TW200813040A - Xinafoate salt of a substituted 5-oxazol-2-yl-quinoline compound - Google Patents

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200813040 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於l-[[5-(l(S)-胺乙基）-2-[8·甲氧基-2_(三氟 甲基）-5-喹啉基]-4-崎唑基]羰基]-4(ΙιΗ(環丙基_羰基）胺 基PL-脯胺酸乙酯之羥萘甲酸鹽、包含該鹽之醫藥組合物 及藉由吸入該鹽治療上部及下部氣管阻塞性疾病之方法。 【先前技術】 已知磷酸二酯酶調節環AMP ,且磷酸二酯酶4(pDE4)已 展示為呼吸平滑肌及發炎細胞中環AMp之主要調節劑。 PDE4之抑制劑適用於治療各種疾病，包括過敏及發炎疾 病、糖尿病、中樞神經系統疾病、疼痛及產生tnf之病 毒。 胺基-取代之喹啉基PDE4抑制劑揭示於us 5,8〇4,588 中；磺醯胺-取代之喧啉基PDE4抑制劑揭示於us 5,834,485中，且（苯稠合）雜芳基_取代之pDE4抑制劑揭示 於US 6,069，151中。噚哇基-取代之喹啉基酬特卩制劑揭 示於 PCT/US2005/017134 中。 本文中稱為化合物A之化合物於w〇 2〇〇5/116〇〇9A1第％ f實例26-347及第228頁請求項19中描述為其游離鹼及醫 藥學上可接受之鹽形式；彼等描述以引入的方式併入本文 中。 【發明内容】 本發明提供l-[[5-(l(S)-胺乙基）_2_[8_曱氧基_2_(三氟曱 基）-5-啥琳基十坐基]幾基[4叫[(環丙基_獄基）胺基]_ 122437.doc 200813040 L-脯胺酸乙酯之羥萘甲 酸鹽 亦即式I化合物··

本發明亦係關於一種治痒兩 ,^ ^ 療而要該治療之患者的氣管上部 或下部阻塞性疾病之方 有效量之式μ合物。-包含藉由吸入對該患者投予 係關於—種治療需要該'冶療之患者的氣管上部 或下口卩阻I性疾病之方 其包含藉由吸入對該患者投予 有效里之式1化合物與至少_ 種其他適用於治療氣管上部 或下部阻塞性疾病之藥劑 结主 ’、、、、且3。其他藥劑較佳為β-促效 ^ 早毋驗拮抗劑或皮質類固醇。 本發明進一步係關於一種包 但匕含有效夏之式！化合物之可

U 吸入型醫藥組合物。 ^發明進—步係㈣—種包含有效量之式！化合物斑至 H適用於治療Ή部或τ部阻塞性疾病之其他藥劑 之、、且5的可吸入型醫藥組合物。 本發明亦係關於式1化合物之晶態多晶型物及假多晶型 物（水合物），其中該多晶型物係選自由以下形式組成之群·· 7垄7 ·其展示實質上與圖1所示圖幸. 射圖案； 丁㈣㈣之粉末X-射線繞 2型·其展示實質上與圖2所示圖案相 J之粉末X-射線繞 122437.doc 200813040 射圖案；及 7垄/二#合场：其展示實質 、 /、圖3所不圖案相同之粉末 X-射線繞射圖案。 3垄7 :其展示實質上與圖1〇所 口 U所不圖案相同之粉末X-射線 射圖案。 本發明進-步提供式⑴型晶態多晶型物’其展示具有 6安卜7.7、13·。及15.9度2Θ特徵峰位置之粉末1射線繞射圖 Ο u 案。 ——例中’式…型晶態多晶型物展示具有Μ、 6· 1、7.7、13.0、15 9、1 7 父 λ 〇 ^ · 7.8、18.4及26.1度2Θ特徵峰位置 之粉末X-射線繞射圖案。 在另一實施例中，式1荆曰〜a 1日日悲夕晶型物展示具有5 · ό、 1 7 7 9·2、13·〇、14·2、15·9、17·8、18·4、20 5、 ㈣…度⑼特徵峰位置之粉末χ•射線繞射圖宰。 1〇t發；:Γ步提供式1之2型晶態多晶㈣，其展示具有 圖案 9·1及21.2度2Θ特徵峰位置之粉末X·射線繞射 在另一實施例中，斗、τ 式之2型晶態多晶型物展示具有 10.6、13.6、17.9、18 s 啕 • 19·1、20.2、21.2 及 23 9 产 主 徵峰位置之粉太特 寸刀禾Χ·射線繞射圖案。 在另一實施例中，+ 工 型晶態多晶型物展示具有9.4、 10·6、13.6、17.9 、19」、2〇 2、21 2 26.6及 28.1 度 20特 26*° ^ 峰位置之粉末X-射線繞射圖案。 本舍明進一步接彳ϋ 乂柃供式1之丨型晶態二水合物，其展示具有 122437.doc 200813040 8.2、 16.5、18·5 及 24·9 声 ι 々 圖案。 心特徵緣位置之粉末X-射線繞射 在另一實施例中，式1 8.2、 14.3、16.5、16.9、18二 展示具有5·5、 .20·6及24·9度2Θ特徵峰位晉 之粉末X-射線繞射圖案。 置 在另一實施例中，式j之] t 1日日怨二水合物展示具有5·5、 7 · 2、8 · 2、14 · 3、14 7、1 < c ·7 16.5、16.9、18.5、2〇6、241、 24·9及26.8度2Θ特徵峰位置之粉末X-射線繞射圖案。 本發明進-步提供式心型晶態多晶型 4.6、7.9、12 1 及 18 Q 疮 具有 案。 特徵峰位置之粉末X-射線繞射圖 7Q在另一實施例中，式1之3型晶態多晶型物展示具有46、 入9、9」、1^1 n Η /、有 4.6 之粉末X-射線繞射圖案。6·5及18·9度2β特徵峰位置 Ο 在另一實施例中，式⑷型晶態多 峰位置 2〇.〇、23_9、24.3及25.7度 .·、 圖案。 直之‘末X-射線繞射 本發明進一步接JJ£ $ # & 經蔡甲酸鹽之^ 用於自化合物A製備〗型多晶型物 第一種方法： 122437.doc 200813040

化合物A 其包含以下步驟： a)將化合物A溶解於熱乙醇中且添加羥萘曱酸，同時繼 續加熱混合物； 1 、 、τ- i -T tt:六 T7 U n .人I ii. -r： X-b 、-、也 〇?匕 · ϋ) 刀口领川'。臼予汉个jj- Titr π匕，y η乃；^王仗处/卬騰 ， c) 過濾熱混合物，隨後緩慢冷卻至室溫且使混合物在 室温下靜置隔夜直至形式I晶體沈澱；且 d) 將濾液冷卻至0°C且過濾1型晶體。 弟《—·種方法·

化合物A 其包含以下步驟： a) 將曱苯及曱醇添加至化合物A及羥萘曱酸中且混合形 成漿液； b) 在混合下將該漿液加熱至約621，產生均質混合物； c) 常壓蒸餾該均質混合物，將蒸餾混合物冷卻至約 50°C，以化合物A 1型晶種接種該蒸餾混合物，在漿 122437.doc -10- 200813040 Ο 液中得到晶體； d) 在約5〇。。下將該漿液攪拌約3〇分鐘且將該漿液冷卻至 約 10°C ; e) 在冷卻漿液中添加額外甲| r τ本且真空蒸餾，隨後添加 額外甲苯且在約2 0 °C下谱胜的9 n八μ 償拌、，，勺20刀鐘形成固體材料； f) 在真空下使用攪拌型乾焊涔你隹& _ ’ 乾炼杰收集所得固體形成濕濾 餅，以甲苯洗務該濕瀘餅且益辦 〜斯1無攪拌地在約50°C下乾燥 約3小時，隨後以約2〇 r p M擰扯 卞 ·Ρ·Μ•攪拌在約80。(：下乾燥約 12小時，隨後以約6〇 ρ ο Μ碑4 …Μ•攪拌在約sot:下乾燥約 12小時，所有操作均在真空下進行。 弟二種方法： Ο

a) 將化合物A及羥萘曱酸分別溶解於熱甲醇中； b) 過濾該2種熱溶液且混合該等兩種溶液； 其包含以下步驟： C)使混合物回流且蒸餾出過量甲醇；且 d)將混合物冷卻至吖形成沈殺且過據㈣晶體。 本發明進一步提供為卜古、土 態多晶型物。“上述方法之產物的化合物…型 本發明進—步提供一種用於自化合物八製備2型多 曰曰 型物 122437.doc 200813040 羥萘曱酸鹽之方法：

‘ 其包含以下步驟： () ^將化合物A溶解於熱曱醇中且添加羥萘甲酸，同時繼 續加熱混合物； b)添加水且將混合物加熱至接近沸騰； Ο過濾熱混合物，隨後緩慢冷卻至室溫且使混合物在 室溫下靜置隔夜直至2型晶體沈澱；且 d)將濾液冷卻至〇°c且過濾2型晶體。 本發明進一步提供為上述方法之產物的化合物A之2型晶 悲多晶型物經萘甲酸鹽。 υ 本發明進一步提供—種自化合物型多晶型物經萘甲 酸鹽製備1型二水合物之方法：

其包含以下步驟： a)在經#甲酸鹽形成期間需添加纟以獲々寻晶態形式 122437.doc -12- 200813040 將化合物A之I型多晶型物羥萘曱酸鹽懸浮於水與甲 醇之混合物中； b) 將懸浮液搜拌21小時，藉由離心懸浮液隨後傾出上 清液來分離固體； c) 在真空下在室溫下乾燥固體。 本發明進一步提供為上述方法之產物的化合物八之2型晶 態二水合物多晶型物經萘甲酸鹽。 本發明進一步提供一種用於自化合物A製備3型多晶型物 羥萘曱酸鹽之方法：

