟3)

7,8,9-三氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸異丙酯

將2,3,4,5-四氟-6-硝基-苯甲酸(10g、42mmol)懸浮於二氯甲烷(150ml)，加入草醯氯(11ml)、N,N-二甲基甲醯胺(2滴)後，攪拌24小時。將反應混合物減壓濃縮，於殘留物中加入甲苯，再度減壓濃縮。

將殘留物溶於甲苯(100ml)，滴加(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)乙酸異丙酯(7.1g、36mmol)之甲苯(40ml)溶液。將反應混合物於室溫攪拌2小時後，倒入飽和碳酸氫鈉水溶液，以乙酸乙酯萃取。將水層以乙酸乙酯萃取後，合併有機層，以硫酸鎂乾燥，將溶劑減壓餾去。將殘留物溶於丙酮(100ml)，加入碳酸鉀(6.6g)，進行18小時加熱回流。於冰冷下，以1M鹽酸使成弱酸性，以乙酸乙酯萃取。將含有不溶物之水層以二氯甲烷萃取，合併有機層，以硫酸鎂乾燥後，將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(二氯甲烷：甲醇=10：0-19：1)精製，獲得固體之標題化合物(11.2g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.35(6H,d,J=6.0Hz),1.77(6H,d,J=4.1Hz),2.27(2H,t,J=7.6Hz),3.30(2H,t,J=7.6Hz),5.15-5.25(1H,m)

(步驟4)

7,8,9-三氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

於7,8,9-三氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸異丙酯(1.9g、4.8mmol)中加入乙酸(15ml)、濃鹽酸(15ml)，於80℃進行1.5小時攪拌。於反應混合物中加入冰水，濾取析出物，進行乾燥，獲得固體之標題化合物(1.9g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.84(6H,d,J=3.7Hz),2.34(2H,t,J=7.8Hz),3.87(2H,t,J=7.6Hz)

(步驟5)

6-胺基-7,8,9-三氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

將7,8,9-三氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸(6.9g、19.4mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(250ml)，添加5%鈀碳觸媒(M、濕重820mg)，於氫氣環境下進行20小時攪拌。將觸媒以矽鈰石濾去，將濾液減壓濃縮。將殘留物懸浮於二氯甲烷，濾取不溶物，進行乾燥，獲得固體之標題化合物(3.6g)。又，將母液以矽膠管柱層析(氯仿：甲醇=19：1)精製，另外獲得固體之標題化合物(762mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.67(7H,d,J=3.7Hz),2.20(2H,t,J=7.6Hz),3.61(2H,t,J=7.6Hz),7.80(2H,br s)

(步驟6)

於6-胺基-7,8,9-三氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸(1.6g、4.9mmol)、1-(4-胺基-哌啶-1-基)乙酮(1.53g、10.8mmol)中加入二甲基亞碸(20ml)，於100℃進行1小時攪拌。將溶劑減壓餾去，將殘留物以矽膠層析(二氯甲烷：甲醇=10：0-9：1)精製，將目的組分濃縮。於殘留物中加入甲醇、二甲醚，濾取析出物，進行乾燥，獲得固體之標題化合物(2.09g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.35-1.46(2H,m),1.70(3H,s),1.71(3H,s),2.07-2.12(1H,m),2.12(3H,s),2.18(2H,t,J=7.8Hz),2.74-2.84(1H,m),3.16-3.26(1H,m),3.71 (2H,t,J=7.6Hz),3.81-4.06(3H,m),4.60(1H,d,J=13.7Hz),6.62(2H,br s)

實施例18

6-胺基-7,9-二氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

於實施例17之步驟5獲得之化合物(925mg、2.84mmol)中加入1-甲基-哌啶-4-基胺(1.4ml)、二甲基亞碸(15ml)，於100℃進行1小時攪拌。將反應混合物放冷後將溶劑減壓餾去，將殘留物以NH矽膠層析(二氯甲烷：甲醇=10：0-8：2)精製，獲得固體之標題化合物(1.3g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.50-1.61(2H,m),1.70(3H,s),1.71(3H,s),2.05-2.19(6H,m),2.31(3H,s),2.77-2.88(2H,m),3.67-3.78(3H,m),4.03-4.10(0H,m),6.59(2H,s)

實施例19

8-{[(3S)-1-乙醯基哌啶-3-基]胺基}-6-胺基-7,9-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

於實施例17之步驟5所獲得之化合物(135mg)及1-乙醯基-3-胺基哌啶(180mg)之二甲基亞碸(2.0ml)溶液中加入二異丙基乙胺(211μL)，於100℃攪拌4小時。於反應液加入飽和氯化鈉水溶液、水，以乙酸乙酯及二氯甲烷萃取。以無水硫酸鈉乾燥後將溶劑於減壓下餾去。將殘渣以矽膠管柱(二氯甲烷：甲醇=50：1)精製後，加入乙酸乙酯並洗滌，獲得固體之標題化合物(138mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.56-1.88(9H,m),2.05-2.23(6H,m),3.19-3.40(2H,m),3.50-3.59(0.5H,m),3.64-3.76(2H,m),3.81-3.98(2H,m),4.09-4.27(1.5H,m),6.48-6.78(2H,br)

實施例20

8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7,9-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於實施例17之步驟6所獲得之化合物(1.98g、4.42mmol)、氯化銨(4.72g、88.3mmol)中加入二氯甲烷(80ml)，加入(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽(2.8g、5.3mmol)、三乙胺(18.5ml)並攪拌7小時。將反應混合物以氯仿稀釋，以1M氫氧化鈉水溶液、水洗滌後，以硫酸鎂乾燥，將溶劑減壓餾去。於殘留物中加入乙酸乙酯，濾取析出物，進行乾燥，獲得固體之標題化合物(1.46g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.33-1.45(2H,m),1.66(3H,s),1.67(3H,s),2.07-2.17(6H,m),2.75-2.83(1H,m),3.15-3.23(1H,m),3.62(2H,t,J=7.3Hz),3.81-3.93(3H,m),4.54-4.62(1H,m),5.49-5.56(1H,m),6.73(2H,br s),9.81(1H,s)

實施例21

6-胺基-7,9-二氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

將實施例18獲得之化合物(1.19g、2.8mmol)溶於二氯甲烷(50ml)，加入氯化銨(3.0g、57mmol)、三乙胺(12ml)、(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽(1.6g)，進行2小時攪拌。將反應混合物以二氯甲烷稀釋後，以1M氫氧化鈉水溶液洗滌，以硫酸鎂乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(二氯甲烷：甲醇=10：0-6：4)精製，獲得固體之標題化合物(392mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.67(3H,s),1.67(3H,s),2.04-2.13(4H,m),2.18-2.27(2H,m),2.36(3H,s), 2.85-2.94(2H,m),3.62(2H,t,J=7.6Hz),3.67-3.76(1H,m),3.88-3.95(1H,m),5.48-5.54(1H,m),6.62-6.80(2H,m),9.81-9.85(1H,m)

實施例22

8-{[(3S)-1-乙醯基哌啶-3-基]胺基}-6-胺基-7,9-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於實施例19所獲得之化合物(70mg)之二氯甲烷(1.5ml)溶液中，加入1-羥基苯并三唑(22mg)、2M氨甲醇溶液(350μL)、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(39mg)，於室溫攪拌3日。於反應液中追加二氯甲烷(3.0ml)、2M氨甲醇溶液(300μl)、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(40mg)，於室溫攪拌4小時。將反應液以二氯甲烷稀釋後，添加10%檸檬酸水。以二氯甲烷萃取，將合併的有機層以飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌後，以無水硫酸鈉乾燥。減壓下濃縮後，於殘渣中加入乙酸乙酯並洗滌、濾取。以薄層層析(二氯甲烷：甲醇=20：1)精製，獲得固體之標題化合物(20mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.53-1.72(9.5H,m),2.00-2.20(5.5H,m),3.15-3.38(2H,m),3.49-3.68(2H,m),3.77-3.95(2.25H,m),3.98-4.25(1.25H,m),5.50-5.65(1H,m),6.57-6.94(2H,br),9.70-9.93(1H,m)

實施例23

8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7,9-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-甲腈

(步驟1)

(1-羥基-5,5-二甲基吡咯啶-2-基)乙腈

於乙腈(2.2ml、42.4mmol)之四氫呋喃(20ml)溶液中，於-78℃滴加1.14M二異丙基醯胺鋰/正己烷-四氫呋喃溶液(37.2ml、42.4mmol)後，攪拌10分鐘。於反應混合物中，於-78℃加入5,5-二甲基-1-吡咯啉N-氧化物(4.0g、35.3mmol)之四氫呋喃(5ml)溶液。將反應混合物於-78℃進行45分鐘攪拌，加水，回溫到室溫。於反應混合溶液中加水，以乙酸乙酯萃取。將有機層以無水硫酸鎂乾燥、過濾後，將濾液減壓濃縮。將殘留物以快速矽膠管柱層析(35%乙酸乙酯/正己烷)精製，獲得油狀物之標題化合物(3.48g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.04(3H,s),1.18(3H,s),1.47-1.68(3H,m),1.96-2.08(1H,m),2.59(2H,d,J=5.5Hz),3.17-3.26(1H,m),4.50(1H,br s)

(步驟2)

