TW200404160A - Test strip qualification system - Google Patents

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200404160 A7 ___ B7 五、發明說明（i) 發明技術領域 本發明係有關檢測利用分析物薄片式測片所獲得結果的 方法本發明特別適合用來試驗以全血測量前凝血酶時間 (pt時間）所用之薄片式測片（其中測量區包括一種催 化血液凝結串聯之組成物）的品質。 先前技術 歐洲專利申請案EP 〇 974 84〇 (84〇公開案）（於2〇01 年1月26日公開）描述一種可用於本發明之裝置和系 統。本文中所示之圖1即採用自84〇公開案，其顯示一種 平行多通道薄片式測片2。其中，提供有測量區4、ό及 8。當在導入孔1〇加入一樣品（通常是全血），壓住氣囊 12後放開時，部分真空會抽吸血液通過管道14直到共用 之止動匯合口（stop juncti〇n)16。薄片式測片亦包括一旁 通^道18 ’其抽吸樣品向氣囊12以舒緩止動匯合口之負 壓’為的是避免其克服了測量區中流體之表面張力而壓制 止動匯合口之流體之流動。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 就PT測量而言，重要的是當樣品達到允許可再生之 “錢串狀紅血球串聯結構(rouleaux formati〇n)，，_紅血球細胞 堆積-之點時可停止其流動，這在利用本發明監視血液凝 結方面是一很重要的步驟。止動匯合口操作之原理被描述 於美國專利案5,230,866中。 薄片式測片本體據述較佳被製成三層。上述元件係藉一 被夾在頂層22和底層24之間之中間層20中之切口所形 -3- 200404160 A7 B7 五、發明說明（2) f °較佳地，層22為雙面黏著膠帶。止動匯合口 16較佳 藉於層22及/或24上之額外切口所形成，其與層Μ上 之切口對齊並以密封層％及/或Μ予以密封。 _ 止動匯合口 16之各切口較佳至少與管道14同寬。可選 擇性地使用-過濾、器來覆蓋樣品孔1()。過瀘器被用來將 紅血球與全血樣品分離及/或可包含一試劑與血液交互作 用，以提供額外訊息。適合之過濾器包含一種異向膜，較 佳為一種可得自光譜診斷公司（Spectral Diagn〇stics，Inc) (加拿大多倫多市）之聚砜(p〇lysulf〇ne)薄膜。選擇性之 反射器可位在薄片式測片2之一表面或層上或附近，且可 言 被定位在測量區上方。若反射器存在，則裝置變成一種穿 透反射裝置。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 基本上，在製造薄片式測片時，試劑被喷墨印刷在區域 4、6及8上。在各位置上之化學品被揭示於84〇公開案 中’其為：1)在區域4中之凝血激素；2)在區域6中之 凝血激素牛析出物及重組因子VIIa及3)在區域8中之凝 血激素及早獨之牛析出物（bovine eluate)。區域6中之組 成物係經選擇，用以藉抵消抗凝血劑，如苄丙酮香豆素 (華法令，warfarin)，之作用，使血液樣品之凝結時間正 常。區域8中之組成物係經選擇以部分克服抗凝血劑之作 用。牛析出物（血漿擰檬酸鋇牛析出物）可得自血液學科 技中心（柏林頓，VT);重組因子VIIa得自美國診斷中 心（格林威治，CT)。凝血激素得自〇池0臨床診斷中 心（Raritan，NJ ) 〇

200404160 A7 五、發明說明（3) 於印刷後，在一未處理之聚酯膜（如AR1235，可得自 黏著劑研究所（Glem R〇ck，pA))上切除一樣品孔，然 後依標記予以積層至去除釋離層後之雙面膠帶的上部。然 後一模頭貫穿三明治之三層切割出止動匯合口。最後，將 單面黏著膠帶（如MSX4841，可得自3M(聖保羅，MN)) 之條狀物貼附至聚酯層之外側以密封止動匯合口。 ’專片式測片之使用可參照圖2A和2B (亦採自840公 開案）所示之計量器元件之示意圖獲得瞭解，其被認為是 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 種自動型計量器。另外，亦可手動操作。於該情況中， 氣囊12在樣品被施加至孔1〇之前被手動壓住，然後放 開。使用者執行的第一步驟就是起動計量器，藉以供給測 片偵測器30、樣品偵測器32、測量系統34及選擇性之加 …、器36成置。第二步驟為插入測片。較佳地，測片之至 少局部面積非為透明的，使插入之測片可阻斷偵測器40 之LED 38的照射（尤佳地，中間層係由不透明材料所形 成’使背景光不會進入測量系統34)。偵測器40藉此可 感知須彳片已被插入並觸動氣囊之致動器42以壓縮氣囊 12 °計量顯示器44隨後指引使用者將一樣品施加於樣品 孔10，此係使用者要開始測量程序必須執行之第三且最 後之步驟。空的樣品孔是可反射的。當樣品被加至樣品孔 寺/、會吸收來自LED 46之光並藉此減低被反射至偵測 器48的光。該光之減低接著發出信號予致動器42以釋放 氣囊12。在管道14中所形成之抽吸作用吸引樣品通過測 量區’至止動匯合口。就各測量區4、6及8而言，提供 -5- i本紙張尺度適用中國國家標準仰私4規格（2心297公 200404160 五 發明說明 (4) A7

