Claims (4)
1. Моноклональное антитело изотипа IgG4, специфичное к синдекану-1 (CD138), представленное двумя тяжелыми и двумя легкими цепями, каждая из которых содержит вариабельный фрагмент и константный фрагмент, связывающее CD138 с аффинностью, превышающей аффинность известных мышиных антител, для терапии опухолевых заболеваний, отличающееся тем, что содержит участки IgG3 в константном фрагменте, вариабельный фрагмент представлен мышиными, гипервариабельными участками и человеческими каркасными участками, константный фрагмент полностью человеческий и содержит аминокислотные замены на С-конце, каждая цепь дополнительно содержит сигнальную секреторную последовательность на N-конце, отщепляющуюся при секреции из клеток-продуцентов, тяжелая цепь представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:1, закодированной нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:3, легкая цепь - каппа и представлена аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:2, закодированной нуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:4, причем нуклеотидные последовательности кодонно оптимизированы для экспрессии в клетках млекопитающих, аффинность антитела к CD138 превышает также таковую известных химерных антител, антитело используют в качестве самостоятельного действующего вещества.1. A monoclonal antibody of the IgG4 isotype specific for syndecan-1 (CD138), represented by two heavy and two light chains, each of which contains a variable fragment and a constant fragment that binds CD138 with an affinity greater than the affinity of known murine antibodies for the treatment of tumor diseases, characterized in that it contains IgG3 regions in a constant fragment, the variable fragment is represented by murine, hypervariable regions and human framework regions, the constant fragment is completely human and contains amino acid substitutions at the C-terminus, each chain additionally contains a signal secretory sequence at the N-terminus that is cleaved by secretion from producer cells, the heavy chain is represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 1, encoded by the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 3, light chain - kappa and is represented by the amino acid sequence of SEQ ID NO: 2 encoded by the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 4, and the nucleotide sequences are codon optimized for expression in mammalian cells and, the affinity of the anti-CD138 antibody also exceeds that of the known chimeric antibodies, the antibody is used as an independent active substance.
2. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что получено способом, включающим получение мышиных моноклональных антител к CD138, определение их гипервариабельных участков, расчет аминокислотной последовательности тяжелой и легкой цепей гуманизированного антитела, включающий выбор участков константных фрагментов изотипов антител, обуславливающих цитотоксичность, выявление аминокислотных замен, увеличивающих время полужизни антитела, их перенос в соответствующие области константного фрагмента тяжелой цепи IgG4, помещение гипервариабельных участков мышиных антител между соответствующими каркасными участками вариабельного фрагмента тяжелой и легкой цепи антитела человека, а также введение на N-конце каждой цепи сигнальной секреторной последовательности, перевод полученных аминокислотных последовательностей в нуклеотидные, с одновременным проведением кодонной оптимизации для экспрессии в клетках млекопитающих, синтез и2. The antibody according to claim 1, characterized in that it is obtained by a method comprising obtaining murine monoclonal antibodies to CD138, determining their hypervariable regions, calculating the amino acid sequence of the heavy and light chains of a humanized antibody, including selecting regions of constant fragments of antibody isotypes that determine cytotoxicity, detection amino acid substitutions that increase the half-life of the antibody, their transfer to the corresponding regions of the constant fragment of the IgG4 heavy chain, placing hypervariable sites of murine antibodies between the corresponding frame sections of the variable fragment of the heavy and light chains of a human antibody, as well as the introduction of a signal secretory sequence at the N-terminus of each chain, translation of the obtained amino acid sequences into nucleotide sequences, with simultaneous codon optimization for expression in mammalian cells, synthesis and
амплификацию нуклеотидных последовательностей и введение в клетку млекопитающего в векторе для экспрессии, наработку и очистку синтезируемого антитела.amplification of nucleotide sequences and introduction into a mammalian cell in a vector for expression, production and purification of the synthesized antibody.
3. Антитело по п. 1, отличающееся тем, что обладает самостоятельной антитело-зависимой и комплемент-зависимой цитотоксичностью.3. The antibody according to claim 1, characterized in that it has an independent antibody-dependent and complement-dependent cytotoxicity.
4. Антитело по п. 1, отличающееся большим временем полужизни.
4. The antibody according to claim 1, characterized by a large half-life.