TW201022254A - S1P lyase inhibitors for the treatment of cerebral malaria - Google Patents

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201022254 六、發明說明： 本發明主張美國專利臨時申請案61/1〇9,982與 61/109,987的優先權，上述兩申請案皆於2〇〇8年1〇月 3 1日提出’在此將其全文納入作為參照。 【發明所屬之技術領域】 本申請案係有關於治療、管理和/或預防腦型瘧疾的方 法與可用於該方法之組成物。 【先前技術】 2.1腦型瘧疾 每年有超過兩百萬人死於瘧疾，其中大部分為非洲孩 童（參見.Golenser，J. ’ 等人 ’ /”ί. 乂 幻; 36:583_593，583 (2006))。要根絕此一疾病，「最大的阻 礙是虐原蟲（特別是最常見且最危險的致病物種--惡性 癔原蟲（Plasmodium falciparum))對現有抗瘧疾藥物發展 出了抗藥性」（前揭註）。 惡性瘧原蟲感染最嚴重的併發症之一就是腦型瘧疾 (cerebral malaria, CM)，約有7%的惡性癔原蟲癔疾個 案會表現出此一併發症。CM的主要症狀為昏迷（布蘭泰 爾（Blantyre)昏迷指數S2或格拉斯哥（Glasgow)昏迷指數 $ 8)，血液抹片中出現惡性瘧原蟲，且沒有其他已知造 成昏迷的原因（參見：John, C.C. ’等人’ 201022254 ^2^92^99 (2008))。據估計，在次撤哈拉非洲每年約有 785,〇〇〇名孩童受到CM的影響，而平均致死率約為 18.6% (參見·· Golenser ’ 第 586 頁；以及 J〇hn，第 頁近來有研究顯示’感染CM後康復的孩童中，每四 人就有一人會經歷長期的認知障礙（J〇hn，前揭註）。 雖然CM的致病機轉不明，較為簡單的解釋認為「黏 附至内皮細胞以及腦部微血管中被寄生之紅血球與免疫 細胞的隔離會導致發炎反應並釋放出其他神經毒性分 子」（參見：Golenser’第584頁）。可利用抗癔疾藥物 來治療某些CM患者（前揭註，第586頁）。但上述療法 中存在一種「不可逆的階段，即便進行了大量的抗寄生 蟲治療’在此一階段後患者仍會死亡」（前揭註）。因此， 相關領域提出了多種辅助療法，其中某些看似具有前 景’但大多數則不然（參見，前揭註，第586_591頁）。 2·2 SIP途徑 神經胺醇-1-碌酸酯（Sphingosine-l-phosphate, SIP) 是一種生物活性分子，其可能會影響多種器官系統（參 見：Saba，J.D.與 Hla，T. Circ. Λα. 94:724-734 (2004))。 此一化合物可和五種相關的G-蛋白質耦合的受體 (S1P1-5)形成低親和力的鍵結，上述受體先前分別稱 為内皮細胞分化基因（endothelial differentiation gene， EDG)受體-1、-5、-3、-6 與-8 (參見：Brinkmann，V.， 尸/^rwiico/. TTjerapewizci 1 15:84-105, 85 (2007))。受體 亞型S1P1、S1P2與S1P3皆廣泛地表現於心血管系統中 4 201022254 (前揭註，篦π、 頁）。S1P1是淋巴細胞上的優勢受 體’且可調控淋巴細胞由次級淋巴器官排出（前揭註 相關領域已提出並建議多種Slp受體的促效劑可作為 、 疾病的可迠療法，上述疾病包括宿主抗移植物疾病、類 w 風濕性關節炎與多發性硬化（multiple scl⑽is，MS)。 特別疋已針對S1P1促效劑FTY720 (芬戈莫德， fingohmod )進行廣泛的研究，目前已將其運用於治療 MS的臨床試驗（前揭註，第％_丨〇〇頁）。 ❼ 看起來似乎亦可藉由影響S1P途徑的其他部分，來治 療某些疾病。舉例來說’酵素sip裂解酶可催化Slp的 裂解而使其成為乙醇胺碟酸醋（ethan〇iamine ph〇Sphate ) 與長鏈搭類’而SIP裂解酶的抑制劑可有效地用於類風 濕性關節炎模型中，且目前正在進行臨床試驗（參見：

Oravecz，T.等人 “Sphingosine-l-Phosphate Lyase is a

Potential Therapeutic Target in Autoimmune Diseases • Including Rheumatoid Arthritis/* Presentation 1833, American College of Rheumatology Scientific Meeting (San Francisco, October 28, 2008) ; Pappas, C.，等人， “LX2931: A Potential Small Molecule Treatment for Autoimmune Disorders，” Presentation 351， American College of Rheumatology Scientific Meeting (San Francisco，October 26，2008))。同時可參見：美國專利 公開案2007/0208063 ;美國專利申請案12/038,872。 5 201022254 【發明内容】 本發明包含了用以治療、管理和/或預防腦型瘧疾的方 法’上述方法至少包含向有需要的患者施予治療有效量 或預防有效量的S1P裂解酶抑制劑。特定的S1P裂解酶 抑制劑為具有以下結構式的化合物：

ΗΝγΝ Ri^X 與其藥學上可接受的鹽類，其中：X為〇為 ORiA、ΝΗΟΗ、氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳 基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；R2 為ORza、C(0)0R2A、氫、鹵素、腈或選擇性經取代之烷 基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環

或雜環院基；r3 為 〇r3A、n(r3A)2、nhc(o)r3A、nhso2r3A

或氫；r4為or4A、oc(o)r4A、氫、鹵素或選擇性經取 代之炫基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷 基雜環或雜環烷基；Rs為N(RSA)2、氫、羥基或選擇性經 取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、 烧基雜環或雜環烧基；以及每一 R丨A、R2A、、Rq與 Rsa分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基芳 烧基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基。 在某些方法中，上述S1P裂解酶抑制劑可附帶和一或 多種額外的活性成分一起施用。 6 201022254 本發明亦包含可用以治療、管理和/或防止CM的藥學 組成物。 【實施方式】 本發明係有關於S1P受體促效劑用於治療、管理和/ 或預防腦型瘧疾（CM)之用途。本發明部分係以申請人 體認到可藉由調節Slp途徑來治療CM的此一發現為基 礎。舉例來說，在此一疾病的完整小鼠模型中，申請人 發現促進S1P受體與抑制sip裂解酶皆可提供對於cm 的保護。參見，如.美國專利臨時申請案61/1〇9 991(2〇〇8 年月31申請）、美國專利臨時申請案61/229 97〇( 2〇〇9 年7月30曰申請）以及美國專利臨時申請案61/1〇9 982 (2009年1〇月31申請）。 5·ι名詞定義

基、2,3-二甲基-2-丁烯基、 丁烯基、2-丁烯基、異丁烯基、 3-甲基-1-丁烯基、2·曱基_2_丁烯 基、1-己稀基、2-己稀基、3 -己稀 基1-庚烯基、2_庚烯基、3-庚烯基、1-辛烯基、2_辛烯 基' 3-辛婦基、1-壬烯基 、2-壬稀基、3-壬稀基、ι_癸婦 201022254 基、2-癸烯基及3-癸烯基。 除非另有說明，「烧基」一詞係指具有1至20 (如：1 至10或1至4)個碳原子的直鍵、分支和/或環狀（環烷 ^ 基）碳氫化合物。具有1 -4個碳原子的烷基成分稱為「小 V 型烷基（lower alkyl )」。烷基的實施例包括但不限於： 甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、第三丁基、異丁 基、戊基、己基、異己基、庚基、4,4-二甲基戊基、辛基、 φ 2’2,4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一基與十二基。環烷 基成分可為單環或多環’且其例示包括環丙基、環丁基、 環戊基、環己基與金剛烧基（a(Jamantyl )。額外的烧基 成分實施例為具有線性、分支和/或環狀部分者（如： 乙基-4-甲基-環己基）。「烷基」一詞包括飽和碳氫化合物 以及烯基與炔基成分。 除非另有說明，「烷芳基」或「烷基_芳基」等詞係指 ® 一烷基成分鍵結至一芳基成分。 除非另有說明，「烷基雜芳基」或「烷基-雜芳基」等 詞係指一烷基成分鍵結至一雜芳基成分。 除非另有說明，「烷基雜環」或「烷基_雜環」等詞係 心一院基成分鍵結至一雜環成分。 除非另有說明，「炔基」—詞係指具有2至2〇 (如：2 至20或2至6)個碳原子的直鏈分支和/或環狀碳氫化 口物’且包括至少一碳_碳三鍵。代表性的炔基成分包括 201022254 乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-甲基-1-丁炔基、4-戊炔基、1-己炔基、2-己 炔基、5-己炔基、1-庚炔基、2-庚炔基、6-庚炔基、1-辛 . 炔基、2-辛炔基、7-辛炔基、丨_壬炔基、2_壬炔基、8_壬 , 炔基、1-癸炔基、2-癸快基與9-癸炔基。 除非另有說明，「烷氧基」一詞係指烷基。烷氧基 的 例 示包括 -OCH3 、 _ -OCH2CH3 、 -〇(CH2)2CH3 、 -0(CH2)3CH3 、 -0(CH2)4CH3、-0(環戊基）與 _〇(CH2)5CH3。 除非另有說明，「芳基」一詞係指由碳與氫原子組成的 芳環或一芳香系或部分芳環系。芳基成分可至少包含鍵 結或併合在一起的多個環。芳基成分的例示包括但不限 於，蒽基（anthracenyl )、奠基（azuienyi )、聯苯 (biphenyl)、苐基（fiuorenyi)、二氫茚基（indan)、茚 _ 基（indenyl )、秦基（naphthyl )' 菲基（phenanthrenyl )、 笨基（phenyl ) 、 1，2,3,4-四氫-萘 (l’2,3,4-tetrahydro-naphthalene)及甲苯基（iolyl)。 * 除非另有說明，「芳烷基」或「芳基-烷基」等詞係指 务基成分鍵結至一烧基成分。 除非另有說明，「鹵素」或「鹵基」等詞包括氟、氣、 溴與碘。 除非另有說明，「雜烷基」一詞係指一烷基成分（如： 9 201022254 線性、分支或環狀）中的至少一個碳原子被一雜原子 (如：N、0或S)所取代。 除非另有說明，「雜芳基」一詞係指一芳基成分中的 至少一個碳原子被一雜原子（如：N、0或S)所取代。 b 其實施例包括但不限於，吖啶基（acridinyl )、苯并咪 唑基（benzimidazolyl )、苯并呋喃基（benzofuranyl )、 苯并異噻唑基（benzoisothiazolyl )、苯并異噁唑基 _ ( benzoisoxazolyl ) 苯并噎 °坐 淋 基 (benzoquinazolinyl)、苯并噻唑基（benzothiazolyl )、 苯并噁唑基（benzoxazolyl )、呋喃基（furyl )、咪唑基 (imidazolyl )、吲哚基（indolyl )、異噻唑基 (isothiazolyl )、異》惡嗅基（isoxaz〇iyi )、β惡二嗤基 (oxadiazolyl )、噁唑基（oxaz〇iyi )、呔畊基 (phthalazinyl )、吡哄基（pyrazinyl )、吡唑基 籲 （Pyraz〇lyl )、°荅哄基（pyridazinyl )、》比咬基（pyridyl )、 ’咬基（pyrimidinyl )、嘯咬基（pyrimidyl )、α比咯基 (pyrrolyl )、噎唾琳基（qUinaz〇Hnyi )、喧嘛基 (quinolinyl )、四 〇坐基（tetrazolyl )、嗟》坐基（thiazolyl ) 及二哄基（triazinyl )。 除非另有說明’ 「雜芳烷基」或「雜芳基-烷基」等詞 係指一雜芳基成分鍵結至一烷基成分。 除非另有說明，「雜環」一詞係指至少由碳、氫與至少 201022254 一雜原子（如：N、〇或s)組成的—芳香族、部分芳香 族或非芳香族的單環或多環的環或環系統。雜環可至少 包含併合或鍵結在—起的多（即，二或更多）環。雜環 包括雜芳基。具體的雜環為5至13個組成原子的雜環其 中含有1至4各分別選自N、〇與S的雜原子。其他實 施例為5至10個組成原子的雜環其中含有i 14各分別 選自N、〇與S的雜原子。雜環的實施例包括苯并[^3] 二噁唑（benZO[l，3]dioxolyl )、2 3_二氫 _ 笨并以，4]二噁畊 (2,3-dihydro-benzo[l，4]dioxinyl ) 、 口 辛啉基 (cinnohnyl )、喃基（furanyl )、乙内醯脲基 (hydantoinyl )、嗎吱琳基（morph〇Hnyi )、環氧丙基 (oxetanyl )、環氧丁基（oxiranyi )、六氫n比哄基 (piperazinyl )、六氫β比咬基（piperidinyl )、β比洛烧嗣基 (pyrrolidinonyl ) > °比略唆基（pyrrolidinyl )、四氫喃基 (tetrahydrofuranyl )、四氫旅喃基（tetrahydropyranyl )、 四氫唆基 （tetrahydropyridinyl )、四氫嘲咬基 (tetrahydropyrimidinyl ) 四氫 苯硫基 (tetrahydrothiophenyl ) 四氫嗟 °南 基 (tetrahydrothiopyranyl)及戊内酿胺（valerolactamyl ) 〇 除非另有說明，「雜環烷基」或「雜環-烷基」等詞係 指一雜環基成分鍵結至一烧基成分。 除非另有說明，「雜環院基」一詞係指一非芳香族雜 201022254 環。 除非另有說明，「雜環烷基烷基」或「雜環烷基-烷基」 等詞係指一雜環烷基成分鍵結至—烷基成分。 祕除非另有說明，「管理」一詞及其時態變化涵蓋防止 曾罹患特定疾病或異常的患者體内，所述疾病或異常的 \發和/或延長罹患該疾病或異常的患者體内症狀較為 咸緩的時間。此—詞彙涵蓋調節該疾病或異常的門棍、 發展和/或持續時間，或改變患者對於該疾病或異常的反 應。 除非另有說明，「藥學上可接受的鹽類」一詞係指由 藥予上可接梵的無毒酸或驗所製成的鹽類，上述酸或驗 包括無機酸、無機鹼以及有機酸、有機鹼。適當的藥學 上可接受的鹼加成鹽類包括但不限於：由鋁、飼、鋰、 鎮卸、納與鋅等製成之金屬鹽類或由離胺酸、n，n，_ 十乙一胺、氣化普魯卡因（chloroprocaine )、膽驗、 乙醇胺 '乙二胺、美洛明（meglumine，即N-甲基還 原葡糖胺）及普魯卡因（procaine )等製成之有機鹽類。 適當的無毒酸包括但不限於，無機與有機酸，例如醋酸、 海藻酸、鄰胺苯甲酸（anthranilic)、苯續酸、苯曱酸、 棒腦續酸、檸檬酸、乙烯基續酸（ethenesulfonic)、甲 酸、丁烯二酸、呋喃曱酸、半乳糖醛酸、葡萄糖酸、尿 甘酸、麩酸、乙醇酸、氫溴酸、氳氣酸、羥乙磺酸、乳 12 201022254 酸、順丁烯二酸、蘋果酸、杏仁酸、曱磺酸、粘液酸、 石肖酸、雙經基萘酸（pamoic acid )、泛酸、苯醋酸、碟 酸、丙酸、柳酸、硬脂酸、琥珀酸、對胺苯磺酸、硫酸、 酒石酸與對曱苯磺酸。具體的無毒酸包括鹽酸、氫溴酸、 磷酸、硫酸與甲磺酸。因此，具體鹽類的實施例包括氫 氣化物及曱續酸鹽。相關領域中還有多種已知的其他實 施例。參見’如：（18th