其包含以下步驟： i) a)於2_丙醇中合併化合物A與羥萘甲酸之混合物； b) 將混合物加熱至回流且添加更多2-丙醇；將混合物保 持在回流下約1小時隨後冷卻至室溫； c) 過濾混合物、以2-丙醇洗滌固體、在真空下乾燥。 本發明進一步提供為上述方法之產物的化合物八之3型晶 態多晶型物羥萘甲酸鹽。 本發明進一步提供式I化合物之丨型多晶型物之純化形 式。 ^ 本發明進一步提供式I化合物之2型多晶型物之純化形 122437.doc -13 - 200813040 式。 本&明進一步提供式I化合物之1型二水合物多晶型物之 純化形式。 本發明進一步提供式I化合物之3型多晶型物之純化形 式。 本發明亦主張一種治療需要該治療之患者的氣管上部或 下部阻塞性疾病之方法，其包含藉由吸入對該患者投予有 ζ\ 效蓋之式1化合物之1型多晶型物以及包含有效量之式I化合 物之1型多晶型物及醫藥學上可接受之載劑的可吸入型醫 藥組合物。 本發明亦主張一種治療需要該治療之患者的氣管上部或 下部阻塞性疾病之方法，其包含藉由吸入對該患者投予有 效量之式1化合物之2型多晶型物以及包含有效量之式I化合 物之2型夕Bg型物及醫藥學上可接受之載劑的可吸入型醫 樂組合物。 (j 本赉明亦主張一種治療需要該治療之患者的氣管上部或 下部阻塞性疾病之方法，其包含藉由吸入對該患者投予有 • 效置之式1化合物之1型二水合物以及包含有效量之式I化合 物之1型二水合物及醫藥學上可接受之載劑的可吸入型醫 ~ 藥組合物。 本發明亦主張一種治療需要該治療之患者的氣管上部或 下部阻塞性疾病之方法，其包含藉由吸入對該患者投予有 效量之式I化合物之3型多晶型物以及包含有效量之式丨化合 物之3型多晶型物及醫藥學上可接受之载劑的可吸入型醫 122437.doc 14 200813040 藥組合物。 【實施方式】 以下稱為化合物Α且具有結構

Ο

化合物A 之式I游離鹼於PCT/US2005/017134中揭示為實例26·381 , 。亥專利以引入的方式併入本文中。 式I化合物（化合物Α之羥萘曱酸鹽）為不吸濕性晶態鹽且 顯示3種多晶型物及1種水合物。 當藉由吸入投藥日夺，與化合物A或化合物A之其他鹽相 比’式I化合物對於治療氣管上部及下部阻塞性疾病具有 出乎意料之優良物理及藥物動力學概況。鱗酸鹽、順丁歸 二酸鹽及琥珀酸鹽為非晶形鹽；酒石酸鹽為晶態鹽，但具 有吸濕性；反丁烯二酸鹽具有晶態形式，但彼等形式為; 穩定水合物。因此與其他鹽相比，對於用於吸人型調配物 而言，羥萘甲酸鹽出乎意料地優於其他鹽。此外與口服投 藥相比，搜奈甲酸鹽經由氣管内投藥展示25倍更佳之發炎 細胞抑制作用。 Λ 發現式I化合物存在3種不同晶態多晶型物及丨種水合 物。此等4種形式在本文中稱為㈣、_、3型及玉型二水 J22437.doc -15- 200813040 合物。由於此化合物之預 此幻化合物之最穩定醫藥學上療活性藥劑’因 關注。 又之形式將受到主要 1型為用於本發明方法之較㈣式。 多態現象可表徵為化合物处Β 保持相同化學式之能力。給定：=同晶體形式’同時 化學上與彼藥物物質 ” h之晶態多晶型物在 以相同方式鍵結之相同々子：他晶態多晶型物在含有彼此 面不同，晶體形式可^子_方二一致，但在其晶體形式方 性、溶解性、熔點、容 ，〃一老如穩疋 等。 積在度、流動特性、生物可用性 如本說明書全文所彳由m 應理解為具有下列含義：’除非另外說明，否則下列術語 ”患者"包括人類及其他動物。 ϋ :哺乳動物"包括人類及其他哺乳動物。 多晶型物”意謂不同於另一晶態形式但共 之物質的晶態形式。 子式 本么月之夕曰曰型物π意謂式1化合物之晶態多晶型物。 醇，’意謂含以基㈤Η)之有機化合物。 ^形劑”意謂用作稀釋劑或為產生調配物形式或稠度之 基本上惰性物質。 ”有效丨’赤丨’後士 、 〆 。、效意欲描述本發明化合物之多晶型物 或^發明組合物’其有效用作PDE4抑制劑且因此產生所 要〜療、改善、抑制或預防作用。”有效量”或”治療有效 122437.doc -16- 200813040 量”意欲描述本發明多晶型物或組合物之量，該多晶型物 或組合物有效用作PDE4抑制劑且因此產生所要治療、改 善、抑制或預防作用。 *由式1化合物治療之上部及下部氣管阻塞性疾病包括哮 喘、COPD(慢性阻塞性肺病）、^生支氣管炎、囊腫性鐵 維化、過敏性鼻炎、非過敏性鼻炎、鼻竇炎、成人呼吸道 ^、急性呼吸箸迫綜合征、料病毒症、《、間質性 f ' 肺炎、慢性竇炎、氣流阻塞、氣管高反應性、支氣管擴張 官f症候群）、呼吸困難、氣腫、呼吸過度、過度擴張、 低氧血症、高氧症誘發之發炎、肺纖維化、肺動脈高血 壓、小氣管病、氣喘及發冷。 式1化合物較佳用於治療哮喘、c〇pD、咳嗷、氣流阻 塞、氣管高反應性、、細支氣管炎、慢性支氣管炎、氣腫、 肺纖維化、肺動脈高血麼、小氣管疾病、氣喘及過敏性鼻 4 炎。 式1化合物更佳用於治療COPD及哮喘。 與式I化合物組合使用以治療阻塞性氣管疾病（例如 COPD或哮喘)之其他藥劑係選自由以下各物組成之群：類 口醇（例如糖皮貝激素）、脂肪加氧酶抑制劑、腎上腺 素受體促效劑、腎上腺素受體促效劑、蕈毒鹼Ml拮抗 劑、蕈毒鹼M3拮抗劑、蕈毒鹼M2拮抗劑、拮抗劑、 半胱白二烯拮抗劑、支氣管擴張劑、pDE4抑制劑、 弹性蛋白酶抑制劑、難㈣制劑、磷脂酶A2抑制劑、磷 122437.doc 200813040 脂酶D抑制劑、組織胺Η1拮抗劑、組織胺H3拮抗劑、多巴 胺促效劑、腺苷Α2促效劑、ΝΚ1拮抗劑、ΝΚ2拮抗劑及 ΝΚ3 t抗劑、gAB A-b促效劑、孤啡狀促效劑、柱瘦劑、 溶黏蛋白劑、減充血劑、肥大細胞穩定劑、抗氧化劑、 抗-IL-8抗體、抗-IL-5抗體、抗IgE抗體、抗TNF抗體、IL-10、黏著分子抑制劑、生長激素及其他PDE4抑制劑。