LED 50和偵測器52 之光。 配對來監視當樣品凝結時由其所傳送 所傳送之光作為時間函數之分析（如 鼻PT時間（其被顯示於計量尋 兄。午口十 m U -1，U ^ ^ ^ 、、、不态4上）及任何有關 相式測片之配適性與可靠性之訊息。較佳地 藉加熱器36予以維持在約37玄 7 '皿又 c。各所述功能係藉被儲存 於程控、唯言買記憶體5 6中之數辨t τ炙軟體所控制之微處理晶片54 所控制。 、如上所述，偵測器僅藉偵測光信號（其被牝所發射且 被48所偵測）之（光譜）反射的降低來檢測於樣品孔ι〇 中之一樣品。惟，該簡單系統無法容易地區分全血樣品及 某些被誤放於樣品孔中之其他液體（如血清），或甚至， 一種可接近樣品孔10並引起系統錯誤地斷定已施加一適 當樣品之物體（如手指）。 經 濟 部 智 慧 財 產 局 員 工 消 費 合 作 社 印 製 為避免此種錯誤，另一具體例係測量來自樣品孔之擴 散反射。此具體例示於圖2Β中，其顯示垂直於薄片2平 面置放之偵測器48。藉此處所示之排列，若全血樣品已 被施加至樣品孔10中，則被48所偵測之信號會因全血樣 品之散射而突然地增強，然後因錢串狀紅血球串聯結構形 成而減弱。偵測器系統32因此町予以程式編碼，藉以在 引起致動器42釋放氣囊12之前要求該種信號。釋放氣囊 時之數秒延遲實質上不會影響如下所述之讀數。 圖3說明一種典型之“血凝塊信號”曲線，其中由偵測器 50而來之電流繪為時間之函數。血液在時間1下先於測 -6-

