RU2011139183A - Способы селекции эукариотических клеток, экспрессирующих гетерологичный белок - Google Patents
Способы селекции эукариотических клеток, экспрессирующих гетерологичный белок Download PDFInfo
- Publication number
- RU2011139183A RU2011139183A RU2011139183/10A RU2011139183A RU2011139183A RU 2011139183 A RU2011139183 A RU 2011139183A RU 2011139183/10 A RU2011139183/10 A RU 2011139183/10A RU 2011139183 A RU2011139183 A RU 2011139183A RU 2011139183 A RU2011139183 A RU 2011139183A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- dhfr
- concentration
- target product
- host cell
- folate
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title 1
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 claims abstract 28
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 claims abstract 28
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims abstract 18
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 claims abstract 15
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 claims abstract 15
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims abstract 14
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims abstract 14
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract 14
- 229940014144 folate Drugs 0.000 claims abstract 12
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract 12
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract 12
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims abstract 4
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 3
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 claims abstract 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract 2
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 claims abstract 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims abstract 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 claims abstract 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 2
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 claims 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims 1
- 238000010187 selection method Methods 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/38—Chemical stimulation of growth or activity by addition of chemical compounds which are not essential growth factors; Stimulation of growth by removal of a chemical compound
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/67—General methods for enhancing the expression
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
1. Способ селекции по меньшей мере одной эукариотической клетки-хозяина, экспрессирующей целевой продукт, включающий по меньшей мере следующие стадии:(а) получения множества эукариотических клеток-хозяев, жизнеспособность которых зависит от потребления фолата, причем указанные эукариотические клетки-хозяева включают по меньшей мере(i) интродуцированный полинуклеотид, кодирующий целевой продукт, и(ii) интродуцированный полинуклеотид, кодирующий фермент дигидрофолатредуктазу (ДГФР),(б) культивирования указанного множества эукариотических клеток-хозяев в селективной культуральной среде, включающей по меньшей мере ингибитор ДГФР и фолат в предельно допустимой концентрации,(в) отбора по меньшей мере одной эукариотической клетки-хозяина, экспрессирующей целевой продукт.2. Способ по п.1, в котором селективная культуральная среда включает ингибитор ДГФР в концентрации 500 нМ или менее и фолат в концентрации 500 нМ или менее.3. Способ по п.1 или 2, в котором селективная культуральная среда включает ингибитор ДГФР в концентрации 200 нМ или менее и/или включает фолат в концентрации 2,5-100 нМ.4. Способ, в котором селективная культуральная среда включает в качестве фолата фолиевую кислоту в концентрации 12,5-50 нМ вместе с метотрексатом (МТК) в качестве ингибитора ДГФР в концентрации 10-100 нМ.5. Способ по меньшей мере по п.1 или 2, в котором фермент ДГФР означает такой фермент ДГФР, который обладает пониженной чувствительностью к ингибитору ДГФР по сравнению с ферментом ДГФР, эндогенно экспрессированным клеткой-хозяином.6. Способ по п.1 или 2, в котором указанная эукариотическая клетка-хозяин является клеткой-хозяином СНО, предпочтител�
Claims (15)
1. Способ селекции по меньшей мере одной эукариотической клетки-хозяина, экспрессирующей целевой продукт, включающий по меньшей мере следующие стадии:
(а) получения множества эукариотических клеток-хозяев, жизнеспособность которых зависит от потребления фолата, причем указанные эукариотические клетки-хозяева включают по меньшей мере
(i) интродуцированный полинуклеотид, кодирующий целевой продукт, и
(ii) интродуцированный полинуклеотид, кодирующий фермент дигидрофолатредуктазу (ДГФР),
(б) культивирования указанного множества эукариотических клеток-хозяев в селективной культуральной среде, включающей по меньшей мере ингибитор ДГФР и фолат в предельно допустимой концентрации,
(в) отбора по меньшей мере одной эукариотической клетки-хозяина, экспрессирующей целевой продукт.