Q 與式I化合物組合使用之抗組織胺之非限制性實例包括 阿司咪唑（astemizole)、阿紮他定（azatadine)、氮拉斯、汀 (azelastine)、阿伐斯丁（acrivastine)、渗婪抓絲 (brompheniramine)、西替利嗓（certirizine)、氣芬胺 (chlorpheniramine)、克立馬丁（clemastine)、赛克利 口秦 (cyclizine)、卡瑞斯、汀（carebastine)、二苯環庚 口定 (cyproheptadine)、卡比沙明（carbinoxamine)、去竣乙氧基 氯雷他定（descarboethoxyloratadine)、苯 ϋ比拉明 (doxylamine)、二曱吡茚（dimethindene)、依巴斯、;丁 (ebastine)、依匹斯汀（epinastine)、乙氟利嗪（efletirizine)、 弗克芬德（fexofenadine)、羥嗓（hydroxyzine)、酮替盼 (ketotifen)、 洛拉他定（loratadine)、左卡巴司汀 (levocabastine)、口米 ϋ坐斯 >、丁（mizolastine)、乙酉昆他口秦 (equitazine)、 米 安舍林(mianserin)、諾柏斯、;丁 (noberastine)、美克利嗪（meclizine)、去甲阿司口米哇 (norastemizole)、旅香豆司特（picumast) 、 口比拉明 (pyrilamine)、異丙唤(promethazine)、特非那定 (terfenadine)、曲 °比那明（tripelennamine)、替美斯〉、丁 122437.doc -18- 200813040 (temelastine)、二曱潑拉嗓（trimeprazine)及曲普利咬 (triprolidine) 〇 組織胺Η;受體拮抗劑之非限制性實例包括：硫哌咪胺 (thioperamide)、英普咪定（impr〇midine) 、 丁咪胺 (burimamide) 氣苯匹特（clobenpropit)、英盤他明 . (imPentamine)、咪吩他定（mifetidine)、索普咪定（S、 • s〇Promidine)、索普咪定、SKF-91480、GR-175737、 (、 GT-20 16、UCL-1199及氯氮平（ci〇zapine)。藉由包括豚鼠 大腦薄膜檢定及豚鼠神經元回腸收縮檢定（雨者皆描述於 美國專利5,352,707中）之已知方法可容易地評估其他化合 物以測定對H3受體之活性。另一適用之檢定係利用大鼠大 腦薄膜且描述於 West 等人，，，Identification 〇f tW0-H3、 Histamine Receptor SubtypesM Molecular Pharmacology , 第 38卷，第 610-613 頁（199〇)。 術語”白三烯抑制劑”包括抑制、限制、延遲或與白三烯 〇 之作用或活性相互作用的任何藥劑或化合物。白三烯抑制 劑之非限制性實例包括孟魯司特（montelukast)及其鈉鹽·， (⑻-(3-(2”二氟_2_喹啉基）乙烯基）苯基）_3-(2-(2_輕 基-2-丙基）苯基）硫基）甲基環丙烷乙酸及其鈉鹽，其描述 於美國專利 5,270,324 中；；u(((1(R)-3(3_(2-(2，弘二氯噻吩 幷[3,2-bp比啶-5-基）调_乙烯基）苯基）冬(2-(1_經基小甲基 乙基）苯基）丙基）硫基）曱基）環_丙烷乙酸及其鈉鹽，其描述 於美國專利5,472,964中；普命斯特（pranlukast);紮魯司特 (zafirhakast);及叫叫心茗三n嗟嗤基）_5_苯幷呋喃 122437.doc -19- 200813040 基]氧基甲基]苯基]乙酸，其描述於美國專利5,296，495中。 β-腎上腺素受體促效劑之非限制性實例包括：舒喘寧 (albuterol)、比托特羅（bitolterol)、乙基喘息定（isoetharine)、 邁普特諾（mataproterenol)、普布特羅（perbuterol)、沙美特 羅（salmeterol)、特布他林（terbutaline)、異丙基腎上腺素 (isoproterenol)、麻黃素（ephedrine)及腎上腺素（epinephrine)。 α-腎上腺素受體促效劑之非限制性實例包括芳基烷基胺 (例如本丙酵胺及假麻黃素）、υ米σ坐（例如萘唾琳、經甲唾 f、E?氫嗤货、及赛洛嗤嘴、）及環烧基胺（例如六氫脱氧麻黃 驗）。 肥大細胞穩定劑之非限制性實例為奈多羅米 (nedocromil)鈉。祛痰劑之非限制性實例為哌芬那辛 (guaifenesin)。減充血劑之非限制性實例為假麻黃素、苯 丙醇胺及苯腎上腺素。 其他PDE4抑制劑之非限制性實例包括羅氟司特 (roflumilast)、茶驗（theophylline)、洛利普（r〇lipram)、匹 克米斯特（piclamist)、西洛司特（cilomilast)及 CDP-840。類 固醇之實例包括強的松龍（prednisolone)、氟替卡松 (fluticasone)、曲安西龍（triamcinolone)、倍氣米松 (beclomethasone)、莫美他松（mometasone)、布締薩味 (budisamide)、倍他米松（betamethasone)、地塞米松 (dexamethasone)、強的松（prednisone)、氟尼縮松 (flunisolide)及可的松（cortisone)。 NK!、NK2及NK3速激肽受體拮抗劑之非限制性實例包括 122437.doc -20- 200813040 CP-99,994及SR 48968。蕈毒鹼拮抗劑之非限制性實例包 括漠化異丙托銨及溴化噻托銨。 GAB AB促效劑之非限制性實例包括氯苯胺丁酸及3-胺基 丙基-一元膦酸。多巴胺促效劑包括喹吡羅（quinpir〇le)、 羅匹尼羅（ropinirole)、普拉克索（pramipex〇le)、培高利特 (pergolide)及漠隱亭（br〇m〇criptine)。 _ ”5-脂肪加氧酶抑制劑，’包括抑制、限制、延遲或與5_脂 肪加氧酶之酶促作用相互作用之任何藥劑或化合物。5-脂 肪加氧酶抑制劑之非限制性實词包括齊留通（zileiii〇n) '多 西苯 S昆（docebenone)、批瑞斯特（pirip〇st)、ICLD23 i 8 及 ABT 761。 藉由流程1或2中所概括及下文實例1或2中詳述之程序製 備式I化合物。在實例1及本申請案別處，Et意謂乙基；Me 意謂曱基，THF為四氫呋喃；DMF為N，N_二甲基甲醯胺； t-BOC及BOC意謂第三丁氧基羰基；RT^室溫；HATUg Q #-[(二甲胺基）-177-1，2,3-三唑幷[4554p比啶-1-基亞甲基]- 曱基曱烷銨六氟磷酸鹽N-氧化物。 122437.doc -21 - 200813040

流程1

實例1 步驟1 :

在化合物 1(100.6 g，0.767 mol)於 EtOH( 1000 ml)中且冷 卻至o°c之機械攪拌懸浮液經由加料漏斗逐滴添加 S〇C12(136.9 g，1.15 mol，84.0 ml)使得内部溫度< 15°C。 在回流下將反應混合物加熱2.5小時，隨後冷卻至0°C。添 加乙醚（1000 ml)且白色固體沈澱。藉由真空過濾分離固體 且以乙醚洗滌之。在真空烘箱中乾燥產物2(HC1鹽）以產生 146.3 g(97%)白色固體。MS (M+l): m/e 160。b-NMR 122437.doc -22- 200813040 (DMSO) δ 1.25 (t，3H)，2.05 (m，1H)，2.20 (m，1H)，3.05 (d， 1H)，3.40 (dd，1H)，4.20 (q，2H)，4·45 (m，2H)，5.65 (寬峰 s， 1 H)。 步驟2 : 在化合物2(HC1鹽，ΐ46·2 g，0·747 mol)溶解於 CH2C12(1600 ml)及Et〇H(l〇〇 ml)中且冷卻至〇°C之溶液中 添加 Et3N(113.4 g，1.12 m〇l，156.2 ml)。逐份添加 t-BOC 酐（195.6，0.90 mol)。在〇°C下將反應混合物攪拌15分鐘， 隨後在室盖下授拌1 6小時。將所得混合輪濃縮至約goo w 體積且以水洗滌。將有機溶液乾燥（MgS〇4)、過濾且濃 縮。藉由矽膠層析（溶離劑：20% EtOAc-CH2Cl2)純化產生 黃色油狀產物 3(193.7 g，1〇〇%)。MS (M+Na): m/e 282。 iH-NMR (CDC13) δ 1.30 (t，3H)，1.45 (s，9H)，1.75 (m，1H)， 2·1〇 (m，1H)，2.30 (m，1H)，3.45 及 3.55 (d，1H 兩個旋轉異 構體），3.65(〇1(1，111)，4.25(111，211)，4.40及4.45(1111兩個 旋轉異構體），4·55 (寬峰s，1H)。 步驟3 : 、、工由加料漏斗在化合物3(3 6· 5 g，〇· 141 mo 1)及三苯膦 (46·2 g’ 〇·176 mol)溶解於無水71^(1〇〇〇 ml)中且冷卻至 〇 C之溶液中逐滴添加偶氮二甲酸二乙酯（30.7 g，〇.176 mol)。在〇 c下將反應混合物攪拌5分鐘，隨後以一份添加 UBt(61，i g，0·704 m〇1)。在室溫下將所得混合物攪拌μ 小時。蒸發溶劑，添加水（15〇〇 ml)且萃取水溶 液。將經合併之有機萃取物乾燥（MgS〇4)、過濾且濃縮。 122437.doc -23 - 200813040 藉由石夕膠層析（溶離劑：2% EtOAc-CH2Cl^ 5% EtOAc-CH2C12)純化產生黃色油狀產物4(318 g，7〇%)。ms (M+1): m/e 322及 324。h-NMR (CDC13) δ 1.30 (m，3H)， 1·45 及 1.50 (s，9Η 兩種旋轉異構體），2·45 (m，1Η)，2.85 (m， 1H)，3·75 (m，1H)，4.05 - 4.40 (m，5H)。 步驟4 : 在化合物4(41.2 g，0.128 mol)溶解於無水DMSO(300 ml)中之溶液中添加NaN3(9.15 g，0.141 mol)。在室溫下將 反應混合4勿擾拌16小時-添加水（3 0〇 ml)，且以乙鱗萃取 水溶液。將經合併有機萃取物乾燥（MgS04)、過濾且濃縮 以產生油狀產物 5(36.4 g，100%)。MS (M+Na): m/e 307。 1H-NMR (CDC13) δ 1·30 (t，3H)，1.45及 1.50 (s，9H兩種旋 轉異構體），2.20 (m，1H)，2.35 (m，1H)，3.50 及 3.60 (m，1H 兩種旋轉異構體），3.75 (m，1H)5 4·15 4·45 (m，4H)。 步驟5 : 在化合物5(36.4 g，0.128 mol)溶解於THF(800 ml)中之 溶液中添加10%披鈀碳催化劑（1〇·〇 g)。在40 psi氫壓力下 於Parr振盪器上將反應混合物振盪1 6小時。藉由過濾移除 催化劑且以異丙醇洗滌。濃縮濾液。藉由矽膠層析（溶離 劑：（：112(：12隨後具有NH3 - CH2C12之10% MeOH)純化產生 淺灰色固體產物6(24.2@，73%)。]\/18(]^+1):111/^ 259。111-NMR (CDC13) δ 1·30 (t，3H)，1·45及 1·50 (3, 9H兩種旋轉異 構體），2.00 (m，1Η)，2.15 (m，1Η)，3·10 及 3.20 (m，1Η 兩種 旋轉異構體），3·70 (m，2H)，4·20 (m，2H)，4.35 及 4.40 (m， 122437.doc -24- 200813040 1H兩種旋轉異構體）。 步驟6 : 在化合物 6(12.0 g，0.0464 mol)溶解於無水 Ch2C12(300 ml)中之溶液中添加玢3叫9.4 g，〇〇93 _，13〇 ml)，隨 後添加環丙烷羰基氯（5·3 g，〇 〇51 m〇1，4·64 ml)。在室溫 下將反應混合物攪拌16小時。添加水（2〇〇 ml)，且以 CHAb萃取水溶液。將經合併有機萃取物乾燥（MgS〇4)、 過濾且濃縮。藉由矽膠層析（溶離劑··具有nh3 - CH2C12之 純化得到油狀產物7(14.3 g，94%)。MS (M+Na): m/e 349 〇 ^-NMR (CDC13) δ 0.75 (d5 2H)? 1.00 (見峰 s，2H)，1.30 (t，3H)，1.35 (m，1H)，1·45及 1.50 (s，9H 兩種旋轉異構體），2.25及2·30 (m，2H旋轉異構體），3.30及 3·45 (dm，1H 旋轉異構體），3.80 (m，1H)，4.15 - 4.45 (m， 3H)，4.55 (m，1H)，5.95及6·10 (寬單峰，1H旋轉異構體）。 步驟7 : 在化合物 7(40.0 g，0.123 mol)溶解於 CH2C12(550 ml)中 之溶液中添加二1烷〇 53 ml，0.613 mol)中之4 N HC1。在 室溫下將反應混合物攪拌4小時，隨後濃縮以得到無色泡 沫狀產物 8(32.2 g，100%)。MS (M+l): m/e 227。iH-NMR (CDC13) δ 0.75 (d，2H)5 0.90 (m，2H)，1·30 (t，3H)，1.55 (m， 岡，2.35 (m5 1H)，2.55 (m，1H)，3.70 (m，2H)，4.25 (m， 2H)，4.75 (m，2H)，8.35 (d，1H)，9.05 (寬峰 s5 1H)。 步驟8 : 在化合物 8(5.5 g，20.8 mmol)與魏酸9(10.0 g，20.8 122437.doc -25- 200813040 mmol)於無水DMF(300 ml)中之混合物中添加3 A篩（10·0 g)、Et3N(6.3 g 5 62.3 mmol j 8.7 ml)，隨後添加 HATU(1 5.8 g，41.6 mmol)。在室溫下將反應混合物攪拌 21小時，隨後濃縮溶劑。添加水（400 ml)，且以CH2C12萃 取水溶液。將經合併有機萃取物乾燥（MgS04)、過濾且濃 縮。藉由矽膠層析（溶離劑·· 20% EtOAc-CH2Cl2至60% EtOAc-CH2Cl2)純化產生無色泡沫狀產物10(14.0 g， 98%)。MS (M+l): m/e 690。NMR光譜參見圖 3。 步驟9 : 在化合物 10(42.1 g，0.061 mol)溶解於 CH2C12(600 ml)中 且冷卻至0°C之溶液中添加二噚烷（76 nd，0.305 mol)中之4 N HC1。隨後在室溫下將反應混合物攪拌5小時且隨後濃 縮。將粗產物溶解於1:1 EtOH:H2O(120 ml)中且以25% NaOH水溶液使其呈鹼性（pH=9-10)。添加CH2C12(700 ml)，且攪拌反應混合物直至所有固體溶解。分離各層且 以CH2C12萃取水溶液。將經合併有機萃取物以鹽水洗滌， 乾燥（MgS04)，過濾且濃縮。添加額外CH2C12且再次濃縮 混合物。添加乙醚且濃縮混合物以產生淡黃色固體狀化合 物 11(化合物 Α)(34·4 g，96%)。MS (M+l): m/e 590。NMR 光譜參見圖4。 在實例2及本申請案別處，Et意謂乙基，Me意謂曱基， ETOH意謂乙醇，NMR意謂核磁共振，THF為四氫呋喃， DMF為N，N-二甲基曱醯胺，t-BOC及BOC意謂第三丁氧基 羰基，RT為室溫，DMSO意謂二曱基亞颯，Et3N意謂三乙 122437.doc -26- 200813040 胺，NaHMDS為雙（三甲基矽烷基）醯胺鈉，HOBT為羥基苯 幷三唑，EDCI HC1為1-乙基-3-[3-二甲胺基）丙基]-碳化二 fe亞胺鹽酸鹽’ NMP為N-甲基吡咯啶酮，ca為大約（約）， KF為卡爾-費休（Karl jpisher)，且玢〇八(：為乙酸乙酯。 流程2 〇

