TW200846005A

TW200846005A - 6-oxo-6,7-dihydro-5H-dibenzo[b,d]azepin-7-yl derivatives

Info

Publication number: TW200846005A
Application number: TW097103532A
Authority: TW
Inventors: Alexander Flohr; Roland Jakob-Roetne; Wolfgang Wostl
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 2007-02-02
Filing date: 2008-01-30
Publication date: 2008-12-01
Also published as: IL199973A0; CL2008000254A1; MX2009007864A; PE20081662A1; US20080188463A1; BRPI0807341A2; AU2008209861B2; KR20090104916A; AU2008209861A1; WO2008092786A1; KR101150574B1; EP2109604A1; CA2676160A1; US7544679B2; AR065129A1; CN101622232A; JP2010517954A

Description

200846005 九、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明係關於一種6-酮-6,7-二氫- 5H-二苯并[b，d]氮坪- 7-基衍生物，其結構式為：

其中 r1為氫或經i素取代的低碳數烷基； R2 為低碳數烷基； R3為經鹵素取代的低碳數烷基、-(CH2)n-環烷基或 _(CH2)n-苯基，其中苯環係未經取代或經鹵素取代； η 為0、1或2 ; 及係關於在醫藥上適用的光學純差向異構物或其等的混合物。【先前技術】如文中所用，術語”低碳數烷基”指含丨至7個碳原子的飽和直鏈或支鏈烷基，例如，曱基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、2-丁基、第三丁基等。優先選擇的低碳數烷基為含1-4個碳原子的基團。術語’’經i素取代之低碳數烷基”指如上定義的烷基，其中至少一個氫原子係經鹵素取代，例如CF3、CHF2、 CH2F、CH2CF3、CH2CH2F、CH2CF2CF3、CH2CF2CH3、 CH2CH2CF2CF3、ch2ch2cf3、ch2ch2ch2cf3和彼等以下 128432.doc 200846005 實例之化合物所闡述經鹵素基取代之丙…展戊基或環己基。優先選擇的環烷基為環丙基。

已發現通式I化合物為γ_分泌酶抑制劑且可用於治療阿兹海默病或常見癌症，包括（但不限獅）宮頸癌、乳線癌和也液糸統惡性腫瘤。結構Μ化合物用於藥物中的好處在於其較高之γ-分泌酶抑制性以及與如w〇 2,/㈣Μ中所揭示之化合物相比有較好的熱溶解性。阿兹海默病（AD)是老年癡呆最常見的原因。AD的病理特點為腦澱粉樣沉積在細胞外斑中及細胞内神經纖維纏繞:澱粉樣斑主|由殿粉樣多肽（Αβ多肽）組成，㉚粉樣多肽係經由一系列蛋白分解裂解步驟源自卜澱粉樣前驅體蛋白（ΑΡΡ)。6確認數種Αρρ形式，#中大多數係胺基酸長度為695、751和770個之蛋白質。他們全部是經由不同剪接由單一基因所得到。Αβ多肽係衍生自Αρρ之同一部分但其Ν-及C-末端不同，主要種類為具4〇和42個胺基酸長度者。 & 經由2種蛋白分解酶，即卜和γ_分泌酶之連續作用而由 ΑΡΡ得到Αβ多肽。β_分泌酶先在跨膜區（ΤΜ)正外側之Αρρ 的、、、田胞外區進行裂解以生成Αρρ含ΤΜ-和細胞質區（CTFp) 的C-末端片段。·分泌酶的受質，分泌酶係分解 ΤΜ中多個相鄰位置而產生Αβ多肽和細胞質片段。大多數 Αβ多肽具40個胺基酸（Αβ40)長度，少數種類於其匕末端另附有2個胺基酸。後者被認爲是更具致病性的丨殿粉樣多 128432.doc 200846005 肽。 β·为/必酶為一種典型的天冬胺酸蛋白酶。了_分泌酶具有由多個蛋白組成之蛋白分解活性，其確實組成尚未完全了解。但是’早老素為這種活性的主要成分且代表一組新的 . 非典型天冬胺酸蛋白酶，其等在其等受質的TM中裂解且其等自身為多源膜蛋白。γ_分泌酶之其他主要成分爲 nicastrin和aphl和pen-2基因。獲證明為γ-分泌酶之受質為 • ΑΡΡ和Notch受體家族之蛋白，但是，γ_分泌酶的受質特異性不強且可進一步裂解與ΑΡΡ和Notch無關的膜蛋白。 γ-分泌酶活性為Αβ多肽之纽造絕對需要的。這點已藉由 la傳方法’即早老素基因的切除和低分子量抑制性化合物表現出來。因為根據ad之澱粉樣假説，Αβ的產生及沉積為疾病之根本原因，因此認爲γ_分泌酶之選擇性及效力抑制劑將可用於預防及治療ad。因此’本發明化合物將藉由阻礙γ-分泌酶的活性及減少 _ 或預防多種澱粉樣Αβ多肽的形成而有效治療AD。很多文獻敍述了目前對γ-分泌酶之抑制的認識，如下列刊物：自然评論/神經系統（Nature Reviews/Neuroscience)，Vol. 3, ^ April 2002/281，生物化學協會學報（Biochemical Society Transactions)(2002)， Vol. 30. part 4? 醫藥化學當前論題（Current Topics in Medicinal Chemistry), 2002, 2, 371-383， 128432.doc 200846005 當今醫藥化學（Current Medicinal Chemistry)，2002，Vol. 9, No· 11，1087-1106，藥物開發研究（Drug Development Research)，56，21 1-227, 2002，今曰藥物發現（Drug Discovery Today)，Vol. 6，No. 9，May 2001， 459-462，歐洲生化學會聯合會快報（FEBS Letters)，483,（2000)，6-10, 科學（Science)，Vol. 297, 353-356, July 2002 及醫藥化學雜諸（Journal of Medicinal Chemistry)，Vol. 44,

No. 13, 2001，2039-2060。【發明内容】本發明目的為結構式I化合物本身，結構式I化合物或其等在醫藥上適用的光學純差向異構物或其等的混合物於製造用於治療涉及γ-分泌酶抑制之疾病之醫藥品的用途，，其等之製造，以根據發明化合物為主的醫藥品，其等之生産和結構式I化合物用於控制或預防阿茲海默病或癌症的用途。本發明之另一個目的為結構式I化合物之所有類型的光學純差向異構物或其等的混合物。優先選擇的結構式Ϊ化合物係彼等R1為氫原子且R3為經鹵素取代之低破數烧基者，例如下列化合物： (R/S)-2-羥基-2-曱基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5Η-二苯并[b，d] 氮呼·7-基）·^’-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-丙二醯胺， (R)-2-輕基-2-曱基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫- 5H-二苯并[b，d]氮 128432.doc 200846005 呼-7-基）-^[-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）_丙二醯胺， (S)-2-羥基-2-甲基善（⑻_6_酮_6，二氫_5H_二苯并巧川氮坪-7·基）-N -(2,2,3,3,3-五氟-丙基）_丙二酿胺， (R/S)-2-羥基-2-甲基-N_((s)_卜酮 _6,7·二氫-5H_二苯并 ^，引氮呼-7-基）-N’-(3,3,3-三氟-丙基）·丙二醯胺， (S)-2-羥基-2-甲基 _N-((S)-6〜W -6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基）-Ν’-(3,3,3·三氟-丙基）_丙二醯胺， (R)-2-乙基-2-羥基·Ν_((8)-6•酮-6,7-二氫 _5Η_二笨并[b，d]氮呼-7-基)-N’-(2,2,2-三氟-乙基）_丙二醯胺， (R/S)-2-羥基 _N-((S)-6-酮-6,7_二氫-5H_二苯并[b，d]氮呼 _7一基)-N-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-2_丙基_丙二醯胺， (R) -2-羥基-N-((S)-6-_ -6,7_ 二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼_7-基）-N-(2,2,3，3,3-五氟-丙基）_2_丙基-丙二醯胺或 (S) -2_ 羥基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7· 基）-N-(2,2,3,3,3-五氟-丙基>2-丙基_丙二酿胺。其他優先選擇的結構式I化合物另外為彼等Ri為經鹵素取代之低碳數烷基且R3為經_素取代之低碳數烷基者，例如以下化合物： (R) -2-羥基1甲基[⑻冬酮·5_(2,2,2_三氟-乙基）·6,7-二氫-511-二苯并[1^]氮呼-7_基]善（2,2,3,3,3_五氟，基）-丙二醯胺或 (S) -2-經基-2·曱基卜酮 _5_(2,2，三氟-乙基）·6,7_ 二氮-5Η·二苯并[b,d]氮呼·7_基]界(2,2,2_三氟_乙基）·丙二醯胺0 128432.doc -10- 200846005 本發明結構式i化合物和其等在醫藥上可接受的鹽可藉由技術中已知方法，如藉由以下闡述方法製備，該等方法包含 a)令結構式II化合物 0

