RU2175195C1 - Method of isolating anigiogenin-rich protein fraction - Google Patents
Method of isolating anigiogenin-rich protein fraction Download PDFInfo
- Publication number
- RU2175195C1 RU2175195C1 RU2000116004/13A RU2000116004A RU2175195C1 RU 2175195 C1 RU2175195 C1 RU 2175195C1 RU 2000116004/13 A RU2000116004/13 A RU 2000116004/13A RU 2000116004 A RU2000116004 A RU 2000116004A RU 2175195 C1 RU2175195 C1 RU 2175195C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- protein fraction
- ultrafiltrate
- milk
- angiogenin
- carried out
- Prior art date
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 25
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 21
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims abstract description 17
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims abstract description 17
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 7
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 claims abstract description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims abstract description 5
- 102100022987 Angiogenin Human genes 0.000 claims description 24
- 108010072788 angiogenin Proteins 0.000 claims description 24
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 8
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 2
- 230000008021 deposition Effects 0.000 claims 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 235000008939 whole milk Nutrition 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 3
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 2
- 229940088623 biologically active substance Drugs 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 235000015155 buttermilk Nutrition 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000007863 gel particle Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000003672 processing method Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012475 sodium chloride buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к способу выделения белковой фракции, содержащей ангиогенин - ценное биологически активное вещество, и может быть использовано в молочной промышленности. The invention relates to a method for isolating a protein fraction containing angiogenin, a valuable biologically active substance, and can be used in the dairy industry.
Известно, что ангиогенин коровьего молока представляет собой одноцепочечный белок, состоящий из 125 остатков аминокислот, с молекулярной массой ~ 14 кДа и является мощным стимулятором ангиогенеза (The angiogenins /Strydom D. J. /CMLS). Известно также, что ангиогенин обладает иммунорегуляторной функцией (Ангиогенин и механизм ангиогенеза /Мертвецов Н.П., Стефанович Л.Е. - Новосибирск: Наука, Сибирское предприятие РАН, 1997). Биологическая активность ангиогенина, а также его присутствие в молоке млекопитающих позволяет рассматривать содержащую его фракцию как перспективную биологически активную добавку. Cow's milk angiogenin is known to be a single chain protein of 125 amino acid residues with a molecular weight of ~ 14 kDa and a potent stimulator of angiogenesis (The angiogenins / Strydom D. J. / CMLS). It is also known that angiogenin has an immunoregulatory function (Angiogenin and the mechanism of angiogenesis / NP Dead, Stefanovich L.E. - Novosibirsk: Science, Siberian Enterprise of the Russian Academy of Sciences, 1997). The biological activity of angiogenin, as well as its presence in mammalian milk, allows us to consider the fraction containing it as a promising biologically active additive.
Известен способ выделения ангиогенина из коровьего молока (Патент РФ N 2109748, МПК6 С 07 К 14/515, 1998), включающий очистку молока от жировой фракции, сорбцию белков на ионообменной смоле карбоксиметилцеллюлозе (КМЦ), элюирование белковой фракции с последующим выделением фракции с оптической плотностью более 0,1 при длине волны 280 нм. Затем осуществляют дальнейшую очистку ангиогенина путем гидрофобной хроматографии и последующего диализа.A known method for the isolation of angiogenin from cow's milk (RF Patent N 2109748, IPC 6 C 07 K 14/515, 1998), including purification of milk from the fat fraction, sorption of proteins on an ion-exchange resin carboxymethyl cellulose (CMC), elution of the protein fraction, followed by separation of the fraction with optical density greater than 0.1 at a wavelength of 280 nm. Then carry out further purification of angiogenin by hydrophobic chromatography and subsequent dialysis.
