RU2018313C1 - Method for producing probiotics for animals and poultry - Google Patents
Method for producing probiotics for animals and poultry Download PDFInfo
- Publication number
- RU2018313C1 RU2018313C1 SU5040840A RU2018313C1 RU 2018313 C1 RU2018313 C1 RU 2018313C1 SU 5040840 A SU5040840 A SU 5040840A RU 2018313 C1 RU2018313 C1 RU 2018313C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bifidobacteria
- mass
- biomass
- milk
- culture
- Prior art date
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims description 15
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title claims description 6
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 244000144977 poultry Species 0.000 title description 5
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims abstract description 30
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 21
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 10
- 108010027350 protosubtilin Proteins 0.000 claims abstract description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 6
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 6
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims abstract description 6
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims abstract description 6
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims abstract description 6
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 6
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 claims abstract description 4
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims abstract description 4
- 241000194035 Lactococcus lactis Species 0.000 claims abstract 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 15
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 claims description 11
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 10
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 4
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 claims description 4
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 claims description 4
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 claims description 4
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 4
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 3
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims 2
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 claims 1
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 10
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 abstract description 10
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 abstract description 8
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 abstract description 8
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 abstract description 6
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 abstract description 6
- 244000005706 microflora Species 0.000 abstract description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 abstract description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 abstract description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 4
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 abstract 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 abstract 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 2
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 abstract 1
- RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H iron(3+) sulfate Chemical compound [Fe+3].[Fe+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H 0.000 abstract 1
- 229910000360 iron(III) sulfate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 abstract 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 abstract 1
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 244000309466 calf Species 0.000 description 10
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 6
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 6
- 241001468229 Bifidobacterium thermophilum Species 0.000 description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 5
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 4
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 4
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 description 3
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 3
- 241000283903 Ovis aries Species 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-L Phosphate ion(2-) Chemical compound OP([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000020186 condensed milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 229910000358 iron sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Fodder In General (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к молочной, биотехнологической промышленности и предназначено для непосредственного использования или в качестве добавки в корм телятам, поросятам, ягнятам, птице, пушным зверям, а также домашним и лабораторным животным с целью быстрейшего формирования нормального микробиоценоза кишечника, а также профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний. The invention relates to the dairy, biotechnology industry and is intended for direct use or as an additive in feed to calves, pigs, lambs, poultry, fur animals, as well as domestic and laboratory animals with the aim of the fastest formation of normal intestinal microbiocenosis, as well as the prevention and treatment of gastrointestinal intestinal diseases.
Известен способ производства сухого бактериального препарата (СБА), содержащего Laadophilus, B. bifidum, Str. faecium, предназначенного для лечения желудочно-кишечных заболеваний животных. Такой препарат получают путем распылительной сушки смеси указанных культур, причем каждая культура выращивается отдельно на молоке. A known method for the production of dry bacterial preparation (SBA) containing Laadophilus, B. bifidum, Str. faecium, intended for the treatment of gastrointestinal diseases of animals. Such a preparation is obtained by spray drying a mixture of these cultures, each culture being grown separately in milk.
Недостатком способа является использование в составе микрофлоры препарата фекального стрептококка Str. faecium, который является условно-патогенным, относится к санитарно-показательным микроорганизмам и поэтому не пригоден для применения на предприятиях молочной промышленности. The disadvantage of this method is the use of microflora of the preparation of fecal streptococcus Str. faecium, which is conditionally pathogenic, belongs to sanitary indicative microorganisms and therefore is not suitable for use in dairy enterprises.
Кроме того, в состав препарата включены бифидобактерии вида B.bifidum, которые не характерны для микробиоценоза кишечника животных, а также неспецифические для животных штаммы ацидофильной палочки. Концентрация бифидобактерий в препарате такова, что одна лечебная доза бифидобактерий обеспечивается дачей около 100 г препарата. In addition, the composition of the preparation includes bifidobacteria of the species B. bifidum, which are not characteristic of microbiocenosis of the intestines of animals, as well as strains of acidophilus bacillus non-specific for animals. The concentration of bifidobacteria in the drug is such that one therapeutic dose of bifidobacteria is provided by giving about 100 g of the drug.
Данный вид бифидобактерий B. bifidum преобладает в кишечнике грудных детей. Недостатком способа является также приготовление закваски из чистой культуры бифидобактерий. Такой прием приготовления закваски трудно осуществить на промышленных предприятиях из-за медленного размножения бифидобактерий в молоке и др. питательных средах. This type of bifidobacterium B. bifidum prevails in the intestines of infants. The disadvantage of this method is the preparation of yeast from a pure culture of bifidobacteria. This method of preparing the starter culture is difficult to implement in industrial enterprises due to the slow reproduction of bifidobacteria in milk and other nutrient media.
