[go: up one dir, main page]

RS61717B1 - Poboljšana antitela koja vezuju a-beta protofibril - Google Patents

Poboljšana antitela koja vezuju a-beta protofibril

Info

Publication number
RS61717B1
RS61717B1 RS20210459A RSP20210459A RS61717B1 RS 61717 B1 RS61717 B1 RS 61717B1 RS 20210459 A RS20210459 A RS 20210459A RS P20210459 A RSP20210459 A RS P20210459A RS 61717 B1 RS61717 B1 RS 61717B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
antibody
antigen
binding fragment
seq
amino acid
Prior art date
Application number
RS20210459A
Other languages
English (en)
Inventor
Charlotte Nerelius
Hanna Laudon
Jessica Sigvardson
Original Assignee
Bioarctic Ab
Eisai R&D Man Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bioarctic Ab, Eisai R&D Man Co Ltd filed Critical Bioarctic Ab
Publication of RS61717B1 publication Critical patent/RS61717B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/461—Igs containing Ig-regions, -domains or -residues form different species
    • C07K16/464—Igs containing CDR-residues from one specie grafted between FR-residues from another
    • C07K16/465—Igs containing CDR-residues from one specie grafted between FR-residues from another with additional modified FR-residues
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G01N33/6896—Neurological disorders, e.g. Alzheimer's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
    • G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
    • G01N2333/4701—Details
    • G01N2333/4709—Amyloid plaque core protein
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2814—Dementia; Cognitive disorders
    • G01N2800/2821—Alzheimer

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)

