TW200934788A - Heterocyclic ring and phosphonoxymethyl group substituted pyridine derivatives and antifungal agent containing same - Google Patents

Description

200934788 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種新穎的雜環及膦酸氧基甲基 (phosphonooxymethyl)經取代之吼啶衍生物、及含有其之 抗真菌劑。 【先前技術】 近年來，由於高度的化學療法等所導致的免疫功能下降 之患者或高齡患者數逐漸增加，因此伺機性感染之對策的 ® 重要性愈發增加。正如由於不同的弱毒菌所導致之伺機性 感染不斷發生的事實所表明，只要有患者抵抗力下降等潛 在疾病存在則感染症之問題就不會消失。因此，在確實會 即將到來之高齡化社會中，預計包含抗藥性菌問題之新的 感染症對策將會成為一個重要的課題。 於抗真菌劑領域中，先前，例如在深部真菌症的治療中 已開發出多烯系之兩性黴素B(amph〇tericin B)或唑系之氟 康唑（fluconazole)、伊曲康唑（itrac〇naz〇le)、伏立康唑 ❹（―咖⑽）等。已上市之現有藥品中具有類似機制之藥 劑較夕，目前唑類抗藥性菌等的出現則成為了問題。 近年來，作為具有新穎機制的葡聚糖合成酶抑制 劑，已開發出源自天然物之環狀六胜肽型之卡泊芬淨 (pofungin)或米卡芬淨(micafungin)等但該等藥劑僅為 注射劑’因而作為抗真菌劑尚不充分。 ‘、、 此種現有之抗真菌劑處於無法稱為充分的狀況，業 盼開發出基於新基音—主丨 ' 、新穎機制之安全性高的藥劑。作為與該基於 137275.doc 200934788 新穎機制之抗真菌劑有關的相關技術，有專利文獻1及2。 專利文獻1及2中記載有如下之吡啶衍生物：藉由抑制 GPI(glycosylph〇Sphatidyl-inosito卜醣基化磷脂醯肌醇）錯 定蛋白質（anchor protein)向細胞壁的運輸過程而抑制細胞 壁表層蛋白質的表現，且抑制細胞壁組合（assembly)並且 抑制真菌對細胞的附著，使得病原體無法發揮其病原性， 藉此對感染症之發病、進展、持續顯示出效果。 於此種狀況下’專利文獻3中’作為具有習知抗真菌劑 ©戶斤未有的優異抗真菌作用且在物性、安全性及代謝穩定性 方面亦為優異之抗真菌劑，提出有雜環取代〇比咬衍生物。 另一方面，專利文獻4或5中分別揭示有作為水溶性前驅 藥（prodrug)之以下述式所表示的化合物類、及…磷醯基氧 基甲基前驅藥： [化1]

Ο Θ (式中’ Ri、R2及R3為含有三級胺或二級胺之取代基， 鹽Γ5分別為有機或無機殘基’X為陽離子有機或無機 然而，目前為止已知之水溶性前驅藥並 GPI錯定蛋白質運輸過程的 _ 土於對 沉具菌作用、並且 137275.doc 200934788 在對水的溶解性及水溶液中的穩定性以及體内動態及安全 性方面亦優異者’因而業界期望創制出更優異之抗真菌 劑。 [專利文獻1]國際公開第02/04626號案 [專利文獻2]國際公開第〇5/〇33〇79號案 [專利文獻3]國際公開第〇7/〇52615號案 [專利文獻4]美國專利第6,235,728 B1 [專利文獻5]曰本專利特表2〇〇1_527〇83號公報 ® 【發明内容】 [發明所欲解決之問題] 有鑒於上述狀況， 的抗真菌作用、並_i ，本發明之目的在於提供一種具有優異 的抗真g作用並_g_在對水的溶解性及水溶液—的穩定性 以及體内動態及安全性方面亦優異之抗真菌劑。 [解決問題之技術手段]

I吸开，伋而完成了本發明： [化2]

I

137275.doc 200934788 即，本發明之第一態樣提供： [1]一種化合物或其鹽，該化合物係以下式⑴表示 [化3]

O^OH 式中， R1表示氫原子、鹵素原子、胺基、rii_nh_(r11表示Cm 烷基、羥基Cw烧基、c〗·6烧氧基Ck烧基、或Ci 6烷氧基 羰基Cw烷基）、r12-(co)-nh-(r12表示Cl_6烷基或Ci 6烷氧 基Cm烷基）、Cl.6烷基，羥基Cl_6烷基、氰基Ci6烷基、 烧氧基、或Ci-6烧氧基Cw烧基； R2表示氫原子、Cw烷基、胺基、或二Ci 6烷基胺基； X及Y中之一者表示氮原子，另一者表示氮原子或氧原 子； ' 環A表示亦可具有！個或2個齒素原子或Ci6烷基之五員 或六員之雜芳環或苯環； Z表示單鍵、亞甲基、伸乙基、氧原子、硫原子、 -CH20-、-OCH2-、-NH-、-CH2NH-、-NHCH2-、-CH2S-、 或-SCH〗-; R表不氫原子、鹵素原子、或亦可具有1個或2個的分別 選自取代基群α中的取代基之Ci 6烷基、C3 8環烷基、 芳基、五員或六員雜芳基、或者五員或六員之非芳香族系 137275.doc -9- 200934788 雜環基； R4表示氫原子或齒素原子。 [取代基群α ] 鹵 基、 素原子、氰基、燒基、Cl.6貌氧基、C C3-8環烷基、c2-6烯基、及C2_6炔基。 I.6燒氧基幾 其中以上述式（I)所 [2]如上述fl]所述之化合物或其鹽， 表示化合物之鹽為式（ΙΑ)所表示之鹽： [化4]

❹ 上述式中，Q表示藥學上容許之陰離子。 [3]如上述[1]所述之化合物或其鹽，其中以上述式⑴所 表示之化合物之鹽為以式（ΙΒ)所表示之鹽： [化5] ❹

上式（ΐΒ)中’ r表示藥學上容許之陽離子。 [4]如上述[1]至[3]中任一項所述之化合物或其鹽，其中 以上述式（I)、（IA)或（IB)中之下式（π)所表示之部分結構： 137275.doc -10· 200934788 [化6]

其為選自下述群中之部分結構者： [化7]

L5]如上述[1]至[4]中 ππ通之化合物或具鹽 X及Υ中之一者為氮原子，另一者為氧原子。 [6]如上述[4]所述之化合物或其 (:ΙΒ)中之下式(Π)所表示之部分二 述式(1)、

其為下式（III)所表示 [化9]

(1〇 之部分結構者：

0») 或下式（IV)所表 [化 1〇] 示之部分結構者：

137275.doc (IV) •11- 200934788 [7] 如上述[η至[6]中任一項所述之化合物或其鹽，其中 X及Y均為氮原子。 [8] 如上述[7]所述之化合物或其鹽，其中以下式（1)、 (IA)或（IB)中之下式（11)所表示之部分結構： [化 11]

其為下式（V)所表示之部分結構者： ❿ [化12]

(V) 或下式（VI)所表示之部分結構者： [化 13] Ηλ (VI) 〇 [9]如上述[1 ]至[8]中任一項所述之化合物或其鹽，其中 R2為胺基。 Π0]如上述[9]所述之化合物或其鹽，其中R1為氫原子、 胺基、或Cw烷氧基Cw烷基。 [11] 如上述[1]至[8]令任一項所述之化合物或其鹽，其中 R1為胺基，R2為氫原子。 [12] 如上述[1]至[11]中任一項所述之化合物或其鹽其 中％ A為吼咬環、苯環、呋喃環、售吩環、或处哈環。 137275.doc -12· 200934788 [13]如上述[12]所述之化合物或其鹽，其中環a為吡啶環 或苯環 [14] 如上述[1]至[13]中任一項所述之化合物或其鹽其 中Z為氧原子、、或_〇ch2_。 [15] —種醫藥組合物，其含有如上述中任一項 所述之化合物或其鹽。 [16] —種醫樂品，其含有如上述[。至!^ 4]中任一項所述 之化合物或其鹽。 ® [17] 一種抗真菌劑’其係以如上述[1]至[14]中任一項所 述之化合物或其鹽作為有效成分。 [18] —種預防及/或治療真菌感染症之方法，其係投予藥 理學有效量的如上述[1]至[14]中任一項所述之化合物或其 鹽者。 [19] 一種如上述Π]至[14]中任一項所述之化合物或其鹽 之用途，其係用於製造抗真菌劑》 又，本發明之第二態樣提供： ® [20] —種製造方法，其係製造以下式⑴所表示之化合物 者： [化H]

式中， 137275.doc -13- 200934788

Rl表不氫原子、齒素原子、胺基、R丨丨-NHJR1丨表示Cy 烷基、羥基Cy烷基、6烷氧基Ci 6烷基、或Ci 6烷氧基 羰基C丨-6烷基）、R〗2_(c〇)_nh (r12表示a 6烷基或a 6烷氧 基匸“烷基）、Cl 6烷基，羥基Ci 6烷基、氰基6烷基、^— 烧氧基、或(^·6院氧基cN6院基； R2表示氫原子、Cl·6烷基、胺基、或二Cw烷基胺基； X及Y中之一者表示氮原子，另一者表示氮原子或氧原 子；

環A表示亦可具有！個或2個齒素原子或烷基之五員 或六員之雜芳環或苯環； Z表示單鍵、亞甲基、伸乙基、氧原子、硫原子、 -CH2〇-、_OCH2…NH…CH2NH、_NHCH2_、、 或-sch2_ ; R:表示可具有i個或2個氫原子、鹵素原子、或分別選自 取代基群α中的取代某^ «. ^ Τ旳取代基之Cl·6烷基、C3·8環烷基、C6，芳 基、五員或六員雜芳基、哎去上 只哪方丞及耆五員或六員之非芳香族系雜 環基； R4表示氫原子或鹵素原子。 [取代基群0；] 、C!-6烷氧基羰 南素原子、氰基、Cw烷基、Ci 6烷氧基 基、仁3.8環烷基、c26烯基、及Cw炔基。 該製造方法包括以下步驟： 酸二-第三丁酯氣甲基酯 使以式（1)所表示的化合物與鱗 於鹼存在下反應： 137275.doc -14- 200934788 [化 15]

(式中，環A、R1、R3、R4、X、丫及Z表示與上述定義相 同之含義）；以及 其後，利用酸進行處理。 [21] 如上述[20]所述之製造方法，其中上述鹼為碘化 納。 [22] 如上述[20]或[21]所述之製造方法，其中上述酸為三 氟乙酸或鹽酸。 [23] —種製造方法，其係製造以下述式（IA)所表示之化 合物之鹽者： [化 16]

O^OH (式中，環A、R1、R3、R4、χ、丫及/表示與上述定義相 同之含義’ Q-表示藥學上容許之陰離子）； 該製造方法包括以下步驟：使藉由如上述[20]至[22]中 任一項所述之製造方法而獲得的化合物與酸反應。 [24]如上述[23]所述之製造方法，其中上述酸係選自由 鹽酸、氫溴酸、硝酸及硫酸所組成之群者。 137275.doc -15- 200934788 [25]—種製造方法，其係製造以下述式（ιβ)所表示之化 合物之鹽者： [化 17]

(ΙΒ) ❹ Ο (式中’環^^^^又^表示與上述定義相 同之含義，J+表示藥學上容許之陽離子）； 該製造方法包括以下步驟：使藉由如上述[2〇]至[22]中 任一項所述之製造方法而獲得的化合物與鹼反應。 [26]如上述[25]所述之製造方法，其中上述鹼係選自由 氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣及離胺酸所組 成之群者。 [發明之效果] 式（I)、（ΙΑ)或（ΙΒ)所表示之化合物（以下，有時簡稱為 「本發明化合物」），丨）基於抑制真菌的GPI生物合成而抑 制細胞壁表層蛋白質的表現，且抑制細胞壁組合並且抑制 真菌對細胞的附著，從而使病原體無法發揮病原性，藉此 對感染症之發病、進展、持續表現出效果，進而，2)物 性、尤其是在對水的溶解性及水溶液中的穩定性以及體内 動態及安全性方面亦優異，因而作為真菌感染症之預防或 治療劑極為有用。 【實施方式】 137275.doc -16· 200934788 以下’揭示本說明書中所記载之記號、用語等的定義及 本發明之實施形態等來詳細說明本發明。再者，本發明並 不限定於以下實施形態，可在其主旨之範圍内作各種變形 而實施。 於本說明書中’為方便起見化合物之結構式表示固定之 異構物，但本發明中包含在化合物的結構上可生成的所有 幾何異構物、基於不對稱碳的光學異構物、立體異構物、 :轉異構物、互變異構物等異構物及異構物混合物，不限 定於方便之式的記載，可為任—種異構物亦可為混合物。 因此’本發明之化合物的分子内具有不對稱碳原子而存在 光學活性體及消旋體’於本發明中並無限定，包含任意情 況。又，亦存在結晶多形，但同樣並無限定，可為任一種 單-結晶形態亦可為由兩種以上結晶形態所構成的混合 物。而且，本發明化合物中包含無水物及水合物等之溶劑 化物®

G 本說明書中所使用之「Cl_6烧基」，係指自碳數卜6個的 脂肪族烴中除去任意-個氫原子而衍生之一價基、即碳數 1〜6個之直鏈狀或支鏈狀之烷基，具體而言，例如可舉 出：甲基、乙基、正丙基、異丙基、正基、 二丁基、第三丁基、正戊基、異戍基、第二：基丁基新： 基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、甲基丙基、12_二曱 基丙基、正己基、異己基、！·甲基戊基、2_甲基戊基、3_ 甲基戊基、1，1-二甲基丁基、1>2•二甲基丁基、2,2二甲基 丁基、1，3_二甲基丁基、2,3_二甲基丁基、3 3_二甲基丁 137275.doc •17· 200934788 基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、M，2_三甲基丙基、12,孓 三甲基丙基、1_乙基-1_甲基丙基、κ乙基-2_甲基丙基等， 較好的是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正 基、第二丁基、第三丁基等。 異丁

❹ 本說明書中所使用之「C2.6烯基」，係指亦可含有丨〜2個 雙鍵之碳數2〜6之直鏈狀或支鏈狀之稀基，具體而言例 如可舉出：乙烯基、1-丙烯基、2_丙烯基、丨_ 丁烯基、入 丁稀基、3-丁烯基、2-曱基小丙烯基、戊烯基、3甲基· 丁烯基、己縣、己二稀基等，較好的是乙稀基、i丙稀 基、2-丙烯基、1_丁烯基、2_丁烯基、3_丁烯基、甲基-1-丙烯基、3-甲基-2-丁烯基等。 本說明書中所使狀「C2.6快基」，係亦指可含有Μ個 三鍵之碳數2〜6之直鏈狀或支鏈狀之炔基，具體而言，例 如可舉出：乙炔基、1-丙炔基、2_丙炔基、^丁炔基、^ 丁炔基、3-丁快基、戊炔基、己快基、己二块基等，較好 的是乙炔基、1-丙炔基、2·丙炔基、卜丁炔基、2_丁炔 基、3-丁炔基等。 、 不s兄明蚤甲所便用 狀脂肪族烴基’具體而言，例如可舉出：環丙基、環； 基、環戊基、冑己基、環庚基、環辛基等，較好的是 基、環丁基、環戊基、環己基等。 ，係指在上述定義 ’具體而言，例如 異丙氧基、正丁氧 本說明書中所使用之「c16烷氧基」 「Cl·6烧基」的末端鍵結有氧原子之基 可舉出：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、 137275.doc -18- 200934788 基、異丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基、正戊基氧基、 異戊基氧基、第二戊基氧基、新戊基氧基、丨甲基丁氧 基、2-甲基丁氧基、基丙氧基、〗，2_二甲基丙氧 基、正己基氧基、異己基氧基、丨_甲基戊基氧基、2_甲基 戊基氧基、3 -甲基戊基氧基、1，丨·二曱基丁氧基、j，2-二甲 基丁氧基、2,2-二甲基丁氧基、丨’弘二甲基丁氧基、2,3_二 甲基丁氧基、3,3-二曱基丁氧基、丨_乙基丁氧基、2_乙基 丁氧基、1，1，2-三甲基丙氧基、三甲基丙氧基、丨乙 © 基-1-甲基丙氧基、乙基-2-曱基丙氧基等，較好的是甲 氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧 基、第二丁氧基、第三丁氧基等。 本說明書中所使用之「羥基Cl_6烷基」，係指以羥基取代 上述定義「Cw烷基」中的任意氫原子之基，具體可舉 出：經基曱基、1-經基乙基、2_經基乙基、卜經基正丙 基、2-羥基正丙基、3_羥基正丙基、丨羥基異丙基、2_羥 參基異丙基、3-羥基異丙基、丨_羥基第三丁基等，較好的是 經基曱基、1_羥基乙基、2_羥基乙基等。 本說明書中所使用之「氰基Cl_6烷基」，係指以氰基取代 上述定義「Cw烷基」中的任意氫原子之基，具體可舉 出：氰基甲基、irn基、2氰基乙基、！氣基正丙 基、2-氰基正丙基、3_氰基正丙基、丨氰基異丙基、2·氰 基異丙基、3-氰基異丙基、丨·氰基第三丁基等較好的是 氰基甲基、1·氰基乙基、2_氰基乙基等。 本說月書巾所使用4烧氧基幾基」，係指在上述定 137275.doc -19- 200934788 義「c〗·6烷氧基」的末端鍵結有羰基之基，具體而言，例 如可舉出：甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、異 丙氧基羰基等。 本說明書中所使用之「Cw烷氧基羰基Cl_6烷基」，係指 在上述定義的「C!·6烷氧基羰基」的末端鍵結有上述定義 C!-6烧基」之基’具體而言，例如可舉出：甲氧基幾基 甲基、甲氧基裁基乙基、乙氧基幾基甲基、乙氧基幾基乙 基等。 本說明書中所使用之「c0-10芳基」，係指碳數6〜1〇之芳 香族烴環基，具體而言，例如可舉出： 蔡基、節基、奠基、幷環庚三稀基二== 是苯基、1-萘基、2-萘基等。 、本說明t中所使用之「Cl.6燒氧基、燒基」，係指以上 述定義烧氧基」取代上述定義「Ci6垸基」中的任意 氫原子之基’I體而言，例如可舉出：曱氧基甲基、乙： ❹ 基甲基、正丙氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基等。 本說明書中所使用之「南素原子」，係指氣原子 子、溴原子或碘原子。 ’、 原 本說明書中所使用之「雜原子 或氧原子。 '硫原子 本說明書中所使用之「五員或六 成環的原子數為5或6、構成環的原 ^ ’係指構 雜原子之芳香族環。具體而言 含有1個至複數個 吩環…比咯環"比啶環""環、又：舉出：吱降環、嗟 开環、井環、嘧啶環、三唑 137275.doc •20· 200934788 環（，2,3 —唑環、i，2,4·三唑環等）、四嗤環（例如1H-四吐 環、2H·四哇環等）、嘆唾環…比嗤環、，号唾環、異十坐 環、異嗟唑環"号二唑環、噻二唑環等。 、 本說明書中所使用之「五員或六員雜芳基」，係指自構

成環的原子數為5或6、播rc 7丄X 飞構成環的原子中含有1至複數個雜 原子的芳香族環中蜂丄 中除去任意位置的1個氫原子而衍生之一 ::甚：體而言，例如可舉出：°夫喃基(例如2_咬喃基、3_ =基等)、售吩基(例如2·嘆吩基、3,吩基等卜 ^ (例如丨-吡咯基、2-吡咏其, 吼啶基、3“比啶基4 土…比咯基等)、°比啶基(例如2_ 3-…二比咬基等)，井基、㈣細如 井二疒呼基等)、㈣基(例如Μ 基、Η咬基等）、三唾基（例如… = 基等）、四哇基（例如1Η_ —基以，4·二唾 (例如2-嘆唾基、4_嗟唾基、 等）嘆唾基 吡唑基、4_吡唑旯簟1 „ 基荨）、吡唑基（例如3- 基—基汶Γ…基(例如2,基、… © 其 ）、专唑基（例如3-異啰唑基、4 IP企 基、5-異十坐基等）、異㈣ 坐基4-異^坐 唾基、5·異嗟唾基等卜号二麵-異㈣基、4_異嘆 本說明書中所使用之「五員基或？二唾基等。 :」，係指自構成環的原子數為5或、6員==系雜環 有1個至複數個雜原子之非Μ 成環的原子中含 氬原子而衍生之一僧Α θ r咏去任意位置的1個 1胃&。具體而令 基、哌畊基、哌啶基、喝啦I °例如可舉出：吡咯啶 等。 馬琳基、四氫咳脅基、四氫㈣ 137275.doc -21. 200934788 本說明書中所使用之「二Cm烷基胺基」，係指分別以相 同或不同的上述定義的「Ci.6烷基」來取代胺基中的2個氫 原子之基’具體而言’例如可舉出：n，n-二甲基胺基、 N，N-二乙基胺基、N，N-二正丙基胺基、N，N-二異丙基胺 基、N，N-二正丁基胺基、N,N_二異丁基胺基、N，N_二-第 二丁基胺基、N，N-二-第三丁基胺基、N_乙基_N_甲基胺 基、N-正丙基-N-甲基胺基、N_異丙基_N_甲基胺基、n_正 丁基-N-甲基胺基、N-異丁基_N•甲基胺基、N•第二丁基 ® -N-甲基胺基、N-第三丁基甲基胺基等，較好的是N，N_ 二甲基胺基、N，N-二乙基胺基、N_乙基_N_曱基胺基等。 本說明書中所使用之「亦可具有！個或2個取代基」，係 指可在能夠進行取代的部位任意地組合具有丨或2個取代 基。 本說明書中所使用之「Q.」係指藥學上容許之陰離子， 因來源於藥學上容許之有機酸或無機酸，故並不限定於特 ❿定之陰離？ ’至於該等有機酸或無機酸，例如可例示以下 者。即，至於有機酸，可舉出：脂肪族或芳 酸、苯績酸、順丁婦二酸、棒樣酸、丁二酸、反： 酸甲笨績酸、二氟曱續酸等；至於無機酸，可舉出：鹽 酸、硫酸、磷酸、氫氟酸、氫溴酸、氫碘酸等。 本說明書中所使用之「J+」係指藥學上容許之陽離子， 並不限定於以下陽離子，具體可舉出：納離子、钟離子、 链離子等之驗金屬離子；約離子、鎮離子等之驗土金屬離 子；或者源自甲基胺、乙基胺或環己基胺等烧基胺，二乙 137275.doc •22· 200934788 醇胺、三乙醇胺或三（羥基甲基）胺基曱烷等經羥基取代的 烧基胺’離胺酸、精胺酸或組胺酸等胺基酸，哌咬，嗎啉 等有機鹼之銨離子等。 R1表示氫原子、鹵素原子、胺基、Cl_6烷基、Cl-6烷氧 基 Ci·6烧基胺基、輕基Ci.6烧基胺基或c].6烧氧基q 6烧 基，尤其好的是氫原子、胺基、或Cl_6烷氧基Ci6烷基，作 為仁!—6烷氧基Ck烷基，較好的是甲氧基甲基。 R表示氫原子、胺基、或二Cl·6烷基胺基，較好的是氫 ❹原子或胺基。 X及Y中之一者表示氮原子，另一者表示氮原子或氧原 子。 、 含有X及Y之以下式（11)所表示之部分結構： [化 18]

的疋八有如下所述的結構，且各自的左端經

而鍵結於吡啶環的3位、並且右端經由亞甲 A 之情形： 蟪心 [化 19]

137275.doc -23· 200934788 例如’於具有式（m)的部分結構之情形時，本發明化合 物之母化合物、即導入膦酸氧基曱基前之化合物的結構如 下式： [化 20]

