[go: up one dir, main page]

SK13292000A3 - Antagonisty vitronektínového receptora, spôsob ich výroby, farmaceutický prostriedok s ich obsahom, ich použitie a medziprodukty - Google Patents

Antagonisty vitronektínového receptora, spôsob ich výroby, farmaceutický prostriedok s ich obsahom, ich použitie a medziprodukty Download PDF

Info

Publication number
SK13292000A3
SK13292000A3 SK1329-2000A SK13292000A SK13292000A3 SK 13292000 A3 SK13292000 A3 SK 13292000A3 SK 13292000 A SK13292000 A SK 13292000A SK 13292000 A3 SK13292000 A3 SK 13292000A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
alkyl
phenyl
pyridinyl
mmol
methylamino
Prior art date
Application number
SK1329-2000A
Other languages
English (en)
Inventor
William H. Miller
John G. Gleason
Dirk Heerding
James M. Samanen
Irene N. Uzinskas
Peter J. Manley
Original Assignee
Smithkline Beecham Corporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Smithkline Beecham Corporation filed Critical Smithkline Beecham Corporation
Publication of SK13292000A3 publication Critical patent/SK13292000A3/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/74—Amino or imino radicals substituted by hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/42—One nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Description

Antagonisty vitronektínového receptora, spôsob ich výroby, farmaceutický prostriedok s ich obsahom, ich použitie a medziprodukty
Oblasť techniky
Vynález sa týka farmaceutický aktívnych zlúčenín, ktoré inhibujú vitronektínový receptor a sú užitočné na liečenie zápalov, rakoviny a kardiovaskulárnych ochorení, ako sú ateroskleróza a restenóza, a chorôb, kde je faktorom kostná resorpcia, ako je osteoporóza.
Doterajší stav techniky
Integríny sú nadskupinou adhéznych bunkových receptorov, ktorými sú transmembránové glykoproteíny, nachádzajúce sa na rozmanitých bunkách.
Tieto adhézne receptory bunkového povrchu zahrnujú gpllb/llla (fibrinogénový receptor) a avp3 (vitronektínový receptor). Fibrinogénový receptor gpllb/llla sa nachádza na povrchu doštičiek a sprostredkuje agregáciu doštičiek a tvorbu hemostatického zhluku na mieste krvácajúcej rany. Philips a kol., Blood. 71,
831, 1988. Vitronektínový receptor ανβ3 sa nachádza na viacerých bunkách, vrátane endotelu, hladkého svalstva, osteoklastu a nádorových buniek, a teda má viaceré funkcie. ανβ3 receptor, nachádzajúci sa na membráne osteoklastových buniek, sprostredkuje adhéziu osteoklastov do kostnej hmoty, čo je kľúčový krok v procese kostnej resorpcie. Ross a kol., J. Biol. Chem. 262.
7703, 1987. Ochorením, charakterizovaným nadmernou kostnou resorpciou, je osteoporóza. ανβ3 receptor, nachádzajúci sa na bunkách hladkého svalu ľudskej aorty, sprostredkuje ich migráciu do neointimy, proces, ktorý môže viesť krestenóze po perkutánnej koronárnej angioplastike. Brown a kol.,
Cardiovascular Res. 28, 1815, 1994. Naviac, Brooks a kol., Celí 79, 1157,
1994, ukázali, že ανβ3 antagonista je schopný napomáhať regresii nádoru vyvolávaním apoptózy angiogénnych krvných ciev. Teda činidlá, ktoré blokujú vitronektínový receptor, by mohli byť užitočné pri liečení ochorení, ako sú osteoporóza, restenóza a rakovina.
·· ···· · · ·· · · • « · « · · · ··· · < · · · · · ··· · · 9 9
9 99 9999 99 9
-2V súčasnosti je známe, že vitronektínový receptor sa týka troch rozličných integrínov, označených ανβι, ανβ3θ ανβδ· Horton a kol., Int. J. Exp.
Pathol. 71, 741, 1990. ανβι viaže fibronektín a vitronektín. ανβ3 viaže veľké množstvo ligandov, vrátane fibrínu, fibrinogénu, laminínu, trombospondínu, vitronektínu, von Willebrandovho faktora, osteopontínu a kostného sialoproteínu I. ανβδ viaže vitronektín. Ukázalo sa, že vitronektínový receptor ανβδ sa zúčastňuje bunkovej adhézie viacerých typov buniek, vrátane mikrocievnych endotelovych buniek (Davis a kol., J. Celí. Biol. 51, 206, 1993), a jeho úloha vangiogenéze sa potvrdila. Brooks a kol., Science 264, 569,
1994. Tento integrín sa nachádza na krvných cievach v ľudskom granulačnom tkanive rany, ale nie v normálnej koži.
Je známe, že vitronektínový receptor sa viaže na proteíny kostnej hmoty, ktoré obsahujú tripeptidový Arg-Gly-Asp (alebo RGD) motív. Teda,
Horton a kol., Exp. Celí Res. 195. 368, 1991, uvádza, že RGD obsahujúce peptidy a protilátka (23C6) anti-vitronektínového receptora inhibujú zubnú resorpciu a šírenie buniek osteoklastmi. Okrem toho, Sato a kol., J. Celí Biol.
111. 1713, 1990, uvádza, že echistatín, peptid hadieho jedu, ktorý obsahuje RGD sekvenciu, je silným inhibítorom kostnej resorpcie v tkanivovej kultúre, a inhibuje upevnenie osteoklastov na kosť.
Teraz sa objavilo, že určité zlúčeniny sú silnými inhibítormi ανβ3 a ανβδ receptorov. Konkrétne sa objavilo, že takéto zlúčeniny sú silnejšími inhibítormi vitronektínového receptora než fibrinogénového receptora.
Podstata vynálezu
Tento vynález poskytuje zlúčeniny všeobecného vzorca I, ako je ďalej opísané, ktoré vykazujú farmakologickú aktivitu na inhibovanie vitronektínového receptora a sú užitočné pri liečení zápalu, rakoviny a kardiovaskulárnych ochorení, ako sú ateroskleróza a restenóza, a chorôb, kde je faktorom kostná resorpcia, ako je osteoporóza.
Tento vynález tiež poskytuje farmaceutický prostriedok, zahrnujúci zlúčeninu všeobecného vzorca I a farmaceutický nosič.
• · ···· ·· ·· · · • 9 · · · · · · · ·
-3• 4 · · · · ·· ·· · ·· ···· ·· ·
Tento vynález tiež poskytuje použitie zlúčenín podľa vynálezu na liečenie ochorení, ktoré sú sprostredkované vitronektínovým receptorom. Z konkrétneho hľadiska sú zlúčeniny podľa tohto vynálezu užitočné na liečenie aterosklerózy, restenózy, zápalu, rakoviny a chorôb, kde je faktorom kostná resorpcia, ako je osteoporóza.
Vynález zahrnuje zlúčeniny, ktoré sú silnejšími inhibítormi vitronektínového receptora než fibrinogénového receptora.
Podstatou vynálezu sú zlúčeniny všeobecného vzorca I (O t
kde R* je co2h —ch;
r’
I
n.^co2h r’ alebo_
X znamená CR’R’, NR', O alebo S;
Y znamená CR’R’, NR’, O alebo S;
A znamená H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, -S(O)rCF3l -CO2R9, -COR9, -CONR92, -Ci-6-alkyl, -Co-6-alkyl-Ar, -C0-6-alkyl-Het, Co-6-alkylC3-6-cykloalkyl, -S(O)kR9 alebo CH2N(Rf)2;
R1 znamená -Co-6-alkyl-Het-, -Co-6-alkyl-Ar, -Ci.6-alkyl, -H, -CN, -CH=CH2, -CsCH alebo -S(O)kRg;
R2 znamená
R>
Rfr //
N
NR—cr;—w —
-4·· ···· l : .·* • · · ·· ·· • · · · • 9 · ·· ···· • »
9
<?>„
NR — CR’2— W-
Wje -(CHR9)a-U-(CHR9)b-;
U je neprítomné alebo znamená CO, CR92, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONŔ, NŔCO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2, N=N, NR9NR9, NR9CR92, CR92NR9, CR92O, OCR92, C^C, CR9=CR9, Ar alebo Het;
G je NR®, S alebo O;
R9 je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3-7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo Ar-Co-6-alkyl; Rk je R9, -C(O)R9 alebo -C(O)ORf;
R1 je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3-7-cykloalkyl-Co-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl alebo Ci-e-alkyl, substituovaný jednou až tromi skupinami, vybranými z halogénu, CN, NR92, OR9, SR9, CO2R9 a CON(R9)2;
Rf je H, -Ci-6-alkyl alebo Ar-Co-e-alkyl;
R® je H, -Ci-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3-7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo (CH2)kCO2R9;
Rb a Rc sú nezávisle vybrané z H, -Ci-6-alkylu, Ar-C0-6-alkylu, Het-Co-6-alkylu alebo C3-6-cykloalkyl-C0-6-alkylu, halogénu, CF3, ORf, S(O)kRf, CORf, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, alebo Rb a Rc sú navzájom spojené, aby vytvorili päť- alebo šesť-členný aromatický alebo nearomatický, karbocyklický alebo heterocyklický kruh, voliteľne substituovaný až troma substituentami, vybranými z halogénu, CF3l C^-alkylu, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; alebo metyléndioxyskupiny;
Q1, Q2, Q3 a Q4 sú nezávisle N alebo C-Ry za predpokladu, že nie viac než jedno z Q1, Q2, Q3 a Q4 je N;
«· · · · φ • « · · 9 · · ··· ·· ···· ··· · · 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 99 9999 99 ·
-5R' je H, -Ci-e-alkyl, Ar-Co-e-alkyl alebo C3-6-cykloalkyl-Co-6-alkyl;
R je R’, -C(O)R’ alebo -C(O)OR’;
Ry je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-,
-CO2R9, -COR9 alebo -CONR92, alebo -Ci-6-alkyl voliteľne substituovaný halogénom, -OR9, -SR9, -CN, -NR9R”, -NO2, -CF3, R'S(O)r, -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92;
a je 0,1 alebo 2;
b je 0,1 alebo 2;
k je 0,1 alebo 2;
r je 0,1 alebo 2;
s je 0,1 alebo 2;
u je 0 alebo 1; a v je 0 alebo 1;
alebo ich farmaceutický prijateľnú soľ.
Vo výhodnom uskutočnení vynález poskytuje zlúčeniny všeobecného vzorca I, ktoré majú všeobecný vzorec la
kde
X je CR’R’, NR’, O alebo S;
Y je CR’R’, NR’, O alebo S;
A je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, -S(O)rCF3, -CO2R9, -COR9, -CONR92i -Ci-6-alkyl, -C0.6-alkyl-Ar, -C0-6-alkyl-Het, -C0-6-alkylCs-e-cykloalkyl, -S(O)kR9 alebo CH2N(Rf)2;
R1 je -Co-6-alkyl-Het-, -Co-6-alkyl-Ar, H, -CN alebo -S(O)kR9;
R2 je
·· ··· • · ···· · · · • · * · · · · ·· ·· i · · · · · · · ·· a ·· ···· ·· ·
-6R’ \
(?)„ (?)„
Wje -(CHR9)a-U-(CHR9)b-;
U je neprítomné alebo znamená CO, CR92, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92l CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONR', NŔCO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2, N=N, NR9NR9, NR9CR92, CR92NR9, CR92O, OCR92i C=C, CR9=CR9, Ar alebo Het;
G je NRe, S alebo O;
R9 je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3-7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo Ar-Co-e-alkyl; Rk je R9, -C(O)R9 alebo -C(O)ORf;
R1 je H, -Ci-6-alkyl, Het-C0-6-alkyl, C3-7-cykloalkyl-Co-6-alkyl, Ar-C0-6-alkyl alebo -Ci-6-alkyl, substituovaný jednou až tromi skupinami, vybranými z halogénu, CN, NR92i OR9, SR9, CO2R9 a CON(R9)2;
Rf je H, -Ci-6-alkyl alebo Ar-Co-6-alkyl;
R® je H, -Ci-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3-7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo (CH2)kCO2R9;
Rb a Rc sú nezávisle vybrané z H, -Ci.6-alkylu, Ar-Co-e-alkylu, Het-C0-6-alkylu alebo C3-6-cykloalkyl-C0-6-alkylu, halogénu, CF3, ORf, S(O)kRf, CORf, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, alebo Rb a Rc sú navzájom spojené, aby vytvorili päť- alebo šesťčlenný aromatický alebo nearomatický, karbocyklický alebo heterocyklický kruh, voliteľne substituovaný až troma substituentami, vybranými z halogénu, CF3, -Cvralkylu, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; alebo metyléndioxyskupiny;
Q1, Q2, Q3 a Q4 sú nezávisle N alebo C-Ry za predpokladu, že nie viac než jedno z Q1, Q2, Q3 a Q4 je N;
·· ···· ·· ·· ·· ·· · · · · · · · • · a · · a · · aaa aaa aaa aa a aa aaaa aa aaa
-7R’ je H, -Ci-6-alkyl, Ar-Co-e-alkyl alebo C3-6-cykloalkyl-Co-6-alkyl;
R je R’, -C(O)R’ alebo -C(O)OR’;
Ry je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r,
-CO2R9, -COR9 alebo -CONR92, alebo -Ci-e-alkyl, voliteľne substituovaný halogénom, -OR9, -SR9, -CN, -NR9R, -NO2, -CF3, R’S(O)r-. -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92;
a je 0,1 alebo 2;
b je 0,1 alebo 2;
k je 0,1 alebo 2;
r je 0,1 alebo 2;
s je 0,1 alebo 2;
u je 0 alebo 1; a v je 0 alebo 1;
alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.
Tiež sú v tomto vynáleze zahrnuté farmaceutický prijateľné adičné soli a komplexy zlúčenín podľa tohto vynálezu. V prípadoch, kde zlúčeniny podľa tohto vynálezu majú jedno alebo viac chirálnych centier, s výnimkou špecifikovaných, tento vynález zahrnuje každú jednotlivú neracemickú zlúčeninu, ktorá sa dá syntetizovať a rozdeliť na enantioméry bežnými postupmi. V prípadoch, v ktorých zlúčeniny majú nenasýtené dvojité väzby uhlík-uhlík, oba cis (Z) a trans (E) izoméry patria do rámca tohto vynálezu.
V prípadoch, kde zlúčeniny môžu existovať v tautomérnych formách, ako sú keto-enol tautoméry vzorcov o OR’ a
každá tautomérna forma sa považuje za zahrnutú do tohto vynálezu, či už existuje v rovnováhe alebo stabilizovaná v jednej forme vhodnou substitúciou R’.
Zlúčeniny vzorca I inhibujú väzbu vitronektínu a ostatných, RGD obsahujúcich peptidov na vitronektínový receptor. Inhibícia vitronektínového receptora na osteoklastoch inhibuje osteoklastovú kostnú resorpciu a je • · * · · · · · » » · e ·· ··· ··· · · · · · «» « ······ ·· ·
-8užitočná pri liečení chorôb, kde kostná resorpcia je spojená s patologickými stavmi, ako je osteoporóza a osteoartritída.
Z iného hľadiska tento vynález zahrnuje spôsob stimulácie tvorby kosti, ktorý zahrnuje podávanie zlúčeniny, ktorá zapríčiňuje zvýšené uvoľňovanie osteokalcínu. Zvýšená kostná tvorba je jasným prínosom v chorobnom stave, kde je nedostatok mineralizovanej kostnej hmoty, alebo je žiaduca prestavba kosti, ako pri liečbe zlomeniny a prevencii kostných zlomenín. Choroby a metabolické poruchy, ktoré vedú k strate kostnej štruktúry, by tiež pozitívne mohli reagovať na takéto liečenie. Napríklad hyperparatyreóza, Pagetova choroba, hyperkalcémia pri zhubnom nádore, osteolytické lézie, produkované kostnými metastázami, kostná strata, spôsobená imobilizáciou alebo nedostatkom pohlavných hormónov, Behcetova choroba, osteomalácia, hyperostóza a osteopetróza by mohli priaznivo reagovať na podanie zlúčeniny podľa tohto vynálezu.
Naviac, keďže zlúčeniny podľa tohto vynálezu inhibujú vitronektínové receptory na viacerých typoch buniek, uvedené zlúčeniny by mohli byť užitočné pri liečbe zápalových ochorení, ako sú reumatoidná artritída a psoriáza, a kardiovaskulárnych ochorení, ako je ateroskleróza a restenóza. Zlúčeniny vzorca I podľa tohto vynálezu môžu byť užitočné pri liečení alebo prevencii iných chorôb, vrátane, ale neobmedzujúc sa na tromboembolické ochorenia, astmu, alergie, syndróm dychovej tiesne dospelých, ochorenia štep versus hostiteľ, odmietnutie orgánového transplantátu, septický šok, ekzém, kontaktnú dermatitídu, zápalové ochorenia čriev a ďalšie autoimunitné ochorenia. Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sú tiež užitočné na liečenie poranení.
Zlúčeniny podľa vynálezu sú tiež vhodné na liečbu, vrátane prevencie angiogénnych ochorení. Pojem „angiogénne ochorenia“, ako sa tu používa, zahrnuje stavy, zahrnujúce abnormálnu neovaskularizáciu. Tam, kde vzrast nových krvných ciev je príčinou alebo prispieva k patologickým javom, spojeným s chorobou, inhibícia angiogenézy bude redukovať škodlivé prejavy choroby. Príkladom takej choroby je diabetická retinopatia. Tam, kde je vzrast nových krvných ciev potrebný na podporenie rastu zhubného tkaniva, inhibícia • · ···· ·· · · · · • · · · · · · ···
-9ί « * *! : t* * s ι · ·· · «· ···· ·· ··· angiogenézy zníži zásobovanie tkaniva krvou a tým bude prispievať k redukcii tkanivovej hmoty, založenej na potrebe krvného zásobovania. Príklady zahrnujú rast nádorov, kde neovaskularizácia je trvalou požiadavkou, aby nádor rástol a na vytvorenie pevných nádorových metastáz. Teda zlúčeniny podľa tohto vynálezu inhibujú angiogenézu v nádorovom tkanive, čím sa predíde nádorovým metastázam a rastu nádoru.
Teda v súlade so spôsobmi podľa tohto vynálezu môže inhibícia angiogenézy s použitím zlúčenín podľa tohto vynálezu zlepšiť symptómy choroby a v niektorých prípadoch môže chorobu vyliečiť.
Ďalším terapeutickým cieľom zlúčenín podľa tohto vynálezu sú očné ochorenia, ktoré sú charakterizované neovaskularizáciou. Takéto očné ochorenia zahrnujú neovaskulárne choroby očnej rohovky, ako je transplantácia rohovky, herpetická keratitída, luetická keratitída, pterygium a neovaskulárny panus, spojený s používaním kontaktných šošoviek. Ďalšie očné ochorenia tiež zahrnujú vekom podmienenú makulárnu degeneráciu, predpokladanú očnú histoplazmózu, retinopatiu nedonosených detí a neovaskulárny glaukóm.
Tento vynález ďalej poskytuje spôsob inhibície rastu nádoru, ktorý zahrnuje podávanie postupne alebo spolu zlúčeniny vzorca I a antineoplastického činidla, ako je topotekan a cisplatina.
S ohľadom na všeobecné vzorce I a la:
R2 je výhodne (O)u _ ί > N NR — CR’2— wθ ’C Q^q3'Q kde každý z Q1, Q2 a Q3 je CRy, Q4 je CRy alebo N, a u je 0, a, výhodne, každé R’ je H, R” je H alebo C^-alkyl, W je -(CH2)1.4-, Q4 je CRy a Ry je H.
Alternatívne je R2 ·· «··· · ·· ·· • · · ·«·· ···
-10··· · · · ·· ·· · · ···· ·· ·
kde každý z Q1, Q2 a Q3 je CH a u je 0, a, výhodne, každé R’ je H, R” je H alebo Ci-e-alkyl, W je -CH2-CH2- a v je 0.
Alternatívne je R2
Rb
R9,
NR CR 2—WN kde G je NH a každý z Rb a Rc je H, a, výhodne, W je -CH2-CH2-. Alternatívne je R2
K
kde G je N H a Rb a Rc sú navzájom spojené, aby vytvorili päť- alebo šesťčlenný aromatický alebo nearomatický, karbocyklický alebo heterocyklický kruh, voliteľne substituovaný až troma substituentami, vybranými z halogénu, CF3, Ci-4-alkylu, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; alebo metyléndioxyskupiny. Výhodne sú Rb a Rc navzájom spojené, aby vytvorili šesťčlenný aromatický, karbocyklický alebo heterocyklický kruh a W je -CH2-CH2-.
Alternatívne je R2 r ύ
()s^^nr9
N . . NR— CR’2 — w kde každý R’ je H, R” je H alebo Ci-6-alkyl, R9 je H alebo Ci-6-alkyl a s je 0, 1 alebo 2 a, výhodne, W je -CH2-CH2-.
·· ···· ·· · ·· • · 9 ···· · · ·
9 9 ·· ···
··· · · · ··· 99 9 99 9999 ·· 999
Alternatívne je R2
2'v kde v je O a W je -CH2-CH2-.
S ohľadom na vzorec I, R1 je výhodne fenyl, benzyl, pyridyl, imidazolyl, oxazolyl alebo tiazolyl. Výhodne je R1 fenyl. Y je výhodne O alebo CH2 a X je NH alebo CH2. Y je výhodne O.
Nové zlúčeniny podľa tohto vynálezu reprezentujú zlúčeniny, ktoré sú uvedené ďalej v príkladoch 1 až 43.
V prípadoch, kde zlúčeniny podľa tohto vynálezu môžu mať jedno alebo viac chirálnych centier, s výnimkou špecifikovaných, tento vynález zahrnuje každú jednotlivú neracemickú zlúčeninu, ktorá sa dá syntetizovať a rozdeliť na enantioméry bežnými postupmi. Podľa tohto vynálezu je výhodná (S) konfigurácia zlúčenín všeobecného vzorca I.
V prípadoch, v ktorých zlúčeniny majú nenasýtené dvojité väzby uhlíkuhlík, oba cis (Z) a trans (E) izoméry patria do rámca tohto vynálezu. Význam ktoréhokoľvek substituenta na ľubovoľnom mieste nezávisí od jeho významu, ani od významu akéhokoľvek iného substituenta na ľubovoľnom mieste.
Tiež sú do tohto vynálezu zahrnuté prekurzory zlúčenín podľa vynálezu. Za prekurzory sa považujú ľubovoľné kovalentne viazané nosiče, ktoré uvoľňujú aktívne východiskové liečivo vzorca I in vivo. Vynález teda ďalej poskytuje nové prekurzory, ktoré sú tiež medziproduktami pri príprave zlúčenín všeobecného vzorca la a majú vzorec II
kde
X je CR’R’, NR’, O alebo S;
• · · ···· · · · • · · · · · · · ·· ···· • · · ··· · · ·· · ·· ···· ·· ·
- 12Yje CR’R’, NR’, O alebo S;
A je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, -S(O)rCF3,
-CO2R9, -COR9, -CONR92, -Ci-e-alkyl, -Co-e-alkyl-Ar, -C0-6-alkyl-Het, Co-e-alkylC3-6-cykloalkyl, -S(O)kR9 alebo CH2N(Rf)2;
R1 je -Co-6-alkyl-Het-, -Co-6-alkyl-Ar, -Ci-6alkyl, H, -CN alebo -S(O)kR9;
R2 je
G
NR-CR’2—WN
<O)U (°)u
R’ \
^N^(CR’2)V—w Q1 Q3
N NR-CR'-W— á ií
Q%s 3-0 ^Q3 alebo r r
Os\/NR9
Wje -(CHR9)a-U-(CHR9)b-;
U je neprítomné alebo znamená CO, CR92, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONŔ, NŔCO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2, N=N, NR9NR9, NR9CR92i CR92NR9, CR92O, OCR92i C=C, CR9=CR9, Ar alebo Het;
G je NRe, S alebo O;
R9 je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo Ar-Co-6-alkyl; Rkje R9, -C(O)R9 alebo -C(O)ORf;
R' je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-Co-6-alkyl, Ar-Co-e-alkyl alebo Ci-6-alkyl, substituovaný jednou až tromi skupinami, vybranými z halogénu, CN, NR92, OR9, SR9, CO2R9 a CON(R9)2;
Rf je H, Ci-6-alkyl alebo Ar-Co-e-alkyl;
Re je H, Ci-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo (CH2)kCO2R9;
·· ···· ·· ·· ·· • » · ···· ···
-13• » · ·· · • · · •e ···· • · · ·· ···
Rb a Rc sú nezávisle vybrané z H, Ci-6-alkylu, Ar-Co-e-alkylu, Het-Co-6-alkylu alebo C3-6-cykloalkyl-Co-6-alkylu, halogénu, CF3, ORf, S(O)kRf, CORf, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, alebo Rb a Rc sú navzájom spojené, aby vytvorili päť- alebo šesťčlenný aromatický alebo nearomatický, karbocyklický alebo heterocyklický kruh, voliteľne substituovaný až troma substituentami, vybranými z halogénu, CF3, C^-alkylu, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; alebo metyléndioxyskupiny;
Q1, Q2, Q3 a Q4 sú nezávisle N alebo C-Ry za predpokladu, že nie viac než jedno z Q1, Q2, Q3 a Q4 je N;
R’ je H, -Ci-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl alebo C3_6-cykloalkyl-Co-6-alkyl;
R je R’, -C(O)R’ alebo -C(O)OR';
Ry je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3t CF3S(O)r-, -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92, alebo Ci-6-alkyl, voliteľne substituovaný halogénom, -OR9, -SR9, -CN, -NR9R”, -NO2, -CF3, R’S(O)r, -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92;
a je 0,1 alebo 2;
b je 0,1 alebo 2;
k je 0, 1 alebo 2;
r je 0,1 alebo 2;
s je 0,1 alebo 2;
u je 0 alebo 1; a v je 0 alebo 1;
alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.
Z ešte ďalšieho hľadiska patria do tohto vynálezu nové medziprodukty všeobecného vzorca III o-
CO2C1.6alkyl kde
XjeCR’R’, NR’, O alebo S;
·· ·· ·· • · · · · ··· ·· · · · · · · · · · · 9 9 ·· · ·· ···· ·· ·
-14• 9 ····
Y je CR'R’, NR’, O alebo S;
A je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, -S(O)rCF3, -CO2R9, -COR9, -CONR92, -Ci-6-alkyl, -Co-6-alkyl-Ar, -C0.6-alkyl-Het, -C0-6-alkyl· C3-6-cykloalkyl, -S(O)i<R9 alebo CH2N(Rf)2;
R1 je -Co-6-alkyl-Het-, -Co-6-alkyl-Ar, H, -CN alebo -S(O)i<R9;
Wje -(CHR9)a-U-(CHR9)b-;
U je neprítomné alebo znamená CO, CR92, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONŔ, NŔCO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2, N=N, NR9NR9, NR9CR92, CR92NR9, CR92O, OCR92, C=C, CR9=CR9, Ar alebo Het;
R9 je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo Ar-Co-e-alkyl; Rk je R9, -C(O)R9 alebo -C(O)ORf;
R1 je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-e-alkyl, C3.7-cykloalkyl-Co-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl alebo -Ci-6-alkyl, substituovaný jednou až tromi skupinami, vybranými z halogénu, CN, NR92, OR9, SR9, CO2R9 a CON(R9)2;
Rf je H, Ci-6-alkyl alebo Ar-Co-6-alkyl;
Q1, Q2, Q3 a Q4 sú nezávisle N alebo C-Ry za predpokladu, že nie viac než jedno z Q1, Q2, Q3 a Q4 je N;
R’ je H, -Ci-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl alebo C3.6-cykloalkyl-Co-6-alkyl;
R” je R’, -C(O)R’ alebo -C(O)OR’;
Ry je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92, alebo -Ci_e-alkyl, voliteľne substituovaný halogénom, -OR9, -SR9, -CN, -NR9R”, -NO2, -CF3, R’S(O)r, -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92;
a je 0,1 alebo 2; a b je 0,1 alebo 2;
alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.
Na opísanie zlúčenín podľa tohto vynálezu sa tu používajú skratky a symboly, ktoré sa bežne používajú pri peptidoch a chemických látkach. Všeobecne skratky aminokyselín zodpovedajú IUPAC-IUB Joint Commission on Biochemical Nomenclature, ako je opísané v Eur. J. Biochem. 9,158,1984.
• » · ···· ··· ··· · · · · · ·· ···· ··· ··· ·· ·· · · ···· ·· ·
-15Ci-4-alkyl, ako sa tu používa, znamená voliteľne substituovanú alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka a zahrnuje metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, nbutyl, izobutyl a ŕerc-butyl. C-i-6-alkyl navyše zahrnuje pentyl, n-pentyl, izopentyl, neopentyl a hexyl a ich jednoduché alifatické izoméry. Co-4-alkyl a Co-6alkyl naviac znamenajú, že nemusí byť prítomná žiadna alkylová skupina (napríklad, že je prítomná kovalentná väzba).
Ľubovoľný Ci-4-alkyl alebo Ci-e-alkyl, C2-6-alkenyl, C2-6-alkinyl alebo Ci-6-oxoalkyl môže byť voliteľne substituovaný skupinou Rx, ktorá môže byť na ľubovoľnom atóme uhlíka, čo vedie k stabilnej štruktúre a dá sa dosiahnuť bežnými syntetickými postupmi. Výhodnými skupinami pre Rx sú C-i-4-alkyl,
OR’, SR’, Ci-4-alkylsulfonyl, CM-alkylsulfoxyl, -CN, N(R’)2, CH2N(R’)2, -NO2,
-CF3, -CO2R’, -CON(R’)2i -COR’, -SO2N(R')2, -NR’C(O)R', F, Cl, Br, I alebo CF3S(O)r, kde r je 0,1 alebo 2.
Halogén znamená F, Cl, Br a I.
Ar alebo aryl, ako sa tu používa, znamená fenyl alebo naftyl, alebo fenyl alebo naftyl, substituovaný jedným až troma substituentami, ako sú vyššie určené substituenty pre alkyl, najmä C1_4-alkyl, C-M-alkoxy, Ci-4-alkyltio, CF3,
NH2, OH, F, Cl, Br alebo I.
Het alebo heterocyklus znamená voliteľne substituovaný päť- alebo šesťčlenný monocyklický kruh alebo deväť- alebo desaťčlenný bicyklický kruh, obsahujúci jeden až tri heteroatómy, vybrané zo skupiny dusíka, kyslíka a síry, ktoré sú stabilné a dostupné bežnou chemickou syntézou. Ilustratívnymi heterocyklami sú benzofurán, benzimidazol, benzopyrán, benzotiofén, benzotiazol, furán, imidazol, indolín, morfolín, piperidín, piperazín, pyrol, pyrolidín, tetrahydropyridín, pyridín, tiazol, oxazol, tiofén, chinolín, izochinolín a tetra- a perhydro-chinolín a izochinolín. Akákoľvek dostupná kombinácia najviac troch substituentov na Het kruhu, ako sú vyššie určené substituenty pre alkyl, ktoré sú dostupné chemickou syntézou a sú stabilné, patria do rámca tohto vynálezu.
C3-7-cykloalkyl sa týka voliteľne substituovaného karbocyklického systému troch až siedmich atómov uhlíka, ktorý môžu obsahovať najviac dve nenasýtené väzby uhlík-uhlík. Typickými C3-7-cykloalkylmi sú cyklopropyl, • · · ···· ··· ··· · · · · · •e ···· ··· ··· · · ·· · ·· ···· ·· ·
-16cyklobutyl, cyklopentyl, cyklopentenyl, cyklohexyl, cyklohexenyl a cykloheptyl. Akákoľvek kombinácia najviac troch substituentov, ako sú vyššie určené substituenty pre alkyl, na cykloalkylovom kruhu, ktorá je dostupná chemickou syntézou a je stabilná, patri do rámca tohto vynálezu.
Ak sú Rb a Rc navzájom spojené, aby vytvorili päť- alebo šesťčlenný aromatický alebo nearomatický, karbocyklický alebo heterocyklický kruh, spojený s kruhom, ku ktorému sú Rb a Rc pripojené, vytvoreným kruhom bude vo všeobecnosti päť- alebo šesťčlenný heterocyklus, vybraný z vyššie uvedených pre Het, alebo to bude fenylový, cyklohexylový alebo cyklopentylový kruh. Výhodne bude Rb a Rc -D1=D2-D3=D4, kde D1 až D4 sú nezávisle CH, N alebo C-Rx, s výhradou, že nie viac než dve z D1 až D4 sú N. Najvýhodnejšie, ak Rb a Rc sú navzájom spojené, tvoria skupinu -CH=CHCH=CH-.
Pre určité radikálové skupiny sa tu používajú skratky. t-Bu sa týka terciárneho butylového radikálu, Boe sa týka t-butyloxykarbonylového radikálu,
Fmoc sa týka fluorenylmetoxykarbonylového radikálu, Ph sa týka fenylového radikálu, Cbz sa týka benzyloxykarbonylového radikálu, Bn sa týka benzylového radikálu, Me sa týka metylu, Et sa týka etylu, Ac sa týka acetylu,
Alk sa týka Ci-4-alkylu, Nph sa týka 1- alebo 2-naftylu a cHex sa týka cyklohexylu. Tet sa týka 5-tetrazolylu.
Pre určité reagenty sa tu používajú skratky. DCC sa týka dicyklohexylkarbodiimidu, DMAP sa týka dimetylaminopyridínu, DIEA sa týka diizopropyletylamínu, EDC sa týka hydrochloridu 1-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu. HOBt sa týka 1-hydroxybenzotriazolu, THF sa týka tetrahydrofuránu,
DIEA sa týka diizopropyletylamínu, DEAD sa týka dietylazodikarboxylátu, PPh3 sa týka trifenylfosfínu, DIAD sa týka diizopropylazodikarboxylátu, DME sa týka dimetoxyetánu, DMF sa týka dimetylformamidu, NBS sa týka /V-brómsukcínimidu, Pd/C sa týka paládia na uhlíkovom katalyzátore, PPA sa týka kyseliny polyfosforečnej, DPPA sa týka difenylfosforylazidu, BOP sa týka 1-benzotriazolyl-oxy-tris(dimetylamino)-fosfóniumhexafluórfosfátu, HF sa týka kyseliny fluorovodíkovej, TEA sa týka trietylamínu, TFA sa týka kyseliny trifluóroctovej,
PCC sa týka pyridíniumehlórehromátu.
-17Zlúčeniny všeobecného vzorca la sa vo všeobecnosti pripravujú reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca IV so zlúčeninou všeobecného vzorca
V
·· • • ···· • · • · ·· • • ·· • · · ·· • ·
• • • •
• •
• • · • • • • •
• · • ·· ···· ·· • ·
kde R1, R2, A a X majú význam určený vo vzorci la, s chránenými reaktívnymi skupinami, a L1 je OH alebo halogén;
a potom odstránením chrániacich skupín a voliteľne vytvorením farmaceutický prijateľnej soli.
Výhodne sa určité zlúčeniny všeobecného vzorca la pripravia reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca IV, ako bol určený vyššie, so zlúčeninou vzorca všeobecného VI
ΟΙ
KN+ /NR—CR’j—W-OH Q1 kde R’, R”, W, Q1, Q2, Q3 a Q4 sú určené vo vzorci la, pričom akékoľvek reaktívne funkčné skupiny sú chránené;
a potom odstránením akýchkoľvek chrániacich skupín a voliteľne vytvorením farmaceutický prijateľnej soli.
Je výhodné, ak pre zlúčeniny všeobecného vzorca VI Q1, Q2, Q3 a Q4 sú CH, W je -(CH2)i-4-, R’ je H a R” je H alebo Ci-6-alkyl. Reakcia medzi zlúčeninou všeobecného vzorca IV a zlúčeninou všeobecného vzorca VI sa výhodne uskutoční v prítomnosti dietylazodikarboxylátu a trifenylfosfínu v aprotickom rozpúšťadle.
·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ··· ··· · · · · ·
-18Určité zlúčeniny všeobecného vzorca la sa pripravia reakciou zlúčeniny všeobecného vzorca IV, ako je určený predtým, so zlúčeninou všeobecného vzorca Vil • · · ··· ··· ·· · ·· ···· ·· ···
(Vil) kde R’, R”, W, Q1, Q2, Q3 a v sú určené vo vzorci la, pričom akékoľvek reaktívne funkčné skupiny sú chránené;
a potom odstránením akýchkoľvek chrániacich skupín a voliteľne vytvorením farmaceutický prijateľnej soli.
Je výhodné, ak pre zlúčeniny všeobecného vzorca Vil Q1, Q2, a Q3 sú CH, W je -CH2- CH2-, R’ je H a R’’ je H alebo Ci-e-alkyl. Reakcia medzi zlúčeninou všeobecného vzorca IV a zlúčeninou všeobecného vzorca Vil sa výhodne uskutoční v prítomnosti dietylazodikarboxylátu a trifenylfosfínu v aprotickom rozpúšťadle.
Zlúčeniny podľa tohto vynálezu, vrátane zlúčenín všeobecného vzorca I a la, sa pripravia všeobecnými spôsobmi, opísanými v schémach I až XVI.
Príprava zlúčenín, kde Y je O a X je CH2, je opísaná v schéme I.
(3)
·· · ···· ··· ··· ·· ··· ·· ···· ··· · · · ·· ·· · ·· ···· ·· ·
- 19Schéma 1 - pokračovanie
(a) EtOAc/LiN(TMS)2, THF; (b) Et3SiH, BF3OEt2, CH2CI2; (c) H2, 10% Pd/C, EtOH; (d) EtSH, AICI3, CH2CI2; (e) 2-[(3-hydroxy-1-propyl)amino]pyridín-/Voxid, DIAD, (Ph)3P, DMF; (f) cyklohexén, 10% Pd/C, 2-propanol; (g) 1,0N LiOH, THF, H2O, potom okyslenie.
Výhodne substituovaný deoxybenzoínový derivát, ako je 2-(4-metoxyfenyl)-1-fenyletanón (Chem. Ber. 91. 755-759, 1958) reaguje v aldolovom type reakcie s enolátom etylacetátu, ktorý sa dá vytvoriť z etylacetátu jeho vystavením vhodnej amidovej zásade, napríklad lítiumdiizopropylamidu (LDA) alebo lítiumbis(trimetylsilyl)amidu (LiN(TMS)2), aby vznikla I-2. Ako rozpúšťadlo pre aldolovú reakciu sa vyberá THF, hoci sa používa v prítomnosti rôznych prísad, napríklad HMPA alebo TMEDA. Reakcia I-2 s trietylsilánom (Et3SiH) v prítomnosti éterátu fluoridu boritého (BF3 OEt2) podľa všeobecného postupu podľa Orphanopoulos a Smonu (Synth. Commun. 833, 1988) na redukciu ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ··· • · · · · ···
-20··· ··· ··· ·· · ·· ···· ·· ··· terciárnych benzylových alkoholov poskytuje 1-3, spolu s olefínovým produktom, odvodeným z β-eliminácie alkoholu. Olefínový produkt sa môže bežne premeniť na 1-3 hydrogenáciou nad paládiovým katalyzátorom, ako je paládiový kov na aktivovanom uhlíku (Pd/C), vo vhodnom inertnom rozpúšťadle, napríklad v metanole, etanole alebo etylacetáte. Odstránenie metyléteru z 1-3 za vzniku 1-4 sa môže uskutočniť reakciou s etántiolom (EtSH) v prítomnosti katalyzátora Lewisovej kyseliny, výhodne bezvodého chloridu hlinitého (AICI3), v inertnom rozpúšťadle, napríklad v CH2CI2. Ďalšie užitočné spôsoby odstránenia metyléteru sú opísané v publikácii Greene: „Protective Groups in Organic Synthesis“ (publikoval Wiley-lnterscience). Zlúčenina 1-4 reaguje s 2-[(3-hydroxy-1-propyl)amino]pyridín-/V-oxidom v Mitsunobuovom type kopulačnej reakcie (Organic Reactions 42, 335-656, 1992; Synthesis, 128, 1981) za vzniku I-5. Reakcia je sprostredkovaná komplexom, vytvoreným medzi diesterom azodikarboxylátu, ako je dietylazodikarboxylát alebo diizopropylazodikarboxylát, a trifenylfosfínom, a uskutočňuje sa v aprotickom rozpúšťadle, napríklad v THF, CH2CI2 alebo DMF. Pyridín-N-oxidová časť I-5 sa redukuje na príslušný pyridín I-6 pri podmienkach transferovej hydrogenácie s použitím paládiového katalyzátora, výhodne paládiového kovu na aktívnom uhlí, v inertnom rozpúšťadle, napríklad v metanole, etanole alebo 2-propanole. Cyklohexén, 1-4-cyklohexadién, kyselina mravčia a soli kyseliny mravčej, ako je mravčan draselný alebo mravčan amónny, sa v tomto type reakcie bežne používajú ako vodík prenášajúce látky. Etylester zlúčeniny I-6 sa hydrolyzuje s použitím vodného roztoku zásady, napríklad LiOH vo vodnom roztoku THF alebo NaOH vo vodnom roztoku metanolu alebo etanolu, a soľ karboxylátu ako medziprodukt sa okyslí vhodnou kyselinou, napríklad TFA alebo HCI, za vzniku karboxylovej kyseliny I-7. Ak je to potrebné, alternatívne sa môže izolovať soľ karboxylátu ako medziprodukt, alebo sa karboxylátová soľ voľnej karboxylovej kyseliny môže pripraviť spôsobmi, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti dobre známe.
Alternatívny spôsob prípravy zlúčenín všeobecného vzorca I je opísaný v schéme II.
-21 • · · ·· · ·« ·· • · · · • · · • · · ·· ···· • · · ·· ···
(a) NaH, 2-[/V-(3-metánsulfonyloxy-1 -propyl)-A/-(ŕerc-butoxykarbonyl)amino] pyridín-ZV-oxid, DMSO; (b) TFA, ΟΗ2ΟΙ2; (c) pozri schému I.
Zlúčenina 11-1, pripravená, ako je opísané v schéme I, reaguje so zásadou, výhodne hydridom alkalického kovu, ako je hydrid sodíka alebo hydrid draslíka, v polárnom, aprotickom rozpúšťadle, obvykle THF, DMF, DMSO alebo ich zmesi, za vzniku príslušného fenoxidu alkalického kovu. Alternatívne sa na deprotonáciu môže použiť amid alkalického kovu, napríklad LDA alebo lítna, sodná alebo draselná soľ hexametyldisilazánu. Prechodný fenoxid sa vo všeobecnosti neizoluje, ale reaguje in situ s vhodným elektrofilom, napríklad 2-[/V-(3-metánsulfonyloxy-1 -propyl)-/V-(íerc-butoxykarbonyl)amino]pyridín-/V-oxidom, za vzniku kopulačného produktu II-2. Tercbutoxykarbonylová chrániaca skupina v II-2 sa odstráni za kyslých podmienok, ako je 4M HCl v 1,4-dioxáne alebo TFA v CH2CI2, aby vznikla II-3. Podmienky na odstránenie ŕerc-butoxykarbonylovej chrániacej skupiny sú odborníkom
-22v tejto oblasti dobre známe a viaceré používané spôsoby sú opísané v štandardných referenčných zväzkoch, ako je Greene: „Protective Groups in
Organic Synthesis“. 11-3 sa následne konvertuje na 11-4 podľa postupu, vyznačeného v schéme I.
·· ···· ·· ·· • · · · · · · • · · · · · ·· · ·· ···· • · ··
(a) Tf2O, 2,6-lutidín, CH2CI2; (b) CO, KOAc, Pd(OAc)2, dppf, DMSO; (c) dihydrochlorid 2-[(2-amino-1-etyl)amino]pyridínu, EDC, HOBtH2O, EtsN, CH3CN; (d) LiOH, THF, H2O, potom okyslenie.
Fenol 111-1, pripravený, ako je opísané v schéme I, sa premení na jeho tirfluórmetánsulfonátový ester III-2 reakciou s trifluórmetánsulfónovým anhydridom (Tf2O) v prítomnosti vhodnej, nenukleofilnej amínovej zásady, ako je 2,6-lutidín, v inertnom rozpúšťadle, obyčajne CH2CI2. III-2 reaguje s oxidom ·· ···· ··
-23• · · ·· ···· • · ·· · uhoľnatým (CO) v prítomnosti octanu draselného, 1,1 ’-bis(difenylfosfín)ferocénu (dppf) a paládiového katalyzátora, napríklad paládiumacetátu (Pd(OAc)2), vo vhodnom rozpúšťadle, výhodne DMSO, podľa všeobecného spôsobu, ktorý opísali Cacchi a Lúpi (Tet. Lett. 33, 3939, 1992) pre karboxyláciu arylových trifluórmetánsulfonátov. Karboxylová kyselina výslednej zlúčeniny (III-3) sa premení na aktivovanú formu s použitím napríklad EDC a HOBt alebo SOCb, a táto aktivovaná forma ďalej reaguje s vhodným amínom, napríklad dihydrochloridom 2-[(2-amino-1-etyl)amino]pyridínu, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je DMF, CH2CI2 alebo CH3CN, za vzniku III-4. V závislosti od toho, či sa vyžaduje neutralizácia kyseliny, môže sa použiť pridaná zásada, ako je trietylamín (Et3N), diizopropyletylamín ((i-Pr)2NEt) alebo pyridín. Sú známe mnohé ďalšie spôsoby konverzie karboxylovej kyseliny na amid a možno ich nájsť vo všeobecne používaných publikáciách, ako je Compendium of Organic Synthetic Methods”, zv. I až VI (publikoval Wiley-lnterscience), alebo Bodansky, “The Practice of Peptide Synthesis (publikoval SpringerVerlag). Etylester zlúčeniny III-4 sa hydrolyzuje s použitím vodného roztoku zásady, napríklad LiOH vo vodnom roztoku THF alebo NaOH vo vodnom roztoku metanolu alebo etanolu, a karboxylátová soľ ako medziprodukt sa okyslí vhodnou kyselinou, napríklad TFA alebo HCI, aby vznikla karboxylová kyselina III-5. Alternatívne, ak je to potrebné, sa môže izolovať karboxylátová soľ ako medziprodukt, alebo karboxylátová soľ voľnej karboxylovej kyseliny sa dá pripraviť spôsobmi, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti dobre známe.
Schéma IV
HO
(D
NO.
,N
Boe
I
N.
'NO.
c
·· ··· ·· a · · · · · · · • a a aa a a a • · a aaa aa • a a aa aaaa ·· a
-24Schéma IV - pokračovanie
(a) CBľ4, Ph3P, THF; (b) 2-(ŕerc-bytoxyamino)pyridín, NaH, DMF; (c) H2, Pd/C, EtOAc; (d) PhCHO, MgSO4, CH2CI2; (e) BrZnCH2CO2t-Bu, BF3OEt2, THF; (f) TFA, CH2CI2.
Komerčne dostupný alkohol IV-1 sa premení na aktivovanú látku, napríklad zodpovedajúci bromid IV-2, s použitím bromidu uhličitého a trifenylfosfínu v inertnom rozpúšťadle, výhodne THF. K dispozícii je mnoho ďalších podmienok, vhodných na premenu alkoholu na aktivovanú látku, ako je zodpovedajúci bromid, chlorid, jodid, mesilát alebo triflát, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti dobre známe. Bromid IV-2 sa alkyluje vhodným 2-aminopyridínovým derivátom, napríklad 2-(ŕerc-bytoxyamino)pyridínom, za vzniku alkylovaného derivátu IV-3. Reakcia je sprostredkovaná vhodnou zásadou, ako je halogenid alkalického kovu, a uskutočňuje sa v polárnom aprotickom rozpúšťadle, vo všeobecnosti THF, DMF, DMSO alebo ich vzájomných zmesiach. Redukcia nitroskupiny zlúčeniny IV-3 sa dá uskutočniť viacerými spôsobmi, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti dobre známe. Výhodne sa redukcia môže uskutočniť hydrogenáciou v prítomnosti paládiového katalyzátora, napríklad paládia na aktivovanom drevenom uhlí, vo vhodnom ·· ···· ·· ·· ·· ·· · · · · · ··· • I · · · · · ·
-25··· · · · · · · ·· · ·· ···· ·· ··· rozpúšťadle, ako je EtOAc, MeOH, EtOH, i-PrOH alebo ich vzájomné zmesi. Výsledný anilín IV-4 reaguje s vhodným aldehydom, ako je benzaldehyd, v inertnom rozpúšťadle, ako je CH2CI2, benzén alebo toluén, za vzniku príslušného aldimínu IV-5. Ak je to žiaduce, môže sa na odstránenie Η2Ο, ktorá vznikla počas reakcie, použiť dehydratačné činidlo, ako je MgSO4. Aldimín ďalej reaguje v aldolovom type reakcie s vhodným enolátom esteru kyseliny octovej za vzniku IV-6. Reakcia je vo všeobecnosti sprostredkovaná Lewisovou kyselinou, napríklad BF3OEt2, a obyčajne sa uskutočňuje v éterickom rozpúšťadle, ako je THF alebo DME. Ako je opísané v schéme I, enolát sa môže vytvoriť z etylacetátu, keď sa vystaví vhodnej amidovej báze, napríklad diizopropylamidu lítnemu (LDA) alebo bis(trimetylsilyl)amidu lítnemu (LiN(TMS)2). Alternatívne sa enolát môže vytvoriť z ŕerc-butylbrómacetátu, keď sa vystaví pôsobeniu kovového zinku, podľa spôsobu Orsoniho a spolupracovníkov (Tetrahedron 40, 2781-2787, 1984). Terc-butoxykarbonylová skupina a íerc-butylester zlúčeniny IV-6 sa odstraňujú súčasne pri kyslých podmienkach, ako je 4M HCI v 1,4-dioxáne alebo TFA v CH2CI2, za vzniku IV7. Podmienky na zrušenie ochrany ŕerc-butylkarbamátov a ŕerc-butylesterov sú odborníkom v tejto oblasti dobre známe, a niekoľko užitočných spôsobov je opísaných v štandardne používaných publikáciách, ako je Greene: „Protective Groups in Organic Synthesis (publikoval Wiley-lnterscience).
Schéma V
co2ch3 ·· ····
(a) BnCI, K2CO3, acetón; (b) L1AIH4, THF; (c) Swernova oxidácia (d) Ph3P=CHCO2CH3, THF; (e) H2, Pd/C, MeOH; (f) 6-metylamino-2-pyridyletanol, DIAD, (Ph)3P, THF; (g) LiOH, THF, H2O, potom okyslenie.
Fenolová skupina komerčne dostupného metyl-4-hydroxyfenylacetátu (V-1) sa chráni vhodnou chrániacou skupinou, napríklad metyléterom, benzyléterom alebo triizopropylsilyléterom. Ochrana fenolov je odborníkom v tejto oblasti dobre známa a reprezentatívne chrániace skupiny sú opísané v štandardne používaných knihách, ako je Greene: „Protective Groups in Organic Synthesis” (publikoval Wiley-Interscience). Esterová skupina zlúčeniny V-2 sa redukuje na zodpovedajúci primárny alkohol s použitím hydridu hlinitolítneho. Existujú mnohé ďalšie spôsoby redukcie karboxylových kyselín a esterov na alkoholy a tie sú opísané v štandardne používaných knihách, ako je Compendium of Organic Synthetic Methods” (publikoval Wiley-Interscience). Alkohol v zlúčenine V-3 sa oxiduje na zodpovedajúci aldehyd s použitím dobre známych Swernových podmienok (J. Org. Chem. 43, 2480, 1978). Existujú mnohé ďalšie spôsoby oxidácie alkoholov na aldehydy a tie sú opísané v štandardne používaných knihách, ako je “Compendium of Organic Synthetic Methods” (publikoval Wiley-Interscience). Aldehyd V-4 sa premení na α,β-nenasýtený ester V-5 dobre známou Wittigovou reakciou.
·· ·· ···· ·· · · · · · ··· ··· · · · · · ·«· · · · · · ·· · ······ ·· ·
-27Optimálne sa reakcia uskutoční s použitím karbometoxymetyléntrifenylfosforanu v polárnom, aprotickom rozpúšťadle, ako je DMSO, THF alebo ich vzájomné zmesi. Redukcia olefínovej skupiny zlúčeniny V-5 sa optimálne uskutoční hydrogenáciou v prítomnosti paládiového katalyzátora, napríklad paládia na aktivovanom drevenom uhlí, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je EtOAc, MeOH, EtOH, /-PrOH alebo ich vzájomné zmesi. Ak sa na ochranu fenolovej skupiny použije benzyléter, súčasne sa rozštiepi, aby uvoľnil voľný fenol. Ak sa použije iná chrániaca skupina, použijú sa vhodné podmienky na jej odstránenie. Napríklad, ak sa použije metyléter, môže sa rozštiepiť etántiolom (EtSH) a chloridom hlinitým (AICI3), ako je opísané v schéme I, alebo bromidom boritým (BBr3), v inertnom rozpúšťadle, výhodne v CH2CI2. Alternatívne, ak sa použije triizopropylsilylová skupina, môže sa rozštiepiť s použitím napríklad tetrabutylamóniumfluoridu v neutrálnom rozpúšťadle, ako je THF. Ďalšie užitočné spôsoby na odstránenie fenolových chrániacich skupín sú opísané v Greene: „Protective Groups in Organic Synthesis” (publikoval Wiley-lnterscience). Výsledný fenol V-6 reaguje so 6-metylamino-2pyridyletanolom v Mitsunobuovom type kopulačnej reakcie (Organic Reactions 42, 335-656, 1992; Synthesis 1-28, 1981) za vzniku V-7. Reakcia je sprostredkovaná komplexom, vytvoreným medzi azodikarboxylátovým diesterom, ako je dietylazodikarboxylát alebo diizopropylazodikarboxylát, a trifenylfosfínom, a uskutočňuje sa v aprotickom rozpúšťadle, napríklad v THF,
CH2CI2 alebo DMF. V-7 sa následne premení na V-8 podľa postupu, opísaného v schéme III.
Schéma VI
co2ch3
HO
O) c,d co2ch3 • · · · ·· ···· ·· ·
-28Schéma VI - pokračovanie
(a) (vinyl)MgBr, CuBr-DMS, THF; (b) TBAF, THF; (c) 6-metylamino-2pyridyletanol, DIAD, (Ph)3P, DMF; (d) LiOH, THF, H2O, potom okyslenie.
α,β-nenasýtený ester VI-1, pripravený, ako je opísané v schéme V, reaguje s meďnatým činidlom, aby sa uskutočnila konjugačná adičná reakcia. Napríklad reakcia zlúčeniny VI-1 s meďnatým činidlom, odvodeným od vinylmagnéziumbromidu a komplexu bromidu med’ného s dimetylsulfidom, v aprotickom rozpúšťadle, ako je Et2O alebo THF, poskytuje konjugovaný adičný produkt VI-2. Pre reakcie tvorby a konjugačné adičné reakcie širokej palety meďnatých a organomeďnatých činidiel sa uvádza mnoho postupov a publikovalo sa niekoľko vynikajúcich prehľadov (napríklad pozri Posner, Organic Reactions 19, 1-113, 1972; Lipshutz a Sengupta, Organic Reactions 41, 135-631, 1992). Triizopropylsilylová skupina zlúčeniny VI-2 sa odstráni, ako je opísané v schéme V, a výsledný fenol VI-3 sa konvertuje na VI-4 podľa spôsobov, opísaných v schéme V.