Description

Opis
Oblast pronalaska
[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na amiloidni beta peptid (Aβ), tačnije na antitela koja se vezuju za Aβ protofibrile i njihovu upotrebu u terapiji i/ili profilaktičkom lečenju Alchajmerove bolesti i drugih poremećaja povezanih sa agregacijom Aβ proteina. Dalje, pronalazak se može odnositi na dijagnozu takvih bolesti, kao i praćenje napredovanja bolesti korišćenjem antitela prema pronalasku. Dalje, pronalazak se može odnositi na veterinarsku upotrebu antitela iz pronalaska.
Pozadina pronalaska
[0002] Alchajmerova bolest (AD) pripada grupi neurodegenerativnih poremećaja i uzrokuje kognitivna, memorijska i bihejvioralna oštećenja. Karakteristike Alchajmerove bolesti uključuju vanćelijske amiloidne plakove, intraneuronalne neurofibrilarne zaplete, neuronsku disfunkciju i na kraju atrofiju mozga. Rizik za razvoj AD raste sa godinama i sa povećanjem broja osoba koje dostižu duboku starost, stanje sa sve većim uticajem na kvalitet života starijih ljudi. Pored toga, društvo se suočava sa situacijom sa povećanim troškovima.
[0003] Uprkos činjenici da je bolest poznata već dugi niz godina i dato je nekoliko predloga za lečenje, ni danas ne postoji tako efikasna terapija za modifikovanje bolesti već samo lekovi koji u najboljem slučaju mogu pružiti simptomatsko lečenje. Mehanizam koji stoji iza bolesti bio je predmet mnogih ispitivanja. Ukratko, Aβ iz nekog razloga počinje da se nagomilava i kroz nekoliko srednjih oblika konačno proizvodi nerastvorljive naslage fibrila/plaka u mozgu. Rano se verovalo da plakovi kao takvi utiču na neurone i signale koji ih prenose, ali danas rezultati opsežnih ispitivanja pokazuju da su rastvorljivi, nagomilani, oblici međujedinjenja Aβ najverovatnije glavni uzrok bolesti i simptomi uočeni kod pacijenata.
[0004] Jedan od takvih međujedinjenja u kaskadi nagomilanih oblika od Aβ monomera do nerastvorljivih Aβ fibrila je rastvorljivi Aβ protofibril velike molekulske težine, koji je prvi opisan od strane Walsh in 1997 in The Journal of Biological Chemistry (Vol.272(35) p.22364-72). Značaj Aβ protofibrila za razvoj AD identifikovala je grupa naučnika na čelu sa Larsom Lannfeltom, Univerzitetom Uppsala, u svojim ispitivanjima arktičke mutacije, koja je mutacija E693G u proteinu amiloidnog prekursora (APP) koji uzrokuje povećanu formaciju protofibrila Aβ.
Utvrđeno je da je porodica u severnoj Švedskoj koja je nosila ovu mutaciju rano razvila tešku Alchajmerovu bolest i pronalazak ove kombinacije pružio je osnovne ideje za novu terapiju. Shodno tome, identifikovano je da je Aβ protofibril snažno povezan sa bolešću i važan cilj terapije. Na osnovu svojih ispitivanja sa Aβ peptidima koji su sadržali arktičku mutaciju, Lannfelt i saradnici bili su u stanju da proizvedu Aβ protofibrile in vitro, arktičke kao i divlji tip, u dovoljnim količinama za imunizaciju i naknadni odabir antitela sa velikim afinitetom za Aβ protofibrile u poređenju sa druge vrste u sistemu Aβ. Primeri postupaka za proizvodnju Aβ protofibrila i antitela koja se vezuju za njih su obelodanjeni u WO02/03911 i WO2005/123775.
[0005] Od posebnog značaja bio je razvoj mišjeg monoklonskog antitela mAb158, antitela koje se vezuje za Aβ protofibrile, a koje je obelodanjeno u EP2004688, koji sadrži sledeće CDR sekvence:
[0006] Visok afinitet i selektivnost humanizovane verzije mAb158, BAN2401, čini je veoma važnim kandidatom za upotrebu u terapiji i/ili prevenciji naročito Alchajmerove bolesti, a trenutno je predmet kliničkih ispitivanja u pripremi za upotrebu kao farmaceutski proizvod Karakteristike BAN2401 opisane su
u EP2004688.
[0007] Efikasnost antitela zavisi od nekoliko farmakokinetičkih i farmakodinamičkih faktora, videti npr. Deng i dr, Expert Opin. Drug Metab. Toxicol 8(2) (2012): p.141-160; Boswell i dr, Bioconjugate Chem.21(2010): p.2153-2163; Konterman, Current Opinion in Biotechnology 22 (2011): p.1-9 i Igawa i dr, mAbs 3:3 (2011): p.243-252. Među njima, produženi polu-raspad u serumu sa povećanom sistemskom izloženošću često pruža značajan potencijal za poboljšanja od značajne terapijske vrednosti. Takođe pruža priliku za smanjenje doze koja ima sistemske, važne implikacije.
Opis pronalaska
[0008] Predmetni pronalazak obezbeđuje antitela koja se vezuju za Aβ protofibrile i njihovu upotrebu u terapiji i/ili profilaktičkom lečenju Alchajmerove bolesti i drugih poremećaja povezanih sa agregacijom Aβ proteina. Dalje, pronalazak se može odnositi na antitela korisna u dijagnozi takvih bolesti, kao i na njihovu upotrebu u praćenju progresije bolesti takvih bolesti, kao i na veterinarsku upotrebu pomenutih antitela. Utvrđeno je da je iznenađujuće polu-raspad kao i izloženost humanizovanog antitela na bazi mAb158, tj. BAN2401, znatno pojačan, npr. otprilike dva puta ili više, prvenstveno uvođenjem jedne ili više mutacija u određene položaje, tj.17, 79 i/ili 82 varijabilnog lakog lanca antitela BAN2401 (položaji Kabat 17, 74 i 77), videti dalje Sliku 9 gde se ovi položaji nazivaju x1, x2 i x3. U BAN2401 aminokiselina u položaju 17 (Kabat položaj 17) je A, aminokiselina u položaju 79 (Kabat položaj 74) je R, a aminokiselina u položaju 82 (Kabat položaj 77) je R. Kabat numerisanje je dato u skladu sa Kabat i dr., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 1991 (NIH Publications No.91-3242).
[0009] Opciono, dalja poboljšanja antitela prema pronalasku mogu se postići kombinovanjem svake od mutacija obezbeđujući povećani polu-raspad sa jednom ili više susednih mutacija, tj.13, 21, 81 i/ili 84 varijabilnog lakog lanca antitela (Kabat položaji 13, 21, 76 i 79), videti dalje Sliku 9, gde se ovi položaji nazivaju i1-4, 37, 38 i/ili 40 varijabilnog teškog lanca antitela ( Kabat položaji 37, 38 i 40), videti dalje Sliku 10, gde se ovi položaji nazivaju z1-3, za dalja poboljšanja imunološkog značaja, odnosno niske imunogenosti. Kada se u poređenju sa BAN2401 sekvencom, x1 mutira, mogu se uvesti mutacije y1 i/ili y1 i kada su mutirane x2 i/ili x3, mogu se uvesti mutacije y3 i/ili y4. Dalje, mogu se uvesti mutacije z1-3.
[0010] Predmetni pronalazak je kao što sledi:
[1] Antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena, koji sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:12; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
[2] Antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena, koji sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:9; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
[3] Antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena, koji sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:10; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
[4] Antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena, koji sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:11; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
[5] Antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena, koji sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:12; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
[6] Antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena, koji sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:9; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
[7] Antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena, koji sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:10; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
[8] Antitelo ili njegov fragment za vezivanje antigena, koji sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:11; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
[9] Antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen prema bilo kom od [1] do [8], pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži konstantni region IgG teškog lanca.1015] Antitelo prema bilo kom od [1] do [9], za upotrebu u terapiji.
[11] Antitelo prema bilo kom od [1] do [9], za upotrebu u lečenju i/ili profilaksi Alchajmerove bolesti i drugih poremećaja povezanih sa agregacijom Aβ proteina.
[12] Antitelo za upotrebu prema [11] pri čemu su takvi drugi poremećaji povezani sa agregacijom Aβ proteina izabrani između traumatične povrede mozga (TBI), demencije sa Levijevim telima (LBD), Daunovog sindroma (DS), amiotrofične lateralne skleroze (ALS), Frontotemporalne demencije, tauopatije, sistemskih amiloidoza, ateroskleroze i Parkinsonove bolesti demencije (PDD).
[13] Antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen prema bilo kom od [1]-[9] za upotrebu u postupku smanjenja količine Aβ protofibrila kod ispitanika, koja uključuje davanje navedenom ispitaniku terapeutski efikasne količine antitela ili fragmenta koji se vezuje za antigen prema [1] do [9].
[14] Antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen prema bilo kom od [1]-[9] za upotrebu u postupku za merenje količine Aβ protofibrila i/ili agregiranog Aβ proteina kod osobe, koja uključuje kontakt tkiva ili telesne tečnosti osobe, in vivo ili in vitro, sa antitelom ili fragmentom koji se vezuje za antigen prema [1] do [9] i merenje količine antitela ili fragmenta koji vezuje za antigen vezan za pomenute Aβ protofibrile i/ili nataloženi Aβ protein.
[15] Antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen prema bilo kom od [1]-[9] za upotrebu u postupku za dijagnozu Alchajmerove bolesti kod osoba koje imaju ili su u opasnosti od razvoja bolesti, koja uključuje kontakt tkiva ili telesne tečnosti osobe, in vivo ili in vitro, sa antitelom ili fragmentom koji se vezuje za antigen prema [1] do [9], ili njegov fragment, i merenje količine pomenutog antitela vezanog za nataloženi Aβ protein.
[16] Antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen prema bilo kom od [1]-[9] za upotrebu u postupku za dijagnozu traumatične povrede mozga (TBI), demencije sa Levijevim telima (LBD), Daunovog sindrom (DS), amiotrofična lateralna skleroza (ALS), Frontotemporalna demencija, tauopatije, sistemska amiloidoza, ateroskleroza i demencija Parkinsonove bolesti (PDD) kod osoba koje imaju ili su u opasnosti od razvoja bilo koje od navedenih bolesti, što uključuje kontakt tkiva ili telesne tečnosti osobe, in vivo ili in vitro, sa antitelom ili fragmentom koji se vezuje za antigen prema [1] do [9], ili njegov fragment, i merenje količine pomenutog antitela vezanog za nataloženi Aβ protein.
[17] Farmaceutski sastav koji sadrži antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen prema bilo kom od [1] do [9], zajedno sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom i/ili razblaživačima.
[18] Antitelo prema bilo kom od [1] do [9], za veterinarsku upotrebu.
Kratak opis slika
[0011]
Slika 1 daje analizu vezivanja i selektivnosti za beta protofibrile u poređenju sa Aβ monomerima za A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S u poređenju sa BAN2401 (kontrola). Inhibicija vezivanja protofibrila Aβ1-42 u rastvoru prikazana je otvorenim krugovima, a otvoreni kvadrati, a inhibicija vezivanja monomerima Aβ1-40 u rastvoru zatvoreni krugovi i zatvoreni kvadrati.
Slika 2 daje izloženost lekova BAN2401 i antitelima pronalaska lekovima u plazmi kod miševa predstavljene kao grafici vreme u odnosu na koncentraciju. Nivoi plazme nakon jednokratne i.v. injekcija BAN2401, A17D, A17D/R79T i A17D/R79T/R82S prikupljenih u vremenskim tačkama 0,5 h, 2 dana, 7 dana, 15 dana i 29 dana nakon davanja, i A17D/R82S prikupljenih u vremenskim tačkama 0,5 h, 2 dana , 7 dana, 14 dana i 28 dana nakon davanja prikazani su na grafiku. A17D/R82S nije bio uključen u istu PK ispitivanje kao i ostala ovde prikazana antitela, ali je umesto toga dat zasebno. Međutim, sa izuzetkom dve vremenske tačke uzorkovanja plazme, isti dizajn ispitivanja korišćen je za dve odvojena ispitivanja. Svi uzorci plazme su istovremeno analizirani ELISA da bi se izbegle varijacije između ispitivanja. Koncentracija leka u plazmi u µg/ml prikazana je na y-osi (logaritamska skala), a vreme nakon davanja u satima (h) prikazano je na x-osi. Srednje vrednosti grupe prikazane su trakama grešaka koje ukazuju na standardna odstupanja.
Srednje vrednosti AUC0-inf i terminalni polu-raspad izračunati su analizom van odeljenja koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight) i prikazani su u Tabeli 1
Slika 3 daje izloženost lekova BAN2401 i antitelima pronalaska lekovima u plazmi kod pacova predstavljene kao grafici vreme u odnosu na koncentraciju. Nivoi plazme nakon jednokratne i.v. injekcije BAN2401, A17D, A17D/R79T i A17D/R79T/R82S prikupljene u vremenskim tačkama prikazane su 0,5 h, 2 h, 7 h, 24 h, 2 dana, 4 dana, 7 dana, 14 dana i 29 dana nakon davanja u grafiku. Koncentracija leka u plazmi u µg/ml prikazana je na y-osi (logaritamska skala), a vreme nakon davanja u satima (h) prikazano je na xosi. Srednje vrednosti grupe prikazane su trakama grešaka koje ukazuju na standardna odstupanja. Srednje vrednosti AUC0-inf i srednji terminalni poluraspad izračunati su analizom van odeljenja koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight) i prikazani su u Tabeli 2
Slika 4 daje podatke sa analizom vezivanja i selektivnosti za beta protofibrile u poređenju sa Ab monomerima za deimunizovane varijante A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) u poređenju sa BAN2401. Inhibicija vezivanja protofibrila Aβ1-42 u rastvoru prikazana je otvorenim krugovima, a otvoreni kvadrati, a inhibicija vezivanja monomerima Aβ1-40 u rastvoru zatvoreni krugovi i zatvoreni kvadrati. A) A17D/R79T_DI 1, B) A17D/R79T_DI 2, C) A17D/R79T_DI 3, D) A17D/R79T_DI 4, E) A17D/R79T_DI 5, F) A17D/R79T_DI 6, G) A17D/R79T_DI 7, H) A17D/R79T_DI8.
Slika 5 daje izloženost lekova BAN2401 i antitelima pronalaska lekovima u plazmi kod miševa predstavljene kao grafici vreme u odnosu na koncentraciju. Nivoi plazme nakon jednog i.v. injekcija BAN2401, A17D/R79T i 8 deimunizovanih varijanti A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) prikupljenih u vremenskim tačkama 0,5 h, 2 dana, 7 dana, 14 dana i 28 dana nakon davanja. Koncentracija leka u plazmi u µg/ml prikazana je na y-osi (logaritamska skala), a vreme nakon davanja u satima (h) prikazano je na xosi. Srednje vrednosti grupe prikazane su trakama grešaka koje ukazuju na standardna odstupanja. Srednje vrednosti AUC0-inf i srednji terminalni poluraspad izračunati su analizom van odeljenja koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight) i prikazani su u Tabeli 6
Na Slici 6 data je izloženost leka BAN2401 i mutantima u pacovima lekovima u plazmi, prikazani kao grafici vreme u odnosu na koncentraciju. Nivoi plazme nakon jednog i.v. injekcija BAN2401, A17D/R79T i 8 deimunizovanih varijanti A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) prikupljenih u vremenskim tačkama 0,5 h, 2 dana, 7 dana, 14 dana i 28 dana nakon davanja. Koncentracija leka u plazmi u µg/ml prikazana je na y-osi (logaritamska skala), a vreme nakon davanja u satima (h) prikazano je na x-osi. Srednje vrednosti grupe prikazane su trakama grešaka koje ukazuju na standardna odstupanja. Srednje vrednosti AUC0-inf i srednji terminalni polu-raspad izračunati su analizom van odeljenja koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight) i prikazani su u Tabeli 7 Slika 7 daje izloženost BAN2401, A17D/R79T_DI 3, A17D/R79T_DI 4 i A17D/R79T_DI 8 korigovanoj dozi leka u plazmi kod majmuna Cinomolgus predstavljenu kao grafici vremena i koncentracije. Nivoi plazme antitela nakon pojedinačne i.v. infuzije BAN2401 sakupljene u vremenskim tačkama 5 minuta, 1 h, 2 h, 8 h, 24 h, 2 dana, 4 dana, 7 dana, 14 dana, 21 dan i 28 dana nakon davanja, i A17D/R79T_DI 3, A17D/R79T_DI 4 i A17D/R79T_DI 8 prikupljeni u vremenskim tačkama 5 minuta, 2 h, 8 h, 24 h, 3 dana, 7 dana, 14 dana, 21 dan i 28 dana nakon davanja. Antitela prema pronalasku data su majmunu u drugom ispitivanju i u drugačijoj dozi (10 mg/kg) u poređenju sa BAN2401 (5 mg/kg). Stoga su grafici izloženosti plazmi prilagođeni dozi.