(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)乙腈

於(1-羥基-5,5-二甲基吡咯啶-2-基)乙腈(3.48g、22.6mmol)、三乙胺(12.6ml、902mmol)之二氯甲烷(40ml)溶液中，於冰冷中加入甲烷磺醯氯(2.1ml、27.1mmol)。將反應混合物進行1小時加熱回流，回溫到室溫。將反應混合物減壓濃縮。於殘留物中加水、乙酸乙酯，以乙酸乙酯萃取。將有機層以飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鈉乾燥後過濾，將濾液減壓濃縮。將殘留物以快速矽膠管柱層析(30%乙酸乙酯/正己烷)精製，獲得固體之標題化合物(1.86g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.22-1.32(6H,m),1.82-1.89(2H,m),2.61-2.67(1H,m),2.83-2.89(1H,m),3.61-3.63(0.5H,m),3.87-3.90(0.5H,m),4.83(0.5H,brs),5.18(0.5H,br s)

(步驟3)

2-(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)-3-側氧基-3-(2,3,4,5-四氟-6-硝基苯基)丙腈

於2,3,4,5-四氟-6-硝基苯甲酸(1.5g、6.34mmol)之二氯甲烷(30ml)懸浮液中加入草醯氯(1.1ml、12.7mmol)、N,N-二甲基甲醯胺(2滴)，於室溫進行4.5小時攪拌。將反應混合物減壓濃縮。於殘留物中加入甲苯(30ml)，以冰冷卻，加入三乙胺(1.3ml、9.52mmol)、(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)乙腈864mg、6.34mmol)。將反應混合物於冰冷中進行1小時攪拌後，於室溫進行1小時攪拌。於反應混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，以乙酸乙酯萃取。將有機層以飽和食鹽水洗滌後，以無水硫酸鈉乾燥，過濾後將濾液減壓濃縮。將殘留物以快速矽膠管柱層析(氯仿)精製，獲得固體之標題化合物(1.81g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.56(6H,s),2.06(2H,t,J=7.7Hz),3.14(2H,t,J=7.7Hz),10.24(1H,br s)

(步驟4)

7,8,9-三氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-甲腈

於2-(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)-3-側氧基-3-(2,3,4,5-四氟-6-硝基苯基)丙腈(2.11g、5.91mmol)中加入丙酮(40ml)、碳酸鉀(1.06g、7.68mmol)。將反應混合物於室溫攪拌一晚，減壓濃縮。於殘留物中加水，以氯仿萃取。將有機層減壓濃縮，獲得固體。於所獲得之固體中加入己烷/乙酸乙酯=2/1，進行濾取，獲得固體之標題化合物(1.91g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.83(3H,s),1.84(3H,s),2.44(2H,t,J=7.8Hz),3.42(2H,t,J=7.8Hz)

(步驟5)

6-胺基-7,8,9-三氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-甲腈

於7,8,9-三氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-甲腈(302mg、0.90mmol)中加入N,N-二甲基甲醯胺(5ml)、甲醇(5ml)、水(5ml)、連二亞硫酸鈉(623mg、2.69mmol)，於70-75℃攪拌3小時。將反應混合物回溫到室溫，加水並進行濾取，獲得固體。將濾液以氯仿萃取後，以無水硫酸鈉乾燥、過濾後，將濾液減壓濃縮，獲得固體。合併所獲得之固體，以快速矽膠管柱層析(1%甲醇/氯仿)精製，獲得固體之標題化合物(199mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.65(3H,s),1.66(3H,s),2.25(2H,t,J=7.3Hz),3.28(2H,t,J=7.3Hz),7.89(2H,br s)

(步驟6)

將6-胺基-7,8,9-三氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-甲腈(50mg、0.16mmol)、1-(4-胺基哌啶-1-基)乙酮(69mg、0.49mmol)之二甲基亞碸(2ml)溶液於80℃攪拌4.5小時。將反應混合物回溫到室溫並減壓濃縮。將殘留物以快速矽膠管柱層析(35%乙酸乙酯/氯仿→3%甲醇/氯仿)精製，獲得固體。於所獲得之固體中加入乙醇，進行濾取，獲得固體之標題化合物(57mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.30-1.45(2H,m),1.69(3H,s),1.70(3H,s),2.06-2.18(5H,m),2.23(2H,t,J=7.6Hz),2.73-2.83(1H,m),3.15-3.27(3H,m),3.80-3.96(3H,m),4.54-4.62(1H,m),6.76(2H,br s)

MS(m/z)：430(M+H)

實施例24

6-胺基-7,9-二氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-甲腈

將實施例23之步驟5中所獲得之化合物(59mg、0.19mmol)、4-胺基-1-甲基哌啶(66mg、0.58mmol)之二甲基亞碸(2ml)溶液於80℃攪拌3小時。將反應混合物回溫到室溫並減壓濃縮。將殘留物以製備性薄層層析(15%甲醇/氯仿展開)精製並獲得固體。將所獲得之固體以快速NH矽膠管柱層析(40%乙酸乙酯/氯仿)精製，獲得固體。對於所獲得之固體加入乙醇並進行濾取，獲得固體之標題化合物(57mg、74%)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.47-1.58(2H,m),1.69(3H,s),1.70(3H,s),2.00-2.18(4H,m),2.22(2H,t,J=7.6Hz),2.31(3H,s),2.77-2.86(2H,m),3.23(2H,t,J=7.6Hz),3.63-3.75(1H,m),3.90-3.99(1H,m),6.73(2H,br s)

MS(m/z)：402(M+H)

實施例25

8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

(1-羥基-5,5-二甲基吡咯啶-2-基)乙酸第三丁酯

於四氫呋喃(400ml)中，於氮氣環境下加入1.1M二異丙基醯胺鋰(正己烷-四氫呋喃溶液、200ml)，將其冷卻至-78℃。於同溫下滴加乙酸第三丁酯(29ml)，滴加結束後進攪拌30分鐘。於其中，於同溫滴加5,5-二甲基-1-吡咯啉N-氧化物(22.3g、194mmol)之四氫呋喃(50ml)溶液，滴加後攪拌2小時。加入飽和氯化銨水溶液，將反應淬滅後，分配到乙酸乙酯-飽和食鹽水，將有機層以硫酸鎂乾燥。將溶劑減壓餾去後，將殘留物以矽膠層析(正己烷：乙酸乙酯=9：1-6：4)精製，獲得油狀物之標題化合物(45.9g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.04(3H,s),1.17(3H,s),1.36-1.43(1H,m),1.45(9H,s),1.52-1.60(2H,m),1.92-2.02(1H,m),2.32(1H,dd,J=14.4,8.0Hz),2.63(1H,dd,J=14.7,5.0Hz),3.26-3.35(1H,m),4.77(1H,br s)

(步驟2)

(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)乙酸第三丁酯

將(1-羥基-5,5-二甲基吡咯啶-2-基)乙酸第三丁酯(45.9g、200mmol)溶於二氯甲烷(500ml)，加入三苯基膦(75g、286mmol)、四氯化碳(229ml、300mmol)、及三乙胺(42ml)，進行4小時加熱回流。將反應混合物放冷後，將溶劑減壓餾去，於殘留物加入乙酸乙酯，濾去不溶物(2次)，將濾液以矽膠層析(正己烷：乙酸乙酯=4：1)精製，獲得固體之標題化合物(30g)。

¹H-NMR(CDCl₃₎δ：1.28(6H,s),1.47(9H,s),1.76(2H,t,J=7.8Hz),2.61-2.65(2H,m),4.37(1H,s),7.74(1H,br s)

(步驟3)

9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸第三丁酯

將3-氯-2,4,5-三氟-6-硝基-苯甲酸(10g、39.1mmol)溶於二氯甲烷(150mL)，滴加N,N-二甲基甲醯胺5滴，於室溫滴加草醯氯(3.58mL、41.1mmol)。攪拌2.5小時後進行減壓濃縮，將甲苯共沸，獲得油狀殘留物。

於烯胺(6.89g、32.6mmol)之四氫呋喃溶液(150mL)中，將上述殘留物之四氫呋喃溶液(150mL)於冰冷下滴加。於室溫進行30分鐘攪拌後，於冰冷下，在反應液中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，以乙酸乙酯萃取。將有機層以水、飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鈉乾燥。過濾後將溶劑減壓餾去，以矽膠管柱層析(10%乙酸乙酯/己烷→30%)粗略精製，獲得油狀物。

於所獲得之油狀物之四氫呋喃(150mL)溶液中，於冰冷下加入氫化鈉(55%，於油中，1.43g，35.8mmol)。於室溫進行1.5小時攪拌後，於冰冷下在反應液中加入10%檸檬酸水溶液，以乙酸乙酯萃取。將有機層以水、飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鈉乾燥。將所獲得之固體以乙醇洗滌並進行濾取，獲得乳白色固體之標題化合物(10.19g)。又，將濾液減壓濃縮，並付諸矽膠管柱層析(20%乙酸乙酯/己烷→50%)，進一步獲得固體之標題化合物(620mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.56(9H,s),1.97(6H,s),2.19(2H,t,J=7.1Hz),3.27(2H,t,J=7.3Hz)

(步驟4)

6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

將9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸第三丁酯(4.53g、10.6mmol)溶解於1,2-二氯乙烷(150mL)，添加10%鈀碳(AD、濕重906mg)，於氫氣環境下於室溫攪拌9小時。將觸媒濾去，並將濾液減壓濃縮，進行甲苯共沸，獲得油狀物。

於所獲得之殘留物之二氯甲烷溶液(60mL)中添加三氟乙酸(15mL)，於室溫攪拌4小時。減壓濃縮，進行甲苯共沸後，將獲得之固體以乙醇洗滌，獲得固體之標題化合物(3.24g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.98(6H,s),2.15(2H,t,J=7.0Hz),3.73(2H,t,J=7.0Hz)

(步驟5)

