SK119498A3 - Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine - Google Patents
Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine Download PDFInfo
- Publication number
- SK119498A3 SK119498A3 SK1194-98A SK119498A SK119498A3 SK 119498 A3 SK119498 A3 SK 119498A3 SK 119498 A SK119498 A SK 119498A SK 119498 A3 SK119498 A3 SK 119498A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- virus
- vaccine
- prrs
- neb
- pigs
- Prior art date
Links
- 208000005342 Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Diseases 0.000 title claims abstract description 58
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 54
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 70
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 15
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims description 21
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 21
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 18
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 claims description 13
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims description 12
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 12
- 210000001132 alveolar macrophage Anatomy 0.000 claims description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 7
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 claims description 6
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 6
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 claims description 4
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims description 3
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 19
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 102100030953 Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 4 Human genes 0.000 description 9
- 101000727105 Homo sapiens Cleavage and polyadenylation specificity factor subunit 4 Proteins 0.000 description 9
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 208000017443 reproductive system disease Diseases 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 5
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 5
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 235000015277 pork Nutrition 0.000 description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 4
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 3
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 208000001951 Fetal Death Diseases 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000005107 Premature Birth Diseases 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 2
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000238017 Astacoidea Species 0.000 description 1
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- -1 EMEM Substances 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 206010055690 Foetal death Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035752 Live birth Diseases 0.000 description 1
- 206010060860 Neurological symptom Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 208000001300 Perinatal Death Diseases 0.000 description 1
- 241001135989 Porcine reproductive and respiratory syndrome virus Species 0.000 description 1
- 241000220324 Pyrus Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010058874 Viraemia Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000004596 appetite loss Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 230000003139 buffering effect Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- RAFNCPHFRHZCPS-UHFFFAOYSA-N di(imidazol-1-yl)methanethione Chemical compound C1=CN=CN1C(=S)N1C=CN=C1 RAFNCPHFRHZCPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 1
- 244000144980 herd Species 0.000 description 1
- 208000021760 high fever Diseases 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 208000019017 loss of appetite Diseases 0.000 description 1
- 235000021266 loss of appetite Nutrition 0.000 description 1
- 208000018773 low birth weight Diseases 0.000 description 1
- 231100000533 low birth weight Toxicity 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 239000006201 parenteral dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 235000021017 pears Nutrition 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 208000030279 prolonged fever Diseases 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004906 thiomersal Drugs 0.000 description 1
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
- G01N33/56983—Viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5254—Virus avirulent or attenuated
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
- A61K2039/552—Veterinary vaccine
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/10011—Arteriviridae
- C12N2770/10034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
- G01N2333/08—RNA viruses
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
Description
Vakcína a spôsob ochrany proti reprodukčnému a respiračnému syndrómu prasiat
Oblasť techniky
Tento vynález sa dotýka vakcíny na liečenie a prevenciu reprodukčného a respiračného syndrómu prasiat (PRRS = porcine reproductive and respirátory syndróme).
Choroba je charakterizovaná poruchami reprodukcie, ako sú napr. predčasné pôrody, neskoré potraty, mŕtvo narodené a mumifikované plody a horúčkové ochorenia dýchacích ciest.
Ochorenie je spôsobené vírusom PRRS. Predmetom výskumu je zaistiť vakcínu, ktorá by chránila prasatá proti tejto chorobe.
Doterajší stav techniky
Tento vynález sa dotýka vakcíny na liečenie reprodukčného a respiračného syndrómu prasiat (porcine reproductive and respirátory syndróme = PRRS).
V roku 1987 priemysel výroby bravčového mäsa v Spojených štátoch zaznamenal neznámu infekčnú chorobu, ktorá mala vážny ekonomický dopad na priemysel výroby bravčového mäsa. Príznaky choroby boli opísané v Európe vrátane Nemecka, Belgicka, Holandska, Španielska aj Anglicka.
Choroba je charakterizovaná poruchou reprodukcie, respiračnou chorobou a rôznymi klinickými príznakmi zahrňujúcimi stratu chuti k jedeniu, horúčku, pľúcnu nedostatočnosť a mierne neurologické príznaky. Hlavnou súčasťou syndrómu je porucha reprodukcie, ktorá sa prejavuje ako predčasné pôrody, neskoré potraty, prasatá sa rodia slabé, mŕtvo narodené, mumifikované plody, znížené pôrodné parametre a oneskorený návrat k ruji u prasníc. Klinické známky respiračnej choroby sa najviac prejavujú do veku 3 týždňov, ale môžu sa vyskytnúť u prasiat vo všetkých štádiách produkcie. Napadnuté prasiatka pomaly rastú, majú zhrubnuté štetiny, dýchacie potiaže (pokašliavanie) a zvýšenú úmrtnosť.
Na referenciu o chorobnom syndróme sa použilo mnoho rôznych termínov zahrňujúcich napr. záhadná choroba svíň (mystery svine disease = MSD), epidemické potraty a respiračný syndróm prasiat (PEARS = porcine epidémie abortion and respirátory syndróme), neplodnosť a respiračný syndróm svíň (SIRS = swine infertility and respirátory syndróme). Teraz sa všeobecne používa názov reprodukčný a respiračný syndróm prasiat (PRRS = porcine reproductive and respirátory syndróme); tento termín sa bude vyskytovať v nasledujúcej patentovej žiadosti.
Predmetom tohto vynálezu je zaistiť vakcínu, ktorá by chránila proti klinickej chorobe zavinenej PRRS. Ďalšou úlohou je zaistiť vakcínu, ktorá pri podaní chovnému stádu svíň zníži výskyt PRRS v ich populácii.
Podstata vynálezu
Predmetom tohto vynálezu je zaistiť novú vakcínu, ktorá chráni prasatá proti klinickej chorobe zavinenej vírusom reprodukčného a respiračného syndrómu prasiat (PRRS).
Ďalším predmetom tohto vynálezu je zaistiť vakcínu chrániacu proti kmeňu NEB-1 PRRS vírusu.
Ďalej je predmetom tohto vynálezu zaistiť metódu ochrany prasiat proti klinickej chorobe zavinenej vírusom reprodukčného a respiračného syndrómu prasiat.
