[go: up one dir, main page]

RU2029560C1 - Agent for stabilization of hepatocyte cellular membrane - Google Patents

Agent for stabilization of hepatocyte cellular membrane Download PDF

Info

Publication number
RU2029560C1
RU2029560C1 SU4134597A RU2029560C1 RU 2029560 C1 RU2029560 C1 RU 2029560C1 SU 4134597 A SU4134597 A SU 4134597A RU 2029560 C1 RU2029560 C1 RU 2029560C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
stabilization
irradiation
hepatocytes
chorionic gonadotropin
agent
Prior art date
Application number
Other languages
Russian (ru)
Inventor
И.М. Солопаева
Original Assignee
Солопаева Инесса Михайловна
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Солопаева Инесса Михайловна filed Critical Солопаева Инесса Михайловна
Priority to SU4134597 priority Critical patent/RU2029560C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2029560C1 publication Critical patent/RU2029560C1/en

Links

Images

Landscapes

  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves the use of chorionic gonadotropin as effective agent for stabilization of hepatocyte cellular membranes. EFFECT: increased effectiveness of agent. 3 tbl

Description

Предлагаемое изобретение относится к биологии и медицине и касается стабилизации клеточных мембран гепатоцитов при облучении. The present invention relates to biology and medicine and relates to the stabilization of hepatocyte cell membranes upon irradiation.

Известно применение кортизона для стабилизации биологических мембран [1]. The use of cortisone to stabilize biological membranes is known [1].

Однако это средство обладает побочным действием. However, this tool has a side effect.

Наиболее близким по технической сущности к изобретению является способ стабилизации биологических мембран путем введения крысам линии Вистар, получавшим предварительно одну инъекцию ССl4 50% масляного раствора в дозе 0,3 мл на 100,0 массы тела животного, 3 метокси 18 оманена (милицина) [2].Closest to the technical nature of the invention is a method of stabilizing biological membranes by administering to Wistar rats previously given one injection of CCl 4 of a 50% oil solution at a dose of 0.3 ml per 100.0 animal body weight, 3 methoxy 18 anomanen (militin) [ 2].

Однако этот способ не содержит прямых доказательств стабилизации биологических мембран гепатоцитов, т.к. о ней судят на основании активности специфических ферментов в сыворотке крови. Тем более, что в этом способе нет доказательств отсутствия угнетающего действия милицина на ферментный обмен в патологически измененной печени. Недостатком способа является то, что милицин не является лечебным препаратом. However, this method does not contain direct evidence of stabilization of the biological membranes of hepatocytes, because it is judged on the basis of the activity of specific enzymes in the blood serum. Moreover, in this method there is no evidence of the absence of the inhibitory effect of militin on enzyme metabolism in a pathologically altered liver. The disadvantage of this method is that mlecicin is not a therapeutic drug.

Целью предлагаемого изобретения является увеличение стабилизации клеточных мембран гепатоцитов после облучения. The aim of the invention is to increase the stabilization of hepatocyte cell membranes after irradiation.

Указанная цель достигается применением гонадотропина хронического в качестве средства для стабилизации клеточных мембран. Под влиянием этого гормона в печени через 7 и 21 сут после облучения животных гепатоцитов с разрушенными клеточными мембранами оказалось достоверно (Р < 0,01) меньше (1,9±0,3 и 1,3±0,3), что на 62 и 75% соответственно срокам забоя меньше, чем у контрольных облученных животных, не получавших гормон (5,00±0,4 и 5,3±0,4), табл.1. This goal is achieved by the use of chronic gonadotropin as a means to stabilize cell membranes. Under the influence of this hormone in the liver, 7 and 21 days after irradiation of animal hepatocytes with destroyed cell membranes, it turned out to be significantly (P <0.01) less (1.9 ± 0.3 and 1.3 ± 0.3), which is 62 and 75%, respectively, of the slaughter time is less than that of the control irradiated animals that did not receive the hormone (5.00 ± 0.4 and 5.3 ± 0.4), Table 1.

