RU2372355C1 - Пептид, обладающий защитным действием против болезни альцгеймера - Google Patents
Пептид, обладающий защитным действием против болезни альцгеймера Download PDFInfo
- Publication number
- RU2372355C1 RU2372355C1 RU2008126082/04A RU2008126082A RU2372355C1 RU 2372355 C1 RU2372355 C1 RU 2372355C1 RU 2008126082/04 A RU2008126082/04 A RU 2008126082/04A RU 2008126082 A RU2008126082 A RU 2008126082A RU 2372355 C1 RU2372355 C1 RU 2372355C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dimethylformamide
- glu
- polymer
- solution
- mmol
- Prior art date
Links
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 title claims abstract description 25
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 25
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 title claims abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 501
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 113
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 110
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 63
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 40
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 21
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 21
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 20
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- HNICLNKVURBTKV-NDEPHWFRSA-N (2s)-5-[[amino-[(2,2,4,6,7-pentamethyl-3h-1-benzofuran-5-yl)sulfonylamino]methylidene]amino]-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)pentanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)NS(=O)(=O)C1=C(C)C(C)=C2OC(C)(C)CC2=C1C HNICLNKVURBTKV-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 7
- KLBPUVPNPAJWHZ-UMSFTDKQSA-N (2r)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-tritylsulfanylpropanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)SC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 KLBPUVPNPAJWHZ-UMSFTDKQSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- UMRUUWFGLGNQLI-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCCCNC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 UMRUUWFGLGNQLI-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 5
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 5
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 5
- 230000006886 spatial memory Effects 0.000 description 5
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 4
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- SWZCTMTWRHEBIN-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C1=CC=C(O)C=C1 SWZCTMTWRHEBIN-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 3
- KSDTXRUIZMTBNV-INIZCTEOSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)butanedioic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 KSDTXRUIZMTBNV-INIZCTEOSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 125000006307 alkoxy benzyl group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 210000000956 olfactory bulb Anatomy 0.000 description 3
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 3
- 238000002636 symptomatic treatment Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- NDKDFTQNXLHCGO-UHFFFAOYSA-N 2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)NCC(=O)O)C3=CC=CC=C3C2=C1 NDKDFTQNXLHCGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 2
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 229960004373 acetylcholine Drugs 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011303 olfactory bulbectomy Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000012549 training Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- MBDOYVRWFFCFHM-SNAWJCMRSA-N (2E)-hexenal Chemical compound CCC\C=C\C=O MBDOYVRWFFCFHM-SNAWJCMRSA-N 0.000 description 1
- ZPGDWQNBZYOZTI-SFHVURJKSA-N (2s)-1-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl)pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 ZPGDWQNBZYOZTI-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- MGHMWKZOLAAOTD-DEOSSOPVSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@H](C(=O)O)CC1=CNC2=CC=CC=C12 MGHMWKZOLAAOTD-DEOSSOPVSA-N 0.000 description 1
- UGNIYGNGCNXHTR-SFHVURJKSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-methylbutanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 UGNIYGNGCNXHTR-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- SJVFAHZPLIXNDH-QFIPXVFZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C1=CC=CC=C1 SJVFAHZPLIXNDH-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 1
- CBPJQFCAFFNICX-IBGZPJMESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-methylpentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 CBPJQFCAFFNICX-IBGZPJMESA-N 0.000 description 1
- QXVFEIPAZSXRGM-DJJJIMSYSA-N (2s,3s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-methylpentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 QXVFEIPAZSXRGM-DJJJIMSYSA-N 0.000 description 1
- DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 1,1-ethanedithiol Chemical compound CC(S)S DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- PXZOVKDQDSCCNS-UHFFFAOYSA-N C(C)(C)[SiH](C(C)C)C(C)C.C(C)(S)S.O.C1(=CC=CC=C1)O.C1(=CC=CC=C1)SC.FC(C(=O)O)(F)F Chemical compound C(C)(C)[SiH](C(C)C)C(C)C.C(C)(S)S.O.C1(=CC=CC=C1)O.C1(=CC=CC=C1)SC.FC(C(=O)O)(F)F PXZOVKDQDSCCNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000026139 Memory disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012347 Morris Water Maze Methods 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 238000011785 NMRI mouse Methods 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N acetylcholine Chemical compound CC(=O)OCC[N+](C)(C)C OIPILFWXSMYKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000034337 acetylcholine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020000715 acetylcholine receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001713 cholinergic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000544 cholinesterase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000000848 glutamatergic effect Effects 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- -1 hexafluorophosphate Chemical compound 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 230000030214 innervation Effects 0.000 description 1
- 238000002690 local anesthesia Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- BUGYDGFZZOZRHP-UHFFFAOYSA-N memantine Chemical compound C1C(C2)CC3(C)CC1(C)CC2(N)C3 BUGYDGFZZOZRHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004640 memantine Drugs 0.000 description 1
- 230000006984 memory degeneration Effects 0.000 description 1
- 206010027175 memory impairment Diseases 0.000 description 1
- 208000023060 memory loss Diseases 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 229940053973 novocaine Drugs 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 230000001242 postsynaptic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005500 uronium group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Изобретение относится к новому биологически активному соединению -пептиду, обладающему защитным действием против болезни Альцгеймера формулы Glu-Trp-Asp-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys-Arg-Ser-Glu-Arg-Phe-Tyr-Glu-Cys-Cys-Lys-Glu и может быть использовано для создания препарата для иммунопрофилактики болезни Альцгеймера. 1 табл.
Description
Изобретение относится к области биохимии, конкретно к новому биологически активному соединению - пептиду, обладающему защитным действием против болезни Альцгеймера, и может быть использовано для создания препарата для иммунопрофилактики болезни Альцгеймера.
Болезнь Альцгеймера (БА) представляет собой тяжелое нейродегенеративное заболевание, приводящее к потере памяти, психическим расстройствам и неизбежной смерти. Одна из современных гипотез предполагает, что пептиды β-амилоидного ряда, в частности βА-(1-42), связываясь с α7-ацетилхолиновым рецептором (АХР), образуют скопления в виде амилоидных бляшек, что приводит к разрушению мозговой ткани.
В настоящее время разработаны препараты, которые используются в основном для симптоматического лечения БА. Использование этих препаратов позволяет в некоторой мере задержать процесс прогрессирования болезни, но не излечить ее.
Наиболее широко применяемым классом препаратов для симптоматического лечения БА методами компенсаторной терапии являются ингибиторы холинэстераз (ИХЭ). Эти препараты увеличивают время действия нейромедиатора ацетилхолина на постсинаптические рецепторы, что ведет к увеличению холинергической иннервации. Эффективность применения ИХЭ существенно снижается на поздних стадиях БА. ИХЭ характеризуются достаточно высокой токсичностью и рядом других побочных эффектов [Watkins Р.В. et al. J. Am. Med. Assoc. 1994. V.271. P.992-998].
Для симптоматического лечения известен препарат другого класса, модулятор глутаматергической системы, мемантин [Raina P. at all // Ann. Intern. Med. 2008. V.148(5). P.379-397]. Наилучшие результаты дает его применение у больных с мягкой и умеренной деменцией альцгеймеровского типа, вместе с тем препарат не обеспечивает полного излечивания БА.
Важным недостатком компенсаторной терапии, является то, что разрабатываемые внутри данного направления методы не ликвидируют причину предполагаемого в настоящее время механизма развития БА-скопления β-амилоида (βA) в виде амилоидных бляшек, разрушающие структуру мозговой ткани. Поэтому интенсивные исследования ведутся по поиску лекарств для радикальной терапии БА, способных не только компенсировать симптоматические нарушения, но и излечивать заболевание.
В последние годы активно разрабатываются и находятся на стадии клинических испытаний иммунотерапевтические методы предотвращения развития БА, направленные на коррекцию содержания в организме βA. Инъекции препаратами на основе βА (главного структурного компонента амилоидных бляшек) вызывают образование специфических антител, которые способствуют удалению βА из мозга [Shenk D. // Nat. Rev. Neurosci. 2002. V.3(10). P.824-828]. Однако клинические испытания таких препаратов показали, что у 6% испытуемых больных БА вызвала воспалительные реакции в мозге. Данные результаты ставят под сомнение безопасность использования препаратов на основе βА в качестве иммунотерапевтических средств.
