Claims (77)
1. Антитело, которое связывается с CLDN6 и/или CLDN9, или функциональный фрагмент указанного антитела, где1. An antibody that binds to CLDN6 and/or CLDN9, or a functional fragment of said antibody, wherein
указанное антитело содержит тяжелую цепь, содержащую CDRH1, CDRH2 и CDRH3, и легкую цепь, содержащую CDRL1, CDRL2 и CDRL3, описанные в любом из следующих (а) и (b):said antibody comprises a heavy chain comprising CDRH1, CDRH2 and CDRH3 and a light chain comprising CDRL1, CDRL2 and CDRL3 as described in any of the following (a) and (b):
(a) CDRH1, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 9, CDRH2, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 10, и CDRH3, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 11, и CDRL1, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 5, CDRL2, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 6, и CDRL3, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 7 или аминокислотной последовательности, содержащей одну или две аминокислотные замены в аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 7; и(a) CDRH1 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9, CDRH2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 10, and CDRH3 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, and CDRL1 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5, CDRL2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 6, and CDRL3 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 or an amino acid sequence comprising one or two amino acid substitutions in the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7; and
(b) CDRH1, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 15, CDRH2, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 16, и CDRH3, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 17, и CDRL1, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 12, CDRL2, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 13, и CDRL3, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 14.(b) CDRH1 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15, CDRH2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 16, and CDRH3 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, and CDRL1 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 12, CDRL2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13, and CDRL3 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 14.
2. Антитело по п. 1 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело содержит тяжелую цепь, содержащую CDRH1, CDRH2 и CDRH3, и легкую цепь, содержащую CDRL1, CDRL2 и CDRL3, описанные в любом из следующих (а) и (b):2. The antibody of claim 1 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody comprises a heavy chain comprising CDRH1, CDRH2 and CDRH3 and a light chain comprising CDRL1, CDRL2 and CDRL3, as described in any of the following (a) and (b):
(a) CDRH1, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 9, CDRH2, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 10, и CDRH3, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 11, и CDRL1, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 5, CDRL2, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 6, и CDRL3, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 7 или аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 8; и(a) CDRH1 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 9, CDRH2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 10, and CDRH3 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 11, and CDRL1 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 5, CDRL2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 6, and CDRL3 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 7 or the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 8; and
(b) CDRH1, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 15, CDRH2, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 16, и CDRH3, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 17, и CDRL1, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 12, CDRL2, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 13, и CDRL3, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 14.(b) CDRH1 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 15, CDRH2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 16, and CDRH3 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 17, and CDRL1 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 12, CDRL2 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 13, and CDRL3 consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 14.
3. Антитело по п. 1 или 2 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, описанные в любом из следующих (а) и (b):3. The antibody of claim 1 or 2 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody comprises a heavy chain variable region and a light chain variable region described in any of the following (a) and (b):
(a) вариабельная область тяжелой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 21, и вариабельная область легкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 19; и(a) a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 21 and a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 19; and
(b) вариабельная область тяжелой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 25, и вариабельная область легкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 23.(b) a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 25 and a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 23.
4. Антитело по любому из пп. 1-3 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из следующих (а)-(е), и вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из следующих (0-(Ю:4. The antibody of any one of claims 1 to 3 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody comprises a heavy chain variable region consisting of an amino acid sequence selected from the group consisting of the following (a) to (e) and a light chain variable region consisting of an amino acid sequence selected from the group consisting of the following (0 to (10:
(a) аминокислотная последовательность, представленная SEQ ID NO: 54;(a) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 54;
(b) аминокислотная последовательность, представленная SEQ ID NO: 58;(b) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 58;
(c) аминокислотная последовательность, представленная SEQ ID NO: 62;(c) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 62;
(d) аминокислотная последовательность с гомологией по меньшей мере 95% или выше по отношению к последовательности каркасной области, исключая последовательности CDR, в любой из последовательностей (а)-(с);(d) an amino acid sequence with at least 95% or greater homology to the framework region sequence, excluding CDR sequences, in any of sequences (a) to (c);
(e) аминокислотная последовательность, содержащая от одной до нескольких аминокислотных делеций, замен или добавлений в последовательности каркасной области, исключая последовательности CDR, в любой из последовательностей (а)-(с);(e) an amino acid sequence comprising one or more amino acid deletions, substitutions or additions in the framework region sequences, excluding the CDR sequences, in any of the sequences (a) to (c);
(f) аминокислотная последовательность, представленная SEQ ID NO: 38;(f) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 38;
(g) аминокислотная последовательность, представленная SEQ ID NO: 42;(g) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 42;
(h) аминокислотная последовательность, представленная SEQ ID NO: 46;(h) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 46;
(i) аминокислотная последовательность, представленная SEQ ID NO: 50;(i) the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 50;
(j) аминокислотная последовательность с гомологией по меньшей мере 95% или выше по отношению к последовательности каркасной области, исключая последовательности CDR, в любой из последовательностей (f)-(i); и(j) an amino acid sequence with at least 95% or greater homology to the framework region sequence, excluding CDR sequences, of any of sequences (f) to (i); and
(k) аминокислотная последовательность, содержащая одну или несколько аминокислотных делеций, замен или добавлений в последовательности каркасной области, исключая последовательности CDR, в любой из последовательностей (f)-(i).(k) an amino acid sequence comprising one or more amino acid deletions, substitutions or additions in the framework region sequences, excluding the CDR sequences, in any of the sequences (f) to (i).