於6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸(201mg、0.586mmol)及1-(4-胺基哌啶-1-基)乙酮(250mg、1.76mmol)中添加N-甲基吡咯烷酮(1.5mL)，於70℃攪拌2小時半。將反應液分配到水、乙酸乙酯，添加10%檸檬酸水溶液。將有機層以水、飽和食鹽水洗滌，以無水硫酸鈉乾燥。過濾後將溶劑減壓餾去，付諸矽膠管柱層析(10%甲醇/氯仿)，獲得固體之9-Cl中間體(181mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.37-1.49(2H,m),1.88(3H,s),1.92(3H,s),2.08-2.13(7H,m),2.85(1H,t,J=12.8Hz),3.21(1H,t,J=11.9Hz),3.67(2H,t,J=6.6Hz),3.78-3.85(1H,m),3.94-4.05(1H,m),4.49-4.62(2H,m),6.70-6.99(2H,brs)

將上述中間體之一部分(140mg、0.301mmol)溶於四氫呋喃(4mL)及異丙醇(4mL)之混合溶液。添加10%鈀碳(AD，濕重100mg)，於氫氣環境下，於室溫攪拌15小時。將觸媒濾去後，將濾液減壓濃縮，付諸矽膠管柱層析(10%甲醇/氯仿)，獲得標題化合物(73.6mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.47-1.55(2H,m),1.77(6H,s),2.08-2.18(3H,m),2.13(3H,s),2.99(1H,t,J=13.8Hz),3.29(1H,t,J=13.9Hz),3.51-3.59(1H,m),3.72(2H,t,J=7.8Hz),3.86-3.89(1H,m),4.12(1H,dd,J=14.0,7.0 Hz),4.37-4.40(1H,m),4.45-4.49(1H,m),6.14(1H,d,J=6.6Hz),6.50-6.69(2H,brs)

實施例26

6-胺基-7-氟-8-[(反式-4-羥基環己基)胺基]-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

使用實施例25之步驟4獲得之化合物及反式-(4-羥基環己基)胺，以與實施例25之步驟5同樣的方法，獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.30-1.58(5H,m),1.74(6H,s),1.99-2.23(6H,m),3.22-3.35(1H,m),3.67(2H,t,J=7.8Hz),3.69-3.81(1H,m),4.13-4.24(1H,m),5.44-5.57(1H,m),6.06(1H,d,J=6.8Hz),6.53-6.90(2H,br),10.03-10.15(1H,m)

MS(ESI)m/z：403(M+H)⁺

實施例27

6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-8-[(1-胺基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸鹽酸鹽

於實施例25之步驟4所獲得之化合物(1.03g、3.01mmol)及4-胺基-1-甲基哌啶(1.13mL、9.03mmol)中添加N-甲基吡咯烷酮(8mL)，於80℃攪拌4個半小時。將反應液減壓濃縮，將溶劑餾去後，於殘渣中加入氨水及乙醇並減壓濃縮。將殘留物付諸矽膠管柱層析(5%甲醇/氯仿→10%→氯仿：甲醇：水=7：3：1之下層)，獲得非晶物之9-Cl體。

將上述非晶物溶於1,2-二氯乙烷(15mL)及乙醇(15mL)之混合溶劑，添加10%鈀碳(AD，濕重550mg)，於氫氣環境下，於室溫攪拌13小時。於反應液中加入氨水後，將觸媒濾去，將濾液減壓濃縮。於所獲得之殘留物中添加乙醇(10mL)，加熱到95℃，添加氨水直到不溶物溶解為止。以此狀態加熱，緩慢使氨氣化，使固體析出。回到室溫並進行濾取，以獲得固體之標題化合物(646mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.73(6H,s),1.85(2H,m),2.05(2H,m),2.20(2H,t,J=7.9Hz),2.60(3H,brs),2.88-3.00(2H,m),3.22-3.31(2H,m),3.51-3.67(3H,m),6.15-6.24(2H,m),7.01-7.10(2H,brs)

實施例28

6-胺基-7-氟-8-{[(2R)-1-羥基丙-2-基]胺基}-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

使用上述實施例25之步驟4中所獲得之化合物及(2R)-(1-羥基丙-2-基)胺，以與實施例25之步驟5同樣之方法，獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：-3.73(1H,s),1.33(3H,d,J=6.1Hz),1.77(6H,d,J=9.8Hz),2.15-2.21(1H,br),2.21(2H,t,J=7.9Hz),3.59-3.76(4H,m),3.78-3.88(1H,m),4.49-4.58(1H,m),6.28(1H,d,J=6.8Hz),6.40-6.59(2H,br)

MS(ESI)m/z：364(M+H)⁺

實施例29

8-{[(3S)-1-乙醯基哌啶-3-基]胺基}-6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

使用上述實施例25之步驟4中所獲得之化合物及1-[(3S)-3-胺基-1-哌啶基]乙酮，以與實施例25之步驟5同樣之方法，獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：-3.93(0.2H,s),-3.77(0.8H,s),1.55-1.97(8H,m),2.02-2.28(6H,m),2.63(1H,dd,J=12.9,9.8Hz),3.11-3.24(1H,m),3.26-3.86(5H,m),4.34-4.48(1H,m),4.70-4.81(1H,m),6.14(0.2H,d,J=6.6Hz),6.33(0.8H,d,J=7.1Hz),6.42-6.70(2H,m)

實施例30

8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

(步驟1)

6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於實施例25之步驟3獲得之9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸第三丁酯(7.5g、17.5mmol)之二氯甲烷溶液(200ml)中添加三氟乙酸(2.6ml)，於室溫攪拌2小時。添加甲苯，將溶劑減壓餾去。將殘留物溶於二氯甲烷，滴加草醯氯(3.88ml、45.2mmol)並滴加1滴N,N-二甲基甲醯胺。於室溫進行2小時攪拌後將溶劑減壓餾去。溶於二烷(25ml)，於冰冷下滴加到氨水(50ml)。於室溫攪拌1小時後加水，並濾取固體(5.6g)。將獲得之粗產物溶於N,N-甲醯胺：1,2-二氯乙烷：乙酸=1：1：0.2(150ml)，並添加10%鈀碳(AD，濕重1.0g)，於氫氣環境下，於室溫攪拌一晚。過濾後將母液濃縮，並將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(3.8g)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.86(6H,s),2.06(2H,t,J=7.2Hz),3.43(2H,t,J=6.9Hz),7.34(1H,d,J=3.4Hz),8.91(1H,d,J=4.0Hz)

MS(ESI)m/z：342[M+H]⁺

(步驟2)

8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-9-氯-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺(200mg、0.59mmol)之二甲基亞碸溶液(5ml)中加入1-(4-胺基哌啶-1-基)乙酮(250mg、1.76mmol)，於100℃攪拌一晚。加水，以含10%甲醇之氯仿萃取，以無水硫酸鎂乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(220mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.34-1.44(1H,m),1.47-1.55(1H,m),1.79(3H,s),1.80(3H,s),1.84-1.93(2H,m),2.66-2.73(1H,m),3.08-3.15(1H,m),3.38(2H,t,J=6.9Hz),3.76-3.83(2H,m),4.23-4.29(1H,m),5.08-5.12(1H,m)

MS(ESI)m/z：464[M+H]⁺

(步驟3)

於8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-9-氯-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺(110mg、0.24mmol)之二氯甲烷-甲醇溶液(4：1、2.5ml)中添加10%鈀碳(AD，濕重30mg)，於氫氣環境下於室溫攪拌一晚。過濾後將母液濃縮，並將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(76mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.34-1.51(2H,m),1.68(6H,s),1.85-1.98(2H,m),2.01(3H,s),2.10(2H,t,J=7.7Hz),2.73-2.81(1H,m),3.16-3.24(1H,m),3.49(2H,t,J=7.7Hz),3.56-3.64(1H,br m),3.84(1H,d,J=14.3Hz),4.32(1H,d,J=13.2Hz),5.98(1H,d,J=6.9Hz),6.06(1H,d,J=6.9Hz),7.00(1H,d,J=4.6Hz),9.53(1H,d,J=4.6Hz)

MS(ESI)m/z：430[M+H]⁺

實施例31

6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

(步驟1)

6-胺基-9-氯-7-氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於實施例30之步驟1所獲得之6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺(200mg、0.59mmol)之N-甲基吡咯烷酮溶液(5ml)中，添加4-胺基-1-甲基哌啶(0.162ml、1.29mmol)，於80度攪拌一晚。加水以乙酸乙酯萃取，將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(130mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.53-1.63(2H,m),1.79(6H,s),1.82-1.88(2H,m),1.96-2.05(4H,m),2.18(3H,s),2.68-2.78(2H,br m),3.38(2H,t,J=7.2Hz),3.55-3.62(1H,br m),5.02(1H,d,J=7.4Hz),7.18(1H,d,J=5.2Hz),9.17(1H,d,J=4.0Hz)

MS(ESI)m/z：436[M+H]⁺

(步驟2)

於6-胺基-9-氯-7-氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺(130mg、0.30mmol)之二氯甲烷-甲醇溶液(4：1、4ml)中添加10%鈀碳(AD，濕重30mg)，於氫氣環境下於室溫攪拌一晚。過濾後將母液濃縮，將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(61mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.68(6H,s),1.79-1.90(2H,m),2.04-2.13(4H,m),2.74(4H,br s),3.50(2H,t,J=7.4Hz),3.58-3.65(1H,m),6.03(1H,d,J=6.9Hz),6.24(1H,d,J=8.6Hz),7.00-7.03(1H,m),9.50-9.53(1H,m),10.17-10.27(1H,br m)