Известен наиболее близкий к заявленному препарат, обладающий защитным действием против болезни Альцгеймера, являющийся конъюгатом пептида формулы Gln-Met-Gln-Glu-Ala-Asp-Ile-Ser-Gly-Val-Pro-Gly-Lys-Arg-Ser-Glu-Arg-Phe-Tyr с гемоцианином улитки (KLH) (I), [О.М.Вольпина с соавт.// Биоорганическая химия. 2008. Т.34. №1. С.50-55]. Пептид, входящий в состав препарата (I) представляет собой синтетическую конструкцию, объединяющую два гидрофильных экстрацеллюлярных участка α7-субъединицы АХР. Иммунизация данным препаратом предотвращает ухудшение памяти у 50% мышей с экспериментально индуцированной БА. Вместе с тем иммунизация мышей препаратом (I) приводит к снижению пространственной памяти у 27% контрольных животных.
Изобретение решает задачу расширения ассортимента препаратов, обладающих защитным действием против болезни Альцгеймера.
Поставленная задача решается за счет пептида, обладающего защитным действием против болезни Альцгеймера, формулы
Glu-Trp-Asp-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys-Arg-Ser-Glu-Arg-Phe-Tyr-Glu-Cys-Cys-Lys-Glu
Сущностью изобретения является новый пептидный фрагмент α7-субъединицы АХР формулы Glu-Trp-Asp-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys-Arg-Ser-Glu-Arg-Phe-Tyr-Glu-Cys-Cys-Lys-Glu (II), получаемый с помощью стандартных методик пептидного синтеза. Предлагаемый препарат относится к имуннотерапевтическим средствам лечения БА. Известно, что промежуточным этапом при накоплении βА в клетке является образование его комплекса с α7 типом АХР [Nagele R.G., D'Andrea M.R., Anderson W.J., Wang H.Y. // Neuroscience. 2002. V.110. P.199-2 II]. При иммунизации заявляемым синтетическим пептидом вырабатываются антитела, способные связываться с α7 типом АХР и препятствовать формированию комплекса с βА и, следовательно, образованию амилоидных бляшек. Техническим результатом изобретения является отсутствие побочных эффектов при использовании пептида, узкая направленность иммунного ответа, высокая эффективность.
Иммунизация заявляемым препаратом (II) по сравнению с препаратом (I) препятствует ухудшению пространственной памяти у большего числа животных с экспериментально индуцированной БА (82%) и предотвращает увеличение мозгового уровня βА. Вместе с тем иммунизация данным пептидом не приводит к ухудшению пространственной памяти у здоровых животных.
В качестве модели БА используют мышей, перенесших операцию удаления обонятельных луковиц головного мозга (ольфакторной бульбэктомии), после которой у животных развиваются морфологические и поведенческие признаки БА.
Синтез целевого продукта осуществляют твердофазным методом с использованием алкоксибензильного полимера. Конденсации осуществляют при помощи гексафторфосфата бензтриазол-1-ил-N-окси-бис(диметиламино)урония. Для отделения пептида от полимерного носителя и конечного деблокирования используют трифторуксусную кислоту с добавкой тиоанизола, фенола, этандитиола, триизопропилсилана и воды.
Структуру и гомогенность целевого продукта подтверждают данными аминокислотного анализа, масс-спектра и высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Пример 1. Синтез пептида Glu-Trp-Asp-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys-Arg-Ser-Glu-Arg-Phe-Tyr-Glu-Cys-Cys-Lys-Glu.
Операция 1.
0,3 г алкоксибензильного полимера с содержанием ОН-групп 0,5 ммоль/г полимера помещают в проточный реактор, промывают диметилформамидом (2×10 мл), снова добавляют 10 мл диметилформамида и оставляют набухать в течение 5-10 мин, затем диметилформамид удаляют. Синтез пептида ведут в проточном реакторе при комнатной температуре.
Операция 2. Получение Fmoc-Glu(OBut)-полимера (I).
