RU2015155602A

RU2015155602A - Способ получения аполипопротеина a-i (аро a-i)

Info

Publication number: RU2015155602A
Application number: RU2015155602A
Authority: RU
Inventors: Ивонне ВУЧИЦА; Гэри Ли УОРРЕН
Original assignee: СиЭсЭл ЛИМИТЕД
Priority date: 2013-06-05
Filing date: 2014-06-05
Publication date: 2017-07-14
Also published as: CN105339387B; BR112015029902A2; RU2015155602A3; US20160176946A1; MX2015016670A; NZ631116A; MX380226B; AU2014277617A1; EP3004160B1; IL242688B; WO2014194362A1; JP2016521694A; WO2014194362A8; CN110172093A; US11279750B2; US20200223902A1; EP3004160A4; US20180298080A1; PL3004160T3; EP4209504A8

Claims

1. Способ получения Apo A-I из белковой фракции, содержащей Apo A-I (A), включающий

a) суспендирование белковой фракции, содержащей Apo A-I (A), в буферном растворе (B), содержащем от 15 до 30% линейного или разветвленного C₁-С₄ спирта (масс/масс), где суспендированная белковая фракция, содержащая Apo A-I (А), имеет рН в диапазоне от 6,4 до 10,0,

(b) удаление примесей из суспензии при поддержании белков Apo A-I в солюбилизированном состоянии,

(с) осаждение Apo A-I из суспензии и

(d) сбор осадка Apo A-I.

2. Способ по п.1, где буферный раствор (B) содержит 20% линейного или разветвленного C₁-С₄ спирта (масс/масс).

3. Способ по п.1 или 2, где суспендированная Apo A-I-содержащая белковая фракция (А) имеет рН в диапазоне от 7,2 до 8,8.

4. Способ по любому из пп.1-3, где суспендированная Apo A-I-содержащая белковая фракция (А) имеет рН в диапазоне от 8,1 до 8,5.

5. Способ по п.1 или 2, где суспендированная Apo A-I-содержащая белковая фракция (А) имеет рН в диапазоне от 7,0 до 7,6.

6. Способ по любому из пп.1-5, где буферный раствор (В) содержит от 5 до 35 мМ NaHCO₃.

7. Способ по любому из пп.1-6, где линейный или разветвленный C₁-С₄ спирт представляет собой этанол.

8. Способ по любому из пп.1-7, в котором на стадии (а) объемное отношение Apo A-I-содержащей белковой фракции (А) к буферному раствору (B) составляет от 1:1 до 1:5.

9. Способ по любому из пп.1-8, где проводимость суспензии, полученной на стадии (a), составляет менее 5 мСм/см.

10. Способ по любому из пп.1-9, где примеси удаляют на стадии (b) путем осаждения добавлением линейного или разветвленного C₁-С₄ спирта до концентрации 55-65% (масс/масс).

11. Способ по любому из пп.1-10, где температура линейного или разветвленного C₁-С₄ спирта, добавляемого к суспензии на стадии (b), находится в диапазоне примерно от -5°С до 15°С.

12. Способ по любому из пп.1-11, где примеси удаляют на стадии (b) путем осаждения с последующими фильтрованием, центрифугированием, декантацией, ультрафильтрацией и/или седиментацией.

13. Способ по любому из пп.1-12, в котором на стадии (c) рН суспензии доводят до значения в диапазоне от 4,6 до 5,6.

14. Способ по любому из пп.1-13, в котором на стадии (с) температуру суспензии доводят до значения в диапазоне от -2 до 20°С, чтобы осадить Apo A-I.

15. Способ по любому из пп.1-14, дополнительно включающий в себя стадию(е), на которой проводят делипидирование собранного осадка Apo A-I путем добавления этанола в диапазоне концентраций от 40 до 96% (масс/масс).

16. Apo A-I, полученный с помощью способа, описанного в любом из предшествующих пунктов.

17. Очищенный Apo A-I, содержащий менее 0,3 мг IgA на грамм Apo A-I.

18. Фармацевтическая композиция, содержащая Apo A-I по п.16 или 17 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

19. Способ получения фармацевтической композиции, включающий получение Apo A-I способом по любому из пп.1-15 и объединение Apo A-I с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем.

20. Восстановленные HDL, содержащие Apo A-I по п.16 или 17.

21. Фармацевтическая композиция, содержащая восстановленные HDL по п.20 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.

22. Способ получения восстановленных HDL, включающий получение Apo A-I способом по любому из пп.1-15, и объединение Apo A-I с липидом с получением восстановленных HDL.

23. Способ получения фармацевтической композиции, включающий получение Apo A-I способом по любому из пп.1-15; объединение Apo A-I с липидом с получением восстановленных HDL; и объединение восстановленных HDL с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем с получением фармацевтической композиции.