2. Способ по п.1, в котором селективная культуральная среда включает ингибитор ДГФР в концентрации 500 нМ или менее и фолат в концентрации 500 нМ или менее.
3. Способ по п.1 или 2, в котором селективная культуральная среда включает ингибитор ДГФР в концентрации 200 нМ или менее и/или включает фолат в концентрации 2,5-100 нМ.
4. Способ, в котором селективная культуральная среда включает в качестве фолата фолиевую кислоту в концентрации 12,5-50 нМ вместе с метотрексатом (МТК) в качестве ингибитора ДГФР в концентрации 10-100 нМ.
5. Способ по меньшей мере по п.1 или 2, в котором фермент ДГФР означает такой фермент ДГФР, который обладает пониженной чувствительностью к ингибитору ДГФР по сравнению с ферментом ДГФР, эндогенно экспрессированным клеткой-хозяином.
6. Способ по п.1 или 2, в котором указанная эукариотическая клетка-хозяин является клеткой-хозяином СНО, предпочтительно клеткой ДГФР+ (плюс).
7. Способ по п.1 или 2, в котором клетку-хозяина ДГФР+ (плюс) применяют вместе с интродуцированным ферментом ДГФР, который менее чувствителен к МТК, чем фермент ДГФР, эндогенно экспрессированный клеткой-хозяином.
8. Способ по п.1, в котором полинуклеотид, кодирующий целевой продукт, и полинуклеотид, кодирующий фермент ДГФР, интродуцированы по меньшей мере одним вектором экспрессии.
9. Способ по п.1, в котором клетка-хозяин включает по меньшей мере два интродуцированных полинуклеотида, кодирующих целевой продукт, причем предпочтительно по меньшей мере один полинуклеотид кодирует тяжелую цепь молекулы иммуноглобулина, а другой полинуклеотид кодирует легкую цепь молекулы иммуноглобулина.
10. Способ по п.1, в котором интродуцированный полинуклеотид (полинуклеотиды), кодирующий целевой продукт, и интродуцированный полинуклеотид, кодирующий фермент ДГФР, включены в разные кассеты экспрессии, и в котором кассета (кассеты) экспрессии для индукции экспрессии полинуклеотида (полинуклеотидов), кодирующего целевой продукт, включает более сильный промотор и/или энхансер по сравнению с кассетой экспрессии для индукции экспрессии полинуклеотида, кодирующего фермент ДГФР.
11. Способ получения целевого продукта, включающий по меньшей мере следующие стадии:
(а) осуществления способа селекции по одному из пп.1-10 для отбора по меньшей мере одной эукариотической клетки-хозяина, экспрессирующей целевой продукт, и
(б) культивирования по меньшей мере одной выбранной эукариотической клетки-хозяина в условиях, которые допускают экспрессию целевого продукта.
12. Способ по п.11, включающий по меньшей мере одну из следующих стадий:
(в) выделения целевого продукта из указанной среды для культивирования клеток и/или из указанной эукариотической клетки-хозяина, и/или
(г) дополнительного процессинга выделенного целевого продукта.
13. Способ по п.11 или 12, в котором целевой продукт является молекулой иммуноглобулина или ее функциональным фрагментом.
14. Применение селективной культуральной среды, включающей ингибитор ДГФР в концентрации 500 нМ или менее и фолат в предельно допустимой концентрации 500 нМ или менее в способе по одному из пп.1-10.