MS(ESI)m/z：402[M+H]⁺

實施例32

8-{[(3S)-1-乙醯基哌啶-3-基]胺基}-6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

使用實施例30之步驟1中所獲得之化合物及1-[(3S)-3-胺基-1-哌啶基]乙酮，以與實施例30之步驟2及步驟3同樣的方法，獲得標題化合物固體。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.52-1.97(9H,m),2.00-2.25(6.25H,m),2.64(0.75H,dd,J=12.9,9.5Hz),3.09-3.24 (0.75H,m),3.24-3.87(4.5H,m),4.20-4.34(1H,m),4.68-4.80(0.75H,m),5.43-5.58(1H,m),6.07(0.25H,d,J=7.1Hz),6.25(0.75H,d,J=6.8Hz),6.55-6.93(2H,br),9.96-10.17(1H,m)

MS(ESI)m/z：430(M+H)⁺

實施例33

8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-甲腈

於實施例30之步驟3中所獲得之化合物(223mg、0.519mmol)及三乙胺(0.579mL、4.15mmol)之二氯甲烷溶液(20mL)，於冰浴下，添加三氟乙酸酐(0.145mL，1.04mmol)並攪拌。30分鐘後，再添加三氟乙酸酐(0.145mL，1.04mmol)及三乙胺(0.290mL、2.07mmol)，並攪拌30分鐘。於反應液中添加飽和碳酸氫鈉水溶液，攪拌18小時後，以氯仿萃取並以無水硫酸鈉乾燥，過濾後將溶劑減壓餾去，獲得殘留物。將獲得之殘留物溶於乙醇(10mL)，添加1N氫氧化鈉水溶液(2mL)，於40℃攪拌20小時。將反應液減壓濃縮，以水稀釋，並以二氯甲烷萃取。以無水硫酸鈉乾燥後過濾，將溶劑減壓餾去，以矽膠管柱層析(3%甲醇/氯仿)精製。將得到的固體以二乙醚洗滌，獲得固體之標題化合物(107mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.49-1.56(2H,m),1.75(6H,s),2.08-2.13(2H,m),2.13(3H,s),2.26(2H,t,J=7.3Hz),2.98(1H,t,J=12.6Hz),3.22(2H,t,J=8.2Hz),3.29(1H,m),3.47-3.57(1H,m),3.86(1H,d,J=14.7Hz),4.28(1H,dd,J=8.0,3.4Hz),4.45(1H,br d,J=14.7Hz),6.02(1H,d,J=7.8Hz),6.63-6.83(2H,m)

實施例34

8-{[(3S)-1-乙醯基哌啶-3-基]胺基}-6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-甲腈

使用實施例32獲得之化合物，以與實施例33同樣之方法獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.50-1.97(8H,m),1.99-2.33(6H,m),2.48-2.65(1H,m),3.08-3.55(4.65H,m),3.69-3.89(1.35H,m),4.22-4.39(1H,m),4.71-4.84(1H,m),6.03(0.2H,d,J=6.6Hz),6.22(0.8H,d,J=6.6Hz),6.53-6.93(2H,m)

實施例35

2-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸

(步驟1)

4-溴-2,6-二氯-5-氟吡啶-3-羧酸

於2,6-二氯-5-氟吡啶-3-羧酸(50g，0.24mol)之四氫呋喃(1000ml)溶液中，於-78℃費時1小時滴加甲基鋰(1M二乙醚溶液、500ml、0.50mol)。將反應液費時2小時一邊升溫一邊攪拌至到達-20℃後，再度冷卻至-78℃。於反應液中加入1,2-二溴四氯乙烷(85g，0.26mol)後，於0℃攪拌1小時30分鐘。於反應液以冰水稀釋後，以氯仿洗滌。於所獲得之水層中加入1M鹽酸水並中和，濾取析出之固體，獲得固體之標題化合物(33.6g)。此化合物不進一步精製而直接用在下一步驟。

MS(ESI)m/z：244(M+H)⁺

(步驟2)

3-(4-溴-2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)-2-(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)-3-側氧基丙酸丙-2-酯

對於4-溴-2,6-二氯-5-氟吡啶-3-羧酸(8.1g、28mmmol)加入亞硫醯氯(20ml、0.27mol)與二甲基甲醯胺(觸媒量)，於100℃攪拌1小時。將反應液減壓餾去，並將獲得之殘渣溶於四氫呋喃(100ml)。於室溫滴加實施例 17之步驟2中所獲得之化合物(6.0g、28mmol)之四氫呋喃(50ml)溶液，於50度攪拌21小時。將溶劑減壓餾去後以乙酸乙酯稀釋，依序以飽和碳酸氫鈉水溶液、水、飽和食鹽水洗滌，以硫酸鈉乾燥。將溶劑減壓餾去後，將殘渣以矽膠管柱層析(己烷：乙酸乙酯=10：1-3：1)精製，獲得固體之標題化合物(6.7g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：0.95-0.98(6H,m),1.45(6H,s),1.96-1.99(2H,m),3.40-3.45(2H,m),4.87-4.92(1H,m),11.62(1H,br s)

MS(ESI)m/z：469(M+H)⁺

(步驟3)

3-[2,6-二氯-5-氟-4-(丙-2-烯-1-基胺基)吡啶-3-基]-2-(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)-3-側氧基丙酸丙-2-酯

於3-(4-溴-2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)-2-(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)-3-側氧基丙酸丙-2-酯(5.0g、10.1mmol)之乙腈(20ml)溶液中加入烯丙胺(8.0ml、0.11mol)，於室溫攪拌一晚、於60℃攪拌2小時。將溶劑減壓餾去後，將殘渣以乙酸乙酯稀釋，並依序以水、飽和食鹽水洗滌，以硫酸鈉乾燥。將溶劑減壓餾去後，將殘渣以矽膠管柱層析(己烷：乙酸乙酯=8：1-2：1)精製，獲得油狀物之標題化合物(2.5g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.43 86H,d,J=10.3Hz),1.56(6H,s),1.92-2.00(2H,m),3.19-3.28(1H,m),3.45-3.54(1H,m),3.94-3.97(2H,m),4.57-4.60(1H,m),4.88-4.9,3.45-3.54(1H,m),3.94-3.97(2H,m),4.57-4.60(1H,m),4.88-4.95(1H,m),5.18(1H,dd,J=10.3,1.2Hz),5.25(1H,dd,J=17.1,1.2Hz),5.84-5.93(1H,m),11.56(1H,br s)

MS(ESI)m/z：444(M+H)⁺

(步驟4)

2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-4-(丙-2-烯-1-基胺基)-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸丙-2-酯

於3-[2,6-二氯-5-氟-4-(丙-2-烯-1-基胺基)吡啶-3-基]-2-(5,5-二甲基吡咯啶-2-亞基)-3-側氧基丙酸丙-2-酯(2.37g、5.1mmol)之四氫呋喃(50ml)溶液中，於-10℃加入55%油性氫化鈉(0.46g、10.6mmol)，於0℃攪拌1小時30分鐘。於反應液中加入飽和氯化銨水溶液後，將有機物以乙酸乙酯萃取。將獲得之有機層依序以水、飽和食鹽水洗滌並以硫酸鈉乾燥。將溶劑減壓餾去後，將殘渣以矽膠管柱層析(己烷：乙酸乙酯=6：1-1：1)精製，獲得固體之標題化合物(1.7g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.38(6H,d,J=5.7Hz),1.78(6H,s),2.12(2H,t,J=7.7Hz),3.24(2H,t,J=7.7Hz),4.15-4.19(2H,m),5.15-5.18(1H,m),5.24-5.29(2H,m),5.92-5.98(1H,m),11.18-11.21(1H,m)

MS(ESI)m/z：408[M+H]⁺

(步驟5)

4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸

於2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-4-(丙-2-烯-1-基胺基)-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸丙-2-酯(700mg，1.7mmol)之異丙醇(20ml)溶液中添加10%鈀碳(350mg)與甲烷磺酸(210mg、2.2mmol)，於80℃攪拌7小時。濾去不溶物後將溶劑減壓餾去，將獲得之殘渣溶於乙醇(10ml)與四氫呋喃(10ml)，加入1M氫氧化鈉水溶液(10ml)，於50℃攪拌19小時。將反應液冷卻至室溫後，添加乙酸並中和，加入水，濾取析出的固體，以獲得固體之標題化合物(370mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.75(6H,s),2.16(2H,t,J=7.7Hz),3.63(2H,t,J=7.7Hz),8.17(1H,s),9.06(1H,s)

MS(ESI)m/z：326[M+H]⁺

(步驟6)

於4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸(60mg，0.18mmol)之N-甲基吡咯烷酮(1ml)溶液中，添加1-(4-胺基哌啶-1-基)乙酮(52mg、0.37mmol)與三乙胺(51μl、0.37mmol)，於100℃攪拌一晚。將反應液以乙酸乙酯稀釋，並依序以水、飽和食鹽水洗滌。將水層進一步以含10%甲醇之氯仿萃取，合併獲得之有機層，以硫酸鈉乾燥。將溶劑減壓餾去後，將殘渣以矽膠管柱層析(氯仿：甲醇=99：1-9：1)精製，將所獲得之粗精製體以乙酸乙酯洗滌，獲得固體之標題化合物(40mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.40-1.57(2H,m),1.76(6H,s),1.84-1.93(2H,m),2.02(3H,s),2.13(2H,t,J=8.0Hz),2.60-2.64(1H,m),3.06-3.11(1H,m),3.58(2H,t,J=8.0Hz),3.87-3.91(1H,m),4.01-4.09(1H,m),4.38-4.43(1H,m),7.09-8.26(4H,m)

ESI-MS m/z：432(M+H)⁺

實施例36

4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-2-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸

於實施例35之步驟5所獲得之化合物(300mg、0.92mmol)之二甲基亞碸(3ml)溶液中，添加1-甲基哌啶-4-胺(525mg、4.61mmol)，於微波照射下於160℃攪拌1小時。將溶劑減壓餾去後，將殘渣以矽膠管柱層析(氯仿：甲醇=99：1-4：1)精製，將所獲得之粗精製體以乙酸乙酯洗滌，獲得固體之標題化合物(220mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.58-1.67(2H,m),1.81(6H,s),2.04-2.08(2H,m),2.13-2.19(4H,m),2.33(3H,s),2.84-2.89(2H,m),3.72(2H,t,J=8.0Hz),3.89-3.95(1H,m),4.81-4.84(1H,m)

ESI-MS m/z：404(M+H)⁺

實施例37

4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-2-[{1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-基}胺基]-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸

使用實施例35之步驟5中所獲得之化合物及1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-胺，以與實施例36同樣之方法獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(D₂O+NaOD)δ：1.50-1.58(2H,m),1.70(6H,s),1.93-1.97(2H,m),2.13(2H,t,J=7.8Hz),2.21-2.26(2H,m),2.60(2H,t,J=5.8Hz),2.93-2.97(2H,m),3.10(2H,t,J=7.8Hz),3.37(3H,s),3.61(2H,t,J=5.8Hz),3.89-3.93(1H,m)

ESI-MS m/z：448(M+H)⁺

實施例38

4-胺基-3-氟-2-[{1-(2-羥基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}胺基]-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸

使用實施例35之步驟5中所獲得之化合物及1-(4-胺基哌啶-1-基)-2-甲基丙-2-醇，以與實施例36同樣之方法獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(D₂O+NaOD)δ：1.55-1.63(2H,m),1.71(6H,s),1.89-1.92(2H,m),2.14(2H,t,J=7.9Hz),2.31-2.36(2H,m),2.44(2H,s),2.99-3.03(2H,m),3.10(2H,t,J=7.8Hz),3.88-3.94(1H,m)

ESI-MS m/z：462(M+H)⁺

實施例39

4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-2-[{1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-基}胺基]-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸

使用實施例35之步驟5中所獲得之化合物及1-(2,2,2-三氟乙基)哌啶-4-胺，以與實施例36同樣之方法獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.61-1.69(2H,m),1.80(6H,s),2.03-2.07(2H,m),2.17(2H,t,J=8.0Hz),2.53-2.58(2H,m),3.00-3.06(4H,m),3.72(2H,t,J=8.0Hz),3.90-3.94(1H,m),4.81(1H,d,J=6.3Hz)

ESI-MS m/z：472(M+H)⁺

實施例40

4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-2-(吡啶-3-基胺基)-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸

(步驟1)

2-氯-3-氟-4-(4-甲氧基苄胺基)-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸第三丁酯

使用實施例35之步驟1中所獲得之化合物、與實施例25之步驟2中所獲得之化合物，以與實施例35之步驟2,3,4同樣之手法，並將步驟3之烯丙胺變更為對甲氧基苄胺(5當量)並實施，獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.58(9H,s),1.76(6H,s),2.10(2H,t、J=7.9Hz),3.20(2H,t、J=7.9Hz),3.79(3H,s),4.67-4.69(2H,m),6.84-6.87(2H,m),7.25-7.27(2H,m),11.41-11.44(1H,m)

MS(ESI)m/z：502[M+H]⁺

(步驟2)

將2-氯-3-氟-4-(4-甲氧基苄胺基)-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸第三丁酯(1.0g、1.99mmol)、3-胺基吡啶(375mg、9.98mmol)、BINAP(62mg、0.1mmol)溶於二烷(20ml)，添加碳酸銫(1.3g)，進行氮取代。添加雙鈀參亞苄基丙酮(90mg)，於80℃攪拌15小時、於加熱回流攪拌4小時。追加3-胺基吡啶(200mg)、BINAP(65mg)、雙鈀參亞苄基丙酮(95mg)，再進行15小時加熱回流。將反應液分配到乙酸乙酯-飽和碳酸氫鈉水溶液，並將有機層以硫酸鎂乾燥後將溶劑餾去。將殘留物以矽膠管柱層析(二氯甲烷：甲醇=10：0→9：1)粗略精製，獲得中間體。

對於上述中間體之二氯甲烷(3ml)溶液，添加三氟乙酸(3ml)，攪拌7小時。將溶劑減壓餾去，於殘留物中加入甲苯，再度將溶劑餾去。於殘留物中加入4M鹽酸/二烷，再度將溶劑餾去後，使用二烷-甲醇進行固體化，獲得固體之標題化合物(554mg)。

¹H-NMR(DMSO-d₆)δ：1.58(6H,s),2.08(2H,t,J=7.8Hz),3.60(2H,t,J=7.8Hz),7.80-7.86(1H,m),8.31-8.36(1H,m),8.50-8.53(1H,m),8.91-8.94(1H,m),9.87-9.93(1H,m)

實施例41

2-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺

(步驟1)

4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺

於實施例35之步驟5所獲得之4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸(1.2g，3.7mmol)之二氯甲烷(30ml)溶液中，加入氯化銨(3.94g、74mmol)與三乙胺(15ml、0.11mol)、(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽(2.1g，4.1mmol)，於室溫攪拌5小時。將反應液以氯仿稀釋，依序以水、飽和食鹽水洗滌後以硫酸鈉乾燥。將溶劑減壓餾去獲得之固體以乙酸乙酯洗滌，獲得固體之標題化合物(0.89g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.80(6H,s),2.13(2H,t,J=8.0Hz),3.75(2H,t,J=8.0Hz),5.31-5.56(2H,m),9.70(2H,br s)

MS(ESI)m/z：325[M+H]⁺

(步驟2)

於4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺(250mg、0.77mmol)之二甲基亞碸(5ml)溶液中加入1-(4-胺基哌啶-1-基)乙酮(330mg、2.3mmol)，於微波照射下於150℃攪拌3.5小時。將溶劑減壓餾去後，將殘渣以乙酸乙酯與甲醇之混合溶劑洗滌，獲得標題化合物之粗精製體A，再將溶出於濾液的目的物以矽膠管柱層析(氯仿：甲醇=99：1-9：1)精製，獲得粗精製體B。合併A與B，再度以矽膠管柱層析(氯仿：甲醇=99：1-9：1)精製，將獲得之粗精製體以乙酸乙酯洗滌，獲得固體之標題化合物(230mg)。

¹H-NMR(CD₃OD)δ：1.46-1.61(2H,m),1.80-1.82(6H,m),1.92-2.14(7H,m),2.77-3.16(2H,m),3.59-3.62(2H,m),3.90-4.29(3H,m)

ESI-MS m/z：431(M+H)⁺

實施例42

4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-2-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺

於實施例41之步驟1所獲得之4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺(250mg、0.77mmol)之二甲基亞碸(3ml)溶液中，加入1-甲基哌啶-4-胺(390μl、3.1mmol)，於微波照射下於150℃攪拌3小時。將溶劑減壓餾去後，將殘渣以矽膠管柱層析(NH)(氯仿：甲醇=99：1-9：1)精製，再以矽膠管柱層析(氯仿：甲醇=99：1-9：1)精製，將獲得之粗精製體以乙酸乙酯洗滌，獲得固體之標題化合物(160mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.59-1.66(2H,m),1.72(6H,s),1.78-1.83(2H,m),1.90-1.95(2H,m),2.04(2H,t,J=8.0Hz),2.18(3H,s),2.80-2.84(2H,m),3.53(2H,t,J=8.0Hz),3.76-3.83(1H,m),6.86-9.50(5H,m)

ESI-MS m/z：403(M+H)⁺

實施例43

4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-2-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a]-1,8-啶-6-甲腈

(步驟1)

4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a]-1,8-啶-6-甲腈

於實施例41之步驟1得到之4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺(1.01g、3.11mmol)、三乙胺(1.3m、9.33mmol)之二氯甲烷(20ml)懸浮液中，於冰冷下加入三氟乙酸酐(0.66μl、4.67mmol)。將反應混合物於室溫攪拌30分鐘。於反應混合物加入飽和碳酸氫鈉水溶液，以二氯甲烷萃取。將有機層以無水硫酸鈉乾燥，過濾後將濾液減壓濃縮。將殘留物以矽膠管柱層析(20%乙酸乙酯/氯仿)精製，獲得固體。於所獲得之固體中加入乙醇，濾取獲得固體之標題化合物(479mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.72(6H,s),2.18(2H,t,J=7.8Hz),3.30(2H,t,J=7.8Hz),8.00(1H,s),9.36(1H,s)

(步驟2)

將4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a]-1,8-啶-6-甲腈(144mg、0.44mmol)、1-甲基哌啶-4-基胺(153mg、1.33mmol)之N-甲基吡咯烷酮(2ml)溶液於120℃攪拌15小時。將反應混合物回到室溫，進行減壓濃縮。將殘留物以快速NH矽膠管柱層析(10%氯仿/乙酸乙酯)精製，並將溶出液減壓濃縮。將殘留物以快速矽膠管柱層析(5%甲醇/氯仿→4%(8N NH3/甲醇)/氯仿)精製，並將溶出液減壓濃縮。將殘留物以製備PLC(20%甲醇/氯仿展開)精製，獲得固體。於獲得之固體中加入正己烷/乙酸乙酯=1：1並進行濾取，獲得固體之標題化合物(70mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.60-1.68(2H,m),1.79(6H,s),2.00-2.23(6H,m),2.32(3H,s),2.80-2.90(2H,m),3.24(2H,t,J=7.8Hz),3.81-3.94(1H,m),4.68-4.75(1H,m)

