[go: up one dir, main page]

RS55618B1 - Derivati hloropirazin karboksamida korisni za lečenje bolesti kojima pogoduje nedovoljna hidracija sluznica - Google Patents

Derivati hloropirazin karboksamida korisni za lečenje bolesti kojima pogoduje nedovoljna hidracija sluznica

Info

Publication number
RS55618B1
RS55618B1 RS20170066A RSP20170066A RS55618B1 RS 55618 B1 RS55618 B1 RS 55618B1 RS 20170066 A RS20170066 A RS 20170066A RS P20170066 A RSP20170066 A RS P20170066A RS 55618 B1 RS55618 B1 RS 55618B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
mmol
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
south
Prior art date
Application number
RS20170066A
Other languages
English (en)
Inventor
Michael R Johnson
Original Assignee
Parion Sciences Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Parion Sciences Inc filed Critical Parion Sciences Inc
Publication of RS55618B1 publication Critical patent/RS55618B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/047—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates having two or more hydroxy groups, e.g. sorbitol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/14—Alkali metal chlorides; Alkaline earth metal chlorides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/10—Laxatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/12—Mucolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/14—Antitussive agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/02—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for disorders of the vagina
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/04—Artificial tears; Irrigation solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D241/26—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D241/26—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/28—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms in which said hetero-bound carbon atoms have double bonds to oxygen, sulfur or nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/24—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D241/26—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/28—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms in which said hetero-bound carbon atoms have double bonds to oxygen, sulfur or nitrogen atoms
    • C07D241/30—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with nitrogen atoms directly attached to ring carbon atoms in which said hetero-bound carbon atoms have double bonds to oxygen, sulfur or nitrogen atoms in which said hetero-bound carbon atoms are part of a substructure —C(=X)—X—C(=X)—X— in which X is an oxygen or sulphur atom or an imino radical, e.g. imidoylguanidines
    • C07D241/32—(Amino-pyrazinoyl) guanidines

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Oblast pronalaska
Predmetni pronalazak odnosi se na nova jedinjenja, uključujući 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil) fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-1 -il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid i srodna jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli, korisna kao blokatori kalcijumovih kanala, jedinjenja koja sadrže iste, njihovu korisnost u terapeutskim metodama i primenama za iste i procese za pripremanje istih.
Osnovne informacije o pronalasku
Sluznice koje predstavljaju graničnu površinu između okoline i tela su razvile veliki broj mehanizama „urođene odbrane" tj. zaštitnih mehanizama. Glavni oblik takve urođene odbrane je čišćenje ovih površina tečnošću. Tipično, količina sloja tečnosti na površini sluznice odražava balans između sekrecije epitelijalne tečnosti, koja često odražava sekreciju anjona (Cl" i/ili HCO3") zajedno sa vodom (i katjonski kontrajon), i apsorpciju epitelijalne tečnosti, koja često održava apsorpciju Na<+>, zajedno sa vodom i kontraanjonom (Cl" i/ili HCO3"). Mnoge bolesti sluznica izaziva premala količina zaštitne tečnosti na tim površinama sluznica, koju stvara disbalans između sekrecije (premalo) i apsorpciije (relativno previše). Poremećeni procesi transporta soli koji karakterišu ove disfunkcije sluznica nalaze se u epitelijalnom sloju sluznica.
Jedan pristup nadoknade zaštitnog sloja tečnosti na površini sluznica jeste da se sistem „rebalansira" blokiranjem Na<+>kanala i apsorpcije tečnosti. Epitelijalni protein koji posreduje u ovom brzinom-ograničenom koraku apsorpcije Na<+>i tečnosti je epitelijalni Na<+>kanal („ENaC"). ENaC je postavljen na apikalnoj površini epitela, tj. graničnoj površini između sluznice i okoline. U idealnom slučaju, u cilju inhibicije apsorpcije Na<+>i tečnosti koja je posredovana ENaC-om, na površinu sluznice će se isporučiti blokator ENaC-a amiloridne klase i održavaće se na ovom mestu kako bi se postigla maksimalna terapeutska korist. Primena ENaC blokatora je prijavljena za raznovrsne bolesti koje ublažava povećana hidracija sluznice. Konkretno, prijavljena je primena ENaC blokatora u lečenju respiratornih oboljenja kao što su hronični bronhitis (HB), cistična fibroza (CF) i HOBP, koje odražavaju neuspeh organizma da normalno čisti sluz iz pluća što na kraju dovodi do hronične infekcije disajnih puteva. PogledajteEvidence for airway surface. dehydration as the initiating event in CF airway disease,R. C. Boucher, Journal of Internal Medicine, Vol. 261, Issue 1, Januarv 2007, strane 5-16; i Cvstic fibrosis: a disease of vulnerabilitv to airway surface dehvdration, R.C. Boucher, Trends in Molecular Medicine, Vol. 13, Issue 6, June 2007, strane 231-240.
Podaci ukazuju na to da je inicijalni problem i kod hroničnog bronhitisa i kod cistične fibroze neuspeh da se sa površina disajnih puteva očisti sluz. Neuspeh da se očisti sluz odražava disbalans u količinama sluzi u obliku tečnosti na površini disajnih puteva (eng. airway surface liquid - ASL) u disajnim putevima. Ovaj disbalans rezultuje relativnim smanjenjem ASL što dovodi do koncentrovanja sluzi, smanjenja lubrikantne aktivnosti pericilijarne tečnosti (eng. periciliarv liquid- PCL), prilepljivanja sluzi za površinu disajnih puteva i nemogućnosti čišćenja sluzi putem cilijarne aktivnosti do usta. Smanjenje čišćenja sluzi dovodi do hronične bakterijske kolonizacije sluzi koja je prilepljena za površinu disajnih puteva. Hronično zadržavanje bakterija, nemogućnost lokalnih antimikrobnih supstanci da ubiju bakterije zarobljene u sluzi na hroničnoj osnovi, kao i posledični hronični zapaljenski odgovor na ovu vrstu površinske infekcije su manifestni u hroničnom bronhitisu i cističnoj fibrozi.
Trenutno postoji velika, neispunjena medicinska potreba za proizvodima koji specifično leče raznovrsne bolesti koje ublažava povećana hidracija sluznica, uključujući hronični bronhitis, HOBP i cističnu fibrozu, između ostalih. Trenutne terapije za hronični bronhitis, HOBP i cističnu fibrozu se fokusiraju na lečenje simptoma i/ili kasne efekte ovih bolesti. Međutim, nijedna od ovih terapija ne tretira efikasno fundamentalni problem neuspešnosti čišćenja sluzi iz pluća.
R.C. Boucher, u patentu U.S. 6,264,975, opisuje primenu pirazinoilguanidin blokatora natrijumovih kanala za hidraciju površina sluznica razvrstane prema dobro poznatim diureticima amilorid, benzamil i fenamil. Međutim, ova jedinjenja su relativno nepotentna, uzimajući u obzir ograničenu masu leka koja može da se inhalira u pluća; (2) brzo se apsorbuju te stoga pokazuju nepoželjno kratak poluživot na površini sluznice; i (3) lako se odvajaju od ENaC. Potrebni su potentniji lekovi sa dužim poluživotima na površini sluznice.
Premalo zaštitne površinske tečnosti na površini drugih sluznica je česta patofiziologija mnogih bolesti. Na primer, kod kserostomije (suva usta) u usnoj duplji ima malo tečnosti usled neuspeha sublingvalnih i submandibulamih parotidnih žlezda da sekretuju tečnost i pored toga što postoji neprekidna apsorpcija tečnosti iz usne duplje posredovana transportom Na<+>(ENaC). Keratokonjuktivitis sira (suvo oko) je izazvan neuspehom suznih žlezda da sekretuju tečnost u licu sa neprekidnom apsorpcijom tečnosti zavisnom od Na<+>na konjuktivama. Kod rinosinusitisa postoji disbalans između sekrecije mucina i relativnog nedostatka ASL. Nedostatak sekrecije Cl- (i tečnosti) u proksimalnom tankom crevu, u kombinaciji sa povećanom apsorpcijom Na<+>(i tečnosti) u terminalnom ileumu dovodi do sindroma distalne intestinalne opstrukcije (eng. distal intestinal obstruction svndrome - DIOS). Kod starijih pacijenata prekomerna apsorpcija Na<+>(i tečnosti) u descendentnom kolonu dovodi do zatvora i divertikulitisa.
U objavljenoj literaturi postoji veliki broj patentnih prijava i patenata koji su odobreni Parion Sciences Inc., koji su usmereni na analoge pirazinoilguanidina u vidu blokatora natrijumovih kanala. Primeri takvih publikacija uključuju PCT brojeve publikacija WO2003/070182, WO2003/070184, WO2004/073629, WO2005/025496, WO2005/016879, WO2005/018644, WO2006/022935, WO2006/023573, WO2006/023617, WO2007/018640, WO2007/146869, WO2008/031028, WO2008/031048, i br. SAD patenata 6858614, 6858615, 6903105, 7064129, 7186833,7189719,7192958, 7192959,7192960, 7241766,7247636, 7247637, 7317013,7332496,7368447,7368450, 7368451,7375102,7388013,7399766, 7410968, 7807834, 7842697 i 7868010.
Ostaje potreba za novim jedinjenjima koja blokiraju natrijumove kanale a koja imaju veću potenciju i efikasnost na sluzokožama. Takođe, ostaje potreba za novim jedinjenj ima koja blokiraju natrijumove kanale koja obezbeđuju terapijski efekat, ali svode na najmanju moguću meru ili eliminišu nastanak ili progresiju hiperkalijemije kod primalaca.
Kratak pregled pronalaska
Ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenja formule I:
naznačena time što:
Ar je izabran iz grupe koju čine:
nje ceo broj izabran od 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
R<1>je izabran od vodonika, Ci-Cs alkil i polihidroksilovane alkil grupe koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R2 je vodonik ili polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje solvate i hidrate, individualne stereoizomere, uključujući optičke izomere (enantiomere i diastereomere) i geometrijske izomere (cis-/trans-izomerizam), smeše stereoizomera, i tautomere jedinjenja formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, kao i farmaceutska jedinjenja koja sadrže jedinjenja, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, koji su svi korisni u metodama lečenja, i metodama za njihovu pripremu.
Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil) naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, kao i optičke izomere (enantiomere i diastereomere) i geometrijske izomere (cis-/trans-izomerizam), smeše stereoizomera, i njihove tautomere, kao i farmaceutska jedinjenja koja sadrže jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, koji su svi korisni u metodama lečenja, i metodama za njegovu pripremu.
KRATAK OPIS CRTEŽA
Potpunije razumevanje pronalaska i mnoge njegove prednosti se mogu lako videti kada se informacije koje su navedene ovde gledaju uporedno sa sledećim slikama:
SL. 1 je dijagram efekta jedinjenja 33 na MCC ovce 4 sata nakon doze.
SL. 2 je dijagram efekta jedinjenja 123 na MCC ovce 4 sata nakon doze.
SL. 3 je dijagram efekta jedinjenja 48 na MCC ovce 4 sata nakon doze.
SL. 4 je dijagram efekta jedinjenja 33 na MCC ovce 8 sati nakon doze.
SL. 5 je dijagram efekta jedinjenja 152 na MCC ovce 8 sati nakon doze.
SL. 6 je dijagram poboljšanja efekta jedinjenja 33 na MCC ovce 8 sati nakon doze pomoću hipertonog fiziološkog rastvora.
SL. 7 je dijagram efekta komparativnog primera I na MCC ovce 4 sata nakon doze. SL. 8 je dijagram efekta komparativnog primera 1 na nivoe kalijuma u plazmi ovce. SL. 9 je dijagram koji poredi aktivnost komparativnog primera 1 i jedinjenja 33 na MCC ovce 4 sata nakon doze.
SL. 10 je dijagram koji poredi efekat komparativnog primera 1 i jedinjenja 33 na nivoe K<+>u plazmi ovce.
SL. 11 je dijagram koji poredi aktivnost komparativnog primera 1 i jedinjenja 123 na MCC ovce 4 sata nakon doze.
SL. 12 je dijagram koji poredi efekat komparativnog primera 1 i jedinjenja 123 na nivoe K<+>u plazmi ovce.
SL. 13 je dijagram koji poredi aktivnost komparativnog primera 1 i jedinjenja 48 na MCC ovce 4 sata nakon doze.
SL. 14 je dijagram koji poredi efekat komparativnog primera 1 i jedinjenja 48 na nivoe K<+>u plazmi ovce.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
Na način kako su korišćeni ovde, sledeći termini su definisani kako je naznačeno.
„Jedinjenje pronalaska" označava jedinjenje formule I ili so, naročito njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
„Jedinjenje formule I" označava jedinjenje koje ima strukturnu formulu naznačenu u ovom dokumentu kao formula I. Jedinjenja formule I uključuju solvate i hidrate (tj. adukte jedinjenja formule I sa rastvaračem). U tim otelotvorenjima naznačeno time što jedinjenje formule I uključuje jedan ili više hiralnih centara, namenjeno je da fraza obuhvati svaki
pojedinačni stereoizomer uključujući optičke izomere (enantiomere i diastereomere) i geometrijske izomere (cis-/trans-izomerizam) i smeše stereoizomera. Pored toga, jedinjenja formule I takođe uključuju tautomere predstavljene(ih) formule(a).
U svim opisima i primerima, jedinjenja su imenovana primenom standardnih IUPAC principa za imenovanje, gde je to moguće, uključujući primenu ChemDraw Ultra 11.0 softverskog programa za imenovanje jedinjenja, koji prodaje kompanija CambridgeSoft Corp./PerkinElmer.
U nekim prikazima hemijske strukture gde atomi ugljenika nemaju prikazan dovoljan broj povezanih varijabli da bi se proizvela valenca od četiri, treba pretpostaviti da su preostali supstituenti ugljenika potrebni da se obezbedi valenca od četiri vodonik. Slično tome, u nekim hemijskim strukturama gde je veza nacrtana bez navođenja terminalne grupe, takva veza ukazuje na metil (Me, -CH3) grupu, što je konvencionalno u stručnoj oblasti.
U jednom otelotvorenju, jedinjenje formule (I) je 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-(bis(2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid, koje ima strukturu:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U drugom otelotvorenju, jedinjenje formule (I) je 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-(bis(2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-1 -il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid, koj e ima strukturu:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U daljem otelotvorenju jedinjenje formule (I) je 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-(2-amino-3-(4-(3-(bis(2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-2-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid, koje ima strukturu:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U drugom otelotvorenju, jedinjenje formule (I) je 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-1 -il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid, koje ima formulu:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
Tri nezavisna otelotvorenja čine jedinjenja formule (II), formule (III) odnosno formule (IV):
naznačena time što:
nje ceo broj izabran od 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
R<1>je izabran od vodonika, Ci-Cs alkil i polihidroksilovane alkil grupe koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R2 je vodonik ili polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U okviru svake grupe jedinjenja nezavisno predstavljenih formulama (I), (II), (III) i (IV), postoji dodatno otelotvorenje naznačeno time što: nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
R<1>je izabran od vodonika, Ci-Cs alkil i polihidroksilovane alkil grupe koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R2 je vodonik ili polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U okviru svake grupe jedinjenja nezavisno predstavljenih formulama (I), (II), (III) i (IV), postoji dodatno otelotvorenje naznačeno time što: nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
R<1>je izabran od vodonika i Ci-Cs alkil;
R<2>je vodonik ili polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U okviru svake grupe jedinjenja nezavisno predstavljenih formulama (I), (II), (III) i (IV), postoji još jedno otelotvorenje naznačeno time što: nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
R<1>je izabran od vodonika i Ci-Cs alkil;
R<2>je vodonik;
R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U okviru svake grupe jedinjenja nezavisno predstavljenih formulama (I), (II), (III) i (IV), postoji i još jedno otelotvorenje naznačeno time što: nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
R<1>i R<2>su svaki, nezavisno, polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U okviru svake grupe jedinjenja nezavisno predstavljenih formulama (I), (II), (III) i (IV), postoji još jedno otelotvorenje naznačeno time što: nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
R<1>i R<2>su svaki, nezavisno, polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R<3>i R<4>su vodonik;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U okviru svake grupe jedinjenja nezavisno predstavljenih formulama (I), (II), (III) i (IV), postoji još jedno otelotvorenje naznačeno time što: nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
R<1>i R<2>su svaki, nezavisno, polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, C1-C3alkil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U okviru svake grupe jedinjenja nezavisno predstavljenih formulama (I), (II), (III) i (IV), postoji dodatno otelotvorenje naznačeno time što: nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
R<1>i R<2>su svaki, nezavisno, polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika;
R3 je vodonik; i
R4jeCi-C3 alkil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
Polihidroksilovane alkil grupe ovog pronalaska su one u kojima je alkil lanac od 3 do 8 atoma ugljenika supstituisan jednom ili više hidroksilnih grupa. Primeri polihidroksilovanih alkil grupa su butan-1,4-diol; butan-1,2,2-triol; butan-1,1,2,3,-tetraol; pentan-l,2,3,4-tetraol; heksan-l,2,3,4,5-pentaol; heptan-l,2,3,4,5,6-heksaol; i oktan-l,2,3,4,5,6,7-heptaol.
Jedno otelotvorenje u okviru svake grupe jedinjenja opisanih u ovom dokumentu su ona jedinjenja u kojima polihidroksilovana alkil grupa ima formulu -CH2-(CHR<5>)n-H, naznačeno time što je n celi broj izabran od 2, 3, 4, 5, 6 ili 7, a R5 je nezavisno u svakoj instanci H ili OH, pod uslovom da su najmanje dve od R<5>grupa OH.
Drugo otelotvorenje u okviru svake grupe jedinjenja opisanih u ovom dokumentu su ona jedinjenja u kojima polihidroksilovana alkil grupa ima formulu -CH2-CHOH-(CHR<6>)m-H, naznačeno time što je m celi broj izabran od 1,2, 3, 4, 5 ili 6, a R6 je nezavisno u svakoj instanci H ili OH, pod uslovom daje najmanje jedna od R<6>grupa OH.
Dalje otelotvorenje u okviru svake grupe jedinjenja opisanih u ovom dokumentu sadrži jedinjenja u kojima polihidroksilovana alkil grupa ima formulu -CH2-(CHOH)n-CH20H, naznačeno time što je n celi broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6. Drugo otelotvorenje u okviru svake grupe jedinjenja opisanih u ovom dokumentu sadrži jedinjenja u kojima je n celi broj izabran od 2, 3, 4 ili 5. Drugo otelotvorenje u okviru svake grupe sadrži jedinjenja u kojima je n celi broj izabran od 3, 4 ili 5.
U drugom otelotvorenju u okviru svake grupe jedinjenja opisanih u ovom dokumentu, lanac predstavljen formulom -CH2-(CHOH)n-CH20H je 2,3,4,5,6-pentahidroksiheksan, sa formulom:
U daljem otelotvorenju u okviru svake grupe jedinjenja opisanih u ovom dokumentu, lanac predstavljen formulom -CH2-(CHOH)n-CH20H, ima formulu:
Tri dalja nezavisna otelotvorenja uključuju jedinjenja formule (V), formule (VI) odnosno formule (VII):
naznačena time što:
nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; i
R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U okviru svakog otelotvorenja predstavljenog formulama (V), (VI) i (VII) postoji dodatno otelotvorenje naznačeno time što je n ceo broj izabran od 1,2, 3, 4, 5 ili 6; a R<3>i R<4>su svaki vodonik; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. U okviru svakog otelotvorenja predstavljenog formulama (V), (VI) i (VII) postoji drugo otelotvorenje naznačeno time što je n ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; a R<3>i R<4>su svaki C1-C3alkil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
U okviru svakog od otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, postoji dalje otelotvorenje naznačeno time što je n ceo broj izabran od 1, 2 ili 3. U okviru svakog od otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, postoji dalje otelotvorenje naznačeno time što je n ceo broj izabran od 4, 5 ili 6. U okviru svakog od otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, postoji šest daljih nezavisnih otelotvorenja naznačenih time što je n ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5, odnosno 6.
Jedinjenja opisana u ovom dokumentu, uključujući ona sa formulama (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), mogu biti u obliku slobodne baze ili soli, naročito farmaceutski prihvatljive soli. Za pregled farmaceutski prihvatljivih soli pogledajte Berge et al., J. Pharma Sci. (1977) 66:1-19.
Farmaceutski prihvatljive soli obrazovane iz neorganskih ili organskih kiselina obuhvataju na primer, hidrohlorid, hidrobromid, hidrojodid, sulfat, bisulfat, nitrat, sulfamat, fosfat, hidrogen fosfat, acetat, trifluoroacetat, maleat, malat, fumarat, laktat, tartrat, citrat, format, glukonat, sukcinat, piruvat, tanat, askorbat, palmitat, salicilat, stearat, ftalat, alginat, poliglutamat, oksalat, oksaloacetat, saharat, benzoat, alkil ili aril sulfonate (npr. metansulfonat, etansulfonat, benzensulfonat, p-toluensulfonat ili naftalensulfonat) i izotionat; komplekse obrazovane sa aminokiselinama kao što su lizin, arginin, glutaminska kiselina, glicin, serin, treonin, alanin, izoleucin i leucin. Jedinjenja pronalaska mogu takođe biti u obliku soli obrazovanih od anjona elemenata izabranih od hlor, brom ili jod.
Za terapijsku primenu, soli aktivnih sastojaka jedinjenja formule I će biti farmaceutski prihvatljive, tj. to će biti soli dobijene od farmaceutski prihvatljive kiseline. Ipak, soli kiselina koje nisu farmaceutski prihvatljive mogu takođe naći primenu, na primer, u pripremi ili prečišćavanju farmaceutski prihvatljivog jedinjenja. Na primer, takvu primenu mogu imati soli trifluoroacetata. Sve soli, bilo da su dobij ene od farmaceutski prihvatljive kiseline ili ne, ulaze u okvir predmetnog pronalaska.
Termin „hiralni" odnosi se na molekule koji imaju svojstvo da ne mogu da se preklope sa partnerom koji je njegov lik u ogledalu, dok se termin „ahiralni" odnosi na molekule koji mogu da se preklope sa partnerom koji je njegov lik u ogledalu.
Termin „stereoizomeri" odnosi se na jedinjenja koja imaju identičan hemijski sastav, ali se razlikuju u pogledu rasporeda atoma ili grupa u prostoru. „Diastereomer" se odnosi na stereoizomer sa jednim ili više centara hiralnosti i čiji molekuli nisu lik u ogledalu jedan drugog. Diastereomeri imaju različita fizička svojstva, npr. tačke topljenja, tačke ključanja, spektralna svojstva i reaktivnosti. Smeša diastereomera se može razdvojiti u analitičkim procedurama visoke rezolucije kao što su elektroforeza i hromatografija. „Enantiomeri" se odnosi na dva stereoizomera jedinjenja koji su slika jedno drugog u ogledalu a ne mogu da se preklope.
Stereohemijske definicije i konvencije korišćene u ovom dokumentu uopšteno prate S. P. Parker, Ed., MCGRAW-HILL REČNIK HEMIJSKIH TERMINA (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; i Eliel, E. and Wilen, S., STEREOHEMIJA ORGANSKIH JEDTNJENJA(1994) John Wiley & Sons, Inc., New York.
Mnoga organska jedinjenja postoje u optički aktivnim oblicima, tj. ona imaju sposobnost da rotiraju ravan polazirovane svetlosti. Prilikom opisivanja optički aktivnog jedinjenja, prefiksi D i L ili R i S se koriste da označe apsolutnu konfiguraciju molekula oko njegovog(ih) hiralnog(ih) centra(centara). Specifičan stereoizomer se takođe može nazivati enantiomer, a smeša takvih izomera se često naziva enantiomerna smeša. Smeša enantiomera u odnosu 50:50 se naziva racemska smeša ili racemat, koja može nastati kada u hemijskoj reakciji ili procesu nema stereoselekcije ili stereospecifičnosti. Termini „racemska smeša" i „racemat" odnose se na ekvimolarnu smešu dve vrste enantiomera.
Termin „tautomeri" odnosi se na vrstu stereoizomera kod koje migracija atoma vodonika rezultuje dvema ili više struktura. Jedinjenja formule I mogu da postoje u različitim tautomernim oblicima. Osoba stručna u ovoj oblasti će prepoznati da amidini, amidi, guanidini, uree, tiouree, heterociklici i slični mogu postojati u tautomernim oblicima. Samo kao primer, jedinjenja formule I mogu postojati u različitim tautomernim oblicima kao što je prikazano ispod:
Svi mogući tautomerni oblici amidina, amida, guanidina, urea, tiourea, heterociklika i sličnih, od svih od otelotvorenja formule I uključeni su u obim predmetnog pronalaska. Tautomeri postoje u ravnoteži te će osobe stručne u ovoj oblasti razumeti da se prikaz jednog tautomera u navedenim formulama podjednako odnosi na sve moguće tautomere.
Treba imati u vidu da su svi enantiomeri, diastereomeri, i racemske smeše, tautomeri, polimorfi, pseudopolimorfi jedinjenja u okviru obima formule I i njenih farmaceutski prihvatljivih soli obuhvaćeni predmetnim pronalaskom. Sve smeše takvih enantiomera i diastereomera, uključujući smeše obogaćene enantiomerima i smeše obogaćene diastereomerima uključene su u obim predmetnog pronalaska. Enantiomerski obogaćene smeše su smeše enantiomera naznačene time što je udeo specifičnog enantiomera u odnosu na alternativni enantiomer veći od 50:50. Konkretnije, enantiomerski obogaćena smeša sadrži najmanje oko 75% specifičnog enantiomera, i poželjno najmanje 85% specifičnog enantiomera. U jednom otelotvorenju, enantiomerski obogaćena smeša u značajnoj meri ne sadrži drugi enantiomer. Slično tome, diastereomerski obogaćene smeše su smeše diastereomera naznačene time što je količina specifičnog diastereomera veća od količine svakog alternativnog diastereomera. Konkretnije, diastereomerski obogaćena smeša sadrži najmanje oko 75% specifičnog diastereomera, i poželjno najmanje 85% specifičnog diastereomera. U jednom otelotvorenju, diastereomerski obogaćena smeša u značajnoj meri ne sadrži sve druge diastereomere. Osobe stručne u ovoj oblasti će razumeti da termin ,,u značajnoj meri ne sadrži" ukazuje na manje od 5% prisustva drugih diastereomera, poželjno manje od 1%, još poželjnije manje od 0,1%. U drugim otelotvorenjima, neće biti prisutni drugi diastereomeri ili će količina bilo kog drugog prisutnog diastereomera biti ispod nivoa detekcije. Stereoizomeri se mogu odvojiti tehnikama poznatim u stručnoj oblasti, uključujući tečnu hromatografiju visokih performansi (HPLC) i kristalizaciju hiralnih soli.
Pojedinačan stereoizomer, npr. enantiomer, koji u značajnoj meri ne sadrži svoj stereoizomer može biti dobijen razlaganjem racemske smeše primenom metoda kao što je obrazovanje diastereomera upotrebom optički aktivnih agenasa za rastvaranje ("Stereochemistrv of Carbon Compounds," (1962) by E. L. Eliel, McGravv Hill; Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr., 113:(3) 283-302). Racemske smeše hiralnih jedinjenja pronalaska mogu se razdvojiti i izolovati pomoću bilo kog pogodnog metoda, uključujući: (1) obrazovanje jonskih, diastereomernih soli sa hiralnim jedinjenj ima i razdvajanje frakcionom kristalizacijom ili drugim metodama, (2) obrazovanje diastereomernih jedinjenja sa hiralnim reagensima za derivatizaciju, razdvajanje diastereomera, i konverzija u čiste stereoizomere i (3) razdvajanje značajno prečišćenih ili obogaćenih stereoizomera direktno u hiralnim uslovima.
U jednom otelotvorenju, predmetni pronalazak obezbeđuje enantiomerski obogaćenu smešu ili jedinjenje koje sadrži 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, kao predominantni izomer.
Druga otelotvorenja sadrže enantiomerski obogaćene smeše ili jedinjenja koja sadrže, respektivno, jedinjenja formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, kao predominantni izomer u svakoj od njihovih respektivnih smeša.
U drugom otelotvorenju, predmetni pronalazak obezbeđuje enantiomerski obogaćenu smešu ilijedinjenje3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3 -oksopropil)naftalen-1 - il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u značajnoj meri bez drugih izomera.
Četiri druga otelotvorenja sadrže enantiomerski obogaćene smeše ili jedinjenja koja sadrže, respektivno, jedinjenja formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, u značajnoj meri bez drugih izomera u svakoj od njihovih respektivnih smeša.
U ovom dokumentu je takođe obezbeđeno svako od jedinjenja i grupa jedinjenja opisanih u dokumentu, uključujući ona sa formulama (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, za upotrebu u vidu leka.
Jedinjenje formule I i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu postojati kao različiti polimorfi ili pseudopolimorfi. U ovom dokumentu, kristalni polimorfizam označava sposobnost kristalnog jedinjenja da postoji u različitim kristalnim strukturama. Kristalni polimorfizam može biti posledica razlika u kristalnom pakovanju (polimorfizam pakovanja) ili razlika u pakovanju između različitih konformera istog molekula (konformacioni polimorfizam). U ovom dokumentu, kristalni pseudopolimorfizam takođe uključuje sposobnost hidrata ili solvata da postoji u različitim kristalnim strukturama. Pseudopolimorfi prikazanog pronalaska mogu postojati usled razlika u kristalnom pakovanju (pseudopolimorfizam pakovanja) ili usled razlika u pakovanju između različitih konformera istog molekula (konformacioni pseudopolimorfizam). Predmetni pronalazak obuhvata sve polimorfe i pseudopolimorfe jedinjenja formule I i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
Jedinjenje formule I i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu takođe postojati kao amorfni čvrsti oblici. U ovom dokumentu, amorfni čvrsti oblik je čvrsti oblik u kojem ne postoji dalekosežni redosled položaja atoma u čvrstom obliku. Ova definicija je primenjiva i kada je veličina kristala dva nanometara ili manje. Aditivi, uključujući rastvarače, mogu da se koriste za stvaranje amorfnih oblika predmetnog pronalaska. Predmetni pronalazak, uključujući sva farmaceutska jedinjenja, metode lečenja, kombinovane proizvode i njihove primene opisane ovde, sadrže sve amorfne oblike jedinjenja formule I i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
PRIMENE
Jedinjenja pronalaska iskazuju aktivnost u vidu blokatora natrijumovih kanala. Bez ograničavanja bilo kojom konkretnom teorijom, veruje se da jedinjenja pronalaska mogu delovatiin vivotako što blokiraju epitelijalne natrijumove kanale prisutne u površini sluznice i time smanjuju apsorpciju vode od strane površina sluznice. Ovaj efekat povećava zapreminu zaštitnih tečnosti na površinama sluznica i rebalansira sistem.
Kao posledica, jedinjenja pronalaska su korisna kao lekovi, naročito za lečenje kliničkih stanja za koja mogu biti indikovani blokatori natrijumovih kanala. Takva stanja obuhvataju plućna oboljenja kao što su bolesti povezane sa reverzibilnom ili ireverzibilnom opstrukcijom disajnih puteva, hronična opstruktivna bolest pluća (HOBP), uključujući akutne egzacerbacije HOBP, astma, bronhiektazije (uključujući bronhiektazije usled stanja koja nisu cistična fibroza), akutni bronhitis, hronični bronhitis, postvirusni kašalj, cistična fibroza, emfizem, pneumonija, panbronhiolitis, i bronhiolitis povezan sa transplantacijom, uključujući bronhiolitis povezan sa transplantacijom pluća i kostne srži, kod ljudi kojima je to potrebno. Jedinjenja pronalaska mogu takođe biti korisna za lečenje traheobronhitisa povezanog sa upotrebom ventilatora i/ili prevenciju pneumonije povezane sa upotrebom ventilatora kod pacijenata na mehaničkom disanju. Predmetna specifikacija otkriva metode za lečenje svakog od stanja opisanih u ovom dokumentu kod sisara kojem je to potrebno, poželjno kod čoveka kojem je to potrebno, pri čemu svaki metod podrazumeva da se navedenom sisani da farmaceutski efikasna količina jedinjenja predmetnog pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Takođe su predstavljeni (a) metod za smanjivanje egzacerbacija HOBP kod sisara kojem je to potrebno; (b) metod za smanjivanje egzacerbacija CF kod sisara kojem je to potrebno; (c) metod za poboljšanje funkcije pluća (FEV1) kod sisara kojem je to potrebno; (d) metod za poboljšanje funkcije pluća (FEV1) kod sisara koji ima HOBP; (e) metod za poboljšanje funkcije pluća (FEV1) kod sisara koji ima CF; (f) metod za smanjivanje infekcija disajnih puteva kod sisara kojem je to potrebno.
Takođe je predstavljen metod za stimulaciju, pojačavanje ili poboljšavanje mukocilijarnog klirensa kod sisara, pri čemu metod podrazumeva da se sisaru kojem je to potrebno da farmaceutski efikasna količina jedinjenja formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Podrazumevaće se da mukocilijarni klirens obuhvata prirodne mukocilijarne radnje koje su uključene u prenos ili čišćenje sluzi u disajnim putevima, uključujući mehanizme bronhija za samočišćenje. Tako je takođe predstavljen metod za poboljšanje čišćenja sluzi u disajnim putevima sisara kojem je to potrebno.
Pored toga, blokatori natrijumovih kanala mogu biti indikovani za lečenje stanja koje ublažava povećana hidracija sluznice na površinama sluznica a ne samo sluznice pluća. Primeri takvih stanja obuhvataju suva usta (kserostomiju), suvu kožu, suvoću vagine, sinusitis, rinosinusitis, nazalnu dehidraciju, uključujući nazalnu dehidraciju izazvanu primenom suvog kiseonika, suvo oko, Sjogrenovu bolest, zapaljenje srednjeg uha, primarnu cilijarnu diskineziju, sindrom distalne intestinalne opstrukcije, ezofagitis, zatvor i hronični divertikulitis. Jedinjenja pronalaska mogu takođe da se koriste za izazivanje okularne ili kornealne hidracije.
Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu takođe biti korisna u metodama za dobijanje uzorka ispljuvka od osobe. Metod se može sprovesti primenom efikasne količine jedinjenja pronalaska u najmanje jedno plućno krilo pacijenta, a zatim izazivanjem i prikupljanjem uzorka ispljuvka od te osobe.
U skladu sa tim, u jednom aspektu, predmetna specifikacija otkriva metod za lečenje stanja kod sisara, kao stoje čovek, za koje je indikovana primena blokatora natrijumovog kanala.
U drugim otelotvorenjima, predmetna specifikacija otkriva svaki od metoda opisanih u ovom dokumentu, sa dodatnom koristi od minimizacije ili eliminacije hiperkalijemije kod primalaca metoda. Takođe su predstavljena otelotvorenja koja sadrže svaki od metoda opisanih u ovom dokumentu, naznačeno time što se postiže poboljšan terapijski indeks.
Termini „lečiti", „lečenje" i „terapija", na način kako su korišćeni ovde odnose se na reverziju, ublažavanje, inhibiciju napredovanja ili prevenciju poremećaja ili stanja ili jednog ili više simptoma datog poremećaja ili stanja.
Svi terapijski metodi opisani u ovom dokumentu sprovode se davanjem efikasne količine jedinjenja pronalaska, jedinjenja formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ispitaniku (tipično sisar i poželjno čovek) kojem je potrebna terapija.
U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje stanja koje ublažava povećana hidracija sluznice kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje bolesti koja je povezana sa reverzibilnom ili ireverzibilnom opstrukcijom disajnih puteva kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom naročitom otelotvorenju, predmetna specifikacija predstavlja metod za lečenje hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP) kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom naročitom otelotvorenju, predmetna specifikacija predstavlja metod za smanjivanje učestalosti, težine ili trajanja akutne egzacerbacije HOBP ili za lečenje jednog ili više simptoma akutne egzacerbacije HOBP kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje astme kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje bronhiektazija (uključujući bronhiektazije usled stanja koja nisu cistična fibroza), kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje bronhitisa, uključujući akutni i hronični bronhitis kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje postvirusnog kašlja kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje cistične fibroze kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje emfizema kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje pneumonije kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje panbronhiolitisa kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje bronhiolitisa povezanog sa transplantacijom, uključujući bronhiolitis povezan sa transplantacijom pluća i kostne srži kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje traheobronhitisa povezanog sa upotrebom ventilatora i/ili prevenciju pneumonije povezane sa upotrebom ventilatora kod pacijenta na mehaničkom disanju kojem je to potrebno.
Ova specifikacija predstavlja specifične metode za lečenje bolesti izabranih iz grupe koju čine reverzibilna ili ireverzibilna opstrukcija disajnih puteva, hronična opstruktivna bolest pluća (HOBP), astma, bronhiektazije (uključujući bronhiektazije usled stanja koja nisu cistična fibroza), akutni bronhitis, hronični bronhitis, postvirusni kašalj, cistična fibroza, emfizem, pneumonija, panbronhiolitis, bronhiolitis povezan sa transplantacijom, i traheobronhitis povezan sa upotrebom ventilatora ili prevencija pneumonije povezane sa upotrebom ventilatora kod čoveka kojem je to potrebno, pri čemu svaki metod podrazumeva da se navedenom čoveku da efikasna količina jedinjenja formule 1 (a) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U daljim otelotvorenjima za svaki metod lečenja, oblik farmaceutski prihvatljive soli je hidrohloridna so ili hidroksinaftoatna so jedinjenja formule (la). U drugom otelotvorenju u okviru svakog metoda lečenja, koristi se slobodna baza jedinjenja formule (la).
U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje suvih usta (kserostomije) kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje suve kože kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje suvoće vagine kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje sinusitisa, rinosinusitisa, ili nazalne dehidracije, uključujući nazalnu dehidraciju izazvanu primenom suvog kiseonika, kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje suvog oka, Sjogrenove bolesti, ili izazivanje okularne ili kornealne hidracije kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje zapaljenja srednjeg uha kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje primarne cilijarne diskinezije kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, specifikacija predstavlja metod za lečenje sindroma distalne intestinalne opstrukcije, ezofagitisa, zatvora ili hroničnog divertikulitisa kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno.
Takođe je obezbeđeno jedinjenje pronalaska za primenu u medicinskoj terapiji, naročito za upotrebu u lečenju stanja kod sisara, kao što je čovek, za koje je indikovana primena blokatora natrijumovih kanala. Sve terapijske primene opisane u ovom dokumentu sprovode se davanjem efikasne količine jedinjenja pronalaska ispitaniku kojem je potrebna terapija. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju plućne bolesti kao što je bolest koja je povezana sa reverzibilnom ili ireverzibilnom opstrukcijom disajnih puteva kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom naročitom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP) kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u smanjivanju učestalosti, težine ili trajanja akutne egzacerbacije HOBP ili za lečenje jednog ili više simptoma akutne egzacerbacije HOBP kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju astme kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje za primenu u lečenju bronhiektazija, uključujući bronhiektazije usled stanja koja nisu cistična fibroza, ili bronhitisa, uključujući akutni bronhitis i hronični bronhitis, kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje za primenu u lečenju postvirusnog kašlja kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje za primenu u lečenju cistične fibroze kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju emfizema kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju pneumonije kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju panbronhiolitisa ili bronhiolitisa povezanog sa transplantacijom, uključujući bronhiolitis povezan sa transplantacijom pluća i kostne srži kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju traheobronhitisa povezanog sa upotrebom ventilatora ili prevenciju pneumonije povezane sa upotrebom ventilatora kod pacijenta na mehaničkom disanju kojem je to potrebno.
U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju stanja koje ublažava povećana hidracija sluznice na površinama sluznica kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje za primenu u lečenju suvih usta (kserostomije) kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje za primenu u lečenju suve kože kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje za primenu u lečenju suvoće vagine kod sisara, naročito čoveka kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju sinusitisa, rinosinusitisa, ili nazalne dehidracije, uključujući nazalnu dehidraciju izazvanu primenom suvog kiseonika, kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju suvog oka, Sjogrenove bolesti ili izazivanje okularne ili kornealne hidracije kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju zapaljenja srednjeg uha kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju primame cilijarne diskinezije kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno. U jednom otelotvorenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju sindroma distalne intestinalne opstrukcije, ezofagitisa, zatvora ili hroničnog divertikulitisa kod sisara, naročito čoveka, kojem je to potrebno.
Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje upotrebu jedinjenja pronalaska za proizvodnju leka za lečenje stanja kod sisara, kao što je čovek, za koje je indikovana primena blokatora natrijumovih kanala. U jednom otelotvorenju obezbeđena je upotreba jedinjenja pronalaska za proizvodnju leka za lečenje bolesti povezanih sa reverzibilnom ili ireverzibilnom opstrukcijom disajnih puteva, hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP), akutnih egzacerbacija HOBP, astme, bronhiektazija (uključujući bronhiektazije usled stanja koja nisu cistična fibroza), bronhitisa (uključujući akutni bronhitis i hronični bronhitis), postvirusnog kašlja, cistične fibroze, emfizema, pneumonije, panbronhiolitisa, bronhiolitisa povezanog sa transplantacijom (uključujući bronhiolitis povezan sa transplantacijom pluća i kostne srži), traheobronhitisa povezanog sa upotrebom ventilatora i/ili prevenciju pneumonije povezane sa upotrebom ventilatora.
U jednom naročitom otelotvorenju obezbeđena je upotreba jedinjenja pronalaska za proizvodnju leka za lečenje stanja koje ublažava povećana hidracija sluznice na površinama sluznica, lečenje suvih usta (kserostomije), suve kože, suvoće vagine, sinusitisa,
rinosinusitisa, nazalne dehidracije, uključujući nazalnu dehidraciju izazvanu primenom suvog kiseonika, lečenje suvog oka, Sjogrenove bolesti, izazivanje okularne ili kornealne hidracije, lečenje zapaljenja srednjeg uha, primarne cilijarne diskinezije, sindroma distalne intestinalne opstrukcije, ezofagitisa, zatvora ili hroničnog divertikulitisa.
Termini „efikasna količina", „farmaceutska efikasna količina", „efektivna doza" i „farmaceutska efektivna doza" kako su korišćeni u ovom dokumentu, odnose se na količinu jedinjenja pronalaska koja je dovoljna da u ispitaniku kojem se daje, izazove biološki ili medicinski odgovor ćelijske kulture, tkiva, sistema ili sisara (uključujući čoveka) koji traži, na primer, istraživač ili kliničar. Termin takođe obuhvata u svom obimu, količine efikasne da poboljšaju normalnu fiziološku funkciju. U jednom otelotvorenju, efikasna količina je količina koja je potrebna da se obezbedi željeni nivo leka u sekretima i tkivima disajnih puteva i pluća, ili alternativno, u cirkulaciji ispitanika koji će se lečiti kako bi se dobio očekivani fiziološki odgovor ili željeni biološki efekat kada se takvo jedinjenje daje inhalacijom. Na primer, efikasna količina jedinjenja pronalaska za lečenje stanja za koje je indikovan blokator natrijumovih kanala je dovoljna u ispitaniku kojem se daje za lečenje konkretnog stanja. U jednom otelotvorenju, efikasna količina je količina jedinjenja pronalaska koja je dovoljna za lečenje HOBP ili cistične fibroze kod ljudi.
Precizna efikasna količina jedinjenja pronalaska zavisiće od određenog broja faktora koji obuhvataju, bez ograničavanja, vrstu, starost i težinu ispitanika koji se tretira, precizno stanje koje zahteva lečenje i njegovu težinu, bioraspoloživost, potentnost i druga svojstva specifičnog jedinjenja koje se primenjuje, prirodu formulacije, put primene, i sredstvo za isporuku, a na kraju će biti ostavljeno na diskreciju ordinirajućem lekaru ili veterinaru. Dalje smernice u pogledu odgovarajuće doze mogu se izvesti iz konvencionalnog doziranja drugih blokatora natrijumovih kanala, kao što je amilorid, pri čemu se takođe uzimaju u obzir i sve razlike u jačini između amilorida i jedinjenja predmetnog pronalaska.