Schéma VII
·· ···· ·· ·· ·· «· · · · · · ··· • •t ·· · · ·
-29«·· · w » · · · ·· * ·· ···· ·· ···
Schéma VII - pokračovanie
(a) PhOH, Cu, K2CO3; (b) síra, morfolín; (c) KOH, Η2Ο, /'-PrOH; LiAIH4, THF; (e) Swernova oxidácia; (f) Ph3P=CHCO2CH3, THF; (g) H2, Pd/C, MeOH; (h) BBr3, CH2CI2; (i) 6-metylamino-2-pyridyletanol, DEAD, (Ph)3P, CH2CI2; (j) 1,0N NaOH, MeOH, potom okyslenie.
Komerčne dostupný 2-fluór-4-metoxyacetofenón (VII-1) reaguje s alkoholom, napríklad fenolom, v prítomnosti kovovej medi a vhodnej zásady, napríklad K2CO3, aby vznikol diaryléter VII-2. Pri pôsobení sírou a vhodným primárnym alebo sekundárnym amínom, výhodne morfolínom, podľa všeobecného postupu Harrisa (J. Med. Chem. 25, 855, 1982) sa VII-2 konvertuje na VII-3 v klasickej Willgerodt-Kindlerovej reakcii. Takto získaný tioamid sa hydrolyzuje na zodpovedajúcu karboxylovú kyselinu VII-4 reakciou s hydroxidom alkalického kovu, vhodne s KOH, vo vodnom roztoku alkoholického rozpúšťadla, ako je vodný roztok MeOH, EtOH alebo /-PrOH. VII-4 sa ďalej premení na VII-9 podľa všeobecného postupu, opísaného v schéme V.
·· ···· ·· ·· ·· ·· · · · · · ···
-30• · · ·· · • · · ·· ···· • · · ·· ···
Schéma VIII
(a) LiN(TMS)2, THF, potom 4-metoxybenzylchlorid; (b) 1,0N NaOH, MeOH, potom okyslenie; (c) SOCI2; (d) CH2N2, Et2O; (e) AgOBz, MeOH; (f) BBr3, CH2CI2; (g) 6-(A/-Boc-/\/-metylamino)-2-pyridyletanol, DEAD, (Ph)3P, CH2CI2; (h) HCI/dioxán; (i) 1,0N NaOH, MeOH, potom okyslenie.
·· ·· ·· • · · · · · · ··· ··· · · ···
9 9 9 9 9 9 ·
9 99 9999 99 9 ·· ····
-31 Metylester kyseliny 2-tiofénoctovej VI11-1 sa deprotonizuje vhodnou zásadou, vo všeobecnosti amidom alkalického kovu, ako je LDA alebo lítiumbis(trimetylsiiyl)amid, a bez izolovania medziproduktu esteru enolátu reaguje s príslušným benzylhalogenidom, napríklad 4-metoxybenzylchloridom, aby vznikol alkylačný produkt VIII-2. Vo všeobecnosti je pre túto reakciu výhodné polárne, aprotické rozpúšťadlo, ako je THF alebo THF v prítomnosti rôznych aditív, napríklad HMPA alebo TMEDA. Metylester zlúčeniny VIII-2 sa hydrolyzuje s použitím vodného roztoku zásady, napríklad LiOH vo vodnom roztoku THF alebo NaOH vo vodnom roztoku MeOH alebo EtOH, a karboxylátová soľ ako medziprodukt sa okyslí vhodnou kyselinou, napríklad TFA alebo HCl, aby vznikla karboxylová kyselina VIII-3. Táto sa konvertuje na aktivovanú formu karboxylovej kyseliny s použitím napríklad SOCI2, a aktivovaná forma ďalej reaguje s diazometánom vo vhodnom rozpúšťadle, ako je Et2O alebo zmes Et2O a ΟΗ2ΟΙ2, aby vznikol diazoketón VIII-4. Pri pôsobení vhodnou soľou striebra, napríklad benzoanom striebra alebo triflátom striebra, v alkoholovom rozpúšťadle, vo všeobecnosti MeOH alebo EtOH, VIII-4 podrobí sa klasickej Arndt-Eistertovej reakcii, aby vznikol ester VIII-5. Odstránenie ochranných skupín metyléteru podľa všeobecných podmienok, opísaných v schéme V, poskytne VIII-6, ktorá sa premení na VIII-7 reakciou so 6-(N-Boc-Nmetylamino)-2-pyridyletanolom v Mitsunobuovej reakcii podľa podmienok, opísaných v schéme V. Terc-butoxykarbonylová skupina zlúčeniny VIII-7 sa odstráni pri kyslých podmienkach, ako je 4M HCl v 1,4-dioxáne alebo TFA v CH2CI2, aby vznikla zlúčenina VIII-8. Podmienky na zrušenie ochrany tercbutylkarbamátov sú odborníkom v tejto oblasti dobre známe a viaceré užitočné spôsoby sú opísané v štandardne používaných publikáciách ako je Greene: “Protective Groups in Organic Synthesis. Saponifikácia podľa všeobecných spôsobov, opísaných v schéme III, poskytne VIII-9.
·· ···· ·· ·· · ·· · ···· ··· ··· ·· · · ·
-32• ·· · · · · · · ·· · ·· ···· ·· ···
Schéma IX
(a) 4-metoxybenzylmagnéziumchlorid, Cul, TMEDA, TMSCI, THF; (b) BBľ3, CH2CI2; (c) 6-(/V-Boc-/V-metylamino)-2-pyridyletanol, DIAD, (Ph)3P, CH2CI2; (d) 4 N HCI/dioxán; (e) 1,0 N NaOH, EtOH, potom okyslenie.
Vhodný derivát kyseliny akrylovej, napríklad etyl-4-brómcinamát IX-1, sa premení na derivát IX-2 reakciou s vybranými benzylmed’natými činidlami podľa všeobecného spôsobu Van Heerdena (Tetrahedron 52, 12313, 1996). Ako je opísané v schéme VI, uvádzajú sa mnohé ďalšie postupy na tvorbu a konjugačné adičné reakcie veľkého radu meďnatých a organomeďnatých reagentov. Adičný produkt IX-2 sa potom premení na IX-5 všeobecným postupom, opísaným v schéme VIII.
99 99
9 9 9 9 9 9 9 9 9
-33·· ····
9 9 9 9 9 9 9
9 99 9999 99 9
(a) metyl-3-benzyloxykarbonyl-3-butenoát, Pd(0Ac)2, P(tol)3l (i-Pr)2NEt, propionitril; (b) H2i 10% Pd/C, MeOH, EtOAc; (c) CDI, (CH3O)2CHCH2NH2, CH2CI2; (d) 6 N HCl, THF; (e) l2, PPh3, Et3N, CH2CI2; (f) BBr3, CH2CI2; (g) 6metylamino-2-pyridyletanol, DIAD, (Ph)3P, THF; (h) LiOH, THF, H2O, potom okyslenie.
Vhodný halogénaromatický derivát, napríklad 4-brómanizol X-1, reaguje s metyl-3-benzyloxykarbonyl-3-butenoátom v Hečkovom type reakcie (pozri Heck, Org. Reactions 27, 345, 1982), aby vznikla X-2. Reakcia je sprostredkovaná paládiom(O) a vo všeobecnosti sa vedie v inertnom rozpúšťadle, ako je CH3CN, propionitril alebo toluén, v prítomnosti vhodného kyselinového lapača, ako je trietylamín (Et3N) alebo diizopropyletylamín ((iPr)2NEt). Typické zdroje paládia(O) zahrnujú octan paladnatý (Pd(OAc)2) a chlorid paladnatý (PdCI2) a častokrát sú zahrnuté fosfínové ligandy, napríklad trifenylfosfín (PPh3) alebo tri-orfo-tolylfosfín (P(tol)3). α,β-nenasýtený ester X-2 ·· ·· ·· ·· · ···· ··· · · ·· ··· ·· ···· ··· · · · ·· ·· · ·· ···· 99 9
-34sa redukuje na nasýtenú zlúčeninu X-3 reakciou s vodíkovým plynom v prítomnosti vhodného katalyzátora, výhodne kovového paládia na aktivovanom uhlíku (Pd/C) v inertnom rozpúšťadle, obvykle MeOH, EtOH, EtOAc alebo ich vzájomných zmesiach. Benzylester vX-2 sa súčasne pri týchto podmienkach štiepi, aby uvoľnil zodpovedajúcu karboxylovú kyselinu. Karboxylová kyselina zlúčeniny X-3 sa premení na aktivovanú formu s použitím napríklad EDC a HOBt, SOCb alebo 1,ľ-karbonyldiimidazol (CDI) a táto aktivovaná forma následne reaguje s vhodným amínom, napríklad aminoacetaldehyddimetylacetálom, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je CH2CI2, aby vznikla X-4. V závislosti od toho, či je potrebné neutralizovať kyselinu, môže sa použiť pridaná zásada, ako je trietylamín (Et3N), diizopropyletylamín ((/Pr)2NEt) alebo pyridín. Sú známe mnohé ďalšie spôsoby na premenu karboxylovej kyseliny na amid a dajú sa nájsť vo všeobecne používaných publikáciách, ako je “Compendium of Organic Synthetic Methods, zv. I až VI (publikoval Wiley-lnterscience), alebo Bodansky, “The Practice of Peptide Synthesis” (publikoval Springer-Verlag). Dimetylacetal zlúčeniny X-4 sa rozštiepi na príslušný aldehyd (X-5) pri kyslých podmienkach, výhodne kyselinou chlorovodíkovou v THF alebo dioxáne. Ďalšie spôsoby premeny dimetylacetalu na aldehyd sú opísané v štandardne používaných publikáciách, ako Greene: „Protective Groups in Organic Synthesis” (publikoval Wileylnterscience). Amidoaldehyd X-5 sa cyklizuje na oxazol X-6 podľa spôsobu Rovnyaka (J. Med. Chem. 40, 24-34, 1997). X-6 sa potom premení na X-7 podľa postupu, opísaného v schéme V.
Schéma XI
(2) ·· ···· ·· ·· ·· • · · · · · · ···
-35··· ··· · · · ·· · ·· ···· ·· ···
Schéma XI - pokračovanie
(a) BnCI, K2CO3, acetón; (b) (CH3O)NHCH3HCI, AICI3, toluén; (c) 2-brómpyridín, ŕerc-BuLi, THF; (d) (EtO)2P(O)CH2CO2Et, NaH, THF; (e) H2, Pd/C, EtOH; (f) 6-metylamino-2-pyridyletanol, DIAD, (Ph)3P, THF; (g) LiOH, THF, H2O, potom okyslenie.
Fenolová skupina komerčne dostupného metyl-4-hydroxyfenylacetátu XI-1 sa chráni ako jeho benzyléter, ako je opísané v schéme V. Výsledná zlúčenina XI-2 reaguje s hydrochloridom Λ/,Ο-dimetylhydroxylamínu v prítomnosti AICI3 v inertnom rozpúšťadle, výhodne toluéne, podľa všeobecného spôsobu Weinreba (Synth. Commun. 12, 989,1982), aby vznikla XI-3. Táto zlúčenina reaguje s vhodným Grignardovým alebo organolítnym činidlom, aby vznikli ketóny, podľa všeobecného spôsobu Weinreba (Tet. Lett. 22, 3815, 1981). Napríklad, 2-lítiumpyridín, pripravený z 2-brómpyridínu a tercbutyllítia, reaguje s XI-3 v éterovom rozpúšťadle, ako je THF alebo DME, aby vznikol ketónový derivát XI-4. Tento ketón reaguje vo Wittigovom type reakcie s trietylfosfonoacetátom v prítomnosti vhodnej zásady, napríklad LiN(TMS)2 ·· ·· ·· • · · ···· ·
-36alebo NaH, v polárnom aprotickom rozpúšťadle, výhodne THF, aby vznikol α,β-nenasýtený ester XI-5. Ako je opísané v schéme V, hydrogenácia zlúčeniny XI-5 redukuje olefín a súčasne odstraňuje benzyléter, aby vznikla XI6. Táto zlúčenina sa potom premení na XI-7 postupom, opísaným v schéme V.
·· ···· ··· ··· · · ·· · ·· ···· ·· ·
Schéma XII
(a) NaH, 4-metoxybenzylchlorid, DMF; (b) BBr3, CH2CI2; (c) 6-(/V-Boc-/\/-metylamino)-2-pyridyletanol, DIAD, (Ph3)P, CH2CI2; (d) 4 N HCI/dioxán; (e) 1,0 N NaOH, EtOH, potom okyslenie.
Vhodne /V-funkcionalizovaný derivát aminokyseliny, napríklad /V-fenylglycín XII-1, reaguje s príslušne funkcionalizovaným benzylhalogenidom, napríklad 4-metoxybenzylchloridom, aby vznikla XII-2. Reakcia je sprostredkovaná zásadou, ako je NaH alebo LiN(TMS)2, a uskutočňuje sa v polárnom aprotickom rozpúšťadle, vo všeobecnosti THF, DMF alebo ich zmesiach. Produkt X1I-2 sa následne premení na XI1-5 podľa postupu, opísaného v schéme VIII.
(a) hydrochlorid metylesteru glycínu, NaBH3CN, 3 A sitá, MeOH; (b) 6-(/V-Boc/V-metylamino)-2-pyridyletanol, DIAD, (Ph3)P, CH2CI2; (c) 4 N HCI/dioxán; (d) 1,0 N NaOH, MeOH, THF, potom okyslenie.
Vhodne funkcionalizovaný aromatický aldehyd, ako je 4-hydroxy-2metoxybenzaldehyd XIII-1, reaguje s derivátom aminokyseliny, napríklad hydrochloridom metylesteru glycínu, pri redukčných aminačných podmienkach, aby vznikla XIII-2. Redukčná aminácia zahrnuje reakciu aldehydu alebo ketónu s amínom v prítomnosti vhodného redukčného činidla, vo všeobecnosti kyanobórhydridom sodným (NaBH3CN) alebo triacetoxybórhydridom sodným (NaB(OAc)3H), často v prítomnosti kyselinového katalyzátora, vo všeobecnosti kyseliny octovej alebo kyseliny chlorovodíkovej. Reakcia pokračuje cez prechodný amín, ktorý reaguje in situ s redukčným činidlom, aby vznikol amín. Alternatívne sa imín môže pripraviť ako samostatná častica a redukovať v nasledujúcom kroku. Typické rozpúšťadlá pre túto reakciu zahrnujú CH2CI2, DMF alebo alkohol, ako je MeOH alebo EtOH. Dehydratačné činidlo, ako sú molekulárne sitá, MgSO4 alebo trimetylortoformiát, sa môže použiť na reakciu ·· ···· ·· ·· ·· ·· · ···· ··· ··· · · · · · ·· · ·· ···· ·· ·
-38s vodou, uvoľnenou v priebehu reakcie. Produkt XIII-2 sa následne premení na XI11-4 podľa postupu, opísaného v schéme VIII.
Schéma XIV
¢8)
(9) ·· ···· ·· · ···· ··· ··· ·· · · ·
-39··· ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
Schéma XIV - pokračovanie
(a) triizopropylsilylchlorid, imidazol, DMF; (b) metyl-3-(benzyloxykarbonyl)-3butenoát, Pd(OÄc)2, P(tol)3, (i-Pr^NEt, propionitril; (c) H2, 10 % Pd/C, i-PrOH, EtOAc; (d) benzylester serínu, EDO, HOBt hhO, EtsN, DMF; (e) Burgessovo činidlo, THF; (f) CI3CBr, DBU, CH2CI2; (g) TBAF, THF; (h) 6-(metylamino)-2pyridyletanol, DIAD, (Ph)3P, THF; (i) LiOH, THF, H2O, potom okyslenie.
Halogénfenolový derivát, napríklad 4-brómfenol XIV-1, sa premení na vhodne chránený derivát, napríklad 4-bróm-1-(triizopropylsilyloxy)benzén XIV-2. Chrániaca skupina pre fenol musí byť kompatibilná s následným chemickým prostredím a tiež musí byť schopná dať sa selektívne odstrániť, ak je to žiaduce. Spôsoby ochrany fenolov sú opísané v štandardne používaných publikáciách, ako Greene: „Protective Groups in Organic Synthesis (publikoval Wiley-lnterscience). XIV-2 sa premení na XIV-4 a následne na XIV5 podľa všeobecných spôsobov, opísaných v schéme X. XIV-5 sa potom premení na oxazolový derivát XIV-7. Sú známe viaceré spôsoby premeny amidoalkoholov na oxazoiy (Meyers, Tetrahedon 50, 2297-2360, 1994; Wipf, J. Org. Chem. 58, 3604-3606, 1993). Napríklad amidoalkohol XIV-5 sa môže premeniť najprv na oxazolín XIV-6.Táto transformácia sa vo všeobecnosti uskutočňuje pri dehydratačných podmienkach, ako je reakcia s Burgessovým činidlom v THF. Oxazolín XIV-6 sa potom oxiduje na oxazol XIV-7 s použitím, napríklad, brómtrichlórmetánu a DBU v CH2CI2 (Williams, Tetrahedon Letters 38, 331-334, 1997) alebo CuBľ2 v DBU vo vhodnom rozpúšťadle, ako je EtOAc/CHCb alebo CH2CI2 (Barrish, J. Org. Chem. 58, 4494-4496, 1993). Odstránenie silylovej chrániacej skupiny poskytuje fenol XIV-8, ktorý sa premení na XIV-10, ako je opísané v schéme V.
·· ····
-40·· ·· ' · · · · · · • · · · · ·
Schéma XV
(a) H2, 10 % Pd/C, EtOH; (b) Me2NH-HCI, EDC, HOBtH2O, Et3N, DMF; (c) LiOH, THF, H2O, potom okyslenie.
Zlúčenina XV-1, pripravená, ako je opísané v schéme XIV, sa premení na derivát XV-2 karboxylovej kyseliny hydrogenáciou v prítomnosti vhodného katalyzátora, výhodne kovového paládia na aktívnom uhlíku (Pd/C), v inertnom rozpúšťadle, vo všeobecnosti MeOH, EtOH, EtOAc alebo ich zmesiach. XV-2 sa premení na amidový derivát XV-3 podľa všeobecných spôsobov pre tvorbu amidov z karboxylových kyselín opísaných v schéme X. Saponifikácia, opísaná v schéme V, dáva XV-4.
·· ··
(a) (COCI)2, DMF, CH2CI2; (b) (Ph3P)2CuBH4l (Ph)3P, acetón; (c) dimetyl-1diazo-2-oxopropylfosfonát, K2CO3, MeOH; (d) BBr3, CH2CI2; (e) 6-(/V-Boc-/Vmetylamino)-2-pyridyletanol, DEAD, (Ph)3P, CH2CI2; (f) 4N HCI/dioxán; (g) 1N NaOH, MeOH, potom okyslenie.
Zlúčenina XVI-1, pripravená, ako je opísané v schéme X, sa premení na aldehydový derivát XVI-2, výhodne spôsobom Fleeta a Hardinga (Tet. Lett. 11. 975-978, 1979). Tento spôsob zahrnuje začiatočnú premenu skupiny karboxylovej kyseliny zlúčeniny XVI-1 na zodpovedajúci chlorid kyseliny pri štandardných podmienkach, ktoré sú odborníkom v tejto oblasti dobre známe, nasledujúcu redukciu na aldehyd s použitím (Ph3P)2CuBH4. Sú známe ďalšie spôsoby selektívnej premeny karboxylovej kyseliny na aldehyd v prítomnosti esteru karboxylovej kyseliny a dajú sa nájsť v štandardne používaných publikáciách, ako je Compendium of Organic Synthetic Methods (publikoval Wiley-Interscience). Aldehyd XVI-2 sa následne transformuje na acetylénový derivát XVI-3 spôsobom podľa Mullera a kol. (Syn. Lett. 521-522, 1996). Teda, XVI-2 reaguje s dimetyl-1-diazo-2-oxopropylfosfonátom v prítomnosti vhodnej zásady, vo všeobecnosti Κ2ΟΟ3, vo vhodnom rozpúšťadle, ako je metanol. Sú ·· ····
-42známe ďalšie spôsoby premeny aldehydu na acetylén a dajú sa nájsť vo všeobecne používaných publikáciách, ako je Compendium of Organic
Synthetic Methods (publikoval Wiley-lnterscience). Produkt XVI-3 sa následne premení na VXI-5 podľa postupu, opísaného v schéme VIII.
Výraz “amidové kondenzačné činidlá”, ako sa tu používa, označuje činidlá, ktoré sa môžu použiť na vytvorenie peptidových väzieb. Typické kondenzačné metódy využívajú karbodiimidy, aktivované anhydridy a estery a acylové halogenidy. Typické sú činidlá, ako EDC, DCC, DPPA, BOP činidlo, HOBt, ΛΖ-hydroxysukcínimid a oxalylchlorid.
Kondenzačné metódy na vytvorenie peptidových väzieb sú v doterajšom stave techniky dobre známe. Spôsoby syntézy peptidov, vo všeobecnosti uvedené Bodanskym a kol., The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Berlín 1984, Alim a kol., v J. Med. Chem. 29, 984, 1986 a J. Med. Chem. 30, 2291, 1987, ilustrujú vo všeobecnosti túto metódu a sú sem zahrnuté odkazom.
Typicky sa viaže amín alebo anilín cez svoju voľnú aminoskupinu na vhodný substrát karboxylovej kyseliny s použitím vhodného karbodiimidového kondenzačného činidla, ako je Λ/,/V'-dicyklohexylkarbodiimid (DCC), najlepšie v prítomnosti katalyzátorov, ako je 1-hydroxybenzotriazol (HOBt) a dimetylaminopyridín (DMAP). Tiež sú vhodné ďalšie spôsoby, ako je tvorba aktivovaných esterov, anhydridov alebo halogenidov kyselín, voľných karboxylov vhodne chráneného kyselinového substrátu, a následná reakcia s voľným amínom vhodne chráneného amínu, voliteľne v prítomnosti zásady. Napríklad sa na chránenú Boc-aminokyselinu alebo Cbz-amidinobenzoovú kyselinu pôsobí v bezvodom rozpúšťadle, ako je metylénchlorid alebo tetrahydrofurán (THF), v prítomnosti zásady, ako je N-metylmorfolín, DMAP alebo trialkylamín, izobutylchlórformiátom, aby sa vytvoril “aktivovaný anhydrid, ktorý následne reaguje s voľným amínom druhej chránenej aminokyseliny alebo anilínu.
Užitočné medziprodukty na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca I, v ktorom R2 je benzimidazol, opísali Nestor a kol., J. Med. Chem., 27, 320, 1984. Vzorové spôsoby prípravy benzimidazolových zlúčenín, užitočných ako • · ·· ···· ·· ·· • > · · • · · • · 9 • · · • · · • · · • · ·· ·
-43medziprodukty v tomto vynáleze, sú tiež známe v doterajšom stave techniky a dajú sa nájsť napríklad v EP-A 0 381 033.
Adičné soli s kyselinami týchto zlúčenín sa pripravia štandardným spôsobom vo vhodnom rozpúšťadle z východiskovej zlúčeniny a pri nadbytku kyseliny, ako je chlorovodíková, bromovodíková, fluorovodíková, sírová, fosforečná, octová, trifluóroctová, maleínová, jantárová alebo metánsulfónová. Niektoré z týchto zlúčenín tvoria vnútorné soli alebo zwitterióny, ktoré môžu byť prijatefné. Katiónové soli sa pripravia pôsobením na východiskovú zlúčeninu nadbytkom alkalického činidla, ako je hydroxid, uhličitan alebo alkoxid, obsahujúceho vhodný katión; alebo vhodným organickým amínom. Katióny, ako je Li+, Na+, K+, Ca++, Mg++ a NH4 +, sú špecifickými príkladmi katiónov, prítomných vo farmaceutický prijateľných soliach.
Tento vynález tiež poskytuje farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú zlúčeninu všeobecného vzorca I a farmaceutický prijateľný nosič. V súlade s tým sa zlúčeniny všeobecného vzorca I môžu použiť pri výrobe liekov. Farmaceutické prostriedky zlúčenín všeobecného vzorca I, pripravené, ako sme opísali predtým, sa môžu formulovať ako roztoky alebo lyofilizované prášky na parenterálne podávanie. Prášky sa môžu rekonštituovať pridaním vhodného riedidla alebo ďalšieho farmaceutický prijateľného nosiča pred použitím. Tekutou formuláciou môže byť pufrovaný, izotonický, vodný roztok. Príkladmi vhodných riedidiel sú normálny izotonický soľný roztok, štandardná 5% dextróza vo vode alebo pufrovanom roztoku octanu sodného alebo amónneho. Takáto formulácia je zvlášť vhodná na parenterálne podávanie, ale tiež sa môže použiť na orálne podávanie, alebo ju môže obsahovať inhalátor alebo rozprašovač s odmeriavanými dávkami na insufláciu. Môže byť žiaduce pridať vehikulá, ako je polyvinylpyrolidón, želatína, hydroxycelulóza, akácia, polyetylénglykol, manitol, chlorid sodný alebo citran sodný.
Alternatívne sa tieto zlúčeniny môžu tvarovať do kapsúl, tabliet alebo pripraviť v emulzii alebo sirupe na orálne podávanie. Farmaceutický prijateľné tuhé alebo kvapalné nosiče sa môžu pridať na zvýšenie alebo stabilizáciu farmaceutického prostriedku alebo na uľahčenie prípravy farmaceutického ·· ···· • 9 ·
-44prostriedku. Tuhé nosiče zahrnujú škrob, laktózu, dihydrát síranu vápenatého, sádrovec, stearan horečnatý alebo kyselinu stearovú, mastenec, pektín, arabskú gumu, agar alebo želatínu. Kvapalné nosiče zahrnujú sirup, arašidový olej, olivový olej, fyziologický roztok alebo vodu. Nosič môže tiež zahrnovať materiál s oneskoreným uvoľňovaním, ako je glycerylmonostearát alebo glyceryldistearát, samotný alebo s voskom. Množstvo tuhého nosiča je premenlivé, ale výhodne bude medzi asi 20 mg a asi 1 g na jednotkovú dávku. Farmaceutické prípravky sa robia bežnými farmaceutickými metódami, zahrnujúcimi mletie, miešanie, granuláciu a lisovanie, keď je to potrebné, pre tabletkové formy; alebo mletie, miešanie a plnenie pre formy kapsúl z tvrdej želatíny. Keď sa použije kvapalný nosič, prípravok bude vo forme sirupu, tinktúry, emulzie alebo vodnej alebo bezvodej suspenzie. Takýto kvapalný prostriedok sa môže podávať priamo p.o., alebo plniť do mäkkej želatínovej kapsuly.
Na rektálne podávanie sa môže zlúčenina podľa tohto vynálezu tiež kombinovať svehikulom, ako je kakaové maslo, glycerín, želatína alebo polyetylénglykoly, a vytvarovať do čapíka.
Tu opísané zlúčeniny sú antagonistami vitronektínového receptora a sú užitočné pri liečení chorôb, kde sa základná patológia dá pripísať Ugandu alebo bunke, ktorá interaguje s vitronektínovým receptorom. Napríklad sú tieto zlúčeniny užitočné pri liečbe chorôb, kde patologický stav vytvára strata kostnej hmoty. Teda tieto zlúčeniny sú užitočné na liečbu osteoporózy, hyperparatyreoidizmu, Pagetovej choroby, hyperkalcémie malignity, osteolytických lézií, produkovaných kostnými metastázami, straty kostnej hmoty v dôsledku nepohyblivosti alebo nedostatku pohlavných hormónov. Predpokladá sa, že zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa dajú využiť ako protinádorové, antiangiogénne, protizápalové a protimetastázové činidlá a sú užitočné pri liečbe aterosklerózy a restenózy.
Zlúčenina sa pacientovi podáva buď orálne alebo parenterálne takým spôsobom, že koncentrácia liečiva je dostatočná na inhibíciu kostnej resorpcie alebo inej takej indikácie. Farmaceutický prostriedok, ktorý obsahuje túto zlúčeninu, sa podáva v orálnej dávke medzi asi 0,1 a asi 50 mg/kg spôsobom, ·· ···· ·· ·· ···· • · · «· ·
-45ktorý zodpovedá stavu pacienta. Výhodne by orálna dávka mohla byť okolo 0,5 až asi 20 mg/kg. Na akútnu liečbu je výhodné parenterálne podanie. Najefektívnejšia je intravenózna infúzia peptidu v 5% dextróze vo vode alebo normálnom fyziologickom roztoku alebo podobnej formulácia s vhodnými vehikulami, hoci vhodná je tiež injekcia intramuskulárneho bolusu. Parenterálna dávka bude typicky okolo 0,01 až asi 100 mg/kg; výhodne medzi 0,1 a 20 mg/kg. Zlúčeniny sa podávajú jeden- až štyrikrát denne na takej úrovni, aby sa dosiahla celková denná dávka okolo 0,4 až okolo 400 mg/kg/deň. Presnú úroveň a spôsob, ktorým sa zlúčeniny podávajú, ľahko určí odborník v tejto oblasti s rutinnou skúsenosťou porovnaním hladiny látky v krvi s koncentráciou, potrebnou na dosiahnutie liečebného efektu.
Tento vynález ďalej poskytuje spôsob liečby osteoporózy alebo inhibície straty kosti, ktorý zahrnuje podávanie zlúčeniny všeobecného vzorca I postupne alebo v spolu s ďalšími inhibítormi kostnej resorpcie, ako sú bisfosfonáty (t. j. alendronát), substitučná liečba hormónmi, antiestrogény alebo kalcitonín. Navyše, tento vynález poskytuje spôsob liečby použitím zlúčeniny podľa tohto vynálezu a anabolického činidla, ako je kostný morfogénny proteín, iproflavón, užitočné pri prevencii kostných strát a/alebo na zvýšenie kostnej hmoty.
Navyše, tento vynález poskytuje spôsob inhibície rastu nádoru, ktorý zahrnuje podávanie zlúčeniny všeobecného vzorca I postupne alebo spolu s antineoplastickým činidlom. Zlúčeniny triedy analógov kamptotecínu, ako je topotekán, irinotekán a 9-aminokamptotecín, a koordinačné zlúčeniny platiny, ako je cisplatina, ormaplatina a tetraplatina, sú dobre známymi skupinami antineoplastických činidiel. Zlúčeniny triedy analógov kamptotecínu sú opísané v U.S. patentoch č. 5 004 758, 4 604 463, 4 473 692, 4 545 880, 4 342 776, 4 513 138, 4 399 276, EP spisoch patentových prihlášok č. 0 418 099 a 0 088 642, Wani a kol., J. Med. Chem. 29, 2358, 1986, Wani a kol., J. Med. Chem. 23, 554, 1980, Wani a kol., J. Med. Chem. 30,1774,1987, a Nitta a kol., Proc. 14th International Congr. Chemotherapy, Anticancer Section I, 28, 1985, pričom celý opis každého z nich je sem zahrnutý odkazom. Koordinačný komplex platiny, cisplatina, je dostupný pod názvom Platinol® od Bristol • · ·· ···· ·· ·· • · · ’ • · • · · • · · • · · • · · ·· ·
-46Myers-Squibb Corporation. Užitočné formulácie pre cisplatinu sú opísané v U.S. patentoch č. 5 562 925 a 4 310 515, pričom celý opis každého z nich je sem zahrnutý odkazom.
V spôsobe inhibovania rastu nádoru, ktorý zahrnuje podávanie zlúčeniny všeobecného vzorca I postupne alebo spolu s neoplastickým činidlom, sa môže koordinačná zlúčenina platiny, napríklad cisplatina, podávať s použitím pomalej intravenóznej infúzie. Výhodným nosičom je dextróza/fyziologický roztok, obsahujúci manitol. Schéma dávkovania koordinačnej zlúčeniny platiny môže byť na báze od asi 1 do asi 500 mg na meter štvorcový (mg/m2) plochy povrchu tela na jednu kúru liečby. Infúzie koordinačnej zlúčeniny platiny sa môžu podávať jeden až dvakrát týždenne a týždenné liečby sa môžu opakovať niekoľkokrát. Pri použití zlúčeniny triedy analógov kamptotecínu na parenterálne podávanie je jedna liečebná kúra vo všeobecnosti od asi 0,1 do asi 300,0 mg/m2 plochy povrchu tela denne počas piatich po sebe nasledujúcich dní. Najvýhodnejšia liečebná kúra pre topotekán je od asi 0,1 do asi 2,0 mg/m2 plochy povrchu tela denne počas piatich po sebe nasledujúcich dní. Liečebná kúra sa výhodne opakuje najmenej raz v asi sedem- až asi dvadsaťosemdňovom intervale.
Farmaceutický prostriedok sa môže formulovať tak so zlúčeninou všeobecného vzorca I, ako aj s antineoplastickým činidlom v tej istej nádobe, ale výhodná je formulácia v rôznych nádobách. Keď sa obe činidlá vyskytnú vo forme roztoku, môžu byť súčasťou infúzno/injekčného systému na súčasné podávanie alebo v usporiadaní za sebou.
Na bežné podávanie zlúčeniny všeobecného vzorca I a antineoplastického činidla v rovnakom alebo odlišnom čase sa pripraví súprava, zahrnujúca v jednom kontajneri, ako je skrinka, krabica alebo iný kontajner, jednotlivé fľaše, vrecká, liekovky alebo iné nádoby, z ktorých každá obsahuje účinné množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I na parenterálne podanie, ako sme opísali vyššie, a účinné množstvo antineoplastického činidla na parenterálne podanie, ako je opísané vyššie. Takáto súprava môže zahrnovať napríklad obe farmaceutické činidlá v oddelených nádobách alebo v tej istej nádobe, výhodne ako iyofilizované zasúvacie kusy a nádoby s roztokmi na ·· ···· • · • · · • · · • · · ·· ·
-47rekonštitúciu. Jej obmena zahrnuje roztok na rekonštitúciu a lyofilizovaný zasúvací kus vo dvoch komorách jednej nádoby, ktoré sa dajú priviesť k zmiešaniu pred použitím. S takýmto usporiadaním sa môžu antineoplastické činidlo a zlúčenina podľa tohto vynálezu zabaliť oddelene, ako do dvoch nádob, alebo lyofilizovať spolu ako prášok a dodať v jednej nádobe.
Keď sa obe činidlá dodajú vo forme roztoku, môžu sa nachádzať v infúzno/injekčnom systéme na súčasné podanie alebo v tandemovom usporiadaní. Napríklad zlúčenina všeobecného vzorca I môže byť v i.v. injekčnej forme, alebo v infúznom vrecku, zapojenom do série cez hadičku s antineoplastickým činidlom v druhom infúznom vrecku. S použitím takéhoto systému môže pacient dostať začiatočnú injekciu bolusového typu alebo infúziu zlúčeniny všeobecného vzorca I, po ktorej nasleduje infúzia antineoplastického činidla.
Zlúčeniny sa môžu testovať v jednej z niekoľkých biologických skúšok na stanovenie koncentrácie zlúčeniny, ktorá je potrebná na zabezpečenie farmakologického účinku.
Inhibícia väzby vitronektínu [3H]-SK&F-107260 väzba na ανβ3 v tuhej fáze: Ľudská placenta alebo ľudská krvná doštička ανβ3 (0.1 až 0,3 mg/ml) v pufri T (obsahujúcom 2 mM CaCb a 1 % oktylglukozidu) sa zriedili pufrom T, obsahujúcim 1 mM CaCI2, 1 mM MnCI2, 1 mM MgCb (pufer A) a 0,05 % NaN3, a potom sa ihneď dodali na 96-jamkové ELISA platne (Corning, New York, NY) v množstve 0,1 ml na jamku. Dodalo sa 0,1 až 0,2 pg ανβ3 na jamku. Platne sa inkubovali cez noc pri 4 °C. V čase experimentu sa jamky raz premyli pufrom A a inkubovali sa s 0,1 ml 3,5% albumínu bovinného séra v rovnakom pufri 1 hodinu pri teplote miestnosti. Po inkubácii sa jamky kompletne odsali a dvakrát premyli 0,2 ml pufra A.
Zlúčeniny sa rozpustili v 100% DMSO v 2 mM zásobného roztoku, ktorý sa zriedil väzbovým pufrom (15 mM tris-HCI (pH 7,4), 100 mM NaCl, 1 mM CaCI2, 1 mM MnCI2, 1 mM MgCI2) na konečnú koncentráciu zlúčeniny 100 μΜ. Tento roztok sa potom zriedil na požadovanú konečnú koncentráciu zlúčeniny.
·· ·· ·· • · · · · · · • · · · · • · · · · · ;
• · · · · . ·· ···· ·· * ·· ····
-48Rôzne koncentrácie neoznačených antagonistov (0,001 až 100 μΜ) sa pridali do jamiek trojmo, po čom nasledovalo pridanie 5,0 nN [3H]-SK&F-107260 (65 až 86 Ci/mmol).
Platne sa inkubovali 1 hodinu pri teplote miestnosti. Po inkubácii sa jamky kompletne odsali a raz sa premyli 0,2 ml ľadovo studeného pufra A spôsobom z jamky-do-jamky. Receptory sa solubilizovali s 0,1 ml 1% SDS a väzba [3H]-SK&F-107260 sa určila kvapalinovým scintilačným počítaním s pridaním 3 ml Ready Safe v Beckmanovom LS kvapalinovom scintilačnom počítači so 40% účinnosťou. Nešpecifické viazanie [3H]-SK&F-107260 sa určilo v prítomnosti 2 μΜ SK&F-107260 a bolo trvalo menšie než 1 % celkového dodávania rádioligandov. IC50 (koncentrácia antagonistu, inhibujúca 50 % väzieb [3H]-SK&F-107260) sa určila programom na prispôsobenie krivke metódou najmenších štvorcov, ktorý sa upravil z LUNDON-2 programu. K, (disociačná konštanta antagonistu) sa vypočítala podľa rovnice: Kí = IC5o/(1+L/Kd). kde L a Kd sú koncentrácia a disociačná konštanta [3H]SK&F-107260.
Zlúčeniny podľa tohto vynálezu inhibujú väzbu vitronektínu na SK&F107260 v rozpätí koncentrácie od asi 10 do asi 0,01 pmol.
Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa tiež testovali na in vitro a in vivo kostnú resorpciu v testoch, ktoré sú v doterajšom stave techniky štandardné na vyhodnotenie inhibície tvorby kosti, ako je skúška tvorby jamky, opísaná v EP 528 587, ktorá sa tiež môže uskutočniť s použitím ľudských osteoklastov namiesto potkaních osteoklastov, a ovarektomizovaný potkaní model, opísaný Wronskim a kol., Celíš and Materials Sup. 1, 69-74,1991.
Test migrácie buniek hladkého svalu cievy
Použili sa potkanie alebo ľudské bunky hladkého svalu aorty. Migrácia buniek sa monitorovala v Transwellovej komore pre bunkové kultúry s použitím polykarbonátovej membrány s pórmi 8 pm (Costar). Spodná plocha filtra sa pokryla vitronektínom. Bunky sa suspendovali v DMEM, doplnenom 0,2 % albumínu bovinného séra, s koncentráciou 2,5 až 5,0 x 106 buniek/ml a vopred sa na ne pôsobilo testovacou zlúčeninou pri rôznych koncentráciách 20 minút ·· ·· ···· ·· ·· » · · <
• · • · · • · · • · · ·· ·
-49pri 20 °C. Ako kontrola sa použilo samotné rozpúšťadlo. 0,2 ml bunkovej suspenzie sa umiestnilo do horného oddelenia komory. Spodné oddelenie obsahovalo 0,6 ml DMEM, doplneného 0,2 % albumínu bovinného séra. Inkubácia sa uskutočnila pri 37 °C v atmosfére 95 % vzduchu/5 % CO2 po dobu 24 hodín. Po inkubácii sa bunky, ktoré nemigrovali, na hornom povrchu filtra odstránili jemným zoškrabaním. Filter sa potom fixoval v metanole a zafarbil sa 10% Giemsovým farbivom. Migrácia sa merala buď a) počítaním množstva buniek, ktoré migrovali k spodnému povrchu filtra, alebo b) extrakciou zafarbených buniek 10% kyselinou octovou, po čom nasledovalo určenie absorbancie pri 600 nM.
Tyreoparatyroidektomizovaný potkaní model
Každá experimentálna skupina pozostáva z 5 až 6 dospelých samcov
Sprague-Dawley potkanov (hmotnosť tela 250 až 400g). Potkany boli tyreoparatyroidektomizované (predajcom, Taconic Farms) 7 dní pred použitím. Všetky potkany dostali substitučnú dávku tyroxínu každé 3 dni. Pri prijatí potkanov sa merali hladiny cirkulujúceho ionizovaného vápnika v celej krvi bezprostredne jej po vytiahnutí punkciou žily chvosta do heparinizovaných skúmaviek. Potkany sa zaradia, ak hladina ionizovaného Ca (meraná kalciovým pH analyzátorom Ciba-Corning, model 634) je < 1,2 mM/Ι. Každý potkan sa vybaví dočasne zavedeným venóznym alebo arteriálnym katétrom na privádzanie testovaného materiálu a na odoberanie vzoriek krvi. Potkanom sa potom nasadí stravovanie potravou bez vápnika a s deionizovanou vodou. Základné hladiny Ca sa odmerajú a každému potkanovi sa kontinuálnou intravenóznou infúziou cez venózny katéter s použitím vonkajšej injekčnej striekačky podá buď kontrolné vehikulum alebo ľudský paratyroidálny hormón 1-34 peptid (hPTH1-34, dávka 1,25 pg/kg/h vo fyziologickom roztoku/0,1 % albumínu bovinného séra, Bachem, Ca) alebo zmes hPTH1-34 a testovacieho materiálu. Vápniková odpoveď každého potkana sa meria v dvojhodinových intervaloch počas trvania infúzie 6 až 8 hodín.
·· ···· ··
-50Skúšky resorpcie a adhézie ľudských osteoklastov
Skúšky jamkovej resorpcie a adhézie sa vyvinuli a štandardizovali s použitím normálnych ľudských osteoklastov, pochádzajúcich z tkaniva osteoklastómu. Skúška 1 sa vyvinula na meranie objemov osteoklastových jamiek laserovým konfokálnym mikroskopom. Skúška 2 sa vyvinula ako filter s vyšším výkonom, v ktorom sa kolagénové fragmenty (uvoľňované počas resorpcie) merajú kompetitívnym ELISA.
Skúška 1 (s použitím laserového konfokálneho mikroskopu) • Alikvotné časti suspenzií buniek, pochádzajúcich z ľudského osteoklastómu, sa odstránia z banky s kvapalným dusíkom, rýchlo sa zahrejú na 37 °C a premyjú 1 x v médiu RPMI-1640 centrifugáciou (1000 ot./min, 5 minút pri 4 °C).
• Médium sa odsaje a nahradí myšou anti-HLA-DR protilátkou, potom sa zriedi 1:3 v médiu RPMI-1640. Suspenzia sa inkubuje 30 minút na ľade a často sa mieša.
• Bunky sa premyjú 2 x studeným RPMI-1640, po čom nasleduje centrifugácia (1000 ot./minútu, 5 minút pri 4 °C) a bunky sa potom premiestnia do sterilnej 15 ml centrifúgovej skúmavky. Množstvo mononukleárnych buniek sa spočíta v zlepšenej Neubauerovej počítacej komore.
• Dostatočný počet magnetických guľôčok (5/mononukleárnu bunku), potiahnutých kozím antimyším IgG (Dynal, Great Neck, NY), sa odstráni z ich zásobnej fľaše a umiestni sa do 5 ml čerstvého média (toto zmyje toxickú azidovú konzervačnú látku). Médium sa odstráni znehybnením guľôčok na magnete a nahradí sa čerstvým médiom.
• Guľôčky sa zmiešajú s bunkami a suspenzia sa inkubuje 30 minút na ľade. Suspenzia sa často mieša.
• Guľôčky pokryté bunkami, sa znehybnia na magnete a zvyšné bunky (frakcia, bohatá na osteoklasty) sa zlejú do sterilnej 50 ml centrifúgovej skúmavky.
·· ···· ·· ·· • · · <
• · • · · • · · • · · ·· ·
-51 • Čerstvé médium sa pridá ku guľôčkam, pokrytým bunkami, aby sa vypudili akékoľvek zachytené osteoklasty. Tento premývací proces sa opakuje 10 x. Guľôčky, pokryté bunkami, sa znehodnotia.
• Životaschopné osteoklasty sa spočítajú v počítacej komore s použitím diacetátu fluoresceínu na označenie živých buniek. Použije sa Pasteurova pipeta na jedno použitie s veľkým otvorom na pridanie vzorky do komory.
• Osteoklasty sa peletizujú centrifugáciou a hustota sa upraví na príslušný počet v médiu EMEM (množstvo osteoklastov je premenlivé od nádoru k nádoru), doplní sa 10 % fetálneho teľacieho séra a 1,7 g/liter hydrogénuhličitanu sodného.
• 3 ml alikvotných častí bunkovej suspenzie (na jedno spracovanie zlúčeniny) sa zleje do 15 ml centrifúgových skúmaviek. Bunky sa peletizujú centrifugáciou.
• Do každej skúmavky sa pridajú 3 ml príslušného prípravku zlúčeniny podľa vynálezu (zriedeného na 50 μΜ v médiu EMEM). Tiež sa zahrnú príslušné kontrolné vehikulá, pozitívna kontrola (myšia monoklonálna protilátka [87MEM1] proti vitronektínovému receptoru, zriedená na 100 μg/ml) a izotypová kontrola (lgG2a> zriedená na 100 pg/ml). Vzorky sa inkubujú 30 minút pri 37 °C.
• 0,5 ml alikvotné časti buniek sa zaočkujú na sterilné dentínové rezy v 48-jamkovej platni a inkubujú sa 2 hodiny pri 37 °C. Každý prípravok sa skrínuje štvornásobne.
• Rezy sa premyjú v šiestich výmenách teplého PBS (10 ml/jamku v 6jamkovej platni) a potom sa umiestnia do čerstvého média, obsahujúceho prípravok zlúčeniny alebo kontrolné vzorky. Vzorky sa inkubujú 48 hodín pri 37 °C.
Postup s kyslou fosfatázou (TRAP), rezistentnou voči vínanu (selektívne farbivo na bunky osteoklastového rodu) ·· ···· • · · • · · • · · ·· ·
-52• Kostné rezy, obsahujúce naviazané osteoklasty, sa premyjú vo fosfátovom pufrovanom fyziologickom roztoku a fixujú sa v 2% glutaraldehyde (v 0,2M kakodyláte sodnom) 5 minút.
• Potom sa premyjú vodou a inkubujú sa 4 minúty v TRAP pufri pri 37 °C (0,5 mg/ml naftol-AS-BI-fosfátu, rozpusteného v /V,/V-dimetylformamide) a zmiešajú s 0,25 M citrátovým pufrom (pH 4,5), obsahujúcim 10 mM vínanu sodného.
• Po premytí studenou vodou sa rezy ponoria do studeného acetátového pufra (0,1 M, pH 6,2) obsahujúceho 1 mg/ml stálej granátovej červene a inkubujú sa 4 minúty pri 4 °C.
• Nadbytočný pufer sa odsaje a rezy sa po premytí vodou vysušia na vzduchu.
• TRAP-pozitívne osteoklasty (tehlovočervený/fialový precipitát) sa spočítajú optickým mikroskopom a potom sa odstránia z povrchu dentínu sonikáciou.
• Objemy jamiek sa určia s použitím Nikon/Lasertec ILM21W konfokáineho mikroskopu.
Skúška 2 (s použitím ELISA odčítania)
Ľudské osteoklasty sa obohatia a pripravia na skrínovanie zlúčeniny, ako je opísané v začiatočných 9 krokoch skúšky 1. Kvôli prehľadnosti sa tieto kroky opakujú nižšie.
• Alikvotné časti suspenzií buniek, pochádzajúcich z ľudského osteoklastómu, sa odstránia z banky s kvapalným dusíkom, rýchlo sa zahrejú na 37 °C a premyjú 1 x v médiu RPMI-1640 centrifugáciou (1000 ot./min, 5 minút pri 4 °C).
• Médium sa odsaje a nahradí myšou anti-HLA-DR protilátkou, potom sa zriedi 1:3 v médiu RPMI-1640. Suspenzia sa inkubuje 30 minút na ľade a často sa mieša.
• Bunky sa 2 x premyjú studeným RPMI-1640, po čom nasleduje centrifugácia (1000 ot./min, 5 minút pri 4 °C) a bunky sa potom premiestnia do ·· ·· ·· • · · · · · · • · · · · • · · · · · • · · · · Λ ···· ·· 9 ·· ···· ·· « • · · • · • · · • · · • · · ·· ·
-53sterilnej 15 ml centrifúgovej skúmavky. Množstvo mononukleárnych buniek sa spočíta v zlepšenej Neubauerovej počítacej komore.
• Dostatočný počet magnetických guľôčok (5/mononukleámu bunku), potiahnutých kozím antimyším IgG (Dynal, Great Neck, NY), sa odstráni z ich zásobnej fľaše a umiestni sa do 5 ml čerstvého média (toto zmyje toxickú azidovú konzervačnú látku). Médium sa odstráni znehybnením guľôčok na magnete a nahradí sa čerstvým médiom.
• Guľôčky sa zmiešajú s bunkami a suspenzia sa inkubuje 30 minút na ľade. Suspenzia sa často mieša.
• Guľôčky, pokryté bunkami, sa znehybnia na magnete a zvyšné bunky (frakcia, bohatá na osteoklasty) sa zlejú do sterilnej 50 ml centrifúgovej skúmavky.
• Čerstvé médium sa pridá ku guľôčkam, pokrytým bunkami, aby sa vypudili akékoľvek zachytené osteoklasty. Tento premývací proces sa opakuje 10 x. Guľôčky, pokryté bunkami, sa znehodnotia.
• Životaschopné osteoklasty sa spočítajú v počítacej komore s použitím diacetátu fluoresceínu na označenie živých buniek. Použije sa Pasteurova pipeta na jedno použitie s veľkým otvorom na pridanie vzorky do komory.
• Osteoklasty sa peletizujú centrifugáciou a hustota sa nastaví na príslušný počet v médiu EMEM (množstvo osteoklastov je premenlivé od nádoru k nádoru), doplní sa 10 % fetálneho teľacieho séra a 1,7 g/liter hydrogenuhličitanu sodného.
Na rozdiel od spôsobu, opísaného vyššie v skúške 1, sa zlúčeniny skrínujú v 4 dávkach, aby sa získali IC50. ako je opísané ďalej:
• Osteoklastové preparáty sa predinkubujú 30 minút pri 37 °C s testovacou zlúčeninou (4 dávky) alebo kontrolami.
• Tie sa potom naočkujú na rezy bovinnej kortikálnej kosti v jamkách 48jamkovej platne tkanivovej kultúry a inkubujú sa ďalšie 2 hodiny pri 37 °C.
• Kostné rezy sa premyjú v šiestich výmenách teplého, fosfátom pufrovaného fyziologického roztoku (PBS), aby sa odstránili neadherované ·· ···· ·· ···· ·· ··
I · · « • · · • · · t · · ·· ·
-54bunky, a potom sa vrátia do jamiek 48-jamkovej platne, obsahujúcej čerstvú zlúčeninu alebo kontroly.
• Platňa tkanivovej kultúry sa potom inkubuje 48 hodín pri 37 °C.
• Supernatanty z každej jamky sa odsajú do jednotlivých skúmaviek a skrínujú sa v kompetitívnej ELISA, ktorá deteguje c-telopeptid kolagénu typu I, ktorý sa uvoľňuje počas resorpčného procesu. Je to komerčne dostupná ELISA (Osteometer, Dánsko), ktorá obsahuje králičie protilátky, ktoré špecificky reagujú so sekvenciou 8 aminokyselín (Glu-Lys-Ala-His-Asp-GlyGly-Arg), ktorá sa nachádza na karboxylovom konci telopeptidu a 1-reťazca kolagénu typu I. Výsledky sa vyjadrujú ako % inhibície resorpcie v porovnaní s kontrolným vehikulom.
Skúška adhézie ľudského osteoklastu
Ľudské osteoklasty sa obohatia a pripravia na skrínovanie zlúčeniny, ako je opísané v prvých 9 krokoch skúšky 1. Na objasnenie, tieto kroky sa tu opakujú nižšie.
• Alikvotné časti suspenzií buniek, pochádzajúcich z ľudského osteoklastómu, sa odstránia z banky s kvapalným dusíkom, rýchlo sa zahrejú na 37 °C a premyjú 1 x v médiu RPMI-1640 centrifugáciou (1000 ot./min, 5 minút pri 4 °C).
• Médium sa odsaje a nahradí myšou anti-HLA-DR protilátkou, potom sa zriedi 1:3 v médiu RPMI-1640. Suspenzia sa inkubuje 30 minút na ľade a často sa mieša.
• Bunky sa premyjú 2 x studeným RPMI-1640, po čom nasleduje centrifugácia (1000 ot./min, 5 minút pri 4 °C) a bunky sa potom premiestnia do sterilnej 15 ml centrifúgovej skúmavky. Množstvo mononukleárnych buniek sa spočíta v zlepšenej Neubauerovej počítacej komore.
• Dostatočný počet magnetických guľôčok (5/mononukleárnu bunku), potiahnutých kozím antimyším IgG (Dynal, Great Neck, NY), sa odstráni z ich zásobnej fľaše a umiestni sa do 5 ml čerstvého média (toto zmyje toxickú ·· ····
-55azidovú konzervačnú látku). Médium sa odstráni znehybnením guľôčok na magnete a nahradí sa čerstvým médiom.
• Guľôčky sa zmiešajú s bunkami a suspenzia sa inkubuje 30 minút na ľade. Suspenzia sa často mieša.
• Guľôčky, pokryté bunkami, sa znehybnia na magnete a zvyšné bunky (frakcia, bohatá na osteoklasty) sa zlejú do sterilnej 50 ml centrifúgovej skúmavky.
• Čerstvé médium sa pridá ku guľôčkam, pokrytým bunkami, aby sa vypudili akékoľvek zachytené osteoklasty. Tento premývací proces sa opakuje 10 x. Guľôčky, pokryté bunkami, sa znehodnotia.
• Životaschopné osteoklasty sa spočítajú v počítacej komore s použitím diacetátu fluoresceínu na označenie živých buniek. Použije sa Pasteurova pipeta na jedno použitie s veľkým otvorom na pridanie vzorky do komory.
• Osteoklasty sa peletizujú centrifugáciou a hustota sa upraví na príslušný počet v médiu EMEM (množstvo osteoklastov je premenlivé od nádoru k nádoru), doplní sa 10 % fetálneho teľacieho séra a 1,7 g/liter hydrogénuhličitanu sodného.
• Osteoklasty, pochádzajúce z osteoklastómu, sa predinkubujú so zlúčeninou (4 dávky) alebo kontrolami pri 37 °C po dobu 30 minút.
• Bunky sa potom naočkujú na rezy, potiahnuté osteopontínom (ľudský alebo potkaní osteopontín, 2,5 pg/ml) a inkubujú sa 2 hodiny pri 37 °C.
• Neadherované bunky sa odstránia prudkým premytím sklíčok vo fosfátom pufrovanom fyziologickom roztoku a bunky, ktoré zostali na sklíčkach, sa fixujú v acetóne.
• Osteoklasty sa zafarbia tartrát-rezistentnou kyslou fosfatázou (TRAP), selektívnym markerom pre bunky tohto fenotypu (pozri kroky 15 až 17), a spočítajú sa optickým mikroskopom. Výsledky sú vyjadrené ako % inhibície adhézie v porovnaní s kontrolným vehikulom.
•· ····
-56·· ·· • · · · • · · • · · · · • · · ·· ···· ·· • · · • · • · • · ·· ·
Skúška bunkovej adhézie
Bunky a bunková kultúra
Bunky ľudskej embryonálnej obličky (bunky HEK 293) sa získali z ATCC (Katalógové číslo CRL 1573). Bunky rástli v Earlovom minimálnom esenciálnom médiu (EMEM), obsahujúcom Earlove soli, 10 % fetálneho bovinného séra, 1 % glutamínu a 1 % penicilínu-streptomycínu.
Konštrukty a transfekcie
3,2 kb EcoRI-Kpnl fragment αν podjednotky a 2,4 kb Xbal-Xhol fragment podjednotky β3 sa vložili do EcoRI-EcoRV klonovacích miest pCDN vektora (Aiyar a kol., 1994), ktorý obsahuje CMV promótor a G418 zvoliteľný marker naviazaním na tupý koniec. Aby bola expresia stabilná, 80 x 106 HEK 293 buniek sa elektrotransformovalo s αν+β3 konštruktami (20 pg DNA každej podjednotky), použijúc Gene Pulser (Hensley a kol., 1994) a umiestnilo sa na 100 mm platne (5x105 buniek/platňu). Po 48 hodinách sa rastové médium doplnilo 450 pg/ml Geneticinu (G418 sulfát, GIBCO-BRL, Bethesda, MD). Bunky sa udržiavali v selektívnom médiu, pokým neboli kolónie dosť veľké na skúšku.