❹ 較好的是X及Υ中之一者為氮原子且另一者為氧原子之 情形、或者X及Υ均為氮原子之情形，於χ&γ中之一者為 氮原子且另—者為氧原子之情形時，較好的是，含有X及 Υ之下式（π)所表示之部分結構具有如下式则或叫所表 不之結構’且各自的左端經由單鍵鍵結於η比咬環的3位、 並且右端經由亞甲基與Α環鍵結之情形： [化 21] (I I) [化 22]

八八久I闷馮氦原子之 Υ之以下式（Π)所表示之部分結構具右好的是，含有X及 表示之結構’各自的左端經由、二下式⑺或m)所 並且右端經由亞甲基與八環鍵結之情::於，環的3位、 137275.doc -24· 200934788 [化 23] (U) [化 24] (VI) ^ —或 ❹ 環Α表示亦可具有!個或2個自 或六員之雜芳環或苯環，較好 或。烷基之五員 吱0南環、嚷吩環、或対環之情:環八為°比唆環、笨環、 環_環，尤其好的是心或笨環更好的一、笨 Z表示單鍵、亞曱基、好 ΓΗ n ^ G基、虱原子、硫原子、 2 七叫·、捕_、·咖 h2_、.CH2…CH2S·、 或-sch2·，其中較好的是亞f基氧原子偶〇、戍 -〇现·，尤其好的是氧原子、·CH2〇、或·〇cH2_。 ❹

R3表示亦可具有i個或2個氫原子、齒素原子、或分別選 自取代基群α中的取代基之C丨-6烷基、c3 8環烷基、C61。芳 基、或者五員或六員環雜芳基。 [取代基群α ] 鹵素原子、氰基、Cy烷基、Cl.6烷氧基、Cl_6烷氧基羰 基、C3-8環烷基、c2.6烯基、及c2.6炔基 若例示作為R3為較好的基，則可舉出：正丁基、環丙 基、苯基、氟苯基、呋喃基、氣呋喃基、甲基呋喃基、嘍 吩基、溴噻吩基、甲基噻吩基、《比啶基、或甲基„比啶基， 137275.doc -25- 200934788 尤其好的是正丁基、環丙基、苯基、氣苯基… 甲基吡啶基。 a z及R3可藉*各自的任意組合而構成環觸取代基。若 例丁作為以此種方式構成之環A的取代基之的較佳 例，則可舉出：苯氧基、节基氧基、2_氟节基氧基、3_氣 节基氧基、4-氟节基氧基、„比。定_2_基氧基甲基、6甲基吼 啶-2-基氧基甲基、吡啶·2_基甲氧基、6•甲基吡啶·2_基甲 ❹ 氧基、4-甲基吼咬_2基甲氧基、丁氧基甲基、或環丙 氧基。 本說明書中所使用之「鹽」，係指與可形成—價抗衡離 :或二價抗衡離子之化合物或原子所形成之鹽。具體而 言’係指與無機酸（例如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸、硝 酸等）形成之鹽、與有機酸（例如甲續酸、乙績酸、苯績 酸、對曱苯磺酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、丁二酸，檸 檬酸、蘋果酸、或三氟乙酸等)形成之鹽、或與無機鹼(例 如納鹽、H㈣等）形成之鹽、與有機驗（例如 甲胺鹽、乙胺鹽、第三丁基胺鹽、環己基胺鹽、Ν_曱基 -D-葡萄糖胺鹽、離胺酸鹽、哌啶或嗎啉等）形成之鹽。單 鹽及雙鹽包含於用語「鹽」中。而且，本發明之化合物之 鹽中包含該鹽之無水物及水合物等該鹽之溶劑化物。 本說明書中所使用之「抗真菌劑」係指真菌感染症之預 防劑及/或治療劑。 本發明之化合物可藉由慣用之方法而製成錠劑、散劑、 細粒劑、顆粒劑、包衣錠劑、膠囊劑、糖漿劑、口含劑、 137275.doc -26 - 200934788 及入劑、栓劑、注射劑、軟膏劑、眼用軟膏劑、貼劑、滴 眼劑、滴鼻劑、滴耳劑、糊劑、洗劑等。 在製劑化時，可使用通常使用之賦形劑、黏合劑、潤滑 劑、著色劑、調味調香劑，或根據需要使用穩定劑、乳化 劑、吸收促進劑、界面活性劑、pH調節劑、防腐劑、抗氧 化劑等’並調配通常用作醫藥品製劑原料之成分利用常用 方法來製劑化。例如，在製造口服製劑時，添加本發明之 化合物及賦形劑，進而根據需要加入黏合劑、崩散劑、潤 ® π劑、著色劑、調味調香劑等，然後利用常用方法製成散 劑、細粒劑、顆粒劑、錠劑、包衣錠劑、膠囊劑等。 至於該等成分，例如可舉出：大豆油、牛油、合成甘油 酯等之動植物油；液體石蠟、角鯊烷、固體石蠟等之烴； 肉豆蔻酸辛基十二烷酯、肉豆蔻酸異丙酯等之酯油；十八 十六醇（cetostearyl alcohol)、二十二醇等之高級醇；矽氧 樹脂；矽油；聚氧乙烯脂肪酸酯、山梨糖醇酐脂肪酸酯、 ❹ 甘油脂肪酸酯、聚氧乙稀山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯 硬化蓖麻油、聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物等之界面活性 劑；羥乙基纖維素、聚丙烯酸、羧基乙烯基聚合物、聚乙 一知、聚乙烯°比洛°定酮、〒基纖維素等之水溶性高分子； 乙醇、異丙醇等之低級醇；甘油、丙二醇、二丙二醇、山 梨糖醇等之多元醇；葡萄糖、蔗糖等之糖；無水矽酸、矽 酸銘鎮、矽酸鋁等之無機粉體；純化水等。至於賦形劑， 例如可使用乳糖、玉米澱粉、白糖、葡萄糖、甘露醇、山 梨糖醇、結晶纖維素、二氧化矽等；至於黏合劑，例如可 137275.doc -27- 200934788 使用聚乙烯醇、聚乙烯醚、曱基纖維素、乙基纖維素、阿 拉伯膠、黃詩、明膠、蟲膠、經丙基甲基纖維素、經丙 基纖維素、$乙烯吡咯啶酮、聚丙二醇_聚氧乙烯嵌段聚 合物、葡曱胺（meglumine)等；至於崩散劑，例如可使用澱 粉填脂、明膠粉、、结晶纖維素、碳酸辑、碳酸氣鈉、棒 檬酸鈣、糊精、果膠、m甲基纖維素鈣等；至於潤滑劑， 例如可使用硬脂酸鎂、滑石、聚乙二醇、二氧化石夕、硬化 植物油等，至於著色劑，可使用允許添加至醫藥品中者； 至於調味調香劑，例如可使用可可粉、薄荷腦、芳香散、 薄荷油、龍腦、肉桂粉等。該等錠劑、顆粒劑當然 糖衣，此外當‘然可根據需要適當進行包衣4，在製造糖 装劑或注射用製劑等溶液劑時，於本發明之化合物中加入 ❹

PH調節劑、溶解劑、等張劑等，以及根據需要加入溶解化 劑、穩定劑等’並利用常用方法而製劑化1於製造外用 劑時之方法並無限定，可利用f用方法來製造。即，作為 在製劑化時所使用之基質補，可使用醫藥品、準藥品、 化粧品等中通常使用的各種原料。至於所使用之基質原 枓’具體而言’例如可舉出：動植物&、礦物油、醋油、 蠟類、高級醇類、脂肪酸類、矽油、#面活性劑、磷脂質 類、醇類、多㈣類、水溶性高分子類、黏土礦物類、純 夂等原料’進而根據需要，可添加例如pH調節劑、抗氧 化劑、整合劑、防腐防黴劑、著色料、香料等，但本發明 ^卜_之基f原料並不限定於該等原料。又，根據需要 亦可調配具有分化誘導作用之成分、血流促進劑、殺菌 137275.doc -28- 200934788 劑、消炎劑、細胞活化劑、 角質溶解劑等成分。再者，、I 胺基酸、保濕劑、

、g # / m π ，上述基質原料之添加量係達SJ 通常在製造外關時所設定濃度之^ ， 當投予本發明之化合物 夺，對其形態並無特別限定，經 由通常所採用的方法，—p 、' 可口服投予亦可非口服投予。

如，可製成錠劑、散劑、顆 J J顆粒劑、膠囊劑、糖漿劑、口 鍵、吸入劑、检齋丨、、、士 U. /主射劑、軟膏劑、眼用軟膏劑、貼

劑、滴眼劑、滴鼻劑、湳且為丨始（灰,L ❹ /間耳劑、糊劑、洗劑等製劑而進杆 投予。 本發明之醫藥品之投予量，可根據症狀程度、年齡、性 別體重才又予形態、鹽的種類、疾病的具體種類等作適 當選擇。 投予量根據患者的疾病種類、症狀程度以及患者的年 齡、性別、對藥劑的接受性差異等而顯著不同，於口服劑 之情形時’通常對成人每天投予1〜10000 mg，較好的是1 日1次〜分數次投予10〜2000 mg。於注射劑之情形時，通 常成人每日投予通常為0.1 mg〜10000 mg，較好的是！ mg 〜2000 mg ° [通常之製造方法] 下面就式（I)、（IA)及（IB)所表示化合物（以下稱為化合物 (I)、化合物（IA)及化合物（IB))之製造方法加以說明。 磷酸酯之通常製造方法 [製造方法1]化合物⑴、（IA)及（IB)之製造方法 137275.doc •29· 200934788

[化 25]

(式中，環八、1^、|13、114、又、丫、2、（50、及了*表示 與上述疋義相同之含義）。 化合物（1-1)可利用後述參考例等中所記載之方法來製 造。又’化合物（1-1)可利用國際公開wo 2007/052615幻 公報所記載之方法等來製造。 [步驟1-1]

本步驟係使化合物（M)與鱗酸二_第三丁基醋氯甲⑽ ^化納存在下反應，然後㈣酸處理而獲得化合物⑴之力 存：=T(1-1)與鱗酸二_第三丁輯氯甲_化 存在下反應時所使用夕、.六杰, 並且不抑制反應者：’若係以某程度溶解起始原 ㈣仿等一 Sr:::如可舉出:二氯 溶劑，乙酸乙醋等之醋系 -乙醚等之醚: 乙腈、四亞甲基颯或該^ J37275.doc -30· 200934788 溶劑的混合溶劑等，較好的是使用乙酸乙酯、四氫呋喃或 乙腈。磷酸二-第三丁基酯氣甲基酯，相對於化合物Οι)， 可使用 1 當量至 10 當量 ，較好 的是使 用1 當量至2當 量。碘化鈉，相對於化合物（M)，可使用！當量至1〇當 量，較好的是使用1當量至2當量。反應溫度為〇它至6〇 °C，較好的是4°C至室溫。反應時間為4小時至216小時。 至於酸處理中所使用之酸，可使用三氟乙酸等有機酸、 鹽酸等無機酸，較好的是使用鹽酸、三氟乙酸。在進行酸 ° 處理時，可於前階段的反應溶劑中直接加入酸，亦可於暫 時將溶劑減壓濃縮後，變更為適當的溶劑例如二氣甲烷等 再加入酸。反應溫度為-lot至室溫，反應時間為5分鐘至 2小時。 [步驟1-2] 本步驟係使化合物（I)與酸反應而獲得化合物（IA)之步 驟。作為該反應中所使用之酸，只要係藥學上容許者則無 特別限制，有鹽酸、氫溴酸、硝酸等之一元酸，硫酸等之 二元酸。作為本反應中所使用之溶劑，只要係以某程度溶 解起始原料並且不抑制反應者’則無特別限制，例如可使 用：N，N-二甲基甲醯胺、N·甲基吡咯啶酮等之醯胺系溶 劑，甲醇、乙醇等之醇系溶劑，四氫呋喃，乙腈，水，或 該等溶劑之混合溶劑等。相對於化合物（I)使用1當量之一 元酸，相對於化合物⑴使用1當量或0.5當量之二元酸。反 應溫度為0。(：至室溫，反應時間為5分鐘至4小時。 [步驟1-3] 137275.doc -31 - 200934788 該步驟係使化合物⑴與驗反應而獲得化 二作為該反應中所使用之驗，只要係蔡學上料者:: 之有:制，有氫氧仙、氫氧化料之無機驗，離胺酸等 ^驗。至於該反應中所使用之溶劑，若係以某程度溶 始原料並且不抑制反應者，則無特別限制，例如可使 y 酿胺、N•甲基料㈣等之醯胺系溶 劑’甲醇、乙醇等之醇系溶劑，四氫咬喃，乙猜，水，或

該等溶劑之混合溶劑等。相對於化合物⑴使用巧量之一 讀’相對於化合物⑴使用！當量至〇5當量之二元驗。反 應溫度為〇°C至室溫’反應時間為5分鐘至4小時。 [實施例] 本發明之化合物，例如可利用以下實施例、參考例及製 造例等中所記載之方法來製造。但是，該等係例示者，本 發明之化合物於任何情形時均不限定於以下之具體例。 [參考例1]3·(3-(4-(吡啶·2_基氧基甲基）苄基）異噚唑_5_ 基）吡啶-2·基胺 [化 26]

於室溫下，於製造例1-1_5所記載之（4•(吡啶_2基氧基甲 基）本基）乙經两醯氣（510 mg，1.84 mmol)及國際公開第 07/052615號公報之製造例丨_2_3所記載之3_乙炔基吡啶·2_ 基胺（150 mg，1.27 mmol)的四氫呋喃（5 mL)溶液中加入三 137275.doc -32- 200934788 乙胺（708 pL，5 ·〇8 mmol)，於室溫下攪拌95分鐘。於室溫 下於反應溶液中加入水，用乙酸乙酯進行萃取。用飽和食 鹽水清洗有機層，以無水硫酸鎂將其乾燥，於減壓下將其 溶劑蒸餾除去。以NH矽膠管柱層析法（庚烷：乙酸乙醋 =2 : 1)對殘渣進行純化，獲得標記化合物（12〇 mg， 26%) ° iH-NMR spectrum (CDC13) δ (ppm) : 4.08 (2H，s)，5.37 (2H, s), 6.33 (1H, s), 6.45 (2H, brs), 6.79-6.82 (2H, m), ❿ 6.88-6.91 (1H, m), 7.30 (2H, d, J=8.1Hz), 7.45 (2H, d, J=8.1Hz), 7.57-7.61 (1H, m), 7.85 (1H, d, J=7.3Hz), 8.03 (1H, d, J=5.5Hz), 8.17 (1H, m) 〇 起始物質（4-(吼啶_2-基氧基甲基）苯基）乙羥肟醯氣係利 用以下方法來合成。 [製造例1-1-1](4-(〇比啶_2_基氧基曱基）苯基）甲醇 [化 27]

於〇t下，向1,4-苯二甲醇（5.5 g，40 mmol)、2-氟吡啶 (1.3 g，13 mmol)、及N，N-二甲基曱醯胺（15 mL)的混合物 中添加氫化納（1.4 g’ 40 mmol，66%在油中），於室溫下授 拌20分鐘及於70。(：下攪拌1小時。於反應混合物中加入 水’用乙酸乙醋進行萃取。用飽和食鹽水清洗有機層，於 減壓下將其溶劑蒸餾除去。以NH矽膠管柱層析法（乙酸乙 醋：庚院=1 : 1)對殘渣進行純化，獲得標記化合物（19 g » 66%) 〇 137275.doc -33· 200934788 *H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 4.71 (2H, s), 5.38 (2H, s), 6.81 (1H, td, J=0.9, 8.4Hz), 6.89 (1H, ddd, J=0.9, 5.1, 7.1Hz), 7.37-7.47 (4H, m), 7.59 (1H, ddd, J=2.0, 7.1, 8.3Hz)，8.17 (1H，ddd，J=0.7, 2.0, 5.1Hz)。 [製造例l-l-2]4-(吡啶-2-基氧基甲基）苯甲醛 [化 28] 於室溫下，於製造例1-1-1所記載之（4-(吡啶-2-基氧基甲 ® 基）苯基）曱醇（1.9 g，8.6 mmol)與二氣甲烷（30 mL)的混合 物中加入二氧化猛（15 g，17 mmol)，於該溫度下整夜授 拌。利用矽藻土將反應混合物過濾，於減壓下將其溶劑蒸 餾除去。以矽膠管柱層析法（乙酸乙酯：庚烷=1 : 4)對殘 渣進行純化，獲得標記化合物（770 mg，42%)。 •H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 5.48 (2H, s), 6.85 (1H, d, J=8.2 Hz), 6.90-6.93 (1H, m), 7.60-7.64 (3H, m), ❹ 7.89 (2H, d, J=8.1Hz)，8.16 (1H，dd, J=l.3, 4·9Ηζ)，10.0 (lH，s)。 [製造例l-l-3]2-(4-((E)-2-硝基乙烯基）苄基氧基V比啶 [化 29]

將製造例1-1-2所記載之4-("比啶-2·基氧基曱基）苯甲醛 (23.4 g，110 mmol)、硝基甲烷（33.6 g，550 mmol)、乙酸 銨（17.0 g ’ 220 mmol)以及乙酸（2〇〇 mL)的混合物於100°C 137275.doc •34· 200934788 下攪拌1小時45分鐘。一面於冰浴冷卻下撲拌反應溶液一 面加入少量水，過濾取出析出的固體’獲得標記化合物 (21.0 g，74.5%)。 'H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ： 5.41 (2H, s), 6.91 (1H, dd, J=0.8, 8.4Hz), 6.99-7.10 (1H, m), 7.53 (2H, d, J=8.0Hz), 7.72-7.79 (1H, m), 7.86 (2H, d, J=8.0Hz), 8.13 (1H，d，J=10Hz)，8.15-8.20 (1H, m), 8.23 (1H，d，J=l〇Hz)。 [製造例l-l-4]2-(4-(2-硝基乙基）苄基氧基）。比啶 〇 [化 30]

一面進行適當冷卻一面於室溫下向製造例1-1-3中所記 載之2-(4-((E)-2-硝基乙烯基）苄基氧基）吼啶（21.0 g，81.9 mmol)、乙酸（21 mL)、二甲基亞颯（200 mL)的溶液加入硼 氫化納（4.96 g ’ 13 1 mmol)。加入硼氫化納後，去除冷卻 浴於室溫下搜拌1 5分鐘。將反應溶液分配於水與乙酸乙酯 φ 中。用水清洗乙酸乙酯層2次，用食鹽水清洗1次，以無水 硫酸鎂對其進行乾燥，於減壓下將其溶劑蒸餾除去。以 NH矽膠管柱層析法（乙酸乙酯：庚烷=ι : 3)對殘渣進行純 化’獲得標記化合物（16.3 g，77.1%)。 H-NMR Spectrum (DMSO_d6) δ (ppm) : 3.23 (2H, t J=6.8Hz), 4.85 (2H, t, J=6.8Hz), 5.32 (2H, s), 6.82-6.88 (1H, m), 6.96-7.01 (1H, m), 7.28 (2H, d, J=8.〇Hz), 7.38 (2H, d, J=8.0Hz), 7.69-7.74 (1H, m), 8.15-8.19 (1H, m) 〇 137275.doc -35- 200934788 [製造例1-1-5]4-(吡啶-2-基氧基曱基）苯基乙羥肟醯氣 [化 31]

Ο 於甲醇（75 mL)中加入裡絲（323 mg，46.6 mmol)並使其 溶解。於該混合溶液中加入製造例1-1-4中所記載之2-(4-(2-硝基乙基）节基氧基）》比咬（6.0 g，23 _ 3 mmol)，於減壓下 將反應溶液濃縮。於殘渣中加入甲苯，於減壓下將其溶劑 漢縮。將所得殘渣之二氯甲烧（90 mL)與四氫吱〇南（45 mL) 的溶液冷卻至-78°C，於攪拌下加入氯化鈦（IV)(8.15 mL， 74·4 mmol)。於加入氣化鈦（IV)結束後，將反應溶液於 下攪拌10分鐘，繼而於室溫下攪拌30分鐘。將反應溶液於 冰水中展開，並用乙酸乙酯進行萃取。以無水硫酸鎂對有 機層進行乾燥’藉由過濾除去硫酸鎂。使濾液在鋪設有中 性妙膠之玻璃過濾器（以乙酸乙酯進行溶析）中通過。將所 得溶析液於減壓下濃縮。於殘渣中加入少量乙酸乙醋，過 濾取出析出的固體，而獲得標記化合物（1.86 g，28.8。/。）。 H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ： 3.82 (2Η, s) 5.33 (2H，s)，6·84-6.89 (1H，m)，6.97-7.01 (1H，m)，7.25 (2H, d, J=8.4Hz), 7.41 (2H, d, J=8.4Hz), 7.70-7.76 (lH, m)j 8.15-8.18 (iH，m)，11.7 (1H，s)。 ’ 又’製造例1-1-5之標記化合物亦可利用下述之其他方 法來合成。 [製造例1-2-1 ]2-(4-溴苄基氧基）η比啶 137275.doc •36- 200934788 [化 32]

於室溫下，於4-溴苄醇（25 g，no mmol)的Ν，Ν_二甲基 甲醯胺（125 mL)溶液中添加第三丁氧基鉀（p〇tassium tert_ butoxide)(15.8 g ’ 141 mmol)，於54°C 下攪拌 l〇分鐘。於 40C至58C下向該反應溶液中加入2-氟η比咬（i5 mL，15 4 mmol) ’進而於65C下攪拌30分鐘。使反應溶液達到室 ® 溫，加入水及乙酸乙醋進行分液。進而用乙酸乙醋（2次）對 水層進行萃取。與乙酸乙S旨層合併，用水（3次）及食鹽水（1 次）進行清洗’以無水硫酸鎮進行乾燥後，進行過減。將 其渡液於減壓下濃縮。向殘漬中加入二乙謎，於減壓下濃 縮，藉此獲得作為粗產物之標記化合物（34 g)。 !H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 5.33 (2Η, s), 6.87-6.90 (1H, m), 6.98-7.02 (1H, m), 7.38-7.44 (2H, m), 7.55-7.60 (2H, m)，7.71-7.76 (1H，m)，8.15-8.18 (1H, m)。 ® [製造例l-2-2]4-(吡啶-2-基氧基曱基）苯曱醛 [化 33]

於-78°C下向製造例1-2-1所記載之2-(4-溴节基氧基）吡啶 (34 g，128 mmol)的四氫呋喃溶液（120 mL)中滴加正丁基 鋰（50 mL，2.6 Μ己烷溶液，134 mmo1)。攪拌30分鐘後， 於-78 t下向該反應溶液中滴加N，N-二甲基曱醯胺（1〇 mL，134 mmol)，於室溫""F進行搜拌。向反應溶液中加入 137275.doc -37- 200934788 水及乙酸乙酯再進行分液。用水（2次）及食鹽水（丨次）清洗 乙酸乙酯層。與水層合併，用乙酸乙酯進行萃取。用水（2 次）及食鹽水（1次）清洗所得乙酸乙酯層。將先前獲得之乙 酸乙醋層與此次獲得之乙酸乙酯層合併，以無水硫酸鎮乾 燥後’進行過濾。將其濾液於減壓下濃縮，藉此獲得作為 粗產物之標記化合物（26.8 g)〇 [製造例1-2-3]2-(4-((Ε)-2-硝基乙烯基）苄基氧基）吼啶 [化 34] 將製造例1-2-2所記載之4-(吡啶-2-基氧基甲基）苯甲醛 (26.8 g ’ 126 mmol)、硝基甲烷（34 mL，630 mmol)、乙酸 敍（19 g，252 mmol)及乙酸（90 mL)的混合物於1〇〇。〇下授 拌1小時3 0分鐘。向反應溶液中加入乙酸乙酯及水並進行 分液。將其有機層分離，用水（5次）及飽和碳酸氫鈉溶液（1 次）進行清洗，再以無水硫酸鎂乾燥後，進行過濾。將其 濾液於減壓下濃縮，藉此獲得作為粗產物之標記化合物 (31 g)。 [製造例l-2-4]2-(4-(2-硝基乙基）苄基氧基）"比啶 [化 35] 於30°c以下，向製造例1-2-3所記載之2-(4-((Ε)·2-硝基 乙稀基）苄基氧基）D比咬（30·8 g，120 mmol)與乙酸（7.4 mL) 之二曱基亞砜（150 mL)的溶液中加入硼氫化鈉（2.45 g， 64.8 mmol)。於室溫下將反應溶液攪拌40分鐘。於30°C以 137275.doc • 38 - 200934788 下向反應溶液中加入水、乙酸乙酯及二乙醚，分配至水與 有機層中。用乙酸乙酯對水層進行萃取。將先前獲得之有 機層與乙酸乙酯層合併，用水（3次）及食鹽水（1次）進行清 洗，以無水硫酸鎂乾燥後，進行過濾。將其濾液於減壓下 濃縮。以NH矽膠管柱層析法（乙酸乙酯：庚烷=1 : 4)對殘 渣進行純化’獲得標記化合物（15.2 g)。 [製造例1-2_5]4-(吡啶-2_基氧基甲基）苯基乙羥肟醯氣 [化 36]