ed.，Mack Publishing，Easton PA:1990)以及

The Science and Pratice of Pharmacy (19th ed., Mack Publishing，Easton PA:1995)。 除非另有說明，「防止」、「預防」等詞及其時態變化意 指在患者開始罹患特定疾病或異常之前所進行的動作， 該動作可抑制紐低該疾病或異f的嚴重性。換句話說 此一詞彙涵蓋疾病預防（prophylaxis )。 除非另有說明’化合物的「預防有效量」係指該含 足以預防疾病或或狀況或與該疾病或狀況相關聯的一 多種症狀’或可防止其復發。化合物的預防有效量係 一治療藥劑的劑量（單獨或與其他藥劑合用時）能夠 供預防的效果，以預防該疾病。「預防有效量Π可 :能夠提升整體預防效果或增進另-種預防性藥劑之 防效果的劑量。 除非另有說明 立體異構混合物 一詞涵蓋了消旋混 13 201022254 合物以及立體異構物強化之混合物（如：R/S = 30/70、 35/65 、 40/60 、 45/55 、 55/45 、 60/40 、 65/35 及 70/30)。 除非另有說明，「純立體異構物」一詞係指一組成物至 少包含一化合物的一種立體異構物，且實質上不含該化 合物的其他立體異構物。舉例來說，對於具有一立體中 心的一化合物而言，該化合物的純立體異構物之組成物 實質上不含該化合物的相對立體異構物。對於具有二立 φ 體中心的一化合物而言，該化合物的純立體異構物之組 成物實質上不含該化合物的其他非鏡向異構物。典型的 純立體異構物化合物至少包含：該化合物的一種立體異 構物之含量大於80%重量百分比，且該化合物之其他立 體異構物的含量小於20%重量百分比；該化合物的一種 立體異構物之含量大於90%重量百分比，且該化合物之 其他立體異構物的含量小於1 〇%重量百分比；該化合物 ❿ 的一種立體異構物之含量大於95%重量百分比，且該化 合物之其他立體異構物的含量小於5%重量百分比；該化 合物的一種立體異構物之含量大於97%重量百分比，且 該化合物之其他立體異構物的含量小於3%重量百分 比；或該化合物的一種立體異構物之含量大於99%重量 百分比，且該化合物之其他立體異構物的含量小於1%重 量百分比。 除非另有說明，當利用「取代」一詞來描述化學結構 14 201022254 或成分時，意指該結構或成分的一衍生物，其中該結構 或成分的一或多個氫原子被一化學成分或官能基所取 代，上述化學成分或官能基例如但不限於：醇、醛、烷 氧基、烷醯氧基、烷氧基羰基、烯基、烷基（如：甲基、 乙基、丙基、第三丁基）、炔基、烷基羰醯氧基（-oc(o) 烷基）、醯胺基（-C(O)NH-烷基-或-烷基NHC(O)基）、 脒基（-C(NH)NH-烷基或-C(NR)NH2 )、胺（一級胺、二 φ 級胺與三級胺，例如烷胺基、芳胺基、芳烷胺基）、芳醯 基、芳基、芳氧基、偶氣、胺曱酿基（carbamoyl， 如：-NHC(0)0-烷基-或-0C(0)NH-烷基）、胺甲醯基 (carbamy卜如：CONH2 以及 CONH-烷基、CONH-芳基、 及CONH-芳烷基）、羰基、羧基、羧酸、羧酸酐、羧醯 氯、氰基、酯基、環氧基、醚基（如：曱氧基、乙氧基）、 胍基、鹵基、鹵烷基（如：-CC13、-CF3、-C(CF3)3)、雜 φ 烷基、半縮醛、亞胺（一級與二級）、異氰酸酯基、異硫 氰酸鹽、酮、腈、硝基、側氧基、正磷酸二酯體、硫化 物、磺醯胺基（如：S02NH2 )、砜、磺醯基（包括烷基 磺醯基、芳基磺醯基及芳烷基磺醯基）、亞砜、硫醇基 (妒：巯基、硫代醚基）及脲（-NHCONH-烷基-)。 除非另有說明，化合物的「治療有效量」係指該含量 足以對欲治療或管理之疾病或狀況或提供治療上的益 處，或可延緩或盡可能減輕與該疾病或狀況相關聯的一 15 201022254 或多種症狀。化合物的治療有效量係指該治療藥劑的劑 量（單獨或與其他療法合用時）能夠對欲治療或管裡的 疾病或狀況提供治療上的益處》「治療有效量」一詞可涵 . 蓋足以改善整體療法、減少或避免—疾病或狀況之症狀 , 或成因或強化另一治療藥劑的治療效果的劑量。 除非另有說明，「治療」一詞及其時態與詞類變化意指 當-患者經歷特定疾病或異常時’肖以減低該疾病或異 φ 常之嚴重性或妨礙或減緩該疾病或異常之進展的動作。 除非另有說明，「包括」-㈣與其時態變化之意義與「包 括但不限於」相同。相似地，「例如」一詞的意義與「例 如，但不限於」相同。 除非另有說明，緊接在一系列名詞前的一或多形容詞 係用以形容該些名詞之每—者。舉例來說，「選擇性經取 代之烷基、芳基或雜芳基」的意義係指「選擇性經取代 • 之烷基、選擇性經取代之芳基或選擇性經取代之雜芳 基」。

當可理解，在此處，對於形成一較大化合物之一部份 的一化學成分，可利用當該化學成分以單一分子.形式存 在時常用的命名方式、或通常用以稱呼其原子團的名稱 來描述之。舉例來說，當利用「„比咬」與「。比唆基」來 描述連接至其他化學成分的一成分時，兩者具有相同意 義。因此，「ΧΟΗ，其中X為σ比唆基」和「ΧΟΗ，其中X 16 201022254 為哎咬」這兩個句子的意義相同，且涵蓋2經基β比咬、 3_羥基吡啶與4-羥基吡啶等化合物。 亦應理帛右並未以例如粗體或虛線來標示一結構或 .—結構之-部分的立體化學結構，所示的結構或該結構 • 的該部分應解釋為包含其所有立體異構物。再者，對於 圖式中所示的任何具有未滿足價的原子，應假定其上連 接了足夠的氫原子以滿^其價態。此外，當將化學鍵結 籲緣不為-實線平行於一虛線時，若是價態許可，應認為 此—鍵結涵蓋了單鍵與雙鍵（如芳香族）。 5·2 S1P裂解酶抑制劑 本發明之具體實施例使用了下述化學式I.Α與II.Α的 〇物上述兩種化學式的化合物皆可抑制sip裂解 酶參見如.美國專利公開案US-2007-0208063-A 1以 Φ 及美國專利7,598,280 » 具體的化合物為結構式Ι.Α之化合物： R4

Ι.Α 與其藥學上可接受的鹽類，其中或NR3;Ri為 ORia、NHOH、氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳 17 201022254

基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；R2 為ORm、C(〇)〇r_2A、氫、鹵素、腈或選擇性經取代之烷 基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環 . 或雜環烧基；R3 為 〇R3A、N(R3A)2、NHC(0)R3A、NHS02R3A * 或氳；R4為〇R4A、〇C(0)R4A、氫、鹵素或選擇性經取 代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷 基雜環或雜環烧基；R_5為N(R5A)2、氫、羥基或選擇性經 # 取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、 院基雜環或雜環烷基；以及每一 Rl A、R2A、R3A、R4A、 與Rsa分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、 芳烧基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基。 具有化學式I.A的具體化合物如X為〇 ; Ri為1_4個 碳的烷基、苯基，苄基或苯乙基；為氫；以與尺4與 R5其中之一為經基；R_4與尺5其中另一者並非1_6個碳的 ❶ 烷基、卜6個碳的羥烷基、每一個碳上最多有一個羥基的 1-6個碳的多羥烧基、每一個碳上最多有一個羥基的ι_6 個碳的多醯烷基、苯基、苄基或苯乙基。 在特定具體實施例中，上述化合物並非2-乙醯-4-四羥 丁 基味峻（2-acetyl-4-tetrahydroxybutylimidazole )、 1-(4-(1，1，2,2,4-五經丁基）_1^-_»圭-2-基）乙酮（1-(4-(1， l,2,2,4-pentahydroxybutyl)-lH-imidazol-2-yl)ethan〇ne ) 、四乙酸1-(2-乙醯-1H-咪唑-4-基）丁烷-1,1,2,2-四酯 18 201022254 ( 1 - (2-acetyl - lH-imidazol-4-yl)butane -1,1,2,2-tetrayl tetraacetate )或五乙酸 1-(2-乙醯-1H-咪唑-4-基）丁烷 -1，1，2,2,4-五醋(1 -(2-acetyl-lH-imidazol-4-yl)butane- 1,1,2,2,4-pentayl pentaacetate) ° 一特定的具體實施例利用了化學式I.B的化合物： r7 r8 Η〇χ Μ vHR9

ΗΝγΝ

I.B 與其藥學上可接受的鹽類，其中：X為〇或NR3 ;心為 OKiA、NHOH、氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳 基、芳烧基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；r2 為ORm、C(〇)〇r2a、氫、函素、腈或選擇性經取代之烷 基、芳基、烧芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環 或雜環炫基；R3 為 〇r3A、n(R3a)2、nhc(o)r3A、nhso2r3a 或氫；r6 為 or6a、〇C(〇)R6a、N(R6b)2、nhc(o)r6B、 氯或 i 素；R7 為 〇r7A、〇c(〇)R7A、N(R7B)2、NHC(0)R7B、 氣或 _ 素；R8 為 〇R8A、〇c(〇)R8A、N(R8B)2、NHC(0)R8B、 氣或齒素；R9 為 CH2OR9A，ch2oc(o)r9A、N(R9B)2、 NHC(0)R9B、氫或 _ 素；每一 R1A、R2A、R3A、R6A、R7A、 Rsa與RPA分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳 201022254 基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；以 及每一 ReB、Rm、R_8B與r9b分別為氫或以一或多種羥基 或鹵素基選擇性取代之貌基。 • 具有化學式I.B的具體化合物如：（1 )若χ為〇 ; Ri .為1-4個碳的烷基、苯基、苄基或苯乙基；且尺2為氫； R6、R7、RS與&其中至少兩個不是羥基或乙酸；（2)若 X為〇 ; R丨為甲基；I為氫；R6與&皆為羥基；且& φ 與R9其中之一為氫，其中另一並非NHC(0)R9B ; ( 3 )若 X為0 ; R!為〇R1A ; r〗a為氫或小型烷基；且r2為氫， R6、R7、Rs與R_9其中至少一但並非全部為羥基或乙酸。 本發明的具體化合物具有以下化學式丨B(a):