Imunocytochemická analýza transfektovaných buniek
Na zistenie, či HEK 293 transfektanty exprimovali vitronektínový receptor, sa bunky imobilizovali na mikroskopických sklíčkach centrifugáciou, fixovali v acetóne 2 minúty pri teplote miestnosti a vysušili na vzduchu. Špecifická reaktivita s 23C6, monoklonálnou protilátkou, špecifickou pre ανββ komplex, sa demonštrovala pomocou štandardnej nepriamej imunofluorescenčnej metódy.
Štúdie bunkovej adhézie
96-jamkové ELISA platne od firmy Corning sa cez noc vopred pokryli 0,1 ml ľudského vitronektínu (0,2 pg/ml v RPMI médiu) pri 4 C. V čase ·· ···
-57experimentu sa platne raz premyli RPMI médiom a blokovali 3,5% BSA v RPMI médiu 1 h pri teplote miestnosti. Transfektované 293 bunky sa znovu suspendovali v RPMI médiu, doplnili 20 mM Hepes, pH 7,4 a 0,1 % BSA pri hustote 0,5 x 106 buniek/ml. 0,1 ml bunkovej suspenzie sa pridalo do každej jamky a inkubovalo sa 1 h pri 37 °C v prítomnosti alebo neprítomnosti rozličných ανβ3 antagonistov. Po inkubácii sa pridalo 0,025 ml 10% formaldehydového roztoku, pH 7,4, a bunky sa fixovali 10 minút pri teplote miestnosti. Platne sa 3 krát premyli 0,2 ml RPMI média a adherované bunky sa farbili 0,1 ml 0,5% toluidínovej modrej v RPMI médiu 20 minút pri teplote miestnosti. Nadbytočné farbivo sa odstránilo rozsiahlym premývaním deionizovanou vodou. Toluidínová modrá, včlenená do buniek, sa eluovala pridaním 0,1 ml 50% etanolu, obsahujúceho 50 mM HCl. Bunková adhézia sa kvantitatívne stanovila pri optickej hustote 600 nm mikrotitrovým platňovým čítačom (Titertek Multiskan MC, Šterling, VA).
Skúška viazania ανβδ v tuhej fáze
Vitronektínový receptor ανβδ sa získal čistením z ľudskej placenty. Receptorový preparát sa zriedil 50 mM tris-HCI, pH 7,5, 100 mM NaCl, 1 mM CaCÍ2,1 mM MnCh, 1 mM MgCb (pufer A) a ihneď sa pridal do 96-jamkových ELISA platní po 0,1 ml na jamku. Pridalo sa 0,1 až 0,2 pg ανββ na jednu jamku. Platne sa inkubovali cez noc pri 4 °C. V čase experimentu sa jamky raz premyli pufrom A a inkubovali sa v 0,1 ml 3,5% albumínu bovinného séra v rovnakom pufri 1 h pri teplote miestnosti. Po inkubácii sa jamky kompletne odsali a dvakrát premyli 0,2 ml pufra A.
V kompetitívnej skúške [3H]-SK&F-107260 sa rôzne koncentrácie neoznačených antagonistov (0,001 až 100 μΜ) pridali do jamiek, po čom nasledovalo pridanie 5,0 nM [3H]-SK&F-107260. Platne sa inkubovali 1 h pri teplote miestnosti. Po inkubácii sa jamky kompletne odsali a raz premyli 0,2 ml ľadovo studeného pufra A spôsobom z jamky-do-jamky. Receptory sa solubilizovali s 0,1 ml 1% SDS a viazanie [3H]-SK&F-107260 sa určilo kvapalinovým scintilačným počítaním s pridaním 3 ml Ready Safe v prístroji »· ····
-58Beckman LS 6800 Liquid Scintillation Counter so 40% účinnosťou. Nešpecifické viazanie [3H]-SK&F-107260 sa určilo v prítomnosti 2 μΜ SK&F107260 a bolo trvalo menšie než 1 % celkového prívodu rádioligandov. IC50 (koncentrácia antagonistu, inhibujúca 50% viazanie [3H]-SK&F-107260), sa určila programom na prispôsobenie krivke metódou najmenších štvorcov, ktorý sa upravil z LUNDON-2 programu. K; (disociačná konštanta antagonistu) sa vypočítala podľa Chengovej a Prusoffovej rovnice: K, = ICso/(1 + L/Kd), kde L a Kd sú koncentrácia a disociačná konštanta [3H]-SK&F-107260.
Inhibícia RGD-sprostredkovanej GPIIb-ll la väzby
Purifikácia GPIIb-llla
Desať jednotiek starých, premytých ľudských krvných doštičiek (získaných od Červeného Kríža) sa lýzovalo miernym miešaním v 3% oktylglukozide, 20 mM tris-HCI, pH 7,4, 140 mM NaCl, 2 mM CaCI2, 2 h pri 4 °C. Lyzát sa centrifúgoval pri 100 OOOxg 1 hodinu. Získaný supernatant sa aplikoval do 5 ml sefarózových 4B stĺpcov šošovicového lektínu (E. Y. Labs), predekvilibrovaných 20 mM tris-HCI, pH 7,4, 100 mM NaCl, 2 mM CaCI2, 1% oktylglukozidom (pufer A). Po 2 h inkubácie sa stĺpce premyli 50 ml studeného pufra A. Lektínom zadržaný GPIIb-llla sa eluoval pufrom A, obsahujúcim 10 % dextrózy. Všetky postupy sa uskutočnili pri 4 °C. Získaný GPIIb-llla mal viac než 95% čistotu, ako preukázala elektroforéza na SDS polyakrylamidovom géle.
Včlenenie GPIIb-llla do lipozómov
Zmes fosfatidylserínu (70 %) a fosfatidylcholínu (30 %) (Avanti Polar Lipids) sa sušila na stenách skúmavky pod prúdom dusíka. Vyčistený GPIIbllla sa zriedil na konečnú koncentráciu 0,5 mg/ml a zmiešal sa s fosfolipidmi v pomere proteínyíosfolipidy 1:3 (hmotnostný). Zmes sa opätovne suspendovaia a sonikovala v kúpeľovom sonifikátore 5 minút. Zmes sa potom cez noc dialyzovala s použitím dialyzačných hadičiek s ohraničením molekulovej hmotnosti na 12 000 až 14 000 voči 1000-násobnému nadbytku ·· ·· ·· • · · · · · · e · · · • · · · · · · • · · · · ·· ···· ·· · ·· ···· • · · • · · • · · ·· ·
-5950 mM tris-HCI, pH 7,4, 100 mM NaCI, 2 mM CaCI2 (s 2 výmenami). Lipozómy, obsahujúce GPIIb-llla, sa centrifúgovali pri 12 OOOxg 15 minút a opätovne suspendovali v dialyzačnom pufri na konečnú koncentráciu proteínu približne 1 mg/ml. Lipozómy sa uskladnili pri -70 °C pre neskoršiu potrebu.
Kompetitívna väzba na GPIIb-llla
Väzba na fibrinogénový receptor (GPIIb-llla) sa testovala metódou nepriamej kompetitívnej väzby použitím [3H]-SK&F-107260 ako ligandu RGDtypu. Skúška väzby uskutočnila na 96-jamkovej filtračnej platňovej súprave (Millipore Corporation, Bedford, MA) s použitím 0,22 μιτι hydrofilných duraporových membrán. Jamky sa vopred pokryli 0,2 ml 10 pg/ml polylyzínu (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO.) pri teplote miestnosti na 1 h na blokovanie nešpecificej väzby. Vždy do štyroch misiek sa pridali rôzne koncentrácie neoznačených benzazepínov. [3H]-SK&F-107260 sa aplikoval do každej jamky na konečnú koncentráciu 4,5 nM, po čom nasledovalo pridanie 1 pg vyčistených lipozómov, obsahujúcich doštičkový GPIIb-llla. Zmesi sa inkubovali 1 h pri teplote miestnosti. GPIIb-llla viazané [3H]-SK&F-107260 sa oddelilo od neviazaného filtráciou s použitím Millipore filtračného potrubia, po čom nasledovalo premytie ľadovo studeným pufrom (2 krát, vždy 0,2 ml). Viazaná rádioaktivita, ktorá zostala na filtroch, sa počítala v 1,5 ml Ready Solve (Beckman Instruments, Fullerton, CA) v prístroji Beckman Liquid Scintillation Counter (model LS6800) so 40% účinnosťou. Nešpecifická väzba sa určila v prítomnosti 2 μΜ neznačeného SK&F-107260 a bola trvalo menšia než 0,14 % celkovej rádioaktivity, pridanej do vzoriek. Všetky údajové body sú priemerom zo štvornásobných určení.
Údaje o kompetitívnej väzbe sa analyzovali postupom prispôsobenia krivke metódou nelineárnych najmenších štvorcov. Táto metóda poskytuje hodnoty IC50 antagonistov (koncentrácia antagonistu, ktorá inhibuje špecifickú väzbu [3H]-SK&F-107260 o 50 % v rovnováhe). IC50 súvisí s rovnovážnou disociačnou konštantou (Kí) antagonistu na základe Chengovej a Prusoffovej rovnice: K| = IC50/(1 +L/Kd), kde L je koncentrácia [3H]-SK&F-107260, použitá ·· ····
-60v teste kompetitívnej väzby (4,5 nM) a Kd je disociačná konštanta [3H]-SK&F107260, ktorá je 4,5 nM, ako sa určilo Scatchardovou analýzou.
Výhodné zlúčeniny podľa tohto vynálezu majú afinitu k vitronektínovému receptoru v pomere k fibrinogénovému receptoru väčšiu než 10:1.
Účinnosť zlúčenín všeobecného vzorca I samotných alebo v kombinácii s antineoplastickým činidlom sa môže určiť s použitím niekoľkých modelov transplantovateľných myších nádorov. Čo sa týka detailov týchto modelov, pozri U.S. patenty č. 5 004 758 a 5 633 016.
Príklady, ktoré nasledujú, nemajú žiadnym spôsobom limitovať rozsah tohto vynálezu, ale uvádzajú sa, aby ilustrovali, ako vyrábať a používať zlúčeniny podľa tohto vynálezu. Odborníkom v tejto oblasti budú ľahko zrejmé mnohé ďalšie uskutočnenia.
Všeobecne
Protónové nukleárne magnetické rezonančné (1H NMR) spektrá sa snímali pri 250, 300 alebo 400 MHz. Chemické posuny sa udávajú v milióntinách (δ) v oblasti nižšej od vnútorného štandardu trimetylsilánu (TMS). Skratky NMR údajov sú nasledovné: s = singiet, d = dublet, t = triplet, q = kvartet, m = multiplet, dd = dublet dubletov, dt = dublet tripletov, app = zrejmý, br = široký. J znamená NMR väzbovú konštantu, meranú v Hertzoch. CDCb je deuteriochloroform, DMSO-d6 je hexadeuteriodimetylsulfoxid a CD3OD je tetradeuteriometanol. Infračervené spektrá (IR) sa snímali v transmisnom móde a polohy pásov sa uvádzajú v inverzných vlnových číslach (cm1). Hmotnostné spektrá sa získali s použitím ionizačných metód elektrorozprašovania (ES) alebo FAB. Elementárne analýzy sa uskutočnili buď vlastnými postupmi alebo podľa Quantitative Technologies Inc., Whitehouse, N J. Body topenia sa určovali na Thomas-Hooverovom prístroji na zisťovanie bodov topenia a nie sú korigované. Všetky teploty sa uvádzajú v stupňoch Celzia. Na chromatografiu na tenkej vrstve sa použili tenké vrstvy z materiálov Analtech Silica Gel GF a E. Merck Silica Gel 60 F-254. Tak rýchla, ako aj gravitačná chromatografia sa uskutočnili na E. Merck Kiesegel 60 (mesh 230 až 400) silikagéli. Analytické a preparačné HPLC sa uskutočnili na ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ···
-61 ··· ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
Raininových alebo Beckmanových chromatografoch. ODS sa vzťahuje na oktadecylsilyl-derivatizovanom silikagélovom chromatografickom nosiči. 5 μηι Apex-ODS označuje oktadecylsilyl-derivatizovaný silikagélový chromatografický nosič, ktorý má nominálnu veľkosť častíc 5 μιτι, vyrobený firmou Jones Chromatography, Littleton, Colorado. YMC ODS-AQ® je ODS chromatografický nosič a je registrovanou známkou firmy YMC Co. Ltd., Kyoto, Japonsko. PRP-1® je polymérový (styrén-divinylbenzén) chromatografický nosič a je registrovanou známkou firmy Hamilton Co., Reno, Nevada. Celíte® je filtračný prostriedok, pozostávajúci z kyselinou premytej infuzóriovej hlinky a je registrovanou známkou firmy Manville Corp., Denver, Colorado.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príprava 1
Príprava 2-[(3-hydroxy-1 -propyl)amino]pyridín-/V-oxidu
a) 2-[(3-Hydroxy-1-propyl)amino]pyridín-/V-oxid
Zmes hydrochloridu 2-chlórpyridín-A/-oxidu (16,6 g, 0,1 mol), 3-amino-1propanolu (15,3 ml, 0,2 mol), NaHCCh (42 g, 0,5 mol) a ŕerc-amylalkoholu (100 ml) sa zahrialo k refluxu. Po 21 h sa reakčná zmes ochladila, zriedila CH2CI2 (300 ml) a prefiltrovala presávaním, aby sa odstránili nerozpustné materiály. Filtrát sa skoncentroval a rekoncentroval z toluénu, aby sa získal žltý olej. Silikagélová chromatografia (20% MeOH/CHCb) poskytla titulnú zlúčeninu (15,62 g, 93 %) ako žltú tuhú látku: TLC (20% MeOH/CHCI3) Rf 0,48; 1H NMR (250, CDCI3) δ 8,07 (dd, J = 6,6, 1,2 Hz, 1 H), 7,34 (br t, 1 H), 7,10 - 7,30 (m, 1H), 6,64 (dd, J = 8,5, 1,4 Hz, 1 H), 6,40 - 6,60 (m, 1 H), 4,49 (br s, 1 H), 3,65 3,90 (m, 2 H), 3,35 - 3,60 (m, 2 H), 1,75 - 2,00 (m, 2 H); MS (ES) m/e 169 (M+H)+.
Príprava 2
Príprava 6-metylamino-2-pyridyletanolu ·· ···· · · · · · ·· · ···· ···
-62··· · · · ··· · · ·· ···· ·· ···
a) 2-terc-Butoxykarbonylamino-6-pikolín
Roztok 2-amino-6-pikolínu (21,63 g, 200 mmol) a di-ŕerc-butylhydrogenuhličitanu (52,38 g, 240 mmol) v CH2CI2 (200 ml) sa skoncentroval na rotačnej odparke pri 50 °C a výsledný zvyšok sa nechal rotovať na rotačnej odparke pri 50 °C vo vákuu. Po 21,5 h sa reakčná zmes zriedila hexánmi (400 ml) a prefiltrovala cez silikagél (po hexánoch nasledoval 20% EtOAc/hexány). Skoncentrovanie zanechalo titulnú zlúčeninu (41,84 g, kvantitatívne) ako svetložltý olej, ktorý postupne pri státí solidifikoval: 1H NMR (250 MHz, CDCI3) δ 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,40 - 7,65 (m, 2 H), 6,80 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 2,43 (s, 3 H), 1,50 (s, 9 H); MS (ES) m/e 153 (M+H-C4H8)+.
b) 2-[(ŕerc-Butoxykarbonyl)metylamino]-6-pikolín
NaH (60% v minrálnom oleji, 3,60 g, 90 mmol) sa pridal po častiach v priebehu niekoľkých minút do roztoku 2-(ŕerc-butoxykarbonylamino)-6-pikolínu (15,62 g, 75 mmol) a jódmetánu (9,3 ml, 150 mmol) v bezvodom DMSO (75 ml) pri 15 °C (kúpeľ so studenou vodou). Vnútorná teplota stúpla na 35 °C. Keď poklesla tvorba plynu, kúpeľ so studenou vodou sa odstránil a reakčná zmes sa nechala miešať pri teplote miestnosti. Po 0,5 h sa tmavožltá zmes vyliala na ľad/H2O (300 ml) a extrahovala sa Et2O (3 x 300 ml). Spojené organické vrstvy sa postupne premyli H2O (2 x 75 ml) a soľankou (75 ml). Sušenie (MgSO4) a skoncentrovanie zanechalo žltý olej, ktorý sa chromatografoval na silikagéli (7% EtOAc/hexány). Titulná zlúčenina (13,01 g, 78 %) sa získala ako slabožltý olej: 1H NMR (250 MHz, CDCI3) δ 7,51 (app t, 1 H), 7,37 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 6,86 (d, J = 7,2 Hz, 1 H), 3,38 (s, 3 H), 2,49 (s, 3 H), 1,50 (s, 9 H); MS (ES) m/e 223 (M+H)+.
c) Etyl-6-[(ŕerc-butoxykarbonyl)metylamino]-2-pyridylacetát
LDA sa pripravilo pri 0 °C pod argónom z diizopropylamínu (19,5 ml, 139,14 mmol) a 2,5 M n-BuLi v hexánoch (46,4 ml, 115,95 mmol) v suchom THF (350 ml). Tento roztok sa ochladil na -78 °C a roztok 2-[(íerc-butoxykarbonyl)metylamino]-6-pikolínu 10,31 g, 46,38 mmol) v suchom THF (46 ml) ······ ·· ·· ·· • · · ···· ···
-63··· ··· t · ·· · ·· ···· ·· ··· sa pridal po kvapkách v priebehu 10 minút. Pri prenose sa použil ďalší suchý THF (2 ml). Oranžový roztok sa miešal pri -78 °C 15 min, potom sa rýchlo pridal dietylkarbonát (6,2 ml, 51,02 mmol). Červený roztok sa miešal pri -78 °C 15 min, potom sa reakcia stlmila polonasýteným NH4CI (175 ml). Zmes sa zahriala na +5 °C a extrahovala EtOAc (175 ml), potom CH2CI2 (2 x 100 ml). Spojené organické látky sa premyli soľankou (100 ml), vysušili (MgSO4) a skoncentrovali. Matný žltý olej sa chromatografoval na silikagéli (15% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (10,72 g, 79 %) ako svetložltý olej: 1H NMR (250 MHz, CDCI3) δ 7,51 - 7,63 (m, 2 H), 6,91 - 7,03 (m, 1 H), 4,19 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 3,77 (s, 2 H), 3,38 (s, 3 H), 1,27 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,51 (s, 9 H); MS (ES) m/e 295 (M+H)+.
d) 6-[(íerc-Butoxykarbonyl)metylamino]-2-pyridyletanol
Roztok 2 N LiBH4 v THF (7 ml, 14 mmol) sa pridal injekčnou striekačkou k miešanému roztoku etyl-6-[(ferc-butoxykarbonyl)metylamino]-2-pyridylacetátu (6,67 g, 23,7 mmol) v bezvodom THF (30 ml) pod argónom. Reakčná zmes sa potom pomaly zahrievala k refluxu (začiatočná exoterma). Po 16 h pri refluxe sa reakčná zmes ochladila na 0 °C a opatrne sa reakcia stlmila vodou (50 ml). Zmes sa extrahovala EtOAc (150 ml) a organická vrstva sa premyla soľankou (100 ml), vysušila (Na2SO4) a skoncentrovala. Čistenie rýchlou chromatografiou na silikagéli (35% EtOAc/hexán) poskytlo titulnú zlúčeninu (5,26 g, 88 %) ako číry olej: 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7,57 (m, 2 H), 6,88 (d, J = 7,2 Hz, 1 H), 4,01 (t, 2 H), 3,39 (s, 3 H), 3,00 (t, 2 H), 1,53 (s, 9 H); MS (ES) m/e 253,2 (M+Hf.
e) 6-Metylamino-2-pyridyletanol
K 6-[(ŕerc-butoxykarbonyl)metylamino]-2-pyridyletanolu (17,9 g, 71 mmol) sa pridal roztok 4N HCI v dioxáne (200 ml). Reakčná zmes sa miešala 1 h pri teplote miestnosti (pozorovala sa mierna tvorba plynu), potom sa skoncentrovala dosucha. Produkt ako hydrochloridová soľ solidifikoval vo vákuu. Táto tuhá látka sa rozpustila v NaCI-nasýtenom 1,0 N NaOH roztoku aa ·· aa aa a aaaa aaa
-64(75 ml) a roztok sa extrahoval Et2O (2 x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli soľankou, vysušili (Na2SO4) a skoncentrovali, aby vznikla titulná zlúčenina (9,12 g, 85 %) ako voskovitá tuhá látka: 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7,37 (t, 1 H), 6,42 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 6,27 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 4,62 (br s, 1 H), 3,96 (t, 2 H), 2,90 (d, J = 5,2 Hz, 3 H), 2,84 (t, 2 H); MS (ES) m/e 153 (M+H)+.
Príprava 3
Príprava etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátu
a) Etyl-(±)-3-hydroxy-4-(4-metoxyfenyl)-3-fenylbutanoát
Bezvodý EtOAc (4,3 ml, 44 mmol) sa po kvapkách pridal v priebehu 5 až 6 minút do roztoku bis(trimetylsilyl)amidu lítneho (1,0 M v THF, 40 ml, 40 mmol) v suchom THF (60 ml) v plameňom sušenej banke pri -78 °C pod argónom. Žltý roztok sa miešal pri -78 °C 0,5 h, potom sa v priebehu 12 minút po kvapkách pridal roztok 2-(4-metoxyfenyl)-1-fenyletanónu (Chem. Ber. 91, 755-759, 1958; 4,53 g, 20 mmol) v suchom THF (20 ml). V transfere sa použil ďalší THF (2 ml). Po 0,5 h sa reakcia stmila nasýteným NH4CI (120 ml) a zahriala na teplotu miestnosti. EtOAc extrakcia, sušenie (MgSO4), skoncentrovanie a silikagélová chromatografia (20% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (6,13 g, 96 %) ako svetložltý olej: TLC Rf (20% EtOAc/hexány) 0,34; MS (ES) m/e 315,2 (M+H)+.
b) Etyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-fenylbutanoát
Eterát fluoridu boritého (4,8 ml, 39 mmol) sa po kvapkách pridal v priebehu 3 minút do roztoku etyl-(±)-3-hydroxy-4-(4-metoxyfenyl)-3-fenylbutanoátu (6,13 g, 19,5 mmol) a trietylsilánu (6,2 ml, 39 mmol) vbezvodom CH2CI2 (49 ml) pri 0 °C pod argónom. Reakčná zmes sa miešala cez noc pri teplote miestnosti, potom sa reakcia stlmila 5% NaHCO3 (100 ml). Zmes sa energicky miešala 10 minút, potom sa oddelila. Vodná vrstva sa extrahovala CH2CI2 (100 ml) a spojené organické vrstvy sa sušili (Na2SO4) a ·· ··· ·· ·· ·· ·· · ···» ··· ··· · ···
-65• · · » · ··· ·· · ·· ···· ·· ··· skoncentrovali. Zvyšok sa rekoncentroval z hexánov (na odstránenie CH2CI2), aby zostal žltý olej. Tento sa rozpustil v absolútnom EtOH (100 ml) a pridalo sa 10% Pd/C (775 mg, 1,95 mmol). Zmes sa trepala na Parrovom prístroji pri teplote miestnosti pod H2 (345 kPa (50 psi)) 2 h, potom sa prefiltrovala cez celíte®. Filtrát sa skoncentroval a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (15% EtOAc/hexány). Titulná zlúčenina (5,27 g, 91 %) sa získala ako bezfarebný olej: TLC Rf (15% EtOAc/hexány) 0,40; MS (ES) m/e 299,2 (M+H)+.
c) Etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoát
Bezvodý chlorid hlinitý (4,49 g, 33,7 mmol) sa všetok naraz pridal do roztoku etyl-(+)-4-(4-metoxyfenyl)-3-fenylbutanoátu (2,01 g, 6,74 mmol) a etántiolu (2,5 ml, 33,7 mmol) v bezvodom CH2CI2 (67 ml) pri 0 °C pod argónom. Žltý roztok sa zahrial na teplotu miestnosti a miešal sa 3 h, potom sa znovu ochladil na 0 °C a reakcia sa stlmila studenou 3 N HCI (67 ml). Zmes sa miešala 5 min, potom sa oddelila. Vodná vrstva sa extrahovala CH2CI2 (2 x 100 ml) a spojené organické vrstvy sa vysušili (Na2SO4) a skoncentrovali. Silikagélová chromatografia (25% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (1,84 g, 96 %) ako bezfarebný olej: TLC Rf (30% EtOAc/hexány) 0,47; MS (ES) m/e 285,2 (M+H)+.
Príprava 4
Príprava dihydrochloridu 2-[(2-amino-1-etyl)amino]pyridínu
a) 2-[[2-(ŕerc-Butoxykarbonyl)amino-1 -etyl]amino]-1 -oxopyridín
Zmes /V-Boc-etyléndiamínu (5,83 g, 36,39 mmol), hydrochloridu 2-chlórpyridín-W-oxidu (7,25 g, 43,67 mmol), NaHCO3 (15,29 g, 182 mmol) a tercamylalkoholu (36 ml) sa zahrievala pri refluxe. Po 47 h sa tmavohnedá zmes ochladila, zriedila ΟΗ2ΟΙ2 (100 ml) a presávaním prefiltrovala. Filtrát sa skoncentroval a zvyšok sa rekoncentroval z toluénu. Silikagélová chromatografia (10% MeOH/CH2CI2) poskytla titulnú zlúčeninu (8,23 g, 89 %) ako žltú tuhú látku: 1H NMR (250 MHz, CDCI3) δ 8,16 (dd, J = 6,5, 1,3 Hz, 1 H), 7,05 ······ ·· ·· ·· • · · ···· ···
-66• · · ··· ··· ·· · ·· ··· ·· ···
7,30 (m, 2 H), 6,68 (br d, J = 8,6 Hz, 1 H), 6,50 - 6,65 (m, 1 H), 5,70 - 5,95 (m,
H), 3,25 - 3,60 (m, 4 H), 1,44 (s, 9 H); MS (ES) m/e 254 (M+H)+.
b) 2-[[2-(ŕerc-Butoxykarbonyl)amino-1-etyl]amino]pyridín
Zmes 2-[[2-(ŕerc-butoxykarbonyl)amino-1 -etyl]amino]-1 -oxopyridínu (7,00 g, 27,64 mmol), 10% Pd/C (5,88 g, 5,53 mmol), cyklohexénu (28 ml, 276,4 mmol) a izopropanolu (110 ml) sa zahriala k refluxu. Po 17 h sa reakčná zmes prefiltrovala cez celit® a filtrát sa skoncentroval. Žltý zvyšok sa rekoncentroval z toluénu, potom sa chromatografoval na silikagéli (5% MeOH/CHCI3). Titulná zlúčenina (5,09 g, 78 %) sa získala ako žltý olej: 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 8,05 - 8,12 (m, 1 H), 7,37 - 7,46 (m, 1 H), 6,53 - 6,61 (m, 1 H), 6,41 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 5,12 (br s, 1 H), 4,86 (br s, 1 H), 3,26 - 3,51 (m, 4 H), 1,44 (s, 9 H); MS (ES) m/e 238 (M+H)+.
c) Dihydrochlorid 2-[(2-amino-1-etyl)amino]pyridínu
4N HCI/dioxán (54 ml) sa prúdom pridali do roztoku 2-[[2-(ŕercbutoxykarbonyl)amino-1-etyl]amino]pyridínu (5,09 g, 21,45 mmol) v bezvodom CH2CI2 (54 ml) pri 0 °C pod argónom, potom sa zmes zahriala na teplotu miestnosti. Po 2 h sa zmes ochladila na 0 °C a presúvaním sa prefiltrovala. Tuhá látka sa dôkladne premyla bezvodým Et2O a vysušila vo vysokom vákuu pri 40 °C, aby sa získala titulná zlúčenina (4,27 g, 95 %) ako belavá, trochu hygroskopická tuhá látka: 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ 7,99 - 8,07 (m, 1 H), 7,92 - 7,98 (m, 1 H), 7,19 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 6,98 - 7,04 (m, 1 H), 3,76 (t, J = 6,2 Hz, 2 H), 3,27 (t, J = 6,2 Hz, 2 H, čiastočne prekryté signálom zvyšku rozpúšťadla): MS (ES) m/e 138 (M+H)+.
Príprava 5
Príprava 2-[(3-hydroxy-1 -propyl)amino]-4-metylpyridín-/V-oxidu
a) 2-Chlór-4-metylpyridín ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ···
-67• · · · · · · · · ·· · ·· ···· ·· ···
Dusitan sodný (13,88 g, 200 mmol) sa pomaly pridával pri 0 °C do roztoku 2-amino-4-pikolínu (15,0 g, 139 mmol) v kone. HCI (200 ml). Reakčná zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti a miešala sa 16 h, potom sa vyliala na ľad (500 g). pH sa upravilo na 8,0 kone. NH4OH a zmes sa extrahovala éterom (3 x 300 ml). Spojené éterové vrstvy sa postupne premyli H2O (2 x 200 ml) a soľankou (200 ml). Sušenie (MgSO4) a skoncentrovanie poskytlo titulnú zlúčeninu (10,3 g, 58 %) ako slabožltý olej: MS (ES) m/e 127,8 (M+Hf.
b) Hydrochlorid 2-chlór-4-metylpyridín-/V-oxidu
Zmes 2-chlór-4-metylpyridínu (10,0 g, 78,3 mmol) a 34% kyseliny peroctovej (76,05 g, 91,0 mmol) v ľadovom AcOH (10 ml) sa zahrievalo 3 h na 70 °C. Reakčná zmes sa ochladila, pridala sa kone. HCI (35 ml) a zmes sa skoncentrovala na rotačnej odparke. Rekryštalizácia zn-butanolu, po ktorej nasledovala triturácia s éterom, poskytla titulnú zlúčeninu (7,16 g, 51 %) ako bielu tuhú látku: MS (ES) m/e 143,9 (M+H)+.
c) 2-[(3-Hydroxy-1-propyl)amino]-4-metylpyridín-/V-oxid
Zmes hydrochloridu 2-chlór-4-metylpyridín-A/-oxidu (7,16 g, 39 mmol), 3-aminopropanolu (6,01 g, 80 mmol) a NaHCO3 (16,8 g, 200 mmol) vŕercamylalkohole (50 ml) sa zahrievalo k refluxu 19 h. Reakčná zmes sa zriedila CH2CI2 (200 ml) a prefiltrovala a filtrát sa skoncentroval na rotačnej odparke. Rekryštalizácia z CH2Cl2/Et2O poskytla titulnú zlúčeninu (5,41 g, 75 %) ako žltú tuhú látku: TLC (15% MeOH/CH2CI2) Rf 0,44; 1H NMR (400, CDCI3) δ 7,92 (d, J = 6,7, 1 H), 7,28 (br t, 1 H), 6,43 (s, 1H), 6,33 (dd, J = 6,6, 2,1 Hz, 1 H), 3,73 (t, J = 5,7 Hz, 2 H), 3,47 (q, H = 6,3 Hz, 2 H), 2,29 (s, 3 H), 1,82 -1,88 (m, 2 H); MS (ES) m/e 183 (M+H)+.
Príprava 6
Príprava hydrobromidu 2-[(3-bróm-1-propyl)amino]pyridín-/V-oxidu
a) Hydrobromid 2-[(3-bróm-1-propyl)amino]pyridín-/V-oxidu ······ · ·· ·· ·· · ···· ···
-68• · · · · · · · ·· · ······ ·· ·
Roztok SOBr2 (5,0 ml, 64,5 mmol) v CH2CI2 (20 ml) sa po kvapkách pridal v priebehu 15 až 20 minút do roztoku 2-[(3-hydroxy-1-propyl)amino]-4metylpyridín-/V-oxidu (10,0 g, 54,87 mmol) v CH2CI2 (100 ml) pri 0 °C. Reakčná zmes sa zahriala na teplotu miestnosti a miešala 2 h, potom sa pomaly pridával Et2O (200 ml). Rozpúšťadlá sa dekantovali z gumovitého precipitátu a precipitát sa premyl ďalším ΟΗ2ΟΙ2/Εί2θ (niekoľkokrát). Vzniknutý hnedožltý zvyšok solidifikoval státím cez noc v chladničke. Táto tuhá látka sa zozbierala a premyla Et2O, aby vznikla titulná zlúčenina (15,07 g) ako žltá tuhá látka. Ďalšia titulná zlúčenina (2,05 g) sa získala ako biele ihličky skoncentrovaním spojených organických vrstiev. Celkový výťažok titulnej zlúčeniny bol 17,89 g (96 %): MS (ES) m/e 245 a 247 (M+H)+.
Príprava 7
Príprava 2-[(5-hydroxy-1 -pentyl)amino]pyridín-/\/-oxidu
a) 2-[(5-Hydroxy-1 -pentyl)amino]pyridín-/V-oxid
Suspenzia hydrochloridu 2-chlórpyridín-A/-oxidu (1,00 g, 6,03 mmol) a NaHCO3 (2,53 g, 30,1 mmol) v ŕerc-amylalkohole (20 ml) sa zahrievala k refluxu 18 h. Reakčná zmes sa ochladila na teplotu miestnosti, zriedila CH2CI2 a prefiltrovala sa. Filtrát sa skoncentroval, aby vznikol svetlozelený olej. Radiálna chromatografia (10% MeOH/CHCb, silikagél, 6 mm platňa) poskytla titulnú zlúčeninu (0,52 g) ako číry olej: 1H NMR (300, CDCI3) δ 8,10 (d, J = 6,5 Hz, 1 H), 7,18 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 6,85 (br s, 1 H), 6,50 (m, 2 H), 3,65 (t, J = 6,2 Hz, 2 H), 3,23 (m, 2 H), 2,20 (br s, 1 H), 1,85 -1,40 (m, 6 H).
Príprava 8
Príprava 2-[/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-/V-metylamino]-5-pyridyletanolu
a) 5-Bróm-2-[(ŕerc-butoxykarbonyl)amino]pyridín
Roztok 2-amino-5-brómpyridínu (5,67 g, 32,7 mmol) a di-ŕerc-butylhydrogenuhličitanu (8,57 g, 38,3 mmol) v CH2CI2 (50 ml) sa skoncentroval na rotačnej odparke pri 50 °C a vzniknutý zvyšok sa nechal rotovať na rotačnej ·· ···· • · · · · · · 9 9
Φ Φ Φ I · ···
Φ Φ Φ Φ · Φ φφ
ΦΦ Φ ·Φ 9999 ΦΦ
-69odparke pri 50 °C cez noc pod vákuom. Po 20 h sa reakčná zmes chromatografovala na silikagéli (5% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (6 g, 67 %) ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 273 (M+H)+.
b) 5-Bróm-2-[/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-/V-metylamino]pyridín
Do roztoku 5-bróm-2-[(ŕerc-butoxykarbonyl)amino]pyridínu (6 g, 21,9 mmol) v suchom DMF (50 ml) sa pod dusíkom pridal po častiach 80% NaH (0,8 g, 26,3 mmol) pri 0 °C. Reakčná zmes sa miešala pri 0 °C 15 minút, potom sa prúdom pridal jódmetán (3 ml, 43,8 mmol). Reakčná zmes sa miešala cez noc pri teplote miestnosti, potom sa skoncentrovala vo vákuu.
Zvyšok sa zriedil vodou a extrahoval CH2CI2. Sušenie (MgSCl·)), skoncentrovanie a rýchla chromatografia na silikagéli (5% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (2,2 g, 35 %) ako olej: MS (ES) m/e 286,9 (M+H)+.
c) 2-[/V-(ŕe/'c-Butoxykarbonyl)-/V-metylamino]-5-vinylpyridín
Do roztoku 5-bróm-2-[/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-/\/-metylamino]pyridínu (2,2 g, 7,69 mmol) a vinyltributylcínu (3,4 ml, 11,5 mmol) v toluéne pri teplote miestnosti sa pridalo tetrakis(trifenylfosfín)paládium(0) (346 mg, 0,3 mmol).
Roztok sa odplyňoval vo vákuu 10 minút, potom sa zahrial k refluxu. Po 5 h sa reakčná zmes ochladila, skoncentrovala vo vákuu a chromatografovala rýchlou chromatografiou na silikagéli (5% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (1,0 g, 65 %) ako bezfarebný olej: MS (ES) m/e 235 (M+H)+. Tiež sa znova získal nepremenený 5-bróm-2-[N-(ŕerc-butoxykarbonyl)-A/-metylamino]-pyridín (0,3 g).
d) 2-[/V-(fe/TC-Butoxykarbonyl)-/V-metylamino]-5-pyridyletanol
Do roztoku 2-[/V-(ferc-butoxykarbonyl)-A/-metylamino]-5-vinylpyridínu (1,1 g, 4,7 mmol) v suchom THF (20 ml) sa pridal boran-tetrahydrofuránový komplex (1,0 M v THF, 3 ml, 3 mmol) pri 0 °C. Reakčná zmes sa zahrievala 1 h, potom sa skoncentrovala vo vákuu. Surový produkt sa rozpustil v THF (5 ml) a pridal sa NaOAc (770 mg, 9,4 mmol), po čom nasledoval 30% H2O2 (1,56 ml). Reakčná zmes sa miešala pri teplote miestnosti 1 h, potom sa čiastočne • · ···· ·· ·· ·· • · · ···· ··· e·· · · ···
-70• · · · · · ··· ·· · ·· ···« ·· ··· skoncentrovala vo vákuu. Na zvyšok sa pôsobilo nasýteným NaCl (ml) a zmes sa extrahovala CH2CI2. Sušenie (MgSO4), skoncentrovanie a rýchla chromatografia na silikagéli (1:1 EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (230 g, 21 %) ako bezfarebný olej: MS (ES) m/e 253 (M+H)+.
Príprava 9
Príprava 2-[/V-(3-metylsulfonyloxy-1-propyl)-/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)amino] pyridín-AZ-oxidu
a) 2-[/V-(3-Hydroxy-1-propyl)-/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)amino]pyridín-/V-oxid
Na roztok 2-[(3-hydroxy-1-propyl)amino]pyridín-/V-oxidu (8,0 g, 47,6 mmol) v ŕerc-BuOH (80 ml) sa pôsobilo di-ŕerc-butylhydrogenuhličitanom (11,4 g, 55,3 mmol). Po 18 h sa roztok skoncentroval a zvyšok sa trituroval hexánom. Vzniknutá tuhá látka sa sušila vo vákuu, aby vznikla titulná zlúčenina (12,5 g, 98 %) ako sivobiela tuhá látka: MS (ES) m/e 269,3 (M+H)+.
b) 2-[/V-(3-metánsulfonyloxy-1-propyl)-/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)amino]pyridín-/Voxid
Metánsulfonylchlorid (0,17 ml, 2,20 mmol) sa po kvapkách pridal do roztoku 2-[/\/-(3-hydroxy-1-propyl)-/V-(terc-butoxykarbonyl)amino]pyridín-/\/oxidu (0,50 g, 1,68 mmol) a pyridínu (0,23 ml, 2,84 mmol) vCHCI3 (5 ml, sušený nad K2CO3) pri 0 °C. Po uskutočnení TLC sa reakčná zmes zriedila CHCI3, premyla ľadovou vodou, vysušila (Na2SC>4) a skoncentrovala. Silikagélová chromatografia (10% MeOH/CHCI3) poskytla titulnú zlúčeninu (0,41 g, 64 %) ako bezfarebný olej: 1H NMR (250 MHz, CDCI3) δ 8,25 (dd, J = 6,0, 1,9 Hz, 1 H), 7,25 (m, 4 H), 4,35 (t, J = 6,2 Hz, 2 H), 3,75 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,00 (s, 3 H), 2,00 (m, 2 H), 1,40 (s, 9 H). Z chromatografického čistenia sa tiež dal spätne získať nepremenený 2-[A/-(3-hydroxy-1-propyl)-A/-(ŕercbutoxykarbonyl)amino]pyridín-A/-oxid (0,18 g, 36 %).
······ ·· · ·· • · · · · · · ···
-71 • · · ··· ··· ·· · ·· «··· ·· ···
Príprava 10
Príprava (±)-etyl-4-(4-karboxyfenyl)-3-fenylbutanoátu
a) Etyl-(±)-3-fenyl-4-[4-(trifluórmetánsulfonyloxy)fenyl]butanoát
Trifluórmetánsulfónanhydrid (1,4 ml, 8,4 mmol) sa po kvapkách rýchlo pridal do roztoku etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátu (1,84 g, 6,47 mmol) a 2,6-lutidínu (1,5 ml, 12,9 mmol) vbezvodom CH2CI2 (32 ml) pri -78 °C pod argónom. Po 0,5 h sa žltý roztok zahrial na teplotu miestnosti a miešal 1 h. Reakčná zmes sa zriedila Et20 (150 ml) a postupne premyla 1,0 N HCl (15 ml), 5% NaHCO3 (15 ml) a nasýtenou soľankou (15 ml). Sušenie (MgSO4), skoncentrovanie a silikagélová chromatografia (15% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (2,62 g, 97 %) ako skoro bezfarebný olej: TLC Rf (20% EtOAc/hexány) 0,55; MS (ES) m/e 417,0 (M+H)+.
b) Etyl-(±)-4-(4-karboxyfenyl)-3-fenylbutanoát
Zmes etyl-(±)-3-fenyl-4-[4-(trifluórmetánsulfonyloxy)fenyl]butanoátu (2,62 g, 6,29 mmol), bezvodého KOAc (2,47 g, 25,16 mmol), Pd(OAc)2 (70,6 mg, 0,31 mmol), dppf (697,4 mg, 1,26 mmol) a bezvodého DMSO (31 ml) sa prečistila oxidom uhoľnatým (tri cykly prečistenia evakuáciou/oxidom uhoľnatým, po ktorých nasledovalo prebublávanie oxidom uhoľnatým cez zmes po dobu 5 minút), potom sa zahriala na 70 °C pod veľkou bankou s oxidom uhoľnatým. Po 3,5 h sa reakčná zmes zriedila H2O (31 ml), ochladila na ľade a okyslila 1,0 N HCl (25 ml). CH2CI2 extrakcia (2 x 100 ml), sušenie (MgSO4), skoncentrovanie a rekoncentrovanie z toluénu poskytlo červenkastooranžovú kvapalinu. Silikagélová chromatografia (1% AcOH v 7:3 toluén/EtOAc) poskytla titulnú zlúčeninu (1,78 g, 91 %) ako krémovo sfarbenú tuhú látku: TLC Rf (1% AcOH v 7:3 toluén/EtOAc) 0,47; MS (ES) m/e 313,2 (M+H)+.
Príprava 11
HPLC separácia enantiomérov etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátu ······ ·· ·· ·· • · · · · · · ···
-72• · · ··· · w · ·· · ·· ···· ·· ··
a) Etyl-(S)-(-)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoát a etyl-(R)-(+)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoát
Etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoát sa rozdelil na jeho enantioméry s použitím nasledovných podmienok: Daicel Chiralcel AD® stĺpec (21,2 mm x 250 mm), 5% etanol v hexánovej pohyblivej fáze, prietok 15 ml/minút, uv detekcia pri 254 nm, 40 mg injekcia; tR pre etyl-(S)-(-)-4-(4-hydroxyfenyl)-3fenylbutanoát = 19,8 minút; tR pre etyl-(/?)-(+)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoát = 23,0 minút.
Príprava 12
Príprava metyl-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu
a) Metyl-4-benzyloxyfenylacetát
Do suspenzie K2CO3 (20,7 g, 150 mmol) v acetóne (50 ml) sa pridal metyl-4-hydroxyfenylacetát (5,0 g, 30 mmol) a benzylchlorid (10,4 ml, 90 mmol) a zmes sa zahriala k refluxu. Po 24 h sa zmes ochladila na teplotu miestnosti, prefiltrovala a skoncentrovala. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (10% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (7,7 g, 100 %) ako biela tuhá látka: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,40 (m, 5 H), 7,21 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 6,95 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 5,05 (s, 2 H), 3,70 (s, 3 H), 3,59 (s, 2 H).
b) 4-Benzyloxyfenetylalkohol
Do roztoku metyl-4-benzyloxyfenylacetátu (1,5 g, 5,85 mmol) v suchom THF (30 ml) sa pridal LiAIH4 (244 mg, 6,44 mmol) pri 0 °C. Po 2 h sa zmes kvenčovala pridávaním po kvapkách 1,0 N NaOH, kým sa nevytvorili biele tuhé soli hliníka. Zmes sa zriedila EtOAc (100 ml), sušila nad MgSO4, prefiltrovala a skoncentrovala, aby vznikla titulná zlúčenina (1,35 g, kvantitatívne), ktorá sa použila bez čistenia. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,40 (m, 5 H), 7,15 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 6,90 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 5,05 (s, 2 H), 3,82 (t, 2 H), 2,81 (t, 2 H).
c) 4-Benzyloxyfenylacetaldehyd ·· ···· ·· ·· ·· • · · · · · · ···
-73• · · ··· ··· ·· · ·· ···· ·· ···
Do roztoku DMSO (0,83 ml, 11,7 mmol) v CH2CI2 (20 ml) sa pridal oxalylchlorid (0,51 ml, 5,85 mmol) pri -78 °C. Po 10 minútach sa pridal roztok 4-benzyloxyfenetylalkoholu (1,35 g, 5,85 mmol) v CH2CI2 (10 ml). Po 30 minútach sa pridal Et3N (2,69 ml, 19,3 mmol) a zmes sa zahriala na teplotu miestnosti. Po 30 minútach sa zmes postupne premyla vždy 10 ml H2O, 10% HCl a H2O, potom sa vzniknutá organická vrstva sušila nad MgSO4, prefiltrovala a skoncentrovala. Zvyšok sa ihneď použil v ďalšom kroku bez čistenia.
d) Metyl-4-(4-benzyloxyfenyl)krotonát
Do roztoku 4-benzyloxyfenylacetaldehydu (5,85 mmol) v suchom THF (30 ml) sa pridal metyl(trifenylfosforanylidén)acetát (2,4 g, 7,02 mmol). Po 18 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa vložil do 1:1 Et2O/hexány (200 ml) a prefiltroval. Filtrát sa skoncentroval a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (10% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (780 mg, 47 % z b) ako žltý olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,35 (m, 5 H), 7,05 (m, 2 H), 6,90 (m, 3 H), 5,80 (d, J = 15 Hz, 1 H), 5,5 (s, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 3,47 (d, J = 6,0 Hz, 2 H).
e) Metyl-4-(4-hydroxyfenyl)butanoát
Do suspenzie 10% Pd/C (113 mg) v absolútnom EtOH (15 ml) sa pridal metyl-4-(4-benzyloxyfenyl)krotonát (300 mg, 1,06 mmol). Zmes sa odkysličila (3 x evakuácia/N2 čistiace cykly), potom sa naplnila H2 (345 kPa (50 psi)). Po 2 h sa H2 odstránil a zmes sa prefiltrovala cez vrstvu celit®-u. Filtrát sa skoncentroval a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (30% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (180 mg, 87 %) ako bezfarebný olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,05 (m, 2 H), 6,90 (m, 2 H), 3,68 (s, 3 H), 2,69 (t, 2 H), 2,30 (t, 2 H), 1,90 (m, 2 H).
Príprava 13
Príprava metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-vinylbutanoátu
a) Metyl-4-(triizopropylsiloxy)fenylacetát
• ·· ···· • · ·· • • ·· • · ·· • · • ·
• • · • • • • •
• • · • • • • •
• · · ·· ···· • · ··
Do roztoku metyl-4-hydroxyfenylacetátu (5,0 g, 30 mmol) a imidazolu (4,08 g, 60 mmol) v suchom DMF (80 ml) sa pridal triizopropylsilylchlorid (9,6 ml, 45 mmol). Po 18 h sa zmes vliala do H2O (500 ml) a extrahovala hexánmi (3 x 300 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (5% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (9,03 g, 93 %) ako bezfarebný olej: 1H NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,10 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 6,80 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,66 (s, 3 H), 3,51 (s, 2 H), 1,23 (m, 3 H), 1,08 (d, J = 7,5 Hz, 18 H).
b) 4-(T riizopropylsiloxy)fenetylalkohol
Do roztoku metyl-4-(triizopropylsiloxy)fenylacetátu (9,03 g, 28 mmol) v suchom THF (100 ml) sa pridal LiAIH4 (1,17 g, 30,8 mmol) pri 0 °C. Po 1 h sa zmes kvenčovala pridávaním po kvapkách 1,0 N NaOH, kým sa nevytvorili biele tuhé soli hliníka. Zmes sa zriedila EtOAc (100 ml), sušila nad MgSO4, prefiltrovala a skoncentrovala, aby vznikla titulná zlúčenina (8,02 g, 97 %), ktorá sa použila bez čistenia. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,10 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 6,80 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 3,80 (t, 2 H), 2,79 (t, 2 H), 1,23 (m, 3 H), 1,08 (d, J = 7,5 Hz, 18 H).
c) 4-(T riizopropylsiloxy)fenylacetaldehyd
Do roztoku DMSO (3,83 ml, 54 mmol) v CH2CI2 (100 ml) sa pridal oxalylchlorid (2,36 ml, 27 mmol) pri -78 °C. Po 10 minútach sa pridal roztok 4(triizopropylsiloxy)fenetylalkoholu (8,02 g, 27 mmol) v CH2CI2 (25 ml). Po 1 h sa pridal Et3N (12,5 ml, 89,8 mmol) a zmes sa zahriala na teplotu miestnosti. Po 1,5 h sa zmes postupne premyla vždy 50 ml H2O, 10% HCI a H2O, potom sa vzniknutá organická vrstva sušila nad MgSO4, prefiltrovala a skoncentrovala. Zvyšok sa ihneď použil v ďalšom kroku bez čistenia.
d) Metyl-4-[(4-triizopropylsiloxy)fenyl]krotonát
Do roztoku 4-(triizopropylsiloxy)fenylacetaldehydu (27 mmol) v suchom benzéne (100 ml) sa pridal metyl(trifenylfosforanylidén)acetát (18,1 g, 54 mmol). Po 96 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa vložil do Et2O (500 ml) a ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ··· • · · · · · t ·
-75• · · ··· ··· ·· · ·· ···· ·· ··· prefiltroval. Filtrát sa skoncentroval a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (2:1 hexány/CH2CI2), aby sa získala titulná zlúčenina (3,39 g, 36 % z b) ako žltý olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,09 (m, 1 H), 6,99 (d, J = 6,6 Hz, 2 H),
6,79 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 5,78 (d, J = 15 Hz, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 3,42 (d, J = 7,1
Hz, 2 H), 1,23 (m, 3 H), 1,08 (d, J = 7,5 Hz, 18 H).
e) Metyl-(±)-4-[(4-triizopropylsiloxy)fenyl]-3-vinylbutanoát
Do suspenzie CuBr-DMS komplexu (647 mg, 3,0 mmol) v suchom THF (10 ml) sa po kvapkách pridal magnéziumvinylbromid (6,0 ml, 6,0 mmol) pri -78 °C. Po 15 minútach sa po kvapkách pridal roztok metyl-4-[(4-triizopropylsiloxy)fenyl]krotonátu (350 mg, 1,0 mmol) v suchom THF (3 ml). Po 1,5 h sa zmes kvenčovala H2O (10 ml) a extrahovala EtOAc (3 x 20 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (3:1 hexány/CH2CI2), aby vznikla titulná zlúčenina (224 mg, 59 %) ako žltý olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6,99 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 6,79 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 5,69 (m, 1 H), 4,95 (m, 2 H), 3,60 (s, 3 H), 2,80 (m, 1 H), 2,59 (m, 2 H), 2,32 (m, 2 H), 1,23 (m, 3 H), 1,08 (d, J = 7,5 Hz, 18 H).
f) Metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-vinylbutanoát
Do roztoku metyl-(±)-4-[(4-triizopropylsiloxy)fenyl]-3-vinylbutanoátu (224 mg, 0,59 mmol) v suchom THF (5 ml) sa pridal roztok TBAF v THF (1,0 M, 0,65 ml, 0,65 mmol). Po 1 h sa zmes zriedila H2O (10 ml) a extrahovala EtOAc (3 x 20 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (30% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (92,5 mg, 71 %) ako žltý olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,00 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 6,74 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 5,70 (m, 1 H), 4,99 (m, 2 H), 4,75 (bs, 1 H), 3,62 (s, 3 H), 2,80 (m, 1 H), 2,59 (m, 2 H), 2,32 (m, 2 H).
·· ···· ·· ·· • · · ···· ··· • · · · · · · · ··· ··· · · ·· · ·· ···· ·· ·
-76Príprava 14
Príprava etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-pyridinyl)butanoátu
a) 4-Benzyloxy-/V-metoxy-/V-metylfenylacetamid
Do suspenzie hydrochloridu Λ/,Ο-dimetylhydroxylamínu (761 mg, 7,8 mmol) v suchom toluéne (20 ml) sa pridal trimetylalumínium (7,8 ml, 7,8 mmol) pri teplote miestnosti. Po 1 h sa pridal metyl-4-(benzyloxy)fenylacetát (1,0 g,
3,9 mmol) a zmes sa zahriala k refluxu. Po 2 h sa zmes ochladila na teplotu miestnosti a miešala 18 h, potom sa kvenčovala pomalým pridávaním 10%
HCI (20 ml) a extrahovala EtOAc (3 x 30 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (75% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (473 mg, 43 %) ako oranžovkastá tuhá látka: MS (ES) m/e 286 (M+H)+.
b) 2-[4-(Benzyloxy)fenyl]-1 -(2-pyridinyl)etanón
Do roztoku 2-brómpyridínu (0,08 ml, 0,8 mmol) v suchom THF (2 ml) sa pridal ŕ-BuLi (0,94 ml, 1,6 mmol) pri -78 °C. Po 10 minútach sa pridal roztok 4benzyloxy-/V-metoxy-/V-metylfenylacetamidu (115 mg, 0,4 mmol) v suchom THF (2 ml). Zmes sa nechala zohrievať, ako sa zohrieval kúpeľ. Po 18 h sa zmes kvenčovala nasýteným NH4CI (20 ml) a extrahovala EtOAc (3 x 20 ml).
Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali.
Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (15% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (80 mg, 66 %) ako oranžovkastá tuhá látka: MS (ES) m/e 304 (M+H)+.
c) Etyl-(±)-4-[4-(benzyloxy)fenyl]-3-(2-pyridinyl)krotonát
Do suspenzie NaH (21 mg, 0,53 mmol) v suchom THF (2 ml) sa po kvapkách pridal trietylfosfonoacetát (0,11 ml, 0,53 mmol) pri teplote miestnosti.
Po 10 minútach sa po kvapkách pridal roztok 2-[4-(benzyloxy)fenyl]-1-(2pyridinyl)etanónu (80 mg, 0,26 mmol) v suchom THF (2 ml). Po 4 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (30% EtOAc/·· ···· ·· • · · · · · · ··· • a · ·· ··· • · · ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-77hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (82 mg, 84 %) ako zmes olefínových izomérov: MS (ES) m/e 374 (M+H)+.
d) Etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-pyridinyl)butanoát
Do suspenzie 10% Pd/C (69 mg) v 1:1 EtOAc/i-PrOH (10 ml) sa pridal etyl-(±)-4-[4-(benzyloxy)fenyl]-3-(2-pyridinyl)krotonát (243 mg, 0,65 mmol).
Zmes sa odkysličila (3 x evakuácia/N2 čistiace cykly), potom sa naplnila H2 (345 kPa (50 psi)). Po 4 h sa H2 odstránil a zmes sa prefiltrovala cez vrstvu celit®-u. Filtrát sa skoncentroval, aby vznikla titulná zlúčenina ako olej (90 mg,
%), ktorý sa použil bez čistenia: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 8,55 (d, 1 H),
7,48 (t, 1 H), 7,08 (m, 1 H), 6,95 (m, 3 H), 6,80 (m, 3 H), 3,98 (q, 2 H), 3,55 (m,
H), 2,90 (m, 2 H), 2,62 (m, 2 H), 1,09 (t, 3 H).
Príprava 15
Príprava metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-oxazolyl)butanoátu
a) Metyl-3-benzyloxykarbonyl-3-butenoát
Diizopropylazodikarboxylát (32,8 ml, 166 mmol) sa pridal do roztoku metyl-3-karboxy-3-buteonátu (20 g, 139 mmol), benzylalkoholu (17,2 mg, 166 mmol) a trifenylfosfínu (43,7 g, 166 mmol) v bezvodom THF (500 ml) pri 0 °C.
Zmes sa nechala zahrievať, ako sa zahrieval kúpeľ na teplotu miestnosti. Po 3 h sa zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (10% EtOAc/hexány). Titulná zlúčenina (29,46 g, 91 %) sa získala ako bezfarebný olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,35 (m, 5 H), 6,48 (s, 1 H), 5,71 (s, 1 H),
5,20 (s, 2 H), 3,63 (s, 3 H), 3,37 (s, 2 H).
b) Metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-karboxybutanoát
Roztok 4-brómanizolu (3,35 ml, 26,7 mmol), metyl-3-benzyloxykarbonyl3-buteonátu (12,5 g, 53,4 mmol), Pd(OAc)2 599 mg, 2,67 mmol), P(o-tolyl)3 (1,63 g, 5,34 mmol) a (i-PrfeNEt (9,3 ml, 53,4 mmol) v propionitrile (100 ml) sa odkysličil (3 x evakuácia/N2 čistiace cykly), potom sa zahrial k refluxu. Po 24 h ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ··· • · · ·· ··· • · · ··· · · ·· · ·· ···· ·· ·