Сущность изобретения заключается в изменении состава питательной среды, применяемой для промышленного выращивания бифидобактерий за счет дополнительного введения ацетата натрия, гидрофосфата или дигидрофосфата калия двухводного, использования в качестве энергетического источника глюкозы вместо лактозы, а также повышения концентрации кукурузного экстракта до 1,0-2,0 мас.%, сернокислого закисного железа до 0,03-0,05 мас.% и снижения содержания трехзамещенного лимоннокислого натрия до 0,4-0,5 мас.%, в изменении состава микрофлоры, соотношения культур и способа накопления их биомассы, предусматривающего совместное выращивание бифидобактерий вида B.thermophilum с мезофильными молочнокислыми стрептококками L. lactis subsp. diacetilactis на питательной среде при посевных дозах 8-10 мас.% и 0,01-0,1 мас. % соответственно, и отдельное выращивание ацидофильной палочки на молоке; использовании в качестве легкоусвояемого кормового субстрата и одновременно среды высушивания белкового гидролизата обезжиренного молока, полученного с помощью протосубтилина активностью 70-80 ед./г в течение 6-8 ч гидролиза при дозе фермента 0,020-0,080 мас.%; внесении в сгущенный белковый гидролизат 5-20% инокулянта, содержащего бифидобактерии и молочнокислые стрептококки, и 15% закваски ацидофильной палочки; распылительной сушке смеси. The invention consists in changing the composition of the nutrient medium used for the industrial cultivation of bifidobacteria due to the additional introduction of sodium acetate, hydrogen phosphate or potassium dihydrogen phosphate two-water, using glucose instead of lactose as an energy source, and also increasing the concentration of corn extract to 1.0-2.0 wt.%, ferrous sulfate to 0.03-0.05 wt.% and reduce the content of trisubstituted sodium citrate to 0.4-0.5 wt.%, in changing the composition of microflora, the ratio of ku tur and method of accumulation of biomass on the joint cultivation of bifidobacteria species B.thermophilum with mesophilic lactic streptococci L. lactis subsp. diacetilactis on a nutrient medium at sowing doses of 8-10 wt.% and 0.01-0.1 wt. %, respectively, and a separate cultivation of acidophilus bacillus in milk; using skim milk protein hydrolyzate obtained with protosubtiline with an activity of 70-80 units / g for 6-8 hours of hydrolysis at an enzyme dose of 0.020-0.080 wt% as an easily digestible feed substrate and at the same time a drying medium; introducing into the condensed protein hydrolyzate 5-20% of an inoculant containing bifidobacteria and lactic streptococci, and 15% sourdough of acidophilus bacillus; spray drying the mixture.
Предусматривается также применение центробежного отделения биомассы бифидобактерий и молочнокислых стрептококков от культуральной среды перед ее внесением в сгущенный белковый гидролизат, позволяющий увеличить в 5-10 раз количество бифидобактерий в готовом продукте. The use of centrifugal separation of biomass of bifidobacteria and lactic streptococci from the culture medium before its introduction into the condensed protein hydrolyzate, which allows to increase the amount of bifidobacteria in the finished product by 5-10 times, is also envisaged.
Существенным отличительным признаком изобретения является использование в качестве микрофлоры кормовой добавки штаммов бифидобактерий, выделенных от животных вида Bihdobacterium thermophilum. An essential distinguishing feature of the invention is the use of microflora as a feed additive for strains of bifidobacteria isolated from animals of the species Bihdobacterium thermophilum.
В состав питательной среды вводят следующие компоненты, мас.%: Глюкоза 0,4-0,5 Кукурузный экстракт 1,8-2,0 Цитрат натрия трехзамещенный 0,4-0,5 Ацетат натрия 0,2-0,3 Калия гидрофосфат или дигидрофосфат двухводный 0,1-0,2 Железо сернокислое закисное семиводное 300-500 мг/л;
(0,03-0,05); Агар - агар 700-750 мг/л
(0,07-0,075);
Основа - частично гидролизованное протосубтилином 3%-ное обезжиренное молоко.The following components are introduced into the composition of the nutrient medium, wt.%: Glucose 0.4-0.5 Corn extract 1.8-2.0 Sodium citrate trisubstituted 0.4-0.5 Sodium acetate 0.2-0.3 Potassium hydrogen phosphate or dihydrogen phosphate two-water 0.1-0.2 Ferrous sulphate ferrous seven-water 300-500 mg / l;
(0.03-0.05); Agar - Agar 700-750 mg / L
(0.07-0.075);
Basis - 3% skim milk partially hydrolyzed with protosubtilin.