II 與結構式III化合物反應

HO

III 生成結構式I化合物

其中取代基有如上所述的意思或 b)令結構式IV化合物

RV

和分子式為NH2R3之胺反應生成結構I化合物

128432.doc -π - 200846005 其中取代基有如上所述的意思，且，如果需要，將結構式1化合物之差向異構形式之混合物 (R/S)轉變為差向異構物（R)和差向異構物（s)。【實施方式】 • 詳細敍述可在以下和實例1-14中找到。結構式„化合物的起始物為-牙重已知化合物且結構式出之胺係&流程2所述般製備。流程1

口構式II化口物和結構式m化合物溶於溶劑中，如四氮咬喃之溶液係在室γ π & ,々# # 皿下’、1 -經基-本弁三唾水合物、二異丙基乙胺和Ν-(3-二甲夷 ^ 土基丙基·乙基-碳二亞胺鹽酸鹽反 …寺4夜檀掉。蒸顧去除溶劑且以乙酸乙醋/庚院於石夕膠上進行㈣得職構式m合物。 128432.doc 12 200846005 流程2

結構式III化合物之製備

將空氣吹入結構式V之二烷基丙基丙二酸酯和碳酸絶之 —甲基曱醯胺懸浮液中。在約10_2(rc下加入水且在室溫下持續攪拌約3小時。然後去除二甲基甲醯胺。加入水且經二乙醚提取得到結構式VI之單烷基酯。、、、。構式VI之單烷基酯係溶於四氫呋喃中且冷卻至。加入1-羥基-苯并三唑水合物、二異丙基乙胺和N_(3•二甲土私：基丙基乙基-碳二亞胺鹽酸鹽且在室溫下持續攪拌約4天。然後加入含水的鹽酸。在提取和純化後後得到結構式VII化合物。心所得到結構式VII化合物之差向異構形式的混合物可以系用方式利用異丙醇/庚烷1〇/9〇於Chiralpak AD上進行層析而分離成差向異構物R和S。 I28432.d〇c •13- 200846005 結構式III之酸的製備如下：在室溫下隔夜攪拌溶於水之氫氧化鋰溶液及溶於四氫呋喃之上個步驟中第一個洗提出之對映體的結構式化合物在室溫下隔夜攪拌。先以水/二乙醚提取，然後以含水鹽酸/乙酸乙酯提取而得到結構式HI之所需酸。結構式I化合物之製備將結構式II之7-胺基-5H，7H_二苯并[b，d]氮呼-6_酮和結構式VHb合物之四氫呋喃溶液冷卻至〇〇c，並加入〗_羥基_ 苯并三唑水合物、二異丙基乙胺和N_(3-二甲基胺丙基 N’·乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。在室溫下持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑和層析後，得到結構式Vin化合物。再將所得溶於四氫呋喃中之結構式¥111化合物和溶於水中之氫氧化鋰的混合物在室溫下隔夜攪拌。蒸發溶劑且提取殘留物以得結構式V之酸。然後將結構式ν化合物和相應胺之四氫呋喃溶液冷卻至〇°c並加入i _羥基-笨并三唾水合物、二異丙基乙胺和Ν·(3_二甲基氨丙基）_N，_乙基·碳二亞胺鹽酸鹽。持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並於矽膠上進行層析以得結構式I之所需化合物。本發明化合物有兩個立體中心。其以差向異構形式之混合物存在。一者總是為s-差向異構物，另一者為R、s或 RS差向異構物。分離成所需差向異構形式可根據本身已知方法在合成早期階段或最好在後期階段藉由層析分離非對映體產物進行。按照以下所提供之實驗研究化合物。 128432.doc -14- 200846005 γ-分泌酶分析之描述

測試化合物之活性可在測量藉由γ•分泌酶活性裂解適宜受質之分析中獲得評估。這些分析可為細胞分析’如γ-分泌酶之受質在其細胞質區中融合成一轉錄因子。細胞係經這種融合基因和報導基因，如螢火蟲螢光素 -、專糸’、表達因轉錄因子而提高。以γ-分泌酶裂解已融口又貝將產生可以適宜分析監控之報導基因的表達。也可在體外無細胞分析中確定γ-分泌酶的活性，其中如含分泌酶複合物的細胞溶解產物係經適宜的ΑΡΡ-衍生受質培養，其中該受質係被裂解成Αβ多肽。所產生的多肽數量可以特異ELISΑ分析確定。神經元之細胞株分泌Αβ多肽，該夕肽可經由特異ELISA分析量得。使用抑制γ_分泌酶之化合物進行處理會減少所分泌之Αβ，因此提供一種抑制方法0 γ-分泌酶活性之體外分析係使用ΗΕΚ293膜餾分作爲丫_分泌酶來源和重組ΑΡΡ受質。後者係由人體APPiC_末端1〇〇個胺基酸融合至六聚組胺酸（6xHistidin)尾端組成以用於純化’其在大腸桿菌中係以一可調控表達載體，如pEtl 5表達。這種重組蛋白質相當於胞外區之γ-分泌酶裂解後所產生的截斷ΑΡΡ片段且該片段構成γ-分泌酶受質。Li ΥΜ 等，PNAS 97(11)，6138-6143(2000)中描述了分析原理。以機械方式破壞Hek293細胞且藉由差速離心分離微粒體部分。該等膜在洗滌劑（0.25% CHAPSO)中溶解且經APP受質培養。經由γ-分泌酶裂解受質所產生之Αβ多肽可藉由 128432.doc 15 200846005

Brockhaus Μ等，Neuroreport 9(7)，1481-1486 (1998)中所描述之特異ELISA分析檢測。較佳化合物顯示IC5G<700 (nM)。在下列表格中顯示了對 γ-分泌酶抑制的數據：實例編號體外ic50 (nM) 實例編號體外ic50 (nM) la (R/S) 4 7a (R/S) 6 lb(R) 2 7b (R) 4 lc(S) 3 7c (S) 5 2a (R/S) 10 8d (R/S) 15 2b (R) 38 9 (R/S) 630 2c (S) 5 10 (R/S) 41 3a (R) 260 11a (R/S) 136 3b (S) 11 11b (R) 13 4a (R/S) 89 12a (R/S) 11 4b (S) 8 12b (R) 3.5 5c (R/S) 110 13a (R) 480 6a (R/S) 15 13b (S) 5 6g (R 或 S) 118 14 (R/S) 30 6h(S 或 R) 50 此外，本發明化合物已於THESA分析中測試以確定熱力學溶解度。 THESA分析：室溫（22.5=tl°C)下，加入過量之約2 mg之每種化合物至 5 0 mM磷酸鹽緩衝液中。將每個樣品置於微量分析試管中，使其超音波處理1 h並攪拌2 h。隔夜靜置所有的懸浮液。次日，使用pH計測量所有的pH值並經Micronic濾板 128432.doc -16- 200846005 (MSGVN2250)過濾樣品以從溶液中分離出固體物質。然後，以HPLC分析所有溶液。以DMSO中不同濃度的化合物建立校正線。從此回歸方程中可確定化合物的溶解性。從下表可看出本發明化合物相較於WO 2005/023 772有較佳溶解性或活性。