5. Антитело по п. 4 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, выбранные из группы, состоящей из следующих (а)-(е):5. The antibody of claim 4 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody comprises a heavy chain variable region and a light chain variable region selected from the group consisting of the following (a) to (e):
(a) вариабельная область тяжелой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 54, и вариабельная область легкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 38;(a) a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 54 and a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 38;
(b) вариабельная область тяжелой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 58, и вариабельная область легкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 42;(b) a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 58 and a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 42;
(c) вариабельная область тяжелой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 54, и вариабельная область легкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 46;(c) a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 54 and a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 46;
(d) вариабельная область тяжелой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 58, и вариабельная область легкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 50; и(d) a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 58 and a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 50; and
(e) вариабельная область тяжелой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 62, и вариабельная область легкой цепи, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 46.(e) a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 62 and a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 46.
6. Антитело по любому из пп. 1-5 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело представляет собой химерное антитело.6. The antibody according to any one of claims 1-5 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody is a chimeric antibody.
7. Антитело по любому из пп. 1-5 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело представляет собой гуманизированное антитело.7. The antibody according to any one of claims 1-5 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody is a humanized antibody.
8. Антитело по любому из пп. 1-7 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело содержит константную область тяжелой цепи lgG1 человека, lgG2 человека или lgG4 человека.8. The antibody according to any one of claims 1-7 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody comprises a constant region of the heavy chain of human IgG1, human IgG2 or human IgG4.
9. Антитело по п. 7 или 8 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело содержит тяжелую цепь и легкую цепь, выбранные из группы, состоящей из следующих (а)-(е):9. The antibody of claim 7 or 8 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody comprises a heavy chain and a light chain selected from the group consisting of the following (a) to (e):
(а) тяжелая цепь, состоящая из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 52, и легкая цепь, состоящая из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 из SEQ ID NO: 36 (H1L1);(a) a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 52 and a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 36 (H1L1);
(b) тяжелая цепь, состоящая из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 56, и легкая цепь, состоящая из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 из SEQ ID NO: 40 (H2L2);(b) a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 56 and a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 40 (H2L2);
(c) тяжелая цепь, состоящая из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 52, и легкая цепь, состоящая из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 из SEQ ID NO: 44 (H1L3);(c) a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 52 and a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 44 (H1L3);
(d) тяжелая цепь, состоящая из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 56, и легкая цепь, состоящая из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 из SEQ ID NO: 48 (H2L4); и(d) a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 56 and a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 48 (H2L4); and
(e) тяжелая цепь, состоящая из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 60, и легкая цепь, состоящая из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 из SEQ ID NO: 44 (H3L3).(e) a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 60 and a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 44 (H3L3).
10. Антитело по п. 9 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело содержит тяжелую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 52, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 из SEQ ID NO: 36 (H1L1).10. The antibody of claim 9 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody comprises a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 52, and a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 36 (H1L1).
11. Антитело по п. 1 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело связывается с сайтом антигена, распознаваемого антителом, по любому из пп. 2-5 и 10.11. The antibody according to claim 1 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody binds to the site of the antigen recognized by the antibody according to any one of claims 2-5 and 10.