Накопление штаммов бифидобактерий, выделенных от животных, производят с мезофильными молочнокислыми стрептококками при температуре 39-41оС при посевных дозах культур 8-10 мас.% и 0,1-0,01 мас.% соответственно. Штаммы ацидофильной палочки, выделенные от животных, выращивают в обезжиренном молоке.Accumulation of bifidobacteria strains isolated from animals, produce a mesophilic lactic streptococci at a temperature of 39-41 ° C at doses sown crops 8-10 wt.% And 0.1-0.01 wt.%, Respectively. Acidophilic bacillus strains isolated from animals are grown in skim milk.
Молоко, предназначенное для приготовления белкового гидролизата, нагревают до температуры 55-57оС и вносят протосубтилин в количестве 0,02-0,08 мас.%. Гидролиз ведут при указанной температуре 6-8 ч при постоянном перемешивании. По окончании гидролизат подвергают термической обработке при температуре 90оС в течение 25-30 мин. Далее гидролизат сгущают в вакуум-выпарной установке при температуре 60-65оС до массовой доли сухих веществ 35-42% . При температуре 45-50оС в гидролизат вносят 5-20% инокулянта совместной культуры бифидобактерий и молочнокислых стрептококков (или их биомассы, полученной после сепарирования культуральной среды) и 1-5% закваски ацидофильной палочки, после чего смесь подвергают распылительной сушке.Milk intended for preparing a protein hydrolyzate, is heated to a temperature of 55-57 ° C and introduced protosubtilin in an amount of 0.02-0.08 wt.%. Hydrolysis is carried out at the indicated temperature for 6-8 hours with constant stirring. At the end of the hydrolyzate is subjected to heat treatment at a temperature of 90 about C for 25-30 minutes Further, the hydrolyzate is concentrated in a vacuum evaporator unit at a temperature of 60-65 ° C until the mass fraction of solids of 35-42%. At a temperature of 45-50 ° C in 5-20% hydrolyzate introduced inoculant co-culture of bifidobacteria and lactic streptococci (obtained after separation of the culture medium or their biomass) and the leaven 1-5% Lactobacillus acidophilus, after which the mixture was spray-dried.
Сухой прибиотический продукт, полученный по описанному выше способу, содержит в 1 г сотни миллионов жизнеспособных клеток бифидобактерий и десятки-сотни миллионов клеток ацидофильной палочки; содержание аминного азота в продукте составляет 0,1-0,12 мас.%. The dry apiotic product obtained by the method described above contains in 1 g hundreds of millions of viable bifidobacteria cells and tens to hundreds of millions of acidophilus bacillus cells; the content of amine nitrogen in the product is 0.1-0.12 wt.%.
Полученный препарат фасуют и упаковывают. The resulting preparation is Packed and packaged.
П р и м е р 1. В 1000 л водопроводной воды вносят 30 кг сухого обезжиренного молока, после тщательного перемешивания, смесь нагревают до 55оС, доводят рН с помощью раствора NaОН до 6,75, добавляют 150 г протосубтилина Г 10х активностью 70 ед/г и выдерживают при этих условиях 2,5 ч. После гидролиза в среду вносят 0,5 кг глюкозы, 0,5 кг треxзамещенного цитрата натрия, 1,8 л кукурузного экстракта, 0,3 кг уксуснокислого натрия, 0,2 кг гидрофосфата калия двухводного, 0,03 кг сернокислого железа 7-водного, 0,07 кг агар-агар. Среду стерилизуют при 121оС в течение 15 мин, затем охлаждают до 40оС, после чего инокулируют 10% культуры B.thermophilum Y-3, выделенного от телят, и 0,01% культуры L. lactis subsp. diacetilactis 5061. Выращивание микроорганизмов проводят при 40оС в течение 16 ч. Затем выращенной смесью культуp инокулируют новую порцию среды в количестве 10%. Выращивание пересадочной совместной культуры проводят при температуре 40оС в течение 15 ч.EXAMPLES EXAMPLE 1 To 1000 liters of tap water introduced 30 kg of skimmed milk powder, after thorough mixing, the mixture was heated to 55 ° C, the pH was adjusted to 6.75 using, was added 150 g of NaOH solution protosubtilin T activity 10x 70 units / g and incubated under these conditions for 2.5 hours. After hydrolysis, 0.5 kg of glucose, 0.5 kg of trisubstituted sodium citrate, 1.8 l of corn extract, 0.3 kg of sodium acetate, 0.2 kg are added to the medium potassium hydrogen phosphate two-water, 0.03 kg of iron sulfate 7-water, 0.07 kg of agar-agar. The medium was sterilized at 121 ° C for 15 minutes, then cooled to 40 ° C, then inoculated with 10% B.thermophilum Y-3 culture, isolated from calves, and 0.01% of the culture L. lactis subsp. diacetilactis 506 1 . The cultivation of microorganisms is carried out at 40 about C for 16 hours. Then, with the grown culture mixture, a new portion of the medium is inoculated in an amount of 10%. The cultivation of transplant joint culture is carried out at a temperature of 40 about C for 15 hours
В обезжиренном молоке при температуре 37оС выращивают чистую культуру ацидофильной палочки (штамм ВКПМ В - 2728), выделен от телят, в течение 14 ч до образования сгустка.The skim milk at 37 ° C grown pure culture of Lactobacillus acidophilus (strain VKPM B - 2728), isolated from calves within 14 hours prior to clot formation.