Koncentracija leka korigovana za dozu u µg/ml po mg/kg ubrizgane doze prikazana je na y-osi (logaritamska skala), a vreme nakon davanja u satima (h) prikazano je na x-osi. Srednje vrednosti grupe prikazane su trakama grešaka koje ukazuju na standardna odstupanja. Srednje vrednosti AUC0-inf prilagođene dozi i terminalni polu-raspadi izračunati su analizom van odeljenja koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight) i prikazani su u Tabeli 8.
Slika 8 daje aminokiselinske sekvence u odnosu na predmetni pronalazak. Slika 9 daje tabelu, podeljenu na dve stranice, sa aminokiselinskom sekvencom lakog varijabilnog lanca sa VL-CDR1-3 sekvencama u sivoj boji. BAN2401: SEQ ID NO:7. Nova antitela sa lakim varijabilnim lancem prema pronalasku: SEQ ID NO:8. Konkretni primeri takvih varijabilnih lakih lanaca: i): SEQ ID NO:9; ii): SEQ ID NO:10; iii): SEQ ID NO:11; i iv): SEQ ID NO:12.
Slika 10 daje tabelu, podeljenu na tri stranice, s aminokiselinskom sekvencom teškog varijabilnog lanca sa sekvencama VH-CDR1-3 u sivoj boji. BAN2401: SEQ ID NO:13. Nova antitela sa teškim varijabilnim lancem prema pronalasku SEQ ID NO:14. Konkretni primeri takvih varijabilnih teških lanaca: i): SEQ ID NO:15; ii): SEQ ID NO:16; iii): SEQ ID NO:17; i iv): SEQ ID NO:18.
Slika 11 daje jednostavno alometrijsko skaliranje centralnog klirensa (CL) za BAN2401, A17D/R79T_DI 3, A17D/R79T_DI 4 i A17D/R79T_DI 8, uključujući pretkliničke vrste miša, pacova i cinomolgus majmuna. CL različitih vrsta se nanose prema težini (dijamantima). Regresiona linija je ekstrapolirana da ukazuje na CL kod muškarca telesne težine 70 kg. Za BAN2401 istinski izmereni centralni CL označen je otvorenim kvadratom i odstupa od linearne regresione linije na osnovu CL BAN2401 kod majmuna miša, pacova i cinomolgus majmuna. BAN2401 je pokazao lošu linearnu korelaciju CL koja ukazuje na nesigurno predviđanje polu-raspada, za razliku od odlične linearne korelacije CL antitela prema pronalasku.
[0012] Mutacije A17D, R79T i R82S predstavljaju položaje u antitelu BAN2401, pri čemu su aminokiseline na pozicijama 17, 79 i 82 mutirane u varijabilnom lakom lancu.
[0013] Pod "BAN2401" podrazumeva se humanizovano monoklonsko antitelo mišjeg antitela mAb158 koje sadrži varijabilni laki lanac sa aminokiselinskom sekvencom kako je navedeno u SEQ ID NO:7 i varijabilni teški lanac kako je navedeno u SEQ ID NO:13. I BAN2401 i mAb158 i njihove karakteristike, uključujući VL-CDR1-3 i VH-CDR1-3 opisane su u EP2004688. BAN2401 je izuzet iz predmetnog pronalaska.
[0014] Sledeće skraćenice se podrazumevaju:
BAN2401:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:7; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:13.
A17D:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:19 i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:13.
1
A17D/R79T:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:20 i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:13.
A17D/R79T/R82S:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:21 i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:13.
A17D/R82S:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:22 i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:13.
A17D/R79T_DI 1:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:9; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
A17D/R79T_DI 2:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:10; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
A17D/R79T_DI 3:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:11; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
A17D/R79T_DI 4:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:12; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
A17D/R79T_DI 5:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:9; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
A17D/R79T_DI 6:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:10; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
A17D/R79T_DI 7:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:11; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
A17D/R79T_DI 8:
antitelo koje sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:12; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
[0015] Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, prema ovom pronalasku, sadrži u varijabilnom laku lancu, u položaju 17 (položaj Kabat 17) aminokiselinu A, D, E, K ili funkcionalni analog, u položaju 79 (Kabat pozicija 74) aminokiselina R, T, K, A, G ili funkcionalni analog, a na poziciji 82 (Kabat pozicija 77) aminokiselina R, S, C, G, N ili funkcionalni analog. Funkcionalni analog je aminokiselina koja pruža nižu pl vrednost antitela u poređenju sa A (položaj 17), odnosno. R (položaji 79 i 82) bez negativnog uticaja na vezivanje za antigen.
[0016] Sekvence aminokiselina u predmetnom obelodanjivanju su predstavljene na sledeći način:
SEQ ID NO:1: varijabilni teški lanac VH-CDR1 BAN2401.
SEQ ID NO:2: varijabilni teški lanac VH-CDR2 BAN2401.
SEQ ID NO:3: varijabilni teški lanac VH-CDR3 BAN2401.
SEQ ID NO:4: varijabilni laki lanac VL-CDR1 BAN2401.
SEQ ID NO:5: varijabilni laki lanac VL-CDR2 BAN2401.
SEQ ID NO:6: varijabilni laki lanac VL-CDR3 BAN2401.
SEQ ID NO:7: varijabilni laki lanac BAN2401.
SEQ ID NO:8: generički varijabilni sekvenca lakog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:9: specifična varijabilna sekvenca lakog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:10: specifična varijabilna sekvenca lakog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:11: specifična varijabilna sekvenca lakog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:12: specifična varijabilna sekvenca lakog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:13: varijabilni teški lanac BAN2401.
SEQ ID NO:14: generički varijabilna sekvenca teškog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:15: specifična varijabilna sekvenca teškog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:16: specifična varijabilna sekvenca teškog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:17: specifična varijabilna sekvenca teškog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:18: specifična varijabilna sekvenca teškog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:19: specifična varijabilna sekvenca lakog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:20: specifična varijabilna sekvenca lakog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:21: specifična varijabilna sekvenca lakog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:22: specifična varijabilna sekvenca lakog lanca u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:23: aminokiselinska sekvenca konstantnog regiona humanog IgG1 sadržana u antitelima prema pronalasku.
SEQ ID NO:24: aminokiselinska sekvenca konstantnog regiona κ lanca čoveka sadržana u antitelima prema pronalasku.
[0017] Varijabilni laki lanac (SEQ ID NO:7) na BAN2401 i antitela prema pronalasku sadrže tri CDR-sekvence (VL-CDR1-3):
i varijabilni teški lanac (SEQ ID NO:13) na BAN2401 i antitela prema pronalasku sadrže tri CDR-sekvence (VH-CDR1-3):
1
[0018] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac izabran iz aminokiselinske sekvence kako je navedeno u bilo kojoj od SEQ ID NOS:9-12.
[0019] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni teški lanac izabran iz aminokiselinske sekvence kako je navedeno u bilo kojoj od SEQ ID NOS:15-16.
[0020] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac izabran iz aminokiselinske sekvence kako je navedeno u bilo kojoj od SEQ ID NOS:9-12; i varijabilni teški lanac izabran iz aminokiselinske sekvence kako je navedeno u bilo kojoj od SEQ ID NOS:15-16.
[0021] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:9; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
[0022] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:10; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
[0023] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:11; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
[0024] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:12; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15.
[0025] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:9; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
[0026] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:10; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
[0027] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:11; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
[0028] U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen, pri čemu antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:12; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
1
[0029] U jednom otelotvorenju, antitelo ili fragment koji vezuje antigen prema predmetnom pronalasku, sadrži konstantni region teškog lanca odabran iz grupe koja se sastoji iz IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA i IgE konstantnih regiona ili bilo koje njihove alelne varijacije, kao što je razmatrano u Kabat i dr. (Kabat, E. A., i dr. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Peto izdanje, SAD Department of Health and Human Services, NIH Objava br.91-3242). Bilo koja od takvih sekvenci može se koristiti u predmetnom pronalasku. U poželjnijem otelotvorenju, konstantni region teškog lanca antitela je IgG1. Aminokiselinska sekvenca konstantnog regiona humanog IgG1 poznata je u struci i navedena je u SEQ ID NO:23.
[0030] U jednom otelotvorenju, antitelo ili fragment koji se vezuje za antigen prema predstavljenom pronalasku sadrži konstantni region lakog lanca odabran iz grupe koja se sastoji od κ- i λ-lanca konstantnih regiona ili bilo koje njihove alelne varijacije kako je diskutovano u Kabat i dr. (Kabat, E. A., i dr. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Peto izdanje, SAD Department of Health and Human Services, NIH Objava br.91-3242). Bilo koja od takvih sekvenci može se koristiti u predmetnom pronalasku. U poželjnijem otelotvorenju, konstantni region lakog lanca antitela je κ. Sekvenca aminokiselina konstantnog regiona κ lanca je poznata u tehnici i navedena je u SEQ ID:24.
[0031] U jednom otelotvorenju, fragment koji se vezuje za antigen prema predmetnom pronalasku je Fab fragment, ili F(ab')2 fragment ili Fv jednolančani fragment.
[0032] Antitela ili fragmenti koji vezuju antigen prema pronalasku mogu sadržati bilo koju kombinaciju varijabilnih lakih i teških lanaca definisanih iznad.
[0033] Prema jednom aspektu pronalaska obezbeđena su poboljšana antitela ili fragmenti koji vezuju antigen sa visokim afinitetom za Aβ protofibrile za upotrebu u terapiji, npr. davanjem jednog ili više antitela ili fragmenata koji se vezuju za antigen prema pronalasku pacijentu koji ima ili je u riziku od razvoja Alchajmerove bolesti i drugih poremećaja povezanih sa agregacijom Ab proteina, poput traumatske
1
povrede mozga (TBI), demencije sa Levijevim telom ( DLB), Daunov sindrom (DS), amiotrofična lateralna skleroza (ALS), Frontotemporalna demencija, tauopatije, sistemska amiloidoza, ateroskleroza i demencija Parkinsonove bolesti (PDD).
Pogodna doza može da varira u širokim granicama, npr. od 0,01 do 100 mg/kg/dozi, u zavisnosti od medicinske indikacije i statusa pacijenta, načina davanja, npr. i.v., s.c., infuzija ili lokalno davanje, pored odabrane učestalosti, npr. pojedinačna doza, dnevna, nedeljna, kvartalna ili još ređe davanje.
[0034] U jednom aspektu, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema pronalasku, za upotrebu u terapiji.
[0035] U jednom aspektu, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema pronalasku, za upotrebu u lečenju i/ili profilaksi Alchajmerove bolesti i drugih poremećaja povezanih sa agregacijom Aβ proteina. Tipično, takvi drugi poremećaji mogu biti izabrani između traumatične povrede mozga (TBI), demencije sa Levijevim telima (LBD), Daunovog sindroma (DS), amiotrofične lateralne skleroze (ALS), frontotemporalne demencije, tauopatije, sistemske amiloidoze, ateroskleroze i demencije Parkinsonove bolesti PDD).
[0036] U jednom aspektu, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema pronalasku za upotrebu u postupku smanjenja količine protofibrila Aβ kod osoba, što uključuje davanje osobi terapeutski efikasne količine antitela ili njegovog fragmenta koji se vezuje za pronalazak.
[0037] U jednom aspektu, obezbeđeno je antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema pronalasku za upotrebu u metodi za lečenje i/ili profilaksu Alchajmerove bolesti i drugih poremećaja povezanih sa agregacijom Aβ proteina kod ispitanika koji ima ili rizikuje da razvije bolest koja se sastoji iz davanja osobi terapeutski efikasne količine antitela ili njegovog fragmenta koji se vezuje za antigen, pronalaska. Tipično, takvi drugi poremećaji mogu biti izabrani između traumatične povrede mozga (TBI), demencije sa Levijevim telima (LBD), Daunovog sindroma (DS), amiotrofične lateralne skleroze (ALS), frontotemporalne demencije, tauopatije, sistemske amiloidoze, ateroskleroze i demencije Parkinsonove bolesti PDD).
1
[0038] "Ispitanik" je obično sisar, kao što je čovek. Ostali sisari predstavljaju takve sisare, gde bi se primenila veterinarska upotreba/lečenje/profilaksa.
[0039] U jednom aspektu, može se obezbediti antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema pronalasku za upotrebu u postupku za merenje količine Aβ protofibrila i/ili agregiranog Aβ proteina kod osobe, koja uključuje kontakt osobe ili njenog tkiva ili telesne tečnosti, u vivo ili in vitro, sa obeleženim antitelom ili njegovim antigen vezujućim fragmentom pronalaska i merenjem količine antitela ili fragmenata koji vezuju antigen vezanih za navedene protofibrile Aβ i/ili nataloženi protein Aβ. Antitela ili fragmenti koji vezuju antigen mogu biti obeleženi radioaktivnim ligandom kao što je I<131>, C<11>, C<14>, H<3>, F<18>ili Galijum<68>, ali bez ograničenja na ove radioizotope, u svrhu detekcije.
[0040] U jednom aspektu, može se obezbediti antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen iz ovog pronalaska za upotrebu u metodi za dijagnozu Alchajmerove bolesti i drugih poremećaja povezanih sa agregacijom Aβ proteina, kao što je traumatska povreda mozga (TBI), demencije sa Levijevim telima (DLB), Daunov sindrom (DS), amiotrofična lateralna skleroza (ALS), frontotemporalna demencija, tauopatije, sistemska amiloidoza, ateroskleroza i Parkinsonova bolest demencija (PDD), kod osoba koje imaju ili su u riziku od razvoja bolesti koje uključuju kontakt sa tkivom osobe ili telesnu tečnost, in vivo ili in vitro, sa antitelom prema pronalasku, ili njegovim antigen vezujućim fragmentom, i merenjem količine antitela ili fragmenta koji se vezuje za antigen vezan za nataloženi protein. Tipično, navedeni drugi poremećaji povezani sa agregacijom Aβ proteina mogu se odabrati između traumatične povrede mozga (TBI), demencije sa Levijevim telom (DLB), Daunovog sindroma (DS), amiotrofične lateralne skleroze (ALS), Frontotemporalne demencije, tauopatije, sistemske amiloidoze, ateroskleroze i demencije Parkinsonove bolesti (PDD). Tipično, telesna tečnost ili tkivo osobe analizirali bi se in vivo ili in vitro (u uzorku uzetom od pacijenta) kontaktom sa preparatom jednog ili više antitela ili fragmenata koji vezuju antigen prema pronalasku i količinom antitela ili vezivanjem antigena izmerili bi se fragmenti vezani za Aβ protofibrile. Kvantifikacija protofibrila koristila bi se za dijagnozu iznad pomenutih bolesti, praćenje različitih tretmana kao i za razvoj novih lekova. Po izboru, antitela ili njihovi fragmenti koji se vezuju za antigen, u takvom preparatu, bi bili obeleženi sredstvom, koje bi se detektovalo i
1
merilo bilo kojom od tehnika poznatih u tehnici, npr. analiza ELISA, Biacore i/ili snimanje sa SPECT, PET, MRI. Antitela ili fragmenti koji vezuju antigen mogu biti obeleženi radioaktivnim ligandom kao što je I<131>, C<11>, C<14>, H<3>, F<18>ili Galijum<68>, ali bez ograničenja na ove radioizotope, u svrhu detekcije.
