TW200819041A - Method for cultivating Antrodia camphorate - Google Patents

Description

200819041 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種樟芝培養方法， :種於段木，以大量裁培樟芝子實體。“係將樟芝菌種接 【先前技術】 /樟芝又稱牛樟芝或牛棒蒜，屬於 薄孔菌屬〇4«的^以）、多年生蕈菌類，尊、夕孔菌科、 僅生長於台灣山區海拔2〇〇·2〇〇〇公0^特有一種真菌， (是⑽妫讯以）的中* a ’寄生於牛樟木 伏之牛樟樹木材潮濕表面。盆材内壁，或枯死倒 )’但牛樟木中主要芳香物^ t原係（d 非r camphor」，後者九技太价夫体、為Γ terPen〇ds」而 植專家張東柱、Λ ΐίΓ 之芳香物，故兹類培 果柱周文能先生特將牛

Antrodia einnam〇mea·。 < 子石止名為 扁平：芝由牛樟木的中空樹幹長出，生長最初呈 捲離#ί幹心^幹㈣表面，之後子實體生長前緣會略 =¼幹⑽起，呈現馬蹄形或不顧形;其生長愈久， M3:恩！古且逐漸木質化或木拴化’外觀則呈現皮 狀成，札狀，▼有強烈苦味。一年生或多年生之子實體上 $面羊攝紅色、橘褐色至淡肉色，之後變為褐色，表面平 滑具同心圓、其菌孔為圓形或多角形，内有孢子。子實體 之，孔表面新鮮時呈橘紅色、橘褐色至淡肉桂色，老化時 則呈諸褐色。 5 200819041 由於樟芝對於食物中毒，腹瀉，嘔吐，農藥中毒等均 具解毒作用，為一極佳解毒劑；亦被認為其對癌症或慢性 病有不錯之療效。惟因樟芝樟樹本身有濃郁香氣，可驅蟲， 一般真菌不能生長，僅樟芝能寄生於台灣本土的牛樟樹 上，而不會寄生於一般的樟樹、陰陽樟木等類似樹種，故 產量本就極為稀少；再加上樟芝所生長之牛樟樹為一級保 育樹種，樟芝屬於牛樟樹之附屬品，亦屬於禁採之列，造 成樟芝在市場上更為供不應求、奇貨可居，因此素有「台 灣紅寶石」之稱，僅產於苗栗南庄、高雄六龜等地。 一直以來，樟芝對慢性疾病及癌症的療效令人趨之若 鶩，傳頌不已，更增添了樟芝在市場上的價值。事實上， 科學研究曾指出：樟芝對鼠類淋巴血癌細胞P-388有明顯 之毒殺性，樟芝菌絲體熱水可溶多醣，能刺激正常成人血 液中的淋巴細胞產生細胞激素，以殺死U-937人類淋巴癌 細胞；也可以增加巨噬細胞之吞噬能力，促進脾臟細胞 (Splenocytes)之增生以及介白素IL-5之分泌。此外，樟 芝亦可抑制金黃色葡萄球菌及鬚瘡小芽癬菌之生長，及抑 制多種腸道菌。基本上，牛樟菇具有清血、解毒、益腎、 保肝、整腸、強心、調壓、強壯、抗寒、抗菌、止咳、化 痰、鎮痛、鎮靜、抗癌、消腫瘤，排毒等功能，實為一種 功效廣泛的藥用真菌。 為了使樟芝的食用普及化，平抑居高不下的市場價 格，並維護牛樟樹的長期保育，人工大量栽培樟芝為相關 產業積極尋求突破的一個重大瓶頸。目前，樟芝人工栽培 方法多以液態發酵培育出菌絲體或以固態方式培養菌絲體 後，再將此菌種接種於太空包，以長成樟芝子實體。惟以 200819041 巧之時’菌絲體的生長狀況不佳，當利用太 二t: 培養時’包體較為鬆軟’也易生長雜 ί子類之含量與野生 ΐ由生物可八難為土壌所分解，將造成環保問題，目 二二”解材質所製成的太空包雖已問世，惟Α價林 二ii::的大量栽培上，無異是成本的二= =以:野二芝;?:在感染段木時，係具 法感染不同而言:人工培養菌絲體並無 子感染的野生牛樟樹二’僅疋直接取用已受樟芝孢 此種人，此， 芝培養物’其三謝多滕體成含量有亦7有且限尽貫子貫體的樟 攸市售子實體多為單一 者極為少見㈣’即可得知市場上^厚多年生 開發-種具有厚實子實體之/二枉= 禾集壓力。因此， 培技術’以有效供應品質優；；二員的人工段木樟芝栽 究的技術領域。 