Обезжиренное молоко кислотностью 18оТ, полученное сепарированием молока, отвечающего требованиям ГОСТ 13264-70, в количестве 100 кг подают в ферментер с мешалкой, подогревают до температуры 57оС, раствором NaOH доводят рН до значения 6,75 и при постоянном перемешивании вносят 0,3 мас.% препарата протосубтилина Г10х активностью 80 ед./г. Гидролиз ведут при температуре 57оС в течение 6 ч при постоянном перемешивании. Через 6 ч гидролизат сгущают в вакуум-выпарной установке до содержания суxиx веществ 35% .Skim milk acidity of 18 T obtained by separation of milk, meet the requirements of GOST 13264-70, in an amount of 100 kg in the fermenter fed with a stirrer, preheated to a temperature of 57 ° C, NaOH solution the pH is adjusted to a value of 6.75 and with constant stirring, making 0 , 3 wt.% Preparation of protosubtilin G10x with an activity of 80 units / g. Hydrolysis is carried out at a temperature of 57 about C for 6 hours with constant stirring. After 6 hours, the hydrolyzate is concentrated in a vacuum evaporator to a dry matter content of 35%.
В сгущенный до содержания 35% сухих веществ белковый гидролизат обезжиренного молока при температуре 45оС вносят 10% совместной культуры бифидобактерий и молочнокислых стрептококков и 1% культуры ацидофильной палочки. После тщательного перемешивания смесь подвергают распылительному высушиванию.The thickened to a content of 35% protein hydrolyzate dry solids of skim milk at 45 ° C is made 10% of co-culture of bifidobacteria and lactic streptococci and 1% of Lactobacillus acidophilus culture. After thorough mixing, the mixture is spray dried.
Готовое сухое кормовое средство для телят с содержанием аминного азота 0,1% содержит в 1 г 500 млн.к.е. бифидобактерий и 250 млн клеток ацидофильной палочки. Продукт фасуется по 10-15 г. Может применяться и другим видам животных и птице. Ready dry feed for calves with an amine nitrogen content of 0.1% contains in 1 g of 500 million cu bifidobacteria and 250 million acidophilus bacillus cells. The product is packaged in 10-15 g. It can be applied to other types of animals and poultry.
П р и м е р 2. В 100 л гидролизованного протосубтилином восстановленного до содержания сухих веществ 3% обезжиренного молока при температуре 57оС и рН 6,70 добавляют 0,150 г протосубтилина и выдерживают при этих условиях 2,5 ч. Затем в частично гидролизованное молоко добавляют 0,5 кг глюкозы, 0,4 кг цитрата натрия, 2,0 л кукурузного экстракта, 0,25 кг уксуснокислого натрия, 0,15 кг дигидрофосфата двухводного, 0,05 кг сернокислого железа семиводного, 0,07 кг агар-агар. После стерилизации при температуре 41оС среду инокулируют 10% культуры B. thermophilum B-1, выделенного от поросят, и 0,05% культуры L. lactis subsp. diacetilactis 5006. Выращивание культур осуществляют при 41оС в течение 15 ч. Выращенной смесью культур инокулируют в количестве 10% новую порцию питательной среды. Выращивание пересадочной совместной культуры осуществляют при 41оС в течение 14 ч.PRI me R 2. In 100 l of hydrolyzed protosubtiline restored to a solids content of 3% skim milk at a temperature of 57 about C and a pH of 6.70 add 0.150 g of protosubtilin and incubated under these conditions for 2.5 hours. Then in partially hydrolyzed milk add 0.5 kg of glucose, 0.4 kg of sodium citrate, 2.0 l of corn extract, 0.25 kg of sodium acetate, 0.15 kg of dihydrogen phosphate, 0.05 kg of ferrous sulfate, 0.07 kg of agar agar. After sterilization at a temperature of 41 ° C inoculated with 10% of the culture B. thermophilum B-1 isolated from pigs, and 0.05% of the culture L. lactis subsp. diacetilactis 500 6 . Cultivation of cultures is carried out at 41 about C for 15 hours. The grown mixture of cultures is inoculated in an amount of 10% a new portion of the nutrient medium. The cultivation of a transplant joint culture is carried out at 41 about C for 14 hours
В обезжиренном молоке при температуре 37оС проводят выращивание культуры L. acidophilum 3 е (выделен от телят) до момента образования сгустка.The skim milk at 37 ° C is carried out growing culture L. acidophilum 3 e (isolated from calves) prior to clot formation.