I.B(a) 其他化合物具有以下化學式I.C :

HO ΗΝγΝ Ri N-R3

I.C 其中：Z為選擇性經取代之烷基；1^為〇RlA、NHOH、 20 201022254 氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜 烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；R2為 OR2A、 C(0)0R2A、氫、鹵素、腈或選擇性經取代之烷基、芳基、 烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基； R3 為 OR3A、n(r3A)2、nhc(o)r3A、nhso2r3A 或氫；以 及每一 R1A、R2A與R3A分別為氫或選擇性經取代之烷 基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環 或雜環烷基。 本發明另一具體實施例使用了具有化學式I.D之化合 物：

與其藥學上可接受的鹽類，其中：心為〇R1A、NHOH、 氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜 烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；R3為〇R3A、N(R3A)2、 nhc(o)r3A、nhso2r3A 或氫；r6 為 or6A、oc(o)r6A、 N(R6B)2、NHC(0)R6B、氫或 i 素；r7 為 or7A、oc(o)r7A、 N(R7B)2、NHC(0)R7B、氫或鹵素；R8 為 OR8A、oc(o)r8A、 n(r8B)2、nhc(o)r8B、氫或鹵素；R9 為 CH2OR9A， 21 201022254 CH2oc(o)R9A、n(r9B)2、nhc(o)r9B、氫或 _ 素；以及 每一 RlA、β·3Α、Κ·6Α、Κ·7Α、Κ·8Α與R_9A分別為氫或選擇性 經取代之烧基、芳基、烧芳基、芳烧基、雜院基、雜環、 烷基雜環或雜環烷基。 具體的化合物具有以下化學式I.D(a):

I.D(a) 針對含有下述成分的每一上述化學式，本發明的某些 具體實施例可為： 在某些具體實施例中，X為〇。在其他具體實施例中， X 為 NR3。 在某些具體實施例中，Rl為氫。在其他具體實施例中’ I為選擇性經取代之小型烷基。在其他具體實施例中， I為NHOH。在其他具體實施例中，&為〇r〗a且r

1 A 為例如氫或選擇性經取代之小型烷基。 在某二八體實施例中，Rz為氫。在其他具體實施例中， R2並非氫。在其他具體實施例中 R2為腈。在其他具體

22 201022254 c(o)〇R2A。在某些具體實施例中，Rsa為氫或選擇性經 取代之小型烷基。 在某些具體實施例中，R_3為ORm。在其他具體實施例 • 中，R3為n(r3a)2或nhc(o)r3A。在其他具體實施例中， . R3為NHS〇2R3A。在某些具體實施例中，R3A為氫或選擇 性經取代之小型烷基。在其他具體實施例中，為選擇 性經取代之芳基或雜環基。 • 在某些具體實施例甲’ R4為OR^。在其他具體實施例 中，R4為_素。 在某些具體實施例中，R_5為N(R5A)2。在其他具體實施 例中’ Rs為氫。在其他具體實施例中，Rs為羥基。在其 他具體實施例中，RS為雜烷基（如：烷氧基在其他具 體實施例中，R5為選擇性經取代之烷基。在其他具體實 施例中’ Rs為選擇性經取代之芳基。 參 在某些具體實施例中’ R6、R7、R8與r9其中一或多個 為經基或鹵素。在某些具體實施例中，R6、r7、r8與R9 皆為經基或乙酸β 在某些具體實施例中，Ζ為以一或多羥基、乙酸或鹵 素成分選擇性取代之烷基。 本發明亦可使用下列化學式II之化合物： 23 201022254

II.A 與其藥學上可接受的鹽類，其中：A為一選擇性經取代 之雜環基；R,為 ORlA、〇C(0)r1a、（:（0)0RlA、氫、鹵 素、腈或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、 雜烧基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；r2為〇R2A、 〇C(〇)R2A、氫、齒素或選擇性經取代之烷基、芳基、烷 芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基； I為ν(ι^α)2、氫、羥基或選擇性經取代之烷基、芳基、 烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基； 以及每一 Ri A、Rm與Rw分別為氫或選擇性經取代之烷 基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環 或雜環烷基。 具體的化合物具有以下化學式n A(a)4 n A(b):

ILA ⑷ II.A(b) 24 201022254 其中：r5 為 or5A、oc(o)r5A、n(r5B)2、nhc(o)r5B、 氫或 i 素；r6 為 or6A、oc(o)r6A、n(r6B)2、nhc(o)r6B、 氫或 i 素；r7 為 or7A、oc(o)r7A、n(r7B)2、nhc(o)r7B、 氫或鹵素；r8 為 ch2or8A，ch2oc(o)r8A、N(R8B)2、 NHC(0)R8B、氫或齒素；每 一 RlA、Κ·5Α、Κ·6Α、R7A 與 R8A 分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷 基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；以及每一 R5b、 r6B、r7B與r8B分別為氫或以一或多羥基或鹵素基選擇 性取代之烧基。 本發明之一具體實施例使用了下列化學式II.B的化合 物： r2 R1)

r4

II.B 與其藥學上可接受的鹽類，其中：X為CR4、CHR4、N、 NR9、Ο 或 S ; Y 為 CR4、CHR4、N、NR9、Ο 或 S ; Z 為 CR4、CHR4、N、NR9、O 或 S ; Ri 為 OR1A、C(0)0R1A、 氫、i素、腈或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、 芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；R2為 OR2A、oc(o)r2A、氫、鹵素或選擇性經取代之烷基、芳 25 201022254

基、炫芳基、芳烧基、雜烧基、雜環、炫^基雜環或雜環 烧基；R_3為N(R_3a)2、氫、經基或選擇性經取代之院基、 芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜 環烧基；每一 R! A、R·2 A與R·3 A分別為氫或選擇性經取代 之烧基、芳基、烧芳基、芳烧基、雜燒基、雜環、烧基 雜環或雜環烷基；每一 R_4分別為〇R4A、〇C(〇)R4A、氫、 鹵素或選擇性經取代之烧基、芳基、炫芳基、芳烷基、 雜烧基、雜環、烧基雜環或雜環烧基；每一 r9分別為氫 或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷 基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；以及每一 r1a、R2A、 R3A與Ru分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳 基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基。 具體的化合物具有以下化學式II.B(a)或II.B(b):

II.B(a) II.B(b) 其中：R5 為 OR5A、OC(0)R5A、N(R5B)2、nhc(o)r5B、 氫或 # 素；R6 為 OR6A、OC(0)r6a、N(r6B)2、NHC(0)R6B、 氫或 _ 素；R7 為 〇r7A、〇C(0)R7A、N(r7B)2、NHC(0)R7B、 氫或 _ 素；R8 為 CH2OR8A，CH20C(0)R8A、N(R8B)2、 26 201022254 nhc(o)r8B、氫或南素；每一 Ria、 分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基芳烷 基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；以及每一 Rsb、 R6b、R*7B與Rsb分別為氫或以一或多羥基或_素基選擇 性取代之競(基。 另一具體實施例涵蓋了化學式II C的化合物：

與其樂學上可接受的鹽類’其中：χ為CR4、CHR4、N、 NR9、〇 或 S ; Y 為 CR4、CHR4、N、NR9、〇 或 S ; Z 為 CR4、CHR4、N、NR9、〇 或 s ; R]為 〇R1A、c(0)0R1A、 φ 氳、鹵素、腈或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、 ^•烧基、雜烧基、雜環、烷基雜環或雜環烧基；r2為 OR2a、OC(0)R2A、氫、鹵素或選擇性經取代之烧基、芳 基、燒芳基'芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環 烧基’ R3為N(R3A)2、氫、經基或選擇性經取代之炫基、 芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜 環烷基；每一 R1A、R2A與R3A分別為氫或選擇性經取代 之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基 27 201022254 雜環或雜環烷基；每一 R4分別為〇r4a、0C(0)R4a、氫、 i素或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、 雜燒基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；每一以分別為氫 或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷 基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；以及每一 R1A、R2A、 R3A與R_4a分別為氫或選擇性經取代之烧基、芳基、烧芳 基、芳烧基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基。

具體的化合物具有以下化學式IIC(a)或H c(b):

n.C(a) II.C(b) 其中：R5 為 0R5A、0C(0)R5A、N(R5B)2、nhc(o)r5B、 氮或幽素；R6 為 〇r6a、〇c(〇)R6A、n(r6b)2、NHC(0)R6B、 氳或 IS 素；R7 為 〇r7a、〇c(〇)R7A、n(R7B)2、NHC(0)R7B、 氫或 i 素；R8 為 CH2OR8A，ch2oc(o)r8A、N(R8B)2、 NHC(0)R8B、氫或 _ 素；每一 Ria、r5a、r6a、r7a 與 r8a 分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷 基、雜烧基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；以及每一 r5B、 R6b、R?b與Rsb分別為氫或以一或多羥基或鹵素基選擇 28 201022254 性取代之烷基。 參照上文揭露的各種化學式（如：化學式π Α、ΠΒ 與II.C)，在適用於本發明時，在某些化合物中，a為一 . 5個原子組成之選擇性經取代之雜環基。其例示包括選 擇性經取代之二氫·咪唑、二氫_異噁唑、二氫_吡唑、二 虱-售嗤、一氧戊環、二硫戊環、二硫醇、妹嗤、異。惡唾、 異噁唑啶（isoxazolidine)、噁噻烷（〇xathi〇lane)與吡 φ 唑。在一具體實施例中，A並非選擇性經取代之呋喃、 售吩或"比洛。 在某些化合物中，A為一 6個原子組成的選擇性經取 代之雜環基（如：嘧啶）。 在某些具體實施例中，X為CR4或CHR4。在某些具體 實施例中，X為N或NR9。在某些具體實施例中，χ為 Ο或S 〇 ® 在某些具體實施例中’Y為CR4或CHR4。在某些具體 實施例中，Y為N或NR?。在某些具體實施例中，γ為 Ο或S。 在某些具體實施例中，Z為CR4或CHR4。在某些具體 實施例中，Z為N或NRg。在某些具體實施例中，z為〇 或S。 在某些具體實施例中，X為N及Y為0。在某些具體 實施例中，X為N及Y為NR9。在某些具體實施例中， 29 201022254 X為N及γ為s。在某些具 艰貫施例中，X為N及Z為 Ο。在某些具體實施例十，. 馬N&Z為NR9。在某些 具體實施例中，X為1^及z為 、 巧S在某些具體實施例中， X為N，Y為N，及Z為NR9。 在某些具體實施例中，R為 1為乳。在某些具體實施例中， h為腈。在某些具體實施例中 T Ri為選擇性經取代之小 型烷基。在某些具體實施例中 J τ ’ Ri 為 〇R1A 或 c(o)or1a

❹ 與R1a為例如氫或選擇性經取代之小型烧基。 在某些具體實施例中，尺2為〇R2a。在某些具體實施例 中R2為oc(o)r2A巾R2A為例如氣。在某些具體實施例 中’ R2為_素。 在某些具體實施例中，R3為選擇性經取代之烷基（如： 以一或多鹵素或ORm成分取代之烷基，其中r3a為例如 氫或乙酸）。在某些具體實施例中，R3為氫。在某些具體 實施例中，R3為羥基。在某些具體實施例中，R3為選擇 性經取代之雜烷基（如：烷氧基）。在某些具體實施例中， R3為以一或多鹵素、羥基或乙酸取代之雜烷基。 在某些具體實施例中，R4為氫或選擇性經取代之烷 基·、芳基或烷芳基。 在某些具體實施例中’每一 r5、R6、R7與R8為氫或 南素。在某些具體實施例中，r5、r6、r7與R8其中一或 多個為羥基或乙酸。在某些具體實施例中，r5、r6、r7 30 201022254 與r8皆為羥基。 在某些具體實施例中，R9為氩或選擇性經取代之燒 基、芳基或烷芳基。 本發明之化合物可含有一或多個立體中心，且能約以 鏡像異構物之消旋混合物或非鏡像異構物之混合物的形 式存在。本發明涵蓋了此種化合物的純立體異構物形 式，以及這些形式的混合物。可利用標準技術以不對稱 鲁 地合成或辨識立體異構物’上述技術例如對掌性管柱或 對掌性辨識藥劑（chiral resolving agents )。參見，如：

Jiacc{\xes, ，專人，Enantiomers, Racemates and

Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981) » Wilen S. H.,等人，33:2725 (1977) ; Eliel，E. L.，

Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw Hill, NY, 1962)，以及 Wilen，S. H.，Γαό/es • °Ptical Resolutions, p. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of