、係為一值得深入研 【發明内容】 樟芝為台灣特有菇菌，又名牛樟 盆 牛樟木’但此樹種為保育類植物，因此，長於台灣之 空樹幹之樟芝，取得便極為不易、產生長^牛樟木中 牙柽為稀少。因此， 7 200819041 本發明之目的係提供一種樟芝菌絲體之固態培養方法，係 將一樟芝菌種接種至含酵母培養基及木屑的器皿中培 養，以形成菌絲體。 ^ 本發明之另一目的係提供一種樟芝菌絲體之液態培 養方法，係將一樟芝菌種接種至含酵母培養基的器皿中培 養，以形成菌絲體。 本發明之再一目的係提供一種樟芝子實體之培養方 法，係可將含有樟芝菌絲體之基質接種至段木，培養一 • 段時間後即可形成樟芝子實體。 本發明之又一目的係提供一種樟芝子實體，其係藉由 前述樟芝子實體之培養方法所培養而成，係含有豐富三萜 類，為深具生物利用潛力之藥用真菌。 為達上述目的，本發明係提供一種樟芝菌絲體之固態 培養方法，其係包含下列步驟：（a)取一含酵母之培養基， 於5-35°C下發酵3-30天；（b)加入木屑於前述發酵後之培 養基並攪拌；（c)將前述木眉及培養基置於一器孤中；（d) ® 將前述裝有木屑及培養基之器皿滅菌；及（e)取一樟芝菌 種接種至前述滅菌過之含有木屑及培養基之器'皿中，並於 5〜35t：下培養形成菌絲體。 較佳地，前述步驟（a )之培養基係包含：1〜8 %糖、 0.06〜1.2%酵母、0.01〜0.4%硫酸鎂及0.01〜0.4%磷酸二 氫鉀，該含酵母之培養基需進行7-14天之發酵。 較佳地，前述步驟（c)係於一濕度60〜90% (最佳 為80%)的器皿中進行培養。 200819041 較佳地，前述步驟（e)之祿 / 本發明之另一目的係接徂— 方法’係包含下列步驟：（a)C^m體之液態培養 °C下發酵W0天；⑻將前述 ，於5-35 中；（〇將裝有培養基之器皿滅菌；置於一器皿 種接種至前述滅菌過之培養基中， 取一 4早1菌 成菌絲體。 錢5〜35°C下培養形 較佳地，前述步騾（a)之培養 硫酸鎂及顧二氫鉀；更佳係包含:卜&糖3、·母、 酵母、0.01〜0.4%硫酸鎂及〇 〇1〜〇 4%鱗酸二」 酵母之培養基需進行7-14天之發酵。 一虱鉀，该含 較佳地’前述步驟（d)之樟芝菌種係在2〇〜3(rc培養。 法 至 本發明之再一目的係提供一種樟芝者 =包含下列步驟:(a)將含有樟芝菌絲; 。广&木；⑴將前述已接種菌種之段木置於—/ff C、濕度05〜85%之環境下培養一段時間；及二I5〜35 木上殘餘之基質後，將段木置溫度15〜35t：、>除段 %之環境下栽培一段時間後即可形成樟芝子實广80〜98 較佳地，前述步驟（a)之含有樟芝菌絲 萁⑽a 固態基質或液態基質，該固態基質係可為木屑。土貝 較佳地，前述步驟（b)之段木之培養環 25〜3〇ΐ、濕度75〜85%，且至少培養一個月=為飢度 較佳地，前述步驟(c)之培養環境係為溫度％〜孙 200819041 °C、濕度80〜98% ’且至少培養三個月以上。 較佳地’前述步驟（b) &⑷係在二氣化碳濃度低 於2%之環境下培養。 又一 本發明之又一目的係提供一種樟芝之培養方法，其係 包含下列步驟：（a)取一含酵母之培養基，於發 酵3-30天；（b)加入木屑於前述發酵後之培養基並俨 (c)將前述木肩及培養基置於一器里中；將前述λ 木屑及培養基之器皿滅菌；及（e)取一樟芝菌種種^寸 述滅菌過之含有木屑及培養基之器皿中，並於= 培養形成菌絲體；（f)將前述含有樟芝菌絲體之木屑接種 至一段木；（g)將前述已接種菌種之段木置於一溫产5〜35 °c、濕度65〜85%之環境下培養一段時間；及. 9木8^^木屑後，將段木置溫度15〜坑、濕度^ %的％境下栽培一段時間後即可形成樟芝子實體。 較佳地，前述步驟（e )之器皿中的濕度 更佳係為80%。 0 ^佳地’前述㈣（g)之段木培養環境係為溫度h 〜C、濕度75〜85% ’且二氧化碳濃度低於2%。 ，佳地’前述㈣⑴之段木培養環境係為溫度％ C、濕度9G〜98%且二氧化碳濃度低於2%。 個月=地’前述步驟（g)之段木培養時間係為至少一 較佳地’前述步驟(h)之樟芝子實體之栽培時間係為 200819041 至少三個月以上。 本考X月之又一目的係提供一種樟芝子實體，： 前述樟芝培養方法所培養而t ^子^ 7、係错由 人工;供之樟芝培養方法’係可利用 體=破其寄生宿主的專-性而達到大量2 支曰加其在生技醫藥應用的範圍。 ^ 【實施方式】 Ρ 士 彻樟芝S絲體人卫接種段木之方式，提高於 出菇的機會，以大量培育活性與成分同於或優於野 實子實體。尤其天然牛樟芝僅生長於牛樟木， 右月b使掉芝菌種成功接種於不同樹種所裁切而成的段木， 貝1對於人工段木栽培技術而言，不啻為一項重大的突破。 ^本發明提供一種樟芝菌絲體之培養方法，包含下列步 =、··取一含酵母之培養基，於5-35。(：下發酵3-30天，由於 I，發酵，可使培養基中的微生物進行轉化，有助於後續 棒之培養物對於營養成分之利用；再加入木屑於前述發酵 後j培養基並攪拌；將前述木屑及培養基置於一器皿中； 將别述裝有木屑及培養基之器孤滅菌；最後，取一樟芝菌 種接。種至前述滅菌過之含有木屬及培養基之器皿中，並於5 35 C下培養形成活性強之菌絲體。 200819041 本發明係挺供一種樟芝子實體之培養方法，包含下列 步驟：先將含有樟芝菌絲體之基f接種再 紅接種菌種之段木置於—溫度5〜坑、濕度6t85%且二 氧化奴丨辰度低於2%之環境下培養一段時間；之後，清除段 木上殘餘之基質後，將段木置溫度15〜35它、濕度⑽〜％ /且一氧化;e反浪度低於2%的環境下栽培一段時間後即可形 ，樟芝子實體。前述含有樟芝菌絲體之基f可為固態或液 m基質。 因此，本發明進一步提供一種樟芝子實體之培養方 ^ i含下列步驟··先取一含酵母之培養基，於5_35〇c下 ΐϊϋ。，；总加入木屑於前述發酵後之培養基並攪拌；將 養基置於一器皿中；將前述裝有木屑及培養 ，之益皿滅囷；取-樟芝菌種接種至前述滅菌過之含有木 ί器，中’並於5〜3rc下培養形成菌絲體;將 Ξ心Ui:絲體ί木屑接種至一段木；將前述已接種 =種之&木置於-溫度5〜35t、濕度65〜85%且二氧 2%之環境下培養一段時間；並於清除 ‘之 ，屑曲，’將段木置溫度15〜35。〇：、濕度8G〜98%且== =又低於2%的環境下栽培—段時間後即可形成樟芝子實 適用於本發明樟芝子實體培養方法之段木種類 G = Γ ^ ^、細、她章或雜3木’ J戈.相心树、土肉桂、杉木、楠木、楓木、 科、金縷梅科、殼斗科等樹種，尤以木頭材質“去華 樹種為佳。貝坚硬者之 12 200819041 口 ^發明之方法可適用於任何樟芝菌種，例如已寄存於食 口口科本研究所之編號· BCRC 35396、BCRC 35716、BCRC 35398或BCRC 3續等可自由分讓之樟芝菌種皆可。 /本發明將藉以下實施例進一步詳細說明，但該等實施例 僅係用於舉例說明，而非用於限定本發明之範疇。、 實施例 J %例〜-*·利用香樟木段木培養棒之子實體 取一含酵母之培養基，於28°C下發酵14天，由於經過 1姜&可使培養基中的微生物進行轉化，有助於後續樟芝 對於營養成分之利用；再加入木屑於前述發酵後之 m並攪拌’再將前述木屑及培養基置於—三角瓶中， 述裝有木屑及培養基之三角瓶於高溫下滅菌，最 後二，了樟芝菌種接種至前述滅菌過之含有木屬及培養基 之一瓶中，並於281下培養2·5個月，即形成菌絲體。 士仍2將#述培養之含有樟芝菌絲體之木屑接種於該香樟 γ又怎上，再將前述已接種菌種之段木置於一溫度5〜35 f、>”、、度65〜85%且二氧化碳濃度低於2%之環境下培養2·5 ρ $待&木已感染樟芝菌絲體後清除段木上殘餘之木 imi置溫度15〜35°c、濕度80〜爾且二氧化碳 =叉，=μ的環境下栽培7個月後，即可形成樟芝子實 边甚圖所示’由第—圖可明顯看出，利用本發明之 二基、斤2培養之樟芝子實體，具有厚實的子實體，已相 田w野生之樟芝子實體型態，至於其三萜類成分含 200819041 里分析洋述如后。 