SK288054B6 - Antibody to IL-1 beta, IL-1 beta binding molecule, its use and process for production, first DNA construct, expression vector and pharmaceutical composition - Google Patents
Antibody to IL-1 beta, IL-1 beta binding molecule, its use and process for production, first DNA construct, expression vector and pharmaceutical composition Download PDFInfo
- Publication number
- SK288054B6 SK288054B6 SK1035-2002A SK10352002A SK288054B6 SK 288054 B6 SK288054 B6 SK 288054B6 SK 10352002 A SK10352002 A SK 10352002A SK 288054 B6 SK288054 B6 SK 288054B6
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- ser
- amino acid
- antibody
- human
- ala
- Prior art date
Links
- 238000009739 binding Methods 0.000 title claims abstract description 87
- 230000027455 binding Effects 0.000 title claims abstract description 86
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 title claims description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 10
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 4
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 title abstract 3
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 title abstract 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 58
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 claims abstract description 28
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 24
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 16
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims abstract description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 22
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims description 20
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 19
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 19
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 19
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 17
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 15
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 14
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 10
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 8
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 claims description 7
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 claims description 7
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 claims description 6
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 5
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 claims description 5
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 claims description 5
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims description 5
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 claims description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 5
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 claims description 4
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 claims description 4
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 claims description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 claims description 4
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 4
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims description 4
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 claims description 4
- 201000010666 keratoconjunctivitis Diseases 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 claims description 3
- 206010014824 Endotoxic shock Diseases 0.000 claims description 3
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 claims description 3
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 claims description 3
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 claims description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 claims description 2
- 206010027654 Allergic conditions Diseases 0.000 claims description 2
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 claims description 2
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 claims description 2
- 208000018083 Bone metabolism disease Diseases 0.000 claims description 2
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 claims description 2
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 claims description 2
- 206010014561 Emphysema Diseases 0.000 claims description 2
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 claims description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims description 2
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 claims description 2
- 206010065159 Polychondritis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 claims description 2
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 claims description 2
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000010399 Wasting Syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 208000016807 X-linked intellectual disability-macrocephaly-macroorchidism syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 claims description 2
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 claims description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 claims description 2
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 claims description 2
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 2
- 230000000414 obstructive effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000004768 organ dysfunction Effects 0.000 claims description 2
- 208000028169 periodontal disease Diseases 0.000 claims description 2
- 206010035653 pneumoconiosis Diseases 0.000 claims description 2
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 claims description 2
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000036303 septic shock Effects 0.000 claims description 2
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 claims description 2
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 claims 6
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 claims 3
- 208000024386 fungal infectious disease Diseases 0.000 claims 3
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 claims 2
- 208000023328 Basedow disease Diseases 0.000 claims 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 claims 1
- 208000002691 Choroiditis Diseases 0.000 claims 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 claims 1
- 206010012434 Dermatitis allergic Diseases 0.000 claims 1
- 206010017982 Gastrointestinal necrosis Diseases 0.000 claims 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 claims 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims 1
- 206010022941 Iridocyclitis Diseases 0.000 claims 1
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 claims 1
- 208000003971 Posterior uveitis Diseases 0.000 claims 1
- 201000004612 anterior uveitis Diseases 0.000 claims 1
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 claims 1
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 claims 1
- 230000036473 myasthenia Effects 0.000 claims 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 claims 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 claims 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims 1
- 101001033249 Homo sapiens Interleukin-1 beta Proteins 0.000 abstract description 7
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 27
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 17
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 16
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 10
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 9
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 9
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 9
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 7
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 7
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 6
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 6
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 6
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 6
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 6
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 229960004669 basiliximab Drugs 0.000 description 5
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 5
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N Gly-Ser-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O SOEGEPHNZOISMT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 4
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 4
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 4
- 229940115586 simulect Drugs 0.000 description 4
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 4
- AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N Arg-Phe-Ser Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N AOHKLEBWKMKITA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 3
- PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N Glu-Asp-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PAQUJCSYVIBPLC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- XHVONGZZVUUORG-WEDXCCLWSA-N Gly-Thr-Lys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN XHVONGZZVUUORG-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 3
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 3
- HXWALXSAVBLTPK-NUTKFTJISA-N Leu-Ala-Trp Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N HXWALXSAVBLTPK-NUTKFTJISA-N 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N N-formyl-L-phenylalanine Chemical compound O=CN[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC=C1 NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- KMWFXJCGRXBQAC-CIUDSAMLSA-N Ser-Cys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CO)N KMWFXJCGRXBQAC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- ARKBYVBCEOWRNR-UBHSHLNASA-N Trp-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ARKBYVBCEOWRNR-UBHSHLNASA-N 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- GAYLGYUVTDMLKC-UWJYBYFXSA-N Tyr-Asp-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 GAYLGYUVTDMLKC-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 3
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 3
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 3
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 3
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 3
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 3
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 3
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 2
- LSLIRHLIUDVNBN-CIUDSAMLSA-N Ala-Asp-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN LSLIRHLIUDVNBN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- IOFVWPYSRSCWHI-JXUBOQSCSA-N Ala-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](C)N IOFVWPYSRSCWHI-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 2
- OTOXOKCIIQLMFH-KZVJFYERSA-N Arg-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N OTOXOKCIIQLMFH-KZVJFYERSA-N 0.000 description 2
- IZSMEUDYADKZTJ-KJEVXHAQSA-N Arg-Tyr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IZSMEUDYADKZTJ-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 2
- MJJIHRWNWSQTOI-VEVYYDQMSA-N Asp-Thr-Arg Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O MJJIHRWNWSQTOI-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- SNFUTDLOCQQRQD-ZKWXMUAHSA-N Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SNFUTDLOCQQRQD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- ZSIDREAPEPAPKL-XIRDDKMYSA-N Glu-Trp-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N ZSIDREAPEPAPKL-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 2
- BXDLTKLPPKBVEL-FJXKBIBVSA-N Gly-Thr-Met Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O BXDLTKLPPKBVEL-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 2
- RQJUKVXWAKJDBW-SVSWQMSJSA-N Ile-Ser-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N RQJUKVXWAKJDBW-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 2
- MUFXDFWAJSPHIQ-XDTLVQLUSA-N Ile-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 MUFXDFWAJSPHIQ-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 2
- HPBCTWSUJOGJSH-MNXVOIDGSA-N Leu-Glu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O HPBCTWSUJOGJSH-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 2
- ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N Leu-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N 0.000 description 2
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 2
- MMAPOBOTRUVNKJ-ZLUOBGJFSA-N Ser-Asp-Ser Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O MMAPOBOTRUVNKJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 2
- BTPAWKABYQMKKN-LKXGYXEUSA-N Ser-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O BTPAWKABYQMKKN-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 2
- UQFYNFTYDHUIMI-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO UQFYNFTYDHUIMI-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N Ser-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O OLKICIBQRVSQMA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N Sulfisoxazole Chemical compound CC1=NOC(NS(=O)(=O)C=2C=CC(N)=CC=2)=C1C NHUHCSRWZMLRLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N Thr-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FQPDRTDDEZXCEC-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 2
- YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N Thr-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YOOAQCZYZHGUAZ-KATARQTJSA-N 0.000 description 2
- HUPLKEHTTQBXSC-YJRXYDGGSA-N Thr-Ser-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 HUPLKEHTTQBXSC-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 2
- PXQPYPMSLBQHJJ-WFBYXXMGSA-N Trp-Asp-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N PXQPYPMSLBQHJJ-WFBYXXMGSA-N 0.000 description 2
- BVZABQIRMYTKCF-JSGCOSHPSA-N Trp-Met Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O)=CNC2=C1 BVZABQIRMYTKCF-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 2
- ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N Tyr-Tyr-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O ANHVRCNNGJMJNG-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 2
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 description 2
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 2
- 108010044374 isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 2
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 2
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 108010003137 tyrosyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- FVNAUOZKIPAYNA-BPNCWPANSA-N Ala-Met-Tyr Chemical compound CSCC[C@H](NC(=O)[C@H](C)N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FVNAUOZKIPAYNA-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- BFMIRJBURUXDRG-DLOVCJGASA-N Ala-Phe-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CC=CC=C1 BFMIRJBURUXDRG-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- RMAWDDRDTRSZIR-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RMAWDDRDTRSZIR-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N Ala-Val-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZDILXFDENZVOTL-BPNCWPANSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- GIVATXIGCXFQQA-FXQIFTODSA-N Arg-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N GIVATXIGCXFQQA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- IJYZHIOOBGIINM-WDSKDSINSA-N Arg-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N IJYZHIOOBGIINM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- AMIQZQAAYGYKOP-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O AMIQZQAAYGYKOP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- QHUOOCKNNURZSL-IHRRRGAJSA-N Arg-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QHUOOCKNNURZSL-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- BIGRHVNFFJTHEB-UBHSHLNASA-N Asn-Trp-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BIGRHVNFFJTHEB-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- UZNSWMFLKVKJLI-VHWLVUOQSA-N Asp-Ile-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O UZNSWMFLKVKJLI-VHWLVUOQSA-N 0.000 description 1
- USNJAPJZSGTTPX-XVSYOHENSA-N Asp-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O USNJAPJZSGTTPX-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000008000 CHES buffer Substances 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- AMRLSQGGERHDHJ-FXQIFTODSA-N Cys-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O AMRLSQGGERHDHJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- SZQCDCKIGWQAQN-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SZQCDCKIGWQAQN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- 101150074155 DHFR gene Proteins 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- IRXNJYPKBVERCW-DCAQKATOSA-N Glu-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O IRXNJYPKBVERCW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- IDEODOAVGCMUQV-GUBZILKMSA-N Glu-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IDEODOAVGCMUQV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MFVQGXGQRIXBPK-WDSKDSINSA-N Gly-Ala-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O MFVQGXGQRIXBPK-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- IEFJWDNGDZAYNZ-BYPYZUCNSA-N Gly-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O IEFJWDNGDZAYNZ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- DHDOADIPGZTAHT-YUMQZZPRSA-N Gly-Glu-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DHDOADIPGZTAHT-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- QSVCIFZPGLOZGH-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QSVCIFZPGLOZGH-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N Gly-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)NCC(O)=O PDUHNKAFQXQNLH-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MHXKHKWHPNETGG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 1
- NVTPVQLIZCOJFK-FOHZUACHSA-N Gly-Thr-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NVTPVQLIZCOJFK-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- MREVELMMFOLESM-HOCLYGCPSA-N Gly-Trp-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O MREVELMMFOLESM-HOCLYGCPSA-N 0.000 description 1
- DNAZKGFYFRGZIH-QWRGUYRKSA-N Gly-Tyr-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=C(O)C=C1 DNAZKGFYFRGZIH-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 206010019755 Hepatitis chronic active Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101001002634 Homo sapiens Interleukin-1 alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001055222 Homo sapiens Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- BCVIOZZGJNOEQS-XKNYDFJKSA-N Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)[C@@H](C)CC BCVIOZZGJNOEQS-XKNYDFJKSA-N 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102100026018 Interleukin-1 receptor antagonist protein Human genes 0.000 description 1
- 101710144554 Interleukin-1 receptor antagonist protein Proteins 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- FAELBUXXFQLUAX-AJNGGQMLSA-N Leu-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C FAELBUXXFQLUAX-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- FKQPWMZLIIATBA-AJNGGQMLSA-N Leu-Lys-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O FKQPWMZLIIATBA-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N Leu-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- 208000004883 Lipoid Nephrosis Diseases 0.000 description 1
- YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 1
- JACAKCWAOHKQBV-UWVGGRQHSA-N Met-Gly-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JACAKCWAOHKQBV-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- IQJMEDDVOGMTKT-SRVKXCTJSA-N Met-Val-Val Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O IQJMEDDVOGMTKT-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 101100278853 Mus musculus Dhfr gene Proteins 0.000 description 1
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N N-L-methionyl-L-tyrosine Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MKWKNSIESPFAQN-UHFFFAOYSA-N N-cyclohexyl-2-aminoethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCNC1CCCCC1 MKWKNSIESPFAQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 241000577979 Peromyscus spicilegus Species 0.000 description 1
- IUVYJBMTHARMIP-PCBIJLKTSA-N Phe-Asp-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IUVYJBMTHARMIP-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 1
- 229920000604 Polyethylene Glycol 200 Polymers 0.000 description 1
- 229920001030 Polyethylene Glycol 4000 Polymers 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 108020005067 RNA Splice Sites Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CO SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- OBXVZEAMXFSGPU-FXQIFTODSA-N Ser-Asn-Arg Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)N)CN=C(N)N OBXVZEAMXFSGPU-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N Ser-Gly-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIGMAMGZOJVTDN-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N Ser-Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO SFTZWNJFZYOLBD-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- UIPXCLNLUUAMJU-JBDRJPRFSA-N Ser-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIPXCLNLUUAMJU-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- ZIFYDQAFEMIZII-GUBZILKMSA-N Ser-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZIFYDQAFEMIZII-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Lys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- BIWBTRRBHIEVAH-IHPCNDPISA-N Ser-Tyr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O BIWBTRRBHIEVAH-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- 102100036865 Solute carrier family 52, riboflavin transporter, member 3 Human genes 0.000 description 1
- 101710102466 Solute carrier family 52, riboflavin transporter, member 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000874347 Streptococcus agalactiae IgA FC receptor Proteins 0.000 description 1
- GFDUZZACIWNMPE-KZVJFYERSA-N Thr-Ala-Met Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O GFDUZZACIWNMPE-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- DGDCHPCRMWEOJR-FQPOAREZSA-N Thr-Ala-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 DGDCHPCRMWEOJR-FQPOAREZSA-N 0.000 description 1
- IMULJHHGAUZZFE-MBLNEYKQSA-N Thr-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IMULJHHGAUZZFE-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- LUMXICQAOKVQOB-YWIQKCBGSA-N Thr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O LUMXICQAOKVQOB-YWIQKCBGSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- UYKREHOKELZSPB-JTQLQIEISA-N Trp-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O)=CNC2=C1 UYKREHOKELZSPB-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- KIMOCKLJBXHFIN-YLVFBTJISA-N Trp-Ile-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O)=CNC2=C1 KIMOCKLJBXHFIN-YLVFBTJISA-N 0.000 description 1
- DDJHCLVUUBEIIA-BVSLBCMMSA-N Trp-Met-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)CCSC)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 DDJHCLVUUBEIIA-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- SMLCYZYQFRTLCO-UWJYBYFXSA-N Tyr-Cys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SMLCYZYQFRTLCO-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- YYLHVUCSTXXKBS-IHRRRGAJSA-N Tyr-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYLHVUCSTXXKBS-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- HRHYJNLMIJWGLF-BZSNNMDCSA-N Tyr-Ser-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 HRHYJNLMIJWGLF-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- SYSWVVCYSXBVJG-RHYQMDGZSA-N Val-Leu-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)N)O SYSWVVCYSXBVJG-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- YMTOEGGOCHVGEH-IHRRRGAJSA-N Val-Lys-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O YMTOEGGOCHVGEH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- WUFHZIRMAZZWRS-OSUNSFLBSA-N Val-Thr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N WUFHZIRMAZZWRS-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 108010081404 acein-2 Proteins 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 208000011341 adult acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 201000000028 adult respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 108010011559 alanylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000011091 antibody purification Methods 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 208000037979 autoimmune inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005452 bending Methods 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010084389 glycyltryptophan Proteins 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 238000012835 hanging drop method Methods 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000016036 idiopathic nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000017306 interleukin-6 production Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 241001515942 marmosets Species 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000015899 negative regulation of fever generation Effects 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 238000012205 qualitative assay Methods 0.000 description 1
- 238000003571 reporter gene assay Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 208000013223 septicemia Diseases 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000012289 standard assay Methods 0.000 description 1
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010035534 tyrosyl-leucyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/244—Interleukins [IL]
- C07K16/245—IL-1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Obesity (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
Abstract
It is described an IL-1 beta binding molecule, an antibody to human IL-1 beta, especially a human antibody to human IL-1 beta, wherein the CDRs of the heavy and light chains have amino acid sequences as defined in description. The molecule is useful for use in the treatment of an IL-1 mediated disease or disorder, e.g. osteoarthritis, osteroporosis and other inflammatory arthritides.
Description
Oblasť techniky
Predkladaný vynález sa týka protilátok proti humánnemu interleukínu I beta (IL-Ιβ) a použitia takýchto protilátok na liečenie ochorení a porúch sprostredkovaných IL-1.
Doterajší stav techniky
Interleukín 1 (IL-1) je aktivita produkovaná bunkami imunitného systému, ktorá pôsobí ako mediátor akútnej fázy zápalovej reakcie. Nevhodná alebo nadmerná tvorba IL-1, najmä potom IL-Ιβ, je patologický stav, ktorý vedie k rôznym ochoreniam a poruchám, ako je napr. septikémia, septický alebo endotoxický šok, alergia, astma, strata kostnej hmoty, ischémia, infarkt, reumatoidná artritída a ďalšie zápalové ochorenia. Protilátky proti IL-Ιβ už boli navrhnuté na použitie pri liečení IL-1 sprostredkovaných ochorení a porúch, pozri napr. WO 95/01997 a diskusia v úvode uvedeného dokumentu.
Pôvodcovia predkladaného vynálezu pripravili zlepšené protilátky proti humánnemu IL-Ιβ na použitie na liečenie IL-1 sprostredkovaných ochorení a porúch.
Podstata vynálezu
Vynález poskytuje protilátku IL-Ιβ, ktorá má vlastnosti, ako sa nárokuje v nároku 1.
Predkladaný vynález poskytuje molekulu viažucu IL-Ιβ, ktorá obsahuje väzbové miesto pre antigén obsahujúce aspoň jednu variabilnú doménu ťažkého reťazca imunoglobulínu (VH), ktorá obsahuje v sekvencii hypervariabilné úseky CDR1, CDR2 a CDR3, ako sú znázornené v SEQ ID NO: 1, t. j. CDR1, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Ser-Tyr-Trp-Ile-Gly, CDR2, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Ile-Ile-Tyr-Pro-Ser-Asp-Ser-Asp-Thr-Arg-Tyr-Ser-Pro-Ser-Phe-Gln-Gly a CDR3, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Tyr-Thr-Asn-Trp-Asp-Ala-Phe-Asp-Ile, a pričom molekula viažuca IL-β obsahuje väzbové miesto pre antigén obsahujúce aspoň jednu variabilnú doménu ľahkého reťazca imunoglobulínu (VL), v ktorej obsahuje v sekvencii hypervariabilné úseky CDRľ, CDR2' a CDR3', ako je znázornené na SEQ ID NO: 2, t. j. CDRľ, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Ala, CDR2', ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Asp-Ala-Ser-Asn-Arg-Ala-Thr a CDR3', ktorý má aminokyselinovú sekvenciu GlnGln-Arg-Ser-Asn-Trp-Met-Phe-Pro.
Vynález poskytuje molekulu viažucu IL-Ιβ, ktorá obsahuje variabilné domény tak ťažkého (VH) ako ľahkého (VL) reťazca, kde molekula viažuca IL-Ιβ obsahuje aspoň jedno väzbové miesto pre antigén obsahujúci:
a) variabilnú doménu ťažkého reťazca imunoglobulínu (VH), ktorá v sekvencii obsahuje hypervariabilné úseky CDR1, CDR2 a CDR3, pričom CDR1, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Ser-Tyr-Trp-Ile-Gly, CDR2, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Ile-Ile-Tyr-Pro-Ser-Asp-Ser-Asp-Thr-Arg-Tyr-Ser-Pro-Ser-Phe-Gln-Gly a CDR3, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Tyr-Thr-Asn-Trp-Asp-Ala-Phe-Asp-lle, a
b) variabilnú doménu ľahkého reťazca imunoglobulínu (VL), ktorá obsahuje v sekvencii hypervariabilné úseky CDRľ, CDR2' a CDR3', pričom CDRľ, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Ala, CDR2', ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Asp-Ala-Ser-Asn-Arg-Ala-Thr a CDR3, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Gln-Gln-Arg-Ser-Asn-Trp-Met-Phe-Pro.
Pokiaľ nie je vyslovene uvedené inak, každý polypeptidový reťazec je v tomto texte opísaný ako sekvencia začínajúca N-koncovým úsekom a končiaca C-koncovým úsekom. Keď väzbové miesto pre antigén obsahuje obe VH a VL domény, tieto domény môžu byť lokalizované na rovnakej molekule polypeptidu, alebo výhodne každá doména môže byť na inom reťazci, pričom doména VH je časťou ťažkého reťazca imunoglobulínu alebo jeho fragmentu a VL je časťou ľahkého reťazca imunoglobulínu alebo jeho fragmentu.
Termín „molekula viažuca IL-^a“ označuje v predkladanom opise akúkoľvek molekulu schopnú väzby na antigén IL-Ιβ, buď samotnému, alebo asociovanému s ďalšími molekulami. Väzbová reakcia môže byť dokázaná pomocou štandardných metód (kvalitatívnych testov), ako je napríklad biologický test (bioassay) na stanovenie inhibície väzby IL-Ιβ na jeho receptor alebo akýkoľvek iný test väzby, vždy vzhľadom na test s negatívnou kontrolou, keď sa použije protilátka s nepríbuznou špecificitou, ale rovnakým izotypom, napr. protilátka anti-CD25. Výhodne môže byť väzba molekuly viažuca IL-Ιβγ podľa vynálezu na IL-Ιβ demonštrovaná použitím kompetitívneho väzbového testu.
Príklady molekúl viažucich antigén sú protilátky tvorené B bunkami alebo hybridómamia chimérické, „vštepené“ CDR („CDR-grafted“) alebo humánne protilátky, alebo akékoľvek ich fragmenty, napr. fragmenty F(ab')2 a Fab.
Jednoreťazcová protilátka pozostáva z variabilnej domény ťažkého a ľahkého reťazca protilátky kovalentne spojených pomocou peptidovej spojky („linker“), ktorú tvorí obvykle 10 až 30 aminokyselín, výhodne 15 až 25 aminokyselín. Teda taká štruktúra neobsahuje konštantné úseky ťažkého a ľahkého reťazca a verí
SK 288054 Β6 sa, že malý spojovací peptidový úsek by mal byť menej antigénny než celý konštantný úsek protilátky.
Termín „chimérická protilátka“ v opise označuje protilátku, v ktorej konštantné úseky ťažkého alebo ľahkého reťazca alebo oboch sú humánneho pôvodu, zatiaľ čo variabilné domény tak ťažkého ako ľahkého reťazca sú iného než humánneho pôvodu (non-humánne), napr. myšieho, alebo sú humánneho pôvodu, ale pochádzajú z odlišnej humánnej protilátky.
Termín „CDR-vštepená protilátka“ označuje protilátku, v ktorej hypervariabilné úseky (CDR) pochádzajú z donorovej (darcovskej) protilátky, ako je napríklad non-humánna (napr. myšia) protilátka alebo odlišná humánna protilátka, zatiaľ čo všetky alebo v podstate všetky ďalšie časti imunoglobulínu, napr. konštantné úseky a vysoko konzervatívne úseky variabilnej domény, t. j. úseky definujúce rámec protilátky („framework“), pochádzajú z akceptorovej (príjemcovej) protilátky, napr. protilátky humánneho pôvodu. „CDRvštepená protilátka“ môže však obsahovať niekoľko aminokyselín donorovej sekvencie v úseku rámca, napríklad v úsekoch rámca susediacich s hypervariabilnými úsekmi.
Termín „humánna protilátka“ označuje protilátku, v ktorej konštantné a variabilné úseky ťažkého a ľahkého reťazca sú všetky humánneho pôvodu alebo majú sekvencie v podstate identické so sekvenciami humánneho pôvodu, nie je podmienkou, aby boli z rovnakej protilátky, a patria sem aj protilátky produkované v myšiach, v ktorých boli gény pre variabilné a konštantné časti imunoglobulínu nahradené ich humánnymi náprotivkami, napr. ako je opísané všeobecne v dokumentoch EP 054 6073 BI, US Patent 5545806, US Patent 5569825, US Patent 5625126, US Patent 5633425, US Patent 5661016. US Patent 5770429, EP 0 438474 BI a EPO 463151 BI.
Zvlášť výhodné molekulu viažuce IL-Ιβ podľa vynálezu sú humánne protilátky, obzvlášť protilátka AAL160, ktorá je ďalej opísaná v príkladoch.
Teda vo výhodných chimérických protilátkach sú variabilné domény tak ťažkého ako aj ľahkého reťazca humánneho pôvodu, napríklad také, aké sú v protilátke AAL 160 a sú v zozname sekvencií uvedené ako sekvencia SEQ ID NO: 1 a sekvencia SEQ ID NO: 2. Domény konštantného úseku výhodne tiež obsahujú vhodné humánne domény konštantného úseku, napríklad ako sú opísané v „Sequences of Proteines of Immunological Interest“, Kabat E. A. et al., US Department of Health and Human Services, Public Health Service, National Inštitúte of Health.
Hypervariabilné úseky môžu byť asociované s akýmikoľvek úsekmi rámca protilátky, ale výhodne humánneho pôvodu. Vhodné úseky rámca protilátok sú opísané v Kabat E. A. et al., ib. Výhodný rámec ťažkého reťazca je humánny rámec ťažkého reťazca, napríklad protilátky AAL160, uvedený v zozname sekvencií ako sekvencia SEQ ID NO: 1. Táto sekvencia pozostáva z úsekov FR1, FR2, FR3 a FR4. Podobne sekvencia SEQ ID NO: 2 ukazuje výhodný rámec ľahkého reťazca protilátky AAL 160, ktorého sekvencia pozostáva z úsekov FRľ, FR2', FR3'a FR4'.
Teda vynález tiež poskytuje molekulu viažucu IL-Ιβ, ktorá obsahuje aspoň jedno väzbové miesto pre antigén obsahujúci buď prvú doménu, ktorá má aminokyselinovú sekvenciu v podstate identickú so sekvenciou uvedenou v zozname sekvencií ako sekvencia SEQ ID NO: 1 začínajúcu aminokyselinou v polohe 1 a končiacu aminokyselinou v polohe 118, alebo prvú doménu už opísanú a druhú doménu, ktorá má aminokyselinovú sekvenciu v podstate identickú so sekvenciou uvedenou v zozname sekvencií ako sekvencia SEQ ID NO: 2, začínajúcu aminokyselinou v polohe 1 a končiacu aminokyselinou v polohe 107.
Monoklonálne protilátky namierené proti proteínom prirodzene sa vyskytujúcim u všetkých ľudí sú typicky produkované v non-humánnych systémoch, napr. v myši. Priamym dôsledkom týchto skutočností je to, že xenogénna protilátka produkovaná pomocou hybridómu, keď je podávaná človeku, vyvoláva nežiaducu imunitnú reakciu, ktorá je predovšetkým sprostredkovaná konštantnou časťou xenogénneho imunoglobulínu. To jasne obmedzuje použitie takých protilátok, pretože nemôžu byť podávané dlhšie obdobie. Teda je zvlášť výhodné použitie jednoreťazcových, chimérických, CDR-vštepených alebo najmä humánnych protilátok, ktoré po podaní človeku s veľkou pravdepodobnosťou nevyvolajú významnú alogénnu reakciu.
Vzhľadom na uvedené skutočnosti, výhodnejšia molekula viažuca IL-Ιβ podľa predkladaného vynálezu je molekula vybraná zo skupiny humánnych protilátok anti-IL-Ιβ, ktoré obsahujú aspoň
a) ťažký reťazec imunoglobulínu alebo jeho fragment, ktorý obsahuje (i) variabilnú doménu obsahujúcu v sekvencií hypervariabilné úseky CDR1, CDR2 a CDR3 a (ii) konštantný úsek alebo jeho fragment z humánneho ťažkého reťazca a to CDR1, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Ser-Tyr-Trp-Ile-Gly, CDR2, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Ile-Ile-Tyr-Pro-Ser-Asp-Ser-Asp-Thr-Arg-Tyr-Ser-Pro-Ser-Phe-Gln-Gly a CDR3, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Tyr-Thr-Asn-Trp-Asp-Ala-Phe-Asp-Ile, a
b) ľahký reťazec imunoglobulínu alebo jeho fragment, ktorý obsahuje (i) variabilnú doménu, ktorá obsahuje hypervariabilný úsek CDR3' a tiež hypervariabilné úseky CDRľ, CDR2' a (ii) konštantný úsek alebo jeho fragment z humánneho ľahkého reťazca a to CDRľ, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Ala, CDR2', ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Asp-Ala-Ser-Asn-Arg-Ala-Thr a CDR3', ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Gln-Gln-Arg-Ser-Asn-Trp-Met-Phe-Pro.
Alternatívne molekula, ktorá viaže IL-^a podľa vynálezu, je molekula vybraná zo skupiny jednoreťazcových viažucich molekúl, ktoré obsahujú väzbové miesto pre antigén obsahujúci
SK 288054 Β6
a) prvú doménu obsahujúcu v sekvencií hypervariabilné úseky CDR1, CDR2 a CDR3, pričom tieto hypervariabilné úseky majú aminokyselinové sekvencie uvedené v sekvencií SEQ ID NO: 1,
b) druhú doménu obsahujúcu hypervariabilný úsek CDR3' a CDRľ a CDR2', pričom tieto hypervariabilné úseky majú aminokyselinové sekvencie uvedené v sekvencií SEQ ID NO: 2 a
c) peptidový linker, ktorý je naviazaný buď na N-koniec prvej domény a na C-koniec druhej domény, alebo na C-koniec prvej domény na N-konci druhej domény.
Ako je odborníkovi známe, malé zmeny v aminokyselinovej sekvencií, ako je napríklad delécia, adícia alebo substitúcia jednej, niekoľkých alebo dokonca aj viac aminokyselín, môžu poskytnúť alelickú formu pôvodného proteínu, ktorá má v podstate identické vlastnosti.
Teda termín Jej priamy ekvivalent“ označuje v predkladanom opise buď jednodoménovú molekulu viažucu IL-1 β (molekula X), (i) v ktorej hypervariabilné úseky CDR1, CDR2 a CDR3 ako celok sú aspoň z 80 % homologické, výhodne aspoň z 90 % homologické, výhodnejšie aspoň z 95 % homologické s hypervariabilnými úsekmi v sekvencíi SEQIDNO: 1, a (ii) ktorá je schopná inhibovať väzbu IL-Ιβ na jeho receptor v podstate v rovnakom rozsahu ako referenčná molekula, ktorá má úseky protilátkového rámca identické so zodpovedajúcimi úsekmi molekuly X, ale má hypervariabilné úseky CDR1, CDR2 a CDR3 identické so zodpovedajúcimi úsekmi sekvencie SEQ ID NO: 1 alebo akúkoľvek molekulu viažucu IL-Ιβ, ktorá má aspoň dve domény na každé väzbové miesto (molekula X'), (i) v ktorej hypervariabilné úseky CDR1, CDR2, CDR3, CDR3' a voliteľne tiež CDRľ a CDR2' ako celok, sú aspoň z 80 % homologické, výhodne aspoň z 90 % homologické, výhodnejšie aspoň z 95 % homologické s hypervariabilnými úsekmi sekvencie SEQ ID NO: 1 a sekvencie SEQ ID NO: 2, a (ii) ktorá je schopná inhibovať väzbu IL-Ιβ na jeho receptor v podstate v rovnakom rozsahu ako referenčná molekula, ktorá má úseky protilátkového rámca a konštantné úseky identické so zodpovedajúcimi úsekmi molekuly X', ale má hypervariabilné úseky CDR1, CDR2, CDR3 a CDR3', a voliteľne tiež CDRľ a CDR2', identické so zodpovedajúcimi úsekmi sekvencie SEQ ID NO: 1 a sekvencie SEQ ID NO: 2.
V kontexte predkladaného opisu vynálezu je aminokyselinová sekvencia aspoň z 80 % homologická s druhou sekvenciou, ak tieto sekvencie majú aspoň 80 % identických aminokyselinových zvyškov v rovnakej polohe, keď sú sekvencie optimálne priradené (porovnané), pričom medzery alebo inzercie v aminokyselinovej sekvencíi sú počítané za neidentické zvyšky.
Inhibícia väzby IL-Ιβ na receptor môže byť ľahko testovaná pomocou rôznych testov, ako sú napr. testy opísané v texte. Použitý IL-Ιβ receptor je výhodne receptor IL-Ιβ typu 1.
Výraz „v rovnakom rozsahu“ alebo „v rovnakej miere“ znamená v kontexte predkladaného opisu, že referenčná a s ňou ekvivalentná molekula majú, štatisticky vzaté, v podstate identickú funkčnú závislosť inhibície IL-Ιβ väzby podľa jedného zo zmienených testov.
Napríklad použitý test môže byť test kompetitívnej inhibície väzby IL-Ιβ uskutočňovaný pomocou rozpustných IL-1 receptorov a IL-Ιβ viažucich molekúl podľa vynálezu.
Najvýhodnejšia humánna IL-Ιβ protilátka obsahuje aspoň
a) jeden ťažký reťazec, ktorý obsahuje variabilnú doménu, ktorá má aminokyselinovú sekvenciu identickú so sekvenciou SEQ ID NO: 1, ktorá začína aminokyselinou v polohe 1 a končí aminokyselinou v polohe 118 a konštantný úsek humánneho ťažkého reťazca a
b) jeden ľahký reťazec, ktorý obsahuje variabilnú doménu, ktorá má aminokyselinovú sekvenciu identickú so sekvenciou SEQ ID. č. 2, ktorá začína aminokyselinou v polohe 1 a končí aminokyselinou v polohe 107 a konštantný úsek humánneho ľahkého reťazca.
Konštantný úsek humánneho ťažkého reťazca môže byť typu γΐ, γ2, γ3 a γ4, μ, αΐ, α2, δ alebo ε, výhodne typu γ, a výhodnejšie typu γΐ, zatiaľ čo konštantný úsek humánneho ľahkého reťazca môže byť typu κ alebo λ (ktorý zahŕňa subtypy λΐ, λ2, λ3, ale výhodne je typu k). Aminokyselinové sekvencie všetkých týchto konštantných úsekov sú uvedené v publikácii Kabát et al., ib.
Molekula viažuca IL-Ιβ podľa vynálezu sa môže pripraviť metódami rekombinantnej DNA. Na tento účel sa musí skonštruovať jedna alebo viac DNA molekúl kódujúcich viažucu molekulu, umiestniť s vhodnou kontrolnou sekvenciou a preniesť do vhodného hostiteľského organizmu, kde sa potom exprimuje.
Vo všeobecnom zmysle tak vynález poskytuje:
(i) DNA molekuly kódujúce jednoreťazcovú molekulu viažucu IL-Ιβ podľa vynálezu, ťažký a ľahký reťazec alebo ich fragmenty z molekuly viažuce IL-1 β podľa vynálezu a (ii) použitie DNA molekuly podľa vynálezu na produkciu IL-Ιβ viažucich molekúl podľa vynálezu pomocou rekombinantnej technológie.
Doterajší stav techniky je taký, že odborník je schopný ľahko syntetizovať DNA molekuly podľa predkladaného vynálezu na základe informácií uvedených v tomto opise, t. j. aminokyselinových sekvencií hypervariabilných úsekov a DNA sekvencií, ktoré ju kódujú. Spôsob konštrukcie génu pre variabilnú doménu bol napríklad opísaný v Európskej patentovej prihláške č. 239 400 a môže byť stručne zhrnutý nasledovne:
Klonuje sa gén kódujúci variabilnú doménu MAb (monoklonálnej protilátky) s ľubovoľnou špecificitou. DNA segmenty kódujúce rámec protilátky a hypervariabilné úseky sa určia a DNA segmenty kódujúce hypervariabilné úseky sa odstránia, takže DNA segmenty kódujúce rámcové úseky sú vzájomne spojené pomocou vhodných reštrikčných miest v mieste spojenia. Reštrikčné miesta môžu byť vytvorené vo vhodných polohách mutagenézou DNA molekúl pomocou štandardných postupov odborníkovi známych. Dvojreťazcové syntetické CDR kazety sú pripravené pomocou DNA syntézy podľa sekvencie uvedenej ako sekvencia SEQ ID NO: 1 alebo sekvencia SEQ ID NO: 2. Tieto kazety sú vybavené „lepivými“ („sticky“) koncami, takže môžu byť ligované do spojov (reštrikčných miest) rámcových úsekov.
Okrem toho nie je potrebné mať prístup k mRNA z produkčnej hybridómovej bunkovej línie, aby bolo možné získať DNA konštrukt kódujúci molekulu viažucu IL-Ιβγ podľa vynálezu. Tak napr. PCT prihláška publikovaná ako WO 90/07861 poskytuje úplné inštrukcie na produkciu protilátky pomocou techniky rekombinantnej DNA, pričom východiskovou informáciou je iba nukleotidová sekvencia génu. Opísaný spôsob zahŕňa syntézu radov oligonukleotidov ich amplifikáciu pomocou PCR (polymerázovej reťazovej reakcie) a nakoniec ich zostrih a spojenie („splicing“), čím vznikne požadovaná DNA sekvencia.
Expresné vektory, ktoré obsahujú vhodný promótor alebo gény kódujúce konštantné úseky ťažkého a ľahkého reťazca, sú verejne k dispozícii. Teda hneď ako je DNA molekula podľa vynálezu pripravená, môže byť ľahko prenesená vo vhodnom expresnom vektore. DNA molekuly kódujúce jednoreťazcové protilátky môžu tiež byť pripravené pomocou štandardného postupu, napríklad ako bol opísaný v medzinárodnej patentovej prihláške WO 88/1649.
Vzhľadom na uvedené skutočnosti nie je nutné ukladať ani hybridómy ani bunkové línie, aby bola splnená požiadavka dostatočnosti opisu vynálezu.
V konkrétnom uskutočnení vynález obsahuje prvý a druhý DNA konštrukt na produkciu molekuly viažucej IL-Ιβ, ako je opísané ďalej:
Prvý DNA konštrukt kóduje ťažký reťazec alebo jeho fragment a obsahuje
a) prvú časť, ktorá kóduje variabilnú doménu obsahujúcu striedavo rámec a hypervariabilné úseky, pričom hypervariabilné úseky sú CDR1, CDR2 a CDR3 s aminokyselinovou sekvenciou uvedenou v zozname sekvencií ako sekvencia SEQ ID NO: 1 a táto prvá časť začína kodónom kódujúcim prvú aminokyselinu variabilnej domény a končí kodónom, ktorý kóduje aminokyselinu variabilnej domény a
b) druhú časť kódujúcu konštantný úsek ťažkého reťazca alebo jeho fragment, ktorý začína kodónom kódujúcim prvú aminokyselinu konštantnej časti ťažkého reťazca a končí kodónom kódujúcim poslednú aminokyselinu konštantnej časti alebo jej fragmentu, po ktorom nasleduje stop kodón.
Výhodne, prvá časť kóduje variabilnú doménu, ktorá má aminokyselinovú sekvenciu v podstate identickú s aminokyselinovou sekvenciou, ktorá je uvedená v zozname sekvencii ako sekvencia SEQ ID NO: 1, ktorá začína aminokyselinou v polohe 1 a končí aminokyselinou v polohe 118. Výhodnejšie prvá časť má nukleotidovú sekvenciu ako sekvencia SEQ ID NO: 1, ktorá začína nukleotidom v polohe 1 a končí nukleotidom v polohe 354. Výhodne druhá časť kóduje konštantnú časť humánneho ťažkého reťazca, výhodnejšie konštantnú časť humánneho reťazca γΐ. Táto druhá časť môže byť DNA fragment genómového pôvodu (obsahujúci intróny) alebo cDNA fragment (bez intrónov).
Druhý DNA konštrukt kóduje ľahký reťazec alebo jeho fragment a obsahuje
a) prvú časť, ktorá kóduje variabilnú doménu, ktorá obsahuje striedavo úseky, rámca a hypervariabilné úseky, pričom hypervariabilné úseky sú CDR3' a voliteľné CDRľ a CDR2', ktorých aminokyselinové sekvencie sú v zozname sekvencii uvedené ako sekvencie SEQ ID NO: 2, pričom táto časť začína kodónom kódujúcim prvú aminokyselinu variabilnej domény a končí kodónom kódujúcim poslednú aminokyselinu variabilnej domény a
b) druhú časť kódujúcu konštantnú časť ľahkého reťazca alebo jej fragment, ktorý začína kodónom kódujúcim prvú aminokyselinu konštantnej časti ľahkého reťazca a končí kodónom kódujúcim poslednú aminokyselinu konštantnej časti alebo jej fragmentu, po ktorom nasleduje stop kodón.
Výhodne táto prvá časť kóduje variabilnú doménu, ktorá má aminokyselinovú sekvenciu v podstate identickú s aminokyselinovou sekvenciou uvedenou v zozname sekvencii ako sekvencia SEQ ID NO: 2, ktorá začína aminokyselinou v polohe 1 a končí aminokyselinou v polohe 107. Výhodnejšie, prvá časť má nukleotidovú sekvenciu uvedenú ako sekvencia SEQ ID NO: 2, ktorá začína nukleotidom v polohe 1 a končí nukleotidom v polohe 321. Výhodne druhá časť kóduje konštantnú časť humánneho ľahkého reťazca, výhodnejšie konštantnú časť humánneho reťazca k.
Opis tiež zahŕňa molekulu viažucu IL-Ιβ, v ktorých je jeden alebo viac zvyškov v CDR1, CDR2, CDR3, CDRľ, CDR2' alebo CDR3' zmenených oproti zvyškom v sekvencii SEQ ID NO: 1 a sekvencii SEQ ID NO: 2, napríklad mutáciou, napr. miestne cielenou mutagenézou príslušnej DNA sekvencie. Opis tiež zahŕňa DNA sekvencie kódujúce takto zmenené molekuly viažuce IL-Ιβ. Najmä opis zahŕňa molekuly viažuce IL-1β, v ktorých jeden alebo viac zvyškov v CDRľ alebo CDR2' bolo zmenených oproti zvyškom v sekvencii SEQ ID NO: 2.
V prvom a druhom DNA konštrukte môže byť prvá a druhá časť oddelená intrónom a v intróne medzi pr5
SK 288054 Β6 vou a druhou časťou môže byť výhodne lokalizovaný enhancer (zosilňovací element). Prítomnosť takého enhanceru, ktorý je transkribovaný, ale nie je translatovaný, môže napomôcť účinnosti transkripcie. Vo zvláštnom uskutočnení prvý a druhý DNA konštrukt obsahujú enhancer génu ťažkého reťazca výhodne humánneho pôvodu.
Každý z DNA konštruktov je vložený pod kontrolu vhodných kontrolných sekvencii, najmä vhodného promótora. Môže byť použitý akýkoľvek typ promótora, za predpokladu, že je adaptovaný na hostiteľský organizmus, do ktorého budú DNA konštrukty prenesené na expresiu. Ale pokiaľ má dôjsť k expresii v cicavčích bunkách, zvlášť výhodné je použitie promótora imunoglobulínového génu alebo promótora cytomegalovírusu (CMV), napr. promótor humánneho CMV.
Požadovaná protilátka môže byť produkovaná v bunkovej kultúre alebo v transgénnom zvierati. Vhodné transgénne zviera môže byť pripravené štandardným spôsobom, ktorý je odborníkom známy a ktorý zahŕňa mikroinjekcie prvého a druhého DNA konštruktu s vhodnými kontrolnými sekvenciami do vajíčka a potom prenesenie takto pripraveného vajíčka do vhodnej pseudopregnantnej samice a nakoniec selekcia potomstva exprimujúceho požadovanú protilátku.
Keď sú reťazce protilátky produkované v bunkovej kultúre, DNA konštrukty musia byť najskôr vložené buď do jedného expresného vektora, alebo do dvoch oddelených, ale pritom kompatibilných expresných vektorov, čo je považované za výhodnejšiu možnosť.
Takže predkladaný vynález tiež poskytuje expresný vektor, ktorý je schopný replikácie v prokaryotickej alebo eukaryotickej bunkovej línii, ktorá obsahuje opísané DNA konštrukty.
Expresný vektor obsahujúci DNA konštrukt je potom prenesený do vhodného hostiteľského organizmu. Keď sú DNA konštrukty oddelene vložené do dvoch expresných vektorov, môžu byť prenesené oddelene, t. j. jeden typ vektora do jednej bunky, alebo môžu byť prenesené spoločne (ko-transfer), čo je považované za výhodnejšiu možnosť. Vhodným hostiteľským organizmom sú baktérie, kvasinky alebo cicavčie bunkové línie, pričom výhodná je táto tretia možnosť. Výhodnejšie, cicavčia bunková línia je lymfoidného pôvodu, napr. myelóm, hybridom alebo normálne imortalizované B-lymfocyty, ktoré neexprimujú endogénne žiadne ťažké ani ľahké reťazce protilátky.
Na expresiu v cicavčích bunkách je výhodné, keď sekvencia kódujúca molekulu viažucu IL-Ιβ je integrovaná do DNA hostiteľskej bunky do lokusu, ktorý dovoľuje alebo podporuje vysoký stupeň expresie IL-Ιβ viažucich molekúl. Bunky, v ktorých je sekvencia kódujúca molekulu viažucu IL-Ιβ integrovaná do takých výhodných lokusov, môžu byť identifikované a selektované na základe hladín molekuly viažucich IL-Ιβ, ktorú exprimujú. Akýkoľvek vhodný selekčný marker môže byť použitý na prípravu hostiteľských buniek obsahujúcich kódujúcu sekvenciu pre molekulu viažucu IL-Ιβ, napr. gén dhfŕ/metotrexát alebo ekvivalentný selekčný systém. Výhodné systémy na expresiu molekuly viažuce IL-Ιβ podľa vynálezu sú napr. systémy založené na GS-amplifikácii/selekcii, opísané v EP 0256055 B, EP 0323997 B a európskej patentovej prihláške 89303964.4. Výhodne vektor obsahuje aj ďalšie sekvencie nielen požadované a to na uľahčenie expresie, opracovanie a transport exprimovaného proteínu, napr. vektor typicky obsahuje vedúcu („leader“) sekvenciu asociovanú s kódujúcou sekvenciou.
V ďalšom aspekte sa poskytuje spôsob produkcie IL-Ιβ viažucich molekúl, tento spôsob zahŕňa kroky (i) kultivácie organizmu, ktorý je transformovaný expresným vektorom už definovaným a (ii) izoláciu molekulu viažucu IL-Ιβ z kultúry.
V súlade s predkladaným vynálezom bolo zistené, že protilátka AAL160 má väzbovú špecificitu na antigénny epitop humánneho IL-Ιβ, ktorý zahŕňa slučku, ktorá obsahuje zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25 zo zrelého humánneho IL-Ιβ (tieto zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25 zo zrelého humánneho IL-Ιβ zodpovedajú zvyškom 138, 139, 140 a 141, v uvedenom poradí, prekurzora humánneho IL-Ιβ). Tento epitop je lokalizovaný vnútri rozpoznávajúceho miesta receptora IL-1 a je preto nanajvýš prekvapujúce, že protilátky proti tomuto epitopu, t. j. napr. protilátka AAL160, sú schopné inhibovať väzbu IL-Ιβ na receptor. Opisujú sa protilátky, najmä chimérické protilátky a CDR-vštepené protilátky a najmä humánne protilátky, ktoré majú väzbovú špecificitu na antigénny epitop zrelého humánneho IL-Ιβ, ktorý obsahuje slučku, ktorá obsahuje zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25 a ktoré sú schopné inhibovať väzbu IL-Ιβ na jeho receptor a tiež použitie týchto protilátok pri liečení ochorení a porúch sprostredkovaných IL-1.
V ďalšom aspekte opis zahrnuje protilátku proti IL-Ιβ, ktorá má antigénnu väzbovú špecificitu na antigénny epitop humánneho IL-Ιβ, ktorý obsahuje slučku obsahujúcu zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25 zrelého humánneho IL-Ιβ a ktorá je schopná inhibovať väzbu IL-Ιβ na jeho receptor.
V ešte ďalšom aspekte opis zahŕňa:
i) použitie protilátky proti IL-Ιβ, ktorá má antigénnu väzbovú špecificitu na antigénny epitop zrelého humánneho IL-Ιβ, ktorý zahŕňa slučku obsahujúcu zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25, a ktorá je schopná inhibície väzby IL-Ιβ na jeho receptor, pri liečení IL-1 sprostredkovaných ochorení alebo porúch, ii) liečenie IL-1 sprostredkovaných ochorení a porúch u pacientov, ktoré spočíva v tom, že sa pacientovi podáva účinné množstvo protilátky proti IL-Ιβ, ktorá má antigénnu väzbovú špecificitu na antigénny epitop zrelého humánneho IL-Ιβ, ktorý zahŕňa slučku obsahujúcu zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25, a ktorá je
SK 288054 Β6 schopná inhibície väzby IL-Ιβ na jeho receptor, iii) farmaceutickú kompozíciu, ktorá obsahuje protilátku proti IL-Ιβ, ktorá má antigénmi väzbovú špecifickú na antigénny epitop zrelého humánneho IL-Ιβ, ktorý zahŕňa slučku obsahujúcu zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25, a ktorá je schopná inhibície väzby IL-Ιβ na jeho receptor, v kombinácii s farmaceutický prijateľným vehikulom, riedidlom alebo nosičom a iv) použitie protilátky proti IL-Ιβ, ktorá má antigénnu väzbovú špecifickú na antigénny epitop zrelého humánneho IL-Ιβ, ktorý zahŕňa slučku obsahujúcu zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25, a ktorá je schopná inhibície väzby IL-Ιβ na jeho receptor, na výrobu lieku, na liečenie IL-1 sprostredkovaných ochorení a porúch.
V kontexte predkladaného opisu výraz, že protilátka je „schopná inhibovať väzbu IL-Ιβ“, znamená, že protilátka je schopná inhibovať väzbu IL-Ιβ na jeho receptor v podstate v rovnakom rozsahu ako protilátka AAL160, pričom výraz „v rovnakom rozsahu“, ktorý už bol definovaný.
V kontexte predkladaného opisu výraz „IL-1 sprostredkované ochorenie“ zahŕňa všetky ochorenia a zdravotné stavy, v ktorých má nejakú úlohu IL-1, či už priamo alebo nepriamo pri ochorení alebo stave, vrátane príčiny ochorení, rozvoji a progresie ochorenia, perzistencie alebo patológie ochorenia alebo stavu.
V kontexte predkladaného opisu sa termíny „liečenie“ alebo „liečiť“ týkajú tak profylaktickej starostlivosti ako aj kuratívnej starostlivosti alebo starostlivosti, ktorá vedie k modifikácii ochorenia, vrátane starostlivosti o pacientov, ktorí sú v riziku získania ochorenia alebo majú podozrenie, že ochorenie získali a tiež pacientov, ktorí ochorením už trpia alebo boli diagnostikovaní ako trpiaci ochorením a ďalej sa týkajú aj potlačenia klinického relapsu.
Protilátky podľa vynálezu, ktoré majú väzbovú špecificitu na antigénny epitop zrelého humánneho IL-Ιβ, ktorý zahŕňa slučku, ktorá obsahuje zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25, a ktoré sú schopné inhibície väzby IL-Ιβ na jeho receptor.
Výhodne majú protilátky podľa vynálezu väzbovú špecificitu na tento epitop humánneho IL-Ιβ, keď humánny IL-Ιβ je v natívnom stave, ako sú napr. normálne fyziologické podmienky a v žiadnom prípade nie v denaturovanom stave, ako je tomu napr. v prítomnosti denaturujúcich činidiel, ako je napríklad SDS. Protilátky podľa vynálezu môžu skrížené reagovať s non-humánnymi IL-Ιβ, ktoré majú antigénne epitopy obsahujúce Gly ako zvyšok v polohe 22, Pro ako zvyšok v polohe 23, Tyr ako zvyšok v polohe 24 a Glu ako zvyšok v polohe 25, a ktoré sú si blízko podobné zodpovedajúcemu humánnemu epitopu. Napríklad protilátky podľa vynálezu môžu skrížené reagovať s IL-Ιβ primátov, ako sú napríklad makak rhesus, makak cynomolgus IL-1 alebo makak marmoset IL-1. Výhodne sú protilátky podľa vynálezu humánne protilátky, najvýhodnejšie je to protilátka AAL160 alebo jej priamy ekvivalent.
Protilátky podľa vynálezu blokujú účinky IL-Ιβ na jeho cieľové bunky a sú teda určené na použitie pri liečení IL-1 sprostredkovaných ochorení a porúch. Tieto a ďalšie farmakologické účinky protilátok podľa vynálezu môžu byť dokázané použitím štandardných testovacích metód, napr. uvedených ďalej:
1. Neutralizácia aktivácie promótora IL-8 sprostredkovaná humánnym IL-Ιβ
Potenciálna neutralizácia bunkovej signalizácie závislej od IL-Ιβ sa môže stanoviť pomocou testu s reportérovým génom
Humánna melanómová bunková línia G361 je stabilne transfekovaná konštruktom založeným na humánnom IL-8 promótore s luciferázovým reportérovým génom. Expresia a aktivita reportérového génu je závislá v tejto bunkovej línii od IL-Ιβ alebo TNFa. Bunky sa stimulujú 300pg/ml rekombinantného humánneho IL-1β alebo ekvivalentom 100 pg/ml v kondiciovanom médiu v prítomnosti rôznych koncentrácií protilátky podľa vynálezu alebo antagonistu IL-1 receptora v rozmedzí 6 až 18 000 pM. Chimérická protilátka Stimulect® (basiliximab) sa používa ako kontrola so zhodným izotypom. Luciferázová aktivita sa kvantifikuje použitím chemiluminiscenčného testu. Protilátky podľa vynálezu majú pri testovaní v tomto teste typicky hodnotu 1C5O približne 1 nM (napr. 0,2 až 5 nM).
2. Neutralizácia IL-Ιβ dependentej tvorby PGE2 a interleukínu-6 v primárnych humánnych fibroblastoch
Tvorba PGF2 a IL-6 v primárnych humánnych dermálnych fibroblastoch je závislá od IL-Ιβ. Samotný TNF-α nemôže účinne indukovať zápalové mediátory, ale pôsobí synergicky s IL-1. Primáme dermálne fibroblasty sa používajú ako náhradný model na IL-1-indukovanú bunkovú aktiváciu.
Primáme humánne fibroblasty sa stimulujú rekombinantným IL-Ιβ alebo kondicionovaným médiom získaným z LPS-stimulovaných humánnych PBCM v prítomnosti rôznych koncentrácií protilátky podľa vynálezu alebo IL-1RA v rozsahu 6 až 18 000 pM. Chimérická protilátka Simulect® (basiliximab) sa používa ako kontrola so zhodným izotypom. Supernatant sa odoberá po 16 hodinách stimulácie a testuje sa na prítomnosť IL-6 testom ELISA alebo na prítomnosť PGE2 testom RIA. Protilátky podľa vynálezu majú pri testovaní v týchto testoch typicky hodnotu IC50 na inhibíciu produkcie IL-6 približne 1 nM alebo nižšiu (napr. 0,1 až 1 nM) a na inhibíciu produkcie PGE2 približne lnM (napr. 0,1 až 1 nM).
Ako sa ukázalo, protilátky podľa vynálezu silne blokujú účinok IL-Ιβ. Teda sú protilátky podľa vynálezu farmaceutický využiteľné a to nasledujúcimi spôsobmi:
Protilátky podľa vynálezu sú užitočné na profylaxiu a liečenie IL-1 sprostredkovaných ochorení a stavov, ako je napr. zápal, alergia a alergický stav, hypersenzitívna reakcia, autoimunitná choroba, silná infekcia a rejekcia orgánového alebo tkanivového transplantátu.
Tak napríklad protilátky podľa vynálezu môžu byť použité pri liečení príjemcov transplantátov srdca, pľúc, bloku srdce-pľúca, obličiek, pankreasu, kože alebo rohovky a tiež pri prevencii reakcie štepu proti hostiteľovi („graft versus host diseases“), napr. po transplantácii kostnej drene.
Protilátky podľa vynálezu sú konkrétne použiteľné napr. pri liečení, prevencii alebo zmiernení autoimunitných ochorení a zápalových ochorení, najmä zápalových stavov s etiológiou zahŕňajúcou autoimunitnú zložku, ako je napríklad artritída (napr. reumatoidná artritída, artritída chronica progrediente a artritída deformans) a reumatických ochorení, vrátane zápalových stavov a reumatických ochorení zahŕňajúcich stratu kostnej hmoty, bolestivé zápaly a hypersenzitivity (vrátane hypersenzitivity dýchacích ciest aj kožnej hypersenzitivity) a alergií. K špecifickým autoimunitným chorobám, na ktoré môžu byť protilátky podľa vynálezu použité, patria autoimunitné hematologické poruchy (vrátane napr. hemolytickej anémie, aplastickej anémie, anémie iba červených krviniek a idiopatickej trombocytopénie), systémový lupus erythematosus, polychondritída, skleroderma, Wegenerova granulomatóza, dermatomyozitída, chronická aktívna hepatitída, myasténia gravis, psoriáza, Steven-Johnsonov syndróm, idiopatická porucha vstrebávania v tenkom čreve (spme), autoimunitné zápalové ochorenie čriev (vrátane napr. ulceratívnej kolitídy, Crohnovho ochorenia a syndrómu dráždivého čreva), endokrinné oftalmopatie, Gevensove ochorenie, sarkoidóza, skleróza multiplex, primárna biliáma cirhóza, juvenilný diabetes (diabetes mellitus typu I), uveitída (anterior a posterior), suchá keratokonjunktivitída a vemálna keratokonjunktivitída, fibróza pľúcneho intersticia, psoriatická artritída a glomerulonefŕitída (tak bez, ako aj s nefrotickým syndrómom, napr. vrátane idiopatického nefrotického syndrómu alebo nefropatie s minimálnymi zmenami).
Protilátky podľa vynálezu sú tiež použiteľné pri liečení, prevencii alebo zmiernení ochorení, ako je astma, bronchitída, pneumokonióza, emfyzém pľúc a ďalšie obštruktívne alebo zápalové ochorenia dýchacích ciest.
Protilátky podľa vynálezu sú použiteľné tiež na liečenie nežiaducich akútnych a hyperakútnych zápalových reakcií, ktoré sú sprostredkované IL-1 alebo zahŕňajú tvorbu IL-1, zvlášť IL-Ιβ alebo podporu uvoľňovania TNF pomocou IL-1, napr. akútne infekcie, napr. septický šok (napr. endotoxický šok a syndróm respiračnej poruchy dospelých), meningitída, pneumónia, ťažké popáleniny a ďalej na liečenie kachexie alebo syndrómu chradnutia (wasting syndróm) spojeného s patologickým uvoľňovaním TNF v dôsledku infekcií, karcinómu alebo orgánových dysfúnkcií, obzvlášť kachexie súvisiacej s AIDS, napr. asociovanej alebo nasledujúcej po infekcii HIV.
Protilátky podľa vynálezu sú ďalej najmä použiteľné pri liečení ochorení metabolizmu kostí, ako je napr. osteoartritída, osteoporóza a ďalšie zápalové artritídy a straty kostnej hmoty všeobecne, vrátane straty kostnej hmoty, ktorá súvisí so starnutím a pri špecifických periodontálnych ochoreniach.
Protilátky podľa vynálezu môžu byť tiež použité pri liečení karcinómov, najmä IL-1 dependentných nádorov.
Na uvedené indikácie bude vhodná dávka, samozrejme, rôzna, a to v závislosti napríklad od konkrétnej použitej protilátky podľa vynálezu, príjemcu, spôsobu podávania a povahy a závažnosti ochorenia, ktoré sa má liečiť. Ale pri profylaktickom použití je všeobecne možné dosiahnuť uspokojivých výsledkov s dennými dávkami približne 0,1 mg až približne 5 mg na 1 kilogram telesnej hmotnosti. Protilátka podľa vynálezu sa obvykle podáva parenterálne, intravenózne, napr. do antekubitálnej alebo inej periférnej žily, intramuskulárne alebo subkutánne. Profylaktické liečenie typicky spočíva v podávaní molekúl podľa vynálezu jedenkrát denne až jedenkrát týždenne počas 2 až 4 týždňov.
Farmaceutické kompozície podľa predkladaného vynálezu sú vyrábané obvyklými spôsobmi, ktoré sú odborníkom známe. Kompozíciu podľa vynálezu je výhodné poskytnúť v lyofilizovanej forme. Na okamžité podanie je rozpustený vo vhodnom vodnom nosiči, ako je napríklad sterilná voda na injekcie alebo sterilný pufrovaný fyziologický roztok. Je vhodné pripraviť väčší objem takého roztoku na podávanie infúzií, napr. i. v. infúzií, namiesto bolusovej injekcie, napr. s. c. bolusovej injekcie. Pri formulácii takejto kompozície je výhodné do fyziologického roztoku pridať ľudský sérový albumín alebo priamo pacientovu vlastnú heparinizovanú krv. Prítomnosť nadbytku fyziologicky inertného proteínu zabraňuje strate protilátky v dôsledku adsorpcie na stenách kontajnera a hadičiek, ktoré sa používajú na infúzny roztok. Pokiaľ sa použije albumín, potom vhodná koncentrácia je 0,5 až 4,5 % (hmotn.) vzhľadom na fyziologický roztok.
Predkladaný vynález je ďalej opísaný pomocou príkladov, ktorých funkcia je ilustratívna, a ktoré sú doplnené nasledujúcimi obrázkami.
Prehľad obrázkov na výkresoch
Obrázok 1 je graf, ktorý ukazuje kompetitívnu inhibíciu väzby AAL160 k IL-Ιβ pomocou rozpustného receptora IL-1 typu I a typu II.
SK 288054 Β6
Obrázok 2 je graf, ktorý ukazuje inhibíciu horúčky vyvolanej IL-Ιβ podaním AAL160 na modeli laboratórneho potkana.
Obrázok 3 je graf, ktorý ukazuje trvanie účinku AAL160 na horúčku vyvolanú IL-Ιβ na modeli laboratórneho potkana.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Transgénne myši exprimujúce humánny IgG/K repertoár namiesto vlastného imunoglobulínového repertoáru (Fishwild et al., 1996, Náture Biotechnol., 14, 845 - 851) sa použili na prípravu protilátky proti humánnemu IL-Ιβ. B lymfocyty z týchto myší sa imortalizovali použitím štandardnej hybridómovej technológie a tak sa získali myšie hybridómové bunky secemujúce humánnu IgGll/κ protilátku označenú AAL160.
Príklad 1
Vytvorenie hybridómu a purifikácia protilátky
Geneticky modifikovaná myš 66 (Medarex Inc. Annadale, NJ) sa imunizovala rekombinantným humánnym IL-Ιβ (50 pg) v adjuvans s. c. v niekoľkých miestach. Imunitná reakcia myši sa ďalej zosilnila piatimi ďalšími injekciami, posledná injekcia tri dni pred fúziou. V deň fúzie sa myš 66 usmrtila inhaláciou CO2 a bunky zo sleziny (4,1 x 107) sa fúzovali rutinným spôsobom použitím PEG 4000 s rovnakým počtom buniek PAI-O myší myelómovej bunkovej línie. Fúzované bunky sa preniesli do 624 jamiek (1 ml/jamka) obsahujúcich podpornú („feeder”) vrstvu myších peritoneálnych buniek (Balb C myší), v médiu RPMI 1640 s HAT, 10 % tepelne inaktivovaným fetálnym teľacím sérom a 5 x 10 5 M β-merkaptoetanolom. Supematanty sa odoberali a testovali pomocou ELISA testu a uskutočnil sa skríning na IL-Ιβ reaktívnu monoklonálnu protilátku. Päť monoklonálnych protilátok podtriedy IgG/κ sa identifikovalo. Klonovanie sa uskutočnilo v 4 x 96 jamkovej mikrotitračnej doštičke, do každej jamky sa prenieslo 0,5 buniek. Po dvoch týždňoch sa jamky kontrolovali inverzným mikroskopom. Supematanty sa odoberali z jamiek s pozitívnym rastom a produkcia monoklonálnej protilátky anti-IL-Ιβ sa vyhodnocovala pomocou ELISA. 1 až 2 litre kondicionovaného supematantu zo štyroch subklonov pôvodne identifikovaného hybridómu #476 sa pripravili a protilátky sa purifikovali pomocou afinitnej chromatografie na kolóne s proteínom A.
Čistota a čiastočná aminokyselinová sekvencia ťažkého a ľahkého reťazca
Aminokyselinové sekvenovanie
Ľahké a ťažké reťazce purifikovanej protilátky AAL160 sa oddelili pomocou SDS-PAGE a aminokoncové aminokyseliny sa stanovili pomocou Edmanovej degradácie. Čistota protilátky použitej v tejto štúdii pomocou sekvenovania bola >90 %. cDNA sekvencie kódujúce variabilné domény ťažkého a ľahkého reťazca sa získali pomocou PCR amplifikácie z cDNA pripravenej z mRNA z klonovaných hybridómových buniek a úplného sekvenovania. Aminokoncové sekvencie variabilných domén ťažkého a ľahkého reťazca a zodpovedajúce DNA sekvencie sú uvedené ďalej, pričom hrubo sú vyznačené úseky CDR.
| SEKVENCIA SEQ ID NO: | 1 | 30 | 60 | |||||||||||||||
| GAG | GTG | CAG | CTG | GTG | CAG | TCT | GGA | GCA | GAG | GTG | AAA AAG | ccc | GGG | GAG | TCT | CTG | AAG | ATC |
| Glu | Val | Gin | Leu | Val | Gin | Ser | Gly | Ala | Glu | Val | Lys Lys | Pro | Gly | Glu | Ser | Leu | Lys | íle |
| 10 | 20 | |||||||||||||||||
| 90 | CDR1 | 120 | ||||||||||||||||
| T CC | TGT | AAG | GGT | TCT | GGA | TAC | AGC | TTT | ACC | AGC | TAC TGG | ATC | GGC | TGG | GTG | CGC | CAG | ATG |
| Ser | Cys | Lys | Gly | Ser | Gly | Tyr | Ser | Phe | Thr | Ser | Tyr Trp | íle | Gly | Trp | Val | Arg | Gin | Met |
| 30 | 40 |
SK 288054 Β6
| ccc Pro | GGG AAA | GGC Gly | 150 CTG GAG TGG ATG GGG ATC | CDR2 ATC TAT CCT | 180 AGT GAC TCT GAT ACC AGA TAC | ||||||||||||||
| Gly | Lys | Leu | Glu Trp | Met | Gly | íle 50 | íle | Tyr | Pro | Ser | Asp | Ser | Asp | Thr Arg Tyr 60 | |||||
| 210 | 240 | ||||||||||||||||||
| AGC | CCG | TCC | TTC | CAA | GGC | CAG | GTC | ACC | ATC | TCA | GCC | GAC | AAG | TCC | ATC | AGC | ACC | GCC | TAC |
| Ser | Pro | ser | Phe | Gin | Gly | Gin | Val | Thr | íle | Ser | Ala | Asp | Lys | Ser | íle | Ser | Thr | Ala | Tyr |
| 70 | 80 | ||||||||||||||||||
| 270 | 300 | ||||||||||||||||||
| CTG | CAG | TGG | AGC | AGC | CTG | AAG | GCC | TCG | GAC | ACC | GCC | ATG | TAT | TAC | TGT | GCG | AGA | TAT | ACC |
| Leu | Gin | Trp | Ser | Ser | Leu | Lys | Ala | Ser | Asp | Thr | Ala | Met | Tyr | Tyr | Cys | Ala | Arg | Tyr | Thr |
| 90 | ICO | ||||||||||||||||||
| CDR3 | 330 | ||||||||||||||||||
| AAC | TGG | GAT | GCT | TTT | GAT | ATC | TGG | GGC | CAA | GGG | ACA | ATG | GTC | ACC | GTC | TCT | TCA | ||
| Aan | Trp Asp | Ala | Phe | Asp | íle | Trp | Gly | Gin | Gly | Thr | Met | val | Thr | Val | Ser | Ser | |||
| SEKVENCIA SEQ ID NO: | 2 | ||||||||||||||||||
| 30 | 50 | ||||||||||||||||||
| GAA | ATT | GTG | TTG | ACA | CAG | TCT | CCA | GCC | ACC | CTG | TCT | TTG | TCT | CCA | GGG | GAA | AGA | GCC | ACC |
| Glu | íle | Val | Leu | Thr | Gin | Ser | Pro | Ala | Thr | Leu | Ser | Leu | Ser | Pro | Gly | Glu | Arg | Ala | Thr |
| 10 | 20 | ||||||||||||||||||
| CDR1 | 90 | 120 | |||||||||||||||||
| CTC | TCC | TGC | AGG | GCC | AGT | CAG | AGT | GTT | AGC | AGC | TAC | TTA | GCC | TGG | TAC | CAA | CAG | AAA | CCT |
| Leu | Ser | Cys | Arg | Ala | Ser | Gin | Ser | Val | Ser | Ser | Tyr | Leu | Ala | Trp | Tyr | Gin | Gin | Lys | Pro |
40
| 150 | CDR2 | 180 | |||||||||||||||
| GGC | CAG | GCT | CCC | AGG | CTC | CTC ATC | TAT | GAT | GCA TCC | AAC | AGG | GCC | ACT | GGC | ATC | CCA | GCC |
| Gly | Gin | Ala | Pro | Arg | Leu | Leu íle | Tyr | Asp | Ala Ser | Asn | Arg | Ala | Thr | Gly | íle | Pro | Ala |
60
| 210 | 240 | ||||||||||||||||||
| AGG | TTC | AGT | GGC | AGT | GGG | TCT | GGG | ACA | GAC | TTC | ACT | CTC | ACC | ATC | AGC | AGC | CTT | GAG | cct |
| Arg | Phe | Ser | Gly | Ser | Gly | Ser | Gly | Thr | Asp | Phe | Thr | Leu | Thr | íle | Ser | Ser | Leu | Glu | Pro |
| 70 | 80 |
| 270 | CDR3 | 300 | ||||||||||||||||
| GAA | GAT | TTT | GCA | GTT | TAT | TAC | TGT | CAG | CAG | CGT | AGC AAC | TGG | ATG | TTC | CCT | TTT | GGC | CAG |
| Glu | Asp | Phe | Ala | Val | Tyr | Tyr | Cys | Gin | Gin | Arg | Ser Asn | Trp | Met | Phe | Pro | Phe | Gly | Gin |
| 90 | 100 |
SK 288054 Β6
GGG ACC AAG CTG GAG ATC AAA Gly Thr Lys Leu Glu íle Lys
DNA sekvencia kódujúca variabilné domény ťažkého a ľahkého reťazca a zodpovedajúca aminokyselinová sekvencia AAL160 sú tiež uvedené v zozname sekvencii ako sekvencia SEQ ID NO: 1 až sekvencia SEQ ID NO: 4.
Konštrukcia expresných vektorov pre ťažký a ľahký reťazec
Klonované sekvencie kódujúce VL a VH sa amplifikovali pomocou PCR a vložili prostredníctvom vhodného reštrikčného miesta do kazety vektorov obsahujúcich imunoglobulínový promótor vedúcej sekvencie z RFT2 protilátky (Heinrich et al. (1989) J. Immunol. 143, 3589 - 97), časť J-segmentov a zostrihové donorové miesto. Kazeta ľahkého reťazca obsahujúca celý VL úsek, promótor a vedúcu sekvenciu na sekréciu sa preniesla do expresného vektora obsahujúceho humánny gén Ck, enhancer ťažkého reťazca imunoglobulínu a modifikovanú myšiu dhfr cDNA na selekciu pomocou metotrexátu (MTX).
Kazeta ťažkého reťazca sa preniesla do expresného vektora, ktorý kóduje humánny gén IgGl, enhancer ťažkého reťazca imunoglobulínu a gén rezistencie na neomycín na selekciu.
Tak ťažký, ako aj ľahký reťazec sú v expresných vektoroch v konfigurácii, ktorá pripomína genómovú konfiguráciu preskupených („rearranged“) imunoglobulínových génov, čo je považované za dôležitý faktor pre vysoký stupeň expresie.
Na produkciu protilátky podľa vynálezu sa opísali vektory kotransfekované do vhodnej hostiteľskej bunkovej línie, napr. bunkovej línie SP2/0, bunky obsahujúce vektorové sekvencie sa selektovali pomocou metotrexátovej selekcie a vyselektované bunkové línie sa kultivovali, aby exprimovali protilátku AAL160. Alternatívne sa môže použiť amplifikačný/selekčný systém založený na GS, aký bol napríklad opísaný v EP 0256055 B, EP 0323997 B alebo európskej patentovej prihláške 89303964.4, keď je selekčný marker dhfr nahradený GS kódujúcou sekvenciou.
Príklad 2
Biochemické a biologické dáta
Zistilo sa, že monoklonálna protilátka AAL160 neutralizuje in vitro aktivitu interleukínu-ΐβ. Monoklonálna protilátka bola ďalej charakterizovaná jej väzbou na rekombinantný humánny ILl-β analýzou Biacore. Spôsob neutralizácie sa hodnotil kompetitívnou väzbovou štúdiou s rozpustnými IL-1 receptormi. Biologická aktivita protilátky AAL160 proti rekombinantne pripravenému a prirodzene tvorenému IL-1 β sa stanovila na primárnych humánnych bunkách (pozri príklad 3), responzívnych na stimuláciu pomocou IL-1 β.
2.1 Stanovenie disociačnej rovnovážnej konštanty
Konštanty rýchlosti asociácie a disociácie väzby rekombinantného humánneho IL-1 β a AAL160 sa stanovili analýzou BIAcore. AAL160 sa imobilizovala a väzba rekombinantného IL-Ιβ v rozmedzí koncentrácií 0,5 až 12 nM sa merala pomocou povrchovej plazmónovej rezonancie. Vybratý formát analýzy umožnil zaobchádzať s väzbovou udalosťou IL-Ιβ na AAL160 podľa 1 : 1 stechiometrie. Analýza dát sa uskutočnila pomocou softvéru „BIAevaluation“.
| Asociačná rýchl. konštanta (M 's1) | (n =15) | (3,91 ±0,14) x 105 | Priemer ±str. chyba priemeru |
| Disociačná rýchl. konštanta (M 's1) | (n =15) | (1,53 ±0,05) x 10'4 | Priemer ±str. chyba priemeru |
| Disociačná rovnovážna Konštanta KD (M) | (n =15) | (396,6 ±19,5) x 10'12 | Priemer ±str. chyba priemeru |
AAL160 sa viaže na rekombinantný humánny IL-Ιβ s vysokou afinitou.
2.2 Kompetitívna inhibícia väzby k rozpustným IL-1 receptorom
Štúdium kompetície väzby pomocou rozpustných receptorov IL-1 typu I a II
Kompetícia medzi AAL160 a rozpustným humánnym receptorom IL-1 typu I a typu II sa merala opäť pomocou zariadenia Biacore. AAL160 sa imobilizovala na povrchu čipu a rekombinantný humánny IL-Ιβ (8nM) sa injikoval, aby sa viazal na AAL160 za absencie alebo prítomnosti zvyšujúcej sa koncentrácie rekombinantného humánneho rozpustného receptora I (0 až 10 nM) alebo receptora II (0 až 80 nM). Získané výsledky sú ukázané na obrázku 1. Väzba NVP AAL160 NX-1 na IL-Ιβ je kompetitívna tak s receptorom IL-1 typ I ako aj s receptorom typu II.
2.3 Profil reaktivity s humánnym IL-Ια, humánnym IL-1RA a IL-Ιβ z niektorých druhov hlodavcov a primátov
Profily reaktivity AAL160 s humánnym IL-Ια, IL-1RA a IL-Ιβ z myši, laboratórneho potkana, králika a makaka „cynomolgus“ sa analyzovali opäť pomocou zariadenia Biacore. AAL160 sa mobilizovala a skúmané cytokíny sa použili v koncentrácii 8 nM (alebo 20 nM v prípade IL-Ιβ).
| Percento celkovo naviazaného ±stredná chyba priemeru | |
| Humánny IL-Ιβ | 100 |
| Humánny IL-la | 0,7 ±0,7 (n = 3) |
| Humánny IL-IRA | 1,2 ±1,2 (n = 3) |
| Myší IL-Ιβ | 2,8 ±1,5 (n = 3) |
| IL-Ιβ lab. potkana | 3,0 ±2,5 (n = 3) |
| IL-Ιβ makaka „cynomolgus“ | 96,4 ±6,8 (n = 3) |
| Králičí IL-Ιβ | 12,1 ±2,3 (n = 4) |
AAL160 skrížené významne nereaguje s humánnym IL-Ιβ, humánnym IL-IRa alebo IL-Ιβ z myši, laboratórneho potkana alebo králika. Reaktivita proti IL-Ιβ z makaka „cynomolgus“ je v podstate zhodná s humánnym cytokínom.
Príklad 3
Neutralizácia od IL-Ιβ závislej produkcie PGE2 a interleukínu-6 v primárnych humánnych fibroblastoch
Produkcia PGE2 a IL-6 v primárnych humánnych dermálnych fibroblastoch je závislá od IL-Ιβ. Samotný TNF-α nemôže účinne indukovať zápalové mediátory, ale pôsobí synergicky s IL-1. Primáme dermálne fibroblasty sa používajú ako náhradný model na IL-1-indukovanú bunkovú aktiváciu.
Primáme humánne fibroblasty sa stimulujú rekombinantným IL-Ιβ alebo kondiciovaným médiom získaným z LPS-stimulovaných humánnych PBCM v prítomnosti rôznych koncentrácií protilátky podľa vynálezu alebo IL-IRA v rozsahu 6 až 18 000 pM. Chimerická anti-CD25 protilátka Simulect® (basiliximab) sa používa ako kontrola so zhodným izotypom. Supematant sa odoberá po 16 hodinách stimulácie a testuje sa na prítomnosť IL-6 testom ELISA alebo na prítomnosť PGE2 testom RIA.
| AAL160 IC50 ±str. chyba (n>3) | IL-1 Ra IC5o ±str. chyba (n>3) | |
| Sekrécia IL-6 Rekombinantná | 0,34 ±0,037 nM | nestanovené |
| Sekrécia IL-6 Kond. Médium | 0,6 ±0,09 nM | 0,03 ±0,001 nM |
| Produkcia PGE2 Kond. Médium | 0,79±0,17nM | nestanovené |
Výsledky ukázali, že AAL160 účinne blokuje produkciu IL-6 a PGE2 v primárnych humánnych dermálnych fibroblastoch s hodnotou IC50 podobnou pre rekombinantný a prírodný IL-Ιβ.
Príklad 4
Účinnosť a trvanie pôsobenia AAL160 in vivo
Účinnosť
In vivo účinnosť anti-huIL-Ιβ protilátky AAL160 sa testovala na modeli laboratórneho potkana, kde sa horúčka indukovala pomocou i. v. injekcie huIL-Ιβ (100 ng/potkan). Protilátka viedla k inhibícii horúčky spôsobom závislým od dávky pri dávkach v rozmedzí 1,3 a 10 pg/kg i. v. (n = 6 potkanov) - pozri tiež obrázok 2. CHI 621 (Simulect®, basiliximab) sa použila ako kontrolná protilátka.
Trvanie účinku
Trvanie účinku AAL160 sa skúmalo na laboratórnych potkanoch, pri ktorých sa pomocou IL-Ιβ indukovala horúčka, nasledujúcim spôsobom: protilátka sa injikovala i. v. buď 24 hodín, alebo 30 minút (štandardný protokol) pred indukciou horúčky pomocou i. v. injekcie humánneho IL-Ιβ a telesná teplota sa merala neskôr za 2 a 4 hodiny. V oboch časoch sa pozorovala približne rovnaká inhibícia horúčky (pozri obrázok 3). Ako sa dalo očakávať, kontrolná protilátka CHI 621 (Simulect®, basiliximab) bola neúčinná v oboch časových bodoch. Toto zistenie ukazuje na to, že humánna protilátka AAL160 je prítomná v potkanovi v aktívnej forme aspoň po 24 hodín a v priebehu tohto času nie je metabolizovaná, vylučovaná ani viazaná na tkanivo.
SK 288054 Β6
Príklad 5
Rôntgenorafické štúdie AAL160 Fab a jeho komplexu s IL-Ιβ
Stanovenie štruktúry AAL160 Fab s rozlíšením 2,0 Á
Súbor dát s rozlíšením 2,0 Á (2,0 x 10’10 m) veľmi dobrej kvality (RSYM = 0,051, úplnosť = 99,9 %, redundancia = 8,2) sa získal na kryštáloch Fab pestovaných pomocou difúzie pary v metóde visiacej kvapky, pri pH 9,5 v 50 % PEG 200 a 0,lM CHES. Kryštál bol v priestorovej skupine P2i2[2i s rozmermi jednotkovej bunky a = 62,17 Á, b = 89,83 Á a c = 123,73 Á a jednou Fab molekulou na jednu symetrickú jednotku (Matthewsov koeficient: 3,6 Á3/Da, stanovený obsah rozpúšťadla: 66 %). Štruktúra sa určila pomocou molekulárneho nahradenia a bola zjemnená na konečný kryštalografický R-faktor 0,209 (voľný R-faktor = 0,261). Výsledný model zhŕňa aminokyselinové zvyšky 1 až 213 ľahkého reťazca, 1 až 131 a 138 až 218 ťažkého reťazca, 387 molekúl vody a 1 molekulu PEG. Výsledná elektrónová denzita je dobre definovaná pre všetky zvyšky CDR s výnimkou Trp94 (CDR3) ľahkého reťazca. Poloha postranného reťazca tohto zvyšku je chybne definovaná v dvoch kryštálových formách, ktoré boli doteraz preskúmané, takže je možné predpokladať, že je v neprítomnosti viazaného antigénu vysoko mobilná.
Kryštalizácia Fab komplexu s IL-1 β a predbežný experimentálny model komplexu:
Niekoľko kryštálov AAL160 Fab v komplexe s antigénom IL-Ιβ sa získalo zo zásobného roztoku 1 : 1 komplexu s koncentráciou 76 mg/ml v 2,0 M sírane amónnom, 0,lM Tris, pH 8,5. Kryštály rástli veľmi pomaly počas niekoľkých týždňov. Vykazovali slabú difrakciu približne do 3,2 Á na domácom zdroji. Súbor predbežných dát sa zistil pomocou molekulárneho nahradzovania využitím štruktúry voľného Fab a humánneho IL-Ιβ s vysokým rozlíšením (J. P. Priestle et al., EMBO J. 7, 339 (1988)) ako východiskových modelov. Výpočty poskytli veľmi jasný a nepochybný výsledok, keď sa časti Fv a Fc z Fab použili ako oddelené moduly (korelácia 67,1 %, R-faktor 0,354 po ďalšom aproximačnom kroku AMOREFITTING použitím dát medzi 8,0 Á a 3,5 Á). Následné porovnanie voľnej a viazanej formy Fab ukázalo, že uhol ohybu je pre tieto dve štruktúry veľmi odlišný. Výsledky výpočtov molekulárneho nahradzovania poskytli prvý molekulárny model interakcie medzi antigénom IL-Ιβ a monoklonálnou protilátkou AAL160. Predbežná analýza tejto interakcie ukázala, že (1) IL-Ιβ vstupuje do tesnej interakcie so všetkými tromi CDR ťažkého reťazca a s CDR ľahkého reťazca. Oproti tomu, CDR1 a CDR2 ľahkého reťazca sa zúčastňujú len niekoľko málo interakcií, pokiaľ vôbec a (2) kľučka obsahujúca zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25 zrelého IL-Ιβ sa viaže v strede antigén-kombinujúceho miesta, zdá sa teda byť kľúčovou zložkou epitopu. Je preto značne zaujímavé, že táto kľučka nie je lokalizovaná v úseku molekuly, ktorá sa najviac odlišuje od myšieho IL-Ιβ. Pro23, Tyr24 a Glu25 sú zachované, ale zvyšok v polohe 22 je Gly v humánnom IL-Ιβ, zatiaľ čo v myšom IL-Ιβ je to Asp. Porovnanie kryštálovej štruktúry humánneho (PDB č. 2ilb) a myšieho IL-Ιβ (PDB č. 8i 1 b) ukazuje, že táto bodová mutácia má za následok veľmi odlišnú konformáciu hlavného reťazca v okolí Pro23. Táto lokálna štruktúrna diferencia je v zhode súhlasná s pozorovaným nedostatkom skríženej reaktivity AAL160 s príslušným myším cytokínom.
ZOZNAM SEKVENCII <110> Novartis AG <120> Protilátky na humánny IL-1 beta <130> 4-31289A <160> 4 <170> Patentln version 3.0 <210> 1 <211> 354 <212> DNA <213> Mus musculus <220>
<221> CDS <222> (1)..(354) <400> 1 gag gtg cag ctg gtg cag tct
Glu Val Gin Leu Val Gin Ser
5 tct ctg aag atc tcc tgt aag
Ser Leu Lys íle Ser Cys Lys tgg atc ggc tgg gtg cgc cag Trp íle Gly Trp Val Arg Gin ggg atc atc tat cct agt gac Gly íle íle Tyr Pro Ser Asp
55 caa ggc cag gtc acc atc tca Gin Gly Gin Val Thr íle Ser 65 70 ctg cag tgg agc agc ctg aag Leu Gin Trp Ser Ser Leu Lys gcg aga tat acc aac tgg gat Ala Arg Tyr Thr Asn Trp Asp gga gca gag gtg aaa aag ccc ggg gag
Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
15 ggt tct gga tac agc ttt acc agc tac
Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
30 atg ccc ggg aaa ggc ctg gag tgg atg
Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
45 tct gat acc aga tac agc ccg tcc ttc
Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe gcc gac aag tcc atc agc acc gcc tac
Ala Asp Lys Ser íle Ser Thr Ala Tyr
80 gcc tcg gac acc gcc atg tat tac tgt
Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
95 get ttt gat atc tgg ggc caa ggg aca
Ala Phe Asp íle Trp Gly Gin Gly Thr
144
192
240
288
336
100
105
110 atg gtc acc gtc tct tca 354
Met Val Thr Val Ser Ser
115
| <210> | 2 |
| <211> | 118 |
| <212> | PRT |
| <213> | Mus musculus |
| <400> | 2 |
SK 288054 Β6
| Glu 1 | Val | Gin | Leu | Val 5 | Gin | Ser Gly | Ala | Glu 10 | Val | Lys | Lys | Pro | Gly 15 | Glu |
| Ser | Leu | Lys | íle 20 | Ser | Cys | Lys Gly | Ser 25 | Gly | Tyr | Ser | Phe | Thr 30 | Ser | Tyr |
| Trp | íle | Gly 35 | Trp | Val | Arg | Gin Met 4D | Pro | Gly | Lys | Gly | Leu 45 | Glu | Trp | Met |
| Gly | íle 50 | íle | Tyr | Pro | Ser | Asp Ser 55 | Asp | Thr | Arg | Tyr 60 | Ser | Pro | Ser | Phe |
| Gin 65 | Gly | Gin | Val | Thr | íle 70 | Ser Ala | A3p | Lys | Ser 75 | íle | Ser | Thr | Ala | Tyr 80 |
| Leu | Gin | Trp | Ser | Ser 85 | Leu | Lys Ala | Ser | Aso so' | Thr | Ala | Met | Tyr | Tyr 95 | Cys |
| Ala | Arg | Tyr | Thr 100 | Asn | Trp | Asp Ala | Phe 105 | Asp | íle | Trp | Gly | Gin 110 | Gly | Thr |
| Met | Val | Thr | Val | Ser | Ser |
115 <2lO> 3 <211> 321 <212> DNA <213p Mus musculus <220>
<221> CDS <222> {1)..(3211 <400> 3 gaa att gtg ttg aca cag tct cca gcc acc ctg tct ttg tct cca ggg
Glu íle Val Leu Thr Gin Ser 1 5 gaa aga gcc acc ctc tcc tgc Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys tta gcc tgg tac caa cag aaa Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys tat gat gca tcc aac agg gcc Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala
55
| Pro | Ala | Thr 10 | Leu | Ser | Leu | Ser | Pro 15 | Gly |
| agg | gcc | agt | cag | agt | gtt | age | age | tac |
| Arg | Ala 25 | Ser | Gin | Ser | Val | Ser 30 | Ser | Tyr |
| cct | ggc | cag | get | ccc | agg | ctc | ctc | atc |
| Pro 40 | Gly | Gin | Ala | Pro | Arg 45 | Leu | Leu | íle |
| act | ggc | atc | cca | gcc | agg | ttc | agt | ggc |
| Thr | Gly | íle | Pro | Ala 60 | Arg | Phe | Ser | Gly |
144
152
SK 288054 Bó
| agc Ser | agc Ser | ctt Leu | gag Glu | cct Pro 80 | 240 |
| agc | aac | tgg | atg | ttc | 2B8 |
| Ser | Asn | Trp | Met 95 | Phe |
321
| agt Ser 65 | ggg tct ggg aca gac | ttc act ctc acc atc | ||||
| Gly Ser Gly Thr | Asp 70 | Phe Thr | Leu | Thr | íle 75 | |
| gaa | gat ttt gca gtt | tat | tac tgt | cag | cag | cgt |
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Arg
90
| cct | ttt | ggc | cag | ggg | acc | aag | ctg | gag | atc | aaa |
| Pro | Phe | Gly | Gin | Gly | Thr | Lys | Leu | Glu | íle | Lys |
| 100 | 105 |
<210> 4 <211> 107 <212> PRT <213> Mus musculus <400 4
| Glu | íle | Val | Leu | Thr | Gin | Ser | Pro | Ala | Thr | Leu | Ser | Leu | Ser | Pro | Gly |
| 1 | 5 | 10 | 15 | ||||||||||||
| Glu | Arg | Ala | Thr | Leu | Ser | Cys | Arg | Ala | Ser | Gin | Ser | Val | Ser | Ser | Tyr |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| Leu | Ala | Trp | Tyr | Gin | Gin | Lys | Pro | Gly | Gin | Ala | Pro | Arg | Leu | Leu | íle |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| Tyr | Asp | Ala | Ser | Asn | Arg | Ala | Thr | Gly | íle | Pro | Ala | Arg | Phe | Ser | Gly |
| 50 | 55 | 60 | |||||||||||||
| Ser | Gly | Ser | Gly | Thr | Asp | Phe | Thr | Leu | Thr | íle | Ser | Ser | Leu | Glu | Pro |
| 65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
| Glu | Asp | Phe | Ala | Val | Tyr | Tyr | Cys | Gin | Gin | Arg | Ser | Asn | Trp | Met | Phe |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| Pro | Phe | Gly | Gin | Gly | Thr | Lys | Leu | Glu | íle | Lys | |||||
| 100 | 105 |
Claims (8)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Protilátka proti IL-Ιβ, ktorá má antigénmi väzbovú špecificitu na antigénny epitop zrelého humánneho IL-Ιβ, ktorý zahŕňa slučku obsahujúcu zvyšky Gly22, Pro23, Tyr24 a Glu25, a ktorá je schopná inhibovať naviazanie IL-Ιβ na jeho receptor, a pričom molekula viažuca IL-Ιβ obsahuje väzbové miesto pre antigén obsahujúce aspoň jednu variabilnú doménu ťažkého reťazca imunoglobulínu (VH), ktorá obsahuje v sekven10 cii hypervariabilné úseky CDR1, CDR2 a CDR3, ako sú znázornené v SEQ ID NO: 1, t. j. CDR1, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Ser-Tyr-Trp-Ile-Gly, CDR2, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Ile-Ile-Tyr-Pro-Ser-Asp-Ser-Asp-Thr-Arg-Tyr-Ser-Pro-Ser-Phe-Gln-Gly a CDR3, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Tyr-Thr-Asn-Trp-Asp-Ala-Phe-Asp-Ile, a pričom molekula viažuca IL-β obsahuje väzbové miesto pre antigén obsahujúce aspoň jednu variabilnú doménu ľahkého reťazca imunoglobulínu (VL), v ktorej obsahuje15 v sekvencii hypervariabilné úseky CDR1‘, CDR2‘ aCDR3‘, ako je znázornené na SEQ ID NO: 2, t. j.SK 288054 Β6CDR1‘, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Ala, CDR2‘, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Asp-Ala-Ser-Asn-Arg-Ala-Thr a CDR3‘, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu Gln-Gln-Arg-Ser-Asn-Trp-Met-Phe-Pro.
- 2. Molekula viažuca IL-β, podľa nároku 1, ktorá je humánnou protilátkou.
- 3. Molekula viažuca IL-1 β, podľa niektorého z nárokov 1 - 2 na použitie ako liečivo.
- 4. Použitie molekuly viažucej IL-1 β podľa niektorého z nárokov 1 - 2 na výrobu liečiva na prevenciu alebo liečenie IL-1 sprostredkovaného ochorenia alebo poruchy zvolených z akútnych a hyperakútnych zápalových reakcií, akútnych infekcií, septického šoku, endotoxického šoku, syndrómu respiračnej poruchy dospelých, meningitídy, pneumónie; a ťažkých popálenín; kachexie alebo syndrómu chradnutia, rakoviny, dysfunkcie orgánov, kachexie súvisiacej s AIDS; alebo na prevenciu alebo liečenie zápalových stavov, alergií a alergických stavov, hypersenzitívnych reakcií, autoimunitných ochorení, silných infekcií, odmietnutia orgánového alebo tkanivového transplantátu, autoimunitného ochorenia, artritídy, reumatoidnej artritídy, artritídy chronica progrediente, artritídy deformans, reumatických ochorení, zápalovej bolesti, hypersenzitivity, hypersenzitivity dýchacích ciest, kožnej hypersenzitivity, alergií, autoimunitných hematologických porúch, hemolytickej anémie, aplastickej anémie, anémie iba červených krviniek a idiopatickej trombocytopénie, systémového lupus erythematosus, polychondritidy, sklerodermy, Wegenerovej granulomatózy, dermatomyozitídy, chronickej aktívnej hepatitídy, myasténie gravis, psoriázy, Steven-Johnsonov syndrómu, idiopatickej sprue, autoimunitného zápalového ochorenia čriev, ulceratívnej kolitídy, Crohnovho ochorenia, syndrómu dráždivého čreva, endokrinnej oftalmopatie, Gravesovho ochorenia, sarkoidózy, sklerózy multiplex, primárnej biliámej cirhózy, juvenilného diabetes, diabetes mellitus typu I, uveitídy anterior a posterior, suchej keratokonjunktivitídy, jarnej keratokonjunktivitídy, fibrózy pľúcneho interstícia, psoriatickej artritídy a glomerulonefritídy, idiopatického nefrotického syndrómu, nefŕopatie s minimálnymi zmenami, astmy, bronchitídy, pneumokoniózy, emfýzému pľúc, a ďalších obštrukčných alebo zápalových ochorení dýchacích ciest, ochorení metabolizmu kostí, osteoartritídy, osteoporózy, ďalších zápalových artritíd, straty kostnej hmoty všeobecne, straty kostnej hmoty súvisiacej vekom, periodontálneho ochorenia, rakovín a IL-1 dependentných tumorov.
- 5. Prvý DNA konštrukt kódujúci ťažký reťazec alebo jeho fragment, ktorý obsahujei) prvú časť, ktorá kóduje variabilnú doménu obsahujúcu striedavo úseky rámca a hypervariabilné úseky, pričom hypervariabilné úseky sú v sekvencii CDR1, CDR2 a CDR3, ktorých aminokyselinové sekvencie sú uvedené v sekvencii SEQ ID NO: 1; pričom táto prvá časť začína kodónom, ktorý kóduje prvú aminokyselinu variabilnej domény a končí kodónom kódujúcim poslednú aminokyselinu variabilnej domény, a ii) druhú časť kódujúcu konštantný úsek ťažkého reťazca, ktorý začína kodónom kódujúcim prvú aminokyselinu konštantnej časti ťažkého reťazca a končí kodónom kódujúcim poslednú aminokyselinu konštantnej časti, po ktorom nasleduje stop kodón; a druhý DNA konštrukt kódujúci ľahký reťazec, ktorý obsahuje iii) prvú časť, ktorá kóduje variabilnú doménu obsahujúcu striedavo úseky rámca a hypervariabilné úseky; pričom hypervariabilné úseky sú CDR3' a prípadne CDRľ a CDR2', ktorých aminokyselinové sekvencie sú uvedené v sekvencii SEQ ID NO: 2; pričom táto prvá časť začína kodónom kódujúcim prvú aminokyselinu variabilnej domény a končí kodónom kódujúcim poslednú aminokyselinu variabilnej domény, a iv) druhú časť kódujúcu konštantný úsek ľahkého reťazca, ktorý začína kodónom kódujúcim prvú aminokyselinu konštantnej časti ľahkého reťazca a končí kodónom kódujúcim poslednú aminokyselinu konštantnej časti, po ktorom nasleduje stop kodón.
- 6. Expresný vektor schopný replikácie v prokaryotickej alebo eukaryotickej bunkovej línii, ktorý obsahuje DNA konštrukty podľa nároku 5.
- 7. Spôsob prípravy molekuly viažucej IL-Ιβ, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa (i) kultiváciu organizmu, ktorý je transformovaný expresným vektorom podľa nároku 6; a (ii) izoláciu molekuly viažucej IL-1 β z kultúry.
- 8. Farmaceutická kompozícia, vyznačujúca sa tým, že obsahuje protilátku proti IL-1 β podľa nároku 1 v kombinácii s farmaceutický prijateľným excipientom, riedidlom alebo nosičom.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GBGB0001448.0A GB0001448D0 (en) | 2000-01-21 | 2000-01-21 | Organic compounds |
| PCT/EP2001/000591 WO2001053353A2 (en) | 2000-01-21 | 2001-01-19 | Recombinant antibodies to human interkleukin-1 beta |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK10352002A3 SK10352002A3 (sk) | 2003-03-04 |
| SK288054B6 true SK288054B6 (sk) | 2013-03-01 |
Family
ID=9884137
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK1035-2002A SK288054B6 (sk) | 2000-01-21 | 2001-01-19 | Antibody to IL-1 beta, IL-1 beta binding molecule, its use and process for production, first DNA construct, expression vector and pharmaceutical composition |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US20030124617A1 (sk) |
| EP (1) | EP1248804B2 (sk) |
| JP (2) | JP3978338B2 (sk) |
| KR (1) | KR100697126B1 (sk) |
| CN (1) | CN1395581B (sk) |
| AR (1) | AR027253A1 (sk) |
| AT (1) | ATE346868T1 (sk) |
| AU (1) | AU772949B2 (sk) |
| BR (1) | BR0107661A (sk) |
| CA (1) | CA2396212C (sk) |
| CO (1) | CO5261584A1 (sk) |
| CY (1) | CY1107989T1 (sk) |
| CZ (1) | CZ302738B6 (sk) |
| DE (1) | DE60124863T3 (sk) |
| DK (1) | DK1248804T4 (sk) |
| ES (1) | ES2274865T5 (sk) |
| GB (1) | GB0001448D0 (sk) |
| HK (1) | HK1050013A1 (sk) |
| HU (1) | HUP0204156A3 (sk) |
| IL (2) | IL150551A0 (sk) |
| MX (1) | MXPA02007091A (sk) |
| MY (1) | MY155269A (sk) |
| NO (1) | NO329816B1 (sk) |
| NZ (1) | NZ519936A (sk) |
| PE (1) | PE20011219A1 (sk) |
| PL (1) | PL207642B1 (sk) |
| PT (1) | PT1248804E (sk) |
| RU (1) | RU2264413C2 (sk) |
| SI (1) | SI1248804T2 (sk) |
| SK (1) | SK288054B6 (sk) |
| TR (1) | TR200201780T2 (sk) |
| WO (1) | WO2001053353A2 (sk) |
| ZA (1) | ZA200205659B (sk) |
Families Citing this family (44)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB0001448D0 (en) * | 2000-01-21 | 2000-03-08 | Novartis Ag | Organic compounds |
| CA2411374C (en) | 2000-06-29 | 2012-10-30 | Abbott Laboratories | Dual specificity antibodies and methods of making and using |
| GB0020685D0 (en) | 2000-08-22 | 2000-10-11 | Novartis Ag | Organic compounds |
| WO2003064606A2 (en) * | 2002-01-28 | 2003-08-07 | Medarex, Inc. | Human monoclonal antibodies to prostate specific membrane antigen (psma) |
| GB0303337D0 (en) | 2003-02-13 | 2003-03-19 | Celltech R&D Ltd | Biological products |
| DE602004030586D1 (de) * | 2003-09-15 | 2011-01-27 | Oklahoma Med Res Found | Verfahren zur verwendung von cytokintests zur diagnose, behandlung und beurteilung von ankyloider spondylitis |
| ES2643760T3 (es) | 2004-02-06 | 2017-11-24 | University Of Massachusetts | Anticuerpos contra toxinas de Clostridium difficile y usos de los mismos |
| EP2361933A3 (en) * | 2005-01-26 | 2012-05-02 | Amgen Fremont Inc. | Antibodies against interleukin-1 beta |
| JO3058B1 (ar) * | 2005-04-29 | 2017-03-15 | Applied Molecular Evolution Inc | الاجسام المضادة لمضادات -اي ال-6,تركيباتها طرقها واستعمالاتها |
| ES2439709T3 (es) * | 2005-06-21 | 2014-01-24 | Xoma (Us) Llc | Anticuerpos y fragmentos de los mismos que se unen a la IL-1beta |
| JP2009513645A (ja) * | 2005-10-26 | 2009-04-02 | ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト | ＩＬ−１β化合物の新規使用 |
| US7935344B2 (en) | 2005-12-29 | 2011-05-03 | Centocor Ortho Biotech Inc. | Human anti-IL-23 antibodies, compositions, methods and uses |
| US7943328B1 (en) | 2006-03-03 | 2011-05-17 | Prometheus Laboratories Inc. | Method and system for assisting in diagnosing irritable bowel syndrome |
| BRPI0709977A2 (pt) * | 2006-04-14 | 2011-08-02 | Novartis Ag | uso de anticorpos de il-1 para o tratamento de distúrbios oftálmicos |
| US20080085524A1 (en) * | 2006-08-15 | 2008-04-10 | Prometheus Laboratories Inc. | Methods for diagnosing irritable bowel syndrome |
| EP2094306A2 (en) | 2006-12-20 | 2009-09-02 | XOMA Technology Ltd. | Treatment of il-1-beta related diseases |
| WO2008082651A2 (en) * | 2006-12-29 | 2008-07-10 | Abbott Laboratories | Dual-specific il-1a/ il-1b antibodies |
| BRPI0807987A2 (pt) | 2007-02-28 | 2014-06-24 | Schering Corp | Terapia de combinação para tratamento de distúrbios imunes. |
| CA3213888A1 (en) * | 2007-05-29 | 2008-12-04 | Novartis Ag | New indications for anti-il-i-beta therapy |
| EP2391650B1 (en) * | 2007-12-20 | 2014-10-15 | Xoma (Us) Llc | Methods for the treatment of gout |
| US20110189172A1 (en) * | 2008-06-06 | 2011-08-04 | Xoma Technology, Ltd. | Methods for the treatment of rheumatoid arthritis |
| WO2010028275A1 (en) | 2008-09-05 | 2010-03-11 | Xoma Technology Ltd. | METHODS FOR TREATING OR PREVENTING IL-1ß RELATED DISEASES |
| EP2493922B1 (en) | 2009-10-26 | 2017-02-15 | F. Hoffmann-La Roche AG | Method for the production of a glycosylated immunoglobulin |
| MX337586B (es) * | 2010-05-07 | 2016-03-11 | Xoma Us Llc | Anticuerpos anti-interleucina-1beta para usarse en el tratamiento de condiciones relacionadas con interleucina-1beta. |
| DE102010033565B4 (de) * | 2010-07-27 | 2012-06-21 | Tetec Tissue Engineering Technologies Ag | Marker zur Bestimmung von Chondrozyten |
| NZ707327A (en) | 2010-08-02 | 2017-01-27 | Regeneron Pharma | Mice that make binding proteins comprising vl domains |
| JP5866130B2 (ja) * | 2010-09-10 | 2016-02-17 | アペクシジェン， インコーポレイテッド | 抗ＩＬ−１β抗体およびその使用方法 |
| JP2014507137A (ja) | 2011-02-25 | 2014-03-27 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | Ａｄａｍ６マウス |
| LT3572517T (lt) | 2011-08-05 | 2021-04-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Humanizuotos universalios lengvosios grandinės pelės |
| DE102011083595A1 (de) | 2011-09-28 | 2013-03-28 | Bayer Pharma AG | Inhibition der Wirkung von Interleukin 1 beta zur Behandlung der Endometriose |
| JP6320300B2 (ja) | 2011-12-19 | 2018-05-09 | ゾーマ （ユーエス） リミテッド ライアビリティ カンパニー | 座瘡を治療するための方法 |
| EP3527070B1 (en) | 2011-12-20 | 2025-12-03 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Humanized light chain mice |
| PL2814843T3 (pl) | 2012-02-13 | 2020-11-16 | Agency For Science, Technology And Research | Ludzkie przeciwciała monoklonalne neutralizujące IL-β |
| MX379274B (es) | 2012-06-12 | 2025-03-10 | Regeneron Pharma | Animales no humanos humanizados con loci de cadena pesada de inmunoglobulina restringidos. |
| KR20160131118A (ko) | 2014-03-21 | 2016-11-15 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 상이한 결합 특징을 전시하는 vl 항원 결합 단백질 |
| EP3895528A1 (en) | 2014-03-21 | 2021-10-20 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals that make single domain binding proteins |
| EP3271403A1 (en) | 2015-03-19 | 2018-01-24 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-human animals that select for light chain variable regions that bind antigen |
| CA3092551A1 (en) | 2018-03-05 | 2019-09-12 | Janssen Biotech, Inc. | Methods of treating crohn's disease with anti-il23 specific antibody |
| CN110818793A (zh) * | 2018-08-14 | 2020-02-21 | 中山康方生物医药有限公司 | 抗IL-1β的抗体、其药物组合物及其用途 |
| CA3120237A1 (en) | 2018-11-20 | 2020-05-28 | Janssen Biotech, Inc. | Safe and effective method of treating psoriasis with anti-il-23 specific antibody |
| MX2021014302A (es) | 2019-05-23 | 2022-01-04 | Janssen Biotech Inc | Metodo para tratar la enfermedad inflamatoria del intestino con una terapia de combinacion de anticuerpos contra il-23 y tnf alfa. |
| WO2021234634A1 (en) | 2020-05-21 | 2021-11-25 | Janssen Biotech, Inc. | Method of treating inflammatory bowel disease with a combination therapy of antibodies to il-23 and tnf alpha |
| CN116063489B (zh) * | 2022-10-21 | 2026-01-30 | 杭州靶向食品科技有限公司 | 一种治疗痛风的单克隆抗体及其相应的组合物 |
| CN121511262A (zh) | 2023-06-28 | 2026-02-10 | 北京哲源科技有限责任公司 | 靶向pd-l1和il-1的双特异性抗体及其用途 |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4772685A (en) | 1985-10-02 | 1988-09-20 | Merck & Co., Inc. | Immunogenic peptides of human interleukin-1 and the corresponding anti-peptide antibodies |
| US4935343A (en) * | 1986-08-08 | 1990-06-19 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Monoclonal antibodies for interleukin-1β |
| FR2640146B1 (fr) * | 1988-12-08 | 1993-12-24 | Commissariat A Energie Atomique | Anticorps monoclonaux anti-interleukines 1(alpha) et 1(beta), leur procede de production et applications desdits anticorps a la detection des interleukines 1(alpha) et 1(beta) et en therapeutique |
| US5859205A (en) * | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
| GB8928874D0 (en) | 1989-12-21 | 1990-02-28 | Celltech Ltd | Humanised antibodies |
| GB9014932D0 (en) | 1990-07-05 | 1990-08-22 | Celltech Ltd | Recombinant dna product and method |
| JP3714683B2 (ja) * | 1992-07-30 | 2005-11-09 | 生化学工業株式会社 | 抗リウマチ剤 |
| US5429614A (en) | 1993-06-30 | 1995-07-04 | Baxter International Inc. | Drug delivery system |
| WO1995001997A1 (en) * | 1993-07-09 | 1995-01-19 | Smithkline Beecham Corporation | RECOMBINANT AND HUMANIZED IL-1β ANTIBODIES FOR TREATMENT OF IL-1 MEDIATED INFLAMMATORY DISORDERS IN MAN |
| US6051228A (en) | 1998-02-19 | 2000-04-18 | Bristol-Myers Squibb Co. | Antibodies against human CD40 |
| GB0001448D0 (en) * | 2000-01-21 | 2000-03-08 | Novartis Ag | Organic compounds |
-
2000
- 2000-01-21 GB GBGB0001448.0A patent/GB0001448D0/en not_active Ceased
-
2001
- 2001-01-18 MY MYPI20010226A patent/MY155269A/en unknown
- 2001-01-18 CO CO01003434A patent/CO5261584A1/es active IP Right Grant
- 2001-01-19 HU HU0204156A patent/HUP0204156A3/hu not_active Application Discontinuation
- 2001-01-19 SI SI200130698T patent/SI1248804T2/sl unknown
- 2001-01-19 NZ NZ519936A patent/NZ519936A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-01-19 DE DE60124863T patent/DE60124863T3/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-19 AT AT01905671T patent/ATE346868T1/de active
- 2001-01-19 PL PL356297A patent/PL207642B1/pl unknown
- 2001-01-19 PE PE2001000065A patent/PE20011219A1/es not_active Application Discontinuation
- 2001-01-19 AR ARP010100247A patent/AR027253A1/es active IP Right Grant
- 2001-01-19 CN CN018039529A patent/CN1395581B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-19 TR TR2002/01780T patent/TR200201780T2/xx unknown
- 2001-01-19 PT PT01905671T patent/PT1248804E/pt unknown
- 2001-01-19 JP JP2001553825A patent/JP3978338B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-19 SK SK1035-2002A patent/SK288054B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2001-01-19 CZ CZ20022531A patent/CZ302738B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-01-19 BR BR0107661-2A patent/BR0107661A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-01-19 IL IL15055101A patent/IL150551A0/xx unknown
- 2001-01-19 AU AU33697/01A patent/AU772949B2/en not_active Ceased
- 2001-01-19 EP EP01905671A patent/EP1248804B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-19 KR KR1020027009374A patent/KR100697126B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-19 RU RU2002121649/13A patent/RU2264413C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-01-19 WO PCT/EP2001/000591 patent/WO2001053353A2/en not_active Ceased
- 2001-01-19 MX MXPA02007091A patent/MXPA02007091A/es active IP Right Grant
- 2001-01-19 DK DK01905671.2T patent/DK1248804T4/da active
- 2001-01-19 CA CA2396212A patent/CA2396212C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-01-19 US US10/181,324 patent/US20030124617A1/en not_active Abandoned
- 2001-01-19 ES ES01905671T patent/ES2274865T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-01-19 HK HK03102022.5A patent/HK1050013A1/zh unknown
-
2002
- 2002-07-02 IL IL150551A patent/IL150551A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-07-05 NO NO20023266A patent/NO329816B1/no not_active IP Right Cessation
- 2002-07-16 ZA ZA2002/05659A patent/ZA200205659B/en unknown
-
2006
- 2006-07-11 US US11/484,472 patent/US7491392B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-12-29 CY CY20061101860T patent/CY1107989T1/el unknown
-
2007
- 2007-01-04 JP JP2007000148A patent/JP2007097598A/ja active Pending
-
2009
- 2009-01-09 US US12/351,007 patent/US20090232803A1/en not_active Abandoned
-
2011
- 2011-03-10 US US13/044,918 patent/US20110182894A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SK288054B6 (sk) | Antibody to IL-1 beta, IL-1 beta binding molecule, its use and process for production, first DNA construct, expression vector and pharmaceutical composition | |
| JP4271936B2 (ja) | ヒトＩＬ−１βに対する抗体 | |
| AU2001295490A1 (en) | Antibodies to human IL-1beta |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees |
Effective date: 20150119 |