15. Применение по п.14, в котором селективная культуральная среда обладает одним или несколькими из следующих свойств:
а) селективная культуральная среда включает фолат в предельно допустимой концентрации 2,5-100 нМ и/или ингибитор ДГФР в концентрации 200 нМ или менее, и/или
б) селективная культуральная среда включает фолиевую кислоту в концентрации 12,5-50 нМ вместе с МТК в концентрации 10-100 нМ.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP09154000 | 2009-02-27 | ||
| EP09154000.5 | 2009-02-27 | ||
| PCT/EP2010/001223 WO2010097239A1 (en) | 2009-02-27 | 2010-02-26 | Methods for selecting eukaryotic cells expressing a heterologous protein |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2011139183A true RU2011139183A (ru) | 2013-04-10 |
| RU2551229C2 RU2551229C2 (ru) | 2015-05-20 |
Family
ID=40451117
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2011139183/10A RU2551229C2 (ru) | 2009-02-27 | 2010-02-26 | Способы селекции эукариотических клеток, экспрессирующих гетерологичный белок |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8962274B2 (ru) |
| EP (1) | EP2401383B1 (ru) |
| JP (2) | JP5745431B2 (ru) |
| KR (1) | KR101706399B1 (ru) |
| CN (1) | CN102333875B (ru) |
| AU (1) | AU2010219088B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI1008762B8 (ru) |
| CA (1) | CA2753813C (ru) |
| DK (1) | DK2401383T3 (ru) |
| ES (1) | ES2440321T3 (ru) |
| IL (1) | IL214620A (ru) |
| MX (1) | MX2011009023A (ru) |
| PL (1) | PL2401383T3 (ru) |
| PT (1) | PT2401383E (ru) |
| RU (1) | RU2551229C2 (ru) |
| SG (1) | SG173457A1 (ru) |
| WO (1) | WO2010097239A1 (ru) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SG173456A1 (en) | 2009-02-27 | 2011-09-29 | Novartis Ag | Expression vector system comprising two selection markers |
| AU2010219088B2 (en) * | 2009-02-27 | 2012-11-01 | Novartis Ag | Methods for selecting eukaryotic cells expressing a heterologous protein |
| EP2758424B1 (en) * | 2011-09-21 | 2019-03-06 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Co2 profile cultivation |
| LT3027646T (lt) | 2013-07-31 | 2018-09-25 | Novartis Ag | Nauji atrankos vektoriai ir eukariotinių ląstelių šeimininkių atrankos būdai |
| EP3277818B1 (en) * | 2015-04-03 | 2020-01-08 | Selexis S.A. | Use of vitamins and vitamin metabolic genes and proteins for recombinant protein production in mammalian cells |
| UY37758A (es) | 2017-06-12 | 2019-01-31 | Novartis Ag | Método de fabricación de anticuerpos biespecíficos, anticuerpos biespecíficos y uso terapéutico de dichos anticuerpos |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2585532B2 (ja) * | 1986-05-10 | 1997-02-26 | 三井東圧化学株式会社 | 動物細胞の形質転換体及びそれを得る方法並びにその形質転換体を用いてｔ−ＰＡを生産する方法 |
| AU6432090A (en) * | 1989-09-01 | 1991-04-08 | Genentech Inc. | Cells transfected with nucleic acid encoding gtp |
| GB9022545D0 (en) * | 1990-10-17 | 1990-11-28 | Wellcome Found | Culture medium |
| AR008077A1 (es) | 1996-07-26 | 1999-12-09 | Talarico Salinas Laura Beatriz | Un polipeptido de fusion o una sal del mismo, su uso, un proceso para prepararlos, una composicion farmaceutica que los comprende, y un vector. |
| JP4031154B2 (ja) | 1999-07-30 | 2008-01-09 | 独立行政法人科学技術振興機構 | 遺伝子増幅細胞の迅速選択法 |
| AU2001292645A1 (en) * | 2000-09-14 | 2002-03-26 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Modulation of IL-2- and IL-15-mediated T cell responses |