Недостатком известного способа является использование цельного молока в качестве исходного сырья, которое могло быть использовано на пищевые цели: для выделения 3,27 мг чистого ангиогенина требуется 3 л молока, а также длительность и многоэтапность очистки. Кроме того, в известном способе выделенная фракция содержит три группы белков: с молекулярной массой 14,3-17,8 кДа, 45 кДа и 67 кДа, т.е. смесь белков, из которой далее выделяют чистый ангиогенин. The disadvantage of this method is the use of whole milk as a feedstock, which could be used for food purposes: to isolate 3.27 mg of pure angiogenin requires 3 l of milk, as well as the duration and multi-stage purification. In addition, in the known method, the isolated fraction contains three groups of proteins: with a molecular weight of 14.3-17.8 kDa, 45 kDa and 67 kDa, i.e. a mixture of proteins, from which pure angiogenin is further isolated.
В то же время известно, что в молочной промышленности при производстве молочных продуктов образуется большое количество побочных продуктов, таких как сыворотка, пахта, ультрафильтрат, которые не всегда находят дальнейшее применение. Широкое распространение ультрафильтрационных методов обработки привело к увеличению количества вырабатываемого ультрафильтрата, который в большинстве случаев не подвергается дальнейшей переработке, а отдается в натуральном виде на корм скоту (Мембранные и молекулярно-ситовые методы переработки молока /Фетисов Е.А., Чагаровский А.П. - М.: Агропромиздат, 1991.-272 с. ). Таким образом, применение молочного ультрафильтрата для выделения биологически активных веществ является актуальным и обладает практической значимостью. At the same time, it is known that in the dairy industry, in the production of dairy products, a large number of by-products, such as whey, buttermilk, ultrafiltrate, which do not always find further use, are formed. The widespread use of ultrafiltration processing methods has led to an increase in the amount of produced ultrafiltrate, which in most cases is not further processed, but is given in kind to livestock (Membrane and molecular sieve methods for milk processing / Fetisov EA, Chagarovsky A.P. - M.: Agropromizdat, 1991.-272 p.). Thus, the use of milk ultrafiltrate for the isolation of biologically active substances is relevant and has practical significance.
Задачей изобретения является разработка эффективного и дешевого способа выделения белковой фракции, обогащенной ангиогенином, на основе вторичного молочного сырья, а именно молочного ультрафильтрата. The objective of the invention is to develop an effective and cheap method of isolating a protein fraction enriched in angiogenin, based on secondary milk raw materials, namely milk ultrafiltrate.
Поставленная задача достигается способом, включающим осаждение молочного ультрафильтрата, в частности насыщенным раствором сульфата аммония при 4oC, отделение осадка путем центрифугирования, диализ против воды и против 0,05М натрий-фосфатного буфера, гель-фильтрацию путем нанесения диализованного ультрафильтрата на ионообменную колонку, содержащую в качестве сорбента сефадекс, с последующим элюированием с помощью раствора 0,2 М хлорида натрия в 0,05 М натрий-фосфатном буфере со значением pH 6,7 со скоростью не более 3-4 мл/ч и выделением фракции с оптической плотность при длине волны 280 нм более 0,1.The problem is achieved by a method including the precipitation of milk ultrafiltrate, in particular a saturated solution of ammonium sulfate at 4 o C, separation of the precipitate by centrifugation, dialysis against water and against 0.05 M sodium phosphate buffer, gel filtration by applying dialyzed ultrafiltrate to an ion exchange column, containing Sephadex as a sorbent, followed by elution with a solution of 0.2 M sodium chloride in 0.05 M sodium phosphate buffer with a pH value of 6.7 at a rate of no more than 3-4 ml / h and isolation of fractions and the optical density at 280 nm greater than 0.1.
