TW200303726A - Process for producing SDG and foods and drinks containing the same - Google Patents

Description

200303726 (1) 玖、發明說明 【發明所屬之技術領域】

本發明係關於爲製造已知爲具有女性激素般活性之木 質素（enterolactone)及腸二醇（enterodiol)等之先驅物 ，木酣素化合物 （lignans) 之一之 SDG( secoisolariciresinol diglycoside)之方法，以及摻合 SDG 而可製造對於女性激素失調所引起之各症狀，例如更年期 障礙、骨質疏鬆症、高脂血症、肥胖及憂鬱等有效之食品 及飮料者。 【先前技術】 認爲更年期障礙係迎接停經期之雌激素（estrogens ) 降低造成激素平衡失調爲原因所造成之各症狀，至閉經期 之數年間持續之症狀。更年期之症狀特徵，已知爲憂鬱及 熱潮紅等。另外，過了更年期，停經之後，所伴隨之症狀 ，可舉例如骨質疏鬆症、高脂血症、高血壓症、肥胖及憂 鬱等。 任何一種對於維持健康均有大的影響，希望能有適當 地對應處理法。治療法之對症療法，對於骨質疏鬆症、高 脂血症、高血壓症、肥胖及憂鬱，雖然可選擇各自之治療 法，對於這些有效的是 HRT法（Hormone Replacement Therapy，簡稱爲HRT)，亦即激素療法。即使症狀爲複 數個時，因爲可取得女性激素，大多可獲得明顯地改善。 然而，該HRT會有產生乳癌、子宮癌等致癌性之風 (2) (2)200303726 險以及假生理般出血等問題。關於致癌性，雖然倂用黃體 激素（progesterone )時大致上可以解除，但是致癌性之 印象深刻，而且合倂有出血之問題，僅以HRT解決時， 可說是不如所期待效果之大。 若得到效能能與HRT相匹敵之食品，可容易想像出 會產生多大利益。因此，近年，由日本甚至美國，備受囑 目的是植物雌激素。 植物雌激素之代表爲大豆異黃酮素（Soy Isoflavones · )，最近受到注目之食品材料。因爲大豆異黃酮素係已知 具有女性激素般作用之成份，所以得到許多對於女性激素 失調而出現之各種症狀，例如更年期障礙、骨質疏鬆症、 高脂血症、肥胖及憂鬱等有效之見解。黃豆胚芽萃取物中 所含之大丑異黃酮素係金雀異黃酮素（Genistein)、木質 素異黃酮素（Daidzein)及大豆黃素（Glycitin)等之總 稱，幾乎以配糖體存在，認爲係因腸內微生物所糖甘配基 (aglycone )化，所吸收者。 Φ 大豆異黃酮素於構造上具有與雌激素共通的性質，所 以預測其可與雌激素受體相結合，但實際上，報告指出雌 激素受體ER/3具有選擇性結合（Endocrinology 139，4252 (1 998 ) ) 〇 關於植物性雌激素，自古就已知道其存在，除了可以 使牛的出奶良好等之效能外，亦已知大量攝取時會造成不 孕。因此，使用時必須十分注意。重視關於人類之安全性 ，認爲最重要的是基於飮食經驗之安全性。 (3) (3)200303726 已知日本人與美國人相比較，子宮癌、乳癌及男性前 立腺癌之發病率極低，而且同時更年期症狀亦較輕（J/ Nutrition 1 25, 75 7S ( 1 995 ))。血中之異黃酮素濃度係 說明其之最大根據，日本人與美國人相比較，確認約具有 1 〇倍以上。另外，可得到使用大豆異黃酮素於培養細胞 或動物之試驗，可抑制乳癌、子宮癌之增殖，使用停經模 式之摘出卵巢小鼠，可抑制骨質吸收過程而改善骨質疏鬆 症，改善停經所伴隨之高脂血症以及抑制肥胖等許多關於 有效性之見解。 依據這些見解可判斷作如此之結論，可期待大豆異黃 酮素，對於改善更年期開始時許多症狀之效果，而且爲安 全性高之植物雌激素。 認爲日本人之異黃酮素之平均攝取量，每日約爲 2〇mg。推廣積極地攝取異黃酮素，關於以攝取異黃酮素 爲目的之食品，（財）日本健康營養食品協會建議關於稱 爲異黃酮素含有食品之含有異黃酮素之食品之攝取標準量 爲10至90mg。