〇 向製造例1-2-4所記載之2-(4-(2-硝基乙基）节基氧基）吡 啶（15.2 g，59 mmol)的甲醇（80 mL)溶液中加入甲氧化鋰 (lithium methoxide)(4.49 g，118 mmol)，攪拌 3 分鐘。將反 應溶液於減壓下濃縮。向殘渣中加入甲苯，將其溶劑於減 壓下濃縮。將所得殘渣之二氣曱烧（100 mL)與四氫ο夫喃（50 mL)的溶液冷卻至_66°C，於攪拌下加入氣化鈦（Iv)(2〇 8 ❹ mL ’ 189 mmol)。將反應溶液於〇°C下攪拌10分鐘，繼而於 室溫下授拌30分鐘。將反應溶液注入冰水中，於室溫下授 拌30分鐘。向反應溶液中加入乙酸乙酯及二乙醚再進行分 液。用水（3次）及食鹽水（1次）清洗有機層。與水層合併， 用乙酸乙酯（2次）進行萃取。與乙酸乙酯層合併，用水（3 次）及食鹽水（1次）進行清洗。將先前之有機層與乙酸乙醋 層合併’以無水硫酸鎂及硫酸鈉乾燥，進行過濾，將其濾 液於減壓下濃縮，藉此獲得作為粗產物之標記化合物（115 137275.doc -39· 200934788 g)〇 又參考例1之標s己化合物亦可利用下述之其他方法1至 3來合成。 [參考例1之其他方法1]3-(3-(4_(吼啶_2_基氧基甲基）苄 基）異嘮唑-5基）吡啶-2-基胺 [化 37]

® 於〇C下，向氣化鋅（8.82 g)與四氫吱味（130 mL)的混合 物中加入國際公開第07/052615號公報之製造例丄_2_3所記 載之3-乙炔基吡啶_2_基胺（3.00 g，純度為98%)、及製造例 1-2-5所記載之4_(吡啶·2_基氧基甲基）苯基乙羥肟醯氣（17 4 g，純度為94%)。使反應混合物達到室溫，一面利用水浴 將内溫保持於28°C以下一面滴加三乙胺（9 〇2 mL)。將反應 混合物於室溫下攪拌20分鐘，繼而於35。〇下攪拌丄小時。 ◎ 使反應混合物達到室溫，向反應混合物中加入氣化銨水溶 液及乙酸乙酯，繼而加入氨水溶液直至pH值約為8，進行 萃取。用飽和食鹽水清洗有機層，以無水硫酸鎂對其進行 乾燥’於減壓下將其溶劑蒸餾除去。以Nh矽膠管柱層析 法（庚烷：乙酸乙酯=3 : 2)對殘渣進行純化，繼而利用第 二丁基甲基醚與庚烷的混合溶劑進行結晶化，獲得標記化 合物（5.32 g)。 ^-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) ； 4.07 (2Η, s), 5.37 (4H, brs), 6.25 (1H, s), 6.71 (1H, dd, J=4.8, 7.7Hz), 6.79- 137275.doc -40- 200934788 6·81 (1H，m)，6.89 (1H，ddd，J=〇.8, 5.0, 7·0Ηζ)，7.30 (2H, d, J=7.9Hz), 7.44 (2H, d, J=8.1Hz), 7.58 (1H, ddd, J=2.0, 7.1，8.4Hz)，7.70 (ih，dd，J=1.8，7.7Hz)，8.14 (1H，dd， J=1.8, 4.9Hz), 8.17-8.18 (1H, m) ° 在參考例1之其他方法1中，起始物質4-(吡啶-2-基氧基 甲基）苯基乙羥肟醯氣係利用以下方法來合成。 [製造例1-3-1]3_(4·(吼啶_2·基氧基甲基）苯基）環氧乙燒_ 2-曱酸甲酯 ❹ [化38]

於-15°C下，向製造例丨-丨^所記載之4-(吡啶-2-基氧基甲 基）苯甲醛（24.8 g)與四氫呋喃（160 mL)的混合物中加入氣 乙酸甲酯（10.2 mL)，繼而於相同溫度下加入甲氧化納 (23·7 mL，28%甲醇溶液）。將反應混合物於〇°c下挽掉η、 時’然後於室溫下攪拌2小時。將反應混合物加入含有乙 酸（6 mL)的冰水（800 mL)中，使反應混合物達到室严。 反應混合物中添加乙酸乙酯進行萃取，繼而分離有機層， 用飽和食鹽水進行清洗，以無水硫酸鎂乾燥。於減壓下將 其溶劑蒸餾除去，獲得標記化合物（30.2 g)。

^-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) ： 3.51 (1Η d J=1.8Hz), 3.83 (3H, s), 4.11 (1H, d, J=1.8Hz), 5.38 (2H s) 6.81 (1H, td, J=0.9, 8.4 Hz), 6.89 (1H, ddd, J=〇.9j 5 { 7.1Hz), 7.29-7.31 (2H, m), 7.47 (2H, d, J=8.2Hz), 7.59 〇H 137275.doc • 41· 200934788 ddd，J=2.0, 7.1，8·4Ηζ)，8.17 (1H，ddd，J=〇.8, 2.0, 5.1Hz)。 [製造例1-3-2]3·(4-("比啶-2-基氧基曱基）-苯基）_環氧乙 烷-2-甲酸鈉 [化 39]

於〇°C下，向製造例1-3-1所記載之3-(4-(吡啶-2-基氧基 曱基）-苯基）-環氧乙烧-2-甲酸甲酯（19.9 g)與乙醇（3〇〇 mL) Q 的混合物中依序加入曱氧化鈉（14.2 mL，28%甲醇溶液）、 水（1.3 mL)、四氫呋喃（100 mL)，於室溫下攪拌1小時。向 反應混合物中加入二乙醚（200 mL)，過滤取出析出的固 體，獲得標記化合物（14.3 g)。 ^-NMR Spectrum (CD3OD) δ (ppm) ： 3.31 (1Η, d, J=1.8Hz), 3.88 (1H, d, J=1.8Hz), 5.33 (2H, s), 6.84 (1HS td, J=0.9, 8.2Hz), 6.94 (1H, ddd, J=0.9, 5.1, 7.1Hz), 7.29-7.31 (2H, m), 7.42 (2H, d, J=8.2Hz), 7.68 (1H, ddd, J=2.0, 7.1, G 8.4Hz)，8.12 (1H, ddd，J=0.7, 2.0, 5.1Hz)。 [製造例l-3-3]4-(吼啶-2-基氧基甲基）苯基乙醛 [化 40]

將製造例1-3-2所記載之3-(4-(吡啶-2-基氧基甲基）苯基） 環氧乙烷-2·甲酸鈉（9.95 g)、曱苯（200 mL)、水（120 mL)、 乙酸（16 mL)的混合物於73 °C下攪拌90分鐘。使反應混合 物達到室溫，向反應混合物中加入乙酸乙酯進行萃取，繼 -42 137275.doc 200934788 而分離出有機層，用飽和食鹽水進行清洗，以無水硫酸鎂 乾燥。於減壓下將其溶劑蒸餾除去，獲得標記化合物（6 82 g)〇 !H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) ： 3.70 (2Η, d, J=2.2Hz), 5.38 (2H, s), 6.81 (1H, td, J=〇.8, 8.2Hz), 6.89 (1H, ddd, J=0.9, 5.1, 7.1Hz), 7.24 (2H, d, J=8.1), 7.48 (2H, d, J-8.1Hz), 7.59 (1H, ddd, J=2.0, 7.1, 8.4Hz), 8.18 (1H, ddd，J=0.6, 2.0, 5·0Ηζ)，9.75 (1H，t，J=2.4Hz)。 [製造例1-3-4]4-(吡啶-2-基氧基甲基）苯基乙醛肟斤/2混 合物） [化 41]

於〇°C下，向硫酸羥胺（19.7 g)與水（250 mL)的混合物中 加入1 N氫氧化納水溶液（240 mL)，於相同溫度下擾拌15 分鐘。繼而，於相同溫度下向反應混合物中滴加製造例 © i-3-3所記載之（4-(«比啶-2-基氧基甲基）苯基）乙醛（27.3 g)與 甲醇（250 mL)的混合物，於室溫下整夜攪拌。過濾取出析 出的固體，獲得作為E體與Z體的混合物之標記化合物 (20.3 g) 〇 !H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) ： 3.54 (2Η, d, J=6.2Hz)，3.74 (2H，d，J=5.3Hz)，5.36 (2H+2H，s)，6·79- 6.81 (1H+1H, m), 6.87-6.90 (1H+2H, m), 7.22-7.24 (2H+2H, m), 7.42-7.44 (2H+2H, m), 7.53 (1H, t, J=6.3Hz), 137275.doc • 43- 200934788 7.56 7.61 (1H+1H, m), 8.17-8.18 (1H+1H, m)(underbar=E or Z)。 [製造例l-3_5]4_(吡啶_2-基氧基曱基）苯基乙羥肟醯氣 [化 42] 於室溫下，向製造例1-3_4所記載之4_(吡啶·2_基氧基甲 基）苯基乙醛肟（Ε/Ζ混合物）（132 mg)與Ν，Ν_二甲基甲醯胺（2 ❹ mL)的混合物中加入义氣琥珀醯亞胺（72·8 。繼而，於 相同溫度下向反應混合物中吹入氣化氫氣體，於相同溫度 下攪拌90分鐘。向反應混合物中加入乙酸乙酯與水進行萃 取，繼而分離出有機層，用飽和食鹽水進行清洗，以無水 硫酸鎂乾燥。於減壓下將其溶劑蒸餾除去，用二乙醚與庚 烷的混合溶劑清洗所得殘渣，獲得標記化合物（123mg)。 tNMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 3.81 (2H，s)，5 36 (2H, s), 6.81 (1H, d, J=8.2Hz), 6.88-6.91 (1H, m), 7.28 (2H, 〇 d, J=8.1), 7.43 (2H, d, J=8.1Hz), 7.57-7.62 (1H, m)s 8.17-8.19 (lH,m)。 ’ [參考例1之其他方法2]3_(3_(4_(ff比啶_2•基氧基甲基）节 基）異呤唑-5·基）吡啶_2·基胺 [化 43]

於〇°C下，向製造例丨-4-2所記載之（3_(3_(4·((β比咬_2_基 137275.doc -44- 200934788 基）醯亞胺二碳酸二_

°c以下向反應溶液中加入飽和碳酸氫鈉溶液，用乙酸乙酯 進行萃取，繼而以NH-矽膠管柱層析法（庚烷：乙 = 氧基）甲基）苄基）異崎》坐-5-基）》比咬_2 第三丁酯（11 液中加入三 ’向所得殘渣中添加第 獲得標記化合物（7.29 =1 : 1)進行純化。將溶劑減壓濃縮， 三丁基甲基醚並過濾取出固體，名 g)。 iH-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4 〇4 (2H，s)， 5.32 (2H, s), 6.26 (2H, brs), 6.69 (1H, dd, J=4.85 8.0Hz)! 6·81 (1H，s)，6.83-6.87 (1H，m)，6.97-7.00 (1H, m)，7 33 (2H, d, J=8.0Hz), 7.40 (2H, d, J=8.0HZ), 7.69-7.74 (1H, m), 7.87 (1H, dd, J=2.0, 7.6Hz), 8.08 (1H, dd, J=2.0, 7.6Hz), 8.15-8.17 (1H，m) 〇 起始物質（3-(3-(4-((吡啶-2-基氧基）甲基）苄基）異嘮嗤 基）》比啶-2-基）醯亞胺二碳酸二第三丁酯係利用以下方法 來合成。 [製造例1 -4-1 ](3-乙炔基吡啶-2-基）醯亞胺二碳酸二_第三 丁酯 [化 44]

將國際公開第07/052615號公報之製造例1-2-3所記栽之 137275.doc -45- 200934788 3-乙炔基吡啶-2-基胺（6.34 g)、二碳酸二_第三丁酯（58.5 g)、二乙胺（27.1 g)、4-二甲基胺基吡啶（655 mg)、及四氡 呋喃（254 mL)於室溫下攪拌18小時。向反應溶液中加入矽 膠並將溶劑減壓濃縮。以矽膠層析法（庚烷：乙酸乙醋 =3: 1)對所得矽膠進行純化，獲得作為白色固體之標記^ 合物（15 g)。 ^-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ： 1.32 (18H, s), 4.59 (1H, s), 7.39-7.44 (1H, m), 7.99-8.03 (1H, m), 8.46-O 8.48 (1H，’ [製造例1·4-2](3-(3-(4-((»比啶-2-基氧基）甲基）苄基）異哼 唑-5-基）吡啶_2-基）醯亞胺二碳酸二-第三丁酯 [化 45]

於室溫攪拌下，向製造例1-4-1所記載之（3-乙炔基吡啶· 2-基）醯亞胺二碳酸二_第三丁酯（12 g)、製造例丨-丨、所記 載之2-(4-(2-硝基乙基）苄基氧基）吼啶（19 4 g)、4二甲基 胺基吡啶（230 mg)、四氫呋喃（2〇〇 mL)的溶液中分4次用8 小時添加二碳酸二-第三丁酯（28.8 g) ^加入結束後，於室 溫下進步攪拌22小時。向反應溶液中加入矽膠並將溶劑 減壓濃縮。以矽膠層析法（庚烷：乙酸乙酯=3 : 1繼而為 2 : 1)對所得矽膠進行純化，獲得含有標記化合物之油狀 137275.doc -46- 200934788 物（1 2.8 g ’含有約70%之目標物）。 製造例1-4-2之比啶·2·基氧基）甲基）苄基）異哼 唑-5-基）吡啶-2-基）醯亞胺二碳酸二-第三丁酯亦可利用下 述之其他方法1或2來合成。 [製造例1-5-1](3_(3_(4_((β比啶-2-基氧基）甲基）苄基）異噚 嗤-5-基）吡啶-2-基）醯亞胺二碳酸二-第三丁酯（製造例1·4·2 之其他方法1) [化 46]

於5〇°C於攪拌下，向製造例i-4-l所記載之（3-乙炔基吡 啶-2-基）醯亞胺二碳酸二·第三丁酯（2·〇 g)、製造例1;1_4所 記載之2-(4-(2-确基乙基）节基氧基）吼啶（2·44 g)、三乙胺 (0.080 μ!〇、四氫呋喃（2〇 mL)的溶液中分4次用5 5小時加

入異氰酸苯酯（2.8 mL)。加入結束後，於5〇°c下進一步擾 拌2小時。向反應溶液中加入NH_矽膠並將溶劑減壓濃縮。 以NH-矽膠層析法（庚烷：乙酸乙醋=3 :丨）對所得nh_矽膠 進行純化。將所得溶液減壓濃縮，以矽膠層析法（庚烷： 乙酸乙醋I !繼而為2 : υ進行純化，獲得作為油狀物之 標記化合物（2.2 g)。 1-18 (18H, s), '6.86 (1H, m), 7.40 (2H, d, 137275.doc -47· 1 H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm)； 4.07 (2Η, s), 5.32 (2H, s), 6.58 (1H, s), 6.83 2 6.96-7.01 (1H, m), 7.29 (2H, d, J=8.〇Hz), 200934788 J=8.0Hz), 7.58 (1H, dd, J=4.8, 7.6Hz), 7.69-7.74 (1H, m), 8.15-8.18 (1H, m), 8.34 (1H, dd, J=2.0, 7.6Hz), 8.59(1H, dd, J=2.0, 5.2Hz)。 [製造例1-6-1](3-(3-(4-((»比啶-2-基氧基）甲基）苄基）異噚 唑-5-基）吡啶_2_基）醯亞胺二碳酸二-第三丁酯（製造例1-4-2 之其他方法2) [化 47]

將製造例1-6-2所記載之4·亞曱基_2_氧雜-4H- °比啶幷 [2,3-«!][1，3]11号_-1-甲酸第三丁酯（1.48§)、製造例1_1_4所 記載之2-(4-(2-硝基乙基）苄基氧基”比啶（2.9 g)、二碳酸 二-第三丁酯（6.14 g)、4-二甲基胺基吡啶（68 6 mg)、及四 氫咬喃（50 mL)於室溫下授拌2小時。向反應溶液中加入石夕 膠並將溶劑減壓濃縮。以矽膠層析法（庚烷：乙酸乙酯 =3 : 1，隨後為1 : 1繼而為1 : 2)對所得矽膠進行純化，獲 得作為油狀物之標記化合物（2· 1 g)。 h-NMR Spe_m (DMSO-d6) s (ppm):】18 (i8H，s)， 4.07 (2H, s), 5.32 (2H, s), 6.58 (ih, s), 6.83-6.86 (1H, m), 6.96-7.01 (1H, m), 7.29 (2H, d, J=8.〇Hz), 7.40 (2H, d, J=8.0Hz), 7.58 (1H, dd, J=4.8, 7.6Hz)9 7.69-7.74 (1H, m), 8.15-8.18 (1H, m), 8.34 (1H, dd, J=2.0, 7.6Hz), 8.59 (1H, dd, J=2,0, 5.2Hz)。 137275.doc -48- 200934788 起始物質4-亞甲基_2_氧雜_4Η_η比啶幷[2,3-d][l，3]噚啡-1-曱酸第三丁酯係利用以下方法來合成。 [製造例1-6-2] 4-亞甲基_2_氧雜_4H_吡啶幷[2,3-d][l，3]哼 畊-1-甲酸第三丁酯 [化 48]

將1-(2-胺基吡啶-3-基）乙酮（990 mg)、二碳酸二-第三丁 酉曰（7.92 g)、4-二甲基胺基0比咬（88.8 mg)、三乙胺（4.95 mL)、及四氫呋喃（165 ml)於室溫下攪拌24小時。向反應 溶液中加入矽膠並將溶劑減壓濃縮。以矽膠層析法（庚 烧：乙酸乙酯=2 : 1)對所得矽膠進行純化，獲得作為油狀 物之標記化合物（1.48 g)。 !H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 1.56 (9Η, s), 5.01 (1H, d, J=3.6Hz), 5.45 (1H, d, J=3.6Hz), 7.28 (1H, dd, J-4.8, 8.0Hz), 8.25 (1H, dd, J=1.6, 8.0Hz), 8.36 (1H, dd, J = 1.6, 4.8Hz) 〇 [參考例1之其他方法3]3-(3-(4-(»比啶-2-基氧基甲基）苄 基）異嘮唑-5-基）吡啶-2-基胺 [化 49]

於氮氣環境下，將製造例1-8-2所記载之2-(4-(5-峨·異吟 137275.doc -49· 200934788 唑-3-基甲基）苄基氧基）吡啶（200 mg)、製造例1-7-2所記載 之2-N-丁氧基幾基-3-*1比咬领酸（134 mg)、碳酸納（82 mg)、 四（三苯基膦）銘（59 mg)、1,2-二曱氧基乙烷（6 mL)及水（1 mL)的混合物於80 °C下攪拌2小時。將該混合物冷卻至室 溫，加入乙酸乙酯及水。將其有機層加以分離，用水及飽 和食鹽水進行清洗’以無水硫酸鎂乾燥後，進行過濾。使 其濾液吸附於矽膠後，以矽膠管柱層析法（庚烷：乙酸乙 酯=4 : 1〜1 : 1〜乙酸乙酯）進行純化，獲得標記化合物 © (116 mg) ° 起始物質2_N- 丁氧基幾基-3-"比咬蝴酸係利用以下方法來 合成。 [製造例1-7_1]吡啶-2-基-胺基甲酸第三丁酯 [化 50]

向第二丁醇（650 mL)與一碳酸二-第三丁酿（24 g)的溶液 φ 中緩慢加入2·胺基吡啶（9_4 g)。將其混合物於室溫下攪拌 24小時。將該反應溶液減壓濃縮，以矽膠管柱層析法（庚 烷：乙酸乙酯=1 : 1)對其殘渣進行純化，獲得標記化合物 (18 g)。 iH-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ·· 1.47 (9H，S)， 6.99-7.03 (1Η，m)，7.70-7.74 (1Η，m)，7.77-7.80 (1Η, m), 8.23-8.24 (1H，m)，9.72 (1H，brs)。 [製造例l-7-2]2-N-丁氧基幾基比咬蝴酸 137275.doc -50. 200934788 [化 51]

將製造例1-7-1所記載之吡啶_2_基_胺基甲酸第三丁酯（16 g)與N，N，N’，N’-四甲基乙二胺（25 g)的四氫呋喃溶液（4〇〇 mL)冷卻至-70°C ’用1小時滴加正丁基鋰（78 mL，2.64 Μ 庚烧溶液），授拌1 0分鐘。將此混合物自_丨〇艽升溫至_6 C ’於該溫度下授拌2小時。再次將此溶液冷卻至_7〇。〇， 〇 用1小時滴加棚酸三異丁酯（58 g)。將此混合物升溫至〇°c 後，加入飽和氣化銨水溶液。向所生成的黃色固體中加入 鍵’擾拌後過滤取出固體，用醚及水進行清洗。將該固體 於減壓下乾燥’獲得標記化合物（14g)。 H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 1.32-1.41 (9Η, m), 6.80-6.84 (1H, m), 7.95-8.13 (2H, m)= 參考例1之其他方法3中的起始物質2-(4-(5-蜗-異p号》坐-3-基曱基）苄基氧基）"比啶係利用以下方法來合成。 〇 [製造例^8-112-(4-(5-三-正丁基錫烷基-異咩唑_3_基甲 基）苄基氧基）吼啶 [化 52]

向三正丁基乙炔基錫（3 g)、製造例1-1·4所記載之2·(4_ (2-硝基乙基）苄基氧基）„比啶（49 g)以及4-二甲基胺基0比啶 (116 mg)的四氫呋喃溶液（90 mL)中加入二碳酸二-第三丁 137275.doc -51- 200934788 酯（7.3 g)的四氫呋喃溶液（3〇 mL) ’於室溫下攪拌i5小時。 向此混合物中加入乙酸乙醋及水。將其有機層分離，用水 及飽和食鹽水進行清洗，以無水硫酸鎂乾燥後，進行過 濾。使其濾液吸附於矽膠後，以矽膠管柱層析法（庚烷： 乙酸乙酯=4 : ”進行純化，獲得標記化合物（5.3 g) ^ ^-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ： 0.81-0.85 (9Η, m), 1.08-1.12 (6H, m), 1.23-1.30 (6H, m), 1.46-1.54 (6H, m), 4.00 (2H, s), 5.30 (2H, s), 6.40 (1H, s), 6.83-6.86 (1H, © m), 6.97-7.00 (lH, m), 7.25-7.26 (2H, m), 7.36-7.38 (2H, m)，7.69-7.74 (1H, m)，8.15-8.17 (1H，m)。 [製造例l-8-2]2-(4-(5-碘-異噚唑-3-基甲基）苄基氧基） 0比。定 [化 53]