В 4 мл диметилформамида растворяют 0,638 г (1,5 ммоль) Fmoc-Glu(OBut)-OH, добавляют 116 мкл (0,75 ммоль) N,N'-диизопропилкарбодиимида и 1,8 мг (0,015 ммоль) 4-диметиламинопиридина. Раствор перемешивают при температуре 0°С. Через 10 мин раствор добавляют к алкоксибензильному полимеру, находящемуся в проточном реакторе. Полученную смесь выдерживают при периодическом перемешивании 12 часов. Полученный Fmoc-Glu(OBut)-полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл) и снова диметилформамидом (2×10 мл). Непрореагировавшие аминогруппы ацилируют смесью 2 мл уксусного ангидрида, 2 мл пиридина и 6 мл диметилформамида в течение 2 ч. Промывки повторяют. Содержание Fmoc-Glu(OBut) в продукте составляет 1,05 ммоль на 0,3 г полимера.
Операция 3. Получение Fmoc-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (II).
а) Полученный Fmoc-Glu(OBut)-полимер (I) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,211 г (0,45 ммоль) Fmoc-Lys(Boc)-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 4. Получение Fmoc-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (III).
а) Fmoc-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (II) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,264 г (0,45 ммоль) Fmoc-Cys(Trt)-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 5. Получение Fmoc-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (IV).
а) Fmoc-Cys(Trt)-Lys(Вос)-Glu(OBut)-полимер (III) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,264 г (0,45 ммоль) Fmoc-Cys(Trt)-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 6. Получение Fmoc-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (V).
а) Fmoc-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (IV) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,192 г (0,45 ммоль) Fmoc-Glu(OBut)-ОН и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полученный полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 7. Получение Fmoc-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (VI).
а) Fmoc-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (V) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,207 г (0,45 ммоль) Fmoc-Tyr(But)-ОН и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 8. Получение Fmoc-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Вос)-Glu(OBut)-полимера (VII).
а) Fmoc-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Вос)-Glu(OBut)-полимер(VI) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,174 г (0,45 ммоль) Fmoc-Phe-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 9. Получение Fmoc-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Вос)-Glu(OBut)-полимера(VIII).
a) Fmoc-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (VII) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,292 г (0,45 ммоль) Fmoc-Arg(Pbf)-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 10. Получение Fmoc-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)- Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (IX).
а) Fmoc-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (VIII) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,192 г (0,45 ммоль) Fmoc-Glu(OBut)-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 11. Получение Fmoc-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (X).
а) Fmoc-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (IX) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин., промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,173 г (0,45 ммоль) Fmoc-Ser(But)-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин., промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 12. Получение Fmoc-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Вос)-Glu(OBut)-полимера (XI).
а) Fmoc-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (X) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,292 г (0,45 ммоль) Fmoc-Arg(Pbf)-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 13. Получение Fmoc-Lys(Вос)-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (XII).
а) Fmoc-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (XI) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,211 г (0,45 ммоль) Fmoc-Lys(Boc)-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин., промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 14. Получение Fmoc-Gly-Lys(Вос)-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (XIII).
а) Fmoc-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (XII) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин., промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,134 г (0,45 ммоль) Fmoc-Gly-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин., промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 15. Получение Fmoc-Pro-Gly-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (XIV).
а) Fmoc-Gly-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (XIII) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,152 г (0,45 ммоль) Fmoc-Pro-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин., промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 16. Получение Fmoc-Ile-Pro-Gly-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (XV).
а) Fmoc-Pro-Gly-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (XIV) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,159 г (0,45 ммоль) Fmoc-Ile-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 17. Получение Fmoc-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys(Вос)-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (XVI).
а) Fmoc-Ile-Pro-Gly-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (XV) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,134 г (0,45 ммоль) Fmoc-Gly-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 18. Получение Fmoc-Val-Gly-Ilr-Pro-Gly-Lys(Вос)-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (XVII).
а) Fmoc-Gly-Ile-Pro-Gly-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Вос)-Glu(OBut)-полимер (XVI) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,153 г (0,45 ммоль) Fmoc-Val-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 19. Получение Fmoc-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys(Вос)-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (XVIII).
а) Fmoc-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (XVII) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,159 г (0,45 ммоль) Fmoc-Leu-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин., промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 20. Получение Fmoc-Asp(But)-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (XIX).