(210x297 公釐） 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格 200404160 Α7 五、發明說明（5 ) 量區中被偵测到。在介於點丨和2之間的時間間隔A 内，血液充滿測量區。在該時間間隔内之電流下降係由於 光線被紅血球散射，因而是一種血球容積之大約测量值。 在點2，樣品已充滿測量區且停止流動，其之移動以被止 動匯合口所制止。紅血球開始像錢幣一樣堆疊（錢串狀紅 血球串聯形成）。錢串狀紅血球串聯效應容許在點2及、、= ，間的時間間隔内，有愈來愈多的光線穿透樣品（且較少 ^射）。在點3,血凝卿成結束了㈣狀紅血球串聯結 且穿透樣品之透光度達到最大。Ρτ時間可由點ι和: 之間或點2和3之間的_ Β計算出。結果基本上以盆 之二脚，（亦即國際標準化比例）定義報告。其後，血液 ，變狀態，由液態變成半固態凝膠，透光度亦對應地降 氏。介於最大值3和終點4之_電流減少(c)與樣 之纖維蛋白原有關。 對一全血樣品利用此測片所為之測量對每一測量區均 生如圖3所示類型之曲線。由控制組（測量區6及8) 之曲線而得之數據被用來核驗由測量區4之曲線而來之數 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 f來自區域4之樣品的測量只有當在區域6及S上之測 :在1定範_產生結果時方為有效。若此等控制組測 二里之任一或二者為在範圍外，則顯示要以另一測片重新測 試:試劑之老化或氧化可能會產生控制組i及/或控制組 2试驗失敗。 产紙張尺度適用中_家標準(CNS)A4規格⑽χ297公爱） 五、發明說明（ο 發明内容 根據諸如在’840 公開案中所描述 片，本發明應用某些標準來產生高準確度之薄片式測片檢 測法，其是基於由各控制組所獲得之結果而得。由第一控 制組(C1)而來之結果被核驗彼等是否落在樣品數值範圍 之雙-控制薄片式測 内。當結果仙謙定義被表達時，在或介於㈣60和 ⑴抓之間的C1讀值是可接受的。由第二控制組(C2)而 來之結果被核驗是否彼等落在被與檢驗PT時間有關之函 數所偈限之區間或區域中。當由第二控制組及檢測而來之 結果係以祖定義被表料，函數為線函數其在較高 檢驗INR值下互相發散。如同在對照系統中，一旦〇和 C2兩者之結果落在所缺範_，㈣丨式則之結果 即被核驗或決定為適合或可靠的。 本發明之线較佳與如上述之可祕丢棄式薄片式測片 和手持式計量ϋ聯合操作。數學演算或函數（較佳為如下 詳細描述者）被絲以如例示結果機明之高度準確的方 式來核驗薄片式測片的數據。此等結果較佳以手持式計量 器以快速方式完成。由硬體所執行之演算法以及所述之方 法形成本發明之態樣。 實施方式 以下所述比上文之概述提供更詳細地描述本發明，其中 標的物薄片式測片檢測系統及其使用之方法均參照圖4及 各方程式來描述。惟，在本發明詳細說明之前，應瞭解本 -8- 200404160 Α7 Β7 五、發明說明（7) 發明並未限於所提及之特殊變化例，且當然為可變化的。 可對所述之本發明進行各種變化且在不偏離本發明之真實 精神及範轉下可以均等物取代。此外，許多修飾可用來使 特殊狀況、材料、物質組成物、方法、製法步驟或諸如步 驟適合於本發明之目的、精神與範嘴。所有此種修飾被認 為在本發明之範_内。 再者，若有提供數值範圍時，應瞭解每個在該範圍之上 下限之間的數值及在該所述範圍之任何其他所述或介於其 間之數值均被包含於本發明中。此等較小範嘴之上下限可 獨立地被包含於更小範圍且亦包含於本發明中。若所述範 圍包含界限之-或兩端時，任何排除該等被包括界限兩者 之範圍亦包含於本發明中。亦可預期的是本文所述發明變 化例之任何選擇性特徵可被提出且單獨地或與本文所述之 绣 任何一或多種特徵結合於申請專利範圍中申請。 T非另有限定，本文所使用之所有技術及科學術語具 有沾悉本發明所屬技術者一般所瞭解之相同意義。雖然任 何類似或均等於本文所述者之方法及材料亦可被用於實施 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 或試驗本發明，但本發明仍描述較佳之方法及材料。本文 所述之所有既存題材（如公開案、專利案、專利申請案及 硬體2全部併入本文作為參考。所參照之事項僅就彼等在 本申清案之申請曰前之揭露部分予以提供。本文中所未提 及者應解釋為承認本發明並無資格憑藉先前發明而早於此 等資料。 又，’應注意當於本文中及於附隨之申請專利範圍中使 -9- 本紙張尺度適时國準(CNS)A4規格—（21G χ 297公^------- 200404160 A7

用時’單數形式“及，，、“該”及“此，，乃包括複數形 式除非文中另有清楚指明。相反地，應認為申請專利範 圍可如此，以要求單_的元件祕除文巾或圖式中所稱 可^在之任何選擇性元件。此聲明係充作關於引述申請專 利範圍元件時使用此等排除術語、 “負面㈣”之”專利限制時之紐基礎。 本發明較佳以薄片式測片來實施及進行程序，其與，840 公開案所揭示者有關。根據本發明，〇包括就之凝灰 因子以抵消血液樣品中之抗凝血劑一特別是可邁丁 (C〇umadin)—之任何作用，以較佳地產生C1之PT介於 優良品質薄片式測片之0.8和Κ9之間。C2於組成（如上 所示）及存在於試劑配方中之凝血因子的量二者與C1不 同。更少的因子被添加至C2以使血液樣品中抗凝血劑效 應。卩分常悲化。反應區6 (對應於C1)較佳包括帶有緩 衝劑和防腐劑之重組組織因子、外來路徑之小牛凝血因子 及重組因子vIIa蛋白質。反應 8 (對應於⑵較佳包 括帶有緩衝劑和防腐劑之重組組織因子、外在途徑之小牛 凝血因子。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 在檢測薄片式測片時，較佳在三個測片測量區之各區 對全血樣品作測量，產生圖3所示類型之曲線，用來決定 各井之INR值。首先，吸取全血樣品於各反應區，使液 體與乾燥試劑再水合並在各位置上反應。於控制組井6和 8所獲得之數據被用來核驗由提供PT時間之測量區4而 來之曲線所付之數據。試驗結果（包括控制組之結果）宜 -10- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 200404160 A7