12. Антитело по п. 1 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело конкурирует с антителом по любому из пп. 2-5 и 10 за связывание с CLDN6 и/или CLDN9.12. The antibody of claim 1 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody competes with the antibody of any one of claims 2-5 and 10 for binding to CLDN6 and/or CLDN9.
13. Полинуклеотид, кодирующий антитело по любому из пп. 1-12.13. A polynucleotide encoding an antibody according to any one of claims 1-12.
14. Полинуклеотид по п. 13, содержащий полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из следующих (a)-(j):14. The polynucleotide of claim 13, comprising a polynucleotide selected from the group consisting of the following (a) to (j):
(a) полинуклеотид, кодирующий вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 54, и полинуклеотид, кодирующий вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 38;(a) a polynucleotide encoding a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 54 and a polynucleotide encoding a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 38;
(b) полинуклеотид, кодирующий вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 58, и полинуклеотид, кодирующий вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 42;(b) a polynucleotide encoding a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 58 and a polynucleotide encoding a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 42;
(c) полинуклеотид, кодирующий вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 54, и полинуклеотид, кодирующий вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 46;(c) a polynucleotide encoding a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 54 and a polynucleotide encoding a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 46;
(d) полинуклеотид, кодирующий вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 58, и полинуклеотид, кодирующий вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 50;(d) a polynucleotide encoding a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 58 and a polynucleotide encoding a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 50;
(e) полинуклеотид, кодирующий вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 62, и полинуклеотид, кодирующий вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 46;(e) a polynucleotide encoding a heavy chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 62 and a polynucleotide encoding a light chain variable region consisting of the amino acid sequence represented by SEQ ID NO: 46;
(f) полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 52, и полинуклеотид, кодирующий легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 SEQ ID NO: 36;(f) a polynucleotide encoding a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 52, and a polynucleotide encoding a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 36;
(g) полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 56, и полинуклеотид, кодирующий легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 SEQ ID NO: 40;(g) a polynucleotide encoding a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 56, and a polynucleotide encoding a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 40;
(h) полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 52, и полинуклеотид, кодирующий легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 SEQ ID NO: 44;(h) a polynucleotide encoding a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 52, and a polynucleotide encoding a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 44;
(i) полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 56, и полинуклеотид, кодирующий легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 SEQ ID NO: 48; а также(i) a polynucleotide encoding a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 56 and a polynucleotide encoding a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 48; and
(j) полинуклеотид, кодирующий тяжелую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 20 по 471 SEQ ID NO: 60, и полинуклеотид, кодирующий легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности, состоящей из аминокислотных остатков с 21 по 234 SEQ ID NO: 44.(j) a polynucleotide encoding a heavy chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 20 to 471 of SEQ ID NO: 60, and a polynucleotide encoding a light chain consisting of an amino acid sequence consisting of amino acid residues 21 to 234 of SEQ ID NO: 44.
15. Вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид по п. 13 или 14.15. An expression vector containing a polynucleotide according to claim 13 or 14.
16. Клетка-хозяин, трансформированная вектором экспрессии по п. 15.16. A host cell transformed with the expression vector according to claim 15.
17. Клетка-хозяин по п. 16, причем указанная клетка-хозяин представляет собой эукариотическую клетку.17. The host cell of claim 16, wherein said host cell is a eukaryotic cell.
18. Клетка-хозяин по п. 17, причем указанная клетка-хозяин представляет собой клетку животного.18. The host cell of claim 17, wherein said host cell is an animal cell.
19. Способ получения антитела по любому из пп. 1-12 или функционального фрагмента антитела, включающий стадии: культивирование клетки-хозяина по любому из пп. 16-18 и сбор целевого антитела из культуры, полученной на стадии культивирования.19. A method for producing an antibody according to any one of claims 1-12 or a functional fragment of an antibody, comprising the steps of: culturing a host cell according to any one of claims 16-18 and collecting the target antibody from the culture obtained in the culturing step.
20. Антитело, полученное с применением способа по п. 19, или функциональный фрагмент указанного антитела.20. An antibody obtained using the method according to claim 19, or a functional fragment of said antibody.