| IL161858A0 (en) | 2001-11-28 | 2005-11-20 | Sandoz Ag | Cell culture process |
| US7384744B2 (en) * | 2002-11-29 | 2008-06-10 | Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co., Kg | Expression vector, methods for the production of heterologous gene products and for the selection of recombinant cells producing high levels of such products |
| TW200513351A (en) * | 2003-07-17 | 2005-04-16 | Availvs Corp | High pressure water jet surface cutting device and cutting method |
| EP1533617A1 (en) | 2003-11-19 | 2005-05-25 | RMF Dictagene S.A. | Angiogenesis inhibiting molecules, their selection, production and their use in the treatment and diagnosis of cancer |
| EP1953222A1 (en) | 2007-01-24 | 2008-08-06 | Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG | Improvement of cell growth |
| CN101652379B (zh) | 2007-03-30 | 2014-05-14 | Abbvie公司 | 用于增加宿主细胞中重组蛋白表达的重组表达载体元件(reves) |
| AU2010219088B2 (en) * | 2009-02-27 | 2012-11-01 | Novartis Ag | Methods for selecting eukaryotic cells expressing a heterologous protein |
-
2010
- 2010-02-26 AU AU2010219088A patent/AU2010219088B2/en active Active
- 2010-02-26 SG SG2011054087A patent/SG173457A1/en unknown
- 2010-02-26 JP JP2011551443A patent/JP5745431B2/ja active Active
- 2010-02-26 ES ES10709687.7T patent/ES2440321T3/es active Active
- 2010-02-26 KR KR1020117022540A patent/KR101706399B1/ko active Active
- 2010-02-26 MX MX2011009023A patent/MX2011009023A/es active IP Right Grant
- 2010-02-26 WO PCT/EP2010/001223 patent/WO2010097239A1/en not_active Ceased
- 2010-02-26 BR BRPI1008762A patent/BRPI1008762B8/pt active IP Right Grant
- 2010-02-26 RU RU2011139183/10A patent/RU2551229C2/ru active
- 2010-02-26 CN CN201080009517.7A patent/CN102333875B/zh active Active
- 2010-02-26 EP EP10709687.7A patent/EP2401383B1/en active Active
- 2010-02-26 DK DK10709687.7T patent/DK2401383T3/da active
- 2010-02-26 PT PT107096877T patent/PT2401383E/pt unknown
- 2010-02-26 PL PL10709687T patent/PL2401383T3/pl unknown
- 2010-02-26 CA CA2753813A patent/CA2753813C/en active Active
- 2010-02-26 US US13/203,546 patent/US8962274B2/en active Active
-
2011
- 2011-08-11 IL IL214620A patent/IL214620A/en active IP Right Grant
-
2014
- 2014-02-06 US US14/174,228 patent/US9315844B2/en active Active
- 2014-12-24 JP JP2014261016A patent/JP2015107120A/ja not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK2401383T3 (da) | 2013-12-16 |
| MX2011009023A (es) | 2011-09-28 |
| AU2010219088A1 (en) | 2011-08-18 |
| IL214620A (en) | 2016-02-29 |
| CA2753813C (en) | 2018-12-11 |
| CA2753813A1 (en) | 2010-09-02 |
| RU2551229C2 (ru) | 2015-05-20 |
| CN102333875B (zh) | 2014-04-16 |
| US20140154739A1 (en) | 2014-06-05 |
| CN102333875A (zh) | 2012-01-25 |
| EP2401383B1 (en) | 2013-09-18 |
| JP5745431B2 (ja) | 2015-07-08 |
| KR101706399B1 (ko) | 2017-02-13 |
| KR20110123783A (ko) | 2011-11-15 |
| JP2012518991A (ja) | 2012-08-23 |
| BRPI1008762B8 (pt) | 2021-05-25 |
| JP2015107120A (ja) | 2015-06-11 |
| SG173457A1 (en) | 2011-09-29 |
| US8962274B2 (en) | 2015-02-24 |
| BRPI1008762B1 (pt) | 2020-10-27 |
| AU2010219088B2 (en) | 2012-11-01 |
| PT2401383E (pt) | 2013-12-16 |
| US20110306095A1 (en) | 2011-12-15 |
| EP2401383A1 (en) | 2012-01-04 |
| US9315844B2 (en) | 2016-04-19 |
| BRPI1008762A2 (pt) | 2015-08-25 |
| PL2401383T3 (pl) | 2014-02-28 |