於〇°C下’向製造例1-8-1所記載之2-(4-(5·三正丁基錫烧 φ 基-異号唑-3-基甲基）苄基氧基）吡咬（5.1 g)的四氫呋喝溶液 (15 mL)中加入碘（2.5 g)。將此混合物於該溫度下授拌2〇分 鐘。向該混合物中加入10°/〇硫代硫酸納水溶液及乙酸乙 酯。分離出其有機層’用飽和食鹽水進行清洗，以無水硫 酸鎮乾燥後，進行過濾。將其慮液濃縮，以石夕膠管柱層析 法（庚烷··乙酸乙酯=i〇: 1〜4: 1)對其殘渣進行純化，獲 得標記化合物（2.4 g)。 !H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ： 3.99 (2Η, s), 137275.doc -52- 200934788 5.31 (2H，s)，6·66 (1H，s)，6.84-6.87 (1H, m)，6.97-7.00 (1H，m)，7.26 (2H，d，J=8Hz)，7.39 (2H，d，J=8Hz)，7.7〇· 7·74 (1H，m)，8.16-8.17 (1H，m)。 以下’說明參考例1所記載之3-(3-(4_(吡啶-2-基氧基甲 基）苄基）異呤唑_5·基）吡啶_2_基胺之製造例之其他方法。 [參考例2] (3_乙醯基》比啶-2-基）胺基甲酸第三丁酯之合成 [化 54]

於氮氣環境下，將1-(2-胺基吡咬_3·基）乙酮（5〇 g，368 mmol) 一 碳酸二-第三丁 _ (120 g，552 mmol)及第三丁醇 (200 mL)的混合物於90°C下攪拌3小時。冷卻後，於減壓 下將溶劑蒸餾除去，向殘渣中加入正庚烷（5〇〇 mL)，過濾 取出析出的固體，獲得作為黃色固體之標記化合物（77 g)。 ^-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) ： 1.54 (9Η, s), 2.64 ® (3H, s), 7.03 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.16 (1H, dd, J=2.0, 8.〇Hz)，8.63 (1H，dd，J=2.0, 4.8Hz), 10.82 (1H，brs)。 [參考例3] 5-(2-胺基吡啶基）異噚唑_3•甲酸乙酯之合成 [化 55]

於氮氣環境下於室溫下，向（3_乙醯基吡啶_2_基）胺基甲 酸第二丁酯（600 mg，2.29 mmol)、草酸二乙酯（669 mg， 137275.doc -53- 200934788 4.58 mmol)的曱苯（5.0 mL)溶液中加入第三丁氧基鉀（514 mg，4.58 mmol)，攪拌2小時。加入曱苯（5.0 mL)並攪拌1 小時後，添加第三丁氧基鉀（257 mg，2.29 mmol)，攪拌 2 小時。向反應混合液中加入鹽酸羥胺（477 mg，6.87 mmol) 及乙醇（10 mL)並攪拌1小時後，加入水（i.o mL)，於室溫 下整夜攪拌。加入水（3 0 mL)，用乙酸乙酯進行萃取。用 飽和食鹽水清洗有機層’以無水硫酸鎂乾燥後進行濃縮。 將濃縮殘渣溶解於N，N-二曱基甲醯胺（5 mL)中，加入三乙 © 胺（192 mg)，於80°C下攪拌6小時。冷卻後加入水，用乙 酸乙酯進行萃取。用飽和食鹽水進行清洗有機層，以無水 硫酸鎂乾燥後’於減壓下將溶劑蒸餾除去，獲得作為白色 固體之標記化合物（443 mg)。 !H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 1.45 (3Η, t, J=7.2Hz), 4.49 (2H, q, J=7.2Hz), 5.40 (2H, brs), 6.79 (1H, dd, J=5.2, 7.6Hz), 6.91 (1H, s), 7.81 (1H, dd, J=2.〇, 7.6Hz), 8.21 (1H，dd, J=2.0, 5·2Ηζ)。 [參考例4][5-(2-胺基吡啶-3-基）異噚唑-3-基]曱醇之合成 [化 56]

於氮氣環境下於0°C下，向5-(2-胺基吡啶-3-基）異噚唑_ 3-甲酸乙酯（381 mg，1.63 mmol)之四氫呋喃（3.8 mL)與乙 醇（3.8 mL)之懸濁液中加入硼氫化鈉（201 mg，4.89 mmol) ’於〇°C下授拌1小時，於2〇它下挽拌2i小時。於冰 -54· 137275.doc 200934788 水浴冷卻下向反應混合液中滴加2 N鹽酸（2 46 mL，4 89 mmol)，於0C下攪拌i〇分鐘，於室溫下攪拌3〇分鐘。於冰 水浴冷卻下滴加5%碳酸氫鈉水溶液調整為鹼性後，用乙 酸乙酯進行萃取》以無水硫酸鎂對有機層進行乾燥後，於 減壓下將溶劑蒸餾除去。使殘渣懸浮於四氫呋喃（14 mL) 中，於o°c下加入硼氫化鈉（67 mg，i 63 mm〇1)，以甲醇 (1.4 mL)洗入。於室溫下攪拌！小時後，於6〇β(：下攪拌5小 時。於冰水浴冷卻下，向反應混合液中滴加1 Ν鹽酸（1.63 ◎ mL，1.63 mmol)，於(TC下攪拌1〇分鐘，於室溫下攪拌3〇 分鐘。於冰水浴冷卻下滴加丨N氫氧化鈉水溶液調整為鹼 性後，用乙酸乙酯進行萃取。以無水硫酸鎂對有機層進行 乾燥後，於減壓下將溶劑蒸餾除去，獲得作為淡黃色固體 之標記化合物（258 mg)。 •H.NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ： 4.56 (2Η, d, J=5.6Hz), 5.54 (1H, t, J=5.6Hz), 6.27 (2H, brs), 6.72 (1H, ❹机 J=4.8, 7.6Hz)，6 9〇 (m，s)，7 9〇 (ih，仳卜2 〇, 7.6Hz)，8·10(1Η，dd，J=2.0, 4.8Hz)。 ’ 參考例5〜10係參考例3及4之其他途徑合成法。 [參考例5]Ν·(3·乙醯基吡啶·2-基）_2,2_二甲基丙醯胺之 合成 [化 57]

於室溫下，向1-(2-胺基" 137275.doc 200934788 mmol)、4-二曱基胺基吨唆（24 mg，0.2 mmol)、-， ’ 二乙胺 (0·64 mL，4_6 mmol)、及曱苯（2 mL)的混合物中滴加特戊 醯氣（pivaloyl chloride)(0,52 mL，4.2 mmol)，於室溫下授 拌1小時’於60 °C下攪拌5小時。在確認2-第三丁基_4甲 基-4Η-»比啶幷[2,3-d][l，3]噚畊-4-基特戊酸酯生成後，向反 應混合物中加入水（2 mL)及5 N鹽酸（0_8 mL)，於室溫下授 拌30分鐘。將反應混合物進行分液’向水層中加入5 n氫 氧化鈉水溶液（1 mL)，用甲苯進行萃取。於減壓下將溶劑 © 蒸餾除去，過濾中途析出的固體成分，獲得標記化合物 (415 mg)。 iH-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 1.33 (9H，s)，2.64 (3H, s), 7.10 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.17 (1H, dd, J=2.〇, 7.6Hz)，8,64 (1H, dd，J=2.0, 4.8Hz)。 * 2-第三丁基_4·曱基_4H_吡啶幷卩义^^”呤畊-‘基特 戊酸酯 ❹ 'H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 1.09 (9Η, s), 1·32 (9H, S), 2.05 (3H, s), 7.14 (1H, dd, J=4.8, 7.6Hz), 7.71 (lH, dd，J=2.〇, 7.6Hz)，8.51 (1H，dd，J=2.0, 4.8Hz)。 參考例6〜7係參考例5之其他途徑合成法。 [參考例6]2-第三丁基_411_吡啶幷[2,3-d][l,3]哼畊-4-酮之 合成 [化 58]

137275.doc -56- 200934788 於〇C下’向2 -胺基终驗酸（13.8 g，100 mmol)、4 -二曱 基胺基吡啶（1.2 g ’ 10 mmol)、三乙胺（55.8 mL，400 mmol)、及N-甲基°比洛咬酮（140 mL，42 mmol)的混合物中 滴加特戊醢氣（24.1 g ’ 200 mmol)，滴加結束後於室溫下 整夜授拌。向反應混合物中加入水，用甲苯進行萃取，用 水及飽和食鹽水清洗有機層以無水硫酸鎂進行乾燥，過 渡後’於減壓下將溶劑蒸餾除去。向殘渣中加入正庚烷， 於〇 °C下進行懸浮攪拌後，進行過濾，獲得標記化合物 ❹（16.6 g)。 'H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 1.45 (9Η, s), 7·48(1Η, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.52 (1H, dd, J=2.0, 7.6Hz), 8.97 (1H，dd，J=2.0, 4.8Hz)。 [參考例7]N-(3-乙醯基吡啶_2-基）-2,2-二甲基丙醯胺之 合成 [化 59]

於_78。(：下，向2_第三丁基-4H-吡啶幷[2,3-d][l，3]唠啩. 4-鲷（10.2 g，50 mmol)及四氫呋喃（5〇 mL)的混合物中滴加 >臭化曱基鎂（0.97 Μ四氫呋喃溶液，10〇 mL，97 mmol), 滴加結束後於-78°C下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入 飽和氣化銨水溶液及水’用乙酸乙酯進行萃取，用氣化銨 水溶液清洗有機層。於減壓下將溶劑蒸餾除去，過濾中途 析出的固體成分，獲得標記化合物（9.丨g)。 137275.d〇c -57· 200934788 ^-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 1.33 (9H, s), 2.64 (3H, s), 7.10 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.17 (1H, dd, J=2.0, 7.6Hz), 8.64 (1H，dd，J=2.0, 4.8Hz) » [參考例8]5-{2-[(2,2-二曱基丙醯基）胺基p比啶-3-基}異 崎唑-3-曱酸乙酯之合成 [化 60]

❹ 於-25°C下，向N-(3-乙醯基吡啶-2-基）-2,2-二甲基丙醯 胺（8.08 g，36.7 mmol)、草酸二乙酯（1〇.〇 mL，73.4 mmol)、及乙醇（36 mL)的混合物中加入第三丁氧基鉀（8 23 g，73.4 mmol)，於-25°C下攪拌1小時。向反應混合物中加 入水（72 mL)並於室溫下攪拌後，加入甲苯（36 mL)而進行 分層，進而用甲苯（36 mL)對所得水層進行清洗。加入5 n 鹽酸（14 mL)及鹽酸羥胺（5.10 g’ 73.4 mmol)，於室溫下授 〇 拌3 0分鐘。向反應混合物中加入5 N氫氧化納水溶液（14 mL) ’用甲苯進行萃取後，於減壓下將溶劑蒸餾除去。向 所得殘渣中加入乙醇（35 mL)及三乙胺（5 mL)，於80。(：至85 °C下搜拌6小時。向反應混合物中加入正庚烧（丨〇5 mL)， 將析出的固體進行過濾，獲得標記化合物（6.9〇 β !H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ： 1.19 (9H, s)5 1.32 (3H, t), 4.37 (4H, q), 7.12 (1H, s), 7.46 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.25 (1H, dd, J=2.0, 8.0Hz), 8.58 (1H, dd, J=2.0, 137275.doc • 58 - 200934788 4.8Hz)，ι〇,〇3 (1Η，s)。 [參考例9]N-{3-[3-(羥基甲基）異哼唑-5-基]吡啶-2-基}-2，2_二甲基丙酿胺之合成 [化 61]

Ο ❹ 於室溫下，向5-{2-[(2,2-二甲基丙醯基）胺基]吡啶-3-基} 異B号唑-3-甲酸乙酯（111 g，350 mmol)、乙醇（110 mL)、及 四氫咬0南（3 5 0 mL)的混合物中加入棚氮化納（13.2 g，350 mmol) ’於室溫下搅拌6小時。向反應混合物中加入水（350 mL)及5 N鹽酸（90 mL)，於室溫下攪拌30分鐘後，加入5 N 氫氧化鈉水溶液（110 mL)，用乙酸乙酯與四氫吱喃的混合 液進行萃取，用水及飽和食鹽水清洗有機層。於減壓下將 溶劑蒸餾除去，獲得作為黃色固體之混入有一部分的[5-(2-胺基吡啶-3-基）異呤唑-3-基]甲醇之標記化合物（83.8 g)。 ^-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 1.20 (9Η, s), 4.52 (2H, d, J=6.0Hz), 5.53 (1H, t, J=6.0Hz), 6.70 (1H, s), 7.44 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.19 (1H, dd, J=5.6, 7.6Hz), 8.53 (1H，dd，J=2.0, 4.8Hz)，9·89 (1H, brs)。 [參考例l〇][5-(2-胺基吡啶-3-基）異噚唑-3-基]甲醇之合成 [化 62]

137275.doc •59- 200934788 於室溫下’向參考例9中獲得之N-{3-[3-(經基甲基）異吟 "坐-5-基]»比咬-2-基}-2,2-二甲基丙酿胺（82.8 g)及曱醇（35〇 mL)的混合物中加入5 N氫氧化鈉水溶液（35〇 mL)，於57〜 6〇°C下攪拌14小時❶向反應混合物中加入乙酸（1〇〇 mL)， 將析出的固體進行過濾，獲得作為灰白色固體之標記化合 物（42.2 g) 〇 ^-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4.54 (2H, s) 5.57 (1H, brs), 6.25 (2H, brs), 6.71 (1H, dd, 1=4.8, 8.0Hz) ® 6.90 (lH,s), 7.90 (1H, dd, J=1.6, 7.6Hz), 8.09(1H, dd, J=1.6, 4.8Hz)。 參考例11〜13係參考例5〜10之其他途徑合成法。 [參考例11]Ν-(3-乙醯基吡啶-2-基）-2,2-二甲基丙醯胺之 合成 [化 63]

❹ 向1500 L反應罐中加入1-(2-胺基吡啶-3-基）乙酮（40.0 kg ’ 294 mol)後，用甲苯（約15 kg)洗入。繼而，加入甲苯 以使甲笨的總量達到347 kg後’加入特戊醯氣（53.1 kg， 1.5 M/M)。於内溫30 °C以下滴加三乙胺（23.8 kg ’ 0·8Μ/Μ) ’於内溫2〇〜30°C下攪拌1小時以上。再次於内溫 30 C以下滴加三乙胺（23.8 kg，0.8 M/M)後，於内溫20〜 3〇°C下攪拌2小時，以HPLC確認反應結束。 於鹽水冷卻下，於内溫30。(：以下滴加水（100 L)，繼而於 137275.doc -60- 200934788 内溫3(TC以下滴加35%鹽酸（49 〇 kg’ 16M/M)。將反應溶 液攪拌5分鐘後’靜置15分鐘以上，將下層⑷分離取出至 聚合物容器中。加入水（100 L)並攪拌5分鐘後，靜置15分 鐘以上。將下層（c)分離取出至聚合物容器中，分離取出上 層（d)後，將下層（a)及下層返回至15〇〇 [反應罐中。於 鹽水冷卻下加入乙酸乙酯（289 kg)，繼而於内溫3(rc以下 滴加48.7%氫氧化鈉水溶液（43.4]<：§，18]^/^1)，攪拌5分鐘 後，以UNIV(Universa卜通用）試紙確認下層的pH值為8〜 © 9。靜置b分鐘以上後，分別分離取出下層（e)、上層（f)， 將下層（e)返回至1500 L反應罐中。加入乙酸乙酯（144 kg)，攪拌5分鐘後，靜置15分鐘以上，分別分離取出下層 (g)、上層（h)。將下層（g)返回至15〇〇 L反應罐中，加入乙 酸乙酯（144 kg)並攪拌5分鐘後，靜置15分鐘以上。取出下 層（I)後，將上層（f)及上層（h)返回至1500 L反應罐中，用 乙酸乙酯（約15 kg)洗入。 ©對返回至1500 L·反應罐中的有機層進行減壓濃縮（溫水 5〇°C )，在濃縮液達到約200 L時暫時結束濃縮。將濃縮液 取出至SUS(Stainless steel，不錄鋼）容器中，將罐内以甲 苯（17 kg)洗出。將取出之濃縮液的約一半量加入至300 L 反應罐中，用甲苯（9 kg)洗入。進而對濃縮液進行減壓濃 縮（溫水50°C )，當來自冷凝器的餾出量減少時將剩餘的濃 縮液加入至300 L反應罐中，用甲苯（9 kg)洗入。再次開始 減壓濃縮（溫水50°C〜70°C )。在餾出幾乎消失時開始水冷 卻，於内溫50°C以下加入甲苯（52 kg)。再次開始減壓濃縮 137275.doc -61 - 200934788 (溫水50〜80°C)。於在外溫肋^；、減壓度為_〇 〇9〇 Mpa以 上的條件下未看見餾出之時點結束濃縮，於内溫2〇〜3〇〇c 下加入乙醇（61 kg)。 於乳氣環境下，將罐内的乙醇溶液取出至sus容器中， 用乙醇（13 kg)沖洗。將取出的溶液加入至丨5〇〇 [反應罐中 後，用乙醇（13 kg)洗入，獲得標記化合物之乙醇溶液（含 有69.4 kg之目標物，產率：ι〇7.3%)。 HPLC條件管柱：YMC-Pack Pro C 18(5 μπι，150x4.6 ^ mm I.D.，YMC)，移動相：乙腈/水/乙酸銨=3〇〇/7〇〇/1〜 900/100/l(v/v/w)。 [參考例12]5-{2-[(2,2-二甲基丙酿基）胺基]n比淀_3_基}異 噚唑-3-甲酸乙酯之合成 [化 64]

於氮氣流下’向1500 L反應罐中之Ν-(3-乙醯基吡啶_2-基）-2,2-二甲基丙醯胺之乙醇溶液（將前製程之產率假定為 100°/。，294 111〇1)中加入草酸二乙酯（64.4 1^，1.51^/]\4)。開 始鹽水循環，於内溫l〇°C以下滴加預先冷卻的22%第三丁 氧基鉀乙醇溶液（212·5kg，l·45M/M)。於内溫-5〜10。C下 授拌30分鐘以上後，以hplc確認反應結束。 繼而，於内溫10。〇以下加入鹽酸羥胺（40.8 kg，2.0 M/M) ’於内溫丨〇°c以下攪拌1小時以上。繼而，一面注意 137275.doc -62- 200934788 發熱一面於内溫20°C以下滴加預先製備並冷卻的含水乙醇 (乙醇（15.3 kg)/水（5.2 kg))，於内溫3(TC以下滴加水（582 L)。轉換成溫水（28°C )循環，於内溫20〜30。(：下加入4-{2-[(2,2-二甲基丙醯基）胺基]吡啶_3_基}_2-(羥基亞胺基）_4-氧 雜丁酸乙酯（約10 g)。目視確認固體析出後，於内溫15〜 25 C下整夜授拌。以HPLC瑞認反應結束後，於内溫1〇〜 25°C下滴加48.7°/。氫氧化鈉水溶液直至溶液pH值達到6.50 〜7.00(使用18.1 kg)。於内溫10〜20°C下攪拌3小時以上 後，分6次利用離心分離機進行固液分離。每次離心時， 用預先製備的含水乙醇（乙醇（2·4 kg)/水（12 kg)清洗濾餅· 後’用水（約200 L)清洗直至洗液的顏色變為無色透明。進 而’進行30分鐘以上離心分離後，將濕固體取出至聚合物 袋中。繼而，利用棚式乾燥機於45〜50°C的溫水循環下進 行減壓乾燥，獲得固體（71.52 kg)。 接著，向1500 L反應罐中加入上述所得固體（71·45 kg)， 用乙醇（約7 kg)洗入。繼而，加入乙醇以使總量達到226 kg，再加入三乙胺（21.6 kg，1M/M)。開始溫水（75°C )循 環，於内溫70〜75°C下攪拌14〜16小時，以HPLC確認反 應結束。繼而，於内溫55 °C〜75 °C下滴加正庚烧（488.7 kg)。其後，於内溫5(TC〜53°C下加入5-(2-[(2,2-二甲基丙 醯基）胺基]吡啶-3-基）異崎唑-3-甲酸乙酯（約5 g)，於内溫 45〜50°C目視確認固體析出。繼而’讓溫水的溫度缓慢下 降，冷卻至内溫15 °C以下後，進而利用鹽水或冷水冷卻於 内溫0〜10。(：下整夜攪拌。利用過濾機將懸濁液進行過 137275.doc -63- 200934788 濾，用正庚烷/乙醇混合溶液（正庚烧（7〇 kg)/乙醇（1〇 kg)) 繼而用正庚烷（8〇 kg)清洗❶以氮氣進行15分鐘以上之乾燥 後，將濕固體取出至SUS容器中《以棚式乾燥機於45〜50 C的溫水循環下對濕固體進行減壓乾燥，獲得標記化合物 (54.55 kg，產率：58.6%)。 H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 1.19 (9H, s), 1.32 (3H, t), 4.37 (4H, q), 7.12 (1H, s), 7.46 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.25 (1H, dd, J=2.0, 8.0Hz), 8.58 (1H, dd, J=2.0, © 4.8Hz), 10.03 (1H, s)。 HPLC條件 管枉：YMC-Pack Pro C18(5 μη，150χ4·6 mml.D. ’ YMC)，移動相：乙腈/水/乙酸錢=3〇0/7〇on〜 900/100/l(v/v/w)。 [參考例13][5·(2-胺基吡啶-3-基）異哼唑-3-基]甲醇之合成 [化 65]

於氮氣流下，向1500 L反應罐中加入5-{2-[(2,2-二曱基 丙醯基）胺基]吼啶-3-基丨異11号唑-3-甲酸乙酯（54.5 kg，172 mol)，用甲醇（4.9 kg)洗入。繼而’加入甲醇以使曱醇的總 量達到108 kg，再連續加入三乙胺（8.7 kg，0.5 M/M)。開 始溫水（60。〇循環後，於内溫5〇〜60°C下攪拌2小時以上， 以HPLC(條件1)確認反應結束。 繼而，開始水冷卻，於内溫以下加入四氫η夫脅（121 kg)。轉換成鹽水冷卻，於氮氣流下於内溫0〜下用5 137275.doc -64 - 200934788 小時以上分批添加硼氫化鈉（7.15 kg，1.1 M/M)。硼氫化鈉 的添加結束後，將水套轉換成冷水（4.〇°C )循環，於内溫0 〜10°C下整夜授拌。次日，於内溫〇〜1 〇。〇下用1小時以上 分批添加硼氫化鈉（1.30 kg，0.2M/M)。將水套轉換成冷 水’用3小時以上將内溫升溫至20〜30°C，進而在此狀態 下於内溫20〜30°C下整夜攪拌。次日，以HPLC確認反應 的進行狀況，因反應幾乎不進行，故再次冷卻，於内溫〇 〜l〇°C下分批加入硼氫化鈉（1·3〇 kg，0.2 M/M)。於内溫0 〜10°C下攪拌1小時以上後’將水套轉換成冷水循環，用2 小時以上將内溫升溫至15〜25t。攪拌1小時以上後，以 HPLC(條件1)確認反應結束，整夜攪拌。 次日，於内溫50。(：以下滴加48.7%氫氧化鈉水溶液（71 kg ’ 5 M/M)後，接著於内溫5〇°c以下滴加水（133 L)。開始 溫水（50〜80〇C)循環，於内溫50〜60°C下攪拌20小時以上 後’以HPLC(條件2)確認反應結束。 繼而’於水冷卻下滴加水（73 L)，轉換成冷水（15。〇冷 卻’於内溫15〜30。(：下加入[5-(2-胺基吡啶-3-基）異噚唑-3-基]甲醇’確認固體析出後，滴加水（21 8 L)，繼而於鹽 水冷卻下，於内溫15〜30。(：下滴加35%鹽酸（115 kg)，用 水（3 L)洗入。於内溫15〜3〇〇c下攪拌5分鐘以上後，以pH 計確認反應溶液的pH值為4.00〜5.00，於内溫15〜30°C下 擾拌1小時以上。接著，滴加4 8.7 %氫氧化納水溶液直至溶 液的pH值達到7_00〜8.00(使用17.1 kg)，整夜靜置。次 曰’開始攪拌及減壓，在確認來自冷凝器的館出後，開始 137275.doc -65- 200934788 溫水（40°C )循環。於溫水（35〜45°C )、減壓度68 cmHg以 上、内溫30°C以上之條件下，進行1小時以上之濃縮。利 用氮氣解除減壓狀態，用水（約20 L)將附著於罐壁上的固 體洗入。於内溫15〜301下攪拌3小時以上，整夜靜置。 次日’確&€、内溫在15〜25C的範圍内，分2次以離心分離 機對漿液進行固液分離。每次離心時，用水（約200 L)清 洗，脫液後進行1小時離心分離，然後將濕固體取出至聚 合物袋中。繼而’以棚式乾燥機於45〜50。(：的溫水循環下 ® 進行減壓乾燥，獲得標記化合物（26.57 kg，產率： 80.9%) ° !H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4.54 (2Η, s), 5.57 (1H, brs), 6.25 (2H, brs), 6.71 (1HS dd, J=4.8, 8.0 Hz), 6.90 (1H, s), 7.90 (1H, dd, J=1.6, 7.6 Hz), 8.09 (1H, dd, J=1.6, 4.8 Hz)。 HPLC條件 1 管柱：YMC-Pack Pro C18(5 μιη，150x4.6 mml.D·，YMC)，移動相：乙腈/水/乙酸敍=300/700/1〜 〇 900/100/l(v/v/w” HPLC條件 2 管柱：YMC-Pack ODS-AQ(5 μιη，150x 4.6 mml.D.，YMC)，移動相：乙腈/水/85%磷酸/1-辛烷磺 酸鈉=161.3/83 8.7/1/1.1 〜900/100/1/1.1 (v/v/v/w)。 參考例14〜15係參考例1 〇之其他途徑合成法。 [參考例14][5-(2-胺基吡啶-3-基）異哼唑-3-基]曱醇草酸 鹽之合成 137275.doc -66- 200934788 [化 66]