實施例44

2-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a]-1,8-啶-6-甲腈

使用實施例43之步驟1中所獲得之化合物及1-(4-胺基哌啶-1-基)乙酮，以與實施例43之步驟2同樣之方法，獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.34-1.58(2H,m),1.72(6H,s),1.80-1.94(2H,m),2.01(3H,s),2.14(2H,t,J=7.8Hz),2.56-2.66(1H,m),3.02-3.13(1H,m),3.22(2H,t,J=7.8Hz),3.83-4.06(2H,m),4.33-4.44(1H,m),7.03(1H,d,J=7.8Hz)

ESI-MS(m/z)：413(M+H)⁺

實施例45

8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

2-(2-乙氧基-2-側氧基亞乙基)-4,4-二甲基咪唑啶-1-羧酸苄酯

於1,2-二胺基-2-甲基丙烷(4.96g，56.2mmol)之乙醇溶液中加入3-乙氧基-3-亞胺基丙酸乙酯鹽酸鹽(10.0g、51.1mmol)，於室溫攪拌1小時。將溶劑餾去後，添加飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml)與四氫呋喃(150ml)，滴加N-(苄氧基羰氧基)-琥珀醯亞胺(5.95g，23.9mmol)之四氫呋喃溶液(50ml)，於室溫攪拌2小時。以乙酸乙酯萃取後，以無水硫酸鈉乾燥後將溶劑減壓餾去，獲得標題化合物。此化合物不進一步精製，而用在下一反應。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.25(3H,t,J=7.1Hz),1.28(3H,s),1.33(3H,s),3.59-3.61(2H,m),4.10(2H,q,J=7.2Hz),5.22(1H,s),7.34-7.39(5H,m)

MS(ESI)m/z：319[M+H]⁺

(步驟2)

4-乙基9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2-二氫咪唑并[1,2-a]喹啉-3,4(5H)-二羧酸3-苄酯

於3-氯-2,4,5-三氟-6-硝基苯甲酸(2.0g，7.83mmol)之二氯甲烷溶液中，加入草醯氯(0.75ml)及N,N-二甲基甲醯胺(1滴)，攪拌3小時。將反應液經過減壓濃縮得到的殘留物之四氫呋喃溶液(30ml)，於冰冷下加到2-(2-乙氧基-2-側氧基亞乙基)-4,4-二甲基咪唑啶-1-羧酸苄酯(4.41g，13.9mmol)之四氫呋喃溶液(70ml)，於室溫攪拌1小時。加水，以乙酸乙酯萃取，以飽和食鹽水洗滌後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體(4.63g)。於獲得之固體(4.60g、8.28mmol)之四氫呋喃溶液(200ml)中加入二異丙基乙胺(14.4ml，82.8mmol)，進行2日加熱回流。放冷至室溫後加水，以乙酸乙酯萃取。將溶劑減壓餾去，添加乙酸乙酯並濾取析出物，獲得固體之標題化合物(1.6g)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.14(3H,t,J=7.2Hz),1.89(6H,s),4.03-4.07(4H,m),5.25(2H,s),7.35-7.44(5H,m)

MS(ESI)m/z：536[M+H]⁺

(步驟3)

6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

於9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-6-硝基-5-側氧基-1,2-二氫咪唑并[1,2-a]喹啉-3,4(5H)-二羧酸3-苄基4-乙酯(500mg)之N,N-二甲基甲醯胺(10ml)溶液中加入5%鈀碳(AD，濕重150mg)，於氫氣環境下於室溫攪拌一晚。過濾後將母液濃縮，將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得標題化合物(230mg)固體。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.25(3H,t,J=7.2Hz),1.82(6H,s),3.54(2H,s),4.19(2H,q,J=7.3Hz),8.62(1H,s)

MS(ESI)m/z：372[M+H]⁺

(步驟4)

8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

於6-胺基-9-氯-7,8-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(230mg)之二甲基亞碸溶液(3ml)中加入1-(4-胺基哌啶-1-基)乙酮(528mg、3.71mmol)，於130度攪拌一晚。加水，以含10%甲醇之氯仿萃取，以無水硫酸鈉乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(161mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.23(3H,t,J=7.2Hz),1.31-1.49(2H,m),1.66-1.68(6H,m),1.83-1.96(2H,m),2.01(3H,s),2.76(1H,t,J=11.2Hz),3.18(1H,t,J=11.5Hz),3.56(3H,s),3.83(1H,d,J=14.9Hz),4.15(2H,q,J=7.1Hz),4.30(1H,d,J=14.9Hz),5.69-5.72(1H,m),5.86(1H,d,J=6.9Hz),8.41(1H,s)

MS(ESI)m/z：460[M+H]⁺

(步驟5)

於8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(70mg，0.15mmol)之二烷-水-甲醇(15：7：10、3.2ml)混合溶液中，加入氫氧化鋰一水合物(13mg，0.3mmol)，於室溫終夜攪拌。加入乙酸(26μl，0.46mmol)，以含10%甲醇之氯仿萃取，以無水硫酸鈉乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(60mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.33-1.50(2H,m),1.84-1.96(2H,m),2.01(3H,s),2.73-2.79(1H,m),3.16-3.23(1H,m),3.64-3.66(3H,m),3.81-3.86(1H,m),4.29-4.34(1H, m),5.95(1H,d,J=6.9Hz),6.09(1H,d,J=6.9Hz),7.03(1H,br s),8.75(1H,s)

MS(ESI)m/z：432[M+H]⁺

實施例46

6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

(步驟1)

6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯

使用實施例45之步驟3獲得之化合物及4-胺基-1-甲基哌啶，以與實施例45之步驟4同樣之方法，獲得標題化合物固體。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.23(3H,t,J=7.2Hz),1.49-1.58(2H,m),1.65(6H,s),1.85(2H,d,J=12.0Hz),1.96-2.02(2H,m),2.17(3H,s),2.74-2.79(2H,m),3.55(2H,s),4.15(2H,q,J=7.1Hz),5.64-5.67(1H,m),5.82(1H,d,J=6.9Hz),8.40(1H,s)

MS(ESI)m/z：432[M+H]⁺

(步驟2)

於6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]喹啉-4-羧酸乙酯(159mg，0.37mmol)之二烷-水-甲醇(3：1：1、5ml)混合溶液中，添加氫氧化鋰一水合物(93mg，2.21mmol)，於室溫終夜攪拌。加入乙酸(148μl，2.58mmol)調整為酸性後，加入氨水調整為鹼性，以含10%甲醇之氯仿萃取，以無水硫酸鈉乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(110mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.52-1.61(2H,m),1.69(6H,s),1.82-1.88(2H,m),1.96-2.03(3H,m),2.17(3H,s),2.73-2.80(2H,m),3.23-3.31(1H,m),3.64(2H,s),5.91(1H,d,J=6.9Hz),6.05(1H,d,J=6.3Hz),7.01(1H,br s),8.73(1H,s)

MS(ESI)m/z：404[M+H]⁺

實施例47

8-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於實施例45之步驟4所獲得之化合物(80mg、0.17mmol)中加入氨-甲醇溶液(8N、1ml)、氨水(1ml)，封管中以100度攪拌一晚。濃縮後，以分取用薄相層析(氯仿：甲醇=1：1)及逆相層析(水-乙腈系)精製，獲得固體之標題化合物(25mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.32-1.50(2H,m),1.68(6H,s),1.85-1.97(2H,m),2.01(3H,s),2.75-2.80(1H,m),3.16-3.22(1H,m),3.54-3.61(9H,m),3.83(1H,d,J=12.0Hz),4.30(1H,d,J=12.0Hz),5.70-5.74(1H,m),5.89(1H,d,J=6.9Hz),6.85(1H,d,J=5.2Hz)

MS(ESI)m/z：431[M+H]⁺

實施例48

6-胺基-7-氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫咪唑并[1,2-a]喹啉-4-羧基醯胺

於實施例46之步驟1所獲得之化合物(200mg、0.46mmol)中加入氨-甲醇溶液(8M、1ml)、氨水(50ml)，封管中以80度攪拌一晚。濃縮後加入甲酸並中和，以逆相層析(水-乙腈系)及超臨界層析(甲醇40%)精製，獲得固體之標題化合物(45mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.53-1.63(2H,m),1.66(6H,s),1.88(2H,d,J=11.5Hz),2.13(2H,t,J=11.5Hz),2.24(3H,s),2.84(2H,d,J=11.5Hz),3.22-3.32(1H,m),3.59(2H,s),5.77(1H,d,J=6.9Hz),5.84(1H,d,J=6.9Hz),6.91(1H,d,J=5.2Hz),8.19(1H,s),9.39(1H,s),9.73(1H,d,J=5.2Hz)

MS(ESI)m/z：403[M+H]⁺

實施例49

6-胺基-9-氯-4-氰基-7-氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2-二氫咪唑并[1,2-a]喹啉-3(5H)-羧酸

(步驟1)

2-(氰基甲基)-4,4-二甲基-4,5-二氫-1H-咪唑-1-羧酸第三丁酯

於2-氰基乙烷醯亞胺酸乙酯鹽酸鹽(5.12g、34.5mmol)之乙醇溶液(130ml)中，添加1,2-二胺基-2-甲基丙烷(3.93ml，37.9mmol)，於室溫攪拌2小時。將溶劑餾去後，加入四氫呋喃(300ml)與飽和碳酸氫鈉水溶液(150ml)、二碳酸二第三丁酯(8.27g，37.9mmol)，於室溫攪拌1小時。以乙酸乙酯萃取，並以飽和食鹽水洗滌。將溶劑減壓餾去，將殘留物以矽膠層析(乙酸乙酯-己烷系)精製，獲得固體之標題化合物(1.24g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.29(3H,s),1.34(3H,s),1.52(9H,s),3.45(1H,s),3.53(1H,s),3.59(2H,s)

MS(ESI)m/z：436[M+H]⁺

(步驟2)