予以轉糾證結果供狀演算純料果給使 用者。 基於在多個臨床單位所評估之複數薄片式測片批量， 若C!之PT INR具有約h9之上限及約〇 6〇之下限（取 代上述之更適度的範圍）即可確定薄片式測片結果已有充 分準確的合格性。至於C2之核驗結果，已觀察到c2與 所獲传之檢驗結果係遵照線性或比例關係。又，由複數薄 片式測片批量及臨床單位而來之數據被用以來產生核驗標 準。 C2之核驗標準可以具稍不同斜率之直線及^_截距值為 代表。如圖4中所見之上限線58之斜率大於亦可見於其 中之下限線60之斜率。兩線在較高PT值下發散，因此 產生一 C2變寬的核驗區62。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 就第二控制組上限5 8而言，當以y = mx + b形式表示 時，m = 0.56至0.58且b = 0.90，以此所產生的線提供所 產生試驗數據之優良的配適性。就第二控制組下限60而 言’當以y = mx + b形式表示時，m = 0.36且b二0.37至 〇·38 ’此線提供所產生試驗數據之優良的配適性。使用 符號，意表相等或約相等。 事實上，上述之線方程式可更精確地定義。兩個很明 顯的圖形被表達，顯示此種級次(order)的變化被考慮到 (就C1的核驗標準而言亦相同）。而且，在理想實施本 發明時，圖4係被精確製圖。。 所，以說，方法上之實質變化被認為是本發明之一部 -11- _本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 200404160

分。例如，一或多項方程式可被用來設定界限，特別是對 C2而言。另外，可使用代表結果在各自〇和之核驗 範圍内之表賴據；論如何，可定義各種核驗區或區 間。進-步的變化包括修飾C1 # C2之化學品。雖然改 變化學性可能影響限定核驗區之功能特性，但本發明^一 般特性應不會改變。 舉例來說，在C1和C2結果被核驗之場合，薄片式測 片計量顯示器44顯示該檢驗之PT時間（較佳以inr值 定義）。若此等控制組測量之一或二者為在所限定之範圍 外’則另-種顯示測試可靠性或配適性之信息即由薄片式 測片計量ϋ顯現。可能出現該種失敗特有 即，信息指示C1、…及C2失敗）。另:°卜:2 能僅顯示以另一測片重試。 實施方式 早自2_年3月即進行與本發明有關之_系列試驗。 此等試驗為實驗性質，為決定及/或確認本文所教示之薄 片式測片檢測方法之準確性所必須者。在經由使用本發明 所達成之W式㈣之準確財面，此種試驗之結果提供 充分準確性的JL面指示。在本案說明書提"請之日之 前，公眾尚無法取得任何根據本發明之產品。 首先針對在三個獨立之如上述之薄片式測片的鑑定機 構所註冊之標的物研究本發财法魏之準確i在此等 臨床試驗巾’吸取靜脈錢’並在—賴祕床實驗室裝

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置上試驗。此等結果被用作絕對參考。透過延伸一致性分 析之比較（其考慮試驗結果之臨床解釋相肖於最終實驗室 參考系統之tb較），本發明系統產生99%之臨床一致 性1此種一致性比例顯示顯著的改良，勝果羅氏診斷中心 (剷身為Boehringer Mannheim股份有限公司）之 ^oaguCheck計量器之方法（其產生87%之延伸一致性vs 實驗室對照組之已公開性能）。關於本發明之此等臨床試 驗，觀察到約0.5%之薄片式測片之錯誤頻率。 亦對病患進行外行人試驗，其在四個有限時間間隔 下，於家庭環境中以標的物薄片式測片及計量器自行試 驗，然後在四小_使歸脈錢於參考實驗祕。將家 庭％i兄/終級使用者結果與臨床結果比較。此試驗亦產生 與第-次研究-致的錯誤頻率，系勺〇.5%。關於ci觀察 到0.5%之錯誤頻率，而C2為〇·5%。〇和Q同時指示 的錯誤以0.1 %之頻率發生。 在進行夕個確認薄片式測片準確性之其他試驗中，外 行人終級使用者相對於實驗室參考裝置的臨床準確性利用 經 部 智 Μ 財 k 局 員 工 消 費 合 作 社 印 延伸-致性結果分析，經測定為95%之臨床一致性。 利用累積次數》，當在外行人終級使用者之控制下實 施時與實驗室參考組比較之下，本發明之準確性據述為 94/之倍率’終級使用者獲得在Q 5臓單位内之實驗室 參考方法之結果。就有關如Av〇cet醫療產品公司所公布 之0.5 INR内之結果而言，此顯示有優於對應之卯％性能 評等孓改良。 -13·