Ďalej je predmetom tohto vynálezu získať očkovací vírus s fenotypovými charakteristikami, ktoré ho môžu odlíšiť od divokých typov PRRS vírusov.
Vynález poskytuje zmes látok pozostávajúcich z oslabeného vírusu PRRS (vírusu reprodukčného a respiračného syndrómu prasiat) , ktorý bol modifikovaný laboratórnou manipuláciou na účely očkovania. Ďalej má zmes také fenotypové vlastnosti, ktoré umožňujú jeho použitie na diagnostické účely rozlíšenia medzi prasatami, ktoré boli infikované prirodzenou cestou, verzus zvieratami, ktoré boli vystavené len pôsobeniu očkovacieho kmeňa. PRRS vírus izolát NEB-1-P94 je uložený v Američan Type Culture Collection (číslo prírastku No. VR-2525).
Virulentný izolát PRRS vírusu sa získal zo vzoriek tkanív prasiat prezentovaných v diagnostickom laboratóriu univerzity v Nebraske (the University of Nebrasca Diagnostic Laboratory). Tkanivový homogenát z mŕtvych prasiat bol inokulovaný na primárne prasačie alveolárne makrofágy a prítomnosť vírusu sa detekovala (zistila) cytopatickými účinkami na inokulovanú kultúru, avšak nie na kontrolnú úlohu bez inokulácie tkanivovým homogenátom. Izolovaný výrus (označený NEB-1) bol následne charakterizovaný ako PRRS vírus na základe fyzikálnych vlastností (citlivosť na éter a chloroform, hustota v tekutom médiu a nedostatok hemaglutinačnej aktivity), reaktivity so špecifickými protilátkami a podľa genetických rozborov. Naočkovanie vírusu pestovaným prasiatkam malo za následok respiračné ochorenie charakterizované vysokou horúčkou, narušené dýchanie a pľúcna patológia odpovedajúca vírusovému intersticiálnemu zápalu pľúc. Naviac naočkovanie vírusu brezivým prasniciam spôsobilo reprodukčnú chorobu charakterizovanú mumifikáciou plodov, mŕtvo narodenými alebo slabými a následne umierajúcimi prasiatkami. Respiračná a reprodukčná choroba zavinená týmto vírusom bola typická pre syndróm prisudzovaný PRRS vírusu.
NEB-1 vírus bol ošetrený sériou pasáží v tkanivovej kultúre. Vírus bol najskôr pasážovaný inokuláciou na kultúre a prasačích alveolárnych makrofágoch (SAM = swine alveolar macrophage) a potom sa uskutočnila séria pasáží na MA104 bunkách (dostupné od Microbiological Associates, Inc., Rockville, MD) celkom 94 pasáží. Izolovali sa klony vírusu plakovou purifikáciou a charakterizovali sa ich fenotypové vlastnosti. Očkovací kloň, označený NEB-1-P94, bol vybraný z dôvodu nepárovaného rastu na prasačích alveolárnych makrofágoch, neprítomnosti reakcie s PRRS - špecifickými monoklonálnymi protilátkami SDWO17 (ATCC HB10997), a nevyvolanie choroby prasiatok a brezivých prasníc. NEB-1-P94 sa expandoval (naočkoval) na bunky MA104 a zmrazil sa ako master seed virus” s označením PRRS-MSV-94-1 na použitie pri štúdiu vývoja očkovacích látok.
Vakcína je pripravená použitím MA104 buniek ako substrátu (môžu sa však použiť aj iné bunkové línie podporujúce rast PRRS vírusu ako MARC 145 [dostupné od Dr.Wang, Agriculture Research Station, Clay Center NE]. MA104 bunky sa pestujú do súvislého nárastu vo vhodných nádobách pre tkanivové kultúry, napr. 850 cm3 valcovitých bankách, s použitím Eagleovho minimálneho esenciálneho média (EMEM) obsahujúceho od 5 do 10 % hovädzieho séra, 30 mM HEPES (N-2-hydroxetylpiperazin-N'-2-etanosiričitej kyseliny, 2 mM L-glutamín a antibiotiká (ako 30 g/ml gentamicín). Môžu sa však použiť aj iné médiá na pestovanie tkanivových kultúr, ktoré podporujú rast MA104 buniek, a to napr. Dulbecco modifikované esenciálne médium [DMEM], Médium 199 alebo iné. Súvislé monovrstvy MA104 buniek sú naočkované (inokulované) vírusom NEB-1-P94 v násobnom rade infekcie (MOI = multiplicity of infection) v rozmedzí od 1 : 5 do 1 : 1 000, najradšej v rozsahu 1 : 10. Po nasledujúcej tri až päťdennej inkubácii pri 37 °C sú supernalty odobrané dekantáciou (vírusová kvapalina).
Vírusové kvapaliny sú titrované pri sérii rôznych riedení v EMEM doplnenom ako je vyššie uvedené, inokulácie 0,2 ml na jamku, uskutočňujeme aspoň v štyroch kópiách jamôk nárastu MA104 alebo MARC 145 buniek v 96-jamkovéj platni pre tkanivové kultúry. Tieto kultúry sú inkubované päť dní pri 37 °C, vo vlhčenej komore s 3-5 % C02, pričom sa sleduje cytopatický účinok. Titre (50 % bod ekvivalencie) sú vyrátané podľa metód Spearmana a Karbera (Methods in Virology, Volume IV, K. Maramorosch and H. Koprowski (Eds). Academic Press, New York, 1977). Bunky sa môžu fixovať 80 %-ným acetónom a testovať na nedostatok reaktivity s SDOW17 a pozitívnu reaktivitu s V017 alebo EP147 monoklonálnymi protilátkami (dostupné od Dr.E.Nelson, South Dakota State University, Brookings, SD) (očakáva sa pozitívny výsledok) aby sa potvrdila fenotypová identita vírusu.