[0041] Prema daljem aspektu pronalaska, priprema se farmaceutski sastav, koji sadrži efikasnu količinu jednog ili više antitela ili njegovog antigen vezujućeg fragmenta prema pronalasku. Medicinski sastav koji sadrži antitelo prema pronalasku može da sadrži, pored efikasne količine antitela, i druge komponente poznate za upotrebu u takvim preparatima, npr. puferi, komponente za očuvanje i stabilnost.
[0042] U još jednom aspektu, može se obezbediti antitelo prema pronalasku, za veterinarsku upotrebu. Tipično, navedena veterinarska upotreba bi uključivala lečenje i/ili profilaksu poremećaja povezanih sa agregacijom Aβ proteina.
[0043] Prema daljem aspektu koji nije deo pronalaska, može se obezbediti terapija koja koristi antitela prema pronalasku u kombinaciji sa simptomatskim tretmanima, kao što su inhibitori acetilholin esteraze, antagonisti NMDA i inhibitori 5HT6.
[0044] Kombinacija sa drugim tretmanima koji modifikuju bolest, poput inhibitora γsekretaze (GSI), modulatora γ-sekretaze (GSM), inhibitora β-sekretaze (BACE), BACE modulatora, vakcina, drugih antitela, lekova koji ciljaju tau ili neuroinflamatorne procese, antihipertenzivne, itd., nudi dodatne mogućnosti za efikasnu terapiju.
[0045] Kombinacija sa nutricionističkim proizvodima može pružiti dodatne mogućnosti za efikasnu terapiju.
[0046] U jednom aspektu, obezbeđen je farmaceutski sastav koji sadrži antitelo prema pronalasku, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom i/ili razblaživačima, pomenuti sastav može dalje sadržati dodatno terapeutsko sredstvo. Tipično, navedeno dodatno terapeutsko sredstvo može se odabrati između inhibitora acetilholin esteraze, NMDA antagonista, 5HT6 inhibitora, GSI, GSM, BACE
1
inhibitora, BACE modulatora, vakcina, drugih antitela, lekova koji ciljaju tau ili neuroinflamatorne procese, antihipertenziva i nutritivnog proizvoda. Sastav se može dati u pojedinačnoj ili sekvencijalnoj dozi.
[0047] Predmetni pronalazak će biti ilustrovan nizom neograničavajućih primera: Primer 1. Proizvodnja antitela i postupci koji se koriste
Proizvodnja referentnih antitela
[0048] Referentno antitelo BAN2401 je proizvedeno prema prethodno opisanim postupcima u EP2004688.
Proizvodnja antitela prema pronalasku
[0049] Antitela prema pronalasku proizvedena su privremenom i/ili stabilnom proizvodnjom u ćelijama jajnika kineskog hrčka (CHO) primenom sistema ekspresije CHOK1SV GS i CHOK1SV GS-KO Xceed™ (Lonza). Sledeći mutanti su proizvedeni privremenom transfekcijom korišćenjem sistema ekspresije CHOK1SV GS-KO Xceed™: A17D, A17D/R79T i A17D/R79T/R82S. Sledeći mutanti su dobijeni i privremenom i stabilnom transfekcijom korišćenjem sistema ekspresije CHOK1SV GS-KO Xceed™: A17D/R79T_DI 1, A17D/R79T_DI 2, A17D/R79T_DI 3, A17D/R79T_DI 4, A17D/R79T_DI 5, A17D/R79T_DI 6, A17D/R79T_DI 7 i A17D/R79T_DI 8. Mutant A17D/R82S je proizveden stabilnom transfekcijom korišćenjem sistema ekspresije CHOK1SV GS.
[0050] Sekvence regiona kodiranja lakog i teškog lanca mutanata sintetizovani su konvencionalnim postupcima.
[0051] Za privremene transfekcije u sistemu ekspresije CHOK1SV GS-KO Xeed™, regioni za kodiranje lakog lanca podklonirani su u vektor pKSC-17.4, a regioni za kodiranje teškog lanca u vektor pKSC-18.4. Ekspresione kulture su sakupljene 6 dana nakon transfekcije i prečišćene centrifugiranjem i sterilnom filtracijom.
Pročišćeni supernatanti ćelijske kulture su podvrgnuti prečišćavanju pomoću proteinske A hromatografije. Eluirano antitelo je dato u PBS (pH 7,4). Proizvodi su dalje prečišćeni preparativnom hromatografijom za isključivanje veličine (SEC) radi uklanjanja agregata. Nakon toga prikupljeni monomerni vrh je analiziran analitičkim SEC i utvrđeno je da su nivoi agregata ispod 2% za sve proizvode.
2
[0052] Stabilno izražavanje u sistemu CHOK1SV GS-KO Xeed ™ izvedeno je u osnovi prema preporukama proizvođača. Ukratko, dva vektora koja sadrže laki i teški lanac (pXC-17.4 i pKSC -18.4) su povezana u jedan dvostruki genski vektor koji sadrži oba gena. CHOK1SV GS-KO ćelije su transfektovane elektroporacijom sa linearizovanim dvostrukim genskim vektorom. Skrining klonova i pregled produktivnosti kultura smrti analizirani su ELISA. Proizvodnja je izvedena sa CD-CHO medijumom dopunjenim sa 15% prehranom A i 15% prehranom B (Life Technologies). Supernatanti su sakupljeni centrifugiranjem i sterilnom filtracijom. Prečišćeni supernatanti ćelijske kulture su prečišćeni korišćenjem proteinske G hromatografije i pufer zamenjen sa Dulbekovim PBS (Gibco).
[0053] Za stabilnu transfekciju korišćenjem sistema ekspresije CHOK1SV GS (Lonza), gen teškog lanca je vezan u pEE6.4 vektor, a gen lakog lanca u pEE12.4 vektor. Dva vektora su podvezana da formiraju dvostruki genski vektor. CHOK1SV ćelije su transfektovane elektroporacijom sa linearizovanim dvostrukim genskim vektorom. U suštini, transfekcije su izvršene prema preporukama proizvođača.
Skrining klonova i pregled produktivnosti kultura smrti analizirani su ELISA.
Proizvodnja je izvedena sa CD-CHO medijumom dopunjenim sa 15% prehrane A i 15% prehrane B (Life Technologies). Supernatanti su sakupljeni centrifugiranjem i sterilnom filtracijom. Prečišćeni supernatanti ćelijske kulture su prečišćeni korišćenjem proteinske G hromatografije i pufer zamenjen sa Dulbekovim PBS (Gibco). Analiza kvaliteta proizvoda pomoću HPLC za isključivanje veličina i SDS-PAGE izvedene su koristeći prečišćeni materijal svih proizvedenih mutanata.
Analiza vezivanja cilja inhibicijom ELISA
[0054] Karakteristike vezivanja za Aβ protofibrila i Aβ monomera antitela prema pronalasku u poređenju sa BAN2401 analizirane su upotrebom inhibicijskog ELISA u kome su antitela prethodno inkubirana u rastvoru sa Aβ protofibrilima ili Aβ monomerima, a zatim premeštena na EL obložene pločice obložene Aβ, kako je opisano u Tucker i dr. J Alzheimers Dis.2015; 43(2):575-88. doi: 10.3233/JAD-140741. PubMed PMID: 25096615, i tamo navedene reference.
Farmakokinetička ispitivanja na miševima divljeg tipa
[0055] Ženke miševa C57BL/6 starih 8-10 nedelja su grupisane i date su pojedinačne intravenske (i.v.) injekcije BAN2401 ili antitela prema pronalasku u dozi od 10 mg/kg. Plazma svih životinja sakupljana je u vremenskim tačkama koje su varirale od 30 minuta do 29 dana nakon injekcije i korišćena za merenje koncentracija antitela i naknadne proračune farmakokinetičkih (PK) parametara. Miševi su žrtvovani u krajnjem trenutku sakupljanja plazme.
Farmakokinetička ispitivanja na pacovima
[0056] Osam nedelja stare ženke pacova Sprague Dawley su grupisane i date su pojedinačno i.v. injekcije BAN2401 ili antitela prema pronalasku u dozi od 10 mg/kg. Plazma svih životinja sakupljana je u vremenskim tačkama koje su varirale od 30 minuta do 29 dana nakon injekcije i korišćena za merenje koncentracija antitela i naknadne proračune PK parametara. Pacovi su žrtvovani u krajnjem trenutku sakupljanja plazme.
Farmakokinetička ispitivanja na majmunima
[0057] Mužjaci majmuna cynomolgus su grupisani (N=3) i podvrgnuti pojedinačnom i.v. infuzije od 5 mg/kg BAN2401 ili 10 mg/kg antitela prema pronalasku. Serum svih životinja sakupljan je u vremenskim tačkama koje su varirale od 5 minuta do 28 dana nakon injekcije i korišćen za merenje koncentracije antitela. Serumski nivoi BAN2401 i antitela prema pronalasku određeni su ELISA. Biotinilirani Ap1-42 protofibrili dodani su u avidin imobilizovanu mikroploču za oblaganje. Nakon blokiranja, uzorci seruma majmuna su dodati u udubljenja. Nakon ispiranja nevezanih supstanci, u udubljenja je dodat kozji anti-humani IgG obeležen alkalnom fosfatazom (AP). Posle pranja da bi se uklonili nevezani reagensi, u udubljenja je dodat p-nitrofenilfosfat, supstrat za AP. Reakcija je zaustavljena rastvorom natrijum hidroksida i merena je apsorbanca na 405 nm i 492 nm. Apsorbancija na 492 nm je oduzeta od apsorpcije na 405 nm. Vrednosti su prevedene u koncentracije pomoću standardne krive i korišćene za naknadne proračune PK parametara.
Direktni ELISA za merenje Ab antitela
[0058] Nivoi BAN2401 i antitela prema pronalasku u podlogama za ćelijske kulture, prečišćenom proizvodu antitela i plazmi prikupljenim u PK ispitivanjima miševa i pacova izmereni su direktnim ELISA ispitivanjem za merenje anti-Aβ antitela. Uzorci su serijski razblaženi i inkubirani u jamicama mikrotiterskih ploča presvučenih Aβ1-40 kako bi se omogućilo vezivanje BAN2401 i antitela iz pronalaska. Kozji antihumani IgG-konjugovani konjski konjugovani peroksidaza (HRP) korišćen je kao antitelo za otkrivanje i dodat je TMB, supstrat za HRP. Reakcija je zaustavljena dodavanjem 2M H2SO4, što rezultira žutom bojom koja se meri na 450 nm. Postupak je korišćen na kvantitativni način, gde se vrednosti OD450 prevode u koncentracije pomoću standardne krive.
Proračuni parametara PK nekompartmentalnom analizom
[0059] Pojedinačni proračuni polu-raspada na terminalima izvedeni su pomoću modela koji nije odeljen sa softverom Phoenix WinNonLin 6.3 (Pharsight). Proračuni površine ispod krive (AUC0-inf) izvedeni su sa Phoenix WinNonLin postupkom lin-uz log-niz. Srednja vrednost grupe i standardna odstupanja AUC i terminalni poluraspad izračunati su pomoću GraphPad Prism (v 6.04).
Statističke analize
[0060] Statističke analize grupnih sredina pojedinačno utvrđenih terminalnih poluraspada i AUC izvršene su pomoću softvera GraphPad Prism (v. 6.04). U ispitivanjima je korišćen jednosmerni ANOVA praćen Bonferronijevim višestrukim poređenjima nakon testa. Ispitivanja su izvedena na nivoima značajnosti *P <0,05, **P <0,01, ***P <0,001 i ****P <0,0001.
Primer 2. Karakterizacija vezivanja cilja
Vezivanje Aβ-protofibrila sačuvano u A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S u poređenju sa BAN2401
[0061] Profili ciljnog vezivanja antitela prema pronalasku su analizirani pored BAN2401 (kontrola) inhibicijom ELISA kako je opisano u Primeru 1 (inhibicija ELISA). Rezultati su predstavljeni na Slici 1, gde su prikazane analize vezivanja i selektivnosti za Aβ protofibrile u poređenju sa Aβ monomerima za A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S i BAN2401. Rezultati su pokazali da je vezivanje i selektivnost vezivanja za Aβ protofibrile u poređenju sa vezivanjem za Aβ monomer očuvano u antitelima prema pronalasku (A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S).
Primer 3. Farmakokinetički profil antitela kod miševa
Farmakokinetička studija na BAN2401, A17D, A17D/R79T, A17D/R82S, A17D/R79T/R82S na miševima divljeg tipa
[0062] Da bi se proučio farmakokinetički profil antitela pronalaska kod miševa divljeg tipa, 8-10 nedelja starim ženkama miševa C57BL/6 dozirane su pojedinačne i.v. injekcije od 10 mg/kg BAN2401 (N=8), A17D (N=7), A17D/R79T (N=6), A17D/R82S (N=8) ili A17D/R79T/R82S (N=7). Životinjama je iskrvarena krv nakon 0,5 h, 2 dana,
2
7 dana, 14 ili 15 dana i 28 ili 29 dana, a nivoi BAN2401 i antitela prema pronalasku analizirani su ELISA postupkom koristeći Aβ1-40 za hvatanje i HRP-spregnutu kozji anti- humani IgG za detekciju kao što je opisano u Primeru 1 (direktni ELISA).
A17D/R82S je primenjen u ispitivanju započetoj odvojeno u poređenju sa ostalim antitelima. Međutim, uzorci plazme iz dve različite studije su istovremeno analizirani ELISA da bi se izbegle varijacije između ispitivanja.
[0063] Kao što je prikazano na graficima vremena i koncentracije na Slici 2 i izračunatih PK parametara predstavljenih u Tabeli 1, PK profili antitela pronalaska (A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S) se značajno razlikuju od BAN2401, posebno tokom prvih 48 sati nakon injekcije. Dok je za A17D viđen šestostruki porast izloženosti, mereno kao površina ispod krive (AUC0-inf), u poređenju sa BAN2401, AUC A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S su poboljšani za 10-11 puta (Tabela 1). Takođe, krajnji polu-raspad antitela pronalaska u plazmi je znatno produžen u poređenju sa BAN2401 (Tabela 1).
[0064] Tabela 1. Parametri PK plazme za BAN2401, A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S kod miševa. Polu-raspad i AUC0-inf za sva antitela izračunati su pojedinačno za sve životinje nekompartmentalnom analizom koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight) i podvrgnuti statističkoj analizi jednosmernom ANOVA praćenom Bonferronijevim višestrukim upoređivanjem nakon testa. Srednje vrednosti AUC0-inf i srednji terminalni polu-raspad prikazani su u tabeli. Statističke razlike u terminalnom polu-raspadu i AUC0-inf između BAN2401 i mutanata prikazane su u Tabeli, gde *** označava p <0,001, a ****p <0,0001.
Primer 4. Farmakokinetički profil antitela kod pacova
Farmakokinetičko ispitivanje BAN2401, A17D, A17D/R79T i A17D/R79T/R82S na pacovima
[0065] Da bi se proučio farmakokinetički profil antitela pronalaska kod pacova, 8 nedelja starim ženskim pacovima Sprague Dawley dozirane su pojedinačnim i.v. injekcije od 10 mg/kg BAN2401 (N=3), A17D (N=4), A17D/R79T (N=6) ili A17D/R79T/R82S (N=5). Životinjama je iskrvarena krv nakon 0,5 h, 2 h, 7 h, 24 h, 2 dana, 4 dana, 7 dana, 14 dana i 29 dana nakon injekcije. Nivoi BAN2401 i antitela prema pronalasku analizirani su ELISA koristeći Aβ1-40 za hvatanje i HRP-spregnuti kozji-humani IgG za detekciju kao što je opisano u Primeru 1 (direktni ELISA). Brzo smanjenje nivoa BAN2401 u plazmi miševa divljeg tipa tokom prvih 48 sati nakon davanja što dovodi do niske izloženosti (Slika 2) nije primećeno kod pacova, već umesto toga BAN2401 i antitela iz pronalaska pokazuju slične PK profile (Slika 3). Statistička analiza polu-raspada u plazmi i vrednosti AUC0-inf, izračunatih pojedinačno za sve pacove u ispitivanju, nije ukazala na veće razlike u AUC0-inf ili terminalnom polu-raspadu između BAN2401 i A17D ili A17D/R79T/R82S (Tabela 2). Iako je za A17D/R79T indiciran značajan porast AUC0-inf u poređenju sa BAN2401, nije postojala statistička razlika u terminalnom polu-raspadu između njih dvoje (Tabela 2).
[0066] Tabela 2. Parametri PK plazme za BAN2401, A17D, A17D/R79T i A17D/R79T/R82S kod pacova. Polu-raspadi i vrednosti AUC0-inf za sva antitela izračunati su pojedinačno za sve životinje nekompartmentalnom analizom koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight) i podvrgnuti statističkoj analizi jednosmernom ANOVA praćenom Bonferronijevim višestrukim upoređivanjem nakon testa. U tabeli su prikazane srednje vrednosti AUC0-inf i srednji terminalni polu-raspadi BAN2401, A17D, A17D/R79T i A17D/R79T/R82S. Statističke razlike u terminalnom poluraspadu i AUC0-inf između BAN2401 i mutanata prikazane su u Tabeli, gde ** označava P <0,01.
2
Primer 5. Deimunizacija
Ex vivo test celih proteinskih T ćelija na BAN2401, A17D, A17D/R79T i A17D/R79T/R82S
[0067] Da bi se procenilo da li su mutacije uvedene u antitela prema pronalasku dovele do povećanog rizika za imunogeni odgovor kod ljudi, analizirani su A17D, A17D/R79T i A17D/R79T/R82S pored BAN2401 pomoću ex vivo celih proteina T ćelije testa aktivacije. Analiza T ćelija u vremenskom toku EpiScreen™ meri kapacitet antitela da indukuje odgovore CD4+ T ćelija (Antitope Ltd, Cambridge, UK). Uzorci su testirani na mononuklearne ćelije periferne krvi sa osiromašenom CD8+ (PBMC) iz kohorte 25 zdravih davalaca (Donatori 1-25, Tabela 3) sa širokom HLA raznolikošću. Sposobnost antitela da indukuju odgovore CD4+ T ćelija merena je proliferacijom i sekrecijom IL-2.
[0068] Rezultati studije su ukazali da je ukupni potencijalni rizik od imunogenosti bio nizak za BAN2401, a granični nizak za A17D sa 8% i 12% davalaca koji su odgovorili pozitivno (Tabela 3). Analiza A17D/R79T i A17D/R79T/R82S otkrila je neočekivano nešto veće rizike od imunogenosti, jer je kombinovana učestalost proliferacije i sekrecije IL-2 bila 24%, odnosno 20% kohorte ispitivanja, respektivno.
[0069] Tabela 3. Rezime zdrave proliferacije donatorskih T ćelija i IL-2 ELISpot odgovora za BAN2401, A17D, A17D/R79T i A17D/R79T/R82S. Pozitivni odgovori T ćelija na proliferaciju označeni su sa „P“, a pozitivni ELISpot odgovori sa „E“.