Предпочтительно центрифугирование проводят со скоростью не менее 12000 об/мин в течение не более 1 ч. Preferably, centrifugation is carried out at a speed of not less than 12,000 rpm for not more than 1 hour
Диализ предпочтительно проводят при температуре не более 8oC в течение 10-12 ч.Dialysis is preferably carried out at a temperature of not more than 8 o C for 10-12 hours
Предлагаемый способ предусматривает использование для получения фракции, обогащенной ценным биологически активным веществом ангиогенином, вторичного молочного сырья, а именно молочного ультрафильтрата, наиболее дешевого и наименее применяемого в производстве вторичного сырья. Поскольку концентрация ангиогенина в цельном молоке составляет до 8 мг/л (Количественный анализ ангиогенина в молоке коров /Тихомирова Н.А. - Молочная промышленность, N 10, 1999), а выход ангиогенина в ультрафильтрат - до 45-60%, использование именно этого вторичного сырья представляет большой практический интерес. The proposed method involves the use of a secondary milk raw material, namely milk ultrafiltrate, the cheapest and least used in the production of secondary raw materials, to obtain a fraction enriched with a valuable biologically active substance angiogenin. Since the concentration of angiogenin in whole milk is up to 8 mg / l (Quantitative analysis of angiogenin in cow's milk / Tikhomirova N.A. - Dairy industry, N 10, 1999), and the yield of angiogenin in ultrafiltrate is up to 45-60%, use of this secondary raw materials is of great practical interest.
Для выделения обогащенной ангиогенином белковой фракции впервые в качестве сорбента использован известный сорбент на основе декстранов - сефадекс G-75 сверхтонкий с размером частиц сухого геля 10-40 мкм. В отличие от известного способа применение этого сорбента позволило выделить белковую фракцию только с одной группой белков с молекулярной массой 12,3-14,3 кДа, что было подтверждено электрофоретическим методом. To isolate the protein fraction enriched in angiogenin, for the first time, a well-known sorbent based on dextrans - Sephadex G-75 ultrafine with a dry gel particle size of 10-40 microns, was used as the sorbent for the first time. In contrast to the known method, the use of this sorbent made it possible to isolate a protein fraction with only one group of proteins with a molecular weight of 12.3-14.3 kDa, which was confirmed by the electrophoretic method.
Предлагаемый способ обеспечивает получение из молочного ультрафильтрата белковой фракции, содержащей ангиогенин в количестве ~ 3,3 мг/л, которую далее можно использовать в качестве биологически активной добавки в производстве новых молочных продуктов, и тем самым комплексно использовать молочное сырье. The proposed method provides for the production of a protein fraction from milk ultrafiltrate containing angiogenin in an amount of ~ 3.3 mg / l, which can then be used as a biologically active additive in the production of new dairy products, and thereby use milk raw materials in a complex way.
Способ осуществляется следующим образом. The method is as follows.
Молочный ультрафильтрат осаждается насыщенным раствором сульфата аммония при температуре 4oC, осадок отделяется путем центрифугирования, диализируется против воды и против 0,05М натрий фосфатного буфера, проводится гель-фильтрация путем нанесения диализованного ультрафильтрата на ионнообменную колонку, содержащую в качестве сорбента сефадекс, с последующим элюированием с помощью раствора 0,2 М хлорида натрия в 0,05 М натрий-фосфатном буфере со значением pH 6,7 со скоростью не более 3-4 мл/ч. Все фракции с оптической плотностью при длине волны 280 нм более 0,1 объединяют.Milk ultrafiltrate is precipitated with a saturated solution of ammonium sulfate at a temperature of 4 o C, the precipitate is separated by centrifugation, dialyzed against water and against 0.05 M sodium phosphate buffer, gel filtration is carried out by applying a dialyzed ultrafiltrate to an ion exchange column containing Sephadex as a sorbent, followed by eluting with a solution of 0.2 M sodium chloride in 0.05 M sodium phosphate buffer with a pH of 6.7 at a rate of no more than 3-4 ml / h. All fractions with optical density at a wavelength of 280 nm more than 0.1 are combined.