步驟3 -►

實例2 步驟1 :

將（S) 2弟—丁氧基幾基胺基-丙酸8.8 kg (4 6.5莫耳，2當 S)裝入裝備有熱電偶、沁入口及饋料槽之5〇 L Hasteli〇y 反應器中。將無水四氫呋喃（9〇公升）（THF ’ KF < 〇·05%)添 加至該批料中且通電以溶解。將二環已胺8.5 kg(46.9莫 耳，2當量）添加至該批料中且在介於_5與代之間的溫度範 圍内經約30分鐘緩慢通電。在介於_5與5。〇之間的溫度範 圍内將該批料授拌約15分鐘。將三甲基乙酿氯5.7 MW.3 莫耳，2當量）添加至該批料中且在介於_5與5。〇之間的溫度 範圍内經約3G分鐘緩慢通電。在介於與5。(：之間的溫度 範圍内將該批料攪拌約3小時。將庚別27公升）添加至該批 122437.doc -27- 200813040 料中且接著裝入C藻土。在町過濾該批料，且以 庚烷中30% v/v THF洗滌濾餅。濃縮濾液。在真空下將人 於。亥批料中之濾液及洗滌液濃縮至約％公升之批料體積。 將™F(27公升）添加至該批料中且通電。將批料温度調整 為約20至3GC。將批料採樣用於研<()屬㈣。該批料為 混合酐THF溶液且力4、 欣且在未進一步純化之狀況下用於下一牛 驟。 乂

ϋ 加將化合物(1A)9.〇 kg(23.3莫耳，i當量)饋入裝備有熱電 偶’ A入口及饋料槽之5〇加侖玻璃内襯反應器中=將us 公升無水四氫呋喃（THF，KF < 〇〇5%)添加至該批料中Α = 通電以溶解。在1大氣壓下將批料濃縮至約81公升之批料 體積。將溫度調整為約_60至_7〇。〇。添加NaHMDs(於thf 中2M ’ 2.70 kg，5.9莫耳，0.25當量）且在介於_6〇與_7〇〇c 之間的溫度範圍内經約15分鐘通電。在介於_6〇與_7〇它之 間的溫度範圍内將批料攪拌約5分鐘。添加上述thf溶液 中之混合酐（0.83 kg活性，3.2莫耳，〇·14當量）且在介於_6〇 與-70 C之間的溫度範圍内經約1 5分鐘通電。在介於_6〇 與-70°C之間的溫度範圍内將批料攪拌約1〇分鐘。將2次裝 料（於THF中2M NaHMDS)及混合酐之順序再重複7次，總 計8組裝料或直至轉化率270%。繼續裝ANaHMDS(於tHF 中2M)，接著裝入以剩餘起始材料之量計相同比率之混合 酐直至轉化率294%。經約1 5分鐘將該批料緩慢轉移至1 3 5 kg ΚΗβΟ4溶解於90公升出0中之水溶液中，同時保持批 料溫度低於3(TC。添加乙酸乙酯（59公升）且通電隨後搜摔 122437.doc -28- 200813040 約ι5分鐘且使各層靜置。以45公升乙酸乙醋萃取水層。以 32公舞w/V NaCl水溶液將經合併有機層洗務兩：。將 有機層作為批料在i大氣壓下濃縮至約巧公升之批料體 積。將90公升甲基第三丁基醚(Mtbe)添加至該批料中且 $電。在1大氣壓下將批料濃縮至約54公升之批料體積。 在介於55與65°C之間的溫度下饋入45公升甲基第三丁基 • 醚。將108公升庚烷添加至該批料中且在介於55*6yc2 ( ' 間的溫度下通電。將溫度調整為約45至55°C且攪拌約3〇分 鐘。隨後經約1小時將溫度調整為約·5至5乞e在介於·5^ 之間的溫度下將該批料攪拌約3〇分鐘。過濾批料形成 濾餅且以庚烷中33% v/v甲基第三丁基醚洗滌。在真空烘 孝目中在45至55°C下將該批料乾燥至少12小時，產生8 4 kg (72.2%)固體狀化合物（2A)，ee >99.0%。 ]H NMR (400 MHz, CDC13); 9.89 (1H, d); 8.56 (1H, d); 7.94 (1H, d); 7.22 (1H, d); 5.91 (1H, s,b); 5.58 (1H, s, b); O 4.47 (2H, q); 4.43 (3H, s)； 3.75 (2H, t); 1.47 (9H, s); 1.19 (9H，s)。 步驟2 :

添加化合物（2A)20 g(39.3 mmol，1當量）且裝入500 mL 具有機械攪拌器、加料漏斗及熱電偶之3頸圓底燒瓶中。 將THF(60 ml)、EtOH(2〇 mL)及水（1〇〇 mL)添加至燒瓶中 且將反應混合物通電。接著，將8 mL 25%氫氧化鈉溶液添 加至反應混合物中且通電。在4〇°c下將反應混合物攪拌約 4小時。藉由HPLC檢定判斷反應完成後，將水（1〇〇 ml)添 122437.doc -29- 200813040 加至混合物中且將該批料通電且加熱至5(rc。達到5〇。〇後 將IN HC1溶液（3 0 ml)添加至該批料中且通電3〇分鐘。在此