-78sa zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (15% EtOAc/hexány), aby vznikol žltý olej. Olej sa vložil do 20% EtOAc/hexánov (100 ml) a tento roztok sa nechal stáť pri teplote miestnosti. Po 18 h sa zmes prefiltrovala a filtrát sa skoncentroval, aby vznikla titulná zlúčenina ako zmes olefínových izomérov. Táto sa ihneď použila v ďalšom kroku.
Do suspenzie 10% Pd/C (2,8 g) v 1:1 EtOAc/i-PrOH (100 ml) sa pridala vyššie uvedená olefínová zmes. Zmes sa odkysličila (3 x evakuácia/N2 čistiace cykly), potom sa naplnila H2 (345 kPa (50 psi)). Po 4 h sa H2 odstránil a zmes sa prefiltrovala cez vrstvu celit®-u. Filtrát sa skoncentroval, aby vznikla titulná zlúčenina (5,81 mg, 86 % zo 4-brómanizolu) ako žltý olej: 1H NMR (300 MHz,
CDCI3) δ 7,09 (d, J = 6,8 Hz, 2 H), 6,81 (d, J = 6,8 Hz, 2 H), 3,78 (s, 3 H), 3,64 (s, 3 H), 3,08 (m, 2 H), 2,68 (m, 2 H), 2,40 (m, 1 H).
c) Metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-[(2,2-dimetoxyetyl)aminokarbonyl]butanoát
Do roztoku metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-karboxybutanoátu (300 mg,
1,19 mmol) v CH2CI2 (5 ml) sa pridal 1,ľ-karbonyldiimidazol (289 mg, 1,78 mmol). Po 1 h sa pridal aminoacetaldehyddimetylacetál (0,2 ml, 1,78 mmol).
Po 72 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (50% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (287 mg, 71 %) ako číry olej: MS (ES) m/e 340 (M+H)+.
d) Metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-oxazolyl)butanoát
Do roztoku metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-[(2,2-dimetoxyetyl)aminokarbonyljbutanoátu (287 mg, 0,85 mmol) v THF (5 ml) sa pridala 6,0 N HCI (5 ml). Po 1 h sa zmes extrahovala EtOAc (3x10 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa vložil do CH2CI2 (5 ml) a pridal do roztoku PPh3 (267 mg, 1,02 mmol), l2 (259 mg, 1,02 mmol) a Et3N (0,24 ml, 1,02 mmol) v CH2CI2 (5 ml). Po 18 h sa zmes skoncentrovala.
Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (50% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (95 mg, 41 %) ako žltý olej: MS (ES) m/e 276 (M+H)+.
·· ···· • · · ···· ··· ··· ·· · · * • · · ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-79e) Metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-oxazolyl)butanoát
Do roztoku metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-oxazolyl)butanoátu (314 mg, 1,14 mmol) v CH2CI2 (5 ml) sa pridal ΒΒΓ3 (3,42 ml, 3,42 mmol) pri -20 °C.
Po 1 h sa zmes opatrne kvenčovala 10% HCI v MeOH (10 ml) a roztok sa nechal zahriať na teplotu miestnosti. Po 18 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa vložil do nasýteného NaHCO3 (20 ml) a extrahoval Et20 (3 x 20 ml).
Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali.
Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (50% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (163 mg, 55%) ako žltý olej: MS (ES) m/e 262 (M+Hf.
Príprava 16
Príprava etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátu
a) 2-[4-(Benzyloxy)fenyl]-1 -(2-tiazolyl)etanón
Do roztoku n-BuLi (0,98 ml, 2,44 mmol) v suchom Et20 (5 ml) sa po kvapkách pridal brómtiazol (0,21 ml, 2,34 mmol) pri -78 °C. Po 20 minútach sa po kvapkách pridal metyl-4-(benzyloxy)fenylacetát (0,5 g, 1,95 mmol) v suchom Et20 (5 ml). Po 1 h sa zmes kvenčovala nasýteným NH4CI (10 ml), zahriala na teplotu miestnosti a extrahovala Et20 (3 x 20 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (20% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (485 mg, 80 %) ako hnedastožltá tuhá látka: MS (ES) m/e 310 (M+Hf.
b) Etyl-(±)-4-(4-benzyloxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)krotonát
Do suspenzie NaH (111 mg, 2,78 mmol) v suchom THF (5 ml) sa po kvapkách pridal trietylfosfonoacetát (0,56 ml, 2,78 mmol) pri teplote miestnosti.
Po 15 minútach sa po kvapkách pridal roztok 2-[4-(benzyloxy)fenyl]-1-(2tiazolyl)etanónu (430 mg, 1,39 mmol) v suchom THF (5 ml). Po 6 h sa zmes kvenčovala nasýteným NH4CI (10 ml) a extrahovala EtOAc (3 x 20 ml).
Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali.
-80·· ···· ·· ·· • · · · · · · • · · · · · • · · » · · ·· · ·· ····
Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (20% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (356 mg, 67 %) ako zmes olefínových izomérov: MS (ES) m/e
380 (M+H)+.
c) Etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoát
Do suspenzie 10% Pd/C (100 mg) v absolútnom EtOH (5 ml) sa pridal etyl-(±)-4-[4-(benzyloxy)fenyl]-3-(2-tiazolyl)krotonát (356 mg, 0,94 mmol). Zmes sa odkysličila (3 x evakuácia/N2 čistiace cykly), potom sa naplnila H2 (345 kPa (50 psi)). Po 4 h sa H2 odstránil a zmes sa prefiltrovala cez vrstvu celit®-u. Filtrát sa skoncentroval. Reakcia sa opakovala trikrát. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (35% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (155 mg, 57 %) ako olej: MS (ES) m/e 292 (M+H)+.
Príprava 17
Príprava etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-metylbutanoátu
a) Etyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-metylkrotonát
Podľa postupu Prípravy 16(b), s výnimkou substituovania 4-metoxyfenylacetónu 2-[4-(benzyloxy)fenyl]-1-(2-tiazolyl)etanónom, sa pripravila titulná zlúčenina (5,2 g, 74 %): 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,08 (d, J = 8,7 Hz, 2 H), 6,85 (d, J = 8,7 Hz, 2 H), 5,66 (úzky m, 1 H), 4,14 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 3,80 (s, 3 H), 3,37 (s, 2 H), 2,12 (d, J = 1,2 Hz, 3 H), 1,27 (t, J = 7,1 Hz, 3 H).
b) Etyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-metylbutanoát
Podľa postupu Prípravy 16(c), s výnimkou substituovania etyl-(±)-4-(4metoxyfenyl)-3-metylkrotonátu etyl-(±)-4-[4-(benzyloxy)fenyl]-3-(2-tiazolyl)-krotonátom, sa titulná zlúčenina (5,1 g, 97 %) pripravila ako bezfarebný olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,07 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 6,38 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 4,11 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 2,00-2,60 (m, 5 H), 1,25 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 0,93 (d, J = 6,3 Hz, 3 H).
·· ···· • · · ···· ··· • · · ·· ··· • · · ··· φ * ·· · ·· ···· ·· ·
-81 c) Etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-metylbutanoát
Podľa postupu Prípravy 15(e), s výnimkou substituovania etyl-(±)-4-(4metoxyfenyl)-3-metylbutanoátu metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-oxazolyl)-butanoátom, sa titulná zlúčenina (3,2 g, 70 %) pripravila ako žltý olej: 1H NMR (250 MHz, CDCI3) δ 7,00 (d, 2 H), 6,76 (d, 2 H), 5,95 - 6,15 (m, 1 H), 4,13 (q, 2 H), 2,05 - 2,60 (m, 5 H), 1,25 (t, 3 H), 0,93 (d, 3 H).
Príprava 18
Príprava metyl-4-(4-metoxyfenyl)krotonátu
a) 4-Metoxyfenylacetaldehyd
Roztok 4-metoxyfenetylalkoholu (1,14 g, 7,49 mmol) v CH2CI2 (30 ml) sa po kvapkách pridal do suspenzie PCC (2.45 g, 11,37 mmol) a NaOAc (1,85 g, 22,55 mmol) v CH2CI2 (50 ml) pri 0 °C pod argónom. Po 1 h sa zmes prefiltrovala a do filtrátu sa pridal tak celit®, ako aj aktivované drevené uhlie.
Zmes sa prefiltrovala a filtrát sa skoncentroval na rotačnej odparke. Zvyšok sa rozpustil v Et2O a pridal sa tak MgSO4, ako aj aktivované drevené uhlie.
Filtrácia a skoncentrovanie poskytli titulnú zlúčeninu (1,1 g, 98 %) ako bezfarebný olej. Tento materiál sa ihneď použil v nasledujúcom kroku bez ďalšieho čistenia.
b) Metyl-4-(4-metoxyfenyl)krotonát
Roztok 4-metoxyfenylacetaldehydu (1,1 g, 7,33 mmol) a metyl(trifenylfosforanylidén)acetátu (2,99 g, 8,94 mmol) v THF (50 ml) sa miešal pri teplote miestnosti cez noc, potom sa skoncentroval vo vákuu. Zvyšok sa zriedil s Et2O a na roztok sa pôsobilo celit®-om a aktivovaným dreveným uhlím. Filtrácia, skoncentrovanie a silikagélová chromatografia (5% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (0,5 g, 33 %): 1H NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,00 - 7,20 (m, 3 H), 6,85 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 5,79 (d, J = 15,5 Hz, 1 H), 3,79 (s, 3 H), 3,71 (s, 3 H), 3,46 (d, J = 6,7 Hz, 2 H).
·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ···
-82• · · ·· · • · · ·· ···· • · · ·· ···
c) Metyl-4-(4-hydroxyfenyl)krotonát
BBr3 (1,0 M v CH2CI2, 4,0 ml, 4,0 mmol) sa po kvapkách pridal do roztoku metyl-4-(4-metoxyfenyl)krotonátu (0,75 g, 3,64 mmol) v CH2CI2 (30 ml) pri 0 °C pod argónom. Reakčná zmes sa miešala pri 0 °C 2 h, potom sa pridal ďalší BBr3 (1,0 M v CH2CI2, 1,0 ml, 1,0 mmol). Po ďalšej 1 h sa reakčná zmes opatrne kvenčovala pomalým pridávaním MeOH. Roztok sa skoncentroval a zvyšok sa rekoncentroval z MeOH (2x). Vzniknutý zvyšok sa chromatografoval rýchlou chromatografiou na silikagéli (1% MeOH/C^Ch), aby vznikla titulná zlúčenina (0,46 g, 66 %): 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 6,95 - 7,25 (m, 3 H), 6,80 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 5,82 (d, J = 15,6 Hz, 1 H), 5,08 (s, 1 H), 3,75 (s, 3 H), 3,48 (d, J = 6,8 Hz, 2 H).
Príprava 19
Príprava metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiofenyl)butanoátu
a) Etyl-(±)-3-(4-metoxyfenyl)-2-(2-tiofenyl)propionát
Hexametyldisilazid lítny (1,0 M v THF, 14 ml, 14,0 mmol) sa pridal do roztoku etyl-2-tiofénacetátu (2,268 g, 13,32 mmol) v suchom THF (10 ml) pri -78 °C pod argónom. Po 1 hodine sa pridal 4-metoxybenzylchlorid (2,0 ml, 14,75 mmol). Reakčná zmes sa udržiavala pri -78 °C ďalších 15 minút, potom sa nechala zahriať na teplotu miestnosti. Po 18 hodinách sa reakčná zmes zriedila EtOAc a roztok sa premyl 1,0 N HCl (2x), následne 1,0 N NaHCO3 (2x). Sušenie (MgSO4), skoncentrovanie a rýchla chromatografia na silikagéli (gradient: 5% EtOAc/hexány, potom 10% EtOAc/hexány, potom 20% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (2,71 g, 66 %) ako čistý bezfarebný olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,16 - 7,14 (m, 1 H), 7,04 (d, J = 8,7 Hz, 2 H), 7,02 - 6,87 (m, 2 H), 6,76 (d, J = 8,7 Hz, 2 H), 4,14 - 4,02 (m, 3 H), 3,71 (s, 3 H), 3,30 (dd, J = 13,6, 8,9 Hz, 1 H), 3,04 (dd, J = 13,7, 6,7 Hz, 1 H), 1,12 (t, J = 7,2 Hz, 3 H).
b) (±)-1 -Diazo-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-tiofenyl)-2-butanón ·· ···· ·· ·· ·· ·· · ···· · • · · · · · · • · · ··· · · ·· · ·· ···· ··
-831,0 N NaOH (10 ml, 10 mmol) sa pridal do roztoku etyl-(±)-3-(4metoxyfenyl)-2-(2-tiofenyl)propionátu (2,71 g, 8,84 mmol) v MeOH (10 ml) a vzniknutá jasnožltá zmes sa ďalej zriedila MeOH a THF, aby sa rozpustil precipitovaný olej. Po 18 h pri teplote miestnosti sa reakčná zmes neutralizovala 1,0 N HCI (10 ml) a prchavé organické zlúčeniny sa odstránili vo vákuu. Zvyšná vodná vrstva sa okyslila 1,0 N HCI a extrahovala EtOAc.
Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v nadbytku SOCI2 a roztok sa zahrieval k refluxu 1 h. Reakčná zmes sa skoncentrovala vo vákuu a zvyšok sa rekoncentroval z toluénu (2x). Vzniknutý zvyšok sa zriedil v THF a pri teplote miestnosti sa pridal diazometán, pochádzajúci od firmy Diazald (2,0077 g, 9,4 mmol). Pridalo sa viac diazometánu od Diazald-u (1,4420 g, 6,7 mmol) a reakčná zmes sa nechala miešať pri teplote miestnosti cez noc. Vzniknutá oranžová reakčná zmes sa skoncentrovala vo vákuu a zvyšok sa adsorboval na silikagéli. Tento sa vložil na suchý silikagélový stĺpec. Rýchla chromatografia (gradient: 5% EtOAc/hexány, potom 10% EtOAc/hexány, potom 20% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (707,6 mg, 30 %) ako olej: 1H NMR (300 MHz,
CDCI3) δ 7,25 - 7,19 (m, 1 H), 7,03 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,94 - 6,85 (m, 2 H),
6,77 (d, J = 8,7 Hz, 2 H), 5,18 (s, 1 H), 3,75 (s, 3 H), 3,41 (dd, J = 13,8, 7,9 Hz,
H), 3,00 (dd, J = 13,8, 7,2 Hz, 1 H).
c) Metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-tiofenyl)butanoát
Roztok benzoátu strieborného (744,2 mg, 3,25 mmol) v trietylamíne (3 ml, 21,6 mmol) sa pridal do roztoku (±)-1-diazo-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2tiofenyl)-2-butanónu (707,6 mg, 2,47 mmol) v MeOH (20 ml) pri teplote miestnosti. Pozorovalo sa uvoľňovanie plynu a reakčná zmes sčernela. Po 30 minútach sa reakčná zmes zahriala k refluxu. Po 1 h pod refluxom sa reakčná zmes prefiltrovala cez celit® a filtrát sa skoncentroval vo vákuu. Zvyšok sa adsorboval na silikagél a vložil na suchý silikagélový stĺpec. Rýchla chromatografia (gradient: 5% EtOAc/hexány, potom 10% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (453,4 mg, 48,0 %) ako svetložltý olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,16 - 7,14 (m, 1 H), 7,04 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 6,91 - 6,89 (m, 1 ·· ·· ···· • · · ···· · • 9 · ·· ··· ··· · « · · ·
9 99 9999 99 9
-84Η), 6,81 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 6,77 - 6,76 (m, 1 H), 3,78 (s, 3 H), 3,74 - 3,72 (m,
H), 3,61 (s, 3 H), 2,97 - 2,92 (m, 2 H), 2,71 - 2,65 (m, 2 H).
d) Metyl-(+)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiofenyl)butanoát
Bromid boritý (1,0 M v CH2CI2, 8 ml, 8 mmol) sa pridal do roztoku metyl(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-tiofenyl)butanoátu (453,4 mg, 1,56 mmol) v CH2CI2 (10 ml) pri 0 °C pod argónom. Po 1 h sa zmes kvenčovala absolútnym MeOH a skoncentrovala vo vákuu. Rekoncentrovanie z toluénu (niekoľkokrát), po ktorom nasledovalo sušenie vo vysokom vákuu, poskytlo titulnú zlúčeninu (449,6 mg, kvantitatívne) ako olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,30 - 7,14 (m,
H), 7,04 (d, J = 8,2 Hz, 2 H), 6,95 - 6,89 (m, 1 H), 6,74 (d, J = 8,4 Hz, 2 H),
6,14 (br s, 1 H), 3,74 - 3,71 (m, 1 H), 3,62 (s, 3 H), 2,95 - 2,89 (m, 2 H), 2,72 2,66 (m, 2 H).
Príprava 20
Príprava etyl-2-[A/-benzyl-/V-(4-hydroxybenzyl)amino]acetátu
a) Etyl-2-[A/-benzyl-A/-(4-metoxybenzyl)amino]acetát
Do roztoku 4-metoxybenzylchloridu (1,00 ml, 7,38 mmol) v DMF (14 ml) sa pri 0 °C pridal etyl-2-benzylaaminoacetát (1,20 ml, 6,40 mmol) a následne NaH (0,38 g, 60% disperzia v oleji, 9,50 mmol). Ľadový kúpeľ sa odstránil a reakčná zmes sa nechala miešať pri teplote miestnosti 18 h. Reakčná zmes sa kvenčovala naliatím do nasýteného NaHCO3 a zmes sa extrahovala EtOAc. Spojené organické extrakty sa sušili nad Na2SO4 a skoncentrovali, aby vznikol žltý olej. Radiálna chromatografia (10% EtOAc/hexány, silikagél, 6 mm platňa) poskytla titulnú zlúčeninu (0,40 g) ako číry olej: MS (ES) m/e 314,1 (M+H)+.
b) Etyl-2-[/V-benzyl-/V-(4-hydroxybenzyl)amino]acetát
Roztok etyl-2-[/V-benzyl-/V-(4-metoxybenzyl)amino]acetátu (0,40 g, 1,27 mmol) v CH2CI2 (2 ml) sa po kvapkách pridal do roztoku BBr3 (3,80 ml, 1,0 M v CH2CI2, 3,80 mmol) pri 0 °C. Po 1 h pri 0 °C sa reakčná zmes opatrne
-85kvenčovala MeOH (2 ml). Rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku a zvyšok sa azeotropicky spracoval z MeOH (2x). Radiálna chromatografia (30%
EtOAc/hexány, silikagél, 6 mm platňa) poskytla titulnú zlúčeninu (0,19 g) ako bielu tuhú látku: MS (ES) m/e 300,1 (M+H)+.
·· • · · ·· ·· ····
Príprava 21
Príprava metyl-2-[/V-(4-hydroxybenzyl)-/V-fenylamino]acetátu
a) Metyl-2-[A/-(4-metoxybenzyl)-/V-fenylamino]acetát
Do roztoku hydrochloridu 2-(fenylamino)acetátu (0,19 g, 0,96 mmol) v DMF (3 ml) sa pridal 4-metoxybenzylchlorid (0,52 ml, 3,84 mmol) a následne NaH (0,11 g, 60% disperzia voleji, 2,75 mmol). Po 18 h pri teplote miestnosti sa reakčná zmes vliala do nasýteného NaHCO3 a zmes sa extrahovala EtOAc. Spojené organické extrakty sa premyli 50% soľankou, sušili nad Na2SO4 a skoncentrovali, aby vznikol žltý olej. Radiálna chromatografia (20% EtOAc/hexány, silikagél, 6 mm platňa) poskytla titulnú zlúčeninu (0,13 g) ako číry olej: MS (ES) m/e 286,1 (M+H)+.
b) Metyl-2-[/V-(4-hydroxybenzyl)-/V-fenylamino]acetát
Roztok metyl-2-[/V-(4-metoxybenzyl)-/V-fenylamino]acetátu (0,13 g, 0,47 mmol) v CH2CI2 sa po kvapkách pridal do roztoku BBľ3 (1,40 ml, 1,0 M v CH2CI2, 1,40 mmol) pri 0 °C. Po 45 minútach sa reakčná zmes opatrne kvenčovala pridaním MeOH (2 ml). Rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku a zvyšok sa azeotropicky spracoval z MeOH (2x). Zvyšok sa rozpustil v nasýtenom NaHCO3 a roztok sa extrahoval EtOAc. Spojené organické extrakty sa sušili nad Na2SO4 a rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku, aby vznikol bledožltý olej. Radiálna chromatografia (30% EtOAc/hexány, silikagél, 2 mm platňa) poskytla titulnú zlúčeninu (39 mg) ako bledožltú tuhú látku: MS (ES) m/e 272,2 (M+H)+.
Príprava 22
Príprava metyl-2-[(4-hydroxy-2-metoxybenzyl)amino]acetátu ·· 99 ·· • ···· · · · ·· ···· ··· · · 9 ·· • · · ·«···· ·· ·
-86a) Metyl-2-[(4-hydroxy-2-metoxybenzyl)amino]acetát
Do suspenzie 4-hydroxy-2-metoxybenzaldehydu (2,00 g, 13,1 mmol) a hydrochloridu metylesteru glycínu (6,60 g, 52,6 mmol) v suchom MeOH (100 ml) sa pridali 4 Ä molekulové sitá (asi 2 g) a NaBH3CN (0,83 g, 13,2 mmol). Po 18 h pri teplote miestnosti sa reakčná zmes prefíltrovala cez lôžko celit®-u a rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku, aby sa zanechal biely zvyšok.
Rýchla chromatografia na silikagéli (10% MeOH/CHCb) poskytla titulnú zlúčeninu (1,27 g) ako číry olej: MS (ES) m/e 226,0 (M+H)+.
Príprava 23
Príprava metyl-2-(4-hydroxy-2-fenoxyfenyl)acetátu
a) 2-(4-Metoxy-2-fenoxyfenyl)-1-(4-morfolinyl)-1-etántión
Podľa spôsobu Harrisa, T. W. a kol. (J. Med. Chem. 25(7), 855-858,
1982) 4-metoxy-2-fenoxyacetofenón (1,69 g, 6,98 mmol), síra (0,36 g, 11,2 mmol) a morfolín (0,98 g, 11,2 mmol) reagovali, aby vznikla titulná zlúčenina (1,24 g) ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 344,0 (M+H)\
b) Kyselina 2-(4-metoxy-2-fenoxyfenyl)octová
Do roztoku 2-(4-metoxy-2-fenoxyfenyl)-1 -(4-morfolinyl)-1 -etántiónu (0,35 g, 1,02 mmol) v /-PrOH (15 ml) a H2O (15 ml) sa pridal KOH (0,57 g, 1,02 mmol). Reakčná zmes sa zahrievala k refluxu 18 h, potom sa ochladila na teplotu miestnosti, zriedila H2O a premyla Et2O. Vodná vrstva sa okyslila na pH 4 kone. HCl a extrahovala sa CHCI3. Spojené extrakty sa sušili nad MgSO4 a skoncentrovali, aby vznikla titulná zlúčenina (0,22 g) ako biela tuhá látka. Táto sa použila bez ďalšieho čistenia: MS (ES) m/e 259,0 (M+Hf.
c) Metyl-2-(4-metoxy-2-fenoxyfenyl)acetát
Do roztoku kyseliny 2-(4-metoxy-2-fenoxyfenyl)octovej (0,22 g, 0,85 mmol) v MeOH (10 ml) sa pridala kone. HCl (1 kvapka). Reakčná zmes sa zahrievala k refluxu 18 h, potom sa nechala ochladiť na teplotu miestnosti. Množstvo MeOH sa odstránilo pri zníženom tlaku a roztok, ktorý zostal, sa ·· ··· ·· ·· ·· • · · ··«· ···
-87nalial do nasýteného NaHCO3- Vodná vrstva sa extrahovala EtOAc a spojené organické extrakty sa premyli soľankou a sušili nad Na2SO4. Rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku, aby vznikla titulná zlúčenina (0,22 g) ako bledožltý olej. Tento sa použil bez ďalšieho čistenia: MS (ES) m/e 273,0 (M+H)+.
d) Metyl-2-(4-hydroxy-2-fenoxyfenyl)acetát
Do roztoku BBr3 (1,0 M v CH2CI2, 4,0 ml, 4,0 mmol) pri 0 °C sa po kvapkách pridal roztok metyl-2-(4-metoxy-2-fenoxyfenyl)acetátu (0,22 g, 0,81 mmol) v CH2CI2 (1 ml). Po 20 minútach sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku a zvyšok sa azeotropicky spracoval z MeOH (2x). Zvyšok sa potom rozpustil v nasýtenom NaHCO3 a roztok sa extrahoval EtOAc. Spojené extrakty sa sušili nad Na2SO4 a skoncentrovali, aby vznikla titulná zlúčenina (0,19 g) ako bledožltý olej. Tento sa použil bez ďalšieho čistenia: MS (ES) m/e 259,0 (M+H)+.
Príprava 24
Príprava metyl-2-(2-fenoxy-4-hydroxy)fenylbutanoátu
a) 2-(2-Fenoxy-4-metoxy)fenyl-1 -etanol
Do roztoku kyseliny 2-(4-metoxy-2-fenoxyfenyl)octovej (0,24 g, 0,93 mmol) v THF (5 ml) pri 0 °C sa pridal hydrid hlinitolítny (0,11 g, 2,79 mmol). Po 1 h pri 0 °C sa reakčná zmes zriedila toluénom (10 ml) a postupne sa pridali NaF (0,47 g) a H2O (0,15 ml). Zmes sa prudko miešala pri 0 °C 30 minút Vzniknutý precipitát sa odstránil filtráciou a prepláchol Et2O. Filtrát sa skoncentroval, aby vznikla titulná zlúčenina (0,16 g) ako číry olej. Materiál sa použil bez ďalšieho čistenia: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,30 (m, 3 H), 7,08 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 6,95 (d, J = 7,6 Hz, 2 H), 6,66 (dd, J = 8,4, 2,5 Hz, 1 H), 6,45 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 3,82 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,73 (s, 3 H), 2,85 (t, J = 6,6 Hz, 2 H).
• · ···· ·· · · ·· • · · ···· ···
-88• · · · · · ··· ·· · ·· ···· ·· «··
b) 2-(2-Fenoxy-4-metoxy)fenylacetaldehyd
Oxalylchlorid (0,06 ml, 0,69 mmol) sa pridal do roztoku DMSO (0,09 ml,
1,27 mmol) v CH2CI2 (1,2 ml) pri -78 °C. Po 10 minútach sa pridal roztok 2-(2fenoxy-4-metoxy)fenyl-1-etanolu (0,16 g, 0,64 mmol) v CH2CI2 (1,2 ml).
Reakčná zmes sa miešala pri -78 °C ďalšiu 1 h, potom sa pridal Et3N (0,27 ml,
1,94 mmol) a odstránil sa kúpeľ s teplotou -78 °C. Po ďalších 20 minútach sa reakčná zmes zriedila CH2CI2 a postupne premyla 1,0 N HCI, nasýteným NaHCO3 a soľankou, potom sa sušila nad Na2SO4. Rozpúšťadlo sa odstránilo vo vákuu, aby vznikla titulná zlúčenina (0,13 g) ako bledožltý olej. Tento materiál sa použil bez ďalšieho čistenia: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 9,71 (t, J = 1,9 Hz, 1 H), 7,30 (m, 2 H), 7,10 (m, 2 H), 6,95 (d, J = 7,7 Hz, 2 H), 6,66 (dd,
J = 8,4, 2,5 Hz, 1 H), 6,45 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 3,71 (s, 3 H), 3,64 (s, 2 H).
c) Metyl-2-(2-fenoxy-4-metoxy)fenyl-2-butenoát
Roztok 2-(2-fenoxy-4-metoxy)fenylacetaldehydu (0,13 g, 0,53 mmol) a metyl(trifenylfosforanylidén)acetátu (0,35 g, 1,05 mmol) v THF (3 ml) sa zahrieval k refluxu 5 h, potom sa nechal ochladiť na teplotu miestnosti.
Reakčná zmes sa naliala do H2O a zmes sa extrahovala Et2O. Organické extrakty sa sušili nad Na2SO4 a rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku.
Radiálna chromatografia (20 % EtOAc/hexány, silikagél, 6 mm platňa) poskytla titulnú zlúčeninu (0,12 g) ako zmes olefínových stereo- a regioizomérov. Táto sa použila v nasledujúcom kroku bez ďalšieho čistenia: MS (ES) m/e 299,1 (M+H)+.
d) Metyl-2-(2-fenoxy-4-metoxy)fenylbutanoát
Parrova hydrogenačná nádoba sa naplnila metyl-2-(2-fenoxy-4metoxy)fenyl-2-butenoátom (0,12 g, 0,39 mmol), 10 % Pd/C (50 mg) a MeOH (50 ml) a zmes sa trepala v atmosfére vodíka pri 345 kPa (50 psi). Po 18 h sa odstránil katalyzátor filtráciou a filtrát sa skoncentroval pri zníženom tlaku.
Rýchla chromatografia na silikagéli (15 % EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (0,09 g) ako číry olej: MS (ES) m/e 300,9 (M+H)+.
·· ···· ·· ·Β ·· • · · ··»· ···
9 9 9 9 9 9 9
-89• 99 9 · 9 9 9 9
9 99 9999 99 999
e) Metyl-2-(2-fenoxy-4-hydroxy)fenylbutanoát
Roztok metyl-2-(2-fenoxy-4-metoxy)fenylbutanoátu (0,09 g, 0,30 mmol) v CH2CI2 (2 ml) sa pridal k BBr3 (1,0 M v CH2CI2, 150 ml, 1,50 mmol) pri 0 °C.
Po 1 h pri 0 °C sa reakčná zmes kvenčovala pridávaním MeOH (2 ml) po kvapkách. Rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku a zvyšok sa azeotropicky spracoval z MeOH (2x). Roztok nasýteného NaHCOs sa pridal do zvyšku a vodná vrstva sa extrahovala EtOAc. Spojené extrakty sa sušili nad Na2SO4 a skoncentrovali, aby vznikla titulná zlúčenina (0,08 g) ako bledožltý olej. Tento materiál sa použil v nasledujúcom kroku bez ďalšieho čistenia: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,25 (m, 2 H), 7,05 (m, 2 H), 6,93 (d, J = 7,6 Hz, 2 H), 6,54 (dd, J = 8,2, 2,5 Hz, 1 H), 6,35 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 5,45 (s, 1 H), 3,62 (s, 3 H), 2,59 (t, J = 7,5 Hz, 2 H), 2,32 (t, J = 7,5 Hz, 2 H), 1,9 (m, 2 H).
Príprava 25
Príprava 2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)-1-etanolu
a) 2-Metyl-8-(ŕerc-butoxykarbonyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín
Zmes 2-metyl-1,8-naftyridínu (J. Chem. Soc. (C) 315, 1966; 5,13 g,
35,58 mmol), 10 % Pd/C (1,14 g, 1,07 mmol) a absolútneho EtOH (70 ml) sa odkysličila cez tri čistiace cykly evakuácia/H2, potom sa energicky miešala vo veľkej banke s H2. Po 18,5 h sa zmes prefiltrovala cez celit® a filtračná vložka sa postupne premyla absolútnym EtOH a EtOAc. Filtrát sa skoncentroval dosucha a zvyšok sa rekoncentroval z EtOAc, aby zostala belavá tuhá látka (5,25 g).
Roztok vyššie uvedeného materiálu (5,25 g), di-ŕerc-butylhydrogenuhličitanu (15,53 g, 71,16 mmol) a CH2CI2 (10 ml) sa skoncentroval na rotačnej odparke, aby sa odstránilo rozpúšťadlo a olejovitý zvyšok sa zahrial pod N2 v olejovej kúpeľovej súprave pri 55 až 60 °C. Po 45 h sa reakčná zmes ochladila na teplotu miestnosti a zvyšok sa chromatografoval rýchlou chromatografiou na silikagéli (40 % EtOAc/hexány). Titulná zlúčenina (4,90 g,
%) sa získala ako svetložltá tuhá látka: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ ·· ··· ·· ·· ·· • · · ···· ···
-90• · · ··· ··· ·· · ·· ···· «· ···
7,27 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 6,81 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 3,69 - 3,79 (m, 2 H), 2,65 2,75 (m, 2 H), 2,48 (s, 3 H), 1,83 - 1,98 (m, 2 H), 1,52 (s, 9 H); MS (ES) m/e
249 (M + H)+.
b) Etyl-[8-(ŕerc-butoxykarbonyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)]acetát
Do roztoku diizopropylamínu (7,24 ml, 55,3 mmol) v suchom THF (50 ml) sa po kvapkách pridal n-BuLi (2,5 M v hexánoch, 22 ml, 55,3 mmol) pri 0 °C. Po 15 minútach sa tento roztok po kvapkách pridal do roztoku 2-metyl-8(fefC-butoxykarbonyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridínu (4,9 g, 19,7 mmol) a dietylkarbonátu (8,86 ml, 73,0 mmol) v suchom THF (50 ml) pri -78 °C. Po 30 minútach sa zmes kvenčovala nasýteným NH4CI (100 ml), zahriala na teplotu miestnosti a extrahovala EtOAc (3 x 200 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali pri zníženom tlaku. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (40 % EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (5,72 g, 91 %) ako svetložltý olej: MS (ES) m/e 321 (M+H)+.
c) 2-(5,6,7,8-Tetrahydro-1,8-naftyridín-2yl)-1-etanol
Do roztoku etyl-[8-(ŕerc-butoxykarbonyl)-5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)]acetátu (5,72 g, 17, 85 mmol) v suchom THF (80 ml) pri teplote miestnosti sa pridal LiBH4 (2,0 M v THF, 10,7 ml, 21,42 mmol) a vzniknutá zmes sa zahriala k refluxu. Po 18 h sa zmes ochladila na 0 °C a opatrne kvenčovala H2O (100 ml). Po 10 minútach sa zmes extrahovala EtOAc (3 x 100 ml). Spojené organické extrakty sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali pri zníženom tlaku.
Vyššie uvedený zvyšok (4,9 g) sa rozpustil v CH2CI2 (10 ml). Do tohto sa pridala 4 N HCI v dioxáne (20 ml), celé naraz pri teplote miestnosti. Po 4 h sa zmes skoncentrovala pri zníženom tlaku. Zvyšok sa vložil do 1:1 zmesi 1,0 N NaOH a nasýteného NaCl (100 ml) a extrahoval CH2CI2 (3 x 100 ml). Spojené organické extrakty sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali pri zníženom tlaku. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (10 % MeOH v 1:1 EtOAc/CHCh)), aby vznikla titulná zlúčenina (2,09 g, 66 %) ako žltá tuhá látka: MS (ES) m/e 179 (M+H)+.
·· ·· ·· ·» ·· ·· · · · » · ···
-91 Príprava 26
HPLC separácia enantiomérov metyl-(+)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátu.
• · · ·*···· · · «
a) Metyl-(S)-(-)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoát a metyl-(R)-(+)-4-(4hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoát
Metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoát sa rozdelil na jeho enantioméry s použitím nasledovných podmienok: Daicel Chiralcel OJ® stĺpec (21,2 x 250 mm), 20% etanol vhexánovej pohyblivej fáze, prietok 12 ml/minútu, uv detekcia pri 320 nm, 25 mg injekcia; tR pre metyl-(S)-(-)-4-(4hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoát = 14,5 minút; tR pre metyl-(R)-(+)-4-(4hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoát = 17,2 minút.
Príprava 27
HPLC separácia enantiomérov etyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-fenylbutanoátu
a) Etyl-(-)-4-(4-metoxyfenyl)-3-fenylbutanoát a etyl-(+)-4-(4-metoxyfenyl)-3fenylbutanoát
Etyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-fenylbutanoát sa rozdelil na jeho enantioméry s použitím nasledovných podmienok: Daicel Chiralcel OJ® stĺpec (21,2 x 250 mm), 15% etanol vhexánovej pohyblivej fáze, prietok 15 ml/minútu, uv detekcia pri 254 nm, 100 mg injekcia; tR pre etyl-(-)-4-(4metoxyfenyl)-3-fenylbutanoát = 9,0 min; tR pre etyl-(+)-4-(4-metoxyfenyl)-3fenylbutanoát = 12,2 minút.
Príprava 28
Príprava metyl-(±)-3-(2-furanyl)-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu
a) Metyl-3-(2-furanyl)akrylát
H2SO4 (0,5 ml, 9,39 mmol) sa pridala do roztoku kyseliny 3-(2furanyl)akrylovej (5,0 g, 36,2 mmol) v MeOH (30 ml). Reakčná zmes sa ·· «·· · • · · · · » A · « · • · · » I ··· • · · ··· t· • » · ······ · ·
-92zahrievala k refluxu 22 h, potom sa skoncentrovala na rotačnej odparke.
Zvyšok sa zriedil H2O (100 ml) a extrahoval sa éterom (2 x 70 ml). Organické vrstvy sa spojili a postupne premyli nasýteným NaHCO3 (30 ml) a H2O (30 ml).
Sušenie (Na2SO4) a skoncentrovanie na rotačnej odparke poskytlo titulnú zlúčeninu (4,86 g, 88 %) ako svetlohnedý olej: TLC Rf (10% EtOAc/hexány)
0,50; MS (ES) m/e 479,0 (3M+Na)+.
b) Metyl-(±)-3-(2-furanyl)-4-(4-metoxyfenyl)butanoát
TMEDA (2,18 ml, 14,47 mmol) sa pomaly pridalo do zmesi Cul (2,51 g,
13,16 mmol) v THF (35 ml) pri teplote miestnosti pod argónom. Po 10 minútach pri teplote miestnosti sa reakčná zmes ochladila na -78 °C a pomaly sa pridal roztok chloridu 4-metoxybenzylhorečnatého v THF (0,5 M, 26,32 ml,
13,16 mmol). Reakčná zmes sa miešala 15 minút, potom sa vstrekol roztok TMSCI (4,17 ml, 32,89 mmol) a metyl-3-(2-furanyl)akrylátu (1,0 g, 6,58 mmol) v THF (20 ml) a teplota sa nechala vystúpiť na -30 °C. Po 18 h sa reakčná zmes kvenčovala nasýteným NH4CI/NH4OH (30 ml) a miešanie pokračovalo, až kým sa nedosiahla teplota okolia. Pridala sa H2O (20 ml) a zmes sa extrahovala éterom (2 x 70 ml). Spojené organické vrstvy sa premyli H2O (2 x 50 ml) a sušili (Na2SO4). Skoncentrovanie a silikagélová chromatografia (8% EtOAc/hexány) poskytli titulnú zlúčeninu (0,85 g, 93 %) ako číry olej: TLC Rf (8% EtOAc/hexány) 0,38; MS (ES) m/e 297 (M+Na)+.
c) Metyl-(±)-3-(2-furanyl)-4-(4-hydroxyfenyl)butanoát
Roztok metyl-(±)-3-(2-furanyl)-4-(4-metoxyfenyl)butanoátu (0,82 g, 2,99 mmol) v CH2CI2 (10 ml) sa po kvapkách pridal do roztoku BBr3 v CH2CI2 (1,0 M, 11,97 ml, 11,97 mmol) pri 0 °C pod argónom. Po 30 minútach sa reakčná zmes kvenčovala MeOH (5 ml). Roztok sa miešal 10 minút, potom sa skoncentroval na rotačnej odparke. Zvyšok sa rozdelil medzi EtOAc (50 ml) a 5% NaHCO3 (30 ml). Vrstvy sa oddelili a organická vrstva sa premyla H2O (20 ml) a sušila (Na2SO4). Skoncentrovanie a silikagélová chromatografia (40% EtOAc/hexány) poskytli titulnú zlúčeninu (0,12 g, 15 %) ako svetložltý ·· ···· • · · ···· ·«· • · · t· ··· · · ······ ·· ·
-93zelenkastý zvyšok: TLC Rf (40% EtOAc/hexány) 0,36; MS (ES) m/e 542,8 (2M+Na)+.
Príprava 29
Príprava (±)-3-(1-dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu
a) 1 -(Dimetylaminosulfonyl)imidazol
Do roztoku imidazolu (1,63 g, 24 mmol) v CH2CI2 (100 ml) sa pridal pri teplote miestnosti Et3N (3,35 g, 24 mmol) a následne dimetylaminosulfonylchlorid (2,15 ml, 20 mmol). Po 24 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa vložil do EtOAc (200 ml) a prefiltroval sa cez vrstvu silikagélu. Filtrát sa skoncentroval, aby vznikla titulná zlúčenina (2,89 g, 82 %) ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 176 (M+H)+.
b) 2-(4-Benzyloxyfenyl)-1-(1-dlmetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)etanón
Podľa spôsobu prípravy 16(a), s výnimkou substituovania 1-(dimetylaminosulfonyl)imidazolu (410 mg, 2,34 mmol) 2-brómtiazolom, sa titulná zlúčenina (364 mg, 47 %) pripravila ako biela tuhá látka po silikagélovej chromatografii (35% EtOAc/hexány): MS (ES) m/e 400 (M+H)+.
c) Etyl-(±)-4-(4-benzyloxyfenyl)-3-(1-dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)krotonát
Podľa spôsobu prípravy 16(b), s výnimkou substituovania 2-(4benzyloxyfenyl)-1-(1-dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)etanónu (564 mg, 1,41 mmol) 2-I4-(benzyloxy)fenyl]-1-(2-tiazolyl)etanónom, sa titulná zlúčenina (589 mg zmesi olefínových izomérov, 89 %) pripravila ako oranžový olej po silikagélovej chromatografii (35% EtOAc/hexány): MS (ES) m/e 470 (M+H)+.
d) Etyl-(±)-3-(1-dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)-4-(4-hydroxyfenyl)butanoát
Podľa spôsobu prípravy 16(c), s výnimkou substituovania etyl-(±)-4-(4benzyloxyfenyl)-3-(1-dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)krotonátu (589 mg, 1,25 mmol) etyl-(±)-4-[4-(benzyloxy)fenyl]-3-(2-tiazolyl)krotonátom, sa titulná ·· ···· ·· · · · · · ··· • · · ·· · · · • f · 9 · · · * ·· · ·· ···· ·· ·
-94zlúčenina (436 mg, 91 %) pripravila ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 382 (M+H)+.
Príprava 30
Príprava etyl-(+)-3-(2-benzotiazolyl)-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu
a) 1 -(2-Benzotiazolyl)-2-(4-benzyloxyfenyl)etanón
Podľa spôsobu prípravy 16(a), s výnimkou substituovania benzotiazolu (0,26 ml, 2,34 mmol) 2-brómtiazolom, sa titulná zlúčenina (570 mg, 81 %) pripravila ako bledožltá tuhá látka po triturácii hexánmi: MS (ES) m/e 360 (M+H)+.
b) Etyl-(±)-3-(2-benzotiazolyl)-4-(4-benzyloxyfenyl)krotonát
Podľa spôsobu prípravy 16(b), s výnimkou substituovania 1-(2-benzotiazolyl)-2-(4-benzyloxyfenyl)etanónu (570 mg, 1,59 mmol) 2-[4-(benzyloxy)fenyl]-1-(2-tiazolyl)etanónom, sa titulná zlúčenina pripravila ako zmes olefínových izomérov. Surový produkt sa použil bez ďalšieho čistenia.
c) Etyl-(±)-3-(2-benzotiazolyl)-4-(4-benzyloxyfenyl)butanoát
Etyl-(±)-3-(2-benzotiazolyl)-4-(4-benzyloxyfenyl)krotonát (1,59 mmol, surový) sa hydrogenizoval (345 kPa (50 psi) H2) s použitím 10% Pd/C (1,00 g) v 1:1 EtOH/EtOAc (20 ml) 5 h. Zmes sa prefiltrovala cez vrstvu celit®-u a filtrát sa skoncentroval. Surový zvyšok sa použil bez ďalšieho čistenia.
d) Etyl-(±)-3-(2-benzotiazolyl)-4-(4-hydroxyfenyl)butanoát
Do roztoku etyl-(±)-3-(2-benzotiazolyl)-4-(4-benzyloxyfenyl)butanoátu (1,59 mmol, surový) v EtSH (1,95 ml) sa pri teplote miestnosti pridal BF3OEt2 (1,95 ml). Po 48 h sa pridal ďalší BF3OEt2 (1,95 ml). Po ďalších 18 h sa zmes ochladila na 0 °C a opatrne kvenčovala nasýteným NaHCO3. Vzniknutá zmes sa extrahovala CH2CI2 (3 x 25 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4 a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (30%
-95······ fcfc ·· ·· • · fc ···· ··· •· · ······ ·· ·
EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (391 mg, 72 % cez 3 kroky) ako pena: MS (ES) m/e 342 (M+Hf.
Príprava 31
Príprava etyl-(±)-3-[4-metyl-(2-tiazolyl)]-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu
a) 2-(4-Benzyloxyfenyl)-1 -[4-metyl-(2-tiazolyl)]etanón
Podľa spôsobu prípravy 16(a), s výnimkou substituovania 4-metyltiazolu (0,21 ml, 2,34 mmol) 2-brómtiazolom, sa titulná zlúčenina (303 mg, 48 %) pripravila ako bledožltá tuhá látka po silikagélovej chromatografii (15% EtOAc/hexány): MS (ES) m/e 324 (M+H)+.
b) Etyl-(±)-3-[4-metyl-(2-tiazolyl)]-4-(4-benzyloxyfenyl)krotonát
Podľa spôsobu prípravy 16(b), s výnimkou substituovania 2-(4-benzyloxyfenyl)-[4-metyl-(2-tiazolyl)]-etanónu (300 mg, 0,93 mmol) 2-[4-(benzyloxy)fenyl]-1-(2-tiazolyl)etanónom, sa titulná zlúčenina pripravila ako zmes olefínových izomérov. Surový produkt sa použil bez ďalšieho čistenia.
c) Etyl-(±)-3-[4-metyl-(2-tiazolyl)]-4-(4-benzyloxyfenyl)butanoát
Etyl-(±)-3-[4-metyl-(2-tiazolyl)]-4-(4-benzyloxyfenyl)krotonát (0,93 mmol, surový) sa rozpustil v MeOH (10 ml) a pridali sa horčíkové piliny (113 mg, 4,65 mmol) pri teplote miestnosti. Po 18 h sa zmes naliala do 10% HCI (75 ml) a extrahovala CH2CI2 (3 x 50 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4 a skoncentrovali. Zvyšok sa použil bez ďalšieho čistenia.
d) Etyl-(±)-3-[4-metyl-(2-tiazolyl)]-4-(4-hydroxyfenyl)butanoát
Do roztoku etyl-(±)-3-[4-metyl-(2-tiazolyl)]-4-(4-benzyloxyfenyl)butanoátu (0,93 mmol, surový) v EtSH (10 ml) sa pri teplote miestnosti pridal BF3OEt2 (2,29 ml). Po 24 h sa pridalo viac BF3OEt2 (1,00 ml). Po 72 h sa zmes ochladila na 0 °C a opatrne kvenčovala nasýteným NaHCO3. Vzniknutá zmes sa extrahovala CH2CI2 (3 x 25 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad • · ··· · ·· ·· ·· • · · · · 9 · · 9 ·
-96MgS04 a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (30%
EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (216 mg, 80 % cez 3 kroky) ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 292 (M+H)+.
Príprava 32
Príprava metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]butanoátu ··· ··· 9 • 9 · ·»···· · · ·
a) 4-Bróm-1 -(triizopropylsilyloxy)benzén
Do roztoku 4-brómfenolu (2,00 g, 11,56 mmol) v suchom DMF (20 ml) pri teplote miestnosti sa pridal imidazol (1,57 g, 23,12 mmol) a následne triizopropylsilylchlorid (3,71 ml, 17,34 mmol). Po 4 h sa zmes zriedila H2O (50 ml) a extrahovala hexánmi (3 x 75 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4 a skoncentrovali, aby vznikla titulná zlúčenina (4,00 g, 100 %) ako číry olej, ktorý sa použil bez čistenia: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,29 (d, J = 6 Hz, 2 H), 6,71 (d, J = 6 Hz, 2 H), 1,22 (m, 3 H), 1,09 (m, 18 H).
b) Metyl-(±)-3-karboxy-4-[4-(triizopropylsilyloxy)fenyl]butanoát
Podľa spôsobu prípravy 15(b), s výnimkou substituovania 4-bróm-1(triizopropylsilyloxy)benzénu (2,19 g, 6,66 mmol) 4-brómanizolom, sa titulná zlúčenina (2,24 g, 85 % cez 2 kroky) pripravila ako číry olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,01 (d, J = 6 Hz, 2 H), 6,80 (d, J = 6 Hz, 2 H), 3,62 (s, 3 H), 3,05 (m, 2 H), 2,65 (m, 1 H), 2,40 (m, 2 H), 1,21 (m, 3 H), 1,09 (m, 18 H).
c) Benzylester (±)-/V-[2-[4-(triizopropylsilyloxy)benzyl]-3-(karbometoxy) propionyljserínu
Do roztoku metyl-(±)-3-karboxy-4-[4-(triizopropylsilyloxy)fenyl]butanoátu (1,00 g, 2,53 mmol) v suchom DMF (10 ml) sa pridal pri teplote miestnosti hydrochlorid benzylesteru serínu (704 mg, 3,04 mmol), HOBt (411 mg, 3,04 mmol), EtsN ((1,06 g, 7,60 mmol) a EDO (583 mg, 3,04 mmol). Po 18 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (80%
-97·· ···· ·· ·· • · · · · 9 · • I · · · · ·· • · · · · » •· · ·· ····
EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (834 mg, 58 %) ako bledožltý olej: MS (ES) m/e 572 (M+H)+.
d) Metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2-oxazolinyl)]-4-[4-(triizopropyl-silyloxy)fenyl]butanoát
Do roztoku benzylesteru (±)-/\/-[2-[4-(triizopropylsilyloxy)benzyl]-3(karbometoxy)propionyl]serínu (834 mg, 1,46 mmol) v suchom THF (10 ml) sa pridalo Burgessovo činidlo (417 mg, 1,75 mmol), potom sa zmes zahriala k refluxu. Po 2 h sa zmes ochladila na teplotu miestnosti a skoncentrovala sa. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (35% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (633 mg, 78 %) ako číry olej: MS (ES) m/e 554 (M+H)+.
e) Metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-(triizopropylsilyloxy)fenyljbutanoát
Do roztoku metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2-oxazolinyI)]-4-[4(triizopropylsilyloxy)fenyl]butanoátu (633 mg, 1,14 mmol) v CH2CI2 (6 ml) pri 0 °C sa pridal DBU (0,19 ml, 1,25 mmol) a následne brómtrichlórmetán (0,12 ml, 1,25 mmol). Zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti, ako sa zahrieval kúpeľ. Po 18 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (20% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (427 mg, 68 %) ako číry olej: MS (ES) m/e 552 (M+Hf.
f) Metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-(4-hydroxyfenyl)butanoát
Do roztoku metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4(triizopropylsilyloxy)fenyl]butanoátu (427 mg, 0,77 mmol) v suchom THF (5 ml) pri 0 °C sa pridal roztok TBAF v THF (1,0 M, 1,16 ml, 1,16 mmol). Po 2 h sa zmes zriedila nasýteným NH4CI (10 ml) a extrahovala CH2CI2 (3 x 15 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4 a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (40% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (268 mg, 88 %) ako sivobiela pena: MS (ES) m/e 396 (M+Hf.
·· ···· t· ·· ·· • · · · · * · · · · • · · · · 9 · i
-98• · · ··· ··· ·· · ·· ···· ·· ···
Príprava 33
Príprava metyl-(+)-3-[4-karboxy-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátu
a) Metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,27 ml, 1,36 mmol) sa pridal do roztoku metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu (268 mg, 0,68 mmol), 2-(6-metylamino-2-pyridinyl)etanolu (207 mg, 1,36 mmol) a trifenylfosfínu (357 mg, 1,36 mmol) v bezvodom THF (4 ml) pri 0 °C. Zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti, ako sa zahrieval kúpeľ. Po 18 h sa zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (50% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (284 mg, 79 %) ako číry olej: MS (ES) m/e 530 (M+H)+.
b) Metyl-(±)-3-[4-karboxy-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1etoxyjfenyljbutanoát
Zmes metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátu (234 mg, 0,44 mmol) a 10% Pd/C (100 mg) v EtOH (5 ml) sa odkysličila (3 x vákuum/N2), potom sa energicky miešala pod H2 (tlak balónu). Po 4 h sa zmes prefiltrovala cez vrstvu celit®-u a skoncentrovala, aby vznikla titulná zlúčenina (165 mg, 85 %) ako biela pena: MS (ES) m/e 440 (M+H)+.
Príprava 34
Príprava metyl-(±)-3-(4-hydroxybenzyl)-4-pentinoátu
a) Metyl-(±)-3-formyl-4-(4-metoxyfenyl)butanoát
Do roztoku metyl-(±)4-(4-metoxyfenyl)-3-karboxybutanoátu (pripraveného, ako je opísané v príprave 15, 0,45 g, 1,80 mmol) v CH2CI2 (10 ml) sa pridal oxalylchlorid (0,24 ml, 2,75 mmol) a DMF (1 kvapka). Po 1,5 h sa rozpúšťadlo »φ φφφφ ·· • φ Φ· • · φ φ · φ · ··· *···* 5 I ·· · ·· ···· ·· ·
-99odstránilo pri zníženom tlaku a zvyšok sa azeotropicky spracoval z toluénu (2x). Surový chlorid kyseliny sa rozpustil v acetóne (2 ml) a roztok sa po kvapkách pridal do rýchlo miešanej suspenzie (Ph3P)2CuBH4 (1,14 g, 1,89 mmol) a Ph3P (0,99 g, 3,78 mmol) v acetóne (4 ml). Po 1 h pri teplote miestnosti sa reakčná zmes prefiltrovala cez celit® a filtračná vložka sa ďalej prepláchla EtOAc. Spojené organické filtráty sa skoncentrovali, aby vznikol žltý zvyšok. Radiálna chromatografia na silikagéli (6 mm platňa, 20% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (0,25 g) ako číry olej: 1H NMR (300 MHz, CDCb) δ 9,79 (s, 1 H), 7,11 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,84 (d, J = 8,6 Hz, 2 H),
3,79 (s, 3 H), 3,65 (s, 3 H), 3,10 (m, 2 H), 2,70 (m, 2 H), 2,38 (dd, J = 16,8, 5,1 Hz, 1 H).
b) Metyl-(±)-3-(4-metoxybenzyl)-4-pentinoát
Do roztoku metyl-(±)-3-formyl-4-(4-metoxyfenyl)butanoátu (0,14 g, 0,61 mmol) v suchom MeOH (5 ml) sa pridal K2CO3 (0,17 g, 1,21 mmol), po čom nasledovalo pridanie po kvapkách roztoku dimetyl-1-diazo-2-oxopropylfosfonátu (0,13 g, 0,67 mmol) v MeOH (5 ml). Po 18 h pri teplote miestnosti sa zmes naliala do nasýteného NaHCO3 a extrahovala Et2O. Spojené organické extrakty sa premyli soľankou a sušili nad MgSO4. Rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku, aby vznikol číry olej. Radiálna chromatografia na silikagéli (2 mm platňa, 20% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (0,06 g) ako číry olej: 1H NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 6,92 (d, J = 8,4 Hz,
H), 3,87 (s, 3 H), 3,77 (s, 3 H), 3,20 (m, 1 H), 2,85 (m, 2 H), 2,56 (d, J = 6,7 Hz, 2 H), 2,17 (d, J = 2,0 Hz, 1 H).
c) Metyl-(±)-3-(4-hydroxybenzyl)-4-pentinoát
Do roztoku BBľ3 v CH2Cb (1,0 M, 0,85 ml, 0,85 mmol) pri 0 °C sa pridal roztok metyl-(±)-3-(4-metoxybenzyl)-4-pentinoátu (66 mg, 0,28 mmol) v CH2CI2 (0,60 ml). Po 3 h pri 0 °C sa reakčná zmes kvenčovala opatrným pridaním MeOH (1 ml). Rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku a zvyšok sa azeotropoval z MeOH (2x). Do zvyšku sa pridal nasýtený NaHCO3 a vodná