6-胺基-9-氯-4-氰基-7,8-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2-二氫咪唑并[1,2-a]喹啉-3(5H)-羧酸第三丁酯

於3-氯-2,4,5-三氟-6-硝基苯甲酸(858mg，3.36mmol)之二氯甲烷溶液中，加入草醯氯(0.32ml)及N,N-二甲基甲醯胺(1滴)，攪拌3小時。將反應液減壓濃縮而得之殘留物之甲苯溶液(30ml)，滴加到2-(氰基甲基)-4,4-二甲基-4,5-二氫-1H-咪唑-1-羧酸第三丁酯(817mg，3.44mmol)之甲苯溶液(10ml)，於室溫攪拌2小時。加入三乙胺(436μl，3.13mmol)，攪拌一晚。加入飽和碳酸氫鈉水溶液，以氯仿萃取，以無水硫酸鈉乾燥後將溶劑減壓餾去。於殘留物(1.49g)之丙酮溶液(30ml)中加入碳酸鉀(520mg、3.76mmol)，於室溫攪拌3小時。加水，以氯仿萃取，並以無水硫酸鈉乾燥後將溶劑減壓餾去。加入乙酸乙酯，並濾取析出之固體。於所獲得之固體(620mg)之N,N-二甲基甲醯胺(10ml)溶液加入10%鈀碳(AD，濕重120mg)，於氫氣環境下於室溫攪拌一晚。過濾後將母液濃縮，並將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(560mg)。

MS(ESI)m/z：425[M+H]⁺

(步驟3)

6-胺基-9-氯-4-氰基-7-氟-1,1-二甲基-8-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-1,2-二氫咪唑并[1,2-a]喹啉-3(5H)-甲腈

於6-胺基-9-氯-4-氰基-7,8-二氟-1,1-二甲基-5-側氧基-1,2-二氫咪唑并[1,2-a]喹啉-3(5H)-羧酸第三丁酯(150mg)之N-甲基吡咯烷酮溶液(5ml)中，加入4-胺基-1-甲基哌啶(266μl、2.12mmol)，於130度攪拌一晚。將溶劑餾去，溶於二甲基亞碸後，加入甲酸調整為酸性後，以逆相矽膠層析(水-乙腈系)精製，獲得固體之標題化合物(20mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.58-1.67(2H,m),1.76(6H,s),2.02-2.09(2H,m),2.19(2H,t,J=10.6Hz),2.32(3H,s),2.78-2.87(2H,m),3.22-3.31(1H,br m),3.66(2H,s),4.17-4.22(1H,m),5.85(1H,d,J=6.9Hz),6.37(1H,s),6.64(1H,br s)

MS(ESI)m/z：385[M+H]⁺

實施例50

4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-2-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-5,7,8,9-四氫咪唑并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺

(步驟1)

2-氯-3-氟-4-[(4-甲氧基苄基)胺基]-9,9-二甲基-5-側氧基-8,9-二氫-5H-咪唑并[1,2-a][1,8]啶-6,7-二羧酸7-苄酯6-乙酯

對於實施例35之步驟1中所獲得之化合物(5g、17.3mmol)滴加亞硫醯氯(8ml)、N,N-二甲基甲醯胺(3滴)，於70℃攪拌2小時。將溶劑減壓餾去，於殘留物加入甲苯，再度將溶劑減壓餾去，溶於四氫呋喃(50ml)。加入實施例45之步驟1中所獲得之化合物(6.1g、19mmol)之四氫呋喃(10ml)溶液後，加入碳酸氫鈉(1.5g)，於50℃攪拌8小時後於室溫攪拌10小時。將反應混合物分配到乙酸乙酯-飽和碳酸氫鈉水溶液，將有機層以硫酸鎂乾燥。將溶劑減壓餾去，將殘留物以矽膠層析(己烷：乙酸乙酯=6：4)粗略精製，獲得油狀物(6.85g)。

於上述油狀物(6.85g)中加入乙腈(30ml)、對甲氧基苄胺(4.7ml)，於50℃攪拌2小時。再加入對甲氧基苄胺(1ml)，於同溫攪拌2小時。將反應混合物分配到乙酸乙酯-水，並將有機層以硫酸鎂乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(己烷：乙酸乙酯=9：1~3：7)精製，獲得固體之標題化合物(2.2g)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.27(3H,t,J=7.2Hz),1.68(3H,s),1.69(3H,s),3.79(3H,s),3.98(2H,s),4.22(2H,q,J=7.2Hz),4.59(2H,d,J=5.5Hz),5.24(2H,s),6.82-6.85(2H,m),7.27-7.30(2H,m),7.35-7.38(5H,m),10.62(1H,t,J=5.5Hz)

(步驟2)

2-氯-3-氟-4-[(4-甲氧基苄基)胺基]-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫咪唑并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸

將2-氯-3-氟-4-[(4-甲氧基苄基)胺基]-9,9-二甲基-5-側氧基-8,9-二氫-5H-咪唑并[1,2-a][1,8]啶-6,7-二羧酸7-苄酯6-乙酯(299mg、0.33mmol)溶於四氫呋喃(3ml)-甲醇(3ml)，加入氫氧化鋰一水合物(56mg、1.32mmol)、水(1ml)，攪拌3日。於反應混合物中加入1M鹽酸(1.35ml)，分配到乙酸乙酯-飽和食鹽水。將有機層以硫酸鎂乾燥後將溶劑減壓餾去，於殘留物中加入二乙醚，濾取不溶物，進行乾燥，獲得固體之標題化合物(106mg)。

¹H-NMR(CDCl₃)δ：1.79(3H,s),1.80(3H,s),3.78-3.81(5H,m),4.63(2H,d,J=5.5Hz),6.86-6.90(2H,m),7.29-7.33(2H,m),9.20(1H,s),10.04-10.09(1H,m)

(步驟3)

4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫咪唑并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺

於2-氯-3-氟-4-[(4-甲氧基苄基)胺基]-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫咪唑并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸(87mg，0.19mmol)之二氯乙烷懸浮液(2ml)中，加入氯化銨(208mg，3.89mmol)、(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷鏻六氟磷酸鹽(122mg、0.23mmol)、三乙胺(814μl，5.84mmol)，於室溫攪拌一晚。以含10%甲醇之氯仿稀釋，並以1M氫氧化鈉水溶液洗滌。以無水硫酸鈉乾燥後將溶劑減壓餾去，加入乙酸乙酯，濾取析出的固體。於獲得之固體(75mg)之二氯甲烷懸浮液(2ml)中加入三氟乙酸(149μl，2.02mmol)，於室溫攪拌4小時。溶劑餾去後加入氨水以調成鹼性，濾取析出物，獲得固體之標題化合物(45mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.90(6H,s),3.63-3.65(2H,br m),9.21(1H,br s)

MS(ESI)m/z：326[M+H]⁺

(步驟4)

於4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫咪唑并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺(360mg、1.11mmol)之二甲基亞碸溶液(18ml)中加入4-胺基-1-甲基哌啶(1.39ml、11.1mmol)，於微波照射下於150度進行15分鐘攪拌。加入氨水，以含10%甲醇之氯仿萃取，並以無水硫酸鈉乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(315mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.54-1.64(8H,m),1.74-1.80(2H,m),1.95(2H,br s),2.18(3H,s),2.75-2.83(2H,m),3.63(2H,s),3.85-3.92(1H,m),6.47(1H,br s),6.65(1H,d,J=6.9Hz),6.97(1H,d,J=5.2Hz),9.47(1H,br s),9.68(1H,d,J=5.2Hz),9.90(1H,s)

MS(ESI)m/z：404[M+H]⁺

實施例51

2-[(1-乙醯基哌啶-4-基)胺基]-4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫咪唑并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺

於實施例50之步驟3所獲得之4-胺基-2-氯-3-氟-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫咪唑并[1,2-a][1,8]啶-6-羧基醯胺(300mg)之二甲基亞碸溶液(10ml)中加入1-(4-胺基哌啶-1-基)乙酮(1.12g、7.88mmol)，於微波照射下於150度進行15分鐘攪拌。加入氨水，以含10%甲醇之氯仿萃取，以無水硫酸鎂乾燥後將溶劑減壓餾去。將殘留物以矽膠層析(氯仿-甲醇系)精製，獲得固體之標題化合物(155mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.32-1.52(2H,m),1.62(6H,s),1.78-1.91(2H,m),2.01(3H,s),2.60(1H,t,J=12.6Hz),3.08(1H,t,J=12.6Hz),3.63(2H,s),3.84(1H,d,J=13.7Hz),4.09-4.18(1H,m),4.37(1H,d,J=12.6Hz),6.49(1H,br s),6.72(1H,d,J=8.0Hz),6.99(1H,d,J=4.9Hz),9.50(1H,br s),9.68(1H,d,J=4.9Hz),9.90(1H,s)

MS(ESI)m/z：464[M+H]⁺

實施例52

4-胺基-3-氟-9,9-二甲基-2-[(1-甲基哌啶-4-基)胺基]-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸甲酸鹽

於實施例35之步驟5獲得之化合物(70mg、0.21mmol)與1-甲基哌啶-4-胺(49mg、0.43mmol)之N-甲基吡咯烷酮(1ml)溶液中，加入三乙胺(60μl，0.43mmol)，於100℃攪拌3日。將反應混合物以逆相HPLC[乙腈：水：甲酸]精製，進行減壓濃縮後，將獲得之殘渣以乙酸乙酯洗滌，以獲得固體之目的物(25mg)。