Обезжиренное молоко кислотностью 18оТ в количестве 100 кг подают в ферментер и подогревают до температуры 55оС вносят и проводят гидролиз в течение 8 ч при постоянном перемешивании реакционной смеси. Через 8 ч фермент разрушают нагреванием смеси при температуре 90оС в течение 30 мин. Готовый гидролизат сгущают в вакуум-выпарной установке до содержания сухих веществ 42% . В сгущенный белковый гидролизат молока при температуре 45оС вносят 15% совместной культуры бифидобактерий и молочнокислых стрептококков и 5% культуры ацидофильной палочки. После перемешивания смесь подвергают распылительному высушиванию.Skim milk acidity of about 18 T in an amount of 100 kg in the fermenter is fed and heated to a temperature of 55 ° C and introduced in the hydrolysis is carried out for 8 hours with continuous stirring of the reaction mixture. After 8 hours, the enzyme destroyed by heating the mixture at 90 ° C for 30 min. The finished hydrolyzate is concentrated in a vacuum evaporator to a solids content of 42%. The condensed milk protein hydrolyzate at a temperature of 45 ° C is made 15% of co-culture of bifidobacteria and lactic streptococci and 5% culture of Lactobacillus acidophilus. After stirring, the mixture is spray dried.
Готовое пробиотическое средство для поросят с содержанием аминного азота 0,120% содержит в 1 г 350 млн. кое бифидобактерий и 600 млн. клеток ацидофильной палочки. Может применяться другим видам животных и птице. Продукт фасуется по 1-5 г. A ready-made probiotic product for piglets with an amine nitrogen content of 0.120% contains 350 ml of some bifidobacteria and 600 million cells of acidophilus bacillus in 1 g. It can be applied to other types of animals and birds. The product is packaged in 1-5 g.
П р и м е р 3. В приготовленную, как описано выше, питательную среду при температуре 39оС вносят 10% культуры B. thermophilum Я-1, выделенной от ягнят, и 0,1% культуры L. lactis subsp. diacetilactis 385. Культуры выращивают при температуре 39оС в течение 14 ч.PRI me R 3. In prepared, as described above, the nutrient medium at a temperature of 39 about With contribute 10% culture B. thermophilum I-1, isolated from lambs, and 0.1% culture L. lactis subsp. diacetilactis 385. Cultures are grown at a temperature of 39 about C for 14 hours
В обезжиренном молоке при температуре 37оС проводят выращивание ацидофильной палочки (20Т - выделен от телят) до момента образования сгустка.The skim milk at 37 ° C is carried out growing Lactobacillus acidophilus (20T - isolated from calves) prior to clot formation.
В сгущенную смесь белкового гидролизата, полученного как в примере 2, вносят 20% совместной культуры бифидобактерий и молочнокислых стрептококков и 3% культуры ацидофильной палочки. После тщательного перемешивания смесь подвергают распылительному высушиванию. In the condensed mixture of protein hydrolyzate obtained as in example 2, contribute 20% of the joint culture of bifidobacteria and lactic streptococci and 3% culture of acidophilus bacillus. After thorough mixing, the mixture is spray dried.
В 1 г пробиотического средства для ягнят содержится 700 млн кое бифидобактерий и 250 млн клеток ацидофильной палочки и 0,1% аминного азота. Продукт фасуется по 5-10 г. Может применяться другими видами животных, а также птице. 1 g of the probiotic product for lambs contains 700 million bifidobacteria and 250 million acidophilus bacillus cells and 0.1% amine nitrogen. The product is packaged in 5-10 g. It can be used by other types of animals, as well as birds.