-100·· ···· ·· ·· • · · · • · · ·· • · · • · • · · ·· ···· • · ·· · vrstva sa extrahovala EtOAc. Spojené organické extrakty sa premyli soľankou a sušili nad Na2SO4. Rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku, aby vznikol číry film. Radiálna chromatografia na silikagéli (2 mm platňa, 20% EtOAc/hexány), poskytla titulnú zlúčeninu (25 mg) ako číry film: 1H NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,15 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 6,83 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 3,69 (s, 3 H), 3,10 (m, 1 H), 2,75 (m, 2 H), 2,45 (m, 2 H), 2,11 (d, J = 2,2 Hz, 1 H).
Príprava 35
Príprava metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(fenyletyl)butanoátu
a) Kyselina (±)-2-(4-metoxybenzyl)-4-fenylbutánová
Reakčná banka sa naplnila diizopropylamínom (1,0 g, 7,5 mmol), NaH (60 % v minerálnom oleji, 0,33 g, 8,5 mmol) a THF (40 mmol). Do miešanej zmesi sa pridal roztok kyseliny fenylbutánovej (1,23 g, 7,5 mmol) v THF (10 mmol) v priebehu 5 minút Vyvíjanie vodíka sa skončilo zahriatím zmesi k refluxu počas 10 minút. Reakčná zmes sa ochladila na 10 °C a pridal sa roztok n-BuLi (2,5 M v hexánoch, 3,0 g, 7,5 mmol). Po 15 minútach pri tejto teplote sa zmes zahrievala na 30 °C 15 minút. Zakalený roztok sa ochladil na 0 °C a v priebehu 10 minút sa pridal 4-metoxybenzylchlorid (1,2 g, 7,5 mmol). Po 20 minútach pri tejto teplote sa zmes miešala pri teplote miestnosti cez noc. Reakčná zmes sa udržiavala pri alebo pod 15 °C, pričom sa pridala Η2Ο (50 ml). Zmes sa čiastočne skoncentrovala vo vákuu, zriedila sa vodou a extrahovala éterom (2 x 50 ml). Vodná vrstva sa okyslila 6 N HCI na Kongo červenú a extrahovali Et2O (3 x 30 ml). Spojené extrakty sa sušili nad bezvodým MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali, aby vznikla titulná zlúčenina (1,6 g, 56 %) ako žltý olej: TLC Rf (1% MeOH/CH2CI2) 0,37.
b) (±)-1 -Diazo-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-fenyletyl)-2-butanón
Na roztok kyseliny (±)-2-(4-metoxybenzyl)-4-fenylbutánovej (1,5 g, 5,26 mmol) v CH2CI2 (30 ml) sa pôsobilo oxalylchloridom (0,92 ml, 10,5 mmol).
·· ···· ·· · · · · · ··· • · · ·· ·«· ··· · · · ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-101 Reakčná zmes sa miešala pri teplote miestnosti cez noc, potom sa skoncentrovala vo vákuu. Zvyšok sa rozpustil v Et2O a pridal sa Et3N, následne nadbytok diazometánu (pochádzajúceho z 1-metyl-3-nitro-1-nitroguanidínu a NaOH). Reakčná zmes sa miešala pri teplote miestnosti cez noc, potom sa skoncentrovala vo vákuu, aby vznikla titulná zlúčenina (1,5 g, 94 %) ako žltý olej: MS (ES) m/e 309 (M+H)+.
c) Metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-fenyletyl)butanoát
Roztok benzoátu strieborného (0,9 g, 3,9 mmol) v Et3N (8 ml, 55,6 mmol) sa pridal do roztoku (±)-1-diazo-4-(4-metoxyfenyl)-3-fenyletyl-2butanónu (0,3 g, 0,97 mmol) v MeOH (20 ml) pri teplote miestnosti. Pozorovalo sa uvoľňovanie plynu a reakčná zmes sčernela. Po 30 minútach sa reakčná zmes zahriala k refluxu. Po 1 h pri refluxe sa reakčná zmes ochladila na teplotu miestnosti a prefiltrovala cez celit® a filtrát sa skoncentroval vo vákuu.
Zvyšok sa adsorboval na silikagél a vložil na suchý silikagélový stĺpec. Rýchla chromatografia (5% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (0,1 g, 57 %) ako svetložltý olej: TLC Rf (5% EtOAc/hexány) 0,63.
d) Metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(fenyletyl)butanoát
Bromid boritý (1,0 M v CH2CI2, 4,8 ml, 4,8 mmol) sa pridal do roztoku metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-fenyletyl)butanoátu (1,0 g, 3,21 mmol) v CH2CI2 (10 ml) pri 0 °C pod argónom. Po 1 h sa zmes kvenčovala absolútnym MeOH a skoncentrovala vo vákuu. Rekoncentrovanie z toluénu (niekoľkokrát), po ktorom nasledovalo sušenie vo vysokom vákuu, poskytlo titulnú zlúčeninu (0,07 g, 73 %) ako olej: TLC Rf (15% EtOAc/hexány) 0,26.
Príprava 36
Príprava metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-benzylbutanoátu
a) Kyselina (±)-2-(4-metoxybenzyl)-3-fenylpropiónová ···· • · · ···· · · · ··· i · · · • · t ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-102Podľa spôsobu prípravy 35(a), s výnimkou substituovania kyseliny fenylpropiónovej kyselinou fenylbutánovou, sa titulná zlúčenina (60 %) získala ako žltý olej: TLC Rf (1% MeOH/CH2CI2) 0,38.
b) (+)-1 -Diazo-3-(4-metoxyfenyl)-3-benzyl-2-butanón
Podľa spôsobu prípravy 35(b), s výnimkou substituovania kyseliny (±)-2(4-metoxybenzyl)-3-fenylpropiónovej kyselinou (±)-2-(4-metoxybenzyl)-4-fenylbutánovou, sa titulná zlúčenina (100 %) získala ako žltý olej: MS (ES) m/e 289 (M+H)+.
c) Metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-benzylbutanoát
Podľa spôsobu prípravy 35(c), s výnimkou substituovania (±)-1-diazo-3(4-metoxyfenyl)-3-benzyl-2-butanónu (±)-1-diazo-4-(4-metoxyfenyl)-3-fenyletyl2-butanónom, sa titulná zlúčenina (80 %) pripravila ako žltkastá pena: TLC Rf (5% EtOAc/hexány) 0,33.
d) Metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-benzylbutanoát
Podľa spôsobu prípravy 35(d), s výnimkou substituovania metyl-(±)-4(4-metoxyfenyl)-3-benzylbutanoátu metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-fenyletyl)butanoátom, sa pripravila titulná zlúčenina (24 %): TLC Rf (20% EtOAc/hexány) 0,33.
Príprava 37
Príprava metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-cyklopropylbutanoátu
a) Kyselina (±)-2-(4-metoxybenzyl)-2-cyklopropyloctová
Podľa spôsobu prípravy 35(a), s výnimkou substituovania kyseliny cyklopropyloctovej kyselinou fenylbutánovou, sa titulná zlúčenina (60 %) získala ako žltý olej: TLC Rf (1% MeOH/CH2CI2) 0,42.
-103• · · · · · ·· · ·· ···· ·· ···· ·· ·· • · · · · · · • · · t t ·
b) (±)-1 -Diazo-3-(4-metoxyfenyl)-3-cyklopropyl-2-butanón
Podľa spôsobu prípravy 35(b), s výnimkou substituovania kyseliny (+)-2(4-metoxybenzyl)-3-cyklopropyloctovej kyselinou (±)-2-(4-metoxybenzyl)-4fenylbutánovou, sa titulná zlúčenina (100 %) pripravila ako žltý olej: MS (ES) m/e 245 (M+H)+.
c) Metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-cyklopropylbutanoát
Podľa spôsobu prípravy 35(c), s výnimkou substituovania (±)-1-diazo-3(4-metoxyfenyl )-3-cyklopropyl-2-butanón u (±)-1 -diazo-4-(4-metoxyfenyl )-3fenyletyl-2-butanónom, sa titulná zlúčenina (60 %) pripravila ako žltkastý film: TLC Rf (10% EtOAc/hexány) 0,21.
d) Metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-cyklopropylbutanoát
Podľa spôsobu prípravy 35(d), s výnimkou substituovania metyl-(±)-4(4-metoxyfenyl)-3-cyklopropylbutanoátu metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-fenyletyl)butanoátom, sa titulná zlúčenina (20 %) pripravila ako žltkastý film: TLC Rf (10% EtOAc/hexány) 0,11.
Príprava 38
Príprava etyl-4-(4-hydroxyfenyl)-3-metyl-3-butenoátu
a) Etyl-4-(4-metoxyfenyl)-3-metyl-3-butenoát
Do suspenzie NaH (60 % v minerálnom oleji, 2,1 g, 54 mmol) v toluéne (40 ml) sa pridal trietylfosfonoacetát (11,1 g, 49,4 mmol) v toluéne (50 ml). Reakčná zmes sa miešala pri teplote miestnosti 20 minút, potom sa po kvapkách pridal roztok 4-metoxyfenylacetónu (7,4 g, 44,9 mmol) v toluéne (40 ml). Reakčná zmes sa zahrievala k refluxu 5 h, potom sa skoncentrovala. Rýchla chromatografia na silikagéli (5% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (1,0 g) ako bezfarebný olej: TLC Rf (5% EtOAc/hexány) 0,23.
·· ···· • · · ···· ··· ··· · · ··· ··· · · ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-104 b) Etyl-4-(4-hydroxyfenyl)-3-metyl-3-butenoát
Podľa spôsobu prípravy 35(d), s výnimkou substituovania etyl-4-(4metoxyfenyl)-3-metyl-3-butenoátu metyl-(±)-4-(4-metoxyfenyl)-3-(2-fenyletyl)butanoátom, sa titulná zlúčenina (34 %) pripravila ako bezfarebný olej: TLC Rf (10% EtOAc/hexány) 0,13.
Nasledujúce zlúčeniny ilustrujú spôsoby prípravy biologicky aktívnych zlúčenín podľa tohto vynálezu z medziproduktov, ako je opísané v predchádzajúcich prípravách.
Príklad 1
Príprava kyseliny (±)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1 -propyloxy]fenyl]-butánovej
a) Etyl-(± )-3-fenyl-4-[4-[3-( 1 -oxo-2-pyridinyl)amino-1 -propyloxyjfenyljbutanoát Diizopropylazodikarboxylát (0,44 ml, 2,25 mmol) sa pridal v priebehu 45 s do roztoku etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátu (426,5 mg, 1,5 mmol), 2-[(3-hydroxy-1-propyl)amino]pyridín-/\/-oxidu (378,5 mg, 2,25 mmol) a trifenylfosfínu (590,2 mg, 2,25 mmol) v bezvodom DMF (22,5 ml) pri 0 °C pod argónom. Žltý roztok sa udržiaval pri 0 °C 10 minút, potom sa zahrial na teplotu miestnosti. Po 23 h sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa rekoncentroval z xylénov (2x). Silikagélová chromatografia (gradient: EtOAc, potom 5% MeOH/CHCb) poskytla titulnú zlúčeninu (445,7 mg, 68 %) ako žltý olej: TLC Rf (5 % MeOH/CHCb) 0,41; 1H NMR (250 MHz, CDCb) δ 8,11 (dd, J = 6,5, 1,3 Hz, 1 H), 7,05 - 7,35 (m, 5 H), 6,85 - 7,05 (m, 1 H), 6,94 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,76 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,62 (dd, J = 8,5, 1,5 Hz, 1 H), 6,48 - 6,59 (m, 1 H), 3,90 - 4,10 (m, 4 H), 3,50 (q, J = 6,5 Hz, 2 H), 3,25 - 3,45 (m, 1 H), 2,85 (d, J = 7,4 Hz, 2 H), 2,50 - 2,72 (m, 2 H), 2,05 - 2,22 (m, 2 H), 1,11 (t, J = 7,1 Hz, 3 H); MS (ES) m/e 435,1 (M + H)+.
b) (±)-3-Fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butanoát ·· ···· »· ·· ·· ·· · · · · · ··· ··· · · ···
-105• · · · · · ··· ·· · ·· ···· ·· ···
Zmes etyl-(±)-3-fenyl-4-[4-[3-( 1 -oxo-2-pyridinyl)amino-1 -propyloxy]fenylj-butanoátu (445,7 mg, 1,03 mmol), cyklohexénu (1 ml, 10 mmol), 10% Pd/C (110 mg, 0,10 mmol) a izopropanolu (10 ml) sa zahriala k refluxu pod argónom. Po 3 h sa pridalo viac Pd/C (110 mg). Zmes sa zahrievala k refluxu ďalších 20,5 h, potom sa za horúca prefiltrovala cez celit®. Filtračný koláč sa premyl horúcim 1:1 MeOH/CHCI3 a spojené filtráty sa skoncentrovali. Zvyšok sa rekoncentroval z toluénu, potom sa chromatografoval na silikagéli (5% MeOH/CHCI3), aby vznikla titulná zlúčenina (332,5 mg, 77 %) ako bezfarebný olej: TLC Rf (5% MeOH/CHCI3) 0,43; 1H NMR (250 MHz, CDCI3) δ 8,02 - 8,12 (m, 1 H), 7,32 - 7,45 (m, 1 H), 7,06 - 7,32 (m, 5 H), 6,94 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,75 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,50 - 6,60 (m, 1 H), 6,39 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 4,65 4,82 (m, 1 H), 3,88 - 4,10 (m, 4 H), 3,48 (q, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,28 - 3,45 (m, 1 H), 2,84 (d, J = 7,4 Hz, 2 H), 2,50 - 2,62 (m, 2 H), 2,00 - 2,15 (m, 2 H), 1,10 (t, J = 7,1 Hz, 3 H); MS (ES) m/e 419,1 (M + H)+.
c) Kyselina (±)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1 -propyloxyjfenyljbutánová Zmes etyl-(±)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]-butanoátu (332,5 mg, 0,79 mmol), 1,0 N LiOH (1,2 ml, 1,2 mmol), THF (4 ml) a H2O (2,8 ml) sa miešala 4 h pri teplote miestnosti, potom sa zahriala v olejovej kúpeľovej súprave na 45 až 50 °C. Po 17,5 h sa vzniknutý homogénny, takmer bezfarebný roztok ochladil na teplotu miestnosti a extrahoval Et2O (2x8 ml). Vrstvy Et2O sa odstránili. Vodná vrstva sa miešala s miernym ohrievaním vo vákuu, aby sa odstránili zvyškové organické rozpúšťadlá, potom sa prefiltrovala. Vzniknutý vodný roztok sa miešal pri teplote miestnosti, zatiaľ čo sa pH pomaly a opatrne nastavilo na 5,5 až 6,0 pomocou 1,0 N HCI. Zmes sa miešala 0,5 h, potom sa tuhá látka zozbierala filtráciou presávaním a premyla množstvom H2O. Sušenie vo vysokom vákuu pri 60 °C poskytlo titulnú zlúčeninu (232,3 mg, 74 %) ako sklovitú tuhú látku: HPLC (Hamilton PRP-1®, 35% CH3CN/H2O, obsahujúci 0,1 % TFA) K’ = 2,4; 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,75 - 7,95 (m, 1 H), 7,48 (app t, 1 H), 7,07 - 7,27 (m, 5 H), 6,90 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 6,72 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 6,50 - 6,70 (m, 2 H), 4,01 (t, J = 6,0 ·· ···· ·· ·· ·· ·· · ···· ···
-106··· · · · ··· ·· · ·· ···· ·· ···
Hz, 2 H), 3,44 (t, J = 6,7 Hz, 2 H), 3,20 - 3,40 (m, 1 H, prekrytý signálom zvyškového rozpúšťadla), 2,87 (dd, J = 13,6, 6,6 Hz, 1 H), 2,79 (dd, J = 13,6,
8,1 Hz, 1 H), 2,48 - 2,70 (m, 2 H), 1,98 - 2,11 (m, 2 H); MS (ES) m/e 391,0 (M + H)+. Anál. Vypoč. pre C24H26N2O30,33 H2O: C, 72,72; H, 6,78; N, 7,07.
Nájdené: C, 72,68; H, 6,69; N, 6,96.
Príklad 2
Príprava kyseliny (±)-3-fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyl]butánovej
a) Etyl-(±)-3-fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,44 ml, 2,25 mmol) sa pridal v priebehu 2 minút do roztoku etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátu (427 mg, 1,5 mmol), 6-metylamino-2-pyridyletanolu (343 mg, 2,25 mmol) a trifenylfosfínu (590 mg, 2,25 mmol) v bezvodom THF (22,5 ml) pri 0 °C pod N2. Žltý roztok sa udržiaval pri 0 °C 10 minút, potom sa zahrial na teplotu miestnosti. Po 24 h sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (4:1 Et2O/hexány). Titulnú zlúčenina (479,5 mg, 76 %) sa získala ako bezfarebný olej: TLC Rf (4:1 Et2O/hexány) 0,50; 1H NMR (250 MHz, CDCI3) δ 7,38 (app t, 1 H), 7,07 - 7,30 (m, 5 H), 6,93 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,76 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,54 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 6,24 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 4,42 - 4,58 (m, 1 H), 4,26 (t, J = 7,0 Hz, 2 H), 3,98 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 3,25 - 3,42 (m, 1 H), 3,05 (t, J = 7,0 Hz, 2 H), 2,89 (d, J = 5,3 Hz, 3 H), 2,74 - 2,92 (m, 2 H), 2,50 - 2,72 (m, 2 H), 1,10 (t, J = 7,1 Hz, 3 H); MS (ES) m/e 419,1 (M + H)+.
b) Kyselina (±)-3-fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová
1,0 N NaOH (1,15 ml, 1,15 mmol) sa po kvapkách pridal do chladeného (15 °C) roztoku etyl-(+)-3-fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljbutanoátu (479,5 mg, 1,15 mmol) v dioxáne (4,6 ml). Vzniknutá zmes sa miešala 2,5 h pri teplote miestnosti, potom sa zahriala v olejovej kúpeľovej ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ··· ··· ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-107súprave na 40 °C. Po 24 h sa reakčná zmes ochladila na teplotu miestnosti a miešala 3 dni, potom sa zriedila H2O (3,4 ml) a extrahovala Et20 (3x5 ml).
Vrstvy Et20 sa odstránili. Pretože sa tuhý precipitát oddelil od vodnej vrstvy, pridal sa 1,0 N NaOH (1,0 mi), dioxán (5 ml) a Et2O (10 ml), aby sa získal homogénny roztok. pH sa upravilo na 5,5 až 6,0 pomocou 1,0 N HCI a organické rozpúšťadlá sa odstránili na rotačnej odparke. Vodný roztok sa zlial z gumovitého precipitátu a precipitát sa starostlivo vysušil vo vákuu. Zvyšok sa rekryštalizoval z CH3CN a tuhá látka sa sušila vo vákuu pri 60 °C niekoľko dní, aby vznikla titulná zlúčenina (331,0 mg, 74 %) ako biela kryštalická tuhá látka:
HPLC (Hamilton PRP-1®, 35% CH3CN/H2O, obsahujúci 0,1 % TFA) K’ = 2,9;;
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,05 - 7,40 (m, 6 H), 6,95 (d, J = 8,4 Hz, 2 H),
6,76 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 6,42 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 6,30 - 6,50 (m, 1 H), 6,26 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 4,21 (t, J = 6,7 Hz, 2 H), 3,12 - 3,30 (m, 1 H), 2,92 (t, J =
6,7 Hz, 2 H), 2,60 - 2,90 (m, 2 H), 2,73 (d, J = 4,8 Hz, 3 H), 2,40 - 2,60 (m, 2 H, čiastočne prekrytý signálom zvyškového rozpúšťadla); MS (ES) m/e 391,2 (M + H)+. Anál. Vypoč. pre C24H26N2O3: C, 73,82; H, 6,71; N, 7,17. Nájdené: C,
73,43; H, 6,72; N, 7,40.
Príklad 3
Príprava kyseliny (+)-3-fenyl-4-[4-[(2-(2-pyridinyl)amino-1 -etylamino)karbonyl]fenyljbutánovej
a) Etyl-(±)-3-fenyl-4-[4-[(2-(2-pyridinyl)amino-1-etylamino)karbonyl]fenyl]-butanoát
Do suspenzie etyl-(±)-(4-karboxyfenyl)-3-fenylbutanoátu (312 mg, 1,0 mmol), dihydrochlorid 2-[(2-amino-1-etyl)amino]pyridínu (252 mg, 1,2 mmol) a HOBt (162 mg, 1,2 mmol) VCH3CN (5 ml) sa pridal (i-Pr)2NEt (0,87 ml, 5,0 mmol), potom EDC (230 mg, 1,2 mmol). Po 18 h sa zmes skoncentrovala.
Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (5% MeOH v 1:1 CHCIa/EtOAc), aby vznikla titulná zlúčenina (380 mg, 88 %) ako hnedastá pena: MS (ES) m/e 432 (M+H)+.
·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ··· ··· · · ··· • · · ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-108b) Kyselina (±)-3-fenyl-4-[4-[(2-(2-pyridinyl)amino-1-etylamino)karbonyl]fenyl]butánová
Do roztoku etyl-(±)-3-fenyl-4-[4-[(2-(2-pyridinyl)amino-1 -etylamino)karbonyl]fenyl]butanoátu (380 mg, 0,88 mmol) v 1:1 THF/H2O (5 ml) sa pridal 1,0 N LiOH (1,3 ml, 1,3 mmol). Po 24 h sa zmes skoncentrovala, aby sa odstránil THF. Výsledný vodný roztok sa ochladil na 0 °C a okyslil na pH 6 s použitím 10% HCl. Precipitát sa zozbieral filtráciou a sušil vo vákuu, aby sa získala titulná zlúčenina (213 mg, 60 %) ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 404 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre 024^5^03-0,25 H2O: C, 70,66; H, 6,30; N, 10,30. Nájdené: C, 70,92; H, 6,44; N, 10,14.
Príklad 4
Príprava kyseliny (±)-3-fenyl-3-[4-[(4-(2-pyridinyl)amino-1 -butyljfenylamino]propánovej
a) 1-Bróm-4-(4-nitrofenyl)bután
Do roztoku 4-(4-nitrofenyl)-1-butanolu (1,0 g, 5,12 mmol) v suchom THF (10 ml) sa pridal PPh3 (1,61 g, 6,14 mmol) a CBr4 (2,04 g, 6,14 mmol). Po 4 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (10% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (1,22 g, 92 %) ako bledožltý olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 8,18 (d, J = 6,5 Hz, 2 H), 7,36 (d, J = 6,5 Hz, 2 H), 3,48 (t, 2 H), 2,80 (t, 2 H), 1,9 (m, 4 H).
b) 1-[/V-(ŕerc-Butoxykarbonyl)-/V-(2-pyridinyl)amino]-4-(4-nitrofenyl)bután
Do suspenzie NaH (170 mg, 4,25 mmol) v suchom DMF (10 ml) sa pridal 2-(ŕerc-butoxykarbonylamino)pyridín (750 mg, 3,86 mmol) pri 0 °C. Po 5 minútach sa zmes zahriala na teplotu miestnosti. Po 15 minútach sa zmes ochladila na 0 °C a pridal sa 1-bróm-4-(4-nitrofenyl)bután (1,22 g, 4,73 mmol) v suchom DMF (5 ml). Zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti, ako sa zahrieval kúpeľ. Po 18 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa vložil do H2O (50 ml) a extrahoval sa EtOAc (3 x 50 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ···
-109• · · ·· ···· ·· ·
MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (15% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (1,25 g, 87 %) ako bledožltý olej: MS (ES) m/e 372 (M+H)+.
c) 1-[/V-(ŕerc-Butoxykarbonyl)-/V-(2-pyridinyl)amino]-4-(4-aminofenyl)bután
Do suspenzie 10% Pd/C (358 mg) v absolútnom EtOH (15 ml) sa pridal 1-[/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-/V-(2-pyridinyl)amino]-4-(4-nitrofenyl)bután (1,25 g, 3,37 mmol). Zmes sa odkysličila (3 x evakuácia/N2 čistiace cykly), potom sa naplnia H2 (345 kPa (50 psi)). Po 2 h sa H2 odstránil a zmes sa prefiltrovala cez vrstvu celit®-u. Filtrát sa skoncentroval, aby vznikla titulná zlúčenina (1,14 g, 99 %) ako žltý olej, ktorý sa použil bez čistenia: MS (ES) m/e 342 (M+H)+.
d) ŕerc-Butyl-(±)-3-fenyl-3-[4-[4-[/\/-(ŕerc-butoxykarbonyl)-/V-(2-pyridinyl)annino]butyljfenylaminojpropanoát
Do suspenzie MgSO4 (7,0 g) v CH2CI2 (20 ml) sa pridal 1-[A/-(íercbutoxykarbonyl)-/V-(2-pyridinyl)amino]-4-(4-aminofenyl)bután (560 mg, 1,64 mmol), potom benzaldehyd (0,2 ml, 1,97 mmol). Po 18 h sa zmes prefiltrovala a filtrát sa skoncentroval. Zvyšok sa vložil do suchého THF (10 ml) a ochladil na -78 °C. Do tejto zmesi sa po kvapkách pridal BF3OEt2 (0,4 ml, 3,28 mmol). Po 15 minútach sa pripravilo Reformatskeho činidlo z kovového zinku a pridal sa ŕerc-butylbrómacetát v THF (Tetrahedron 40, 2781, 1984; 818 mg, 2,46 mmol). Zmes sa nechala zahrievať na teplotu miestnosti 5 h, ako sa zohrieval kúpeľ. Zmes sa zriedila H2O (20 ml) a extrahovala sa EtOAc (3 x 20 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (15% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (350 mg, nečistá): MS (ES) m/e 546 (M+H)+. Táto sa použila v nasledujúcom kroku bez ďalšieho čistenia.
e) Kyselina (±)-3-fenyl-3-[4-[(4-(2-pyridinyl)amino-1 -butyljfenylaminojpropánová ferc-Butyl-(±)-3-fenyl-3-[4-[4-[/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-/V-(2-pyridinyl)amino]-1-butyl]fenylamino]propanoát (350 mg, nečistý) sa rozpustil v 1:1 • · · ···· ··· ··· · 4 ··· ·· ····
-110TFA/CH2CI2 (10 ml). Po 2 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa rozpustil v 1,0 M NaOH (10 ml) a extrahoval sa EtOAc (2x10 ml). Vodná vrstva sa okysliia na pH 6 s použitím 10% HCI. Tuhá látka sa pozberala filtráciou a sušila sa vo vákuu pri 50 °C 18 h, aby sa získala titulná zlúčenina (74 mg, 12 %) ako sivobiely prášok: MS (ES) m/e 390 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C24H27N3O20,50 H2O: C, 72,34; H, 7,08; N, 10,54. Nájdené: C, 72,29; H, 6,92; N, 10,37.
Príklad 5
Príprava kyseliny 4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyljbutánovej
a) Metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,3 ml, 1,4 mmol) sa pridal do roztoku metyl-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátu (180 mg, 0,93 mmol), 6-metylamino2-pyridyletanolu (212 mg, 1,4 mmol) a trifenylfosfínu (367 mg, 1,4 mmol) v bezvodom THF (10 ml) pri 0 °C. Zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti, ako sa zahrieval kúpeľ. Po 24 h sa zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (Et2O). Titulná zlúčenina (160 mg, 52 %) sa získala ako bledožltý olej: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,39 (t, 1 H), 7,05 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 6,82 (d, J = 6,6 Hz, 2 H), 6,52 (d, J = 8 Hz, 1 H), 6,13 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 4,51 (br s, 1 H), 4,28 (t, 2 H), 3,72 (t, 2 H), 3,65 (s, 3 H), 3,06 (t, 2 H), 2,89 (d, J = 6,0 Hz, 3 H), 2,55 (t, 2 H), 2,30 (t, 2 H), 1,88 (m, 2 H).
b) Kyselina 4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyljbutánová
Do roztoku metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyl]butanoátu (160 mg, 0,49 mmol) v 1:1 THF/H2O (1,5 ml) sa pridal 1,0 N LiOH (0,58 ml, 0,58 mmol). Po 5 h sa zmes skoncentrovala, aby sa odstránil THF. Vzniknutý vodný roztok sa ochladil na 0 °C a okyslil na pH 6 s použitím 10% HCI. Titulná zlúčenina (94 mg, 61 %) sa pozberala filtráciou a sušila vo vákuu pri 50 °C 18 h: MS (ES) m/e 315 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre CieH22N2O3: C, 68,77; H, 7,05; N, 8,91. Nájdené: C, 68,75; H, 7,06; N, 8,74.
·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· · · ·
-111 • · · 4·· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
Príklad 6
Príprava kyseliny (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-vinylbutánovej
a) Metyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-vinylbutanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,17 ml, 0,84 mmol) sa pridal do roztoku metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-vinylbutanoátu (92,5 mg, 0,42 mmol), 6-metylamino-2-pyridyletanolu (128 mg, 0,84 mmol) a trifenylfosfínu (220 mg, 0,84 mmol) v bezvodom THF (2 ml) pri 0 °C. Zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti, ako sa zahrieval kúpeľ. Po 24 h sa zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (3:1 Et2O/hexány). Titulná zlúčenina (100 mg, 67 %) sa získala ako bledožltý olej: MS (ES) m/e 355 (M+H)+.
b) Kyselina (+)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-vinylbutánová
Do roztoku metyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3vinylbutanoátu (100 mg, 0,28 mmol) v 1:1 THF/H2O (1,5 ml) sa pridal 1,0 N LiOH (0,34 ml, 0,34 mmol). Po 18 h sa zmes okyslila na pH 6 s použitím 10% HCl a extrahovala sa EtOAc (3x10 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa lyofilizoval zHOAc (10 ml), aby vznikla titulná zlúčenina (50 mg, 52 %) ako žltý olej: MS (ES) m/e 341 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C20H24N2O3-2,75 CH3CO2H: C, 60,58; H, 6,98; N, 5,54. Nájdené: C, 60,55; H, 6,91; N, 5,47.
Príklad 7
Príprava kyseliny (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2pyridinyl)butánovej
a) Etyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-pyridinyl)-butanoát ·· ···· ·· · ·· ·· · · · · · · 9 ·
- 1129 9 9 9 9 9 9 9
9 99 9999 99 9
Diizopropylazodikarboxylát (0,12 ml, 0,62 mmol) sa pridal do roztoku metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-pyridinyl)butanoátu (90 mg, 0,31 mmol), 6metylamino-2-pyridyletanolu (95 mg, 0,62 mmol) a trifenylfosfínu (163 mg, 0,62 mmol) v bezvodom THF (2 ml) pri 0 °C. Zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti, ako sa zahrieval kúpeľ. Po 24 h sa zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (10% hexány/Et2O). Titulná zlúčenina (71 mg, 55 %) sa získala ako bezfarebný olej: MS (ES) m/e 420 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-4-[4-[2-(6-mety la mino-2-py rid i ny I)-1 -etoxyjfeny l]-3-(2-py ridi nyl )butánová
Do roztoku etyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3(2-pyridinyl)butanoátu (71 mg, 0,17 mmol) v 1:1 THF/H2O (2 ml) sa pridal 1,0 N LiOH (0,34 ml, 0,34 mmol). Po 18 h sa zmes okyslila na pH 6 s použitím 10% HCl a extrahovala sa CHCI3 (3 x 10 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali. Zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (10% MeOH/CHCb), aby vznikla titulná zlúčenina ako žltkastá pena: MS (ES) m/e 392 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C23H25N3O3 0,75 H2O: C, 68,21; H, 6,60; N, 10,38. Nájdené: C, 68,50; H, 6,39; N, 10,24.
Príklad 8
Príprava kyseliny (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-oxazolyl)butánovej
a) Metyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-oxazolyl)-butanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,24 ml, 1,24 mmol) sa pridal do roztoku metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-oxazolyl)butanoátu (163 mg, 0,62 mmol), 6metylamino-2-pyridyletanolu (190 mg, 1,24 mmol) a trifenylfosfínu (325 mg, 1,24 mmol) v bezvodom THF (4 ml) pri 0 °C. Zmes sa nechala zahriať, ako sa kúpeľ zahrieval na teplotu miestnosti. Po 24 h sa zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (50% EtOAc/CHCb). Titulná ·· ·· ·· • · · ···· ··· • · · · · t · · ·· ···· • · · · · · ι β • · · ······ ·· ·
-113 zlúčenina (167 mg, 68 %) sa získala ako oranžovkastý olej: MS (ES) m/e 396 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-oxazolyl)butánová
Do roztoku metyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3(2-oxazolyl)butanoátu (167 mg, 0,42 mmol) v 1:1 THF/H2O (4 ml) sa pridal 1,0 N LiOH (0,63 ml, 0,63 mmol). Po 18 h sa zmes premyla Et20 (2x2 ml). Vodná vrstva sa skoncentrovala, aby sa odstránil zvyškový THF/Et2O, potom sa okyslila na pH 6 s použitím 10% HCI. Titulná zlúčenina (114 mg, 71 %) sa pozberala ako biela tuhá látka filtráciou a sušila vo vákuu pri 50 °C po dobu 18 h: MS (ES) m/e 382 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C2iH23N3O4O,50 H2O: C, 64,60;
H, 6,20; N, 10,76. Nájdené: C, 64,33; H, 6,12; N, 10,38.
Príklad 9
Príprava kyseliny (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2tiazolyl)butánovej
a) Etyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamíno-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,21 ml, 1,06 mmol) sa pridal do roztoku etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátu (155 mg, 0,53 mmol), 6metylamino-2-pyridyletanolu (163 mg, 1,06 mmol) a trifenylfosfínu (278 mg, 1,06 mmol) v bezvodom THF (5 ml) pri 0 °C. Zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti, ako sa zahrieval kúpeľ. Po 24 h sa zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (50% EtOAc/CHCI3). Frakcie, ktoré obsahovali produkt, sa skoncentrovali a rechromatografovali na silikagéli (60% EtOAc/hexány). Frakcie z druhej chromatografie, ktoré obsahovali produkt, sa ďalej čistili preparatívnou TLC (60% EtOAc/hexány). Titulná zlúčenina (106 mg, 47 %) sa získala ako olej: MS (ES) m/e 426 (M+H)+.
• · · ···· · 9 · • · · · · · * • · · V·· 9 · ·· · ·· ···· ·· ·
-114b) Kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]feny l]-3-(2-tiazoly I)butánová
Do roztoku etyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3(2-tiazolyl)butanoátu (106 mg, 0,25 mmol) v 1:1 THF/H2O (5 ml) sa pridal 1,0 N LiOH (0,37 ml, 0,37 mmol). Po 18 h sa zmes extrahovala Et20 (2x5 ml) a Et2O vrstvy sa odstránili. Vodná vrstva sa skoncentrovala, aby sa odstránili zvyškové organické rozpúšťadlá, potom sa okyslila na pH 6 s použitím 10%
HCI. Do zmesi sa pridal CH3CN (0,5 ml), aby sa rozpustili všetky tuhé látky.
Roztok sa čistil C18-väzbovo/elučnou chromatografiou (H2O, potom 20% CH3CN/H2O). Frakcie, ktoré obsahovali produkt, sa lyofilizovali, aby vznikla titulná zlúčenina (53 mg, 53 %) ako biely prášok: MS (ES) m/e 398 (M+H)+.
Anál. Vypoč. pre C21H23N3O3S: C, 63,46; H, 5,83; N, 10,57. Nájdené: C, 63,17;
H, 6,00; N, 10,37.
Príklad 10
Príprava kyseliny (±)-3-metyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1 -propyloxyjfenyl]butánovej
a) Etyl-(±)-3-metyl-4-[4-[3-(1-oxo-2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,3 ml, 1,5 mmol) sa pridal v priebehu 45 s do roztoku etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-metylbutanoátu (220 mg, 1,0 mmol), 2-[(3-hydroxy-1-propyl)amino]pyridín-/V-oxidu (252 mg, 1,5 mmol) a trifenylfosfínu (390 mg, 1,5 mmol) v bezvodom DMF (22,5 ml) pri 0 °C pod argónom.
Žltý roztok sa udržiaval pri 0 °C 10 minút, potom sa zahrial na teplotu miestnosti. Po 23 h sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa rekoncentroval z xylénov (2x). Silikagélová chromatografia (1% MeOH/CH2CI2) poskytla titulnú zlúčeninu (200 mg, 54 %) ako žltý olej: MS (ES) m/e 373 (M+H)+.
b) Etyl-(±)-3-metyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butanoát
Zmes etyl-(±)-3-metyl-4-[4-[3-( 1 -oxo-2-pyridinyl)amino-1 -propyloxy]fenyljbutanoátu (200 mg, 0,54 mmol), cyklohexénu (0,6 ml, 0,54 mmol), 10% • · · · • · · · · · · t · · • e · ·· · ·
-115 Pd/C (55 mg, 0,5 mmol) a izopropanolu (10 ml) sa zahriala k refluxu pod argónom. Zmes sa zahrievala k refluxu ďalších 20,5 h, potom sa zahorúca prefiltrovala cez celit®. Filtračný koláč sa premyl horúcim 1:1 MeOH/CHCh a filtrát sa skoncentroval. Zvyšok sa rekoncentroval z toluénu, potom sa chromatografoval na silikagéli (1% MeOH/CH2CI2), aby vznikla titulná zlúčenina (150 mg, 78 %) ako bezfarebný olej: MS (ES) m/e 357 (M+H)+.
c) Kyselina (±)-3-metyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1 -propyloxy]fenyl]butánová
Zmes etyl-(±)-3-metyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butanoátu (150 mg, 0,42 mmol), 1,0 N LiOH (1,2 ml, 1,2 mmol), THF (4 ml) a H2O (2,8 ml) sa miešala 4 h pri teplote miestnosti, potom sa zahriala v olejovej kúpeľovej súprave na 45 až 50 °C. Po 17,5 h sa výsledný homogénny, takmer bezfarebný roztok ochladil na teplotu miestnosti a extrahoval Et2O (2x8 ml). Vrstvy Et2O sa odstránili. Vodná vrstva sa miešala s miernym zahrievaním vo vákuu, aby sa odstránili zvyškové organické rozpúšťadlá, potom sa prefiltrovala. Vzniknutý vodný roztok sa miešal pri teplote miestnosti, zatiaľ čo sa pH pomaly a opatrne nastavilo na 5,5 až 6,0 pomocou 1,0 N HCI. Zmes sa miešala 0,5 h, potom sa tuhá látka pozberala filtráciou presávaním a premyla množstvom H2O. Sušenie vo vysokom vákuu pri 60 °C poskytlo titulnú zlúčeninu (90 mg, 65 %) ako sklovitú tuhú látku: MS (ES) m/e 328 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre Ci9H24N2O3-0,25 H2O: C, 68,54; H, 7,13; N, 8,35. Nájdené: C, 68,55; H, 7,42; N, 8,41.
Príklad 11
Príprava kyseliny (±)-3-metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyl]butánovej
a) Etyl-(±)-3-metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát Diizopropylazodikarboxylát (0,44 ml, 2,25 mmol) sa pridal v priebehu 2 minút do roztoku etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-metylbutanoátu (378 mg, 2,25 mmol), 6-metylamino-2-pyridyletanolu (343 mg, 2,25 mmol) a trifenylfosfínu ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ··· • · e · e e · • · · v·· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-116 (590 mg, 2,25 mmol) v bezvodom THF (22,5 ml) pri 0 °C pod N2. Žltý roztok sa udržiaval pri 0 °C 10 minút, potom sa zahrial na teplotu miestnosti. Po 24 h sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (6:4 EtOAc/hexány). Titulná zlúčenina (200 mg, 76 %) sa získala ako bezfarebný olej: MS (ES) m/e 357 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-3-metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyl]butánová
1,0 N NaOH (1 ml, 0,898 mmol) sa po kvapkách pridal do ochladeného (15 °C) roztoku etyl-(±)-3-metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljbutanoátu (160 mg, 0,449 mmol) v THF (3 ml) a zmes sa miešala 24 h pri teplote miestnosti. Vzniknutý roztok sa skoncentroval vo vákuu a zvyšok sa rozpustil v H2O (5 ml). pH sa upravilo na 7 pomocou 1,0 N HCI a supernatant sa zlial z gumovitého precipitátu. Starostlivé sušenie vo vákuu pri 60 °C niekoľko dní poskytlo titulnú zlúčeninu (120 mg, 82 %) ako bielu, penovitú tuhú látku: MS (ES) m/e 328 (M+Hf. Anál. Vypoč. pre C19H24N2O3: C, 69,49; H,
7,37; N, 8,53. Nájdené: C, 69,03; H, 7,27; N, 8,40.
Príklad 12
Príprava kyseliny (±)-3-metyl-4-[4-[2-(2-metylamino-5-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyl]butánovej
a) Etyl-(±)-3-metyl-4-[4-[2-(2-metylamino-5-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,18 ml, 0,913 mmol) sa pridal v priebehu 2 minút do roztoku etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-metylbutanoátu (133 mg, 0,6 mmol), 2-[/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-/V-metylamino]-5-pyridyletanolu (230 mg,
0,913 mmol) a trifenylfosfínu (239 mg, 0,913 mmol) v bezvodom THF (5 ml) pri 0 °C pod N2. Žltý roztok sa udržiaval pri 0 °C 10 minút, potom sa zahrial na teplotu miestnosti. Po 24 h sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (1% MeOH/C^Cb). Titulná zlúčenina (200 mg,
%) sa získala ako bezfarebný olej: MS (ES) m/e 456 (M+Hf.
······ ·· ·· ·· • · · · · » ··· ··« · · · · · «· · ·· ···· ·· ·
-117b) kyselina (±)-3-metyl-4-[4-[2-(2-metylamino-5-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyl]butánová
Etyl-(±)-3-metyl-4-[4-[2-(2-metylamino-5-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát (200 mg, 0,44 mmol) sa suspendoval v 1,0 M HCI/dioxán (5 ml). Po 2 h sa reakčná zmes skoncentrovala vo vákuu a zvyšok sa rekoncentroval z toluénu (3x10 ml). Zvyšok, ktorý zostal, sa vložil do 5% roztoku Na2CO3 a extrahoval sa CH2CI2. Extrakty sa sušili nad MgSO4, prefiltrovali a skoncentrovali, za vzniku oleja (50 mg). Tento sa vložil do THF (3 ml), pridal sa 1,0 N LiOH (0,28 ml, 0,28 mmol) a zmes sa miešala 24 h. Vzniknutý roztok sa skoncentroval vo vákuu a zvyšok sa rozpustil v H2O (5 ml). pH sa upravilo na 7 pomocou 1,0 N HCl a supernatant sa zlial z gumovitého precipitátu. Starostlivé sušenie vo vákuu pri 60 °C po dobu niekoľko dní poskytlo titulnú zlúčeninu (5 mg) ako bielu, penovitú tuhú látku: MS (ES) m/e 328 (M+H)+.
Príklad 13
Príprava kyseliny (+)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-tiofenyl)butánovej
a) Metyl-(±)-4-[4-[2-[6-[/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-A/-metylamino]-2-pyridinyl]-1etoxy]fenyl]-3-(2-tiofenyl)butanoát
Roztok metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiofenyl)butanoátu (245,1 mg,
0,89 mmol) a PPh3 (237,6 mg, 0,91 mmol) v CH2CI2 sa pomaly pridal k roztoku 6-[/V-(ferc-butoxykarbonyl)-/V-metylamino]-2-pyridyletanolu (244,1 mg, 0,97 mmol) a DEAD (0,14 ml, 0,89 mmol) v CH2CI2 pri 0 °C. Reakčná zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti, ako sa zahrieval kúpeľ. Po 24 h sa reakčná zmes skoncentrovala vo vákuu a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (gradient: 10% EtOAc/hexány, potom 20% EtOAc/hexány, potom 50% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (122,1 mg, 26,9 %): MS (ES) m/e 510,9 (M+H)+.
-118·· φφ • · · φ • · · φ φ · ·· »·φφ φ · φ • φ φφφ
b) Kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-py rid i nyl )-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-tiofenyl)butánová
Metyl-(±)-4-[4-[2-[6-[/V-(íerc-butoxykarbonyl)-/V-metylamino]-2-pyridinyl]1-etoxy]fenyl]-3-(2-tiofenyl)butanoát (122,1 mg, 0,24 mmol) sa miešal so 4 N HCI/dioxánom 2,5 h pri teplote miestnosti, potom sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa rekoncentroval z toluénu (2x). Keďže sa Boe skupina úplne neodstránila, zvyšok sa vrátil do reakčných podmienok. Po ďalších 1,5 h sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa rekoncentroval z toluénu. Tento materiál sa rozpustil v dioxáne (3 ml) a THF (3 ml) a pridal sa 1,0 N NaOH (2 ml, 2 mmol). Reakčná zmes sa miešala 24 h pri teplote miestnosti, potom sa skoncentrovala. Keďže bol stále prítomný ester, zvyšok sa vrátil do reakčných podmienok. Po ďalších 20 h pri teplote miestnosti sa reakčná zmes neutralizovala 1,0 N HCI a skoncentrovala. Keďže bol ester stále prítomný, zvyšok sa vrátil do reakčných podmienok, tentoraz so zahriatím na 60 °C. Po 18 h sa reakčná zmes neutralizovala 1,0 N HCI a skoncentrovala vo vákuu. Tuhý zvyšok sa rekoncentroval z toluénu (2x), potom sa vložil do 0,1% TFA/H2O. Biely precipitát, ktorý sa oddelil, sa zozbieral a premyl viac než 0,1% TFA/H2O. Sušenie vo vákuu poskytlo titulnú zlúčeninu (92,5 mg, 83 %) ako biely prášok: MS (ES) m/e 397,1 (M+Hf. Anál. Vypoč. pre C22H24N2O3S 0,5 TFA-0,5 H2O: C, 59,73; H, 5,56; N, 6,06. Nájdené: C, 59,62; H, 5,40; N, 6,14.
Príklad 14
Príprava kyseliny 2-[A/-benzyl-/V-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]-benzyljaminojoctovej
a) Etyl-2-[/V-benzyl-/V-[4-[2-[6-[/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-/V-metylamino]-2-pyridinyl]-1-etoxy]benzyl]amino]acetát
Roztok 6-[W-(ferc-butoxykarbonyl)-A/-metylamino]-2-pyridyletanolu (0,17 g, 0,69 mmol) a dietyldiazokarboxylátu (0,11 ml, 0,70 mmol) v CH2CI2 (1,5 ml) sa po kvapkách pridal do roztoku etyl-2-[/V-benzyl-/V-(4-hydroxybenzyl) amino]acetátu (0,14 g, 0,46 mmol) a Ph3P (0,18 g, 0,69 mmol) v CH2CI2 (1,5 ml) pri 0 ·· *··· * · · ···· · · · ··· · · · · · • · · · t 9 · · « » B »···· ·· ·
-119°C. Ľadový kúpeľ sa odstránil a reakčná zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti. Po 24 h sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku. Radiálna chromatografia (20% EtOAc/hexány, silikagél, 6 mm platňa) poskytla titulnú zlúčeninu (0,14 g) ako číry olej: MS (ES) m/e 534,1 (M+H)+.
b) Kyselina 2-[/V-benzyl-/V-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjbenzyl]aminojoctová
Etyl-2-[/V-benzyl-/V-[4-[2-[6(-/V-(ferc-butoxykarbonyl)-/V-metylamino)]-2pyridinyl]-1-etoxy]benzyl]amino]acetát (0,14 g, 0,27 mmol) sa rozpustil v 4 N HCI/dioxáne (5 ml). Reakčná zmes sa miešala 5,5 h pri teplote miestnosti, potom sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku. Zvyšok sa suspendoval v 1,0 N NaOH (2 ml) a MeOH (2 ml). Reakčná zmes sa miešala pri teplote miestnosti 18 h, potom sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku. Zvyšok sa rozpustil v H2O a roztok sa okyslil na pH 5 pomocou 1,0 N HCl. Rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku. Čistenie preparatívnou HPLC (Hamiiton PRP-1 stĺpec, 20% CH3CN/H2O, obsahujúci 0,1% TFA) poskytlo titulnú zlúčeninu (0,40 g) ako biely prášok: MS (ES) m/e 406,0 (M+H)+. Anál.
Vypoč. pre C24H27N3O3-2,5 TFA-1,5 H2O: C, 48,54; H, 4,56; N, 5,86. Nájdené:
C, 48,69; H, 4,24; N, 5,78.
Príklad 15
Príprava kyseliny 2-[[/\/-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]benzyl]-/Vfenyl]amino]octovej
a) Metyl-2-[[/V-[4-[2-[6-(N’-(terc-butoxykarbonyl)-A/’-metylamino)-2-pyridinyl]-1etoxy]benzyl]-/V-fenyl]amino]acetát
Podľa postupu v príklade 14(a), s výnimkou substituovania 2-[Λ/-(4hydroxybenzyl)-A/-fenylamino]acetátu (39 mg, 0,14 mmol) etyl-2-[A/-benzyl-/V(4-hydroxybenzyl)amino]acetátom, sa titulná zlúčenina (8 mg) získala ako číry film po radiálnej chromatografii (20% EtOAc/hexány, silikagél, 2 mm platňa):
MS (ES) m/e 506,0 (M+H)+.
· · · · · ·· ·· ·· • · e · · · · ··· • · · ··· ···· • · 4 1 · 9 9 9
9 99 9999 99 9
-120b) Kyselina 2-[[/V-[4-[2-(6-mety lami ηο-2-py ridi ny I )-1 -etoxy]benzyl]-/V-fenyl]aminojoctová
Roztok 4 N HCl v dioxáne (5 ml) sa pridal do metyl-2-[[W-[4-[2-(6metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]benzyl]-A/-fenyl]amino]acetátu (8 mg, 0,016 mmol). Reakčná zmes sa miešala 5,5 h pri teplote miestnosti, potom sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku, aby sa získal číry film. Tento sa rozpustil v 1,0 N NaOH (2 ml) a MeOH (2 ml). Reakčná zmes sa miešala pri teplote miestnosti 18 h, potom sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku.
Rýchla chromatografia na C-18 Bond Elut® stĺpci (krokový gradient: H2O, obsahujúca 0,1 % TFA, potom 20% CH3CN/H2O, obsahujúci 0,1 % TFA, potom 50% CH3CN/H2O, obsahujúci 0,1 % TFA) poskytla titulnú zlúčeninu (1,5 mg) ako hygroskopickú, tmavú tuhú látku: MS (ES) m/e 392,0 (M+Hf.
Príklad 16
Príprava kyseliny 2-[/V-[2-metoxy-4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]-benzyl]amino]octovej
a) Kyselina metyl-2-[/V-[2-metoxy-4-[2-[6-(/\/’-(terc-butoxykarbonyl)-A/’-metylamino)-2-pyridinyl]-1-etoxy]benzyl]amino]octová
Podľa spôsobu prípravy z príkladu 14(a), s výnimkou substituovania metyl-2-[(4-hydroxy-2-metoxybenzyl)amino]acetátu (0,48 g, 2,14 mmol) etyl-2[/V-benzyl-/V-(4-hydroxybenzyl)amino]acetátom, sa titulná zlúčenina (0,14 g) získala ako číry olej po rýchlej chromatografii na silikagéli (40% EtOAc/hexány), po ktorej nasledovala radiálna chromatografia (5% MeOH/CHCI3, silikagél, 6 mm platňa): MS (ES) m/e 506,0 (M+Hf.
b) Metyl-2-[A/-[2-metoxy-4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]benzyl]amino]acetát
Roztok 4 N HCl v dioxáne (15 ml) sa pridal do kyseliny metyl-2-[/V-[2metoxy-4-[2-(6-(N’-(ŕerc-butoxykarbonyl)-A/’-metylamino)-2-pyridinyl)-1-etoxy]benzyljaminojoctovej (0,14 g, 0,30 mmol). Reakčná zmes sa miešala 2 h pri teplote miestnosti, potom sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku, aby ·· ···· ·· • · · · · · I ··· • e · · · I·· ··· · · · · · ·· · ·· ···· ·· ·
-121 zostal číry zvyšok. Tento sa rozpustil v nasýtenom NaHCO3 a roztok sa extrahoval 10% MeOH/EtOAc. Spojené organické extrakty sa premyli soľankou, sušili nad Na2SO4 a skoncentrovali, aby sa získal bledožltý olej.
Rýchla chromatografia na silikagéli (5% MeOH/CHCI3) poskytla titulnú zlúčeninu (0,11 g) ako číry olej: MS (ES) m/e 350,4 (M+H)+.
c) Kyselina 2-[/V-[2-metoxy-4-[2-(6-nnetylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]benzyl]aminojoctová
Do roztoku metyl-2-[/V-[2-metoxy-4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 etoxyjbenzyljaminojacetátu (0,11 g, 0,30 mmol) v MeOH (3ml) sa pridal 1,0 N NaOH (3 ml). Reakčná zmes sa miešala 15 minút pri teplote miestnosti, potom sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku. Zvyšok sa rozpustil v H2O a roztok sa okyslil na pH 3 pomocou kone. HCI. Rozpúšťadlo sa odstránilo, aby sa získal biely zvyšok. Rýchla chromatografia na Waters Sep-PaK® C-18 stĺpci (krokový gradient: H2O, potom 15% CH3CN/H2O) poskytla titulnú zlúčeninu (0,11 g) ako veľmi hygroskopickú bielu tuhú látku: MS (ES) m/e 346,4 (M+H)+. 1H NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 7,70 (m, 1 H), 7,40 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 6,80 - 6,55 (m, 4 H), 4,35 (m, 2 H), 4,05 (s, 2 H), 3,80 (s, 3 H), 3,67 (s, 2 H), 3,15 (m, 2 H), 2,95 (s, 3 H).
Príklad 17
Príprava kyseliny 2-fenoxy-4-[5-(2-pyridinyl)amino-1 -pentyloxyjfenyloctovej
a) Metyl-2-fenoxy-4-[5-(1 -oxo-2-pyridinyl)amino-1 -pentyloxyjfenylacetát