於室溫下，向5-{2-[(2,2-二甲基丙醯基）胺基]吡啶_3_基} 異呤唑-3-甲酸乙酯（3.17 g，1〇 mm〇i)、乙醇（3 mL)、及四 氫吱喃（10 mL)的混合物中加入蝴氫化納（〇 38 g，1〇 mm〇1)，於冰浴冷卻下於室溫下整夜攪拌。將反應混合物 分為5等份，向其中一份中加入5 N氫氧化鈉水溶液（2 mL)，於55°C下整夜攪拌。向反應混合物_加入水，用甲 基第三丁醚與四氫呋喃的混合液進行萃取，向有機層中加 入草酸（0.18 g，2 mmol)。將析出的固體進行過濾，獲得 作為白色固體之標記化合物（0.39 g)。 H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ： 4.54 (2H, s) 6’31 (2H, brs)，6.72 (1H, dd，J=4.8, 8·〇Ηζ)，6.89 (1H，s) 7.90 (1H，dd，J-2.0，8.0Hz)，8.09 (1H, dd，J=2.〇，4.8Hz)。 [參考例15][5-(2-胺基吼啶-3-基）異噚唑_3_基]曱醇之合成 [化 67]

Ccf 於室溫下，向[5-(2_胺基"比咬_3·基）異》号唾_3_基]甲醇草 酸鹽（0.39 g)與水（2 mL)的混合物中加入5 N氫氧化納水溶 液（0.5 inL)，將析出的固體進行過濾，獲得作為白色固體 之標記化合物（〇. 18 g)。 H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4 54 (2H s) 137275.doc 200934788

5.57 (1H，brs), 6.25 (2H，brs)，6.71 (1H，dd，J=4.8, 8.0Hz)， 6.90 (1H，s)，7.90 (1H，dd，J=l.6, 7.6Hz)，8.09 (ih，dd，J = 1.6, 4.8Hz)。 [參考例16]3-[3-(氣曱基）異哼唑-5-基]n比咬·2胺之合成 [化 68]

於冰浴冷卻下’向[5-(2-胺基β比咬-3-基）異，号峻_3_基]甲 〇 醇（0.19 g，1 mmo1)、Ν，Ν_二甲基乙酿胺（1 mL)的混合物 中’加入亞硫醯氣（0.15 mL，2 mmol)、苯并三„坐（〇 26 g， 2.2 mmol)及四氫°夫喃（1 mL)的混合物，於室溫下擾掉3〇分 鐘。向反應混合物中加入水及5 N氫氧化鈉水溶液調整為 鹼性後，用乙酸乙酯進行萃取’用飽和食鹽水清洗有機 層。於減壓下將溶劑蒸餾除去’獲得作為淡黃色固體之標 記化合物（0.21 g)。 !H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4.84 (2Η s) ® 6.31 (2H, brs), 6.72 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 7.04 (iHj s)5 7.91 (1H，dd, 7.6Hz)，8.11 (1H，dd, J=1.2，4·8Ηζ)。

[參考例17]{3-[3·(氣甲基）異哼唑-5·基]吡啶_2-基}醯亞 胺二碳酸二-第三丁酯之合成 [化 69] 137275.doc 68· 200934788 於室溫下，向3-[3-(氣甲基）異呤唑-5-基]吡啶-2-胺（420 mg > 2.01 mmol)、4-二甲基胺基吡咬（26.8 mg，0.220 mmol)、四氫〇夫味（2· 1 mL)的混合物中加入二碳酸二-第三 丁酯（924 mg，4.24 mmol)並進行攪拌。25小時後，向反應 液中加入水並用曱苯進行萃取，然後用5%食鹽水清洗有 機層，於減壓下將溶劑蒸德除去，獲得作為淡黃色油狀物 之標記化合物（880 mg)。 ]H-NMR Spectrum (CDCI3) δ (ppm) : 1.33 (18H, s), 4.63 W (2H, s), 6.66 (1H, s), 7.45 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.30 (1H, dd，J=2.0, 8.0Hz), 8.62 (1H，dd，J=2.0, 4.8Hz)。 參考例18〜21係參考例9〜10及參考例16〜17之其他途 徑合成法》 [參考例18]{3-[3-(羥基甲基）異哼唑-5-基]°比啶-2-基}胺 基曱酸第三丁酯之合成 [化 70]

於室溫下，向5-{2-[(；2,2-二甲基丙醯基）胺基]吡啶-3-基} 異嘮唑-3-甲酸乙酯（1.59 g，5 mmol)、二碳酸二-第三丁酯 (1 ·3 1 g，6 mmol)、及四愈^咬嚼（5 mL)的混合物中加入4-二 甲基胺基吡啶（61 mg，0.5 mmol)，於室溫下攪拌1小時 後，於60°C下攪拌6小時。向反應混合物中加入乙醇（2.5 inL)及硼氫化鈉（0.57 g，15 mmol) ’於0°C下攪拌30分鐘 後’於室溫下整夜授拌。向反應混合物中加入水，用乙酸 137275.doc -69- 200934788 乙酯進行萃取，用水及飽和食鹽水清洗有機層。以無水硫 酸鎂乾燥並進行過濾後，於減壓下將溶劑蒸餾除去，獲得 標記化合物（1.60 g)。 ^-NMR Spectrum (CDCI3) δ (ppm) : 1.47 (9H, s), 4.83 (2H, s), 6.63 (1H, s), 7.17 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 7.58 (1H, s), 7.97 (1H, dd, J=2.0, 8.0Hz), 8.51 (1H, dd, J=2.〇, 4.8Hz)。 [參考例19]{3-[3-(氯甲基）異噚唑-5-基]°比啶_2-基}胺基 甲酸第三丁酯之合成 [化 71]

於氮氣環境下，將苯并三唑（3.55 g，29.5 mmol)溶解於 N，N-二甲基乙醯胺（10 mL)中，於冰水冷卻下滴加亞硫醯 氣（2.06 mL，26.8 mmol)，製備亞硫醯氣-苯并三嗤（1 : 1.1) 之N，N-二甲基乙醯胺溶液。 於氮氣環境下，將{3-[3·(羥基甲基）異哼唑-5-基]吡啶-2-基}胺基甲酸第三丁 S旨（781 mg，2.68 mmol)溶解於N，N-二 曱基乙醯胺（2.7 mL)中’於冰水冷卻下滴加上述亞硫醯氣_ 苯并三唑（1 : 1.1)之Ν,Ν-二曱基乙醯胺溶液（6 mL，14.4 mmol) ’於相同溫度下攪拌1小時後，於室溫下授摔。1小 時20分鐘後，於冰水冷卻下滴加亞硫醯氣·苯并三吐（1 : 1.1) iN，N- 一甲基乙酿胺溶液（2.2 mL，5.12 mmol)，於室 溫下攪拌1小時。於冰水冷卻下，向反應液中加入1 N氫氧 I37275.doc -70- 200934788 化鈉水溶液及第三丁基曱基醚調整為鹼性後，進行萃取。 依序用0.5 N氫氧化鈉水溶液、5%食鹽水清洗有機層，以 無水硫酸鎂乾燥後，於減壓下將溶劑蒸餾除去，獲得作為 淡黃色油狀物的標記化合物之粗產物（95 3 mg)。 !H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 1.47 (9Η, s), 4.65 (2H，s)，6.67 (1H, s)，7·20 (1H，dd，J=4.8, 8.0Hz)，7·44 (1H， brs), 8.01 (1H, dd, J=2.0, 8.0Hz), 8.52 (1H, dd, J=2.0, 4.8Hz)。 [參考例20] {3-[3-(氣甲基）異〃号π坐_5_基]e比咬基}醯亞 胺二碳酸二·第三丁酯之合成 [化 72]

將{3-[3-(氯曱基）異吟唑_5_基]〇比咬_2-基}胺基甲酸第三 丁 S日的粗產物（1.13 g’ 3.17 mmol)溶解於四氫η夫味（7.0 © mL)中，於冰水冷卻下加入二碳酸二第三丁酯（761 mg， 3.49 mmol)，用THF(3.0 mL)洗入。繼而加入4_二甲基胺基 w比啶（39.1 mg，〇_3 17 mmol)後，於室溫下搜拌。5小時 後’於冰水冷卻下向反應液中加入乙酸乙酯及5 %食鹽 水’進行萃取。用5 %食鹽水清洗有機層，以無水硫酸鎂 乾燥後，於減壓下將溶劑蒸餾除去。以矽膠管柱層析法對 殘〉查進行純化’獲得作為淡黃色固體之標記化合物（1.14 g)。 137275.doc -71- 200934788 !H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) ： 1.33 (18H, s), 4.63 (2H, s), 6.66 (1H, s), 7.45 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.30 (1H, dd，J=2.0, 8.0Hz)，8.62 (1H, dd，J=2.0, 4.8Hz)。 [參考例21]{3-[3-(氣甲基）異哼唑-5-基]吡啶_2-基}醯亞 胺二碳酸二-第三丁酯之合成 [化 73]

於氮氣流下，向500 L反應罐中加入[5_(2_胺基》比。定-3-基）異吟唾-3-基]甲醇（26.00 kg，136.0 m〇i)及ι,3-二甲基-2-咪嗅琳酮（143 kg，5.5w/w，分取一部分用於洗入），開 始攪拌。於内溫35〜45°C下攪拌1小時以上，於[5_(2_胺基 "比咬-3 -基）異p号唑-3-基]甲醇溶解後’進行冷卻。於内溫5 〜25 C 下滴加亞硫酿氣（19·40 kg，163.1 m〇i，1.2 M/Μ)。 滴加結束後’用分取的1，3-二曱基-2-咪唑啉酮將亞硫醯氣 ® 洗入’於内溫5〜25°C下授拌12小時以上。以hplc分析確 認反應結束後’於内溫0〜25 C下滴加濃度約為36%的氮 氧化鈉水溶液（48%氫氧化鈉水溶液（15.9 kg，氫氧化納為 190.8 mol，1.4 M/M)與水（5_3 kg，0.2 w/w)的混合液），繼 而於内溫15〜35°C下滴加乙酸乙酯（164 kg，6.31你~)及 水（74·2 kg，2.85 w/w)。進而，於内溫〇〜2rc下滴加濃产 約為8%的氫氧化鈉水溶液（48%氫氧化鈉溶液（136 kg，氫 氧化鈉為 163.2 mol，1.20 M/M)與水（68.0 kg，2.6 w/w)的 137275.doc -72- 200934788 混合液）’將内溫調整至15〜30 °C後，在相同溫度範圍内 攪拌30分鐘以上’靜置30分鐘以上。分別取出下層與上 層’各將1/2重量分別加入至5〇〇 L反應罐1及500 L反應罐2 中。 500L反應罐1之後處理係以如下方式實施。開始搜拌並 加入水（52 kg ’ 2 w/w)後，於内溫〇〜25°C下一點一點地滴 加濃度約為8%的氫氧化鈉水溶液（48%氫氧化鈉水溶液 (11.3 kg，氫氧化納為 135.6 mol，1.0M/M)與水（56.5 kg、 ® 2.17^界）的混合液，將下層的？11值調整為7_00〜8.50(實 測值：pH7.84)。此時’使用35.55 kg之濃度約8%的氫氧化 鈉水溶液。接著，將内溫調整至15〜30〇C，攪拌3〇分鐘以 上，然後整夜靜置。次曰，再次確認pH值為ρΗ7·59後，分 別分離取出上層及下層，僅將下層返回至50〇 L反應罐i 中’然後加入乙酸乙醋（82 kg，3·15 w/w)。於内溫15〜30 °C下攪拌5分鐘後，靜置30分鐘以上，除去下層（pH7.55)。 向殘留於罐中上層中加入分離取出之上層及5〇/〇食鹽水（食 鹽（3.3 kg’ 〇_13 w/w)與水（618 kg，2.3 8w/w)的混合液）， 於内溫15〜30°C下攪拌5分鐘後，靜置30分鐘以上，除去 下層（pH8.23)。進而加入水（65 kg，2.5 w/w)，於内溫15〜 30°C下攪拌5分鐘後，整夜靜置，除去下層（pH7.04)。 500 L反應罐2之後處理，係與500L反應罐1之操作同時 進行並實施同樣之操作。 接著，將500 L反應罐2的上層移送至500 L反應罐1中， 於溫水45〜55°C、減壓度-0.070〜-0.085 MPa下對内容液 137275.doc •73- 200934788 實施減壓濃縮直至成為約200 L。向复由Λ , 问具中加入乙酸乙酯 (141 kg，5.42W/W)，再次於相同條件下進行減壓濃縮。進 而將此操作重複進行2次後，藉由第4次添加乙酸乙酯（ΐ4ι kg ’ 5.42w/w)前後之HPLC分析來確認内溶液中之3_[3气氣 曱基）異哼唑-5-基]吡啶-2-胺的含量，並計算内溶液中之3_ [3-(氯甲基）異喝唑-5-基]吡啶_2_胺的含量（23 35 kg，1114 mol)及其產率（81.9。/。）。繼而’再一次於相同條件下進行減 壓濃縮以使3-[3-(氣甲基）異嘮唑_5-基]吡啶_2_胺的含量達 © 到10.0〜13·0%，獲得3-[3_(氣甲基）異嘮唑-5-基]吡啶_2_胺 之乙酸乙酯溶液。 於乳氣流下’將500 L反應罐1内之3-[3-(氣曱基）異p号„坐_ 5-基]吡啶-2-胺的乙酸乙酯溶液（前製程中獲得之總量，含 有23.35 kg(111.4 mol))進行攪拌’於内溫15〜25〇c下加入 二碳酸二第三丁酯（53.47 kg，245.0 mol，2.2 M/M)，用 乙酸乙酯（2 kg)洗入。向其中加入預先製備的4_二甲基胺 基。比啶的乙酸乙酯溶液（4-二甲基胺基吡啶（0.409 kg，3.35 mol，0.03M/M)與乙酸乙酯（8 kg)的混合液），用乙酸乙酯 (1 kg)洗入後，於内溫1〇〜30 °C下攪拌22小時以上。以 HPLC分析確認反應結束後，加入丨，3_二甲基_2_咪唑啉酮 (50 kg，2_12 w/w)。於45〜55°C的溫水循環下、減壓度 為-0.092 MPa以上之條件下進行減壓濃縮直至液體餾出減 弱為止，藉由GC分析確認乙酸乙酯含量為7.0%後，冷卻 至内溫為30°C以下，整夜靜置。次曰，向濃縮殘渣中加入 甲醇（111 kg，4.74 w/w)並搜拌1〇分鐘以上，確認無固體析 137275.doc • 74· 200934788 出後，將溶液分成2份。繼而，將分成2份的溶液分別加入 500 L反應罐1及2中，分別用甲醇（各9 kg，各〇 4 w/w)洗 入。此時，對分成2份之前的溶液（225 65 kg)進行HpLC分 析，結果目標之{3·[3-(氣曱基）異噚唑_5_基]吡啶_2_基}醯 亞胺二碳酸二-第三丁酯的含量為19 37%，溶液中所含之 {3-[3-(氣甲基）異噚唑_5_基]吡啶_2_基）醯亞胺二碳酸二-第 二丁酯的重量為 43.71 kg(l〇6.6 mol，產率；95.7°/〇)。 對5 00 L反應罐1以如下方式進行處理。開始攪拌後，於 © 内溫35〜45°C下用3〇分鐘以上滴加水（35 kg，i 5 w/w)， 於内溫35〜4(TC下加入{3_[3_(氣甲基）異噚唑_5_基]吡啶_2_ 基}醯亞胺一碳酸二-第三丁酯（〇〇1〇 kg)。於内溫35〜4〇〇c 下攪拌30分鐘以上，然後確認固體析出，進而在相同的溫 度範圍内授拌1小時以上。接著，於内溫3 5〜4 5下分別 用30分鐘以上滴加水（3次滴加35 kg，各i 5 w/w)後用3 小時以上進行冷卻直至内溫達5〜15它，在相同的溫度範 ❹圍内攪拌12小時以上。以離心分離機分2次進行固液分 離，用含水甲醇（甲醇（每次7 kg，〇3 w/w)及水（每次27 kg，1.14W/W)的混合液）加以清洗。清洗結束後，進行3〇分 鐘以上離心分離，獲得標記化合物之濕固體（25 8〇 kg)。 將該濕固體投入混合型真空乾燥機中，於外溫45〜55<>(：下 進行24小時以上之真空乾燥，獲得作為淡黃色固體之標記 化合物（21.09 kg)。 對500 L反應罐2與上述處理同時進行相同的操作，獲得 作為淡黃色固體之標記化合物（21.22 kg)。 137275.doc -75- 200934788 藉此，獲得標記化合物（42.31 kg，產率：92.7%)。 'H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 1.33 (18H, s), 4.63 (2H, s), 6.66 (1H, s), 7.45 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.30 (1H, dd, J=2.0, 8·0Ηζ)，8.62 (1H，dd，J=2.0, 4.8Hz)。 HPLC條件 管柱：YMC-Pack Pro C18(5 μιη，150x4.6 mml.D·，YMC)，移動相：乙腈/水/乙酸錢=3〇〇/7〇〇/i〜 900/100/l(v/v/w) 〇 GC條件 管柱：DB-624(30 m，0.53mmI.D.，Film 3 μπι，Agilent)。 [參考例22]5-{2-[(2,2-二甲基丙氧基羰基）胺基p比啶_3_ 基}異p号唑-3 -甲酸乙酯 [化 74]

於〇°C下用2小時，向以國際公開第08/136279號案說明 © 書製造例3-3-1所記載之方法而合成的4-亞曱基-2-氧雜-4H-0比咬幷[2,3-d][l，3]呤畊-1·甲酸第三丁酯（2.71 g，10.37 mmol)、三乙胺（4.2 mL，30 mmol)、及四氫呋喃（30 mL·)的 混合物中加入2-氣-2-(羥基亞胺）乙酸乙酯（4 5 g，3〇 mrnol) 後’於室溫下攪拌14小時。向反應混合物中加入水，用乙 酸乙醋進行萃取’用水及飽和食鹽水清洗有機層。以硫酸 鎂乾燥並過濾後，於減壓下將溶劑蒸餾除去。使殘渣懸浮 於正己燒與乙酸乙酯為1 : 1的混合液中並進行清洗，獲得 137275.doc -76· 200934788 標記化合物（1.5 6 g)。 ^-NMR Spectrum (CDCI3) δ (ppm) : 1.44 (3Η, t, J=6.8Hz), 1.46 (9H, s), 4.47 (4H, q, J=7.2Hz), 6.95 (1H, s), 7.22 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 7.42 (1H, bs), 8.05 (1H, dd, J=2.0, 8.0Hz), 8.52(1H，dd，J=2.0, 4.8Hz)。 [參考例23]5-{2-[雙（2,2-二甲基丙氧基羰基）胺基]°比 啶-3-基}異噚唑-3-曱酸乙酯 [化 75]

於室溫下’向5-{2-[(2,2-二甲基丙氧基幾基）胺基]n比咬 -3-基}異<»号唾-3-甲酸乙醋（1.46 g，4.38 mmol)、二碳酸二· 第三丁酯（1.46 g，6.69 mmol)、及四氫呋喃（25 mL)的混合 物中添加4-二甲基胺基吡啶（30 mg，0.25 mmol)，於室溫 下授拌14小時。向反應混合物中加入水，用乙酸乙g旨進行 萃取’用水及飽和食鹽水清洗有機層。以硫酸鎂乾燥，進 行過濾後’於減壓下將溶劑蒸餾除去，以矽膠管柱層析法 (己烷：乙酸乙酯=3 : 1繼而為1 : 1)對殘渣進行純化，獲 得標記化合物（1.96 g)。 'H-NMR Spectrum (CDC13) 6 (ppm) : 1.36 (18H, s) 1 46 (3H，t，J=6.8Hz)，4.47 (4H，q，J=6.8Hz)，6.93 (1H，s)，7 46 (1H, dd，J=4.8, 7.6Hz)，8.29 (1H，d，J=7.6Hz)，8.64(1H d J=4.8Hz)。 137275.doc -77- 200934788 [參考例24]{3-[3-(羥基甲基）異哼唑-5-基]。比啶-2-基}醯 亞胺一碳酸二-第三丁醋 [化 76]

於〇°(：下，向5-{2-[雙（2,2-二甲基丙氧基羰基）胺基]吡啶_ 3-基}異崎唾-3-甲酸乙g旨（1.73 g，4 mmol)、乙醇（5 mL)、 Ο 及四氫呋喃（5 mL)的混合物中加入硼氫化鈉（0.15 g，4 mmol) ’於室溫下授拌丨小時。進而加入硼氫化鈉（〇 15 g， 4 mmol)，於室溫下攪拌3小時。向反應混合物中加入水， 用乙酸乙酯進行萃取，用水及飽和食鹽水清洗有機層。以 無水硫酸鎂乾燥並進行過濾後，於減壓下將溶劑蒸館除 去。向殘渣中添加正己烷-乙酸乙酯（1: 1)的混合液再進行 懸浮攪拌後’進行過濾，獲得標記化合物（1.02 g)。

!H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 1.33 (18Η, s), 4.gj ® (2H, s), 6.60 (1H, S), 7.43 (1H, dd, J=4.8, 8.0Hz), 8.27 (iH dd, J=2.0, 8.0Hz)，8.60 (1H，dd，J=2.0, 4.8Hz)。 [參考例25]{3-[3-(溴曱基）異哼唑-5-基]吡啶_2_基}醯亞 胺二碳酸二·第三丁 g旨 [化 77]