Farmaceutska efektivna doza koja se primenjuje topikalno na površine disajnih puteva ispitanika (npr. inhalacijom) jedinjenja pronalaska za lečenje čoveka od 70 kg može biti u rasponu od oko 10 ng do oko 10 mg. U drugom otelotvorenju, farmaceutska efektivna doza može biti od oko 0,1 do oko 1000 jug. Tipično, dnevna doza koja se primenjuje topikalno na površinu disajnih puteva će biti količina koja je dovoljna za postizanje rastvorene koncentracije aktivnog sastojka na površinama disajnih puteva od oko IO"<9>, IO"<8>ili IO"<7>do oko IO"<4>,IO"<3>, IO"<2>ili 10"<1>mola/litru, poželjnije od oko 10"<9>do oko IO"4mola/litru. Izbor specifične doze za pacijenta će utvrditi ordinirajući lekar, kliničar ili veterinar stručan u navedenoj oblasti, na osnovu više faktora, uključujući i one navedene ranije. U jednom naročitom otelotvorenju, doza jedinjenja pronalaska za lečenje čoveka od 70 kg će biti u rasponu od oko 10 nanograma (ng) do oko 10 mg. U drugom otelotvorenju, efektivna doza bi bila od oko 0.1 jng do oko 1.000 ug. U jednom otelotvorenju, doza jedinjenja pronalaska za lečenje čoveka od 70 kg će biti u rasponu od oko 0,5 ug do oko 0,5 mg. U daljem otelotvorenju, efektivna doza će biti od oko 0,5 |ug do oko 60 |a,g. U drugom otelotvorenju, farmaceutska efektivna doza će biti od oko 1 do oko 10 |ug. U drugom otelotvorenju, farmaceutska efektivna doza će biti od oko 5 |ug do oko 50 |ug. Drugo otelotvorenje će imati efektivnu dozu od oko 10 |ug do oko 40 jug. U dva dalja otelotvorenja, farmaceutska efektivna doza će biti od oko 15 |ug do oko 50 jug, odnosno od oko 15 |ug do oko 30 jug. Podrazumeva se da će u svakom od ovih opsega doze, biti uključene sve postupne doze u opsegu. Na primer, opseg 0,5-50 jug uključuje pojedinačne doze od: 0,5 jug, 0,6 ixg, 0,7 ixg, 0,8 jug, 0,9 |ug, 1,0 ng, 1,1 jug, 1,2 ixg, 1,3 ng, 1,4 ng, 1,5 jag, 1,6 ug, 1,7 |ug, 1,8 ug, 1,9 jag, 2,0 ug, 2,1 ug, 2,2 ng, 2,3 ug, 2,4 jag, 2,5 ng, 2,6 ng, 2,7 ug, 2,8 ug, 2,9 |ug, 3,0 ug, 3,1 jag, 3,2 ug, 3,3 ug, 3,4 ng, 3,5 ug, 3,6 ug, 3,7 ng, 3,8 ug, 3,9 jag, 4,0 ug, 4,1 ug, 4,2 jug, 4,3 jag, 4,4 ug, 4,5 ug, 4,6 ng, 4,7 ug, 4,8 ug, 4,9 ng, 5,0 ng, 5,1 jag, 5,2 ug, 5,3 |ug, 5,4 ug, 5,5 jag, 5,6 ug, 5,7 ug, 5,8 ug, 5,9 ug, 6,0 ug, 6,1 ng, 6,2 ng, 6,3 jug, 6,4 jug, 6,5 jug, 6,6 jug, 6,7 jag, 6,8 jug, 6,9 |ug, 7,0 jug, 7,1 jug, 7,2 jag, 7,3 ug, 7,4 ug, 7,5 jag, 7,6 ug, 7,7 jag, 7,8 ug, 7,9 ug, 8,0 ug, 8,1 ug, 8,2 jug, 8,3 jug, 8,4 jag, 8,5 |tig, 8,6 jug, 8,7 jag, 8,8 jug, 8,9 |ug, 9,0 jug, 9,1 jug, 9,2 jug, 9,3 jug, 9,4 jag, 9,5 jug, 9,6 jug, 9,7 |ug, 9,8 |ug, 9,9 jug, 10,0 iug, 10,1 |ug, 10,2 |ug, 10,3 |ug, 10,4 jug, 10,5 |ug, 10,6 jug, 10,7 jug, 10,8 iug, 10,9 jug, 11,0 |ug, 11,1 |ug, 11,2 |ug, 11,3 jug, 11,4 |ug, 11.5 |ug, 11,6 ng, 11,7 jug, 11,8 |ug, 11,9 jug, 12,0 |ug, 12,1 |ug, 12,2 iug, 12,3 jug, 12,4 iug, 12,5 jug, 12,6 |ug, 12,7 jug, 12,8 jug, 12,9 iug, 13,0 jug, 13,1 |ug, 13,2 jug, 13,3 iug, 13,4 jug, 13,5 iug, 13.6 |ug, 13,7 jig, 13,8 jug, 13,9 iug, 14,0 jug, 14,1 |ug, 14,2 iug, 14,3 ug, 14,4 jug, 14,5 iug, 14,6 jug, 14,7 jug, 14„8 jug, 14,9 jug, 15,0 jug, 15,1jug,15,2jug,15,3 jug, 15,4 jug, 15,5 jug, 15,6 |ug, 15„7 jug, 15,8 |ug, 15,9 jug, 16,0 jug, 16,1jug,16,2jug,16,3 jug, 16,4 |ug, 16,5 jug, 16,6 |ug,
16.7 |ug, 16,8 jug, 16,9 |ug, 17,0 jug, 17,1 |ug, 17,2 jug, 17,3 jug, 17,4 jug, 17,5 jug, 17,6 jug, 17,7 jug, 17,8 |ug, 17,9 jug, 18,0 jug, 18,1 ug, 18,2 jug, 18,3 ug, 18,4 jug, 18,5 |ug, 18,6 jug, 18,7 ug, 18.8 jug, 18,9 jag, 19,0 jug, 19,1 ug, 19,2 jug, 19,3 ug, 19,4 jug, 19,5 jag, 19,6 jug, 19,7 ug, 19,8 jug, 19,9 iug, 20,0 jug, 20,1 jug, 20,2 ug, 20,3 jug, 20,4 |ug, 20,5 |ug, 20,6 ug, 20,7 jug, 20,8 iug, 20.9 |ug, 21,0 jag, 21,1 jug, 21,2 |ug, 21,3 jug, 21,4ug,21,5 |ug, 21,6 |ug, 21,7 jug, 21,8 ug, 21,9 jug, 22,0 jug, 22,1 jug, 22,2 jug, 22,3 jug, 22,4 jug, 22,5 ug, 22,6 ug, 22,7 jug, 22,8 jug, 22,9 jug, 23.0 |ug, 23,1 jug, 23,2 |ug, 23,3 jug, 23,4 |ug, 23,5ug,23,6 ug, 23,7 ug, 23,8 ug, 23,9 jug, 24,0 jug, 24,1<p>ag, 24,2 ug, 24,3 jag, 24,4 jag, 24,5 jag, 24,6 ug, 24,7 jag, 24,8 jag, 24,9 jag, 25,0 jag, 25.1 jag, 25,2 jag, 25,3 jag, 25,4 jag, 25,5 jag, 25,6 ug, 25,7 ug, 25,8 ug, 25,9 jug, 26,0 jag, 26,1 jug, 26,2 iug, 26,3 jug, 26,4 jug, 26,5 ug, 26,6 jug, 26,7 ug, 26,8 jag, 26,9 ug, 27,0 jug, 27,1 ug, 27.2 jug, 27,3 jig, 27,4 jug, 27,5 iug, 27,6 jug, 27,7 ug, 27,8 iug, 27,9 iug, 28,0 jug, 28,1 ug, 28,2 jug, 28,3 jag, 28,4 jug, 28,5 jag, 28,6 jug, 28,7 jug, 28,8 ug, 28,9 jug, 29,0 jug, 29,1 jug, 29,2 jug, 29.3 jug, 29,4 jag, 29,5 jug, 29,6 jug, 29,7 jug, 29,8 ug, 29,9 jug, 30,0 jug, 30,1 ug, 30,2 jug, 30,3 jug, 30,4 iug, 30,5 jug, 30,6 jug, 30,7 iug, 30,8 jug, 30,9 ug, 31,0 jag, 31,1 iug, 31,2 jug, 31,3 iug,
31.4 ug, 31,5 ug, 31,6 ug, 31,7 ug, 31,8 ug, 31,9 ug, 32,0 ug, 32,1 ug, 32,2 ug, 32,3 ug, 32,4 ug, 32,5 ug, 32,6 ug, 32,7 ug, 32,8 ug, 32,9 ug, 33,0 ug, 33,1 ug, 33,2 ug, 33,3 ug, 33,4 ug, 33.5 ug, 33,6 ug, 33,7 ug, 33,8 ug, 33,9 ug, 34,0 ug, 34,1 ug, 34,2 ug, 34,3 ug, 34,4 ug, 34,5 ug, 34,6 ug, 34,7 ug, 34,8 ug, 34,9 ug, 35,0 ug, 35,1 ug, 35,2 ug, 35,3 ug, 35,4 ug, 35,5 ug, 35.6 ug, 35,7 ug, 35,8 ug, 35,9 ug, 36,0 ug, 36,1 ug, 36,2 ug, 36,3 ug, 36,4 ug, 36,5 ug, 36,6 ug, 36,7 ug, 36,8 ug, 36,9 ug, 37,0 ug, 37,1 ug, 37,2 ug, 37,3 ug, 37,4 ug, 37,5 ug, 37,6 ug, 37.7 ug, 37,8 ug, 37,9 ug, 38,0 ug, 38,1 ug, 38,2 ug, 38,3 ug, 38,4 ug, 38,5 ug, 38,6 ug, 38,7 ug, 38,8 ug, 38,9 ug, 39,0 ug, 39,1 ug, 39,2 ug, 39,3 ug, 39,4 ug, 39,5 ug, 39,6 ug, 39,7 ug, 39.8 ug, 39,9 ug, 40,0 ug, 40,1 ug, 40,2 ug, 40,3 ug, 40,4 ug, 40,5 ug, 40,6 ug, 40,7 ug, 40,8 ug, 40,9 ug, 41,0 ug, 41,1 ug, 41,2 ug, 41,3 ug, 41,4 ug, 41,5 ug, 41,6 ug, 41,7 ug, 41,8 ug, 41.9 ug, 42,0 ug, 42,1 ug, 42,2 ug, 42,3 ug, 42,4ug,42,5 ug, 42,6 ug, 42,7 ug, 42,8 ug, 42,9 ug, 43,0 ug, 43,1 ug, 43,2 ug, 43,3 ug, 43,4 ug, 43,5 ug, 43,6 ug, 43,7 ug, 43,8 ug, 43,9 ug, 44.0 ug, 44,1 ug, 44,2 ug, 44,3ug,44,4 ug, 44,5 ug, 44,6ug,44,7 ug, 44,8 ug, 44,9ug,45,0 ug, 45,1 ug, 45,2 ug, 45,3 ug, 45,4 ug, 45,5 ug, 45,6 ug, 45,7ug,45,8 ug, 45,9 ug, 46,0 ug, 46.1 ug, 46,2 ug, 46,3 ug, 46,4 ug, 46,5 ug, 46,6 ug, 46,7 ug, 46,8 ug, 46,9 ug, 47,0 ug, 47,1 ug, 47,2 ug, 47,3 ug, 47,4 ug, 47,5 ug, 47,6 ug, 47,7 ug, 47,8 ug, 47,9 ug, 48,0 ug, 48,1 ug, 48.2 ug, 48,3 ug, 48,4 ug, 48,5 ug, 48,6 ug, 48,7 ug, 48,8 ug, 38,9 ug, 49,0 ug, 49,1 ug, 49,2 ug, 49,3 ug, 49,4 ug, 49,5 ug, 49,6 ug, 49,7 ug, 49,8 ug, 39,9 ug i 50 ug.
Gore navedene predložene doze mogu biti prilagođene primenom konvencionalnih izračunavanja doze ako se jedinjenje primenjuje drugačijim putem. Utvrđivanje odgovarajuće doze za primenu drugim putevima je u okviru veštine stručnih u ovoj oblasti imajući u vidu gore navedeni opis i opšte znanje u stručnoj oblasti.
Isporuka efikasne količine jedinjenja pronalaska može obuhvatiti dostavljanje oblika pojedinačne doze ili više jediničnih doza koje se mogu isporučiti uporedo ili zasebno u toku određenog vremenskog perioda, kao što su 24 časa. Doza jedinjenja pronalaska (sama ili u obliku jedinjenja koje sadrži istu) može se primeniti odjednom do deset puta dnevno. Tipično, jedinjenje pronalaska (samo ili u obliku jedinjenja koje sadrži isto) će se primeniti četiri, tri, dva ili jednom dnevno (24 časa).
Jedinjenja formule (I) predmetnog pronalaska su takođe korisna za lečenje infekcija koje se prenose vazduhom. Primeri infekcija koje se prenose vazduhom uključuju, na primer, RSV. Jedinjenja formule (I) predmetnog pronalaska su takođe korisna za lečenje infekcije antraksom. Predmetni pronalazak odnosi se na upotrebu jedinjenja formule (I) predmetnog pronalaska za profilaksu, post-ekspozicijsku profilaksu, preventivu ili terapiju bolesti ili stanja izazvanih patogenima. U poželjnom otelotvorenju, predmetni pronalazak odnosi se na upotrebu jedinjenja formule (I) za profilaksu, post-ekspozicijsku profilaksu, preventivu ili terapiju bolesti ili stanja izazvanih patogenima koji se mogu koristiti za bioterorizam.
Poslednjih godina uvedeni su raznovrsni istraživački programi i mere biološke odbrane u cilju smirivanja zabrinutosti oko upotrebe bioloških agenasa u terorističkim delima. Ove mere su usmerene na rešavanje zabrinutosti u pogledu bioterorizma ili upotrebe mikroorganizama ili bioloških toksina za ubijanje ljudi, širenje straha i remećenje društva. Na primer, Nacionalni institut za alergije i infektivne bolesti (NIAID) je razvio strateški plan za istraživanje biološke odbrane koji ukratko opisuje planove za ispunjavanje istraživačkih potreba u širokoj oblasti bioterorizma i novonastalim i infektivnim bolestima koje se ponovo javljaju. U skladu sa planom, namerno izlaganje civilne populacije Sjedinjenih Američkih Država sporamaBacillus anthracisotkrilo je jaz u ukupnoj pripremljenosti nacije protiv bioterorizma. Štaviše, izveštaj detaljno navodi da su ovi napadi otkrili neispunjenu potrebu za testovima za brzo dijagnostikovanje, vakcinama i imunoterapijama za prevenciju, i lekovima i biološkim lekovima za lečenje bolesti izazvanih agensima bioterorizma.
Veći deo fokusa raznih istraživačkih napora usmeren je na ispitivanje biologije patogena koji su identifikovani kao potencijalno opasni kao bioteroristički agensi, ispitivanje odgovora domaćina na takve agense, razvoj vakcina protiv infektivnih bolesti, procenu trenutno dostupnih terapeutika i terapeutika koji se ispituju protiv takvih agenasa, i razvoj dijagnostike za identifikaciju znakova i simptoma pretećih agenasa. Takvi napori su glasni ali, imajući u vidu veliki broj patogena koji su identifikovani kao potencijalno dostupni za bioterorizam, ovi napori još uvek nisu uspeli da pruže zadovoljavajuće odgovore za sve moguće bioterorističke pretnje. Pored toga, mnogi patogeni koji su identifikovani kao potencijalno opasni kao agensi bioterorizma ne daju adekvatne ekonomske podsticaje za razvoj terapijskih ili preventivnih mera od strane industrije. Štaviše, čak i kada bi preventivne mere poput vakcina bile dostupne za svaki patogen koji se može koristiti u bioterorizmu, troškovi davanja svih takvih vakcina opštoj populaciji su previsoki.
Sve dok ne budu postojale pogodne i efikasne terapije za svaku bioterorističku pretnju, postoji snažna potreba za preventivnim, profilaktičkim i terapijskim tretmanima koji mogu sprečiti ili smanjiti rizik od nastanka infekcije od patogenih agenasa.
Predmetna specifikacija izlaže takve metode profilaktičkog lečenja. U jednom aspektu, obezbeđen je metod profilaktičkog lečenja koji se sastoji od davanja profilaktički efikasne količine jedinjenja formule (I) osobi kojoj je potrebno profilaktičko lečenje za infekciju izazvanu jednim ili više patogena koji se prenose vazduhom. Konkretan primer patogena koji se prenosi vazduhom je antraks.
U drugom aspektu, prikazanje metod profilaktičkog lečenja za smanjivanje rizika od nastanka infekcije patogenom koji se prenosi vazduhom koji može da izazove oboljenje kod ljudi, pri čemu se navedeni metod sastoji od davanja efikasne količine jedinjenja formule (I) u pluća ljudi koji mogu biti pod rizikom od infekcije patogenom koji se prenosi vazduhom ali su asimptomatski, naznačeno time što su efikasna količina blokatora natrijumovih kanala i osmolita dovoljne da smanje rizik od infekcije kod ljudi. Konkretan primer patogena koji se prenosi vazduhom je antraks.
U drugom aspektu, prikazanje metod post-ekspozicijskog profilaktičkog lečenja ili terapijskog tretmana za lečenje infekcije patogenom koji se prenosi vazduhom koji se sastoji od davanja efikasne količine jedinjenja formule (I) u pluća osobe kojoj je potrebno takvo lečenje za infekciju izazvanu patogenom koji se prenosi vazduhom. Patogeni od kojih se može vršiti zaštita metodama profilaktičkog post-ekspozicijskog, simptomatskog i terapijskog tretmana pronalaska uključuju sve patogene koji mogu ući u telo preko usta, nosa ili nosnih disajnih puteva i tako nastavljaju do pluća. Tipično, patogeni će biti oni koji se prenose vazduhom, bilo koji se javljaju prirodno ili koji nastaju aerosolizacijom. Patogeni mogu biti oni koji se javljaju prirodno ili mogu biti uvedeni u okolinu namerno nakon aerosolizacije ili pomoću drugog metoda uvođenja patogena u okolinu. Mnogi patogeni koji se prirodno ne prenose putem vazduha su bili ili mogu biti aerosolizovani za primenu u bioterorizmu. Patogeni za koje terapija pronalaska može biti korisna uključuju, ali nije i ograničeno na, patogene kategorije prioriteta A, B i C na osnovu podele od strane NIAID. Ove kategorije uopšteno odgovaraju listama koje je sastavio Centar za kontrolu i prevenciju bolesti (CDC). Prema CDC, agensi kategorije A su oni agensi koji se mogu lako diseminovati ili preneti sa osobe na osobu, izazivaju visok mortalitet i imaju potencijal za veliki uticaj na javno zdravlje. Agensi kategorije B su sledeći po prioritetu i obuhvataju one koji se umereno lako diseminuju i izazivaju umeren morbiditet i nizak mortalitet. Kategorija C sadrži novonastale patogene koji se mogu napraviti inžinjeringom za masovnu diseminaciju u budućnosti zbog njihove dostupnosti, lake proizvodnje i diseminacije i potencijala za visok morbiditet i mortalitet. Konkretni primeri ovakvih patogena su antraks i kuga. Dodatni patogeni protiv kojih se može vršiti zaštita ili se smanjivati rizik od infekcije istim obuhvataju viruse influence, rinoviruse, adenoviruse i respiratorne sincicijalne viruse, i slične. Još jedan patogen od kojeg se može zaštititi je koronavirus, za koji se smatra da izaziva težak akutni respiratorni sindrom (SARS).
Predmetna specifikacija takođe predstavlja upotrebu blokatora natrijumovih kanala formule I, ili njene farmaceutski prihvatljive soli, za prevenciju, ublažavanje i/ili lečenje determinističkih zdravstvenih efekata na respiratorni trakt koje izaziva izlaganje radiološkim materijalima, naročito aerosolima koji se mogu udahnuti a koji sadrže radionuklide iz nuklearnih napada, kao što su detonacija radioloških disperzivnih uređaja (RDD), ili nezgode, kao što su nuklearne katastrofe u nuklearnim centralama. Tako je ovde obezbeđen metod za prevenciju, ublažavanje i/ili lečenje determinističkih zdravstvenih efekata na respiratorni trakt i/ili druge telesne organe koje izaziva izlaganje aerosolima koji se mogu udahnuti a koji sadrže radionuklide kod primaoca kojem je to potrebno, uključujući čoveka kome je to potrebno, pri čemu se navedeni metod sastoji od toga da se navedenom čoveku da efikasna količina jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
Glavno pitanje u pogledu planiranja upravljanja posledicama izlaganja javnosti aerosolima koji se mogu udahnuti a koji sadrže radionuklide iz nuklearnih napada, kao što su detonacija radioloških disperzivnih uređaja (RDD), ili nezgode, kao što su nuklearne katastrofe u nuklearnim centralama, jeste kako da se spreče, ublaže ili leče potencijalni deterministički zdravstveni efekti na respiratorni trakt, prvenstveno pluća. Neophodno je da imamo lekove, tehnike i procedure, kao i obučeno osoblje koje će biti pripremljeno da zbrine i leči takve visoko unutrašnje kontaminirane osobe.
Sprovedeno je istraživanje u cilju utvrđivanja načina za sprečavanje, ublažavanje ili lečenje potencijalnog oštećenja respiratornog trakta i raznih organa u telu koje izazivaju radionuklidi nataloženi unutar organizma. Do danas, veći deo pažnje istraživanja bio je usredsređen na osmišljavanje strategija za ublažavanje zdravstvenih efekata od radionuklida koji su nataloženi unutar tela tako što bi se ubrzala njihova ekskrecija ili uklanjanje. Ove strategije su se fokusirale na rastvorljive hemijske oblike koji imaju sposobnost da uđu u krvotok i natalože se na udaljenim sistemskim mestima koja su specifična za dati radioelement. Takvi pristupi neće biti delotvorni u slučajevima kada je nataloženi radionuklid u relativno nerastvorljivom obliku. Studije su pokazale da će mnogi, ako ne i većina fizičko-hemijskih oblika disperzovanih radionuklida iz RRD-jeva biti u relativno nerastvorljivom obliku.
Jedini metod za koji je poznato da efikasno smanjuje dozu zračenja u plućima od udahnutih nerastvorljivih radioaktivnih aerosola je bronhoalveolarna lavaža ili BAL. Pokazano je daje ova tehnika, koja je adaptirana od one koja se već koristi za lečenje pacijenata sa alveolarnom proteinozom, bezbedna procedura koja može da se ponovi, čak i kada se izvodi u dužem vremenskom periodu. Iako postoje varijacije procedure, osnovni metod za BAL je da se ispitanik uvede u anesteziju, nakon čega se izotoni fiziološki rastvor polako uvodi ujedan režanj plućnog krila dok se ne dostigne funkcionalni rezidualni kapacitet. Zatim se dodaju dodatne zapremine i dreniraju silom zemljine teže.
Rezultati studija sa primenom BAL na životinjama ukazuju na to da oko 40% dubokog sadržaja pluća može da se ukloni razumnim redosledom BAL-a. U nekim studijama bilo je značajnih razlika među životinjama u pogledu količine uklonjenog radionuklida. Razlozi za ovu varijabilnost trenutno nisu razjašnjeni.
Dalje, na osnovu jedne studije na životinjama, veruje se da značajno smanjenje doze pomoću BAL terapije dovodi do ublažavanja zdravstvenih efekata usled inhalacije nerastvorljivih radionuklida. U studiji, odrasli psi su udahnuli nerastvorljive<144>Ce-FAP čestice. Dve grupe pasa su dobile plućni sadržaj<144>Ce za koji je poznato da izaziva radijacioni pneumonitis i fibrozu pluća (oko 2 MBq/kg telesne mase), ijedna grupa je lečena pomoću 10 unilateralnih lavaža između 2 i 56 dana nakon izlaganja, a druga nije lečena. Treća grupa je izložena na nivou<144>Ce koji se može uporediti sa nivoom opaženim kod grupe lečene BAL-om nakon lečenja (oko 1 MBq/kg), ali ove životinje nisu lečene. Sve životinje su ostavljene da žive do kraja njihovog životnog veka, što je iznosilo do 16 godina. Budući da postoji varijabilnost u inicijalnom sadržaju 144Ce u plućima među psima u svakoj grupi, procenti doza i kumulativne doze za svaku grupu se preklapaju. Ipak, efekat BAL na smanjenje rizika od pneumonitisa/fibroze bio je očigledan iz krivi preživljavanja. Kod nelečenih pasa sa plućnim sadržajem od 1,5-2,5 MBq/kg, srednje vreme preživljavanja bilo je 370 ± 65 dana. Za lečene pse, srednje preživljavanje bilo je 1270 ± 240 dana, što je statički značajna razlika. Treća grupa, koja je dobila plućni sadržaj<144>Ce od 0,6-1,4 MBq imala je srednje vreme preživljavanja od 1800 ± 230, što nije bilo statički različito od lečene grupe. Podjednako značajno kao i povećano preživljavanje, psi u grupi sa visokom dozom koji nisu lečeni umrli su zbog determinističkih efekata na pluća (pneumonitis/fibroza) dok to nije bio slučaj kod pasa koji su lečeni. Umesto toga, lečeni psi, kao i psi u grupi sa niskom dozom koji nisu lečeni, uglavnom su imali tumore pluća (hemangiosarkom ili karcinom). Stoga, čini se daje smanjenje doze kao posledica BAL tretmana proizvelo biološke efekte u plućima koji su se mogli predvideti na osnovu doza zračenja koje su pluća primila.
Na osnovu ovih rezultata, veruje se da bi dalje smanjenje rezidualne radiološke doze pomoću bilo kog metoda ili kombinacije metoda za pojačanje klirensa čestica iz pluća dodatno smanjilo verovatnoću zdravstvenih efekata na pluća. Međutim, BAL je procedura koja ima mnoge mane. BAL je visoko invazivna procedura koja se mora izvoditi u specijalizovanim medicinskim centrima od strane obučenih pulmologa. Kao takva, BAL procedura je skupa. Imajući u vidu mane BAL, to nije opcija lečenja koja bi bila lako i odmah dostupna osobama kojim je potrebno ubrzano uklanjanje radioaktivnih čestica, na primer, u slučaju nuklearnog napada. U slučaju nuklearnog napada ili nuklearne nezgode, potrebna je terapija koja se neodložno i relativno lako daje osobama koje su bile izložene ili su pod rizikom da budu izložene. Pokazano je da blokatori natrijumovih kanala koji se daju u vidu inhalacionog aerosola oporavljaju hidraciju površina disajnih puteva. Takva hidracija površina disajnih puteva pomaže pri čišćenju akumulisanih sekrecija sluzi i povezane čestične materije iz pluća. Kao takvi, bez ograničavanja bilo kojom konkretnom teorijom, smatra se da blokatori natrijumovih kanala mogu da se koriste za ubrzavanje uklanjanja radioaktivnih čestica iz disajnih puteva.
Kako je izloženo ranije, najveći rizik po pluća nakon radiološkog napada, kao što je prljava bomba, nastaje zbog udisanja i zadržavanja nerastvorljivih radioaktivnih čestica. Kao rezultat zadržavanja radioaktivnih čestica, kumulativna ekspozicija pluća se značajno povećava, što na kraju dovodi do fibroze pluća/pneumonitisa i potencijalno, smrti. Nerastvorljive čestice se ne mogu sistemski očistiti helirajućim agensima zato što ove čestice nisu u rastvoru. Do danas, fizičko uklanjanje čestične materije pomoću BAL je jedini terapijski režim za koji je pokazano daje efikasan za smanjivanje bolesti pluća izazvane zračenjem. Kako je navedeno ranije, BAL nije realistično terapijsko rešenje za smanjivanje efekata radioaktivnih čestica koje su udahnute u organizam. Stoga je poželjno da se obezbedi terapijski režim koji efikasno pomaže u čišćenju radioaktivnih čestica iz disajnih puteva i koji, za razliku od BAL, se relativno lako primenjuje i može se uklopiti u scenario izlaganja zračenju velikih razmera. Pored toga, takođe je poželjno da terapijski režim bude lako dostupan većem broju ljudi u relativno kratkom vremenskom periodu.
U jednom aspektu predmetnog prikaza, metod za prevenciju, ublažavanje i/ili lečenje determinističkih zdravstvenih efekata na respiratorni trakt i/ili druge telesne organe koje izaziva izlaganje aerosolima koji se mogu udahnuti a koji sadrže radionuklide, sastoji se od toga da se osobi kojoj je to potrebno da efikasna količina blokatora natrijumovih kanala formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U jednoj odlici ovog aspekta, blokator natrijumovih kanala se primenjuje zajedno sa osmolitom. U daljem pogledu ove odlike, osmolit je hipertonični fiziološki rastvor (HS). U daljoj odlici, blokator natrijumovih kanala i osmolit se primenjuju zajedno sa modulatorom transporta jona. U daljem pogledu ove odlike, modulator transporta jona može biti izabran iz grupe koju čine P-agonisti, CFTR potencijatori, agonisti purinergičkog receptora, lubiprostoni i inhibitori proteaze. U drugoj odlici ovog aspekta, radionuklidi su izabrani iz grupe koju čine kobalt-60, cezijum-137, iridijum-192, radijum-226, fosfor-32, stroncijum-89 i 90, jod-125, talijum-201, olovo-210, torijum-234, uranijum-238, plutonijum, kobalt-58, hrom-51, americijum i kirijum. U daljoj odlici, radionuklidi potiču iz uređaja za radioaktivno odlaganje. U još jednoj odlici, blokator natrijumovih kanala ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se primenjuju u suspenziji čestica koje se mogu udahnuti u obliku aerosola koji osoba udiše. U dodatnoj odlici, blokator natrijumovih kanala ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se primenjuju se primenjuju nakon izlaganja radionuklidima.
KOMPOZICIJE
Iako je moguće da se jedinjenje pronalaska primeni samostalno, u nekim otelotvorenjima je poželjno da ono bude predstavljeno u obliku kompozicije, naročito farmaceutske kompozicije (formulacije). Tako, u drugom aspektu, pronalazak obezbeđuje kompozicije, a naročito farmaceutske kompozicije (kao što je inhalatorna farmaceutska kompozicija) koje sadrže farmaceutski efikasnu količinu jedinjenja pronalaska u vidu aktivnog sastojka, i farmaceutski prihvatljivu pomoćnu materiju, rastvarač ili nosač. Termin „aktivni sastojak" na način kako je korišćen ovde odnosi se na bilo koje jedinjenje pronalaska ili kombinaciju dva ili više jedinjenja pronalaska u farmaceutskoj kompoziciji. Takođe su obezbeđena specifična otelotvorenja u kojima farmaceutska kompozicija sadrži farmaceutski efikasnu količinu jedinjenja formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, nezavisno ili u kombinaciji, i farmaceutski prihvatljivu pomoćnu materiju, rastvarač ili nosač.
U nekim otelotvorenjima, farmaceutska kompozicija sadrži farmaceutski efikasnu količinu jedinjenja formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, nezavisno ili u kombinaciji, u rastvaraču. U zasebnim otelotvorenjima, farmaceutska kompozicija sadrži farmaceutski efikasnu količinu jedinjenja formula (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u hipertoničnom fiziološkom rastvoru, odnosno sterilnoj vodi i hipertoničnom fiziološkom rastvoru, naznačeno time što koncentracija fiziološkog rastvora može biti kako je opisano ovde. U jednom otelotvorenju koncentracija fiziološkog rastvora iznosi 0,17% w/v a u drugom je 2,8% w/v.
Takođe je obezbeđen komplet koji sadrži i) farmaceutski efikasnu količinu jedinjenja formule (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli; ii) jednu ili više farmaceutski prihvatljivih pomoćnih materija, nosača ili rastvarača; iii) uputstva za primenu jedinjenja iz grupe i) i pomoćnih materija, nosača ili rastvarača iz grupe ii) kod ispitanika kojem je to potrebno; i iv) posudu. Ispitanik kojem je to potrebno podrazumeva bilo kog ispitanika kojem su potrebni metodi lečenja opisani u ovom dokumentu, naročito podrazumeva humanog ispitanika kojem je to potrebno. Dalja otelotvorenja takođe sadrže uređaj za aerosolizaciju koji je izabran iz grupe koju čine nebulizator, uključujući nebulizatore sa vibrirajućom mrežicom i nebulizatore sa mlaznicom, inhalator za suvi prašak, uključujući aktivne i pasivne inhalatore za suvi prašak, inhalator sa fiksnim dozama, uključujući one pod pritiskom, sa suvim praškom i inhalatore sa fiksnim dozama sa finom maglom.
U jednom otelotvorenju komplet sadrži i) od oko 10 ng do oko 10 mg jedinjenja formule (I), (Ia), (II), (111), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, po dozi; ii) od oko 1 do oko 5 ml rastvarača po dozi; iii) uputstva za primenu jedinjenja iz grupe i) i rastvarača iz grupe ii) kod ispitanika kojem je to potrebno; i iv) posudu. U daljem otelotvorenju, rastvarač je od oko 1 do oko 5 ml fiziološkog rastvora, kako je opisano ovde, po dozi. U daljem otelotvorenju, rastvarač je od oko 1 do oko 5 ml hipotonog fiziološkog rastvora po dozi. U drugom otelotvorenju, rastvarač je od oko 1 do oko 5 ml hipertonog fiziološkog rastvora po dozi. U još daljem otelotvorenju, rastvarač je od oko 1 do oko 5 ml sterilne vode po dozi.
Takođe je obezbeđen komplet koji sadrži i) rastvor koji sadrži farmaceutski efikasnu količinu jedinjenja formule (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli; rastvorenog u farmaceutski prihvatljivom rastvaraču; iii) uputstva za primenu rastvora iz grupe i) kod ispitanika kojem je to potrebno; i iii) posudu.
Takođe je obezbeđen komplet koji sadrži i) rastvor koji sadrži od oko 10 ng do oko 10 mg jedinjenja formule (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli; rastvorenog u farmaceutski prihvatljivom rastvaraču; iii) uputstva za primenu rastvora iz grupe i) kod ispitanika kojem je to potrebno; i iii) posudu. U daljem otelotvorenju, rastvarač je od oko 1 do oko 5 ml fiziološkog rastvora, kako je opisano ovde, po dozi.
Drugo otelotvorenje sadrži komplet koji sadrži i) farmaceutski efikasnu količinu jedinjenja formule (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli;u formulaciji suvog praška koji je pogodan za inhalaciju ii) opciono, jednu ili više farmaceutski prihvatljivih pomoćnih materija ili nosača pogodnih za inhalaciju; iii) uputstva za primenu jedinjenja iz grupe i) i pomoćnih materija ili nosača iz grupe ii) kod ispitanika kojem je to potrebno; i iv) posudu. U daljem otelotvorenju, komplet takođe sadrži inhalator za suvi prašak koji je pogodan za dostavljanje formulacije suvog praška primaocu. Inhalator za suvi prašak može biti, u dodatnim otelotvorenjima, jednodozni inhalator ili višedozni inhalator.
Dalja otelotvorenja svakog od kompleta opisanih u ovom dokumentu uključuju ona u kojima je koncentracija jedinjenja formule (I), (Ia), (II), (III), (IV), (V), (VI) i (VII), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, po dozi, jedan od opsega efektivne doze opisanih u ovom dokumentu, uključujući a) od oko 0,1 ug do oko 1.000 ug; b) od oko 0,5 ug do oko 0,5 mg; i
c) od oko 0,5 ug do oko 50 ug.
Za svaki od kompleta opisanih ranije postoji dodatno otelotvorenje u kojem je rastvarač
hipertonični fiziološki rastvor koncentracija opisanih u ovom dokumentu. U drugom otelotvorenju za svaki komplet rastvarač je hipotonični fiziološki rastvor koncentracija
opisanih u ovom dokumentu. U daljem otelotvorenju za svaki komplet, rastvarač je sterilna voda pogodna za inhalaciju.
Farmaceutski prihvatljiva(e) pomoćna(e) materija(e), rastvarač(i) ili nosač(i) moraju biti prihvatljivi u smislu da su kompatibilni sa drugim sastojcima formulacije i da nisu štetni po primaoca iste. Uopšteno, farmaceutski prihvatljiva(e) pomoćna(e) materija(e), rastvarač(i) ili nosač(i) koji se koriste u farmaceutskoj formulaciji su „netoksični" što znači da se ona/oni smatra/ju bezbednim za konzumaciju u količini koja se isporučuje u formulaciji i „inertni" što znači da ona/oni ne ulaze u značajnu reakciju sa ili izazivaju neželjene efekte po terapijsku aktivnost aktivnog(ih) sastojka(sastojaka). Farmaceutski prihvatljive pomoćne materije, rastvarači i nosači su konvencionalni u stručnoj oblasti i mogu biti izabrani konvencionalnim tehnikama, na osnovu željenog puta primene.Pogledajte,REMINGTON'S, PHARMACEUTICAL SCIENCES, Lippincott Williams & Wilkins; 21st Ed (May 1, 2005). Poželjno, farmaceutski prihvatljiva(e) pomoćna(e) materija(e), rastvarač(i) ili nosač(i) se uopšteno smatraju bezbednim (eng. Generally Regarded As Safe - GRAS) prema FDA.
Farmaceutske kompozicije u skladu sa pronalaskom obuhvataju one koje su pogodne za oralnu primenu; parenteralnu primenu, uključujući potkožnu, intradermalnu, intramuskularnu, intravensku i intraartikularnu; topikalnu primenu, uključujući topikalnu primenu na kožu, u oči, uši itd; vaginalnu ili rektalnu primenu; i primenu u respiratorni trakt, uključujući nosne šupljine i sinuse, oralne i ekstratorakalne disajne puteve, i pluća, uključujući pomoću korišćenja aerosola koji se mogu dostaviti pomoću raznih vrsta inhalatora za suvi prašak, inhalatora sa fiksnim dozama pod pritiskom, inhalatora fine magle, nebulizatora ili insuflatora. Najpogodniji put primene može zavisiti od nekoliko faktora, uključujući pacijenta i stanje ili poremećaj koji se tretira.
Formulacije mogu biti predstavljene u obliku za pojedinačno doziranje ili u grupnom obliku, kao na primer u slučaju formulacija koje će meriti inhalator i mogu biti pripremljene pomoću bilo kog metoda koji su dobro poznati u farmaciji. Uopšteno, metodi obuhvataju korak povezivanja aktivnog sastojka sa nosačem, rastvaračem ili pomoćnom materijom i opciono jednim ili više pomoćnih sastojaka. Uopšteno formulacije se pripremaju uniformnim i intimnim povezivanjem aktivnog sastojka sa jednim ili više tečnih nosača, rastvarača ili pomoćnih materija ili fino podeljenih čvrstih nosača, rastvarača ili pomoćnih materija, ili oba, a zatim, ako je potrebno, oblikovanjem proizvoda u željenu formulaciju.
U jednom željenom otelotvorenju, kompozicija je inhalatorna farmaceutska kompozicija koja je pogodna za inhalaciju i dostavljanje u endobronhijalni prostor. Tipično, takva kompozicija je u obliku aerosola koji sadrži čestice za dostavljanje pomoću nebulizatora, inhalatora sa fiksnim dozama pod pritiskom (MDI), inhalatora fine magle ili inhalatora za suvi prašak (DPI). Formulacija aerosola koja se koristi u metodama predmetnog pronalaska može biti tečnost (npr. rastvor) pogodna za primenu pomoću nebulizatora, inhalatora fine magle ili MDI, ili suvi prašak pogodan za primenu pomoću MDI ili DPI.
Aerosoli koji se koriste za davanje lekova u respiratorni trakt su tipično polidisperzivni; to jest oni su sastavljeni od čestica mnogih različitih veličina. Distribucija veličine čestica se tipično opisuje Srednjim aerodinamičkim prečnikom mase (MMASD) i Geometrijskom standardnom devijacijom (GSD). Za optimalno isporučivanje leka u endobronhijalni prostor MMAD je u opsegu od oko 1 do oko 10 um i poželjno od oko 1 do oko 5 um, a GSD je manja od 3, i poželjno manja od oko 2. Aerosoli koji imaju MMAD veću od 10 um su generalno previše veliki kada se udahnu da bi stigli do pluća. Aerosoli sa GSD većom od oko 3 nisu poželjni za isporuku u pluća jer oni dostavljaju visok procenat leka u usnu duplju. Da bi se u praškastoj formulaciji dostigle ove veličine čestica, česticama aktivnog sastojka se može smanjiti veličina primenom konvencionalnih tehnika kao što su mikronizacija ili atomizacija. Neograničavajući primeri drugih postupaka ili tehnika koji se mogu koristiti za proizvodnju čestica koje se mogu udahnuti uključuju atomizaciju, precipitaciju, superkritičnu tečnost i liofilizaciju. Željena frakcija se može razdvojiti vazdušnom klasifikacijom ili prosejavanjem. U jednom otelotvorenju, čestice će biti kristali. Za tečne formulacije, veličina čestica se utvrđuje izborom konkretnog modela nebulizatora, inhalatora fine magle ili MDI.
Distribucije veličina čestica aerosola se utvrđuju pomoću uređaja koji su dobro poznati u stručnoj oblasti. Na primer višestepeni Andersonov kaskadni impaktor ili drugi pogodan metod kao što su oni koji su specifično citirani u poglavlju 601 Američke farmakopeje kao uređaji za karakterizaciju za aerosole koje isporučuju inhalatori sa fiksnim dozama i suvim praškom.
Suve praškaste kompozicije za topikalno dostavljanje u pluća inhalacijom mogu biti formulisane bez pomoćne materije ili nosača a da umesto njih sadrže samo aktivne sastojke u obliku suvog praška koji ima odgovarajuću veličinu čestica za inhalaciju. Suve praškaste kompozicije mogu takođe sadržati mešavinu aktivnog sastojka i pogodne praškaste baze (nosač/rastvarač/pomoćna materija) kao što su mono-, di- ili poli-saharidi (npr. laktoza ili škrob). Laktoza je tipično poželjna pomoćna materija za suve praškaste formulacije. Kada se koristi čvrsta pomoćna materija kao što je laktoza, uopšteno veličina čestica pomoćne materije će biti mnogo veća od aktivnog sastojka kako bi olakšala disperziju formulacije u inhalatoru.
Primeri inhalatora sa suvim praškom uključuju inhalatore sa rezervoarom sa više doza, multidozne inhalatore sa unapred određenim fiksnim dozama, inhalatore sa kapsulama i jednodozne inhalatore za jednokratnu upotrebu. Inhalator sa rezervoarom sadrži veliki broj doza (npr. 60) u jednoj bočici. Pre inhalacije, pacijent aktivira inhalator što dovodi do toga da inhalator izmeri jednu dozu leka iz rezervoara i pripremi je za inhalaciju. Primeri DPI-jeva sa rezervoarom uključuju Turbohaler® kompanije AstraZeneca i ClickHaler® kompanije Vectura.
U multidoznom inhalatoru sa unapred određenim fiksnim dozama, svaka pojedinačna doza je proizvedena u zasebnoj bočici, a aktivacija inhalatora pre inhalacije dovodi do toga da se iz bočice oslobađa nova doza leka i priprema za inhalaciju. Primeri multidoznih DPI inhalatora obuhvataju, ali nisu i ograničeni na Diskus® kompanije GSK, Gvrohaler® kompanije Vectura i Prohaler® kompanije Valois. U toku inhalacije, inspiratorni protok pacijenta ubrzava prašak koji izlazi iz uređaja u usnu duplju. Za inhalator sa kapsulom, formulacija se nalazi u kapsuli i čuva se van inhalatora. Pacijent stavlja kapsulu u inhalator, aktivira inhalator (probuši kapsulu) a zatim udahne. Primeri uključuju Rotohaler™
(GlaxoSmithKline), Spinhaler™ (Novartis), HandiHaler™ (IB), TurboSpin™ (PH&T). Kada su u pitanju jednodozni inhalatori za jednokratnu upotrebu, pacijent aktivira inhalator kako bi ga pripremio za inhalaciju, udahne, a zatim baci inhalator i pakovanje. Primeri uključuju Twincer™ (U Groningen), OneDose™ (GFE) i Manta Inhaler™ (Manta Devices).
Uopšteno, inhalatori sa suvim praškom koriste karakteristike turbulentnog toka putanje praška da izazovu disperziju agregata pomoćna materija-lek, i da se čestice aktivnog sastojka natalože u plućima. Ipak, određeni inhalatori sa suvim praškom koriste ciklonsku komoru za disperziju kako bi proizveli čestice željene veličine za udisanje. U ciklonskoj komori za disperziju, lek ulazi u komoru za disperziju oblika novčića tangencijalno tako da se putanja vazduha i leka kreću duž spoljašnjeg kružnog zida. Kako se formulacija leka kreće duž ovog kružnog zida ona udara naokolo i snage sudaranja razbijaju aglomerate. Vazduh se kreće spiralnom putanjom prema centru komore i izlazi vertikalno. Cestice koje imaju dovoljno male aerodinamičke veličine mogu da prate putanju vazduha i izađu iz komore. U stvari, komora za disperziju radi kao mali mlazni mlin. U zavisnosti od specifičnosti formulacije, u formulaciju se mogu dodati velike čestice laktoze koje će pomoći disperziju pomoću sudara sa česticama API.
Izgleda da Twincer™ jednodozni inhalator za jednokratnu upotrebu radi uz korišćenje ciklonske komore za disperziju oblika novčića koja se naziva „vazdušni klasifikator".Pogledajte,SAD objavljenu patentnu prijavu br. 2006/0237010 od strane Rijksuniversiteit Groningen. Radovi koje je objavio univerzitet u Groningenu, navode da se doza čistog mikronizovanog kolistin sulfometata od 60 mg može efikasno isporučiti u obliku suvog praška za inhalaciju primenom ove tehnologije.
U poželjnom otelotvorenju, formulacija aerosola se isporučuje u vidu suvog praška primenom inhalatora za suvi prašak naznačeno time što čestice koje emituje inhalator imaju MMAD u opsegu od oko 1 do oko 5 um i GSD oko manje od 2.
Primeri pogodnih inhalatora za suvi prašak i uređaja za disperziju suvog praška za upotrebu u isporučivanju jedinjenja i kompozicija u skladu sa predmetnim pronalaskom uključuju one koji su obelodanjeni uUS7520278; US7322354; US7246617; US7231920; US7219665; US7207330; US6880555; US5,522,385; US6845772; US6637431; US6329034; US5,458,135; US4,805,811; i U.S. objavljenoj patentnoj prijavi br. 2006/0237010.
U jednom otelotvorenju, farmaceutska formulacija u skladu sa pronalaskom je suvi prašak za inhalaciju koji je formulisan za dostavljanje pomoću uređaja tipa Diskus®. Uređaj Diskus® se sastoji od izdužene trake oblikovane iz baznog lista koji ima mnoštvo udubljenja postavljenih njegovom dužinom i poklopca koji je hermetički zatvoren ali može da se odlepi, koji definiše mnoštvo rezervoara, pri čemu svaki rezervoar sadrži inhalacionu formulaciju koja sadrži unapred utvrđenu količinu aktivnog sastojka bilo samog ili u smeši sa jednim ili više nosača ili pomoćnih materija (npr. laktoza) i/ili druge terapeutski aktivne agense. Poželjno, traka je dovoljno fleksibilna da može da se umota u rolnu. Poklopac i bazni list će poželjno imati prednjačeće krajnje delove koji nisu spojeni jedan sa drugim i najmanje jedan od prednjačećih krajnjih delova je konstruisan tako da može da se prikači na sredstvo sa navojima. Takođe, poželjno je da se hermetička zaptivka između baze i poklopca prostire njihovom čitavom širinom. Za pripremanje doze za inhalaciju, poklopac se poželjno može odlepiti od baznog lista u longitudinalnom pravcu od prvog kraja baznog lista.
U jednom otelotvorenju, farmaceutska formulacija u skladu sa pronalaskom je suvi prašak za inhalaciju koji je formulisan za dostavljanje pomoću jednodoznog inhalatora za jednokratnu upotrebu, a naročito Twincer™ inhalatora. Twincer™ inhalator se sastoji od laminatnog blistera od folije sa jednim ili više udubljenja i poklopca koji je hermetički zatvoren ali može da se odlepi, koji definiše mnoštvo rezervoara. Svaki rezervoar sadrži inhalacionu formulaciju koja sadrži unapred utvrđenu količinu aktivnog(ih) sastojka(sastojaka) bilo samog ili u smeši sa jednim ili više nosača ili pomoćnih materija (npr. laktoza). Poklopac će poželjno imati prednjačeći krajnji deo koji je konstruisan tako da se projektuje od tela inhalatora. Pacijent bi rukovao uređajem i tako primenjivao formulaciju aerosola 1) uklanjanjem omota spoljašnjeg pakovanja, 2) povlačenjem jezička folije kako bi otkrio lek koji je u blisteru i 3) inhaliranjem leka iz blistera.
U drugom otelotvorenju, farmaceutska formulacija u skladu sa pronalaskom je suvi prašak za inhalaciju naznačeno time što je suvi prašak formulisan u mikročestice kako je opisano u PCT publikacija br. WO2009/015286 ili WO2007/l 14881, oba pripadaju NexBio. Takve mikročestice se uopšteno obrazuju dodavanjem kontrajona u rastvor koji sadrži jedinjenje pronalaska u rastvaraču, dodavanjem antirastvarača u rastvor; i postepenim hlađenjem rastvora do temperature ispod oko 25°C, kako bi se obrazovalo jedinjenje koje sadrži mikročestice koje sačinjavaju jedinjenje. Mikročestice koje sačinjavaju jedinjenje se zatim mogu odvojiti iz rastvora bilo kojim pogodnim sredstvom, kao što su sedimentacija, filtracija ili liofilizacija. Pogodni kontrajoni, rastvarači i antirastvarači za pripremu mikročestica jedinjenja pronalaska opisani su u WO2009/015286.
U drugom otelotvorenju, farmaceutska kompozicija u skladu sa pronalaskom se isporučuje u vidu suvog praška pomoću inhalatora sa fiksnim dozama. Neograničavajući primeri inhalatora sa fiksnim dozama i uređaja uključuju one opisane u US5,261,538; US5,544,647; US5,622,163; US4,955,371; US3,565,070; US3,361306 i US6,116,234 i US7,108,159. U poželjnom otelotvorenju, jedinjenje pronalaska se isporučuje u vidu suvog praška primenom inhalatora sa fiksnim dozama naznačeno time što emitovane čestice imaju MMAD u opsegu od oko 1 um do oko 5 um i GSD koji je manji od oko 2.
Tečne formulacije aerosola za isporučivanje u endobronhijalni prostor ili pluća pomoću inhalacije mogu na primer biti formulisane kao vodeni rastvori ili suspenzije ili kao aerosoli koji se dostavljaju iz pakovanja pod pritiskom, kao što su inhalatori sa fiksnim dozama, sa primenom pogodnih tečnih potiskivača, inhalatori sa finom maglom ili nebulizatori. Takve kompozicije aerosola koje su pogodne za inhalaciju mogu biti ili suspenzija ili rastvor i uopšteno sadrže aktivni(e) sastojak(sastojke) zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem ili rastvaračem (npr. voda (destilovana ili sterilna), fiziološki rastvor, hipertonični fiziološki rastvor ili etanol) i opciono jedan ili više drugih terapeutskih aktivnih agenasa.
Kompozicije aerosola za dostavljanje pomoću inhalatora sa fiksnim dozama pod pritiskom tipično dalje sadrže farmaceutski prihvatljiv potiskivač. Primeri takvih potiskivača uključuju fluorougljenike ili hlorofluorougljenike koji sadrže vodonik ili njihove smeše, naročito hidrofluoroalkane, npr. dihlorodifluorometan, trihlorofluorometan, dihlorotetrafluoroetan, posebno 1,1,1,2-tetrafluoroetan, 1,1,1,2,3,3,3,-heptafluoro-n-propan ili njihovu smešu. Kompozicija aerosola može da ne sadrži pomoćne materije ili može opciono da sadrži dodatne pomoćne materije za formulaciju koje su dobro poznate u stručnoj oblasti kao što su surfaktanti npr. oleinska kiselina ili lecitin i ko-rastvarače npr. etanol. Formulacije pod pritiskom će uopšteno biti sadržane u rezervoaru (npr. aluminijumska bočica) koji je zatvoren ventilom (npr. merni ventil) i postavljen na aktivator koji ima usnik.
U drugom otelotvorenju, farmaceutska kompozicija u skladu sa pronalaskom se isporučuje u vidu tečnosti pomoću inhalatora sa fiksnim dozama. Neograničavajući primeri inhalatora sa fiksnim dozama i uređaja uključuju one opisane u patentima registrovanim u SAD pod br. 6,253,762, 6,413,497, 7,601,336, 7,481,995, 6,743,413 i 7,105,152. U poželjnom otelotvorenju, jedinjenje pronalaska se isporučuje u vidu suvog praška primenom inhalatora sa fiksnim dozama naznačeno time što emitovane čestice imaju MMAD u opsegu od oko 1 um do oko 5 um i GSD koji je manji od oko 2.