Podľa spôsobu prípravy z príkladu 14(a), s výnimkou substituovania 2(4-hydroxy-2-fenoxyfenyl)acetátu (0,19 g, 0,74 mmol) etyl-2-[/V-benzyl-/V-(4hydroxybenzyl)amino]acetátom, sa titulná zlúčenina (0,35 mg) získala ako bledožltý olej po radiálnej chromatografii (50% EtOAc/hexány, silikagél, 6 mm platňa): MS (ES) m/e 506,0 (M+H)+.
b) Metyl-2-fenoxy-4-[5-(2-pyridinyl)amino-1-pentyloxy]fenylacetát ··.···« ·· • · · ··· · 2 ·· · ·· ···· ·· ·
-122 Do roztoku metyl-2-fenoxy-4-[5-(1 -oxo-2-pyridinyl)amino-1 -pentyloxy]fenylacetátu (0,35 g, 0,81 mmol) a cyklohexénu (0,81 ml, 8,00 mmol) v EtOH (4 ml) sa pridalo 10% Pd/C (10 mg). Po 18 h refluxu sa reakčná zmes nechala ochladiť na teplotu miestnosti a katalyzátor sa odstránil filtráciou. Rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku, aby sa získal číry olej. Radiálna chromatografia (5 až 10% MeOH/CHCb, silikagél, 6 mm platňa) poskytla titulnú zlúčeninu (0,23 g) ako číry olej: MS (ES) m/e 421,1 (M+H)+.
c) Kyselina 2-fenoxy-4-[5-(2-pyridinyl)amino-1 -pentyloxyjfenyloctová
Do roztoku metyl-2-fenoxy-4-[5-(2-pyridinyl)amino-1 -pentyloxyj-fenylacetátu (0,23 g, 0,55 mmol) v MeOH (2,5 ml) sa pridal 1,0 N NaOH (2,5 ml).
Reakčná zmes sa miešala 18 h pri teplote miestnosti, potom sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku. Zvyšok sa rozpustil v H2O a roztok sa okyslil na pH 4 pomocou kone. HCl. Vodná vrstva sa extrahovala EtOAc a spojené organické extrakty sa sušili nad Na2SO4. Rozpúšťadlo sa odstránilo, aby sa získal bledožltý olej. Rýchla chromatografia na silikagéli (10% MeOH/CHCh) poskytla titulnú zlúčeninu (81 mg): MS (ES) m/e 407,0 (M+H)+. 1H NMR (300 MHz, CDCb) δ 7,78 (d, J = 4,1 Hz, 1 H), 7,50 (dt, J = 8,7, 1,6 Hz, 1 H), 7,20 (m, 3 H), 6,95 (m, 3 H), 6,50 (m, 4 H), 3,77 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 3,59 (s, 2 H),
3,13 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 1,80 -1,50 (m, 6 H).
Príklad 18
Príprava kyseliny [4-[4-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]-2-fenoxyfenyl]butánovej
a) Metyl-4-[4-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]-2-fenoxyfenylbutanoát
Roztok 2-(6-metylamino-2-pyridinyl)etanolu (0,07 g, 0,43 mmol) a dietylazodikarboxylátu (0,07 ml, 0,44 mmol) v CH2CI2 (3 ml) sa pridal spôsobom po kvapkách do roztoku Ph3P (0,11 g, 0,43 mmol) a kyseliny 2fenoxy-4-[5-(2-pyridinyl)amino-1-pentyloxy]fenyloctovej (0,08 g, 0,29 mmol) v CH2CI2 (3 ml) pri 0 °C. Chladiaci kúpeľ sa odstránil a reakčná zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti. Po 18 h sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom ·· ···· • ·
-123tlaku a zvyšok sa čistil radiálnou chromatografiou (30 až 50% EtOAc/hexány, silikagél, 6 mm platňa), aby vznikla titulná zlúčenina (0,14 g) ako olej: MS (ES) m/e 420,9 (M+H)+.
·· • · • · • · ··
b) Kyselina 4-[4-[6-(metylamino)-2-pyridinyl]-1 -etoxy]-2-fenoxyfenylbutánová Roztok metyl-4-[4-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]-2-fenoxyfenylbutanoátu (0,1 g, 0,34 mmol) a 1,0 N NaOH (2 ml) v MeOH (2 ml) a THF (dostatočného množstva, aby vznikol homogénny roztok) sa miešal pri teplote miestnosti. Po 18 h sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku. Zvyšok sa suspendoval v H2O a zmes sa okyslila na pH 3 pomocou kone. HCI. Vodná fáza sa extrahovala EtOAc a spojené extrakty sa sušili nad Na2SO4. Rozpúšťadlo sa odstránilo pri zníženom tlaku, aby sa získala biela pena. Rýchla chromatografia na silikagéli (EtOAc až 10% MeOH/CHCb) poskytla titulnú zlúčeninu (0,07 g) ako bielu penu: MS (ES) m/e 406,9 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C24H26N2O4 0,75 H2O: C, 68,64; H, 6,60; N, 6,67. Nájdené: C, 68,33; H, 6,09; N, 6,54.
Príklad 19
Príprava kyseliny (R)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1 -propyloxyjfenyl]butánovej
a) Etyl-(+)-3-fenyl-4-[4-[3-(1 -oxo-2-pyridinyl)amino-1 -propyloxy]fenyl]butanoát Diizopropylazodikarboxylát (0,40 ml, 2 mmol) sa pridal v priebehu 45 s do roztoku etyl-(R)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátu (0,39 g, 1,4 mmol), 2-[(3-hydroxy-1-propyl)amino]pyridín-/V-oxidu (0,35 g, 2 mmol) a trifenylfosfínu (0,54 g, 2 mmol) v bezvodom DMF (20 ml) pri 0 °C pod argónom. Žltý roztok sa udržiaval pri 0 °C 10 minút, potom sa zahrial na teplotu miestnosti. Po 23 h sa reakčná zmes skoncentrovala. Silikagélová chromatografia (gradient: 1% až 4% MeOH/CHCb) poskytla titulnú zlúčeninu (0,30 g, 51 %) ako žltý olej: MS (ES) m/e 434,9 (M+H)+.
·· ···· ·· · · · · · ··· • · · ·· ··· • · · ··· · · ·· · ·· ···· ·· ·
-124b) Etyl-(f?)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butanoát
Zmes ety l-( A?)-3-feny l-4-[4-[3-( 1 -oxo-2-pyridinyl)amino-1 -propyloxy]fenyljbutanoátu (0,30 g, 0,69 mmol), cyklohexénu (1 ml, 10 mmol), 10 % Pd/C (93 mg, 0,09 mmol) a izopropanolu (5 ml) sa zahriala k refluxu pod argónom.
Po 3 h sa pridalo viac Pd/C (110 mg). Zmes sa zahrievala k refluxu ďalších 20,5 h, potom sa zahorúca prefiltrovala cez celit®. Filtračný koláč sa premyl horúcim EtOAc a spojené filtráty sa skoncentrovali, aby vznikla titulná zlúčenina (0,25 mg, 87 %) ako bledožltý olej: MS (ES) m/e 419,1 (M+H)+.
c) Kyselina (R)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyI)amino-1 -propyloxy]fenyl]butánová
Zmes etyl-(R)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]-butanoátu (0,25 g, 0,6 mmol) a monohydrátu hydroxidu lítneho (32 mg, 0,76 mmol) v THF (5 ml) a H2O (3 ml) sa miešala 18 h pri teplote miestnosti, potom sa skoncentrovala a zvyšok sa rozpustil v H2O. Vzniknutý vodný roztok sa miešal pri teplote miestnosti, zatiaľ čo sa pH pomaly a opatrne nastavilo na 5,5 až 6,0 pomocou 1,0 N HCI. Zmes sa miešala 0,5 h, potom sa tuhá látka pozberala filtráciou presávaním a premyla množstvom H2O. Sušenie vo vysokom vákuu pri 60 °C poskytlo titulnú zlúčeninu (100 mg, 43 %) ako sklovitú tuhú látku: MS (ES) m/e 390,7 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C24H26N2O3-0,25 H2O: C, 73,82; H,
6,71; N, 7,17. Nájdené: C, 72,98; H, 6,76; N, 7,09.
Príklad 20
Príprava kyseliny (S)-3-fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyl]butánovej
a) Etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,16 ml, 0,80 mmol) sa pridal v priebehu 2 minút do roztoku etyl-(S)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátu (0,19 g, 0,66 mmol), 6-metylamino-2-pyridyletanolu (0,12 g, 0,80 mmol) a trifenylfosfínu (0,20 g, 0,80 mmol) v bezvodom CH2CI2 (5 ml) pri 0 °C pod N2. Žltý roztok sa udržiaval pri 0 °C 10 minút, potom sa zahrial na teplotu miestnosti. Po 24 h sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli
-125-
·· • • ···· • · • · • • ·· • • ·· • · • ·· • · e · ··
• • · • • • • ·
• · • ·· ·· ·· ·· • ·
(gradient: 10% až 30% EtOAc/hexány). Titulná zlúčenina (0,26 g, 93 %) sa získala ako bezfarebný olej: MS (ES) m/e 419,0 (M+H)+.
b) Kyselina (S)-3-fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyl]butánová
Monohydrát hydroxidu lítneho (29 mg, 0,69 mmol) v H2O (2 ml) sa pridal do roztoku etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljbutanoátu (0,25 g, 0,62 mmol) v THF (5 ml). Vzniknutá zmes sa miešala 18 h pri teplote miestnosti, potom sa skoncentrovala. Zvyšok sa rozpustil v H2O a pH sa nastavilo na 5,5 až 6,0 pomocou 1,0 N HCI. Vodný roztok sa zlial z gumovitého precipitátu, ktorý sa sušil vo vákuu pri 60 °C niekoľko dní, aby vznikla titulná zlúčenina (0,10 g, 41 %) ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 391,0 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C24H26N2O3: C, 73,82; H, 6,71; N, 7,17. Nájdené: C, 73,62; H, 6,80; N, 6,98.
Príklad 21
Príprava kyseliny (S)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1 -propyloxyjfenyljbutánovej
a) Etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(1 -oxo-2-pyridinyl)Boc-amino-1 -propyloxyjfenyljbutanoát
Hydrid sodný (80 % v minerálnom oleji, 66 mg, 2,2 mmol) sa pridal do roztoku etyl-(S)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátu (0,60 g, 2 mmol) v bezvodom DMSO (6 ml) pri 23 °C pod argónom. Po tom, čo sa zmes stala homogénnou, sa pridal 2-[/V-(3-metánsulfonyloxy-1-propyl)-/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)amino]pyridín-A/-oxid (0,35 g, 2 mmol). Vzniknutý roztok sa miešal pri teplote miestnosti 5 dní, potom sa rozdelil medzi EtOAc a H2O. Organická fáza sa premyla dvakrát H2O a raz soľankou, sušila (MgSO4) a skoncentrovala sa. Silikagélova chromatografia (gradient: 0,5% až 4% MeOH/CH2CI2) poskytla titulnú zlúčeninu (0,30 g, 55 %, vztiahnuté na späť získaný východiskový materiál) ako žltý olej: MS (ES) m/e 535,0 (M+H)+. Nepremenený etyl-(S)-4-(4hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoát (0,30 g) sa získal späť.
·· ···· ·· ·· ·· • · · · · · · · · · • · · · e ···
-126• · · ··· ··· ·· · ·· ···· ·· ···
b) Etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(1 -oxo-2-pyridinyl)amino-1 -propyloxy]fenyl]butanoát
Roztok etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(1-oxo-2-pyridinyl)Boc-amino-1-propyloxy]fenyl]butanoátu (0,30 g, 0,56 mmol), CH2CI2 (5 ml) a TFA (5 ml) sa miešal 1 h pri 0 °C, potom sa nechal zahriať na teplotu miestnosti. Po ďalších 2 h sa roztok skoncentroval, aby vznikla titulná zlúčenina (0,15 g) ako bledožltý olej: MS (ES) m/e 435,2 (M+H)+.
c) Etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butanoát
Zmes etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(1 -oxo-2-pyridinyl)amino-1 -propyloxyjfenyljbutanoátu (0,15 g, 0,35 mmol), cyklohexénu (0,5 ml, 5 mmol), 10% Pd/C (80 mg, 0,075 mmol) a izopropanolu (5 ml) sa zahriala k refluxu pod argónom. Po 20,5 h sa zahorúca prefiltrovala cez celit®. Filtračný koláč sa premyl horúcim EtOAc a spojené filtráty sa skoncentrovali, aby vznikla titulná zlúčenina (0,1 mg, 43 %) ako bledožltý olej: MS (ES) m/e 419,2 (M+H)+.
d) Kyselina (S)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1 -propyloxyjfenyljbutánová
Zmes etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyljbutanoátu (0,1 g, 0,24 mmol) a monohydrátu hydroxidu lítneho (12 mg, 0,29 mmol) v THF (5 ml) a H2O (2 ml) sa miešala 18 h pri teplote miestnosti, potom sa skoncentrovala. Zvyšok sa rozpustil v H2O a vzniknutý vodný roztok sa miešal pri teplote miestnosti, zatiaľ čo sa pH pomaly a opatrne nastavilo na 5,5 až 6,0 pomocou 1,0 N HCI. Zmes sa miešala 0,5 hodín, potom sa roztok zlial z tuhej látky. Sušenie vo vysokom vákuu pri 60 °C poskytlo titulnú zlúčeninu (40 mg, 43 %) ako sklovitú tuhú látku: MS (ES) m/e 390,7 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C24H26N2O3-1,7 HCI: C, 63,72; H, 6,17; N, 6,19. Nájdené: C, 63,56; H, 6,22; N, 6,10.
Príklad 22
Príprava kyseliny (±)-3-(4-brómfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 etoxyjfenyljbutánovej ·· ···· ·· · ···· ··· ··· ·· · · · ··· ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-127a) Etyl-(±)-3-(4-brómfenyl)-4-[4-[2-[6-(/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-A/-metylamino)2-pyridinyl]-1-etoxy]fenyl]butanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,24 ml, 1,24 mmol) sa pomaly pridal do roztoku etyl-(±)-3-(4-brómfenyl)-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu (0,30 g, 0,82 mmol), 6-[/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-A/-metylamino]-2-pyridyletanolu (0,31 g,
1,24 mmol) a trifenylfosfínu (0,32 g, 1,24 mmol) v bezvodom CH2CI2 (10 ml) pri 0 °C pod argónom. Žltý roztok sa udržiaval pri 0 °C 10 minút, potom sa zahrial na teplotu miestnosti. Po 39 h sa reakčná zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (20% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (0,32 g, 65 %) ako číry olej: TLC Rf (20% EtOAc/hexány), 0,44; MS (ES) m/e 349,1 (M+Na)+, 674,9 (2M+Na)+.
b) Etyl-(±)-3-(4-brómfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát
Roztok etyl-(±)-3-(4-brómfenyl)-4-[4-[2-[6-(/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-A/metylamino)-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátu (0,32 g, 0,53 mmol) v 4 N HCI v dioxáne (15 ml) sa miešal 1,5 h pri teplote miestnosti. Skoncentrovanie a rekoncentrovanie z CH2CI2 a hexánov poskytlo titulnú zlúčeninu ako biely sirup, ktorý sa preniesol ďalej bez ďalšieho čistenia.
c) Kyselina (±)-3-(4-brómfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyljbutánová
1,0 N NaOH (1,44 ml, 1,44 mmol) sa po kvapkách pridal do roztoku etyl(±)-3-(4-brómfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátu (0,26 g, 0,48 mmol) v dioxáne (10 ml) a H2O (5,0 ml). Vzniknutá zmes sa miešala 3 h pri 50 °C, potom sa skoncentrovala. Zvyšok sa zriedil H2O (5 ml) a roztok sa neutralizoval 1,0 N HCI. Precipitovaná tuhá látka sa pozberala a vysušila, aby vznikla titulná zlúčenina (0,20 g, 81 %) ako biela, kryštalická tuhá látka: HPLC (Hamilton PRP-1®, gradient v priebehu 20 minút: 10% až 80% CH3CN/H2O, obsahujúci 0,1% TFA) K’ = 13,28; Anál. Vypoč. pre »· ···· • · · · · · · · ·· • · · ·· ··· ··· · · · ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-128 Ο24Η25Ν2Ο3Βγ·1,5 HCI-0,25 Η20: C, 54,54; Η, 5,15; N, 5,30. Nájdené: C, 54,49;
H, 4,97; N, 5,10.
Príklad 23
Príprava kyseliny (±)-3-(4-izopropylfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 etoxyjfenyljbutánovej
a) Metyl-(±)-3-(4-izopropylfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljbutanoát
Podľa postupu z príkladu 22(a), s výnimkou substituovania metyl-(±)-4(4-hydroxyfenyl)-3-(4-izopropylfenyl)butanoátu etyl-(±)-3-(4-brómfenyl)-4-(4hydroxyfenyl)butanoátom a substituovania 6-(metylamino)-2-pyridyletanolu 6[/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)-/V-metylamino]-2-pyridyletanolom, sa titulná zlúčenina získala po silikagélovej chromatografíi (30% EtOAc/hexány): MS (ES) m/e 447,0 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-3-(4-izopropylfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyljbutánová
Podľa postupu z príkladu 22(c), s výnimkou substituovania metyl-(±)-3(4-izopropylfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]-fenyl]-butanoátu etyl-(+)-3-(4-brómfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-butanoátom sa získala titulná zlúčenina: HPLC (Hamilton PRP-1®, gradient v priebehu 20 minút: 10% až80% CH3CN/H2O, obsahujúci 0,1% TFA) K-14,19;
MS (ES) m/e 435,5 (M+H)+.
Príklad 24
Príprava kyseliny (±)-3-(4-izopropylfenyl)-4-[4-[3-(4-metyl-2-pyridinyl)amino-1 propyloxyjfenyljbutánovej
a) Metyl-(±)-3-(4-izopropylfenyl)-4-[4-[3-(4-metyl-1-oxo-2-pyridinyl)amino-1-propyloxyjfenyljbutanoát ·· ···· • · · ···· ··· ··· ·· ··· • · · 9 9 9 9 9 ·· · ·· ···· ·· ·
-129 NaOH (0,14 g, 3,37 mmol) sa pridal do roztoku 2-[(3-bróm-1propyl)amino]pyridín-/V-oxidu (0,37 g, 1,13 mmol) a metyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(4-izopropylfenyl)butanoátu (0,32 g, 1,02 mmol) v bezvodom CH3CN (15 ml). Po miešaní pri teplote miestnosti pod argónom 20 h sa reakčná zmes prefiltrovala a skoncentrovala na rotačnej odparke. Silikagélová chromatografia (5% MeOH/CH2Cl2) poskytla titulnú zlúčeninu (0,31 g, 64 %) ako číry olej: MS (ES) m/e 477,1 (M+H)+.
b) Metyl-(±)-3-(4-izopropylfenyl)-4-[4-[3-(4-metyl-2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]-fenyl]butanoát
Zmes metyl-(±)-3-(4-izopropylfenyl)-4-[4-[3-(4-metyl-1-oxo-2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butanoátu (0,31 g, 0,65 mmol), 10% Pd/C (0,31 g,
0,29 mmol), cyklohexénu (0,66 ml, 6,51 mmol) a izopropanolu (15 ml) sa zahrievala k refluxu 16 h, potom sa katalyzátor odstránil prefiltrovaním cez celit®. Skoncentrovanie a silikagélová chromatografia (5% MeOH/CH2CI2) poskytli titulnú zlúčeninu (0,25 g, 83 %) ako svetložltý olej: MS (ES) m/e 460,9 (M+H)+.
c) Kyselina (±)-3-(4-izopropylfenyl)-4-[4-[3-(4-metyl-2-pyridinyl)amino-1 -propyloxyjfenyljbutánová
Podľa postupu z príkladu 22(c), s výnimkou substituovania metyl-(±)-3(4-izopropylfenyl)-4-[4-[3-(4-metyl-2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butanoátu etyl-(±)-3-(4-brómfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátom, sa získala titulná zlúčenina: HPLC (Hamilton PRP-1®, gradient v priebehu 20 minút: 10% až 80% CH3CN/H2O, obsahujúci 0,1% TFA) K-14,57;
MS (ES) m/e 447,5 (M+H)+.
Príklad 25
Príprava kyseliny 4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-buténovej ·· ···· • · · ···· ··· ··· · · ··· ··· · · · ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-130a) Metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]krotonát
Podľa postupu z príkladu 5(a), s výnimkou substituovania metyl-4-(4hydroxyfenyl)krotonátu (0,46 g, 2,39 mmol) metyl-4-(4-hydroxyfenyl)-butanoátom, sa pripravila titulná zlúčenina (0,6 g, 76 %): MS (ES) m/e 327 (M+H)+.
b) Kyselina 4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-buténová
1,0 N NaOH (1,8 ml, 1,8 mmol) sa pridal do roztoku 4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]krotonátu (0,3 g, 0,92 mmol) v MeOH (5 ml).
Reakčná zmes sa miešala cez noc pri teplote miestnosti, potom sa skoncentrovala vo vákuu. Rýchla chromatografia na silikagéli (gradient:
CH2CI2, potom 1% MeOH/CH2CI2, potom 1% MeOH/CH2CI2, obsahujúci 0,5 %
HCO2H) viedla k získaniu titulnej zlúčeniny (0,09 mg, 31 %) ako slabožltej tuhej látky: MS (ES) m/e 313 (M+H)+; 1H NMR (360 MHz, DMSO-d6) δ 7,85 (app t, 1 H), 7,33 (d, J = 8,7 Hz, 2 H), 6,84 - 6,96 (m, 4 H), 6,81 (d, J = 7,2 Hz,
H), 6,40 (d, J = 16,0 Hz, 1 H), 6,08 - 6,18 (m, 1 H), 4,22 - 4,35 (m, 2 H), 3,09 - 3,29 (m, 4 H), 2,96 (s, 3 H). Anál. Vypoč. pre Ci8H2oN203-1,0 HCO2H: C,
63,68; H, 6,19; N, 7,82. Nájdené: C, 63,84; H, 6,42; N, 7,98.
Príklad 27
Príprava kyseliny (S)-3-fenyl-4-[4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)-1 etoxyjfenyljbutánovej
a) Etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)-1-etoxy]fenyl]butanoát
Diizopropylazodikarboxylát (0,25 ml, 1,25 mmol) sa pridal do roztoku etyl-(S)-3-fenyl-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu (178 mg, 0,63 mmol), 2-(5,6,7,8tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)etanolu (223 mg, 1,25 mmol) a trifenylfosfínu (328 mg, 1,25 mmol) v bezvodom THF (5 ml) pri 0 °C. Zmes sa nechala zahriať, ako sa zahrieval kúpeľ na teplotu miestnosti. Po 18 h sa zmes skoncentrovala a zvyšok sa chromatografoval na silikagéli (4,5:1 ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· · · ·
-131 • · · ·· · φ · · ·· ···· φ φ ·· ·
Et20/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (197 mg, 71 %) ako číry olej. MS (ES) m/e 445 (M+H)+.
b) Kyselina (S)-3-fenyl-4-[4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)-1-etoxy]fenyljbutánová
Do roztoku etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2yl)-1-etoxy]fenyl]butanoátu (197 mg, 0,44 mmol) v 1:1 THF/H2O (2 ml) sa pridal 1N LiOH (0,66 ml, 0,66 mmol). Po 18 h sa zmes zahriala na 50 °C. Po 18 h sa zmes ochladila na teplotu miestnosti a premyla Et2O (2x5 ml). Vodná vrstva sa skoncentrovala, aby sa odstránil zvyškový THF/Et2O, potom sa okyslila na pH 6 s použitím 10% HCI. Tuhá látka sa pozberala filtráciou a vysušila sa vo vákuu pri 50 °C, aby vznikla titulná zlúčenina ako biely prášok (136 mg, 74 %). MS (ES) m/e 417 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C26H28N2O30,5 H2O: C, 73,39; H, 6,87; N, 6,58. Nájdené: C, 73,14; H, 6,64; N, 6,26.
Príklad 28
Príprava kyseliny (±)-3-(1-dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánovej
a) Etyl-(±)-3-(1-dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát
Podľa postupu z príkladu 9(a), s výnimkou substituovania etyl-(+)-3-(1dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu (436 mg, 1,14 mmol) etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátom, sa titulná zlúčenina (411 mg, 70 %) pripravila ako svetlooranžový olej: MS (ES) m/e 516 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-3-(1 -dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová
Podľa postupu z príkladu 9(b), s výnimkou substituovania etyl-(±)-3-(1dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljbutanoátu (200 mg, 0,39 mmol) etyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridi·· ···· • · · ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-132 nyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butanoátom, sa titulná zlúčenina (70 mg, 37 %) pripravila ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 488 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C23H29N5O5S 0,5 H2OHCí: C, 51,83; H, 5,86; N, 13,14. Nájdené: C, 51,88; H,
5,69; N, 12,75.
Príklad 29
Príprava kyseliny (±)-3-(2-imidazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 etoxy]fenyl]butánovej
a) Kyselina (±)-3-(2-imidazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyljbutánová
Etyl-(+)-3-(1-dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát (200 mg, 0,39 mmol) sa rozpustil v 2,0 M HCI (10 ml) a roztok sa zahrial k refluxu. Po 6 h sa zmes ochladila na teplotu miestnosti a pH sa nastavilo na 6 s použitím 1,0 N NaOH. Vzniknutý roztok sa skoncentroval na približne 2 ml a chromatografoval sa na C-18 väzbovo/elučnom stĺpci (H2O, potom 20% CH3CN/H2O). Frakcie, obsahujúce produkt, sa spojili a lyofilizovali, aby vznikla titulná zlúčenina (80 mg, 54 %) ako biely prášok: MS (ES) m/e 381 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C2iH24N4O30,85 HCI: C, 61,31; H, 6,09; N, 13,62. Nájdené: C, 61,26; H, 6,09; N, 13,62.
Príklad 30
Príprava kyseliny (S)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2tiazolyl)butánovej
a) Etyl-(S)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butanoát
Podľa postupu z príkladu 9(a), s výnimkou substituovania etyl-(S)-4-(4hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátu (200 mg, 0,69 mmol) etyl-(±)-4-(4hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátom, sa titulná zlúčenina (262 mg, 89 %) ·· ···· • · · · · · · · ·· · ·· ···· ··
-133 pripravila ako bledooranžový olej po silikagélovej chromatografíi (35% THF v 1:1 toluén/hexány): MS (ES) m/e 426 (M+Hf.
b) Kyselina (S)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butánová
Podľa postupu z príkladu 9(b), s výnimkou substituovania etyl-(S)-4-[4[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butanoátu (262 mg,
0,62 mmol) etyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)-butanoátom, sa titulná zlúčenina (112 mg, 45 %) pripravila ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 398 (M+Hf. Anál. Vypoč. pre 021^3^03-0,75 H2O: C,
61,37; H, 6,01; N, 10,22. Nájdené: C, 61,51; H, 5,89; N, 10,18.
Príklad 31
Príprava kyseliny (ŕ?)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2tiazolyl)butánovej
a) Etyl-(/?)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)-butanoát
Podľa postupu z príkladu 9(a), s výnimkou substituovania etyl-(A?)-4-(4hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátu (200 mg, 0,69 mmol) etyl-(+)-4-(4hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátom, sa titulná zlúčenina (265 mg, 90 %) pripravila ako bledooranžový olej po silikagélovej chromatografíi (35% THF v 1:1 toluén/hexány): MS (ES) m/e 426 (M+Hf.
b) kyselina (/?)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyI)butánová
Podľa postupu z príkladu 9(b), s výnimkou substituovania etyl-(/?)-4-[4[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butanoátu (265 mg,
0,62 mmol) etyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolylfbutanoátom, sa titulná zlúčenina (98 mg, 40 %) pripravila ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 398 (M+Hf. Anál. Vypoč. pre C2iH23N3O30,5 H2O: C,
62,05; H, 5,95; N, 10,34. Nájdené: C, 62,25; H, 5,80; N, 10,37.
· ···· ·· ·· • · · · · · · • · · · ·
-134·· ·· 9 9 9 ·· 9999 99 ·
Príklad 32
Príprava kyseliny (±)-3-(2-benzotiazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 etoxy]fenyl]butánovej
a) Etyl-(+)-3-(2-benzotiazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát
Podľa postupu z príkladu 9(a), s výnimkou substituovania etyl-(±)-3-(2benzotiazolyl)-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu (200 mg, 0,59 mmol) etyl-(±)-4-(4hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátom, sa titulná zlúčenina (220 mg, 78 %) pripravila ako číry olej po silikagélovej chromatografii (60% EtOAc/hexány): MS (ES) m/e 476 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-3-(2-benzotiazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljbutánová
Podľa postupu z príkladu 9(b), s výnimkou substituovania etyl-(±)-3-(2benzotiazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátu (220 mg, 0,46 mmol) etyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2tiazolyl)butanoátom, sa titulná zlúčenina (125 mg, 61 %) získala ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 448 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre CzsHasNaOaSOJS H2O: C, 65,13; H, 5,79; N, 9,11. Nájdené: C, 65,22; H, 5,49; N, 8,92.
Príklad 33
Príprava kyseliny (S)-4-[4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butánovej
a) Etyl-(S)-4-[4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridíη-2-yI)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butanoát
Podľa postupu z príkladu 27(a), s výnimkou substituovania etyl-(S)-4-(4hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátu (200 mg, 0,69 mmol) etyl-(S)-3-fenyl-4(4-hydroxyfenyl)butanoátom, sa titulná zlúčenina (371 mg, znečistená) získala ·· ·· • · ···· ··· • · · · · · · ·· ···· ·· • · « ··· · · ·· · ······ ··
-135ako číry olej po silikagélovej chromatografii (40% THF v 1:1 CHCIVhexány):
MS (ES) m/e 452 (M+H)+.
b) Kyselina (S)-4-[4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)-1-etoxy]fenyl]-3(2-tiazolyl)butánová
Etyl-(S)-4-[4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)-1-etoxy]fenyl]-3(2-tiazolyl)butanoát (371 mg, znečistený) sa rozpustil v 1:1 THF/H2O (5 ml). Do tohto roztoku sa pridal 1,0 N LiOH (1,04 ml, 1,04 mmol) a zmes sa zahriala na 50 °C. Po 18 h sa zmes ochladila na teplotu miestnosti a premyla Et2O (2x5 ml). Vodná vrstva sa skoncentrovala vo vákuu, aby sa odstránili zvyškové organické rozpúšťadlá, potom sa okyslila na pH 6 s použitím 10% HCI. Tuhá látka sa pozberala filtráciou a vysušila sa vo vákuu pri 50 °C, aby vznikla titulná zlúčenina (106 mg, 36 % cez 2 kroky) ako biely prášok. MS (ES) m/e 424 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C23H25N3O3-0,33 HCI: C, 63,42; H, 5,86; N, 9,65. Nájdené: C, 63,19; H, 5,61; N, 9,45.
Príklad 34
Príprava kyseliny (±)-3-(4-metyl-2-tiazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 etoxyjfenyljbutánovej
a) Etyl-(±)-3-(4-metyl-2-tiazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxyjfenyljbutanoát
Podľa postupu z príkladu 9(a), s výnimkou substituovania etyl-(±)-3-(4metyl-2-tiazolyl)-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu (216 mg, 0,74 mmol) etyl-(±)-4(4-hydroxyfenyl)-3-(2-tiazolyl)butanoátom, sa titulná zlúčenina (395 mg, znečistená) pripravila ako číry olej po silikagélovej chromatografii (50% EtOAc/hexány): MS (ES) m/e 426 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-3-(4-metyl-2-tiazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 etoxyjfenyljbutánová ·· ···· ·· ·· ·· • · · · · · · ·· • · · · e ··· ··· · · · ·· ·· · ·· ···· ··
-136Znečistený etyl-(±)-3-(4-metyl-2-tiazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát (395 mg) sa rozpustil v 1:1 THF/H2O (5 ml). Do tohto roztoku sa pridal 1,0 N LiOH (1,11 ml, 1,11 mmol) a zmes sa zahriala na 50 °C. Po 18 h sa zmes ochladila na teplotu miestnosti a premyla Et2O (2x5 ml). Vodná vrstva sa skoncentrovala vo vákuu, aby sa odstránili organické rozpúšťadlá, potom sa okyslila na pH 6 s použitím 10% HCl. Tuhá látka sa pozberala filtráciou a sušila sa vo vákuu pri 50 °C, aby vznikla titulná zlúčenina (88 mg, 29 % cez 2 kroky) ako bledožltý prášok: MS (ES) m/e 412 (M+H)+.
Anál. Vypoč. pre C22H25N3O3S0,25 HCl: C, 62,82; H, 6,05; N, 9,99. Nájdené:
C, 62,94; H, 5,95; N, 9,95.
Príklad 35
Príprava kyseliny (±)-3-[4-karboxy-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánovej
a) Kyselina (±)-3-[4-karboxy-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridiny I)-1 -etoxyjfenyljbutánová
Do roztoku metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátu (50 mg, 0,09 mmol) v 1:1 THF/H2O (5 ml) sa pridal 1,0 N LiOH (0,28 ml, 0,28 mmol) pri teplote miestnosti. Po 72 h sa zmes okyslila na pH 6 s použitím 10% HCl, potom sa skoncentrovala dosucha. Zvyšok sa čistil HPLC s obrátenými fázami (gradient:
až 80% CH3CN/H2O, obsahujúci 1% TFA). Frakcie, obsahujúce produkt, sa spojili a skoncentrovali, aby sa odstránil CH3CN. Vzniknutý vodný roztok sa lyofilizoval, aby vznikla titulná zlúčenina (36 mg, 94 %) ako biela tuhá látka:
MS (ES) m/e 426 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C22H23N3O6-1,7 TFA: C, 49,26; H,
4,02; N, 6,79. Nájdené: C, 49,30; H, 4,24; N, 6,97.
Príklad 36
Príprava kyseliny (±)-3-[4-aminokarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánovej ·· ···· • · · · · · · · ·· · ·· ···· ·· ·
-137 a) Metyl-(±)-3-[4-aminokarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyrid iny I)-1 -etoxy]fenyl]butanoát
Do roztoku metyl-(±)-3-[4-karboxy-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátu (82 mg, 0,19 mmol) v suchom DMF (2 ml) sa pri teplote miestnosti pridali NH4CI (30 mg, 0,56 mmol), HOBt (30 mg,
0,22 mmol), Et3N (0,08 ml, 0,56 mmol) a EDC (42 mg, 0,22 mmol). Po 18 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa vložil do Η2Ο (10 ml) a extrahoval sa CH2CI2 (3 x 30 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4 a skoncentrovali sa, aby vznikla titulná zlúčenina (46 mg, 55 %) ako svetložltý olej: MS (ES) m/e 439 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-3-[4-aminokarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová
Podľa postupu z príkladu 35(a), s výnimkou substituovania metyl-(±)-3[4-aminokarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljbutanoátu (46 mg, 0,1 mmol) metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl-1,3-(2oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyljbutanoátom, sa pripravil surový produkt. Tento sa čistil HPLC s obrátenými fázami (gradient: 15 až 50% CH3CN/H2O, obsahujúci 1 % TFA). Frakcie, obsahujúce produkt, sa spojili a skoncentrovali, aby sa odstránil CH3CN. Vzniknutý vodný roztok sa lyofilizoval, aby vznikla titulná zlúčenina (19 mg, 45 %) ako biela tuhá látka:
MS (ES) m/e 425 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C22H24N4O5-2,5 TFA . 1,0 H2O: C,
44,58; H, 3,95; N, 7,70. Nájdené: C, 44,24; H, 3,60; N, 7,83.
Príklad 37
Príprava kyseliny (±)-3-[4-dimetylaminokarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánovej
a) Metyl-(±)-3-[4-dimetylaminokarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát ·· ···· • · · · · · · · ·· · ······ ·· ·
-138Do roztoku metyl-(±)-3-[4-karboxy-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátu (82 mg, 0,19 mmol) v suchom DMF (2 ml) sa pri teplote miestnosti pridal hydrochlorid dimetylamínu (46 mg, 0,56 mmol), HOBt (30 mg, 0,22 mmol), Et3N (0,08 ml, 0,56 mmol) a EDO (42 mg,
0,22 mmol). Po 18 h sa zmes skoncentrovala. Zvyšok sa vložil do H2O (10 ml) a extrahoval sa CH2CI2 (3 x 30 ml). Spojené organické vrstvy sa sušili nad MgSO4 a skoncentrovali sa na titulnú zlúčeninu (79 mg, 89 %) ako svetložltý olej: MS (ES) m/e 439 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-3-[4-dimetylaminokarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová
Podľa postupu z príkladu 35(a), s výnimkou substituovania metyl-(±)-3[4-dimetylaminokarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1etoxyjfenyljbutanoátu (79 mg, 0,17 mmol) metyl-(±)-3-[4-benzyloxykarbonyl1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátom, sa pripravil surový produkt. Tento sa čistil HPLC s obrátenými fázami (gradient: 10 až 80% CH3CN/H2O, obsahujúci 1% TFA). Frakcie, obsahujúce produkt, sa spojili a skoncentrovali, aby sa odstránil CH3CN. Vzniknutý vodný roztok sa lyofilizoval, aby vznikla titulná zlúčenina (48 mg, 62 %) ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 453 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C24H28N4O5-1,8 TFA: C,
50,44; H, 4,57; N, 8,52. Nájdené: C, 50,19; H, 4,79; N, 8,88.
Príklad 38
Príprava kyseliny (S)-3-fenyl-4-[4-[3-(3,4,5,6-tetrahydro-2-pyrimidinyl)amino-1 propyloxyjfenyljbutánovej
a) Etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(ŕerc-butoxykarbonyl)amino-1-propyloxy]fenyl]-butanoát
Roztok 3-/V-(ŕerc-butoxykarbonyl)amino-1-propanolu (499 mg, 2,85 mmol) a diizopropylazodikarboxylátu (0,561 ml, 2,85 mmol) v bezvodom CH2CI2 (14 ml) sa v priebehu 10 minút po kvapkách pridal do roztoku (S)-3fenyl-4-(4-hydroxyfenyl)butanoátu (323 mg, 1,14 mmol) a trifenylfosfínu (474 ·· ···· ·· ·· · • · · ···· ··· • · · ·· ···
-139• ·· ···· ·· ··· mg, 2,85 mmol) v bezvodom CH2CI2 (5,7 ml) pri 0 °C pod argónom. Žltý roztok sa udržiaval 10 minút pri 0 °C, potom sa zahrial na teplotu miestnosti. Po 23 h sa reakčná zmes skoncentrovala na rotačnej odparke a zvyšok sa podrobil rýchlej chromatografii na silikagéli (15% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (378 mg, 75 %) ako biela tuhá látka: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,28 - 7,10 (m, 5 H), 6,95 - 6,90 (d, 2 H), 6,76 - 6,72 (d, 2 H), 6,84 - 4,70 (br s, 1 H), 4,01 - 3,94 (dd, 4 H), 3,38 - 3,27 (m, 3 H), 2,85 - 2,83 (d, 2 H), 2,63 - 2,58 (t, 2 H), 1,96 -1,92 (m, 2 H), 1,43 (s, 9 H), 1,12 -1,08 (t, 3 H).
b) Etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-(3-amino-1 -propyloxy)fenyl]butanoát
N HCl vdioxáne HCl (4,25 ml, 17 mmol) sa po kvapkách pridal do roztoku etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(ŕerc-buroxykarbonyl)amino-1-propyloxy)fenyl]butanoátu (377 mg, 0,85 mmol) pri teplote miestnosti a vzniknutá zmes sa miešala 2 h. Rozpúšťadlo sa odstránilo na rotačnej odparke a zvyšok sa trituroval s éterom, aby vznikla titulná zlúčenina ako biela tuhá látka: MS (ES) m/e 341,9 (M+H)+.
c) Etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyrimidinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butanoát
Zmes etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-(3-amino-1 -propyloxy)fenyl]butanoátu (0,85 mmol, surový), 2-brómpyrimidínu (177 mg, 1,11 mmol) a NaHCO3 (375 mg, 4,25 mmol) v EtOH (10 ml) sa zahrievala k refluxu 22 h. Zmes sa ochladila na teplotu miestnosti a soli sa odstránili filtráciou. Filtračný koláč sa premyl EtOH. Spojený filtrát a výplach sa skoncentrovali na rotačnej odparke a zvyšok spracoval rýchlou chromatografiou na silikagéli (25% EtOAc/hexány), aby vznikla titulná zlúčenina (289 mg, 80 %, 2 kroky): MS (ES) m/e 419,9 (M+H)+.
d) Etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(3,4,5,6-tetrahydro-2-pyrimidinyl)amino-1-propyloxy]fenyljbutanoát
Zmes etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyrimidinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butanoátu (286 mg, 0,68 mmol), ľadovej HOAc (10 ml), kone. HCl (0,113 ml, 1,36 mmol) a 10% Pd/C (72 mg, 0,068 mmol) sa trepala pri teplote miestnosti pod H2 (310,5 kPa (45 psi)) na Parrovom prístroji. Po 4 h sa reakčná zmes ·· ···· ·· · ·· • · · ···· ··· • · · · · ··· • · · ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-140 prefiltrovala a skoncentrovala, aby vznikla titulná zlúčenina (240 mg, 83 %):
MS (ES) m/e 423,8 (M+H)+.
e) Kyselina (S)-3-fenyl-4-[4-[3-(3,4,5,6-tetrahydro-2-pyrimidinyl)amino-1 -propyloxyjfenyljbutánová
Zmes etyl-(S)-3-fenyl-4-[4-[3-(3,4,5,6-tetrahydro-2-pyrimidinyl)amino-1propyloxy]fenyl]butanoátu (240 mg, 0,56 mmol), 1,0 N NaOH (1,15 ml, 1,12 mmol), THF (4 ml) a EtOH (4 ml) sa miešala v olejovej kúpeľovej zostave pri 35 °C. Po 18 h sa zmes ochladila na teplotu miestnosti a premyla Et20 (2x5 ml). Et2O výplach sa odstránil. Zvyšná vodná vrstva sa krátko skoncentrovala na rotačnej odparke, aby sa odstránili zvyškové organické rozpúšťadlá, potom sa prefiltrovala a filtrát sa okyslil na pH 5 pomocou 30% TFA. Preparatívna HPLC (Hamilton PRP-1®, 250 x 21,5 mm, 35% CH3CN/H2O, obsahujúci 0,1%
TFA), nasledovaná lyofilizáciou, poskytla titulnú zlúčeninu (80 mg) ako biely prášok: MS (ES) m/e 395,9 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre C23H29N3O3 TFA: C,
58,93; H, 5,93; N, 8,25. Nájdené: C, 58,63; H, 5,59; N, 7,99.
Príklad 39
Príprava kyseliny (±)-3-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)etoxy]benzyl]-4pentí novej
a) Metyl-(±)-3-[4-[2-(6-(/V-ferc-butoxykarbonylmetylamino)-2-pyridinyl)etoxy]benzyl]-4-pentinoát
Do roztoku metyl-(±)-3-(4-hydroxyfenyl)4-pentinoátu (25 mg, 0,12 mmol), 6-[(ferc-butoxykarbonyl)metylamino]-2-pyridyletanolu (43 mg, 0,17 mmol), Ph3P (45 mg, 0,17 mmol) v CH2CI2 (5 ml) pri 0 °C sa po kvapkách pridal DEAD (0,03 ml, 0,19 mmol). Reakčná zmes sa nechala zahriať na teplotu miestnosti. Po 2 dňoch sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku.
Radiálna chromatografia na silikagéli (2 mm platňa, 20% EtOAc/hexány) poskytla titulnú zlúčeninu (30 mg) ako číry olej: MS (ES) m/e 453,1 (M+H)+.
·· ··· ·· • · · ··· ·· ·· · ······ ·· ·
-141 b) Kyselina (±)-3-[4-[2-(6-metylamino-2-pyriclinyl)etoxy]benzyl]-4-pentínová
Roztok 4 N HCI/dioxán (1 ml) sa pridal do metyl-(±)-3-[4-[2-[6-(/V-ŕercbutoxykarbonyl)metylamino-2-pyridinyl]etoxy]benzyl]-4-pentinoátu (30 mg,
0,06 mmol). Po 8 h sa rozpúšťadlo odstránilo pri zníženom tlaku, aby vznikol bledožltý zvyšok.
Roztok tohto zvyšku, 1,0 N NaOH (0,5 ml), MeOH (0,5 ml) a THF (1 kvapka), sa miešal 18 h pri teplote miestnosti, potom sa skoncentroval dosucha pri zníženom tlaku. Zvyšok sa rozpustil v H2O (3 ml) a pH sa upravilo na 6 pomocou 1,0 N HCI. Vodná vrstva sa extrahovala 10% MeOH/CHCI3.
Spojené organické extrakty sa sušili nad Na2SO4 a rozpúšťadlo sa odstránilo.
Zvyšok sa lyofilizoval z vody, aby vznikla titulná zlúčenina (21 mg) ako biely prášok: 1H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 7,57 (m, 1 H), 7,12 (d, J = 8,5 Hz, 2 H),
6,76 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 6,55 (d, J = 7,2 Hz, 1 H), 6,40 (d, J = 8,8 Hz, 1 H),
4,2 (m, 2 H), 3,70 (m, 2 H), 3,15 (m, 2 H), 2,88 (s, 3 H), 2,80 (m, 1 H), 2,70 (m,
H), 2,50 (m, 2 H), 2,01 (d, J = 2,3 Hz, 1 H). MS (ES) m/e 339,2 (M + H)+.
Príklad 40
Príprava kyseliny (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2fenyletyl)butánovej
a) Metyl-(±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-fenyletyl)butanoát
Podľa postupu z príkladu 2(a), s výnimkou substituovania metyl-(±)-4(4-hydroxyfenyl)-3-(fenyletyl)butanoátu etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenyl-butanoátom, sa titulná zlúčenina (59 %) získala ako číry film po silikagélovej chromatografii (20% EtOAc/hexány): MS (ES) m/e 433 (M+H)+.
b) kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-fenyletyl)butánová
Podľa postupu z príkladu 2(b), s výnimkou substituovania metyl-(±)-4-[4[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-fenyletyl)butanoátu etyl-(±)-3·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ··· • · · · · ··· • · · ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-142feny l-4-[4-[2-(6-metylam ino-2-pyrid iny I)-1 -etoxy]fenyl]butanoátom, sa titulná zlúčenina (70 %) získala ako biela pena: MS (ES) m/e 419 (M+H)+. Anál.
Vypoč. pre C26H3oN203-1,1 H2O: C, 71,24; H, 7,40; N, 6,39. Nájdené: C, 71,29;
H, 7,19; N, 6,33.
Príklad 41
Príprava kyseliny (±)-3-benzyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxyjfenyl]butánovej
a) Metyl-(±)-3-benzyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoát
Podľa postupu z príkladu 2(a), s výnimkou substituovania metyl-(±)-4(4-hydroxyfenyl)-3-benzylbutanoátu etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátom, sa titulná zlúčenina (47 %) získala ako číry film po silikagélovej chromatografii (20% EtOAc/hexány): MS (ES) m/e 419 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-benzyl)butánová
Podľa postupu z príkladu 2(b), s výnimkou substituovania metyl-(±)-3benzyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátu etyl-(±)-3fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]butanoátom, sa titulná zlúčenina (47 %) získala ako svetložltá pena: MS (ES) m/e 405 (M+H)+. Anál.
Vypoč. pre Ο25Η28Ν2Ο3·1,0 HCI-0,45 H2O: C, 66,87; H, 6,71; N, 6,24. Nájdené:
C, 66,68; H, 6,62; N, 6,64.
Príklad 42
Príprava kyseliny (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2cyklopropyl)butánovej
a) Metyl-(+)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-cyklopropyl)butanoát ·· ···· • · · ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
-143Podľa postupu z príkladu 2(a), s výnimkou substituovania metyl-(±)-4(4-hydroxyfenyl)-3-cyklopropylbutanoátu etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátom, sa titulná zlúčenina (64 %) získala ako číry film po chromatografii na silikagéli (20% EtOAc/hexány): MS (ES) m/e 369 (M+H)+.
b) Kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-(2-cyklopropyl)butánová
Podľa postupu z príkladu 2(b), s výnimkou substituovania metyl-(±)-4-[4[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-cyklopropyl)butanoátu etyl-(±)3- fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]butanoátom, sa titulná zlúčenina (9 mg) získala ako svetložltá pena: MS (ES) m/e 355 (M+H)+.
Príklad 43
Príprava kyseliny 3-metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3buténovej
a) Metyl-3-metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-butenoát
Podľa postupu z príkladu 2(a), s výnimkou substituovania etyl-4-(4hydroxyfenyl)-3-metyl-3-butenoátu etyl-(±)-4-(4-hydroxyfenyl)-3-fenylbutanoátom, sa titulná zlúčenina (96 %) získala ako číry film po chromatografii na silikagéli (20% EtOAc/hexány): MS (ES) m/e 355 (M+H)+.
b) Kyselina 3-metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 -etoxy]fenyl]-3-buténová
Podľa postupu z príkladu 2(b), s výnimkou substituovania metyl-3-metyl4- [4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-butenoátu etyl-(±)-3-fenyl-4[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butanoátom, sa titulná zlúčenina (30 mg) získala ako žltá pena: MS (ES) m/e 327 (M+H)+. Anál. Vypoč. pre Ci9H22N2O3-0,60 HCI-0,55 H2O: C, 63,71; H, 6,67; N, 7,82. Nájdené: C, 63,41;
H, 6,78; N, 8,14.
-144·· ····
Príklad 44
Zloženie parenterálnej jednotkovej dávky
Prípravok, ktorý obsahuje 20 mg zlúčeniny z príkladu 1 ako sterilného suchého prášku, sa pripraví nasledovne: 20 mg zlúčeniny sa rozpustí v 15 ml destilovanej vody. Roztok sa prefiltruje pri sterilných podmienkach do 25 ml multidávkovej ampuly a lyofilizuje sa. Prášok sa rekonštituuje pridaním 20 ml 5% dextrózy vo vode (D5W) na intravenóznu alebo intramuskulárnu injekciu. Dávka sa pritom obmedzuje objemom injekcie. Ďalšie riedenie sa môže uskutočniť pridaním odmeraného objemu tejto jednotkovej dávky do ďalšieho objemu D5W na injekciu, alebo sa odmeraná dávka môže pridať do ďalšieho mechanizmu na podanie liečiva, ako do fľaše alebo vrecka na IV kvapkaciu infúziu, alebo k inému injekčno-infúznemu systému.
Príklad 45
Zloženie orálnej jednotkovej dávky
Tobolka na orálne podávanie sa pripraví zmiešaním a mletím 50 mg zlúčeniny z príkladu 1 so 75 mg laktózy a 5 mg stearanu horečnatého. Vzniknutý prášok sa preoseje a naplní sa do tobolky z tvrdej želatíny.
Príklad 46
Zloženie orálnej jednotkovej dávky
Tabletka na orálne podanie sa pripraví zmiešaním a granulovaním 20 mg sacharózy, 150 mg dihydrátu síranu vápenatého a 50 mg zlúčeniny z príkladu 1 s 10% roztokom želatíny. Vlhké granuly sa preosejú, vysušia, zmiešajú sa s 10 mg škrobu, 5 mg mastenca a 3 mg kyseliny stearovej; a zlisujú sa do tabletky.
Predchádzajúci opis úplne opisuje, ako pracovať s týmto vynálezom a používať ho. Avšak tento vynález sa neobmedzuje na vyššie opísané konkrétne uskutočnenia, ale zahrnuje všetky ich modifikácie v rozsahu ·· ····
-145nasledujúcich nárokov. Rozličné odkazy na časopisy, patenty a iné publikácie, ktoré sú tu citované, tvoria stav techniky a sú sem zahrnuté odkazom, akoby boli plne opísané.