| ES2440321T3 (es) | 2014-01-28 |
| WO2010097239A1 (en) | 2010-09-02 |
| IL214620A0 (en) | 2011-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2011139183A (ru) | Способы селекции эукариотических клеток, экспрессирующих гетерологичный белок | |
| RU2011139182A (ru) | Система векторов экспрессии, включающая два селективных маркера | |
| Xuan et al. | Root cap-derived auxin pre-patterns the longitudinal axis of the Arabidopsis root | |
| CY1118734T1 (el) | Μεθοδοι παρασκευης γλυκοπρωτεϊνων σε κυτταροκαλλιεργειες θηλαστικου χρησιμοποιωντας γλυκοκορτικοειδη | |
| EA201291024A1 (ru) | Композиции эндорибонуклеаз и способы их использования | |
| EA201390082A1 (ru) | Способ получения рекомбинантного adamts13 в культуре клеток | |
| MX2012001000A (es) | Metodo y kit para la deteccion de un microorganismo. | |
| Zheng et al. | Antibiotic sulfadiazine degradation by persulfate oxidation: Intermediates dependence of ecotoxicity and the induction of antibiotic resistance genes | |
| EA201101581A1 (ru) | Улучшенный способ культивирования клеток | |
| Huang et al. | Ultrasonic irradiation of low intensity with a mode of sweeping frequency enhances the membrane permeability and cell growth rate of Candida tropicalis | |
| BR112015023424A2 (pt) | construto de expressão engenheirado, método para aprimoramento de produção de rna ou proteína, vetor, célula, hospedeira bacteriana, sistema de cultura de célula para síntese in vivo de dsrna, composição e método para controlar uma infestação de pragas de invertebrados ou para inibir a propagação de uma doença viral em uma população de plantas, e terminador transcricional | |
| FR3056989B1 (fr) | Procede de production d'acides l-amines | |
| MX2021013907A (es) | Matriz y método para la detección de información espacial de ácidos nucleicos. | |
| RU2010119558A (ru) | Способ получения клетки, способной продуцировать гетепротеины с высоким выходом | |
| Xu et al. | The selective breeding and mutagenesis mechanism of high‐yielding surfactin Bacillus subtilis strains with atmospheric and room temperature plasma | |
| Levin et al. | Expanding the Symbiodinium (Dinophyceae, Suessiales) toolkit through protoplast technology | |
| Muench et al. | A pathogenic Th17/cd38+ macrophage feedback loop drives inflammatory arthritis through TNF-α | |
| Whitman et al. | Liquid-liquid phase separation of the DEAD-box cyanobacterial RNA helicase redox (CrhR) into dynamic membraneless organelles in Synechocystis sp. strain PCC 6803 | |
| Fiskin et al. | Multi-modal skin atlas identifies a multicellular immune-stromal community associated with altered cornification and specific T cell expansion in atopic dermatitis | |
| Santin et al. | Deciphering the genetic landscape of enhanced poly-3-hydroxybutyrate production in Synechocystis sp. B12 | |
| CN103173452B (zh) | 一种可同时识别OdDHL和BHL的核酸适体及其应用 | |
| WO2023244669A1 (en) | A 3-dimensional human immune organoid system for high throughput screening | |
| Kong et al. | Spatial double-layer hydrogels enabled visual detection of Cladobotryum mycophilum based on recombinase-aided amplification-CRISPR/Cas12a | |
| Chen et al. | The phototactic collection of microalgae and its implications for the comprehensive utilization of microalgal biomass | |
| DE602006014505D1 (de) | Verfahren zum nachweis lebensfähiger zellen in ein |