Označeni su granični odgovori (*). Korelacija se izražava kao procenat odgovora na proliferaciju takođe pozitivan u ELISpot testu. Da bi se smatrao odgovorom kod jednog davaoca, i testovi proliferacije i ELISpot moraju biti pozitivni. Humanizovani A33 (Welt S i dr., Clin Cancer Res.2003 Apr; 9(4): 1347-53., 2003), koja je terapijska kontrola antitela sa poznatom srednjom imunogenošću od 32% u klinici, tipično stimuliše 20-30% davalaca da pozitivno odgovore na test proliferacije T ćelija. Fitohemaglutinin (PHA) i hemocijanin u ključaonici limpet (KLH) su snažni antigeni koji se koriste kao pozitivne kontrole.
2
2
Skrining epitopa T-ćelija na BAN2401 u silikonu
[0070] Da bi se dalje pozabavio rizikom imunogenosti zaključen mutacijama i pronašli relevantni položaji za deimunizaciju, BAN2401, A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S bili su podvrgnuti skriningu epitopa silikonskih T ćelija. Sekvence varijabilnih regiona BAN2401, A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S su dostavljene kompaniji Antitope Ltd (Cambridge, UK) na analizu od strane njihovih zaštićenih silikonskih tehnologija iTope™ i TCED™. Negerminalne promiskuitetne sekvence vezivanja klase MHC klase identifikovane su i u teškim lancima i u lakim lancima analiziranih antitela. Analiza pretrage BLAST TCED™ otkrila je dva delimična podudaranja sa prethodno identifikovanim epitopima u bazi podataka peptida sa poznatom imunogenošću ex vivo.
Ex vivo mapiranje epitopa T ćelija na BAN2401, A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S
[0071] Da bi se verifikovao rizik imunogenosti izveden novim mutacijama i identifikovale pozicije za deimunizaciju, procenjeno je 44 peptida (15-metara) izvedenih iz varijabilnih regiona BAN2401, A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S za prisustvo epitopa CD4+ T ćelija pomoću tehnologije mapiranja epitopa T ćelija EpiScreen™ (Antitope Ltd, Cambridge, UK). Peptidi su izabrani da pokriju sve potencijalne epitope T ćelija identifikovane in silico ekranom, kao i dva regiona koji pokrivaju područja supstitucije A17D i supstitucije R79T i R82S (uključujući peptide sa ili bez mutacija).
[0072] Peptidi su testirani na kohorti od 11 humanih davalaca izabranih iz analize celokupnih antitela Episcreen™ opisane u prethodnom odeljku. Odgovori T ćelija su mereni za svakog davaoca prema svakom peptidu primenom testa proliferacije koji meri ugradnju<3>[H]-timidina. Rezultati su identifikovali prisustvo tri potencijalna epitopa T ćelija u sekvencama (Epitop 1, 5 i 8). „Epitop 1“ prisutan u teškom lancu smatran je slabim. „Epitop 5“, uključujući mutaciju A17D, bio je slab i nisu primećeni donatorski odgovori na srodni peptid sekvence divljeg tipa BAN2401. „Epitop 8“ je bio najznačajniji epitop zasnovan na učestalosti odgovora T ćelija i identifikovan je u
2
peptidima antitela A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S, ali ne i u divljem tipu BAN2401 ili A17D.
[0073] Podaci sa ex vivo mapiranja epitopa T ćelija podržali su zaključak iz testa T ćelijskog kursa antitela da su A17D/R79T i A17D/R79T/R82S povezani sa povećanim ukupnim rizikom od imunogenosti. Pored toga, takođe se čini da A17D/R82S (koji nije uključen u test celih antitela na T ćelijama) ima povećani rizik od imunogenosti zbog mutacije R82S u "Epitopu 8".
Deimunizacija peptida identifikovanih kao potencijalni epitopi T ćelija mapiranjem epitopa T ćelija ex vivo
[0074] Generalno, deimunizacija se postiže promenom jedne aminokiseline u jednom od važnih položaja sidrenja (p1, p4, p6, p7 i p99-mer) potencijalnog peptida koji vezuje MHC klase II. Izabrane su specifične deimunizacione mutacije u tri epitopa identifikovana u iznad opisanom ex vivo mapiranju peptida (Epitopi 1, 5 i 8). Supstitucije su odabrane na osnovu očekivanog smanjenog afiniteta vezivanja peptida za vezujući džep molekula MHC klase II. Ispitivane su dve deimunizacione zamene za svaki peptid za koji je naznačeno da je potencijalno imunogeni, a ovi peptidi su analizirani zajedno sa originalnim peptidima BAN2401, A17D, A17D/R79T, A17D/R82S i A17D/R79T/R82S koristeći mapiranje peptida Episcreen™ tehnologija.
[0075] Odgovori T ćelija su mereni za svakog davaoca prema svakom peptidu primenom testa proliferacije koji meri ugradnju<3>[H]-timidina. Rezultati ovog ispitivanja potvrdili su ranije nalaze, ali su svi epitopi (Epitopi 1, 5 i 8) u ovom ispitivanju smatrani slabima (Tabela 4). Ipak, sve deimunizacione supstitucije uspešno su smanjile rizik od imunogenosti za peptide koji pokrivaju tri epitopa u poređenju sa originalnim peptidima, bez ili sa vrlo malo T-ćelijskih odgovora (Tabela 4). To ukazuje na to da su odabrane zamene bile efikasne i da su deimunizacione bile uspešne.
[0076] Tabela 4. Rezultati deimunizacije na nivou peptida epitopa identifikovanih kao imunogeni primenom EpiScreen™ tehnologije mapiranja epitopa T ćelija. Prikazani su peptidi izvedeni iz BAN2401 i antitela pronalaska koja su identifikovana kao imunogena, kao i isti peptidi sa uvedenim supstitucijama deimunizacije (podvučeni). Mutacije koje poboljšavaju polu-raspad prikazane su podebljanim slovima. Svi
2
deimunizovani peptidi su testirani u testu ex vivo T ćelija, a rezultati su prikazani u krajnjoj desnoj koloni (učestalost odgovora davaoca).
Dizajn i izrada deimunizovanih varijanti A17D/R79T
[0077] Osam deimunizovanih varijanti A17D/R79T dizajnirano je na osnovu rezultata prethodno mapiranja epitopa T ćelija i deimunizacije peptida. U sva tri epitopa identifikovana kao potencijalno imunogena, deimunizacione mutacije za koje je pokazano da smanjuju imunogenost u mapiranju epitopa T ćelija ex vivo uvedene su u kombinacijama naznačenim u Tabeli 5.
[0078] Tabela 5. Rezime osam deimunizovanih varijanti dvostrukog mutanta A17D/R79T. Deimunizacione mutacije za epitope 1, 5 i 8, odabrane i funkcionalno verifikovane u testu ex vivo T ćelija na nivou peptida, naznačene su za specifična antitela. Korišćena je numeracija N-terminala. VH = varijabilni teški lanac, VL = varijabilni laki lanac.
Primer 6. Karakterizacija ciljnog vezivanja deimunizovanih antitela
Vezivanje Aβ-protofibrila sačuvano u osam deimunizovanih varijanti A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) u poređenju sa BAN2401
[0079] Profili ciljnog vezivanja osam deimunizovanih varijanti A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) su analizirani pored BAN2401 (kontrola) postupkom inhibicije opisanom u Primeru 1 (Inhibicija ELISA). Rezultati su predstavljeni na Slici 4, gde su prikazane analize vezivanja i selektivnosti za Aβ protofibrile u poređenju sa Aβ monomerima za A17D/R79T_DI 1-8 i BAN2401. Rezultati su pokazali da je vezivanje i selektivnost vezivanja za Aβ protofibrile u poređenju sa vezivanjem za Aβ
1
monomer očuvano u antitelima prema pronalasku (A17D/R79T_DI 1-8).
Primer 7. Farmakokinetički profil deimunizovanih antitela kod miševa
Farmakokinetičko ispitivanje na BAN2401, A17D/R79T i osam deimunizovanih varijanti A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) na miševima divljeg tipa
[0080] Da bi se uporedili PK profili osam varijanti deimunizovanog A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) sa PK profilom BAN2401 i A17D/R79T kod miševa divljeg tipa, 8-10 nedelja starih ženskih miševa C57BL/6 su grupisani (N=5) i podvrgnuti pojedinačnom iv injekcije 10 mg/kg antitela. Životinjama je iskrvarena krv nakon 0,5 h, 2 dana, 7 dana, 14 dana i 28 dana, a nivoi BAN2401 i antitela prema pronalasku analizirani su ELISA postupkom koristeći Aβ1-40 za hvatanje i HRP-spregnutu kozji anti- humani IgG za detekciju kao što je opisano u Primeru 1 (direktni ELISA). Kao što je prikazano na grafiku vreme-koncentracija na Slici 5, PK profil deimunizovanih mutanata A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) podseća na PK profil A17D/R79T i razlikuje se od BAN2401. Rezultati su sugerisali da su i AUC0-inf i terminalni poluraspad A17D/R79T i deimunizovane varijante (A17D/R79T_DI 1-8) značajno poboljšani u poređenju sa BAN2401 (Tabela 6). Dakle, sve deimunizovane varijante pokazale su poboljšani PK profil u poređenju sa BAN2401 i prikazivale PK profile koji su bili slični PK profilu A17D/R79T, sa povećanom izloženošću i produženim poluraspadom eliminacije.
[0081] Tabela 6. Parametri PK plazme za BAN2401, A17D/R79T i deimunizovane varijante A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) kod miševa. Polu-raspad i AUC0-inf za sva antitela izračunati su pojedinačno za sve životinje nekompartmentalnom analizom koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight) i podvrgnuti statističkoj analizi jednosmernom ANOVA praćenom Bonferronijevim višestrukim upoređivanjem nakon testa. Srednji AUC0-inf i srednji terminalni polu-raspad prikazani su u tabeli.
Statističke razlike u terminalnom polu-raspadom i AUC0-inf između BAN2401 i mutanata prikazane su u tabeli, gde * označava P<0,05, ** P<0,01, *** P<0,001 i **** P<0,0001.
2
Primer 8. Farmakokinetički profil deimunizovanih antitela kod pacova
Farmakokinetički profili BAN2401, A17D/R79T i osam deimunizovanih varijanti A17D/R79T (A17D/R79T DI 1-8) kod pacova
[0082] Da bi se uporedili PK profili osam varijanti deimunizovanog A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) sa PK profilom BAN2401 i A17D/R79T kod pacova, grupisane su 8 nedelja stare ženke Sprague Dawley pacova (N=5) i podvrgnuti pojedinačnom iv injekcije 10 mg/kg antitela. Životinjama je iskrvarena krv nakon 0,5 h, 2 dana, 7 dana, 14 dana i 28 dana, a nivoi BAN2401 i antitela prema pronalasku analizirani su ELISA postupkom koristeći Aβ1-40 za hvatanje i HRP-spregnutu kozji anti- humani IgG za detekciju (Primeru 1 direktni ELISA).
[0083] Kao što je prikazano na Slici 6, BAN2401, A17D/R79T i deimunizovane varijante A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) pokazuju prilično slične PK profile kod pacova. Rezultati sugerišu da je A17D/R79T_DI 1 imao značajno duži terminalni polu-raspad od BAN2401 kod pacova (p<0,05), dok je AUC0-inf bio značajno veći za A17D/R79T, A17D/R79T_DI 1 i A17D/R79T_DI 4 u poređenju sa BAN2401 (p<0,01) (Tabela 7).
[0084] Tabela 7. Parametri PK plazme za BAN2401, A17D/R79T i deimunizovane varijante A17D/R79T (A17D/R79T_DI 1-8) kod pacova. Polu-raspad i AUC0-inf za sva antitela izračunati su pojedinačno za sve životinje nekompartmentalnom analizom koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight) i podvrgnuti statističkoj analizi jednosmernom ANOVA praćenom Bonferronijevim višestrukim upoređivanjem nakon testa. Srednji AUC i srednji terminalni polu-raspad prikazani su u tabeli. Statističke razlike u terminalnom polu-raspadu i AUC između BAN2401 i antitela prema pronalasku prikazane su u tabeli, gde * označava P<0,05 i ** P<0,01.
Primer 9. Farmakokinetički profil deimunizovanih antitela kod majmuna
Farmakokinetički profili BAN2401, A17D/R79T_DI 3, A17D/R79T_DI 4 i A17D/R79T_DI 8 kod majmuna cinomolgus.
[0085] Da bi se uporedili PK profili A17D/R79T_DI 3, A17D/R79T_DI 4 i A17D/R79T_DI 8 sa PK profilom BAN2401 kod majmuna, muški majmuni cinomolgus su grupisani (N = 3) i podvrgnuti pojedinačnom i.v. infuzije od 5 mg/kg BAN2401 ili 10 mg/kg antitela prema pronalasku. Majmunima ubrizganim u BAN2401 krv je iskrvarena nakon 5 min, 1 h, 2 h, 8 h, 24 h, 2 dana, 4 dana, 7 dana, 14 dana, 21 dan i 28 dana nakon primene, dok su majmunima ubrizgane antitela na pronalazak je iskrvaren nakon 5 minuta, 2 sata, 8 sati, 24 sata, 3 dana, 7 dana, 14 dana, 21 dana i 28 dana. Koncentracija plazme primenjenih antitela analizirana je ELISA, kao što je opisano u Primeru 1 (direktni ELISA). PK profili su prikazani kao grafici vremena u odnosu na koncentraciju na Slici 7, dok su vreme polu-raspada i AUC0-inf za sva antitela izračunati ne-kompartment analizom koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight) (Tabela 8). PK parametri iz BAN2401 prikazani u Tabeli 8, rezultat su zasebnog ispitivanja u kojoj je BAN2401 davan putem i.v. infuzije u dozi od 5 mg/kg BAN2401.
4
[0086] Tabela 8. Parametri PK plazme za BAN2401, A17D/R79T_DI 3, A17D/R79T_DI 4 i A17D/R79T_DI 8 kod majmuna cinomolgus. Terminalni poluraspad i AUC0-inf za sva antitela izračunati su analizom bez odeljenja koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight). PK parametri iz BAN2401 ovde prikazani su iz zasebnog ispitivanja u kojoj je BAN2401 davan putem i.v. infuzije u dozi od 5 mg/kg BAN2401. Da bi se pojednostavila poređenja AUC između BAN2401 i antitela prema pronalasku, u tabeli su prikazane srednje vrednosti AUC0-inf i srednje vrednosti poluraspada prilagođenih dozi.
Primer 10. Jednostavno alometrijsko skaliranje - miš, pacov i majmun čoveku [0087] Da bi se predvideo humani polu-raspad antitela prema pronalasku (ovde prikazano za A17D/R79T_DI 3, A17D/R79T_DI 4 i A17D/R79T_DI 8), izvršeno je 2-uporedno modelovanje i jednostavno alometrijsko skaliranje. Model sa 2 odeljenja je primenjen na PK profile plazme BAN2401 i antitela iz pronalaska koristeći Phoenix WinNonlin 6.3 (Pharsight), kako bi se procenili vrednosti klirensa (CL) i zapremine (V) kod miševa pacova i majmuna. Vrednosti CL i V su ucrtane u odnosu na telesnu masu i primenjeno je jednostavno alometrijsko skaliranje (Deng i dr. mAbs 2011: 3(1): p.61-66. doi:10.4161/mabs.3.1.13799). Terminalni polu-raspad izračunat je prema jednačini:
[0088] Jednostavnim alometrijskim skaliranjem zapremine ili klirensa, vrednosti procenjenih parametara u predkliničkim vrstama se nanose u odnosu na telesnu masu . Konstanta i eksponent iz regresione linije koriste se za predviđanje V i CL kod čoveka pri telesnoj masi od 70 kg. I eksponent (koji bi trebalo da bude oko 0,85 za klirens i 1 za zapreminu) i pridržavanje regresione linije mere su pouzdanosti procene specifičnih parametara kod čoveka.
[0089] Kao što je prikazano na Slici 11, BAN2401 ima lošu linearnu korelaciju centralnog CL među testiranim vrstama, što rezultira nesigurnim jednostavnim alometrijskim skaliranjem. Odstupanje od eksponenta (koje bi trebalo da bude blizu 0,85) sugeriše da je loša korelacija efekat visokog klirensa BAN2401 kod miševa. To je dovelo do potcenjivanja očekivanog CL kod čoveka i, prema tome, do precenjivanja predviđenog terminalnog polu-raspada. Krajnji polu-raspad BAN2401 procenjen je na 41 dan, što je znatno odstupalo od polu-raspada izmerenog u klinici (5-7 dana). Stvarni CL banke BAN2401 naznačen je na Slici 11 (otvoreni kvadrat). Za razliku od loše linearne korelacije između miša, pacova i cinomolgusa za BAN2401, antitela pronalaska (A17D/R79T_DI 3, A17D/R79T_DI 4 i A17D/R79T_DI 8) pokazala su odličnu korelaciju (Slika 11). Izračunati terminalni polu-raspad iz predviđenih parametara PK kod čoveka predložio je polu-raspad kod ljudi od 13, 15 i 20 dana za A17D/R79T_DI 3, A17D/R79T_DI 4 i A17D/R79T_DI 8. Jednostavno alometrijsko skaliranje zapremine (V) sugeriše dobru linearnu korelaciju i eksponent od približno 1 za BAN2401 i antitela iz pronalaska (nije prikazano).
[0090] Antitela prema pronalasku pokazuju linearnu korelaciju CL među vrstama sa sigurnijim alometrijskim skaliranjem i ponašaju se poput drugih terapijskih IgG1, kao što su bevacizumab, omalizumab i trastuzumab, kako je opisano u Deng i dr, Expert Opin. Drug Metab. Toxicol 8(2) (2012): p.141-160., sa polu-raspadom kod čoveka od oko 15-30 dana. Za razliku od BAN2401, sa suboptimalnim PK profilom kod miša i čoveka koji odstupa od mnogih drugih terapijskih IgG1, antitela iz predmetnog pronalaska su projektovana što je rezultiralo normalizovanim PK profilima kod miša. Oni pokazuju PK profile i vreme poluraspada kod miša, pacova i cinomolgusa slično ostalim terapeutskim IgG1 sa polu-raspadom kod čoveka oko 15-30 dana.
Predmetno obelodanjivanje nagoveštava da će se produženi polu-raspad antitela pronalaska kod miševa prevesti na čoveka.
4
4
4
4
4
4
4
1
2