Claims (43)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Antagonisty vitronektínového receptora všeobecného vzorca I r- (O
    R* kde
    R‘ znamená
    R1 r' co2h _ch/n\^cc>2H aleb0 co2h
    X znamená CR’R’, NR’, O alebo S;
    Y znamená CR’R’, NR’, O alebo S;
    A znamená H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2l -CF3, -S(O)rCF3, -CO2R9, -COR9, -CONR92i -Ci-e-alkyl, -C0-6-alkyl-Ar, -Co-e-alkyl-Het, C0-6-alkylC3-6-cykloalkyl, -S(O)kR9 alebo CH2N(Rf)2;
    R1 znamená -Co-6-alkyl-Het-, -Co-e-alkyl-Ar, -Ci.6-alkyl, -H, -CN, -CH=CH2, -C=CH alebo -S(O)kR9;
    R2 znamená
    R>
    R9
    NR” CR2—WN
    R (Q)u
    N. ,NR-—CR’2—W·· ·· ·· • · · · · · · • · · t ·
    -147 ·· ···· • · · • · · ··· ··· ··· • · · ·· • · ·· ···· • · ·· r y
    Os\ /NR9
    N .. NR— CR'2 — W
    W znamená -(CHR9)a-U-(CHR9)b-;
    U je neprítomné alebo znamená CO, CR92, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONŔ, NŔCO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2, N=N, NR9NR9, NR9CRg2, CR92NR9, CR92O, OCR92, C=C, CR9=CR9, Ar alebo Het;
    G znamená NRe, S alebo O;
    R9 znamená H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3-7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo Ar-Co-6-alkyl;
    Rk znamená R9, -C(O)R9 alebo -C(O)ORf;
    Ŕ znamená H, -Ci.6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3-7-cykloalkyl-Co-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl alebo -Ci-6-alkyl, substituovaný jednou až tromi skupinami, vybranými z halogénu, CN, NR92, OR9, SR9, CO2R9 a CON(R9)2;
    Rf znamená H, -Ci_6-alkyl alebo Ar-Co-6-alkyl;
    Re znamená H, -Cve-alkyl, Ar-Co-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-C0.6alkyl alebo (CH2)kCO2R9;
    Rb a Rc sú nezávisle vybrané z H, -Ci_6-alkylu, Ar-C0.6-alkylu, Het-Co-6-alkylu alebo C3^-cykloalkyl-Co-6-alkylu, halogénu, CF3, ORf, S(O)kRf, CORf, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2l CH2N(Rf)2, alebo Rb a Rc sú navzájom spojené, aby vytvorili päť- alebo šesť-členný aromatický alebo nearomatický, karbocyklický alebo heterocyklický kruh, voliteľne substituovaný až troma substituentami, vybranými z halogénu, CF3, -Ci-4-alkylu, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; alebo metyléndioxy;
    Q1, Q2, Q3 a Q4 sú nezávisle N alebo C-Ry za predpokladu, že nie viac než jeden z Q1, Q2, Q3 a Q4 je N;
    R’ je H, Ci-6-alkyl, Ar-C0-6-alkyl alebo C3-6-cykloalkyl-Co-6-alkyl;
    R” je R’, -C(O)R' alebo -C(O)OR’;
    • · · ··· ···· • · · · · · ·· ·· · ·· ···· ·· ·
    -148 Ry je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r,
    -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92, alebo -Ci-6-alkyl, voliteľne substituovaný halogénom, -OR9, -SR9, -CN, -NR9R, -NO2, -CF3, R'S(O)r. -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92;
    a je 0,1 alebo 2;
    b je 0,1 alebo 2;
    k je 0,1 alebo 2;
    r je 0,1 alebo 2;
    s je 0,1 alebo 2;
    u je 0 alebo 1; a v je 0 alebo 1;
    alebo ich farmaceutický prijateľné soli.
  2. 2. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 1 všeobecného vzorca la ·· ···· kde
    X je CR'R’, NR’, O alebo S;
    Y je CR’R’, NR’, O alebo S;
    A je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, -S(O)rCF3, -CO2R9, -COR9, -CONR92, -Ci-6-alkyl, -Co-e-alkyl-Ar, -Co-e-alkyl-Het, -C0-e-alkylC3.6-cykloalkyl, -S(O)kR9 alebo CH2N(Rf)2;
    R1 je -Co-e-alkyl-Het-, -Co-e-alkyl-Ar, H, -CN alebo -S(O)kR9;
    R2 je
    Rb
    R*
    NR CR’2—WN
    R' ·· ···· ·· ·· ·· :? .........
    ..........
    • · · ··· ·· ·· · ·· ···· ·· ·
    149(?)« (?)u
    N^ /(CR') — WR- f Y ' 1 <>3 qk>N NR—CR’-WQ< 2-° Qz
  3. 3-Q4
    Q alebo .NR—CR2 —W( Y <),^NRS
    Wje -(CHR9)a-U-(CHR9)b-:
    U je neprítomné alebo znamená CO, CR92, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONR1, NŔCO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2, N=N, NR9NR9, NR9CR92, CR92NR9, CR92O, OCR92i C=C, CR9=CR9, Ar alebo Het;
    G je NRe, S alebo O;
    R9 je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo Ar-Co e-alkyl; Rkje R9, -C(O)R9 alebo -C(O)ORf;
    R1 je H, -C-i-e-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3-7-cykloalkyl-Co-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl alebo Ci-6-alkyl, substituovaný jednou až tromi skupinami, vybranými z halogénu, CN, NR92, OR9, SR9, CO2R9 a CON(R9)2;
    Rf je H, -Ci-6-alkyl alebo Ar-Co.6-alkyl;
    Re je H, -Ci-e-alkyl, Ar-Co-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3-7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo (CH2)kCO2R9;
    Rb a Rc sú nezávisle vybrané z H, -Ci-6-alkylu, Ar-Co-6-alkylu, Het-Co-6-alkylu alebo C3.6-cykloalkyl-Co-6-alkylu, halogénu, CF3, ORf, S(O)kRf, CORf, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, alebo Rb a Rc sú navzájom spojené, aby vytvorili päť- alebo šesťčlenný aromatický alebo nearomatický, karbocyklický alebo heterocyklický kruh, voliteľne substituovaný až troma substituentami, vybranými z halogénu, CF3, -Ci-4-alkylu, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; alebo metyléndioxy;
    Q1, Q2, Q3 a Q4 sú nezávisle N alebo C-Ry za predpokladu, že nie viac než jeden z Q1, Q2, Q3 a Q4 je N;
    R’ je H, -Ci-6-alkyl, Ar-Co-e-alkyl alebo C3.6-cykloalkyl-Co-6-alkyl;
    ·· ·· • · · · • · ·
    -150·· ···· • · · • · · ·· · ·· ····
    R je R’, -C(O)R' alebo -C(O)OR’;
    Ry je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3i CF3S(O)r. -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92) alebo -Ci-6-alkyl, voliteľne substituovaný halogénom, -OR9, -SR9, -CN, -NR9R”, -NO2, -CF3, R’S(O)r, -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92;
    a je 0,1 alebo 2;
    b je 0,1 alebo 2;
    k je 0,1 alebo 2;
    r je 0,1 alebo 2;
    s je 0,1 alebo 2;
    u je 0 alebo 1; a v je 0 alebo 1;
    alebo ich farmaceutický prijateľné soli.
    3. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 1 alebo 2, v ktorých R2 je <°)u
    N NR—CR--Wi iC α^θ,-ο4 kde každé z Q1,Q2 a Q3 je CRy, Q4 je CRy alebo N a u je 0.
  4. 4. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 3, kde každé R’ je H, R” je H alebo -Ci.6-alkyl, W je -(CH2)i^-, Q4 je CRy a Ry je H.
  5. 5. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 1 alebo 2, v ktorých R2 je
    R“ ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ···
    -151 • · · ··· ··· ·· · ·· ···· ·· ··· kde každé Q1,Q2 a Q3 je CH a u je 0.
  6. 6. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 5, kde každé R’ je H, R je H alebo -Ci-6-alkyl, v je 0 a W je -CH2-CH2-.
  7. 7. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 1 alebo 2, v ktorých R2 je
    K kde G je NH a každé z Rb a Rc je H.
  8. 8. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 7, kde W je -CH2-CH2-.
  9. 9. Antagonisty vitronektínového receptora podlá nároku 1 alebo 2, v ktorých R2 je
    Rb>
    R*
    NR-CR'Z—WN kde G je N H a Rb a Rc sú navzájom spojené, aby vytvorili päť- alebo šesťčlenný aromatický alebo nearomatický, karbocyklický alebo heterocyklický kruh, voliteľne substituovaný až troma substituentami, vybranými z halogénu, CF3, C^-alkyl, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2, alebo metyléndioxy.
  10. 10. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 9, v ktorých Rb a Rc sú navzájom spojené, aby vytvorili šesťčlenný aromatický karbocyklický kruh.
    ·· ···· ··
    -152
  11. 11. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 10, kde W je -CH2-CH2-.
  12. 12. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 9, kde Rb a Rc sú navzájom spojené, aby vytvorili šesťčlenný aromatický heterocyklický kruh.
  13. 13. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 12, v ktorých Wje -CH2-CH2-.
  14. 14. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 1 alebo 2, v ktorých R2 je
    N NR—CR’ — w
    NR kde každé R’ je H, R je H alebo Ci-6-alkyl, R9 je H alebo Ci-6-alkyl a s je 0, 1 alebo 2.
  15. 15. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 14, v ktorých Wje -CH2-CH2-.
  16. 16. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 1 alebo 2, v ktorých R1 je fenyl, benzyl, pyridyl, imidazolyl, oxazolyl alebo tiazolyl.
  17. 17. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 1 alebo 2, v ktorých Y je O alebo CH2.
  18. 18. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 1 alebo 2, v ktorých X je NH alebo CH2.
  19. 19. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 1, v ktorých R2 je ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ···
    -153- ··· · · · é · ·· · ······ ·· · kde v je O a W je -CH2-CH2-.
  20. 20. Antagonisty vitronektínového receptora podľa nároku 1, ktorými sú: kyselina (±)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butánová; kyselina (±)-3-fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová; kyselina (+)-3-fenyl-3-[4-[4-(2-pyridinyl)amino-1-butyl]fenylamino]propánová; kyselina 4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová; kyselina (S)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butánová; kyselina 2-fenoxy-4-[5-(2-pyridinyl)amino-1-pentyloxy]fenyloctová; kyselina 4-[4-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]-2-fenoxyfenyl]butánová; kyselina (±)-4-[4-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-vinylbutánová; kyselina (±)-3-metyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butánová; kyselina (/?)-3-fenyl-4-[4-[3-(2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butánová; kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-pyridinyl)butánová;
    kyselina (±)-3-metyl-4-[4-[2-(2-metylamino-5-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová; kyselina 2-[/V-benzyl-/V-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]benzyl]amino] octová;
    kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-tiofenyl)butánová;
    kyselina 2-[/V-[4-[2-[6-(metylamino)-2-pyridinyl]-1-etoxy]benzyl]-/\/-fenyl]amino]octová;
    kyselina (±)-3-(4-brómfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljb u tá n ová;
    kyselina (±)-3-metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová; kyselina (S)-3-fenyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová;
    ·· ···· • · · · · · ··· • · · · · · · • · · ··· · · ·· · ······ ·· ·
    -154kyselina (+)-3-(4-izopropylfenyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljbutánová;
    kyselina (±)-3-(4-izopropylfenyl)-4-[4-[3-(4-metyl-2-pyridinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butánová;
    kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-oxazo!yl)butánová;
    kyselina 2-[/V-[2-metoxy-4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]benzyl]aminojoctová;
    kyselina 4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-buténová;
    kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butánová;
    kyselina (±)-3-fenyl-4-[4-[[2-(2-pyridinyl)amino-1-etylamino]karbonyl]fenyl]butánová;
    kyselina (±)-3-(2-furanyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová;
    kyselina (±)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-fenyletyl)butánová;
    kyselina (S)-3-fenyl-4-[4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyrid íη-2-yl)-1 -etoxy]fenyljbutánová;
    kyselina 3-metyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-buténová; kyselina (±)-3-(1-dimetylaminosulfonyl-2-imidazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová;
    kyselina (±)-3-benzyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová;
    kyselina (±)-3-(2-imidazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová;
    kyselina (S)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butánová;
    kyselina (R)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2-tiazolyl)butánová;
    ·· ···· ·· ·· • · · · · · ·· ·· · ·· ···· ·· ·
    -155kyselina (S)-3-fenyl-4-[4-[3-(3,4,5,6-tetrahydro-2-pyrimidinyl)amino-1-propyloxy]fenyl]butánová;
    kyselina (±)-3-cyklopropyl-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]b u tá nová;
    kyselina (±)-3-(2-benzotiazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljbutánová;
    kyselina (S)-4-[4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-1,8-naftyridín-2-yl)-1-etoxy]fenyl]-3-(2tiazolyl)butánová;
    kyselina (±)-3-(4-metyl-2-tiazolyl)-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1-etoxy]fenyljbutánová;
    kyselina (±)-3-[4-karboxy-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)-1 etoxy]fenyl]butánová;
    kyselina (±)-3-[4-aminokarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino-2pyridinyl)-1-etoxy]fenyl]butánová;
    kyselina (±)-3-[4-dimetylaminokarbonyl-1,3-(2-oxazolyl)]-4-[4-[2-(6-metylamino2-py ridinyl)-1 -etoxyjfenyl] butánová;
    kyselina (±)-3-[4-[2-(6-metylamino-2-pyridinyl)etoxy]benzyl]-4-pentínová;
    alebo ich farmaceutický prijateľné soli.
  21. 21. Spôsob výroby antagonistov vitronektínového receptora všeobecného vzorca la podľa nároku 2, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje pôsobenie zlúčeniny všeobecného vzorca V na zlúčeninu všeobecného vzorca IV (IV) (V) ·· ···· ·· ·· • · e ···· ··· • · ·· ··· • · · ··· · · ·· · ······ ·· ·
    - 156kde R1, A a X sú určené pre vzorec la, s akýmikoľvek chránenými reaktívnymi funkčnými skupinami, a L1 je OH alebo halogén;
    a potom odstránenie chrániacich skupín a voliteľne vytvorenie farmaceutický prijateľnej soli.
  22. 22. Spôsob výroby antagonistov vitronektínového receptora všeobecného vzorca la podľa nároku 2, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje pôsobenie zlúčeniny všeobecného vzorca VI na zlúčeninu všeobecného vzorca IV (IV) (VI) kde R1, A, X, R’, R”, W, Q1, Q2, Q3 a Q4 sú určené pre vzorec la, s akýmikoľvek chránenými reaktívnymi funkčnými skupinami, a potom odstránenie chrániacich skupín a voliteľne vytvorenie farmaceutický prijateľnej soli; alebo pôsobenie zlúčeniny všeobecného vzorca VII na zlúčeninu všeobecného vzorca IV o- (VII) kde R1, A, X, R’, R”, W, Q1, Q2, Q3 a v sú určené pre vzorec la, s akýmikoľvek chránenými reaktívnymi funkčnými skupinami;
    ·· ···· • · · ···· ··· • · · ·· ··· • · · ··· ·· ·· · ·· «··· ·· ·
    -157a potom odstránenie chrániacich skupín a voliteľne vytvorenie farmaceutický prijateľnej soli.
  23. 23. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje antagonistu vitronektínového receptora podľa nárokov 1 až 20 a farmaceutický prijateľný nosič.
  24. 24. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje antagonistu vitronektínového receptora podľa nárokov 1 až 20, antineoplastické činidlo a farmaceutický prijateľný nosič.
  25. 25. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 22, vyznačujúci sa t ý m, že antineoplastickým činidlom je topotekán alebo cisplatina.
  26. 26. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje antagonistu vitronektínového receptora podľa nároku 1, inhibítor kostnej resorpcie a farmaceutický prijateľný nosič.
  27. 27. Antagonista vitronektínového receptora podľa nároku 1 na použitie na liečenie chorobného stavu, v ktorom je indikovaný antagonizmus ανβ3 receptora.
  28. 28. Antagonista vitronektínového receptora podľa nároku 1 na použitie na liečenie chorobného stavu, v ktorom je indikovaný antagonizmus ανβδ receptora.
  29. 29. Antagonista vitronektínového receptora podľa nároku 1 na použitie na liečenie osteoporózy.
  30. 30. Antagonista vitronektínového receptora podľa nároku 1 na použitie na inhibovanie angiogenézy, rastu nádoru alebo nádorových metastáz.
    ·· ·· • ···· ·· ·· · · · · · ··· • ··· · · · · · • · · · · · ·· ···· ·· ·
    - 158
  31. 31. Antagonista vitronektínového receptora podľa nároku 1 na použitie na liečenie aterosklerózy, restenózy alebo zápalu.
  32. 32. Antagonista vitronektínového receptora podľa nároku 1 spolu s antineoplastickým činidlom na použitie na inhibíciu rastu nádoru, na spoločné alebo postupné podanie.
  33. 33. Antagonista vitronektínového receptora podľa nároku 32, kde antineoplastickým činidlom je topotekán alebo cisplatina.
  34. 34. Antagonista vitronektínového receptora podľa nároku 1 spolu s inhibítorom kostnej resorpcie na použitie na liečenie osteoporózy alebo na inhibíciu straty kostnej hmoty, na spoločné alebo postupné podanie.
  35. 35. Antagonista vitronektínového receptora podľa nároku 1 na použitie ako liek.
  36. 36. Použitie antagonistu vitronektínového receptora všeobecného vzorca I podľa nároku 1 na výrobu lieku na liečenie chorôb, pri ktorých je indikovaný antagonizmus ανβ3 receptora.
  37. 37. Použitie antagonistu vitronektínového receptora všeobecného vzorca I podľa nároku 1 na výrobu lieku na liečenie chorôb, pri ktorých je indikovaný antagonizmus ανβδ receptora.
  38. 38. Použitie antagonistu vitronektínového receptora všeobecného vzorca I podľa nároku 1 na výrobu lieku na liečenie osteoporózy.
  39. 39. Použitie antagonistu vitronektínového receptora všeobecného vzorca I podľa nároku 1 na výrobu lieku na inhibíciu angiogenézy, rastu nádoru alebo nádorových metastáz.
    ···· ··· ·· ····
    -159
  40. 40. Použitie antagonistu vitronektínového receptora všeobecného vzorca I podľa nároku 1 na výrobu lieku na liečenie aterosklerózy, restenózy alebo zápalu.
  41. 41. Použitie antagonistu vitronektínového receptora všeobecného vzorca I podľa nároku 1 a antineoplastického činidla na výrobu lieku na inhibíciu rastu nádoru na spoločné alebo postupné podanie.
  42. 42. Použitie podľa nároku 41, kde antineoplastickým činidlom je topotekán alebo cisplatina.
  43. 43. Medziprodukt všeobecného vzorca II
    CO2CMalkyl (H) kde
    X je CR’R', NR', O alebo S;
    Y je CR’R’, NR’, O alebo S;
    A je Ί+, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, -S(O)rCF3, -CO2R9, -COR9, -CONR92i -Ci-e-alkyl, -C0.6-alkyl-Ar, -Co-e-alkyl-Het, Co-e-alkylCa-e-cykloalkyl, -S(O)kR9 alebo CH2N(Rf)2;
    R1 je -Co-6-alkyl-Het-, -Co-6-alkyl-Ar, -C^alkyl, H, -CN alebo -S(O)kR9;
    R2 je
    Ύ ,<A^N
    NR CR’2—W(O)„ (O)u
    R’
    R n n^-w— i 1 ^3 ^Q2 _N. NR— CR·— wQ Y □Χ 3-θ4 Q alebo ·· ···· · ·· ·· ·· · · · · · ···
    -160• · · ··· ··· ·· · ·· ···· ·· ···
    N NR—CR'2 —WY xXNR9
    Wje -(CHR9)a-U-(CHR9)b-;
    U je neprítomné alebo CO, CR92, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONŔ, NŔCO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2, N=N, NR9NR9, NR9CR92i CR92NR9, CR92O, OCR92i C=C, CR9=CR9, Ar alebo Het;
    G je NR®, S alebo O;
    R9 je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo Ar-Co-e-alkyl; Rkje R9, -C(O)R9 alebo -C(O)ORf;
    R' je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-C0-6-alkyl, Ar-C0.6-alkyl alebo Ci-6-alkyl, substituovaný jednou až tromi skupinami, vybranými z halogénu, CN, NR92i OR9, SR9, CO2R9 a CON(R9)2;
    Rf je H, -Ci-6-alkyl alebo Ar-Co-6-alkyl;
    R® je H, -Ci-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo (CH2)kCO2R9;
    Rb a Rc sú nezávisle vybrané z H, -Ci-6-alkylu, Ar-Co-6-alkylu, Het-Co-6-alkylu alebo C3.6-cykloalkyl-C0-6-alkylu, halogénu, CF3, ORf, S(O)kRf, CORf, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, alebo Rb a Rc sú navzájom spojené, aby vytvorili päť- alebo šesťčlenný aromatický alebo nearomatický, karbocyklický alebo heterocyklický kruh, voliteľne substituovaný až troma substituentami, vybranými z halogénu, CF3, Cm-alkylu, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 a CH2N(Rf)2; alebo metyléndioxy;
    Q1, Q2, Q3 a Q4 sú nezávisle N alebo C-Ry za predpokladu, že nie viac než jedno z Q1, Q2, Q3 a Q4 je N;
    R’ je H, Ci-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl alebo C3-6-cykloalkyl-Co-6-alkyl;
    R” je R’, -C(O)R’ alebo -C(O)OR’;
    Ry je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r, -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92, alebo C-i-6-alkyl, voliteľne substituovaný ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ···
    -161 ·· · ·· ···· ·· ··· halogénom, -OR9, -SR9, -CN, -NR9R”, -NO2, -CF3, R’S(O)r. -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92; a je 0,1 alebo 2; b je 0,1 alebo 2; k je 0,1 alebo 2; r je 0, 1 alebo 2; s je 0,1 alebo 2; u je 0 alebo 1; a v je 0 alebo 1;
    alebo jeho farmaceutické prijateľné soli, alebo medziprodukt všeobecného vzorca III o-
    NR —CR’j—w—o
    CO2C,.6alkyl (III) kde
    X je CR’R’, NR', O alebo S;
    Y je CR’R’, NR’, O alebo S;
    A je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, -S(O)rCF3, -CO2R9, -COR9, -CONR92, -Ci-6-alkyl, -Co-6-alkyl-Ar, -Co.6-alkyl-Het, -Co_6-alkylC3-6-cykloalkyl, -S(O)kR9 alebo CH2N(Rf)2;
    R1 je -Co-6-alkyl-Het-, -Co-6-alkyl-Ar, H, -CN alebo -S(O)kR9;
    Wje -(CHR9)a-U-(CHR9)b-;
    U je neprítomné alebo CO, CR92, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONŔ, NŔCO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2, N=N, NR9NR9, NR9CR92, CR92NR9, CR92O, OCR92i C^C, CR9=CR9, Ar alebo Het;
    R9 je H, -Ci-6-alkyl, Het-Co.6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-Co-6-alkyl alebo Ar-Co-e-alkyl; Rkje R9, -C(O)R9 alebo -C(O)ORf;
    ·· ···· ·· ·· ·· • · · ···· ···
    -162• · · ··· ··· ·· · ·· ···· ·· ···
    R' je H, Ci-6-alkyl, Het-Co-6-alkyl, C3.7-cykloalkyl-Co-6-alkyl, Ar-Co-6-alkyl alebo Ci-6-alkyl, substituovaný jednou až tromi skupinami, vybranými z halogénu,
    CN, NR92, OR9, SR9, CO2R9 a CON(R9)2;
    Rf je H, -Ci_6-alkyl alebo Ar-Co-6-alkyl;
    Q1, Q2, Q3 a Q4 sú nezávisle N alebo C-Ry za predpokladu, že nie viac než jedno z Q1, Q2, Q3 a Q4 je N;
    R’ je H, -Ci-6-alkyl, Ar-C0-6-alkyl alebo C3-6-cykloalkyl-Co-6-alkyl;
    R” je R', -C(O)R’ alebo -C(O)OR’;
    Ry je H, halogén, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r,
    -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92, alebo Ci-e-alkyl, voliteľne substituovaný halogénom, -OR9, -SR9, -CN, -NR9R, -NO2i -CF3, R’S(O)r-, -CO2R9, -COR9 alebo -CONR92;
    a je 0,1 alebo 2; a b je 0,1 alebo 2;
    alebo jeho farmaceutický prijateľné soli, na výrobu antagonistu vitronektínového receptora všeobecného vzorca la podľa nároku 2.
SK1329-2000A 1998-03-10 1999-03-10 Antagonisty vitronektínového receptora, spôsob ich výroby, farmaceutický prostriedok s ich obsahom, ich použitie a medziprodukty SK13292000A3 (sk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US7761098P 1998-03-10 1998-03-10
US9606398P 1998-08-11 1998-08-11
PCT/US1999/005232 WO1999045927A1 (en) 1998-03-10 1999-03-10 Vitronectin receptor antagonists