本申請案的實例編號 IC5〇/THESA (pg/ml) WO 2005/023772 之對應實例 1C50/THESA (pg/ml) 注釋 lb 5/19 2/<l 效力相似，溶解性較強 lc 3/14 d<)0 0 6/<l 效力相似，溶解性較強 2c 5/127 &b" 120/<1 效力較強，溶解性較強 3b 11/26 ά^° 0 150/16 效力較強，溶解性較強 6a 15/- &b。° 610/- 效力較強 6g 118/- &b°0 幾乎無活性A 效力較強 12a 11/- &b°0 480/- 效力較強 13b 5/14 &b。° 38/- 效力較強 128432.doc •17- 200846005 結構式1化合物可用作醫藥品，如呈藥物製_式。¥ =劑可口服，如以旋劑、包衣疑、糖衣錠、硬膠囊和軟膠囊、溶液、乳液或懸浮液形式。但也可經腸方式給藥，如以栓劑形式，腸道外方式給藥，如以注射液形式。 :以醫藥上惰性、無機或有機載體加工結構式!化合物以製備藥物製劑。可使用乳糖、玉米殿粉或其衍生物、带 =、硬脂酸或其鹽及類似物’如作爲錠劑、包衣錠、糖：广和硬膠囊的載體。適宜作為軟膠囊之载體為，如植物蠟月曰肪半固體多凡醇和液體多元醇及類似物。然而根據活性物質的屬性，私 …、 …此軟膠囊一般不需要載體。適宜作為I備溶液和糖衆之載體為，例如，水、多元醇、甘、由 «油及類似物。適宜作為栓劑之載體為，例如，自秋油或硬化油、蠟、脂肪、车、物。月曰^固體多元醇或液體多元醇及類似乳2製Γ另含㈣腐劑、增溶劑、穩定劑、潤濕劑、 β &甜劑、者色劑、調味劑、改變渗透塵之鹽、緩值的文物=劑或抗氧化劑。他們也可包含其他治療上有價載：二式1化合物或其醫藥上可接受的鹽及治療上惰性 :體:；:品亦是本發明之-目的，如其製造方法，包含越及，^種結構式1化合物及/或醫藥上可接受的酸加成 ^ σ而要，一種或多種其他治療上有π信沾你所纺種或多種治療上惰性載體一起製成草本制二、L、根據本發明之結構式合物基t抑tr劑投與形式。、P制γ-分泌酶係適用於 128432.doc -18- 200846005 控制或預防疾病，如阿茲海默病或癌症。劑量可在寬範圍内變化且當然必須針對每種特殊情況之個別需求進行調整。在口服的情況下，成人每日通式I化合物之劑量或其醫藥上可接受的鹽之對應劑量可從約0.01 mg變化至約1000 mg。每日劑量可一次服用或分次服用且，此外，當註明時也可超過上限範圍。錠劑配方（濕製粒法）項目成分 mg/鍵 5 mg 25 mg 100 mg 500 mg 1. 結構式I化合物 5 25 100 500 2. 無水乳糖DTG 125 105 30 150 3, Sta-Rx 1500 6 6 6 30 4. 微晶纖維素 30 30 30 150 5. 硬脂酸鎂 1 1 1 1 總重 167 167 167 831 製造程序 1. 將項目1、2、3及4混合且經淨化水粒化。 2. 於50°C下乾燥顆粒。 3. 使顆粒通過適宜的研磨設備。 4. 加入項目5且混合3分鐘；在適宜的壓縮機上壓縮。 I28432.doc -19- 200846005 膠囊配方 mg/膠囊項目成分 5 mg 25 mg 100 mg 500 1. 結構式I化合物 5 25 100 500 2. 含水乳糖 159 123 148 … 3. 玉米澱粉 25 35 40 70 4. 雲母 10 15 10 25 5. 硬脂酸鎂 1 2 2 5 總重 200 200 300 600 製造程序 1. 將項目1、2及3在適宜的混合器中混合30分鐘。 2. 加入項目4,及5且混合3分鐘。 3. 填入適宜的膠囊中。實例1 (R/S)-2·羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并【b，d】氮呼-7-基）-]^’-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-丙二醯胺及 (R) -2-羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并【b，d] 氮呼-7-基）-1>^-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-丙二醯胺及 (S) -2·羥基-2·甲基·Ν-((8)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并丨b，d]氮呼-7-基）-Ν’·（2,2,3,3,3-五氟-丙基）-丙二醯胺

128432.doc 20- 200846005 a) (R/S)|羥基-2-甲基善(⑻冬酮-6,7-二氫_5H二苯并 [b，d]氮呼-^基^^匕^夂^夂五氟丙基卜丙二醯胺將15 ml四氫呋喃中之101 mg(〇 45 mm〇i)(s)-7-胺基-5H，7H_二笨并[b d]氮呼冬酮和 up mg(〇.45 mmol)(RS)-2- 备基-2-甲基_n_(2,2,3,3,3-五氟-丙基）_丙醢胺酸之溶液冷卻至〇C並加入61.8 mg (0·45 mmol)l-羥基-苯并三唑水合物、157 μΐ (〇·9〇 mmol)二異丙基乙胺和 87·6 mg (0.45 mmol)N-(3-二甲基胺丙基）-N’-乙基•碳二亞胺鹽酸鹽。在至溫下持續隔夜攪拌。將混合物倒在冰/水上並加入1N含水鹽酸直至pH達到丨。以二乙醚提取，以飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水沖洗並利用乙酸乙酯/環己烷1/1於矽膠上進行層析得到 86·1 mg(41%)(R/S)-2_ 羥基-2-甲基-N-((S)-6_ 酮-6,7·二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7·基）-N’-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-丙二醯胺之白色固體，MS (m/e): 472.1 (M+H)+。 b) (R)-2-羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮 _6,7·二氫-5H-二苯并【b，d]氮呼基）_Ν，_(2,2,3,3,弘五氟·丙基）_丙二酿胺及 e) (S)_2-羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5Η·二苯并 lb，d】氮呼_7·基）-〜_(2,2,3,3,3-五氟-丙基）_丙二醯胺藉由製備型HPLC於YMC Pack SIL上利用庚烷/乙醇/異丙醇/乙腈混合物分離124 mg (0.27 mmol)差向異構物 (R/S)-2-羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d] 氮呼-7-基）-1^’-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-丙二醯胺的混合物以產生 Π mg(R或 S)-2-羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼_7-基）卞，-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-丙二醯 128432.doc -21 - 200846005 胺’差向異構物A(最早洗提出），MS (m/e) : 469.9 (Μ-Η)- ’和mg (S 或 R)-2-羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫- 5Η_二苯并[b，d]氮呼-7-基）-：^-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-丙二酿胺’差向異構物B (第二洗提出），MS (m/e) : 472.1 (M+H)+ 〇實例2

(R/S)_2-羥基-2-甲基-N-((S>6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d】氮呼·7-基）·ν，-(3,3,3-三氟-丙基）-丙二醯胺及 (R) -2-羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5Η-二苯并[b，d] 氮呼-7-基）_n，-(3,3,3-三氟-丙基）-丙二醯胺及 (S) -2-羥基 _2_ 甲基·Ν-((8)-6-酮-6,7-二氫-5H_二苯并[b，d]氮呼_7_基）-N，-(3,3,3-三氟-丙基）-丙二醯胺

a) (R/S)-2·羥基-2-甲基 _N-((S)-6-酮 _6,7_ 二氫-5H-二苯并 [1>，(1]氮啤-7-基）-^-(3,3,3-三氟-丙基）-丙二酿胺將50 ml四氫吱喃中之210 mg(0.94 mmol)(S)-7-胺基-5H，7H-二苯并[b，d]氮呼-6-酮和 215 mg(0.94 mmol)(RS)- 2- 羥基-2-甲基-N-(3,3,3-三氟-丙基）-丙醯胺酸之溶液冷卻至 0°C並加入129 mg(0.94 mmol)l-經基-苯并三嗤水合物、 327 μΐ (1.87 mmol)二異丙基乙胺和 183 mg(0.94 mmol)N-(3-二甲基胺丙基）-Nf-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。在室溫下持 128432.doc -22- 200846005 、貝夜攪#。將混合物倒纟冰/水上並加入！ N含水鹽酸直至pH達到1。凑έτ< _ 疋、、二一乙醚提取，再經乙酸乙酯提取，使用飽和^反S""氯納水溶液和鹽水沖洗並利用乙酸乙酯/庚烷2/1 於石夕膠上進行層析得到15〇邮⑷。^)(R/s)_2-經基甲基- N-((S)-6-酮-6 7 - , 一氣-丙基 > 丙二酸胺之白色固體，MS (m/e) : 436.1 (M+H)+ 〇 b) (R)-2-經基-2,甲基善(⑻+酮-6,7-二氫-5Ημ二苯并 [Μ]氣呼^基卜^⑽^三氟-丙基卜丙二釀胺及 c) (S)-2·羥基-2-甲基-N_((s)_6-酮-6,7•二氫 _5H-二苯并【M〗氮呼_7_基）·Νχ3,3,3_三氟·丙基兴丙二醯胺藉由製備型HPLC於Chiralpak AD上利用乙醇/庚烷20/80 分離150 mg(mmol)差向異構物（R/s)_2_羥基_2-甲基_N_((S)_ 6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基）-N’-(3,3,3-三氟- 丙基）-丙二醯胺的混合物而得到6orng(R或S)-2-羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基）-N，-(3,3,3-三氟-丙基）-丙二醯胺，差向異構物A(最早洗提出），MS (m/e) · 43 6.1 (M+H)+，和 75mg(S 或 R)-2-經基-2-曱基-N-((S)-6·酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基）-N，- (3,3,3-二氟-丙基）-丙一酸胺，差向異構物B (第二洗提出），MS (m/e) : 436·1(Μ+Η)+。實例3 (R)-2-幾基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5Η-二苯并【b，d】氮坪-7-基）-Nf-(2,2,2-三氟·乙基）_丙二醯胺及 128432.doc -23- 200846005 (S)-2-羥基-2-甲基-N-((S)-6·酮-6,7-二氫-5H-二苯并 ^，…氮呼-7-基）·Ν、(2,2,2-三氟-乙基）-丙二醯胺

a) (R)-2-羥基-2-甲基·Ν·((8)·6_ 酮·6,7-二氫-5Η-二苯并 [b，d]氮呼_7-基）_ν，_(2,2,2_三氟-乙基）-丙二醯胺將6 ml四氫吱喃中之7〇·〇 mg(0,3 1 mmol)(S)-7 -胺基-5H，7H-二笨并[b，d]氮呼·6_ 酮和 73.9 mg(0.34 mmc^)(R)-2- 羥基·2-曱基-N-(2,2,2-三氟-乙基）-丙醯胺酸之溶液冷卻至〇°C並加入46·4 mg (0·34 mmol)l-經基-苯并三嗤水合物、 117 μΐ (0.69 mmol)二異丙基乙胺和 65.8 mg (0.34 mmol)N-(3-二曱基胺丙基乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。持續攪拌16 小時。蒸餾去除溶劑並利用庚烷/乙酸乙酯（梯度從1 00/0至 25/75)於矽膠上進行層析得到101 mg(77%)(R)-2-羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基）-Ν’-(2,2,2_三氟-乙基）-丙二醯胺，MS (m/e) : 422·0 (Μ+Η)+。 b) (S)-2-羥基-2-甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5Η-二苯并【b，d]氮呼-7-基）-Ν，-(2,2,2-三氟·乙基）-丙二醯胺

128432.doc -24 - 200846005 將6 ml四氫呋喃中之70·〇 mg (〇·3ΐ mmoIXS)-?-胺基· 5H，7H-二苯并[b，d]氮呼-6,和 73.9 mg(0.34 mmol)(S)-2-羥基-2-甲基-N-(2,2,2-三氟-乙基）_丙醯胺酸之溶液冷卻至〇。〇並加入46·4 mg (0·34 mm〇l)i·羥基-苯并三唑水合物、117 μΐ (0.69 mmol)二異丙基乙胺和 65 8 mg (〇 34 mm〇1)N_(3- 二甲基胺丙基）-N’-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。持續攪拌16小日守。蒸餾去除溶劑並利用庚烧/乙酸乙酯（梯度從1⑽/〇至 25/75)於矽膠上進行層析得到1〇4 mg (79%)(s)_2·羥基_2_曱基-N-((S)-6-酮-6,7·二氫-5H_ 二苯并[b，d]氮呼冬基）_N，_ (2,2,2_二氟-乙基）_ 丙二醯胺，MS (m/e) : 422 〇 (M+H)+。實例4 (R/S)-2-乙基-2-羥基_心((8)-6-酮二氫-5H二苯并丨bd】氮呼·7_基）-N，-(2,2,2-三氟-乙基）_丙二醯胺及 (R) -2-乙基-2-羥基-N-((S)_6_ 酮-6,7-二氫 _5H_ 二苯并[b，d】氮呼*-7-基）-]\’-(2,2,2-三敗_乙基）_丙二醯胺及 (S) -2-乙基_2·羥基-N_((S)_6-酮-6,7-二氫_5H•二苯并…，…氮坪-7-基）_]\’_(2,2,2-三氟_乙基）-丙二醯胺

a) (R/S)-2·乙基-2-羥基各（(8)-6_酮-6,7_二氫-5H_二苯并【b，d】氮呼-7·*)-Ν，-(2,2,八三氟-乙基卜丙二醯胺 128432.doc -25- 200846005 將24 ml四氫呋喃中之250 mg (1·12 mmol)(S)-7-胺基一 5Η，7Η·一本并[b，d]氮坪-6-_ 和 256 mg( 1 · 12 mmol)(RS)-2- 經基-2-(2，2,2-三氟-乙基胺基甲酸基）_丁酸之溶液冷卻至〇°C並加入174 mg (0·94 羥基-苯并三唑水合物、 390 μΐ (2.23 mmol)二異丙基乙胺和 218 mg(1.12 mmol)N- (3 -—甲基胺丙基）-Nf-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。在室溫下持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並利用乙酸乙酯/庚烷2/8於石夕膠上進行層析得到330 mg (68%)(Κ78)-2-乙基-2-羥基 ((8)-6-_-6,7-二氫-511-二苯并[15，(1]氮坪-7-基）-1\[*_(2,2,2-三氟-乙基）-丙二醯胺之無色油，MS (m/e) : 43 6· 1 (Μ+Η)+。 b) (R)-2-乙基-2-經基-N-((S)-6· _ -6,7·二氮-5Η·二苯并 [b，d]氮呼-7-基）-Ν’-(2,2,2-三氟-乙基）-丙二醯胺及 e) (S)-2-乙基-2_ 經基-N-((S)-6-酮 _6,7_ 二氫-5Η-二苯并 [b，d】氮呼-7-基）·Ν，_(2,2,2-三氟-乙基）-丙二醯胺藉由製備型HPLC於Chiralpak AD上利用異丙醇/庚烧 15/85分離310 mg (mmol)差向異構物（R/s)-2-乙基-2-經基->1-((8)-6-酮-6,7-二氫-511-二苯并[13，(1]氮呼-7-基）->^-(2,2,2- 三氟-乙基）-丙二醯胺的混合物得到120 mg(R或S)-2-乙基-2-經基->1-((8)-6-酮-6,7-二氫-511_二苯并[13，(1]氮啤_7_基）-N!-(2,2,2-三氟-乙基）-丙二醯胺，差向異構物a(最早洗提出），MS (m/e) : 43 6.1 (M+H)+，和 i2〇mg(S 或 R)-2-乙基 _2-經基-N_((S)-6-酮-6,7-二氫- 5H-二笨并[b，d]氮呼-7-基）-N，- (2,2，2-三氟-乙基）-丙二醢胺，差向異構物b(第二洗提出），MS (m/e) : 436·1(Μ+Η)+。 128432.doc -26- 200846005 實例5 (R/S)-N·環丙基甲基-2_羥基_N_(⑻冬酮_6,7·二氫_纽_二苯并[b，d]氮呼_7_基）_2_丙基_丙二醯胺

a) (R’S)_2-經基 _2_((8)冬酮-67二氫 _5H，二苯并氮呼-7-基胺基甲醯基）_戊酸乙酯

將 40 ml四氫呋喃中之5〇〇 mg(2 mm〇1)(s)_7_ 胺基 _5h，7H_ 一本并[b，d]氣呼 g同和 466 mg(2 mmol)(RS)-2-經基-2-丙

基·丙二酸單乙酯之溶液冷卻至〇。〇並加入331 mg (2 mmol)l-羥基-苯并三唑水合物、83〇 ^ (5 mmol)二異丙基乙胺和470 mg (2 mmol)N-(3-二甲基胺丙基）-N、乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。在室溫下持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並利用庚烷/乙酸乙酯（梯度從90/10至50/50)於矽膠上進行層析得到 630 mg(71%)(R/S)-2-羥基-2-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基胺基甲醯基）-戊酸乙酯之無色泡沫， MS (m/e) : 397.3 (M+H)+。 b) (R/S)-2-羥基-2_((S)-6-酮-6,7-二氫·5Η_ 二苯并[b，d]氮呼-7_基胺基甲醯基）-戊酸 128432.doc -27- 200846005

