RU2001113279A

RU2001113279A - Система доставки свиного соматотропина

Info

Publication number: RU2001113279A
Application number: RU2001113279/13A
Authority: RU
Inventors: Митчелл КИГАН; Марк Ричард ДЖОУНЗ; Джеффри Филип М. МУР
Original assignee: Коммонвелт Сайентифик Энд Индастриал Рисерч Организейшн; Юниверсити Оф Вестерн Сидней (Непин); Пиг Рисерч Энд Дивелопмент Корпорейшн
Priority date: 1998-10-16
Filing date: 1999-10-18
Publication date: 2003-07-27

Claims

1. Экспрессионная кассета, включающая последовательность, кодирующую секреторный сигнал инсулина, оперативно связанный с гетерологичной последовательностью, кодирующей полипептид.

2. Экспрессионная кассета по п.1, где секреторный сигнал инсулина имеет аминокислотную последовательность, представленную как SEQ ID NO:l.

3. Экспрессионная кассета по п.1, где секреторным сигналом инсулина является модифицированный секреторный сигнал инсулина, включающий модификации секреторного сигнала инсулина, имеющего аминокислотную последовательность, представленную как SEQ ID NO:l, где упомянутые модификации не оказывают неблагоприятного влияния на биологическую активность секреторного сигнала инсулина.

4. Экспрессионная кассета по любому из пп.1-3, где гетерологичная последовательность кодирует полипептид, выбранный из гормонов, цитокинов, агонистов рецепторов, антагонистов рецепторов, феромонов и ферментов.

5. Экспрессионная кассета по п.4, где полипептид является гормоном роста.

6. Экспрессионная кассета по п.4, где полипептид является соматотропином.

7. Экспрессионная кассета по любому из пп.1-6, дополнительно включающая один или несколько регуляторных элементов, делающих возможной дискретную экспрессию гетерологичной последовательности.

8. Вектор, включающий экспрессионную кассету по любому из пп.1-7.

9. Рекомбинантная клетка, которая включает экспрессионную кассету по любому из пп.1-7.

10. Рекомбинантная клетка по п.9, где клеткой является бактериальная клетка, дрожжевая клетка, клетка насекомого или млекопитающего.

11. Рекомбинантная клетка по п.10, где клеткой является клетка млекопитающего.

12. Клетка млекопитающего по п.11, где клеткой является крысиный миобласт (L6).

13. Способ получения полипептида, который включает культивирование рекомбинантной клетки по любому из пп.9-12 в условиях, делающих возможными экспрессию и секрецию полипептида и необязательно выделение полипептида.

14. Капсула, предназначенная для имплантации в организм хозяина, где данная капсула включает полупроницаемую мембрану, заключающую в себе рекомбинантные клетки по любому из пп.9-12.

15. Капсула по п.14, где полупроницаемой мембраной является альгинат-поли-L-лизин-альгинатная (АРА) мембрана.

16. Способ введения полипептида хозяину, где упомянутый способ включает введение хозяину экспрессионной кассеты по любому из пп. 1-7.

17. Способ введения полипептида хозяину, где данный способ включает имплантацию хозяину капсулы по п.14 или 15.

18. Способ по п.16 или 17, где хозяином является животное или человек.

19. Способ по п.18, где хозяином является животное, относящееся к домашнему скоту.

20. Способ по п.19, где животным, относящимся к домашнему скоту, является свинья.

21. Способ введения соматотропина свинье, где способ включает имплантацию свинье капсулы, включающей полупроницаемую мембрану, заключающую в себе рекомбинантные клетки, причем упомянутые рекомбинантные клетки включают и экспрессируют экспрессионную кассету, включающую последовательность, кодирующую секреторный сигнал инсулина, оперативно связанную с гетерологичной последовательностью, кодирующей соматотропин, где упомянутая мембрана является проницаемой для экспрессируемого соматотропина.

22. Способ по п.21, где секреторный сигнал инсулина имеет аминокислотную последовательность, представленную как SEQ ID NO:l.

23. Способ по п.21, где секреторным сигналом инсулина является модифицированный секреторный сигнал инсулина, включающий модификации секреторного сигнала инсулина, имеющего аминокислотную последовательность, представленную как SEQ ID NO:l, где упомянутые модификации не оказывают неблагоприятного влияния на биологическую активность секреторного сигнала инсулина.

24. Способ по любому из пп.21-23, где рекомбинантными клетками являются клетки млекопитающего.

25. Способ по п.24, где клетками млекопитающего являются крысиные миобласты (L6).

26. Способ по любому из пп.21-25, где полупроницаемой мембраной является альгинат-поли-L-лизин-альгинатная (АРА) мембрана.

27. Способ по любому из пп.21-26, где свинье имплантируют одну или несколько капсул, достаточных для достижения секреции соматотропина на уровне, составляющем, по меньшей мере, 30 нг/мл.