а) Fmoc-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (XVIII) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,185 г (0,45 ммоль) Fmoc-Asp(But)-ОН и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин., промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 21. Получение Fmoc-Trp-Asp(But)-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys(Вос)-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимера (XX).
а) Fmoc-Asp(But)-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (XIX) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,192 г (0,45 ммоль) Fmoc-Trp-OH и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 22. Получение Fmoc-Glu(But)-Trp-Asp(But)-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys(Boc)-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(Bul)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Clu(OBut)-полимера (XXI).
а) Fmoc-Trp-Asp(But)-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Arg(Pbf)-Ser(But)-Glu(OBut)-Arg(Pbf)-Phe-Tyr(But)-Glu(OBut)-Cys(Trt)-Cys(Trt)-Lys(Boc)-Glu(OBut)-полимер (XX) обрабатывают 10 мл 20%-ного раствора пиперидина в диметилформамиде 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), раствором диоксана в воде (2:1) (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
б) 0,192 г (0,45 ммоль) Fmoc-Glu(But)-ОН и 0,145 г (0,45 ммоль) TBTU растворяют в 4 мл диметилформамида. В раствор добавляют 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина и перемешивают при 0°С в течение 10 мин. Раствор добавляют к полимеру и при периодическом перемешивании оставляют на 2 ч. Полимер промывают диметилформамидом (2×10 мл).
в) Полимер обрабатывают раствором 43 мкл (0,45 ммоль) уксусного ангидрида и 77 мкл (0,45 ммоль) N-этилдиизопропиламина в 4 мл диметилформамида в течение 20 мин, промывают диметилформамидом (2×10 мл), этанолом (2×10 мл), снова диметилформамидом (2×10 мл).
Операция 23. Получение целевого пептида Glu-Trp-Asp-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys-Arg-Ser-Glu-Arg-Phe-Tyr-Cys-Cys-Lys-Glu (XXII). 0,3 г пептидил-полимера (XXI) обрабатывают 4 мл смеси трифторуксусная кислота-тиоанизол-фенол-вода-этандитиол-триизопропилсилан в объемном соотношении 81,5:5:5:5:2,5:1 в течение 2 ч. Полимер отфильтровывают, раствор упаривают, сухой остаток промывают сухим диэтиловым эфиром (2×50 мл). Растворяют в 10-% уксусной кислоте и очищают на препаративной ВЭЖХ при следующих условиях: колонка Phenomenex (США) Jupiter 10µ C18 300А (250×10 мм), растворитель А: 0,1%-ная трифторуксусная кислота в воде, растворитель Б: 0,1%-ная трифторуксусная кислота в ацетонитриле, градиент растворителя А в Б - 10-70% за 1 ч, скорость потока элюента - 3 мл/мин, выход пептида регистрируют при оптической длине волны 226 нм. Собранную после ВЭЖХ фракцию, содержащую целевой продукт лиофилизируют.
Данные аминокислотного анализа Asp 1,0(1), Ser 0,8(1), Glu 4,3(4), Pro 0,6(1), Gly 2,2(2), Val 1,0(1), Ile 1,0(1), 0,8(1), Tyr 1,0(1), Phe 1.1(1), Lys 2,0(2), Arg 1.6(2).
По данным масс-спектрометрии МН+2546. По данным аналитической ВЭЖХ время удерживания составляет 23,2 мин, условия: колонка Phenomenex (США) Jupiter 5µ C18 300А (250×4,6 мм), растворитель А: 0,1%-ная трифторуксусная кислота в воде, растворитель Б: 0,1%-ная трифторуксусная кислота в ацетонитриле, градиент растворителя А в Б - 10-70% за 1 ч, скорость потока элюента - 1 мл/мин, выход пептида регистрируют при оптической длине волны 226 нм.
Пример 2. Проведение биологических испытаний.
Эксперименты проводят на мышах NMRI весом 20-30 г.
а) Пептид, полученный по изобретению, растворяют в натрий-фосфатном буфере, рН 7,4 (PBS) (1 мг/мл). Для получения вакцинирующего комплекса раствор пептида смешивают с равным объемом полного адъюванта Фрейнда. Мышам вводят вакцинирующий комплекс в основание хвоста из расчета 100 мкг пептида (0,2 мл) на одно животное.