Na prípravu mŕtvej vakcíny sú vírusové kvapaliny inkubované s chemickým inaktivačným činidlom. Príklady inaktivačných činidiel zahrňujú formaldehyd, glutaraldehyd, binárny etylénimín alebo beta-propiolakton. Vírusové kvapaliny sa potom uchovávajú pri 4°C, pokým nie sú použité na prípravu vakcín. Vakcína je pripravená zmiešaním vírusovej kvapaliny (obsahujúcej 10® až 10® TCIDbo vírusov; založené na preinaktivačných titroch) s fyziologicky prijateľným rozpúšťadlom (ako EMEM, Hank's Balanced Sált Solution - Hankov rovnovážny soľný roztok, roztok fosfátového surfu) a imunitu - stimulujúca prídavná látka (adjuvant, ako je minerálny olej, rastlinný olej, hydroxid hlinitý, saponín, nejontované detergenty, skvalén, blokové ko-polyméry alebo iné zlúčeniny známe z oboru možno použiť buď samostatne alebo v kombinácii). Dávka vakcíny je obvykle medzi 1 a 5 ml.
Na prípravu živej vakcíny sa vírusové kvapaliny uchovávajú zmrazené pri teplote -50 °C (alebo nižšej teplote) pokial nie sú použité. Vírusové kvapaliny v rozsahu 10* a 10v TCIIT.o/na dávku, najlepšie, ak obsahujú 10® TCIDso/na dávku, sú rieď&né fyziologicky vhodným rozpúšťadlom (ako je EMEIÍ> fBsaňgcrf' rovnovážny soľriý roztok, roztok fosfátového pufru) a fyziologicky vhodná zmes zlúčenín určených na stabilizáciu vírusu. Zlúčeniny, ktoré sú v odbore používané na stabilizáciu vírusov, sa môžu použiť buď samostatne alebo v kombináciách, sú sacharóza, laktóza, N-Z amín, glutatión, neopeptón, želatína, dextrán a tryptón. Vakcína sa pred použitím uchováva zmrazená pri teplote -50°C (alebo nižšej) alebo lyofilizovaná pri 4 °C. Typická veľkosť pripravených dávok vakcíny je v rozsahu od 1 do 5 ml, najlepšie 2 ml.
Na profilaxiu PRRS - zavinenej choroby je vakcína podávaná prasatám orálne, intranasálne alebo parenterálne. Príklady parenterálnej cesty podávania prípravku zahrňujú intradermálne, intramuskulárne, intravenózne, intraperitoneálne a subkutánne cesty podávania.
Ak je táto vakcína podávaná vo forme roztoku, možno ju pripraviť buď vo forme vodného roztoku, sirupu, elixíru alebo tinktúry. Takéto preparáty sú v odbore bežné a sú pripravované rozpúšťaním antigénu a ostatných vhodných aditív vo vhodných rozpúšťadlových systémoch. Vhodnými rozpúšťadlami sú voda, soľný roztok, etanol, etylénglykol, glycerol, Al kvapalina atď. Medzi vhodné aditíva z odboru patria certifikované farbivá, aromatické látky a ochucovadlá, sladidlá, antimikrobiálne konzervačné prostriedky ako je tiomersal (sódium etylmercuritiosalicylate). Takéto roztoky sa môžu stabilizovať napríklad prídavkom čiastočne hydrolyzovanej želatíny, sorbitolu alebo média pre bunečné kultúry a môžu sa tiež pufrovať metódami známymi v odbore pri použití reagencií, na tento účel v odbore bežne používaných, ako sú hydrofosforečňan sodný, dihydrofosforečňan sodný, hydrofosforečňan draselný a/alebo dihydrofosforečňan draselný.
Kvapalné prípravky môžu tiež zahrňovať suspenzie a emulzie. V odbore je napríklad známa príprava suspenzie pri použití koloidného mlynčeka alebo napríklad príprava emulzií pri použití homogenizátora.
Parenterálne formy dávkovania určené pre injekciu do systémov telesných tekutín vyžadujú správnu izotonicitu a pH pufrovania zhodnými s hladinami bravčových telesných tekutín. Parenterálne prípravky sa musia tiež pred použitím sterilizovať.
Izotonicita sa môže nastaviť chloridom sodným alebo inými soľami, ak je to potrebné. Môžu sa použiť aj iné rozpúšťadlá, ako etanol alebo propylénglykol, na zvýšenie rozpustnosti prísad zmesi a stability roztoku. Ďalšie aditíva, ktoré sa môžu použiť do tohto prípravku, zahrňujú dextrózu, bežné antioxidanty a bežné chelatačné činidlá, ako je kyselina etyléndiamíntetraoctová (EDTA).
Podporné očkovanie sa môže podávané dva až štyri týždne po počiatočnej imunizácii. Na prevenciu reprodukčnej choroby sa dodržuje očkovací režim do 6 týždňov pred a 1 týždeň po narodení. Na prevenciu respiračnej choroby prasiatok sa môže vakcinácia uskutočniť tak často, ako je ešte pred dosihnutím veku 3 týždňov. Reakcia na očkovanie sa môže monitorovať stanovením titru protilátok smerovaných proti PRRS vírusu pomocou použitia metódy enzýmovo viazaného imunosorbentu (ELISA = enzyme-linked imunosorbent assay), sérum neutralizačné stanovenie, nepriamej imunofluorescencie alebo metódou westernového prenosu (Western blot).
Očkovací kmeň má fenotypové vlastnosti, ktoré sa môžu využiť pri diagnóze u prasiat na rozlíšenie divokých typov PRRS infekcií verzus samotnému vystaveniu očkovaciemu kmeňu. Zvieratá vystavená poľným kmeňom vírusu PRRS sa môžu rozlíšiť od zvierat vystavených len očkovaciemu kmeňu NEB-1-P94 meraním protilátkovej odpovede k epitopu rozpoznanému pomocou monoklonálnej protilátky (MAb) SD0W17. Prítomnosť protilátok reaktívnych s epitopom SD0W17 indikuje vystaveniu (expozícii) divokému typu vírusu.