Ранее хорионический гонадотропин применялся для лечения эндокринной патологии. Так, согласно [3] гонадотропин хорионический для инъекций выпускается в стерильном лиофилизированном виде. Белый или почти белый порошок, растворы его нестойки, готовят их непосредственно перед употреблением на изотоническом растворе хлорида натрия. Активность гормона определяется биологическим путем. Одна единица действия (ЕД) соответствует активности 0,1 мг стандартного порошка хорионического гонадотропина. Previously, chorionic gonadotropin was used to treat endocrine pathology. Thus, according to [3], chorionic gonadotropin for injection is available in sterile lyophilized form. White or almost white powder, its solutions are unstable, they are prepared immediately before use on an isotonic sodium chloride solution. The activity of the hormone is determined biologically. One unit of action (UNIT) corresponds to the activity of 0.1 mg of standard chorionic gonadotropin powder.

Применяют гонадотропин хорионический при понижении функции половых желез у мужчин и женщин, обусловленном нарушением деятельности гипоталамуса и гипофиза. Препарат показан у больных с межуточно-гипофизарной недостаточностью (б-нь Симмондса, синдром Шиена, пангипопитуитаризм любой этиологии, адипозогенитальная дистрофия, гипофизарная карликовость с явлениями полового инфантилизма, гипогонадотропной гипогонадизм с явлениями евнухоидизма), ановуляторной дисфункцией яичников и связанный с нею бесплодием, поздним половым развитием, при привычном и угрожающем аборте в I триместре беременности, при дисфункциональных маточных кровотечениях у женщин в детородном возрасте, при двустороннем крипторхизме у детей, а также при одностороннем крипторхизме после оперативного лечения при наличии признаков евнухоидизма. Препарат применяют также с целью дифференциальной диагностики первичного и вторичного гипогонадизма у мужчин. Chorionic gonadotropin is used to reduce the function of the gonads in men and women, due to a violation of the hypothalamus and pituitary gland. The drug is indicated in patients with interstitial-pituitary insufficiency (Simmonds pap, Syen's syndrome, panhypopituitarism of any etiology, adiposogenital dystrophy, pituitary dwarfism with the phenomena of sexual infantilism, hypogonadotropic hypogonadism with the phenomena of eunuchoidism and ovarian function), development, with habitual and threatening abortion in the first trimester of pregnancy, with dysfunctional uterine bleeding in women of childbearing age, with bilateral cr ptorhizme in children, as well as unilateral cryptorchidism after surgical treatment if there are signs evnuhoidizma. The drug is also used for the differential diagnosis of primary and secondary hypogonadism in men.

Таким образом, предлагаемое изобретение отвечает критериям "Новизна" и "Существенные отличия", т. к. найдено новое применение ранее известного препарата, причем эта новая область использования не вытекает с очевидностью из ранее известных свойств препарата и основано на новом, установленном автором данной заявки свойстве. Thus, the present invention meets the criteria of "Novelty" and "Significant differences", because a new application of a previously known drug is found, and this new area of use does not follow clearly from previously known properties of the drug and is based on a new one established by the author of this application property.

Положительный эффект предлагаемого изобретения заключается в том, что: стабилизация клеточных мембран гепатоцитов достигается лечебным препаратом; меньше количество введений препарата (12 инъекций гонадотропина хорионического против 21 инъекции милицина); способ дает прямое доказательство стабилизации клеточных мембран путем подсчета с помощью морфометрии количества гепатоцитов с разрушенными клеточными мембранами, что позволяет количественно выразить действие препарата; способ стабилизирует клеточные мембраны гепатоцитов при облучении, что является более тяжелой и трудно излечимой патологией, чем однократное отравление CCl4 в указанных дозах.The positive effect of the invention is that: stabilization of the hepatocyte cell membranes is achieved by a therapeutic drug; fewer injections of the drug (12 injections of chorionic gonadotropin versus 21 injections of militin); the method provides direct evidence of stabilization of cell membranes by counting by morphometry the number of hepatocytes with destroyed cell membranes, which allows to quantify the effect of the drug; the method stabilizes the cell membranes of hepatocytes upon irradiation, which is a more severe and difficult to cure pathology than a single poisoning of CCl 4 in the indicated doses.

Стабилизацию клеточных мембран с помощью хорионического гонадотропина проводят следующим образом. Stabilization of cell membranes using chorionic gonadotropin is carried out as follows.

После облучения экспериментальным животным вводят хорионический гонадотропин по следующей схеме. After irradiation, chorionic gonadotropin is administered to experimental animals according to the following scheme.

График введения гонадотропина хорионического (ГХ) облученным животным. Schedule of administration of gonadotropin chorionic (GC) to an irradiated animal.

Дни опыта 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19
Дни вве- + + + + + + + + + + + +
дения ГХ
Гонадотропин хорионический вводят под кожу один раз в день в дозе от 75 ЕД до 85 ЕД на 100,0 массы тела. Такая доза гормона была выбрана потому, что дает биологический эффект. Однократное ежедневное введение препарата производили потому, что введенный в организм этот гормон распадается и выводится из организма в течение 24 ч. Введение препарата в течение двух дней подряд обусловлено тем, что этот гормон в указанных дозах за этот срок обеспечивает деление большинства готовых к делению гепатоцитов.
Test days 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19
Days on- + + + + + + + + + + + + +
Dénia GC
Chorionic gonadotropin is administered under the skin once a day at a dose of 75 IU to 85 IU per 100.0 body weight. This dose of the hormone was chosen because it gives a biological effect. A single daily administration of the drug was carried out because this hormone introduced into the body disintegrates and is eliminated from the body within 24 hours.The introduction of the drug for two consecutive days is due to the fact that this hormone in the indicated doses during this period ensures the division of most hepatocytes ready for division.

В проведенных экспериментах осуществление способа выполнялось следующим образом. Белых беспородных крыс размещали в ящике, имеющем 9 ячеек, соответствующим размерам животных и облучали их на гамма-установке "ЛУЧ-1". Условия облучения: источник - Со60, Е = 1,25 мэв, поле максимальное, мощность дозы на R = 2 м; Д = 0,092 грей/мин, общая доза 4,50 грей, время облучения = 49 мин.In the experiments, the implementation of the method was performed as follows. Outbred white rats were placed in a box having 9 cells corresponding to the size of the animals and irradiated with the LUCH-1 gamma-ray apparatus. Irradiation conditions: source - Co 60 , E = 1.25 meV, maximum field, dose rate at R = 2 m; D = 0.092 gray / min, total dose 4.50 gray, irradiation time = 49 min.

В опыте использовано 31 животное. Часть животных после облучения получала хорионический гонадотропин под кожу один раз в день в дозе от 75 ЕД до 85 ЕД на 100,0 массы тела. In the experiment, 31 animals were used. Some animals after irradiation received chorionic gonadotropin under the skin once a day at a dose of 75 IU to 85 IU per 100.0 body weight.

Через 7 и 21 день после облучения у всех крыс брали кусочки печени для исследования, заливали в парафин, срезы печени толщиной 5-6 микрон после депарафинизации окрашивали гематоксилин-эозином. Затем с помощью светового микроскопа при увеличении 90 х 10 х 1,5 с помощью окулярной морфологической сетки проводили подсчет количества гепатоцитов, имеющих разрушенные клеточные мембраны на тест-площадь препарата. Подсчет проводили при заданной степени достоверности (Р ≅0,05) с использованием таблиц Стрелкова. After 7 and 21 days after irradiation, rats were taken from all rats for research, embedded in paraffin, sections of the liver 5-6 microns thick after dewaxing were stained with hematoxylin-eosin. Then, using a light microscope at a magnification of 90 x 10 x 1.5 using an ocular morphological grid, we counted the number of hepatocytes with destroyed cell membranes per test area of the drug. The calculation was carried out at a given degree of confidence (P ≅ 0.05) using Strelkov tables.

Перерывы между введениями гормона делали для того, чтобы восстановить количество гепатоцитов, готовых к делению. Breaks between hormone injections were made in order to restore the number of hepatocytes ready for division.

П р и м е р 1. Крысу N 8 сажали в ячейку ящика, имеющего 9 ячеек, соответственно размеру животного и облучали на гаммаустановке "Луч-1". Условия облучения: источник - Со60, Е = 1,25 мэв, поле - максимальное, мощность дозы на R = 2 м, Д = 0,092 грей/мин, общая доза 4,50 грей, время облучения = 49 мин.PRI me R 1. Rat N 8 was planted in a cell of a box having 9 cells, corresponding to the size of the animal and irradiated on a gamma-ray unit "Luch-1". Irradiation conditions: source — Co 60 , E = 1.25 meV, field — maximum, dose rate at R = 2 m, D = 0.092 gray / min, total dose 4.50 gray, irradiation time = 49 min.