¹H-NMR(DMSO-D₆)δ：1.61-1.71(2H,m),1.75(6H,s),1.80-1.86(2H,m),2.00-2.07(2H,m),2.13(2H,t,J=7.8Hz),2.23(3H,s),2.86-2.91(2H,m),3.57(2H,t,J=7.8Hz),3.79-3.88(1H,m),6.58-8.61(2H,m),7.23(1H,d,J=7.8Hz),8.17(1H,s)

MS(ESI)m/z：404[M+H]⁺

實施例53

4-胺基-3-氟-2-[{1-(2-羥基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}胺基]-9,9-二甲基-5-側氧基-5,7,8,9-四氫吡咯并[1,2-a][1,8]啶-6-羧酸鹽酸鹽

於實施例35之步驟5獲得之化合物(500mg、1.5mmol)及1-(4-胺基哌啶-1-基)-2-甲基丙-2-醇 (397mg、2.3mmol)之二甲基亞碸(10ml)溶液中加入三乙胺(1.1ml、7.7mmol)，於微波照射下於150℃攪拌6小時。將溶劑減壓餾去後，將殘渣以矽膠管柱層析[氯仿：甲醇=99：1→9：1(v/v)]精製。將獲得之殘渣以甲醇稀釋後，加入4N鹽酸-二烷溶液並攪拌。將溶劑減壓餾去後，於獲得之殘渣加入異丙醇與乙酸乙酯並固化，以獲得固體之目的物(150mg)。

¹H-NMR(D2O+NaOD)δ：1.55-1.63(2H,m),1.71(6H,s),1.89-1.92(2H,m),2.14(2H,t,J=7.9Hz),2.31-2.36(2H,m),2.44(2H,s),2.99-3.03(2H,m),3.10(2H,t,J=7.8Hz),3.88-3.94(1H,m)

ESI-MS m/z：462[M+H]⁺

實施例54

6-胺基-7,9-二氟-1,1-二甲基-8-[{1-(2-羥基-2-甲基丙基)哌啶-4-基}胺基]-5-側氧基-1,2,3,5-四氫吡咯并[1,2-a]喹啉-4-羧酸

使用實施例17之步驟5中所獲得之化合物及1-(4-胺基哌啶-1-基)-2-甲基丙-2-醇，以與實施例17同樣的方法獲得固體之標題化合物。

¹H-NMR(D2O+NaOD)δ：1.21(6H,s),1.52-1.59(2H,m),1.65(3H,s),1.66(3H,s),1.87-1.93(2H,m),2.17-2.27(4H,m),2.37(2H,s),2.92-2.95(2H,m),3.11(2H,t,J=7.5Hz),3.53-3.677(1H,m)

ESI-MS m/z：479(M+H)⁺

(試驗例1 GSK-3抑制活性)

測定於待驗化合物存在下或非存在下之GSK3之激酶活性。基質胜肽係因GSK3之激酶活性而被磷酸化。由於相較於未經磷酸化之基質，被激酶所磷酸化之基質，只有磷酸基之分量的電荷變化為負(陰性)，所以將此變化以電泳原理來分離(Mobility Shift Assay法)，定量磷酸化之程度。

(1)試樣製備與酵素反應

使用於人之GSK3β之全長(1-420胺基酸)的N末端側導入GST標籤，並使其於昆蟲細胞病毒依存性地表現之GST-GSK3蛋白(GSK3β、carnabioscience)。

然後，製備含有上述GST-GSK3蛋白及100mM HEPES(pH7.4)、0.003% Brij-35、0.004% Tween-20、1mM DTT、10mM MgCl₂之GSK3β酵素溶液，分注到384孔盤(康寧)。

將待驗化合物溶於DMSO，使用DMSO製備稀釋系列。將此化合物溶液添加到已分注之GSK3酵素溶液，混合後於室溫進行30分鐘的預溫育。

於含有上述待驗化合物之孔中，添加基質溶液(100mM HEPES(pH7.4)、0.003% Brij-35、0.004% Tween-20、1mM DTT、10mM MgCl₂、ATP(最終濃度20μM)、FL-Peptide 15(Caliper Lifesciences)並混合後，於28℃放置1.5小時，並使酵素反應進行。

作為確認酵素反應之進行的正對照(positive control)，係使用DMSO來替代化合物溶液，作為未進行酵素反應之負對照，係使用已從基質溶液去除ATP者來替換基質溶液，而進行同樣的操作。

(2)酵素反應之檢測

酵素反應後，對於各孔添加反應停止液(100mM HEPES(pH7.4)、0.015% Brij-35、40mM EDTA、0.1% Coating Reagent 3(Caliper life science)後，使用Caliper life science公司之EZ Reader II，分離經磷酸化之基質與未經磷酸化之基質，並測定基質胜肽被磷酸化之比例(Conversion)與抑制活性(Inhibition)。藉由在S字形的(sigmoid)曲線擬合測定值，算出化合物顯示50%抑制之濃度，作為GSK3β酵素抑制活性之IC₅₀值。

各實施例化合物之IC₅₀值為20nM以下。

(試驗例2 抗細胞試驗)

將來自人惡性黑色素瘤之細胞株A375細胞(ATCC公司)接種到96孔板(2000/孔)，在製備含待驗化合物之檢體的稀釋系列後添加到各孔。於4日培養後，將CellTiter-Glo^TM Luminescent Cell Viability Assay(Promega)添加到各孔，並測定ATP量之變化。50%細胞增殖抑制活性(GI₅₀)係以下式計算。

100×[(T-T₀)/(C-T₀)]=50

(在此，T係4日間待驗化合物添加孔之量測值、C係4日間待驗化合物非添加孔之計測值、T₀係待驗化合物添加時之初始量測值)。

已實施試驗之實施例化合物中，實施例1~16、18~36、39~50、52、53之化合物為GI₅₀值50nM以下。

(試驗例3)體內(in vivo)抗腫瘤效果

將來自人惡性黑色素瘤之細胞株A375細胞調配為4×10⁷cells/mL，並將0.1mL腫瘤細胞懸浮液移植到BALB/c裸小鼠(雌性、5~6週大)的皮下，飼養7~10日。確認腫瘤體積之平均超過100mm³後，使用腫瘤體積值實施分群(n=5)，將待驗化合物懸浮於0.5%甲基纖維素，對於小鼠經口投予。投予用量之設定，係針對各化合物實施對於小鼠經口投予之預備試驗，將出現死亡例之最低單次投予用量的1/2作為最大耐量(MTD)。將MTD設定作為最大投予量，而以複數種的投予用量，評價於單次投予的藥效。藥效係經時地以電子數位卡尺測量腫瘤之長徑(mm)及短徑(mm)，並依下示計算式，以判定日(投予1週後)之腫瘤增殖抑制率(GI%)進行評價。

GI(%)=(1-A/B)×100

A：化合物投予群於判定日之平均腫瘤體積 (＊)

B：無處置對照群於判定日之平均腫瘤體積 (＊)

＊：腫瘤體積係以1/2×[腫瘤長徑]×[腫瘤短徑]×[腫瘤短徑]算得。

實施了試驗的實施例化合物當中，實施例1、2、11、13、18、20、21、22、25、27、30、32、36~44、47、50、53、54，於MTD以下之濃度顯示GI(%)>30之腫瘤增殖抑制。

Claims

一種化合物或其鹽，係以通式(1)表示； [式中，R₁表示羧基、胺甲醯基或氰基，R₂表示甲基或氫原子，R₃表示鹵素原子，R₄表示也可具有選自於下列A群之取代基之哌啶基、也可具有選自於下列A群之取代基之吡啶基、也可具有選自於下列A群之取代基之環己基、或氫原子，X₁表示C-H、C-F或N，X₂表示CH₂、N-H或S]A群：也可經1~3個鹵素原子、羥基或甲氧基取代之C₁-C₆烷基、乙醯基、甲基磺醯基、羥基。
如申請請求項1之化合物或其鹽，其中R₁係羧基或氰基。
一種化合物或其鹽，係選自於以下之群組中之一；
一種肝醣合成酶激酶3(GSK3)抑制劑，包含如申請請求項1至3中任一項之化合物或其鹽。
一種醫藥，係將如申請請求項1至3中任一項之化合物或其鹽作為有效成分。
一種抗癌劑，係將如申請請求項1至3中任一項之化合物或其鹽作為有效成分。
一種醫藥組成物，含有如申請請求項1至3中任一項之化合物或其鹽、及藥學上可容許之載體。
一種癌之治療方法，其特徵為：投予如申請請求項1至3中任一項之化合物或其鹽。
如申請請求項6之抗癌劑，其中該癌係血癌(白血病、淋巴瘤、多發性骨髓瘤)、腦腫瘤、頭頸部癌、食道癌、胃癌、闌尾癌、大腸癌、肛門癌、膽嚢癌、膽管癌、胰臟癌、消化管間質腫瘤、肺癌、肝癌、間皮瘤、甲狀腺癌、腎臟癌、前列腺癌、神經內分泌腫瘤、黑色素瘤、乳癌、子宮體癌、子宮頸癌、卵巢癌、骨肉瘤、軟部肉瘤、卡波西肉瘤、肌肉瘤、腎臟癌、膀胱癌或睪丸癌。
如申請請求項8之癌之治療方法，其中癌係血癌(白血病、淋巴瘤、多發性骨髓瘤)、腦腫瘤、頭頸部癌、食道癌、胃癌、闌尾癌、大腸癌、肛門癌、膽嚢癌、膽管癌、胰臟癌、消化管間質腫瘤、肺癌、肝癌、間皮瘤、甲狀腺癌、腎臟癌、前列腺癌、神經內分泌腫瘤、黑色素瘤、乳癌、子宮體癌、子宮頸癌、卵巢癌、骨肉瘤、軟部肉瘤、卡波西肉瘤、肌肉瘤、腎臟癌、膀胱癌或睪丸癌。