Meranie protilátok k epitopu SDOW17 sa môže kombinovať pomocou použitia metódy kompetitívna ELISA. Platne (96-iontové) sú pokryté vírusom NEB-1 PRRS (alebo inými PRRS vírusmi, vyžadujúcimi epitop SDOW17). Potom sa platne inkubujú s bravčovým sérom testovaných zvierat a s enzymaticky značenou (napríklad konjugovanou s chrenovou peroxidázou) SN0W17 monoklonálnou protilátkou. Schopnosť bravčového séra rozpoznať SDOW17 epitop je posudzovaná podľa schopnosti inhibície enzymaticky viazanej SD0W17 MAb naviazanej na platni, ktorá je potom zistiteľná ako nedostatočná konverzia enzýmového farebného substrátu. Inou možnosťou priameho použitia metódy ELISA. Sekvencie aminokyselín zahrňujúce SD0W17 epitop sa môže pripraviť ako syntetický peptid alebo metódami expresie rekombinantnej DNA vo vhodnom vektorovom systéme, ako napr. E.coli. Platne potiahnuté SDOW17 antigénom sú inkubované bravčovým sérom. Väzba bravčových protilátok na antigén SDOW17 sa stanovuje inkubáciou s enzymaticky značeným (konjugovaným) antisérom proti bravčovému imunoglobulínu, nasle duje inkubácia s enzýraovým substrátom a potom detekcia farebnej zmeny.
V nasledujúcich príkladoch je vynález podrobne opísaný. Odborníkom v odbore bude zrejmé, že modifikácia materiálov a metód sa môže uskutočňovať, bez toho aby prišlo k odchýlke od zmyslu a zámeru tejto publikácie.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1: Fenotypová charakteristika NEB-1-P94 z hľadiska rastu na alveolárnych makrofágoch
Očkovací kmeň vírusu NEB-1-94 bol charakterizovaný po piatich pasážach z tzv. master seed vírusu z hľadiska rastu na MA104, MARC 145 a bravčových alveolárnych makrofágoch (SAM). Bravčové alveolárne makrofágy sa získali bronchoalveolárnym výplachom soľným roztokom a následnou eentrifugáciôu peliet buniek. Makrofágy boli resuspendované v EMEM s 10 %ným fetálnym hovädzím sérom a 50 g/ml gentamicínu, potom boli nanesené na 96-jamkové platne pre tkanivové kultúry približne 7 x 10* buniek na jamku. Bunky MA104 a MARC 145 sa tiež naniesli do média na 96-jamkové platne pre tkanivové kultúry (médium EMEM obsahujúce 10 % fetálneho hovädzieho séra, 30 mM HEPES, 2 mM L-glutamínu a 50 g/ml gentamicínu) . Uskutočnila sa séria riedenia vírusov NEB-1-P94 alebo rodičovského vírusu NEB-1 v médiu a 0,2 ml každého riedenia sa naočkovalo do replikovaných jamôk 96-jamkových platní obsahujúcich bunky SAM, MAC104 alebo MARC 145. Kultúry boli inkubované po dobu 5 dní pri 37 °C, 3 % až 5 % C0a vo vlhčenej inkubačnej komore a monitorované na cytopatický efekt, typický pre PRRS vírus. Titre (50 % bod ekvivalencie) boli vyrátané podľa metódy Spearmana a Karbera. NEB-1-P94 vykazoval znížené alebo nemerateľné titre na troch oddelených SAM kultúrach s titrami získanými na bunkách MA104 a MARC 145 (tabuľka 1). To predstavuje fenotypovú zmenu v porovnaní s rodičovským kmeňom, ktorý vykazuje podobné titre na všetkých testovaných kultúrach. Preto bol nepárový rast na bravčových alveolárnych makrofágoch vybraný ako fenotypový marker pre očkovací kmeň NEB-1-P94.
Tabuľka 1. Porovnanie rastu NEB-1-P94 vírusu na rôznych typoch buniek
| Vírus | Titer* na MA104 | Titer* na MARC 145 | Titer* na SAM 7 | Titer* na SAM 8 | Titer* na SAM 22 |
| NEB-1-P94 | 5.3 | 6.1 | 0.2 | 2.5 | < 1.2 |
| NEB/1 | 5.2 | 6.5 | 5.2 | 6.5 | 6.5 |
* Titer = logio TCIDso/ml (limit detekcie v tomto stanovení = 1,2)
Príklad 2: Fenotypová charakterizácia NEB-1-P94 z hľadiska nedostatku virulencie u prasiat
Štyri gnotobiotické prasiatka (vo veku od 7 do 10 dní) od PRRS séronegatívnych svíň boli intranasálne očkované (3 ml/nosnú dierku) master seed vírusom NEB-1-P94 (10s·3 TCIDso/ml). Prasiatka boli sledované z hľadiska klinických príznakov respiračnej choroby a očkovací kmeň vírusu bol spätne izolovaný zo séra päť dní po očkovaní. Sérum od prvej skupiny prasiat sa použilo pre intranasálne očkovanie druhej skupiny gnotobiotických prasiatok, ktoré boli monitorované rovnakým spôsobom. Tento proces sa opakoval do celkového počtu piatich spätných pasáží v prasiatkach s účelom zistenia, či sa očkovací kmeň nemôže vrátiť do virulentného stavu. Očkovací vírus bol odobraný z každej podozrivej pasáže (in vivo), avšak respiračná choroba sa u gnotobiotických prasiatok nepozorovala. Naviac sa vírus z piatej spätnej pasáže prasiatok intranasálne naočkoval jednotýždňovým a trojtýždňovým prasiatkam (podávalo sa približne 10=-3 TCIDso/ml na jedno prasiatko). Zvieratá sa počas 42 dní po očkovaní vírusom monotorovali, pričom sa neobjavili klinické známky choroby (napríklad dlhšie trvajúca horúčka, respiračné príznaky, pľúcna lézia), ktoré by zodpovedali virulantnej PRRS infekcii. Preto bol určený záver, že NEB-1-P94 vírus je avirulentný z hľadiska indukcie (vyvolania) respiračnej choroby prasiatok.
Ďalší NEB-1-P94 vírus bol skúšaný z hľadiska schopnosti zaviniť reprodukčnú chorobu. 85 dní brezivé PRRS seronegatívne svine boli intranasálne očkované (3 ml/na nosnú dierku) master seed očkovacím kmeňom (10*·5 predpokladanom čase a porovnanie, neočkované
TCIDso/ml). Všetky svine porodili v 96 % sa narodilo živých a zdravých. Pre kontrolné svine porodili vrhy, kde 87 % prasiatok bolo živých a zdravých. To poukazuje, že očkovací kmeň
NEB-1-P94 nie je schopný indukovať reprodukčnú chorobu typickú pre virulentný PRRS vírus (viď. príklad 4). Tieto dáta potvrdzujú avirulentný fenotyp očkovacieho kmeňa NEB-1-P94.