Через 21 день после облучения у крысы брали кусочки печени для исследования. Приготавливали парафиновые срезы толщиной 5-6 микрон и после депарафинизацими окрашивали гематоксилин-эозином. Затем с помощью светового микроскопа при увеличении 90 х 10 х 1,5 с помощью окулярной морфометрической сетки проводили подсчет количества гепатоцитов, имеющих разрушенные клеточные мембраны, на тест-площадь препарата. Подсчет проводили при заданной степени достоверности (Р≅ 0,05) с использованием таблиц Стрелкова (см. табл.1). 21 days after irradiation, rats were taken pieces of the liver for research. Paraffin sections 5-6 microns thick were prepared and, after dewaxing, stained with hematoxylin-eosin. Then, using a light microscope at a magnification of 90 x 10 x 1.5 using an ocular morphometric grid, we counted the number of hepatocytes having destroyed cell membranes on the test area of the drug. The calculation was carried out at a given degree of confidence (Р≅ 0.05) using Strelkov tables (see Table 1).

Перерывы между введениями гормона делали для того, чтобы восстановить количество гепатоцитов, готовых к делению. Breaks between hormone injections were made in order to restore the number of hepatocytes ready for division.

У крысы N 8 через 21 день после облучения оказалось 4,0 гепатоцита с разрушенными клеточными мембранами на тест-площадь препарата. In rat No. 8, 21 days after irradiation, 4.0 hepatocytes with destroyed cell membranes were found per test area of the drug.

П р и м е р 2. Крысу N 17 весом 200,0 облучали при таких же условиях как крысу N 8 в примере 1. После облучения крысе N 17 вводили гонадотропин хорионический в дозе 150 ЕД по приведенной схеме. Препараты печени готовили и изучали таким же образом, как у крысы N 8 в примере 1. PRI me R 2. Rat N 17 weighing 200.0 was irradiated under the same conditions as rat N 8 in example 1. After irradiation, rat N 17 was introduced chorionic gonadotropin in a dose of 150 PIECES according to the scheme. Liver preparations were prepared and studied in the same manner as in rat No. 8 in Example 1.

Через 21 день после облучения и введения гормона у крысах N 17 количество гепатоцитов с разрушенными мембранами в среднем оказалось равно 0,2 на тест-площадь препарата. 21 days after irradiation and administration of the hormone in rats No. 17, the number of hepatocytes with destroyed membranes averaged 0.2 per test area of the drug.

Данные, полученные в эксперименте послужили основанием для подсчета общего количества нормальных гепатоцитов, имеющих хорошо структурированное ядро, неповрежденную клеточную мембрану и достаточное количество белка в цитоплазме. The data obtained in the experiment served as the basis for calculating the total number of normal hepatocytes with a well-structured nucleus, an intact cell membrane and a sufficient amount of protein in the cytoplasm.

У облученных животных на оба срока исследования количество нормальных гепатоцитов было достоверно ниже (Р < 0,01), чем у облученных животных, получавших гонадотропин хорионический, табл.2. In irradiated animals for both periods of the study, the number of normal hepatocytes was significantly lower (P <0.01) than in irradiated animals treated with chorionic gonadotropin, Table 2.

Кроме того, на основании подсчета нормальных (НГ) и дегенерирующих гепатоцитов (ДГ), к последним относили гепатоциты с разрушенными клеточными мембранами, с измененным (кариопикноз, кариолизис) ядрами. Вычисляли отношение НГ/ДГ, которое показывает степень нормализации паренхимы печени. Это отношение у облученных животных, получавших гонадотропин хорионический на оба срока наблюдения оказалось достоверно (Р < 0,01) выше у облученных животных, получавших гонадотропин хорионический, чем у контрольных облученных животных, не получавших гормон, т.е. степень обратимости патологических изменений в печени после облучения под влиянием гонадотропина хорионического выражена более значительно, табл.3. In addition, based on the calculation of normal (NG) and degenerating hepatocytes (DH), the latter included hepatocytes with destroyed cell membranes, with altered (karyopyknosis, karyolysis) nuclei. The NG / DH ratio was calculated, which shows the degree of normalization of the liver parenchyma. This ratio in irradiated animals treated with chorionic gonadotropin for both observation periods was significantly (P <0.01) higher in irradiated animals treated with chorionic gonadotropin than in control irradiated animals that did not receive hormone, i.e. the degree of reversibility of pathological changes in the liver after irradiation under the influence of chorionic gonadotropin is more pronounced, Table 3.