U jednom otelotvorenju formulacija aerosola je pogodna za aerosolizaciju pomoću mlaznog nebulizatora, ili ultrazvučnog nebulizatora uključujući nebulizatore sa statičnom ili
vibrirajućom poroznom pločom. Tečne formulacije aerosola za nebulizaciju mogu se stvoriti rastvaranjem ili rekonstituisanjem formulacije sa čvrstim česticama ili se mogu formulisati sa vodenim nosačem uz dodavanje agenasa kao što su kiseline ili baze, puferske soli i agensi za
podešavanje izotoničnosti. One se mogu sterilisati tehnikama u okviru procesa kao što su filtracija, ili terminalnim procesima kao što su zagrevanje u autoklavu ili gama zračenje. One mogu takođe biti predstavljene u nesterilnom obliku.
Pacijenti mogu biti osetljivi na pH, osmolalnost i jonski sadržaj nebulizovanog rastvora. Stoga ove parametre treba prilagoditi da budu kompatibilni sa aktivnim sastojkom nebulizovanog rastvora i podnošljivi za pacijente. Najpoželjniji rastvor ili suspenzija aktivnog sastojka će sadržati koncentraciju hlorida >30 mmol/1 pri pH 4,5-7,4, poželjno 5,0-5,5, i imati osmolalnost od oko 800-1600mOsm/kg. pH rastvora se može kontrolisati ili titracijom uobičajenim kiselinama (hlorovodonična kiselina ili sumporna kiselina, na primer) ili bazama (natrijum hidroksid, na primer) ili upotrebom pufera. Puferi koji se često koriste obuhvataju citratne pufere, kao što su limunska kiselina/natrij um citrat puferi, acetatne pufere, kao što su sirćetna kiselina/natrijum acetat puferi, i fosfatne pufere. Jačine pufera mogu biti u opsegu od 2 mmol/1 do 50 mmol/1.
Korisni acetatni, fosfatni i citratni puferi obuhvataju natrijum acetat, natrijum acetat trihidrat, amonijum acetat, kalijum acetat, natrijum fosfat, dvobazni natrijum fosfat, dinatrijum hidrogen fosfat, kalijum dihidrogen fosfat, kalijum hidrogen fosfat, kalijum fosfat, natrijum citrat i kalijum citrat. Drugi puferi koji se mogu koristiti obuhvataju natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, amonijum hidroksid, aminometilpropanol, trometamin, tetrahidroksipropil etilendiamin, limunsku kiselinu, sirćetnu kiselinu, hidroksitrikarboksilnu kiselinu ili njihovu so, kao što su njihova citratna ili natrijum citratna so, mlečnu kiselinu, i soli mlečne kiseline uključujući natrijum laktat, kalijum laktat, litijum laktat, kalcijum laktat, magnezijum laktat, barijum laktat, aluminijum laktat, cink laktat, srebro laktat, bakar laktat, gvožđe laktat, mangan laktat, amonijum laktat, monoetanolamin, dietanolamin, trietanolamin, diizopropanolamin, kao i njihove kombinacije, i slične.
Takve formulacije se mogu primenjivati pomoću komercijalno dostupnih nebulizatora ili drugog atomizatora koji može razbiti formulaciju u čestice ili kapljice pogodne za taloženje u respiratornom traktu. Neograničavajući primeri nebulizatora koji se mogu koristiti za dostavljanje aerosola kompozicije pronalaska uključuju pneumatske mlazne nebulizatore, ventilirane ili udahom pojačane mlazne nebulizatore ili ultrazvučne nebulizatore uključujući nebulizatore sa statičnom ili vibrirajućom poroznom pločom. Komercijalno dostupni nebulizatori uključuju Aeroneb® Go nebulizator (Aerogen) i eFlow nebulizator (Pari Pharma).
Mlazni nebulizator koristi struju vazduha velike brzine koja rasprskuje vodeni stub kako bi se stvorile kapljice. Cestice koje nisu pogodne za inhalaciju udaraju o zidove ili aerodinamične pregrade. Ventiliran ili udahom pojačan mlazni nebulizator u suštini radi na isti način kao i mlazni nebulizator izuzev što udahnuti vazduh prolazi kroz primarnu oblast za stvaranje kapljica kako bi se povećala izlazna stopa nebulizatora dok pacijent udiše.
U ultrazvučnom nebulizatoru, vibracija piezoelektričnog kristala stvara površinske nestabilnosti u rezervoaru sa lekom što dovodi do formiranja kapljica. U nebulizatorima sa poroznom pločom polja pritiska koja stvara zvučna energija guraju tečnost kroz pore mrežice gde se ona rasprskuje u kapljice pomoću Rejlijevog raspada. Zvučna energija se može obezbediti vibrirajućim rogom ili pločom koju pokreće piezoelektrični kristal, ili vibracijom same mrežice. Neograničavajući primeri atomizatora uključuju bilo koji jedno ili dvofluidni atomizator ili mlaznicu koja proizvodi kapljice odgovarajuće veličine. Jednofluidni atomizator radi tako što gura tečnost kroz jednu ili više rupica, gde se mlaz tečnosti rasprskuje u kapljice. Dvofluidni atomizatori rade tako što ili guraju i gas i tečnost kroz jednu ili više rupica, ili tako što sudaraju mlaz tečnost sa drugim mlazom tečnosti ili gasa.
Izbor nebulizatora koji aerosolizuje formulaciju aerosola je bitan u primeni aktivnog(ih) sastojka (sastojaka). Različiti nebulizatori imaju različite efikasnosti u zavisnosti od njihovog dizajna i principa rada i osetljivi su na fizička i hemijska svojstva formulacije. Na primer, dve formulacije sa različitim površinskim naponom mogu imati različite distribucije veličine čestica. Pored toga, svojstva formulacije kao što su pH, osmolalnost i stalni sadržaj jona mogu uticati na podnošljivost leka, tako da su poželjna otelotvorenja prilagođena određenim rasponima ovih svojstava.
U jednom poželjnom otelotvorenju, formulacija za nebulizaciju se isporučuje u endobronhijalni prostor u vidu aerosola koji ima MMAD između oko 1 um i oko 5 um i GSD manji od 2 primenom odgovarajućeg nebulizatora. Da bi bio optimalno efikasan i da bi se izbegla neželjena dejstva u gornjem respiratornom traktu i sistemska neželjena dejstva, aerosol ne bi trebalo da ima MMAD veći od oko 5 um i ne bi trebalo da ima GSD veći od oko 2. Ako aerosol ima MMAD veći od oko 5 um ili GSD veći od oko 2, veliki procenat doze može da se nataloži u gornjim disajnim putevima čime se smanjuje količina leka koji se isporučuje na željeno mesto u donjem respiratornom traktu. Ako je MMAD aerosola manji od oko 1 um onda veliki procenat čestica može ostati suspendovan u udahnutom vazduhu i može zatim biti izdahnut u toku izdisanja.
Jedinjenja pronalaska se takođe mogu primeniti transbronhoskopskom lavažom.
Formulacije koje su pogodne za oralnu primenu mogu biti predstavljene kao zasebne jedinice kao što su kapsule, škrobne kapsule ili tablete, od kojih svaka sadrži unapred utvrđenu količinu aktivnog sastojka; kao prašak ili granule; kao rastvor ili suspenzija u vodenoj tečnosti ili nevodenoj tečnosti; ili kao tečna emulzija ulje u vodi ili tečna emulzija voda u ulju. Aktivni sastojak može takođe biti predstavljen kao kesica, loptica, elektuarijum ili pasta. Tableta se može napraviti komprimovanjem ili kalupljenjem, opciono sa jednim ili više pomoćnih sastojaka. Komprimovane tablete se mogu pripremiti u odgovarajućoj mašini kompresijom aktivnog sastojka u slobodnom obliku kao što je prašak ili granule, opciono izmešanog sa povezivačima, lubrikantom, inertnim rastvaračem, površinski aktivnim ili disperzionim agensom. Oblikovane tablete se mogu napraviti u odgovarajućoj mašini kalupljenjem smeše praškastog jedinjenja koje je navlaženo inertnim tečnim rastvaračem. Tablete mogu opciono biti obložene ili urezane i mogu biti formulisane tako da obezbeđuju sporo ili kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka koji sadrže.
Formulacije za topikalnu primenu u ustima, na primer bukalno ili sublingvalno, obuhvataju lozenge, koje sadrže aktivni sastojak u bazi sa ukusom kao što su sukroza i akacija ili tragakant, i pastile koje sadrže aktivni sastojak u bazi kao što su želatin i glicerin ili sukroza i akacija.
Formulacije za parenteralnu primenu obuhvataju vodene i nevodene sterilne rastvore za injekciju koji mogu sadržati antioksidante, pufere, bakteriostatike i rastvore koji čine formulaciju izotoničnom sa krvlju nameravanog primaoca; i vodene i nevodene sterilne suspenzije koje mogu sadržati agense za suspendovanje i agense za zgušnjavanje. Formulacije mogu biti predstavljene u pakovanjima za jediničnu dozu ili više doza, na primer zapečaćene ampule i bočice, i mogu se čuvati u liofilizovanom stanju koje zahteva samo dodavanje sterilnog tečnog nosača, na primer fiziološkog rastvora ili vode za injekcije neposredno pre upotrebe. Rastvori za injekcije i suspenzije za ekstemporalnu pripremu mogu biti pripremljeni od sterilnih praškova, granula i tableta prethodno opisane vrste.
Oralne tečnosti kao što su rastvori, sirupi i eliksiri mogu biti pripremljeni u obliku jedinice doziranja tako da data količina sadrži unapred utvrđenu količinu aktivnog sastojka. Sirupi mogu biti pripremljeni rastvaranjem aktivnog sastojka u vodeni rastvor prikladnog ukusa, dok se eliksiri pripremaju upotrebom farmaceutski prihvatljivog alkoholnog nosača. Suspenzije mogu biti formulisane dispergovanjem aktivnog sastojka u farmaceutski prihvatljivom nosaču. Rastvarači i emulgatori kao što su etoksilovani izostearil alkoholi i polioksi etilen sorbitol etri, konzervansi, aditivi za ukus kao što je ulje peperminta ili prirodni zaslađivači ili saharin ili drugi veštački zaslađivači, i slični mogu takođe biti inkorporirani u oralne tečne kompozicije.
Lipozomski sistemi za isporuku, kao što su male unilamelarne vezikule, velike unilamelarne vezikule i multilamelarne vezikule mogu takođe biti upotrebi) eni kao sredstva za isporuku jedinjenja pronalaska. Lipozomi se mogu formirati iz raznovrsnih fosfolipida kao što su holesterol, stearilamin i fosfatidilholini.
Farmaceutske kompozicije za topikalnu primenu mogu biti formulisane kao masti, kreme, suspenzije, losioni, praško vi, rastvori, paste, gelovi, sprejovi, aerosoli ili ulja. Kompozicije namenjene za lečenje očiju ili drugih spoljašnjih tkiva, na primer usta i kože, mogu se nanositi u obliku masti ili kreme za topikalnu primenu. Kada se formuliše u obliku masti, aktivni sastojak može biti upotrebljen sa parafinskom ili bazom od masti koja se može mešati sa vodom. Alternativno, aktivni sastojak se može formulisati u obliku kreme sa bazom kreme ulje u vodi ili voda u ulju.
Druge kompozicije namenjene za topikalnu primenu u oči ili uši uključuju kapi za oči i kapi za uši naznačene time što je aktivni sastojak rastvoren ili suspendovan u pogodnom nosaču, kao što je na primer vodeni rastvarač, uključujući fiziološki rastvor.
Kompozicije namenjene za nazalnu primenu uključuju aerosole, rastvore, suspenzije, sprejove, magle i kapljice. Formulacije za nazalnu primenu koje mogu da se aerosolizuju mogu biti formulisane na skoro iste načine kao i formulacije za inhalaciju koje mogu da se aerosolizuju, uz uslov da će u formulacijama za nazalnu primenu biti poželjne čestice sa veličinama koje se ne mogu udahnuti. Tipično, mogu se koristiti čestice veličine od oko 5 mikrona do veličine vidljivih kapljica. Tako se za nazalnu primenu mogu koristiti čestice veličine u rasponu 10-500 um kako bi se osiguralo zadržavanje u nosnoj duplji.
Mogu se takođe koristiti transdermalni flasteri, koji su dizajnirani da ostanu u kontaktu sa epidermom pacijenta duži vremenski period i promovišu apsorpciju aktivnog sastojka kroz isti.
Kompozicije za vaginalnu i rektalnu primenu uključuju masti, kreme, supozitorije i klizme, koje sve mogu biti formulisane konvencionalnim tehnikama.
U drugom aspektu, pronalazak obezbeđuje metod za pokretanje hidracije površina sluznica ili ponovno uspostavljanje odbrane sluznice kod čoveka kojem je to potrebno, koji se sastoji od davanja navedenom čoveku farmaceutske kompozicije koja sadrži jedinjenje pronalaska, naznačene time što se navedeno jedinjenje primenjuje u efikasnoj količini. U jednom poželjnom otelotvorenju, metod se sastoji od primene farmaceutske kompozicije u obliku inhalatorne kompozicije koja sadrži količinu jedinjenja pronalaska koja je dovoljna da se postigne rastvorena koncentracija jedinjenja na površinama disajnih puteva od oko IO"<9>, IO"<8>ili IO"<7>do oko IO"<4>,10"<3>, IO"2 ili10"<1>mola/litru, još poželjnije od oko IO"<9>do oko IO"<4>mola/litru.
U drugom aspektu, pronalazak obezbeđuje metod za lečenje bilo koje od: bolest povezana sa reverzibilnom ili ireverzibilnom opstrukcijom disajnih puteva, hronična opstruktivna bolest pluća (HOBP), astma, bronhiektazije (uključujući bronhiektazije usled stanja koja nisu cistična fibroza), akutni bronhitis, hronični bronhitis, postvirusni kašalj, cistična fibroza, emfizem, pneumonija, panbronhiolitis, bronhiolitis povezan sa transplantacijom, i traheobronhitis povezan sa upotrebom ventilatora ili prevencija pneumonije povezane sa upotrebom ventilatora kod čoveka kojem je to potrebno, što podrazumeva da se čoveku da farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje pronalaska, naznačeno time što se navedeno jedinjenje primenjuje u efikasnoj količini. U jednom poželjnom otelotvorenju, metod se sastoji od primene farmaceutske kompozicije u obliku inhalatorne kompozicije koja sadrži količinu jedinjenja pronalaska koja je dovoljna da se postigne rastvorena koncentracija jedinjenja na površinama disajnih puteva od oko IO"<9>, IO"<8>ili IO"<7>do oko 10"<4>, IO"<3>,IO"<2>ili 10"<1>mola/litru, još poželjnije od oko IO"<9>do oko 10"4 mola/litru.
U drugom aspektu, pronalazak obezbeđuje metod za lečenje bilo koje od sledećih suva usta (kserostomija), suva koža, suvoća vagine, sinusitis, rinosinusitis, ili nazalna dehidracija, uključujući nazalnu dehidraciju izazvanu primenom suvog kiseonika, suvo oko ili Sjogrenova bolest, pokretanje okularne ili kornealne hidracije, lečenje sindroma distalne intestinalne opstrukcije, lečenje zapaljenja srednjeg uha, primarne cilijarne diskinezije, sindroma distalne intestinalne opstrukcije, ezofagitisa, zatvora ili hroničnog divertikulitisa kod čoveka kojem je to potrebno, što podrazumeva da se čoveku da farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje pronalaska, naznačeno time što se navedeno jedinjenje primenjuje u efikasnoj količini.
Poželjne formulacije jedinične doze za jedinjenja pronalaska su one koje sadrže efikasnu količinu aktivnog sastojka ili njenu odgovarajuću frakciju.
Podrazumeva se da pored sastojaka koji su konkretno navedeni ranije, formulacije ovog pronalaska mogu uključivati druge agense koji su konvencionalni u stručnoj oblasti, uzimajući u obzir vrstu formulacije u pitanju, na primer one koje su pogodne za oralnu primenu mogu sadržati agense za ukus.
Kompozicije predmetnog pronalaska mogu biti formulisane za trenutno, kontrolisano ili produženo oslobađanje po želji za određeno stanje koje se tretira i željenog puta primene. Na primer, formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem za oralnu primenu može biti poželjna za lečenje zatvora kako bi dostavljanje aktivnog sastojka u kolon bilo najveće moguće. Takve formulacije i pogodne pomoćne materije za iste su dobro poznate u oblasti farmacije. Budući daje slobodna baza jedinjenja uopšteno manje solubilna u vodenim rastvorima nego so, kompozicije koje sadrže slobodnu bazu jedinjenja formule I mogu da se koriste za obezbeđivanje dužeg oslobađanja aktivnog sastojka koji se isporučuje inhalacijom u pluća. Aktivan sastojak prisutan u plućima u čestičnom obliku koji nije rastvoren u rastvor nije dostupan za indukovanje fiziološkog odgovora, ali služi kao depo bioraspoloživog leka koji se postepeno rastvara u rastvor. Kao drugi primer, formulacija može sadržati jedinjenje pronalaska i u obliku slobodne baze i u obliku soli kako bi se obezbedilo i neposredno oslobađanje i produženo oslobađanje aktivnog sastojka za rastvaranje u sekrecijama sluzi, na primer u nosu.
KOMBINACIJE
Jedinjenja pronalaska mogu biti formulisana i/ili korišćena u kombinaciji sa drugim terapeutski aktivnim agensima. Primeri drugih terapeutski aktivnih agenasa koji mogu biti formulisani ili korišćeni u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska uključuju, bez ograničavanja, osmolite, antiinflamatorne agense, antiholinergičke agense, P-agoniste (uključujući selektivne P2-agoniste), agoniste P2Y2 receptora, agoniste delta receptora aktiviranog proliferatorom peroksizoma (PPAR), druge epitelijalne blokatore natrijumovih kanala (blokatori ENaC receptora), modulatore regulatora transmembranskog provođenja cistične fibroze (CFTR), inhibitore kinaze ,antiinfektivne agense, antihistaminike, neantibiotske antiinflamatorne makrolide, inhibitore elastaze i proteaze i agense koji modifikuju mukus ili mucin, kao što su surfaktanti. Pored toga, za kardiovaskularne indikacije, jedinjenja pronalaska mogu da se koriste u kombinaciji sa beta blokatorima, ACE inhibitorima, inhibitorima HMGCoA reduktaze, blokatorima kalcijumovih kanala i drugim kardiovaskularnim lekovima.
Predmetni pronalazak tako obezbeđuje, kao drugi aspekt, kompoziciju koja sadrži efikasnu količinu jedinjenja pronalaska ijedan ili više drugih terapeutski aktivnih agenasa izabranih iz grupe koju čine osmoliti, antiinflamatorni agensi, antiholinergički agensi, P-agonisti (uključujući selektivne P2-agoniste), agonisti P2Y2 receptora, agonisti delta receptora aktiviranog proliferatorom peroksizoma (PPAR), drugi epitelijalni blokatori natrijumovih kanala (blokatori ENaC receptora), modulatori regulatora transmembranskog provođenja cistične fibroze (CFTR), inhibitori kinaze ,antiinfektivni agensi, antihistaminici, neantibiotski antiinflamatorni makrolidi, inhibitori elastaze i proteaze i agensi koji modifikuju mukus ili mucin, kao što su surfaktanti. Predmetni pronalazak tako obezbeđuje, kao drugi aspekt, kompoziciju koja sadrži efikasnu količinu jedinjenja pronalaska i jedan ili više drugih terapeutski aktivnih agenasa izabranih od beta blokatori, ACE inhibitori, inhibitori HMGCoA reduktaze i blokatori kalcijumovih kanala. Upotreba jedinjenja pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više drugih terapeutski aktivnih agenasa (naročito osmolitima) može smanjiti dozu jedinjenja pronalaska koja je potrebna da u dovoljnoj meri hidrira površine sluznica, čime se smanjuje potencijal za neželjena dejstva koja se pripisuju sistemskom blokiranju natrijumovih kanala, kao na primer u bubrezima.
„Osmoliti" u skladu sa predmetnim pronalaskom su molekuli ili jedinjenja koja su osmotski aktivna. „Osmotski aktivni" molekuli i jedinjenja ne prolaze membranu( tj.u suštini se ne
mogu apsorbovati) disajnih puteva ili epitelijalnog sloja pluća. Termini „površina disajnih puteva" i „površina pluća", kako su korišćeni ovde, obuhvataju površine plućnih disajnih puteva kao što su bronhije i bronhiole, površine alveola, i površine nosa i sinusa. Pogodni osmoliti uključuju jonske osmolite( tj.soli) i nejonske osmolite( tj.šećere, šećerne alkohole i organske osmolite). Uopšteno, osmoliti (i jonski i nejonski) koji se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska su poželjno osmoliti koji ne promovišu, ili zapravo sprečavaju ili usporavaju rast bakterija. Osmoliti pogodni za upotrebu u predmetnom pronalasku mogu biti u racemskom obliku ili u obliku enantiomera, diastereomera, tautomera, polimorfa ili pseudopolimorfa.
Primeri jonskih osmolita korisnih u predmetnom pronalasku uključuju bilo koju so ili farmaceutski prihvatljiv anjon i farmaceutski prihvatljiv katjon. Poželjno, bilo anjon ili katjon (ili oba) su osmotski aktivni i ne podležu brzom aktivnom transportu, u odnosu na površine disajnih puteva na koje se primenjuju. Takva jedinjenja uključuju ali nisu ograničena na anjone i katjone koji su sadržani u solima koje su komercijalno dostupne na tržištu i odobrene od straneFDA, pogledajte, npr.Remington: The Science and Practice of Pharmacv, Vol. II, pg. 1457 (19th Ed. 1995), i mogu se koristiti u bilo kojoj kombinaciji poznatoj u stručnoj oblasti.
Specifični primeri farmaceutski prihvatljivih osmotski aktivnih anjona obuhvataju, ali se ne ograničavaju na acetat, benzensulfonat, benzoat, bikarbonat, bitartarat, bromid, kalcijum edetat, kamsilat (kamforsulfonat), karbonat, hlorid, citrat, dihidrohlorid, edetat, edisilat (1,2-etandisulfonat), estolat (lauril sulfat), ezilat (1,2-etandisulfonat), fumarat, gluceptat, glukonat, glutamat, glikolilarsanilat (p-glikolamidofenilarsonat), heksilrezorcinat, hidrabamin( N, N'-Di(dehidroabietil)etilendiamin), hidrobromid, hidrohlorid, hidroksinatfoat, jodid, izetionat, laktat, laktobionat, malat, maleat, mandelat, mezilat, metilbromid, metilnitrat, metilsulfat, mučat, napsilat, nitrat, nitrit, pamoat (embonat), pantotenat, fosfat ili difosfat, poligalakturonat, salicilat, stearat, subacetat, sukcinat, sulfat, tanat, tartarat, teoklat (8-hloroteofilinat), trietjodid, bikarbonat itd. Poželjni anjoni uključuju hlorid, sulfat, nitrat, glukonat, jodid, bikarbonat, bromid i fosfat.
Specifični primeri farmaceutski prihvatljivih osmotski aktivnih katjona obuhvataju, ali se ne ograničavaju na organske katjone kao što su benzatin (A^V'-dibenziletilendiamin), hloroprokain, holin, dietanolamin, etilendiamin, meglumin (A^-metil D-glukamin, prokain, D-lizin, L-lizin, D-arginin, L-arginin, trietilamonijum, N-metil D-glicerol, i slične; i metalne katjone kao što su aluminijum, kalcijum, litijum, magnezijum, kalijum, natrijum, cink, gvožđe, amonijum i slični. Poželjni organski katjoni uključuju organske katjone sa 3 ugljenika, 4 ugljenika, 5 ugljenika i 6 ugljenika. Poželjni katjoni uključuju natrijum, kalijum, holin, litijum, meglumin, D-lizin, amonijum, magnezijum i kalcijum.
Specifični primeri jonskih osmolita koji se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjem pronalaska obuhvataju, ali se ne ograničavaju na, natrijum hlorid (naročito hipertonični fiziološki rastvor), kalijum hlorid, holin hlorid, holin jodid, litijum hlorid, meglumin hlorid, L-lizin hlorid, D-lizin hlorid, amonijum hlorid, kalijum sulfat, kalijum nitrat, kalijum glukonat, kalijum jodid, gvožđe (III) hlorid, gvožđe (II) hlorid, kalijum bromid, i kombinacije bilo koja dva ili više od navedenih. U jednom otelotvorenju, predmetni pronalazak obezbeđuje kombinaciju jedinjenja pronalaska i dve različite osmotski aktivne soli. Kada se koriste različite soli, jedan od anjona ili katjona može biti isti među solima koje se razlikuju. Hipertonični fiziološki rastvor je preferirani jonski osmolit za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenj ima pronalaska.
Nejonski osmoliti obuhvataju šećere, šećerne alkohole i organske osmolite. Šećeri i šećerni alkoholi koji su korisni kao osmoliti u predmetnom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na šećere sa 3 ugljenika( npr.glicerol, dihidroksiaceton); šećere sa 4 ugljenika( npr.i D i L forme eritroze, treoze i eritruloze); šećere sa 5 ugljenika (npr. i D i L forme riboze, arabinoze, ksiloze, liksoze, psikoze, fruktoze, sorboze i tagatoze); i šećere sa 6 ugljenika (npr. i D i L forme altoze, aloze, glukoze, manoze, guloze, idoze, galaktoze i talože, i D i L forme alo-heptuloze, alo-hepuloze, gluko-heptuloze, mano-heptuloze, gulo-heptuloze, ido-heptuloze, galakto-heptuloze, talo-heptuloze). Dodatni šećeri korisni u praksi predmetnog pronalaska uključuju rafinozu, oligosaharide iz familije rafinoza i stahiozu. ID i L forme redukovanih oblika svakog šećera/šećernog alkohola su takođe pogodne za predmetni pronalazak. Na primer, glukoza, kada se redukuje postaje sorbitol; osmolit u okviru obima pronalaska. U skladu sa tim, sorbitol i drugi redukovani oblici šećera/šećernih alkohola (npr. manitol, dulcitol, arabitol) su pogodni osmoliti za upotrebu u predmetnom pronalasku. Manitol je preferirani nejonski osmolit za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenj ima pronalaska.
„Organski osmoliti" se uopšteno koristi da označi molekule koji kontrolišu unutarćelijsku osmolalnost u bubregu.Pogledajte npr.J. S. Handler et al., Comp. Biochem. Phvsiol, 117,
301-306 (1997); M. Burg, Am. J. Phvsiol. 268, F983-F996 (1995). Organski osmoliti obuhvataju ali nisu i ograničeni na, tri glavne klase jedinjenja: poliole (polihidroksilne alkohole), metilamine i aminokiseline. Pogodni poliolni organski osmoliti obuhvataju ali nisu i ograničeni na, inozitol, mioinozitol i sorbitol. Pogodni metilaminski organski osmoliti obuhvataju ali nisu i ograničeni na, holin, betain, karnitin (L-, D- i DL forme), fosforilholin, lizo-fosforilholin, glicerofosforilholin, kreatin i kreatin fosfat. Pogodni aminokiselinski organski osmoliti obuhvataju ali nisu i ograničeni na, D- i L-forme glicina, alanina, glutamina, glutamata, aspartata, prolina i taurina. Dodatni organski osmoliti pogodni za upotrebu u predmetnom pronalaska obuhvataju tihulozu i sarkozin. Poželjni su sisarski organski osmoliti, pri čemu su najpoželjniji humani organski osmoliti. Ipak, određeni organski osmoliti potiču od bakterija, kvasnica i morskih životinja, i ova jedinjenja može takođe da se koriste u predmetnom pronalasku.
Prekursori osmolita mogu da se koriste u kombinaciji sa jedinjenj ima pronalaska. „Prekursor osmolita", kako je korišćen u ovom dokumentu, odnosi se na jedinjenje koje se pomoću metaboličkog koraka, bilo katabolitičkog ili anabolitičkog, konvertuje u osmolit. Primeri prekursora osmolita obuhvataju, ali nisu i ograničeni na, glukozu, polimere glukoze, glicerol, holin, fosfatidilholin, lizo-fosfatidilholin i neorganske fosfate, koji su prekursori poliola i metilamina. Prekursori aminokiselinskih osmolita obuhvataju proteine, peptide i poliaminokiseline, koje se hidrolizuju kako bi se dobile osmolitne aminokiseline, i metaboličke prekursore koji se metaboličkim korakom poput transaminacije mogu konvertovati u osmolitne aminokiseline. Na primer, prekursor aminokiseline glutamin je poli-L-glutamin, a prekursor glutamata je poli-L-glutaminska kiselina.
Mogu takođe da se koriste hemijski modifikovani osmoliti ili prekursori osmolita. Takve hemijske modifikacije uključuju povezivanje osmolita (ili prekursora) sa dodatnom hemijskom grupom koja menja ili pojačava efekat osmolita ili prekursora osmolita (npr. inhibira degradaciju molekula osmolita). Takve hemijske modifikacije su korišćene sa lekovima ili prolekovima i poznate su u stručnoj oblasti.( Pogledajte,na primer, SAD pat. br. 4,479,932 i 4,540,564; Shek, E. et al., J. Med. Chem. 19:113-117 (1976); Bodor, N. et al., J. Pharm. Sci. 67:1045-1050 (1978); Bodor, N. et al., J. Med. Chem. 26:313-318 (1983); Bodor, N. et al., J. Pharm. Sci. 75:29-35 (1986).
Poželjni osmoliti za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenj ima pronalaska obuhvataju natrijum hlorid, naročito hipertonični fiziološki rastvor i manitol.
Za formulaciju 7% i >7% hipertoničnog fiziološkog rastvora, posebno mogu biti korisne formulacije koje sadrže bikarbonatne anjone, naročito za respiratorne poremećaje sa disfunkcijom regulatora transmembranskog provođenja cistične fibroze (CFTR), kao što su CF ili HOBP. Nedavni nalazi ukazuju na to da, iako relativni odnos provođenje HCO3" /provođenje Cl"iznosi između 0,1 i 0,2 za pojedinačne CFTR kanale aktivirane sa cAMP i ATP, odnos u znojnom kanalu može da bude u rasponu od praktično 0 do skoro 1,0, u zavisnosti od uslova stimulacije. To jest, kombinovanje cAMP + cGMP + a-ketoglutarat može proizvesti CFTR provođenje HCCb'koje je skoro jednako provođenju Cl" (Quiton et al. Physiology, Vol. 22, No. 3, 212-225, June 2007). Pored toga, formulacije 7% i >7% hipertoničnog fiziološkog rastvora koje sadrže bikarbonatne anjone mogu biti posebno korisne zbog bolje kontrole pH u tečnosti na površini disajnih puteva. Prvo, pokazano je da u CF dolazi do acidifikacije disajnih puteva (Tate et al. 2002) i da nedostatak CFTR-zavisne sekrecije bikarbonata može dovesti do poremećenog kapaciteta odgovora na stanja u disajnim putevima udružena sa acidifikacijom tečnog sloja na površini disajnih puteva (Coaklev et al. 2003). Kao drugo, dodavanje hipertoničnog fiziološkog rastvora bez bikarbonata na površinu pluća može dodatno razblažiti koncentracije bikarbonata, i potencijalno smanjiti pH ili sposobnost za odgovor na acidifikaciju disajnih puteva unutar tečnog sloja na površini disajnih puteva. Stoga dodavanje bikarbonatnih anjona u hipertonični fiziološki rastvor može da pomogne da se održi ili poboljša pH tečnog sloja na površini disajnih puteva kod pacijenata sa CF.
Na osnovu ovih dokaza, dodavanje bikarbonatnog anjona u formulaciju 7% i >7% hipertoničnog fiziološkog rastvora koja se primenjuje pomoću metoda ovog pronalaska bi bilo naročito korisno. Formulacije koje sadrže koncentracije bikarbonatnih anjona do 30 do 200 mmol/1 su od posebnog interesa za hipertonične fiziološke rastvore od 7% ili >7%.
Podrazumeva se da hipertonični fiziološki rastvor ima koncentraciju soli veću od koncentracije normalnog fiziološkog rastvora (NS), tj. veću od 9 g/l ili 0,9% w/v, a hipotonični fiziološki rastvor ima koncentraciju soli manju od koncentracije normalnog fiziološkog rastvora, kao što je od oko 1 g/1 ili 0,1% w/v do oko 8 g/l ili 0,8% w/v. Hipertonični fiziološki rastvori korisni u ovde navedenim formulacijama i metodima lečenja mogu imati koncentraciju soli od oko 1% do oko 23,4% (w/v). U jednom otelotvorenju hipertonični fiziološki rastvor ima koncentraciju soli od oko 60 g/l (6% w/v) do oko 100 g/l (10% w/v). U drugom otelotvorenju, fiziološki rastvor ima koncentraciju soli od oko 70 g/l (7% w/v) do oko 100 g/l (10% w/v). U daljim otelotvorenjima, fiziološki rastvor ima koncentraciju soli od a) od oko 0,5 g/l (0,05% w/v) do oko 70 g/l (7% w/v); b) od oko 1 g/l (0,1% w/v) do oko 60 g/l (6% w/v); c) od oko 1 g/l (0,1% w/v) do oko 50 g/l (5% w/v); d) od oko 1 g/l (0,1 % w/v) do oko 40 g/l (4% w/v); e) od oko 1 g/l (0,1 % w/v) do oko 30 g/l (3% w/v); i f) od oko 1 g/l (0,1% w/v) do oko 20 g/l (2% w/v).
Specifične koncentracije fizioloških rastvora korisnih u ovde navedenim formulacijama i metodima lečenja uključuju, nezavisno, one koji imaju koncentracije soli od 1 g/l (0,1 % w/v), 2 g/l (0,2% w/v), 3 g/l (0,3% w/v), 4 g/l (0,4% w/v), 5 g/l (0,5% w/v), 6g/l(0,6% w/v), 7 g/l (0,7% w/v), 8 g/l (0,8% w/v), 9 g/l (0,9% w/v), 10 g/l (1% w/v), 20 g/l (2% w/v), 30 g/l (3% w/v), 40 g/l (4% w/v), 50 g/l (5% w/v), 60 g/l (6% w/v), 70 g/l (7% w/v), 80 g/l (8% w/v), 90 g/l (9% w/v), 100 g/l (10% w/v), 110 g/l (11% w/v), 120 g/l (12% w/v), 130 g/l (13% w/v), 140 g/l (14% w/v), 150 g/l (15% w/v), 160 g/l (16% w/v), 170 g/l (17% w/v), 180 g/l (18% w/v), 190 g/l (19% w/v), 200 g/l (20% w/v), 210 g/l (21% w/v), 220 g/l (22% w/v) i 230 g/l
(23% w/v). Mogu se takođe koristiti koncentracije fiziološkog rastvora između svake od ovih navedenih koncentracija/procenata, kao što su fiziološki rastvor od 1,7 g/l ( 0, 17% w/v), 1,25 g/l (1,25% w/v), 1,5 g/l (1,5% w/v), 25 g/l (2,5% w/v), 28 g/l (2,8% w/v), 35 g/l (3,5% w/v), 45 g/l (4,5% w/v) i 75 g/l (7,5% w/v).
Specifične korisne koncentracije hipotoničnih fizioloških rastvora obuhvataju one od oko 0,12 g/l (0,012% w/v) do oko 8,5 g/l (0,85% w/v). Može se koristiti svaka koncentracija unutar ovog opsega, kao na primer, na w/v osnovi, 0,05%>, 0,1%, 0,15%, 0,2%, 0,225% (1/4 NS), 0,25%, 0,3% (1/3 NS), 0,35%, 0,4%, 0,45% (1/2 NS), 0,5%, 0,55%, 0,6% (2/3 NS), 0,65%, 0,675% (3/4 NS), 0,7%, 0,75% i 0,8%.
Svaki od opsega i specifičnih koncentracija fiziološkog rastvora opisanih u ovom dokumentu se mogu koristiti sa fonnulacijama, metodima lečenja, režimima i kompletima opisanim u ovom dokumentu.
U okviru obima ovog pronalaska, takođe su nameravani hemijski modifikovani osmoliti ili prekursori osmolita. Takve hemijske modifikacije uključuju povezivanje dodatne hemijske grupe na osmolit (ili prekursor) koja menja ili pojačava efekat osmolita ili prekursora osmolita (npr. inhibira degradaciju molekula osmolita). Takve hemijske modifikacije su korišćene sa lekovima ili prolekovima i poznate su u stručnoj oblasti. (Pogledajte, na primer, SAD pat. br. 4,479,932 i 4,540,564; Shek, E. et al., J. Med. Chem. 19:113-117 (1976); Bodor, N. et al., J. Pharm. Sci. 67:1045-1050 (1978); Bodor, N. et al., J. Med. Chem. 26:313-318
(1983); Bodor, N. et al., J. Pharm. Sci. 75:29-35 (1986), od kojih je svaki inkorporiran ovde referencom.
Pogodni antiinflamatorni agensi za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenj ima pronalaska obuhvataju kortikosteroide i nesteroidne antiiflamatorne lekove (NSAIL), naročito inhibitore fosfodiesteraze (PDE). Primeri kortikosteroida za upotrebu u predmetnom pronalasku uključuju oralne ili inhalacione kortikosteroide ili njihove prolekove. Specifični primeri obuhvataju, ali nisu i ograničeni na, ciklezonid, desizobutiril-ciklezonid, budezonid, flunizolid, mometazon i njihove estre (npr. mometazon furoat), flutikazon propionat, flutikazon furoat, beklometazon, metil prednizolon, prednizolon, deksametazon, 6a,9a-difluoro-17a- [(2-furanilkarbonil)oksi] -11 P-hidroksi-16a-metil-3-okso-androsta-1,4-dien-17P-karbotioična kiselina S-fluorometil estar, 6a,9a-difluoro-11 P-hidroksi- 16a-metil-3-okso- 17a-propioniloksi-androsta-1,4-dien-17P-karbotioična kiselina S-(2-okso-tetrahidro-furan-3S-il) estar, estri beklometazona (npr. 17-propionat estar ili 17,21-dipropionat estar, fluorometil estar, triamcinolon acetonid, rofleponid, ili bilo koju njihovu kombinaciju ili podskup. Poželjni kortikosteroidi za formulaciju ili upotrebu u kombinaciji sa jedinjenj ima pronalaska su izabrani od ciklezonid, desizobutiril-ciklezonid, budezonid, mometazon, flutikazon propionat i flutikazon furoat, ili bilo koja njihova kombinacija ili podskup.
NSAIL za upotrebu u predmetnom pronalasku obuhvataju, ali nisu i ograničeni na, natrijum hromoglikat, nedokromil natrijum, inhibitore fosfodiesteraze (PDE) (npr. teofilin, aminofilin, PDE4 inhibitori, mešoviti PDE3/PDE4 inhibitori ili mešoviti PDE4/PDE7 inhibitori), antagoniste leukotrijena, inhibitore sinteze leukotrijena (npr. 5 LO i FLAP inhibitori), inhibitore sintaze azot monoksida (iNOS), inhibitore proteaze (npr. inhibitori triptaze, inhibitori elastaze neutrofila i inhibitori metaloproteaze), antagoniste p2-integrina i agoniste ili antagoniste adenozinskog receptora (npr. adenozin 2a agonisti), antagoniste citokina (npr. antagonisti hemokina) ili inhibitore sinteze citokina (npr. antagonisti receptora prostaglandina D2 (CRTh2)). Primeri modifikatora leukotrijena pogodnih za primenu pomoću metoda ovog pronalaska obuhvataju montelukast, zileuton i zafirlukast.
PDE4 inhibitor, mešoviti PDE3/PDE4 inhibitor ili mešoviti PDE4/PDE7 inhibitor može biti bilo koje jedinjenje za koje je poznato da inhibira enzim PDE4 ili za koje se otkrije da deluje kao inhibitor PDE4, i koja su selektivni inhibitori PDE4 (tj. jedinjenja koja u značajnoj meri ne inhibiraju druge članove PDE familije). Primeri specifičnih PDE4 inhibitora za formulaciju i upotrebu u kombinaciji sa jedinjenj ima predmetnog pronalaska obuhvataju, ali nisu i ograničeni na, roflumilast, pumafentrin, arofilin, cilomilast, tofimilast, oglemilast, tolafentrin, piklamilast, ibudilast, apremilast, 2-[4-[6,7-dietoksi-2,3-bis(hidroksimetil)-l-naftalenil]-2-piridinil]-4-(3-piridinil)-l(2H)-ftalazinon(T2585), N-(3,5-dihloro-4-piridinil)-l-[(4-fluorofenil)metil] - 5-hidroksi-a-okso-1 H-indol-3 -acetamid (AWD-12-281,4- [(2R)-2 - [3 -
(ciklopentiloksi)-4-metoksifenil]-2-feniletil]-piridin(CDP-840), 2-[4-[[[[2-(l,3-benzodioksol-5-iloksi)-3-piridinil]karbonil]amino]metil]-3-fluorofenoksi]-(2R)-propanoinska kiselina (CP-671305), N-(4,6-dimetil-2-pirimidinil)-4-[4,5,6,7-tetrahidro-2-(4-metoksi-3-metilfenil)-5-(4-metil-1 -piperazinil)-1 H-indol-1 -il]- benzensulfonamid, (2E)-2-butendioat (YM-393059), 9-[(2-fluorofenil)metil]-N-metil-2-(trifluorometil)-9H-purin-6-amin (NCS-613), N-(2,5-dihloro-3-piridinil)-8-metoksi-5-kvinolinkarboksamid (D-4418), N-[(3R)-9-amino-3,4,6,7-tetrahidro-4-okso-1 -fenilpirolo[3,2,l -] [ 1,4]benzodiazepin-3-il]-3H-purin-6-amin (PD-168787), 3-[[3-(ciklopentiloksi)-4-metoksifenil]metil]-N-etil-8-(l-metiletil)-3H-purin-6-amin hidrohlorid (V-l 1294A), N-(3,5-dihloro-l-oksido-4-piridinil)-8-metoksi-2-(trifluorometil)-5-kvinolinkarboksamid (Sch351591), 5-[3-(ciklopentiloksi)-4-metoksifenil]-3-[(3-metilfenil)metil]-(3S,5S)- 2-piperidinon (HT-0712), 5-(2-((li?,4JR)-4-amino-l-(3-(ciklopentiloksi)-4-metioksifenil)cikloheksil) etinil)-pirimidin-2-amin,cis-[4-ciano-4-(3-ciklopropilmetoksi-4-difluorometoksi fenil)cikloheksan-l-ol] i 4-[6,7-dietoksi-2,3-bis(hidroksimetil)-l-naftalenil]-l-(2-metoksietil)-2(lH)-piridinon (T-440), i bilo koju njihovu kombinaciju ili podskup.
Antagonisti leukotrijena i inhibitori sinteze leukotrijena obuhvataju zafirlukast, montelukast natrijum, zileuton i pranlukast.
Antiholinergički agensi za formulaciju ili upotrebu u kombinaciji sa jedinjenj ima pronalaska obuhvataju, ali nisu i ograničeni na, antagoniste muskarinskih receptora, posebno uključujući pan antagoniste i antagoniste M3receptora. Primeri jedinjenja obuhvataju alkaloide biljke beladona, kao što su atropin, skopolamin, homatropin, hiosciamin, i različiti oblici uključujući i njihove soli (npr. bezvodni atropin, atropin sulfat, atropin oksid ili HC1, metilatropin nitrat, homatropin hidrobromid, homatropin metil bromid, hiosciamin hidrobromid, hiosciamin sulfat, skopolamin hidrobromid, skopolamin metil bromid), ili bilo koju njihovu kombinaciju ili podskup.
Dodatni antiholinergici za formulaciju i upotrebu u kombinaciji sa metantelin, propantelin bromid, anizotropin metil bromid ili Valpin 50, aklidinijum bromid, glikopirolat (Robinul), izopropamid jodid, mepenzolat bromid, tridiheksetil hlorid, heksociklijum metilsulfat, ciklopentolat HC1, tropikamid, triheksifenidil CC1, pirenzepin, telenzepin, i metoktramin, ili bilo koja njihova kombinacija ili podskup.
Poželjni antiholinergici za formulaciju i upotrebu u kombinaciji sa jedinjenj ima pronalaska obuhvataju ipratropijum (bromid), oksitropijum (bromid) i tiotropijum (bromid) ili bilo koju njihovu kombinaciju ili podskup.
Primeri p-agonista za formulaciju i upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska obuhvataju, ali nisu i ograničeni na, salmeterol, R-salmeterol, i njihove ksinafoatne soli, albuterol ili R-albuterol (slobodna baza ili sulfat), levalbuterol, salbutamol, formoterol (fumarat), fenoterol, prokaterol, pirbuterol, metaprterenol, terbutalin i njihove soli, i bilo koju njihovu kombinaciju ili podskup.
Agonisti P2Y2 receptora za formulaciju i upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska mogu da se koriste u količini koja je efikasna da stimuliše sekreciju hlorida i vode od strane površina disajnih puteva, posebno površina nosnih disajnih puteva. Pogodni agonisti P2Y2 receptora su poznati u stručnoj oblasti i opisani na primer, u kolonama 9-10 patenta registrovanog u SAD pod br. 6,264,975 i takođe patenata registrovanih u SAD pod br. 5,656,256 i 5,292,498.
P2Y2agonisti koji mogu da se primene putem metoda ovog pronalaska uključuju agoniste P2Y2receptora kao što su ATP, UTP, UTP-.gama.-S i dinukleotidne agoniste P2Y2receptora (npr. denufosol ili dikvafosol) ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so. Agonista P2Y2receptora je tipično uključen u količini koja je efikasna da stimuliše sekreciju hlorida i vode od strane površina disajnih puteva, posebno površina nosnih disajnih puteva. Pogodni agonisti P2Y2receptora su opisani u, ali bez ograničavanja, SAD pat. br. 6,264,975, SAD pat.br.5,656,256, SAD pat. br. 5,292,498, SAD pat. br. 6,348,589, SAD pat. br. 6,818,629, SAD pat. br. 6,977,246, SAD pat. br. 7,223,744, SAD pat.br.7,531,525 i SAD pat.AP.2009/0306009 od kojih je svaki inkorporiran ovde referencom.
Kombinovane terapije i formulacije u ovom dokumentu mogu uključivati agoniste adenozina 2b (A2b), takođe, uključujući BAY 60- 6583, NECA (N-etilkarboksamidoadenozin), (S)-PHPNECA, LUF-5835 i LUF-5845. A2b agonisti koji se mogu koristiti su opisani od strane Volpini et al., Journal of Medicinal Chemistrv 45 (15): 3271-9 (2002); Volpini et al., Current Pharmaceutical Design 8 (26): 2285-98 (2002); Baraldi et al., Journal of Medicinal Chemistrv 47 (6): Cacciari et al., 1434-47 (2004); Mini Reviews in Medicinal Chemistrv 5 (12): 1053-60 (Dec. 2005); Baraldi et al., Current Medicinal Chemistrv 13 (28): 3467-82 (2006); Beukers et al, Medicinal Research Reviews 26 (5): 667-98 (Sept. 2006); Elzein et al., Bioorganic & Medicinal Chemistrv Letters 16 (2): 302-6 (Jan. 2006); Carotti, et al., Journal of Medicinal Chemistrv 49 (1): 282-99 (Jan. 2006); Tabrizi et al., Bioorgonic & Medicinal Chemistry 16 (5): 2419-30 (March 2008); i Stefanachi, et al., Bioorgonic & Medicinal Chemistrv 16 (6): 2852-69 (March 2008).
Primeri drugih blokatora ENaC receptora za formulaciju i upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska obuhvataju ali nisu i ograničeni na amilorid i njegove derivate poput onih jedinjenja opisanih u SAD patentu br. 6858615, iPCT br. publikacija WO2003/070182, WO2004/073629, WO2005/018644, WO2006/022935, WO2007/018640 i WO2007/146869, sve pripadaju Parion Sciences, Inc.