將/合於8 ml四氫π夫喃中之6〇〇叫（2 2-((S)-6·酮·6,7-二氫_5H _二苯并[b，d]氮呼_7_基胺基曱醯基）-戊I乙S曰與溶於4 ml水中之7〇〇 mg(2 mmol)氫氧化鋰之w合物在至溫下隔夜攪拌。蒸發溶劑並使用乙酸乙酿在口1^-1下提取殘留物得到45〇1^(81%)(1^/8)_2-羥基-2_((8)_ 6-酮-6,7-一氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7_基胺基甲醯基）_戊酸，MS (m/e) : 367.1 (M-Η)·。 e) (R/S)_N_環丙基甲基羥基·N-((s)-6•酮 _6,7_二氫·5H_ 二苯并【b，d]氮呼-7_基）_2_丙基-丙二醯胺將 3 ml 四氫呋喃中之 7〇·〇 mg(0.19 mmol)2-羥基-2-((S)_ 6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7_基胺基甲醯基）-戊酸和14.9 mg (〇·21 mmo!)環丙曱基胺之溶液冷卻至〇〇c並加入 28·2 mg (〇·21 rnmoi;^羥基·苯并三唑水合物、71 μ1 (〇 42 mmol)一異丙基乙胺和4〇1 mg(0.21 mmol)N-(3-二甲基胺丙基）-N -乙基·碳二亞胺鹽酸鹽。持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並利用庚烷/乙酸乙酯（梯度從9〇: 1〇至5〇: 50)於石夕膠上進行層析得到50.0 mg(62%)(R/S)-N-環丙基甲基-2-經基-N-((S)-6·酮 _6,7·二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7·基）-2-丙基-丙二醯胺：MS (m/e) ·· 422·4 (M+H)+。實例6 (R/S)_2_羥基-n_((S)-6·酮-6,7_二氩-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-128432.doc -28 - 200846005 基）_2_丙基- N_(3,3,3_三氟-丙基）-丙二醯胺及（R)-2-羥基-N-((S)-6, _6,7_ 二氫-5H-二苯并{b，d】氮平 7_基）-2·丙基-N-(3,3,3-三氟-丙基）-丙二醯胺及 (S)-2-經基-N-((S)-6·網-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼·7 基）-2-丙基-Ν-(3,3,3_三氟-丙基）-丙二醯胺

a) (R/S)-2-羥基-N_((S)-6-酮-6,7·二氫-5Η-二苯并【b，d]氮呼基）-2-丙基-N-(3,3,3-三氟-丙基）_丙二醯胺將 3 ml 四氫呋喃中之 70.0 mg(0.19 mmol)2-羥基-2-((S)-6 -嗣-6,7 -一氮- 5H- 一本并[b，d]氮呼-7-基胺基曱酿基）-戍酸和31.3 11^(0.21111111〇1)3,3,3-三氟丙胺鹽酸鹽之溶液冷卻至 0°C並加入28·2 mg (〇·21 mm〇l)l-羥基_苯并三唑水合物、 103 μΐ (0.61 mmol) 一異丙基乙胺和 40.1 mg (0.21 mmol )N-(3-—曱基胺丙基、乙基_碳二亞胺鹽酸鹽。持續隔夜攪摔蒸顧去除溶劑並利用庚燒/乙酸乙酯（梯度從9〇 ·· 10至 5〇 5〇)於矽膠上進行層析得到mg(57%)(R/s)_2_羥基_ N-((S)冬酉同·6,7·二氫巧H-二苯并[b，d]氮坪-7-基）-2，基-N- ( 氟丙基）_ 丙二醯胺·· MS (m/e) ·· 464.0 (M+H)+。 b) 2-羥基_2_丙基-丙二酸單乙酯 128432.doc -29* 200846005

在室溫下將空氣吹入含15.0 g (72·7 mm〇i)丙基丙二酸

乙酯和47.6 g (145 mmol)碳酸絶於12〇瓜丨二甲基甲酿胺之懸浮液中達1小時。在l〇-20°C下加入15〇 ml水並在室溫下持續擾拌3小時。然後在35°C之槽溫下，真空蒸餾去除大部分二甲基曱醯胺。加入11水並經二乙醚提取得到i丨7 g 2-羥基-2-丙基-丙二酸單乙酯，MS (m/e) : 189,1 (M-Η)·。 Ο 2_羥》-。2-(3,3广三氟丙基胺甲醯基）戊酸乙酯

將4.03 g (〜21 mmol)之量的2-羥基-2-丙基-丙二酸單乙酯溶於200 ml四氫呋喃中並冷卻至〇°c。加入2·92 g (21·2 mmol)l-經基-苯并三σ坐水合物、ΐ2·9 ml (74·1 mmol)二異丙基乙胺和4.14 g (21·2 mmol)N-(3-二甲基胺丙基乙基-碳二亞胺鹽酸鹽並在室溫下持續攪拌4天。加入45 ml 2 N含水鹽酸。以乙酸乙酯提取，經鹽水沖洗並利用乙酸乙醋/環己烷3/1於矽膠上進行層析得到4.6〇 g(76%)2-羥基冬 (3,3,3-三氟丙基胺甲醯基）戊酸乙酯之黃色油，MS (m/e): 286.1 (M+H)+ 〇 d) (R和S)-2-羥基·2_(3,3,3-三氟丙基胺甲醯基）戊酸乙酯利用異丙醇/庚燒1〇/9〇於（^11丨1^43]<:八0上進行層析而將外消旋2-經基-2-(3,3,3-三氟丙基胺甲醯基）戊酸乙酯分離成對映異構物而得到0.96 g (21%)(R或S)-2-羥基-2-(3,3,3- 128432.doc •30- 200846005

三氟丙基胺甲醯基）戊酸乙酯之最早洗提出的對映異構物，MS (m/e) : 286.1 (M+H)+，和 1.09 g (24%)(S 或 R)_ 2 羥基-2-(3,3,3-三氟丙基胺甲醯基）戊酸乙酯之第二洗提出的對映異構物，MS (m/e) : 286.4 (M+H)+。 e) (R或S)-2·羥基·2·(3,3,3·三氟-丙基胺甲醯基）-戊酸，實艘A

溶於8 ml水中之131 mg (3·09 mmol)氫氧化鐘溶液與溶於18ml四氫呋喃中之880 mg (3.09 mmol)上個步驟最早洗提出之對映異構物（R或S)-2-羥基-2-(3,3,3三氟丙基胺甲酿基）戊酸乙酯在室溫下隔夜攪拌。先經水/二乙醚提取，再經1 N含水鹽酸/乙酸乙醋提取而得到744 mg(93%)(R或S)-2-羥基-2-(3,3,3-三氟-丙基胺曱醯基）-戊酸，實體八，]^8 (m/e) : 256.1 (M-Η)-。

f) (S或R)-2-羥基-2-(3,3,3-三氟-丙基胺甲醯基）-戊酸，實體B 將溶於8.5 ml水之158 mg (3.72 mmol)氫氧化鋰溶液與 1·〇6 g (3·72 mmol)(S 或 R)-2-羥基-2-(3,3,3三氟丙基胺曱醯基）戊酸乙酯（步驟c中第二洗提出之差向異構物）在室溫下隔夜攪拌。先經水/二乙醚提取，再經1 N含水鹽酸/乙酸乙酯提取而得到870 mg (91%)(S或R)-2-羥基-2-(3,3,3-三氟-丙基胺甲醯基）·戊酸，實體B，MS (m/e) : 256·1 (M-Η)-。 §)(1^或8)-2-經基_〜((8)-6-嗣_6,7_二氮-511-二苯并[1>，(1】氮呼基）·》2·丙基-Ν-(3,3,3·三氟-丙基）-丙二醯胺，實禮A 將10 ml四氫呋喃中之135 mg (0.60 mmol)(S)-7-胺基- 128432.doc -31 - 200846005 5H，7H_二笨并[b，d]氮呼-6-酮和 154 mg(0.60 mmol)(R或 S)-2-經基-2-(3,3,3-三氟-丙基胺曱醯基戊酸，實體a之溶液冷卻至0(：並加入93.8]11§(0.6〇111111〇1)1_經基_苯并三唑水合物、210 μΐ (1,2〇 mm〇i)二異丙基乙胺和 117 mg (0.60 mmol)N-(3-二甲基胺丙基）_N|-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並利用乙酸乙酯/庚烷（梯度從 1〇:90至1〇〇:〇)於矽膠上進行層析得到218叫（78%)(11或8)- 2-羥基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基）-2-丙基-N-(3,3,3_三氟-丙基）_丙二醯胺，實體a: MS (m/e): 462.0 (M-H)、

Ϊ1) (S 或 R)_2-羥基-N-((S)-6_ 酮·6,7-二氫-5H_二苯并丨b，d】氮呼-7-基）-2•丙基-Ν-(3,3,3·三氟-丙基）_丙二醯胺，實體B 將 10 ml四氫呋喃中之 135 mg (〇6〇 5H，7H-二苯并[b，d]氮呼·6-酮和 154 mg(0.60 mmol)(S 或 R) 2罗工基-2-(3,3,3-二I _丙基胺甲醯基）·戊酸，實體b之溶液冷卻至0°C並加入93.8 mg (〇·6〇 mm〇l)i_羥基-苯并三唑水合物、210 μ1 (ΐ·2〇 mmol)二異丙基乙胺和117 mg (〇 6〇 mmol)N-(3-二甲基胺丙基）_；^_乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並利用乙酸乙酯/庚烷（梯度從 10:90至100:0)於矽膠上進行層析而得到22i mg (8〇%)(8或 R)-2-羥基-N-((S)-6-酮-6,7·二氫 _5H_ 二苯并[b，d]氮呼基）2丙基-N-(3,3,3-二氟_丙基）_丙二醯胺，實體b : MS (m/e) : 462·0 (M-H)、實例7 128432.doc -32- 200846005 (R/S)-2-羥基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并【b，d】氮呼-7- 基、^^^^’。，:^五氟-丙基丨^-丙基-丙二醯胺及（R)-2-羥基_N-((S)-6-酮-6,7_二氫_5H-二苯并丨b，d】氮呼_ 7·基）_N-(2,2,3,3,3-五氟·丙基卜丙基·丙二醯胺及 (S)-2-羥基-1Νμ((8)·6-酮 _6,7-二氫-5H_ 二苯并【b，d]氮呼-7-基）-N-(2,2,3,3,3-五氟-丙基兴2_丙基_丙二醯胺

a) (R/S)- 2-羥基-N_((S)_6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并【b，d]氮呼-7-基）·Ν-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）_2_丙基丙二醯胺將3 ml四氫呋喃中之70 0 mg(〇19 mm〇1)2_羥基·2_((8)_ 6-酮-6,7-二氫-5Η-二苯并[b，d]氮呼基胺基甲醯基）_戊酸及31.2 mg (0·21 mmol)2,2,3,3,3·五氟丙基胺之溶液冷卻至〇°C並加入28·2 mg (0·21 mm〇1)1_羥基_苯并三唑水合物、 72 μ1 (0·42麵〇1)二異丙基乙胺和4〇」叫(〇21贿。叫 (3-二甲基胺丙基）_N，_乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並利用庚烷/乙酸乙酯（梯度從9〇: 至 5〇:5〇)於石夕膠上進行層析而得到6〇〇 mg (63%)(r/s>2_經基-N-(⑻冬酮-6,7_二氫-5H_二苯并[b，d]氮呼1基）·沭 (2’2,3,3,3-五氟-丙基)_2_丙基-丙二醯胺：_(献)：5〇〇4 (M+H)、 · b) 叫2-經基例(8)_6务6,7二氫·5Η二苯并【b d]氮呼_ 128432.doc -33 - 200846005 7-基）-N-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）·2-丙基-丙二醯胺及 c) (S)-2·羥基 _N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5Η-二苯并[b，d】氮呼-7-基）-N-(2,2,3,3,3_五I-丙基）-2 -丙基-丙二酿胺藉由製備型1^1^(：於〇^1^0&1^八〇上利用庚烷/乙醇9〇:1〇分離 500 mg(1.0 mmol)差向異構物（R/s)-2-羥基-N-((S)-6-酮-6,7_二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基）-N-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-2-丙基-丙二醯胺的混合物得到115 mg (22%)(R或S)-2-羥基 _N-((S)-6-酮·6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼·7_基）-1\[-(2,2,3,3,3-五氟·丙基）-2-丙基-丙二醯胺，差向異構物Α (最早洗提出），MS (m/e) : 500·4 (M+H)+，和 95 mg (19%)(S 或 R)-2-羥基 _n-((S)_6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基）-N-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-2-丙基-丙二醯胺，差向異構物 B (第二洗提出），MS (m/e) : 500·4 (M+H)+。實例8 (R/S)-2-經基 _2_ 異丁基-N-((S)-6-嗣-6,7-二氮-5H·二苯并【b，d]氮呼-7-基）·Ν-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）_丙二醯胺

a) (R/S)-2-羥基_2·異丁基-丙二酸單乙酯

128432.doc -34- 200846005 在室溫下將空氣吹入〇·5 g (3 mmol)二甲基-(2·曱基丙基）丙二酸酯和1.73 g (5 mmol)碳酸鉋於7ml二甲基甲醯胺之懸浮液中達1小時。在室溫下持續攪拌24小時。加入25 ml水並經二乙醚提取混合物。用…含水鹽酸酸化至pH=l並經乙酸乙酯提取而得到〇·42 g(83%)(R/S)-2-羥基-2-異丁基-丙二酸單甲酯，MS(m/e) ·· 189,4 (M-Η)-。 b) (R/S)-2-羥基-4-甲基-2-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并 [b，d】氮呼-7-基胺甲醯基）_戊酸甲酯

將30 ml四氫呋喃中之35〇 mg (1.56 mmol)(S)-7-胺基-5H，7H-二苯并[b，d]氮呼-6,和 327 mg (1.72 mmol)(R/S)-2- 經基-2-異丁基·丙二酸單甲酯之溶液冷卻至〇。〇並加入232 mg (1.72 mmol)l·羥基-苯并三唑水合物、584 μι (343 mmol)一異丙基乙胺和329 mg (192 mmol)N-(3-二甲基胺丙基）-N、乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。在室溫下持續隔夜攪拌。經水/乙酸乙酯提取並利用庚烷/乙酸乙酯（梯度從90/1 〇至 5〇/50)於石夕膠上進行層析得到47〇 mg(76%)(R/s)_2_經基_‘ 甲基-2-((S)-6-酮·6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基胺甲醯基）-戊酸甲酯之無色泡沫，MS (m/e) : 397.3 (M+H)+。 c) (R/S)-2-羥基-4-甲基-2_((S)-6- _ -6,7-二氫-5H-二苯并【b，d】氮呼-7-基胺甲醯基）·戊酸 128432.doc -35- 200846005

Ο 在至·下隔夜擾拌溶於6 ml四氫呋喃中之430 mg (1·09 mmol)(R/S)-2-羥基-4-甲基-2-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7>基胺曱醯基）_戊酸甲酯和溶於3ml水中之 5〇·1 mg (1.19 mmol)氫氧化鋰單水合物之混合物。蒸發溶

劑並在pH為1下經乙酸乙酯提取殘留物得到39〇叫 (94 /〇)(R/S)-2-經基-4-甲基- 2-((S)-6-_-6,7-二氫- 5H-二苯并 [b，d]氮呼-7-基胺曱醯基）·戍酸，MS (m/e) : 381〇 (m_h):。 d) (R/S)_2-經基_2_異丁基_]^-((8)-6·酮 _6,7_二氫 JH-二苯并 [b，d]氮呼·7-基）-Ν·(2,2,3,3,3-五氟_丙基）_丙二酿胺將1.5ml二曱基曱醯胺中之5〇,〇 mg(〇 13 mm〇i)2-羥基_4· 甲之甲基^^⑻七酸^…二氫巧仏二苯并巧⑷氮呼^基胺醯基）·戊酸和39·0 mg (0.26 mmol)2,2,3,3,3-五氟丙基胺溶液冷卻至η：並加入20 μ1 (0.14 mmol)三乙胺和54 5 ((M4 mm〇l)〇-(苯并三唑」-基）_N，N，N，，N，-四甲基錁六氟磷酸鹽（HBTU)。持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並利用庚烷/ 乙酸乙_(梯度從19: 1}於矽膠上進行層析得到 mg(67〇/。）〇1/外2-經基-2-異丁基|((扑6,_6,7_二氯、沉二苯并[b，d]氮呼1基）-义(2,2,3,3,3-五氟-丙基）_丙二酿胺：MS (m/e) : 514.5 (M+H)十。實例9 ((S)_6_ 嗣 _6,7_ 二 (R/S)-N-環丙基甲基·2·羥基_2_異丁基 128432.doc -36- 200846005 氫-5H-二苯并【b，d】氮呼-7-基）-丙二醯胺

將1·5 ml二甲基甲醯胺中之50 0 mg (〇13 mniol)2-羥基-4-甲基-2-((S)-6__-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基胺曱醯基）-戊酸和18.6 mg(0·26 mmol)環丙甲基胺之溶液冷卻至〇°C 並加入 20 μΐ (0.14 mmol)三乙胺和 54·5 mg(0.14 mmol)0-(苯并三唑小基）_Ν，Ν，Ν’，Ν，_四甲基錁六氟磷酸鹽 (HBTU)。在室溫下持續攪拌度過周末。蒸餾去除溶劑並利用庚烷/乙酸乙酯（梯度從19 : 1至1 ·· 1)於矽膠上進行層析得到10·0 mg (18%)(R/S)-N-環丙基甲基-2-羥基-2—異丁基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二笨并[b，d]氮呼-7-基）-丙二醯胺 MS (m/e) : 436.1 (M+H)+。實例10 (R/S)-N-(3,5-二氟-节基）-2-羥基 _2_異丁基 6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮坪-7-基）_丙二醯胺

將1.5 ml二甲基甲醯胺中之5〇·〇 mg (0·13 mmol)2-羥基 128432.doc -37- 200846005 4-曱基-2-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼_7_基胺甲醯基）-戊酸和37.4 mg (0.26 mmol)3,5-二氟苄基胺之溶液冷

卻至〇°C 並加入 20 μΐ (0.14 mmol)5 乙胺和 54 5 mg(〇 14 mm〇l)〇-(苯并三唾小基）_N，N，N，，N，_四f紐六氣鱗酸鹽 (HBTU)。在室溫下持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並利用庚烧/乙酸乙自旨（梯度從19 : 1至i : υ於⑦膠上進行層析得到 10.0 mg(15%)(R/S)_N_(3,5·二氣-节基）·2_羥基_2_異丁基_ Ν-(⑻-6-酮-6,7-二氫 _5Η_二苯并[b，d]氮呼 _7基）_ 丙二1 胺，MS (m/e) : 508.5 (M+H)+。實例11 氟-乙基）-6,7-ι氣-丙基）-丙 (R/S)_2-羥基-2-甲基-N-[(S)_6-酮 _5·(2,2,2-三二氫-5Η_二苯并丨b，d】氮呼巧-基】，，-(3 3 3< 二醯胺，及 (R)-2-經基·2-甲基·Ν.[(8)_6,_5·(2,2,2•三氟·乙基）_6,7-二氫-5Η-二苯并【b，d]氮呼_7-基】·Ν，-(3,3,3•三氣丙基）_丙二酿胺，及 -5-(2,2,2-三氟 _ 乙基）-6,7-二 -Nf-(3,3,3-三氟-丙基）·丙二 (S)-2-幾基-2-甲基-N-[(S)-6·酮氫-5H·二苯并[b，d]氮呼_7_基] 醯胺

氣-乙基）-氟·丙基）_ a) (R/S)-2•經基 _2_ 甲基·Ν郁)-6_嗣_5_(2,2,2· 6,7-二氫-5Η-二苯并丨b，d】氮呼_7基】_ν，似3 128432.doc -38· 200846005 丙二醯胺將7 ml四氫呋喃中之200 mg (〇·65 mmol)(S)-7-胺基-5-(2,2,2-三敗-乙基）-5H，7H-二苯并[b，d]氮呼-6-酮和 150 mg(0.65 mmol)(RS)- 2-羥基-2-甲基_N-(3,3,3_三氟-丙基）-丙醯胺酸之溶液冷卻至0°C並加入102 mg (0.65 mmol)l-羥基-苯并三嗤水合物、22 8μ1 (1.31 mmol)二異丙基乙胺和 128 mg (0·65 mmol)N-(3-二甲基胺丙基）_N’_乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。室溫下持續隔仪擾掉。蒸餾去除溶劑並利用乙酸乙酯/庚烷（梯度從1/4至4/1)於矽膠上進行層析得到220 mg (65%)(R/S)-2-經基-2-曱基-N-[(S)-6-酮-5-(2,2,2-三氟-乙基）-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼-7-基]-N’-(3,3,3-三氟-丙基）-丙二醯胺之白色固體，MS (m/e) ·· 518·2 (M+H)+。 b) (R)-2-羥基-2·甲基-N_[(S)-6-酮-5-(2,2,2-三氟-乙基）-6,7· 二氫-5Η-二苯并[b，d】氮呼，7-基卜]\’-(3,3,3-三氟-丙基）-丙二醯胺，及 c) (S)-2-羥基-2-甲基-N-[(S)-6-酮-5-(2,2,2-三氟-乙基）_6,7-一氫- 5H-^ —本并[b，d]氮呼-7 -基】-Ν’·(3,3,3_三氣-丙基）·丙二醯胺藉由製備型HPLC於Chiralpak AD上利用異丙醇/庚烧 15/85分離20〇11^差向異構物（11/3)-2-羥基-2-甲基->^[〇6-酮-5-(2,2,2-三氟-乙基）-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼—7-基]-N*-(3,3,3-三氟-丙基丙二醢胺之混合物得到9〇 mg(R 或 S)-2-經基-2-曱基-N-[(S)-6 -酮·5-(2,2,2-三氣-乙基）_6,7_ 二氫-5Η-二苯并[b，d]氮呼基]-N’-(3,3,3-三氟-丙基）_丙二 I28432.doc -39- 200846005 醯胺，差向異構物A (最早洗提出），Ms (m/e) : 5i85 (M+H)+，和90 mg (S絲)冬經基·2•甲基_n_[⑻_6香5_ (2,2,2-三氟·乙基）·6,7_二氫_5H.二苯扣观呼_7_基]界 (3,3,3-三氟-丙基）·丙二醯胺’差向異構物B (第二洗提出），MS (m/e) : 518.5 (M+H)+。實例12

(R/S)-2_經基-2-曱基·N_[⑻_6_網_5_(2,2,2•三乙基）_6,7· 二氫-SH-二苯并 ib，d]氮呼 _7_ 基】· 丙二醯胺，及 (R) -2-經基-2-甲基氫-5H-二苯并[b，d]氮呼_7_基]-Ν_(2,2 3,3 3五氟丙基）丙二醯胺及 (S) -2-m 基-2-甲基-N-[(S)-6-酮-5-(2,2,2-三氟-乙基）_6,7_二氫-5Η·二苯并[b，d]氣呼·7·基】|(2,2,3,3,3-五氟丙基卜丙二醯胺

a) (R/S)-2-羥基-2-甲基-Ν-【(8)·6·酮-5-(2,2,2-三氟-乙基卜 6,7_二氫-5Η-二苯并[b，d]氮呼 _7_ 基】_]^(2,2,3,3,3_五氟_丙基）-丙^酿胺將 21 ml 四氫呋喃中之 144 mg (0.47 mmol)(S)-7_ 胺基-5- (2,2,2-三氟-乙基）-5Η，7^二笨并[Μ]氮呼冬酮和125叫 (0·47 mm〇l)(RS)-2_經基，2_甲基 _n_(2,2,3,3,3_五氟-丙基）_ 128432.doc -40- 200846005 丙醯胺酸之溶液在室溫下與73·6 mg (0·47 mm〇1)1^f基-苯并三唑水合物、165 μΐ (0·94 mmol)二異丙基乙胺和92ι mg (0.47 mm〇l)N-(3-二甲基胺丙基）_N匕乙基-碳二亞胺鹽酸鹽反應。持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並利用乙酸乙酯/ 庚烷（梯度從1 5/85至40/60)於矽膠上進行層析得到2〇7 mg (79%)(R/S)-2-羥基-2-甲基-N-[(S)-6-酮-5-(2,2,2-三氟-乙基）_6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮呼 _7_基]·ν_(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-丙一醯胺之白色固體，MS(m/e) : 5 54.3 (Μ+Η)+。 b) (R)-2-羥基-2-甲基-N-[(S)-6-酮-5-(2,2,2-三氟-乙基）_6,7-二氫-511-二苯并[1}，(1]氮呼_7_基卜]^(2,2,3,3,3-五氟_丙基）· 丙二醯胺及 c) (S)-2·經基-2·甲基-Ν_[(8)_6酮乂(2,2,2 三氟乙基）6,7_ 二氫-511_二苯并丨1>，(1]氮呼-7-基]-]^(2,2,3,3,3-五氟_丙基）- 丙二醯胺藉由製備型HPLC於Chiralcel OD上利用異丙醇/庚烷 10/90分離差向異構物（R/S)_2_羥基-2_甲基_n_[(s)_6___5_ (2,2,2-二氟-乙基）_6,7-二氫-511-二苯并[5，(1]氮呼_7-基]-：^-(2,2,3,3,3-五鼠-丙基）·丙二酷胺之混合物得到4〇 mg (r或 S)-2-經基 | 甲基 _Ν_[(：§)-6-酮 _5_(2,2,2_三氟-乙基）_6,7_二氫-5Η_二笨并[b，d]氮呼-7-基]-冰（2,2,3,3,3-五氟_丙基）-丙二酿胺，差向異構物A (最早洗提出），MS (m/e) : 554·3 (M+H)+，和 40 mg (S 或 R)-2-經基-2-曱基-N_[(S)冬酮 I (2,2,2-二氟-乙基）-6，[二氫 _5H_ 二笨并[b，d]氮呼基]·ν_ (2,2,3,3,3-五氟-丙基）_丙二醯胺，差向異構物3(第二洗提 128432.doc -41 - 200846005 出），MS (m/e) : 554·3 (M+H)+。實例13 (R) -2·羥基-2-甲基-N-[(S)-6-酮-5-(2,2,2-三氟-乙基）-6,7-二氫·5Η_二苯并[b，d】氮呼-7_基】-N’-(2,2,2-三氟-乙基）-丙二醯胺及 (S) -2_ 羥基-2-甲基-N-[(S)-6-酮-5-(2,2,2-三氟-乙基）-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d】氮呼冬基】-N，-(2,2,2_三氟-乙基）-丙二醯胺

a) (R)-2-經基-2-甲基-N-[(s)冬嗣-5_(2,2,2_三氣乙基）_6,7- 二氫-SH-二苯并【b，d]氮呼基】_]^，_(2,2,2-三氟-乙基）-丙二醯胺