Пример 1. Example 1
2 л ультрафильтрата, полученного в результате ультрафильтрации цельного молока при производстве детского творога, осаждали 65% насыщенным раствором сульфата аммония в течение двух суток при температуре 4oC. Образовавшийся осадок центрифугировали со скоростью 12000 об/мин в течение 50 мин и диализовали против воды и 0,05 М натрий-фосфатного буфера с pH 6,7 в течение 10 часов при температуре 4oC. Определяли содержание белка в диализованном ультрафильтрате по методу Лоури, которое составило 8 мг белка на 1 мл ультрафильтрата. Затем подготовленным сефадексом заполняли колонку размером (1,5х95)см и наносили диализованный ультрафильтрат.2 l of ultrafiltrate obtained by ultrafiltration of whole milk in the production of baby cottage cheese was precipitated with a 65% saturated solution of ammonium sulfate for two days at a temperature of 4 o C. The resulting precipitate was centrifuged at a speed of 12000 rpm for 50 min and dialyzed against water and 0.05 M sodium phosphate buffer with a pH of 6.7 for 10 hours at 4 ° C. The protein content of the dialyzed ultrafiltrate was determined by the Lowry method, which was 8 mg of protein per 1 ml of ultrafiltrate. Then the prepared Sephadex filled column (1.5x95) cm in size and the dialyzed ultrafiltrate was applied.
Элюирование проводили раствором 0,2 М хлористого натрия в 0,05 М натрий-фосфатном буфере с pH 6,7 со скоростью 3 мл/ч. Выделяли белковую фракцию с оптической плотностью более 0,1 при длине волны 280 нм. Выход ангиогенина составил 67%. Определяли концентрацию ангиогенина в выделенной фракции по количественному методу определения ангиогенина в биологическом сырье (Патент РФ N 2110066, МПК6 G 01 N 33/04, 1998). Концентрация ангиогенина составила 3,35 мг/л.Elution was carried out with a solution of 0.2 M sodium chloride in 0.05 M sodium phosphate buffer with a pH of 6.7 at a rate of 3 ml / h. A protein fraction with an optical density of more than 0.1 at a wavelength of 280 nm was isolated. The yield of angiogenin was 67%. The concentration of angiogenin in the isolated fraction was determined by the quantitative method for determining angiogenin in biological raw materials (RF Patent N 2110066, IPC 6 G 01 N 33/04, 1998). The concentration of angiogenin was 3.35 mg / L.
Пример 2. Example 2
2 л ультрафильтрата, полученного в результате ультрафильтрации цельного молока при производстве детского творога, осаждали 100% насыщенным раствором сульфата аммония в течение двух суток при температуре 4oC. Образовавшийся осадок центрифугировали при 14000 об/мин в течение 35 мин и диализовали против воды и 0,05 М натрий-фосфатного буфера с pH 6,7 в течение 12 часов при температуре 8oC. Определяли содержание белка в диализованном ультрафильтрате по методу Лоури, которое составило 8 мг белка на 1 мл ультрафильтрата. Затем подготовленным сефадексом заполняли колонку размером (1,5х95)см и наносили диализованный ультрафильтрат.2 l of ultrafiltrate obtained by ultrafiltration of whole milk in the production of baby cottage cheese was precipitated with a 100% saturated solution of ammonium sulfate for two days at a temperature of 4 o C. The resulting precipitate was centrifuged at 14000 rpm for 35 minutes and dialyzed against water and 0 , 05 M sodium phosphate buffer with a pH of 6.7 for 12 hours at a temperature of 8 ° C. The protein content of the dialyzed ultrafiltrate was determined by the Lowry method, which was 8 mg of protein per 1 ml of ultrafiltrate. Then the prepared Sephadex filled column (1.5x95) cm in size and the dialyzed ultrafiltrate was applied.
Элюирование проводили раствором 0,2 М хлористого натрия в 0,05 М натрий-фосфатном буфере с pH 6,7 со скоростью 4 мл/ч. Выделяли белковую фракцию с оптической плотностью более 0,1 при длине волны 280 нм. Выход составил 72,8%. Концентрация ангиогенина составила 3,64 мг/л. Elution was carried out with a solution of 0.2 M sodium chloride in 0.05 M sodium phosphate buffer with a pH of 6.7 at a rate of 4 ml / h. A protein fraction with an optical density of more than 0.1 at a wavelength of 280 nm was isolated. The yield was 72.8%. The concentration of angiogenin was 3.64 mg / L.