Príklad 3: Fenotypová charakterizácia NEB-1-P94 z hľadiska reaktivity PRRS vírus - špecifických monoklonálnych protilátok
Bunky MA104 infikované rodičovským kmeňom NEB-1 alebo očkovacím kmeňom NEB-1-P94 vírusu boli skúšané z hľadiska reaktivity s monoklonálnymi protilátkami špecifickými pre PRRS vírus pomocou nepriamej imunofluorescencie. Skrátka, 96-jamkové dosky súvislých nárastov MA104 buniek boli fixované počas 10 minút 80 %-ným acetónom počas 2 dní po infikácii každým testovaným vírusom. Monovrstvy sa potom inkubovali s monoklonálnymi protilátkami SDWO17, V017 alebo EP147. Po nasledovnom premytí bola zaisťovaná reaktivita protilátok s každým vírusom inkubáciou s fluorescein izotiokyanát konjugovaným anti-myším IgG, po premývaní sa potom mikroskopicky zisťovala fluorescencia. Pozitívna fluorescencia bola zaznamenaná pre rodičovský kmeň NEB-1 pri všetkých troch monoklonálnych protilátkych (Tabuľka 2). Avšak očkovací kmeň NEB-1-P94 stratil reaktivitu s monoklonálnou protilátkou SDOW17, ale bol testovaný pozitívne v prípade ostatných dvoch protilátok. Tieto dáta naznačujú, že kmeň NEB-1-P94 stratil prejavy (expresiu) epitopu rozpoznanej protilátkou SDOW17. Strata reaktivity s touto monoklonálnou protilátkou najpravdepodobnejšie predstavuje genetickú mutáciu v sekvencii RNA NEB-1-P94, ktorá spôsobila zmenenú sekvenciu aminokyselín proteínov v oblasti proteínov obalu bunkového jadra rozpoznanými monoklonálnou protilátkou SDOW17.
Tabuľka 2: Reaktivita rodičovského a očkovacieho kmeňa PRRS so špecifickými monoklonálnymi protilátkami
| Reaktivita s SD0W17 | Reaktivita s V017 | Reaktivita s EP147 | |
| NEB-1-P94 | - | + | + |
| NEB-1 | + | + | + |
Príklad 4: Prevencia reprodukčnej choroby očkovaním svíň kmeňom NEB-1-P94
Vakcína sa pripravila naočkovaním kónických baniek s MA104 bunkami kmeňom NEB-11P94 (4 pasáže z master seed) pri multiplicite infekcie približne 1 : 10 do EMEM média, obsahujúceho 10 % fetálne hovädzie sérum, 2 mM L-glutamínu a 30 g/ml gentamicínu. Kultúry boli inkubované počas 3 dní pri 37 °C a potom boli supernatantové kvapaliny zobrané dekantáciou. Tieto vírusové kvapaliny sa potom zriedili stabilizátorom na 50 % (v/v objemových) (stabilizátor: 75 g/1 tryptónu, 30 g/1 dextránu, 2 g/1 želatíny, 100 g/1 laktózy, 2 g/1 glutamátu sodného, 1,05 g/1 KH^PO^, 2,5 g/1 KaHPO4, 10 g/1 albuminovej frakcie V), potom zmrazili a lyofilizovali. Pre prípad potreby sa vakcína rehydratovala sterilnou deionizovanou vodou a potom sa 2 ml (105·1 TCIDso/ml) podávali mladým prasniciam štyri a šesť týždňov pred pôrodom. V 85. dni tehotenstva boli očkované aj kontrolné neočkované svine infikované challenged intranasálnym podaním vírusu NEB-1 (približne 10®-3 TCID5o). Zvieratá boli monitorované počas siedmych týždňov po pôrode z hľadiska fetálneho alebo neonatálneho úmrtia prisudzovaného PRRS vírusu. PRRS virémia sa vyvinula u 11/12 (92 %) kontrolných sviní a u 100 % ich živo narodených prasiatok. PRRS infekcia počas tehotenstva mal za následok v 16 % straty úmrtím pri pôrode (veľké múmie a mŕtvo narodené prasiatka pri kontrolnej skupine) (Tabuľka 3), porovnané s čistou 6 %-nou stratou úmrtím pri očkovaných sviniach. Naviac výsledkom očkovania bolo tiež 50 %-né terajšie zníženie výskytu slabých a neduživých prasiatok a 94 %-né zníženie prasiatok s nízkou pôrodnou váhou (vážiacich po narodení menej než 1 kg) v porovnaní s kontrolou. Očkovanie zabránilo kongenitálnemu PRRS, čo jr zrejmé pri neprítomnosti PRRS vírusu v krvi alebo tkanivách všetkých prasiatok od imunizovaných svíň a 55 %-nú prevenciu strát úmrtím počas 7 týždňov veku (Tabuľka 3) v porovnaní s kontrolou. Štatisticky významná prevencia strát úmrtím a vírusovej infekcie u očkovaných svíň a ich potomstva jasne demonštrujú efektívnosť tohto očkovania pri prevencii reprodukčnej formy choroby zavinenej PRRS vírusom.