ENaC blokatori malih molekula su sposobni da direktno spreče transport natrijuma kroz poru ENaC kanala. ENaC blokatori koji mogu da se primene u kombinacijama navedenim u ovom dokumentu obuhvataju, ali nisu ograničeni na amilorid, benzamil, fenamil, i analoge amilorida kako je navedeno u primerima u SAD pat. br. 6,858,614, SAD pat. br. 6,858,615, SAD pat. br. 6,903,105, SAD pat. br. 6,995,160, SAD pat. br. 7,026,325, SAD pat. br. 7,030,117, SAD pat. br. 7,064,129, SAD pat. br. 7,186,833, SAD pat. br. 7,189,719, SAD pat. br. 7,192,958, SAD pat. br. 7,192,959, SAD pat. br. 7,241,766, SAD pat. br. 7,247,636, SAD pat. br. 7,247,637, SAD pat. br. 7,317,013, SAD pat. br. 7,332,496, SAD pat. br. 7,345,044, SAD pat. br. 7,368,447, SAD pat. br. 7,368,450, SAD pat. br. 7,368,451, SAD pat. br. 7,375,107, SAD pat. br. 7,399,766, SAD pat. br. 7,410,968, SAD pat. br. 7,820,678, SAD pat. br. 7,842,697, SAD pat. br. 7,868,010, SAD pat. br. 7,875,619.
Dobro je opisano da proteoliza ENaC povećava transport natrijuma kroz ENaC. Inhibitori proteaze blokiraju aktivnost endogenih proteaza u disajnim putevima, čime sprečavaju cepanje i aktivaciju ENaC. Proteaze koje cepaju ENaC uključuju furin, meprin, matriptazu, tripsin, proteaze povezane sa kanalom (CAPs) i elastaze neutrofila. Tnhibitori proteaze koji mogu da inhibiraju proteolitičku aktivnost ovih proteaza koje se mogu primeniti u kombinacijama navedenim ovde obuhvataju, ali nisu i ograničeni na, kamostat, prostazin, furin, aprotinin, leupeptin i inhibitore tripsina.
Kombinacije navedene ovde mogu uključivati jednu ili više pogodnih nukleinskih kiselina (ili polinukleinskih kiselina), uključujući, ali bez ograničavanja na antisens oligonukleotid, siRNK, miRNK, mimičnu miRNK, antagomir, ribozim, aptamer i oligonukleotidne nukleinske kiseline mamce.Pogledajte, npr.publikaciju SAD patentne prijave br. 20100316628. Uopšteno, takve nukleinske kiseline mogu imati od 17 ili 19 nukleotida u dužini, do 23, 25 ili 27 nukleotida u dužini, ili više. Primeri uključuju, ali nisu i ograničeni na, one opisane u SAD patentu br. 7,517,865 i SAD patentnim prijavama br. 20100215588; 20100316628; 20110008366; i 20110104255. Uopšteno, takve siRNK imaju od 17 ili 19 nukleotida u dužini, do 23, 25 ili 27 nukleotida u dužini, ili više.
Jedinjenja koja moduliraju aktivnost CFTR koja se mogu primeniti u kombinacijama ovog pronalaska uključuju, ali nisu ograničena na, jedinjenja opisana u US 2009/0246137 Al, US 2009/0253736 Al, US 2010/0227888 Al, broj patenta 7,645,789, US 2009/0246820 Al, US 2009/0221597 Al, US 2010/0184739 Al, US 2010/0130547 Al, US 2010/0168094 Ali izdatom patentu: 7,553,855; US 7,772,259 B2, US 7,405,233 B2, US 2009/0203752, US 7,499,570.
Agensi koji modifikuju mukus ili mucin koji su korisni u kombinacijama i metodima opisanim ovde uključuju redukujuće agense, surfaktante i deterdžente, ekspektoranse i deoksiribonukleazne agense.
Proteini mucina su organizovani u polimere velike molekulske težine putem formiranja kovalentnih (disulfidnih) i nekovalentnih veza. Narušavanje kovalentnih veza redukujućim agensima je dobro ustanovljen metod za smanjivanje viskoelastičnih karakteristika mukusain vitroi pretpostavlja se da svodi adhezivnost mukusa na najmanju moguću meru i poboljšava klirensin vivo.Dobro je poznato da redukujući agensi smanjuju viskoznost mukusain vitroi često se koriste kao pomoćno sredstvo za obradu uzorka ispljuvka. Primeri redukujućih agenasa uključuju molekule koji sadrže sulfid ili fosfine koji su sposobni da redukuju disulfidne veze proteina, uključujući, ali bez ograničavanja na N-acetil cistein, N-acistelin, karbocistein, glutation, ditiotreitol, proteine koji sadrže tioredoksin i tris (2-karboksietil) fosfin.
N-acetil cistein (NAC) je odobren za upotrebu zajedno sa fizioterapijom grudnog koša za odvajanje lepljivog ili gustog mukusa u disajnim putevima. Kliničke studije koje procenjuju efekte oralno primenjenog ili inhaliranog NAC kod CF i HOBP su prijavile poboljšanja u reološkim svojstvima mukusa i trendove ka poboljšanju plućne funkcije i smanjenju plućnih egzacerbacija<9>. Ipak, veliki broj kliničkih podataka ukazuje na to daje NAC u najboljem slučaju marginalno efikasan terapijski agens za lečenje opstrukcije disajnih puteva mukusom kada se primenjuje oralno ili putem inhalacije. Nedavni Kohran pregled postojeće kliničke literature o upotrebi NAC nije pronašao nijedan dokaz koji govori u prilog efikasnosti NAC za CF. Marginalna klinička korist NAC odražava: NAC je relativno neefikasan redukujući agens koji je samo delimično aktivan na površinama disajnih puteva. Potrebne su veoma visoke koncentracije NAC (200 mmol/1 ili 3,26%) da se u potpunosti redukuje Muc5B, glavni mucin u disajnim putevima koji obrazuje gel, in vitro. Pored toga, u pH sredini površine disajnih puteva (mereno u opsegu pH 6,0 do 7,2 u disajnim putevima kod CF i HOBP), NAC postoji samo delimično u svom reaktivnom stanju kao negativno naelektrisan tiolat. Tako, u kliničkim uslovima, NAC se primenjuje u veoma visokim koncentracijama. Ipak, predviđa se da aktuelni uređaji za aerosole neće biti u stanju da postignu terapijske koncentracije od čak 20%> rastvora Mucomvst na površinama distalnih disajnih puteva u okviru relativno kratkih vremenskih perioda (7,5 - 15 minuta) koliko se tipično
koriste.
U nekliničkim studijama, NAC obeležen sa<14>C, primenjen inhalacijom, pokazuje brzu eliminaciju iz pluća sa poluživotom u rasponu od 6 do 36 minuta.
NAC se primenjuje kao visoko koncentrovan, hipertonični rastvor za inhalaciju (20%> ili 1,22 molarni) i prijavljeno je da izaziva bronhokonstrikciju i kašalj. U mnogim slučajevima, preporučuje se da se NAC primenjuje sa bronhodilatatorom kako bi se poboljšala podnošljivost ovog agensa.
Tako, redukujući agensi kao što je NAC nisu veoma prikladni za bolus primenu aerosola. Ipak, pretpostavlja se da bi isporuka redukujućih agenasa infuzijom aerosola u pluća povećala efikasnost, i istovremeno omogućila smanjivanje koncentracije redukujućeg agensa u rastvoru za inhalaciju (predviđa se da povećava podnošljivost).
Surfaktanti i deterdženti su šireći agensi za koje je pokazano da smanjuju viskoelasticitet mukusa čime poboljšavaju čišćenje mukusa. Primeri surfaktanata uključuju dipalmitoilfosfatidilholin (DPPC), PF, palmitinsku kiselinu, palmitoil-oleoilfosfatidilglicerol, proteine vezane za surfaktante (npr. SP-A, B, ili C), ili mogu biti dobijeni od životinja (npr. lavažom iz pluća krave ili te leta ili ekstrahovani iz mlevenog pluća svinje) ili njihove kombinacije.Pogledajte, npr.SAD patente br. 7,897,577; 5,876,970; 5,614,216; 5,100,806; i 4,312,860. Primeri proizvoda surfaktanata obuhvataju Exosurf<®>Neonatal (kolfosceril palmitat), Pumactant<®>(DPPC i fosfatidilglicerol jajeta), KL-4 surfaktant, Venticute<®>
(lusulptid, rSP-C surfaktant), Alveofact<®>(bovaktant), Curosurf<®>(poraktant alfa), Infasurf<®>
(kalfaktant), Nevvfacten® (modifikovani goveđi surfaktant), Surface<®>, Natsurf™ (nejonski alkohol etoksilat surfaktant) i Survanta<®>(beraktant). Primeri deterdženata obuhvataju, ali nisu ograničeni na Tween-80 i triton-X 100.
Može se koristiti svaki pogodan ekspektorans, uključujući, ali bez ograničavanja na guaifenezin( pogledajte, npr.SAD patent br. 7,345,051). Može se koristiti svaka pogodna deoksiribonukleaza, uključujući, ali bez ograničavanja na dornazu alfa( pogledajte, npr.SAD patent br. 7,482,024).
Primeri inhibitora kinaze uključuju inhibitore NFkB, PI3K (fosfatidilinozitol 3-kinaza), p38-MAP kinaze i Rho kinaze.
Antiinfektivni agensi za formulaciju i upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska uključuju antivirotike i antibiotike. Primeri pogodnih antivirusnih lekova uključuju Tamiflu®
(oseltamivir) i Relenza® (zanamivir). Primeri pogodnih antibiotika uključuju, ali nisu ograničeni na aztreonam (arginin ili lizin), fosfomicin, i aminoglikozide kao što su tobramicin, ili bilo koji njihovu kombinaciju ili podskup. Dodatni antiinfektivni agensi koji se mogu koristiti ovde uključuju aminoglikozide, daptomicin, fluorokvinolone, ketolide, karbapeneme, cefalosporine, eritromicin, liezolid, peniciline, azitromicin, klindamicin, oksazolidinone, tetracikline i vankomicin.
Primeri korisnih karbapenamskih antibiotika su impenam, panipenam, meropenam, biapenam, MK-826 (L-749,345), DA-1131, ER-35786, lenapenam, S-4661, CS-834 (prolek R-95867), KR-21056 (prolek KR-21012), L-084 (prolek LJC 11036) i ceftolozan (CXA-101).
Antihistaminici (tj. antagonisti Hl-receptora) za formulaciju i upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska obuhvataju, ali nisu i ograničeni na: etanolamine kao što su difenhidramin HC1, karbinoksamin maleat, doksilamin, klemastin fumarat, difenilhidramin HC1 i dimenhidrinat; etilendiamine kao što su pirilamin maleat (metpiramin), tripelenamin HC1, tripelenamin citrat i antazolin; alkilamine kao što su feniramin, hlorofeniramin, bromofeniramin, dekshlorfeniramin, triprolidin i akrivastin; piridine kao što je metapirilen, piperazine kao što su hidroksizin HC1, hidroksizin pamoat, ciklizin HC1, ciklizin laktat, meklizin HC1 i cetirizin HC1; piperidine kao što su astemizol, levokabastin HC1, loratadin, deskarboetoksiloratadin, terfenadin i feksofenadin HC1; tri- i tetraciklike kao što su prometazin, hlorprometazin trimeprazin i azatadin; i azelastin HC1, ili bilo koju njihovu kombinaciju ili podskup.
Primeri drugih klasa terapeutskih agenasa pogodnih za upotrebu u kombinacijama i metodima navedenim ovde uključuju antivirusne lekove kao što su ribavirin, antigljivične agense kao što su amfotericin, intrakonazol i vorikonazol, imunosupresive kao što su ciklosporin, takrolimus i sirolimus, bronhodilatatore uključujući, bez ograničavanja, antiholinergičke agense kao što su atrovent, siRNK, vektori genske terapije, aptameri, antagonisti endotelinskog receptora , alfa-l-antitripsin i prostaciklini.
U prethodno opisanim metodima lečenja i primenama, jedinjenje pronalaska se može koristiti samo, ili u kombinaciji sa jednim ili više terapeutski aktivnim agensima. Tipično, svaki terapeutski aktivan agens koji ima terapeutski efekat u bolesti ili stanju koje se tretira sa jedinjenjem pronalaska može da se koristi u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska, pod uslovom daje konkretan terapeutski aktivan agens kompatibilan sa terapijom koja obuhvata jedinjenje pronalaska. Tipični terapeutski aktivni agensi koji su pogodni za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska uključuju agense opisane ranije u tekstu.
U jednom poželjnom otelotvorenju, jedinjenja pronalaska se koriste u kombinaciji sa jednim ili više osmolita, naročito hipertoničnim fiziološkim rastvorom ili manitolom.
U drugom aspektu, specifikacija otkriva metode za lečenje i primene koji su opisani ranije, koji se sastoje od davanja efikasne količine jedinjenja pronalaska i najmanje još jednog terapeutski aktivnog agensa. Jedinjenja pronalaska i najmanje jedan dodatni terapeutski aktivan agens mogu se koristiti u kombinaciji istovremeno ili redosledno u bilo kojoj terapijski prikladnoj kombinaciji. Primena jedinjenja pronalaska sa jednim i više drugih terapeutski aktivnih sastojaka može biti istovremenom primenom u 1) jedinstvenoj farmaceutskoj kompoziciji, kao što su prethodno opisane kompozicije, ili 2) zasebnim farmaceutskim kompozicijama od kojih svaka sadrži jedan ili više aktivnih sastojaka komponente. Komponente kombinacije se mogu davati zasebno po redosledu naznačenim time što se jedinjenje pronalaska daje prvo a drugi terapeutski aktivan agens se daje drugi ili obrnuto.
Kada se jedinjenje pronalaska daje u kombinaciji sa jednim ili više osmolita, primena svake komponente je poželjno istovremena, i mogu biti u jedinstvenoj kompoziciji ili zasebnim kompozicijama. U jednom otelotvorenju, jedinjenje pronalaska ijedan ili više osmolita se primenjuju istovremeno putem transbronhoskopske lavaže. U drugom otelotvorenju, jedinjenje pronalaska ijedan ili više osmolita se primenjuju istovremeno putem inhalacije.
Kada se jedinjenje pronalaska koristi u kombinaciji sa drugim terapeutski aktivnim agensom, doza svakog jedinjenja se može razlikovati od one kada se jedinjenje pronalaska koristi samostalno. Stručnjak iz navedene oblasti će lako moći da utvrdi odgovarajuće doze. Odgovarajuća doza jedinjenja pronalaska, drugog(ih) terapeutski aktivnog(ih) sastojka(sastojaka) i relativna vremena primene će biti izabrani tako da se postigne željeno kombinovano terapijsko dejstvo, i u obimu su stručnosti i slobodnog izbora ordinirajućeg lekara, kliničara ili veterinara.
Eksperimentalni postupciPredmetni pronalazak takođe obezbeđuje procese za pripremanje jedinjenja pronalaska i do sintetičkih intermedijera koji su korisni u takvim procesima, kako je detaljno opisano u nastavku.
Određene skraćenice i akronimi se koriste pri opisivanju sintetičkih procesa i eksperimentalnih detalja. Iako će osoba stručna u navedenoj oblasti razumeti većinu ovih reči, u sledećoj tabeli se nalazi lista mnogih od ovih skraćenica i akronima.
Jedinjenja formule I mogu biti sintetisana pomoću tehnika poznatih u stručnoj oblasti. U shemi 1 u nastavku prikazana je reprezentativna sintetička procedura.
Shema 1
Ove procedure opisane se u, na primer, E. J. Cragoe, „Sinteza amilorida i njegovih analoga"
(pogl. 3) u Amilorid i njegovi analozi, str. 25-36. Drugi procesi za pripremanje analoga amilorida opisani su u, na primer, SAD patentu br. 3,318,813, koji pripada Cragoe, naročito u
metodima A, B, C i D patenta '813. Drugi procesi koji mogu biti adaptirani za pripremanje jedinjenja pronalaska opisani su u PCT publikacijama br. WO2003/07182, WO2005/l08644, WO2005/022935, US 7,064,129, US 6,858,615, US 6,903,105, WO 2004/073629, WO 2007/146869 i WO 2007/018640, sve pripadaju Parion Sciences, Inc.
Priprema metil N'-3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimido tioata (2) se može videtiuWO 2009/074575.
Uopšteno, jedinjenja pronalaska se mogu pogodno pripremiti tretiranjem jedinjenja formule II sa aminom formule III. Specifičnije, jedinjenja formule 2 se tretiraju aminom formule 3 u pogodnom rastvaraču kao što su metanol, etanol ili tetrahidrofuran, i bazi kao što su trietilamin (TEA) ili di-izoproiletilamin (DIPEA), uz zagrevanje do povišene temperature, npr. 70°C. Dalje prečišćavanje, razlučivanje stereoizomera, kristalizacija i/ili pripremanje soli može se sprovesti primenom konvencionalnih tehnika.
Kao što će biti očigledno stručnjacima iz navedene oblasti, u određenim slučajevima, početna ili intermedijerna jedinjenja u sintezi mogu posedovati druge funkcionalne grupe koje mogu obezbediti alternativna reaktivna mesta. Interferencija sa takvim funkcionalnim grupama se može izbeći korišćenjem odgovarajućih zaštitnih grupa, kao što su amino ili alkoholne zaštitne grupe, i gde je primenjivo, odgovarajućom prioritizacijom sintetičkih koraka. Pogodne zaštitne grupe će biti očigledne stručnjacima iz navedene oblasti. Metodi za ugrađivanje i uklanjanje takvih zaštitnih grupa su dobro poznati u stručnoj oblasti, i takve konvencionalne tehnike se takođe mogu koristiti i u procesima prikazanog pronalaska.
Sledeći specifični primeri su navedeni u ovom dokumentu u ilustrativne svrhe. Materijal i metode. Svi reagensi i rastvarači su kupljeni od Aldrich Chemical Corp., Chem-Impex International Inc. i TCI chemical industrv Co. Ltd. NMR spektri su dobijeni na ili Bmker AC 400 ('H NMR na 400 MHz i<13>C NMR na 100 MHz) ili Bruker AC 300 ('H NMR na 300 MHz i<B>C NMR na 75 MHz). Spektri protona su upoređivani sa tetrametilsilanom kao unutrašnjim standardom a spektri ugljenika su upoređivani sa CDCb, CD3OD ili DMSO-dk(kupljenih od Aldrich ili Cambridge Isotope Laboratories, ako nije naznačeno drugačije). Brza hromatografija je izvršena na Combiflash sistemu (Combiflash Rf, Teledvne Isco) u koji je postavljena silika gel kolona (Redi Sep. Rf, Teledvne Isco) ili kolona reverznih faza (High performance Cl8 Gold kolona). ESI maseni spektri su dobijeni na Shimadzu LCMS-2010 EV masenom spektrometru. HPLC analize su dobijene pomoću Waters XTerra MS C18 5 um 4,6xl50mm analitičke kolone detektovane na 220 nm (ako nije naznačeno drugačije) na Shimadzu Prominence HPLC sistemu. Korišćen je sledeći vremenski program sa brzinom protoka od 1,0 ml po minutu:
UPLC analize su dobijene pomoću Waters ACQUITY UPLC HSS T3 l,8um 2,lxl00mm analitičke kolone detektovane na 220 nm (ako nije naznačeno drugačije) na Shimadzu Prominence UFLC sistemu. Korišćen je sledeći vremenski program sa brzinom protoka od 0,3 ml po minutu: 1. Dobijanje hidrohloridne soli (S)-2-amino-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonil)guanidino)butil)naftalen-l-il)propanoične kiseline (16)
Dobijanje 4-(/e/-c-Butildimetilsililoksi)naftalen-l-karbaldehida(2); Rastvor 4-hidroksinaftalen-l-karbaldehida (1) (10,0 g, 58,1 mmol) u suvom THF(200 ml) je ohlađen do 0 °C, i redom su dodati imidazol (12,0 g, 174 mmol) i terc-butildimetilsilil hlorid(TBSCl)
(13,1 g, 87,1 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 16 h reakciona smeša je filtrirana a rastvarač evaporisan. Ostatak je uveden u EtOAc (500 ml), ispran zasićenim vodenim NH4C1 (100 ml), vodom (100 ml), i vodenim rastvorom NaCl (100 ml), i osušen
nad Na2SO"4. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom a ostatak prečišćen brzom hromatografijom na silika gelu (2% EtOAc/heksan), čime je dobijeno jedinjenje 2 (14,8 g, 90%) u vidu žute čvrste supstance: 'HNMR (300 MHz, CDCb): 6 10,22 (s, IH), 9,30 (d,J=8,10 Hz, 1H), 8,27 (d,J =8,1 Hz, 1H), 7,86 (d,J =7,8 Hz, 1H), 7,69 (ddd,J =8,4, 7,0, 1,3 Hz, IH), 7,57 (ddd,J=8,4, 7,0, 1,3 Hz, IH), 6,95 (d,J=7,5 Hz, IH), 1,10 (s, 9H), 0,36 (s, 6H)
Dobijanje (Z)-Metil 2-(fm>Butiloksikarbonil)amino-3-[ l-( terc-butildimetilsililoksi)naftalen-4-il] akrilata (4);
U rastvor (MeOhP(0)CH(NHBoc)C02Me, 3 (23,0 g, 52,7 mmol) u suvom CH2CI2(100 ml) je dodat DBU (10,1 ml, 67,3 mmol), i smeša je mešana 30 min na 0 °C. Rastvor jedinjenja 1 (14,8 g, 51,74 mmol) u suvom CH2CI2(60 ml) je polako dodat brizgalicom, i reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature tokom 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u CH2CI2(500 ml), brzo opran zasićenim vodenim rastvorom NH4CI (2 x 150 ml) i vodenim rastvorom NaCl (200 ml) pa osušen nad Na2S04. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (20%o EtOAc/heksan sa 1% NEt3), čime je dobijeno jedinjenje 4 (20,0 g, 85%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (300 MHz, CDCb): 5 8,23 (dd,J=8,6, 2,1 Hz, IH), 7,93 (dd,J=8,6, 2,1 Hz, IH), 7,67 (s, IH), 7,57 (d,J=8,4 Hz, IH), 7,53-7,47 (m, 2H), 6,85 (d,J =7,8 Hz, IH), 6,05 (brs, IH), 3,88 (s, 3H), 1,30 (s, 9H), 1,09 (s, 9H), 0,30 (s, 6H).
Dobij anj e Metil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-3-(4-(terc-butildimetilsililoksi)naftalen-l-il)propanoata(5);
Suspenzija jedinjenja 4 (17,2 g, 37,6 mmol) i 10% Pd/C (3,40 g) u EtOH (200 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm, balon) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje 5 (17,0 g, 99%>) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (300 MHz, CDCb): 8 8,23 (d,J=8,2 Hz, IH), 7,99 (d,J=8,2 Hz, IH), 7,57-7,44 (m, 2H), 7,10( d, J=8,2 Hz, IH), 6,77 (d,J=8,2 Hz, IH), 5,07-4,94 (brs, IH), 4,74-4,61 (m, IH), 3,66 (s, 3H), 3,55-3,17 (m, 2H), 1,40 (s, 9H), 1,18 (s, 9H), 0,30 (s, 6H). Dobijanje Metil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-3-(4-hidroksinaftalen-l-il)propanoata (6);
U rastvor jedinjenja 5 (17,0 g, 37,0 mmol) u suvom THF (200 ml) na 0 °C je dodat tetrabutilamonijum fluorid (48,1 ml, 48,1 mmol). Nastali rastvor je mešan 15 min i ugašen zasićenim vodenim NH4CI (150 ml). Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u CH2CI2(500 ml), brzo opran vodom (2 x 150 ml) i vodenim rastvorom NaCl (200 ml), pa osušen nad Na2SO"4. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (25% EtOAc/heksan), čime je dobijen rotamer 6 (14,0 g, 94%) u vidu žute čvrste supstance:<>>H NMR (300 MHz, CDCb): 8 8,23 (d,J=8,2 Hz, IH), 7,98 (d,J=8,2 Hz, IH), 7,57-7,44 (m, 2H), 7,07 (d,J=8,0 Hz, IH), 6,68 (d,/=7,6 Hz, IH), 6,55 (brs, IH), 5,14-4,85 (brs, IH), 4,77-4,51 (m, IH), 3,78-3,31 (m, 5H), 1,40 (s, 6H), 1,10 (s, 3H).
Dobijanje jedinjenja 7 i 8;
CHIRALPAK AD kolona 5 cm I.D x 50 cm L, čestica 20u korišćena je za odvajanje enantiomera korišćenjem izokratskog sistema IPA/Heptan (7,5%> sa 0,4%> DEA). 8,0 g racemskog jedinjenja 6 prečišćeno je kolonom da bi se dobio S-izomer 8 (3,5 g, 44%> prinos) u vidu bele čvrste supstance i i?-izomer 7 (2,2 g, 28%>) u vidu bele čvrste supstance. Dobijanje (S)-metil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-3-[4-(trifluorometilsulfoniloksi)naftalen-l-il]propanoata (9);
U rastvor jedinjenja 8 (1,22 g, 3,53 mmol) u piridinu (20 ml) dodat je triflat (0,9 ml, 5,30 mmol) na 0 °C, pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Nakon koncentrovanja, reakciona smeša je podeljena između CH2CI2(100 ml) i vode (50 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 50 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 9 (1,51 g, 89%) u vidu smeđeg ulja: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,19-8,07 (m, 2H), 7,69-7,64 (m, 2H), 7,38 (d, J= 8,1 Hz, IH), 7,28 (d,J=7,9 Hz, IH), 5,12-5,06 (brs, IH), 4,78-4,67 (m, IH), 3,68-3,46 (m, 5H), 1,39 (s, 8H), 1,25 (s, IH).
Dobijanje (S)-metil 3-{4-[4-(benziloksikarbonilamino)but-l-inil]naftalen-l-il}-2-(terc-butoksikarbonilamino)propanoat (11); U rastvor jedinjenja 9 (1,50 g, 3,14 mmol) u vodenom CH3CN (60 ml) dodat je TEA (1,27 ml, 12,6 mmol), 10% (M3u)3P u heksanima (1,27 ml, 0,62 mmol), benzil but-3-inilkarbamat (10, 948 mg, 4,71 mmol), i Cul (30 mg, 0,16 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša degasirana je argonom 10 min pa je brzo dodat Pd(PPli3)4(363 mg, 0,31 mmol) u jednoj porciji. Nakon degasiranja sa argonom 5 min, dobijena smeša refluksovana je 16 h. Reakciona smeša koncentrovana je u vakuumu pa je ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 60:40 etil acetat/heksani) kako bi se dobilo jedinjenje 11 (1,30 g, 78%) u vidu smeđeg ulja: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,33 (dd, /= 7,5, 2,2 Hz, IH), 8,07 (dd,J=7,5, 2,2 Hz, IH), 7,58-7,51 (m, 2H), 7,52 (d,J=7,5 Hz, IH), 7,35-7,29 (m, 5H), 7,19 (d,J=7,5 Hz, IH), 5,16-5,12 (m, IH), 5,13 (s, 2H), 5,07-4,99 (m, IH), 4,74-4,65 (m, IH), 3,59 (s, 3H), 3,91-3,42 (m, 2H), 3,53 (d,J=6,2 Hz, 2H), 2,79 (t,J=6,4 Hz, 2H), 1,39 (s, 8H), 1,25 (s, IH).
Dobijanje solisirćetnekiseline od (S)-metil 3-(4-(4-aminobutil)nafthalen-l-il)-2-(terc-
butoksikarbonilamino)propanoata (12);
Suspenzija jedinjenja11(1,00 g, 1,88 mmol) i 10% Pd/C (200 mg) u smeši MeOH (20 ml) i AcOH (2 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so12(820 mg, 95%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,17-8,05 (m, 2H), 7,62-7,48 (m, 2H), 7,27 (brs, 2H), 4,47 (t,J=7,4 Hz, IH), 3,75-3,51 (m, 5H), 3,13 (t,J=7,5 Hz, 2H), 2,93 (t,J=7,66 Hz, 2H), 1,93 (s, 3H), 1,88-1,65 (m, 4H), 1,34 (s, 7H), 1,01 (s, 2H).
Dobij anj e (S)-metil 2-(terc-butoksikarbonilamino)-3-(4-14- [3-(3,5-diamino-6-
hloropirazin-2-karbonil)guanidino]butil}naftalen-l-il)propanoata (14);U rastvor aminske soli12(815 mg, 1,77 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (13, 1,1 g, 2,83 mmol) u EtOH (6,0 ml) dodat je DIPEA (2,50 ml, 14,2 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin14(870 mg, 80%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,17-8,07 (m, 2H), 7,58-7,48 (m, 2H), 7,26 (q,J=7,4 Hz, 2H), 4,56-3,68 (m, IH), 3,75-3,68 (m, IH), 3,64 (s, 2H), 3,58-3,43 (m, 2H), 3,13 (t,J=6,7 Hz, 2H), 2,98 (q, /= 7,2 Hz, 2H), 1,86-1,70 (m, 4H), 1,33 (s, 7H), 0,98 (s, 2H).
(S)-2-(terc-butoksikarbonilamino)-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-hloropirazin-2-
karbonil)guanidino)butil)naftalen-l-il)propanoična kiselina (15);U rastvor metil estra14(510 mg, 0,83 mmol) u smeši THF (3 ml), metanola (3 ml) i vode (1 ml) dodat je čvrsti LiOH (120 mg, 4,99 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Kada je TLC reakcione smeše pokazala završetak reakcije, pH reakcione smeše podešen je na pH 9-10 dodavanjem 1 N HC1 (vodeni rastvor), a organski rastvarač je uklonjen. pH vodenog dela podešen je na 5-6, a nastali precipitat je ekstrahovan pomoću dihlorometana. Vodeni deo ekstrahovan je pomoću DCM (2 x 50 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 15 (375 mg, 76%>) u obliku bele čvrste supstance: 'H NMR (300 MHz, DMSO-^): 8 8,22-8,02 (m, 2H), 7,59-7,47 (m, 2H),
7,34-7,22 (m, 2H), 6,82 (brs, 2H), 4,19-4,06 (m, IH), 3,59-3,46 (m, IH), 3,25-3,13 (m, 2H), 3,09-2,94 (m, 10H), 1,80-1,55 (m, 4H), 1,28 (s, 7H), 0,93 (s, 2H).
Dobijanje HC1 soli (S)-2-amino-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonil)guanidino)butil)naftalen-l-il)propanoične kiseline (16); 4 N HC1 u dioksanu (8,0 ml) je dodato ujedinjenje 15 (258 mg, 0,43 mmol) a nakon toga i voda (4,0 ml) pa je
reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen a ostatak je liofiliziran kako bi se dobilo jedinjenje 16 (250 mg, 99%) u obliku žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz,DMSO-Je):8 10,54 (brs, IH), 9,33 (t,J=5,92 Hz, IH), 9,03-8,80 (m, 2H), 8,60 (brs, 3H), 8,17 (ddd,J=10,1, 7,6, 4,5 Hz, 2H), 7,59 (ddd,J=9,2, 6,7, 4,5 Hz, 2H), 7,46-7,36 (m, 2H), 7,34 (dd,J=9,9, 7,5 Hz, 2H), 4,13-4,02 (m, IH), 3,75-3,44 (m, 3H), 3,43-3,33 (m, 2H), 3,09 (t,J=6,4 Hz, 2H), 1,81-1,62 (m, 4H).
2. Dobijanje (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-(dimetilamino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (23)
Dobijanje (S)-metil 3-{4-[4-(benziloksikarbonilamino)but-l-inil]naftalen-l-il}-2-(terc-
butoksikarbonilamino)propanoata(17);
U rastvor metil-estra 11 (1,71 g, 3,22 mmol) u smeši THF (21 ml), metanola (21 ml) i vode (7.0 ml) dodat je čvrst NaOH (1,29 g, 32,3 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Kada je TLC reakcione smeše pokazala završetak reakcije, pH reakcione smeše podešen je na pH 9-10 dodavanjem 1 N HC1 (vodeni rastvor), a organski rastvarač je uklonjen. pH vodenog dela podešen je na 5-6, a nastali precipitat je ekstrahovan pomoću dihlorometana. Vodeni deo ekstrahovan je pomoću CH2CI2(2 x 50 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 17 (1,55 g, 93%) u obliku smeđe čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 8,32 (d,J=7,4 Hz, IH), 8,13-8,05 (m, IH), 7,58-7,48 (m, 4H), 7,38-7,29 (m, 5H), 5,21-5,15 (m, IH), 5,12 (s, 2H), 5,07-4,93 (m, IH), 4,70-4,54 (m, IH), 3,77-3,62 (m, IH), 3,57-3,35 (m, 2H), 2,84-2,68 (m, 2H), 1,37 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 19; Jedinjenje 18 (100 mg, 0,56 mmol) u THF (2,5 ml) redom je pomešano sa DEPBT (218 mg, 0,72 mmol), 17 (289 mg, 0,56 mmol) i DIPEA (0,3 ml, 1,68 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u CH2CI2(100 ml), brzo opran zasićenim vodenim rastvorom NaHCCb(2 x 50 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml) pa osušen nad Na2S04. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (8% metanol/OrhCh), čime je dobijen amid 19 (250 mg, 66%) u obliku žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,34 (dd,J=8,3, 1,4 Hz, IH), 8,21 (d, / = 8,3 Hz, IH), 7,61-7,47 (m, 4H), 7,39-7,27 (m, 5H), 7,16 (d,J=8,3 Hz, 2H), 7,05 (d,J=8,3 Hz, 2H), 5,36-5,19 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,36-4,53 (m, IH), 3,66-3,42 (m, 4H), 2,79 (t,J=6,6 Hz, 2H), 2,57 (t, /= 7,5 Hz, 2H), 2,40 (t,J=7,5 Hz, 2H), 2,32 (s, 6H), 1,86-1,75 (m, 2H), 1,39 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 20; Suspenzija jedinjenja 19 (210 mg, 0,31 mmol) i 10% Pd/C (150 mg) u smeši MeOH (3,0 ml) i AcOH (0,3 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 22, koja je neutralisana sa trietilaminom, pa je sirov proizvod prečišćen brzom hromatografijom na silika gelu (CMA, 80:18:2), čime je dobijen slobodan amin 20 (130 mg, 77%) u obliku žute čvrste supstance: 'H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,24 (dd, /= 8,1, 2,1 Hz, IH), 8,08 (dd, /= 8,2, 1,5 Hz, IH), 7,58-7,47 (m, 2H), 7,33-7,20 (m, 4H), 7,07-7,05 (m, 2H), 4,53 (t,J=7,2 Hz, IH), 3,66-3,55 (m, 2H), 3,09 (t, /= 7,5 Hz, 2H), 2,82 (t, /= 7,4 Hz, 2H), 2,57 (t,J=7,2 Hz, 2H), 2,35 (dd,J=10,5, 7,5 Hz, 2H), 2,24 (s, 6H), 1,84-1,61 (m, 6H), 1,36 (s, 7H), 1,10 (s, 2H).
Dobijanje jedinjenja 22; Rastvor amina 20 (122 mg, 0,22 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (21, 139 mg, 0,35 mmol) u EtOH (4,0 ml) pomešan je sa DIPEA (0,31 ml, 1,76 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 22 (111 mg, 66%) u vidu žute čvrste supstance:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8,23 (dd,J=7,5, 2,4 Hz, IH), 8,10 (d,J=8,1 Hz, IH), 7,57-7,48 (m, 2H), 7,29 (d,J=7,3 Hz, 2H), 7,24 (d,J=8,0 Hz, 2H), 7,13-7,05 (m, 2H), 4,53 (t,J=8,0 Hz, IH), 3,60-3,37 (m, 2H), 3,23 (t,J=7,3 Hz, 2H), 3,15-3,03 (m, 2H), 2,55 (t,J=7,3 Hz, 2H), 2,29 (dd,J=9,7, 7,6 Hz, 2H), 2,21 (s, 6H), 1,86-1,64 (m, 6H), 1,36 (s, 7H), 1,12 (s, 2H).
Dobijanje HC1 soli jedinjenja 23 (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-(dimetilamino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid
4 N HC1 u dioksanu (3.0 ml) dodato je ujedinjenje 22 (100 mg, 0,13 mmol) a nakon toga i voda (1,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Rastvarač je uklonjen i neutralisan sa IN NaOH (vodeni), nastala čvrsta supstanca je isprana vodom i ponovo tretirana sa 1 N HC1 (vodena), voda je uklonjena, a ostatak je liofiliziran kako bi se dobilo jedinjenje 22 (65 mg, 65%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-de) 10,50 (s, IH), 10,48 (s, IH), 10,46-10,40 (m, IH), 9,26 (t, /= 4,9 Hz, IH), 9,01-8,74 (m, 2H), 8,61 (brs, IH), 8,35 (dd,J=6,6, 3,4 Hz, IH), 8,13 (dd, /= 6,5, 3,3 Hz, IH), 7,58 (ddd, / = 9,9, 6,6, 3,6 Hz, 2H), 7,42 (brs, IH), 7,40 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,34 (d,J=7,3 Hz, IH), 7,28 (d,/=7,3 Hz, IH), 7,16 (d,/=8,6 Hz, 2H), 4,29-4,20 (m, IH), 3,64-3,49 (m, 2H), 3,12-3,03 (m, 2H), 3,02-2,94 (m, 2H), 2,72 (s, 3H), 2,70 (s, 3H), 2,56 (t,J =8,1 Hz, 2H), 1,97-1,88 (m, 2H), 1,79-1,61 (m, 4H). 3. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(heksU((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (28)
Dobijanje jedinjenja25;
Jedinjenje 24 (165 mg, 0,38 mmol) u THF (10 ml) redom je pomešano sa DEPBT (148 mg, 0,48 mmol), 17 (200 mg, 0,38 mmol) i DIPEA (0,2 ml, 1,14 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u CH2CI2(100 ml), brzo opran zasićenim vodenim rastvorom NaHCCb(2 x 50 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml) pa osušen nadNa2SO"4. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (8% metanol/CtbCh), čime je dobijen amid 25 (210 mg, 60%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (300 MHz, CDCb): 8 8,35 (d,J=8,2 Hz, IH), 8,21 (d,J=8,3 Hz, IH), 7,63-7,52 (m, 2H), 7,51 (d,J=7,3 Hz, IH), 7,44-7,39 (m, IH), 7,37-7,27 (m, 6H), 7,16-7,02 (m, 3H), 5,24-5,16 (m, IH), 5,13 (s, 2H), 4,68
(ddd, /= 11,3, 10,3, 5,1 Hz, IH), 4,56 (q, /= 7,2 Hz, IH), 4,19-4,09 (m, IH), 3,90-3,76 (m, 5H), 3,74-3,68 (m, IH), 3,63-3,46 (m, 5H), 3,45-3,24 (m, 3H), 2,80 (t,J =6,7 Hz, 2H), 2,70-2,35 (m, 8H), 1,81-1,67 (m, 2H), 1,63-1,53 (m, IH), 1,35-1,20 (m, 6H), 1,21 (s, 9H), 1,31 (d, /= 5,1 Hz, 3H), 0,87 (t,J=6,2 Hz, 3H).
Dobijanje jedinjenja26;
Suspenzija jedinjenja 25 (280 mg, 0,30 mmol) i 10% Pd/C (560 mg) u smeši EtOH (9,0 ml) i AcOH (1,0 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 22, koja je neutralisana sa NaHC03pa je sirov proizvod prečišćen brzom hromatografijom na silika gelu (CMA, 80:18:2), čime je dobijen slobodan amin 26 (160 mg, 67%>) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,29 (d,/=8,2 Hz, IH), 8,07 (d,/=8,6 Hz, IH), 7,60( t, J=6,9 Hz, IH), 7,55(ddd, J=8,2, 6,9, 1,1 Hz, IH), 7,24( d, J=7,1 Hz, IH), 7,18 (d,/=7,1 Hz, IH), 7,02-7,96 (m, IH), 7,95-6,88 (m, 2H), 6,77-6,69 (m, IH), 5,56-5,35 (m, IH), 4,68 (q,J=5,1 Hz, IH), 4,61-4,53 (m, IH), 4,12 (dd,/=10,8, 5,4 Hz, IH), 3,89-3,80 (m, 2H), 3,74( t, J=3,3 Hz, 2H), 3,46(d, J=3,8 Hz, IH), 3,39(t, J=10,7 Hz, 2H), 3,18 - 3,09 (m, IH), 3,02-2,92 (m, IH), 2,68 (t,J=7,1 Hz, 2H), 2,61-2,47 (m, 5H), 2,46-2,37 (m, 4H), 1,77-1,63 (m, 4H), 1,33 (d,/=5,1 Hz, 3H), 1,31-1,20 (m, 8H), 1,21 (s, 9H), 0,88 (t,/ =6,7 Hz, 3H).
Dobijanje jedinjenja 27;
Rastvor amina 26 (155 mg, 0,20 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (21, 123 mg, 0,31 mmol) u EtOH (8,0 ml) pomešan je sa DIPEA (0,28 ml, 1,56 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) pa hromatografijom reverznih faza (Gold Cl8) kako bi se dobio guanidin 27 (100 mg, 51%>) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,23 (dd,/=8,8, 2,5 Hz, IH), 8,10 (d,/=8,2 Hz, IH), 7,56-7,49 (m, 2H), 7,29 (d,/=7,9 Hz, 2H), 7,24 (d,/=7,4 Hz, 2H), 7,08 (d,/=7,9 Hz, 2H), 4,67 (q,/=5,1 Hz, IH), 4,56-4,50 (m, IH), 4,04 (dd,/= 10,8, 5,4 Hz, IH), 3,92-3,86 (m, IH), 3,82-3,74 (m, 2H), 3,51-3,46 (m, IH), 3,25 (t,/=7,1 Hz, 2H), 3,15-3,06 (m, 2H), 2,71 (dd,/=13,2, 5,2 Hz, IH), 2,60-2,45 (m, 6H), 1,87-1,63 (m, 6H), 1,48-1,40 (m, 6H), 1,33-1,26 (m, 6H), 1,23( d, J=5,1 Hz, 3H), 1,20 (s, 9H), 0,89 (t,J=6,7 Hz, 3H).
Dobijanje HC1 soli jedinjenja 28 - 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(heksil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid; 4 N HC1 u vodi (3,0 ml) dodato je ujedinjenje 27 (80 mg, 0,08 mmol) u etanolu (0,5 ml) pa je reakciona smeša mešana na 40 °C tokom 6 h. Rastvarač je uklonjen, dodato je još 4N HC1 pa je smeša zagrevana na 40 °C još 4 h. Rastvarač je uklonjen, dodata je voda, a ostatak je liofiliziran kako bi se dobilo jedinjenje 28 (78 mg, 99%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-Je): 8 10,58 (brs, IH), 10,56 (brs, IH), 9,70-9,58 (m, IH), 9,38-9,31 (m, IH), 9,04-8,84 (m, 2H), 8,70 (brs, IH), 8,43-8,34(m, IH), 8,16-8,08 (m, IH), 7,62-7,52 (m, 2H), 7,46-7,37 (m, 4H), 7,34 (d, / = 7,1 Hz, IH), 7,27 (d, /= 7,1 Hz, IH), 7,17(d, J=8,1 Hz,
2H), 5,52-5,46 (m, IH), 4,85-4,76 (m, IH), 4,68-4,52 (m, 2H), 4,49-4,37 (m, IH), 4,32-4,22 (m, IH), 4,05-3,97 (m, IH), 3,72-3,43 (m, 6H), 3,17-2,97 (m, 8H), 2,02-1,90 (m, 2H), 1,77-1,54 (m, 6H), 1,33-1,21 (m, 6H), 0,86 (t,J=6,6 Hz, 3H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,23 (d, /= 8,3 Hz, IH), 8,17 (d,J=8,2 Hz, IH), 7,62-7,53 (m, 2H), 7,41-7,36 (m, IH), 7,35-7,32 (m, IH), 7,31-7,25 (m, 2H), 7,21-7,12 (m, 2H), 4,35-4,25 (m, IH), 4,17-4,02 (m, IH), 3,86-3,75 (m, 2H), 3,73-3,59 (m, 6H), 3,23-3,08 (m, 9H), 2,73-2,60 (m, 2H), 2,11-1,97 (m, 2H), 1,91-1,75 (m, 4H), 1,74-1,62 (m, 2H), 1,44-1,30 (m, 6H), 0,92 (t, 7=6,6 Hz, 3H)
4. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (33)
Dobijanje jedinjenja30:
Jedinjenje 29 (290 mg, 0,54 mmol) u THF (8.0 ml) redom je pomešano sa DEPBT (210 mg, 0,70 mmol), 17 (311 mg, 0,60 mmol) i DIPEA (0,28 ml, 1,62 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u CH2CI2(100 ml), brzo opran zasićenim vodenim rastvorom NaHCCb (2 x 50 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml) pa osušen nadNa2S04. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (8% metanol/CEbCh), čime je dobijen amid 30 (400 mg, 72%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,36-8,26 (m, IH), 8,20-8,09 (m, IH), 8,03-7,85 (m, IH), 7,61-7,46 (m, IH), 7,49 (d,J=7,2 Hz, 2H), 7,38-7,28 (m, 5H), 7,18-6,96 (m, 4H), 5,51-5,36 (m, IH), 5,32-5,21 (m, IH), 5,12 (s, 2H), 4,67 (q,J=5,1 Hz, 2H), 4,66-4,53 (m, IH), 4,11 (dd, /= 10,4, 5,2 Hz, 2H), 4,06-3,96 (m, 2H), 3,93-3,86 (m, 2H), 3,86-3,77 (m, 2H), 3,68-3,56 (m, 2H), 3,56-3,44 (m, 6H), 3,39 (t,J=10,4 Hz, 2H), 3,05 (q, J= 7,6 Hz, 2H), 2,96-2,88 (m, 2H), 2,79 (t, / = 6,1 Hz, 2H), 2,64-2,61 (m, 4H), 1,93-1,72 (m, 4H), 1,48-1,40 (m, 2H), 1,35 (s, 9H), 1,29 (d,/=5,l Hz, 6H). Dobijanje jedinjenja 31;
Suspenzija jedinjenja 30 (400 mg, 0,39 mmol) i 10% Pd/C (210 mg) u smeši EtOH (54 ml) i AcOH (6,0 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 31 (333 mg, 84%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,25 (dd,J=7,5,2,5 Hz, IH), 8,10 (d,J=7,3 Hz, IH), 7,60-7,51 (m, 2H), 7,36-7,32 (m, IH), 7,31 (d, / = 7,2 Hz, 2H), 7,26 (d,J=7,8 Hz, IH), 7,15 (d, / = 7,8 Hz, 2H), 4,70 (q,J=4,9 Hz, 2H), 4,54 (d, / = 7,3 Hz, IH), 4,18-4,10 (m, 2H), 4,06 (dd,J=10,6, 5,3 Hz, 2H), 3,87-3,82 (m, 2H), 3,81-3,68 (m, 3H), 3,53 (dd,J=9,5, 1,8 Hz, 2H), 3,39 (t,J=9,2 Hz, 3H), 3,35-3,30 (m, 2H), 3,15-3,08 (m, 2H), 2,92 (t,J=8,0 Hz, 2H), 2,09-2,00 (m, 4H), 2,77-2,58 (m, 2H), 1,95 (s, 6H), 1,88-1,60 (m, 4H), 1,36 (s, 9H), 1,25 (d, / = 4,9 Hz, 6H).
Dobijanje jedinjenja 32; Rastvor jedinjenja 31 (370 mg, 0,36 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (21, 226 mg, 0,58 mmol) u EtOH (12 ml) pomešan je sa DIPEA (0,51 ml, 2,88 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 32 (250 mg, 63%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,23 (d, / = 8,6 Hz, IH), 8,13-8,03 (m, IH), 7,54-7,49 (m, 2H), 7,30-7,20 (m, 4H), 7,13-7,04 (m, 2H), 4,67 (q,J=4,9 Hz, 2H), 4,54-4,49 (m, IH), 4,03 (dd,J=10,8, 5,4 Hz, 2H), 3,91-3,84 (m, 2H), 3,82-3,72 (m, 5H), 3,48-3,43 (m, 5H), 3,41-3,34 (m, 2H), 3,13-3,10 (m, 2H), 2,68-2,50 (m, 8H), 1,87-1,67 (m, 6H), 1,36 (s, 9H), 1,23 (d, 7=4,9 Hz, 6H).