21. Антитело по любому из пп. 1-12 и 20 или функциональный фрагмент указанного антитела, где указанное антитело содержит одну, две или более модификаций, выбранных из группы, состоящей из N-связанного гликозилирования, О-связанного гликозилирования, N-концевого процессинга, С-концевого процессинга, дезамидирования, изомеризации аспарагиновой кислоты, окисления метионина, добавления метионинового остатка на N-конце, амидирования пролинового остатка и делеций одного или двух аминокислотных остатков на карбоксильном конце тяжелой цепи.21. The antibody of any one of claims 1-12 and 20 or a functional fragment of said antibody, wherein said antibody comprises one, two or more modifications selected from the group consisting of N-linked glycosylation, O-linked glycosylation, N-terminal processing, C-terminal processing, deamidation, aspartic acid isomerization, methionine oxidation, addition of a methionine residue at the N-terminus, amidation of a proline residue, and deletions of one or two amino acid residues at the carboxyl terminus of the heavy chain.
22. Антитело по п. 21 или функциональный фрагмент указанного антитела, где на карбоксильном конце тяжелой цепи удалены один или несколько аминокислотных остатков.22. The antibody according to claim 21 or a functional fragment of said antibody, wherein one or more amino acid residues are removed from the carboxyl end of the heavy chain.
23. Антитело по п. 22 или функциональный фрагмент указанного антитела, где один аминокислотный остаток удален на карбоксильном конце каждой из двух тяжелых цепей.23. The antibody of claim 22 or a functional fragment of said antibody, wherein one amino acid residue is removed at the carboxyl end of each of the two heavy chains.
24. Антитело по любому из пп. 20-23 или функциональный фрагмент указанного антитела, где пролиновый остаток на карбоксильном конце тяжелой цепи дополнительно амидирован.24. The antibody according to any one of claims 20-23 or a functional fragment of said antibody, wherein the proline residue at the carboxyl terminus of the heavy chain is additionally amidated.
25. Способ получения гликан-ремоделированного антитела, включающий следующие стадии:25. A method for producing a glycan-remodeled antibody, comprising the following steps:
i) культивирование клетки-хозяина по любому из пп. 16-18 и сбор целевого антитела из полученной культуры;i) culturing the host cell according to any one of claims 16-18 and collecting the target antibody from the resulting culture;
ii) обработка антитела, полученного на стадии i), гидролазой с получением (Fucα1,6)GlcNAc-антитела; иii) treating the antibody obtained in step i) with a hydrolase to obtain a (Fucα1,6)GlcNAc antibody; and
iii) - 1 проведение реакции полученного (Fucα1,6)ClcNAc-антитела с молекулой-донором гликана в присутствии трансгликозидазы, причем указанную молекулу-донор гликана получают путем введения ПЭГ-линкера, содержащего азидную группу, в карбонильную группу карбоновой кислоты в положении 2 сиаловой кислоты в MSG (9) или SG (10) и оксазолинирования восстанавливающего конца, илиiii) - 1 reacting the obtained (Fucα1,6)ClcNAc antibody with a glycan donor molecule in the presence of transglycosidase, wherein said glycan donor molecule is obtained by introducing a PEG linker containing an azide group into the carbonyl group of the carboxylic acid at position 2 of the sialic acid in MSG (9) or SG (10) and oxazolining the reducing end, or
iii) - 2 проведение реакции полученного (Fucal,6)ClcNAc-антитела с молекулой-донором гликана в присутствии трансгликозидазы, причем указанную молекулу-донор гликана получают путем введения ПЭГ-линкера, содержащего азидную группу, в карбонильную группу карбоновой кислоты в положении 2 сиаловой кислоты в (MSG-)Asn или (SG-)Asn с необязательно защищенной α-аминогруппой, а также в карбонильную группу карбоновой кислоты в Asn, вызывая действие гидролазы, и последующего оксазолинирования восстанавливающего конца.iii) - 2 reacting the obtained (Fucal,6)ClcNAc antibody with a glycan donor molecule in the presence of a transglycosidase, wherein said glycan donor molecule is obtained by introducing a PEG linker containing an azide group into the carbonyl group of the carboxylic acid at position 2 of the sialic acid in (MSG-)Asn or (SG-)Asn with an optionally protected α-amino group, as well as into the carbonyl group of the carboxylic acid in Asn, causing the action of a hydrolase, and subsequent oxazolineation of the reducing end.
26. Способ по п. 25, дополнительно включающий стадию очистки (Fucα1,6)GlcNAc-антитела путем очистки реакционного раствора, полученного на стадии ii), на колонке с гидроксиапатитом.26. The method according to claim 25, further comprising the step of purifying the (Fucα1,6)GlcNAc antibody by purifying the reaction solution obtained in step ii) on a hydroxyapatite column.
27. Гликан-ремоделированное антитело, полученное с применением способа, по п. 25 или 26.27. A glycan-remodeled antibody obtained using the method according to claim 25 or 26.
28. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по любому из пп. 1-12, 20-24 и 27 или функционального фрагмента указанного антитела.28. A pharmaceutical composition comprising an antibody according to any one of claims 1-12, 20-24 and 27 or a functional fragment of said antibody.
29. Фармацевтическая композиция по п. 28, где указанная композиция представляет собой противоопухолевое лекарственное средство.29. The pharmaceutical composition according to claim 28, wherein said composition is an antitumor drug.
30. Фармацевтическая композиция по п. 29, где указанная опухоль представляет собой опухоль, экспрессирующую CLDN6 и/или CLDN9.30. The pharmaceutical composition according to claim 29, wherein said tumor is a tumor expressing CLDN6 and/or CLDN9.
31. Фармацевтическая композиция по п. 29 или 30, причем указанная опухоль представляет собой рак яичников (поверхностную эпителиальную опухоль, стромальную опухоль или опухоль зародышевой клетки), рак легкого (немелкоклеточный рак легкого или мелкоклеточный рак легкого), рак желудка, рак эндометрия, рак яичка (семиному или несеминому), рак шейки матки, плацентарную хориокарциному, рак почки, уротериальный рак, коло ректальный рак, рак простаты, мультиформную глиобластому, рак головного мозга, рак поджелудочной железы, рак молочной железы, меланому, рак печени, рак мочевого пузыря или рак пищевода.31. The pharmaceutical composition according to claim 29 or 30, wherein said tumor is ovarian cancer (a superficial epithelial tumor, a stromal tumor, or a germ cell tumor), lung cancer (non-small cell lung cancer or small cell lung cancer), gastric cancer, endometrial cancer, testicular cancer (seminoma or non-seminoma), cervical cancer, placental choriocarcinoma, kidney cancer, urothelial cancer, colorectal cancer, prostate cancer, glioblastoma multiforme, brain cancer, pancreatic cancer, breast cancer, melanoma, liver cancer, bladder cancer, or esophageal cancer.
32. Способ лечения опухоли, где антитело по любому из пп. 1-12, 20-24 и 27 или функциональный фрагмент указанного антитела вводят индивидууму.32. A method for treating a tumor, wherein the antibody according to any one of claims 1-12, 20-24 and 27 or a functional fragment of said antibody is administered to an individual.
33. Способ по п. 32, где указанная опухоль представляет собой опухоль, экспрессирующую CLDN6 и/или CLDN9.33. The method according to claim 32, wherein said tumor is a tumor expressing CLDN6 and/or CLDN9.
34. Способ по п. 32 или 33, где указанная опухоль представляет собой рак яичников (поверхностную эпителиальную опухоль, стромальную опухоль или опухоль зародышевой клетки), рак легкого (немелкоклеточный рак легкого или мелкоклеточный рак легкого), рак желудка, рак эндометрия, рак яичка (семиному или несеминому), рак шейки матки, плацентарную хориокарциному, рак почки, уротериальный рак, коло ректальный рак, рак простаты, мультиформную глиобластому, рак головного мозга, рак поджелудочной железы, рак молочной железы, меланому, рак печени, рак мочевого пузыря или рак пищевода.34. The method according to claim 32 or 33, wherein said tumor is ovarian cancer (a superficial epithelial tumor, a stromal tumor, or a germ cell tumor), lung cancer (non-small cell lung cancer or small cell lung cancer), gastric cancer, endometrial cancer, testicular cancer (seminoma or non-seminoma), cervical cancer, placental choriocarcinoma, kidney cancer, urothelial cancer, colorectal cancer, prostate cancer, glioblastoma multiforme, brain cancer, pancreatic cancer, breast cancer, melanoma, liver cancer, bladder cancer, or esophageal cancer.
35. Способ лечения опухоли, где фармацевтическую композицию, содержащую антитело по любому из пп. 1-12, 20-24 и 27 или функциональный фрагмент указанного антитела, и по меньшей мере одно противоопухолевое лекарственное средство вводят индивидууму одновременно, раздельно или последовательно.35. A method for treating a tumor, wherein a pharmaceutical composition comprising an antibody according to any one of claims 1-12, 20-24 and 27 or a functional fragment of said antibody and at least one antitumor drug are administered to an individual simultaneously, separately or sequentially.