137275.doc 78- 200934788 於〇°C下，向{3-[3-(羥基甲基）異噚唑_5_基]吡啶_2_基}醯 亞胺一破酸一 第二丁酿（0.78 g，2 mmol)、三乙胺（ι·95 mL，14 mmol)、及^·二甲氧基乙烷（1〇 mL)的混合物中 滴加二漠化鱗（0.37 mL，4 mmol) ’於室溫下撲拌2小時 後，於50 C下攪拌30分鐘。將反應混合物冷卻至〇艽後加 入水，用乙酸乙酯進行萃取，用飽和食鹽水清洗有機層。 以無水硫酸鎂乾燥並進行過濾後，於減壓下將溶劑蒸餾除 去，以矽膠管柱層析法對殘渣進行純化，獲得標記化合物 ❹（0_14 g)。 !H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 1.33 (18Η, s), 4.45 (2H，s)，6.63 (1H，S)，7.43 (1H，dd，J=4.8, 8.0Hz)，8·28 (1H， dd，J=2.0，8.0Hz)，8.61 (1H，dd, J=2.0，4.8Hz)。 [參考例26]2-[(4-溴苄基）氧基]^比。定之合成 [化 78]

於氮氣環境下於室溫下’向4_溴苄醇（18 g，94.3 mm〇l) 的二甲基亞硬（85 mL)溶液中一點一點地加入第三丁氧基 鉀（11.5 g，99 mmol)並授拌1〇分鐘。於水浴冷卻下，用3〇 分鐘向該溶液中滴加2-氟吡啶（12.3 g，123 mmol)。於室 溫下攪拌2小時後，加入乙酸乙酯及5%食鹽水進行萃取。 依序用水、5 %食鹽水清洗有機層後，於減麼下將溶劑蒸 餾除去’獲得作為黃色油狀物之標記化合物（24.3 g)。 H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 5.33 (2H, s), 6.87- 137275.doc -79- 200934788 6.70 (1H，m)，6-98-7.02 ΠΗ 770- UH, m), 7.38-7.44 (2H, m), 7.55- 7.60 (2H，m), 7.71-7.76 (1H，m)，8.15-8.18 (ih m)。 參考例27係參考例26之其他途徑合成法。 [參考例27]2-[(4-溴苄基）氧基]„比啶之合成 [化 79]

於氮氣環境下於冷卻至7°C下，向4-溴苄醇（600 g，3.21 〇 叫與2_氟°比唆（343 g，3.53叫的四氫咬喃（刪mL)溶 液中滴加第三丁氧基鉀（396 g，3.53 m〇1)的四氫呋喃（32〇8 mL)溶液（63 min，9.2〜20.5。〇。於22°C下攪拌3小時後， 滴加5%碳酸氫鈉水溶液（由碳酸氫鈉16〇 g與水32〇8 mL而 製備）（2〇111111，21.0〜23_9。(：）。繼而添加庚烷（322〇1111^進 行萃取，用水（800 mL)清洗有機層。進行減壓濃縮（直至約 為3200 mL)，加入乙醇（1604 mL)，進行減壓濃縮（直至約 ❹ 為3200 mL)。繼而，加入庚烷（3200 mL)進行減壓濃縮， 進一步添加庚烷（3200 mL)進行減壓濃縮，獲得作為褐色 油狀物之標記化合物的庚烧溶液（含有789 g目標物，2603 g)(產率：93.2%)。 ^-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) ： 5.33 (2H, s), 6.87-6·70 (1H, m), 6.98-7.02 (1H, m), 7.38-7.44 (2H, m), 7.55-7.6〇 (2H，m)，7.71-7.76 (1H, m)，8.15-8.18 (1H，m)。 [參考例28]{4-[(°比啶-2_基氧基）甲基]苯基}硼酸之合成 137275.doc -80 - 200934788 [化 80]

於氮氣環境下’將2-[(4-溴苄基）氧基]吡啶（5〇 g，ι9〇 mmol)的四氫呋喃（200 mL)溶液冷卻至_78〇C，滴加26 M 正丁基裡己烧溶液（88 mL，228 mmol)。擾拌45分鐘後， 於相同溫度下滴加三甲氧基硼烷（29.6 g，285 。3〇 分鐘後加入飽和氯化銨水溶液及水進行淬冷，用乙酸乙酯 ❹ 進行萃取。用飽和氯化錢水溶液與飽和食鹽水的混合液清 洗有機層，以無水硫酸納乾燥後，於減壓下將溶劑蒸德除 去。向殘渣中加入乙腈（200 mL)，於70°C下進行30分鐘懸 浮攪拌後進行冷卻，於4°C下整夜攪拌。將析出的固體進 行過濾，獲得作為白色固體之標記化合物（112 q。 H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) ： 4.62 (2H, s), 5.42 (2H, s), 6.83 (1H, d, J=8.4Hz), 6.87-6.92 (1H, m), 7.50 (2H, d, J=8.0Hz), 7.57-7.62 (1H, m), 7.75 (2H, d, J=8.0Hz), ❹ 8.16-8.19 (1H, m)。 [參考例29]2-{[4-(5,5-二曱基-i，3,2-二嘮硼烷_2_基）苄基] 氧基}"比啶之合成 [化 81]

向2-[(4-漠苄基）氧基]«比啶（789 g，2.99 mol)的庚烷溶液 (2603 g)中加入庚烷（939 mL)及四氫呋喃（1199 mL)，於氮 137275.doc 81 - 200934788 氣環境下’ 一面攪拌一面以乾冰/乙醇浴緩慢冷卻。45分 鐘後中斷冷卻，於内溫-12°C下加入2-[(4-溴苄基）氧基]吡 咬（0·9 g)。再次開始冷卻，以-20°C/h進行冷卻。約3小時 後，滴加1.66 Μ之正丁基鋰己烷溶液（1980 mL，3.29 mol)(80 min，-67.0〜61.4°C )。搜拌0.5小時後，於相同溫 度下滴加三異丙氧基棚烧（674 g，3.56 mol)(134 min， -68.2〜60.3°C )。於相同溫度下攪拌0.5小時後，換成冰水 浴冷卻，整夜攪拌（外溫：0 °C )。次日，滴加水（5600 〇 mL)，移至分液裝置中將反應物萃取至水層中（pH : 11.2)。加入乙酸乙酯（4800 mL) ’ 一面攪拌一面滴加濃鹽 酸（約280 mL)(内溫20°C以下），調整為pH : 7.1。用5%食 鹽水（約900 g)清洗有機層分液後，於減壓下進行濃縮。向 殘渣中加入異丙醇（3 300 mL)進行減壓濃縮，進一步加入 異丙醇（3300 mL)進行減壓濃縮，獲得{4·[(吡啶-2-基氧基） 曱基]苯基}硼酸（646 g)的異丙醇溶液（2671 g)(產率： 94.4%)。將所得溶液加熱至6(rC ’ 一面進行抽氣過濾除去 不溶物一面將不溶物添加至加入有2,2-二甲基-1，3-丙二酮 (354 g，3.41 mol)的容器中，繼而用異丙醇（685 mL)洗 入。確認溶解後，於浴溫為2(TC下攪拌，於内溫為28 8r 下確認結晶析出。1.5小時後，將浴溫調整為_2〇°c，整夜 攪拌。將析出的結晶進行過濾，用冷卻至〇。〇的少量異丙 醇清洗結晶。進行減壓乾燥，獲得作為白色結晶之標記化 合物（779 g)(產率：92.2%)。 ^-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 0.94 (6Η, s), 137275.doc -82- 200934788 3-74 (4H, s), 5.35 (2H, s), 6.87 (1H, d, J=8.4Hz), 6.96-7.00 (1H, m), 7.39 (2H, d, J=8.0Hz), 7.67-7.74 (3H, m), 8.14-8.17 (1H, m) ° [參考例30][3-(3-{4-[(0比啶-2-基氧基）甲基]节基}異p号唑 -5 -基）η比咬_2_基]酿亞胺二破酸二·第二丁 S旨之合成 [化 82]

於氮氣環境下，向{3-[3-(氯甲基）異哼唑-5-基]»比啶_2_ 基}酿亞胺二碳酸二-第三丁酯（164 mg，0.40 mmol)、{4-[(°比啶-2-基氧基）甲基]苯基}硼酸（138 mg，0.60 mm〇i)、 碳酸绝（391 mg，1.20 mmol)、蛾化銅（1)(3.9 mg，5 mol%)、及l，2-二甲氧基乙烷（2.0 mL)的混合物中加入 Π，1’_雙（二苯基膦）雙茂鐵]二氣化鈀（II)-二氣甲烷錯合物 ❹ （16.4 mg，5 mol%)，於80°C下攪拌1.5小時。追加{4_[(吡 咬-2-基氧基）甲基]苯基}删酸（46 mg，0.20 mmol)，進一步 授拌4.5小時。冷卻後，加入乙酸乙酯及5%食鹽水，將不 溶物進行過濾後，將濾液移至分液漏斗中進行分層。用 5%食鹽水清洗有機層，以無水硫酸鎂乾燥後，於減壓下 將/谷劑蒸館除去^以碎勝管柱層析法對殘潰進行純化，獲 得作為淡黃色油狀物之標記化合物〇 73 mg)。 ^-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 1.23 (9Hj s), 4.05 (2H, s), 5.34 (2H, s)5 6.32 (1H, s), 6.76-6.79 (lHs m), 6.86- 137275,doc -83 - 200934788 6.90 (1H, m), 7.28 (2H, d, J=8.〇Hz), 7.38-7.43 m) 7.55-7.60 (1H, m)，8.15-8.18 (1H，m)，8.27 (1H，dd j=2 〇 8.0Hz)，8.57 (1H，dd，J =2.0, 7.6Hz)。 [參考例31]3-(3-(4-吡啶-2-基氧基曱基）苄基）異嘩唑巧 基]°fcb咬· 2 -基胺 [化 83]

© 將[3·(3-{4-[(«比啶-2-基氧基）甲基]苄基}異噚唑_5基）吡 啶-2-基]醯亞胺二碳酸二-第三丁酯（28·8 mg , 51 6叫^…容 解於乙腈（0.6 mL)中，於冰水冷卻下滴加濃鹽酸（6〇从匕 690 μηιοί) ’於相同溫度下攪拌1小時。進一步滴加濃鹽酸 (140 gL ’ 1.61 mmol) ’於相同溫度下攪拌i小時，於2〇(>c 下攪拌3.5小時。於冰水冷卻下，向反應液中加入〇 5 N氣 氧化鈉水溶液及乙酸乙酯，進行萃取。用5%食鹽水清洗 有機層，以無水硫酸鎂乾燥後，於減壓下將溶劑蒸餾除 ® 去，獲得作為淡黃色油狀物之標記化合物（18.3 mg)。 ^-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) ： 4.07 (2H, s), 5.37 (2H, s), 5.42 (2H, brs), 6.25 (1H, s), 6.71 (1H, dd, J=5.2, 7.6Hz), 6.80 (1H, d, J=8.4Hz), 6.87-6.91 (1H, m), 7.30 (2H, d, J=7.6Hz), 7.44 (2H, d, J=7.6Hz), 7.56-7.61 (1H, m), 7.70 (1H, dd, J=2.0, 7.6Hz), 8.14 (1H, dd, J=2.0, 4.8Hz), 8.16-8.19 (1H，m)。 參考例32〜33係參考例3〇〜3 1之其他途徑合成法。 137275.doc -84- 200934788 [參考例32][3-(3-{4-[(吼啶-2-基氧基）甲基]苄基}異„号哇 -5-基）吡啶-2-基]醯亞胺二碳酸二-第三丁酯之合成 [化 84]

第1批次係以如下方式來實施。於氮氣流下，向預先經 氮氣置換之500 L反應罐2中加入{3-[3-(氣甲基）異》号唾_5_ 基]吡啶-2-基}醯亞胺二碳酸二-第三丁酯（20.80 kg，50.75 m〇l)、2-{[4-(5,5-二曱基-1，3,2-二氧雜硼烷-2-基）苄基]氧 基}吡啶（19.611<^，66.00 111〇卜1.30^[/：\1)、（氧基二_2，1-伸 苯基）雙（二苯基膦）（1.367 1^，2.54 111〇1，0.05]^/^1)、碳酸 鉀（9.111^，65.91111〇1，1.3〇]^/1^)後，對罐内再次進行氮 耽置換’加入N，N-二甲基甲酿胺（147 kg，7.08 w/w)，開 始攪拌。接著，於内溫15〜25〇C下，於-0.090 MPa以上的 φ 減壓度下維持3〜5分鐘後，用氮氣解除減壓狀態。反覆進 行該操作共計5次，再進行溶液的脫氣。脫氣結束後，加 入乙酸鈀的N，N-二曱基曱醯胺溶液（乙酸鈀（〇.570 kg，254 mol，〇_〇5M/M)與完成脫氣的N，N-二甲基曱醯胺（9.8 kg， 〇.5w/w，分取一部分用於洗入）的混合液），以分取之完成 脫氣的Ν，Ν·二甲基甲醯胺洗入。繼而，攪拌1〇分鐘後，立 即於内溫20〜30 °C下滴加完成脫氣的水（10.4 kg，0.5 w/w) ’減壓至減壓度為_〇 〇87 MPa後用氮氣解除減壓狀 態’重複進行此操作3次。其後’迅速地使約6〇«c溫水循 137275.doc -85 · 200934788 環將内溫調節至55〜65 °C，自加熱開始起授拌3小時。藉 由HPLC分析碟認反應結束後’於内溫〇〜2 5 下加入甲苯 (90 kg ’ 4.34 w/w)，再相同溫度範圍内滴加水（156 kg， 7.5 w/wp接著，於内溫15〜30°C下攪拌30分鐘後，靜置 30分鐘以上並除去下層。向罐内之上層中加入水（1〇4 kg， 5·0 w/w)，於内溫15〜30°C下攪拌5分鐘後，靜置一整夜， 僅除去不含不溶物之下層。以鋪設有矽藻土 5〇3RV(28 kg，0.135 w/w)之過濾器對上層及含有不溶物之下層進行 ® 加壓過濾，用甲苯（18.0 kg，0.867 w/w，分取一部分用於 送出、洗入）沖洗罐及過濾器。將所得濾液及洗液返回至 500 L反應罐2中，以先前分取的甲苯洗入。其後，將内溫 調節至15〜30 °C後，靜置30分鐘以上並除去下層。將搜掉 速度調節至幾乎為最大，於内溫15〜301下用1小時以上 滴加正庚烷（152 kg ’ 7.32 w/w)後，於相同溫度範圍内授 拌2小時以上。繼而，於内溫15〜30。(：下用30分鐘以上分 批投入三聚硫氰酸（thiocyanuric acid)(0.90 kg，5.08 mol， 0.1M/M)，於相同溫度範圍内攪拌丨小時以上。再次於内溫 15〜30°C下用30分鐘以上分批投入三聚硫氰酸（〇9〇 kg， 5.08 mol，0.1M/M)，於相同溫度範圍内整夜攪拌。整夜 攪拌後，以預先準備的過濾器將罐之内容液進行活性炭過 滤'，以正庚烧-曱苯混合液（正庚烧（130 kg)與曱苯（83 kg) 的混合液’分取一部分用於活性炭（純化白鷺）的濕潤）對罐 及過濾器進行洗入》再次投入三聚硫氰酸（1.8〇 kg，1〇16 mol，0.2M/M)後’使用等量的矽藻土 503RV、活性炭（純 137275.doc -86- 200934788 化白鷺）及正庚烷-曱苯混合液進行活性炭過濾處理。繼 而，將所得濾液及洗液加入至5〇〇 L反應罐，於4〇〜7〇 °C的溫水循環下進行減壓濃縮直至以目視觀察内容液達到 約100 L。再者，於氮氣環境下、内溫30t以下將濃縮殘 渣加以靜置，直至第2批次之活性炭過濾結束。 作為第2批次，係實施與上述相同之操作。將第2批次的 濾液及洗液加入至500 L反應罐，與第1批次的濃縮殘 渣合併後開始減壓濃縮。於6〇〜7〇。〇的溫水循環下，在餾 ® 出減弱之時添加甲苯（144 kg)，然後再度於6〇〜7〇°C的溫 水循環下進行減壓濃縮直至餾出減弱。此處，分析濃縮殘 J查’根據濃縮殘渣中之[3-(3-{4-[(吼啶-2-基氧基）甲基]节 基}異〃号唾-5 -基）》比。定-2-基]酿亞胺二碳酸二-第三丁酯的含 量及甲苯的含量來計算甲苯/目標物之比率（〇 167 w/w)。 添加甲苯（29.06 kg，甲苯/目標物之比率為〇_7〇〇 w/w)，於 内溫15〜3 0 °C下攪拌3 0分鐘以上’獲得標記化合物之甲苯 溶液（含有42.37 kg目標物，產率：74.7%)。 ❹ HPLC條件 管柱：CAPCELL PAK C18 MGII(5 μιη， 15 0x4.6 mml.D.，SHISEIDO)，移動相：乙腈/水/三氟乙酸 = 180/820/1 〜900/100/l(v/v/v)。 [參考例33]3-(3-(4-"比啶-2·基氧基甲基）苄基）異哼唑_5_ 基）咬-2 -基胺 [化 85]

137275.doc .87· 200934788 於内溫-5〜20°C下，向[3-(3-{4-[(»比唆_2_基氧基）甲基] 苄基}異号唑-5-基）吡啶-2-基]醯亞胺二碳酸二_第三丁醋的 甲苯溶液（含有42.37 kg(75_85 mol))中滴加甲酸（181 kg， 4.27 w/w)，於内溫為22〜32 °C下攪拌19〜20小時。以 HPLC分析確認反應結束後，冷卻至内溫-5〜1 〇。(：，將内 容液分成2份，分別加入至500 L反應罐1及2中。 對500 L反應罐1以如下方式實施後處理。於擾拌下，於 内溫-5〜20°C下滴加水（74 kg，1.75 w/w)，進而於内溫〇〜 ❹ 25°C下加入第三丁基甲基醚（31.4 kg，0.74 w/w)及正庚院 (29.0 kg，0.684 w/w)。於内溫1 5〜25 °C下擾拌5分鐘，靜 置30分鐘以上後分取下層。將下層返回至罐中，再次於内 溫0〜25。(：下加入第三丁基甲基醚（31.4]^，〇.74评/评）及正 庚烧（29.0 kg，0.6 84 w/w)，於内溫15〜25 °C下挽拌5分鐘 後，靜置30分鐘以上後再一次分取下層。將下層返回至罐 中，首先於内溫0〜25°C下滴加48%氫氧化鈉水溶液（116 kg，氫氧化鈉為1392.0 mol，18.35 M/M)。其次，於相同 〇 溫度範圍内添加乙酸乙酿（96 k.g，2.26 w/w)，滴加48%氮 氧化納水溶液（20.5 kg ’風乳化納為246.0 mol， 3.24M/M)。進而，於相同溫度範圍内向其中滴加約8%氫 氧化鈉水溶液（48%氫氧化鈉水溶液（12.7 kg，氫氧化鈉為 152.4 mol ’ 2.00 M/Μ)與水（64 kg，1.5 w/w)的混合液）直至 下層的pH值達到pH8.00〜9.00，實測值：pH8.58)(使用 0.75 kg)。其後，於内溫20〜30°C下攪拌1小時以上後靜置 整夜’然後再次確認下層的pH值（實測值為pH8.29)，除去 137275.doc -88- 200934788 下層。向罐中殘留之上層中加入約5%碳酸氫鈉水溶液（碳 酸氫納（5.3 kg，63.09 mol)與水（101 kg、2 375 w/w)的混 合液，於内溫20〜30。(：下攪拌！小時以上，然後靜置3〇分 鐘以上。除去下層（pH8.6〇)後，向上層中加入水（i〇6 kg， 2.5 w/w) ’於内溫2〇〜30°C下攪拌1小時以上後，靜置3〇分 鐘以上’再次除去下層（pH7.17)。 對於500 L反應罐2，與500 L反應罐i同時實施同樣之後 處理。 將500 L反應罐1的内容液轉移至5〇〇 L反應罐2中，於55 〜65 C的溫水循環下進行減壓濃縮直至内容液達到約1〇〇 L °接著’向濃縮殘渣中加入乙醇（42 kg，i .〇 w/w)及乙酸 乙醋（96 kg，2·26 w/w)並攪拌5分鐘後，於55〜65〇c的溫 水循環下、減壓度-0.092 MPa以上之條件下進行減壓濃縮 直暴幾乎看不見顧出為止’此處’因看見有結晶析出，故 一點一點地加入乙酸乙酯直至結晶完全溶解（使用13 85 kg)。進而加入乙醇（18.3 kg)及乙酸乙酯（6.7 kg)後，將内 溫調節至50〜55。(：，以目視確認結晶溶解後，於内溫45〜 55C下用30分鐘以上滴加正庚烧（3 3.5 kg，0.79 w/w)。繼 而’於内溫45〜50 °C下，添加以國際公開第⑽/丨36279號 案說明書實施例18所記載之方法可合成的3-(3-(4-吡啶-2-基氧基甲基）苄基）異17号嗤-5-基）吡啶-2-基胺（〇.〇 11 kg)，確 認結晶析出後’於相同溫度範圍内授拌1小時以上。於内 溫45〜55。(：下用1小時以上滴加正庚烷（66.9]<^，1.5 8\^/\〇 後’用4小時以上冷卻至内溫〇〜1〇。(：，於相同溫度範圍内 137275.doc -89· 200934788 授拌5小時以上。對内容液進行取樣，確認目標物的結晶 率為94%後，對懸濁液進行加壓過濾，依序用乙醇_乙酸乙 酉曰-正庚烷混合液（乙醇（3 6〇 kg，〇 〇85 w/w)、乙酸乙酯 ( g O.098 w/w)及正庚院（1 8.81 kg，〇.444w/w)的混 合液）、乙醇-正庚烷混合液（乙醇（7 25 kg，〇17i w/w)與正 庚烷（18.81 kg，0.444 w/w)的混合液）對結晶進行沖洗，獲 得作為微黃色結晶之標記化合物的濕粗結晶（36.52 0)。 向預先經氮氣置換之5〇〇 l溶解罐中依序加入所得之3_ © (3_(4_°比啶-2-基氧基甲基）苄基）異啰唑_5_基）„比啶_2_基胺 的濕粗結晶（36.52 kg)及乙醇（57·9 kg，2·37 w/w)，加熱至 内辰70〜75 C，使結晶溶解。將此溶解液在保溫狀態下通 過SUS過濾器並轉移至500 L晶析罐中，於外溫約65<t下用

預先加溫的乙醇（19.3 kg，0.8 w/w)對500 L溶解罐及SUS 過慮器進行洗入。繼而’將濾液的内溫調節至55〜6〇 t， 確s忍罐内的溶液為均勻。其後，將内溫緩慢冷卻至48〜5 ^ c，此時有結晶析出。再度加熱至内溫為55〜6〇。〇使結晶 Ο 溶解後，迅速冷卻至内溫為48〜511：,立即加入以國際公 開第08/136279號手冊之說明書實施例18所記載之方法可 合成的3-(3-(4-比啶_2_基氧基甲基）苄基）異呤唑巧_基）吡 啶-2-基胺（0.0111^)。接著，於内溫45〜5〇。(：下以目視確 認結晶析出後，於内溫43〜47〇C下攪拌1小時〜1小時3〇分 鐘’用4小時以上冷卻至内溫〇〜10»c。此處，對析出之結 晶進行取樣’確認其結晶形態與標準品為相同後，於相同 溫度範圍内整夜攪拌。次日，確認結晶形態與標準品為相 同後’以離心分離機分2次對結晶進行固液分離，分別用 137275.doc -90- 200934788 乙醇19.3 kg的約1/2量進行沖洗，獲得目標物之濕結晶 (24.23 kg)。將該濕結晶投入混合型真空乾燥機中，於外 溫20〜30°C下減壓乾燥6小時以上，於外溫35〜45°C下減 壓乾燥12小時以上，獲得作為淡黃色結晶之標記化合物 (23.52 kg，65.63 mol，產率：86.8%) ° !H-NMR Spectrum (CDC13) δ (ppm) : 4.07 (2Η, s), 5.37 (2H, s), 5.42 (2H, brs), 6.25 (1H, s), 6.71 (1H, dd, J=5.2, 7.6Hz), 6.80 (1H, d, J=8.4Hz), 6.87-6.91 (1H, m), 7.30 (2H, d, J=7.6Hz), 7.44 (2H, d, J=7.6Hz), 7.56-7.61 (1H, m), 7.70 (1H, dd, J=2.0, 7.6Hz), 8.14 (1H, dd, J=2.0, 4.8Hz), 8.16-8.19 (1H，m)。 HPLC條件 管柱：CAPCELL PAK C18 MGII(5 μιη， 150x4.6 mml.D.，SHISEIDO)，移動相：乙腈/水/三氟乙酸 = 180/820/1 〜900/100/1 (v/v/v) [實施例1]2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）-3-(3-((4-((2-吼啶 基氧基）甲基）苯基）曱基）-5-異噚唑基）"比啶鏽 (2-Amino-l-((phosphonooxy)methyl)-3-(3-((4-((2-pyridinyloxy) methyl)phenyl)methyl)-5-isoxazolyl)-pyridinium) [化 86]