Notre Dame Press，Notre Dame，IN，1972) 〇 本發明更涵蓋了此處揭示之化合物的立體異構物混合 物°其亦涵蓋了此處揭示之化合物的組構異構物 (configurational iS0mers )，其可能是以混合或純或實質 上純的形式存在’例如順式（Z )與反式（E )烯烴異構 物以及同側與異側肟異構物。 可利用相關領域所知的方法來製備本發明之化合物， 31 201022254 上述方法包括美國專利公開案US-2007-0208063-A1與 美國專利7,598,280中所揭露者。 5·3額外的活性成分 本發明的某些具體實施例使用除了 S1P裂解酶抑制劑 以外的一或多種活性成分。此種額外成分的例示包括抗 癔疾藥物（如：奎寧、奎寧定與青蒿素（artemisinin)衍生 φ 物例如蒿曱謎（artemether )與青蒿琥酯（artesunate ))、 滲透性利尿劑（如：甘露醇與尿素）、抗癲癇劑（如：二 氮平（diazepam)、苯妥英（phenytoin)、苯巴比妥 (phenobarbital)與苯巴比通（phenobarbitone))、退熱劑 (如：乙醯胺苯酚（paracetamol))、抗氧化劑與抗發炎藥 物（如：NSAIDS、類固醇、環孢黴素、沙利多邁 (thalidomide)、雷利米德（revlimid )、抗-TNF 抗體（如： ❿ 因福利美（infliximab)、重組人TNF受體75-Fc融合蛋 白（etanercept))以及配妥西菲林（pent〇xifyUine))。 其他還包括卡特蘭多酷硫酸醋（curdian sulfate )、薑黃 素與 LMP-420。 5.4使用方法 本發明涵蓋了預防、管理與治療CM的方法，其至少 包含向患者施予治療或預防有效量的Slp裂解酶抑制 32 201022254 劑。藥物的含量、給藥時間與給藥途徑會隨著藥物與患 者而異，且本領域具有習知技藝者可輕易確知。對某些 CM患者而言，口服給藥可能會有困難，因此較佳的给藥 途徑包括靜脈注射（i.v.)與及肌肉注射（i.m)。 在本發明某些具體實施例中，SIP裂解酶抑制劑可作 為辅助藥劑而和一或多種額外的活性成分一起施用。施 予二或更多種藥物可以同時進行（如：在相同的劑型中 或在不同的劑型中但幾乎同時施予患者），但這並非必 要。 治療與管理CM的方法適用於出現一或多種CM症狀 的患者，上述症狀包括昏迷（布蘭泰爾昏迷指數$2或格 拉斯哥昏迷指數$ 8 )’血液抹片中出現惡性瘧原蟲且沒 有其他已知造成昏迷的原因。預防CM的方法則適用於

有罹患CM風險的患者，> :企液抹片中出現惡性癌原 蟲的患者’以及選擇性地出現—或多種額外癔疾症狀的 患者’包括罹患嚴重瘧疾（如：嚴重瘧疾性貧血呼吸 箸迫、休克、自發性出血、低血糖、重複癲痛發作血 紅素尿、低血糖、衰竭、意識障礙、黃痕 '高寄生蟲血 症）者。上述患者包括成人與孩童（如：年齡為HU 者）0 33 201022254 5.5藥學配方 藥學組成物包括單—單元的劑型，其適用於口服、黏 膜（如：鼻腔、舌下、陰道、頰或直腸）、注射（如：皮 • 下、靜脈内、快速注射、肌肉内或動脈内）或經皮給藥， 而投予患者°劑型的實施例包括但不限於：藥錠；糖衣 錠；膠囊，例如軟式彈性明膠膠囊；藥片；喉錠；口含 錠；分散液；拴劑；軟膏；泥罨劑（糊劑）；藥膏；粉末； ❿敷料；乳膏；硬膏劑；溶液；貼布；噴霧劑（如：鼻液 劑或吸入劑）；凝膠；適用於口腔或黏膜給藥而投予患者 的液體劑型’包括懸浮液（如：水性或非水性液體懸浮 液、水包油乳液或油包水液體乳液）、溶液與酏劑；適用 於注射而投予患者的液體劑型；以及無菌固冑（如：結 晶型或非晶型固體)’其可經重新配製以提供適用於注射 而投予患者的液體劑型。 • '组成物與劑型的類型可隨著用途而改變。舉例來說， 要針對疾錢行急性治料，利㈣型可含有大量的 -或多種活性成分（相較㈣於針對相同疾病進行慢性 治療所用的劑型）。相似地，注射劑型所含的—或多種活 性成分的量可能小於用以治療相同疾病之口服劑型。本 發明所涵蓋之特定劑型的上述與其他方式彼此不同，且 可由本領域具有通常知識者可輕易確知。參見，如： 34 201022254

Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18th ed. (Mack Publishing, Easton PA: 1990)。 5·5·1 口服射型 適用於口服給藥之本發明的藥學組成物能夠以分離的 劑型來呈現’例如但不限於：藥錢（如：可吸嚼藥旋）、 糖衣錠、膠囊與液體（如：調味糖漿此種劑型可包含 • 預疋的/舌性成分量，且可利用本領域習知技藝者所熟知 的藥學方法來製備。參見’如：

Pharmaceutical Sciences, 18th ed. (Mack Publishing, Easton PA: 1990)。 典型的口服劑型係藉由將一適當混合物中的一或多活 性成分與根據傳統藥物調配技術的至少一賦型劑結合。 賦型劑可具有多種形式，其係取決於想藥用已施用的製 # 帛性態。對於罹患、CM的大多數患者而言，液體口服劑 型較佳。 5·5·2非腸道劑型 非腸道劑型可透過多種途徑而投予患者，包括但不限 於：皮下、靜脈内（包括快速注射）、肌肉内與動脈内。 因為這些施用形式通常會避開了患者對於污染物的自然 防衛系統，非腸道劑型需經特定滅菌處理，或在投予一 35 201022254 患者前能夠先經過滅菌處理。非腸道劑型的實施例包括 但不限於：可供注射的溶液、可供溶解或懸浮於一藥學 上可接受的注射用栽體的乾式產物、可供注射的懸浮液 與乳液。 可用以提供本發明之非腸道劑型的適當的載體為本領 域$知技藝者所熟知。相關實施例包括但不限於：注射 用水’水溶液載體例如但不限於：氣化鈉注射液、林格 式；主射液、葡萄糖注射液，葡萄糖與氯化鈉注射液以及 乳酸化林格式注射液；與水互溶的載體’例如但不限於： 、聚乙二醇與聚丙二醇；以及非水溶液载體例如但 不限於.玉米油、棉花籽油、花生油、芝麻油、油酸乙 δθ肉豆蔻酸異丙酯與苯甲酸苄酯。 6·實驗例 可藉由下列實驗例來瞭解本發明之態樣，但這些實驗 例不應限制本發明的範圍。 6.1 (E/Z)-1-(4-((ir，2s，3R)-1，2,3,4-四羥丁基）-lH-咪 唑-2-基）-乙鲷肟之合成

36 201022254 將 四羥 _ 丁基）_iH 咪唑 _2_ 基]-乙綱（THI，根據 Halweg，K M and 別也，G， 50^34-^36 (1985)所製備）（35〇 mg，152 . mm〇1)懸浮於水（1〇ml)中。加入氫氣酸骇（i26 8 mg， 1.82醜〇1，口叫）與醋酸鈉（ 247 3 mg 3 〇4inm〇i 2 eq.)，並在50〇C下攪拌將該懸浮液。約4小時之後，反 應混合物轉為澄清。繼續在5MC下攪拌16小時。lcms • 分析指出形成了產物且不存在起始材料。使反應混合物 達到至溫並通過一細孔洞過濾層。直接利用此溶液並使 用製備性HPLC純化出產物；進行製備性HpLC的方法 包括：Atlantis HILIC氧化矽管柱30 X i〇〇mm ;於水中 加入2% - 21%乙腈中超過6分鐘；45 ml/min ;並在254 nm的波長下進行偵測。收集產物部分，並在減愿條件下 使乙腈蒸發。將水溶液冷凍乾燥以得到產物，產物為約 ❹ 3 : 1的異侧：同側（anti:syn)異構物的混合物，外觀為 白色固體，約284 mg ( 77%)。

LCMS : Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm ; 0 - 17% MeOH (0.1% TFA)加入水（0.1% TFA)中超過5分鐘；流速 =3 ml/min ;偵測波長220 nm ;滯留時間：0.56分鐘（同 側異構物，246.0 (M+1))與0.69分鐘（異側異構物，246.0 (M+l))。iHNMlK D20 與 DC1) δ 2.15 與 2.22(單重峰， 3H)、3.5 - 3.72 ( m，4H)、4.76 ( br、OH 質子與 H2〇)、 37 201022254 (單重峰，1Η)。 63 .〇6、64.59、 ”.64、135.32、 4.95 與 4.97(單重峰，1H)、7.17 與 7.25 13C NMR ( D20 與 DC1) δ 10.80、16 76 64.75 、 70.86 、 72.75 、 72.85 ' ΐι7 22 、 138.39、141.35、144.12 ° 趣丁基）-1Η-咪唑 6.2 (E)-M4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4_四 -2-基）-乙酮肟之合成

此一化合物係分成兩步驟來製備，如

W ’如下所示：

Dioxane:water(2:1) " --— 1.5 equiv Ph3CONH2 0.25 equiv HCI, 50 °C

首先’在裝有THI (21.20 mmol，4.88 g)的燒瓶中加 入水（25 ml)與IN氣化氳水溶液（21·2 ml，21 2 mmol)。 當所有固體溶解之後，加入三苯曱基羥胺（25.44 mmol, 7.00g)的二氧陸圜（dioxane)溶液（55ml)，並將反應系 統維持在50°C、4小時。當反應完成後，將反應系統冷 卻至室溫且藉由加入1N的氫氧化鈉水溶液將溶液調整 至pH=7。之後將中和後的溶液濃縮成塑性塊（piastic 38 201022254 mass)’並利用快速色層分析法在氧化石夕凝膠上[10〇/ NH4〇H(5% wt.溶液於水中）加入咖中]0 將其純化，以得到呈現清澈塑膠狀的三苯甲基醚。利用 . 來處理塑性塊並加以濃縮，可得到自色料，可在 真空下將其乾燥，以得到一片狀固體（1〇 〇〇窑，產率 97%) 〇 其次，在經劇烈攪拌的室溫下之三苯甲基肟醚（4 8 • g’10 mm〇1)的二氧陸圜溶液（9〇 ml)中加入氣化氳的 二氧陸圜溶液（4 M，60 ml)。數分鐘後，可觀察到白色 沈搬物的產生’並持續攪拌總計3〇分鐘，之後利用多孔 玻璃過濾器將其過濾，並以二氧陸圜與乙醚沖洗濾餅。 將濾餅重新溶解於水（2〇〇 ml)中，並進行5分鐘的超 音波處理，之後將其冷卻至〇〇c，以矽鈣石（5 g )處理， 並通過多孔玻璃過濾器進行過濾。濃縮水溶液直到乾 # 燥’之後利用由曱醇（30 ml) /二乙基醚（60 ml)分離 出來以得到分析上純白粉末狀的E-將（3.8 g，產率 80%) 〇 39 201022254 6.3 (£/2)-1-(4-((111，28,311)-1，2,3,4_四羥丁基）-111-咪 唑-2-基）乙酮〇-甲基肟的合成

利用如上述實驗例6.1所述的方法來製備此化合物， 但在此處利用曱氧基胺鹽酸鹽取代了氫氣酸胲，而產率 φ 為74%。產物是白色絨毛狀固體。

LCMS : Sunfire C-18 管柱、4.6 X 50mm ; 0 - 17% MeOH (0.1% TFA)於水（〇.i% TFA)中超過5分鐘；流速=3 ml/min ;偵測220 nm ;滯留時間：159分鐘（同側異構 物’ 260.1 (M+1))與丨.73分鐘（異側異構物，26〇^ (M+1) )。4 NMR ( D2〇) §2.18 與 2.22(單重峰，3H)、 3.54 - 3.60 ( m，lH)、3.66 - 3·79 ( m，3H)、3.94 與 3.95 Φ (單重峰，3Η)、4.76 ( br，OH 質子與 Η20)、4.93 與 4.97(單重峰 ’ 1Η)、7.17 與 7.25(單重峰，1Η)。13c NMR (D2O) δ 11.55、17.56、62.32、62.38、62.99、63.07、 67.09、71.54、73.86、119.09、138.64、139.79、142.95、 144.98、148.97 ° 40 201022254 6.4 1-(5-甲基-4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪 嗅-2-基）乙嗣之合成 分成7個步驟並利用下文提出的方法來製備此化合 物0