Сравнительный пример. Comparative example.
Свежее цельное молоко в количестве 2 л обезжиривали центрифугированием (3000 об/мин, 30 мин) при 4oC. Обезжиренное молоко суспендировали в предварительно подготовленную карбоксиметилцеллюлозу. Затем измеряли значение pH смеси и, если это необходимо, доводили его до значения 6,7 с помощью 0,1 М соляной кислотой. Сорбцию вели в течение одного часа при температуре 4oC. После сорбции отделяли сорбент от жидкой фазы, промывали его пятью объемами 0,05 М натрий-фосфатного буфера, pH 6,7, при объемном соотношении карбоксиметилцеллюлоза : буфер = 1 : 5. Затем сорбент помещали в ионообменную колонку размером (2,5х50)см. Колонку промывали 0,2 л того же буфера со скоростью 200 мл/ч и элюировали белки смесью хлорида натрия и натрий-фосфатного буфера со скоростью 100 мл/ч. Собирали фракции объемом 10 мл и все фракции с оптической плотностью более 0,1 при длине волны 280 нм объединяли.Fresh whole milk in an amount of 2 l was degreased by centrifugation (3000 rpm, 30 min) at 4 o C. Skim milk was suspended in pre-prepared carboxymethyl cellulose. The pH of the mixture was then measured and, if necessary, adjusted to a value of 6.7 with 0.1 M hydrochloric acid. Sorption was carried out for one hour at a temperature of 4 o C. After sorption, the sorbent was separated from the liquid phase, washed with five volumes of 0.05 M sodium phosphate buffer, pH 6.7, with a volume ratio of carboxymethyl cellulose: buffer = 1: 5. Then the sorbent was placed in an ion-exchange column measuring (2.5x50) cm. The column was washed with 0.2 L of the same buffer at a rate of 200 ml / h and the proteins were eluted with a mixture of sodium chloride and sodium phosphate buffer at a rate of 100 ml / h. Fractions with a volume of 10 ml were collected and all fractions with an optical density of more than 0.1 at a wavelength of 280 nm were combined.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет использовать молочный ультрафильтрат в качестве дешевого исходного сырья для получения ангиогенина, а также выделять белковую фракцию, содержащую ангиогенин, с использованием сефадекса в качестве сорбента. Полученную белковую фракцию можно использовать как биологически активную добавку при производстве молочных продуктов, в особенности для повышения биологической ценности стерилизованных молочных продуктов. Thus, the proposed method allows the use of milk ultrafiltrate as a cheap starting material for producing angiogenin, and also to isolate the protein fraction containing angiogenin using Sephadex as a sorbent. The resulting protein fraction can be used as a biologically active additive in the production of dairy products, in particular to increase the biological value of sterilized dairy products.