Tabuľka 3. Zhrnutie reprodukčnej choroby po infikácii PRRS vírusom (PRRS Vírus Challenge) u očkovaných verzus kontrolných svíň
| Skupina | Počet svíň prasatá/ pôrod | % veľkej múmie a mŕtvo narodené | % živo narodených ale uhynulých | % slabé a neduživé | % prsiatka s hmotnosťou <2 lbs | Úrmtnosť do 7 týždňov |
| Očkované | 21 (10.8) | 6 % | 2 % | 3 % | 1 % | 17 % |
| Kontrolné | 12 (10.1) | 16 % | 3 % | 6 % | 17 % | 38 % |
lbs = 0,4536 kg
Príklad 5: Prevencia respiračnej choroby očkovaním svíň NEB-1-P94
Vakcína bola pripravená naočkovaním kónických baniek s MA104 bunkami kmeňom NEB-1-P94 (4 pasáže z master seed) pri multiplicite infekcie približne 1 : 10 do EMEM obsahujúceho 10 % fetálneho séra, 2 mM L-glutamínu a 30 g/ml gentamicínu. Kultúry boli inkubované päť dní pri 37 °C a potom sa supernatantové kvapaliny zobrané dekantáciou. Vírusové kvapaliny sa zriedili na 50 % (v/v objemových) stabilizátorom (75 g/1 tryptónu, 30 g/1 dextránu, 2 g/1 želatíny, 100 g/1 laktózy, 2 g/1 glutamánu sodného, 1,05 g/1 KH^PO^, 2,5 g/1 K2HPO4, 10 g/1 albumínovej frakcie V), zmrazili a lyofilizovali. Pre prípad použitia sa vakcína rehydratovala deionizovanou vodou a 1 ml (104·® TCDIso/ml) sa podával intramuskulárne trojtýždňovým PRRS séronegatívnym prasiatkam.
Štyri týždne po očkovaní boli prasiatka infikované (chalenged) virulentným vírusom NEB-1-P94 intranasálnou cestou, ako bolo opísané v prípade prasnic (Príklad 4). Počas štrnástich dní po infikácii boli prasiatka monitorované z hľadiska príznakov respiračnej choroby. U všetkých neočkovaných prasiatok sa vyvinuli príznaky respiračnej choroby. U všetkých neočkovaných prasiatok sa vyvinuli príznaky respiračnej choroby, oproti tomu u očkovaných zvierat len u 8 % (3/40). Výsledkom očkovania bolo štatisticky významné zníženie horúčky, respiračných príznakov a klinickej choroby u očkovaných zvierat v porovnaní s kontrolou (Tabuľka 4). Táto štúdia jasne demonštruje účinnosť očkovania pri prevencii respiračnej choroby u mladých prasiat, zavinenej vírusom PRRS.
12a
TABUĽKA 4: ZHRNUTIE VÝSLEDKOV KLINICKEJ CHOROBY OČKOVANÝCH A KONTROLNÝCH ZVIERAT PO INFIKÄCII PRRS VÍRUSOM
| percento zvierat s klinickými príznakmi v daných dňoch η | v | 33 | o | A Ä | ND | 33 | o | |||
| co | 30 | CM | 17 | 27 | o | |||||
| CM v— | 23 | to | 20 | v | 33 | o | ||||
| ▼— | 40 1 1 | m | f bCO | o | 40 | CM | ||||
| o | 47 | IO | 47 | o | 50 | CM | ||||
| m | 40 | CM | 57 | 14 | 50 | CM | ||||
| CO | 37 | o | 37 | CM | 33 | O | ||||
| 40 | CO | 50 | 20 | 47 | CM | |||||
| co | 09 | CM | | I 99 I | o | 60 | O | ||||
| m | 37 | O | 73 | o | 50 | O | ||||
| 53 | CO | 83 | 14 | 09 | O | |||||
| CO | 57 | CO | 73 | 20 | 23 | CM | ||||
| CM | o | O | 43 | 20 | o | O | ||||
| - | o | O | b- | 14 | o | O | ||||
| O | o | O | CO | o | o | O | ||||
| • »4 P • u* •H P 0) 0) □s | Kontroly | Očkovania | o m 3 r+ *4 O X | Kontroly | Očkovania | (Klinická ch. I | Kontroly | I Očkovania |
ND = Nedostupné dáta Respir.príz. = Respiračné príznaky
Kontroly n=30 Hor.>104,5°F = Horúčka>104,5°F
Očkovania n=40 Klinická ch. = Klinická choroba
Teplota 104,5°F = 40 °C
Claims (9)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Vakcína proti reprodukčnému a respiračnému syndrómu prasiat (PRRS), vhodná na použitie pri ochrane svíň., proti tomuto syndrómu obsahuje vírus PRRS, pritom je nevyhnutné, aby sa tento vírus zhodoval s izolátom NEB-1-P94, ktorý je uložený v Američan Type Culture Collection pod číslom prírastku VR-2525.
- 2. Vakcína podlá nároku 1, vyznačujúca sa tým, že je v živej, usmrtenej alebo modifikovanej živej (oslabenej) forme.
- 3. Vakcína podľa nároku 2, vyznačujúca sa tým, že vírusový agens je živý modifikovaný (oslabený) a je v kvapalnej, zmrazenej alebo vysušené j f orme.
- 4. Vakcína podľa nároku 1, vyznačujúca sa tým, že obsahuje 10*·° až 109'° TCID PRRS vírusu v ml.
- 5. Vakcína podľa nároku 1, vyznačujúca sa tým, že môže byť odlíšená od divých typov foriem vírusov na základe nedostatku reaktivity s monoklonálnymi protilátkami SD0W17 a nedostatkom schopnosti rastu na bunkách prasačích alveolárnych makrofágoch.
- 6. Spôsob ochrany prasiat pred klinickou chorobou zavinenou vírusom reprodukčného a respiračného syndrómu prasiat, vyznačujúci sa tým, že sa podáva účinné množstvo vakcíny podľa nároku 1 prasatám, ak je potrebné opatrenie proti chorobe zavinenej uvedeným vírusom.
- 7. Spôsob podľa nároku 6, vyznačujúci sa tým, že uvedená vakcína sa podáva orálne, intranasálne, intramuskulárne, intradermálne, intravenózne alebo subkutánne.
- 8. Spôsob diagnózy infekcie len vakcínou vírusu podía nároku 1 verzus infekcia divokým typom vírusu, vyznačujúci sa tým, že je založený na izolácii vírusu zo séra alebo tkaniva infikovaných prasiat a fenotypovej charakterizácii, ako je špecifikované v nároku 5.