Claims (20)

Patentni zahtevi
1. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen koji sadrži:
(a) varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:12; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16;
(b) varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:9; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15;
(c) varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:10; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15;
(d) varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:11; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15;
(e) varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:12; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:15;
(f) varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:9; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16
(g) varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:10; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16; ili
(h) varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:11; i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
2. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1, gde antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen sadrži konstantni region IgG teškog lanca.
3. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, za upotrebu u terapiji.
4. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen patentnom prema zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, za upotrebu u lečenju i/ili profilaksi Alchajmerove bolesti i drugih poremećaja povezanih sa agregacijom Aβ proteina, kao što je traumatska povreda mozga (TBI), demencija sa Levijevim telima (LBD), Daunov sindrom (DS), amiotrofična lateralna skleroza (ALS), frontotemporalna demencija, tauopatije, sistemske amiloidoze, ateroskleroza i demencija Parkinsonove bolesti (PDD).
5. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 za upotrebu u postupku smanjenja količine protofibrila Aβ kod ispitanika , koji se sastoji iz davanja navedenom ispitaniku terapeutski efikasne količine antitela ili njegovog fragmenta koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtev 2.
6. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 za upotrebu u postupku za merenje količine Aβ protofibrila i/ili nataloženog Aβ proteina kod osobe, koja uključuje kontakt i tkivo ili telesnu tečnost osobe, in vivo, sa antitelom ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 i merenje količine antitela ili njegovog fragmenta za vezivanje antigena vezanog za navedene protofibrile Aβ i/ili nataloženi protein Aβ.
7. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 za upotrebu u postupku za dijagnozu Alchajmerove bolesti kod osoba koje imaju ili rizikuju da razviju bolest, koje uključuju kontakt tela ili telesne tečnosti te osobe, in vivo, sa antitelom ili njegov fragment za vezivanje antigena prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, ili njegov fragment, i merenje količine pomenutog antitela vezanog za nataloženi protein Aβ.
8. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 za upotrebu u postupku dijagnoze traumatične povrede mozga (TBI), demencije sa Levijevim telima (LBD), Daunovog sindroma (DS), amiotrofične lateralne skleroze (ALS), Frontotemporalne demencije, tauopatije, sistemske amiloidoze, ateroskleroze i demencije Parkinsonove bolesti (PDD) kod osoba koje imaju ili su u opasnosti od razvoja bilo koje od pomenutih bolesti,
4
uključujući kontakt tela ili telesne tečnosti osobe, in vivo, sa antitelom ili fragmentom koji ga vezuje za antigen, prema patentnom zahtev 1 ili patentnom zahtev 2, i merenje količine pomenutog antitela ili njegovog fragment koji se vezuje za antigen koji je vezan za nataloženi Aβ protein.
9. Farmaceutski sastav, koji sadrži antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom i/ili razblaživačima.
10. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, za veterinarsku upotrebu.
11. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen koji imaju afinitet prema Aβ protofibrilima, pri čemu antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen sadrži varijabilni laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:12 i varijabilni teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu kako je navedeno u SEQ ID NO:16.
12. Antitelo prema patentnom zahtevu 11, gde antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen sadrži konstantni region IgG teškog lanca.
13. Farmaceutski sastav, koji sadrži antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtevu 12, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom i/ili razblaživačem.
14. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtevu 12 za upotrebu u postupku smanjenja količine protofibrila Aβ kod ispitanika , koji se sastoji iz davanja navedenom ispitaniku terapeutski efikasne količine antitela ili njegovog fragmenta koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtev 12.
15. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtevu 12 za upotrebu u postupku za lečenje Alchajmerove bolesti ili drugog poremećaja povezanog sa agregacijom Aβ proteina kod ispitanika koji ima navedenu bolest ili poremećaj, naznačen time što obuhvata davanje navedenom ispitaniku terapeutski efikasne količine antitela ili njegovog fragmenta koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtevu 12.
16. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtevu 12 za upotrebu u postupku lečenja Alchajmerove bolesti kod ispitanika koji ima Alchajmerovu bolest, koji obuhvata davanje navedenom ispitaniku terapeutski efikasne količine antitela ili njegovog fragmenta koji vezuje antigen prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtevu 12.
17. Antitelo ili njegov fragment koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtevu 12, za upotrebu u terapiji.
18. In vitro postupak za merenje količine Aβ protofibrila i/ili agregiranog Aβ proteina kod osobe, koji uključuje kontakt tkiva ili telesne tečnosti osobe, in vitro, sa antitelom ili njegovim fragmentom koji se vezuje za antigen prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 i merenje količina antitela ili njegovog antigen vezujućeg fragmenta vezanog za pomenute Aβ protofibrile i/ili nataloženi Aβ protein.
19. In vitro postupak za dijagnozu Alchajmerove bolesti kod osoba koje imaju ili su u riziku da razviju bolest, koji uključuje kontakt tkiva ili telesne tečnosti osobe, in vitro, sa antitelom ili njegovim fragmentom koji se vezuje za antigen, prema patentnom zahtevu 1 ili 2, ili njegov fragment i merenje količine pomenutog antitela vezanog za nataloženi Aβ protein.
20. In vitro postupak za dijagnozu traumatične povrede mozga (TBI), demencije sa Levijevim telima (LBD), Daunovog sindroma (DS), amiotrofične lateralne skleroze (ALS), Frontotemporalne demencije, tauopatije, sistemske amiloidoze, ateroskleroze i demencije Parkinsonove bolesti (PDD) kod osoba koje imaju ili rizikuju razvoj bilo koje od pomenutih bolesti, uključujući kontakt tela i telesne tečnosti osobe, in vitro, sa antitelom ili njegovim antigenom vezujućim fragmentom prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, i merenje količine pomenutog antitela ili fragmenta koji se vezuje za antigen vezan za nataloženi Aβ protein.
RS20210459A 2014-07-10 2015-07-08 Poboljšana antitela koja vezuju a-beta protofibril RS61717B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462022952P 2014-07-10 2014-07-10
PCT/EP2015/065633 WO2016005466A2 (en) 2014-07-10 2015-07-08 IMPROVED Aß PROTOFIBRIL BINDING ANTIBODIES
EP15738876.0A EP3166970B1 (en) 2014-07-10 2015-07-08 Improved a-beta protofibril binding antibodies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61717B1 true RS61717B1 (sr) 2021-05-31

Family

ID=53673920

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20210459A RS61717B1 (sr) 2014-07-10 2015-07-08 Poboljšana antitela koja vezuju a-beta protofibril

Country Status (34)

Country Link
US (1) US9573994B2 (sr)
EP (2) EP3865510A3 (sr)
JP (1) JP6628786B2 (sr)
KR (2) KR102763164B1 (sr)
CN (2) CN106661103B (sr)
AR (1) AR101130A1 (sr)
AU (1) AU2015286707B2 (sr)
CA (1) CA2951990C (sr)
CL (1) CL2017000053A1 (sr)
CO (1) CO2017000346A2 (sr)
CY (1) CY1124563T1 (sr)
DK (1) DK3166970T3 (sr)
ES (1) ES2865112T3 (sr)
HR (1) HRP20210680T1 (sr)
HU (1) HUE053809T2 (sr)
IL (2) IL282823B2 (sr)
JO (1) JO3537B1 (sr)
LT (1) LT3166970T (sr)
MA (2) MA53887A (sr)
MX (1) MX379241B (sr)
MY (1) MY184890A (sr)
PE (1) PE20170768A1 (sr)
PH (1) PH12017500032B1 (sr)
PL (1) PL3166970T3 (sr)
PT (1) PT3166970T (sr)
RS (1) RS61717B1 (sr)
RU (1) RU2700104C2 (sr)
SG (1) SG11201610734RA (sr)
SI (1) SI3166970T1 (sr)
SM (1) SMT202100263T1 (sr)
TW (1) TWI678376B (sr)
UA (1) UA121550C2 (sr)
WO (1) WO2016005466A2 (sr)
ZA (1) ZA201706272B (sr)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2991856A1 (en) 2015-07-21 2017-01-26 Bioarctic Neuroscience Ab Method for treatment of traumatic brain injury targeting aggregated peptides
JP2019529345A (ja) 2016-07-14 2019-10-17 バイオアークティック アクティエボラーグ 脳送達タンパク質
CN117244056A (zh) * 2016-10-27 2023-12-19 卫材研究发展管理有限公司 用于治疗阿尔茨海默病的含有抗Aβ初原纤维抗体和β-分泌酶BACE1抑制剂的组合物
EP3658172A4 (en) 2017-07-25 2021-05-05 TrueBinding, Inc. TREATING CANCER BY BLOCKING THE INTERACTION OF TIM-3 AND HIS LIGAND
JP7398380B2 (ja) * 2018-03-08 2023-12-14 フェインズ セラピューティクス，インコーポレーテッド 抗クローディン１８．２抗体及びその使用
WO2020023530A2 (en) * 2018-07-24 2020-01-30 Eisai R&D Management Co., Ltd. Methods of treatment and prevention of alzheimer's disease
CN120058944A (zh) 2019-01-30 2025-05-30 真和制药有限公司 抗gal3抗体及其用途
MX2022014786A (es) 2020-05-26 2023-01-16 Truebinding Inc Metodos para tratar enfermedades inflamatorias mediante el bloqueo de galectina-3.
JP2023535024A (ja) 2020-07-23 2023-08-15 オター プロシーナ リミテッド 抗ａベータ抗体
TW202300517A (zh) 2021-03-12 2023-01-01 美商美國禮來大藥廠 抗類澱粉β抗體及其用途
WO2022251048A1 (en) 2021-05-24 2022-12-01 Eli Lilly And Company Anti-amyloid beta antibodies and uses thereof
US20250163135A1 (en) 2021-07-09 2025-05-22 Eisai R&D Management Co., Ltd. Biomarkers for alzheimer's disease treatment
MX2024002567A (es) 2021-08-30 2024-03-20 Eisai R&D Man Co Ltd Formulaciones subcutaneas de anticuerpo anti protofibrillas de beta-amiloide (abeta) y metodos de uso de las mismas.
EP4473009A1 (en) 2022-02-02 2024-12-11 Eisai R&D Management Co., Ltd. Methods of treatment using p-tau181 level
CN114578066B (zh) * 2022-05-07 2022-08-19 北京第一生物化学药业有限公司 检测β-淀粉样蛋白的产品和方法
CN120513256A (zh) 2023-01-20 2025-08-19 迈威(美国)生物治疗有限公司 抗淀粉样蛋白β原纤丝/低聚物抗体和其用途

Family Cites Families (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5231000A (en) 1987-10-08 1993-07-27 The Mclean Hospital Antibodies to A4 amyloid peptide
US5753624A (en) 1990-04-27 1998-05-19 Milkhaus Laboratory, Inc. Materials and methods for treatment of plaquing disease
US6174916B1 (en) 1990-04-27 2001-01-16 Milkhaus Laboratory, Ltd. Methods for treating herpes virus infections
CA2081482C (en) 1990-04-27 2000-11-21 Ellis L. Kline Method and composition for treatment of central nervous system disease states associated with abnormal amyloid beta protein molecular organization
US5604102A (en) 1992-04-15 1997-02-18 Athena Neurosciences, Inc. Methods of screening for β-amyloid peptide production inhibitors
ATE198622T1 (de) 1993-10-27 2001-01-15 Elan Pharm Inc Transgene tiere, die app allele mit der schwedischen mutation beherbergen
AU686818B2 (en) 1994-05-25 1998-02-12 John Mcmichael Materials and methods for treatment of plaquing diseases
US6114133A (en) 1994-11-14 2000-09-05 Elan Pharmaceuticals, Inc. Methods for aiding in the diagnosis of Alzheimer's disease by measuring amyloid-β peptide (x-≧41)
US7427392B1 (en) 1994-11-14 2008-09-23 Elan Pharmaceuticals, Inc. Methods for aiding in the diagnosis of alzheimer's disease by measuring amyloid-β peptide (x-≧41) and tau
US5786180A (en) 1995-02-14 1998-07-28 Bayer Corporation Monoclonal antibody 369.2B specific for β A4 peptide
US6303567B1 (en) 1995-03-14 2001-10-16 Praecis Pharmaceuticals, Inc . Modulators of β-amyloid peptide aggregation comprising D-amino acids
US5817626A (en) 1995-03-14 1998-10-06 Praecis Pharmaceuticals Incorporated Modulators of beta-amyloid peptide aggregation
US5854215A (en) 1995-03-14 1998-12-29 Praecis Pharmaceuticals Incorporated Modulators of β-amyloid peptide aggregation
JPH11514333A (ja) 1995-03-14 1999-12-07 プレーシス ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド アミロイドの凝集の調節剤
US5985242A (en) 1995-10-27 1999-11-16 Praecis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of β-amyloid peptide aggregation comprising D-amino acids
JPH09178743A (ja) 1995-12-27 1997-07-11 Oriental Yeast Co Ltd 可溶性ａｐｐの定量法
US6054114A (en) 1996-05-08 2000-04-25 Massachusetts Institute Of Technology Organometallic ligands for the localization and quantification of amyloid in vivo and in vitro
US20060178302A1 (en) 1997-02-05 2006-08-10 Northwestern University & The University Of Southern California Amyloid beta protein (globular assembly and uses thereof)
US6218506B1 (en) 1997-02-05 2001-04-17 Northwestern University Amyloid β protein (globular assembly and uses thereof)
US20030068316A1 (en) 1997-02-05 2003-04-10 Klein William L. Anti-ADDL antibodies and uses thereof
US7964192B1 (en) 1997-12-02 2011-06-21 Janssen Alzheimer Immunotherapy Prevention and treatment of amyloidgenic disease
TWI239847B (en) 1997-12-02 2005-09-21 Elan Pharm Inc N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease
DE1033998T1 (de) 1997-12-03 2001-05-23 Brigham And Women's Hospital, Boston Methode zur unterdrückung von beta-amyloid-verwandten veränderungen in alzheimer
AU2486900A (en) 1998-12-29 2000-07-31 University Of Georgia Research Foundation, Inc., The Rubredoxin fusion proteins, protein expression system and methods
US6670195B1 (en) 1999-05-26 2003-12-30 New York University Mutant genes in Familial British Dementia and Familial Danish Dementia
UA81216C2 (en) 1999-06-01 2007-12-25 Prevention and treatment of amyloid disease
PE20010212A1 (es) 1999-06-01 2001-02-22 Neuralab Ltd Composiciones del peptido a-beta y procesos para producir las mismas
AU6234700A (en) 1999-07-27 2001-02-13 Abgenix, Inc. Methods and compositions for inhibiting polypeptide accumulation associated with neurological disorders
DE60043165D1 (de) 1999-08-04 2009-11-26 Univ Southern California Globularer Aufbau vom Amyloid-beta- protein und deren Verwendungen
WO2001039796A2 (en) 1999-11-29 2001-06-07 Neurochem Inc. Vaccine for the prevention and treatment of alzheimer's and amyloid related diseases
PT1284998E (pt) 2000-05-22 2005-06-30 Univ New York Eptideos imunogenicos sinteticos mas nao-amiloidogenicos homologos a beta-amiloides, destinados a induzir uma reaccao imunitaria contra os beta-amiloides e os depositos amiloides
EP2082749A3 (en) 2000-07-07 2010-06-30 Bioarctic Neuroscience AB Prevention and treatment of Alzheimer's disease
US20030187011A1 (en) 2001-12-20 2003-10-02 Lashuel Hilal A. Apomorphine inhibitors of amyloid-beta (Abeta) fibril formation and their use in amyloidosis based disease
EP2330113B1 (en) 2002-04-19 2016-06-29 The Governing Council Of The University Of Toronto Immunological methods and compositions for the treatment of Alzheimer's disease
US20040049134A1 (en) 2002-07-02 2004-03-11 Tosaya Carol A. System and methods for treatment of alzheimer's and other deposition-related disorders of the brain
ATE506072T1 (de) 2002-09-12 2011-05-15 Univ California Immunogene und entsprechende antikörper, die spezifisch sind für häufige hochmolekulare aggregations-zwischenprodukte von amyloiden aus proteinen unterschiedlicher sequenz
EP1545582A4 (en) 2002-10-01 2008-09-17 Univ Northwestern DIFFUSIBLE DERIVATIVES DERIVED FROM AMYLOID BETA (ADDL), ADDL SUBSTITUTE, ADDL BINDING MOLECULES, AND USES THEREOF
JP2006505272A (ja) 2002-11-04 2006-02-16 バイオアークティック ニューロサイエンス アーベー βアミロイド前駆体タンパク質の構造およびプロセシングを調節する薬剤の同定のための方法
DE10303974A1 (de) 2003-01-31 2004-08-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
US20050124016A1 (en) 2003-08-01 2005-06-09 Enh Research Institute Antibodies specific for toxic amyloid beta protein oligomers
JP4668191B2 (ja) 2003-08-20 2011-04-13 アモールフィックス・ライフ・サイエンシィズ・リミテッド タンパク質立体配座を検出するためのエピトープ保護アッセイおよび方法
US20070110750A1 (en) 2003-09-12 2007-05-17 The Regents Of The University Of California Monoclonal antibodies specific for high molecular weight aggregation intermediates common to amyloids formed from proteins of differing sequence
SE0400707D0 (sv) 2004-03-22 2004-03-22 Bioarctic Neuroscience Ab Transgenic animal model
SE0401601D0 (sv) 2004-06-21 2004-06-21 Bioarctic Neuroscience Ab Protofibril specific antibodies and uses thereof
US8507206B2 (en) 2004-07-02 2013-08-13 Northwestern University Monoclonal antibodies that target pathological assemblies of amyloid β (Abeta)
US20060079447A1 (en) 2004-10-08 2006-04-13 Wetzel Ronald B Stabilized A-beta protofibrillar aggregates
US20080044356A1 (en) 2004-10-22 2008-02-21 Regents Of The University Of Minnesota Assemblies of Oligomeric Amyloid Beta Protein and Uses Thereof
US7780963B2 (en) 2004-10-25 2010-08-24 Merck & Co., Inc. Anti-ADDL antibodies and uses thereof
WO2006066233A1 (en) 2004-12-15 2006-06-22 Neuralab Limited An immunoprecipitation-based assay for predicting in vivo efficacy of beta-amyloid antibodies
CA2593846A1 (en) 2005-01-14 2006-08-10 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for inhibiting drusen formation and for diagnosing or treating drusen-related disorders
GT200600031A (es) 2005-01-28 2006-08-29 Formulacion anticuerpo anti a beta
US7731962B2 (en) 2005-02-14 2010-06-08 Merck & Co., Inc. Anti-ADDL monoclonal antibody and use thereof
US7700099B2 (en) 2005-02-14 2010-04-20 Merck & Co., Inc. Non-immunostimulatory antibody and compositions containing the same
CA2599792A1 (en) 2005-03-05 2006-09-14 Abbott Gmbh & Co. Kg Screening method, process for purifying of non-diffusible a-beta oligomers, selective antibodies against said non-diffusible a-beta oligomers and a process for manufacturing of said antibodies
WO2006137354A1 (ja) 2005-06-21 2006-12-28 Medical & Biological Laboratories Co., Ltd. アミロイド線維形成に対する阻害活性を有する抗体
TW200726482A (en) 2005-06-30 2007-07-16 Merck & Co Inc Method for preparing a covalently cross linked oligomer of amyloid beta peptides
TW200726774A (en) 2005-06-30 2007-07-16 Merck & Co Inc Composition and method for producing stable amyloid beta oligomers
AU2006306553B9 (en) 2005-10-21 2011-09-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-ADDL monoclonal antibody and use thereof
US9133267B2 (en) 2005-11-22 2015-09-15 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Antibody treatment of Alzheimer's and related diseases
NO347079B1 (no) * 2006-03-23 2023-05-08 Bioarctic Neuroscience Ab Forbedrede protofibrilselektive antistoffer og anvendelse derav
UA100672C2 (en) * 2006-07-14 2013-01-25 Ас Иммуне Са HUMANIZED ANTIBODY TO b-AMYLOID PROTEIN
TR201802814T4 (tr) * 2006-07-14 2018-03-21 Ac Immune Sa Amiloid betaya karşı insanlaştırılmış antikor.
HUE033466T2 (en) * 2006-10-02 2017-12-28 Ac Immune Sa Humanized antibody to beta-amyloid
SG182192A1 (en) * 2007-06-12 2012-07-30 Ac Immune Sa Humanized antibodies to amyloid beta
CA2696164C (en) * 2007-08-13 2018-06-12 Vasgene Therapeutics, Inc. Cancer treatment using humanized antibodies that bind to ephb4
DK2202245T3 (en) 2007-09-26 2016-11-21 Chugai Pharmaceutical Co Ltd A method of modifying an antibody isoelectric point VIA amino acid substitution in CDR
EP2207568B1 (en) * 2007-11-16 2017-05-31 The Rockefeller University Antibodies specific for the protofibril form of beta-amyloid protein
EP2282758B1 (en) 2008-04-29 2018-11-21 BioArctic AB Antibodies and vaccines for use in therapeutic and diagnostic methods for alpha-synuclein-related disorders
DK3702371T5 (da) 2009-03-25 2024-08-26 Genentech Inc Anti-FGFR3-antistoffer og fremgangsmåder ved anvendelse af disse
EP3892633A1 (en) 2009-06-29 2021-10-13 BioArctic AB Antibodies selective for n-terminaltruncated amyloid-p protofibrils/oligomers
EP2463369A4 (en) * 2009-08-07 2013-09-18 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd HUMANIZED ANTIBODIES AGAINST AMYLOID B OLIGOMERS
DK2539366T3 (en) * 2010-02-26 2018-02-05 Bioarctic Neuroscience Ab PROTOFIBRIL-BINDING ANTIBODIES AND THEIR USE IN THERAPEUTIC AND DIAGNOSTIC PROCEDURES FOR PARKINSON'S DISEASE, DEMENS WITH LEWY BODY AND OTHER ALPHA SYNUCLEINOPATHIES
AU2011283694B2 (en) * 2010-07-29 2017-04-13 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
JP6147670B2 (ja) 2010-12-22 2017-06-14 テバ・ファーマシューティカルズ・オーストラリア・ピーティワイ・リミテッド 改善された半減期を有する修飾された抗体

Also Published As

Publication number Publication date
EP3166970A2 (en) 2017-05-17
SG11201610734RA (en) 2017-01-27
SMT202100263T1 (it) 2021-07-12
IL282823A (en) 2021-06-30
KR102763164B1 (ko) 2025-02-07
PH12017500032A1 (en) 2017-05-15
AR101130A1 (es) 2016-11-23
EP3865510A3 (en) 2021-10-27
KR20230129449A (ko) 2023-09-08
MA40224A (fr) 2017-05-17
HRP20210680T1 (hr) 2021-06-11
CA2951990C (en) 2023-08-22
EP3166970B1 (en) 2021-03-10
US9573994B2 (en) 2017-02-21
CN112390881A (zh) 2021-02-23
LT3166970T (lt) 2021-05-10
KR20170037900A (ko) 2017-04-05
PT3166970T (pt) 2021-04-26
KR102564384B1 (ko) 2023-08-07
ES2865112T3 (es) 2021-10-15
IL282823B2 (en) 2024-05-01
MY184890A (en) 2021-04-29
NZ727338A (en) 2024-08-30
IL250001B (en) 2021-05-31
PE20170768A1 (es) 2017-07-04
US20160009793A1 (en) 2016-01-14
TW201613964A (en) 2016-04-16
TWI678376B (zh) 2019-12-01
WO2016005466A2 (en) 2016-01-14
HUE053809T2 (hu) 2021-07-28
PH12017500032B1 (en) 2022-09-02
ZA201706272B (en) 2019-02-27
CY1124563T1 (el) 2022-07-22
DK3166970T3 (da) 2021-05-25
BR112016030774A2 (pt) 2018-01-16
JP2017521427A (ja) 2017-08-03
RU2017103446A3 (sr) 2019-02-26
IL250001A0 (en) 2017-03-30
MA53887A (fr) 2021-10-27
CN106661103B (zh) 2020-11-03
WO2016005466A3 (en) 2016-04-07
MA40224B1 (fr) 2021-05-31
PL3166970T3 (pl) 2021-09-13
JP6628786B2 (ja) 2020-01-15
AU2015286707A1 (en) 2017-01-12
JO3537B1 (ar) 2020-07-05
CL2017000053A1 (es) 2017-06-23
RU2700104C2 (ru) 2019-09-12
MX2017000378A (es) 2017-08-25
UA121550C2 (uk) 2020-06-25
SI3166970T1 (sl) 2021-09-30
CA2951990A1 (en) 2016-01-14
AU2015286707B2 (en) 2020-05-21
CN106661103A (zh) 2017-05-10
EP3865510A2 (en) 2021-08-18
MX379241B (es) 2025-03-10
IL282823B1 (en) 2024-01-01
CO2017000346A2 (es) 2017-06-09
AU2015286707A8 (en) 2017-01-19
CN112390881B (zh) 2025-02-21
RU2017103446A (ru) 2018-08-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9573994B2 (en) Aβ protofibril binding antibodies
KR102695287B1 (ko) 항-phf-타우 항체 및 이의 용도
KR102522693B1 (ko) 세포독성 t-림프구-관련 단백질 4 (ctla-4)에 대한 신규의 단일클론 항체
TW201716436A (zh) 特異性針對過度磷酸化τ蛋白之抗體及其使用方法
CN106794129B (zh) 对il-21具有特异性的结合分子及其用途
JP2022506719A (ja) タウ認識抗体
KR20230058171A (ko) 항-테나신 c 항체 및 이의 용도
CN116249717A (zh) 识别分拣蛋白的抗体
EP3647323A1 (en) Anti-gitr antibody, antigen-binding fragment thereof, and pharmaceutical use thereof
CN115298216A (zh) 抗体或其抗原结合片段、其制备方法及医药用途
KR20250004705A (ko) 항-tdp-43 결합 분자
CA3236555A1 (en) Compounds and methods targeting interleukin-34
HK40048843A (en) Improved a-beta protofibril binding antibodies
HK1232900B (en) Improved a-beta protofibril binding antibodies
CN118525032A (zh) 靶向白细胞介素34的化合物和方法
CN118475609A (zh) 靶向白细胞介素-34的化合物和方法
BR112016030774B1 (pt) Anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo, uso de um anticorpo, métodos para medição da quantidade de protofibrilas de ab e/ou de proteína ab agregada em uma pessoa, e para diagnóstico de uma doença, e, composição farmacêutica
EA049614B1 (ru) Анти-псф-тау-антитела и способы их применения
NZ725735B2 (en) Binding molecules specific for il-21 and uses thereof
NZ762893B2 (en) Binding molecules specific for il-21 and uses thereof