П р и м е р 4. В приготовленную питательную среду при температуре 40оС вносят 10% культуры B.tpermophilum Y-2 (выделен от телят) и 0,03% культуры L.lactis subsp. diacetilactis 5122. Культуры выращивают совместно при температуре 40оС в течение 16 ч. После готовности их используют в качестве инокулята свежей порции питательной среды в количестве 10%. Выращивание вновь осуществляют при 40оС в течение 14 ч.PRI me R 4. In the prepared nutrient medium at a temperature of 40 about C contribute 10% of the culture of B. termophilum Y-2 (isolated from calves) and 0.03% of the culture L. lactis subsp. diacetilactis 512 2 . Cultures are grown together at 40 ° C for 16 hours. After the readiness of their use as an inoculum of fresh medium portion in an amount of 10%. Growing again is carried out at 40 about C for 14 hours
В конце роста культуральную среду подвергают центрифугированию, а полученную биомассу вносят в сгущенную смесь. At the end of growth, the culture medium is centrifuged, and the resulting biomass is introduced into the condensed mixture.
Культуру ацидофильной палочки (штамм ВКПМ В-2728) выращивают при температуре 37оС на стерильном обезжиренном молоке до образования сгустка.Culture of Lactobacillus acidophilus (strain VKPM B-2728) were grown at 37 ° C in sterile skim milk to clot formation.
В сгущенный белковый гидролизат обезжиренного молока, полученный, как в примере 2, при температуре 45оС вносят 10% биомассы совместной со стрептококками культуры бифидобактерий и 5% закваски ацидофильной палочки. После тщательного перемешивания смесь подвергают распылительному высушиванию.The thickened skim milk protein hydrolyzate prepared as in Example 2, at a temperature of 45 ° C is made 10% of the biomass together with the culture of bifidobacteria and streptococci 5% leaven Lactobacillus acidophilus. After thorough mixing, the mixture is spray dried.
В 1 г пробиотического средства для телят содержатся 5 млрд. кое бифидобактерий и 90 млн клеток ацидофильной палочки и 0,110% аминного азота. Продукт фасуется по 1-10 г. Может применяться другим видам животных, а также птице. In 1 g of a probiotic agent for calves contains 5 billion some bifidobacteria and 90 million cells of acidophilus bacillus and 0.110% of amine nitrogen. The product is packaged in 1-10 g. It can be used for other types of animals, as well as poultry.
П р и м е р 5. В приготовленную питательную среду при температуре 41оС вносят 10% культуры B.thermophilum Y-5 (выделен от телят) и 0,08% культуры L. lactis subsp. diacetilactis 5923. Смесь культур выращивают при 41оС в течение 15 ч. По готовности их используют в качестве инокулята новой порции питательной среды. Производственную совместную культуру выращивают при 41оС в течение 15 ч.PRI me R 5. In the prepared nutrient medium at a temperature of 41 about With contribute 10% of the culture of B.thermophilum Y-5 (isolated from calves) and 0.08% of the culture of L. lactis subsp. diacetilactis 592 3 . A mixture of cultures is grown at 41 about C for 15 hours. When ready, they are used as inoculum of a new portion of the nutrient medium. Production co-culture is grown at 41 about C for 15 hours
Культуру ацидофильной палочки (штамм ВКПМ, В-2728) выращивают на стерильном обезжиренном молоке при температуре 37оС.The culture of acidophilus bacillus (strain VKPM, B-2728) is grown in sterile skim milk at a temperature of 37 about C.
В сгущенный белковый гидролизат молока, полученный по примеру 2, вносят 10% производственной культуры бифидобактерий и мезофильных молочнокислых стрептококков и 4% культуры ацидофильной палочки. После тщательного перемешивания смесь подвергают распылительному высушиванию. In the condensed protein hydrolyzed milk obtained in example 2, contribute 10% of the industrial culture of bifidobacteria and mesophilic lactic streptococci and 4% culture of acidophilus bacillus. After thorough mixing, the mixture is spray dried.
В 1 г пробиотического средства для телят содержится 350 млк кое бифидобактерий и 600 клеток ацидофильной палочки и 0,12% аминного азота. Продукт фасуется по 10-15 г, может применяться другим видам животных, а также птице. 1 g of a probiotic agent for calves contains 350 μl of bifidobacteria and 600 cells of acidophilus bacillus and 0.12% of amine nitrogen. The product is packaged in 10-15 g, can be used by other types of animals, as well as poultry.