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SK13292000A3 true SK13292000A3 (sk) 2001-06-11

Family

ID=26759473

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1329-2000A SK13292000A3 (sk) 1998-03-10 1999-03-10 Antagonisty vitronektínového receptora, spôsob ich výroby, farmaceutický prostriedok s ich obsahom, ich použitie a medziprodukty

Country Status (24)

Country Link
EP (1) EP1061921A4 (sk)
JP (1) JP2002506033A (sk)
KR (1) KR20010041812A (sk)
CN (1) CN1299282A (sk)
AP (1) AP2000001898A0 (sk)
AR (1) AR015241A1 (sk)
AU (1) AU758498B2 (sk)
BG (1) BG104824A (sk)
BR (1) BR9908636A (sk)
CA (1) CA2323208A1 (sk)
CO (1) CO5080762A1 (sk)
DZ (1) DZ2741A1 (sk)
EA (1) EA200000921A1 (sk)
HU (1) HUP0101143A3 (sk)
ID (1) ID26223A (sk)
IL (1) IL138245A0 (sk)
NO (1) NO20004503L (sk)
OA (1) OA12189A (sk)
PE (1) PE20000323A1 (sk)
PL (1) PL342881A1 (sk)
SK (1) SK13292000A3 (sk)
TR (1) TR200002625T2 (sk)
UY (2) UY25421A1 (sk)
WO (1) WO1999045927A1 (sk)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19939981A1 (de) * 1999-08-24 2001-03-01 Merck Patent Gmbh Neue Inhibitoren des Integrins alphavß3
DE19939980A1 (de) 1999-08-24 2001-03-01 Merck Patent Gmbh Inhibitoren des Integrins alphavbeta¶3¶
US6881736B1 (en) 1999-09-07 2005-04-19 Smithkline Beecham Corporation Vitronectin receptor antagonists
EG24179A (en) * 1999-09-07 2008-09-28 Smithkline Beecham Corp Vitronectin receptor antagonists
US6448278B2 (en) 1999-12-23 2002-09-10 Pfizer Inc. Procollagen C-proteinase inhibitors
GB9930570D0 (en) * 1999-12-23 2000-02-16 Pfizer Ltd Therapy
FR2808798A1 (fr) * 2000-05-09 2001-11-16 Hoechst Marion Roussel Inc Nouveaux derives antagonistes du recepteur de la vitronectine
PE20020665A1 (es) 2000-06-15 2002-08-14 Pharmacia Corp ACIDO CICLOALQUIL FENIL ALCANOICO COMO ANTAGONISTA DE INTEGRINAS OVß3
US6531494B1 (en) 2001-08-29 2003-03-11 Pharmacia Corporation Gem-substituted αvβ3 antagonists
US6645993B2 (en) 2001-03-30 2003-11-11 Warner-Lambert Company 3-heterocyclylpropanohydroxamic acid PCP inhibitors
US6716842B2 (en) 2002-04-05 2004-04-06 Warner-Lambert Company, Llc Antidiabetic agents
WO2005049589A2 (en) * 2003-10-14 2005-06-02 Cadila Healthcare Limited Heterocyclic compounds for the treatment of hyperlipidemia, diabetes, obesity and similar diseases
BRPI0508397A (pt) * 2004-03-05 2007-08-07 Taisho Pharmaceutical Co Ltd derivado de tiazol ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, inibidor de alk5, estimulador de proliferação de folìculo capilar, e, estimulador do crescimento capilar ou um agente de crescimento capilar
UA87854C2 (en) 2004-06-07 2009-08-25 Мерк Энд Ко., Инк. N-(2-benzyl)-2-phenylbutanamides as androgen receptor modulators
BRPI0610506A2 (pt) 2005-04-20 2010-06-29 Johnson & Johnson moduladores de trombina de n-óxidos de piridina fluorados e processo para n-oxidação de heteroarilas contendo nitrogênio
PL3040329T3 (pl) * 2013-08-29 2019-04-30 Kyoto Pharma Ind Związek aromatyczny i jego zastosowanie w leczeniu chorób związanych z metabolizmem kości
EP3929196B1 (en) 2013-09-24 2023-08-23 FUJIFILM Corporation Pharmaceutical composition of a nitrogen-containing compound or salt thereof, or metal complex thereof
MX2016015467A (es) 2014-05-30 2017-03-23 Pfizer Derivados de carbonitrilo como moduladores selectivos del receptor de androgenos.
WO2023275715A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Pfizer Inc. Metabolites of selective androgen receptor modulators

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ203898A3 (cs) * 1995-12-29 1999-03-17 Smithkline Beecham Corporation Antagonista vitronektinového receptoru, farmaceutický přípravek s jeho obsahem, způsob a použití
BR9612378A (pt) * 1995-12-29 1999-07-13 Smithkline Beecham Corp Antagonistas receptores de vitronectina

Also Published As

Publication number Publication date
AR015241A1 (es) 2001-04-18
BG104824A (en) 2001-05-31
IL138245A0 (en) 2001-10-31
NO20004503D0 (no) 2000-09-08
CN1299282A (zh) 2001-06-13
UY25421A1 (es) 2001-07-31
AU2903399A (en) 1999-09-27
HUP0101143A2 (hu) 2001-08-28
OA12189A (en) 2006-05-09
CO5080762A1 (es) 2001-09-25
EP1061921A4 (en) 2005-03-30
HUP0101143A3 (en) 2002-12-28
TR200002625T2 (tr) 2000-12-21
UY25519A1 (es) 1999-12-13
PL342881A1 (en) 2001-07-16
EA200000921A1 (ru) 2001-04-23
CA2323208A1 (en) 1999-09-16
NO20004503L (no) 2000-10-10
DZ2741A1 (fr) 2003-09-08
JP2002506033A (ja) 2002-02-26
BR9908636A (pt) 2002-01-08
KR20010041812A (ko) 2001-05-25
AP2000001898A0 (en) 2000-09-30
ID26223A (id) 2000-12-07
EP1061921A1 (en) 2000-12-27
PE20000323A1 (es) 2000-05-24
WO1999045927A1 (en) 1999-09-16
AU758498B2 (en) 2003-03-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK13292000A3 (sk) Antagonisty vitronektínového receptora, spôsob ich výroby, farmaceutický prostriedok s ich obsahom, ich použitie a medziprodukty
EP0957917B1 (en) Vitronectin receptor antagonists
KR19990076878A (ko) 비트로넥틴 수용체 길항제
WO1999015508A1 (en) Vitronectin receptor antagonists
US6495560B1 (en) Vitronectin receptor antagonist
JP4685307B2 (ja) ビトロネクチン受容体アンタゴニスト
US20020147334A1 (en) Vitronectin Receptor Antagonists
US6881736B1 (en) Vitronectin receptor antagonists
US6458814B1 (en) Vitronectin receptor antagonists
MXPA00008847A (en) Vitronectin receptor antagonists
CZ20003289A3 (cs) Antagonisté receptoru vitronektinu
MXPA00002700A (en) Vitronectin receptor antagonists
HK1023730B (en) Vitronectin receptor antagonists