溫度下將該批料再攪拌3〇分鐘，隨後將另一份24 W HC1溶液添加至該批料中且將該批料通電3〇分鐘。將水 ml)添加至該批料中且在5(rc下將該批料通電3〇分鐘，形 成漿液。經1小時將所得漿液冷卻至室溫形成產物，將其 • 藉由抽吸過濾收集，形成濕濾餅。以40 ml乙醇與水（1/5， f V/V)之溶劑混合物洗滌濕濾餅。在真空下在6(TC下將所得 固體乾燥丨2小時，產生16·8 g(9〇%)灰白色固體狀化合牷 (3A)。 4 NMR (400 MHz，，DMS0): 9·97 (1H，d)5 8·42 (1H，d)， 8.20 (1H，d)，7·48 (1H，d)，5·40 (1H，m)，4·07 (3H，s)5 1.45 (3H，d)，1·30 (9H，s)。 步驟3 : A部分 (J 將（2R，4S)-4(環丙烷羰基-胺基）-吡咯啶-1，2-二甲酸茗 二：Γ鎊2-乙酯（BP)(6〇 g，184 mmol，1當量）溶解於 EtOAc(1.2 L)中且取樣作為1〇〇% HpLC標準物。將該批料 冷卻至 20-35°C 且將 HCl(g)(36 g，980 mmol，5·3 當量）添加 至該批料中且通電，同時將反應溫度保持在2〇-35<t之 間。隨著反應進行，產物之鹽沈澱。裝料結束 時，將該批料加熱至20-30°C且攪拌1小時。}小時後，藉 有對反應此合物採樣且比較反應與上文標準物之hplc面 積反應從而檢查反應完成。對反應採樣直至Bp相對於標準 122437.doc -30- 200813040 物之量$0·5%面積。在真空下在35-45。(：下將該批料濃縮至 600 mL，形成稠漿液。隨後將NMP(280 mL)添加至該批料 中。在真空下在35-45 C下將该批料濃縮至約wo mL之體 積，形成澄清溶液。將該澄清溶液直接用於B部分之偶合 步驟中。 B部分： ' 在1 [三頸圓底燒瓶中，將化合物（3)(80 g，166 mmol， ( 1 當量）溶解於 NMP(32〇 mL)及 EtOAc(320 mL)中之 ΗΟΒΤ·Η2〇(28 g ’ 182 mino卜 LI 當量）及EDCI.HC1(48 g， 250 mmol，1.4當量）中。在25它下將該批料攪拌4〇分鐘。 將BP(來自A部分）之溶液添加至該批料中且攪拌〗〇分鐘。 以保持溢度低於35°C之速率將N-甲基嗎啉（80 mL，724 mmol，4.4當量）添加至該反應中。判斷反應完成後，將 EtOAc(320 mL)及水（8〇〇 mL)添加至該批料中。將所得批 料攪拌15分鐘且分離各層。以丨M HC1(4〇〇 mL)、隨後以 〇 1〇% K2C03(400 mL)及水（400 mL)洗滌有機層。將有機層 浪縮至約160 mL且將丙酮（8〇〇 mL)添加至有機層中。在約 40-50 C下在減Μ下再次將該批料濃縮至約24〇 。以另 一份800 mL丙酮稀釋反應且在4〇_5〇〇c下在減壓下將該批 料/辰细至約240 mL。將批料溫度保持在約4〇〇c下，且將 800 mL庚烷緩慢添加至該批料中，且形成一些固體。藉由 過/慮收集產物固體且在真空下在5〇它下乾燥12小時以提供 (103 g，90%)灰白色固體狀化合物（4A)。 NMR (400 MHz，wDMSO): 9.55，9.03，8.18，7.90，7.77， 122437.doc •31- 200813040 7.66，7.10，7.04，6.70，6.66，6.10，5.76，5.36，4.91，4·80, 4·4-3·55 2·58, 2.30，1·82，1.56，1.47，1.31，1.07，1.001.84, 〇·74。注意：由於存在旋轉異構體，因此僅列出所觀察到 之所觀察峰。 步驟4 : 將化合物（4A)(20 g，29 mmol，1當量）添加至燒瓶中且 裝入化合物（4A)以溶解於THF(60 ml)中且將溶液冷卻至〇_ 10°C。緩慢添加濃HC1(20 ml)以保持溫度在〇_20°C。裝料 C : 結束時，使溶液升溫至20-30°c且攪#約4小時，此時藉由 HPLC分析測定反應完成。以2-Me_THF(120 ml)及THF(40 ml)稀釋該批料，且使用20% K2C〇3(l 10 ml)中止反應以獲 得8-8.5之pH值。調節pH值後，添加更多水（8〇 ml)且將該 批料加熱至約30°C以實現明顯相分開。使該批料靜置約i 5 分鐘，分離下部水層且以水（80 ml)洗滌有機層。以2_Me-THF(200 ml)稀釋有機相且隨後在回流下在大氣壓下濃縮 ◎ 至約1〇〇 mi。在此體積下觀察到固體產物。隨後將該批料 冷卻至0-10°C且過濾留下濕濾餅。以2-Me-THF(每次40 ml) 將濕濾餅洗滌2次。在60°C下在真空下將所洗滌濕遽餅乾 燥至少12小時，提供13.50 g(79%)本文中亦稱為化合物a 之白色固體狀化合物（5A)。 iH NMR (光譜指示旋轉異構物，僅報導化學位移，無積分 或峰多重性；400 MHz，wDMSO) δ 9.82, 9.62, 8.51，8.38, 8.07，7.45，5.46，4.69，4·57，4.33，4.15，4.08，3.99，3·83, 2.39，2.26，2·16，1.56，1.44，1.22，0.82，0.69; MSES+ m/z 122437.doc -32- 200813040 (相對強度）590 (M+H)。 羥萘曱酸鹽之形成： 1型多晶型物：方法1: 在化合物 Α(34·4 g，0.0583 mol)溶解於熱 EtOH(800 ml) 中之溶液中小心地逐份添加經萘曱酸（1〇·98 g，0.0583 mol)，同時繼續加熱EtOH溶液。添加額外EtOH(2〇〇 mi)及 ’水（6 ml)。將反應混合物加熱至接近沸騰以溶解所有固 體，隨後過濾之。將濾液緩慢冷卻至室溫，此時發生社曰 () 、、口日日 且使混合饬在室溫下靜置隔夜。將濾液冷卻至〇。〇且藉由 真空過濾分離固體羥萘曱酸鹽。以異丙醇，隨後以乙_洗 務固體羥萘甲酸鹽且在高真空下在6(rc下乾燥以產生36.8 g(81%)之白色固體。 1型多晶型物：方法2: 在裝備有氮入口及回流冷凝器之5〇〇 mL三頸圓底燒瓶中 添加流程2實例2之化合物（5A)(30 g，50.89 mmol，1當量） Q 及^羥基萘曱酸（1〇·5 g，55.80 mmol，1.1當量）。隨後 在此燒瓶中添加甲苯（154 mL)及曱醇（103 mL)且將所得浆 液加熱至約62°C，此時内含物變均質。攪拌15分鐘後，在 常壓下將内含物蒸餾至21 〇 mL，隨後冷卻至約5〇。〇，且隨 後以1型晶體（於10 mL甲苯中3 g，10重量。/〇)種晶，使得產 物鹽結晶以形成漿液。在5〇0CT將此漿液攪拌3〇分鐘後， 將内含物冷卻至約1 〇。〇，此時添加甲苯（9〇 mL)且將漿液真 空蒸餾至約210 mL。進行第二次甲苯（90 mL)之添加且在 約20。(：下將内含物攪拌20分鐘。使用攪拌型乾燥器在真空 122437.doc -33- 200813040 下收集所得固體，且以曱苯（60 mL)洗滌濕濾餅。使用下 列方案乾燥此等固體：（a)Tj= 50°C，壓力=〇.1巴，無攪 拌’時間=3小時；（b)Tj= 80。(：，壓力=0.1巴，20 rpm，時 間=12小時；（C)T广80T：，壓力=〇·1巴，60 rpm，時間= 12小時。總計回收35 g(81%)流程2實例2之固體狀化合物 . (6A) 〇 • lH NMR (光譜指示旋轉異構物，僅報導化學位移，無積分 ( 或峰多重性；400 MHz, m-DMSO) δ 9.86, 9.62, 8.55-8.41， 8.14, 8.03, 7.70, 7·45-7·37, 6·90, 5.46, 4.69, 4.57, 4.33, 4.15, 4.08, 3.99, 3.83, 2·39, 2.26, 2.16, 1.56, 144, h22, 〇·82, 〇·69 〇 1型多晶型物方法3 :將化合物Α(5.0 g，0.00848 mol)於 MeOH(75 ml)中之溶液加熱至5(rc，過濾且以Me〇H(i〇 ml)冲洗。將經 I 甲酸（1·76 g，0.00933 mol)於]vie〇H(3 5 ml)中之溶液加熱至5(rc且過濾入化合物A溶液中。將混合 〇 物加熱至回流，歷時約10分鐘，常壓蒸餾至約50 ml，經 約1小時冷卻至〇。(：且攪拌約3〇分鐘。將混合物過濾，以冷 MeOH(20 ml)洗滌且在室溫下在真空下乾燥約12小時以產 生灰白色固體5.63 g(8 5.4%)。 2型多晶型物：在化合物Α(34·4 g，〇〇583 m〇i)溶解於熱 CH3〇H(800 ml)中之溶液小心地逐份添加羥萘甲酸（Μ.% g，0.0583 mol)，同時繼續加熱CH3〇H溶液。添加水（6 ml)。將反應混合物加熱至接近沸騰以溶解所有固體，隨 後過濾、之。將濾液緩慢冷卻至室溫，此時發生結晶且使2 122437.doc -34- 200813040 合物在室溫下#置隔夜。冑濾液冷卻至〇t且藉由直空過 濾分離固體羥萘曱酸鹽。以異丙#，隨後以乙醚洗滌：體 羥萘甲酸鹽且在高真空下在6crc下乾燥而產生36·8二叫 之白色固體。

7赉二竑合#·•在羥萘甲酸鹽形成期間需添加水以獲得 晶態形式。藉由將丨型⑼^ mg，〇 65 _〇1)懸浮於水 (0.9 mL)與甲醇（3」mL)之混合物中製備1型二水合物。將 懸浮液攪拌21小時。藉由將懸浮液離心，隨後傾出上清液 從面分離出固體。在真空下在室溫下乾燥固體^ 3垄/多違型# ••藉由於2-丙醇（90 mL)中合併游離鹼、化 合物 A(3.0 g，5·1 mm〇l)與羥萘甲酸（〇·96 g，5 a mm〇1)之 混合物來製備3型。將混合物加熱至回流且添加更多2_丙 醇（3 0 mL)。將混合物在回流下保持1小時，隨後冷卻至室 溫。過濾混合物且以2-丙醇（6 mL)洗滌固體，隨後在真空 下乾燥以產生3.24 g產物。 粉末x_射線繞射樣品製備 作為乾粉劑分析羥萘甲酸鹽之1型、2型、3型及1型二水 合物之粉末X-射線繞射（"PXRD”）分析。在PXRD分析前使 用以下程序於喷射研磨機中使1型微粒化。 藉由喷射研磨微粒化 藉由調節噴射壓力及進入喷射研磨機之進料速率控制微 粒化粉末之粒度分布。藉由加壓氮經由文氏管系統 (venturi systeni)以1 g/min之速率將顆粒饋入MC ONE JETMILL(Jetpharma Group，South Plainfield，NJ)研磨室 122437.doc 200813040 中。將跨越文氏管之壓降設定為5巴。藉由放置在研磨室 周邊附近之4個喷嘴以研磨室内部之螺旋運動使顆粒加 速。將跨越噴嘴之壓降設定為4巴。藉由較慢入射顆粒與 彼等在螺旋流中已加速顆粒之間的碰撞產生微粒化作用。 離心力將較大顆粒保留在研磨室之周邊，而較小顆粒藉助 於靜止分級器隨廢氣自室中心排出且於恰在噴射研磨機下 部之收集容器中回收。 Ο

以敢：>、畺製劑分析樣品以預防任何形式改變。將樣品輕 微摩擦以確保顆粒不會成塊„此等分析中未使用溶劑、乾 炼或其他製備步驟。PXRD數據可獨特地鑑定水合物及多 晶型物。 粉末X-射線繞射 於裝備有CuKa輻射（λ=1·54056Α，在3〇kv、151^下）及 固態偵測器（Rigaku Msc, The w〇〇dlands，τχ)之幻胖匕 MinifleX繞射計上收集1型及2型之x-射線粉末繞射圖案。 、 ㊀之步長及2〇/min之掃描速率記錄所有樣品之連 續掃描。 於Bmker D8繞射計上以CuKai源（λ=1 54〇6人）在4〇 kv及 40 mA下收集！型二水合物之χ_射線粉末繞射圖案。以 0·032° 2Θ之步長及〇.5秒之階躍時間記錄連續掃描。 /Kratos XRD 6〇〇〇上收集3型之χ_射線粉末繞射圖案。 藉由將材料輕輕地填裝於樣品支座且輕輕地滑動以產生平 土一樣π口表面來製備樣品。自2至4〇度20以〇〇2度之步長及 〇·6秒之階躍持續期間分析樣品。使用K_C)S提供之Basic 122437.doc -36- 200813040

Process軟體，2.6版進行數據分析。使用軟體中之自動平 滑方法使數據平滑。 使用上述方法及設備，使1型、2型及3型多晶型物羥萘 甲酸鹽及化合物A之二水合物形式經受PXRD分析。產生 PXRD圖案且顯示於圖1-3及10中。將峰強度（y軸為每秒計 數）對2Θ角（X軸為度2Θ)作圖。此外，以每步驟之收集時間 正規化之偵測器計數對2Θ角作圖。與此等概況一致之峰位 置（2Θ X軸上）展示於表1中。此等PXRD峰之位置為1型、2 型、3型晶態多晶型物及弍I化合物之1型晶態二水合物的 特徵。 表1 1型、2型、3型及1型二水合物之PXRD峰位置 1型 2型 1型二 、水合物 3型 峰位置 強度 峰位置 強度 峰位置 強度 峰位置 強度 (度 2Θ) (Cps) (度 2Θ) (Cps) (度 2Θ) (Cps) (度 2Θ) (Cps) 5.6 2023 4.5 290 5.5 1208 4.6 5605 6.1 5570 6.9 239 7.2 1066 7.9 1225 6.4 156 9.0 374 8.2 86658 9.1 882 7.7 4978 9.4 625 11.6 620 12.1 1718 9.3 511 10.6 4176 12.8 328 13.0 217 9.7 270 11.6 319 13.7 866 13.7 1243 10.3 973 13.6 6557 14.3 2078 15.2 383 12.2 129 14.9 135 14.7 948 15.8 792 13.0 3733 16.5 357 16.5 16206 16.5 1065 13.4 252 17.9 904 16.9 1402 17.8 198 14.2 450 18.8 906 17.4 612 18.3 172 15.3 235 19.1 2737 18.5 3106 18.9 1315 15.9 2434 20.2 679 19.1 1236 20.0 800 122437.doc -37- 200813040 16.2 101 21.2 4129 19.9 654 21.0 295 16.6 296 22.7 301 20.6 2604 22.0 248 17.8 3180 23.2 171 21.6 430 23.9 368 18.4 595 23.9 733 22.0 790 24.3 352 18.9 486 24.6 151 23.4 458 24.9 302 19.4 160 26.0 400 24.1 814 25.7 985 20.1 301 26.6 520 24.9 3626 26.6 172 20.5 1355 27.2 262 25.9 642 27.4 243 21.1 409 28.1 543 26.8 838 27.8 347 21.8 754 29.7 274 27.8 782 28.8 220 22.1 583 30.8 221 28.8 604 22.9 795 31.5 204 31.8 502 23.3 231 32.3 66 23.9 399 33.1 175 24.4 185 33.9 138 25.5 120 34.7 188 26.1 602 36.2 163 26.8 321 37.1 182 27.3 214 27.8 414 28.1 171 30.4 113 30.8 375 31.6 103 33.4 422 34.6 1244 36.2 228 36.6 223 36.9 146 38.1 219 39.6 408 以如表1所示之PXRD峰位置起始，可選擇各多晶型物或 122437.doc -38- 200813040 水合物之最特徵峰位置且藉 且精田相對強度分組以便利地自其 他晶態結構區分晶態結構。 此獨特峰之選擇展示於表2中。因此’例如式淡合物之 1型晶態結構可藉由由4個特徵PXRD峰位置組成之峰位置 組編號1鑑定。或者，式1化合物之1型晶態結構可藉由由 組編號1之4個特徵PXRD峰位置及另外4個峰位置組成之峰 位置組編號2鑑定。或者，式z化合物之丨型晶態結構可藉 由由組編號2之8個特徵PXRD峰位置及另外4個峰位置組成 之峰位置组編號3鑑定。此方案適周於4種多晶型软之每一 者以鑑定且彼此區分各形式。 表2 式I之1型、2型、3型及1型二水合物之特徵PXRD峰位置

122437.doc -39- 200813040 峰位置 組編號 峰位置 __ (度 2Θ) 1型多晶型物 1型一水合物 2型多晶型物 3型多晶型物 5.5 9.4 4.6 _6Λ 7.2 10.6 7.9 7.7 8.2 13.6 _9.1 14.3 17.9 12.1 13.0 14.7 1 18.8 1 13.7 3 16.5 19.1 15.8 _1^.9 16.9 20.2 16.5 _ϋ·8 18.5 21.2 18.9 18.4 20.6 23.9 20.0 24.1 26.0 23.9 22.9 24.9 26.6 24.3 26.1 26.8 28.1 25.7 ,、、、S此項技術者將瞭解相同化合物之給定晶態形式的 PXRD峰位置量測將在誤差界限内變化。樣品製備、儀器

U 測試或分析技術及其他因素之差異可引入該等變化。由於 (例如）裝填樣品之密度變化，因此個別峰位置之量測可小 度數變化，而整個峰概況可較大度數變化。 多晶型物純度 式I化合物之丨型、2型、3型晶態多晶型物及丨型二水合 物較佳實質上不含化學雜質(例如在多晶型物製備期間產 生之1產物)及其他多晶型晶態形式。出於本發明之目 的’ ”實質上不含”化學雜質意謂小於或等於約5重量％化學 雜質、較佳小於或等於約3重量％化學雜質、更佳小於或 。專於約2重量％化學雜質、且甚至更佳小於或等於⑴重量 化學雜質。多晶㈣之術語”純化”或,,以純化形式"係指 以可由本文描述或熟習此項技術者熟知之標準分析技術表 122437.doc -40- 200813040 徵的足夠純度藉由本文描述或熟習此項技術者熟知之純化 過程獲得後該多晶型物之物理狀態。式J化合物之i型、2 型及3型晶態多晶型物及i型二水合物之純化形式實質上不 含化學雜質。

差示掃描熱量測定 用以測試1型及2型多晶型物樣品之DSC測試儀為TA

Instruments⑧2920型（2001年製造），其裝備有冷凍冷卻系 Ο Ο 統。以40 ml/min之超高純度氮氣淨化Dsc單元/樣品室。 以高純銦校準測試儀。以此方法所量剽樣品溫度之準確度 在約+/- 1°C内，且可在約+/_ 5%之相對誤差内量測熔化 熱。將樣品置於具有蓋的標準銘政盤中，該蓋含有兩個 針孔用於壓力釋放。將約2 mg樣品粉末置於盤底部且輕輕 向下敲擊使其與盤接觸。精確量測樣品重量且記錄至百分 之一毫克。測試儀使用空參照盤。以1(rc/min加熱速率= 行DSC分析。 及3型多晶型物樣品之DSC測試儀 >將樣品再次密封於密閉鋁盤中且 用以測試1型二水合物 為 Q100 TAInstruments® 在樣品盤之蓋上打兩個斜？丨 + & n孔。在虱氣吹掃下以每分鐘1 〇 之加熱速率進行分析。 將由樣品重量標準化之熱流對所量測樣品溫度作圖。所 報導數據以單位瓦特/公克("w/g，,)計。以指向下之吸敎峰 作圖。評估吸㈣科之外推起始及結束（開端）溫度，峰 溫度及此分析之炼融熱。 1型式I之DSC概況展示於同 展不於圖6中。對於1型式I化合物觀察 122437.doc 200813040 U192 C之起始溫度及193。〇之♦溫度的單一吸熱。 2里式I之DSC概況展示於圖7中。對於2型式】化合物觀察 ^具有152。。之起始溫度及161。。及181。〇之峰溫度之兩個重 疊吸熱。 . 之1型二水合物之Dsc概況展示於圖8中。對於式工化 合物之1型二水合必y & A n t 物而5，l型二水合物以1(rc/min經受脫 水且轉化為至溫亞JL4 JU , t…、水形式。此事件作為具有73 〇c之起 f) 始咖度及143 J/g之熱的寬吸熱反映於DSC溫譜圖（圖8)上。

“口熱期間損失之結合水的量占總重量之4·1%，其在TGA 資料（圖9)中展示為階梯形重量損失，指示二水合物化學計 量。室温亞穩形式經受起始溫度為144t：之溶融。由於開 始分解而不能測定溶融熱，分解對應於完成炼融事件之 前，l5〇°C後丁 GA資料（圖9)之重量損失。 3型式I之DSC概況展示於圖丨丨中。對於3型式〗化合物觀 察到具有182t之起始溫度及186它之峰溫度之單一吸熱。 ϋ 吸入治療之前提為以最小全身副作用將藥物直接輸送至 作用部位（肺）。因此當藉由吸入或口服給藥途徑給藥時， . 由於低口服生物可用性及/或高清除率，吸入化合物應展 示具有低血液濃度（AUC)之藥物動力學概況。重要的是口 • 服AUC應較低以最小化吸入期間任何吞咽藥物之作用。低 AUC含量通常難以量測。因此，可重複Aljc資料為較佳 的。 過敏棕色挪威大鼠之檢定方案： 由 Charles River Laboratory(Wilmington，ΜΑ)獲得體重 122437.doc -42- 200813040 150至200 g之近親配種雄性bn大鼠。使用前，使動物隨立 進食及飲水。如”測試化合物之輸送”部分所詳細說明，在 抗原激發前5小時藉由口服或吸入途徑投予測試化合物。 敏化及抗原支氣管刺激 將動物分成兩個主要組，即礬組及抗原組。在抗原組 中，藉由腹膜内（i.p)注射含有懸浮於〇·9%鹽水媒劑中之 . 阳卵白蛋白（〇VA，III級；Sigma chemical Co.，St L〇uis M〇)及8 mg Al(〇H)3之1 ml礬沈澱之抗原將動物敏化。7天 後再次給與此礬-OVA混合抝之激發注射。屬於釁組之動 物接受僅含有礬之注射。第二次注射7天後，將動物暴露 於霧化抗原支氣管刺激中，該刺激係藉由將大鼠置於封閉 樹脂玻璃室（21公升）中且使大鼠暴露於霧化〇VA(i。/心中歷 時30分鐘進行。藉由超音喷霧器（DeVilMss，pA， USA ; Ultra-Neb 99型）以約8公升/分鐘之流動速率產生霧 化OVA。霧化〇VA激發24小時後，以過度劑量之戊巴比妥 〇 納使動物安樂死。將氣管取出且插管，且以兩等份之3 ml 生理鹽水灌洗肺。使由此收集之支氣管肺泡灌洗液體 (BALn經受細胞計數。使用血球計將10微升BALF用於手 動计π、、，心白血球數。將i 00微升BALF用以製備細胞離心 物，其經 Hema3T、色系統（Fisher Scientific，s^ingfield， NJ)木色以鑑定且計算諸如嗜伊紅性粒細胞、嗜中性白血 球、單核細胞及上皮細胞之分化白血球數。自各細胞離心 物計數到總計200個細胞。報導化合物抑制發炎、慮 管中募集之能力。 122437.doc -43 - 200813040 測試化合物之輸送： 口服投藥：將化合物溶解於0.4%甲基纖維素中且以3 ml/kg經口輸送至動物。將等效體積之0.4%甲基纖維素給 與陰性（礬組）及陽性（抗原）對照組。 氣管内投藥：將適當劑量之化合物與乳糖散劑混合以獲 得最終3 mg之量，使用細小尖端微型喷霧器將其氣管内輸 送給麻醉動物。將動物保持在豎直位置歷時3 -4分鐘且使 其在返回籠中前自麻醉恢復。 使用上述測試程序，獲得以下結果 · 酒石酸鹽：在0.02 mpk下52%抑制發炎細胞（氣管内給藥） 羥萘甲酸鹽：在0.02 mpk下69%抑制發炎細胞（氣管内給藥） 猴PK檢定之檢定方案： 以3 mpk以0.4% HPMC媒劑中之測試化合物經口給與兩 隻禁食猴。劑量體積為2 ml/kg劑量。在0.5、1、2、4、8 及24小時收集血漿。與肝素一起收集血樣且將血漿與 EDTA —起儲存。藉有MS/MS分析表徵各個別動物之血 樣。 使用上述測試程序獲得以下結果： 酒石酸鹽：在 10mpkp〇T.AUC = 30ng.h/mL 經萘甲酸鹽：在 lOmpkpoTSAUOOng.h/mL 大鼠PK檢定之檢定方案： 以10 mpk以0.4% HPMC媒劑中之化合物經口給與兩隻禁 食Sprague Dawley大鼠。劑量體積為5 ml/kg劑量。在0.5、 1、2、3、4及6小時收集血漿。與肝素一起收集血樣且將 122437.doc -44- 200813040 血桌與EDTA —起儲存。彙集各時間點之兩個血樣用於 MS/MS分析。 酒石酸鹽：在30 mpk po下AUC = 〇至1350 ng.h/mL(可變） 故奈曱酸鹽：在 30 mpk po下 AUC = 350 ng.h/mL 肺功能檢定之檢定方案： 使用用力呼氣操縱技術量測肺功能。在此程序中，使大 鼠麻醉且插入氣管導管。將大鼠置於含有能夠區分肺脹大 及收縮之呼吸瓣的整體體積描記器内。隨後使肺經受肺用 力脹大至肺總容量，隨後快速收縮至剩餘體積。將用力肺 活量及呼氣峰流量之量測結果用以量測抗原激發之作用且 評估式I化合物之抑制作用。將藥物與乳糖混合以用於氣 吕内輸运且在抗原激發5小時前以精細微型喷霧器直接給 與氣管。在抗原激發前5小時，於〇·4%甲基纖維素媒劑中 給與經口輸送化合物。對照動物分別接受氣管内乳糖或甲 基纖維素。抗原激發由霧化暴露於1%印白蛋白歷時3〇分 鐘組成。抗原（㈣蛋白）暴露後24小時量測用力呼氣肺功 能。 式I化合物在0.02 mpk it(氣管内）下展示54%用力肺活量 (FVC)抑制且在3 mpk p〇下展示31% Fvc抑制。 醫樂組合物 對於由本發明所描述之多晶型物製備醫藥組合物而言， 醫藥學上可接受之情性载劑可為固體或液體。醫藥學上可 接受之載劑及製造各種組合物之方法之實例可見於A. Gennaro(編），心論脚&户“卿⑽"—，第18 122437.doc -45 - 200813040 版，（1990)，Mack Publishing Co·，East〇n，PennsyWania。 液體形式製劑包括用於鼻内投藥之溶液、懸浮液及乳 液。 適用於吸入之喷霧製劑可包括溶液及呈粉末形式之固 體，其可與醫藥學上可接受之載劑（諸如惰性壓縮氣體， 例如氮氣）組合。 劑量 η ο 單位劑量製劑中活性化合物之量可根據特定應用自約 0.01 fig至約100 mg、較佳自約0,01 至約75 mg、更佳自 約〇.〇1 pg至約5〇 mg且最佳自約〇.〇1吨至約25 mg變化或 調節。 所用實際劑量可視患者需要及所治療病狀的嚴重程度而 變化◦判斷特定情況之合適給藥方案在此項技術之技能 内。為方便起見，要分割總劑量且在一天内以逐份方 式投予。 本發明化合物及/或丨醫藥學㈣㈣Μ 頻率將根據巡診臨床醫師考慮到諸如患者之年齡、病狀及 體型以及所治療症狀的嚴重程度之因素所作診斷來調整。 吸入之典型推薦日給藥方案可分為一至四次劑量在每天約 〇.04叫至每天約400 Mg範圍内變化。 除^喿作實例中所示或如另外指示外，本說明書及申請 專利祀圍中所用之表示成份、反應條件等之量的所有數字 ，理解為在所有情況下藉由術語"約"修飾。上述描述不欲 羊述本毛月之所有修正及變更。熟習此項技術者將瞭解可 122437.doc -46- 200813040 在不恃離發明概念之情況下對上述實施例進行改變。因此 應理解本發明不限於上述特定實施例，而意欲涵蓋如以下 申請專利範圍之語言所定義的本發明精神及範疇内之修 正。 【圖式簡單說明】 圖1為使用X-射線繞射儀產生之i型式τ化合物的粉末 ' 射線繞射（PXRD)圖案之圖。該圖以如每秒計數所定義之 峰強度對以度計繞射角2Θ作圖。 圖2為使用X〜射線繞射儀產生之2型式I化合物之pXRD圖 案之圖。該圖以如每秒計數所定義之峰強度對以度計繞射 角2Θ作圖。 Θ 3為使用X-射線繞射儀產生之式I化合物的1型二水合 物之PXRD圖案之圖。該圖以如每秒計數所定義之峰強度 對以度計繞射角2 Θ作圖。 圖4為步驟8之產物化合物10之NMR光譜的複本。 Q 圖5為亦稱為化合物A之化合物11的NMR光譜之複本。 圖6為由差示掃描熱量測定（DSC)產生之1型式I化合物的 熱分析圖。 圖7為由差示掃描熱量測定（DSC)產生之2型式I化合物的 * 熱分析圖。 圖8為由差示掃描熱量測定（DSC)產生之式I化合物的1型 二水合物的熱分析圖。 圖9為由熱解重量分析（TGA)產生之式I化合物的1型二水 合物的熱解重量分析圖。 122437.doc -47- 200813040 。圖10為使用X_射線繞射儀產生之式I化合物的3型PXRD 圖案之圖。該圖以如每秒計數所定義之峰強度對以度計繞 射角2Θ作圖。 的:^ 4為由差示掃描熱量測定（D S C )產生之3型式1化合物 的熱分析圖。 切 〇 〇 122437.doc -48 -

Claims (1)