另外，作爲特定保健用食品，基於抑制骨 質吸收作用，已獲得厚生勞動省之作爲安全且效能之素材 之許可。 除此異黃酮素以外，已知許多稱爲植物雌激素之成份 。例如，啤酒花（HOP)中所含之 prenylnaringenin，首 宿芽菜 （Alfalfa ) 中所含之 coumestrol，其次，最近 受注目者係亞麻中所含之木酣素。 依區域別分析植物雌激素之攝取時，明白相對於以攝 - 8- (4) (4)200303726 取異黃酮素爲主之亞洲，北歐係以攝取木酚素爲主。由統 計上顯示，兩區域均爲乳癌發病率及更年期症狀之重症度 低者，與其他區域相比，係拜攝取植物雌激素之賜。 對於尤其具有如激素作用之活性成份，攝取時必須充 份注意當中，對於異黃酮素及木酚素，由於存在著顯示免 疫學上有效性之見解，硏究者將異黃酮素及木酚素列爲世 界上之2大植物雌激素。 顯示亞麻中所含之木酚素化合物（亞麻木酚素）， 由腸內細菌轉變成顯示具有木質素及腸二醇等之女性激素 般作用之活性成份（Nature 298,659( 1982))。在此應 注意之要點爲含有木酚素之植物素材中，尤其是亞麻種子 中所含有之SDG等之木酚素，變換成活性成份效率高， 此由 Thompson等人之硏究所揭示（Flaxseed in Human Nutrition, Chapter 5 ( p 8 2 - 9 8 ) ，academic press， AO C S Press ( 1995) ) o 亞麻木酚素如此地受到重視，亞麻本身自新石器時代 就已被食用，自古代希臘、羅馬或埃及時代至現代，一直 被食用。然而，關於直接攝取亞麻種子時，因爲殼硬，即 使攝取亦難以利用其有效成份，含油率高爲高熱量食品， 含有氰基配糖體，以及存在維生素 B之拮抗劑（ antagonist )等問題。另外，因爲亞麻種子油之不飽和脂 肪酸含量多，所以容易劣化，於日本幾乎完全作爲工業用 油使用，至今於食用上未受到注目。 於日本，由通常飮食生活中攝取大豆製品判斷，可判 -9 - (5) (5)200303726 斷異黃酮素之攝取保持某程度高値，相對於此，關於木酚 素型之植物雌激素，可指出其攝取量低。然而，含有高含 量亞麻木酚素之食品幾乎不存在，希望能開發解決這些問 題之食品素材。 另一方面，有報告指出亞麻中所含之木酣素化合物， 作爲食品添加物使用。特開平1 1 — 22 1 048中記載，使用 異黃酮素、木酣素、皂素（Saponin)、兒茶素（catechin )及酚酸，減輕或預防頭暈、骨質疏鬆症、睡眠障礙、膣 乾燥及月經前症候群之方法，所記載之木酚素類係以亞麻 木酚素爲例。另外，特許第3 062 5號中揭示作爲褪色防止 劑之木酚素化合物，所記載之木酚素化合物係以SDG爲 例。然而，至今仍未解開關於亞麻木酣素之生理作用。 另外，關於木酚素之製造方法，有關於由亞麻種子萃 取木酚素方法之美國特許第5,705,6 1 8號。該特許中揭示 ，以醇類萃取濃縮後，再經鹼處理之方法。另外，日本特 許第3065925揭示將亞麻種子之醇類萃取物或粗木酚素配 糖體濃縮物，以酵素處理或酸處理之方法。然而，這些製 法仍留有步驟複雜而且成本方面須改善的空間。另外，已 知亞麻種子含有許多蛋白質，以這些方法，只能得到低胺 基酸含量者。 【發明內容】 發明之揭示 本發明的目的係開發已知爲具有女性激素般活性之木 -10- (6) (6)200303726 質素及腸二醇等之先驅物之 SDG ( secoisolariciresinol diglycoside)之有效率的製造法，實用性地供給含有SDG 之薪新食品素材。 本發明進一步目的係提供摻合本發明之嶄新食品素材 ’包含對於女性激素（尤其是雌激素）失調所引起之各種 症狀’例如更年期障礙、骨質疏鬆症、高脂血症、高血壓 症 '肥胖、憂鬱及熱潮紅等之預防及減輕症狀有效之健康 食品’不論其型態或種類之食品及飮料。 本發明者等人，著眼於植物雌激素，進行對於亞麻木 酣素之生理作用努力檢討結果，另外驚誕的是，發現亞麻 木酚素所含之SDG對於女性激素失調所引起之各種症狀 ，例如更年期障礙、骨質疏鬆症、高脂血症、肥胖症、憂 馨及熱潮紅等有效。 