Me2NS02CI, TEA DCM 1

TIPSOTf, TEA DCM

N《/N、S02NMe2 、OTIPS n-BuLi, THF, -78 °C then,

4

8

4-甲基咪唑-1-二甲胺基磺醯胺（2):在室溫下的4-甲 基咪唑J ( 3.00 g，3 6.54 mmol)之甲苯溶液（200 ml)中 連續加入三乙胺（5.6 ml，40.20 mmol )與N，N-二甲胺基 41 201022254 胺續醯氣（3.9 ml, 36.54 mmol)。將容器儲存於5〇C的冷 藏室中48小時，之後將反應.系統中的固體過濾掉，並將 所得之液體濃縮以得到位向異構物2與2α為2.5 : 1的 • 混合物。將此粗產物利用快速色層分析法在氧化妙凝膝 (80-1〇〇%醋酸乙酯：己烷，洗提劑）上進行純化，以得 到位向異構物2 : 為5.5 : 1之混合物（4.31 g，產率 62%) : M+l = 190.1 ❿ 4·甲-2-乙醯咪唑-1-二甲胺基項醢胺（3):在-780C下 之咪唾2 ( 1.99 g，10.54 mmol)的四氫呋喃溶液（70 ml) 中緩慢加入n-BuLi的己烷溶液（2.5 M，11.60 ml)。40 分鐘後’將N-曱氧基-N-曱基乙醯胺（1.30 g，12.65 mmol) 一滴一滴地加入冷卻之溶液中。允許反應系統升溫至室 /m並保持2小時。完成時，藉由加入飽和的氣化錄水溶 液（20 ml )將反應淬滅，之後以水（2〇 ml )加以稀釋。 馨 反應系統出現分層，並利用醋酸乙酯（2 X 3 0 ml )清洗 有機層。以滷水（20 ml)清洗所有的有機物，之後在硫 酸鎮上將其乾燥’並濃縮之。將此粗產物利用快速色層 •分析法在氧化矽凝膠（6〇_8〇%醋酸乙酯：己烷，洗提劑） 上進行純化以得到油狀的產物J ( 1.85 g，產率76% ): M+1 = 232.1 〇 4-甲基-2-(1-(三異丙矽氧基）已烯基）」_二甲胺基磺醢 联（4):在咪唑j i 65 g, 7 14 mm〇1)的二氯曱烷溶液 42 201022254 (45ml)中連續加入三乙胺（1〇〇mi，m 與 三氟甲續酸三異丙基石夕醋（2.12ml 7 86 mm〇i)。將反應 系統保持在室溫了 20小時，之後藉由加人飽和的 • NaHC〇3水溶液（2〇叫將反應淬滅。利用水（2〇ml) .來稀釋混合物’並使反應系統分層。利用二氣甲烷（2χ 2〇 ml)來清洗水層，並利用滷水（2〇 mi)清洗所有的 有機物，之後在硫酸鎂上將其乾燥，並加以濃縮。將所 • 得到的油狀物利用快速色層分析法在氧化矽凝膠（1-2% 甲醇.一氣甲烷，洗提劑）上進行純化，以得到橘色油 狀的石夕稀醇趟（silyl en〇l ether)4 ( 2·26 g，產率 83% ): M+l= 388.2。 内醚醇（5):在 _78°C 下的咪唑 # ( 2.26 g, 5.84 mmol) 的四氫咬喃（40 ml)溶液中換慢加入n_BuLi的己烷溶 液（2.5 M，3.27 ml)。30分鐘後，將（_)·2,3-0-異丙亞基 ❿ -D-三經丁酸内酯（1.66g，10_51 mmol)的四氫呋喃溶液 (10 ml)緩慢加入上述jpc的溶液中。將反應系統維 持在-78°C下2小時，之後讓反應系統升溫至〇〇c，接著 藉由加入飽和的氣化銨水溶液（20 ml )將反應淬滅。以 水（10 ml )稀釋混合物，且使得各層分離。利用醋酸乙 醋（2 X 20 ml)來沖洗有機物，並利用滷水（20 ml)來 沖洗全部的有機物，之後在硫酸鎂上乾燥，並加以濃縮。 利用快速色層分析法在氧化矽凝膠（30-50%醋酸乙酯： 43 201022254 己烧’洗提劑）上純化粗產物，以得到白色泡沫狀的内 醚醇（lactol)5 ( 2.69 g，產率 85%) : M+1 =546.4。 二醇（6):將顆粒狀的氫硼化鈉（1.4 g，38.32 mmol) 分成數次加入〇°C的内醚醇5(2.09 g，3.83 mmol)的乙 醇溶液（70 ml )中。2小時後，將反應系統升溫至室溫

並維持30分鐘，之後將其濃縮。將殘餘物重新溶解於水 (40 ml)以及醋酸乙酯（4〇 ml)中。將上述二相混合 物劇烈授拌1 〇分鐘，之後使其分層。利用醋酸乙酯（2 x 40 ml )來清洗水層，並利用滷水（30 ml )沖洗所有的 有機物，之後在硫酸鎂上乾燥，並加以濃縮。利用快速 色層分析法在氧化矽凝膠（5%曱醇：二氣曱烷，洗提劑） 上純化泡沫狀的粗產物以得到二醇6 ( 1.88g，產率 9〇 Λ )’所得到的產物是一種混合物含有3 : 1的苄基位 置上之無法分離的非鏡像異構物：M+1== 547.4。 ^ (7).將敦化铯（315 mg，2_08 mmol)加入味吐 6 ( 567叫，1.04 mm〇〇的乙醇溶液（10 ml)中並加熱至 65°C。1小時後 化銨水溶液（1 ’將反應系統冷卻至室溫並以飽和 ml )處理之，之後將其濃縮。利用 的氣 快速 色層刀析法在氡化妙凝膠（5%甲醇：二氣曱烧，洗提劑） 上純化粗產物以得到白色泡珠狀的味& 7 ( 380 mg，產 率 94〇/〇) : M+l=392.1。 7 ( 380 mg, 0.97 最、產物（8 ):將受到保護的咪唾 44 201022254 mmol)溶解於丙酮（6 ml)中，並連續以水（6 mi)以 及濃縮的氣化氫水溶液（3 ml)處理之。將容器加熱至 40°C並保持45分鐘，之後將其冷卻至室溫並加以濃縮。 . 利用反相製備性色層分析法來純化粗產物，其係利用i • mm X 30 mm的Zorbax C-6管柱並使用無緩衝溶劑來進 行’所用的方法如下：以1 %乙腈：水進行等位沖提循環 5分鐘（TR=1.52分鐘）。在冷凍乾燥後，可以得到化合 • 物及，此一產物為二甲胺基胺磺酸鹽類，型態為非晶型 固體：M+l= 245.1 ; iH NMR ( 400 MHz，CDC13)主要 δ 5_04 ( d，lH)、3.62 ( coinp. m，2H)、3.42 ( comp. m,2H)、 2.62 ( s，6H)、2.43 ( S，3H)、2.21 ( s，3H);次要 δ 5 〇1 (d，lH)、3.79 ( c〇mp. m，2H)、3.55 ( comp. m，2H)、2.62 (s，6H)、2.43 ( S，3H)、2.21 ( S，3H)。 Φ 6·5 (1R，2S，3R)-l-(2-(l-亞肼基乙基）-1Η-咪唑-4-基）丁 燒-1，2,3,4-四醇之合成

OH OH

將1-[4-((1尺，28,311)-1，2,3,4-四羥-丁基）-111-咪唑-2-基]-乙酮（THI，根據 Halweg，K.M. and Biichi ’ G.，《/_ 45 201022254 50:1134-1136 (1985)所製備）（148 mg, 0.64 mm〇1) 懸浮於甲醇（3 ml)與水（i ml)中。加入水合肼（35 mg， 〇·7 mmol，1.2 eq.)與醋酸（1滴），並在50°C下授掉該 • 懸浮液6小時。LCMS分析顯示形成了產物且不存在起 • 始材料。將反應混合物冷卻至室溫並以四氫咳^南稀釋 之。收集所產生的白色析出物，並以四氫吱喃沖洗，以 得到產物，上述產物為混合物，其含有約3 : 1的E:Z異 φ 構物，且為白色固體：90 mg ( 58%)。 LCMS . Zorbax C-8 管柱 4·6 X 150 mm ;於 10 - 90%水 (10 mM醋酸銨）中超過6分鐘；流速=2 ml/min ;债測 220 nm;滞留時間：0.576分鐘（同側異構物，245.0 (M+1)) 與1.08分鐘（異側異構物，245 〇 (M+1) )。iH NMR (DMSO-d6) δ 2.5 (單重峰，DMSO 下 3H)、3.4 - 3.7 (m，4H)、4.3 ( m，2H)、4.6 ( m，2H)、4.8 ( m，lH)、4.9 Φ 與5.0(雙重峰，1H)、7_04與7·21 (單重峰，1H)。 46 201022254 6.6!^-(1-(4-((1128,3只）_1，2,3，扣四羥丁基）111_咪唑 -2-基）亞乙基）乙醢肼之合成

OH OH

將 1-[4-((1玟，28,3尺）-1，2,3,4-四羥_丁基）_111_咪唑_2_ 基]-乙酮（160 mg，0.70 mmol)懸浮於甲醇（3 ml)與水 (1 ml)中。加入乙醯肼（56 mg，〇·75 mmol，1.2 eq.) 與鹽酸（1滴，12N)，並在50。<：下將該懸浮液挽拌48 小時。LCMS分析顯示形成了產物且不存在起始材料。 將反應混合物冷卻至室溫並以四氫η夫喃加以稀釋。收集 所產生的白色析出物並以四氫呋喃沖洗以得到產物，上 述產物為混合物，其含有約3: 1的Ε:Ζ異構物，且為白 色固體：129 mg ( 65%)。 LCMS : Sunfire C-18 管柱 4·6 X 50mm ;於 2 - 20%水 (10 mM醋酸錄）中超過2.5分鐘；流速=3.5 ml/min ; 偵測220 nm;滯留時間：0.53分鐘（287·1 (M+1))»巾NMR (DMSO-d6) δ 2.2 (單重峰，3H)、2.5 (單重峰，3H 於 DMSO 下）、3.4 - 3.7 ( m，4H)、4.3 ( br，2H)、4.6-5.0 (br，4H)、7.0 ( br，lH)、10.30 與 10.37 (單重峰，1H)。 47 201022254 6·7 (E>-4-甲基四羥 基）-1Η-味唾_2_基）亞已基）苯碟雄肼之合成 201022254

將 l-[4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥-丁基）_1H_ 咪唑孓 基]-乙酮（153 mg，0.67 mmol)懸浮於甲醇（3 ml)與水 (1 ml)中。加入！>·對甲苯磺醯肼（14〇 mg，〇 75 1.2eq.)與鹽酸（1滴’ 12N)，並在50。(：下搜拌懸浮液 24小時。LCMS分析顯示形成了產物且不存在起始材 料。將反應混合物冷卻至室溫並乾裝載於氧化矽凝膠 上。在氧化矽凝膠（l〇g SiCh’ 4: 1醋酸乙醋：甲醇） 上進行快速色層分析法以產生白色固體狀的產物，上述 產物為混合物含有約85: 15的E:Z異構物.142 mg (53%)。 LCMS : Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm ;於 1〇 _ 9〇%水 (10〇1]^[醋酸銨）中超過2.5分鐘；流迷==351111/爪丨11. 偵測220 nm ;滯留時間：0.50分鐘（399.2 (M+1))與 0.66 分鐘（399.3 (M+l))。】HNMR (甲醇_d4) δ 2 2 (單 48 201022254 重峰’3H)、2.41 與 2.45(單重峰，3H)、3.6-3.85(m，4H)、 4.99 與 5.05(單重峰，1H)、7.09( br S，1H)、7.39( d，2H， j =8 Hz)、7.77 與 7.87 ( d，2H，j =8 Hz)。 6.8 ]\’-(1-(4-((1只，28,311)-;|，2,3,4-四趣丁基）_1|1-味峻 -2-基）亞乙基）苯甲醢肼之合成

將 1四經-丁基）味唾·2_ 基]-乙酿I ( 150 mg，0.65 mmol)懸浮於曱醇（3 ml)與水 (1 ml)中。加入苯甲酿肼（102mg 〇 75 i ^ 與鹽酸（1滴’ 12N)’並在50。0：下攪拌懸浮液18小時。 LCMS分析顯示形成了產物且不存在起始材料。將均質 反應混合物冷卻至室溫並在真空下濃縮之。進行c i8反 相sPE(10gAlltechHi_loadcl8，梯度範圍是水至2㈣ 甲醇/水）以得到產物，上述產物為約丨：1之e : z異構 物的混合物，無色固體：193 mg ( 85%)。 LCMS： SunfireC-18 f ^ 4.6x5〇mm; ^ 1〇.9〇0/〇^ (10mM醋酸銨）中超過2.5分鐘；流速 49 201022254 偵測 220 nm;滯留時間：0.49 分鐘（349·2 (M+1))。NMR (甲醇-d4) δ 2.2 (單重峰，3H)、2·42與2.45 (單重峰’ 3H)、3.6 - 3.85 ( m，4H)、5.11 與 5.14 (單重峰 ’ 1H)、 7.3 0( br s，lH)、7.40-7.7( m，4H)、7.80 與 7·95 ( m，2H)、 8.1 ( br s，lH)。 6.9 (£)-2_(1-(4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪 唑-2-基）亞乙基）肼甲酸乙酯之合成