越[:_械樹段木培養樟之子實體 取'~含酵母之i立羞^ I i 發酵，可使培養基=二2耽下發酵14天，由於經過 培養物對於營養成:之=物進行轉化’有助於後續樟芝 班袭其*抑 用；再加人木屑於前述發酵後之 培養基並㈣’再將前 基之二=溫二最 之n Γ之菌&接裡至前述滅菌過之含有木肩及培養基 - * ’亚於5〜35t下培養形成菌絲體培養3個月。 抖⑴述&養之含有樟芝菌絲體之木屑接種於該相思 Ϊ ίί ’再將前述已接種菌種之段木置於-溫度5〜35 個曰Ί!5〜85%且二氧化碳濃度低於2%之環境下培養3 ^樟芝_體後清除段木上殘餘之木 ，仏木置>皿度15〜35t、濕度8〇〜98%且二氧 二又二2%的環境下栽培6個月後，即可形成樟 圖所示’由第二圖可明顯看出，利用本發明： :购實趙型態，至於㈣類成分ί 列七•利用牛樟木段木培養樟之子實體 取一含酵母之培養基，於5-35Ϊ：下發酵3-30天，由於 200819041 使培4基中的微生物進行轉化，有助於後搞 =====;再加入木屑於前述忿 ί德裝有木屑及培養基之三角瓶於高溫下忒 某之ni芝菌種接種至前述滅8過之含有木屑及块養 f二角瓶中，並於5〜抑下培養2.5個月，即形‘ 木段木上3已絲體之木屑接種於該牛樟 個月，接於士 t二 辰度低於2%之環境下培養2 5 濃度低於2%的環境下栽拉 J、^8°〜98%且二氧化殘 體，如第三圖所示，由栽=個月後’即可形成樟芝子實 量分析詳述如后。子謂㈣，至於其三賴成分含 實施例四：比較木發明 芝之成分含i之樟芝、野生樟芝以及市售樟 待爲== 層析(HPLC)分析各檢品之指紋圖譜， 同成分之原則，而使用此 檢液製備： 本實驗係針對野生樟芝子實體、棒芝市售品膠囊内含 200819041 粉末、以及利用本發明培養方法於 、香樟木、相思樹…人工裁芝^ 牛樟木 三)等五種檢體進行分析。首二體(4貫施例-至 粉，置於60t恆溫烘箱連續乾’、日:五2品細切或研 中器放=將各檢品精確秤==== 二=:，醇’蓋緊瓶蓋。之後， ^ 守，並將抽取液經〇.45μηι_膜啸 後，取得之澄清液斷可作為分析職液。 膜過/慮

高壓液相層析： ，分析使用之高壓液相層析儀為hitachi d德 列：幫浦：匕7100、偵測儀（Detector) : L-7420、自動進樣 器（AUtosampler) ·· ;其巾，層析管购8管柱$ 250 mm，内徑4.6腿(粒徑5_)。 又 分析條件為流速每分鐘！ mL，偵測吸光波長為υν2ι〇 nm，注入體積25 mL，分析終止之時間為19〇分鐘。移動相 係使用兩種溶媒系統做梯度沖提（ Gradient) :移動相A : 10%乙腈（内含1〇/0磷酸），移動相B : i〇〇〇/0乙腈（内含p/〇 磷酸），梯度沖提條件如表一所示。 表一 :HPLC移動相梯度沖提條件

Time (min) Mobile phase Mobile phase Flow A B (mL/min) 0.0 100.0 0.0 — __-/ 1.0000 5.0 100.0 0.0 1.0000 10.0 70·0 30.0 1.0000 15.0 55.0 45.0 1.0000 16 200819041 25.0 55-0 45.0 1.0000 - 50.0 50.0 1.0000 - 50.0 5〇.