- 9. Spôsob podľa nároku 8, vyznačujúci sa tým, že diagnóza infekcie očkovacím vírusom alebo divokým typom vírusu je založená na meraní protilátok v sére infikovaných sviní, ktoré sú reaktívne s proteínovým epitopom vírusu PRRS rozpoznateľným pomocou monoklonálnej protilátky SDOW17.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US60980696A | 1996-03-01 | 1996-03-01 | |
| PCT/US1997/002562 WO1997031651A1 (en) | 1996-03-01 | 1997-02-26 | Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK119498A3 true SK119498A3 (en) | 1999-07-12 |
Family
ID=24442410
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK1194-98A SK119498A3 (en) | 1996-03-01 | 1997-02-26 | Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0894007A1 (sk) |
| JP (1) | JP3135069B2 (sk) |
| KR (1) | KR100297537B1 (sk) |
| CN (1) | CN1165342C (sk) |
| AR (1) | AR006023A1 (sk) |
| AU (1) | AU2277497A (sk) |
| BG (1) | BG64693B1 (sk) |
| BR (1) | BR9708443B1 (sk) |
| CA (1) | CA2248182C (sk) |
| CO (1) | CO4600644A1 (sk) |
| CZ (1) | CZ273798A3 (sk) |
| EE (1) | EE04741B1 (sk) |
| HU (1) | HUP9901958A3 (sk) |
| MY (1) | MY115070A (sk) |
| PL (1) | PL328627A1 (sk) |
| RU (1) | RU2187333C2 (sk) |
| SK (1) | SK119498A3 (sk) |
| WO (1) | WO1997031651A1 (sk) |
| ZA (1) | ZA971663B (sk) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0839912A1 (en) | 1996-10-30 | 1998-05-06 | Instituut Voor Dierhouderij En Diergezondheid (Id-Dlo) | Infectious clones of RNA viruses and vaccines and diagnostic assays derived thereof |
| CA2440933A1 (en) | 1998-12-22 | 2000-06-22 | Pfizer Products Inc. | An infectious cdna clone of north american porcine reproductive and respiratory syndrome (prrs) virus and uses thereof |
| EP1157121B1 (en) | 1999-03-08 | 2013-04-24 | Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH | Prrsv replicon |
| JP4778620B2 (ja) | 1999-04-22 | 2011-09-21 | ユナイテッド ステイツ デパートメント オブ アグリカルチャー | 分離株ｊａ−１４２に基づく、豚繁殖・呼吸障害症候群ワクチン |
| EP1781327A4 (en) | 2004-06-18 | 2009-02-25 | Univ Minnesota | IDENTIFICATION OF VIRAL INFECTED AND VACCINATED ORGANISMS |
| US7632636B2 (en) | 2004-09-21 | 2009-12-15 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Porcine reproductive and respiratory syndrome isolates and methods of use |
| PL2369001T3 (pl) | 2005-06-24 | 2017-06-30 | Regents Of The University Of Minnesota | Wirusy PRRS, ich klony zakaźne, mutanty i sposoby stosowania |
| RU2354333C1 (ru) * | 2007-07-24 | 2009-05-10 | ФГОУ ВПО Омский государственный аграрный университет | Способ ранней диагностики послеродовых заболеваний у свиноматок |
| CN101612395B (zh) * | 2008-06-24 | 2012-02-08 | 扬州优邦生物制药有限公司 | 一种培养敏感细胞生产蓝耳病疫苗的方法 |
| TWI627281B (zh) | 2009-09-02 | 2018-06-21 | 百靈佳殷格翰家畜藥品公司 | 降低ｐｃｖ－２組合物殺病毒活性之方法及具有改良免疫原性之ｐｃｖ－２組合物 |
| UA117272C2 (uk) | 2011-02-17 | 2018-07-10 | Бьорінгер Інгельхайм Ветмедіка Гмбх | Новий європейський штам prrsv |
| CN103370077B (zh) | 2011-02-17 | 2016-10-26 | 贝林格尔.英格海姆维特梅迪卡有限公司 | 猪繁殖与呼吸综合征病毒的商业化规模生产方法 |
| WO2013017568A1 (en) | 2011-07-29 | 2013-02-07 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | INFECTIOUS cDNA CLONE OF EUROPEAN PRRS VIRUS AND USES THEREOF |
| US9187731B2 (en) | 2011-07-29 | 2015-11-17 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | PRRS virus inducing type I interferon in susceptible cells |
| KR101300528B1 (ko) * | 2011-10-05 | 2013-09-02 | 캔 테크놀로지스 인코포레이티드 | 액티노바실러스 플루로뉴모니애 감염 방지 및 처치용 조성물 |
| CN105073130A (zh) | 2013-03-15 | 2015-11-18 | 勃林格殷格翰动物保健公司 | 猪生殖与呼吸综合征病毒、组合物、疫苗及使用方法 |
| EP4012025A1 (en) * | 2020-12-10 | 2022-06-15 | Univerzita Palackého v Olomouci | Transport medium for samples containing nucleic acids and/or proteins |
| CZ309704B6 (cs) * | 2020-12-10 | 2023-08-09 | Univerzita Palackého v Olomouci | Transportní médium pro transport a skladování virů |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6042830A (en) * | 1992-08-05 | 2000-03-28 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Viral agent associated with mystery swine disease |
| HU220113B (hu) * | 1991-10-14 | 2001-11-28 | Akzo N.V. | Sertések reproduktív és légzőszervi tünetegyüttese elleni vakcina, eljárás előállítására és alkalmazása |
| FR2686097B1 (fr) * | 1992-01-14 | 1994-12-30 | Rhone Merieux | Preparation d'antigenes et de vaccins de virus de la mystery disease, antigenes et vaccins obtenus pour la prevention de cette maladie. |
| US5695766A (en) * | 1992-10-30 | 1997-12-09 | Iowa State University Research Foundation | Highly virulent porcine reproductive and respiratory syndrome viruses which produce lesions in pigs and vaccines that protect pigs against said syndrome |
| DE69426228T2 (de) * | 1993-02-08 | 2001-03-01 | Bayer Ag | Verfahren zum Vermehren des das Reproduktions- und Atemwegs-Syndrom verursachenden Schweinevirus und dessen Verwendung als Impfstoff. |
| ES2074950B1 (es) | 1993-09-17 | 1996-03-16 | Iberica Cyanamid | Vacuna para la prevencion de la enfermedad reproductiva y respiratoria de la cerda. |