200404160 A7 B7 五、發明說明（12) 雖然本發明已參照一實施例，視情況配合各種特徵予以 描述，惟本發明當考慮到可能之變化時並不限於所述或所 揭示者。本發明之範圍僅受下列申請專利範圍之文義或均 等範圍之限制。 圖式之簡要說明 圖1為關於本發明所使用之薄片式測片之上視圖；圖 1B為薄片式測片的側視圖。 圖2A為可用於本發明之計量器之硬體元件之示意圖； 圖2B顯示圖2A之計量器之一元件之另一變化例。 圖3為用來決定PT時間之數據圖。 圖4為顯示一檢驗第二控制組之核驗區之圖。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 ·* 4· 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐） 200404160 A7 B7 五、發明說明（13) 圖式之元件代表符號 測片—2 >則 S 區—4、6 ’ 8 導入孔—10 氣囊…12 管道…14 止動匯合口…16 旁通管道-—18 頂層…22 底層…24 中間層一20 密封層…26，28 偵測器…30，32，40，48，52 測量系統-—3 4 加熱器…36 LED …38，46，50 致動器…42 計量顯示器-一44 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 唯讀記憶體一-56 微處理晶片—54 上限線…58 下限線…60 核驗區—62 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210x297公釐）

Claims (1)

1. 200404160 A8 B8 C8 D8 」、 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 申請專利範圍 1. 一種薄片式測片之檢測方法，該方法包括： 提供一包含檢驗反應區之薄片式測片、一第一控制組 反應區和一第二控制組反應區； 獲得各反應區之PT結果； 將由該第一控制組區而來之結果與第一控制組核驗標 準比較以及將由第二控制組區而來之結果與第二控制 組核驗標準比較，其中該第一控制組核驗標準包含一 上限和一下限，該第一控制組上限為約1.9 INR且該第 一控制組下限為約0.60 INR ;及 輸出顯示薄片式測片可靠性之信息給使用者。 2. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該第二控制 組核驗標準包含一上限和一下限，該上限與檢驗反應 區PT結果相關，該下限具有與檢驗反應區PT結果相 關之第一和第二區段。 3. 根據申請專利範圍第2項之方法，其中該第二控制 組標準上限包含一線函數及該第二控制組標準下限包 含一線函數。 4. 根據申請專利範圍第3項之方法，其中該線函數被表 示為 y = mx + b， 其中y代表該第二控制組所獲得之INR結果，且x代 表該檢驗反應區所獲得之INR結果； 其中就該上限而言m = 0.56至0.58且b = 0.90，及 其中就該下限而言m = 0.36且b = 0.37至0.38。 5. —種薄片式測片之檢測方法，該方法包含： -16- μ本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） 200404160 A8 B8 C8 ---------D8 六、申請專利範圍 -- 提供一包含檢驗反應區、-第-控制組反應區及-第 一控制組反應區之薄片式測片·， 獲得各反應區之PT結果； 將由第-控制組區而來之結果與第一控制組核驗標準 比車乂以及將由第二控制組區而來之結果與第二控制组 核驗標準比較，其中該第二控制組核驗標準包含一上 限和下限’各別與檢驗反應區PT結果相關；及 輸出顯示薄片式測片可靠性之信息給使用者。 6. 根據申請專利範圍第5項之方法，其中該帛二控制 組標準上下限函數包含線函數。 7. 根據中請專利範圍第6項之方法，其中該線函數被表 示為y = mx + b ;及 /、中y代表該第二控制組所獲得之INR結果，且x代 表該檢驗反應區所獲得之INR結果； 其中就該上限而言^㈣至㈣且卜㈣赁及 其中就該下限而言m = 〇.36且b = 〇.37至0.38。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 8·根射請專利範圍第5項之方法，其中該第—控制组 核驗標準包含一上限和一下限，該第一控制組上限為 約1.9INR且該第一控制組下限為約〇 6〇祖。 9· -種系統’其係被程序控制以操作根據—種選自由根 據申請專利範圍第i至8項之薄片式測片檢測方法所 成組群中之方法。 1〇·根據中請專利範圍第9項之系統，進—步包含一種薄 片武測片’其包含—檢驗反應區、_第—控制組反應 -17- 200404160 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 區及一第二控制組反應區。 11.一種電腦可讀媒體，其包含一程式，以引導系統進行一 種選自由根據申請專利範圍第1至8項之薄片式測片檢 測方法所成組群中之方法。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 適 度 張 紙 本a lil 準 標 家 祕 釐 公 97