137275.doc -91- 200934788 向磷酸二·第三丁酯氣甲酯（1.5 g’ 5.6 mm〇i)、碘化鈉 (420 mg，2.8 mmol)及四氫呋喃（10 mL)的混合物中加入參 考例1所記載之3-(3-(4-(吡啶-2-基甲氧基）苄基）異„号嗤_5_ 基）吡啶-2-基胺（1.0 g ’ 2.8 mmol)，於室溫下整夜搜摔。 將反應混合物冷卻至0°C，於相同溫度下滴加三敗乙酸（17 mL)。使反應混合物達到室溫並攪拌3〇分鐘。將反應溶液 減壓濃縮並對殘渣進行凝膠過濾（三菱化成，CHP20P，用 水繼而用甲醇進行溶析）。將溶析液進行減壓濃縮後，利 ❹ 用ODS管柱（水：乙腈：三氟乙酸=1 〇〇〇 : 1〇 : 1繼而 1000 : 200 : 1.2，繼而 1〇〇〇 : 250 : 1.25，繼而 1500 : 500 : 2)對殘渣進行純化。對溶析液進行減壓濃縮，向殘 渣中加入少量的甲醇及醚，過濾、取出析出的固體。於6〇。〇 下進行2.5小時暖風乾燥而獲得標記化合物（38〇 mg， 29%) 〇 'H-NMR Spectrum (CD3OD ： D2〇=l：i) 5 (ppm) : 4.08 ❺(2H, s), 5.33 (2H, s), 5.75 (2H, d, J=l.〇Hz), 6.85 (1H, d, J=8.4Hz), 6.96-7.40 (3H, m), 7.35 (2H, d, J=8.0Hz), 7.41 (2H, d, J=8.0Hz), 7.6-7.74 (1H, m), 8.15-8.18 (1H, m), 8.26 (1H, dd，J=1.2, 7·2Ηζ)，8.35 (1H, dd，J=1.2, 6.8Hz)。 [實施例2]2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）_3_(3_((4_((2_„比咬 基氧基）甲基）苯基）甲基）-5-異号峻基）n比咬鑌無水物（1型） 使2-胺基-1-((膦酸氧基）曱基）_3-(3-((4-((2·«比啶基氧基） 甲基）苯基）甲基）-5-異呤唑基）〇比啶鑌（30 mg)懸浮於80°C的 一甲基亞礙中’繼而一面搜拌一面加入水及乙酸製成透明 137275.doc •92· 200934788 溶液。繼而，使溶液返回至室溫，過濾取出析出的結晶而 獲得標記化合物15 mg。 iH-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4.07 (2H s) 5.33 (2H, s), 5.72 (2H，d，J=9.2Hz)，6.84-6.87 (1H m) 6.97-7.20 (2H, m), 6.98 (1H, s), 7.35 (2H, d, J=8.4Hz), 7 42 (2H, d, J=8.4Hz), 7.69-7.74 (1H, m), 8.15-8.18 (1H, m) 8·25 (1H，dd，J=l.6, 7.2Hz)，8.33-8.37 (1H, m)。 [實施例3]2-胺基-1·((膦酸氧基）甲基）·3_(3·((4比啶 © 基氧基）甲基）苯基）甲基）-5_異呤唑基）°比啶鏽無水物（2型） 於4°C下，向磷酸二第三丁酯氣甲酯（541 mmol)與四氫呋喃（10 mL)的混合物中加入參考例}所記載 之3-(3-(4-(吡啶-2-基甲氧基）节基）異噚唑_5_基）吡啶_2_基 胺（300 mg，0.84 mmol)、及碘化鈉（251 mg，1.7 mm〇1)， 於4°C下攪拌66小時。於冰浴冷卻下向反應混合物中加入二 N鹽酸水溶液（10 mL)，於室溫下攪拌35小時。向反應混 ❿合物中加入乙酸乙醋（1〇 mL)及水（10 mL)，進行萃取。將 水層分離，向水層中加入乙酸乙酯（1〇 mL)，繼而加N 氫氧化鈉水溶液直至水層的pH值達到2,進行萃取。將水 層分離’向水層中加入乙酸乙醋（1G mL)，繼而加入丄贱 氧化鈉水溶液直至水層的pH值達到2 5，進行萃取。將水 層分離’向水層中加入乙酸乙醋〇〇 mL)。繼而加入ι隨 氧化鈉水溶液直至水層的pH值達到3，進行萃取。將水層 分離，加入1 N氫氧化鈉水溶液直至水層的pH值達到4,將 水層於室溫下整夜攪拌。對析出的結晶進行過濾，用pH=4 137275.doc -93- 200934788 之水（2 mL)及乙酸乙酯（2 mL)依序進行清洗，獲得標記化 合物（68 mg，17%)。 ^-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ； 4.08 (2Η, s), 5.33 (2H, s), 5.73 (2H, d, J—9.2Hz), 6.84-6.87 (1H, m), 6.97-7.04 (3H, m), 7.35 (2H, d, J=8.1Hz), 7.42 (2H, d, J=8.1Hz), 7.70-7.74 (1H, m), 8.16-8.18 (1H, m), 8.25 (1H, dd, J=l.5, 7.5Hz), 8.34-8.36 (1H, m)。 [實施例4]2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）_3_(3_((4_((2_n比咬 ® 基氧基）甲基）苯基）甲基）-5-異吟峻基）η比咬鏘無水物（3型） (2-Amino-l-((phosphonooxy)methyl)-3-(3-((4-((2-pyridinyloxy) methyl)phenyl)methyl)-5-isoxazolyl)-pyridinium) [化 87]

向構酸氣曱基一-第三丁基醋（6.73 g，26 mmol)與四41 呋喃（22 mL)的混合物中加入蛾化鈉（6 〇3 g，4〇 mm〇i)及銅 粉（127 mg，2 mmol)，於室溫下攪拌。5小時後，加入實 施例1所記載之3-(3-(4-(«比啶-2-基甲氧基）苄基）異噚唑_5-基）0比啶-2-基胺（7.17 g，20 mmol)、甲苯（20 mL)及 5 N氫 氧化鈉水溶液（22 mL)，於室溫下攪拌❶23小時後，加入 以與上述同樣之方式由磷酸氣曱基二-第三丁基酯（3 63 g ’ 14 mmol)、碰化納（3.25 g，21.5 mmol)、銅粉（68 mg， 137275.doc 94- 200934788 1·〇8 mmol)及四氫呋喃（12 mL)所製備的混合物，於室溫下 搜拌。20小時後’過濾除去不溶物後，將有機層分離。於 冰水洛冷卻下向所得有機層中滴加5 N鹽酸（22 mL)，於室 皿下授拌。2· 5小時後’向反應混合物中加入乙酸乙醋（3 5 mL) ’於冰水浴冷卻下滴加5 ν氫氧化鈉水溶液，調整為 ρΗ10·5〜11.0。將水層分離，用乙酸乙酯（35 mL)清洗，進 而重複進行2次同樣的操作。向所得水層中加入乙腈（7〇 mL) ’於室溫下攪拌1小時後’進行過濾除去不溶物。將水 © 層分離，加入乙腈（70 mL)，於冰水浴冷卻下攪拌0.5小時 後’於冰箱中保管整夜。次日，進行過濾除去不溶物，向 所得水層中滴加5 N鹽酸，將pH值調整為pH3.5。加入少量 的2_胺基_1_((膦酸氧基）曱基）-3-(3-((4-((2-〇比啶基氧基）甲 基）苯基）曱基）-5-異呤唑基）吡啶鏽，於室溫下整夜攪拌。 18小時後’將所析出的固體進行過濾，用水（8 mL)、水-乙 腈（1 : 1)(8 mL)、乙腈（8 mL)依序清洗後，進行減壓乾 燥’獲得作為淡褐色固體之標記化合物的粗固體（3.39 ® g)。 向所得粗固體（3·39 g)中添加亞硫酸鈉（3.39 g)及水（67.7 mL)，於室溫下攪拌^ 〇 5小時後，確認無不溶物後，加入 乙腈（13.5 mL)。滴加5 N鹽酸，結晶緩慢地析出，將卩11值 調整為pH3_5後，於室溫下整夜攪拌。17小時後，將所析 出的結晶進行過濾，用水_乙腈（1 : 1)(14 mL)、乙腈（21 mL)依序清洗後，進行減壓乾燥，獲得作為淡黃色結晶之 標記化合物（2.98 g)。 137275.doc -95- 200934788 H-NMR Spectrum (DMS〇_d6) § (ppm) : 4 〇8 (2H，s), 5.33 (2H, s), 5.73 (2H, d, J=9.2Hz), 6.84-6.87 (1H, m), 6.97-7.04 (3H, m), 7.35 (2H, d, J=8.1Hz), 7.42 (2H, d, J=8.1Hz), 7.70-7.74 (1H, m), 8.16-8.18 (1H, m), 8.25 (1H, dd, J=1.5, 7.5Hz), 8.34-8.36 (1H, m) 〇 [實施例5]2-胺基-1-((膦酸氧基）曱基比啶 基氧基）甲基）本基）甲基）-5-異I»号唾基）0比咬鑌水合物 於室溫下，向磷酸二-第三丁基氣甲基酯（43 mg，0.17 ® mmo1)與丙酮（1 mL)的混合物中加入參考例丨所記載之3_(3_ (4_0比咬-2-基曱氧基）苄基）異P号吐_5_基）n比咬_2_基胺（3〇 mg，0.084 mmol)、碘化鈉（25 mg，0.17 mmol)，於 4。(：下 攪拌17小時，繼而於室溫下攪拌3日。於室溫下向反應溫 合物中加入四氫呋喃（1 mL)及2 N鹽酸水溶液（1 mL)，於室 溫下攪拌1.5小時。於冰浴冷卻下向反應混合物中加入乙 酸乙酿’繼而於相同溫度下添加5 N氫氧化納水溶液直至 0 水層的pH值達到7.5。將水層分離’於室溫下加入1 n鹽酸 水溶液直至水層的pH值達到5。於室溫下向水層中加入乙 酸乙酯，於相同溫度下整夜攪拌。將所析出的結晶進行過 渡’依序用pH=4之水（2 mL)及異丙醇（2 mL)進行清洗，獲 得標記化合物（9.7 mg，23%)。 !H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) ： 4.07 (2Η s) 5.32 (2H, s), 5.69 (2H, d, J=9.3Hz), 6.84-6.89 (2H, m), 6-97-7.00 (2H, m), 7.34 (2H, d, J=8.1Hz), 7.41 (2H, d, J=8.2Hz)5 7.69-7.74 (1H, m), 8.16-8.19 (2H, m), 8.27 (1H, 137275.doc -96- 200934788 d，J=6.6Hz)。 [實施例6]2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）_3-(3_((4_((2-»比啶 基氧基）甲基）苯基）曱基）-5-異噚唑基）吼啶鑌乙酸鹽 使2-胺基-1-((膦酸氧基）曱基）_3_(3-((4-((2-。比啶基氧基） 甲基）苯基）甲基）-5-異吟唑基）》比啶鏽（30 mg)懸浮於801的 乙醇中，繼而一面攪拌一面加入乙酸製成透明溶液。繼而 使溶液返回至室溫，過濾取出析出的固體而獲得標記化合 物 22 mg。 H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 1.91 (3H, s), 4.08 (2H, s), 5.33 (2H, s), 5.73 (2H, d, J = 9.6Hz), 6.84-6.87 (1H, m), 6.97-7.30 (2H, m), 6.98 (1H, s), 7.35 (2H, d, J=8.0Hz), 7.42 (2H, d, J=8.0Hz), 7.69-7.74 (1H, m), 8.15- 818 (1H, m), 8.25 (1H, dd, J=1.6, 7.6Hz), 8.36 (1H, dd, J=1.6，6.4Hz) 0 [實施例7]非晶質2-胺基-1-((膦酸氧基）曱基）_3_(3_((4_ ((2-。比啶基氧基）甲基）苯基）曱基）_5_異嘮唑基）吼啶鑌 將2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基比啶基氧基） 甲基）苯基）甲基）-5-異嘮唑基）吡啶鑌（5〇 mg)溶解於〇 〇23〇/〇 氨水（25 mL)中’然後進行冷凍乾燥，而獲得標記化合 物。 [實施例8]2-胺基- l_((膦酸氧基）曱基）_3_(3_((4_((2_D比唆 基氧基）曱基）苯基）甲基）_5_異嘮唑基）β比啶鏽一鹽酸鹽 使2·胺基-1 -((膦酸氧基）甲基）_3_(3_((4_((2_〇比啶基氧基） 甲基）苯基）甲基）-5_異噚唑基）。比啶鏽（1〇〇 mg)懸浮於水（1 137275.doc 97· 200934788 mL)及甲醇（1 mL)中，繼而一面攪拌一面添加2 n鹽酸0.5 mL製成透明溶液。繼而加入丙酮13 mL，照射超音波並過 滤取出析出的固體，而獲得白色固體97 mg。將所得固體 97 mg溶解於水1 mL中’加入丙_ 19 mL並照射超音波，過 濾取出析出的白色固體，而獲得標記化合物92 mg。 ]H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4.10 (2Η, s), 5.33 (2H, s), 5.96 (2H, d, J=12.8Hz), 6.84-6.87 (1H, m), 6.97- 7.01 (1H, m)5 6.99 (1H, s), 7.08 (1H, t, J = 7.2Hz), 7.35 (2H, d, J=8.0Hz), 7.42 (2H, d, J=8.0Hz), 7.70-7.75 (1H, m), 8.15-8.18 (1H，m), 8.31 (2H，d，J=7.2Hz)。 [實施例9]2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基比啶 基氧基）甲基）苯基）甲基）-5-異噚唑基）"比咬鏽一鹽酸鹽 使2-胺基-1 -((膦酸氧基）甲基）_3_(3-((4-((2-吨啶基氧基） 曱基）苯基）曱基）-5-異号坐基比咬鑌（50 mg)懸浮於水（0.5 mL)及甲醇（0.5 mL)中，繼而一面攪拌一面添加2 N鹽酸 2 1 4 μΐ^製成透明溶液。繼而加入丙酮直至溶液少許渾濁， 搜拌30分鐘。過遽取出析出的固體而獲得標記結晶（33 mg)。 'H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4.10 (2H, s), 5.33 (2H, s), 5.98 (2H, d, J=12.8Hz), 6.84-6.87 (1H, m), 6.97- 7.01 (1H, m), 6.99 (1H, s), 7.07-7.11 (1H, m), 7.35 (2H, d, J=7.6Hz), 7.42 (2H, d, J=7.6Hz), 7.70-7.75 (1H, m), 8、15-8·18 (1H，m)，8.28-8.33 (2H，m) o [實施例l〇]2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）-3-(3-((4-((2-啦咬 137275.doc • 98 - 200934788 基氧基）甲基）苯基）甲基）-5-異ρ号唑基）"比°定鏽半硫酸鹽 將2-胺基-1-((膦酸氧基）曱基）-3-(3-((4-((2-吼啶基氧基） 曱基）苯基）甲基）-5-異哼唑基）"比啶鏘（50 mg)溶解於水（0.5 mL)、甲醇（0.5 mL)及2 N硫酸（52.5 mg)中。加入丙酮（約 0.5 mL)使溶液產生白濁’於室溫下攪拌片刻。向白濁溶 液照射超音波後’過濾取出析出的固體，而獲得標記結晶 (38 mg)。 *H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4.10 (2Η, s), ® 5.33 (2H, s), 5.94 (2H, d, J=12.4Hz), 6.84-6.87 (1H, m), 6.97- 7.01 (2H, m), 7.06-7.10 (1H, m), 7.35 (2H, d, J=8.4Hz), 7.42 (2H, d, J=8.4Hz), 7.70-7.75 (1H, m), 8.15-8.18 (1H，m)，8.28-8.32 (2H, m)。 [實施例11]2-胺基-1-((膦酸氧基）曱基比啶 基氧基）曱基）苯基）曱基）-5-異p号唾基）〇比咬鑌一硝酸鹽 於室溫下，向2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）-3-(3-((4-((2-吼 啶基氧基）甲基）苯基）甲基）-5-異哼唑基）η比啶（50 mg)中加 入9%硝酸水溶液直至變為透明的溶液。濃縮後向殘渣中 加入水，過濾除去不溶物。將濾液濃縮，向殘渣中加入少 量的甲醇及丙_。進行濃縮，向殘渣中加入少量的乙醇並 照射超音波後，回流2分鐘。恢復至室溫，過濾取出所析 出的固體而獲得標記結晶（35 mg)。 !H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4.10 (2Η, s), 5.33 (2H, s), 5.98 (2H, d, J=13.6Hz), 6.86 (1H, d, J=8.4Hz), 6.97- 7.01 (2H, m), 7.09 (1H, dd, J=7.6, 7.6Hz), 7.35 (2H, d, 137275.doc • 99· 200934788 J=8.0Hz), 7.42 (2H, d, J=8.0Hz), 7.70-7.75 (1H, m), 8.15- 8.18 (1H, m)，8.26-8.34 (2H, m) e [實施例12]2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）-3-(3-((4-((2-^比啶 基氧基）甲基）苯基）甲基）-5-異哼唑基比啶鑌一氫溴酸鹽 將2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）-3-(3-((4-((2_"比啶基氧基） 甲基）苯基）甲基）-5-異噚唑基）吡啶鏽（50 mg)溶解於水（0,5 mL)、甲醇（0.5 mL)及2 N氫溴酸（0.3 mL)中。加入少量的 丙酮使溶液產生白濁，放置片刻。過濾取出析出的固體而 ® 獲得標記結晶（44 mg)。 !H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4.10 (2Η, s), 5.33 (2H, s), 5.98 (2H, d, J=13.2Hz), 6.84-6.87 (1H, m), 6.98-7.01 (2H, m), 7.09 (1H, dd, J=7.6, 7.6Hz), 7.35 (2H, d, J=8.0Hz), 7.42 (2H, d, J=8.0Hz), 7.70-7.75 (1H, m), 8.15- 8.18 (1H，m), 8.27-8.33 (2H，m)。 [實施例13]2-胺基·1_((膦酸氧基）甲基）-3-(3-((4-((2-吡咬 基氧基）甲基）苯基）曱基）-5-異噚唑基）吼啶鏽鈉鹽 使2-胺基-1 -((膦酸氧基）甲基）_3_(3_((4-((2-«比啶基氧基） 甲基）苯基）曱基）-5-異噚唑基）》比啶鑌（50 mg)懸浮於甲醇（3 mL)中，加入1 N氫氧化鈉水溶液（0.107 mL)。將該溶液於 室溫下攪拌2小時後，於減壓下進行濃縮。向其殘渣中加 入適量的丙酮，析出黃色結晶。過濾取出所析出的黃色結 晶，於減壓下於室溫下進行乾燥，獲得標記化合物（26 mg)。 'H-NMR Spectrum (D20) δ (ppm) : 3.96 (2H, s), 5Λ2 137275.doc 200934788 (2H, s), 5.62 (2H, d, J=2.3Hz), 6.60 (1H, s), 6.70 (1H, d, J=2.1Hz), 6.84-6.88 (2H, m), 7.21 (2H, d, J=1.8Hz), 7.29 (2H, d，J=1.8Hz)，7.27-7.59 (1H，m)，7.90-7.98 (3H, m)。 [實施例14]2-胺基((膦酸氧基）曱基）_3_(3_((4_((2_β比啶 基氧基）曱基）本基）甲基）_5_異ρ号嗤基）„比咬鏽半約鹽 使2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）比啶基氧基） 甲基）苯基）曱基）-5-異噚唑基）吡啶鏽（3〇 mg)懸浮於水（〇 5 mL)中，於室溫下加入1 N氫氧化鈉水溶液（0.064 mL)，繼 而加入乙酸鈣一水合物（5 6 mg)的水（〇.32 mL)溶液。將反 應混合物於室溫下整夜攪拌。利用離心機使所析出的結晶 /尤降從而與上清俛分離，用水（2 mL)清洗結晶2次，繼而 用丙酮（2 mL)清洗1次，獲得標記化合物（丨2 mg)。 ^-NMR Spectrum (CD3OD/D20=l/l) δ (ppm) : 4.13 (2Η, s), 5.29 (2H, s), 5.79 (2H, d, J=8.8Hz), 6.85 (1H, s), 6.88-6.90 (1H, m), 7.02-7.06 (2H, m)s 7.37 (2H, d, J=8.2Hz), Q 7*44 (2H, d, J = 8.4Hz), 7.74-7.78 (1H, m), 8.09-8.11 (1H, m)，8.17-8.19 (1H，m)，8.23 (1H，dd，J=l.6, 7.6Hz)。 [實施例1 5]2-胺基-i—((膦酸氧基）甲基）_3_(3_((4 ((2_π比啶 基氧基）曱基）笨基）曱基）_5-異噚唑基）β比啶鏽鐘鹽 使2-胺基-1 -((膦酸氧基）甲基）_3_(3_((4_((2_π比啶基氧基） 甲基）苯基）甲基）-5-異啰唑基）吼啶鏘（5〇 mg)懸浮於曱醇 mL)中，加入4 Μ氫氧化鋰水溶液（〇〇27 mL)。將其混合物 於室溫下攪拌20小時後，於減壓下進行濃縮。向其殘渣中 加入適量的丙酮，析出黃色結晶。過濾取出析出的黃色結 137275.doc -101· 200934788 晶，於減壓下於室溫下進行乾燥，獲得標記化合物（35 mg)。 ^-NMR Spectrum (D2〇) δ (ppm) : 3.96 (2Η, s), 5.13 (2H, s), 5.59 (2H, d, J=2.2Hz), 6.59 (1H, s), 6.71 (1H, d, J=2.1Hz), 6.79 (1H, t, J=1.8Hz), 6.85-6.88 (1H, m), 7.21 (2H, d, J=2.1Hz), 7.29 (2H, d, J=2.1Hz), 7.56-7.60 (1H, m), 7.88-7.94 (3H，m)。 [實施例16]2_胺基-1-((膦酸氧基）甲基）_3_(3_((4_((2_〇比啶 基乳基）甲基）苯基）曱基）-5_異》号β坐基）D比。定銪奸鹽 使2-胺基_ 1-((膦酸氧基）甲基）„比啶基氧基） 甲基）苯基）甲基）-5-異哼唑基）吼啶鏽（65 mg)懸浮於甲醇（3 mL)中’加入1 Μ氫氧化鉀（〇.107 mL)。將該混合物於室溫 下攪拌16小時後，於減壓下進行濃縮。向其殘渣中加入適 量的丙酮，析出黃色結晶。過濾取出析出的黃色結晶，於 減壓下於室溫下進行乾燥，獲得標記化合物（23 mg)。 φ H_NMR Spectrum (D20) δ (ppm) ： 3.96 (2Η, s), 5.12 (2H，s), 5.62 (2H, d，J=2.3Hz), 6·60 (1H, s), 6.70 (1H，d， J=2.1Hz)，6.85-6.88 (2H，m)，7.21 (2H，d，J=2.1Hz), 7.29 (2H, d, J=2.1Hz), 7.55-7.60 (1H, m), 7.90-7.92 (2H, m), 7.93-7.97 (1H，m)。 [實施例17]2-胺基-i_((膦酸氧基）曱基）_3_(3_((4_((2_e比啶 基氧基）甲基）苯基）甲基）異呤唑基）〇比啶鑌磷酸鹽 使2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）_3_(3_((4_((2_β比啶基氧基） 甲基）苯基）曱基）-5-異，号唑基）ti比啶鏘①幻懸浮於甲酵 137275.doc 200934788 (0.5 0 mL)、水（0_50 mL)中’於室溫下加入碟酸（85〇/〇，〇11 niL)使其溶解《向反應混合物中滴加丙酮（3 〇 mL)，製成 無色懸濁液。藉由傾析除去溶劑，獲得標記化合物（27 mg)。 ]H-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 4.16 (2Η, s), 5.38 (2H, s), 5.92 (2H, d, J=12.〇Hz), 6.87 (1H, s), 7.11 (1H, dd, J=7.0, 8.0Hz), 7.15 (1H, d, J=8.0Hz), 7.21 (1H, ddd, J=1.5, 6.0, 7.0Hz), 7.40 (2H, d, J=8.0Hz), 7.48 (2H, d, J=8.0Hz), 8.01 (1H, ddd, J=1.5, 7.0, 9.0Hz), 8.17-8.20 (2H, m)，8.29 (1H, dd，J=1.5, 8,0Hz) ° [實施例18]2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）-3-(3-((4-((2-吼啶 基氧基）曱基）苯基）甲基）-5-異哼唑基）吼啶鏽N-甲基-D-葡 萄糖胺鹽 使2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）-3-(3-((4-((2-吼啶基氧基） 曱基）苯基）甲基）-5-異哼唑基）《比啶鏽（30 mg)懸浮於水（1.0 mL)中，加入N-甲基-D-葡萄糖胺（99%，15.1 mg)及水（0.12 mL)使其溶解。將反應混合物減壓濃縮，向殘渣中加入曱 醇（1.0 mL)使其溶解。將溶液減壓濃縮後，加入丙酮（4.0 mL)，藉由傾析除去溶劑，獲得標記化合物（69%，27 mg)。 'H-NMR Spectrum (DMSO-de) δ (ppm) : 2.76 (3Η, s), 3.15 (1H, dd, J=9.5, 13.0Hz), 3.20 (1H, dd, J=3.5, 13.0Hz), 3.62-3.67 (3H, m), 3.71-3.76 (2H, m), 3.79-3.82 (3H, m), 4.05-4.10 (2H, m), 4.12 (2H, s), 5.28 (2H, s), 5.79 (2H, d, 137275.doc •103· 200934788 J=9.0Hz), 6.83 (1Η, s), 6.88 (1H, d, J=8.5Hz), 7.01-7.05 (2H, m), 7.36 (2H, d, J=8.0Hz), 7.43 (2H, d, J=8.0Hz), 7.72-7.78 (1H，m)，8.09 (1H, dd，J=l.5, 5.0Hz), 8·17 (1H， dd，J=1.5, 6_5Hz)，8.20 (1H，dd，J=1.5, 7.5Hz)。 [實施例19]2-胺基_丨_((膦酸氧基）甲基）_3_(3_((4_((2_„比啶 基氧基）甲基）笨基）甲基）_5_異号嗤基户比咬鑌一離胺酸鹽 將2-胺基-1-((膦酸氧基）甲基）比啶基氧基）