| DE69522984T2 (de) * | 1994-04-11 | 2002-04-25 | Akzo Nobel Nv | Europäische Vakzinstämme des Fortplanzungs-Atmungs-Syndromsvirus des Schweins |
| US5690940A (en) * | 1995-06-21 | 1997-11-25 | Regents Of The University Of Minnesota | Low pathogencity PRRS live virus vaccines and methods of preparation thereof |
-
1997
- 1997-02-26 CO CO97010338A patent/CO4600644A1/es unknown
- 1997-02-26 SK SK1194-98A patent/SK119498A3/sk unknown
- 1997-02-26 WO PCT/US1997/002562 patent/WO1997031651A1/en not_active Ceased
- 1997-02-26 RU RU98118186/13A patent/RU2187333C2/ru active
- 1997-02-26 CA CA002248182A patent/CA2248182C/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-26 JP JP09530994A patent/JP3135069B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1997-02-26 EP EP97906016A patent/EP0894007A1/en not_active Withdrawn
- 1997-02-26 BR BRPI9708443-3A patent/BR9708443B1/pt not_active IP Right Cessation
- 1997-02-26 PL PL97328627A patent/PL328627A1/xx unknown
- 1997-02-26 CZ CZ982737A patent/CZ273798A3/cs unknown
- 1997-02-26 ZA ZA9701663A patent/ZA971663B/xx unknown
- 1997-02-26 MY MYPI97000727A patent/MY115070A/en unknown
- 1997-02-26 KR KR1019980706853A patent/KR100297537B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-26 AU AU22774/97A patent/AU2277497A/en not_active Abandoned
- 1997-02-26 EE EE9800267A patent/EE04741B1/xx unknown
- 1997-02-26 HU HU9901958A patent/HUP9901958A3/hu unknown
- 1997-02-26 CN CNB971941092A patent/CN1165342C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1997-02-27 AR ARP970100790A patent/AR006023A1/es not_active Application Discontinuation
-
1998
- 1998-09-29 BG BG102809A patent/BG64693B1/bg unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0894007A1 (en) | 1999-02-03 |
| EE04741B1 (et) | 2006-12-15 |
| CA2248182A1 (en) | 1997-09-04 |
| CZ273798A3 (cs) | 1999-02-17 |
| HUP9901958A2 (hu) | 1999-10-28 |
| KR19990087432A (ko) | 1999-12-27 |
| JPH11506122A (ja) | 1999-06-02 |
| BR9708443B1 (pt) | 2012-06-12 |
| JP3135069B2 (ja) | 2001-02-13 |
| BG102809A (en) | 1999-05-31 |
| ZA971663B (en) | 1997-08-26 |
| MX9807083A (es) | 1998-12-31 |
| CA2248182C (en) | 2004-04-20 |
| AU2277497A (en) | 1997-09-16 |
| WO1997031651A1 (en) | 1997-09-04 |
| MY115070A (en) | 2003-03-31 |
| KR100297537B1 (ko) | 2001-10-26 |
| BR9708443A (pt) | 1999-08-03 |
| AR006023A1 (es) | 1999-07-21 |
| RU2187333C2 (ru) | 2002-08-20 |
| PL328627A1 (en) | 1999-02-15 |
| CN1216922A (zh) | 1999-05-19 |
| EE9800267A (et) | 1999-02-15 |
| HUP9901958A3 (en) | 2000-04-28 |
| BG64693B1 (bg) | 2005-12-30 |
| CO4600644A1 (es) | 1998-05-08 |
| CN1165342C (zh) | 2004-09-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5866401A (en) | Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine | |
| Wensvoort et al. | Bovine viral diarrhoea virus infections in piglets born to sows vaccinated against swine fever with contaminated vaccine | |
| RU2192887C2 (ru) | Вакцина против репродуктивного и респираторного синдрома свиней (prrs), способ иммунизации свиньи против prrs, способ получения вакцины, выделенный и очищенный штамм вируса репродуктивного и респираторного синдрома свиней | |
| US5698203A (en) | European vaccine strains of the Porcine Reproductive Respiratory Syndrome virus (PRRSV) | |
| Afshar et al. | Viruses associated with bovine semen. | |
| JP2738524B2 (ja) | ウイルスに感染した動物とワクチン接種した動物を区別する方法 | |
| EP0830142B1 (en) | Prrs (porcine reproductive and respiratory syndrome) virus vaccine | |
| US6001370A (en) | Attenuated strain of the virus causing the porcine reproductive respiratory syndrome (PRRS), and vaccines | |
| SK119498A3 (en) | Porcine reproductive and respiratory syndrome vaccine | |
| KR101152012B1 (ko) | 돼지 생식기 및 호흡기 증후군 바이러스 균주 및 조성물 | |
| Aynaud | Principles of vaccination | |
| US20030017448A1 (en) | Method of prophylaxis and treatment of porcine reproductive and respiratory syndrome | |
| US7824689B2 (en) | Chicken astrovirus type 2 | |
| PL209994B1 (pl) | Wariant wirusa zakaźnego zapalenia torby Fabrycjusza (IBDV), szczepionki, sposób wytwarzania wariantu IBDV, sposób wytwarzania szczepionek, zastosowanie wariantów IBDV | |
| Donald | Epidemiology and diagnosis of equid herpesviruses 1 and 4 in horses in New Zealand | |
| RU2269361C2 (ru) | Вакцина ассоциированная эмульсионная инактивированная против репродуктивно-респираторного синдрома и парвовирусной инфекции свиней | |
| KR20240028924A (ko) | 높은 중화 항체를 유도하는 돼지 유행성 설사병 바이러스 및 불활화 백신 조성물 | |
| MXPA98007083A (en) | Vaccine against the reproductive and respiratory syndrome porc | |
| Tielen | PW de Leeuw¹, JM Wijsmuller2, JW Zantinga³ and | |
| MXPA97010149A (en) | Live pathogenicity live virus vaccines and methods of preparation of mis | |
| MXPA97007302A (en) | New attenuated cepa of the virus causing the respiratory and reproductive swine syndrome (prrs), vaccines and diagnostic media obtained with the same and the procedures for your obtenc |