Claims (6)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000116004/13A RU2175195C1 (en) | 2000-06-23 | 2000-06-23 | Method of isolating anigiogenin-rich protein fraction |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000116004/13A RU2175195C1 (en) | 2000-06-23 | 2000-06-23 | Method of isolating anigiogenin-rich protein fraction |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2175195C1 true RU2175195C1 (en) | 2001-10-27 |
| RU2000116004A RU2000116004A (en) | 2002-08-27 |
Family
ID=20236494
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000116004/13A RU2175195C1 (en) | 2000-06-23 | 2000-06-23 | Method of isolating anigiogenin-rich protein fraction |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2175195C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2318406C1 (en) * | 2006-07-07 | 2008-03-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет прикладной биотехнологии" | Method for production of biologically active supplement (bas) from law molecular milk cation proteins and obtained bas |
| RU2538654C2 (en) * | 2008-05-14 | 2015-01-10 | Эгрикалчер Виктория Сервисиз Пти Лтд | Milk fractions enriched with angiogenine |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2110066C1 (en) * | 1996-12-27 | 1998-04-27 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method of quantitatively determining angiogenin in biological sample |
| RU2109748C1 (en) * | 1996-12-27 | 1998-04-27 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method of angiogenine isolation |
| RU2133464C1 (en) * | 1998-06-25 | 1999-07-20 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method for quantitatively determining angiogenine in milk material |
-
2000
- 2000-06-23 RU RU2000116004/13A patent/RU2175195C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2110066C1 (en) * | 1996-12-27 | 1998-04-27 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method of quantitatively determining angiogenin in biological sample |
| RU2109748C1 (en) * | 1996-12-27 | 1998-04-27 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method of angiogenine isolation |
| RU2133464C1 (en) * | 1998-06-25 | 1999-07-20 | Московский государственный университет прикладной биотехнологии | Method for quantitatively determining angiogenine in milk material |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| BOND M.D., VALEE B.L. JSOLATION OF BOVINE ANGIOGENIN USING A PLACENTAL RIBONUCLEASE INHIBITOR BINDING USSAG, BIOCHEMISTRY, V.27, N 17, H.6282-6287, 1987. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2318406C1 (en) * | 2006-07-07 | 2008-03-10 | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Московский государственный университет прикладной биотехнологии" | Method for production of biologically active supplement (bas) from law molecular milk cation proteins and obtained bas |
| RU2538654C2 (en) * | 2008-05-14 | 2015-01-10 | Эгрикалчер Виктория Сервисиз Пти Лтд | Milk fractions enriched with angiogenine |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Burke | The purification of interferon | |
| JP2622686B2 (en) | Method for producing k-casein glycomacropeptide | |
| NZ237452A (en) | Secretory component-containing compositions from milk | |
| RU2390253C1 (en) | Method of lactoferrin obtaining from dairy raw materials | |
| RU2175195C1 (en) | Method of isolating anigiogenin-rich protein fraction | |
| KR101089704B1 (en) | Purification of peptides from colostrum | |
| JP2568151B2 (en) | Method for isolating angiogenin | |
| SU513595A3 (en) | The method of selection orgoteina | |
| RU2204262C2 (en) | Method for preparing biologically active protein concentrate enriched with pancreatic ribonuclease a, angiogenin and lysozyme from dairy ultrafiltrate | |
| JP4465164B2 (en) | Method for producing oligosaccharide containing sialic acid | |
| JP3486196B2 (en) | Method for purifying streptolysin O, complete streptolysin O obtained by this method and use thereof | |
| JPS61233694A (en) | Growth factor contained in bovine spleen and method of isolating same | |
| CN1800200A (en) | Method for extracting high purity protein from cow milk or soybean waste water | |
| KR100567448B1 (en) | Milk pretreatment method of transgenic animals and purification method of human protein | |
| JP2985158B2 (en) | Recovery method of highly active lactenin fraction | |
| JP2963081B2 (en) | Method for separating and purifying lactoferrin from milk and its by-products | |
| US4308204A (en) | Process for preparing the third component of the complement from human blood plasma | |
| JPH03279396A (en) | Rhodophyceae lectin and production thereof | |
| CN102977184A (en) | Purification method of protein group of 30 kD in silkworm pupa | |
| RU2277421C1 (en) | Method for production of secretory immunoglobulin a from horned cattle foremilk | |
| JP2826807B2 (en) | Seaweed lectin and method for producing the same | |
| Ito et al. | Purification of milk catalase by immunoaffinity chromatography | |
| SU1280546A1 (en) | Method of producing leukocytic beta sub 1 - glycoproteide | |
| SU575353A1 (en) | Method of obtaining carboxypepiidase | |
| SU1359298A1 (en) | Method of obtaining molecular forms of carboanhydrase |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NF4A | Reinstatement of patent | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080624 |