Результаты исследования говорят о том, что способ можно использовать также и для лечения лучевых повреждений печени. The results of the study suggest that the method can also be used to treat radiation damage to the liver.

Claims (1)

СРЕДСТВО ДЛЯ СТАБИЛИЗАЦИИ КЛЕТОЧНЫХ МЕМБРАН ГЕПАТОЦИТОВ. MEANS FOR STABILIZING CELLULAR HEPATOCYTIC MEMBRANES. Применение хорионического гонадотропина в качестве средства для стабилизации клеточных мембран гепатоцитов. The use of chorionic gonadotropin as a means to stabilize the hepatocyte cell membranes.
SU4134597 1986-10-15 1986-10-15 Agent for stabilization of hepatocyte cellular membrane RU2029560C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU4134597 RU2029560C1 (en) 1986-10-15 1986-10-15 Agent for stabilization of hepatocyte cellular membrane

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU4134597 RU2029560C1 (en) 1986-10-15 1986-10-15 Agent for stabilization of hepatocyte cellular membrane

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2029560C1 true RU2029560C1 (en) 1995-02-27

Family

ID=21262857

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU4134597 RU2029560C1 (en) 1986-10-15 1986-10-15 Agent for stabilization of hepatocyte cellular membrane

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2029560C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2185189C2 (en) * 2000-01-05 2002-07-20 Беляков Михаил Авенирович Method for treating the cases of alcohol-induced liver injuries

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
1. Юдаев Н.А. Биохимия гормонов и гормональная регуляция. М., 1976, с.217-222. *
2. Авторское свидетельство СССР N 1043860, кл. A 61K 35/78, 1981. *
3. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М., 1985, ч.1, с.536-537. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2185189C2 (en) * 2000-01-05 2002-07-20 Беляков Михаил Авенирович Method for treating the cases of alcohol-induced liver injuries

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Carpentier et al. Intracellular localization of 125I-labeled insulin in hepatocytes from intact rat liver.
Barranco et al. Treatment of relapsing polychondritis with dapsone
DE69732225T2 (en) Process for the encapsulation of biologically active substances in erythrocytes and apparatus therefor
Gebauer et al. Synthesis of heparin-like glycosaminoglycans in rat ovarian slices
ALMIRON et al. Spermatogenic onset. II. FSH modulates mitotic activity of germ and Sertoli cells in immature rats
Lönnroth et al. β-Adrenergic dependent downregulation of insulin binding in rat adipocytes
Eskin et al. Rat mammary gland atypia produced by iodine blockade with perchlorate
Zhu et al. Effects of ethanol on rat Sertoli cell function: studies in vitro and in vivo
Haynes et al. Mechanisms of corticosteroid action on lymphocyte subpopulations: V. Effects of in Vivo hydrocortisone on the circulatory kinetics and function of naturally occurring and mitogen-induced suppressor cells in man
Planas et al. Serum iron and its transport mechanism in the fowl
Ottaway The insulin-like action of growth hormone
RU2029560C1 (en) Agent for stabilization of hepatocyte cellular membrane
Boyer et al. The paracellular pathway and bile formation
RU2134582C1 (en) Method of stimulation of hepatic tissue regeneration
Kondo et al. Serum sialyltransferase and liver catalase activity in cachectic nude mice bearing a human malignant melanoma
Midgley Jr Immunofluorescent localization of human pituitary luteinizing hormone
Polesky et al. Serum albumin polymorphism in North American Indians
RU2185835C2 (en) Method for stimulating hepatic tissue repair
Perkin et al. Immunofluorescent localization of parathyroid hormone in extracellular spaces of the bovine parathyroid gland
Wolf et al. Metabolism and distribution of I131-labeled angiotensin II
Mills et al. The intraovarian progesterone modulation of follicle development in the rabbit ovary
CLAYTON et al. Effects of oestrogens and ACTH on the adrenals of the guinea-pig compared with those in the rat
RU2007182C1 (en) Radioprotector
Quadagno et al. Intrahypothalamic actinomycin-D: Sexual behavior and nucleolar ultrastructure in the steroid-primed ovariectomized rat and the intact cyclic rat
KERKOF et al. Follicular reorganization and 131I utilization by cultured rat thyroid cells implanted into thyroidectomized rats