將 l-[4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4-四羥-丁基）-1Η_ 咪唑-2-基]-乙酮（150 mg, 0.65 mmol )懸浮於甲醇（3ml)與水 (1 ml)中。力口入肼基甲酸乙酯（ethyi carbazate) ( 78 mg， 0.75 mmol，1.2 eq.)與鹽酸（i 滴，12 N)，且之後在 5〇〇c 下攪拌懸浮液18小時》LCMS分析顯示形成了產物且不 存在起始材料。將反應混合物冷卻至室溫、在真空下濃 收集所得到的白色析出物並以丙酿j 上述產物是一種明顯的異構物， 縮並以丙酮稀釋之。收集 沖洗’以得到產物，上述 色固體：96mg ( 47% )。 50 201022254 LCMS . Sunfire C-18 管柱 4.6 x 50mm ;於 2 - 20%水 (10 mM醋酸銨）中超過2 5分鐘；流速=3 5 mi/min ; 债測220 nm ;滯留時間：〇 25分鐘（317 35 (M+i))。咕 NMR (曱醇-d4) δ 1.36 ( t，3H ’ j =8 Hz)、2.28 ( s，3H) ' 2.42 與 2.45 (單重峰，3H)、3 6〇 _ 3 85 ( m 4H)、4 34 (dd，2H ’ j =8 Hz)、5.08 ( S，1H)、7.27 ( s，iH)。 6·1〇 ( E)-N’-(l-(4_((iR，2S，3R)_l，2,3,4-四羥丁 基）-1Η-咪唑-2-基）亞乙基 >菸殮酸醢肼之合成

將 1-[4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥-丁基；)_111_11米唑_2_ 參基]-乙酮（215 mg，〇.93 mmol)懸浮於甲醇（3 ml)與水 (1 ml)中。加入於驗酸醯肼（〇min〇i，i」q ) 與鹽酸（1滴，12N)，並在50%下攪拌懸浮液48小時。 lcms分析顯示形成了產物且不存在起始材料。將反應 混合物冷卻至室溫，並在真空下部分濃縮之。收集所得 到的白色析出物並以水沖洗以得到產物，上述產物是一 獾明顯的異構物，白色固體：311 mg (95%)。 51 201022254 LCMS : Sunfire C-18 管柱 4.6 x 50mm ;於 10 - 90%水 (10 mM醋酸銨）中超過2.5分鐘；流速=3·5 ml/min ; 偵測 220 nm ;滯留時間：0.22 分鐘（350.27 (M+l)) . 4 NMR ( DMSO-d6) δ 2.37 ( s，3H)、3.60 - 3.85 ( m，4H)、 4.40( m，2H)、4.71 ( m，lH)、5.01 ( m，2H)、5.16( m，lH)、 7.25( br，lH)、7.64( br，lH)、8.35( br，lH)、8.80 ( br，lH)、 9·14 ( br，lH)。 6.11 3-氣-N’-(1-(4_((1R，2S，3R)-1，2,3,4-四羥丁 基）-1Η-咪唑-2-基）亞乙基）苯甲醢肼之合成

OH OH

將 1-[4-((1尺，28,3尺）-1，2,3,4-四羥-丁基）-1^1-咪唑_2_ 基]-乙酮（194 mg, 0.84 mmol )懸浮於乙醇（4 ml )與水 (1 ml)中。加入3_氣苯甲醯肼（mg，！ 〇 mm〇1，1 2 叫.）及鹽酸（1滴，12N) ’並在50°C下攪拌懸浮液48 小時。LCMS分析顯示形成了產物且不存在起始材料。 將反應混合物冷卻至室溫，並在真空下部分濃縮之。收 集所得到的白色析出物並以乙醇沖洗以得到產物，上述 52 201022254 產物為約3 : 1的E:z混合物，白色固體：i〇8 mg( 33%)。 LCMS : Sunfire C-18 管柱 4.6 X 50mm ;於 10 - 90%水 (10mM醋酸錢）中超過25分鐘；流速=35 ml/min ; 债測 220 nm ;滯留時間：〇 63 分鐘（383 23 (M+1))。ιΗ NMR (甲醇_d4) δ 2.44 ( s，3H)、3.60 - 3.90 ( m，4H)、 5.12 ( S，1H)、7.29 ( s，lH)、7.65 ( m，2H)、8.04 ( m，2H)。 6.12 (E>-4-氟 基>-lH-咪嗤_2-基）亞己基）苯甲醢肼之合成

OH OH

Φ 將1 [4-((1 R，2S，3R)·^3,4-四羥丁基）·1Η_ 咪唑 _2· 基]乙網（179m mg’ 0.74 mmol )懸浮於乙醇（4 ml)與水 (1 ml)中。4 λ 加入4-氟苯甲醯肼（131 mg，〇 85 mm〇1，j】 eq.)與鹽酸】、、益 小時。 C滴，12N)’並在下攪拌懸浮液 、CMS分析顯示形成了產物且不存在起始材料。 =輕合物冷卻至室溫，並在真空下部分濃縮之。收 產物ϋ的白色析出物並以乙醇沖洗以得到產物，上述 種明顯的異構物，白色固體· 股.97 mg ( 35% ) 〇 53 201022254 LCMS : Sunfire C-18 管柱 4.6 x 50mm ;於 l〇 - 90%水 (10 mM醋酸銨）中超過2.5分鐘；流速=3·5 ml/min ; 偵測 220 nm ;滯留時間：0.55 分鐘（367.24 (M+1))。4 NMR (甲醇-d4，1 滴 DC1) δ 2.55 ( s，3H)、3.60 — 3.90 (m，4H)、5.22(s，lH)、7.30(m，2H)、7.54(s，lH)、8.08 (m，2H)。 6.13 (E)-6-胺四羥丁 基）-1Η-咪唑-2-基）亞己基）菸鹼酸醢肼

將 1_[4_((1R，2S，3R)-1，2,3,4-四經·丁基）_1H_ 咪唑 _2_ 基]-乙酮（115mg，0.50mmol)懸浮於乙醇（4mi)與水 (1 ml)中。加入取代的醯肼（91 mg，〇 6 mm〇1，】2eq ) 及鹽酸（1滴，12N)，並在55cC下攪拌懸浮液48小時。 LCMS分析顯示形成了產物且不存在起始材料。將反應 混合物冷卻至室溫，並在真空下部分濃縮之。收集所得 刻的白色析出物並以乙醇沖洗之，以得到產物，上述產 物是一種明顯的異構物’白色固體：136mg (75%)。 54 201022254 LCMS : Sunfire C-18 管柱 4.6 x 50mm ;於 ι〇 — 9〇%水 (10 mM醋酸銨）中超過2.5分鐘；流速=3 5 ml/min ; 偵測220 nm ;滞留時間：0.15分鐘（365,32 (M+l))。】h NMR (甲醇-d4，1 滴 DC1) δ 2·58 ( S,3H)、3.6〇 _ 3 9〇 (m，4H)、5,22 ( s，lH)、7.17 ( m，lH)、7.54 ( m iH)、 8.44 ( m，lH)、8.68 ( m，lH)。 6.14 (£)-!^’-(1-(4-((1厌，28,3尺)-1，2,3,4-四羥丁基）_111 咪唑-2-基）亞乙基）異菸鹼酸醢肼

將 l-[4-((lR’2S，3R)-l，2,3,4-四羥-丁基）_1H 咪唑 _2_ 基]-乙酮（168 mg，0.73 mmol)懸浮於乙醇（4 ml)與水 (1 ml)中。加入異菸驗酸醯肼（11〇 mg，〇8〇 mm〇i， hleq.)與鹽酸（1滴’ 12N)’並在55〇c下攪拌懸浮液 24小時。LCMS分析顯示形成了產物且不存在起始材 料。將反應混合物冷卻至室溫，並在真空下部分濃縮之。 收集所得到的白色析出物並以乙醇沖洗之，以得到產 物’上述產物是一種明顯的異構物，白色固體：136 mg 55 201022254 (75%)。 LCMS : Sunfire C-18 管柱 4.6 x 50mm ;於 iq _ 9〇%水 (10 mM Ammonium Acetate )中超過 2.5 分鐘；流速=3 5 ml/min ;偵測220 nm ;滯留時間：0.15分鐘（365 32 (M+1))。4 NMR (甲醇-d4，1 滴 DC1) δ 2.63 ( S,3H)、 3.60 - 3.90 ( m,4H) ' 5.12 ( s,lH) > 7.5 8 ( s,lH) > 8.63 (d，2H，j = 8 Hz)、9·14 ( d，2H，j = 8 Hz) 〇

6.15 (£)-]>?’-(1-(4-((1尺，28,311)-1，2,3,4-四趣丁基）_1]|- 咪唑-2-基）亞已基）聯苯基_3-卡肼之合成

將 1-[4-((111，28,31〇-1，2,3,4-四羥-丁基）-111-咪唑-2- 基]-乙酮（315 mg，1.36 mmol)與聯苯基-3-卡肼（36〇 mg， 1·81 mmol)懸浮於DMSO (2 ml)中。加入濃鹽酸（2 滴），並在40。(：下攪拌懸浮液5小時。LCMS分析顯示 形成了產物且不存在起始材料。將反應混合物冷卻至室 溫’以甲醇稀釋並利用反相HPLC ( 1 〇 mM NH4 OAc/乙 56 201022254 腈）純化之。分別收集兩部分（E與Z異構物）的所需 產物並冷康乾燥之。第—部分為白色固體，95 mg (16%)。第二部分為白色固體，82 ( 14〇/〇)。 第一部分：分析式HPLC Zorbax C-8管柱4.6 X 150 mm ;溶劑A = 10 mM醋酸銨；溶劑B = MeCN ;第〇分 鐘5¼ B，第1分鐘5% B，第3分鐘90% B，第4分鐘 停止；流速=3 ml/min ;偵測220 nm ;滯留時間：2.9分 ❹ 鐘（註：含有約5%的另一種異構物）。m+H = 425.28。 4 NMR ( DMS0-d6 與 2 滴 D20) δ 2_3 (單重峰，3H)、 3.3 - 3.7( m，4H)、4.9( m，lH)、7.19( s，lH)、7.37( m’lH)、 7.47 ( m，2H)、7.67 ( m，3H)、7.85_7.92 ( m，2H)及 8.15 (s，lH)。相同樣本的HSQC與2.3 ( CH3)的質子訊號相 關，並有20 ppm的碳訊號。 第二部分：分析式HPLC Zorbax C-8管柱4.6 X 150 ❹ mm ;溶劑A = 10 mM酷酸錄；溶劑B = MeCN ;第〇分 鐘5% B，第1分鐘5% B，第3分鐘90% B ,第4分鐘 停止；流速=3 ml/min ;偵測220 nm ;滯留時間：2.963 分鐘（註：含有約6%的另一種異構物）。M+H = 425.28。 NMR ( DMS0-d6 與 2 滴 D20) δ 2.4 (單重峰，3H)、 3.4-3.6(m，4H)、4.77 與 4.86(寬單重峰，結合=【Η)、 6.9 與 7.1 (寬單重峰，結合=1H)、7.40 ( m，lH)、7.50 (m，2H)、7.61 ( m，lH)、7.73 ( m，2H)、7.87 ( m，2H)與 57 201022254 8.10 ( s，lH)。相同樣本的HSQC與2.4 ( CH3 )的質子訊 號相關，並有13 ppm的破訊號 6.16 N-經基-4-((lR，2S，3R)-l，2,3,4_ 四幾丁基）-1Η-咪 唑-2-羧醢胺之合成

將 1-[4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥-丁基）-111-咪唑-2-基]-乙酮（18 g，78.3 mmol)懸浮於二氣乙烷（160 ml) 及2,2-二甲氧基丙烷（160 ml)中。加入4-對甲苯磺酸 (3 g )，並在70°C下攪拌混合物18小時。以二氣曱烷 稀釋反應系統，並以水、5%碳酸氫鹽、滷水沖洗之，之 ❹ 後乾裝載於Si02上。利用快速色層分析法（己烷/醋酸乙 酯）進行純化可得到無色油狀的 l-(4-((4S，4’R，5R)-2,2,2’，2’-四甲基-4,4'-聯（1，3·二氧五 環）-5-基）-1Η-咪唑-2-基）乙銅（18.8 g，60.6 mmol ;產率 77% ; M+H calc : 3 11.4 以及 〇bs : 3 11.3 )。 將以上所得之產物（20g，64.5 mmol)溶解於DMF中。 依序加入 K2C03 ( 12.5 g，90.3 mmol)與溴甲苯（10.7 ml， 90.3 mmol)。將反應系統加熱至5〇〇c並持續μ小時。 58 201022254 。加入額外的溴曱苯（5