б) Операцию ольфакторной бульбэктомии проводят на 28 день после иммунизации в стерильных условиях под гексеналовым наркозом (40 мг/кг внутрибрюшинно) с применением 0,5% раствора новокаина для местного обезболивания при скальпировании. Двустороннее удаление обонятельных луковиц проводят путем аспирации через трепанационное отверстие. Контрольных животных подвергают аналогичной манипуляции, но без удаления обонятельных луковиц.
в) Через 7 дней после операции проводят повторную иммунизацию пептидом. Раствор пептида в PBS (1 мг/мл) смешивают с равным объемом неполного адъюванта Фрейнда. Мышам вводят вакцинирующий комплекс в основание хвоста из расчета 100 мкг пептида (0,2 мл) на одно животное.
г) Через 20 дней после повторной иммунизации проводят обучение животных в водном лабиринте Морриса. Экспериментальная камера представляет собой пластиковый круглый бассейн с диаметром 80 см, заполненный на 30 см водой с температурой 23°С. Площадь бассейна условно делится на четыре равных сектора, в одном из которых находится спасательная платформа диаметром 5 см. Вода забеляется молоком для того, чтобы животные не могли визуально обнаружить спасательную платформу.
Для опытов отбирают мышей, умеющих хорошо плавать и быстро находить спасательную платформу. В течение 5 дней проводят по четыре сеанса обучения ежедневно. В результате всех животных обучают находить спасательную платформу менее чем за 10 сек. Затем в течение одной минуты у животных тестируют уровень пространственной памяти при отсутствии спасательной платформы. Состояние пространственной памяти каждого животного оценивают по его способности помнить отсек обучения и выделять его из 3-х других отсеков. В течение 1 минуты учитывают время пребывания животных в каждом отсеке. Обучившимися считают животных, время нахождения которых в отсеке обучения достоверно превышает время нахождения в каждом из других отсеков.
д) Образцы мозга бульбэктомированных и контрольных животных готовят следующим образом: 200-270 мг ткани мозга (кора и гиппокамп) гомогенизируют в 0,5 мл 70% муравьиной кислоты, выдерживают в течение 1 ч, центрифугируют при 100000 g в течение 40 мин, отбирают супернатант, упаривают на роторном испарителе до минимального объема, добавляют 1 мл воды, нейтрализуют раствор до рН 7,4 раствором NaOH и лиофилизируют.
Для иммунологического анализа нитроцеллюлозную мембрану обрабатывают в течение 1 мин 4% раствором овальбумина в буфере PBS, затем в течение 10 мин 2,5% раствором глутарового альдегида. На мембрану наносят 1 мкл мозговой ткани и выдерживают 1 ч в 2,5% растворе овальбумина в буфере PBS с добавлением 0,1% азида натрия.
На каждую точку с образцом мозговой ткани наносят моноклональные мышиные антитела 4G8 к β-амилоиду в разведении 1:1000 и инкубируют в течение 2 дней. После этого мембрану промывают буфером PBS с 1 М NaCl, PBS с добавлением 0,05% детергента Tween 20, PBS и 4% раствором овальбумина в PBS с добавлением 0,01% азида натрия. Затем наносят биотинилированные лошадиные антитела против IgG мыши в разведении 1:3500 и инкубируют в течение 1 ч. Промывки мембраны повторяют. Далее на мембрану наносят моноклональные антитела к биотину, конъюгированные с пероксидазой (разведение 1:4000).
Мембрану обрабатывают раствором 0,05% перекиси водорода и 0,05% о-фенилендиамина в 0,05 Na-цитратном буфере рН 4,5. Реакцию развития окрашивания останавливают добавлением 12,5% серной кислоты.
Результаты биологических испытаний заявляемого препарата приведены в таблице.
е) Токсичность полученного пептида исследуют на экспериментальных животных в системе in vivo. Исследование проводят на линейных мышах линии Balb/c весом 20 г с использованием максимальной дозы пептида 1 мг, вводимой подкожно. Животных держат под наблюдением в течение суток. По результатам наблюдения острой токсичности исследуемого препарата не выявлено.