1. 200813040 十、申請專利範圍： 1 · 一種具有以下結構式之化合物

   2 · 種/σ療需要遠治療之患者氣管上部或下部阻塞性疾广 之方法’其包含藉由吸入對該患者投予—有效量之如言2 求項1之化合物。 3.如請求項2之方法，其中該經治療之疾病為哮喘或慢性 阻塞性肺病。 4· 一種治療需要該治療之患者氣管上部或下部阻塞性疾病 之方法，其包含藉由吸入對該患者投予有效量之如請求 項1之化合物與至少一種適用於治療氣管上部或下部阻 塞性疾病之其他藥劑的組合。

   5. 如請求項4之方法’其中該經治療之疾病為哮喘或慢性 阻塞性肺病。 6. 如請求項4之方法，其中該其他藥劑係選自由卜促效劑、 簟毒驗拮抗劑及皮質類固醇組成之群。 7· 一種可吸入型醫藥組合物，其包含有效量之如請求 之化合物。 ^ ' 1 8. 一種可吸入型醫藥組合物，其包含有效量之如請求項1 之化合物與至少一種適用於治療氣管上部或下 、 部阻塞性 122437.doc 200813040 疾病之其他藥劑之組合。 9.如*求項8之組合物，其中該等其他 劑、笼主上人u 、巧】係遥自由卜促效 早母驗拮抗劑及皮質類固醇組成之群。 1 〇·種下式化合物之晶態多晶型物： 〇H 〇

   〇Chh

   ^^OCHaCHs Γ:該/晶型物係選自由以下形式、组成之群： /、展示貫質上與圖丨所示圖 射圖案； 〃问之粉末X-射線繞 里·其展示實質上與圖2所矛闯安 射圖案；及 〃目同之粉末X-射線繞 U 1水合物··其展示實質上與圖3所示m x 一射線繞射圖案； ’、圖案相同之粉末 3型：发度— "不貫質上與圖10所示圖荦相π 射圖案。 茶相问之粉末X-射線繞 11· ' 一種如古杳ct 項1 0之化合物之！型晶 具有6.1、7 7 主日日心夕晶型物，其展示 · 、13·0及15·9度2Θ特徵峰位罟 繞射圖案。 兮位置之粉末X-射線 12 ·如請龙馆1 7.7、13.〇、之晶態多晶型物，其展示具有5.6、6.卜 末X-射線繞射圖案Τ’8、18·4及Μ·1度⑼特徵峰位置之粉 122437.doc 200813040 士口月求項1 1之晶態多晶型物，其展 7 7 > Q 〇 /、頁 5.6、6.1、 • ·、13·〇、14.2、15·9、m 18·4、20·5、22 9及 26·1度2Θ特徵峰位置之粉末^射線繞射圖案。 · 14·如請求項1〇之1型晶態多晶型物。 ” 15· —種如請求項1〇之化合 且有1n a I日日心夕日日型物，其展示 ^ 13·6、W·1及21·2度2Θ特徵峰位置之# 線繞射圖案。 竽位置之粉末X-射 16·:::求項15之晶態多晶型物，其展示具有心 17·^^^19^2〇.2.2ΐ2Α23 ^ 粉末邊線繞射圖案。 、致峰位置之 17.如π求項15之晶態多晶型物’其展示具有Μ、、 13·6' 17.9, 18.8. 19,1.20.2.21.2^23.9.26 0 及28·1度2Θ特徵峰位置之粉末心射線繞射圖案。.、26·6 18·如請求項1〇之2型晶態多晶型物。 U 19·種如睛求項10之化合物之㈣晶態二水合物，一 /、有8·2、16·5、18·5及24·9度2Θ特徵峰位置 線繞射圖案。 夏之‘末X-射 如請求項19之晶態二水合物，其展示具 1 4 ^ Ν Λ C Γ 末.、16’9、18.5、2〇·6 及 24.9 度 20特徵峰位 杨末X-射線繞射圖案。 21·如請求項19之晶態二水合物，其展示具有55、” 8·2'14.3、14·7、16·5、16.9、18.5、20·6、24ι、22、 8度2Θ特锨峰位置之粉末χ —射線繞射圖案。 22.如請求項1〇之1型晶態二水合物。 122437.doc 200813040 23 種巧未項l〇之化合物之3¾)日能> s , 心〕空日日態多晶型物， 有4.6、7 Q、17 1 « u 〇由 具展不具 /•9、12.1及18·9度2Θ特徵峰位置 射圖案。 1之叔末X-射線繞 24.如請求項23之晶態多晶型 q 1 ”展不具有4.6、7 9、 9.1、U.i、13.7、15.8、16 5及 · 末X-射線繞射圖案。 』特料位置之粉 η如請求項23之晶態多晶型物，其展示具有46、79、 9·1 、 Ι2·ι 、 13·7 、 15 8 、 16 5 、 这…龟 · I8·9、20·0、23.9、24.3 二…心特徵峰位置之m線繞射圖案。 26.如睛求項1〇之3型晶態多晶型物。 27· = “下物質製備如請求項1…型多晶型物之方

   U 化合物A 其包含以下步驟： y化口物A之化合物溶解於熱乙醇中且添加羥萘甲 酸’同時繼續加熱混合物； ':、、力額外乙醇及水且將混合物加熱至接近沸騰，· 〇過遽該熱混合物，隨後緩慢冷卻至室溫且使該混合 物在室溫下靜置隔夜直至1型晶體沈澱，·且 d)將濾液冷卻至0°C且過濾該1型晶體。 122437.doc 200813040 28· —種由以下物質製備如請求項1〇之1型多晶型物之方

   化合物A p 其包含以下步驟： e) 將甲苯及甲醇添加至化合物A及羥萘甲酸中且混合 之以形成漿液； f) 在混合下將該漿液加熱至約62它，產生均質混合 物； g) 吊壓蒸餾ό亥均質混合物，將蒸餾混合物冷卻至約 5 0 °C ’以1型化合物Α晶種接種該蒸餾混合物，在漿 液中產生晶體； (J h)在約5〇C下將該漿液攪拌約30分鐘且將該漿液冷卻 至約l〇°C ; i) 在該冷卻漿液中添加額外甲苯且真空蒸餾，隨後添 加額外甲笨且在約20 C下攪拌約20分鐘以形成固體 材料， j) 在真空下使用授拌型乾燥器收集所得固體以形成濕 濾餅；以甲苯洗滌該濕濾餅且無攪拌地在約5〇。〇下 乾燥約3小時，隨後以約20 RpM·攪拌在約㈣它下 乾燥約12小時，隨後以約60 R p M.攪拌在約8〇()(：下 122437.doc 200813040 29. 乾燥約12小0夺 一種由以下物質製 法： ’其均在真空下進行。 備如請求項1 0之1型多 晶型物之方

   k)其包含以下步 於熱甲醇中； 化合物A 鄉·將化合物A及羥萘f酸分別溶解 1)過濾該等兩種熱溶液且混合該等兩種溶液； ⑷使該混合物回流且蒸镏出過量甲醇；且 n)將該混合物冷卻至代以形成沈澱且過滤!型晶體。 種可吸入型商藥組合物，其包含如請求項⑺之1型晶 態多晶型物及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑或載 U 3 1 · —種如請求項1〇之i型多晶型物的純化形式。 3 2· 種冶療需要该治療之患者氣管上部或下部阻塞性疾病 之方法，其包含藉由吸入對該患者投予一有效量之如請 求項1 0之1型多晶型物。 3 3 · 一種由以下物質製備如請求項1 〇之2型多晶型物之方 法： 122437.doc 200813040

   化合物A 其包含以下步驟： 〇)將化合物A溶解於熱甲 、、T知中且添加羥萘p酸，同時

   繼續加熱該混合物； PJ添加水且將該混合物加熱至接近㈣； q)過濾'該熱混合物，隨後緩慢冷卻至室溫且使該混合 物在室溫下靜置隔夜直至2型晶體沈殿，·且 0將濾液冷卻至〇它且過濾丨型晶體。 34. -種可吸入型醫藥組合物，其包含如請求項1〇之2型晶 態多晶型物及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑或載 劑0 3 5·種如明求項1 〇之2型多晶型物的純化形式。 36. —種治療需要該治療之患者氣管上部或下部阻塞性疾病 之方法，其包含藉由吸入對該患者投予一有效量之如請 求項10之2型多晶型物。 37. —種由化合物八之！型羥萘甲酸鹽多晶型物製備如請求項 1 0之1型一水合物之方法： 122437.doc 200813040

   其包含以下步驟： r)將化合物Α之I型多晶型物羥萘甲酸鹽懸浮於水與甲 醇之混合物中；

   Ο S)將該懸浮㈣拌叫、時，藉由離心該懸浮液，隨後 傾出上清液來分離固體； t)在真空下在室溫下乾燥固體。 38. —種可吸入型醫藥組合物’其包含如請求項⑺之丨型曰 Γ水合物及至少一種醫藥學上可接受之賦形劑或； > 〜一卞口奶的純化形式。 4〇.:=療=治療之患者氣管上部或下部阻塞性疾病 方法其包含藉由吸入對該患者投予 求項10之1型二水合物。 有放里之如叫 41·:種由以下物質製備如請求項1〇之3型多晶型物之方

   122437.doc 200813040 其包含以下步驟·· U)於2丙酉子中合併化合物A與羥萘曱酸之混合物； v) 將此合物加熱至回流且添加更多2_丙醇；將混合物 保持在回流下】小時，隨後冷卻至室溫； w) 過遽混合物、以丙辱洗條固體、在真空下乾燥 42· -種可吸入型醫藥組合物，其包含如請求二二 為匕 々 pj | 日日 悲多B9型物及至少一種醫蘿聲上可技A 酉条子X T接叉之賦形劑或載 f、 劑0 4 3 · —種如请求項1 〇之3型多晶型軟的純化形式。 44. 一種治療需要該治療之患者氣管上部或下部阻塞性疾病 之方法’其包含藉由吸入對該患者投予一 θ 4 胥效ΐ之如請 求項10之3型多晶型物。 U 122437.doc