Claims (1)
Глюкоза 0,4 - 0,5
Кукурузный экстракт 1,8 - 2,0
Цитрат натрия трехзамещенный 0,4 - 0,5
Ацетат натрия 0,2 - 0,3
Гидрофосфат калия или дигидрофосфат калия двухводный 0,1 - 0,2
Железо сернокислое закисное семиводное 0,03 - 0,05
Агар - агар 0,070 - 0,075
Частично гидролизованное протосубтилином 3% -ное обезжиренное молоко Остальное
в защитную среду вносят смесь биомасс бифидобактерий и стрептококков и отдельно выращенную биомассу ацидофильной палочки в количестве 5 - 20 мас.% и 1 - 5 мас.% соответственно, а в качестве защитной среды используют сгущенный белковый гидролизат молока, полученный обработкой молока в течение 6 - 8 ч 0,020 - 0,030 мас.% протосубтилина с активностью 70 - 80 ед.METHOD FOR PRODUCING A PROBIOTIC FOR ANIMALS AND BIRDS, including cultivation of bifidobacteria, lactic streptococci and acidophilus bacillus in milk-based nutrient media, separation of biomass, introduction of it into a protective medium and spray drying, characterized in that Bifidobacterium bifidobacterium bacterium is used Streptococcus bacteria of the species Lactococcus lactis subsp. diacetilactis, while the cultivation of bifidobacteria and lactic streptococci is carried out jointly at 39 - 41 o With and inoculated doses of 8 to 10 wt.% and 0.01 to 0.1 wt.%, respectively, in a nutrient medium composition, wt.%:
Glucose 0.4 - 0.5
Corn Extract 1.8 - 2.0
Sodium citrate trisubstituted 0.4 - 0.5
Sodium Acetate 0.2 - 0.3
Potassium hydrogen phosphate or potassium dihydrogen phosphate two-water 0.1 - 0.2
Ferrous sulfate ferrous seven-water 0.03 - 0.05
Agar - Agar 0.070 - 0.075
Partially hydrolyzed protosubtilin 3% skim milk
a mixture of biomass of bifidobacteria and streptococci and separately grown biomass of acidophilus bacillus in the amount of 5 to 20 wt.% and 1 to 5 wt.%, respectively, are introduced into the protective medium, and a condensed protein milk hydrolyzate obtained by processing milk for 6 - 8 hours 0.020 - 0.030 wt.% Protosubtilin with an activity of 70 - 80 units.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5040840 RU2018313C1 (en) | 1992-05-06 | 1992-05-06 | Method for producing probiotics for animals and poultry |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU5040840 RU2018313C1 (en) | 1992-05-06 | 1992-05-06 | Method for producing probiotics for animals and poultry |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018313C1 true RU2018313C1 (en) | 1994-08-30 |
Family
ID=21603567
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU5040840 RU2018313C1 (en) | 1992-05-06 | 1992-05-06 | Method for producing probiotics for animals and poultry |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2018313C1 (en) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2119796C1 (en) * | 1997-01-28 | 1998-10-10 | Закрытое акционерное общество "БАКС" | Complex probiotic preparation for animals |
| EP0862863A3 (en) * | 1997-01-09 | 1998-12-23 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Cereal product containing probiotics |
| US5952033A (en) * | 1996-12-24 | 1999-09-14 | Nestec S.A. | Gelatinized cereal product containing oligosaccharide and processes of preparing and using same |
| RU2171037C1 (en) * | 2000-04-14 | 2001-07-27 | Общество с ограниченной ответственностью "БИОТРОФ" | Chicken feeding method and method of preparing substance for feeding chickens |
| RU2209630C2 (en) * | 2001-07-16 | 2003-08-10 | Государственное образовательное учреждение Вологодская государственная молочнохозяйственная академия им. Н.В. Верещагина | Method of production of probiotic supplement |
| RU2468079C1 (en) * | 2011-09-30 | 2012-11-27 | Общество с ограниченной ответственностью "БиоСинТек" (ООО "БиоСинТек") | Bacterium lactobacillus reuteri okt strain, used for production of probiotic preparations for poultry |
| US9986750B2 (en) | 2014-07-29 | 2018-06-05 | Biowish Technologies Inc. | Animal feed compositions and feed additives |
| RU2801210C2 (en) * | 2016-11-10 | 2023-08-03 | Сосьете Де Продюи Нестле С.А. | Composition in a powder form containing iron and probiotic bacteria |
-
1992
- 1992-05-06 RU SU5040840 patent/RU2018313C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 1. Антипов В.А., Ермакова Т.И., Кошелева Е.К., Бадалян К.М. Применение СБА в качестве ростстимулирующего средства. Всес.конф. "Микроорганизмы-стимуляторы и ингибиторы роста раст. и животных", 3 - 5 окт. 1989, Тез.докл. Ч.1, Ташкент, 1989, с.14. * |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5952033A (en) * | 1996-12-24 | 1999-09-14 | Nestec S.A. | Gelatinized cereal product containing oligosaccharide and processes of preparing and using same |