Таким образом, получен новый пептид формулы Glu-Trp-Asp-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys-Arg-Ser-Glu-Arg-Phe-Tyr-Glu-Cys-Cys-Lys-Glu, который обладает защитным действием против болезни Альцгеймера.
Claims (1)
- Пептид, обладающий защитным действием против болезни Альцгеймера, формулы: Glu-Trp-Asp-Leu-Val-Gly-Ile-Pro-Gly-Lys-Arg-Ser-Glu-Arg-Phe-Tyr-Glu-Cys-Cys-Lys-Glu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008126082/04A RU2372355C1 (ru) | 2008-06-27 | 2008-06-27 | Пептид, обладающий защитным действием против болезни альцгеймера |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008126082/04A RU2372355C1 (ru) | 2008-06-27 | 2008-06-27 | Пептид, обладающий защитным действием против болезни альцгеймера |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2372355C1 true RU2372355C1 (ru) | 2009-11-10 |
Family
ID=41354700
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2008126082/04A RU2372355C1 (ru) | 2008-06-27 | 2008-06-27 | Пептид, обладающий защитным действием против болезни альцгеймера |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2372355C1 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014016787A2 (en) | 2012-07-24 | 2014-01-30 | Pharma Bio Llc | Peptide-based compounds and uses thereof to treat beta-amyloid accumulation |
| RU2558242C1 (ru) * | 2014-06-30 | 2015-07-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | Пептид, обладающий лечебным действием против болезни альцгеймера |
| WO2018199803A1 (ru) | 2017-04-28 | 2018-11-01 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма "ВЕРТА" | Пептид с антидепрессантной активностью и лечебным действием против болезни альцгеймера |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20020013374A1 (en) * | 1998-06-01 | 2002-01-31 | Allen B. Reitz | Method of treating neurodegenerative disorders via inhibition of amyloid beta peptide binding |
| WO2003029279A2 (en) * | 2001-10-04 | 2003-04-10 | Corixa Corporation | Immunodominant acetylcholine receptor alpha subunit peptide: mhc complexes |
| RU2260599C2 (ru) * | 1999-03-04 | 2005-09-20 | Прикис Фамэсьютикэлс Инкопэрейтид | МОДУЛЯТОР АГРЕГАЦИИ ПЕПТИДА β-АМИЛОИДА ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ АГРЕГАЦИИ ПЕПТИДОВ ПРИРОДНОГО β -АМИЛОИДА ИЛИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СУБЪЕКТА ОТ НАРУШЕНИЯ, АССОЦИИРОВАННОГО С β -АМИЛОИДОЗОМ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ДЕТЕКЦИИ В БИОЛОГИЧЕСКОМ ОБРАЗЦЕ ПЕПТИДОВ ПРИРОДНОГО β -АМИЛОИДА |
-
2008
- 2008-06-27 RU RU2008126082/04A patent/RU2372355C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20020013374A1 (en) * | 1998-06-01 | 2002-01-31 | Allen B. Reitz | Method of treating neurodegenerative disorders via inhibition of amyloid beta peptide binding |
| RU2260599C2 (ru) * | 1999-03-04 | 2005-09-20 | Прикис Фамэсьютикэлс Инкопэрейтид | МОДУЛЯТОР АГРЕГАЦИИ ПЕПТИДА β-АМИЛОИДА ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ АГРЕГАЦИИ ПЕПТИДОВ ПРИРОДНОГО β -АМИЛОИДА ИЛИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СУБЪЕКТА ОТ НАРУШЕНИЯ, АССОЦИИРОВАННОГО С β -АМИЛОИДОЗОМ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ДЕТЕКЦИИ В БИОЛОГИЧЕСКОМ ОБРАЗЦЕ ПЕПТИДОВ ПРИРОДНОГО β -АМИЛОИДА |
| WO2003029279A2 (en) * | 2001-10-04 | 2003-04-10 | Corixa Corporation | Immunodominant acetylcholine receptor alpha subunit peptide: mhc complexes |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Вольпина О.М. и др. Новые подходы к иммунотерапии болезни Альцгеймера с использованием синтетических фрагментов α7-субъединицы ацетилхолинового рецептора. - Биоорганическая химия, 2008, т.34, №1, с.50-55. * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014016787A2 (en) | 2012-07-24 | 2014-01-30 | Pharma Bio Llc | Peptide-based compounds and uses thereof to treat beta-amyloid accumulation |
| WO2014016787A3 (en) * | 2012-07-24 | 2015-07-30 | Pharma Bio Llc | Peptide-based compounds and uses thereof to treat beta-amyloid accumulation |
| EP2877486A4 (en) * | 2012-07-24 | 2016-08-24 | Manus Pharmaceuticals Canada Ltd | PEPTIDE-BASED COMPOUNDS AND THEIR USE FOR THE TREATMENT OF BETA-AMYLOID ACCUMULATION |
| US9718869B2 (en) | 2012-07-24 | 2017-08-01 | Manus Pharmaceuticals (Canada) Ltd. | Peptide-based compounds and uses thereof to treat beta-amyloid accumulation |
| EA031902B1 (ru) * | 2012-07-24 | 2019-03-29 | Манус Фармасьютикалс (Канада) Лтд. | СОЕДИНЕНИЯ НА ОСНОВЕ ПЕПТИДОВ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ АККУМУЛЯЦИИ β-АМИЛОИДА |
| RU2558242C1 (ru) * | 2014-06-30 | 2015-07-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | Пептид, обладающий лечебным действием против болезни альцгеймера |
| WO2018199803A1 (ru) | 2017-04-28 | 2018-11-01 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственная фирма "ВЕРТА" | Пептид с антидепрессантной активностью и лечебным действием против болезни альцгеймера |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2440824C2 (ru) | Терапевтическая вакцина | |
| US20190194280A1 (en) | Peptide vaccine for prevention and immunotherapy of dementia of the alzheimer's type | |
| RU2546234C2 (ru) | Вакцина против интермедиата с амилоидным сворачиванием | |
| RU2372355C1 (ru) | Пептид, обладающий защитным действием против болезни альцгеймера | |
| RU2558242C1 (ru) | Пептид, обладающий лечебным действием против болезни альцгеймера | |
| Volpina et al. | A fragment of the receptor for advanced glycation end products restores the spatial memory of animals in a model of Alzheimer’s disease | |
| CN104277092A (zh) | 用于预防和/或治疗老年性痴呆的β片层阻断肽 | |
| US20240400634A1 (en) | Peptide immunogens targeting islet amyloid polypeptide (iapp) and formulations thereof for prevention and treatment of disorders related to aggregated iapp | |
| RU2626972C2 (ru) | Пептид, обладающий лечебным действием против болезни Альцгеймера | |
| CA2730328C (en) | Immunogenic escherichia coli heat stable enterotoxin | |
| US20220023401A1 (en) | Peptide vaccine for prevention and immunotherapy of dementia of the alzheimer's type | |
| US9718869B2 (en) | Peptide-based compounds and uses thereof to treat beta-amyloid accumulation | |
| RU2677296C2 (ru) | Пептид, обладающий лечебным действием против болезни Альцгеймера | |
| RU2283666C2 (ru) | Средство для активации восстановления структуры и функции поврежденных тканей и органов | |
| Vol’pina et al. | New approaches to the immunotherapy of Alzheimer’s disease with the synthetic fragments of α7 subunit of the acetylcholine receptor | |
| Bobkova et al. | Structure–Function mapping of the extracellular part of neurotrophin receptor P75 | |
| CN117586370A (zh) | 强毒性淀粉样蛋白寡聚体及其用途 | |
| Volpina et al. | Protective activity of fragments of the prion protein after immunization of animals with experimentally induced Alzheimer’s disease | |
| TW201725213A (zh) | 一種利用雙硫鍵重組技術製造抗蛇毒血清之方法及其產物 | |
| CN120289574A (zh) | 一种具有促进肠蠕动作用的九肽及其制备方法和应用 | |
| RS54074B1 (sr) | Metode i kompozicije koje sadrže supramolekulske konstrukte | |
| JPH03173899A (ja) | 生体由来のタンパク質 | |
| MX2008007149A (en) | Therapeutic vaccine | |
| HK1127486B (zh) | 治疗性疫苗 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20110704 |
|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20151029 |
|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20161128 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190628 |