〇 1.0000 40.0 60^1 L0000 ~~~^ι〇·〇 40.0 60.0 1.0000 ----80-0 20.0 80.0 1.0000 - 0.0 100.0 1.0000 0·0 100.0 1.0000 — 100.0 0·0 1.0000 --- 100.0 〇.0 1.0000 口及收峰面積（peak Area)由内建軟體自動計算，立中， 峰面積剔除值（Peakrejectionlevel)設定為 2〇〇,〇〇〇， =¾收峰面積未達2〇〇,〇〇〇者視為雜訊，將捨棄不予列入 ^昇；吸收峰面積達到200,000而吸收峰呈現^規則形狀 的吸^^人工_選而捨棄之；最後將各分析用檢液可信賴 收峰面積加總，並互相比較，以進行品質評估。 分伯ΐ下列表二所示，野生樟芝子實體之吸收峰總面積積 值為139,983,370，相思樹段木人工栽培樟芝子實體 =積分值為76,165,715，香樟木段木人讀培樟芝= $面積積分值為11U56，施’牛樟木段木人卫栽培榼， 之積積分值為152,760,267;而樟芝市售品膠i 、〜積積为值為21，126，138 ’與上述四種檢品相去甚 表二 •不同種類之人卫栽培樟芝子實紐液之吸收峰面 積 17 200819041 波長：210nm ~ __ 樣品名稱 市售樟芝 吸光強度·· 1300mV 總吸收峰面積$ 野生樟芝 雜木（香樟木）人工栽培樟芝

76,165,715 21,126,138 139,983,370 111,356,206 152,760,267 結果 將五種檢品以相同吸光強度（Intensity，簡 同滯留時間（18G分鐘）’進行圖譜分析。A中香棒木 ，樹及牛樟木個別之HPLC分析圖譜，分別“ 弟五圖及第六圖所示。 此外，並利用上述五種檢品，將樟芝市售品（膠 野生樟芝及利用三種不同段木一牛樟木、香樟木、相、田 進的樟芝子實體之指紋圖譜經由疊圖加以比; 樟芝子實體均與野生樟芝子實體之指紋 滞留時間)呈現相同的吸光集；，僅= 度互有差異而已；而樟芝市售品之指 盥四2 疊圖分析比較的結果，非常清楚的顯=== 香樟木、相思樹所人工栽培出的樟芝子實體=以 18 200819041 實體具有同源性，表示本發明使用不同段木所栽培的樟芝 子實體係具有與野生樟芝子實體相類似之三類成分和相 同之生理活性及用途。 由上述分析結果可知，本發明係提供一種可大量人工 栽培樟芝子實體的方法，且所培養出來的樟芝子實體厚 實，其活性與成分同於或優於野生樟芝或市售人工培養芝 樟，係為人工培養樟芝子實體技術的一大突破。 其他實施態樣 雖然本發明已以較佳實施例揭露如上，然其並非用以 限定本發明，任何熟悉此技藝者，在不脫離本發明之精神 和範圍内，當可作各種之更動與潤飾，因此，本發明之保 護範圍，當以後附之申請專利範圍所界定者為準。 200819041 【圖式簡單說明】 影像圖 ΪΓ。圖係為本發明利用香樟木段木培 影像圖 養樟芝子實體之 ^圖係為本發明利用相思樹段木培養樟 之子貫體之 影像^_為树_科樟木財料衫子實趙之

HPLC :第本㈣_㈣核木⑽樟芝子實 之 肌cHi本發明彻相思樹段木培養 樟芝子實體之 HPLC；,^ 第七圖係為樟芝市售品（膠囊）、野生棒芝與本刹 香樟木段木、相思樹段木、牛樟木段木培養樟^體 HPLC分析圖譜疊圖比對。 貝體之 【主要元件符號說明】 無 20

Claims (1)

1. 200819041 十、申請專利範圍： 1. 一種樟芝菌絲體之培養方法，其係包含下列步驟： (a) 取一含酵母之培養基，於5-35°C下發酵3-30天； (b) 加入木屑於前述發酵後之培養基並攪拌； : (c)將前述木屑及培養基置於一器孤中； - (d)將前述裝有木屑及培養基之器孤滅菌；及 (e)取一樟芝菌種接種至前述滅菌過之含有木屑及培養 基之器皿中，並於5〜35°C下培養形成菌絲體。 2. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其係為一種固態培養 • 方法。 3. 如申請專利範圍第1項所述之方法，其中前述步驟（c) 之器皿的濕度為60〜90%。 