另外，本發明者等開發對於亞麻種子等所含之木酸素 化合物SDG，更有效率地且高收成率之製造方法。本發明 中，將含有SDG之植物材料，例如亞麻種子或其脫脂殘 渣，以鹼性醇類萃取。依據本發明，令人驚訝的是，即使 同時以鹼性醇類進行萃取及水解時，可以高收成率回收木 酚素化合物SDG ’並且明白，收集來自原料之胺基酸而可 一倂回收。 以往之分別進行萃取及水解之方法，兩步驟間必須進 行濃縮步驟’實際上爲3個步驟。相對於此，本發明之方 法’可以1個步驟萃取木酚素化合物，非常效率化地製造 SDG。 (7) (7)200303726 用以實施發明之最佳型態 作爲本發明中有效成份SDG之製造原料爲木酚素， 尤其是只要含有SDG之天然物即可使用。例如木酚素， 係含於燕麥、玉米、裸麥、薔麥及小麥等之全粒穀物中， 爲2至8mg/kg。報告指出亞麻種子中，含有相當於全粒 榖物100倍之800mg/kg之木酚素，作爲SDG之製造原料 尤其適宜。 另外，作爲SDG之製造原料，雖然可使用將亞麻種 子粉碎後，以己烷等可使用於食品製造之溶劑萃取脫脂者 ’更希望的是以工業上由亞麻種子，經己烷萃取油後所剩 餘之脫脂亞麻粕爲適合。該脫脂亞麻粕，通常是廢棄或是 作爲家畜飼料使用，未能有效地利用於食品上。 關於由脫脂亞麻粕至SDG之製法，需注意兩點。一 點是亞麻種子所含粘多醣（Mucopolysaccharide)的存在 ，另一點是因木酚素化合物之糖鏈而高分子化。考慮這些 後所開發之SDG之有效率的製造方法，係於分解時同時 進行萃取者。 首先，關於溶媒，通常於萃取植物原料所使用者即可 利用，但是以可作爲食品原料使用之溶媒爲宜。最適當的 是食品用之醇類，例如甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇及丁醇 。萃取時所使用之醇類，必須爲不能萃取出粘多醣之濃度 ，以30至100% ( v/v)之濃度爲宜，例如可以50% ( v/v)之醇類萃取。 進而，將上述之濃度所不能萃取之SDG，於鹼性條件 (8) (8)200303726 下萃取時，可水解糖鏈，萃取出未萃取之SDG，而可提高 萃取效率。 由此可知，作爲於鹼性條件下倂行水解及萃取之方法 之本發明之鹼性醇類萃取法，因爲可提高目的成份之回收 量，並且同時可簡化步驟，所以爲具有工業上極大利益之 方法。另外，以鹼性醇類萃取法，就其亞麻種子所含之蛋 白質爲胺基酸型式，與先前法相比較，由更有效率地萃取 之觀點而言，本發明之製法係有效的。 對於亞麻粕所使用之萃取液係相對於亞麻粕，以1至 2〇倍量爲適當的，相對於批式處理之循環型萃取裝置， 可以使用較少量之萃取液量即可。 鹼性醇類萃取步驟所使用的鹼，只要爲可使用於食品 製造者，並不選擇其種類，例如可使用NaOH。 所添加之NaOH濃度，雖依亞麻粕之處理量而異，爲 0.05 至 2N 之 NaOH，以 0.1 至 0.2N 爲宜。 關於以鹼性醇類進行萃取，進行時間可比通常之醇類 萃取短，於室溫下進行時爲3 0分至3小時，典型上約以 1小時萃取完畢。萃取溫度，於通常之萃取裝置時，係以 醇類之沸點以下爲宜，例如以室溫至70°C之溫度爲宜。 若使用可加壓之萃取裝置時’可以更高溫處理。 萃取物必須於最後進行中和。使用酸於該中和時，以 食品製造時可使用之酸，例如醋酸及鹽酸等爲宜。酸之添 加量必須可中和萃取物之量。 以鹼性醇類萃取階段之本發明之SDG高含有物係由 (9) (9)200303726 原料回收1至2%之SDG。另外，所回收之胺基酸中，期 待可消除疲勞及增強體力等之麩氨酸、由肌肉吸收，直接 作爲能量來源之纈胺酸、異白氨酸及白氨酸等，與以先前 方法所萃取之SDG高含有物相比較，約含有8至10倍之 多。因此，將本SDG含有組成物，直接或加工成飮食型 態，或添加於飮食品中攝取時，加上SDG之效果，亦可 得到消除疲勞及增強體力等之效果。於該SDG高含有物 中，因爲幾乎不含有氰基配糖體，所以脫鹽後，可直接作 爲食品素材使用。另外，以提升純度爲目的時，以精製步 驟而可製造高含量之食品素材。精製方法係只要適合於食 品製造之方法，不選擇其手段，例如可使用活性碳或矽膠 、逆相系樹脂（ODS )以苯乙烯二乙烯基苯系吸附樹脂（ Diaion HP20，三菱化學製），或不使用樹脂之方法，如 CPC法（離心液相分離法）、結晶法或利用對於溶媒之溶 解性差異之分液法等。 因應目的，依據所使用之條件，SDG之含量可提高至 每固形份之10%至90%以上。尤其是調製高純度之試樣 時，使用ODS分離用高效能液相層析儀（HPLC)，重覆 使用而可得之。 亞麻種子含有粘性物質，所以難以摻合於食品及飮料 ，依據本發明之製法，分解此粘性物質，可將對於維持健 康有效的木酚素化合物之SDG摻合於食品及飮料。 所得之SDG高含有物，可以通常之減壓濃縮法或噴 霧乾燥法、冷凍乾燥法等乾燥，可製成適宜之粉末物。 (10) (10)200303726 因此’本發明係提供以本發明之方法所萃取之嶄新 S D G高含有食品素材。依本發明所得之s D G高含量食品 素材係SDG可至40重量％，無色、無臭及無味，對水溶 解性大’所以可單獨作爲粉末食品，或混入黃豆粉等之粉 末食品食用，或作爲食品素材添加者，亦可使用於各種食 品或飮料之製造用。 本發明更提供摻合SDG，可容易地攝取SDG應攝取 量之經口攝取用組成物。 φ 發現摻合SDG之本發明之食品、飮料，爲預防、減 輕對於女性激素，尤其是雌激素失調所引起之各種症狀， 特別地適合。本發明之SDG含有食品，可設定摻合於食 品’使SDG之每日攝取爲lmg至l〇〇〇mg，以5mg至 5 0 0mg爲宜，以1〇至250mg尤佳。SDG摻合量係依據食 品之利用目的而選擇，使用每日可持續攝取型態之食品時 ，例如以10mg至90 mg爲宜。另一方面，希望更加保健 之用途時，例如可至5 0 0 mg之摻合。 _ 粉末食品或錠劑等之水份含量低之食品型態，或其攝 取量少時，SDG之摻合比率可設定較高。考慮因用途之攝 取量不同，可開發調整爲每重量含有SDG例如0. 1 %至90 %者之食品。 另外，飮料、利樂包食品等水份含量多，其自身攝取 量多時，SDG含量可因應之而減少，希望每重量摻合爲例 如 0.001% 至 10%。 本發明之SDG高含有物，除了 一般食品之外，亦可 -15- (11) (11)200303726 作爲機能性食品及營養補助食品等原材料使用。可舉例如 麵包、餅乾及燕麥棒等之固形狀食品或果汁及湯等之液狀 食品。機能性食品時，可舉例如粉末、顆粒、錠劑、軟式 膠囊、硬式膠囊、內服液及糖漿等之加工型態。這些係以 通常所使用之方法可以製造的。 另外，製造錠劑時，作爲賦形劑之纖維素、乳糖、糊 精、粉糖、玉米澱粉、還原麥芽糖及蔗糖脂肪酸酯等任何 一般所使用者均可使用，但不以這些爲限。亦可使用防濕 用之蟲膠、椰子蠟及砂糖等，只要可適當地被覆，並無特 別的限制。其他，亦可摻合具有其他機能性成份之抗氧化 作用之素材，例如維生素E、多酚及鈣等礦物質。 另外，對水溶解性高，其味道及香味於摻合時並不造 成大的影響，所以可利用作爲具有保健目的的飮料。其調 味上可採用茶或淸涼飮料及口服液劑（包含粉末口服液） 等各種型態。通常的飮料型態，可設定爲〇.〇lmg/ml至 10mg/ml之建議摻合量。另外，濃縮型態飮料時，摻合量 之上限係因應濃縮度愈高愈佳。 至今有關SDG及異黃酮素之有效性比較，並未有充 份的數據存在。實施其活性比較試驗，顯示S D G具有與 異頁酮素同等或以其以上之效能，以及組合兩者時可得到 更大的效果。組合SDG及異黃酮素之食品，係依據本發 明所首先提出者，可提供對於女性激素失調所引起之各種 症狀’例如更年期障礙、骨質疏鬆症、高脂血症、高血壓 症、肥胖、憂鬱及熱潮紅等非常有效的食品及飮料。 -16- (12) (12)200303726 異黃酮素之摻合量係摻合每日可攝取如10至90mg。 【實施方式】 實施例 以下係以實施例表示，更加說明本發明。 實施例1 萃取法 以市販之亞麻粕爲原料，將1 kg之亞麻粕懸濁於i 〇L 之50%乙醇後，添加400ml之4N之NaOH。邊攪拌，邊 提升溫度至50°C，進行萃取1小時。使用醋酸中和後， 過濾，於減壓下濃縮而得242g之鹼性醇類萃取物（組成 物1 ) 0 作爲比較用，調製不添加NaOH而萃取者，亦即，將 l〇〇g之亞麻粕，以10L之50%乙醇，於50°C下，進行萃 取4小時後，將萃取物濾過，添加40ml之4N之NaOH後 ，於50°C下，分解處理4小時。將其中和後，減壓下濃 縮，而得1 1 . 1 g之萃取物（組成物2 )。 實施例2 SDG分析法、結果 有關上述組成物1及2之SDG萃取量，以HPLC分 析比較。 分析方法係以使用ODS管柱（Deverosil 5HG-3，4.6 (13) 200303726 x 5 0mm，野村化學社製），於〇 · 1 % TFE (三氟乙酸）存 在下，流速爲lml/min，於8分鐘內，乙腈濃度由1〇%增 加至80%之梯度條件下，進行分析。監視器係以UV檢測 器，280nm之波長進行，以峰高爲根據進行定量分析。 試樣以水溶解進行測定。 結果如表1所不。

於本分析條件下，SDG係以於3.8分鐘之保留時間所 出現之高峰而可檢出。 H 與醇類所萃取之組成物2相比，確認鹼性醇類所萃取 之組成物1，其回收率約高出2成。 表1以鹼性醇類萃取法提升回收率 原料 回收固形物 SDG含量 鹼性醇類萃取法 lKg 242g 15g 醇類萃取法 100g 11.lg 1.3g 實施例3 胺基酸分析法、結果 已知亞麻種子中含有多量的蛋白質，提高醇類濃度時 ，可預知其難以萃取。因此，爲檢討以鹼性醇類處理可否 提高胺基酸含量，所以進行胺基酸分析。分析係依據曰立 胺基酸分析系統L8 8 00型高速胺基酸分析器，使用胺基酸 (鄰苯二甲醛（OPA)法）分析系統進行。 其結果如表2所示。依據鹼性醇類萃取之嶄新製法， -18 - (14) 200303726 因爲相對於以先前方法僅能萃取少量之胺基酸，尤其可消 除疲勞及增強體力之麩氨酸之萃取率，可提升8.1倍，以 及由肌肉吸收，直接作爲能量來源之纈胺酸、白氨酸及異 白氨酸等胺基酸含量約可提升8至11倍，所以依據本發 明之製法，確認可如此有效率地回收有效成份，確認本發 明之製法之有效性。 表2以鹼性醇類萃取法提升胺基酸回收率_ φ 每g亞麻粕之胺基酸萃取量（mg) 麩氨酸 纈胺酸 異白氨酸 白氨酸 鹼性醇類萃取法 22 38 33 47 醇類萃取法 2.7 3.6 4.2 4.3 比較（倍率） 8.1 10.6 7.9 10.9 實施例4 HP20精製 將242g之實施例1所得之組成物1 (含有15g之 SDG)溶解於 2L的水中，供給於DiaionHP20 ( 8cm p X 60cm管柱）。以8L的水洗淨後，再以5L之40%乙醇（ v/v )溶出。溶出係以流速1 vvm實施。所得分離物（組成 物3)爲3 9g，以及14.3g之SDG含量。 與組成物3同樣地，重覆實施例1及上述作業，將所 得之95g (含有36.6g之SDG)，溶解於500ml之水中， 供給於DiaionHP20 ( 8cm p X 40cm管柱）。以水洗淨後 -19- (15) 200303726 ，以5L之10%、15%、20%及40%之乙醇（v/v)逐級 溶出。溶出係以流速Ivvm實施。 分離結果如表3所示。SDG於10%乙醇時，幾乎未 被溶出。接著以15%及20%乙醇溶出的結果，回收14.lg 及16.6g之SDG。純度分別爲74.2及91.0%。另外，以 4 0 %乙醇溶出的結果，回收2.9 g之S D G，純度爲1 1.8 % 。另外，即使再提升濃度於其上’亦未能溶出SDG。 由結果可知，使用HP20，可調製純度高之SDG。例 如，以醇類濃度1 5 %以上溶出爲宜。 另外，以此次之2 0 %乙醇溶出部份（組成物4)’供 予效能試驗。 表3 以HP20分離之總結 溶出醇類濃度 固形物（g) SDG(g) SDG含有率（％) 10%乙醇 18 1 . 1 6. 1 1 5 %乙醇 19 14.1 74.2 2 0 %乙醇 18.25 16.6 91.0 4 0 %乙醇 24.5 2.9 11.8 合計 79.75 34.7 43.5 實施例5 效能1;對於脂質、骨質之效果以及倂用異黃酮素之 效果 關於使用更年期模式動物之雌激素般作用之試驗 -20- (16) (16)200303726 已知停經後，隨著雌激素降低，蝕骨細胞（

Osteoclast)之活性化，使骨量降低，而引起骨質疏鬆症 般症狀。另外，隨著雌激素降低，脂質代謝之平衡失調， 容易產生高脂血症或高膽固醇血症等症狀。將雌鼠之卵巢 摘出，爲使其雌激素値降低，呈現如上述之症狀，作爲更 年期模式動物，廣爲使用。爲確認SDG可補充降低之雌 激素，抑制這些更年期障礙之效果，而使用卵巢摘出雌鼠 ，進行實驗。 · 製作卵巢摘出之骨質疏鬆症模式小鼠·_

Wistar 系小鼠（日本 Charles River )，芊，34 隻 6 週大，進行卵巢摘出手術（〇 VX )，同週大之9隻，施以 假手術（Placebo ) ( Sham )，以小鼠用一般飼料CE — 2 (曰本CLEA)飼育。2週後，將卵巢摘出小鼠，分爲4 組（n = 8至9 )，爲I至IV組。作爲陽性對象則設有施以 假手術之卵巢未摘出組（V組，n = 9 ) 。 Φ 卵巢摘出小鼠之飼育·· 飼料係以 AIN - 93M摻合鈣之無添加精製飼料（ ORIENTAL酵母工業製）爲基本飼料，使I組及V組自由 攝取4週。Π組爲大豆異黃酮素、ΙΠ組爲組成物4 (含有 91%之SDG)及IV組爲大豆異黃酮素（含有80%)及組 成物4，分別添加〇 · 1 %於基本飼料，使其攝取飼料。飼 育終了日，測定小鼠體重後，進行解剖採血及摘出右腳大 -21 - (17) (17)200303726 腿骨。 抑制骨量降低效果之判定： 將小鼠右腳所摘出之大腿骨，除去附著之組織碎片後 ，以100°C，乾燥24小時後，測定重量。其結果發現I 組小鼠之每1 0 0 g體重之大腿骨重量’與v組相比較’明 顯地降低，而Π組、m組及IV組與I組相比較’發現有抑 制骨重量降低之傾向（表4 ) 。 φ 表4 卵巢摘出小鼠之骨重量_ 大腿骨乾燥重量（mg) (每l〇〇g體重） I組 87.9 土 1.3 II組 89.5± 1.8 III組 90·9± 2·7 IV組 93·1± 2.6 V組 112.8土 1·4 改善脂肪代謝效果之判定： 由小鼠血液分離出血漿，以自動分析裝置（日立）’ 測定三酸甘油酯。發現相對於I組之三酸甘油酯値之顯著 上升，於π組則有抑制傾向，於m組及iv組則見有意義之 抑制效果（表5 )。 -22- (18) 200303726 表5卵巢摘出小鼠之血中三酸甘油酯値 血中三酸甘油酯 (mg/dl ) I組 50.3± 7.5 II組 38.6土 3.5 III組 32.0土 3.2* IV組 28.9± 3.1** V組 24·7± 1.9 (* : P < 0.05， * * : P < 0 · 0 1 v s I 組）

由上述之試驗例，SDG對於脂質及骨質具有效果，另 外，組合異黃酮素時，顯示可增加其作用，顯示倂用二者 使用時爲有效。 實施例6 Φ 效能2 ;抗肥胖效果 將7週大之雌性Wister系小鼠摘出卵巢，每日一次 將試樣，使用金屬製胃探棒強制經口投予。投予期間爲術 後14天。各群之η數爲8隻。 測定體重，調查對於停經後因食欲增進而肥胖之效果 。試樣係陽性對照爲1 7万腸二醇，另外，怍爲比較試樣 則使用大豆異黃酮素之主要化合物之金雀異黃酮素。另外 ，SDG係使用組成物4。 -23- (19) (19)200303726 其結果如圖2所示。體重之變化係於攝取50mg/Kg 之 SDG、0.0 2 mg/Kg 之 17/3 腸二醇及 100 mg/Kg 之金雀 異黃酮素時，抑制體重的增加。 實施例7 效能3 ;熱潮紅之改善及與異黃酮素之相乘效果 使用更年期模式動物之試驗 停經後雌激素急速降低’使激素平衡失調，使自主神 經發生失調，而出現熱潮紅等之血管運動障礙般症狀。關 於實驗動物中，雌鼠卵巢摘出，觀察出尾部皮膚溫度上升 ，相當於更年期障礙之熱潮紅之症狀。使卵巢摘出雌鼠， 攝取SDG及大豆異黃酮素，測定尾部皮膚溫度。 製作卵巢摘出之骨質疏鬆症模式小鼠：

Wistar 系小鼠（日本 Charles River)，罕，41 隻 6 週大，進行卵巢摘出手術，同週大之9隻，施以假手術（ Placebo )，以小鼠用一般飼料CE — 2 (日本CLEA)飼育 。1週後，將卵巢摘出小鼠，分爲5組（n = 7至9 )，爲 I至V組。陽性對象則設有施以假手術之卵巢未摘出組（ n = 9 ) 〇 卵巢摘出小鼠之飼育： 飼料係以AIN - 93M摻合鈣之無添加精製飼料（ (20) (20)200303726 ORIENTAL酵母工業製）爲基本飼料，使I組、V組及卵 巢未摘出組自由攝取4週。Π組爲大豆異黃酮素、ΠΙ組爲 SDG(組成物4)及IV組爲大豆異黃酮素及SDG，分別添 加0.1%於基本飼料使其攝取。V組係於試驗飼料攝取期 間中，皮下投予1 // g/day之1 7 腸二醇。飼育期間，以 微小精密溫度計BAT— 12R(Rhysitemp製）測定小鼠尾 部皮膚溫度。因卵巢摘出而使小鼠尾部皮膚溫度上升，但 是攝取異黃酮素及SDG可抑制上升，該作用於倂用二者 時更爲顯著，顯示倂用二者利用時爲有效。 效能4 ; SDG及異黃酮素對於子宮重量之影響 實施例中，解剖試驗終了時之小鼠’測定其子宮重量 。因卵巢摘出，使子宮萎縮，重量降低，但投予1 7々腸 二醇之V組，則未見子宮萎縮，其重量與卵巢未摘出組相 同程度。相對於此，Π組至IV組與I組爲相同程度’未見 抑制子宮萎縮之作用。 -25- (21) 200303726 表6卵巢摘出小鼠之子宮重量 子宮重量 (mg ) I組 93.7土 3.9 II組 95.1± 6.4 ΠΙ組 105.5± 6.8 IV組 100.7土 4.3 V組 443.9± 28.8*" 卵巢非摘出組 524·3± 7] 4 * * * ***P < 0.001 vs I 組

實施例8 效能5 :更年期女性之未定困擾投訴之改善效果 依規定法製造含有3.3重量％之組成物4、6.7重量 %之大豆異黃酮素及0.5重量％之維生素E之錠劑，作爲 試驗用錠劑。隨著停經之更年期特有之未定困擾投訴之 33名女性，其使攝取錠劑，每日3粒（約600mg )，進 行四週，依據Kupperman更年期指數，問卷調查各症狀 之變化。統計問卷結果，暈眩、頭痛、憂鬱感、疲勞感、 關節痛及肌肉痛有意義地改善，發現熱潮紅及四肢冰冷等 之血管運動神經障礙般症狀有改善的傾向。另外，各監視 器之簡易更年期指數（SMI )與攝取前期間相比較爲有意 義降低（圖4 )。 -26 - (22) 200303726 實施例9 調製含有SDG之錠劑 以表7所表示之組成，將各粉體以攪拌器混合均勻， 使用打錠機，打錠成1粒200mg之錠劑。其次，於被覆 盆上，噴霧蟲膠，使之乾燥，而製成錠劑。 表7 組成1 組成2 組成3 成分 摻合量（％) 摻合量（％) 合配量（％) 抽出物3 30 8 15 大豆異黃酮素 (含有30%) 22 15 維生素E 9 5 乳糖 18 25 25 纖維素 5 34 29 還原麥芽糖 15 鈣 14 8 8 玉米澱粉 5 蔗糖脂酸酯 4 3 3 合計 100 100 100

實施例1 0 調製含有SDG之麵包 將lg之本發明之含有4〇%SDG之萃取物，與3g之 -27- (23) (23)200303726 乾燥酵母粉、500g之小麥粉、50g之砂糖、1顆蛋、2g鹽 及3 00ml之水，一起放入調理深碗，混合揉麵。醱酵15 分鐘後，趕出空氣，再醱酵15分鐘。趕出空氣，分成20 等份，整型成圓狀。排列於已薄薄塗抹沙拉油之烤盤上， 經1小時之二次醱酵後，以預熱180 °C之烤箱燒烤20分 鐘，而製成麵包。 實施例11 # 飮料 於2 0L之飮料水中，添加lg之檸檬酸鈉、20 0g之葡 萄糖及1 lg之含有80% SDG之萃取物，使之溶解後，以 檸檬酸調整爲PH4.0之後，添加柑橘類香料，封入120ml 之褐色瓶中，製成飮料。 產業上利用性

依據本發明，將已知爲具有女性激素般活性之木質素 H 及腸二醇等之先驅物之 SDG ( secoisolariciresinol diglycoside )製造成高含量之嶄新食品素材及摻合其之各 種型態之飮食品。 如此之含有SDG飮食品，尤其是含有SDG及異黃酮 素之飮食品係可改善女性激素失調所引起之各種症狀，例 如更年期障礙、骨質疏鬆症、高脂血症、高血壓症、肥胖 、憂鬱及熱潮紅等各種症狀，或是就可期待美容效果之觀 點，對於其開發，可期待其帶給健康莫大的益處。 -28- (24) 200303726 【圖式簡單說明】 圖1係表示SDG之構造式。 圖2係表示抗肥胖效果試驗之體重變化。 圖3係表不對於熱潮紅之改善及倂用異黃酮素之效果 〇 圖4係表示對於更年期障礙女性之未定困擾投訴之改 善效果。 _

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Claims (1)

1. (1) (1)200303726 拾、申請專利範圍 1. 一種SDG高含有物之製造法，其特徵爲，將含有 secoisolariciresinol diglycoside ( SDG)之植物素材，以 鹼性醇類萃取。 2·如申請專利範圍第1項之SDG高含有物之製造法 ，其中含有SDG之植物素材爲亞麻種子。 3·如申請專利範圍第2項之SDG高含有物之製造法 ，其中亞麻種子爲脫脂亞麻粕。 · 4·如申請專利範圍第1項至第3項中任一項之SDG 含有組成物之製造法，其中醇類濃度爲30至1〇〇% ( v/v )0 5. 如申請專利範圍第1項至第4項中任一項之Sdg 含有組成物之製造法，其中鹼性醇類爲含有0.05至2N的 鹼之醇類。 6. —種SDG高含有物，其特徵爲，以如申請專利範 圍第1項至第5項中任一項之製造法所製造。 春 7 · 一種飮食品素材，其特徵爲，以如申請專利範圍 第6項之SDG高含有物所製成。 8 . 一種飮食品，其特徵爲，含有如申請專利範圍第 7項之飮食品素材。 9.如申請專利範圍第8項之飮食品，其中含有每日 攝取量爲1至lOOOmg之SDG。 10·如申請專利範圍第8項之飮食品，其中含有每重 量爲0.001至90重量％之SDG。 -30- (2) 200303726 1 1 ·如申請專利範圍第8項之飮食品，其爲含有每日 攝取量爲10至90mg之SDG之型態。 12· —種飮食品，其特徵爲，含有SDG及異黃酮素 〇 1 3 .如申請專利範圍第1 2項之飮食品，其中含有每 曰攝取量爲1至lOOOmg之SDG。 1 4 ·如申請專利範圍第1 2項之飮食品，其中含有每 重量爲0.001至90重量％ 2SDG。 _ 15.如申請專利範圍第12項之飮食品，其爲含有每 曰攝取量爲10至90mg之SDG之型態。 16·如申請專利範圍第12項之飮食品，其爲可每日 攝取10至90mg之異黃酮素類之型態。 17.如申請專利範圍第12項至第16項中任一項之飮 食品，其中SDG係由天然物所萃取者。 18·如申請專利範圍第17項之飮食品，該天然物爲 含有SDG之植物素材。 籲 19.如申請專利範圍第18項之飮食品，該含有SDG 之植物素材爲亞麻種子。 2 0.如申請專利範圍第8項至第1 9項中任一項之飮 食品，其具有預防及/或改善女性激素失調所引起各種症 狀的效果。 2 1 .如申請專利範圍第8項至第1 9項中任一項之飮 食品，其具有預防及/或改善更年期障礙症狀的效果。 22.如申請專利範圍第8項至第19項中任一項之飮 -31 - (3) (3)200303726 食品，其具有預防及/或改善至少一種選自骨質疏鬆症、 高脂血症、高血壓症、肥胖、憂鬱及熱潮紅之症狀的效果 〇 23 .如申請專利範圍第8項至第1 9項中任一項之飮 食品，該飮食品爲選自麵包及餅乾等之燒烤點心’果汁及 無糖茶等飮料、酒類、湯、糖果、口香糖、優酪乳、冰淇 淋、布丁及果凍者。 24.如申請專利範圍第8項至第1 9項中任一項之飮 食品，該飮食品爲選自粉末、顆粒、錠劑、軟式膠囊 '硬 式膠囊、內服液及糖漿之加工型態。

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