Ο 曱基）苯基）曱基）-5-異呤唑基）吡啶鏽（5〇 mg)及L-離胺酸 (15.6 mg)溶劑於甲醇（2 mL)及水（1 mL)中，繼而將溶劑減 壓濃縮。向殘渣中加入乙醇（丨mL)，使固體懸浮並過濾取 出。將所得固體溶解於甲醇中，然後進行濃縮。向殘渣中 加入少量的甲醇，加溫至60〜7(TC。待固體暫時溶解後， 有結晶析出’因此將其過濾取出而獲得標記結晶（25 mg)。 ^-NMR Spectrum (DMSO-d6) δ (ppm) : 1.25-1.42 (4Η m), 1.53-1.62 (2H, m), 1.72-1.80 (2H, m), 2.86 (2H t J=8.0Hz), 3.59 (1H, t, J=5.6Hz), 3.95 (2H, s), 5.1〇 (2H s) 5.62 (2H, d, J=9.2Hz), 6.58 (1H, s), 6.67 (1H, d, J=8.4Hz) 6.82-6.88 (2H, m), 7.19 (2H, d, J=7.6Hz), η 2i ’ (2H，d， J=7.6Hz), 7.53-7.58 (1H, m), 7.86-7.91 (2H, η gj ’ d，J=7.2Hz)。 （1H’ (粉末X射線繞射測定） 以研缽將試樣 進行測 對於實施例中獲得之各結晶及各非晶質 約5 mg粉碎後，置於測定用鋁锅中並於以下條件下 137275.doc •104· 200934788 定。 使用裝置：X射線DSC系統：TTR-ΙΙΙ(理學電機股份有限 公司製造） 使用X射線：CuKo:射線 測角器：TTR-ΙΙΙ水平測角儀 計數器：閃爍計數器 樣品盤：鋁 靶材：Cu

® 管電壓：50 kV 管電流：300 mA 掃描速度：2.000°/min 掃描軸：2 Θ / 0 掃描範圍：20 =2.000 〜35.000。 發散狹縫：0.5 mm 發散縱向限制狹縫： 2 mm 散射狹縫：開放 接收狹縫：開放 取樣寬度：0.02° 累計次數：1 將各實施例中所得各結晶及各非晶質之粉末X射線繞射 圖案分別示於圖1〜圖14，將上述各結晶之繞射角（2 Θ )的 代表性峰值及相對強度示於表1。 137275.doc •105· 200934788 [表l] 實施例 結晶自由體無水物1型 自由體無水物2型 自由體無水物3型_自由體水合物 峰值繞射角 (20) 相對強度 峰值繞射角 (2Θ) 相對強度 峰值繞射角 (20) 相對強度 峰值繞射角 (20) 相對強度 4.08 100 3.74 100 3.860 100 4.46 100 8.24 31 9.98 34 17.800 57 7.16 54 9.20 14 17.38 71 18.240 23 7.86 52 16.54 95 18.22 52 18.52 99 17.06 100 實施例 結晶 自由體乙酸鹽 自由體非晶質 峰值繞射角 (2 0) 相對強度 峰值繞射角 (20) 相對強度 2.72 100 16.60 13 18.10 25 實施例 結晶 一鹽酸鹽 半硫酸鹽 硝酸鳋 氫溴酸鹽 峰值繞射角 相對強度 峰值繞射角 (2Θ) 相對強度 峰值繞射角 (2Θ) 相對強度 峰值繞射角 (2 0) 相對強度 6.26 67 7.84 52 11.88 83 12.40 29 12.54 56 19.42 100 12.22 69 17.82 16 20.38 100 20.24 59 16.7 75 20.20 100 21.14 62 19.72 100 21.52 62 21.5 75 Ο 實施例 結晶 鈉盥 半鈣里_竺f 峰值繞射角 (20) 相對強度 峰值繞射角 (2Θ) 相對強度 峰值繞射角 (2 0) 相對強度 峰值繞射角 (2Θ) 相對強度 2.32 100 3.78 56 2.10 100 2.10 100 4.60 6 14.36 37 4.36 15 4.30 12 15.78 34 10.88 7 10.98 6 18.22 100 18.44 60

根據小鼠念珠菌（candida)全身性感染試驗可知，以式⑴ 所表示之本發明化合物使得平均存活天數顯著地改善’進 而物性尤其是對水的溶解性及水溶液中的穩定性以及安全 -106 - 137275.doc 200934788 性方面亦優異，因而作為真菌感染症之預防劑或治療劑極 為有用。 1.對水的溶解性之比較試驗例 對母化合物即參考例1所記載之3-(3-(4-(吡啶-2-基氧基 曱基）苄基）異喝唑-5-基）吡啶-2-基胺與實施例1之化合物於 25 C下在Britton-Robinson緩衝液（離子強度為0.3)中的溶解 度進行比較。表2表示其結果。 [表2] 溶解性(mg/mL) pH5 pH7 pH8 pH9 母化合物 <0.1 <0.1 <0.1 <0.1 賞施例1之化合物 1.9 10.5 16.4 >21.1

由表2所示結果判明，實施例1之化合物與其母化合物相 比’於各種pH區域中對水的溶解性顯著增大。 [藥理試驗例] 2.小鼠念珠菌全身性感染實驗 〇 (1)接種菌液之製備 將C. albicans E81022菌株於沙氏葡萄糖瓊脂培養基 (Difco公司）中於35。〇下靜置培養24小時將回收的菌體懸 浮於滅菌生理食鹽水（大塚製藥）中。以血球計算盤對菌數 進行計數’將以使菌數成為2xl07 cells/mL之方式用滅菌 生理食鹽水進行稀釋者作為接種菌液。 (2)感染 將接種菌液0·2 mL接種至小鼠尾靜脈中（4 X 106 137275.doc •107· 200934788 cells/mouse)。 (3) 藥劑溶液之調整及治療 將實施例1之化合物以13 mg/mL及3.25 mg/mL溶解於 pHIO的50 mM甘胺酸緩衝液（和光純藥工業）中，然後以5% 葡萄糖（大塚製藥）稀釋10倍。於菌接種30分鐘後以及9小時 後，將藥劑溶液0.2 mL投予至尾靜脈内。將藥劑投予量設 定為2.5及10 mg/kg(活性體換算），一組之動物數為5隻。 (4) 效果之判定 〇 感染防禦效果，係藉由觀察動物的生死直至感染後14 天，並計算平均存活天數而加以判定。 利用2.中所記載之測定法，測定實施例1之化合物對念 珠菌全身感染的防禦效果。根據其結果可明瞭，如表2所 示，投予實施例1之化合物的小鼠與非投予組相比較，生 存時間較長，實施例1之化合物於活體内（in vivo)顯示感染 防禦效果。 [表3]

表3念珠菌感染實驗中之平均存活天數 投予群 對照組 實施例1之化合物3.25 mg/kg (活性體換算2.5 mg/kg) 實施例1之化合物 13 mg/kg (活性體換算10 mg/kg)

平均存活天數 2A 再者，實施例1之化合物，於活體外（in vitro)相對於母 化合物（參考例1)而言僅顯示1/1 00以下的活性。由此表 示，實施例1之化合物於生物體内係作為前驅藥而發揮作 137275.doc -108- 200934788 用。 3.小鼠體内之藥物處置評價 (1) 投予液之製備 將實施例1之化合物以0.45 mg/mL溶解於ρΗ9之50 mM甘 胺酸緩衝液（和光純藥工業）中，將活性體以0.45 mg/mL溶 解於含有5%葡萄糖（大塚製藥）之10 mM鹽酸溶液（和光純藥 工業）中。 (2) 投予、採血及血漿採取 ❾ 使用5週齡之雌性ICR系小鼠（Charles River Laboratories

Japan)，將2隻作為1組，將本發明化合物及活性體以3 mg/kg的投予量投予至尾靜脈内。於投予後0.25、0.5、 1.5、3、5、8小時穿刺入尾靜脈，以經肝素處理之吸管採 取血液。將採取之血液置入取樣管中並於冰浴冷卻下保 存，然後於4°C下、以10,500 xg進行5分鐘離心分離。準確 分取出5 μι所得血漿，保存於-20°C下直至分析時。 (3) 血漿濃度測定法 實施例1之化合物及活性體之血漿濃度，係使用液相層 析質量分析計（LC-MS)進行測定，並利用内標準法 (internal standard method)進行定量。將丙味井鹽酸鹽 (Imipramine Hydrochloride)(SIGMA)以濃度達到 0.5 μπιοΙ/L 之方式溶解於乙腈與甲醇（1: 1)的混合溶液中，而製備内 標準物質溶液（IS溶液）。將血漿融解後，加入IS溶液50 pL 並加以混合，於4°C下、以1500 xg進行10分鐘離心分離（除 蛋白）後，利用LC-MS(Waters)分析上清液。於所得層析圖 137275.doc -109- 200934788 中，以MassLynx(Waters)來分析實施例1之化合物及其母化 合物即活性體化合物之峰以及與内標準物質相對應之峰的 面積，以内標準法計算血漿中所含化合物的濃度。 以3·中記載之測定法測定實施例1之化合物及活性體的 血漿濃度。其結果如圖15所示，實施例1之化合物的血漿 濃度於投予後迅速下降，活性體的血漿中濃度自投予實施 例1之化合物後起立即迅速上升，並顯示與投予活性體時 相類似的血漿濃度變化。由以上内容說明，實施例1之化 〇 合物於小鼠體内迅速轉變為活性體。 4.狼子體内之藥物處置評價 (1) 投予液之製備 將實施例1之化合物以1.5 mg/mL溶解於pH9的50 mM甘 胺酸緩衝液（和光純藥工業）中，將其母化合物即活性體以i mg/mL溶解於含有5%葡萄糖（大塚製藥）的1〇 鹽酸溶液 (和光純藥工業）中。 (2) 投予、採血及血漿採取 使用5歲之雄性食蟹猴（GFD) ’將2隻作為卜组，將實施例 1之化合物及活性體以〇 .4 mg/kg的投予量投予至橈骨皮靜 脈内。於投予後0.25、0.5、1、2、4、6小時，利用經肝素 處理的注射器自橈骨皮靜脈進行採血。於採血後將血液置 入取樣管中並於冰浴冷卻下保存，然後於4〇c下以1〇 5〇〇 xg進行5分鐘離心分離。準確分取出5〇吣所得血漿於 -20°C下保存直至分析時。 (3) 血漿濃度測定法 137275.doc •110- 200934788 實施例1之化合物及活性體之血漿濃度，係利用液相層 析質量分析計（LC-MS)進行測定，並利用内標準法進行定 量。將丙咪畊鹽酸鹽（SIGMA)以濃度達到〇·5 μηιοΐ/L之方 式溶解於乙腈與曱醇（1 : 1)的混合溶液中，製備内標準物 質溶液（IS溶液）。將血漿融解後，加入IS溶液200 pL並加 以混合’於4C下、以1500 xg進行10分鐘離心分離（除蛋 白），然後以LC-MS(Waters)分析上清液。於所得層析圖 中，利用MassLynx(Waters)來分析實施例1之化合物及活性 ® 體化合物之峰以及與内標準物質相對應之峰的面積，以内 標準法計算金漿中所含化合物的濃度。 以4.所述之測定法測定實施例1之化合物投予後之活性 體的血漿濃度。其結果如圖16所示，自實施例1之化合物 投予後起活性體的jk漿濃度立即迅速上升，並顯示與活性 體投予時相類似的血漿濃度變化。再者，實施例1之化合 物的血楽_濃度係在 >(貞測極限以下。由以上内容說明，實施 0 例1之化合物於猴體内迅速轉變為活性體。 本申請案係基於2007年12月27日向美國專利商標局提出 申請之美國臨時專利申請案號第61/〇17,〇53號、以及2〇〇7 年12月27日向日本國專利廳提出申請之日本專利申請案 (特願2007-33 6977)，其内容以參照的方式併入本文。 [產業上之可利用性] 根據本發明’式（I)、（IA)或（IB)所表示之本發明化合 物，1)基於真菌的GPI合成抑制作用而抑制細胞壁表層蛋 白質的表現，且抑制細胞壁組合並且抑制真菌對細胞的附 137275.doc -111· 200934788 著，使病原體無法發揮病原性，藉此對感染症之發病、進 展、持續顯示效果；2)物性尤其是在對水的溶解性及水溶 液中的穩定性以及體處置及安全性方面亦優異，因而作為 真菌感染症之預防或治療劑極為有用。 【圖式簡單說明】 圖1表示本發明實施例2中獲得之2-胺基-1-((膦酸氧基）曱 基）-3-(3-((4·((2-η比啶基氧基）甲基）苯基）甲基）·5異嘮唑基） 吼啶鏽無水物（1型）之χ射線繞射圖案。 © 02表示本發明實施例3中獲得之2-胺基小((膦酸氧基）甲 基）-3-(3-((4-((2•吼啶基氧基）曱基）苯基）曱基）·5•異噚唑基） 〇比啶鏽無水物（2型）之X射線繞射圖案。 圖3表示本發明實施例4中獲得之2-胺基-1-((膦酸氧基）甲 基）-3-(3-((4-((2-吼啶基氧基）曱基）苯基）甲基）_5_異噚唑基） °比啶鏽無水物（3型）之X射線繞射圖案。 圖4表示本發明實施例5中獲得之2 -胺基-1-((膦酸氧基）甲 φ 基）-3-(3-((4-((2-。比啶基氧基）甲基）苯基）甲基）_5_異噚唑基） °比啶鏽水合物之X射線繞射圖案。 圖5表示本發明實施例6中獲得之2-胺基-1-((膦酸氧基）甲 基）·3-(3-((4-((2·°比啶基氧基）甲基）苯基）甲基）-5-異啰唑基） 〇比啶鑌乙酸鹽之X射線繞射圖案。 圖6表不本發明實施例7中獲得之2-胺基-1-((膦酸氧基）甲 基）-3-(3-((4_((2-。比啶基氧基）甲基）苯基）甲基）_5_異吟唑基） 〇比啶鏽非晶質之X射線繞射圖案。 圖7表示本發明實施例8中獲得之2-胺基-1-((膦酸氧基）甲 137275.doc -112- 200934788 基）-3-(3-((4-((2-吼啶基氧基）甲基）苯基）甲基）5異嘮唑基） 吼啶鏘一鹽酸鹽之χ射線繞射圖案。 圖8表不本發明實施例10中獲得之2-胺基-1-((膦酸氧基） 曱基）-3-(3-((4-((2_D比啶基氧基）曱基）苯基）曱基）_5_異噚嗤 基）°比啶鏽半硫酸鹽之X射線繞射圖案。 圖9表示本發明實施例11中獲得之2-胺基-1-((膦酸氧基） 甲基）-3-(3-((4-((2-咐啶基氧基）曱基）苯基）曱基）_5_異噚唑 基比咬鏽一硝酸鹽之χ射線繞射圖案。 圖1〇表不本發明實施例丨2中獲得之2-胺基-1-((膦酸氧基） 曱基）-3-(3-((4-((2•吼啶基氧基）甲基）苯基）曱基）_5•異噚唑 基）"比咬鑌一氫溴酸鹽之X射線繞射圖案。 圖11表不本發明實施例13中獲得之2_胺基_丨_((膦酸氧基） 甲基）-3-(3-((4-((2-。比啶基氧基）甲基）苯基）曱基）_5_異噚唑 基）°比啶鏘鈉鹽之X射線繞射圖案。 圖12表示本發明實施例14中獲得之2_胺基膦酸氧基） 甲基）-3-(3-((4-((2-〇比啶基氧基）甲基）苯基）曱基）_5_異呤唑 基比啶鑌半鈣鹽之X射線繞射圖案。 圖13表示本發明實施例15中獲得之2_胺基_丨（(膦酸氧基） 曱基）-3-(3-((4-((2-〇比啶基氧基）甲基）苯基）曱基）_5_異噚唑 基）此啶鏽鋰鹽之X射線繞射圖案。 圖14表示本發明實施例16中獲得之2胺基_丨_((膦酸氧基） 甲基）-3-(3-((4-((2-吼啶基氧基）曱基）苯基）曱基）_5_異嘮唑 基）"比啶鏘鉀鹽之X射線繞射圖案。 圖1 5係表示於本發明一實施形態中測定於小鼠體内的藥 137275.doc -113- 200934788 物處置評價法中所測定之實施例1之化合物及其母化合物 即活性體的血漿濃度之結果之圖。 圖I6係表示於本發明另一實施形態中測定於猴體内的藥 物處置評價法中所測定之實施例1之化合物及其母化合物 即活性體的血槳濃度之結果之圖。

❹ 137275.doc • 114·

Claims (1)

1. 200934788 十、申請專利範圍： 1· 一種化合物或其鹽，該化合物係以下式⑴所表示 [化1]

   式中， Rl表示氫原子、_素原子、胺基、RU-NH-(R"表示Ci 烧基經基Ci·6烧基、Ci·6院氧基Ci·6炫基、或q 6燒氧 基羰基CN6烷基）、ri2_(c〇)_nh(r12表示Cl 6烷基或Cl 6 烷氧基Cw烷基）、Ci 6烷基、羥基Ci·6烷基、氰基烷 基、Ci.6烷氧基、或Cl 6烷氧基Cl 6烷基； R表示氫原子、Cl.6烷基、胺基、或二Ci 6烷基胺基； X及Y中之者表示氮原子，另一者表示氮原子或氧原 子； ' 環A表示亦可具有1個或2個鹵素原子或Ci_6烷基之五員 或六員之雜芳環或苯環； Z表示單鍵、亞甲基、伸乙基、氧原子、硫原子、 -CH20- ' -OCH2- > -Νη_ λ .Ch2NH- > -NHCH2- ' -ch2s-、或-sch2-; R表不氫原子、_素原子、或亦可具有i個或2個分別 選自取代基群《中的取代基之Ci_6烷基、c3_8環烷基、 C6_1Q芳基、五員或六員之雜芳基、或者五員或六員之非 137275.doc 200934788 芳香族系雜環基； 表示迴1原子或函素原子； [取代基群α] 鹵素原子、氰基、Ci_6烷基、Ci 6烷氧基、Ci·6烷氧基 羰基、匚3.8環烷基、c26烯基、及c2_6炔基。 如請求項1之化合物或其鹽，其中以上述式⑴所表示之 化合物之鹽為以式（IA)所表示之鹽： [化2]

   上式（IA)中，q-表示藥學上容許之陰離子。 如凊求項1之化合物或其鹽，其中以上述式⑴所表示之 化合物之鹽為以式（IB)所表示之鹽： Ο [化3]

   上式（IB)中，J+表示藥學上容許之陽離子。 如請求項1至3中任一項之化合物或其鹽，其中以上述式 ⑴、（认）或（18)中之下式（11)所表示之部分結構： 137275.doc 200934788 [化4] ❹ 其係選自下述群中之 (丨丨 部分結構者：

   5. 如明求項山中任一項之化合物或其鹽，其中X及γ中之 一者為氮原子，另一者為氧原子。 6. 如°月求項4之化合物或其鹽，其中以下式（I)、（IA)或（IB) 中之（Π)所表示之部分結構： [化6] (11) 其係以下式（III)所表示之部分結構者： [化7]

   或下式（IV)所表示之部分結構者 [化8]

   (IV) 137275.doc 200934788 如凊求項1至3中任—項之化合物或其鹽，其中乂及¥均為 氮原子。 8.如請求項7之化合物或其鹽，其中以下式⑴、（ia)或⑽ 中之下式（II)所表示之部分結構： [化9]

   其係以下式（V)所表示之部分結構者： [化 10]

   (V) 或以下式（VI)所表示之部分結構者： [化 11]

   (VI) ❹ 9.如請求項丨之化合物或其鹽，其中R2為胺基。 10·如請求項9之化合物或其鹽’其W為：原子、胺基、 烷氧基cK6烷基。 U.如請求項1之化合物或其鹽’其中汉1為胺基、V為氫原 ，其中環A為吡啶環、 〇 鹽’其中環A為吡啶 苯環、 環或笨 12. 如請求項1之化合物或其鹽 呋喃環、噻吩環、或他咯環 13. 如請求項12之化合物或其 環。 137275.doc 200934788 14.如叫求項1之化合物或其鹽’其中Z為氧原子、-ch2o-、 或-〇CH2-。 15·種化合物或其鹽，該化合物係以下式所表示之2_胺基_ 膦酸氧基）甲基）-3-(3-((4-((2-"比啶基氧基）罗基）苯基） 甲基）-5-異呤唑基）吡啶鏘： [化 12]

   合物或其鹽。 17種醫藥，其含有如請求項1至15中任一項之化合物 或其鹽。 G Q •種抗真菌劑，其係將如請求項1至1 5中任一項之化合 物或其鹽作為有效成分者。 19·種如凊求項1至15中任一項之化合物或其鹽之用途， 其係用於製造抗真菌劑。 137275.doc