φ g’ 產率 62。/。）。 將所得到的中間產物（j 3 LC/MS分析指出仍含有起始材料 ml，42 mmol)並將溫度提升至6丨 g’ 32.5 mmol)溶解於二氧 陸圜（120 ml)中，並以溶於商賭漂白水（細叫6% NaOCl)中之NaOH( 13 2 g)處理之。劇烈攪拌2小時， 之後利用醋酸乙酯來萃取反應系統。以滷水沖洗有機萃 取物，之後在矽鈣石上將其乾燥。過濾與蒸發後可得到 一固體，在真空下乾燥該固體可得到卜苄基 Φ 4-((4S，4’R，5R)-2,2,2’，2’-四甲基-4,4·-聯（l，3-二氧五 環）-5-基）-1Η-咪唑-2-羧酸（13 g，定量產率，Μ+Η計算 值：403.2，觀察值：403.2)。 將以上所得之產物（600 mg，1.49 mmol )、〇_三苯甲基 羥胺（820 mg, 2.98 mmol)、EDAC ( 430 mg，2.24 mmol) 與 HOBt ( 305 mg，2.24 mmol)和 DMF ( 8 ml)與三乙胺 (622 μΐ，4.47 mmol)混合。在環境溫度下攪拌反應系統 22小時，將其濃縮並利用DCM/MeOH裝载於氧化梦上。 59 201022254 利用快速色層分析法（Me〇H/DCM )以得到1-苄基 -4-((4S,4’R，5R)-2,2,2，，2，-四甲基-4,4’-聯（1，3-二氧五 環）_5_基）(三苯曱氧基）_1H-咪唑-2-羧醯胺（ 480 mg， 0.73 mmol 產率 49%，M+H calc : 660.3，obs : 660.4) 〇 將以上所得之產物（480 mg，0.73 mmol)溶解於乙醇 (50 ml)中。加入 Pd ( 〇H) 2 ( 500 mg，20% 於碳上， ❹

濕）’並在& ( 65 psi)下攪拌反應系統18小時，之後 將其過滤。在真空下移除乙醇。將殘餘物溶解於Dcm 中，並利用快速色層分析法（Me〇H/DCM )進行純化， 以得到 N-經基 _4_((48,4，尺，511)_2,2,2，，2，_四甲基_4,4，聯 (1，3-二氧五環）_5_基）·1Η•咪唑_2綾醯胺（15〇 刪〇卜產率 63〇/〇 ’ M+H calc : 328」，_ : 328 3 )。 將以上所得之產物（15〇mg，〇46mm〇i)溶解於丙嗣 (8ml)與水（8ml)卜利用乾冰/丙酮冰浴將反應系 統冷卻至内部溫度加入濃畲 晨氣化風（3 ml)，添加 速率需使得内部溫度仍保持在_丨 L以下。移除冰浴，並 在環境溫度下攪拌反應系統3小 J砰、在4〇C下攪拌18小 時，之後再於環境溫度下攪拌7 J砰。在真空下移除丙 酮與部分的水以得到析出物。依 斤加入二氧陸圜（20 ml) 與THF ( l〇mi)。利用過濾分 贝固體，並以THF/二氧 陸圜沖洗之’在真空下參 下乾燥以得到N-羥基 -4-((111，28,311)-1，2,3,4-四羥丁基） >1H-咪唑-2-羧酿胺的 201022254 氳氣酸鹽（98 mg，0.40 mmol，產率 87% )。

Mass spec· : M+H 計算值：248.1，觀察值：248.2 » 刀析式 HPLC . Luna Pheny-Hexyl, 5um，4.6 x 50 mm，等 位沖提10 mM醋酸錢與1%乙腈，流速=3 ml/min，偵 • 測 220 nm，滯留時間=0.245 分鐘。4 NMR ( DMSO-d6) δ 3.37-3.64( m，4H)、4.96(寬單重峰，1H)' 7,47( s，lH)、 U.9(寬單重峰，iH)。 鲁' 6·17 (lR，2S，3R)-l-(2-(5-甲基異噁唑-3-基）-1Η-咪唑 -s-基）丁烷·12,34·四醇之合成

利用下文方案2所述的一般方法A來製備此一化合物：

方案2 61 201022254

其中.a 為 DCE. (MeO)2CMe2( 1 : 1)、p-TsOH、70oC ; b 為 Ph3CONH2、MeOH、IN 氣化氫（1 ·〇 當量）；c 為 2 N 氣化氫/二氧陸園；d為n-BuLi4.0當量、THF、0oc，之 後N-曱基-N-曱氧基乙醯胺5.0當量；以及e為iN氣 化氫：二氧陸園（1: 1)。 特別是’在 1 ( 4.3 4g，1 8.87 mmol )的二氣甲院（3〇 ml) 參漿狀物中依序加入2,2-二甲氧基丙烷（30 ml)與p_對甲 苯項酸單水合物（ 900 mgs，4.72 mmol)。將上述聚狀物 加熱至70oC並保持16小時，之後冷卻至室溫，並以過 量的三乙胺（1 ml )處理之。利用曱苯共沸液來濃縮與 乾燥反應系統，以得到琥珀色固體，此一固體可直接進 行後續步驟而不需純化。 將上述琥珀色固體溶解於MeOH ( 100 ml )中，且之 ❿ 後以N-三苯曱基羥胺（6.75 g, 24.53 mmol)與1 N氣化 氫（18_5 ml，18.5 mmol)處理之。1小時後反應系統轉 為澄清’並保持在室溫下18小時。反應完成時，利用 10 N的氫氧化鈉溶液將反應系統中和至ph=7，之後減 壓條件下將其濃縮。利用色層分析法在氧化矽凝膠 (32-63 μηι，10% MeOH : CH2C12 與 1% NH4OH)上純化 上述粗材料以得到受保護的白色泡沫狀產物2 ( 9.8 g， 產率91%，2步驟）。 62 201022254 將無水 4M 二氡陸圜（20ml)加入 2( 3.11 g，5.48 mmol ) 的無水二氧陸園（40 ml )溶液中。經過1小時後，在真 空下濃縮反應系統，之後重新溶解於無水DCM ( 60 ml ) 中，以過量三乙胺（5 ml)處理’之後再次濃縮。將粗 產物快速通過氧化矽凝膠（3-8% MeOH : CH2C12與 0.5-1.0¼ NH4OH)以得到白色泡沫狀的肟3 ( 1 〇5 g，產 率 59%)。 ❹ 在 _45〇c 的 3 ( 50〇 mgs, 1.54 mmol)的 THF ( 15 ml) 溶液中，一滴滴地加入1.6 Μ之n-BuLi ( 3.85 ml，6.16 mmol)的己燒溶液中。10分鐘後，一滴滴地加入队甲 基-Ν-甲氧基乙醯胺（0.79 ml, 7.69 mmol)，並使反應系 統升溫至室溫。2小時後，加入氣化銨（丨〇 ml )以萃滅 反應’並加水（5 ml)稀釋以溶解固體。使反應系統分 層，並以EtzCK 2 X 20 ml)來萃取水層。利用滷水（25 mi) φ 來沖洗所有的有機物，之後在硫酸鎂上乾燥並於真空中 濃縮之。利用快速色層分析法在氧化矽凝膠上（

EtOAc:己烷）純化所得到的白色泡沬以得到白色泡沫固 體。 在上述中間產物白色固體的二氧陸園（5ml)溶液中， 加入1 N氣化氫（5 ml)。將反應系統加熱至8〇〇c並保 持2小時，且之後在減廢環境下濃縮至乾燥。將所得到 的玻璃狀固體冷凍乾燥以除去水（8 ml)以得到4 “Μ 63 201022254 mgs，產率48%，2步驟），其外觀為絨毛狀白色粉末。 MS m/z C11H15N3O5 [Μ + Η] + = 270 ; NMR ( 400 MHz > D20): δ 7.54( s’lH)、6.7( s，lH)、5.2( s lH)、3 83_3 59 (m，4H)、2.49 ( s，lH) ; 13C NMR ( 100 MHz，D2〇) : δ 174.3、150.0、136.6、13 5.0、118.1、i〇 lo、73. j、71 〇、 65.0 、 63.2 。 6.18 (lR，2S，3R)-l-(2_(5-乙基異嗔嗤 _3_ 基）味唉 -5-基）丁烷-1,2,3,4-四醇之合成

Et

利用一般方法A來合成此一化合物，其係藉由利用N-甲基-N-甲氧基乙基胺來將中間產物3烷基化。MS m/z C,2H17N3〇5 [Μ + Η] + = 284 ； 'Η NMR ( 400 MHz > D2〇): δ 7.24 ( s，lH)、6.54 ( s，lH)、4.95 ( s，lH)、3.84-3.56 (m，4H)、2.82-2.77 ( m，2H)、1.25 ( t，J=6.0 Hz，3H)。 64 201022254 6·19 (1狀，28,紐)小(2-(異瑞唑_3-基）_1][1__咪唑_5_基）丁 烧-1，2,3,4»四酵之合成

根據下文方案3利用修改後的一般方法Α來製備此一 化合物：

方案3 ❹ 其中.a為n-BuLi ( 4.0當量）、THF，0oC，之後加入 DMF ( 5_0當量）；b為TFAA、吡啶、DCM ;以及c為 1 N氣化氫：二氧陸園（1 : 1 )，50。(：。 具體來說’在 _45。0：的 3( 424 mgs, 1.30 mmol )的 THF (15 ml)溶液中一滴滴地加入2.5 M n-BuLi ( 2.1 nU， 5.25 mmol)的己烧溶液。ι〇分鐘後’一滴滴地加入無水 DMF ( 0.505 ml，6.52 mmol)並讓反應系統升溫至室溫。 2小時後’藉由加入氣化銨（1〇 ml)來淬滅反應並加入 65 201022254 水（5 ml )稀釋以溶解固體。使反應系統分層，並以玢a (2 x 20 ml )沖洗水層。以滷水（25 ml )沖洗所有有機 物’之後在硫酸鎂上乾燥，並於真空中濃縮之。使所得 到的泡沫快速通過氧化矽凝膠（3-6% MeOH : CH2C12與 . 0.5〇/〇 NH4OH)以得到白色泡沫狀的半縮醛5 ( 220 mgs， 產率47%)。 在〇〇C的5 ( 130 mgs，0.37 mmol)的THF溶液中依序 參 加入0比咬〇2〇μ1，I·48 mmol )與三氟醋酸if。將反應系 統升溫至室溫10分鐘，且之後加熱至55。(：並持續16小 時。完成時，在真空下濃縮反應系統，之後利用快速色 層分析法在氧化矽凝膠上純化（60-90% EtOAc :己炫） 將其純化以得到白色泡沫狀的雜環雙縮酮（60 mgs ,產 率47% )’最後利用標準的酸性環境將上述雜環雙縮酮去 保護以得到實驗例3的化合物，其外觀為白色結晶型固 ❹ 體，MS m/z C10H13N3O5 [M + H] + = 256 ; 4 NMR ( 400 MHz，D2〇) δ 8.87 ( S，1H)、7.55 ( s，lH)、7.05 ( s，lH)、 • 5.21 ( s，lH)、3.75 ( m，3H)、3.63 ( m,2H)。 6.20 (lR，2S，3R)-l-(2-(異噁唑-3-基）-1Η-咪唑 _5_基）丁 燒-1，2,3,4-四醇的另一種合成方法 利用此處稱為一般方法B的方式來製備上述化合物， 一般方法B如以下方案4所示： 66 201022254

其中：a為1.0當量的Na〇Me於MeOH中、室溫下’之 後加入氣化氫水溶液。 參 具體來說’在室溫下的腈7 (600 mgs, 6.38 mmol )之

MeOH( 1〇 ml )溶液中加入 25% w/v MeONa( 0.83 ml, 3.83 mmo1)。3小時後’加入果糖胺醋酸鹽（1.53 g，6.38 mmol) 並將溶液保持在室溫下同時劇烈攪拌5小時。之後將另 一部分的 25% w/v MeONa ( 0.66 ml, 3.19 mmol)加入浪 稍的漿狀物中。16小時後，過濾反應系統並以冷的MeOH 來沖洗濾餅。之後以1 N氣化氫（20 ml)來處理Me〇H 參並過據之。在真空下濃縮水溶液直到重量保持恒定為 止’以得到6.20之化合物（1.3〇g，產率66%)，其外觀 為白色粉末。 67 201022254 6·21 (lR，2S，3R)-l-(2-(2-甲基雀唑基-4-基）-lH-咪唑 基）丁烷-1，2,3,4-四酵之合成

根據一般方法B來製備此化合物，其係利用2-曱基噻 ❹唾·4-甲腈（2-methylthiazole-4-carbonitrile)( 1.023 g，8.25 mmol)、甲氧基鈉的甲醇（25 wt %，ml，4 95 mm〇1) 溶液中、甲醇（8.25 ml)與化合物8( 2.00 g，8.26 mmol)。 2.5天後，加入另一額外部分的甲氧基納的曱醇（25 wt%， 0.891 ml，4.125 mmol )溶液。24小時後，進行過濾以收 集所形成的固體並以冷的曱醇沖洗之，以得到上述化合

物（1.70 g，5.96 mmo卜產率 72% )。MS m/z CnHwl^C^S % [Μ + Η] = 286 ； *Η NMR ( 400 MHz » CD3OD) δ 2.81 (s，3H)、3.67-3.75 ( m，2H)、3.77-3.88 ( m，2H)、5.21 (s，lH)、7.47 ( s，lH)、8.35 ( s，lH)。 68 201022254 6.22 (lR，2S，3R)-l-(2-(l-苄基 _1H_12 4_ 三唑 3 基）-111-咪峻-4-基）丁炫-1，2,3,4-四醇里酸盥之合成