Dobijanje HC1 soli jedinjenja 33 -3,5-diamino-N-(N-(4-(-4-((S)-2-amino-(3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid
[0240] 4 N HC1 u vodi (6,0 ml) dodatoje ujedinjenje 32 (200 mg, 0,18 mmol) u etanolu (2,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na 40 °C tokom 8 h. Rastvarač je uklonjen, dodato je još 4N HC1 pa je smeša zagrevana na 40 °C još 6 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (Gold kolona), a ostatak je liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 33 (138 mg, 59%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-d): 8 10,48 (brs, IH), 10,45-10,41 (m, IH), 9,25-9,19 (m, IH), 8,95-8,85 (m, IH), 8,81-8,69 (m, IH), 8,64-8,46 (m, 4H), 8,36-8,29 (m, IH), 8,18-8,10 (m, IH), 7,62-7,55 (m, 2H), 7,46-7,38 (m, 4H), 7,34 (d, /= 7,5 Hz, IH), 7,28 (d, /= 7,3 Hz, IH), 7,18 (d,J=8,7 Hz, 2H), 5,48-5,39 (m, 2H), 4,87-4,75 (m, 2H), 4,68-4,33 (m, 4H), 4,28-4,17 (m, IH), 4,05-3,93 (m, 2H), 3,72-3,65 (m, 2H), 3,62-3,53 (m, 4H), 3,52-3,35 (m, 8H), 3,27-3,13 (m, 6H), 3,3,10-3,00 (m, 2H), 2,62-2,48 (m, 4H), 2,03-1,90 (m, 2H), 1,78-1,61 (m, 4H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8,24-8,20 (m, IH), 8,18-8,15 (m, IH), 7,57 (td,J=4,6, 1,5 Hz, 2H), 7,38 (d, /= 7,4 Hz, IH), 7,33 (d, /= 7,4 Hz, IH), 7,28 (dd,J=8,4, 2,6 Hz, 2H), 7,16 (dd, /= 8,4, 2,0 Hz, 2H), 4,28 (t, /= 6,9 Hz, IH), 4,19-4,13 (m, IH), 4,12-4,07(m, IH), 3,85-3,79 (m, 2H), 3,77(dd, /= 10,4, 5,2 Hz, 2H), 3,73-3,60 (m, 6H), 3,49-3,45 (m, 2H), 3,42-3,34 (m, 6H), 3,26-3,23 (m, IH), 3,19-3,13 (m, 2H), 3,14-3,11 (m, IH), 2,74-2,59 (m, 2H), 2,14-2,00 (m, 2H), 1,90-1,72 (m, 4H).
5. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-okso-3-(4-(3-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksilamino)propil)fenilamino)propil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (38)
Dobijanje jedinjenja35;
Jedinjenje 34 (400 mg, 0,91 mmol) u THF (15 ml) redom je pomešano sa DEPBT (389 mg, 1,30 mmol), 17 (516 mg, 1,00 mmol) i DIPEA (0,52 ml, 3,00 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u CH2CI2(100 ml), brzo opran zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(2 x 50 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml) pa osušen nadNa2S04. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (8% metanol/CEbCh), čime je dobijen amid 35 (700 mg, 83%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,35 (dd, /= 8,2, 1,5 Hz, IH), 8,22 (d,J=8,1 Hz, IH), 7,64-7,35 (m, 4H), 7,38-7,26 (m, 5H), 7,06 (d, /= 7,8 Hz, 2H), 7,17-7,09 (m, 2H), 5,21-5,13 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,69 (q,J =5,1 Hz, IH), 4,55 (q, /= 7,25 Hz, IH), 4,15 (dd, /= 11,4, 5,6 Hz, IH), 4,11-4,02 (m, IH), 4,07-3,92 (m, IH), 3,88-3,77 (m, IH), 3,73-3,67 (m, IH), 3,64-3,49 (m, 5H), 3,41 (d, J= 10,6 Hz, 2H), 3,37-3,30 (m, 2H), 3,29-3,20 (m, 3H), 2,80 (t,J=6,2 Hz, 2H), 2,52 (t,J=7,8 Hz, 2H), 1,90-1,76 (m, 3H), 1,42 (s, 18 H), 1,32 (d, /= 5,2 Hz, 3H).
Dobijanje jedinjenja 36;
Suspenzija jedinjenja 35 (700 mg, 0,74 mmol) i 10% Pd/C (400 mg) u smeši EtOH (90 ml) i AcOH (10 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 36 (650 mg, 95%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,20 (d,J=8,4 Hz, IH), 7,96 (d, / = 7,3 Hz, IH), 7,86-7,71 (m, IH), 7,70-7,63 (m, IH), 7,58-7,43(m, 2H), 7,36-7,26 (m, 2H), 7,02-6,91 (m, 2H), 4,70-4,63 (m, IH), 4,61-4,54 (m, IH), 4,20-4,05 (m, 2H), 4,04-3,90 (m, IH), 3,89-3,68 (m, 3H), 3,67-3,46 (m, 3H), 3,45-3,27 (m, 5H), 3,29-3,21 (m, 4H), 3,11-2,91 (m, 4H), 2,90-2,76 (m, 2H), 2,48 (d,J=7,3 Hz, 2H), 2,08 (s, 6H), 1,86-1,61 (m, 6H), 1,41 (s, 15H), 1,32 (d,J=5,1 Hz, 3H), 1,25 (s, 3H).
Dobijanje 37;
Rastvor jedinjenja 36 (650 mg, 0,70 mmol) i metil 3, 5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (21, 436 mg, 1,13 mmol) u EtOH (12 ml) pomešan je sa DIPEA (0,90 ml, 5,60 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 37 (444 mg, 62%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,23 (dd, /= 7,7, 2,2 Hz, IH), 8,10 (d,J=8,1 Hz, IH), 7,57-7,47 (m, 2H), 7,33-7,21 (m, 4H), 7,08 (d, /= 8,1 Hz, 2H), 4,68 (q, J = 5,0 Hz, IH), 4,53 (t,J=7,2 Hz, IH), 4,04 (dd,J=10,8, 5,4 Hz, IH), 4,03-3,93 (m, IH), 3,25 (ddd,J =10,3, 9,2, 5,2 Hz, H), 3,71-3,65 (m, IH), 3,58-3,37 (m, 4H), 3,27-3,20 (m, 4H), 3,20-3,15 (m, IH), 3,14-3,05 (m, 2H), 2,66(q, J=7,5 Hz, IH), 2,53 (t,J=7,2 Hz, 2H), 1,89-1,76 (m, 4H), 1,76-1,64 (m, 2H), 1,36 (s, 6H), 1,42 (s, 9H), 1,25 (d,J=5,0 Hz, 3H), 1,11 (s, 3H). Dobijanje HC1 soli jedinjenja 38;
4 N HC1 u vodi (6,0 ml) dodato je ujedinjenje 37 (240 mg, 0,23 mmol) u etanolu (3,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na 40 °C tokom 8 h. Rastvarač je uklonjen, dodato je još 4N HC1 pa je smeša zagrevana na 40 °C još 8 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (Gold kolona), a ostatak je liofilizovan kako bi se dobilo
jedinjenje 38 (251 mg, 64%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz,DMSO-d):8 10,50 (brs, IH), 9,28 (t,J=5,7 Hz, IH), 9,02-8,87 (m, IH), 8,86-8,75 (m, IH), 8,72-8,55 (m, 4H), 8,39-8,33 (m, IH), 8,16-8,10 (m, IH), 7,61-7,55 (m, 2H), 7,45-7,40 (m, IH), 7,40 (d,J= 7,4 Hz, 2H), 7,34( d, J=7,3 Hz, IH), 7,28( d, J=7,4 Hz, IH), 7,14 (d,J=8,5 Hz, 2H), 5,38 (d,J=4,3 Hz, IH), 4,74 (d,J=4,9 Hz, IH), 4,64-4,51 (m, 2H), 4,49-4,35 (m, IH), 4,30-4,20 (m, 2H), 3,94-3,86 (m, IH), 3,70-3,64 (m, IH), 3,63-3,52 (m, 3H), 3,51-3,34 (m, 6H), 3,15-2,98 (m, 3H), 2,98-2,81 (m, 3H), 2,58 (t,J=7,6 Hz, 2H), 1,96-1,85 (m, 2H), 1,79-1,61 (m, 4H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,26-8,20 (m, IH), 8,19-8,14 (m, IH), 7,60-7,53 (m, 2H), 7,38 (d,J=7,2 Hz, IH), 7,33 (d,J=8,4 Hz, IH), 7,28 (dd,J=8,4, 2,0 Hz, 2H), 7,14( d, J =8,4 Hz, 2H), 4,29 (t,J=8,3 Hz, IH), 4,07-4,00 (m, IH), 3,83 (dd,J=9,8, 1,5 Hz, IH), 3,77 (dd,/= 9,8, 2,6 Hz, IH), 3,73-3,64 (m, 5H), 3,37 (t,J=7,2 Hz, 2H), 3,21-3,11 (m, 4H), 3,06-2,96 (m, 2H), 2,66 (t,J=7,7 Hz, 2H), 2,03-1,94 (m, 2H), 1,90-1,75 (m, 4H).
6. Dobijanje (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(6-(dimetilamino)heksil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (43)
Dobijanje jedinjenja 40;
Rastvor kiseline 17 (880 mg, 1,70 mmol) u THF (30 ml) ohlađen je na 0 °C u vodenom kupatilu. Dodat je NMM (0,37 ml, 3,40 mmol), a zatim PivCl (0,20 ml, 1,70 mmol), pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi 2 h. Dodato je 39 (375 mg, 1,70 mmol, 15 ml THF) pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi još 10 minuta. Reakciona smeša preneta je na sobnu temperaturu i mešana 16 h. Organski rastvarač je uklonjen. U ostatakje dodata voda pa je ekstrahovan sa CH2CI2(3 x 100 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (4% metanol u hloroforrnu) kako bi se dobio amid 40 (719 mg, 59%) u vidu svetložute čvrste supstance: [M + Hf 720.
Dobijanje jedinjenja 41;
Suspenzija jedinjenja 40 (719 mg, 1,00 mmol) i 10% Pd/C (300 mg) u smeši EtOH (110 ml) i AcOH (20 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so41u vidu žute čvrste supstance (660 mg, 93%): [M + H]<+>589.
Dobijanje jedinjenja 42;
Rastvor amina41(660 mg, 0,93 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (21, 650 mg, 1,67 mmol) u EtOH (10 ml) pomešan je sa DIPEA (1,66 ml, 9,3 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 42 (370 mg, 50%) u vidu žute čvrste supstance: [M + Hf 801.
Dobijanje HC1 soli jedinjenja 43 (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(6-(dimetilamino)heksil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid
TFA (10 ml) dodato je u 42 (370 mg, 0,46 mmol) u CH2CI2(10 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, dodato je još IN HC1, i rastvarač je uklonjen. Smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (Gold kolona), a ostatakje liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 43 (290 mg, 92%>) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 5 10,39 (brs, 2H), 9,25 (brs, IH), 9,02-8,87 (m, IH), 8,86-8,73 (m, 2H), 8,71-8,44 (m, 2H), 8,35 (brs, IH), 8,13 (dd,J=6,8, 3,8 Hz, IH), 7,58 (dd,J=6,5, 3,2 Hz, 2H), 7,42 (brs, 2H), 7,35 (d,J=8,6 Hz, 2H), 7,33 (d, /= 7,8 Hz, IH), 7,27 (d,J=7,3 Hz, IH), 7,11 (d, /= 8,4 Hz, 2H), 4,26-4,18 (m, IH), 3,65-3,48 (m, 2H), 3,39-3,32 (m, 3H), 3,06 (t,J=6,5 Hz, 2H), 2,99-2,91 (m, 2H), 2,69 (s, 6H), 1,77-1,56 (m, 6H), 1,52 (t,J=8,2 Hz, 2H), 1,34-1,21 (m,4H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8,22-8,17 (m, IH), 8,16-8,12 (m, IH), 7,58-7,51 (m, 2H), 7,36 (d,J=7,2 Hz, IH), 7,30 (d,J=7,4 Hz, IH), 7,19 (d,J=8,04 Hz, 2H), 7,05 (d,J=8,3 Hz, 2H), 4,24 (t,J=8,2 Hz, IH), 3,70-3,58 (m, 2H), 3,33 (t,J=6,9 Hz, 2H), 3,14 (t,J=7,4
Hz, 2H), 3,09-3,03 (m, 2H), 2,84 (s, 6H), 2,53 (t,J=8,6 Hz, 2H), 1,88-1,73 (m, 4H), 1,72-1,63 (m, 2H), 1,61-1,52 (m, 2H), 1,41-1,32 (m, 4H).
7. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(6-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)heksil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida
Dobijanje jedinjenja 45;
Rastvor kiseline 17 (900 mg, 1,74 mmol) u THF (40 ml) ohlađen je na 0 °C u vodenom kupatilu. Dodat je NMM (0,38 ml, 3,48 mmol), a zatim PivCl (0,21 ml, 1,74 mmol), pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi 2 h. Dodato je44(1.21 g, 1,74 mmol, 20 ml THF) pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi još 10 minuta. Reakciona smeša preneta je na sobnu temperaturu i mešana 16 h. Organski rastvarač je uklonjen. U ostatakje dodata voda pa je ekstrahovan sa CH2CI2(3 x 100 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (4% metanol u hloroformu) kako bi se dobio amid45(2,00 g, nečist) u vidu žute čvrste supstance: [M + H]+ 1196.
Dobijanje jedinjenja 46;
Suspenzija45(2,00 g, nečisto) i 10% Pd/C (400 mg) u smeši EtOH (120 ml) i AcOH (20 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so46,koja je neutralisana sa NaHC03pa je sirov proizvod prečišćen brzom hromatografijom na silika gelu (CMA, 80:18:2), čime je dobijen slobodan amin46u vidu žute čvrste supstance (500 mg, 27%> kroz dva koraka): [M + H]+ 1067.
Dobijanje jedinjenja 47;
Rastvor amina46(500 mg, 0,47 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (21, 330 mg, 0,84 mmol) u EtOH (20 ml) pomešan je sa DIPEA (0,84 ml, 94,70 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom u silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 47 (325 mg, 55%) u vidu žute čvrste supstance: [M + Hf 1278.
Dobijanje HC1 soli jedinjenja 48 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(6-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)heksil)fenilamino)-3-
oksopropil)nafthalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida
4 N HC1 u vodi (20 ml) dodato je u 47 (325 mg, 0,25 mmol) u EtOH (2,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (Gold kolona), a ostatakje liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 48 (165 mg, 60%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz,DMSO-d):8 10,52 (brs, IH), 10,44 (brs, IH), 9,28 (t,J=5,2 Hz, IH), 9,00-8,88 (m, IH), 8,87-8,75 (m,
IH), 8,63 (brs, 2H), 8,60-8,50 (m, IH), 8,39-8,33 (m, IH), 8,17-8,11 (m, IH), 7,58 (dd,J =6,5, 3,3 Hz, 2H), 7,47-7,35 (m, 2H), 7,36 (d,J=8,7 Hz, 2H), 7,33 (d,J=6,8 hz, IH), 7,27 (d,J=3,6 Hz, IH), 7,11 (d,J=8,8 Hz, 2H), 3,72-3,66 (m, 3H), 3,60 (d,J=3,6 Hz, IH), 3,57(d, J=2,8 Hz, IH), 3,53-3,46 (m, 3H), 3,45-3,38 (m, 3H), 3,37-3,27 (m, 4H), 3,26- 3,12 (m, 4H), 3,06 (t,J=8,5 Hz, 2H), 1,76-1,60 (m, 6H), 1,58-1,47 (m, 2H), 1,35-1,23 (m, 4H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8,23-8,18 (m, IH), 8,17-8,12 (m, IH), 7,59-7,52 (m, 2H), 7,36(d, J= 7,8 Hz,IH), 7,31(d, J=7,2 Hz, IH), 7,18(d, J= 8,2 Hz, 2H),7,04(d, J=8,2 Hz, 2H), 4,25 (t,J=7,8 Hz, IH), 4,18-4,10 (m, 2H), 3,83-3,79 (m, 2H), 3,77 (d, J = 3,1 Hz, IH), 3,74 (d, J = 3,5 Hz, IH), 3,71-3,60 (m, 8H), 3,49-3,41 (m, 2H), 3,40-3,33 (m, 4H), 3,32-3,30 (m, IH), 3,25-3,19 (m, IH), 3,18-3,10 (m, 2H), 2,52 (t,J=7,4 Hz, 2H), 1,88-1,69 (m, 6H), 1,62-1,53 (m, 2H), 1,44-1,30 (m, 4H).
8. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-okso-3-(4-(6-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksilamino)heksil)fenilamino)propil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida
Dobijanje jedinjenja50;
Rastvor kiseline 17 (950 mg, 1,84 mmol) u THF (30 ml) ohlađen je na 0 °C u vodenom kupatilu. Dodat je NMM (0,40 ml, 3,68 mmol), a zatim PivCl (0,23 ml, 1,84 mmol), pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi 2 h. Dodato je 49 (800 mg, 1,47 mmol, 10 ml THF) pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi još 10 minuta. Reakciona smeša preneta je na sobnu temperaturu i mešana 16 h. Organski rastvarač je uklonjen. U ostatakje dodata voda pa je ekstrahovan sa CH2CI2(3 x 100 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (4% metanol u hloroforrnu) kako bi se dobio amid 50 (1,40 g, nečist) u vidu žute čvrste supstance: [M + H]+ 1043.
Dobijanje jedinjenja 51;
Suspenzija 50 (1,40 g, nečisto) i 10% Pd/C (400 mg) u smeši EtOH (120 ml) i AcOH (20 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 51, koja se neposredno koristi u sledećem koraku (1,20 g, sirova): [M + H]<+>913.
Dobijanje jedinjenja 52;
Rastvor amina 51 (1,20 g, 0,47 mmol, sirov) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (21, 723 mg, 1,86 mmol) u EtOH (20 ml) pomešan je sa DIPEA (2,00 ml, 11,6 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom u silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 52 (500 mg, 24% kroz tri koraka) u vidu žute čvrste supstance: [M + H]<+>1125.
Dobijanje HC1 soli jedinjenja 53 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-okso-3-(4-(6-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksilamino)heksil)fenilamino)propil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida 4 N HC1 u vodi (25 ml) dodato je u 52 (500 mg, 0,44 mmol) u EtOH (5,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (Gold kolona), a ostatakje liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 53 (170 mg, 41%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-d): 8 10,52 (brs, IH), 10,45-10,41 (m, IH), 9,31-9,24 (m, IH), 9,02-8,89 (m, IH), 8,88-8,76 (m, IH), 8,70-8,58 (m, 3H), 8,57-8,46 (m, 2H), 8,40-8,31 (m, IH), 8,17-8,10 (m, IH), 7,62-7,54 (m, 2H), 7,42 (brs, 2H), 7,36 (d,/=8,7 Hz, 2H), 7,33 (d,/=6,7 Hz, IH), 7,27 (d,/=7,5 Hz, IH), 7,11 (d,/=8,7 Hz, 2H), 5,41-5,35 (m, IH), 4,79-4,72 (m, IH), 4,62-4,53 (m, 2H), 4,47-4,38 (m, IH), 4,29-4,19 (m, IH), 3,94-3,87 (m, IH), 3,63-3,52 (m, 3H), 3,50-3,39 (m, 3H), 3,38-3,32 (m, 2H), 3,12-2,96 (m, 3H), 2,97-2,90 (m, IH), 2,89-2,80 (m, 2H), 1,77-1,56 (m, 6H), 1,54-1,45 (m, 2H), 1,35-1,20 (m, 4H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,24-8,20 (m, IH), 8,19-8,14 (m, IH), 7,60-7,53 (m, 2H), 7,38 (d,/=7,6 Hz, IH), 7,33 (d,/=7,2 Hz, IH), 7,24-7,18 (m, 2H), 7,07 (d,/=8,1 Hz, 2H), 4,31-4,22 (m, IH), 4,08-4,01 (m, IH), 3,84 (dd,J=4,8, 1,3 Hz, IH), 3,77 (dd,J=10,1,
2,5 Hz, IH), 3,71-3,62 (m, 5H), 3,36 (t,J=7,2 Hz, 2H), 3,19-3,12 (m, 4H), 3,03-2,96 (m, 2H), 2,55 (t,J=7,7 Hz, 2H), 1,90-1,74 (m, 4H), 1,73-1,64 (m, 2H), 1,63-1,53 (m, 2H), 1,45-1,31 (m, 4H).
9. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(6-(heksil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)heksil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksaniida
Dobijanjejedinjenja 55; Jedinjenje 54 (770 mg, 1,45 mmol) u THF (50 ml) redom je pomešano sa DEPBT (564 mg, 1,88 mmol), 17 (752 mg, 1,45 mmol) i DIPEA (0,77 ml, 4,35 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatakje rastvoren u CH2CI2(100 ml), brzo opran zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(2 x 100 ml) i NaCl (50 ml) pa osušen nad Na2SC>4. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (5% metanol/C^Ch) i hromatografijom reverznih faza (Gold kolona), čime je dobijen amid 55 u vidu žute čvrste supstance (800 mg, 54%): [M + H]<+>1027.
Dobijanje jedinjenja 56;
Suspenzija 55 (800 mg, 0,78 mmol) i 10% Pd/C (400 mg) u smeši EtOH (120 ml) i AcOH (30 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 56 u vidu žute čvrste supstance (780 mg, 99%): [M + H]<+>897.
Dobijanje jedinjenja 57;
Rastvor aminske soli 56 (780 mg, 0,75 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (21, 466 mg, 1,20 mmol) u EtOH (20 ml) pomešan je sa DIPEA (1,37 ml, 7,67 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom u silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 57 (455 mg, 55%) u vidu žute čvrste supstance: [M + Hf 1110.
Dobijanje HC1 soli jedinjenja 58 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(6-(heksil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)heksil)fenilanrino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida 4 N HC1 u vodi (25 ml) dodato je u 57 (455 mg, 0,41 mmol) u etanolu (10 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (Gold kolona), a ostatakje liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 58 (230 mg, 55%) u vidu žute čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, DMSO-c/6): 5 10,45 (brs, IH), 9,30 (brs, IH), 9,09-8,49 (m, 3H), 8,41-8,32 (m, IH), 8,16-8,08 (m, IH), 7,62-7,52 (m, 2H), 7,42 (brs, 2H), 7,37 (t, /= 8,4 Hz, 2H), 7,32 (d, /= 7,8 Hz, IH), 7,27 (d, /= 7,2 Hz, IH), 7,10 (d, /= 8,1 Hz, 2H), 5,52-5,36 (m, IH), 4,87-4,70 (m, IH), 4,63-4,51 (m, 2H), 4,47-4,38 (m, IH), 4,23 (t, /= 6,7 Hz, IH), 4,03-3,94 (m, IH), 3,71-3,66 (m, IH), 3,65-3,52 (m, 2H), 3,50-3,34 (m, 5H), 3,21(d,J=3,2 Hz, IH), 3,12 (d,J=3,2 Hz, IH), 3,09-2,96 (m, 6H), 1,77-1,58 (m, 8H), 1,57-1,46 (m, 2H), 1,35-1,21 (m, 10 H), 0,86 (t,J=6,4 Hz, 3H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,26-8,20 (m, IH), 8,19-8,12 (m, IH), 7,60-7,51 (m, 2H), 7,38 (d,J=7,2 Hz, IH), 7,32 (d,J=7,4 Hz, IH), 7,21 (d,J=8,3 Hz, 2H), 7,06 (d,J=8,5 Hz, 2H), 4,26 (t,J=7,4 Hz, IH), 4,16-4,09 (m, IH), 3,82 (dd,J=5,0, 1,5 Hz, IH), 3,78 (dd,J=11,3, 3,2 Hz, IH), 3,72-3,61 (m, 6H), 3,35 (t,J=6,7 Hz, 2H), 3,24-3,11 (m, 7H), 2,54 (t,J=7,4 Hz, 2H), 1,90-1,67 (m, 8H), 1,64-1,54 (m, 2H), 1,44-1,30 (m, 10 H), 0,92 (t,J=6,7 Hz, 3H).
10. Dobijanje (S)-2-amino-3-(6-(4-(3-(3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonil)guanidino)butil)naftalen-2-il)propanoične kiseline (80)
Dobijanje jedinjenja62;
Stabilan Vitigov ilid karbomtoksimetilenetrifenilfosforan (PhsPCHCChMe, 43,0 g, 129 mmol) dodat je u rastvor aldehida 59 (20,0 g, 107 mmol) u CH2CI2(200 ml) u azotnoj atmosferi pa je reakciona smeša mešana 16 h na temperaturi okoline. Tankoslojnom hromatografijom praćeno je izvršenje reakcije (16 h). CH2CI2 je uklonjen pod sniženim pritiskom, a FCC sa 10% etil acetat-heksanima dala je odgovarajući trans-a,P-nezasićeni estar 62 (24,0 g, 92%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 6 7,88-7,82 (m, IH), 8,81( d, J=15,8 Hz, IH), 7,73 (d,J=9,0 Hz, IH), 7,70 (d,J=8,8 Hz, IH), 7,61 (dd, / = 8,8, 2,2 Hz, IH), 7,15(dd, J=9,2, 2,2 Hz, IH), 7,11 (d,/=2,2 Hz, IH), 6,49( d, J =15,8 Hz, IH), 3,82 (s, 3H), 3,82 (s, 3H).
Dobijanje jedinjenja 62 (dodatni put);
Trimetil-fosfonoacetatu (55,6 ml, 381 mmol) u 250 ml anhidrovanog CH2CI2ohlađenom na 0°C dodat je DBU (48,8 ml, 322 mmol) pa je smeša mešana 15 min. Aldehid 59 (40,0 g, 215 mmol) u 50 ml CH2CI2dodat je u kapima. Temperatura reakcione smeše podešena je na sobnu temperaturu, dobijena reakciona smeša mešana je na sobnoj temperaturi 16 h, pa je ugašena sa 100 ml vode. Smeša je razdvojena, a vodeni sloj ekstrahovan je pomoću CH2CI2(3 x 150 ml). Pomešana organska jedinjenja oprana su rastvorom NaCl, osušena (Na2S04), filtrirana, koncentrovana, a ostatakje prečišćen hromatografijom na silika gel koloni (10:1 heksani/etil-acetat) kako bi se dobio željeni trans-a,P-nezasićeni estar 62 (48,0 g, 92%) u vidu bele čvrste supstance.
Dobijanje jedinjenja 64;
Suspenzija jedinjenja 62 (48,0 g, 196 mmol) i 10% Pd/C (10 g) u EtOAc/THF (600 ml/75 ml) podvrgnuta je uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo 64 (46,5 g, 96%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCB) 8 7,67 (d, /= 9,4 Hz, 2H), 7,57-7,54 (m, IH), 7,29(dd,J=8,6, 1,8 Hz, IH), 7,12 (dd,J=8,8, 2.5 Hz, IH), 7,11-7,09 (m, IH), 3,90 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 3,07 (t,J=7,7 Hz, 2H), 2,70 (t,J =7,7 Hz, 2H).
Dobijanje jedinjenja 66;
U rastvor metil-estra 64 (46,5 g, 191 mmol) u THF/MeOH/H20 (500 ml/500 ml/150 ml) dodat je NaOH (45,6 g, 114 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen pa je pH vrednost podešena na 1 pomoću 1 N aq HC1; istaložila se bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena u vakuumu da bi se dobila kiselina 66 (42,5 g, 97%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6)8 12,14 (brs, IH), 7,73 (dd,J=9,5, 2,3 Hz, 2H), 7,64-7,61 (m, IH), 7,35 (dd,J=8,5, 1,5 Hz, IH), 7,26 (d,J=2,8 Hz, IH), 7,12 9 (dd,J=9,1, 2,5 Hz, IH), 3,85 (s, 3H), 2,94 (t,J =7.6 Hz, 2H), 2,60 (t,/=7,6 Hz, 2H).
Dobijanje jedinjenja 67;
U rastvor jedinjenja 60 (39,3 g, 222 mmol) u suvom THF (500 ml) dodat je «-butil litijum (110 ml, 2M rastvora u) u kapima na -78°C pa je reakciona smeša mešana lh da bi se dobio rastvor jedinjenja 61. U drugi rastvor jedinjenja 66 (42,5 g, 185 mmol) u suvom THF(1000 ml) dodati su NMM (26,3 ml, 240 mmol) i PivCl (27,3 ml, 222 mmol) u kapima na -78 °C. Reakciona smeša mešana je 1 min na istoj temperaturi pa je polako dodavan pripremljeni rastvor jedinjenja 66 na -78°C. Reakciona smeša mešana je još 10 min, zatim je zagrejana na 0 °C i mešana 1 h, pa je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, ugašena je zasićenim NH4CI, pa je koncentrovana da bi se uklonio THF i razdeljena između CH2CI2(1000 ml) i vode (1000 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 1000 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, CH2CI2) kako bi se dobilo jedinjenje 67 (45,0 g, 63%>) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCB) 8 7,68 (d, /= 8,6 Hz, 2H), 7,64-7,61 (m, IH), 7,31 (dd,/= 8,5, 1,8 Hz, IH), 7,33-7,24 (m, 4H), 7,17-7,12 (m, 2H), 7,11-7,09 (m, IH), 4,69 -4,61 (m, IH), 4,15 (d, /=2,4 Hz, IH), 4,13 (s, IH), 3,90 (s, 3H), 3,46-3,21 (m, 3H), 3,20-3,08 (m, 2H), 2,74 (dd,J=13,6, 9,4 Hz, IH).
Dobijanje jedinjenja 68;
U rastvor jedinjenja 67 (45,0 g, 116 mmol) u suvom THF (700 ml) dodat je KHMDS (34,6 g, 174 mmol) u porcijama na -78°C. Nakon što je dobijena smeša mešana 30 min, dodat je trizil azid (53,6 g, 174 mmol) pa je reakciona smeša mešana 5 min. Zatim su polako na istoj temperaturi dodavani sirćetna kiselina (69,6 ml, 1158 mmol) pa tetrametil-amonijum-acetat (30,9 g, 232 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 24°C, mešana 16 h, ugašena zasićenim NaHCO} (300 ml), pa koncentrovana da bi se uklonio THF i ekstrahovana pomoću CH2CI2(2 x 500 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad NaiSCUi koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 10:90 EtOAc/heksan, zatim DCM) kako bi se dobilo jedinjenje 68 (31,0 g, 62%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7,70 (d,J=9,1 Hz, 2H), 7,68-7,65 (m, IH), 7,40 (dd,J=8,6, 1,8 Hz, IH), 7,36-7,23 (m, 3H), 7,20 (d,J=1,8 Hz, IH), 7,19-7,17 (m, IH), 7,13 (dd,J=9,0, 2,6 Hz, IH), 7,10 (d,J=2,4 Hz, IH), 5,36 (dd, /= 9,0, 6,0 Hz, IH), 4,58-4,50 (m, IH), 4,11 (dd, /= 9,1, 2,6 Hz, IH), 3,90 (s, 3H), 3,91 (t,J=8,6 Hz, IH), 3,34 (dd, /= 13,8, 6,5 Hz, IH), 3,30 (dd,J =13,0, 3,5 Hz, IH), 3,19 (dd,J=13,4, 8,6 Hz, IH), 2,81 (dd, /= 13,4, 9,5 Hz, IH). Dobijanje jedinjenja 69;
U rastvor jedinjenja 68 (31,0 g, 72,1 mmol) u THF/H2O (300 ml/100 ml) dodat je H2O2(49 ml, 433 mmol), a zatim LiOH (6,04 g, 144 mmol) u porcijama na 0°C. Reakciona smeša mešana je 10 min na istoj temperaturi, zatim na sobnoj temperaturi 1 h, pa je ugašena zasićenim Na2S03(200 ml), koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se uklonio THF i oprana pomoću CH2CI2(500 ml). Vodeni sloj je zakišeljen sa IN aq HC1 i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 500 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04, koncentrovani i oprani sa MTBE da bi se dobilo jedinjenje 69(15,0 g, 82%) u vidu prljavobele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz,MeOD-^)8 7,70 (t, /= 8,4 Hz, 2H), 7,66-7,63 (m, IH), 7,35 (dd, /= 8,6, 1,7 Hz, IH), 7,19 (d,J=2,8 Hz, IH), 7,10 (dd, /= 9,1, 2,6 Hz, IH), 4,25 (dd, /= 8,6, 5,3 Hz, IH), 3,88 (s, 3H), 3,29 (dd, /= 13,9, 5,1 Hz, IH), 3,10 (dd,/= 14,3, 8,6 Hz, IH).
Dobijanje jedinjenja 70;
Suspenzija jedinjenja 69 (15,0 g, 55,1 mmol) i 10% Pd/C (3,50 g) u AcOH/H20 (300 ml/100 ml) podvrgnuta je uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa ACOH/H2O, a zatim sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila acetatna so 70 (14,0 g, 83%>) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-^,TFA) 8 8,38-8,18 (m, 3H), 7,78 (dd,J=11,4, 8,1 Hz, 2H), 7,75-7,70 (m, IH), 7,41 (dd,J=8,6, 1,6 Hz, IH), 7,29 (d,J=2,3 Hz, IH), 7,18 (dd,J=8,8, 2,4 Hz, IH), 4,33-4,23 (m, IH), 3,89 (s, 3H), 3,33 (dq,J=14,5, 5,9 Hz, 2H), 1,92 (s, 3H).
Dobijanje jedinjenja 71;
U rastvor jedinjenja 70 (14,0 g, 45,9 mmol) u sirćetnoj kiselini (140 ml) dodata je bromovodonična kiselina (140 ml) u kapima na sobnoj temperaturi pa je reakciona smeša refluksovana 3 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana. Sirov smeđi ostatak 71 (12,4 g, 87%) direktno je iskorišćen u sledećem koraku bez ikakvog prečišćavanja: 'H NMR (400 MHz, DMSO-ife) 8 13,83 (brs, IH), 9,71 (brs, IH), 8,41 (brs, IH), 8,25 (brs, 2H), 7,67 (dd,J=13,8, 8,7 Hz, 2H), 7,64-7,61 (m, IH), 7,29 (dd,J=8,6, 1,7 Hz, IH), 7,13-7,05 (m, 2H), 4,29-4,19 (m, IH), 3,20 (t,J=5,5 Hz, 2H). Dobijanje jedinjenja 72;
Acetil-hlorid (38,4 ml, 540 mmol) dodat je u anhidrovani metanol (400 ml) na 0°C pa je dodato jedinjenje 71 (24,0 g, 77,2 mmol). Reakciona smeša je refluksovana 4 h pa koncentrovana. Ostatakje podeljen između CH2CI2(500 ml) i zasićenog NaHC03(300 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 300 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 72 (16,6 g, 88%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-ds) 8 9,62 (brs, IH), 7,67 (d,J=9,4 Hz, IH), 7,58 (d,J=8,8 Hz, IH), 7,53 (s, IH), 7,22 (dd,J=8,2, 1,4 Hz, IH), 7,09-7,06 (m, IH), 7,04 (dd,J=8,8, 2,6 Hz, IH), 3,67 (t,J=6,5 Hz, IH), 3,57 (s, 3H), 2,97 (dd,J=13,5, 6.1 Hz, IH), 2,86 (dd,J=13,2, 7,4 Hz, IH), 1,90 (brs, 2H).
Dobijanje jedinjenja 73;
U rastvor jedinjenja 72 (16,6 g, 67,8 mmol) u MeOH/H20 (360 ml/120 ml) dodati su NaHCOs (22,8 g, 271 mmol) i Boc20 (17,7 g, 81,3 mmol) na 0 °C. Dobijena smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu pa je mešana 1 h. Reakciona smeša je podeljena između CH2CI2(200 ml) i vode (200 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 400 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani. FCC pomoću 20% etil-acetat-heksana zatim CH2CI2dala je jedinjenje 73 (17,0 g, 73%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7,60 (d,J=9,5 Hz, IH), 7,51( d, J=8,2 Hz, IH), 7,49-7,43 (m, IH), 7,15 (d, /= 8.2 Hz, IH), 7,09-6,99 (m, 2H), 6,31 (brs, IH), 5,15-4,84 (m, IH), 4,73-4,46 (m, IH), 3,71 (s, 3H), 3,23 (dd,J=13,7, 5,3 Hz, IH), 3,14 (dd,J=13,7, 5,5 Hz, IH), 1,39 (s, 9H). Dobijanje jedinjenja 74;
U rastvor jedinjenja 73(7,0 g, 20,3 mmol) u CH2CI2(300 ml) dodat je piridin (16,5 ml, 203 mmol) dodat je triflat (5,11 ml, 30,4 mmol) na 0 °C pa je mešano na istoj temperaturi 1 h, a zatim na sobnoj temperaturi 2 h. Nakon koncentrovanja, reakciona smeša je podeljena između CH2CI2(300 ml) i vode (200 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 300 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nadNa2S04i koncentrovani kako bi se dobilo jedinjenje 74 (8,80 g, 91%>) u vidu smeđeg ulja (piridin prisutan kako je potvrđeno pomoću NMR). Reakcija je praćena pomoću LC-MS, a stvaranje proizvoda potvrđeno je podacima iz LM-MS: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 7,85 (d,/=9,2 Hz, IH), 7,80 (d,J=8,7 Hz, IH), 7,71 (d,J=2,7 Hz, IH), 7,66-7,63
(m, IH), 7,37 (ddd, .7 = 10,0, 7,3, 2,0 Hz, 2H), 5,12-5,03 (m, IH), 4,73-4,61 (m, IH), 3,72 (s, 3H), 3,32 (dd,J=13,3, 5,3 Hz, IH), 3,20 (dd,J=13,3, 6,2 Hz, IH), 1,38 (s, 9H).Dobijanje jedinjenja75;
Jedinjenje 74 (16,5 g, 34,6 mmol) i benzil but-3-inilkarbamat (T7, 10,4 g, 51,9 mmol) u anhidrovanom CH3CN (450 ml) degasirani su argonom 10 min na sobnoj temperaturi pa su dodati TEA (19,3 ml, 138 mmol), 10% (M3u)3P u heksanima (13,9 ml, 6,91 mmol) i Cul (0,33 g, 1,72 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša degasirana je argonom 10 min pa je brzo dodat Pd(PPh3)4(3,99 g, 3,45 mmol) u jednoj porciji. Nakon degasiranja sa argonom 5 min, dobijena smeša refluksovana je 18 h. Reakciona smeša koncentrovana je u vakuumu pa je ostatak prečišćen u koloni (silika gel, 75:25 heksani/EA) kako bi se dobilo jedinjenje 75 (14,1 g, 77%) u vidu smeđe čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7,86 (brs, IH), 7.68 (t, / = 7,8 Hz, 2H), 7,53 (brs, IH), 7,41 (dd,J=8,5, 1,6 Hz, IH), 7,38-7,28 (m, 5H), 7,27-7,22 (m, IH), 5,26-5,17 (m, IH), 5,13 (s, 2H), 5,06-4,99 (m, IH), 4,70-4,59 (m, IH), 3.69 (s, 3H), 3,46( q, J=6,7 Hz, 2H), 3,27 (dd,/= 14,1, 5,9 Hz, IH), 3,16(dd, J=13,2, 6,2 Hz, IH), 2,67 (t, /= 6,6 Hz, 2H), 1,38 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja76;
U rastvor metil-estra 75 (12,1 g, 22,8 mmol) u THF/MeOH/H20 (150 ml/150 ml/50 ml) dodat je NaOH (4,56 g, 114 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Vrednost pH podešena je na 9 pomoću 1 N aq HC1 pa je uklonjen organski rastvarač. Vrednost pH ostatka podešena je na 5-6 pa je suspenzija podeljena između CH2CI2(500 ml) i vode (200 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 400 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 76 (10,50 g, 89%) u vidu smeđe čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7,83 (s, IH), 7,73-7,61 (m, 3H), 7,44-7,19 (m, 7H), 5,10 (s, 2H), 4,42-4,34 (m, IH), 3,41-3,32 (m, 3H), 3,06 (dd, /= 14,3, 9,3 Hz, IH), 2,64 (t, /= 7,0 Hz, 2H), 1,31 (s, 7H), 1,21 (s, 2H).
Dobijanje jedinjenja77;SG-SJL-B-27
Suspenzija 75 (2,0 g, 3,77 mmol) i 10% Pd/C (500 mg) u smeši EtOH (90 ml) i AcOH (10 ml) degasirana je pa podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 77 (1,60 mg, 93%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,73 (d,J= 8,5, IH), 7,72 (d,J= 8,7 Hz, IH), 7,62 ((brs, 2H), 7,73 (ddd,J=10,0, 8,7, 2,7 Hz, 2H), 4,44 (dd,J=8,8, 5,6 Hz, IH), 3,68 (s, 3H), 3,25 (dd,J=14,0, 6,6 Hz, IH), 3,04 (dd,J= 13,5, 9,2Hz, IH), 2,93 (t, /= 7,4 Hz, 2H), 2,83 (t,J=7,4 Hz, 2H), 1,96 (s, 6H), 1,85-1,75 (m, 2H), 1,74-1,68 (m, 2H), 1,33 (s, 7H), 1,26 (s, 2H).
Dobijanje jedinjenja 78; SG-SJL-B-30
U rastvor aminske soli 77 (1,60 g, 3,47 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (13, 2,16 g, 5,56 mmol) u EtOH (40 ml) dodat je DIPEA (6,20 ml, 34,70 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 1 h pa je rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 78 (1.24 g, 59%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7,71 (dd,J=8,4, 2,8 Hz, 2H), 7,60 (brs, 2H), 7,34 (dd,J=8,5, 1,9 Hz, IH), 7,30 (dd, /= 8,7, 1,7 Hz, IH), 4,45 (dd,J=8,9, 5,7 Hz, IH), 3,68 (s, 3H), 3,28-3,26 (m, IH), 3,25 (t,J=2,4 Hz, IH), 3,22 (d,J =5,9 Hz, IH), 3,04 (dd,J =14,0, 9,2 Hz, IH), 2,82 (t, J= 7,2 Hz, 2H), 1,86 -1,77 (m, 2H), 1,73-1,63 (m, 2H), 1,32 (s, 7H), 1,23 (s, 2H).
Dobijanje jedinjenja 79; SG-SJL-B-32
U rastvor metil-estra 78 (1,24 g, 2,00 mmol) u smeši THF (25 ml), metanola (25 ml) i vode (10 ml) dodat je čvrst NaOH (324 mg, 8,00 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 1 h. TLC reakcione smeše pokazala je završetak reakcije, pa je pH reakcione smeše podešen na pH 9-10 dodavanjem 1 N HC1 (vodeni rastvor), a organski rastvarač je uklonjen. Vrednost pH vodenog dela podešena je na pH 5-6, talog se izdvojio i ekstrahovan je dihlorometanom. Vodeni deo ekstrahovan je pomoću CH2CI2(2X 50 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani i koncentrovani. Čvrsto jedinjenje žute boje (79, 1,10 g, 92%) osušeno je u vakuumu: 'H NMR ((400 MHz, CD3OD) 7,70 (t, /= 9,4, 2H), 7,61 (d, /= 5,3 Hz, 2H), 7,33 (dd, /= 8,4, 1,4 Hz, 2H), 4,38 (dd,J=8,4, 5,1 Hz,lH), 3,05 (dd,J =14,1, 9,1 Hz, IH), 2,84 (t,J=6,9 Hz, 2H), 3,35-3,34 (m, 3H), 1,88-1,79 (m, 2H), 1,76-1,67 (m, 2H), 1,32 (s, 7H), 1,21 (s, 2H).
Dobijanje jedinjenja 80 - hidrohloridne soli (S)-2-amino-3-(6-(4-(3-(3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonil)guanidino)butil)naftalen-2-il)propanoične kiseline 4 N HC1 u dioksanu (25 ml) dodato je u 79 (1,10 g, 1,83 mmol) u EtOH (5,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (gold kolona), a ostatakje liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 80 (700 mg, 67%>) u vidu žute čvrste supstance: H NMR (400 MHz, DMSO-d6)10,48 (s, IH), 9,24 (brs, IH), 8,99-8,86 (m, IH), 8,84-8,70 (m, IH), 8,38 (brs, 3H), 7,80 (t,J=9,2 Hz, 2H), 7,73 (s, IH), 7,69 (s, IH), 7,45-7,35 (m, 4H), 4,25 (dd, / = 11,4, 5,9 Hz, IH), 3,34 (q, /= 6,6 Hz, 2H), 3,27 (d,J=6,9 Hz, 2H), 2,79 (t,J= 1, 10Hz, 2H), 1,79-1,67 (m, 2H), 1,65-1,54 (m, 2H).
'H NMR ((400 MHz, CD3OD) 7,82(d, J=8,5 Hz, IH), 7,78 (d, J= 8,7 Hz, IH), 7,73 (s, IH), 7,68 (s, IH), 7,40 (ddd, /= 10,5, 8,6, 1,6 Hz, 2H), 4,33 (dd,J=1, 1, 5,2 Hz, IH), 3,46 (dd, /= 14,9, 6,0 Hz, IH), 3,37 (t, /= 7,5 Hz, 2H), 3,33-3,29 (m, IH), 2,87 (t, /= 7,7 Hz, 2H), 1,90-1,80 (m, 2H), l,79-l,71(m, 2H).
11. Dobijanje (S)-3,5-diamino-6-hloro-N-(N-(4-(6-(2,3-diamino-3-oksopropil)naftalen-2-il)butil)karbamimidoil)pirazin-2-karboksamida (84)
Dobijanje jedinjenja 81;
Rastvor kiseline 76 (2,0 g, 3,87 mmol) u THF (80 ml) ohlađen je na 0 °C u ledenom kupatilu, dodat je NMM (0,63 ml, 5,03 mmol) zatim /-BCF u kapima (0,63 ml, 5,80 mmol) pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi 2 h. Dodat je NH3(7,0 N u metanolu, 5,52 ml, 38,7 mmol) u kapima pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi još 2 h. Reakciona smeša je zatim preneta na sobnu temperaturu i mešana još 16 h. Organski rastvarač je uklonjen. U ovaj ostatak dodata je voda pa je ekstrahovan sa CH2CI2(3 x 100 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (3% metanol u hloroformu) kako bi se dobio amid 81 (1,75 g, 88%) u vidu svetložute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,83 (s, IH), 7,69 (d, /= 8,1 Hz, 2H), 7,66 (s, IH), 7,39 (dt, /= 8,8, 1,9 Hz, 2H), 7,35-7,21 (m, 5H), 5,09 (s, 2H), 4,40 (dd, /= 9,6, 5,8 Hz, IH), 3,37 (t, /= 6,9 Hz, 2H), 3,27 (dd,J=13,8, 5,2 Hz, IH), 2,97 (dd, /= 13,7, 9,4 Hz, IH), 2,63 (t,J=7,0 Hz, 2H), 1,27 (s, 7H), 1,21 (s, 2H). Dobijanje jedinjenja 82;
Suspenzija 81 (1,75 mg, 3,39 mmol) i 10% Pd/C (600 mg) u smeši EtOH (110 ml) i AcOH (15 ml) degasirana je pa podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 82 u vidu bele čvrste supstance (1,40 g, 93%): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,72 (dd, /= 8,3, 5,6 Hz, 2H), 7,66 (s, IH), 7,61 (s, IH), 7,38 (dd, /= 8,6, 1,3 Hz, IH), 7,34 (dd, /= 8,5,1,5 Hz, IH), 4,38 (dd,J =9,0, 5,0 Hz, IH), 3,27 (dd,J=13,8, 5,0 Hz, IH), 2,93 (t, /= 7,9 Hz, 2H), 2,83 (t, /= 7,5 Hz, 2H), 3,01-2,95 (m, IH), 1,96 (s, 3H), 1,86-1,75 (m, 2H), 1,74-1,64 (m, 2H), 1,29 (s, 7H), 1,23 (s, 2H).
Dobijanje jedinjenja 83;
U rastvor aminske soli 82 (1,40 g, 3,15 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (13,1,96 g, 5,04 mmol) u EtOH (40 ml) dodat je DIPEA (5,64 ml, 31,5 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h pa je rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 83 (1,15 g, 61%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7,70 (d,J =8,3 Hz, 2H), 7,64 (s, IH), 7,60 (s, IH), 7,34 (dt,J= 8,9, 1,9 Hz, 2H), 4,38 (dd, /= 9,0, 5,5 Hz, IH), 3,28-3,20 (m, 3H), 2,96 (dd, /= 9,6, 14,1 Hz, IH), 2,81 (t,J =7,4 Hz, 2H), 1,85-1,76 (m, 2H), 1,70-1,61 (m, 2H), 1,27 (s, 7H), 1,20 (s, 2H).
Dobijanje jedinjenja HC1 soli (S)-3,5-diamino-6-hloro-N-(N-(4-(6-(2,3-diamino-3-oksopropil)naftalen-2-il)butil)karbamimidoil)pirazin-2-karboksaniida (84)
4 N HC1 u dioksanu (25 ml) dodato je u 83(1,15 g, 1,92 mmol) u EtOH (6,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša prečišćena u koloni reverznih faza (gold koloni), a ostatakje liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 84 (310 mg, 28%) u vidu žute čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10,56 (s, IH), 9,38 (t,J=5,5 Hz, IH), 9,06-8,83 (m, 2H), 8,31 (brs, 3H), 8,02 (s, IH), 7,79 (t,J=8,6 Hz, 2H), 7,73 (s, IH), 7,69 (s, IH), 7,51 (s, IH), 7,46 -7,36 (m, 4H), 4,06 (dd,/= 11,5, 6,0 Hz, IH), 3,37( q, J=6,4 Hz, 2H), 3,27 (dd,/ = 6,6, 1,4 Hz, IH), 3,18 (dd,/ = 13,7, 6,9 Hz, IH), 2,79 (t, /= 7,1 Hz, 2H), 1,79-1,69 (m, 2H), 1,64-1,54 (m, 2H). 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,82 (d, /= 8,4 Hz, IH), 7,79 (d, /= 8,7 Hz, IH), 7,74 (s, IH), 7,68 (s, IH), 7,41 (td,J=8,1, 1,6 Hz, 2H), 4,18 (dd,J=8,1, 6,3 Hz, IH), 3,42-3,34 (m, 3H), 3,21 (dd,J =14,1, 8,0 Hz, IH), 2,86 (t,J=7,4 Hz, 2H), 1,91-1,80 (m, 2H), 1,79-1,71 (m, 2H). 12. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-((S)-2-amino-3-(4-(3-(heksil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-2-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (89)
Dobijanje jedinjenja86;
Ujedinjenje 85 (1,10 g, 2,32 mmol) u THF (50 ml) redom su dodati DEPBT (766 mg, 2,56 mmol), 76 (1,00 g, 1,97 mmol) i DIPEA (1,0 ml, 5,91 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatakje rastvoren u CH2CI2(100 ml), brzo opran vodom (2 X100 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml), pa osušen nad Na2S04. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (5% metanol/C^Ch) čime je dobijen amid 86 u vidu žute čvrste supstance (1,19 g, 57%): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 7,82 (d,J=5,8 Hz, 2H), 7,73-7,61 (m, 4H), 7,51-7,43 (m, 2H), 7,39-7,19 (m, 10H), 7,05( d, J=8,3 Hz, 2H), 5,52 (s, IH), 5,10 (s, 2H), 4,51(t, J=7,8 Hz, IH), 4,31-4,25 (m, IH), 4,24(dd, J=11,0, 5,4 Hz, IH), 4,01-3,91 (m, 2H), 3,88 (dd,J=5,5, 2,1 Hz, IH), 3,76 (dd, /= 9,3, 2,1 Hz, IH), 3,61 (t,J =10,6 Hz, IH), 3,37 (t,7=6,9 Hz, 2H), 3,12-3,00 (m, IH), 2,74 (dd,7 =13,2, 5,3 Hz, IH), 2,64 (t,7 =7,1 Hz, 2H), 2,57-2,37 (m, 7H), 1,74-1,64 (m, 2H), 1,31 (s, 9H), 1,29-1,16 (m, 8H), 0,86 (t, 7=6,9 Hz, 3H).
Dobijanje jedinjenja 87;
Suspenzija 86 (1,19 g, smeša) i 10% Pd/C (220 mg) u smeši EtOH (110 ml) i AcOH (15 ml) degasirana je pa podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 87, koja je zatim neutralisana sa NaHC03pa je sirov proizvod prečišćen brzom hromatografijom na silika gelu (CMA, 80:18:2), čime je dobijen slobodan amin 87 u vidu žute čvrste supstance (550 mg, 58% kroz dva koraka): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,71 (t,7=8,4 Hz, 2H), 7,62 (d,7=1,8 Hz, IH), 7,49-7,45 (m, 3H), 7,40(d, 7 =8,2 Hz, 2H), 7,36-7,28 (m, 5H), 7,09 (d,7 =8,2 Hz, 2H), 5,55 (s, IH), 4,51 (dd,7 =15,6, 8,4 Hz, IH), 4,25 (dd,7 =10,6, 5,4 Hz, IH), 4,17-4,03 (m, 2H), 3,98-3,90 (m, 2H), 3,81-3,74 (m, IH), 3,63 (t,7 =10,4 Hz, IH), 3,27-3,20 (m, IH), 3,09-2,98 (m, 5H), 2,93 (t,7 =7,6 Hz, 2H), 2,83 (t,7 =6,8 Hz, 2H), 2,61-2,54 (m, 2H), 1,95-1,86 (m, 2H), 1,85-1,75 (m, 2H), 1,74-1,65 (m, 2H), 1,57-1,47 (m, 2H), 1,39-1,19 (m, 7H), 1,33 (s, 9 H), 0,88 (t, 7= 6,9 Hz, 3H).
Dobijanje 88;
U rastvor amina 87 (550 mg, 0,65 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (21, 400 mg, 1,04 mmol) u EtOH (20 ml) dodat je DIPEA (1,15 ml, 6,44 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h pa je rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom u silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) pa u koloni reverznih faza (Gold Cl8) kako bi se dobio guanidin 88 (333 mg, 48%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,69 (dd,7=8,6, 3,5 Hz, 2H), 7,66 (s, IH), 7,60 (s, IH), 7,48-7,44 (m, 2H), 7,35 (ddd,7 =10,4, 8,6, 1,6 Hz, 2H), 7,33-7,28 (m, 5H), 7,04 (d,7 =8,3 Hz, 2H), 5,52 (s, IH), 4,52-4,55 (m, IH), 4,24 (dd,7 =10,6, 5,4 Hz, IH), 4,00-3,91 (m, 2H), 3,88 (dd, 7 = 5,4, 2,0 Hz, IH), 3,75 (dd,7 =9,6, 2,2 Hz, IH), 3,60 (t,7 =10,6 Hz, 2H), 3,28-3,23 (m, 3H), 3,06 (dd, 7= 13,5, 8,3 Hz, IH), 2,82 (t,7=7,0 Hz, 2H), 2,77 (dd,7 = 13,9, 5,6 Hz, IH), 2,59-2,40 (m, 7H), 1,86-1,76 (m, 2H), 1,74-1,68 (m, 4H),1,42-1,60 (m, 7H), 1,33 (s, 9H), 0,86 (t, 7= 7,1 Hz, 3H).
Dobijanje HC1 soli 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-((S)-2-amino-3-(4-(3-(heksil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-2-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida jedinjenje (89) ;
4 N HC1 u vodi (20 ml) dodato je u 88 (333 mg, 0,31 mmol) u etanolu (10 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Prečišćena je hromatografijom reverznih faza (gold kolona), a ostatak je liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 89 (210 mg, 68%) u vidu žute čvrste supstance: 'HNMR (400 MHz, DMSO-J6) 10,94 (brs, IH), 9,29 (brs, IH), 9,02-8,77 (m, 2H), 8,64-8,17 (m, 2H), 7,80-7,73 (m, 3H), 7,68 (s, IH), 7,52 (d,J=8,8 Hz,2H), 7,47 (dd,/=8,2, 1,0 Hz, IH), 7,44-7,36 (m, 3H), 7,19 (d,J=8,6 Hz, 2H), 5,52-5,41 (m, IH), 4,86-4,71 (m, IH), 4,60 (d, / = 5,4 Hz, IH), 4,59-4,53 (m, IH), 4,42 (t, / = 5,8 Hz, IH), 4,38 (t,J=7,0 Hz, IH), 4,03-3,95 (m, IH), 3,71-3,66 (m, IH), 3,62-3,55 (m, IH), 3,53-3,34 (m, 5H), 3,27 (d,J=7,7 Hz, IH), 3,23 (d, /= 7,4 Hz, IH), 3,16-2,99 (m, 5H), 2,78 (t, /= 7,4 Hz, 2H), 2,58 (t,J=7,9 Hz, 2H), 2,01-1,90 (m, 2H), 1,78-1,68 (m, 2H), 1,66- 1,54 (m, 4H), 1,32-1,21 (m, 6H), 0,85 (t, /= 6,6 Hz, 3H). 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,79 (d, J= 8,5 Hz, IH), 7,77-7,73 (m, 2H), 7,67 (s, IH), 7,47-7,37 (m, 4H), 7,21 (d,J=8,5 Hz, 2H), 4,30 (dd, /= 7,7, 6,7 Hz, IH), 4,12-4,05 (m, IH), 3,82-3,74 (m, IH), 3,71-3,61 (m, 2H), 3,49 (dd,J=14,0, 6,6 Hz, IH), 3,47(t,J=6,9 Hz, 2H), 3,33-3,27 (m, 3H), 3,26-3,13 (m, 4H), 2,86 (t, /= 7,6 Hz, 2H), 2,73-2,64 (m, 2H), 2,10-2,00 (m, 2H), 1,89-1,80 (m, 2H), 1,79-1,72 (m, 2H), 1,71-1,63 (m, 2H), 1,40-1,30 (m, 6H), 0,91 (t, J=6,6 Hz, 3H). 13. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-2-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (94)
Dobijanje jedinjenja91;
Ujedinjenje 90 (484 mg, 0,91 mmol) u THF (30 ml) redom su dodati DEPBT (300 mg, 1,00 mmol), 19 (400 g, 0,77 mmol) i DIPEA (0,40 ml, 2,31 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatakje rastvoren u CH2CI2(100 ml), brzo opran vodom (2 X100 ml) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (50 ml), pa osušen nad Na2SO"4. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (5% metanol/OrbCh) čime je dobijen amid 91 u vidu žute čvrste supstance (600 mg, 76% nečist): Stvaranje proizvoda potvrđeno je pomoću LCMS.Dobijanje jedinjenja92;
Suspenzija 91 (600 mg, 0,59 mmol) i 10% Pd/C (200 mg) u smeši EtOH (90 ml) i AcOH (10 ml) degasirana je pa podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 92, koja je zatim neutralisana sa NaHC03pa je sirov proizvod prečišćen brzom hromatografijom na silika gelu (CMA, 80:18:2), čime je dobijen slobodan amin 36 u vidu žute čvrste supstance (350 mg, 66%, nečist): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,71(d, J=8,1 Hz, 2H), 7,68 (s, IH), 7,61 (s, 2H), 7,43-7,37 (m, 2H), 7,34 (dd,J=8,3, 1,3 Hz, IH), 7,16 (d,J=8,2 Hz, 2H), 4,69 (q,J=5,1 Hz, 2H), 4,50( t, J=7,1 Hz, IH), 4,13-4,06 (m, 2H), 4,05(dd, J=11,0, 5,6 Hz, 2H), 3,83 (dd,/=4,8, 2,1 Hz, 2H), 3,81 - 3,73 (m, 2H), 3,51 (dd,/= 9,5, 2,3 Hz, 2H), 3,38( t, J=10,8 Hz, 2H), 3,13-3,03 (m, 6H), 2,93 (t,J=7,6 Hz, 2H), 2,82 (t,J=7,2 Hz, 2H), 2,74-2,57 (m, 2H), 2,04-1,95 (m, 2H), 1,84-1,75 (m, 3H), 1,74-1,63 (m, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,25 (d,J=5,1 Hz, 6H).
Dobijanje 93;
U rastvor amina 92 (350 mg, 0,38 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (13, 242 mg, 0,62 mmol) u EtOH (10 ml) dodat je DIPEA (0,67 ml, 3,80 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h pa je rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom u silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) pa u koloni reverznih faza (Gold Cl8) kako bi se dobio guanidin 93 (170 mg, 20% kroz tri koraka) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,71 (d,J=8,2 Hz, 2H), 7,68 (s, IH), 7,62 (s, IH), 7,43 (d, /= 8,2 Hz, 2H), 7,26 (ddd, /= 10,6, 8,6, 1,3 Hz, 2H), 7,18 (d, /= 8,2 Hz, 2H), 4,70 (q, /= 0,5 Hz, 2H), 4,49 (t, /= 7,8 Hz, IH), 4,22-4,09 (m, 2H), 4,06 (dd,/= 10,4, 5,1 Hz, 2H), 3,89-3,81 (m, 2H), 3,80-3,71 (m, 2H), 3,60-3,49 (m, 2H), 3,43-3,32 (m, 8H), 3,31-3,23 (m, 2H), 3,10-2,98 (m, 2H), 2,85 (t, /= 6,9 Hz, 2H), 2,77-2,61 (m, 2H), 2,12-2,02 (m, 2H), 1,89-1,79 (m, 2H), 1,78-1,68 (m, 2H), 1,31 (s, 9H), 1,25(d, J=5,1 Hz, 6H).
Dobijanje HC1 soli 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-2-il) butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (94)
4 N HC1 u vodi (20 ml) dodato je u 93 (170 mg, 0,15 mmol) u etanolu (5,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na 40 °C tokom 2h. Rastvarač je uklonjen, dodato je još 4N HC1 pa je zagrevana na 40 °C još 2 h. Ovo dodavanje ponovljeno je još dvaput. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (gold kolona), a ostatakje
liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 94 (80 mg, 50%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 10,74 (brs, IH), 9,28-9,19 (m, IH), 9,03-8,60 (m, 2H), 8,58-8,04 (m, IH), 7,81-7,73 (m, 3H), 7,68 (s, IH), 7,50(d, J=8,4 Hz, 2H), 7,48-7,34 (m, 4H), 7,19 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 5,39-5,35 (m, IH), 4,87-4,63 (m, IH), 4,62-4,47 (m, 3H), 4,45-4,35 (m, 2H), 4,32-4,23 (m, IH), 4,01-3,85 (m, IH), 3,67 (d,J=4,6 Hz, IH), 3,62-3,55 (m, 2H), 3,53-3,38 (m, 5H), 3,37-3,29 (m, 2H), 3,24-3,09 (m, 2H), 2,78 (t,J=7,2 Hz, 2H), 2,62-2,53 (m, 2H), 2,01-1,86 (m, 2H), 1,79-1,68 (m, 2H), 1,64-1,55 (m, 2H). 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,78 (d,J=8,4 Hz, IH), 7,75 (d, /= 7,8 Hz, IH), 7,73 (s, IH), 7,66 (s, IH), 7,42 (d,J=8,8 Hz, 2H), 7,39 (d, /= 8,4 Hz, 2H), 7,21 (d, /= 8,7 Hz, 2H), 4,16 (t,J=7,0 Hz, IH), 4,13-4,05 (m, 2H), 3,81 (dd, /= 4,7, 1,9 Hz, 2H), 3,77 (dd, J = 10,6, 3,0 Hz, 2H), 3,72-3,61 (m, 6H), 3,44-3,30 (m, 10 H), 2,86 (t,J=7,0 Hz, 2H), 2,76-2,61 (m, 2H), 2,11-2,01 (m, 2H), 1,89-1,80 (m, 2H), 1,79-1,72 (m, 2H). 14. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-((S)-2-amino-3-okso-3-(4-(3-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksilamino)propil)fenilamino)propil)naftalen-2-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (99)
Dobijanje jedinjenja96;
Rastvor kiseline 19 (1,17 g, 2,27 mmol) u THF (60 ml) ohlađen je na 0 °C u ledenom kupatilu, dodat je NMM (0,30 ml, 2,95 mmol) zatim PivCl (0,30 ml, 2,49 mmol) pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi 2 h. Dodato je 34 (1,0 g, 2,27 mmol, 10 ml THF) od anilina171pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi još 10 min. Reakciona smeša je zatim preneta na sobnu temperaturu i mešana još 16 h. Organski rastvarač je uklonjen. U ovaj ostatak dodata je voda paje ekstrahovan sa CH2CI2(3 x 100 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (4% metanol u hloroformu) kako bi se dobio amid 96 (1,40 g, 66%, nečist) u vidu svetložute čvrste supstance: Stvaranje proizvoda potvrđeno je pomoću LCMS.
Dobijanje jedinjenja97;
Suspenzija 96 (1,40 g, 1,50 mmol) i 10% Pd/C (300 mg) u smeši EtOH (120 ml) i AcOH (12 ml) degasirana je pa podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 97, koja je zatim neutralisana sa NaHC03pa je sirov proizvod prečišćen brzom hromatografijom na silika gelu (CMA, 80:18:2), čime je dobijen slobodan amin 97 u vidu žute čvrste supstance (550 mg, 30% kroz dva koraka): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,74-7,65 (m, 3H), 7,59 (s, IH), 7,41-7,29 (m, 4H), 7,11 (d,J=8,4 Hz, 2H), 4,69( q, J =4,9 Hz, IH), 4,50 (t,J=7,9 Hz, IH), 4,04 (dd,J =10,4, 5,2 Hz, IH), 4,02-3,94 (m, IH), 3,79-3,71 (m, IH), 3,70-3,63 (m, IH), 3,54-3,39 (m, 3H), 3,26-(dd, / = 13,6, 6,8 Hz, IH), 3,07 (dd,J=13,1, 8,3 Hz, IH), 2,79 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,75-2,67 (m, 2H), 2,55 (t,J=7,3 Hz, 2H), 1,91-1,80 (m, 2H), 1,79-1,69 (m, 2H), 1,62-1,52 (m, 2H), 1,50-1,37 (m, 12H), 1,33 (s, 9H), 1,25 (d,J=4,9 Hz, 3H).
Dobijanje 98;
U rastvor amina 97 (550 mg, 0,68 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (13, 423 mg, 0,62 mmol) u EtOH (20 ml) dodat je DIPEA (1,21 ml, 6,80 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h pa je rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom u silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) pa na koloni reverznih faza (Gold Cl8) kako bi se dobio guanidin 98 (500 mg, 72%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,73-7,64 (m, 3H), 7,61 (s, IH), 7,40-7,30 (m, 4H), 7,11 (d, / = 8,5 Hz, 2H), 4,68 (d, J = 4,9 Hz, IH), 4,49 (t, / = 7,2 Hz, IH), 4,04 (dd, / = 10,9, 5,5 Hz, IH), 4,02-3,93 (m, IH), 3,78-3,70 (m, IH), 3,69-3,64 (m, IH), 3,54-3,38 (m, 4H), 3,30-3,20 (m, 2H), 3,15-3,01 (m, IH), 2,83 (t, / = 7,4 Hz, 2H), 2,54 (t,J=7, 3 Hz, 2H), 1,90-1,78 (m, 4H), 1,73-1,64 (m, 2H), 1,53-1,37 (m, 12H), 1,32 (s, 9H), 1,25 (d, 7=4,9 Hz, 3H).
Dobijanje HC1 soli 3,5-diamino-N-(N-(4-(6-((S)-2-amino-3-okso-3-(4-(3-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksilamino)propil)fenilamino)propil)naftalen-2-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (99)
4 N HC1 u vodi (20 ml) dodato je u 98 (500 mg, 0,15 mmol) u etanolu (5,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na 40 °C tokom 2h. Rastvarač je uklonjen, dodato je još 4N HC1 pa je zagrevana na 40 °C još 2 h. Ovo dodavanje ponovljeno je još dvaput. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (gold kolona), a ostatakje liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 99 (206 mg, 50%>) u vidu žute čvrste supstance: 'H
NMR (400 MHz, DMSO-d6) 11,0 (brs, IH), 9,34 (brs, IH), 9,09-8,25 (m, 6H), 7,82-7,73 (m, 2H), 7,68 (s, IH), 7,53 (d,J=8,5 Hz, 2H), 7,49 (d,J=9,2 Hz, IH), 7,41 (s, 2H), 7,39 (d,J =8,2 Hz, 2H), 7,17 (d,/=8,2 Hz, 2H), 5,39 (d,/=3,7 Hz, IH), 4,80-4,70 (m, IH), 4,62 (d,J =4,3 Hz, IH), 4,60-4,54 (m, IH), 4,46-4,36 (m, 2H), 3,96-3,88 (m, IH), 3,71-3,65 (m, IH), 3,62-3,54 (m, IH), 3,51-3,35 (m, 5H), 3,09 (d, J= 13,3 Hz, IH), 2,94 (d,J=10,9 Hz, IH), 2,87 (t,/=9,1 Hz, 2H), 2,78 (t, J= 6,7 Hz, 2H), 2,60 (t,/=7,7 Hz, 2H), 2,00-1,86 (m, 2H), 1,85-1,67 (m, 2H), 1,65-1,53 (m, 2H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,80 (d,/=9,5 Hz, IH), 7,78-7,73 (m, 2H), 7,68 (s, IH), 7,45-7,37 (m, 4H), 7,19 (d,J=7,1 Hz, 2H), 4,31 (t, /= 6,3 Hz, IH), 4,09-4,00 (m, IH), 3,87-3,81 (m, IH), 3,78 (d,/=11,4 Hz, IH), 3,73-3,61 (m, 3H), 3,46 (dd,/=13,6, 6,3 Hz, IH), 3,37 (t,J=6,8 Hz, 2H), 3,30-3,25 (m, IH), 3,22-3,12 (m, 2H), 3,03 (t,J =7,9 Hz, 2H), 2,86 (t,J =6,8 Hz, 2H), 2,69 (t,J=7,4 Hz, 2H), 2,07-1,95 (m, 2H), 1,91-1,81 (m, 2H), 1,80-1,69 (m, 2H).
15. Dobijanje (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(6-(2-amino-3-(4-(3-(dimetilamino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-2-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (103)
Dobijanje jedinjenja 100;
Rastvor kiseline 19 (1,75 g, 3,39 mmol) u THF (70 ml) ohlađen je na 0 °C u ledenom kupatilu, dodat je NMM (0,74 ml, 6,78 mmol) zatim PivCl (0,41 ml, 3,39 mmol) pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi 2 h. Dodato je 18 (825 mg, 4,61 mmol, 10 ml THF) pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi još 10 min. Reakciona smeša je zatim preneta na sobnu temperaturu i mešana još 16 h. Organski rastvarač je uklonjen. U ovaj ostatak dodataje voda pa je ekstrahovan sa CH2CI2(3 x 100 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (4% metanol u hloroformu) kako bi se dobio amid100(1,60 g, 71%) u vidu svetložute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 7,87 (s, IH), 7,71 (d,J =8,5 Hz, IH), 7,67 (d, /= 8,5 Hz, IH), 7,65-7,62 (m, 2H), 7,42 (dd, /= 8,4, 1,9 Hz, IH), 7,40-7,29 (m, 5H), 7,22(d, J=8,6 Hz, 2H), 7,08 (d,J=8,4 Hz, 2H), 5,21-5,10 (m, 2H), 5,13 (s, 2H), 4,51 (q,J=7,6 Hz, IH), 3,47 (q,J=6,5 Hz, 2H), 3,29 (d,J=6,9 Hz, 2H), 2,68 (t,J= 6,7 Hz, 2H), 2,57 (t,J=7,9 Hz, 2H), 2,26 (ddt,J=11,5, 9,3, 2,5 Hz, 2H), 2,21 (s, 6H), 2,22-2,19 (m, IH), 1,78-1,69 (m, 3H), 1,39 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 101;
Suspenzija100(1,60 g, 2,30 mmol) i 10% Pd/C (400 mg) u smeši EtOH (130 ml) i AcOH (20 ml) degasirana je pa podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so101u vidu žute čvrste supstance (1,60 g, 99%): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,71 (d,J= 8,5 Hz, 2H), 7,68 (s, IH), 7,61 (s, IH), 7,42 (d,J=8,5 Hz, 2H), 7,39 (dd,J=8,5, 1,3 Hz, IH), 7,33 (dd,J=8,5, 1,3 Hz, IH), 7,16 (d,J =8,6 Hz, 2H), 4,50 (t,J=7,6 Hz, IH), 3,28 (dd,J=14,0, 6,3 Hz, IH), 3,07 (dd,J=13,3, 8,7 Hz, IH), 3,05-2,98 (m, 2H), 2,93 (t,J=7,6 Hz, 2H), 2,82 (t,J=7,3 Hz, 2H), 2,78 (s, 6H), 2,65 (t,J=7,5 Hz, 2H), 2,06-1,96 (m, 2H), 1,93 (s, 6H), 1,86-1,75 (m, 2H), 1,74-1,64 (m, 2H), 1,33 (s, 9H).
Dobijanje 102;
U rastvor amina101(1,60 g, 2,30 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (21, 1,60 g, 4,14 mmol) u EtOH (25 ml) dodat je DIPEA (4,1 ml, 23,0 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h pa je rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom u silika gel koloni (80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin102(645 mg, 37% i 640 mg, 37% nečist) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,70 (dd, 7= 9,0, 4,3 Hz, 2H), 7,66 (s, IH), 7,61 (s, IH), 7,39 -7,31 (m, 4H), 7,11 (d,J=8,4 Hz, 2H), 4,48 (t,J=7,6 Hz, IH), 3,30-3,22 (m, 3H), 3,06 (dd,J=13,8, 8,9 Hz, IH), 2,83 (t,J=7,2 Hz, 2H), 2,57 (t,J=7,9 Hz, 2H), 2,32 (dd,J =10,5, 7,6 Hz, 2H), 2,23 (s, 6H), 1,86-1,74 (m, 4H), 1,73-1,64 (m, 2H), 1,32 (s, 9H).
Dobijanje HC1 soli (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(6-(2-amino-3-(4-(3-(dimetilamino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-2-il)butil)karbamimidoil)-6-
hloropirazin-2-karboksamida (103)
TFA (10 ml) dodato je u 47 (545 mg, 0,71 mmol) u CH2CI2(15 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Rastvarač je uklonjen, ponovo je dodato IN HC1 pa je rastvarač uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (gold kolona), a ostatakje liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 48 (206 mg, 50%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-d*) 11,02 (brs, IH), 10,81-10,58 (m, IH), 10,53 (s, IH), 9,32 (s, IH), 9,04-8,72 (m, 2H), 8,50 (brs, 3H), 7,82-7,73 (m, 3H), 7,68 (s, IH), 7,53 (d,J=8,5 Hz, 2H), 7,48 (d,J=9,2 Hz, IH), 7,45-7,35 (m, 3H), 7,18 (d,J=8,4 Hz, 2H), 4,45-4,35 (m, IH), 3,74-3,45 (m, IH), 3,27(dd, J=14,7, 8,3 Hz, IH), 3,03-2,93 (m, 2H), 2,78 (t,J =7,3 Hz, 2H), 2,70 (s, 6H), 2,58 (t,J=7,3 Hz, 2H), 2,02-1,88 (m, 2H), 1,79-1,66 (m, 2H), 1,64-1,54 (m, 2H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7,80 (d,J=9,2 Hz, IH), 7,78-7,73 (m, 2H), 7,67 (s, IH), 7,47-7,38 (m, 4H), 7,20 (d,J=8,9 Hz, 2H), 4,33 (t,J=7,5 Hz, IH), 3,46 (dd,J=13,6, 6,6 Hz, IH), 3,37 (t,J=6,8 Hz, 2H), 3,36-3,26 (m, 3H), 2,87-2,83 (m, 2H), 2,87 (s, 6H), 2,68 (t,J =7,6 Hz, 2H), 2,07-1,97 (m, 2H), 1,89-1,80 (m, 2H), 1,80-1,71 (m, 2H).
16. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(heksil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (123)
Dobijanje jedinjenja 105;
U rastvor104(100 g, 0,675 mmol) u suvom THF (800 ml) dodati su NaOH (32,0 mg, 0,809 mmol) i dimetilsulfat (102 g, 0,809 mmol) u kapima na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi. THF je uklonjen pod sniženim pritiskom pa je smeša podeljena između CH2CI2(1,0 1) i vode (1,0 1). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 1,0 1). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 100% CH2C12) kako bi se dobilo jedinjenje105(108,0 g, 90%) u vidu žute tečnosti:'HNMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 7,06 (t,J=7,85 Hz, IH), 6,71 (d, /= 7,25, IH), 6,64 (t, /= 7,7 Hz, IH), 3,80 (s, 3H), 2,74 (t, / = 2,75 Hz, 2H), 2,65 (t, / = 2,65 Hz, 2H), 1,81-1,71 (m, 4H).
Dobijanje jedinjenja 106;
U rastvor suvog DMF (71,45 ml, 0,923 mmol) dodat je POCh (57,40 ml, 0,616 mmol) u kapima u azotnoj atmosferi na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 30 min na 0°C. Rastvor105(50,0 g, 0,308 mmol) u suvom 1,2-dihlorometanu (500 ml) dodat je u reakcionu smešu u kapima u azotnoj atmosferi na 0 °C. Nakon što je dodavanje završeno, reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 6 h. Reakciona smeša je ugašena hladnom H2O i podeljena između CH2O2 (1,0 1) i vode (1.0 1). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 1,0 1). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 5% EA/heksan) kako bi se dobilo jedinjenje106(35,0 g, 61%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-J6): 8 10,10 (s, IH), 7,65( d, J=7,81, IH), 6,78 (d,J=7,47 Hz, IH), 3,89 (s, 3H), 3,18 (t,J=5,80 Hz, 2H), 2,70 (t,J=4,64 Hz, 2H), 1,82-1,73 (m, 4H).
Dobijanje jedinjenja 107;
U rastvor trimetilfosfonoacetata (55,0 ml, 0,378 mmol) u 100 ml anhidrovanog CH2CI2ohlađen na 0°C dodat je DBU (58,0 g, 0,380 mmol) pa je smeša mešana 15 min. Aldehid106(16,0 g, 0,084 mmol) u 50 ml CH2CI2dodat je u kapima. Reakciona smeša zagrejana je na sobnu temperaturu, mešana 16 h i ugašena sa 100 ml vode. Smeša je razdvojena, a vodeni sloj ekstrahovan je pomoću CH2CI2(3 x 150 ml). Pomešana organska jedinjenj a oprana su rastvorom NaCl, osušena (Na2S04), filtrirana i koncentrovana, a ostatakje prečišćen hromatografijom na silika gel koloni (10:1 heksani/etil-acetat) kako bi se dobio cis i trans-a,P-nezasićeni estar107(15,0 g, 72%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-Je): 8 7,83 (d,J=14,7 Hz, IH), 7,58 (d,J=8,3 Hz, IH), 6,82 (d,J=8,4 Hz, IH), 6,35 (d,J=15,2 Hz, IH), 3,80 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 2,76 (t,J=5,7 Hz, 2H), 2,55 (t,J=5,4 Hz, 2H), 1,80-1,60 (m,4H).
Dobijanje jedinjenja 108
Suspenzija jedinjenja107(33,0 g, 0,134 mmol) i 10% Pd/C (15 g, 0,127) u EtOH (300 ml) podvrgnuta je uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo108(28,0 g, 90%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 7.65 (d,J=7,62, IH), 6,78 (d,J=7,96 Hz, IH), 4,06-4,11 (m, IH), 3,78 (s, 3H), 2,86( t, J =7,79 Hz, 2H), 2,69-2,64 (m, 4H), 2,57-2,51 (m, 2H), 1,79-1,74 (m, 4H).
Dobijanje jedinjenja 109;
U rastvor metil-estra108(28,0 g, 0,106 mmol) u THF/MeOH/H20 (200 ml/200 ml/60 ml) dodat je NaOH (25,0 g, 0,625 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Rastvarač je uklonjen, a pH je podešen na 1 pomoću 1 N vodenog rastvora HC1; Istaložila se bela čvrsta supstanca, koja je filtrirana, oprana vodom i osušena u vakuumu kako bi se dobila kiselina109(25,5 g, 92%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 6,96 (d,J=7,29, IH), 6,63 (d,J=6,86 Hz, IH), 3,78 (s, 3H), 2,88 (t,J=7,29 Hz, 2H), 2,69-2.66 (m, 4H), 2,63-2,59 (m, 2H), 1,80-1,73 (m, 4H).
Dobijanje jedinjenja 110
U rastvor jedinjenja60(13,70 g, 77,31 mmol) u suvom THF (200 ml) dodat je/7-butillitijum (45,07 ml, 90,08 mmol, 2M rastvor u cikloheksanu) u kapima na -78°C pa je reakciona smeša mešana Ih da bi se dobio rastvor litijumove soli 61. U drugi rastvor jedinjenja109(15,0 g, 64,37 mmol) u suvom THF (200 ml) dodati su NMM (9,30 ml, 83,64 mmol) i PivCl (10,30 ml, 83,64 mmol) u kapima na -78 °C. Reakciona smeša mešana je 30 min, zatim zagrejana na
-20 °C tokom 1 h, pa je polako dodavan pripremljeni rastvor litijumove soli na -78 °C. Reakciona smeša mešana je još 10 min, zatim je zagrejana na 0 °C i mešana 1 h, pa je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 30 min, ugašena zasićenim NH4CI, koncentrovana da bi se uklonio THF i razdeljena između CH2CI2(300 ml) i vode (100 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(150 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, CH2CI2) kako bi se dobilo jedinjenje110(15,0 g, 60%) u vidu bele čvrste supstance:Dobijanje jedinjenja 111;
U rastvor jedinjenja110(15,0 g, 38,14 mmol) u suvom THF (250 ml) dodavanje KHMDS (13,70 g, 68,67 mmol) u porcijama na -78°C. Nakon što je dobijena smeša mešana 30 min, dodat je trizil azid (19,0 g, 61,40 mmol) pa je reakciona smeša mešana 5 min. Zatim su polako na istoj temperaturi dodavani sirćetna kiselina (15,0 ml, 228 mmol) pa tetrametilamonijum-acetat (30,9 g, 76,28 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 24°C, mešana 16 h, ugašena zasićenim NaHC03(100 ml), pa koncentrovana da bi se uklonio THF i ekstrahovana pomoću CH2CI2(300 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 90:10 heksani/EtOAc, zatim DCM) kako bi se dobilo jedinjenje111(8,80 g, 54%) u vidu žute čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, CDCb): 5 7,36-7,30 (m, 3H), 7,23 (m, IH), 7,20 (m, IH), 7,16 (m, IH), 7,01 (d, /= 7,79 Hz, IH), 6,60 (d, /= 7,59 Hz, 2H), 5,35 (t, /= 7,99, 2H), 4,89 (s, IH), 4,58-4,51 (m, IH), 4,13-4,10 (m, 3H), 3,93 (t,J=7,54, IH), 3,77 (s, 3H), 3,33-3,27 (m, 3H), 2,71 (m, 2H), 2,63 (m, 2 H), 1,78-1,75 (m, 5H), 1,58 (m, 2H).
Dobijanje jedinjenja 112;
U rastvor jedinjenja111(31,0 g, 72,1 mmol) u THF/H2O (300 ml/100 ml) dodat je H2O2(49 ml, 433 mmol), a zatim LiOH (6,04 g, 144 mmol) u porcijama na 0°C. reakciona smeša mešana je 10 min na 0 °C pa na sobnoj temperaturi 1 h, ugašena zasićenim Na2S03(200 ml), koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se uklonio THF i oprana pomoću CH2CI2(500 ml). Vodeni sloj je zakišeljen sa 1 N vodenog rastvora HC1 i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 500 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04, koncentrovani i oprani sa MTBE da bi se dobilo jedinjenje112(15,0 g, 82%) u vidu prljavobele čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 6,92 (d,J=1, 1 Hz, IH), 6,63 (d,J=8,0 Hz, IH), 3,75 (s, 3H), 2,81 (t,/=7,8 Hz, 2H), 2,67 (t,/=6,0 Hz, 2H), 2,61 (t,J=5,7 Hz, 2H), 2,49-2,47 (m, 2H), 1,84-1,70 (m, 6H).
Dobijanje jedinjenja113;
Suspenzija jedinjenja112(15,0 g, 55,1 mmol) i 10%) Pd/C (3,50 g) u AcOH/H20 (300 ml/100 ml) podvrgnuta je uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa ACOH/H2O, a zatim sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila acetatna so113(14,0 g, 83%) u vidu žute čvrste supstance:Dobijanje jedinjenja 114;
U rastvor jedinjenja113(11,0 g, 44,1 mmol) u sirćetnoj kiselini (120 ml) dodata je bromovodonična kiselina (120 ml) u kapima na sobnoj temperaturi pa je reakciona smeša refluksovana 3 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana. Sirov smeđi ostatak114(8,90 g, 80%>) direktno je iskorišćen u sledećem koraku bez ikakvog prečišćavanja: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 6,80 (d,/=7,85, IH), 6,57 (d,/=7,21 Hz, IH), 3,92-3,91 (m, IH), 3,04-2,98 (m, IH), 2,91-2,86 (m, IH), 2,61 (m, 2H), 2,54-2,53 (m, 2H), 1,69-1,68 (m, 5H).
Dobijanje jedinjenja 115;
Acetil-hlorid (17,0 ml, 243 mmol) dodat je u anhidrovani metanol (300 ml) na 0°C pa je dodato jedinjenje114(8,90 g, 28,2 mmol). Reakciona smeša je refluksovana 4 h pa koncentrovana. Ostatakje podeljen između CH2CI2(200 ml) i zasićenog NaHC03(100 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(200 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 115 (7,30 g, 90%>) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 6,81 (d,J=7,51, IH), 6,59 (d,J =7,21 Hz, IH), 4,12-4,11 (m, IH), 3,75 (s, IH), 3,31-3,30 (m, 2H), 2,70-2,67 (m, 2H), 2,63 (t, J= 6,16 Hz, 2H).
Dobijanje jedinjenja116;
U rastvor jedinjenja115(7,30 g, 25,60 mmol) u MeOH/H20 (100 ml/60 ml) dodati su NaHC03(12,0 g, 145 mmol) i B0C2O (10,0 g, 45,8 mmol) na 0 °C. Dobijena smeša je zagrejana na sobnu temperaturu pa je mešana 1 h. Reakciona smeša je podeljena između CH2CI2(100 ml) i vode (50 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(100 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani. Brza hromatografija na koloni pomoću 20%> etil-acetat-heksana zatim CH2CI2dala je jedinjenje116(7,1 g, 81%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 6,77 (d,J=7,36, IH), 6,55 (d,J=7,86 Hz, IH), 4,96-4,94 (m, IH), 4,71 (s, IH), 4,96-4,94 (m, IH), 4,71 (s, IH), 4,50-4,48 (m, IH), 3,69 (s, 3H), 3,07-3,01 (m, IH), 2,89-2,84 (m, IH), 2,86 (m, 2H), 2,63 (m, 2H), 1,80-1,78 (m, 4H), 1,39 (s, 9H).Dobijanje jedinjenja117;
U rastvor jedinjenja116(7,0 g, 20,05 mmol) u CH2CI2(80 ml) dodati su piridin (100 ml) i triflat (4,64 ml, 24,0 mmol) na 0 °C, mešan je 1 h pa zatim mešan na sobnoj temperaturi 2 h. Nakon koncentrovanja, reakciona smeša je podeljena između CH2CI2(150 ml) i vode (70 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(100 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje117(8,00 g, 83%) u vidu smeđeg ulja: 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,81 (d,J=4,63 Hz, 5H), 8,56-8,51 (m, 2H), 8,02-7,99 (m, 4H), 7,11 (d,J=7,98 Hz, IH), 7,03 (d,J =7,98, IH), 4,39-4,35 (m, IH), 3,68 (s, 3H), 3,19-3,14 (dd, IH), 2,90-2,77 (m, 5H), 1,86-1,81 (m, 4H), 1,35 (s, 9H), 1,32-1,28 (m, 4H).
Dobijanje jedinjenja 118;
Jedinjenje117(8,0 g, 16,6 mmol) i benzil but-3-inilkarbamat (10, 5,00 g, 24,9 mmol) u anhidrovanom CH3CN (100 ml) degasirani su argonom 10 min na sobnoj temperaturi pa su dodati TEA (9,34 ml, 66,50 mmol), 10% (/-Bu)3P u heksanima (7,0 ml, 3,32 mmol) i Cul (0,16 g, 0,84 mmol). Dobijena smeša degasirana je argonom 10 min pa je brzo dodat Pd (PPli3)4(2,00 g, 1,73 mmol) u jednoj porciji. Nakon degasiranja sa argonom 5 min, dobijena smeša refluksovana je 16 h. Reakciona smeša koncentrovana je u vakuumu pa je ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 75:25 heksani/etil-acetat) kako bi se dobilo jedinjenje118(4,50 g, 52%) u vidu smeđe čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,36-7,34 (m, 4H), 7,33-7,29 (m, 2H), 7,16 (d,J=7,63 Hz, IH), 6,82 (d,J=7,02 Hz, IH), 5,12-5,08 (m, 2H), 4,95(d, J=7,88 Hz, IH), 4,52-4,51 (m, IH), 3,67 (s, 3H), 3,48-3,34 (m, 2H), 3,10-3,05 (dd, IH), 2,84-2,83 (m, 2H), 2,68-2,65 (m, 4H), 1,81-1,76 (m, 4H), 1,39 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja119;
U rastvor metil-estra118(4,50 g, 8,42 mmol) u THF/MeOH/H20 (30 ml/30 ml/10 ml) dodat je NaOH (3,60 g, 90 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Vrednost pH podešena je na 9 pomoću 1 N aq HC1 pa je uklonjen organski rastvarač. Vrednost pH ostatka podešena je na 5-6 pa je suspenzija podeljena između CH2CI2(100 ml) i vode (50 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(100 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani kako bi se dobilo jedinjenje119
(3,66 g, 85%) u vidu smeđe čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,28-7,24 (m, 5H), 7,05-7,03 (d,J=7,67 Hz, IH), 6,89-6,87(d, J=7,55 Hz, IH), 5,04(brs, J=7,02 Hz, IH), 5,12-5,08 (m, 2H), 4,95 (d,J=7,88 Hz, IH), 4,52-4,51 (m, IH), 3,67 (s, 3H), 3,48-3,34 (m, 2H), 4,27-4,26 (m, IH), 3,38-3,30 (m, 2H), 3,15-3,10 (m, IH), 2,78-2,71 (m, 4H), 2,59( d, J=5,95, 2H), 1,73-1,71 (m, 4H), 1,31 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 120;
Jedinjenje119(800 mg, 1,53 mmol) u THF (30 ml) redom je pomešano sa DEPBT (845 mg, 2,56 mmol), 24 (700 mg, 2,33 mmol) i DIPEA (1,0 ml, 4,65 mmol) pa je mešano na sobnoj
temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatakje rastvoren u CH2CI2(50 ml), brzo opran vodom (50 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml), pa osušen nad Na2S04. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (6% metanol/CH2Cb) čime je dobijen amid120(1,0 g) u vidu žute čvrste
supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 7,46-7,44 (m, 3H), 7,36-7,30 (m, 7H), 7,17 (d,J =7,2 Hz, 2H), 7,07 (d,J=7,5 Hz, IH), 6,99-6,92 (m, IH), 5,49 (s, IH), 5,10 (s, 2H), 4,35-4,31 (m, IH), 4,05-3,90 (m, 2H), 3,80-3,82 (m, IH), 3,75-3,72 (m, IH), 3,62 (t,J=9,9 Hz, IH), 3,43 (t,J=5,7 Hz, 2H), 3,18-3,16 (m, IH), 3,01-3,08 (m, IH), 2,83-2,82 (m, 2H), 2,68-2,48 (m, 8H), 1,86-1,78 (m, 3H), 1,71-1,62 (m, 10H), 1,44 (s, 9H), 0,87 (t,J=6,3 Hz, 3H).
Dobijanje jedinjenja 121;
Suspenzija jedinjenja120(1,00 g, 1,01 mmol) i 10% Pd/C (600 mg) u smeši EtOH (50 ml) i AcOH (2 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so121u vidu bele čvrste supstance (700 mg, 80%): 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 7,49-7,41 (m, 2H), 7,34-7,30 (m, 5H), 7,12-6,78 (m, 5H), 4,30-4,27 (m, 2H), 4,19-4,18 (m, IH), 3,98-3,91 (m, 2H), 3,78-3,58 (m, 2H), 3,19-3,08 (m, 3H), 3,02-2,89 (m, 6H), 2,75-2,73 (m, 2H), 2,65-2,62 (m, 3H), 2,55-2,52 (m, 3H), 1,98-1,92 (m, 2H), 1,73-1,68 (m, 3H), 1,60-1,52 (m, 7H), 1,41 (s, 9H), 1,29-1,20 (m, 7H), 0,88-0,84 (m, 3H), 0,87 (t,J=6,4 Hz, 3H).
Dobijanje jedinjenja122;
Rastvor aminske soli121(700 mg, 0,81 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (13, 680 mg, 1,75 mmol) u EtOH (20 ml) pomešan je sa DIPEA (1,60 ml, 9,26 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCb/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin122(380 g, 48%) u vidu žute čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, DMSO-Je): 8 7,43-7,39 (m, 3H), 7,33-7,31 (m, 3H), 7,05 (d,J =6,69 Hz, 2H), 6,99-6,95 (m, 2H), 6,86 (d,J=7,59 Hz, IH), 5,47 (s, IH), 4,33-4,31 (m, IH), 4,14-4,10 (m, IH), 3,79-3,72 (m, 4H), 3,68-3,65 (m, 2H), 2,69-2,66 (m, 6H), 2,56-2,53 (m, 3H), 2,45-2,36 (m, 7H), 1,70 (m, 4H), 1,56 (m, 6H), 1,32 (s, 9H), 0,86 (t, /= 7,0 Hz, 3H).
Dobijanje HC1 soli 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(heksil((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (jedinjenje 123);
4 N HC1 u dioksanu (15 ml) dodato je u 122 (350 g, 0,35 mmol) u EtOH (5,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (Gold kolona), a ostatakje liofilizovan kako bi se dobilo 110 mg (45%) jedinjenja 123 u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-ć/e): 8 10,16 (s, IH), 9,16 (brs, IH), 8,51-8,34 (brs, 2H), 7,41 (t,J=8,1 Hz, 4H), 7,20 (d,J=8,6 Hz, 2H), 6,95-6,89 (q, 2H), 5,42 (brs, IH), 4,42 (m, IH), 4,53 (d,J=5,3 Hz, 2H), 4,42 (m, IH), 4,01 (m, IH), 3,93 (m, IH), 3,60 (m, IH), 3,50-3,38 (m, 4H), 3,08-3,03 (m, 6H), 2,72 (brs, 2H), 2,66-2,65 (m, 2H), 2,57 (m, 2H), 1,91-1,90 (m, 2H), 1,72-1,69 (m, 4H), 1,61-1,54 (m, 6H), 1,26 (s, 6H), 0,86 (t,J=7,0 Hz, 3H). 'H NMR (400 MHz, D20): 8 7,08 (d,J=8,4 Hz, 2H), 7,04-6,98 (q, 2H), 6,92 (d,J=8,3 Hz, 2H), 4,06-4,02 (m, 2H), 3,78-3,69 (m, 3H), 3,62-3,54 (m, 2H), 3,25 (t, / = 5,3 Hz, IH), 3,19-3,14 (m, 3H), 3,10-3,04 (m, 4H), 2,66-2,54 (m, 7H), 1,90-1,86 (m, 2H), 1,65-1,58 (m, 5H), 1,50-1,40 (m, 4H), 1,19-1,18 (m, 6H), 0,78 (t, /= 6,62). 17. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (127)
Dobijanje jedinjenja 124;
Jedinjenje119(1,0 g, 1,92 mmol) u THF (30 ml) redom je pomešano sa DEPBT (845 mg, 2,82 mmol),29(1,25 g, 1,91 mmol) i DIPEA (1,0 ml, 5,73 mmol) pa je mešano na sobnoj
temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatakje rastvoren u CH2CI2(50 ml), brzo opran vodom (50 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml), pa osušen nad Na2S04. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (5% metanol/CH2Cb) čime je dobijen amid124[900 mg (smeša)] u vidu žute čvrste supstance.
Dobijanje jedinjenja 125;
Suspenzija jedinjenja124[900 mg (smeša), 0,77 mmol] i 10% Pd/C (600 mg) u smeši EtOH (50 ml) i AcOH (1,5 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo sirovo jedinjenje125(800 mg) u vidu bezbojnog ulja:
Dobijanje jedinjenja126; Rastvor sirovog jedinjenja 125 (800 mg) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (13, 400 mg, 1,02 mmol) u EtOH (40 ml) pomešan je sa DIPEA (1,10 ml, 6,38 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 126 (285 mg, 12% kroz 3 koraka) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-</6): 8 7,44-7,42 (m, 4H), 7,30-7,28 (m, 6H), 7,22 (d,J=7,27 Hz, 2H), 6,96 (d,J=7,11 Hz, 2H), 6,91 (d, /= 7,0 Hz, 2H), 6,86 (d, / = 7,61 Hz, 2H), 5,47 (s, 2H), 4,33 (m, IH), 4,23-4,19 (m, 2H), 3,97-3,91 (m, 4H), 3,84-3,82 (m, 2H), 3,71 (d, /= 2,29 Hz, IH), 3,69 (d,J=2,2 Hz, IH), 3,58 (t,J=10,08 Hz, 2H), 3,06-3,00 (m, IH), 2,91-2,86 (m, IH), 2,76 (m, 2H), 2,71-2,68 (m, 4H), 2,61-2,55 (m, 4H), 2,44-2,35 (m, 4H), 1,74-1,60 (m, 10H), 1,38 (s, 9H). Dobijanje HC1 soli 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (jedinjenje 127); 4 N HC1 u dioksanu (10 ml) dodato je u 126 (1,15 g, 0,23 mmol) u EtOH (3,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (Gold kolona) pa je ostatak liofilizovan da bi se dobilo 62 mg (32%) jedinjenja 127:'H NMR (400 MHz, DMSO-c4): 8 10,39 (brs, IH), 10,03 (brs, IH), 8,91-8,82 (brs, 2H), 8,48 (brs, 2H), 7,42 (d, /= 7,6 Hz, 4H), 7,18 (d, /= 7,6 Hz, 2H), 6,96 (d,J=7,1, IH), 6,89 (d, /= 7,4, IH), 5,44 (d,J=10,8, 2H), 4,81 (br, 2H), 4,59 (d, /= 4,2, 2H), 4,55 (d,J=5,4 Hz, 2H), 4,42 (t,J =4,4, 2H), 4,11 (br, IH), 4,00 (brs, 2H), 3.69- 3,65 (m, 2H), 3,58 (m, 2H), 3,47 (m, 4H), 3,43-3,39 (m, 4H), 3,25-3,22 (m, 4H), 3,04 (d, /= 6,3, 2H), 2,73 (m, 2H), 2,64 (m, 2H), 2,58-2,56 (m, 2H), 1,98 (m, 2H), 1,97 (m, 2H), 1.70- 1,67 (m, 4H), 1,61-1,59 (m, 2H), 1,54-1,52 (m, 2H), 1,70-1,67 (m, 4H), 1,61-1,59 (m, 2H), 1,54-1,52 (m, 2H). 'H NMR (400 MHz, D2O): 8 7,10 (d,J =8,30 Hz, 2H), 7,02-6,90 (m, 2H), 6,91 (d,J =7,42 Hz, 2H), 4,07-3,92 (m, 5H), 3,77-3,70 (m, 8H), 3,62-3,55 (m, 5H), 4,07-3,95 (m, 5H), 3,74-3,56 (m, 8H), 3,60-3,55 (m, 5H), 3,30 (d,J=8,2 Hz, 5H), 3,20-3,16 (m, 7H), 2,60-2,51 (m, 10H), 1,97-1,95 (m, 3H), 1,61-1,59 (m, 7H), 1,49-1,45 (m, 2H). 18. Dobijanje 3,5-diamino-N-(4-(4-((S)-2-amino-3-okso-3-(4-(3-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksilamino)propil)fenilamino)propil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-l-il)butilkarbamoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (131)
Dobijanje jedinjenja 128;
Jedinjenje119(1,00 g, 1,92 mmol) u THF (30 ml) redom je pomešano sa DEPBT (862 mg, 2,88 mmol),34(1,50 g, 2,98 mmol) i DIPEA (1,0 ml, 5,76 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatakje rastvoren u CH2CI2(50 ml), brzo opran vodom (30 ml) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (20 ml), pa osušen nad Na2S04. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (6% metanol/CH2Cl2), čime je dobijen amid128(780 mg, 42%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 7,49 (m, 3H), 7,31-7,29 (m, 10H), 7,00-7,08 (m, 3H), 6,94 (d,J=7,4 Hz, IH), 5,54 (m, IH), 5,50-5,49 (m, IH), 5,08 (s, 2H), 4,36 (m, IH), 4,26-4,22 (m, 2H), 4,05 (m, 2H), 3,95-3,91 (m, IH), 3,80 (m, 2H), 3,64-3,59 (m, IH), 3,52-3,48 (m, IH), 3,14-3,06 (m, IH), 2,94-2,89 (m, IH), 2,79(d, J =16,12 Hz, 4H), 2,63 (t,J=5,98 Hz, IH), 2,51 (t,J=6,9 Hz, IH), 1,82-1,75 (m, 7H), 1,41 (s, 18H).
Dobijanje jedinjenja 129;
Suspenzija jedinjenja 128 (780 mg, 0,776 mmol) i 10% Pd/C (300 mg) u smeši EtOH (30 ml) i AcOH (1,0 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobila aminska so 129 (720 mg, 85%>) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 7,49-7,46 (m, 2H), 7,32-7,30 (m, 5H), 7,08-7,06 (d,J=7,2 Hz, IH), 6,88 (d,J=7,4 Hz, IH), 5,53 (s, IH), 4,34-4,33 (m, IH), 4,25-4,21 (m, IH), 4,03-4,02 (m, IH), 3,96-3,89 (m, IH), 3,78-3,76 (m, IH), 3,71-3,69 (m, IH), 3,60 (t, /= 9,9 Hz, IH), 3,48-3,46 (m, IH), 3,09-3,04 (m, IH), 2,89 (t,J=7,3 Hz, 3H), 2,79 (m, 2H), 2,69 (m, 2H), 2,58 (t,J=6,5 Hz, 2H), 2,51 (t, /= 6,8 Hz, 2H), 1,84-1,77 (m, 6H), 1,67-1,66 (m, 2H), 1,61-1,57 (m, 2H), 1,41 (s, 18H).
Dobijanje jedinjenja 130;
Rastvor aminske soli 129 (720 mg, 0,77 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (13, 456 mg, 1,17 mmol) u EtOH (20 ml) pomešan je sa DIPEA (1,12 ml, 6,24 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 130 (380 mg, 45%) u vidu žute čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 7,48-7,46 (m, 2H), 7,30 (t,J=2,70 Hz, 5H), 7,08-7,06 (d, /= 7,6 Hz, 2H), 6,93 (d, /= 7,1 Hz, IH), 6,88 (d, /= 7,3 Hz, IH), 5,53 (s, IH), 4,34 (m, IH), 4,25-4,21 (m, IH), 4,04 (m, IH), 3,96-3,90 (m, IH), 3,79 (m, 2H), 3,60 (t,J=10,0 Hz, IH), 3,50-3,46 (m, IH), 3,25 (t,J=5,9 Hz, 3H), 3,07-3,02 (m, IH), 2,92-2,87 (m, IH), 2,77 (m, 2H), 2,69-2,67 (m, 2H), 2,58 (t,J=6,0 Hz, 2H), 2,48 (t, /= 6,8 Hz, 2H), 1,82-1,74 (m, 6H), 1,67-1,64 (m, 5H), 1,40 (s, 18H).
Dobijanje HC1 soli 3,5-diamino-N-(4-(4-((S)-2-amino-3-okso-3-(4-(3-((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksilamino)propil)fenilamino)propil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-l-il)butilkarbamoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (131)
4 N HC1 u dioksanu (25 ml) dodato je u 130 (350 mg, 0,35 mmol) u EtOH (5,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (Gold kolona), pa je ostatak liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 131 (125 mg, 48%>) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,35 (d,J=7,6, 2H), 7,18 (d,J=7,3, 2H), 6,99-6,98 (m, 2H), 4,07-4,03 (m, 2H), 3,83 (d,J=1,30, IH), 3,82 (d,J= 1,40Hz, IH), 3,78-3,75 (m, IH), 3,68-3,66 (m, 3H), 3,36 (t,J=6,3, 2H), 3,18-3,15 (m, 4H), 3,04-3,00 (m, 2H), 2,76 (t,J=5,3 Hz, 2H), 2,69-2,61 (m, 5H), 2,00-1,97 (m, 2H), 1,77-1,73 (m, 5H), 1,69-1,65 (m, 3H). 'H NMR (400 MHz, D20): 5 10,46 (s, IH), 9,31 (br, IH), 8,55 (br, 4H), 7,45 (d,J=6,6, 4H), 7,20 (d,J=7,62 Hz, 2H), 7,00 (d,J=6,6, IH), 6,93 (d,J=6,6 Hz, IH), 5,43 (d,J=3,8 Hz, IH), 4,79( d, J=5,38 IH), 4,64-4,63 (m, 2H), 4,46 (t,J=4,9 Hz, IH), 4,15 (t,J=4,6 Hz, IH), 3,96-3,94 (m, IH), 3,71 (m, IH), 3,64-3,61 (m, IH), 3,51-3,45 (m, 3H), 2,96-2,92 (m, 3H), 2,78-2,77 (m, 2H), 2,68-2,65 (m, 2H), 2,62 (t,J=6,6 Hz, 2H), 1,95-1,94 (m, 2H), 1,76-1,15 (m, 8H).19. Dobijanje (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-(dimetilamino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (135)
Dobijanje jedinjenja132;
Jedinjenje 119 (700 mg, 1,34 mmol) u THF (30 ml) redom je pomešano sa DEPBT (600 mg, 2,00 mmol), 18 (360 mg, 1,51 mmol) i DIPEA (0,80 ml, 4,03 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača pod sniženim pritiskom, ostatakje rastvoren u CH2CI2(50 ml), brzo opran vodom (50 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml), pa osušen nad Na2S04. Nakon isparavanja rastvarača sirov proizvod prečišćen je brzom hromatografijom na silika gelu (6% metanol/C^Ch) čime je dobijen amid 132 [800 mg (smeša)] u vidu žutog čvrstog proizvoda:<>>H NMR (400 MHz, DMSO-^e): 5 8,13 (d,/=7,54 Hz, IH), 8,03 (d,/ =7,7 Hz, IH), 7,89-7,85 (m, IH), 7,71 (t,J=7,52 Hz, IH), 7,64-7,59 (m, 2H), 7,44 (d, /= 7,7 Hz, 2H), 7,33-7,30 (m, 6H), 7,12-7,06 (m, 3H), 7,0 (d, /= 7,6 Hz, IH), 5,02 (s, 2H), 2,70 (m, 4H), 2,63-2,61 (m, 5H), 2,45 (m, 5H), 1,83 (s, 6H), 1,69-1,65 (m, 3H), 1,33 (s, 9H). Dobijanje jedinjenja 133;
Suspenzija jedinjenja 132 [800 mg (smeša), 1,01 mmol] i 10% Pd/C (350 mg) u smeši EtOH (30 ml) i AcOH (1 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu i prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje 233(500 mg, 67% kroz 2 koraka) u vidu žute čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, DMSO-Je): 8 7,31 (d,J=7,54 Hz, 2H), 7,12 (d,J=7,1 Hz, 2H), 6,93 (d, /= 7,2 Hz, IH), 6,88 (d,J=6,8 Hz, IH), 4,32 (m, IH), 3,08-3,03 (m, IH), 2,91-2,86 (m, IH), 2,77-2,76 (m, 4H), 2,69 (m, 2H), 2,60-2,55 (m, 4H), 2,35-2,31 (m, 2H), 1,82 (s, 6H), 1,58-1,57 (m, 4H), 1,40 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 134;
Rastvor aminske soli 133 (500 mg, 0,90 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (13, 530 mg, 1,36 mmol) u EtOH (20 ml) pomešan je sa DIPEA (1,30 ml, 7,25 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCb/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 134 (285 mg, 42%) u vidu žute čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, DMSO-c/6): 8 7,29 (d, / = 7,5 Hz, 2H), 7,10 (d,J=8,1 Hz, 2H), 6,94-6,87 (m, 2H), 4,33 (m, IH), 3,27-3,24 (m, 2H), 3,07-3,00 (m, IH), 2,92-2,87 (m, IH), 2,76 (m, 2H), 2,70 (m, 2H), 2,61-2,54 (m, 4H), 2,35-2,31 (m, 2H), 2,22 (s, 6H), 1,80-1,72 (m, 5H), 1,69-1,62 (m, 4H), 1,39 (s, 9 H).
Dobijanje HC1 soli (S)-3,5-diamino-N-(N-(4-(4-(2-amino-3-(4-(3-(dimetilamino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida Jedinjenje 135;
4 N HC1 u dioksanu (10 ml) dodato je u 134 (380 g, 0,35 mmol) u EtOH (5,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je
prečišćena hromatografijom reverznih faza (C18 Gold kolona), a ostatakje liofilizovan kako bi se dobilo jedinjenje 135 (125 mg, 49%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-Je): 8 10,69 (brs, IH), 10,54-10,50 (d,J=16,7 Hz, 2H), 9,32 (t,J=4,8 Hz, IH), 8,96 (brs, IH), 8,86 (brs, IH), 8,58 (brs, 3H), 7,42 (d,J=8,0 Hz, 4H), 7,18( d, J =8,2 Hz, 2H), 6,96 (d,J=7,3 Hz, IH), 6,88 (d,J=7,4 Hz, IH), 4,15 (t,J=4,4 Hz, IH), 3,36-3,32 (m, 2H), 3,09-3,06 (m, 2H), 3,00-2,95 (m, 2H), 2,74-2,73 (m, IH), 2,22 (s, 6H), 2,64 (m, 2H), 2,57-2,56 (m, 2H), 1,94-1,90 (m, 2H), 1,70-1,67 (m, 3H), 1,62-1,58 (m, 2H), 1,54-1,52 (m, 2H).
'H NMR (400 MHz, D20): 8 7,08 (d,J=7,7 Hz, 2H), 7,00-6,97 (q, 2H), 6,91 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 4,12-4,08 (q, IH), 3,25(t, J=5,2 Hz, 3H), 3,21-3,17 (m, IH), 3,10 (t,J=9,8 Hz, IH), 3,0-2,96 (m, 2H), 2,77 (s, 6H), 2,60-2,58 (m, 5H), 2,50-2,50 (m, 4H), 1,91-1,87 (m, 2H), 1,60-1,58 (m, 6H), 1,45-1,43 (m, 2H).
20. Dobijanje (S)-2-amino-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonil)guanidino)butil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-l-il)propanoične kiseline (139)
Dobijanje jedinjenja136;
Suspenzija 118 (800 mg, 1,49 mmol) i 10% Pd/C (350 mg) u smeši EtOH (50 ml) i AcOH (1.0 ml) degasirana je i podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) tokom 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celitni filter, pa je filter opran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu i prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje 136 (700 mg, 93%) u vidu žute čvrste supstance.
Dobijanje jedinjenja 137;
Rastvor aminske soli 136 (700 mg, 1,50 mmol) i metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioata (13, 880 mg, 2,26 mmol) u EtOH (30 ml) pomešan je sa DIPEA (2,15 ml, 12,03 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C u hermetički zatvorenoj epruveti 2 h, rashlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobio guanidin 137 (560 mg, 60%) u vidu žute čvrste supstance:'H NMR (400 MHz, CD3OD); 5 6,95-6,85 (m, 2H), 4,32-4,28 (m, IH), 3,72-3,67 (m, 2H), 3,34 (m, 3H), 3,22-3,16 (m, 2H), 3,08-3,03 (m, IH), 2,73 (m, 4H), 2,62 (t,J=7,0 Hz, IH), 1,81-1,78 (m, 4H), 1,74-1,72 (m, 2H), 1,68-1,60 (m, 2H), 1,36 (s, 9H), 1,34 (s, 5H). Dobijanje jedinjenja 138;
U rastvor metil-estra 137 (560 mg, 0,907 mmol) u THF/MeOH/H20 (30 ml/30 ml/10 ml) dodat je NaOH (3,60 g, 7.25 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Vrednost pH podešena je na 9 pomoću 1 N vodenog rastvora HC1 pa je uklonjen organski rastvarač. Vrednost pH ostatka podešena je na 5-6 pa je suspenzija podeljena između CH2CI2(100 ml) i vode (50 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(100 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 138 (420 mg, 78%) u vidu smeđe čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-ck)\8 6,93 (d,J=6,7 Hz, IH), 6,84 (d,J=7,35 Hz, IH), 6,70 (s, 3H), 3,93 (m, IH), 3,16 (m, 5H), 2,98-2,94 (m, IH), 2,74-2,64 (m, 6H), 1,70 (m, 5H), 1,55 (m, 5H), 1,31 (s, 9H), 1,16-1,06 (m, 2H).
Dobijanje HC1 soli (S)-2-amino-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonil)guanidino)butil)-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-l-il)propanoične kiseline Jedinjenje 139;
4 N HC1 u dioksanu (10 ml) dodato je u 138 (420 mg, 0,69 mmol) u EtOH (5,0 ml) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza (C18 Gold kolona), a ostatakje liofilizovan kako
bi se dobilo jedinjenje 139 u vidu žute čvrste supstance (200 mg, 49%): 'H NMR (400 MHz,DMSO-Je);8 10,56 (brs, IH), 9,36 (t,J=4,7 Hz, IH), 8,9-8,8 (brs, 2H), 6,98-6,93 (m, 2H), 3,95-3,92 (m, 2H), 3,38-3,35 (m, 2H), 3,04 (d,J=7,0 Hz, 2H), 2,67-2,66 (m, 4H), 2,56-2,55 (m, 2H), 1,72-1,70 (m, 4H), 1,63-1,56 (m, 4H). 'H NMR (400 MHz, D20); 8 7,43 (brs, 2H), 6,94 (d,J=7,2 Hz, IH), 6,87( d, J=7,1 Hz, IH), 3,41 (t,J=6,0 Hz, 2H), 3,28-3,26 (m, 4H), 3,11 (d, IH), 3,08 (m, IH), 2,66-2,64 (m, 6H), 1,67-1,57 (m, 8H). 21. Hiralna sinteza 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (33)
Dobijanje jedinjenja 141;
U rastvor 1-naftola(140,10,0 g, 69,4 mmol) u acetonitrilu (70,0 ml) dodato je nekoliko porcija NBS (142,12,3 g, 69,4 mmol) tokom perioda od 30 min. Dobijena smeša mešana je na sobnoj temperaturi 4 h, koncentrovana u vakuumu, nakon čega je dodata voda (200 ml) i etil-acetat (200 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću etil-acetata (2 x 200 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 4:1 heksani/EtOAc) kako bi se dobilo željeno jedinjenje141(9,50 g, 61%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, DMSO-c/6) 8 10,49 (s, IH), 8,20 (dd,J=8,3, 0,5 Hz, IH), 8,02 (d,/=8,3 Hz, IH), 7,66 (dd,/=8,4, 1,4 Hz, IH), 7,64 (d,J=8,1 Hz, IH), 7,55 (ddd,J= 8,2, 7,7, 1,1 Hz, IH), 6,83 (d,/ =8,2 Hz, IH).
Dobijanje jedinjenja7;
Cinkova prašina (7,03 g, 107,6 mmol) sipana je u Slenkovu posudu osušenu na plamenu i očišćenu azotom. Brizgalicom je dodat anhidrovani DMF (50,0 ml), a zatim katalitička količina joda (1,00 g, 3,94 mmol). Dobijena smeša posmatrana je da bi se uočila promena boje od bezbojne u žutu i nazad u bezbojnu. Zaštićeni jodoalanin143(11,8 g, 35,9 mmol) dodat je u jednoj porciji, a zatim katalitička količina joda (1,00 g, 3,94 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 30 min; uspešno dodavanje cinka praćeno je blagom egzotermnom reakcijom. Rastvor organocinkovog reagensa ostavljen je da se ohladi na sobnu temperaturu pre nego što su dodati Pd2dba3(821 mg, 0,89 mmol), SPhos (736 mg, 1,79 mmol) i aril bromid141(8,00 g, 35,9 mmol) pa je smeša zagrevana na 50 °C tokom 16 h, pod pozitivnim pritiskom azota. Smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Dodati su zasićen rastvor NH4CI (300 ml) i EtOAc (300 ml) pa je smeša filtrirana kroz celit i oprana pomoću EtOAc (100 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću EtOAc (2 x 300 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 4:1 heksani/EtOAc) kako bi se dobilo željeno jedinjenje 7 (4,60 g, 37%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb, smeša rotamera) 8 8.23 (d,/ =8.3 Hz, IH), 7.99 (d,/= 8.6 Hz, IH), 7,54 (t,J=8,04 Hz, IH), 7,48 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,3 Hz, IH), 7,08 (d, J = 7,8 Hz, IH), 6,70 (d, J = 7,6 Hz, IH), 6,57 (br s, 0,2 H), 6,45 (br s, 0,2H), 5,91 (br s, 0,65 H), 5,05 (d,/ =7,7 Hz, 0,75H), 4,89 (br s, 0,25H), 4,68 (q, 7=6,8 Hz, 0,7H), 4,56 (br s, 0,2H), 3,73 (s, 0,7H), 3,62 (s, 2,3 H), 3,49 (dd,/= 14,0, 5,9 Hz, 0,8H), 3,89 (dd,/= 14,0, 7,2 Hz, 0,7H), 3,05 (br s, 0,2H), 1,39 (s, 7,5H), 1,09 (s, 2,5H).
Dobijanje jedinjenja9;
U rastvor jedinjenja 7 (7,60 g, 21,8 mmol) u CH2O2 (150 ml) dodati su piridin (18,0 ml) TfzO (9,19 g, 32,6 mmol) na 0 °C. Dobijena smeša mešana je na sobnoj temperaturi 2 h, koncentrovana u vakuumu i podeljena između CH2CI2(100 ml) i vode (50 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 50 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2SO"4 i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje 9 (11,0 g, sirovo) u vidu smeđeg ulja. Sirov smeđi proizvod direktno je iskorišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja: 'H NMR (400 MHz, CDCb, smeša rotamera) 8 8,19-8,07
(m, 2H), 7,69-7,64 (m, 2H), 7,38 (d, J = 8,1 Hz, IH), 7,28 (d,J=7,9 Hz, IH), 5,12-5,06 (br s, IH), 4,78-4,67 (m, IH), 3,68-3,46 (m, 5H), 1,39 (s, 8H), 1,25 (s, IH). Dobijanje jedinjenja11;
Rastvor jedinjenja 9 (11,0 g, 21,8 mmol) i benzil but-3-inilkarbamata10(6,56 g, 32,6 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (100 ml) degasiran je 10 min u atmosferi argona pa su dodati TEA (11,9 ml, 87,0 mmol), 10% (/-Bu)3P u heksanima (8,80 ml, 4,35 mmol) i Cul (207 mg, 1,08 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša degasirana je argonom još 10 min pa je dodat Pd (PPh3)4(2,51 g, 2,17 mmol) u jednoj porciji. Nakon degasiranja sa argonom 5 min, dobijena smeša refluksovana je 16 h. Reakciona smeša koncentrovana je u vakuumu pa je ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 2:3 heksani/EtOAc) kako bi se dobilo jedinjenje 11 (7,00 g, 61%> kroz dva koraka) u vidu smeđeg ulja: 'H NMR (400 MHz, CDCb, smeša rotamera) 8 8,33 (dd,J =8,9, 1,9 Hz, IH), 8,07 (dd,J=9,0, 1,7 Hz, IH), 7,59-7,49 (m, 3H), 7,39-7,27 (m, 5H), 7,19 (d,J=7,3 Hz, IH), 5,24-5,16 (m, IH), 5,12 (s, 2H), 5,08-4,99 (m, IH), 4,69 (q,J=6,7 Hz, IH), 3,59 (s, 3H), 3,57-3,40 (m, 4H), 2,79 (t,J=6,4 Hz, 2H), 1,39 (s, 7,5 H), 1,11 (s, 1,5 H).
Dobijanje jedinjenja 17;
U rastvor metil-estra 11 (7,00 g, 13,2 mmol) u THF (200 ml), metanolu (200 ml) i vodi (75,0 ml) dodat je čvrst NaOH (16,0 g, 79,2 mmol). Dobijena smeša mešana je na sobnoj temperaturi 1 h dok tankoslojnom hromatografijom nije dokazan završetak reakcije. Dodato je 1 N hlorovodonične kiseline kako bi se pH vrednost reakcione smeše podesila na 10. Nakon što je koncentrovana, dodata je voda (100 ml) pa je pH vrednost podešena na 5-6. Dobijeni talog ekstrahovan je pomoću CH2CI2(2 x 250 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani, koncentrovani i triturisani sa MTBE kako bi se dobilo jedinjenje 17 (5,00 g, 75%) u vidu bele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD; smeša rotamera) 8 8,33 (d,J=8,2 Hz, IH), 8,28-8,20 (m, IH), 7,59-7,45 (m, 3H), 7,38-7,21 (m, 6H), 5,09 (s, 2H), 4,55-4,45 (m, IH), 3,76-3,66 (m, IH), 3,44 (t,J=6,7 Hz, 2H), 3,28-3,20 (m, IH), 2,76 (t,/=6,7 Hz, 2H), 1,29 (s, 6H), 0,82 (s, 3H).
Dobijanje jedinjenja 30;
U rastvor jedinjenja 17 (4,60 g, 8,91 mmol) u THF (160 ml) redom su dodati T3P (50% u etil acetatu, 10,7 ml) i NMM (4,89 ml, 44,5 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi 10 min dodat je amin 29 (6,11 g, 9,33 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje rastvoren u CH2CI2(100 ml), brzo opran zasićenim NH4CI, zasićenim NaHC03i zasićenim vodenim rastvorom NaCl, osušen nad Na2S04i
koncentrovan. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1
CH2Cb/MeOH) kako bi se dobio amid 30 (6,60 g, 64%) u vidu prljavobele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8,33 (dd,J=9,0, 1,7 Hz, IH), 8,17 (d,J=7,3 Hz, IH), 7,62-7,47 (m, 4H), 7,42 (dd,/= 7,7, 4,1 Hz, 4H), 7,37-7,28 (m, 11H), 7,09-6,95 (m, 4H), 5,46 (s, 2H), 5,33 (br s, IH), 5,22(t, J=5,8 Hz, IH), 5,11 (s, 2H), 4,63-4,51 (m, IH), 4,27(dd, J=10,8, 5,4 Hz, 2H), 4,02-3,84 (m, 6H), 3,71 (t,J=4,5 Hz, 6H nečistoće), 3,57 (t, J = 10,6 Hz, 2H), 3,54-3,45 (m, 4H), 2,82-2,60 (m, 6H), 2,59-2,45 (m, 3H), 2,44-2,36 (m, 4H), 1,82-1,69 (m, 2H), 1,38 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 31;
Suspenzija jedinjenja 30 (7,26 g, 6,20 mmol) i 10% Pd/C (1.50 g) u EtOH/AcOH (240 ml, 40,0 ml) degasirana je propuštanjem mehurića argona kroz brizgalicu tokom 10 min pa je podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu i triturisan pomoću MTBE kako bi se dobila aminska so 31 (7,06 g, 98%) u vidu smeđe čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD, smeša rotamera) 5 8,24 (dd,J=7,2, 2,0 Hz, IH), 8.09 (d,J=7,0 Hz, IH), 7,59-7,22 (m, 2H), 7,49-7,41 (m, 4H), 7,39-7,22 (m, 10H), 6,95 (d,J= 8,5 Hz, 2H), 5,51 (s, 2H), 4,55 (t,J=7,2 Hz, IH), 4,24 (dd,J=10,7, 5,4 Hz, 2H), 4,19-4.10 (m, 2H), 3,99-3,88 (m, 4H), 3,83-3,73 (m, 8H, nečistoće), 3,61 (t,J=10,5, Hz, 2H), 3,59-3,52 (m, IH), 3,45-3,36 (m, IH), 3,19-3,02 (m, 4H), 2,93-2,81 (m, 8H), 2,54.2,39 (m, 2H), 1,95 (s, 6H), 1,88-1,80 (m, 2H), 1,80-1,65 (m, 4H), 1,36 (s, 7H), 1,09 (s, 2H).
Dobijanje 32
U rastvor jedinjenja 31 (7,06 g, 6,18 mmol) u EtOH (50,0 ml) dodat je DIPEA (8,80 ml, 49,4 mmol), a zatim metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioat (13, 3,84 g, 9,88 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C tokom 2 h, ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje dvaput prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCI3/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje 32 (2,50 g, 33%) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD, smeša rotamera) 5 8,22 (d,J =9,3 Hz, IH), 8,08 (d,J=7,8 Hz, IH), 7,56-7,47 (m, 4H), 7,43 (dd,J= 7,4, 3,6 Hz, 4H), 7,33-7,14 (m, 10H), 6,94( d, J=8,0 Hz, 2H), 5,47 (s, 2H), 4,53 (t,J=7,7 Hz, IH), 4,22 (dd,J=10,8, 5,4 Hz, 2H), 3,99-3,89 (m, 4H), 3,84 (dd,J =5,5, 2,3 Hz, 2H), 3,70 (dd,J =9,2, 2,2 Hz, 2H), 3,59 (t,J =10,8 Hz, 2H), 3,54-3,46 (m, IH), 3,47-3,38 (m, IH), 3,22 (t,J=6,4 Hz, 2H), 3,11-3,02 (m, 2H), 2,70 (dd,J =13,5, 4,6 Hz, 2H), 2,61 (dd,J =13,6, 8,9, 2H), 2,57-2,47 (m, 2H), 2,46-2,34 (m, 2H), 1,84-1,73 (m, 2H), 1,72-1,61 (m, 4H), 1,36 (s, 7H), 1,12 (s, 2H).
DobijanjeHC1 soli 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (33)
U rastvor jedinjenja 32 (2,50 g, 2,02 mmol) u EtOH (30,0 ml) dodato je 4 N hlorovodonične kiseline (80,0 ml). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza i liofilizovana kako bi se dobilo jedinjenje 33 (1,82 g, 85%) u vidu žute higroskopne čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz,DMSO-Je)8 10,61 (s, IH), 10,59 (s, IH), 9,41 (t,J=5,2 Hz, H), 9,01 (br s, IH), 8,96 (br s, IH), 8,81 (br s, 2H), 8,77 (br s, 2H), 8,44-8,37 (m, IH), 8,16-8,10 (m, IH), 7,61-7,52 (m, 2H), 7,41 (d,J=8,6 Hz, 2H), 7,35 (d,J=7,5 Hz, IH), 7,27 (d,J=7,3 Hz, IH), 7,17 (d,J=8,5 Hz, 2H), 4,28 (q,J=7,4 Hz, IH), 4,09-3,99 (m, 2H), 3,75-3,65 (m, 3H), 3,58 (dd,J =11,0, 2.6 Hz, 2H), 3,55-3,31 (m, 10H), 3,30-3,13 (m, 4H), 3,32-3,00 (m, 2H), 2,63-2,53 (m, 2H), 2,05-1,92 (m, 2H), 1,78-1,61 (m, 4H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 9,25 (t,J=5,9 Hz, 0,5H), 8,26-8,21 (m, IH), 8,17-8,12 (m, IH), 7,60-7,54 m, 2H), 7,38(d, J= 7,2 Hz,IH), 7,32(d, J= 7,2Hz, IH), 7,25(d, J= 8,6 Hz,2H), 7,15(d, 7=8,6Hz, 2H), 4,31(t, J=8,1 Hz, IH), 4,21-4,14 (m, IH), 4,13-4,08 (m, IH), 3,85-3,80 (m, 2H), 3,79(d, /= 2,9 Hz, IH), 3,76 (d, /= 3,2 Hz, IH), 3,73-3,62 (m, 8H), 3,51-3,34 (m, 8H), 3,15 (t, /= 6,8 Hz, 2H), 2,73-2,57 (m, 2H), 2,15-1,98 (m, 2H), 1,91-1,73 (m,
4H).
22. Dobijanje (2R,2'R,3R,3'R,4R,4,R,5S,5'S)-6,6'-(3-(4-aminofenil)propilazanediil)diheksan-l,2,3,4,5-pentaola (29)
Dobijanje jedinjenja 145
U rastvor jedinjenja144(8,80 g, 154,1 mmol) u CH2CI2(150 ml) dodati su TEA (32,2 ml, 231,2 mmol) i B0C2O (40,4 g, 185,3 mmol) na 0 °C. Nastavljeno je s mešanjem reakcione smeše na 0 °C tokom 0,5 h, pa je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 5 h. Zatim je smeša podeljena između CH2CI2(150 ml) i vode (150 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CL2CI2(2x 150 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2SO"4 i koncentrovani da bi se dobilo željeno jedinjenje145(22,0 g, 91%) u vidu bezbojnog ulja: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 5,90-5,77 (m, IH), 5,17(dq, J=17,1, 1,7 Hz, IH), 5,10 (dq,/= 10,4, 1,4 Hz, IH), 4,64 (brs, IH), 3,74 (t,J=5,2 Hz, 2H), 1,45 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 147
U rastvor jedinjenja145(14,0 g, 89,12 mmol) u bezvodnom THF (150 ml) dodat je 9-BBN (0,5 M u THF, 270 ml, 133,8 mmol) pod argonom. Nakon što je reakciona smeša mešana 2 h na sobnoj temperaturi, dodati su jedinjenje146(17,7 g, 71,3 mmol), Pd(PPh3)2Cb (3,12 g, 4,45 mmol) i 1 N aq NaOH (150 ml) na sobnoj temperaturi. Nastala smeša je mešana još 1 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje podeljen između EtOAc (200 ml) i vode (200 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću EtOAc (2 x 200 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 4:1 heksani/EtOAc) kako bi se dobilo jedinjenje147(8,00 g, 43%) u vidu smeđe čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8,14 (d, /= 8,9 Hz, 2H), 7,34 (d, /= 8,9 Hz, 2H), 4,56 (br s, IH), 3,17 (q,J=6,2 Hz, 2H), 2,75 (t,J=7,7 Hz, 2H), 1,89-1,79 (m, 2H), 1,44 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 148;
Jedinjenje147(8,00 g, 28,6) rastvoreno je u 4 N HC1 u dioksanu (50,0 ml) na sobnoj temperaturi pa je rastvor mešan 1 h. Reakciona smeša koncentrovana je u vakuumu pa je ostatak triturisan sa MTBE kako bi se dobilo jedinjenje148(4,00 g, 65%) u vidu smeđe čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8,19 (d,J=8,7 Hz, 2H), 7,50 (d,J=8,7 Hz, 2H), 2,98 (t,J=7,4 Hz, 2H), 2,86 (t,J=7,6 Hz, 2H), 2,07-1,97 (m, 2H).
Dobijanje jedinjenja 150;
U rastvor jedinjenja148(4,00 g, 18,5 mmol) itriola 149(24,8 g, 92,5 mmol) u MeOH (150 ml) dodat je AcOH (11,1 ml, 185 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 10 min. Nakon dodavanja NaCNBH3(5,83 g, 92,5 mmol), rastvor je i dalje mešan na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Tokom 4 dana dodavani su dodatno jedinjenje149(4,0 ekviv), AcOH (4.0 ekviv) i NaCNBH3(4,0 ekviv). Zatim su dodati heksanal (2,0 ekviv), AcOH (2,0 ekviv) i NaCNBH3(2,0 ekviv). Rastvor je dalje mešan tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje neutralisan zasićenim NaHC03a ostatakje podeljen između EtOAc (200 ml) i vode (200 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 300 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CftCk/MeOH, 80:18:2 CHCl3/MeOH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje150(6,50 g, 52%) u vidu prljavobele čvrste supstance. Dodatna 4,00 g materijala iz nečistih frakcija izolovano je i prečišćeno u koloni reverznih faza kako bi se dobio 1,50 g (12%>) čistog jedinjenja 150 (ukupno 7,70 g, 64%): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8,03 (d,J=8,7 Hz, 2H), 7,50-7,41 (m, 4H), 7,35-7,23 (m, 8H), 5,48 (s, 2H), 4,22 (dd,J=10,6, 5,3 Hz, 2H), 3,99-3,91 (m, 4H), 3,85 (dd,J=5,5, 2,4 Hz, 2H), 3,70 (dd,J=9,5, 2,4 Hz, 2H), 3,59 (t,J=10,6 Hz, 2H), 2,73 (dd,/= 13,6, 4,5 Hz, 2H), 2,67-2,50 (m, 6H), 1,83-1,71 (m, 2H).Dobijanje (2R,2'R,3R,3'R,4R,4,R,5S,5'S)-6,6,-(3-(4-aminofenil)propilazanediil)dihcksan-l,2,3,4,5-pcntaola (jedinjenje153); Suspenzija jedinjenja150(6,50 g, 9,50 mmol) i 10% Pd/C (1,30 mg) u EtOH (150 ml) degasirana je uduvavanjem argona pomoću brizgalice u toku 10 min, zatim mešana na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi (balon, 1 atm) tokom 6 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, paje oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje 153 (6,01 g, 97%) u vidu prljavobele čvrste supstance.
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,49-7,42 (m, 4H), 7,35-7,26 (m, 6H), 6,82 (d,J=8,4 Hz,
2H), 6,60(d, J=8,4 Hz, 2H), 5,48 (s, 2H), 4,22 (dd,/=10,8, 5,9 Hz, 2H), 3,98-3,89 (m, 4H), 3,83 (dd,J=5,7, 2,3 Hz, 2H), 3,69 (dd,J=13,2, 3,4 Hz, 2H), 3,62-3,55 (m, 3H), 2,71 (dd,/= 13,2, 3,4 Hz, 2H), 2,65-2,48 (m, 3H), 2,45-2,29 (m, 2H), 1,74-1,63 (m, 2H).
23. Dobijanje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((R)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksaniida (152)
Dobijanje jedinjenja14
U rastvor 1-naftola (1, 10,0 g, 69,4 mmol) u acetonitrilu (70,0 ml) dodato je nekoliko porcija NBS (142,12,3 g, 69,4 mmol) tokom perioda od 30 min. Dobijena smeša mešana je na sobnoj temperaturi 4 h, koncentrovana u vakuumu, nakon čega su dodati voda (200 ml) i etil-acetat (200 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću etil-acetata (2 x 200 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani. Ostatakje prečišćen kristalizacijom (heptan/EtOAc) kako bi se dobilo željeno jedinjenje14(6,0 g, 39%) u vidu bele čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz,DMSO-</6):8 10,49 (s, IH), 8,20 (dd,J=8,3, 0,5 Hz, IH), 8,02 (d,J=8,3 Hz, IH), 7,66 (dd,J=8,4, 1,4 Hz, IH), 7,64 (d,J=8,1 Hz, IH), 7,55 (ddd,J=8,2, 7,7, 1,1 Hz, IH), 6,83 (d,J=8,2 Hz,
IH).
Dobijanje jedinjenja 145
Cinkova prašina (4,76 g, 72,9 mmol) sipana je u Šlenkovu posudu osušenu na plamenu i očišćenu azotom. Brizgalicom je dodat anhidrovani DMF (25,0 ml), a zatim katalitička količina joda (677 mg, 2,67 mmol). Dobijena smeša posmatrana je da bi se uočila promena boje od bezbojne u žutu i nazad u bezbojnu. Zaštićeni jodoalanin114(8,00 g, 24,3 mmol) dodat je u jednoj porciji, a zatim katalitička količina joda (677 mg, 2,67 mmol) pa je mešano na sobnoj temperaturi 30 min; uspešno dodavanje cinka praćeno je blagom egzotermnom reakcijom. Rastvor organocinkovog reagensa ostavljen je da se ohladi na sobnu temperaturu pre nego što su dodati Pd2(dba)3(556 mg, 0,60 mmol), SPhos (498 mg, 1,21 mmol), i aril bromid14(5,40 g, 24,3 mmol) pa je smeša zagrevana na 50 °C tokom 16 h, pod pozitivnim pritiskom azota. Smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Dodati su zasićen rastvor NH4CI (300 ml) i EtOAc (300 ml) pa je smeša filtrirana kroz celit i oprana pomoću EtOAc (100 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću EtOAc (2 x 300 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 4:1 heksani/EtOAc) kako bi se dobilo željeno jedinjenje145(3,10 g, 37%o) u vidu žute čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb, smeša rotamera): 8 8,23 (d,/=8,3 Hz, IH), 7,99 (d,J=8,6 Hz, IH), 7,54 (t,J=8,04 Hz, IH), 7,48 (ddd, J = 8,3, 6,9, 1,3 Hz, IH), 7,08 (d, J =
7,8 Hz, IH), 6,70 (d, J = 7,6 Hz, IH), 5,98 (brs, 0,3H), 5,59 (br s, 0,7 H), 5,03 (d,J= 1, 1Hz, 0,85H), 4,84 (br s, 0,15H), 4,68 (q, J=6,8 Hz, IH), 3,76-3,68 (m, IH), 3,62 (s, 3H), 3,54-3,33 (m, 2H), 1,39 (s, 7H), 1,09 (s, 2H).
Dobijanje jedinjenja 146
U rastvor jedinjenja145(3,07 g, 8,90 mmol) u CH2CI2(75,0 ml) dodati su piridin (7,25 ml, 88,9 mmol) i Tf^O (2,24 ml, 13,3 mmol) na 0 °C. Dobijena smeša mešana je na sobnoj temperaturi 2 h, koncentrovana u vakuumu i podeljena između CH2CI2(100 ml) i vode (50 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 50 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2SO"4 i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje146(4,20 g, sirovo) u vidu smeđeg ulja. Sirov smeđi proizvod direktno je iskorišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. 'H NMR (400 MHz, CDCb, smeša rotamera): 5 8,19-8,07 (m, 2H), 7,69-7,64 (m, 2H), 7,38 (d, /= 8,1 Hz, IH), 7,28 (d, /= 7,9 Hz, IH), 5,12-5,06 (br s, IH), 4,78-4,67 (m, IH), 3,68-3,46 (m, 5H), 1,39 (s, 8H), 1,25 (s, IH).
Dobijanje jedinjenja 147
Rastvor jedinjenja 6 (4,20 g, 8,80 mmol, sirovog) i benzil but-3-inilkarbamata 7 (2,65 g, 13,2 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (50,0 ml) degasiran je 10 min u atmosferi argona pa su dodati TEA (4,81 ml, 35,2 mmol), 10% (/-Bu)3P u heksanima (3,56 ml, 1,76 mmol) i Cul (84 mg, 0,44 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša degasirana je argonom još 10 min pa je dodat Pd (PPh3)4(1,01 g, 0,88 mmol) u jednoj porciji. Nakon degasiranja sa argonom 5 min, dobijena smeša refluksovana je 18 h. Reakciona smeša koncentrovana je u vakuumu pa je ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 2:3 heksani/EtOAc) kako bi se dobilo jedinjenje147(3,20 g, 67%> kroz dva koraka) u vidu smeđeg ulja. 'H NMR (400 MHz, CDCb, smeša rotamera): 8 8,33 (dd,J=8,9, 1,9 Hz, IH), 8,07 (dd,/=9,0, 1,7 Hz, IH), 7,59-7,49 (m, 3H), 7,39-7,27 (m, 5H), 7,19(d, J=7,3 Hz, IH), 5,24-5,16 (m, IH), 5,12 (s, 2H), 5,08-4,99 (m, IH), 4,69 (q, /= 6,7 Hz, IH), 3,59 (s, 3H), 3,57-3,40 (m, 4H), 2,79 (t, / = 6,4 Hz, 2H), 1,39 (s, 7,5 H), 1,11 (s, 1,5 H).
Dobijanje jedinjenja 148
U rastvor metil-estra147(3,10 g, 5,84 mmol) u THF (60 ml), metanolu (60 ml) i vodi (20,0 ml) dodat je čvrst NaOH (1,40 g, 35,09 mmol). Dobijena smeša mešana je na sobnoj temperaturi 2 h dok tankoslojnom hromatografijom nije dokazan završetak reakcije. Dodato je 1 N hlorovodonične kiseline kako bi se pH vrednost reakcione smeše podesila na 10. Nakon što je koncentrovana, dodata je voda (100 ml) pa je pH vrednost podešena na 5-6. Dobijeni talog ekstrahovan je pomoću CH2CI2(2 x 200 ml). Organski slojevi su pomešani, osušeni nad Na2S04, filtrirani, koncentrovani i triturisani sa MTBE kako bi se dobilo jedinjenje148(3,00 g, 99%) u vidu bele čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CD3OD; smeša rotamera): 8 8,33(d, J=8,2 Hz, IH), 8,28-8,20 (m, IH), 7,59-7,45 (m, 3H), 7,38-7,21 (m, 6H), 5,09 (s, 2H), 4,55-4,45 (m, IH), 3,76-3,66 (m, IH), 3,44 (t,J=6,7 Hz, 2H), 3,28-3,20 (m, IH), 2,76 (t, /= 6,7 Hz, 2H), 1,29 (s, 6H), 0,82 (s, 3H).
Dobijanje jedinjenja 149
U rastvor jedinjenja 148 (800 mg, 1,55 mmol) u THF (30 ml) redom su dodati T3P (50% u etil acetatu, 1,86 ml) i NMM (0,85 ml, 7,75 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi 10 min dodat je amin 29 (1,01 g, 1,55 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje rastvoren u CH2CI2(100 ml), brzo opran zasićenim NH4CI, zasićenim NaHCOs i vodenim rastvorom NaCl, osušen nad Na?S04i koncentrovan. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CH2Ci2/MeOH) kako bi se dobio amid 149 (1,20 g, 67%>) u vidu prljavobele čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,35 (d,J=8,0, 1,7 Hz, IH), 8,19 (d,/=8,5 Hz, IH), 7,60-7,52 (m, 2H), 7,50 (d,J =7,3 Hz, 2H), 7,45-7,39 (m, 5H), 7,37-7,28 (m, 1 IH), 7,08-6,96 (m, 3H), 5,47 (s, 2H), 5,33-5,17 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 4,59-4,48 (m, IH), 4,29 (dd,J=10,8, 5,4 Hz, 2H), 4,07-4,00 (m, 2H), 3,99-3,91 (m, 4H), 3,78-3,68 (m, 3H), 3,59 (t, J = 10,6 Hz, 2H), 3,55-3,46(m, 4H), 2,95-2,82 (m, 2H), 2,81-2,69 (m, 4H), 2,68-2,57 (m, IH), 2,56-2,44 (m, 3H), 2,43-2,38 (m, IH), 1,85-1,69 (m, 2H), 1,38 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 150
Suspenzija jedinjenja 149 (1,15 g, 1,00 mmol) i 10% Pd/C (230 mg) u EtOH/AcOH (80,0 ml/20,0 ml) degasirana je propuštanjem mehurića argona kroz brizgalicu tokom 10 min pa je podvrgnuta uslovima hidrogenacije (1 atm) 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu i triturisan pomoću MTBE kako bi se dobila aminska so 150 (1,12 g, 97%) u vidu smeđe čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CD3OD, smeša rotamera): 8 8,25 (dd, /= 7,2, 2,0 Hz, IH), 8,09 (d, /= 7,0 Hz, IH), 7,59-7,51 (m, 2H), 7,48-7,41 (m, 4H), 7,37-7,21 (m, 10H), 6,94 (d, / = 8,5 Hz, 2H), 5,52 (s, 2H), 4,54 (t, / = 7,2 Hz, IH), 4,24 (dd, / = 10,7, 5,4 Hz, 2H), 4,16-4,08 (m, 2H), 3,97-3,88 (m, 4H), 3,75-3,70 (m, 2H), 3,62 (t, /= 10,5, Hz, 2H), 3,60-3,51 (m, IH), 3,28-3,15 (m, 2H), 3,14-2,95 (m, 4H), 2,89 (t,J=7,4 Hz, 2H), 2,73-2,67 (m, IH), 2,54-2,39 (m, 2H), 1,95 (s, 6H), 1,88-1,64 (m, 8H), 1,36 (s, 7,5H), 1,09 (s, 1,5H).