將7 ml四氫吱喃中之75〇 mg (〇25 mm〇1)(s)_7_胺基_ 5H，7H-二苯并[b，d]氮呼-6_ 酮和 52 7 mg(〇 25 mm〇1)(R)_2- 爹二基2甲基N-(2,2,2-三氟-乙基）_丙醯胺酸之溶液冷卻至 OC並加入33.8 mg (〇·25 羥基·苯并三唑水合物、 86 μΐ (0.49 mmol)二異丙基乙胺和 47 9 mg (〇 25 議⑷Ν· (3 —甲基胺丙基）_Ν,_乙基·碳二亞胺鹽酸鹽。持續攪拌工6 J才条顧去除，谷劑並利用庚烷/乙酸乙酷（梯度從1〇/9〇至〇/6〇)於石夕膠上進行層析得到刃叫(3〇%)⑻_2_經基_2_甲土 N [(S) 6-酮 _5-(2,2,2’三氟 _ 乙基）_6,7_ 二氫巧H_ 二苯并 [b，d]氮呼-7-基]_抑^2,2,2

二氣-乙基）-丙二酸胺，MS 128432.doc -42- 200846005 (m/e) ： 504.4 (M+H)+ ° b) (S)_2-幾基-2_ 甲 *-N-[(S)-6-嗣-5_(2,2,2_三氟-乙基）-6,7_ 二氫-5H_二苯并[b，d】氮呼-7-基卜N’-(2,2,2_三氟-乙基）-丙二醯胺

⑩ 將7 ml四氫吱喃中之75.0 mg (0.25 mmol)(S)-7-胺基- 5H，7H-二苯并[b，d]氮呼·6·酮和 52.7 mg (〇·25 mmol)(S)-2-羥基-2-甲基-N-(2,2,2-三氟-乙基:丙醯胺酸之溶液冷卻至 0°C並加入33·8 mg (0·25 mmol)l-經基-笨并三嗤水合物、 86 μΐ (0.49 mmol)二異丙基乙胺和 47.9 mg (0·25 mmol)N-(3-二甲基胺丙基）-N，-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。持續隔夜擾拌。蒸餾去除溶劑並利用庚烷/乙酸乙酯（梯度從1〇/9〇至 φ 40/60)於矽膠上進行層析得到38 mg(31%)(S)-2-羥基_2-甲基善[⑻冬酮·5_(2,2,2-三氣-乙基）-6,7-二氫-5H-二笨并 [b，d]氮呼-7-基]-Ν，_(2,2,2-三氟-乙基）·丙二醯胺， * (m/e) : 504.4 (M+H)+ 〇實例14 (R/S)-N-(2,2-二氟-丙基）-2-經基-N-((S)-6-嗣-6,7-二氫 _5H-二苯并【b，d]氮呼基）_2_丙基-丙二醯胺 128432.doc -43- 200846005

將2·5 ml四氫呋喃中之5〇·〇 mg (〇·14 mmol)2-羥基_2· ((S)-6-酮-6,7-二氫_5Η-二苯并[b，d]氮呼基胺曱醯基:戍酸和14.2 mg(0.15 mmol)2,2-二氟丙基胺之溶液冷卻至〇°c 並加入20,2 mg (0.1 5 mmol) 1 -經基"苯并三峻水合物、39 μ 1 (0.3 mmol)二異丙基乙胺和28·6 mg(0.15 mmol)N-(3-二甲基胺丙基）乙基-碳二亞胺鹽酸鹽。持續隔夜攪拌。蒸餾去除溶劑並利用庚烷/乙酸乙酯（梯度從90 : 10至50 : 50) 於矽膠上進行層析得到30.0 mg(50%)(R/S)-N-(2,2-二氟-丙基）-2-經基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫-5H-二苯并[b，d]氮坪-7-基）-2-丙基-丙二醯胺：MS (m/e) : 446.1 (M+H)+。 128432.doc 44-

Claims

200846005 十、申請專利範圍： 1 ’ 種具有以下結構式之6 -酮-6,7-二氫- 5H-二苯并[i^d]氮呼-7 -基衍生物

其中 _ Rl為氫或經鹵素取代的低碳數烷基； r2 為低碳數烷基； R3 為經鹵素取代的低碳數烧基、-(CH2)n-環烷基或 -(CH2)n·苯基’其中本環係未經取代或經鹵素取代； η 為0、1或2 ; 或醫藥上適用的光學純差向異構物或彼等的混合物。 2.如請求項1之結構式I化合物，其中R1為氫且R3為經鹵素 ^ 取代的低碳數烷基。 3·如請求項2之結構式1化合物，該化合物為 , (R/S)-2 -經基-2-甲基-N-((S)-6-酉同-6,7·二氫-5Η-二苯并 [b，d]氮呼-7-基）-Ν’·（2,2,3,3,3-五氟-丙基）_丙二醯胺， (R) -2-經基-2 -甲基-N-((S)-6-酮-6,7-二氫·5Η·二苯并[b，d] 氮呼-7-基）-^*1’-(2,2,3,3,3-五氣-丙基）_内二酿胺， (S) -2-經基-2-甲基善((S)-6-酮-6,7-二氫二苯并[b，d] 氮呼-7-基）-1^’-(2,2,3,3,3-五氟-丙基）-兩二酸胺， 128432.doc 200846005 (R/S)-2-經基 _2-甲基-N_((S)-6·酮-6,7-二氫-5H_ 二苯并 [b，d]氮呼-7-基）·ν’-(3,3,3-三氟-丙基）-丙二醯胺， (S) 2 k 基-2-甲基-N-((S)-6 -酮-6,7 -二氫- 5H-二苯并[b，d] 氮呼-7-基）-N’-(3,3,3-三氟^ -丙基）_丙二醯胺， (R) 2 乙基-2-¾ 基-N-((S)_6 -酉同-6,7 -二氫- 5H-二苯并[b，d] 氮坪-7-基）-N’-(2,2,2-三氟·乙基）_丙二酿胺， (R/S)-2-瘦基-N_((S)冬酮_6,二氫乃H_二苯并[b，d]氮呼-7基）]^-(2,2,3,3,3-五氟_丙基）_2-丙基_丙二醯胺， (R) -2-經基-N_((s)-6__ _6,7_二氫-5H_二苯并[b，d]氮呼_7_ 基）-N-(2,2,3，3，3-五氟-丙基）-2 -丙基-丙二醯胺，或 (S) -2-羥基-义（（8)-6_酮_6,7_二氫 _5H_ 二苯并[b，d]氮呼 _7· 基）1^-(2,2,3,3,3-五氟_丙基）-2-丙基_丙二酸胺。 4·如明求項1之結構式I化合物，其中R1為經鹵素取代的低碳數烷基且R3為經鹵素取代的低碳數烷基。 5·如請求項4之結構式I化合物，該化合物為 (R) 2·.基-2-甲基-]^-[(8)-6_酮-5-(2,2,2-三氟_乙基）-6,7-一氫-5H-二苯并[b，d]氮呼基]_1^(2,2,3,3,3-五氟_丙基l·内二醯胺或 (8)2'私基-2-曱基->^[(8)-6-酮-5-(2,2,2-三氟-乙基）-6,7-一氣4H-二苯并[b，d]氮呼基]-Ν，·（2,2,2-三氟-乙基）-丙二醯胺。 6’ 種製備如請求項1-5中任一項之結構式〗化合物的方法’該方法包含： a)令結構式II化合物： 128432.doc II 200846005

與結構式III化合物：

0 III 反應而生成結構式I化合物：

其中該等取代基之定義係如請求項丨中所描述；或 b)令結構式IV化合物··

與化學式NH2R3的胺反應，而生成結構式I化合物··

其中該等取代基之定義係如請求項1中所描述；及’如有必要，將結構式I化合物的差向異構形式之物之（R/S)轉變為差向異構物（R)和差向異構物（s)。 128432.doc 200846005 7·如請求項〗/ 、、中任~項之化人私 ^ 項β的方法 & 、口，，、中該化合物係由請求 4 Η寺方法所製備。 8· 一種醫藥品，苴〆、匕3 一種或多種如▲主上化合物和醫藥μ ^求項Μ中任一珀之 W樂上可接受的賦形劑。 T仕項之 9. 如明求項8之醫藥口甘/么 <西柰0口，其係用於症。柯茲海默病或癌 10. —種如請求項〗_5中任一項之化合物之造治療阿兹海默病或癌症的醫藥品。4，其係用於製 128432.doc 200846005 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明：八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式： . (無）

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