4·如申請專利範圍第3項所述之方法，其中前述步驟（c) 之器皿的濕度為80%。 5. —種樟芝菌絲體之培養方法，其係包含下列步驟： (a) 取一含酵母之培養基，於5-35°C下發酵3-30天； (b) 將前述發酵後之培養基置於一器皿中； (c) 將裝有培養基之器皿滅菌；及 鲁 （d)取一樟芝菌種接種至前述滅菌過之培養基中，並於 5〜35t：下培養形成菌絲體。 6. 如申請專利範圍第5項所述之方法，其係為一種液態培養 方法。 7·如申請專利範圍第1項或第5項所述之方法，其中前述步 驟（a)係發酵7-14天。 ‘ 8·如申請專利範圍第1項或第5項所述之方法，其中前述培 養基之成分係包含：糖、酵母、硫酸鎂及填酸二氫鉀。 9.如申請專利範圍第8項所述之方法，其中前述培養基成分 21 200819041 係包含：1〜8%糖、0·06~1·2%酵母、〇·〇1〜〇·4%硫酸鎂 及0.01〜0.4%磷酸二氫鉀。

   10·如申請專利範圍第1項或第5項所述之方法，其中前述 樟芝菌種係在20〜30°C培養。 11·一種樟芝子實體之培養方法，其係包含下列步驟： (a )將含有樟芝菌絲體之基質接種至一段木； (b) 將前述已接種菌穆之段木置於一溫度5〜35。(：、濕 度65〜85%的環境下培養，段時間；及 (c) 清除段木上殘餘之基質後，將段木置溫度15〜35 t、濕度80〜98%的環境下栽培一段時間後即可形成樟 芝子實體。 12·如申請專利範圍第11項所述之方法，其中前述步驟（a) 之含有樟芝菌絲體之基質包含固態基質或液態基質。 13·如申請專利範圍第12項所述之方法，其中前述固態基質 係為木屑。 、 14. 如申請專利範圍第11項所述之方法，其中前述步驟（b) 之段木係在温度25〜30。〇濕度75〜85%之環境^挎養。 15. 如^請專利範圍第11項所述之方法，其中前^步驟"（I) 之段木係在溫度26〜3(TC、濕度90〜98%的環境下栽 圍ί 11項所述之方法’其中前 之樟之子貫體之栽培時間係為至少三個月以7 18.-種樟芝子實體之培養方法，其係包含下列步驟. 取-含酵母之培養基，於5-饥下發酵3 3〇天· (b)加入木屑於前述發酵後之培養基並機拌. 22 200819041 (C)將前述木屬及培養基置於一哭皿中· 及培養基之皿滅菌；及 I士早之囷種接種至前述滅菌過之含有木屑及培養 基之為皿中，並於5〜35〇c下培養形成菌絲體； (f) 將t述含有樟芝菌絲體之木屑接種至一段木； (g) 將則述已接種囷種之段木置於一溫度5〜35°C、濕 度65〜85%的環境下培養一段時間；及 (h) 清除段木上殘餘之木屑後，將段木置溫度Μ〜％ °C、濕度8〇〜的環境下栽培一段時間後即可形成樟 之子只體。 (c 19·如申請專利範圍第18項所述之方法，其中前述步 之器皿中的濕度為60〜90%。 20·如申請專利範圍第〗9項所述之方法，其中前述步驟 之器皿的濕度為80%。 C 21·如申請專利範圍第18項所述之方法，其中前述步驟 之段木係在溫度25〜30°C、满度75〜85%之環境^妹2 22·如申請專利範圍第18項所述之方法，其中訝述步^ \ 之段木係在溫度26〜30X：、濕度90〜98%的環境下栽 培0 23·如申請專利範圍第18項所述之方法，其中前述步驟 之培養時間係為至少一個月以上。 g 24·如申請專利範圍第18項所述之方法，其中前述步驟 之樟芝子實體之栽培時間係為至少三個月以上。π ) 25· —種樟芝子實體，其係根據申請專利範圍第1 方法所培養而成。 23 200819041 七、指定代表圖： (一） 本案指定代表圖為：第（七）圖。 (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 無 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式: