SK287405B6 - Deriváty caloporozidu, liečivá s ich obsahom, spôsob prípravy týchto látok pomocou mikroorganizmu a tento mikroorganizmus - Google Patents
Deriváty caloporozidu, liečivá s ich obsahom, spôsob prípravy týchto látok pomocou mikroorganizmu a tento mikroorganizmus Download PDFInfo
- Publication number
- SK287405B6 SK287405B6 SK1118-2003A SK11182003A SK287405B6 SK 287405 B6 SK287405 B6 SK 287405B6 SK 11182003 A SK11182003 A SK 11182003A SK 287405 B6 SK287405 B6 SK 287405B6
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- physiologically acceptable
- formula
- compound
- well
- acceptable salts
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- SANKFKFXZIBMQR-BBDKHGEFSA-N 2-[(16r)-16-[(2r,3r,4r,5r)-2-acetyloxy-5-[(2s,3s,4s,5s,6r)-3-acetyloxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3,4,6-trihydroxyhexanoyl]oxyheptadecyl]-6-hydroxybenzoic acid Chemical class C([C@@H](C)OC(=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)OC(C)=O)CCCCCCCCCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O SANKFKFXZIBMQR-BBDKHGEFSA-N 0.000 title claims description 21
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 58
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 32
- 241000035902 Gloeoporus dichrous Species 0.000 claims abstract description 22
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 14
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 9
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims abstract description 5
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims abstract 6
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 12
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 8
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 8
- 125000000346 malonyl group Chemical group C(CC(=O)*)(=O)* 0.000 claims description 7
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 2
- 229940043378 cyclin-dependent kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 2
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940126074 CDK kinase inhibitor Drugs 0.000 claims 1
- 102100034770 Cyclin-dependent kinase inhibitor 3 Human genes 0.000 claims 1
- 101000945639 Homo sapiens Cyclin-dependent kinase inhibitor 3 Proteins 0.000 claims 1
- 239000002875 cyclin dependent kinase inhibitor Substances 0.000 claims 1
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108091007914 CDKs Proteins 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 7
- 102000003903 Cyclin-dependent kinases Human genes 0.000 description 6
- 108090000266 Cyclin-dependent kinases Proteins 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 6
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 5
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 5
- SANKFKFXZIBMQR-UHFFFAOYSA-N Caloporoside Natural products O1C(CO)C(O)C(O)C(OC(C)=O)C1OC(CO)C(O)C(O)C(OC(C)=O)C(=O)OC(C)CCCCCCCCCCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O SANKFKFXZIBMQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 5
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 5
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical class OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002143 fast-atom bombardment mass spectrum Methods 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 3
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N octanoic acid Chemical compound CCCCCCCC(O)=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- GZCGUPFRVQAUEE-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100005789 Caenorhabditis elegans cdk-4 gene Proteins 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N Ethyl methanesulfonate Chemical compound CCOS(C)(=O)=O PLUBXMRUUVWRLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical class Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine Chemical compound O=NN(C)C(=N)N[N+]([O-])=O VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical class OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001241 acetals Chemical class 0.000 description 2
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 2
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 2
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N decanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCC(O)=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N methanol-d1 Chemical compound [2H]OC OKKJLVBELUTLKV-VMNATFBRSA-N 0.000 description 2
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-N nonanoic acid Chemical compound CCCCCCCCC(O)=O FBUKVWPVBMHYJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N salicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1O YGSDEFSMJLZEOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000219496 Alnus Species 0.000 description 1
- 235000003840 Amygdalus nana Nutrition 0.000 description 1
- 244000296825 Amygdalus nana Species 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 235000003932 Betula Nutrition 0.000 description 1
- 241000219429 Betula Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 239000004604 Blowing Agent Substances 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005632 Capric acid (CAS 334-48-5) Substances 0.000 description 1
- 239000005635 Caprylic acid (CAS 124-07-2) Substances 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 102000016736 Cyclin Human genes 0.000 description 1
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 1
- 102000013701 Cyclin-Dependent Kinase 4 Human genes 0.000 description 1
- 108010025464 Cyclin-Dependent Kinase 4 Proteins 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N Daunomycin Natural products CCC1(O)CC(OC2CC(N)C(O)C(C)O2)c3cc4C(=O)c5c(OC)cccc5C(=O)c4c(O)c3C1 WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 230000010190 G1 phase Effects 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000610640 Homo sapiens U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 238000006945 Knorr synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 229910010082 LiAlH Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000005643 Pelargonic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 229940124034 Phospholipase C inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 241000219000 Populus Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011432 Prunus Nutrition 0.000 description 1
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 1
- 101001110823 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-A Proteins 0.000 description 1
- 101000712176 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-B Proteins 0.000 description 1
- 241000124033 Salix Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 102100040374 U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Human genes 0.000 description 1
- 241001106462 Ulmus Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 229910001514 alkali metal chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910001617 alkaline earth metal chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-UHFFFAOYSA-N alpha-D-glucopyranose Natural products OCC1OC(O)C(O)C(O)C1O WQZGKKKJIJFFOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000010775 animal oil Substances 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000011953 bioanalysis Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- PVEOYINWKBTPIZ-UHFFFAOYSA-N but-3-enoic acid Chemical compound OC(=O)CC=C PVEOYINWKBTPIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000012482 calibration solution Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009096 combination chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- LDHQCZJRKDOVOX-NSCUHMNNSA-N crotonic acid Chemical compound C\C=C\C(O)=O LDHQCZJRKDOVOX-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 1
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 1
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical group 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000002324 hematogenic effect Effects 0.000 description 1
- 201000005787 hematologic cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000011141 high resolution liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 230000002912 lymphogenic effect Effects 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- BUTPBERGMJVRBM-UHFFFAOYSA-N methanol;methylsulfinylmethane Chemical compound OC.CS(C)=O BUTPBERGMJVRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002446 octanoic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- DXGLGDHPHMLXJC-UHFFFAOYSA-N oxybenzone Chemical compound OC1=CC(OC)=CC=C1C(=O)C1=CC=CC=C1 DXGLGDHPHMLXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000003371 phospholipase C inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 1
- 229920003124 powdered cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000019814 powdered cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 235000014774 prunus Nutrition 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960004889 salicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 229930000044 secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- WSWCOQWTEOXDQX-MQQKCMAXSA-N sorbic acid group Chemical group C(\C=C\C=C\C)(=O)O WSWCOQWTEOXDQX-MQQKCMAXSA-N 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- LDHQCZJRKDOVOX-UHFFFAOYSA-N trans-crotonic acid Natural products CC=CC(O)=O LDHQCZJRKDOVOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 108010046845 tryptones Proteins 0.000 description 1
- 230000005740 tumor formation Effects 0.000 description 1
- 230000004222 uncontrolled growth Effects 0.000 description 1
- 229940005605 valeric acid Drugs 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
- C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Opisujú sa zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom R1, R2 a R3 nezávisle jeden od druhého znamenajú atóm vodíka alebo acylovú skupinu obsahujúcu 2 až 10 uhlíkových atómov; a R4 znamená atóm vodíka alebo skupinu -C(O)(CH2)nCOOH, kde n znamená 1 až 7; s tou výhradou, že R1, R2, R3 a R4 neznamenajú všetky atóm vodíka; ako aj ich fyziologicky prijateľné soli, liečivá s ich obsahom na ošetrovanie nádorových ochorení, spôsob prípravy týchto zlúčenín fermentáciou mikroorganizmu Gloeoporus dichrous (Fr. : Fr.) Bres. ST 001714, DSM 13784, alebo jeho mutácií, alebo variantov a tento mikroorganizmus.
Description
Predložený vynález sa týka nových účinných látok (derivátov caloporozidu), ktoré sú tvorené v priebehu fermentácie pomocou mikroorganizmu Gloeoporus dichrous Breš. ST001714, DSM 13784, spôsobu ich prípravy, ich použitia ako liečiv, liečiva s obsahom derivátov caloporozidu, a tiež mikroorganizmu Gloeoporus dichrous Breš. ST001714, DSM 13784.
Doterajší stav techniky
Caloporozid je prvý raz opísaný v roku 1994 ako inhibítor fosfolipázy C (W. Weber a kol., J. Antibiotics, 47, 1188 až 1194). V tom istom roku sa izolovali dva ďalšie podobné sekundárne metabolity (R. Shan a kol., Nat. Prod. Lett., 4, 171 až 178). Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) (ďalej) podľa predloženého vynálezu sa od týchto opísaných látok líšia svojou štruktúrou.
Rakovina je väčšinou smrteľne prebiehajúce ochorenie človeka a zvierat, ktoré je zapríčinené nekontrolovaným rastom telu vlastných buniek. Rakovina je označenie pre tvorbu zhubných nádorov (malignómov), neoplazmatov (nádorov, respektíve karcinómov) alebo pre malígne zvrhnutie, ako aj poruchy dozrievania bielych krviniek (leukémiu, rakovinu krvi). Rakovinové alebo nádorové bunky vznikajú premenou buniek telu vlastných. Zhubnosť rakovinovej bunky sa vyznačuje autonómiou rastu, to znamená schopnosťou infiltrovateľne, nespútané a bez začlenenia do stavebného plánu orgánu rásť, pričom sú porušované tkanivá. Istým príznakom malignity je tvorba nádoru vzdialených kolónií (metastáz) hematogénnym alebo lymfogénnym rozšírením nádorových buniek. Rakovina patrí k najčastejším príčinám úmrtí ľudí, a preto existuje veľká potreba spôsobov a prostriedkov na liečenie alebo ošetrovanie malígnych zvrhnutí.
Možnosti terapie malígnych nádorov zahŕňajú okrem, pokiaľ možno radikálnych, operatívnych odstránení nádorov, rádiologickú terapiu rôntgenovými lúčmi, lúčmi α, β, γ, imunoterapiu a chemoterapiu. Imunoterapia je v súčasnosti použiteľná len v obmedzenej miere. Pod chemoterapiou nádorov sa rozumie podávanie bunkových jedov (cytostatík) na ošetrovanie nádorov a nádorových buniek, ktoré zostali po lokálnom chirurgickom ošetrení alebo ožiarení. Tieto látky špecificky zasahujú určité procesy bunkového delenia, takže tkanivá s vysokým podielom deliacich sa buniek, ako je rýchlo rastúce nádorové tkanivo, reagujú citlivejšie. Použiť je možné alkylované zlúčeniny, ako napr. cyklofosfamid (The Merck Index, 12. vydanie, str. 463), antimetabolity, ako metotrexát (The Merck Index, 12. vydanie, str. 1025), alkaloidy, ako vincristín (The Merck Index, 12. vydanie, str. 1704) a antibiotiká, ako daunomycín (The Merck Index, 12. vydanie, str. 479), ako aj adriamycín (The Merck Index, 12. vydanie, str. 581 až 582). Všetky tieto činidlá však majú kvôli masívnym vedľajším účinkom veľkú nevýhodu, takže smrť pacientov je len odďaľovaná, ale nie odvrátená. Okrem toho sa pri zvrhlých (rakovinových) bunkách vyskytuje rezistencia proti použitému prostriedku. Potom súčasné liečivá už nepôsobia cytostaticky, ale vďaka vedľajším účinkom toxicky. Navyše sa ukázalo, že účinnosť kombinovaného, respektíve postupného, použitia cytostatík je vyššia ako pri jedinom cytostatiku (monoterapie), a je preto možné, že sa významné vedľajšie účinky pri polychemoterapii nesčítajú. Z týchto všetkých dôvodov sú nové chemoterapeutiká naliehavo potrebné, a preto celosvetovo hľadané.
Cyklín-dependentné kinázy (CDK = kinázy závislé od cyklínu) hrajú ústrednú úlohu pri regulácii bunkového cyklu. Katalyzujú fosforylačné reakcie a uvádzajú tak do chodu reakčnú kaskádu, ktorá v bunkovom cykle podnecuje prechod z G1 fázy (rastová fáza 1) do S fázy (syntetická fáza). Cyklín-dependentné kinázy preto predstavujú dobrý terapeutický cieľ na ošetrovanie rakoviny a iných ochorení s patologickou poruchou bunkovej proliferácie. Užitočnými liečivami na ošetrovanie pacientov s rakovinou by boli nízkomolekuláme inhibitory regulujúce bunkový cyklus a zabraňujúce nekontrolovanému bunkovému deleniu.
Podstata vynálezu
Teraz sa prekvapujúco zistilo, že kmeň mikroorganizmu Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784, dokáže produkovať vysoko účinné nové cytostatiká, ktoré inhibujú cyklín-dependentné kinázy vo veľmi nízkych koncentráciách.
Podstatou vynálezu sú preto účinné látky (deriváty caloporozidu) produkované kmeňom Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784, ako aj ich fyziologicky prijateľné soli, estery a zrejmé chemické ekvivalenty.
Predložený vynález sa v súlade s tým týka zlúčenín všeobecného vzorca (I)
v ktorom
R1, R2 a R3 nezávisle jeden od druhého znamenajú atóm vodíka alebo acylovú skupinu obsahujúcu 2 až 10 uhlíkových atómov, výhodne 2 až 6 atómov, obzvlášť 2 atómy; a R4 znamená atóm vodíka alebo skupinu -C(O)(CH2)nCOOH, kde n znamená 1 až 7, výhodne 1 až 3, obzvlášť výhodne 1 alebo 2;
s tou výhradou, že R1, R2, R3 a R4 neznamenajú všetky atóm vodíka;
ako aj ich fyziologicky prijateľných solí.
Acylové skupiny zlúčenín všeobecného vzorca (I) môžu byť priame alebo rozvetvené, nasýtené alebo raz alebo dvakrát nenasýtené.
Acylovou skupinou obsahujúcou 2 uhlíkové atómy sa myslí napríklad acetylová skupina.
Príklady nasýtených nerozvetvených acylových skupín sú zvyšky kyseliny octovej (C = 2), kyseliny propiónovej (C = 3), kyseliny maslovej (C = 4), kyseliny Valérovej (C = 5), kyseliny kaprónovej (C = 6), kyseliny enantovej (C = 7), kyseliny kaprylovej (C = 8), kyseliny pelargónovej (C = 9) a kyseliny kaprálovej (C = 10).
Príklady raz nenasýtených nerozvetvených acylových skupín sú zvyšky kyseliny akrylovej (C = 3), kyseliny krotónovej (C = 4) alebo kyseliny vinyloctovej (C = 4).
Príkladom dvojnásobne nenasýtenej nerozvetvenej acylovej skupiny je zvyšok kyseliny sorbovej (C = 6).
Caloporozidy sú slabo účinné antibiotiká, ktoré pozostávajú z kyseliny salicylovej a disacharidu. Obidve štruktúrne jednotky sú zviazané prostredníctvom alkylového reťazca. Cukrovou časťou zlúčeniny všeobecného vzorca môže byť disacharid pozostávajúci vždy z D-pyranózy aldohexózy (ako napr. D-glukopyranózy alebo D-galaktopyranózy) a -ónovej kyseliny aldohexózy (napr. kyseliny D-glukónovej). Výhodnou cukrovou časťou je kyselina D-manopyranozyl-D-manónová, ktorá je nesubstituovaná alebo je substituovaná substituentmi R2, R3 a/alebo R4, ako sú definované skôr.
Vynález sa ďalej týka
a) zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 znamená acetylovú skupinu; R2 = R3 = R4 = atóm vodíka (= caloporozid B: sumárny vzorec: C38H62O|6, molekulová hmotnosť 774,9), ako aj jej fyziologicky prijateľnej soli;
b) zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 = R3 = acetylová skupina; R2 = atóm vodíka; R4 = malonylová skupina (= caloporozid C: sumárny vzorec: C43H66O20, molekulová hmotnosť 902,99), ako aj jej fyziologicky prijateľnej soli;
c) zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 = R2 = atóm vodíka; R3 = acetylová skupina; R4 = malonylová skupina (= caloporozid D: sumárny vzorec: C4]H640i9, molekulová hmotnosť 806,96), ako aj jej fyziologicky prijateľnej soli;
d) zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 = R3 = atóm vodíka; R2 = acetylová skupina; R4 = malonylová skupina (= caloporozid E: sumárny vzorec: C4iH64Oi9, molekulová hmotnosť 806,96), ako aj jej fyziologicky prijateľnej soli;
e) zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom R1 = R2 = R4 = atóm vodíka; R3 = acetylová skupina (= caloporozid F: sumárny vzorec: C38H62O16, molekulová hmotnosť 774,9), ako aj jej fyziologicky prijateľnej soli.
Centrá chirality môžu byť v zlúčeninách všeobecného vzorca (I), ak nie je uvedené inak, v konfigurácii R- alebo S-. Vynález sa týka tak opticky čistých zlúčenín, ako i zmesí stereoizomérov, ako aj zmesí enantiomérov a zmesí diastereomérov.
Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) je možné podľa vynálezu získať fermentáciou pomocou mikroorganizmu Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784, alebo jedným z jeho variantov alebo mutácií za vhodných podmienok v kultivačnom médiu, pokiaľ sa v kultivačnom médiu nehromadí jeden alebo viac derivátov caloporozidu všeobecného vzorca (I). Následnou izoláciou zlúčenín a prípadne konverziou na chemické ekvivalenty, ako aj ich fyziologicky prijateľné soli, sa získajú deriváty caloporozidu.
Predložený vynález sa v súlade s tým ďalej týka spôsobu prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kto rý sa vyznačuje tým, že sa fermentuje mikroorganizmus Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784, alebo jeden z jeho variantov alebo mutácií za vhodných podmienok v kultivačnom médiu, pokiaľ sa v kultivačnom médiu nehromadí jedna alebo viac výsledných zlúčenín a následne sa zlúčeniny izolujú a prípadne sa prevedú na chemické ekvivalenty a/alebo fyziologicky prijateľné soli.
Výhodne sa kmeň ST 001714, DSM 13784, jeho mutácia a/alebo varianty fermentuje v živnom roztoku alebo pevnom médiu (označovanom tiež ako kultivačné médium) so zdrojmi uhlíka a dusíka, ako aj obvyklými anorganickými soľami, pokiaľ sa v kultivačnom médiu nehromadia zlúčeniny podľa vynálezu, následne sa zlúčeniny izolujú z kultivačného média a prípadne sa rozdelia na jednotlivé aktívne zložky.
Spôsob podľa vynálezu je možné použiť na fermentáciu v laboratórnom meradle (v rozsahu mililitrov až litrov) a v priemyselnom meradle (v kubických metroch).
Kmeň Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714 sa rozmnožil v predkultúre. Izolát sa uložil dňa 14. decembra 1999 za podmienok budapeštianskej zmluvy u Deutsche Sammlung von Mikroorganismen u Zellkulturen GmbH (Nemeckej zbierky mikroorganizmov a bunkových kultúr), Mascheroder Weg lb, 3300 Braunschweig, Nemecko, pod číslom DSM 13784.
Mikroorganizmus Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714 , DSM 13784 má biele mycélium a purpurovo sfarbené spóry. Vyskytuje sa na organizme Betula, môže však napádať tiež iných hostiteľov, napríklad Alnus, Salix, Populus, Ulmus, Prunus.
Namiesto kmeňa Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784, je možné tiež použiť jeho mutácie a varianty, ktoré syntetizujú jednu alebo viac zlúčenín podľa vynálezu. Tieto mutácie je možné vytvárať známymi spôsobmi, pomocou fyzikálnych prostriedkov, napríklad ožarovania, ako napríklad pomocou ultrafialového alebo rôntgenového žiarenia, alebo chemických mutagénov, ako je napríklad etylmetánsulfonát (EMS); 2-hydroxy-4-metoxybenzofenón (MOD) alebo N-metyl-N'-nitro-N-nitrózoguanidín (MNNG).
Vyhľadávanie mutácií a variantov, ktoré syntetizujú zlúčeniny podľa vynálezu, prebieha podľa nasledujúcej schémy:
lyofilizácia doskových kultúr;
- extrakcia lyofilizátov organickým rozpúšťadlom;
- extrakcia zlúčeniny z kultivačného fíltrátu s pevnými fázami;
- analýza pomocou HPLC, DC alebo pomocou testov biologickej účinnosti.
Ďalej opisované podmienky fermentácie platia pre mikroorganizmus Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, uložený izolát DSM 13784, ako aj jeho mutácie a varianty.
V živnom roztoku, ktorý obsahuje zdroj uhlíka a zdroj dusíka, ako aj obvyklé anorganické soli, produkuje mikroorganizmus Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784, deriváty caloporozidu.
Ako výhodné zdroje uhlíka sú na fermentáciu vhodné asimilovateľné uhľovodíky a cukrové alkoholy, ako je glukóza, laktóza, sacharóza alebo D-manitol, ako aj prirodzené produkty obsahujúce uhlovodany, ako je napríklad sladový výťažok. Ako živiny obsahujúce dusík prichádzajú do úvahy: aminokyseliny, peptidy a proteíny, ako aj ich degradačné produkty, ako sú kazeín, peptóny alebo tryptóny, ďalej mäsové extrakty, kvasnicové extrakty, mleté semená, napríklad kukurice, pšenice, bôbov, sóje alebo bavlníka, destilačné rezíduá z produkcie alkoholu, mäsové múčky alebo kvasnicové extrakty, tiež však amóniové soli a nitráty, najmä však tiež synteticky, respektíve biosynteticky, získané peptidy. Anorganickými soľami, ktoré môže živný roztok obsahovať, sú napríklad chloridy, uhličitany, sírany alebo fosforečnany alkalických kovov alebo kovov alkalických zemín, železa, zinku, kobaltu a mangánu.
Tvorba zlúčenín podľa vynálezu prebieha obzvlášť dobre v živnom roztoku, ktorý obsahuje asi 0,05 až 5 %, výhodne 1 až 2 % sladového výťažku, 0,05 až 3 %, výhodne 0,05 až 1 % kvasnicového extraktu a 0,2 až 5 %, výhodne 0,5 až 2 % glukózy, 0,5 až 3 %, výhodne 0,5 až 3 % práškovej celulózy a stopy síranu amónneho. Údaje v percentách sú vždy vztiahnuté na hmotnosť celého živného roztoku.
V tomto živnom roztoku mikroorganizmus Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784, vytvára zmes derivátov caloporozidu. Podľa zloženia živného roztoku sa môže kvantitatívny podiel jedného alebo viacerých derivátov caloporozidu podľa vynálezu líšiť. Okrem toho sa môže pomocou zloženia média riadiť syntéza jednotlivých derivátov caloporozidu, takže jeden derivát caloporozidu nie je mikroorganizmom vytváraný vôbec, respektíve je vytváraný v množstve pod hranicou detegovateľnosti.
Kultivácia mikroorganizmu prebieha aeróbne, to znamená napríklad ponorená za pretrepávania alebo miešania v pretrepávacích bankách alebo fermentoroch, prípadne za zavádzania vzduchu alebo kyslíka, alebo na pevnom médiu. Je možné ju uskutočňovať v teplotnom rozsahu asi od 18 do 35°C, výhodne asi pri 20 až 30°C, najmä pri 25 až 30°C. Hodnota pH by sa mala pohybovať v rozsahu 5 a 8, výhodne v rozsahu 5,5 a 6,5. Mikroorganizmus sa za týchto podmienok všeobecne kultivuje počas 24 až 720 hodín, výhodne 288 až 576 hodín.
Kultivácia sa výhodne uskutočňuje v niekoľkých stupňoch, to znamená na začiatku sa v kvapalnom živnom médiu vytvorí jedna alebo viac predkultúr, tie sa potom preočkujú do vlastného produkčného média, to znamená hlavnej kultivácie, napríklad v objemovom pomere 1 : 10. Predkultúra sa napríklad získa preočkovaním mycélia do živného roztoku a jeho ponechaním rásť počas asi 36 až 120 hodín, výhodne 48 až 72 ho dm. Mycélium je možné napríklad získať ponechaním kmeňa rásť počas 3 až 40 dní, výhodne 10 až 30 dní, na pevnej alebo kvapalnej živnej pôde, napríklad sladokvasnicovom agare alebo zemiakodextrózovom agare.
Priebeh fermentácie je možné sledovať podľa hodnôt pH kultúry alebo objemu mycélia, ako aj pomocou chromatografických metód, ako je napr. kvapalinová chromatografia s vysokou rozlišovacou schopnosťou (HPLC), alebo testovaním biologickej aktivity.
Ďalej opisovaný spôsob izolácie slúži na vyčistenie derivátov caloporozidu podľa vynálezu.
Izolácia, respektíve čistenie, derivátu caloporozidu podľa vynálezu z kultivačného média sa uskutočňuje známymi spôsobmi s ohľadom na chemické, fyzikálne a biologické vlastnosti prirodzenej látky. Na testovanie koncentrácie príslušného derivátu caloporozidu v kultivačnom médiu alebo v jednotlivých stupňoch izolácie je možné použiť HPLC, pričom sa množstvo vytvorenej látky vhodne porovnáva s kalibračným roztokom.
Na izoláciu zlúčenín podľa vynálezu sa kultivačný bujón alebo kultúra s pevným médiom lyofilizuje, následne sa deriváty caloporozidu extrahujú z lyofilizátu vhodným, s vodou miešateľným, organickým rozpúšťadlom. Fáza organického rozpúšťadla obsahuje prirodzené látky podľa vynálezu, prípadne sa koncentruje vo vákuu a ďalej čistí.
Ďalšie čistenie jednej alebo viacerých zlúčenín podľa vynálezu sa uskutočňuje pomocou chromatografie na vhodných materiáloch, výhodne napr. na molekulových sitách, na silikagéli, oxide hlinitom, ionomeničoch alebo adsorbčných živiciach, respektívne na reverzných fázach (RP). Pomocou tejto chromatografie sa deriváty caloporozidu rozdelia. Chromatografia derivátov caloporozidu prebieha s pufŕovanými vodnými roztokmi alebo zmesou vodných a organických roztokov.
Zmesami vodných alebo organických roztokov sa myslia všetky s vodou miešateľné rozpúšťadlá, výhodne metanol, propanol a acetonitril, v koncentrácii 5 až 80 % rozpúšťadla, výhodne 20 až 50 % rozpúšťadla alebo tiež všetky pufrované vodné roztoky, ktoré sú miešateľné s organickými rozpúšťadlami.
Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) sa môžu vyskytovať tak v mycéliu, ako aj v kultivačnom filtráte, ale hlavné množstvo sa obvykle nachádza v biomase (mycéliu). Preto je vhodné separovať posledne menované od predtým menovaného pomocou filtrácie alebo odstreďovania. Filtrát sa extrahuje rozpúšťadlom nemiešajúcim sa s vodou, ako je 1-butanol, etylacetát, chloroform alebo podobne. Mycélium sa vhodne extrahuje metanolom alebo acetónom, ale je možné tiež použiť skôr uvedené rozpúšťadlá nemiešajúce sa s vodou. Použiteľnými puframi sú rovnaké pufry, ako sú uvedené skôr.
Rozdelenie derivátov caloporozidu na základe ich rozdielnej polarity sa uskutočňuje pomocou chromatografie s reverznou fázou, napríklad na MCI® (adsorbčná živica od Mitsubishi, Japonsko) alebo Amberlite XAD® (TOSOHAAS), na ďalších hydrofóbnych materiáloch, ako napríklad na fázach RP-8 alebo RP-18. Okrem toho je možné rozdelenie uskutočňovať pomocou chromatografie s normálnou fázou, napríklad na silikagéli, oxide hlinitom a podobne.
Chromatografia derivátov caloporozidu sa uskutočňuje pomocou pufrovaných alebo okyslených vodných roztokov alebo zmesí vodných roztokov s alkoholmi alebo inými, s vodou miešateľnými, organickými rozpúšťadlami. Ako organické rozpúšťadlá sa výhodne používajú propanol a acetonitril.
Pufŕovanými alebo okyslenými vodnými roztokmi sa rozumie napr. voda, fosfátový pufer, amóniumacetát, citrátový pufer v koncentrácii od 0 do 0,5 M, ako aj kyselina mravčia, kyselina octová, kyselina trifluóroctová alebo všetky obchodne dostupné, odborníkovi známe kyseliny, výhodne v koncentrácii od 0 do 1 %. Ako pufŕovaný vodný roztok je obzvlášť výhodný 0,1 % amóniumacetát.
Chromatografia prebieha s gradientom, ktorý začína 100 % vody a končí 100 % rozpúšťadla, výhodný je lineárny gradient od 20 do 100 % propanolu alebo acetonitrilu.
Alternatívne je možné uskutočňovať tiež gélovú chromatografiu alebo chromatografiu na hydrofóbnych fázach.
Gélová chromatografia sa uskutočňuje na polyakrylamidových alebo zmesových polymémych géloch, ako napríklad Biogel-P 2® (Biorad) alebo Fractogel TSK HW 40® (Merck, Nemecko, alebo Toso Haas, USA).
Poradie skôr uvedených chromatografii je zameniteľné.
Zlúčeniny podľa vynálezu sú v pevnom stave a v roztokoch s hodnotami pH v rozsahu 3 a 8, obzvlášť 5 a 7, stabilné a je možné ich preto spracovať do podoby bežných galenických prípravkov.
Jedna alebo viac zlúčenín zo zlúčenín podľa vynálezu je vhodná, vďaka svojim cenným farmakologickým vlastnostiam, na použitie v ľudskom alebo veterinárskom lekárstve ako liečivo.
Predložený vynález sa tak týka použitia zlúčeniny všeobecného vzorca (I) alebo jej fyziologicky prijateľnej soli na prípravu cytostatika na ošetrovanie nádorových ochorení.
Predložený vynález sa ďalej týka všetkých zrejmých chemických ekvivalentov zlúčenín všeobecného vzorca (I) podľa vynálezu. Týmito ekvivalentmi sú zlúčeniny, ktoré vykazujú nepatrný chemický rozdiel, teda majú rovnaké účinky alebo sa za miernych podmienok premieňajú na zlúčeniny podľa vynálezu. K uvedeným ekvivalentom patria napríklad tiež soli, redukčné produkty, estery, étery, acetály alebo amidy zlúčenín podľa vynálezu, ako aj ekvivalenty, ktoré môže odborník pripraviť štandardnými spôsobmi, okrem toho všet ky optické antipódy, diastereoméry a všetky stereoméme formy.
Fyziologicky prijateľnými soľami zlúčenín všeobecného vzorca (I) sa myslia tak organické, ako aj anorganické soli, ako sú opísané v Remington's Pharmaceutical Sciences (17. vydanie, str. 1418 (1985)). Vďaka fyzikálnej a chemickej stabilite a rozpustnosti sú pri kyslých skupinách výhodné, okrem iného, sodné, draselné, vápenaté a amónne soli; pri zásaditých skupinách sú výhodné, okrem iného, soli kyseliny chlorovodíkovej, kyseliny sírovej, kyseliny fosforečnej alebo karboxylových kyselín alebo sulfónových kyselín, ako napr. kyseliny octovej, kyseliny citrónovej, kyseliny benzoovej, kyseliny maleínovej, kyseliny fumarovej, kyseliny vínnej a kyseliny μ-toluénsulfónovej.
Estery, étery a acetály je možné pripraviť spôsobmi opísanými v literatúre, napr. v Advanced Organic Synthesis, 4. vydanie, J. March, John Wiley & Sons, 1992 alebo Protective Groups in Organic Synthesis, 3. vydanie, T.W. Greene & P.G.M. Wuts, John Wiley & Sons, 1999.
Karboxylovú skupinu je možné redukovať na alkohol napríklad pomocou LiAlH4.
Zo zlúčenín všeobecného vzorca (I) je možné predovšetkým odštiepiť glykozidovú časť pomocou alkalickej hydrolýzy (W. Weber a kol., J. Antibiotics, 47, 1188 až 1194). Následne je možné pomocou glykozylácie (napr. Kônigs-Knorrova reakcia) zaviesť ľubovoľný cukrový zvyšok. Príslušné metódy sú opísané v literatúre, napr. v Carbohydrate Chemistry, J.F. Kennedy, Oxford University Press, 1988.
Mechanizmus účinku derivátov caloporozidu je neznámy, ale významný účinok je možné preukázať.
Na preukázanie inhibítorov CDK sa používajú testy, pri ktorých sa stanovuje miera fosforylácie špecifického peptidového substrátu pomocou cyklín-dependentných kináz. Cyklín-dependentné kinázy sa aktivujú pomocou väzby na príslušný cyklín. [y-P]-fosfát sa pomocou enzýmu prenesie z [γ-Ρ]-ΑΤΡ na peptidový substrát. Test sa uskutočňuje na 96-jamkových mikrotitračných doskách. Stanovuje sa rádioaktivita [y-P]-fosfátov prenesených na substrát.
Hodnoty IC50 pre deriváty caloporozidu udáva tabuľka 1; sú to koncentrácie, ktoré inaktivujú CDK-4 na 50 %.
Tabuľka 1
| caloporozid B | 1,5 pmol |
| caloporozid C | 3,1 pmol |
| caloporozid D | 1,8 pmol |
| caloporozid E | 1,8 pmol |
| caloporozid F | 1,5 pmol |
Predložený vynález sa ďalej týka liečiva s obsahom aspoň jednej zlúčeniny podľa vynálezu.
Jednu alebo viac zlúčenín z derivátov caloporozidu podľa vynálezu je možné v zásade podávať samotné. Výhodné je použitie v zmesi s vhodnými pomocnými látkami alebo nosnými materiálmi. Ako nosný materiál je možné pri liečivách použiť bežné a farmakologicky prijateľné nosné materiály a/alebo pomocné látky.
Liečivá podľa vynálezu je možné všeobecne podávať orálne alebo parenterálne, ale rektálna aplikácia je v zásade tiež možná. Vhodnými pevnými alebo kvapalnými galenickými prípravkami sú napríklad granulát, prášok, tablety, dražé, (mikro)kapsuly, čapíky, sirup, emulzie, suspenzie, aerosól, kvapky alebo injikovateľné roztoky v podobe ampúl, ako aj preparáty s protrahovaným uvoľňovaním účinnej látky, pri ktorých príprave nachádzajú využitie bežné nosné látky a prísady a/alebo pomocné látky, ako sú nadúvadlo, spojivo, poťahové činidlo, napučiavacie činidlo, glidant alebo lubrikant, ochuťovadlá, sladidlo alebo solubilizačné činidlo. Ako často používané nosné alebo pomocné látky je možné menovať napríklad uhličitan horečnatý, oxid titaničitý, laktózu, manitol a ďalšie cukry, mastenec, mliečny proteín, želatína, Škroby, vitamíny, celulóza a jej deriváty, živočíšne a rastlinné oleje, polyetylénglykol a rozpúšťadlá, ako sterilná voda, alkoholy, glycerín a viacnasýtené alkoholy.
Prípadne môžu byť dávkové jednotky na orálne podávanie mikroenkapsulované na oddialenie alebo predĺženie uvoľňovania po dlhší čas, ako napríklad potiahnutím alebo vložením účinnej látky v podobe častíc do vhodného polyméru, vosku a podobne.
Výhodne sa farmaceutické preparáty pripravujú a podávajú v podobe dávkových jednotiek, pričom každá jednotka obsahuje ako účinnú zložku určitú dávku jednej alebo viacerých zlúčenín z derivátov caloporozidu podľa vynálezu. Pri použití pevných dávkových foriem, ako sú tablety, kapsuly a čapíky, môže táto dávka predstavovať až asi 500 mg, výhodne však asi 0,1 až 200 mg, a pri injekčných roztokoch v podobe ampúl až asi 200 mg, výhodne však asi 0,5 až 100 mg, na deň.
Podávané denné dávky závisia od telesnej hmotnosti, veku, pohlavia a stavu cicavca. Podľa podmienok je však možné použiť tiež vyššie alebo nižšie denné dávky. Podávanie dennej dávky je možné uskutočňovať prostredníctvom jedného podania v podobe jedinej dávkovej jednotky alebo viac menších dávkových jednotiek, ale tiež prostredníctvom viacnásobného podania rozdelených dávok v určitých intervaloch.
Liečivá podľa vynálezu je možné pripravovať tak, že sa jedna alebo viac zlúčenín podľa vynálezu s bežnými nosnými látkami, ako aj prípadne prísadami a/alebo pomocnými látkami, vpraví do vhodnej dávkovej formy.
Nasledujúce príklady uskutočnenia vynálezu majú slúžiť na ďalšie dokreslenie predloženého vynálezu. Percentuálne údaje sa vzťahujú na hmotnosť. Zmesové pomery pri kvapalinách sa vzťahujú na objem, ak nie je uvedené inak.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Príprava glycerínovej kultúry Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784
100 ml živného roztoku (sladový výťažok 2,0 %, kvasnicový extrakt 0,2 %, glukóza 1,0 %, (NH4)2HPO4 0,05 %, pH 6,0) v sterilnej Erlenmeyerovej banke s objemom 300 ml sa naočkuje kmeňom Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784 a inkubuje sa pri 25 °C a 140 rpm (otáčkach za minútu) na rotačnej trepačke počas 7 dní. Následne sa 1,5 ml tejto kultúry zriedi 2,5 ml 80 % glycerínu a uchováva pri -135 °C.
Príklad 2
Príprava predkultúry Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784 v Erlenmeyerovej banke ml živného roztoku (sladový výťažok 2,0 %, kvasnicový extrakt 0,2 %, glukóza 1,0 %, (NH4)2HPO4 0,05 %, pH 6,0) v sterilnej Erlenmeyerovej banke s objemom 100 ml sa naočkuje kmeňom Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784 a inkubuje sa pri 25 °C a 140 rpm (otáčkach za minútu) na rotačnej trepačke počas 4 dni. Práve 2 ml tejto predkultúry sa následne naočkujú dosky pri príprave hlavnej kultúry.
Príklad 3
Príprava hlavnej kultúry Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784 na doskách s pevným médiom
Sterilné dosky s rozmermi 25 x 25 cm (Nunc) sa zalejú 200 ml nasledujúceho živného roztoku: 20 g/1 sladového výťažku, 2 g/1 kvasnicového extraktu, 10 g/1 glukózy a 0,5 g/1 (NH4)2HPO4, pH 6,0. Tieto dosky sa vždy naočkujú 2 ml predkultúry. Maximálna produkcia jednej alebo viacerých zlúčenín podľa vynálezu sa dosiahne asi po 480 hodinách.
Príklad 4
Produkcia derivátov caloporozidu
Pripraví sa 50 kusov dosiek s rozmermi 25 x 25 cm a naočkujú sa predkultúrou: Živné médium:
g/1 sladového výťažku, g/1 kvasnicového extraktu, g/1 glukózy,
0,5 g/1 (NH4)2HPO4, pH 6,0 (pred sterilizáciou). Inkubačný čas: 480 hodín. Inkubačná teplota: 25°C.
Príklad 5
Izolácia caloporozidovej zmesi z doskových kultivácií Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784
Po dokončení fermentácie Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784 sa doskové kultivácie získané v príklade 3 lyofilizujú a lyofílizát sa extrahuje 5 1 metanolu. Účinnú látku obsahujúci metanolový roztok sa filtráciou zbaví rezídua a koncentruje vo vákuu. Koncentrát sa zriedi vodou a nanesie sa na pripravený 1,01 stĺpec MCI GEL, CHP20P. Elúcia sa uskutočňuje s gradientom od vody po 100 % acetonitril. Prietok stĺpcom (25 ml/min.) sa odoberá po frakciách (každá 25 ml) a frakcie obsahujúce deriváty caloporozidu (od 40 % do 100 % acetonitrilu) sa zhromažďujú. Koncentráciou vo vákuu a následnou lyofilizáciou sa získa 8,5 g žltohnedého prášku.
Príklad 6
Predbežné delenie derivátov caloporozidu pomocou RP18 chromatografie
0,5 g produktu získaného v príklade 4 sa nanesie na stĺpec Nucleosil® 100-7 C18 HD (veľkosť: 40 mm x x 250 mm). Eluuje sa gradientom od 20 % acetonitrilu (+ voda s 0,1 % prídavkom amóniumacetátu) po 100 % acetonitril za rýchlosti prietoku 35 ml/min. Výtok zo stĺpca sa odoberá po frakciách (35 ml). Deriváty caloporozidu sa prevažne nachádzajú vo frakciách 39 až 68. Zhromažďujú sa, vo vákuu sa odstráni rozpúšťadlo a následne sa lyofilizujú. Pritom sa získa caloporozid B (22,4 mg) a F (10,5 mg) už s čistotou > 95 %. Caloporozid C (frakcia 41; 43,4 mg), D (frakcia 43 až 45; 76,2 mg) a E (frakcia 43 až 45; 76,2 mg) sa získajú s čistotou asi 70 % a preto sa ešte ďalej chromatograficky čistia.
Príklad 7
Čistenie caloporozidu C, D a E mg v príklade 5 izolovaného a upraveného caloporozidu C sa nanesie na stĺpec LUNA® 5 μ C 18(2) (veľkosť: 10 mm x 250 mm) a chromatografuje sa gradientom od 25 do 35 % acetonitrilu v 0,1 % amóniumacetát/voda. Rýchlosť prietoku elučného média predstavuje 6,5 ml/min., veľkosť frakcií 6,5 ml. Vo frakciách 35 až 42 sa nachádza caloporozid C. Lyofilizáciou uvedených frakcií sa získa caloporozid C (7,5 mg) s čistotou > 95 %.
mg v príklade 5 izolovanej a upravenej zmesi caloporozidu D a E sa nanesie na stĺpec LUNA® 5 μ C18(2) (veľkosť: 10 mm x 250 mm) a chromatografuje sa gradientom od 30 do 40 % acetonitrilu v 0,1 % amóniumacetát/voda. Rýchlosť prietoku elučného média predstavuje 6,5 ml/min., veľkosť frakcií 6,5 ml. Vo frakciách 18 a 19 sa nachádza caloporozid D, vo frakciách 20 až 21 caloporozid E. Lyofilizáciou uvedených frakcií sa získa caloporozid D (7,0 mg) a caloporozid E (6,0 mg) s čistotou > 95 %.
Fyzikálno-chemické, ako aj spektroskopické vlastnosti zlúčenín podľa vynálezu je možné nasledovne zhrnúť:
caloporozid B: Sumárny vzorec: Molekulová hmotnosť: UV maxima: ‘H- a 13C-NMR:
C38H62O16
774,9
208, 244,310 pozri tabuľka 2
FAB hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou ukazuje intenzívne MH+ pri
775,4120, v dobrej zhode s vypočítanou hmotou (pre C38H620i6, monoizotop) 775,4116. caloporozid C:
Sumárny vzorec: C43H66O20
Molekulová hmotnosť: 902,99
UV maxima: 208,244,310 'H- a 13C-NMR: pozri tabuľka 3
FAB hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou ukazuje intenzívne MH+ pri 903,4264, v dobrej zhode s vypočítanou hmotou (pre C36H71O25, monoizotop) 903,4284.
caloporozid D:
Sumárny vzorec: CíiH^Ois
Molekulová hmotnosť: 890,96
UV maxima: 208,244,310 'H- a 13C-NMR; pozri tabuľka 4
FAB hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou ukazuje intenzívne M+Na+ pri 883,3942, v dobrej zhode s vypočítanou hmotou (pre C^H^OigNa, monoizotop) 883,3939. caloporozid E:
Sumárny vzorec:
Molekulová hmotnosť: 890,96
U V maxima: 208,244,310 *H- a 13C-NMR: pozri tabuľka 4
FAB hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou ukazuje intenzívne M+Na+ pri 883,3942, v dobrej zhode s vypočítanou hmotou (pre C^H^OigNa, monoizotop) 883,3939. caloporozid F:
Sumárny vzorec: C38H62O16
Molekulová hmotnosť: 774,9
UV maxima: 208,244,310 ‘H- a i3C-NMR: pozri tabuľka 5
FAB hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou ukazuje intenzívne M+H+ pri 775,4128, v dobrej zhode s vypočítanou hmotou (pre C38H62O16, monoizotop) 775,4116.
m/z m/z m/z m/z m/z
Tabuľka 2 'H- a 13C-chemické posuny caloporozidu B v metanole-d4 a DMSO-df, pri 300 K
| DMSO | MeOD | DMSO | MeOH | |
| 1 | - | - | 171,24 | a) |
| 2 | - | - | a) | a) |
| 3 | - | - | 162,22 | 163,57 |
| 4 | 6,68 | 6,77 | 115,28 | 116,81 |
| 5 | 7,17 | 7,25 | -131,6 | b |
| 6 | 6,57 | 6,67 | 121,02 | -123,0 |
| 7 | - | - | 137,90 | 139,57 |
| 8 | a) | a) | a) | a) |
| 9 | a) | a) | a) | a) |
| 10-20 | 1,30-1,20 | 1,32-1,27 | 29,01-28,69 | 30,76-30,47 |
| 21 | 1,30 | 1,38/1,32 | 24,81 | 26,52 |
| 22 | 1,54/1,45 | 1,65/1,52 | 35,31 | 37,00 |
| 23 | 4,81 | 4,95 | 70,04 | 73,09 |
| 24 | 1,15 | 1,24 | 19,69 | 20,22 |
| ľ | - | - | 173,43 | 175,35 |
| 2' | 3,95 | 4,13 | 70,89 | 72,97 |
| 3' | 3,95 | 4,17 | 70,04 | 71,59 |
| 4' | 3,54 | 3,82 | 67,96 | 69,80 |
| 5' | 3,65 | 3,86 | 78,94 | 80,12 |
| 6' | 3,74/3,44 | 3,90/3,69 | 62,11 | 63,25 |
| 1 | 4,53 | 4,71 | 100,27 | 101,34 |
| 2 | 3,74 | 3,95 | 70,37 | 72,46 |
| 3 | 3,22 | 3,44 | 73,67 | 75,30 |
| 4 | 3,21 | 3,49 | 67,54 | 69,00 |
| 5 | 3,04 | 3,22 | 77,15 | 78,23 |
| 6 | 3,72/3,31 | 3,88/3,63 | 61,80 | 63,25 |
| Ac-C' | - | a) | - | a) |
| Ac-Me | a) | a) | a) | a) |
a) Pre tieto protóny/atómy uhlíka nebol v MeOD, respektíve DMSO, pozorovaný žiadny signál (agregácia)
Tabuľka 3 'H- a 13C-chemické posuny caloporozidu C v metanole-d4 pri 300 K
| *H | *0 | |
| 1 | - | 175,90 |
| 2 | - | 116,73 |
| 3 | - | 163,67 |
| 3-Ac-Me | a) | a) |
| 3-Ac-C' | - | a) |
| 4 | 6,73 | 116,73 |
| 5 | 7,16 | -132,6b) |
| 6 | 6,55 | 123,53 |
| 7 | - | 139,51 |
| 8 | 2,49 | 43,06 |
| 9 | 1,53 | 24,75 |
| 10-20 | 1,36-1,26 | 30,78-30,62 |
| 21 | 1,38/1,33 | 26,54 |
| 22 | 1,65/1,52 | 37,02 |
| 23 | 4,95 | 73,04 |
| 24 | 1,24 | 20,22 |
| ľ | - | 175,17 |
| 2' | 4,17 | 72,82 |
| 3' | 4,08 | 71,60 |
| ’H | 13C | |
| 4' | 3,71 | 69,79 |
| 5' | 4,07 | 76,38 |
| 6' | 4,60/4,14 | 66,43 |
| 7' | - | 170,55 |
| 8' | 3,27 c) | -44,8 |
| 9' | - | 173,12 |
| 1 | 4,93 | 99,40 |
| 2 | 5,33 | 73,40 |
| 3 | 3,72 | 73,40 |
| 4 | 3,42 | 69,34 |
| 5 | 3,34 | 78,19 |
| 6 | 3,89/3,62 | 63,11 |
| 2-Ac-Me | 2,11 | 21,17 |
| 2-Ac-C' | - | 172,56 |
a) Pre tieto jadrá sa nepozoroval žiadny signál (silné rozšírenie signálu).
b) Rozšírenie signálu.
c) Signál pre protóny v polohe 8' sa pozoroval len v čerstvom roztoku (rýchlejšia výmena oproti deutériu).
Tabuľka 4 'H- a 13C-chemické posuny caloporozidu D a E v metanole-d4 pri 300 K
| 'H caloporozid D | I3C caloporozid D | 'H caloporozid E | I3C caloporozid E | |
| 1 | - | - | 176,28 | 176,28 |
| 2 | - | - | 120,37 | 120,37 |
| 3 | - | - | 162,12 | 162,12 |
| 4 | 6,61 | 6,61 | 114,91 | 114,91 |
| 5 | 7,06 | 7,06 | 131,53 | 131,53 |
| 6 | 6,58 | 6,58 | 122,23 | 122,23 |
| 7 | - | - | 147,22 | 147,22 |
| 8 | 3,04 | 3,04 | 36,31 | 36,31 |
| 9 | 1,55 | 1,55 | 33,35 | 33,35 |
| 10-20 | 1,36-1,25 | 1,36-1,25 | 31,07-30,61 | 31,07-30,61 |
| 21 | 1,38/1,32 | 1,38/1,32 | 26,53 | 26,53 |
| 22 | 1,65/1,53 | 1,65/1,53 | 37,01 | 37,01 |
| 23 | 4,95 | 4,95 | 73,13 a) | 73,07 a) |
| 24 | 1,24 | 1,24 | 20,23 | 20,23 |
| ľ | - | - | 175,18 | 175,40 |
| 2' | 4,17 | 4,15 | 72,80 | 72,80 |
| 3' | 4,08 | 4,15 | 71,61 | 71,53 |
| 4' | 3,71 | 3,85 | 69,78 | 69,27 |
| 5' | 4,07 | 4,08 | 76,40 | 77,07 |
| 6' | 4,58/4,14 | 4,59/4,24 | 66,35 | 65,43 |
| 7' | - | - | -170,4 | -170,4 |
| 8' | 3,28 | 3,28 | -45,0 | -45,0 |
| 9' | - | - | -173,0 | -173,0 |
| 1 | 4,93 | 4,84 | 99,40 | 100,20 |
| 2 | 5,33 | 4,03 | 73,41 | 70,27 |
| 3 | 3,72 | 4,78 | 73,39 | 77,44 |
| 4” | 3,42 | 3,71 | 69,32 | 66,35 |
| 5 | 3,34 | 3,38 | 78,35 | 78,00 |
| 6” | 3,91/3,62 | 3,89/3,65 | 63,09 | 62,96 |
| 2/3-Ac-Me | 2,11 | 2,00 | 21,18 | 20,98 |
| 2/3-Ac-C' | - | - | 172,59 | 172,36 |
a) Tieto signály nebolo možné jednoznačne priradiť.
Tabuľka 5 'H- a 13C-chemické posuny caloporozidu F v metanole-d4 pri 300 K
| Ή | 13C | |
| 1 | - | 174,95 |
| 2 | - | 117,32 |
| 3 | - | 162,18 |
| 4 | 6,68 | 115,42 |
| 5 | 7,17 | 133,17 |
| 6 | 6,67 | 122,65 |
| 7 | - | 146,91 |
| 8 | 2,93 | 36,57 |
| 9 | 1,56 | 33,27 |
| 10-20 | 1,36-1,25 | 30,93-30,62 |
| 21 | 1,35 | 26,53 |
| 22 | 1,65/1,53 | 37,02 |
| 23 | 4,95 | 73,05 |
| 24 | 1,24 | 20,23 |
| ľ | - | 175,15 |
| 2' | 4,17 | 72,98 |
| 3' | 4,09 | 71,73 |
| 4' | 3,71 | 69,88 |
| 5' | 3,85 | 79,59 |
| 6' | 3,90/3,61 | 63,57 |
| 1 | 4,88 | 99,76 |
| 2 | 5,37 | 73,52 |
| 3 | 3,63 | 73,56 |
| 4 | 3,46 | 69,27 |
| 5 | 3,28 | 78,33 |
| 6 | 3,91/3,63 | 63,06 |
| Ac-C' | - | 173,03 |
| Ac-Me | 2,13 | 21,21 |
Príklad 8
Bioanalýza CDK-4 inhibítorov
S cieľom stanoviť hodnoty IC5() sa z prirodzených látok podľa vynálezu pripravili zásobné roztoky s koncentráciou 10 mmol. Na 384-jamkové dosky FlashPlates sa pri izbovej teplote v priebehu 2 hodín nanieslo 50 μΐ (50 pg/jamka) biotinylovaného peptidového substrátu a následne sa 3x premyli PBS pufrom. Pre reakciu sa na dosky napipetovalo 30 μΐ pufrom zriedeného roztoku derivátu caloporozidu a 20 μΐ vopred namiešaného roztoku ATP/cyklinDl/CDK4 (výsledná koncentrácia: 1 pCi 33Ρ-γ-ΑΤΡ, 2 pmol ATP a 1 pg enzýmovej zmesi). Po 2 hodinách reakčného času pri 37 °C sa dosky 3x premyli 80 μΐ 3 % kyseliny fosforečnej a následne 30 sekúnd merali v počítači MicroBeta. Stanovenie percentuálnej inhibície sa uskutočnilo pomocou matematických rovníc. Na stanovenie hodnôt IC50 sa testovalo 10 koncentrácií čerstvo zriedeného DMSO roztoku zlúčenín podľa vynálezu.
Claims (15)
1. Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) (I), v ktorom
R1, R2 a R3 nezávisle jeden od druhého znamenajú atóm vodíka alebo acylovú skupinu obsahujúcu 2 až 10 uhlíkových atómov; a
R4 znamená atóm vodíka alebo skupinu -C(O)(CH2)nCOOH, kde n znamená 1 až 7;
s tou výhradou, že R1, R2, R3 a R4 neznamenajú všetky atóm vodíka;
ako aj ich fyziologicky prijateľné soli.
2. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, kde
R1, R2 a R3 nezávisle jeden od druhého znamenajú atóm vodíka alebo acetylovú skupinu; a
R4 znamená atóm vodíka alebo malonylovú skupinu, to znamená n = 1;
ako aj jej fyziologicky prijateľné soli.
3. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 alebo 2, kde
R1 znamená acetylovú skupinu; a
R2, R3 a R4 znamenajú atóm vodíka;
ako aj jej fyziologicky prijateľné soli.
4. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 alebo 2, kde
R1 a R3 znamenajú acetylovú skupinu;
R2 znamená atóm vodíka; a
R4 znamená malonylovú skupinu;
ako aj jej fyziologicky prijateľné soli.
5. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 alebo 2, kde
R1 a R2 znamenajú atóm vodíka;
R3 znamená acetylovú skupinu; a
R4 znamená malonylovú skupinu;
ako aj jej fyziologicky prijateľné soli.
6. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 alebo 2, kde
R1 a R3 znamenajú atóm vodíka;
R2 znamená acetylovú skupinu; a
R4 znamená malonylovú skupinu; ako aj jej fyziologicky prijateľné soli.
7. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 alebo 2, kde
R1, R2 a R4 znamenajú atóm vodíka; a
R3 znamená acetylovú skupinu;
ako aj jej fyziologicky prijateľné soli.
8. Spôsob prípravy zlúčeniny všeobecného vzorca (I) alebo jej fyziologicky prijateľnej soli podľa jedného alebo viacerých z nárokov 1 až 7, vyznačujúci sa tým, že sa fermentuje mikroorganizmus Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784, respektíve jeden z jeho variantov alebo mutácií, vo vhodných podmienkach, izoluje sa jeden alebo viac derivátov caloporozidu a prípadne sa tieto prevedú na fyziologicky prijateľné soli.
9. Spôsob podľa nároku 8, vyznačujúci sa tým, že sa fermentácia uskutočňuje za aeróbnych podmienok, pri teplote v rozsahu 18 a 35 °C a pri pH v rozsahu 5 a 8.
10. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) alebo jej fyziologicky prijateľná soľ podľa jedného alebo viacerých z nárokov 1 až 7 na použitie ako liečivo.
11. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) alebo jej fyziologicky prijateľná soľ podľa jedného alebo viacerých z nárokov 1 až 7 na použitie ako inhibítor cyklín-dependentnej kinázy.
12. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca (I) alebo jej fyziologicky prijateľnej soli podľa jedného alebo viacerých z nárokov 1 až 7 na prípravu liečiv na ošetrovanie rakoviny alebo iných ochorení s patologickou poruchou bunkovej proliferácie.
13. Liečivo, vyznačujúce sa tým, že obsahuje aspoň jednu zlúčeninu všeobecného vzorca (I) alebo jej fyziologicky prijateľnú soľ podľa jedného alebo viacerých z nárokov 1 až 7.
14. Spôsob prípravy liečiva podľa nároku 13,vyznačujúci sa tým, že sa aspoň jedna zlúčenina všeobecného vzorca (I) alebo jej fyziologicky prijateľná soľ podľa jedného alebo viacerých z nárokov 1 až 7 s vhodnými pomocnými a/alebo nosnými látkami vpraví do formy vhodnej na podávanie.
15. Mikroorganizmus Gloeoporus dichrous (Fr.:Fr.) Breš. ST 001714, DSM 13784.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE10111682A DE10111682B4 (de) | 2001-03-09 | 2001-03-09 | Caloporosid-Derivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung |
| PCT/EP2002/001916 WO2002072110A1 (de) | 2001-03-09 | 2002-02-23 | Caloporosid-derivate, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK11182003A3 SK11182003A3 (sk) | 2004-02-03 |
| SK287405B6 true SK287405B6 (sk) | 2010-09-07 |
Family
ID=7677071
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK1118-2003A SK287405B6 (sk) | 2001-03-09 | 2002-02-23 | Deriváty caloporozidu, liečivá s ich obsahom, spôsob prípravy týchto látok pomocou mikroorganizmu a tento mikroorganizmus |
Country Status (29)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6596694B2 (sk) |
| EP (1) | EP1372670B1 (sk) |
| JP (1) | JP4206271B2 (sk) |
| KR (1) | KR100862546B1 (sk) |
| CN (1) | CN1296047C (sk) |
| AR (1) | AR035437A1 (sk) |
| AT (1) | ATE296104T1 (sk) |
| BG (1) | BG108151A (sk) |
| BR (1) | BR0207953A (sk) |
| CA (1) | CA2439857C (sk) |
| CZ (1) | CZ20032426A3 (sk) |
| DE (2) | DE10111682B4 (sk) |
| EE (1) | EE05184B1 (sk) |
| ES (1) | ES2242011T3 (sk) |
| HR (1) | HRP20030712B1 (sk) |
| IL (2) | IL157793A0 (sk) |
| ME (1) | MEP56208A (sk) |
| MX (1) | MXPA03007550A (sk) |
| MY (1) | MY127289A (sk) |
| NO (1) | NO329936B1 (sk) |
| NZ (1) | NZ528070A (sk) |
| PE (1) | PE20020895A1 (sk) |
| PL (1) | PL205951B1 (sk) |
| PT (1) | PT1372670E (sk) |
| RS (1) | RS50275B (sk) |
| RU (1) | RU2282634C2 (sk) |
| SK (1) | SK287405B6 (sk) |
| WO (1) | WO2002072110A1 (sk) |
| ZA (1) | ZA200306475B (sk) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6989386B2 (en) * | 2002-04-30 | 2006-01-24 | Dana-Farber Cancer Institute | Pharmaceutically active ornithine derivatives, ammonium salts thereof and methods of making same |
| JP2010213686A (ja) * | 2009-02-20 | 2010-09-30 | Kao Corp | 微生物醗酵生産物の製造方法 |
| US20150353542A1 (en) | 2013-01-14 | 2015-12-10 | Amgen Inc. | Methods of using cell-cycle inhibitors to modulate one or more properties of a cell culture |
| CN106148453B (zh) * | 2016-07-14 | 2019-05-17 | 河南农业大学 | 一种利用地黄毛状根生产毛蕊花糖苷的方法 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6005099A (en) * | 1993-11-17 | 1999-12-21 | Laboratoires Om S.A. | Glucosamine disaccharides, method for their preparation, pharmaceutical composition comprising same, and their use |
-
2001
- 2001-03-09 DE DE10111682A patent/DE10111682B4/de not_active Expired - Fee Related
-
2002
- 2002-02-23 CN CNB028074793A patent/CN1296047C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-23 BR BR0207953-4A patent/BR0207953A/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-02-23 HR HR20030712A patent/HRP20030712B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2002-02-23 EE EEP200300433A patent/EE05184B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2002-02-23 WO PCT/EP2002/001916 patent/WO2002072110A1/de not_active Ceased
- 2002-02-23 PT PT02719903T patent/PT1372670E/pt unknown
- 2002-02-23 PL PL363320A patent/PL205951B1/pl not_active IP Right Cessation
- 2002-02-23 KR KR1020037011818A patent/KR100862546B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-23 AT AT02719903T patent/ATE296104T1/de active
- 2002-02-23 NZ NZ528070A patent/NZ528070A/en unknown
- 2002-02-23 MX MXPA03007550A patent/MXPA03007550A/es active IP Right Grant
- 2002-02-23 SK SK1118-2003A patent/SK287405B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2002-02-23 CA CA2439857A patent/CA2439857C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-23 ES ES02719903T patent/ES2242011T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-23 IL IL15779302A patent/IL157793A0/xx unknown
- 2002-02-23 ME MEP-562/08A patent/MEP56208A/xx unknown
- 2002-02-23 DE DE50203198T patent/DE50203198D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-23 CZ CZ20032426A patent/CZ20032426A3/cs unknown
- 2002-02-23 EP EP02719903A patent/EP1372670B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-02-23 RS YU67203A patent/RS50275B/sr unknown
- 2002-02-23 RU RU2003129888/04A patent/RU2282634C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-02-23 JP JP2002571069A patent/JP4206271B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-02-26 PE PE2002000158A patent/PE20020895A1/es not_active Application Discontinuation
- 2002-03-07 AR ARP020100828A patent/AR035437A1/es active IP Right Grant
- 2002-03-08 US US10/092,538 patent/US6596694B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-03-08 MY MYPI20020838A patent/MY127289A/en unknown
-
2003
- 2003-08-20 ZA ZA200306475A patent/ZA200306475B/en unknown
- 2003-09-02 BG BG108151A patent/BG108151A/xx unknown
- 2003-09-07 IL IL157793A patent/IL157793A/en not_active IP Right Cessation
- 2003-09-08 NO NO20033965A patent/NO329936B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2012512224A (ja) | マクロラクトン誘導体、その製造方法、及びがんの処置のためのその使用 | |
| SK287405B6 (sk) | Deriváty caloporozidu, liečivá s ich obsahom, spôsob prípravy týchto látok pomocou mikroorganizmu a tento mikroorganizmus | |
| RU2357956C2 (ru) | Производные бенгамида, способ их получения и их применение для лечения раковых заболеваний | |
| EP2321322B1 (en) | Streptospirole derivatives | |
| AU2002250997B2 (en) | Use of thiolutin dioxide and its derivatives in the manufacture of a medicament for the treatment of CNS disorders and a process for the preparation thereof | |
| WO2005047275A1 (de) | 2-phenyl-benzofuran-derivate, verfahren zur ihrer herstellung und ihre verwendung | |
| JP4801307B2 (ja) | プルラフラビンおよびその誘導体、それらの製造方法および使用 | |
| HRP20020352A2 (en) | Aromatic di-keto derivatives, processes for their production and their use as pharmaceutical | |
| EP0955055A2 (en) | FGF inhibitor, angiogenesis inhibitor and antitumor agent containing complestatin or its derivative as effective ingredient | |
| SK286776B6 (sk) | Amycomycin, spôsob jeho prípravy a farmaceutická kompozícia, ktorá ho obsahuje | |
| JPH1017527A (ja) | 抗菌性物質ｂｅ−３９５８９類及びその製造法 | |
| HK1061655B (en) | Caloporoside derivatives, methods for the production thereof and their use |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees |
Effective date: 20120223 |