根據一般方法B並進行以下修改，以得到上述化合 ❿ 物：將 1-节基-1H-1，2,4-三唑-3-甲腈（2.1〇g，114mm〇1) 溶解於甲醇（12 ml )中’以曱氧基鈉的甲醇（25 wt %，1.48 ml, 6.8 mmol)溶液處理之，並攪拌18小時，之後加入 8並將反應系統擾拌18小時。進行過濾以分離出所得到 之固體，以甲醇沖洗後在真空下乾燥以得到白色固體 (3.20 g，9.28 mmol ’產率81% )。將此固體懸浮於THf (50 ml)中，以冰浴冷卻之，並加入氯化氫（4 M溶於 ❹ 二氧陸圜中，7.5 ml, 30 mmol)。移除冰浴，並將懸浮液 攪拌4小時。進行過濾以分離出固體，以THF沖洗並在 真空下乾燥’以得到子標題之化合物（35〇 g，9 19 mmo卜產率99%)其外觀為白色固體，ms m/z C16H19N5〇4 [Μ + Η] + — 346 ;NMR ( 400 MHz，CD3OD) δ 2.81 (s，3H)、3.67-3.75 ( m，2H)、3.77-3.88 ( m，2H)、5.21 (s,lH) ' 7.47 ( S,1H) ' 8.35 ( s,lH) 〇 69 201022254 6.23 (lR’2s,3R)-l-(lH’l Η·2,2，-麟味峻-5_ 基）丁燒 -1，2,3,4-四醇之合成

根據一般方法B並進行以下修改，以得到上述化合 物。在1H-咪唑_2_曱腈（〇.39 g，4·17 mm〇1)的甲醇（* 8 ml)溶液中加入曱氧基鈉的甲醇（Μ wt%，〇 54 g，〇 57如 2.50 mmo1)溶液’攪拌16小時之後加入溶於1〇 ml之 Me0H的化合物8 ( 0.964 g，4.17 mmol)。待形成析出物 後過渡出析出物並以丙酮（i 5 ml )沖洗》濃縮濾液至乾 燥為止’並以製備性HPLC ( 10 mM醋酸銨/乙腈水溶液） 純化之以得到子標題之化合物（0.0141 g，0.0554 mmol) ’ 其為一灰白色固體，MS m/z C10Hi4N4〇4 [M + Η] + = 255； *Η NMR( 400 ΜΗζ> CD3〇D)5 3.56-3.5 7( m,2H)' 3.67-3.74 ( m，2H)、4.90 ( s，lH)、7.04 ( s，lH)。 201022254 6.24 (lR，2S，3R)-l-(2-(5-曱氧基-4,5·二氫異噁唑-3-基）-111-咪唑-5-基）丁烷-1，2,3,4-四醇之合成

OMe ❿ 將1M的氣化氫溶液（10 ml)加入至室溫下的β米β坐5 (方案 3，500 mg, 1.41 mmol)之 MeOH ( 10 ml)溶液 中。將反應系統加熱至50°C並持續8小時，冷卻至室溫， 並濃縮至乾燥以得到上述化合物（430 mgs，產率 100% )，其外觀為淡黃色粉末，含有1 : 1的非鏡像異構 物之混合物。MS m/z C丨丨H17N306 [M + H]+ = 288; !H NMR (400 MHz，D20) δ 7.06 ( s,lH)、5.71 ( d，J = 7.2 Hz) ® 與 5.41 ( d，J=7.2 Hz，lH)、4_72( s，lH)、3.2-3.4( m，3H)、 2.98-2.80 ( m，2H)。 71 201022254 6.25 (1R,2S . ’甲基-1H_ 吡唑-3-基）-1Η-咪唑 -5-基）丁燒-ΐ·2 文 j ,z’3,4-四醇

述化σ物係利用^叫2 2 2, 2,四甲基 聯（，一氧五環）~5_基）-1Η-咪唑_2-基）乙酮（化合 物9)與以下方法所製備。將9 ( 975 mg315mm〇1)的 (15 ^1)溶液緩慢加入-10。(：的六曱基二矽胺烷鉀 鹽（15,72 ml /容於〇.5 M曱苯溶液中’ 7.86 mmol)的THF 谷液（15mi)中。將反應系統維持在-1〇0C：下10分鐘， 後加入醋酸乙醋（i 55 ml，15 75咖〇1)。使反應系統 升溫至室溫並保持i小時’之後藉由加入3〇 mi氣化銨 (飽和水溶液）來淬滅反應。使反應系統分層，以Et〇Ac (2 X 30 ml)沖洗水層。以水（3〇如）與滷水（％⑷ 沖洗所有有機物，之後在硫酸鎂上乾燥並將其濃縮。直 接使用所得到的棕褐色材料而不需純化。 將粗材料溶解於EtOH(20m〇中，並以m氯化氫〇 如）酸化之。之後以過量的肼單水合物（pi)來處 72 201022254 理經授拌的室溫溶液。在結束時，α 1 N氮氧化納將反 應系統調整至PH=7，之後將其體積濃縮至約1〇 ml。加 入DCM (30 ml)來溶解由水溶液中析出的固體並使 其分層。在硫酸鎂上乾燥有機層並將其濃縮。使粗產物 快速通過氧化矽（5_10% Me〇H : DCM洗提劑）以得到 受保護的吡唑（204 mg，產率19°/。），其外觀為澄清泡沫 狀。 ® 將1 N氯化氫溶液（5 ml)加入至受保護的雜環化物 (180 mgs’ 0.52 mmol )的室溫溶液中，並將反應系統加 熱至50°C。1.5小時後’將反應系統冷卻至室溫，之後 濃縮至乾燥。將泡沫重新溶解於2 ml的MeOH，之後加 入3 ml的EhO研磨之，並冷卻至〇。(：，之後將傾析出液 體。以EtzO (2x2 ml)沖洗固體，之後在高真空環境下 將其乾燥，以得到6.25化合物（130 mgs，產率70%)， ® 其外觀為白色粉末。MS m/z C16H16N404 [M + H]+ = 269 ; lU NMR( 400 MHz > D20) δ 7.28 ( s，1H )、6.52 ( s，1H )、 5.07( d，J=0.9 Hz，lH)、3.74-3.54( m，4H)、2.22( s,lH); 13C NMR ( D20): δ 142.8、139」、13 6.3、134.卜 116.0、 104.0、72.6、70.6、64·4、62·7、9.6。 6·26腦型瘧疾模型 第1圖與第2圖呈現了利用三組雌性C56B1/6小鼠（每 73 201022254 組10隻）所進行之實驗結果。分別針對3群組中的所有 小鼠進行腹腔注射（500 μΐ的基質中含有1〇〇萬隻寄生 蟲（/>·^π/^ΑΝΚΑ))以感染小鼠。第1組為對1組。 第2組小鼠經腹腔施用SiP裂解酶抑制劑 (E)-l-(4-((lR，2S’3R)-l，2,3,4,羥丁基）_1H•咪唑 _2 基卜 _ 參 乙酮肟（⑽mg/kg);而帛3組的小鼠經胃導管施用相 同的S1P裂解酶抑制劑（100 mg/kg)。每天施用上述藥 物’且在感染前一天首度施用。 ' 在首次施用藥物後24小時，由老鼠尾部血管抽血，並 進行流式細胞分析以評估B細胞與丁細胞的含量分析 中使用了抗⑽、CD4、CD8與cm9的抗體。每日監 控動物的體重、血球比容以及寄生蟲血症，並每日兩次 監測其存活率。 人 如第1圖所示’在接受治療的第2組與第3組小鼠中， 都出現了 CD8+ T細胞減少的現象（相對於未經治療的 控制組）。如第2圖所示’接受治療的第2組與第3組小 鼠的壽命明顯比控制組長得多。 在此將此處提及的所有參考文赴 π又獻（如.公開文獻、專 利與專利申請案）整體納入作為參_考_。 【圖式簡單說明】 參照下列附隨圖式可進—步瞭解本發明的某些態樣 74 201022254 第1圖顯示在上述實驗例中所用之腦型瘧疾模型中， S 1P裂解酶抑制劑對於小鼠之淋巴細胞上之影響。 第2圖顯示在上述實驗例中所用之腦型瘧疾模型中， 經腹腔與胃導管施用S 1 P裂解酶抑制劑對小鼠存活率之 影響。 【主要元件符號說明】 無

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Claims (1)

1. 201022254 七、申請專利範圍： !.-種S1P裂解酶抑制劑 療、管理或預防腦型癔… 用於製造一用以治 呵主瘧疾的藥劑。 2.如申請專利範圍第1 該藥劑適用於 9所述之用途，其中 局部或經皮施用予—患者。

   .如申請專利範圍第丨項所述之用途 經靜脈内施用予一患者。 其中該藥劑適用於 4.如申請專利範圍第1項至第 π王笫3項任一項所述之用途，其中 該S1P裂解酶抑制劑為具有以下化學式：

   的一化合物或其藥學上可接受的一鹽類，其中： Ri為氫、烧基或芳基； r3為 or3A、nhc(o)r3a、nhso2r3A或氫； 每一 RSA分別為氫或以齒基選擇性取代之烷基、芳基、 烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基； R>6 為 OR6A 或 〇C(0)R6A ; 76 201022254 r7為 or7A4 oc(o)r7A ; R8為 0118六或0(：(0)118八； r9為氫、ch2or9A或ch2oc(o)r9A;以及 每一 R6A、Κ·7Α、Κ·8 A與Κ·9Α分別為氮或小型烧基。 5.如申請專利範圍第4項所述之用途，其中該化合物具有 以下化學式：

   HQ OH

   其中： Ri為小型烷基； R3為氫、or3a、nhc(o)r3A或 NHS02R3A ; R9為氫或CH2OH ;以及 每一汉3八分別為氫或小型烷基。 6.如申請專利範圍第5項所述之用途，其中該化合物為 (丑）-1-(4-((111，28,3反)-1，2,3,4-四羥丁基）-111-咪唑_2_基）_ 乙網聘。 7.如申請專利範圍第〗項至第3項任一項所述之用途，其中 77 201022254 該SIP裂解酶抑制劑為具有以下化學式：

   的一化合物或其藥學上可接受的一鹽類，其中： A為一選擇性經取代之雜環； R5為 0115厶或0(：(0)115八； © r6為 or6A4〇c(o)r6A ; 117為 OR7Aa〇C(0)R7A ; R8為氫、CH2OR8A 或 ch2oc(o)r8A;以及 每一 R5 A、R6A、Κ·7Α與Κ·8Α分別為氮或小型烧基。 8.如申請專利範圍第7項所述之用途，其中該化合物具有 以下的化學式：

   其中： X為Ν或NR9 ; Y為 CR4、N、NR9、Ο或 S ; Z為 CR4、CHR4、N、NR9、Ο或 S ; 78 201022254 Ri為氫或選择性經取代之小型烷基；以及 R3為選擇性經取代之院基； 每一 R4分別為or4A、oc(o)r4A、氫、鹵素或選擇性經取 代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷 基雜環或雜環烷基； 每一 R9分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳 基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；以 ❹ 及 每一 IUA分別為氫或選擇性經取代之烷基。 9.如申請專利範圍第7項所述之用途，其中該化合物具有 以下的化學式：

   其中： X為N或NR9 ; Y為 CR4、N、NR9、〇 或 s ; Z 為 CR4、CHR4、N、NR9、〇或 s ; I為氫或選擇性經取代之小型烷基；以及 79 201022254 r3為選擇性經取代之烷基； 每一 R4分別為〇r4A、〇C(〇)R4A、氫、鹵素或選擇性經取 代之烷基、芳基、烷芳基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷 基雜環或雜環烷基； 每一 R9分別為氫或選擇性經取代之烷基、芳基、烷芳 基、芳烷基、雜烷基、雜環、烷基雜環或雜環烷基；以 及 每一 IUa分別為氫或選擇性經取代之烷基。 10.如申請專利範圍第1項至第3項任一項所述之用途，更包 含將一額外的活性成分施用予該患者。 如申請專利範圍第1〇項所述之用途，其中該額外的活性 成分為一抗瘧疾藥物。 參12.如申請專利範圍第10項所述之用途，其中該額外的活性 成分為一滲透性利尿劑。 〆 ’ 13·如中請專利範圍第1G項所述之用途，其中該額外的活性 成分為一抗癲癇劑。 ⑷如申請專利範圍第10項所述之用途，其中該額外的活性 80 201022254 成分為一退熱劑。 15. 如申請專利範圍第1〇項所述之用途，其中該額外的活性 成分為一抗氧化劑。 16. 如申請專利範圍第1〇項所述之用途’其中該額外的活性 成分為一抗發炎藥物》 17. —種藥學組成’至少包含一S1P裂解酶抑制劑與一抗癌 疾藥物。 18·—種單一單元藥學劑型，至少包含一Slp裂解酶抑制劑 與一抗瘧疾藥物。 19. 如申請專利範圍第18項所述之劑型，其適用於經皮或局 部投遞予一患者。 20. 如申請專利範圍第19項所述之劑型，其為一貼片。