| US6197361B1 (en) | 1996-12-24 | 2001-03-06 | Nestec S.A. | Gelatinized cereal product containing oligosaccharide |
| US6596332B1 (en) | 1996-12-24 | 2003-07-22 | Nestec S.A. | Gelatinized cereal product containing oligosaccharide |
| EP0862863A3 (en) * | 1997-01-09 | 1998-12-23 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Cereal product containing probiotics |
| RU2119796C1 (en) * | 1997-01-28 | 1998-10-10 | Закрытое акционерное общество "БАКС" | Complex probiotic preparation for animals |
| RU2171037C1 (en) * | 2000-04-14 | 2001-07-27 | Общество с ограниченной ответственностью "БИОТРОФ" | Chicken feeding method and method of preparing substance for feeding chickens |
| RU2209630C2 (en) * | 2001-07-16 | 2003-08-10 | Государственное образовательное учреждение Вологодская государственная молочнохозяйственная академия им. Н.В. Верещагина | Method of production of probiotic supplement |
| RU2468079C1 (en) * | 2011-09-30 | 2012-11-27 | Общество с ограниченной ответственностью "БиоСинТек" (ООО "БиоСинТек") | Bacterium lactobacillus reuteri okt strain, used for production of probiotic preparations for poultry |
| US9986750B2 (en) | 2014-07-29 | 2018-06-05 | Biowish Technologies Inc. | Animal feed compositions and feed additives |
| US10398156B2 (en) | 2014-07-29 | 2019-09-03 | BiOWiSH Technologies, Inc. | Animal feed compositions and feed additives |
| RU2801210C2 (en) * | 2016-11-10 | 2023-08-03 | Сосьете Де Продюи Нестле С.А. | Composition in a powder form containing iron and probiotic bacteria |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4187321A (en) | Method for producing foods and drinks containing bifidobacteria | |
| US5589168A (en) | Probiotic | |
| EP0555618B1 (en) | Dietetic and/or pharmaceutical compositions containing lyophilized lactic bacteria | |
| RU2412612C1 (en) | Method for production of "ferm km" probiotic fodder additive for domestic animals and birds | |
| Mitchell et al. | Investigations on a metabolite from Lactobacillus bulgaricus which neutralizes the effect of enterotoxin from Escherichia coli pathogenic for pigs | |
| CN106282072B (en) | Compound lactobacillus microecological preparation and preparation method and application thereof | |
| CN112741210A (en) | Biological preparation for improving animal organism immunity function and preparation method thereof | |
| JPH0153035B2 (en) | ||
| JPS62104552A (en) | Feed composition | |
| RU2018313C1 (en) | Method for producing probiotics for animals and poultry | |
| JPS6283842A (en) | Freeze-dried yogurt and production thereof | |
| RU2035184C1 (en) | Method of preparing bacterial preparation for food agent production | |
| RU2091075C1 (en) | Complex bacterial preparation for treatment and prophylaxis of gastroenteric disease in animals | |
| RU2083666C1 (en) | Method of preparing the dry bacterial preparation | |
| CN112251372A (en) | Lactobacillus acidophilus with galactosidase activity and lactose tolerance and application thereof | |
| KR101951893B1 (en) | Method for producing high concentration of probiotic active Lactobacillus paracasei SRCM102343 strain derived from traditional fermented food | |
| FI76372C (en) | Process for Preparation of a Composition Containing a New Microorganism belonging to Streptococcus thermophilus | |
| BG61712B1 (en) | Ferments for bulgarian yoghourt and method for their preparation | |
| RU2326938C2 (en) | Consortium of lactobacteria strains and method of receiving preparation on its basis, which is used as dietary supplement or ferment for production of sour milk products | |
| RU2202609C2 (en) | Nutrient medium for isolation of lactobacillus | |
| RU2173159C2 (en) | Method of production of biologically active food addition | |
| RU2376366C2 (en) | Lactis acid bacillus strains syndicate and production method of biologically active additive or leaven for production of fermented milk products based on this syndicate | |
| CN105925645A (en) | Preparation method of active lactobacillin and application of active lactobacillin in biological feed | |
| RU2746523C1 (en) | Method for producing fermented milk product | |
| RU2819908C1 (en) | Enzymatic method of producing lactulose-containing postbiotic product |