Dobijanje jedinjenja 151
U rastvor jedinjenja 150 (1,05 g, 0,92 mmol) u EtOH (15,0 ml) dodat je DIPEA (1,30 ml, 7,35 mmol), a zatim metil 3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonilkarbamimidotioat (13, 573 mg, 1,47 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša zagrevana je na 70°C tokom 2 h, ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana u vakuumu. Ostatakje dvaput prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 80:18:2 CHCb/CH3OH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje 151 (410 mg, 36%) u vidu žute čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CD3OD, smeša rotamera): 8 8,22 (d,J=8,4 Hz, IH), 8,09 (d,J=8,2 Hz, IH), 7,56-7,48 (m, 2H), 7,47-7,40 (m, 4H), 7,33-7,25 (m, 6H), 7,22 (d,J=7,5 Hz, 2H), 7,16 (d,J=7,8 Hz, 2H), 6,94
(d,J=8,1 Hz, 2H), 5,47 (s, 2H), 4,53(t, J=8,1 Hz, IH), 4,22 (dd,J=10,8, 5,4 Hz, 2H), 3,99-3,89 (m, 4H), 3,84 (dd,J=5,5, 2,1 Hz, 2H), 3,70 (dd,J=9,1, 2,0 Hz, 2H), 3,59 (t,J =10,8 Hz, 2H), 3,53-3,47 (m, IH), 3,46-3,39 (m, IH), 3,26-3,17 (m, 2H), 3,12-3,04 (m, 2H), 2,70 (dd,J=13,2, 4,0 Hz, 2H), 2,60 (dd,J=13,0, 8,2, 2H), 2,57-2,49 (m, 2H), 2,47-2,33 (m, 2H), 1,84-1,73 (m, 2H), 1,72-1,61 (m, 4H), 1,37 (s, 7H), 1,12 (s, 2H). Sinteza 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((R)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)propil)fenilamino)-3-oksopropil)naftalen-l-il)butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamida (152)
U rastvor jedinjenja 151 (480 mg, 0,42 mmol) u EtOH (5,0 ml) dodato je 4 N hlorovodonične kiseline (25,0 ml). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen, smeša je prečišćena hromatografijom reverznih faza i liofilizovana kako bi se dobilo jedinjenje 152 (300 mg, 71%) u vidu žute higroskopne čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, DMSO-c/e): 8 10,57 (brs, IH), 10,55 (brss, IH), 9,35 (t,J=6,0 Hz, IH), 9,04-8,84 (m, 2H), 8,81-8,66 (m, 4H), 8,42-8,36 (m, IH), 8,16-8,10 (m, IH), 7,61-7,53 (m, 2H), 7,41 (d,J =8,6 Hz, 2H), 7,35( d, J =7,5 Hz, IH), 7,28 (d,J=7,8 Hz, IH), 7,17( d, J =9,0 Hz, 2H), 4,32-4,23 (m, IH), 4,08-3,97 (m, 2H), 3,75-3,30 (m, 13H), 3,29-3,15 (m, 4H), 3,14-2,97 (m, 2H), 2,64-2,53 (m, 2H), 2,05-1,92 (m, 2H), 1,79-1,60 (m, 4H).
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,25-8,21 (m, IH), 8,18-8,13 (m, IH), 7,59-7,53 (m, 2H), 7,38 (d,J=7,3 Hz, IH), 7,32 (d,J=7,3 Hz, IH), 7,26 (d,J=8,8 Hz, 2H), 7,15 (d,J=8,5 Hz, 2H), 4,30 (t,J=7,3 Hz, IH), 4,20-4,14 (m, IH), 4,13-4,08 (m, IH), 3,84-3,80 (m, 2H), 3,79-3,75(m, 2H), 3,72-3,61 (m, 8H), 3,51-3,34 (m, 8H), 3,15 (t,J=7,3 Hz, 2H), 2,74-2,58 (m, 2H), 2,13-1,98 (m, 2H), 1,91-1,73 (m, 4H).
HRMS izračunat za C44H64CIN10O12[M + Na]<+>, 959,4418 i dobijen 959,4394.
24. Dobijanje intermedijera 18
Dobijanje jedinjenja155;
U rastvor jedinjenja 154 (500 mg, 9,00 mmol) u CH2CI2(50 ml) dodati su TEA (1,63 ml, 11.7 mmol) i B0C2O (2,16 g, 9,90 mmol) na 0 °C. Nastavljeno je s mešanjem reakcione smeše na 0 °C tokom 0,5 h, pa je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 3 h. Zatim je smeša podeljena između CH2CI2(50 ml) i vode (50 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 50 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04,koncentrovani, ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 2:3 heksani/EtOAc) da bi se dobilo željeno jedinjenje 155 (1,20 g, 86%) u vidu bezbojnog ulja. 'H NMR (300 MHz, CDCb): 8 4,70 (br s, IH), 3,91 (dd,/ =5,3, 2,2 Hz, 2H), 2,21 (t,J =2,7 Hz, IH), 1,45 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 157;
Rastvor jedinjenja 155 (1,00 g, 6,45 mmol) i jedinjenja 156 (1,30 g, 6,45 mmol) u bezvodnom THF (15 ml) degasiran je 10 min u atmosferi argona pa su dodati TEA (3,53 ml, 25.8 mmol), PPtr? (424 mg, 1,61 mmol) i Cul (246 mg, 1,29 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša degasirana je argonom još 10 min pa je dodat Pd (PPli3)4(7,45 g, 6,45 mmol) u jednoj porciji. Nakon degasiranja sa argonom 5 min, dobijena smeša refluksovana je 16 h. Reakciona smeša koncentrovana je u vakuumu pa je ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 2:3 heksani/EtOAc) kako bi se dobilo jedinjenje 157 (750 mg, 42%) u vidu smeđeg ulja. 'H NMR (400 MHz, CDCb) : 8 8,17 (d,/=9,2 Hz, 2H), 7,55 (d,/=9,2 Hz, 2H), 4,79 (brs, IH), 4,18 (d,J=6,0 Hz, 2H), 1,47 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 158;
Jedinjenje 157 (2,00 g, 7,24) rastvoreno je u 4 N HC1 u dioksanu (20,0 ml) na sobnoj temperaturi pa je rastvor mešan 2 h. Reakciona smeša koncentrovana je u vakuumu pa je ostatak triturisan sa MTBE kako bi se dobilo jedinjenje 158 (1,25 g, 82%) u vidu smeđe čvrste supstance. 'H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,26 (d,J= 9, 2Hz, 2H), 7,72 (d,J= 9, 2Hz, 2H), 4,09 (s, 2H).
Dobijanje jedinjenja 159;
U rastvor jedinjenja 158 (100 mg, 0,47 mmol) i rastvora formaldehida u vodi (30%, 1,40 ml, 1,41 mmol) u MeOH (3,0 ml) dodat je AcOH (0,09 ml, 1,41 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Nakon dodavanja NaCNBH3 (88 mg, 1,41 mmol), rastvor je i dalje mešan na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Dodati su dodatni rastvor formaldehida u vodi (30%, 0,92 ml, 0,94 mmol), AcOH (0,09 ml, 1,41 mmol) i NaCNBH3(88 mg, 1,41 mmol) i mešani još 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje neutralisan zasićenim NaHC03a ostatakje podeljen između EtOAc (30 ml) i vode (30 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 40 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CftCk/MeOH, 80:18:2 CHCl3/MeOH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje 159 (50 g, 52%) u vidu prljavobelog ulja. 'H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,17 (d, /= 9,0 Hz, 2H), 7,57 (d,J=9,0 Hz, 2H), 3,50 (s, 2H), 2,37 (s, 6H).
Dobijanje jedinjenja 18;
Suspenzija jedinjenja 159 (100 mg, 0,49 mmol) i 10% Pd/C (40 mg) u MeOH (3,0 ml) degasirana je sa argonom u toku 10 min, zatim mešana u vodoničnoj atmosferi (balon, 1 atm) tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu i triturisan pomoću C^Ch/heksan kako bi se dobilo jedinjenje 18 (48 mg, 55%) u vidu belog kristala: 'H NMR (300 MHz, CDCb): 8 6,96 (d, /= 8,3 Hz, 2H), 6,60 (d, /= 8,3 Hz, 2H), 3,47 (br s, 2H), 2,53 (t,J=7,8 Hz, 2H), 2,26 (dd, /= 8,7, 7,2 Hz, 2H), 2,22 (s, 6H), 1,77-1,67 (m, 2H).
Dobijanje intermedijera 29
Dobijanje jedinjenja 161;
U rastvor jedinjenja158(4,00 g, 18,9 mmol) i triola160(11,7 g, 56,6 mmol) u MeOH (50 ml) dodat je AcOH (3,40 ml, 56.6 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Nakon dodavanja NaCNBH3 (3,55 g, 56,6 mmol), rastvor je i dalje mešan na sobnoj temperaturi tokom 16 h. U rastvor su dodati dodatno jedinjenje160(11,7 g, 56,6 mmol), AcOH (3,40 ml, 56,6 mmol) iNaCNBH3(3,55 g, 56,6 mmol) i nastavljeno je mešanje na sobnoj temperaturi još 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje neutralisan zasićenim NaHC03a ostatakje podeljen između CH2CI2(10 ml) i vode (10 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2x10 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 OJ^Ck/MeOH, 80:18:2 CHCl3/MeOH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje 29 (700 mg, 7,0%) u vidu prljavobele čvrste supstance. 'H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,21 (d, / = 8,8 Hz, 2H), 7,66 (d, /= 8,8 Hz, 2H), 4,68( q, J=5,1 Hz, 2H), 4,04 (dd,J= 10,8, 5,4 Hz, 2H), 3,99-3,93 (m, 2H), 3,86-3,74 (m, 6H), 3,54 (dd,J= 9,8, 2,3 Hz, 2H), 3,36 (t,J=10,7 Hz, 2H), 2,87 (dd,J=13,3, 4,9 Hz, 2H), 2,74 (dd,J=13,3, 7,8 Hz, 2H), 1,25 (d, 7=5,1 Hz, 6H).
Dobijanje jedinjenja29;
Suspenzija jedinjenja 161 (500 mg, 0,90 mmol) i 10% Pd(OH)2/C (215 mg) u EtOH (230 ml) degasirana je uduvavanjem argona pomoću brizgalice u toku 10 min, zatim mešana u vodoničnoj atmosferi (balon, 1 atm) tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu a ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CTbCk/MeOH, 80:18:2 CHCl3/MeOH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje 29 (264 mg, 55%) u vidu prljavobele čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 6,97 (d, /= 8,6 Hz, 2H), 6,67 (d, /= 8,6 Hz, 2H), 4,71 (q, /= 5,1 Hz, 2H), 4,06 (dd, /= 10,6, 5,3 Hz, 2H), 4,13-4,05 (m, 2H), 3,81 (dd,J=5,0, 2,3 Hz, 2H), 3,80-3,72 (m, 2H), 3,51 (dd,J=9,6, 2,4 Hz, 2H), 3,33-3,23 (m, 2H), 3,38 (t,7 =10,7 Hz, 2H), 2,83-2,54 (m, 6H), 1,85-1,69 (m, 2H), 1,26 (d,7 =5,1 Hz, 6H).
Dobijanje intermedijera 24
Dobijanje jedinjenja 162;
U rastvor jedinjenja158(200 mg, 0,94 mmol) i trio 1160 (194 mg, 0,94 mmol) u MeOH (2,0 ml) dodat je AcOH (0,17 ml, 2,82 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Nakon dodavanja NaCNBH3(148 mg, 2,35 mmol), rastvor je i dalje mešan na sobnoj temperaturi tokom 16 h. U rastvor su dodati dodatno jedinjenje160(0,2 ekviv), AcOH (3,0 ekviv) i NaCNBH3(1,0 ekviv) i nastavljeno je mešanje rastvora na sobnoj temperaturi još 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje neutralisan zasićenim NaHC03a ostatakje podeljen između CH2CI2(10 ml) i vode (10 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2x10 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 80:18:2 CHCi3/MeOH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje162(95 mg, 28%) u vidu prljavobele čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,24 (d,7=9,1 Hz, 2H), 7,69 (d, 7= 9,1 Hz, 2H), 4,70 (q, 7 = 5,1 Hz, IH), 4,09-4,02 (m, 2H), 4,00 (d,7= 2,1 Hz, 2H), 3,83 (dd, 7=5,1, 2,3 Hz, IH), 3,81-3,71 (m, IH), 3,53 (dd,7=9,3, 2,3 Hz, IH), 3,38 (t,7=11,0 Hz, IH), 3,21-3,07 (m, 2H), 1,25 (d,7=5,1 Hz, 3H).
Dobijanje jedinjenja 164;U rastvor jedinjenja162(95 mg, 0,26 mmol) i heksanala163(52 mg, 0,51 mmol), dodati su AcOH (0,05 ml, 0,78 mmol) i NaCNBH3(41 mg, 0,65 mmol). Rastvor je mešan tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje neutralisan zasićenim NaHC03a ostatakje podeljen između EtOAc (10 ml) i vode (10 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2x10 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 80:18:2 CHCb/MeOH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje164(70 mg, 59%) u vidu prljavobele čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,18(d,J=8,9 Hz, 2H), 7,56 (d,J=8,9 Hz, 2H), 4,70 (q,J=5,0 Hz, IH), 4,15 (dd,J=10,4, 5,2 Hz, IH), 4,01-3,89 (m, 2H), 3,83 (dd,J=3,8, 2,7 Hz, IH), 3,77 (brs, IH), 3,70 (brs, IH), 3,64 (t,J=6,2 Hz, IH), 3,56 (dd,J=9,2, 4,0 Hz, IH), 3,41 (t,J=10,8 Hz, IH), 2,87 ( dd, J= 13,2, 4,3 Hz, IH), 2,78-2,68 (m, 2H), 2,63-2,55 (m, IH), 1,75-1,43 (m, 4H), 1,34 (d,J=5,0 Hz, 3H), 1,32-1,25 (m, 6H), 0,89( t, J=6,6 Hz, 3H).
Dobijanje jedinjenja 24
Suspenzija jedinjenja164(1,70 g, 3,77 mmol) i 10% Pd/C (200 mg) u MeOH (40 ml) degasirana je sa argonom u toku 10 min, zatim mešana u vodoničnoj atmosferi (balon, 1 atm) tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu a ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 80:18:2 CHCb/MeOH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje 24 (1,20 g, 76%) u vidu prljavobele čvrste supstance. 'H NMR (300 MHz, CDCb): 8 6,96 (d,J=8,9 Hz, 2H), 6,62 (d,J=8,9 Hz, 2H), 4,68 (q,J=5,0 Hz, IH), 4,14 (dd,J=11,0, 5,5Hz, IH), 3,92-3,81 (m, 2H), 3,72 (dd,J=3,8, 2,4 Hz, IH), 3,50 (dd,J=9,1, 4,0 Hz, IH), 3,40 (t,J=10,5 Hz, IH), 2,76-2,38 (m, 10H), 1,81-1,64 (m, 3H), 1,48-1,36 (m, 2H), 1,33(d, J=5,0 Hz, 3H), 1,30-1,20 (m, 6H), 0,88 (t,J=6,6 Hz, 3H).
Dobijanje intermedijera 85
Dobijanje jedinjenja 166;
U rastvor jedinjenja148(4,60 g, 21,3 mmol) i triola165(17,1 g, 63,9 mmol) u MeOH (100 ml) dodat je AcOH (12,1 ml, 63,9 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 10 min. Nakon dodavanja NaCNBH3(4,00 g, 63,9 mmol), rastvor je i dalje mešan na sobnoj temperaturi tokom 6 h. Zatim su dodati heksanalni163(5,10 ml, 42,6 mmol) i NaCNBH.3 (2,60 g, 42,6 mmol). Rastvor je dalje mešan tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje neutralisan zasićenim NaHCCba ostatak je podeljen između EtOAc (200 ml) i vode (200 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 300 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 80:18:2 CHCl3/MeOH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje166(6,90 g, 64%) u vidu prljavobele čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8,12 (d,J=8,6 Hz, 2H), 7,51-7,43 (m, 2H), 7,38 (d,J=8,6 Hz, 2H), 7,37-7,27 (m, 3H), 5,55 (s, IH), 4,24(dd, J=11,5, 5,5 Hz, IH), 4,18-4,01 (m, IH), 4,00-3,94 (m, IH), 3,93-3,89 (m, IH), 3,77 (dd,/=9,3, 1,8 Hz, IH), 3,61 (t,/=10,7 Hz, IH), 3,13-2,77 (m, 6H), 2,71 (t,/=7,5 Hz, 2H), 1,99-1,85 (m, 2H), 1,55-1,42 (m, 2H), 1,38-1,18 (m, 6H), 0,87 (t, /= 7,0 Hz, 3H).Dobijanje jedinjenja85;
Suspenzija jedinjenja 166 (800 mg, 1,55 mmol) i 10% Pd/C (300 mg) u EtOH (40 ml) degasirana je uduvavanjem argona pomoću brizgalice u toku 10 min, zatim mešana na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi (balon, 1 atm) tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje 85 (700 mg, 93%) u vidu prljavobele čvrste supstance.
'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 7,52-7,42 (m, 2H), 7,38-7,25 (m, 3H), 6,88 (d, /= 8,4 Hz, 2H), 6,63 (d,J=8,4 Hz, 2H), 5,53 (s, IH), 4,24 (dd, /= 10,8, 5,5 Hz, IH), 4,05-3,84 (m, 3H), 3,76 (dd, J= 9,6, 1,8 Hz, IH), 3,61 (t,J=10,8 Hz, IH), 2,93 (dd,J=13,6, 5,0 Hz, IH), 2,79 (dd, /= 13,4, 9,0 Hz, IH), 2,73-2,60 (m, 4H), 2,42 (t, / = 8,0 Hz, 2H), 1,88-1,68 (m, 2H), 1,48-1,36 (m, 2H), 1,33-1,14 (m, 6H), 0,87 (t, / = 7,0 Hz, 3H).
Dobijanje intermedijera 34
Dobijanje jedinjenja 168;
U rastvor jedinjenja162(534 mg, 1,45 mmol) u MeOH (30 ml) dodat je zasićeni rastvor NaHC03u vodi (5,0 ml) na 0 °C i mešan je 10 min. Zatim je dodat (Boc)20 (350 mg, l,60m mmol) pa je reakciona smeša mešana 3 h na istoj temperaturi, dovedena na sobnu temperaturu i mešana još 30 min. Smeša je koncentrovana, ostatakje rastvoren u CH2CI2(100 ml), pa je rastvor ispran sa vodom (100 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml). Organski sloj je osušen nad Na2S04, filtriran i koncentrovan, a ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 8:2 CHCb/MeOH) da bi se dobilo jedinjenje168(435 mg, 64%) u vidu prljavobele čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,18 (d,J=8,7 Hz, 2H), 7,56 (d,J=8,7 Hz, 2H), 4,72 (q,J=5,1 Hz, IH), 4,41-4,35 (m, 2H), 4,16 (dd,/= 10,8, 5,5 Hz, IH), 4,15-4,04 (m, IH), 3,93-3,83 (m, IH), 3,81-3,76 (m, IH), 3,66-3,53 (m, 4H), 3,40 (t,J=11,0 Hz, IH), 3,25-3,12 (m, IH), 3,08-2,96 (m, IH), 1,49 (s, 9H), 1,32 (d,J=5,1 Hz, 3H).
Dobijanje jedinjenja34;
Suspenzija jedinjenja168(80 mg, 0,21 mmol) i 10% Pd/C (40 mg) u EtOH (10 ml) degasirana je uduvavanjem argona pomoću brizgalice u toku 10 min, zatim mešana u vodoničnoj atmosferi (balon, 1 atm) tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje 34 (82 mg, 89%) u vidu prljavobele čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 6,96 (d,J=8,1 Hz, 2H), 6,62 (d,J=8,1 Hz, 2H), 4,69 (q,J=5,1 Hz, IH), 4,15 (dd,/= 10,8, 5,5 Hz, IH), 4,13-4,09 (m, IH), 4,01-3,93 (m, IH), 3,89-3,78 (m, IH), 3,75-3,68 (m, IH), 3,62-3,43 (m, 4H), 3,40 (t,J=11,3 Hz, IH), 3,35 (dd,J=13,5, 4,0 Hz, IH), 3,26 (t, /= 7,9 Hz, IH), 3,23-3,13 (m, IH), 2,48 (t,J=7,8 Hz, 2H), 1,86-1,76 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,33 (d,J=5,1 Hz, 3H).
Dobijanje intermedijera 171
U rastvor jedinjenja148(6,40 g, 29,6 mmol) i triola165(11,9 g, 44,5 mmol) u MeOH (300 ml) dodat je AcOH (5,32 ml, 88,8 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Nakon dodavanja NaCNBH3(3,73 g, 59,2 mmol), rastvor je i dalje mešan na sobnoj temperaturi tokom 16 h. U rastvor su dodati dodatno jedinjenje165(11,9 g, 44.5 mmol), AcOH (5,32 ml, 88,8 mmol) iNaCNBH3(3,73 g, 59,2 mmol) i nastavljeno je mešanje na sobnoj temperaturi još 14 h. U rastvor su dodati dodatno jedinjenje165(7,93 g, 29.6 mmol), AcOH (3,55 ml, 59,2 mmol) iNaCNBH3(2,80 g, 44,4 mmol) i nastavljeno je mešanje na sobnoj temperaturi još 10 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje neutralisan zasićenim NaHC03a ostatakje podeljen između CH2CI2(100 ml) i vode (100 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 100 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Prečišćavanje hromatografijom na koloni je bilo izazovno (silika gel, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 80:18:2 CHCl3/MeOH/NH4OH) kako bi se dobila jedinjenja150i169(20 g, smeša). Smeša je direktno korišćena za naredni korak.
Dobijanje jedinjenja 170;
U rastvor jedinjenja150i169(20,0 g, smeša) u MeOH (120 ml) i vodi (40 ml) dodat je zasićeni rastvor NaHC03 (9,99 g, 118,4 mmol) na 0 °C i mešanje 10 min. Dodat je (BochO (9,69 g, 44,4 mmol) pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi još 10 min, preneta je na sobnu temperaturu i mešana još 2 h. Smeša je koncentrovana, ostatakje rastvoren u CH2CI2(100 ml), pa je rastvor ispran vodom (100 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml). Organski sloj je osušen nad Na2S04, filtriran i koncentrovan, a ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 8:2 CHCl3/MeOH) da bi se dobilo jedinjenje150(1,50 g) i170(4,50 g) u vidu prljavobele čvrste supstance. ESI-MSmlz529 [C27H32N209+H]<+.>
Dobijanje jedinjenja 171
Suspenzija jedinjenja 170 (4,20 g, 7,92 mmol) i 10% Pd/C (500 mg) u EtOH (100 ml) i AcOH (10 ml) degasirana je sa argonom u toku 10 min, zatim mešana u vodoničnoj atmosferi (balon, 1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, neutralisan sa Na2C03 a ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 C^Ck/MeOH, 8:2 CHCl3/MeOH) kako bi se dobilo jedinjenje172(2,70 g, 68%) u vidu prljavobele čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,52-7,44 (m, 2H), 7,36-7,29 (m, 3H), 6,89 (d,J=8,3 Hz, 2H), 6,64 (d,J =8,3 Hz, 2H), 5,54 (s, IH), 4,23 (dd,/= 11,9, 5,9 Hz, IH), 4,10-3,97 (m, IH), 3,97-3,89 (m, IH), 3,81-3,75 (m, IH), 3,74-3,69 (m, IH), 3,60 (t,J=10,9 Hz, IH), 3,48 (dd,J=14,1, 4,6 Hz, IH), 3,28-3,22 (m, 3H), 2,41 (t,J=7,5 Hz, 2H), 1,83-1,71 (m, 2H), 1,41 (s, 9H).
Dobijanje intermedijera 39
Ras<p>or jedinjenja 17 (30,0 g, 121 mmol) i 173 (14,2 g, 145 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (300 ml) degasiran je 10 min u atmosferi argona pa su dodati TEA (67 ml, 484 mmol), 10% (t-BubP u heksanima (49,0 ml, 24,2 mmol) i Cul (1,15 g, 6,05 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša degasirana je argonom još 10 min pa je dodat Pd (PPh3)4(14,0 g, 12,1 mmol) u jednoj porciji. Nakon degasiranja sa argonom 5 min, dobijena smeša zagrevana je na 50 °C tokom 16 h. Reakciona smeša koncentrovana je u vakuumu pa je ostatak prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 2:3 heksani/EtOAc) kako bi se dobilo jedinjenje 174 (15,0 g, 58%) u vidu smeđeg ulja. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8,14 (d,J=8,8 Hz, 2H), 7,50 (d,J=8,8 Hz, 2H), 3,71 (t,J=6,4 Hz, 2H), 2,50 (t, /= 6,8 Hz, 2H), 1,80-1,70 (m, 4H), 1,70-1,65 (m, IH).
Dobijanje jedinjenja 175;
U rastvor jedinjenja 174 (15,0 g, 67,9 mmol) u bezvodnom CH2CI2(50 ml) dodat je Et3N (28,0 ml, 203,7 mmol) i DMAP (4,12 g, 33,9 mmol) pod argonom na 0 °C. Nakon mešanja reakcione smeše tokom 5 min na istoj temperaturi, dodat je TsCl (32,5 g, 170 mmol) na 0 °C. Nastala smeša je mešana još 4 h na sobnoj temperaturi. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatak je podeljen između CH2CI2(250 ml) i vode (150 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 250 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2SO"4 i koncentrovani u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, heksani/EtOAc) kako bi se dobilo jedinjenje 175 (15,0 g, 60%) u vidu smeđeg ulja. 'H NMR (400 MHz, CDCb): 5 8,15 (d,J=8,8 Hz, 2H), 7,79( d, J=8,8 Hz,
2H), 7,50(d, J=8,8 Hz, 2H), 7,34 (d,/=8,8 Hz, 2H), 4,10 (t,J=6,4 Hz, 2H), 2,44 (t,J=7,0 Hz, 2H), 2,44 (s, 3H), 1,90-1,79 (m, 2H), 1,75-1,61 (m, 2H).
Dobijanje jedinjenja 176;
U rastvor jedinjenja 175 (5,00 g, 12,9 mmol, sirov) u THF (10 ml) dodat je NHMe?u vodi (30%, 50,0 ml) a zatim mešan na sobnoj temperaturi u zatvorenoj epruveti 3 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje podeljen između CH2CI2(100 ml) i vode (100 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 100 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel) kako bi se dobilo jedinjenje 176 (400 mg, 13%) u vidu žute lepljive čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,15 (d, /= 7,3 Hz, 2H), 7,51 (d,J=7,3 Hz, 2H), 2,48 (t,J=6,6 Hz, 2H), 2,30 (t,J=5,7 Hz, 2H), 2,23 (s, 6H), 1,70-1,61 (m, 4H).
Dobijanje jedinjenja 39;
Suspenzija jedinjenja 176 (400 mg, 1,62 mmol) i 10%> Pd/C (50 mg) u EtOH (50 ml) degasirana je uduvavanjem argona pomoću brizgalice u toku 10 min, zatim mešana na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi (balon, 1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje 39 (300 mg, 84%) u vidu smeđe lepljive čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 6,91 (d, /= 7,5 Hz, 2H), 6,65 (d, /= 7,5 Hz, 2H), 2,47 (t, /= 7,0 Hz, 2H), 2,30 (dd,J=8,4, 6,5 Hz, 2H), 2,23 (s, 6H), 1,60-1,52 (m, 2H), 1,51-1,41 (m, 2H), 1,38-1,27 (m, 4H).
31 Dobijanje intermedij era44
Dobijanje jedinjenja177;
Ras<p>or jedinjenja175(6,00 g, 16,0 mmol) u 7 N NH3u metanolu (150 ml) je grejan na 30 °C u zatvorenoj epruveti tokom 5 h. Temperatura je povišena na 40 °C pa je mešan 16 h, a zatim je temperatura ponovo povišena na 60 °C pa je mešan 4 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje podeljen između CH2CI2(100 ml) i vode (100 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 100 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CthCh/MeOH) kako bi se dobilo jedinjenje 177 (1,48 g, 43%) u vidu žutog ulja. 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,16 (d,J=8,4 Hz, 2H), 7,39 (d, /= 8,4 Hz, 2H), 3,61 (t, /= 5,6 Hz, 2H), 2,08-2,05 (m, 2H), 1,65-1,53 (m, 4H).
Dobijanje jedinjenja 178i 179;
U rastvor jedinjenja177(1,38 g, 6,33 mmol) i triola165(2,03 g, 7,59 mmol) u MeOH (10 ml) dodat je AcOH (0,6 ml, 9,49 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Nakon dodavanja NaCNBH3(800 mg, 12,7 mmol), rastvor je i dalje mešan na sobnoj temperaturi tokom 16 h. U rastvor su dodati dodatno jedinjenje165(2,55 g, 9,49 mmol), AcOH (0,80 ml, 12,7 mmol) i NaCNBH3(1,19 g, 18,9 mmol) i nastavljeno je mešanje na sobnoj temperaturi još 16 h. U rastvor su dodati dodatno jedinjenje165(2,55 g, 9,49 mmol), AcOH (0,80 ml, 12,7 mmol) i NaCNBH3(1,19 g, 18,9 mmol) i nastavljeno je mešanje na sobnoj temperaturi još 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje neutralisan zasićenim NaHC03a ostatakje podeljen između CH2CI2(10 ml) i vode (10 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2x10 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 80:18:2 CHCb/MeOH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje179(2,28 g, 51%) u vidu prljavobele čvrste supstance: 'H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,14 (d,J =9,0 Hz, 2H), 7,54 (d, /= 9,0 Hz, 2H), 7,47-7,44 (m, 4H), 7,34-7,30 (m, 6H), 5,48 (s, 2H), 4,24-4,19 (m, 2H), 3,99-3,94 (m, 4H), 3,86-3,84 (m, 2H), 3,73-3,69 (m, 2H), 3,57 (t,J=10,8 Hz, 4H), 3,35-3,25 (m, 4H), 2,33 (d,J=6,9 Hz, 2H)„ 1,61-1,51 (m, 4H).
Smeša jedinjenja 178/179 (900 mg) je takođe izolovana i direktno je korišćena za sledeći korak (SG-GHC-G-106).
Dobijanje jedinjenja 44;
Suspenzija jedinjenja179(2,26 g, 3,11 mmol) i 10%> Pd/C (100 mg) u smeši EtOH (50 ml) i AcOH (10 ml) degasirana je sa argonom u toku 10 min, zatim mešana u vodoničnoj atmosferi
(balon, 1 atm) tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje44(1,90 g, 80%) u vidu smeđe čvrste supstance. 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7,46-7,44 (m, 4H), 7,33-7,31 (m, 6H), 6,89( d, J=8,4 Hz, 2H), 6,65 (d,J=8,4 Hz, 2H), 5,51 (s, 2H), 4,26-4,14 (m, 2H), 3,93-3,90 (m, 2H), 3,76-3,73 (m, 4H), 3,63-3,58 (m, 4H), 3,35-3,25 (m, 2H), 3,10-3,00 (m, 2H), 2,41 (t,J=7,2 Hz, 2H), 1,47-1,45 (m, 4H), 1,16-1,12 (m, 4H).
Dobijanje intermedijera 49
Dobijanje jedinjenja 180;
U rastvor jedinjenja178(900 mg, smeša, pribl. 2,0 mmol) u smeši MeOH (20 ml) i vode (10 ml) dodat je NaHC03(672 mg, 4,0 mmol) na 0 °C i mešanje 10 min. Dodat je (Boc)20 (524 mg, 2,40 mmol) pa je reakciona smeša mešana na istoj temperaturi još 1 h, preneta je na sobnu temperaturu i mešana još 4 h. Smeša je koncentrovana, ostatakje rastvoren u CH2CI2(100 ml), pa je rastvor ispran vodom (100 ml) i vodenim rastvorom NaCl (50 ml). Organski sloj je osušen nad Na2S04, filtriran i koncentrovan, a ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 8:2 CHCb/MeOH) da bi se dobilo jedinjenje 180 (780 mg, 64%) u vidu prljavobele čvrste supstance. 'H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 8,16 (d,J =9,0 Hz, 2H), 7,55 (d, /= 9,0 Hz, 2H), 7,50-7,47 (m, 2H), 7,34-7,30 (m, 3H), 5,53 (s, IH), 4,25-4,20 (m, IH), 4,10 (br s, IH), 3,94-3,91 (m, IH), 3,80-3,48 (m, 4H), 3,35-3,25 (m, 3H), 2,46 (t, /= 6,9 Hz, 2H), 1,70-1,49 (m, 4H), 1,43 (s, 9H).
Dobijanje jedinjenja 49;
Suspenzija jedinjenja180(780 mg, 1,36 mmol) i 10% Pd/C (50 mg) u smeši EtOH (10 ml) i AcOH (2,0 ml) degasirana je uduvavanjem argona pomoću brizgalice u toku 10 min, zatim mešana na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi (balon, 1 atm) tokom 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša neutralisana je saNa2C03, filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje 49 (625 g, 84%) u vidu bele čvrste supstance. 'H NMR (300 MHz, CD3OD): 8 7,50-7,46 (m, 2H), 7,32-7,30 (m,
3H), 6,90(d, J=8,4 Hz, 2H), 6,66 (d,/=8,4 Hz, 2H), 5,53 (s, IH), 4,25-4,20 (m, IH), 4,04 (br s, IH), 3,94-3,89 (m, IH), 3,77-3,43 (m, 4H), 3,35-3,25 (m, 3H), 2,45 (t,J=7,5 Hz, 2H), 1,52-1,47 (m, 4H), 1,42 (s, 9H), 1,27-1,24 (m, 4H).
Dobijanje intermedijera 54
Dobijanje jedinjenja 182;
U rastvor jedinjenja181(1,60 g, 16,00 mmol) u bezvodnom THF (40 ml) dodat je 9-BBN (0,5 mol/l u THF, 80 ml, 40,0 mmol) pod argonom. Nakon što je reakciona smeša mešana 2 h na sobnoj temperaturi, dodati su jedinjenje172(3,17 g, 12,8 mmol), Pd(PPh3)2Cb (561 mg, 0,80 mmol) i 1 N aq NaOH (24 ml) na sobnoj temperaturi. Nastala smeša je mešana još 1 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje podeljen između EtOAc (100 ml) i vode (100 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću EtOAc (2 x 100 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 4:1 heksani/EtOAc) kako bi se dobilo jedinjenje 182 (1,20 g, 34%) u vidu smeđe čvrste supstance: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,13 (d,/=9,0 Hz, 2H), 7,31 (d,/=9,0 Hz, 2H), 3,64 (t,/=6,7 Hz, 2H), 2,71 (t,/=7,8 Hz, 2H), 1,73-1,46 (m, 4H), 1,43-1,31 (m, 4H).
Dobijanje jedinjenja 183
U rastvor jedinjenja182(1,20 g, 5,38 mmol) u bezvodnom CH2CI2(20 ml) dodat je Et3N (7,32 ml, 53,8 mmol) pod argonom na 0 °C. Nakon mešanja reakcione smeše tokom 5 min na istoj temperaturi, dodat je mesil hlorid (0,62 ml, 8,07 mmol) na 0 °C. Nastala smeša je mešana još 2 h na sobnoj temperaturi. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje podeljen između CH2CI2(50 ml) i vode (50 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2
(2 x 50 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Sirov proizvod 183 (3,00 g, sirov) je direktno korišćen za naredni korak.
Dobijanje jedinjenja 184;
Rastvor jedinjenja 183 (3,00 g, 5,38 mmol, sirov) u 7 N NH3u metanolu (30,0 ml) je grejan na 60 °C u zatvorenoj epruveti tokom 2 h. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje podeljen između CH2CI2(100 ml) i vode (100 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 100 ml). Kombinovani organski ekstrakti oprani su vodenim rastvorom NaCl, osušeni nadNa2S04i koncentrovani u vakuumu. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel) kako bi se dobilo jedinjenje 184 (390 mg, 33%, u dva koraka) u vidu žutog ulja. 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8,14 (d,J=9,0 Hz, 2H), 7,42 (d,J=9,0 Hz, 2H), 2,75 (t,J=7,8 Hz, 2H), 2,67 (t,J=7,3 Hz, 2H), 1,72-1,63 (m, 2H), 1,53-1,46 (m, 2H), 1,42-1,35 (m, 4H).
Dobijanje jedinjenja 185;
U rastvor jedinjenja 184 (620 mg, 2,79 mmol) i triol 165 (938 mg, 3,49 mmol) u MeOH (30 ml) dodat je AcOH (1,16 ml, 27,8 mmol) pa je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 10 min. Nakon dodavanja NaCNBH3(526 mg, 8,37 mmol), rastvor je i dalje mešan na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Tokom 16 h dodavani su dodatno jedinjenje 165 (0,3 ekviv), AcOH (10 ekviv) i NaCNBH3(1,0 ekviv). Zatim su dodati heksanalni 163 (0,96 ml, 8,37 mmol), AcOH (1,00 ml) i NaCNBH3(526 mg, 8,37 mmol). Rastvor je dalje mešan tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatakje neutralisan zasićenim NaHC03a ostatakje podeljen između EtOAc (100 ml) i vode (100 ml). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan pomoću CH2CI2(2 x 100 ml). Kombinovani organski ekstrakti osušeni su nad Na2S04i koncentrovani u vakuumu. Ostatakje prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, 9:1 CH2Cl2/MeOH, 80:18:2 CHCl3/MeOH/NH4OH) kako bi se dobilo jedinjenje 185 (950 g, 61%) u vidu prljavobelog ulja: 'H NMR (400 MHz, CDCb): 8 8,02 (d,J=8,7 Hz, 2H), 7,48-7,42 (m, 3H),7,37-7,34 (m, 2H), 7,31 (d,J=8,7 Hz, 2H), 5,54 (s, IH), 4,46-4,40 (m, IH), 4,30 (dd,J=11,6, 6,6 Hz, IH), 4,03 (t,J=4,0 Hz, IH), 3,97 (dd,J =10,5, 5,4 Hz, IH), 3,88 (dd,J=9,4, 4,0 Hz, IH), 3,65 (t,J=10,4 Hz, IH), 3,11-3,00 (m, 4H), 2,69 (t,J=7,8 Hz, 2H), 2,00 (s, IH), 1,70-1,55 (m, 6H), 1,37-1,30 (m, 4H), 1,29-1,20 (m, 8H), 0,87 (t, 7= 7,1 Hz, 3H).
Dobijanje jedinjenja 54;
Suspenzija jedinjenja 185 (950 g, 1,70 mmol) i 10% Pd/C (300 mg) u EtOH (100 ml) degasirana je sa argonom u toku 10 min, zatim mešana u vodoničnoj atmosferi (balon, 1 atm) tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša filtrirana je kroz celit, pa je oprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje 54 (790 mg, 88%) u vidu žutog ulja. 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 7,51-7,44 (m, 2H), 7,35-7,29 (m, 3H), 6,90 (d,J=8,5 Hz, 2H), 6,65 (d,J=8,5 Hz, 2H), 5,54 (s, IH), 4,24 (dd,J=10,8, 5,4 Hz, IH), 4,08-4,02 (m, IH), 4,00-3,92 (m, IH), 3,91 (dd,J=5,6, 1,8 Hz, IH), 3,78 (dd,J=9,6, 1,8 Hz, IH), 3,61 (t, /= 10,9 Hz, IH), 3,01 (dd, /= 13,7, 5,4 Hz, IH), 2,91 (dd,J=12,1, 8,1 Hz, IH), 2,82-2,71 (m, 4H), 2,45 (t, /= 7,5 Hz, 2H), 1,59-1,42 (m, 6H), 1,37-1,13 (m, 10H), 0,89 (t, J=7,l Hz, 3H).
Nekoliko testova se može koristiti za karakterizaciju jedinjenja predmetnog pronalaska. Reprezentativni testovi razmotreni su u nastavku.
In Vitromera aktivnosti blokiranja natrijumovog kanala i reverzibilnosti
Jedan test koji se koristi za procenu mehanizma delovanja i/ili potentnosti jedinjenja predmetnog pronalaska obuhvata utvrđivanje lumenske inhibicije natrijumovih struja epitela disajnih puteva od strane leka, izmerene pod strujom kratkog spoja (Isc) korišćenjem monoslojeva epitela disajnih puteva montiranih u Using-ove komore. Ćelije dobijene iz sveže ekscidiranih disajnih puteva čoveka, psa, ovce ili glodara se seju na porozne Snapwell™ umetke od 0,4 mikrona (CoStar), kultiviraju u uslovima međuspoja vazduh-tečnost (ALI) u hormonski definisanom medijumu, i testiraju za aktivnost transporta natrijuma (Isc) dok se kupaju u Krebsovom bikarbonatnom ringer rastvoru (KBR) u Using-ovim komorama. Svi testni lekovi se dodaju u lumenalnu kupku sa protokolima dodavanja polulogaritamske doze (od 1 x IO"<11>mol/l do 3 x IO"<5>mol/l), i beleži se kumulativna promena u Isc (inhibicija). Svi lekovi se pripremaju u dimetil sulfoksidu kao koncentrovani rastvori sa koncentracijom od 1 xl0"<2>mol/l i čuvaju na -20° C. Paralelno se tipično obrađuje osam preparata; dva preparata po obradi obuhvataju amilorid i/ili benzamil kao pozitivne kontrole. Nakon što se primeni maksimalna koncentracija (5 x 10"<5>mol/l), lumenalna kupka se zamenjuje tri puta sa svežim KBR rastvorom koji ne sadrži lek, a rezultujući Isc se meri nakon svakog pranja u trajanju od oko 5 minuta. Reverzibilnost se definiše kao procenat povratka na početnu vrednost za struju natrijuma nakon trećeg pranja. Svi podaci iz naponskih štipaljki se prikupljaju pomoću računarskog interfejsa i analiziraju van mreže.
Odnose doze i efekta za sva jedinjenja razmatra i analizira program Prism 3.0. Vrednosti IC50, maksimalne efikasne koncentracije i reverzibilnost se izračunavaju i upoređuju sa amiloridom i benzamilom kao pozitivnim kontrolama. Potentnost aktivnosti blokiranja natrijumovog kanala reprezentativnih jedinjenja u odnosu na amilorid u sveže ekscidiranim ćelijama iz disajnih puteva pasa prikazana je u tabeli 1.
Test2.Studije mukocilijarnog klirensa(MCC)kodovaca
Model na životinjama koji se najčešće koristi za merenje promena u MCC je model na ovcama. Efekat jedinjenja na poboljšanje mukocilijarnog klirensa (MCC) se može izmeriti primenomin vivomodela opisanog od strane Sabater et al, Journal of Applied Physiology, 1999, pp. 2191-2196, koji je ovde inkorporiran referencom.
U ovim studijama, odrasle ovce su vezane i nazalno intubirane endobronhijalnim tubusom. Ovcama su tokom 10-15 minuta davani aerosolizovani testirani proizvodi. Zatim je u određenom vremenu četiri ili osam sati nakon testiranog proizvoda primenjen radioaktivno obeležen 99mTc-sumpor koloid (TSC, 3,1 mg/ml; koji sadrži približno 20 mCi). Radioaktivno obeležen aerosol je davan kroz endotrahealni tubus oko 5 minuta. Ovce su zatim ekstubirane, a ukupna radioaktivnost u plućima je merena na svakih 5 minuta u toku 1-časovnog perioda opservacije. Brzina klirensa radiološki obeležene supstance iz pluća je reprezentativna za brzinu MCC kod životinje. Prednost ovog sistema je u tome da blisko simulira sredinu u ljudskim plućima. Model takođe omogućava prikupljanje simultanih informacija o FK/FD kroz uzorkovanje plazme i mokraće u toku perioda testa. Takođe, postoji nekoliko tehnika za merenje koncentracija leka na površini disajnih puteva u toku merenja MCC. One obuhvataju prikupljanje kondenzata izdahnutog vazduha ili metod sa filter papirom za dobijanje ASL pomoću bronhoskopije.
Ovčiji model opisan iznad korišćen je za evaluacijuin vivoefekata (efikasnost/trajnost) testiranog agensa dostavljenog aerosolom na MCC. Ispitivane su terapije koje su sadržale ili 4 ml testiranog agensa ili testirani agens u kombinaciji sa hipertoničnim fiziološkim rastvorom (HS). Da bi se utvrdilo da li kombinovanje HS sa testiranim agensom poboljšava MCC, HS je primenjivan odmah nakon davanja testiranog agensa. Testirani rastvori su aerosolizovani pomoću Raindrop nebulizatora pri brzini protoka od osam litara u minutu i povezani sa sistemom za dozimetriju koji se sastojao od solenoidnog ventila i izvora komprimovanog vazduha (20 psi). Pretpostavlja se da nataložena doza leka u plućima ovaca nakon primene aerosola pomoću Raindrop nebulizatora iznosi 8-15% doze. Uz upotrebu Raindrop nebulizatora, radioaktivno obeležen TSC je davan tokom približno 3 minuta bilo 4 ili 8 sati nakon tretmana lekom u cilju procene efikasnosti/trajnosti. Radioaktivni odbroji su mereni gama kamerom u centralnom regionu u desnom plućnom krilu u intervalima od 5 min tokom 1 sata. Korišćena su tri metoda analize, 1) inicijalna brzina klirensa (nagib) tokom prvih 30 min prilagođen uz primenu linearne regresije 2) površina ispod krive za % klirensa tokom vremena tokom jednog sata i 3) maksimalni klirens dobijen za jedan sat.
Efekatjedinjenja33 na MCC kod ovaca pri 0,24 nmol/kg (3 umol/l) je testiran i upoređen sa nosačem (4 ml sterilne H2O) četiri sata nakon doziranja (slika 1). Analize efekata prikazane su u tabeli A.Jedinjenje33 je poboljšalo MCC u poređenju sa nosačem kao kontrolom.
Da bi se utvrdilo da li jedinjenja ovog pronalaska produžavaju trajanje delovanja, ona su testirana 8 sati nakon doze. Tabele D i E zajedno sa slikama 4 i 5 jasno pokazuju produženo trajanje delovanja MCC naspram nosačaza jedinjenja33 i 152.
Da bi se utvrdilo da li HS povećava MCC efekat jedinjenja 33, 7% HS je dat odmah nakon 0,24 nmol/kg jedinjenja 33 a MCC je procenjen osam sati nakon kombinovanog doziranja (slika 6). HS je povećao efekat jedinjenja 33 na MCC kako je prikazano na slici 6.
Test 3. Klirens i metabolizam leka u tečnosti površine disajnih puteva (ASL) od strane epitela disajnih puteva kod ljudi
Nestajanje jedinjenja 33 sa apikalne površine i metabolizam epitela disajnih puteva su procenjivani u ćelijama humanog bronhijalnog epitela (tabela 3). U ovim eksperimentima, 25 ul rastvora ENaC blokatora od 25 umol/l je dodat na apikalnu površinu HBE ćelija uzgajanim na međuspoju voda/tečnost, a koncentracija leka i metabolita u apikalnom i bazolateralnom odeljku mereni su tokom 2 h pomoću UPLC.
Uporedni primeri
Predmetna jedinjenja formule (I) su potentnija i/ili se apsorbuju sporije sa površina sluznica, naročita sluznica disajnih puteva, u poređenju sa poznatim blokatorima natrijumovih kanala, kao što su amilorid i jedinjenja treće generacije kao što je uporedni primer 1 opisan u nastavku. Stoga, jedinjenja formule (I) imaju duži poluživot na površinama sluznica u poređenju sa ovim poznatim jedinjenjima što je dokazano podacima prikazanim u tabeli G. Nestajanjejedinjenja33 sa apikalne površine i metabolizam epitela disajnih puteva procenjivani su u HBE i upoređeni sa uporednim primerom 1 (tabela H). U ovim eksperimentima, 25 ul rastvora ENaC blokatora od 25 umol/1 je dodat na apikalnu površinu HBE ćelija uzgajanim na međuspoju voda/tečnost, a koncentracija leka u apikalnom i bazolateralnom odeljku mereni su tokom 2 h pomoću UPLC. Nakon inkubacije jedinjenja ovog predmetnog pronalaska na apikalnoj površini (37 °C) u trajanju od 2 h, jedinjenje 33 je uglavnom ostalo nemetabolizovano na apikalnoj strani. Nasuprot tome, veći deo uporednog primera 1 je bio eliminisan sa apikalne strane pri čemu je 83% metabolizovano u manje aktivnu karboksilnu kiselinu, (S)-2-amino-3-(4-(4-(3-(3,5-diamino-6-hloropirazin-2-karbonil)guanidino)butil)fenoksi)propanoična kiselina, čija je struktura prikazana ispod. Uporedni primer 1 prikazanje i opisan u okviru objava WO 2003/070182 (SAD patenata br. 6,858,615; 7,186,833; 7,189,719; 7,192,960; i 7,332,496), kao blokator natrijumovih kanala koji ima korisna medicinska svojstva i može se pripremiti pomoću tamo opisanih metoda i drugih poznatih u stručnoj oblasti.
Uporedni primer 1.
(5)-3,5-diamino-6-hloro-7V-(A<f->(4-(4-(2,3-diamino-3-oksopropoksi)fenil)butil)karbamimidoil)pirazin-2-karboksamid
Jedinjenje uporednog primera 1 se može videti na strani 15 US 2005/0080093 i kao jedinjenje 2 na strani 90 WO 2008/031048, i kao jedinjenje 2 na stranama 42-43 WO 2008/031028. Da bi imalo korisnu aktivnost u lečenju cistične fibroze i HOBP, jedinjenje mora da ima svojstva koja će izazvati poboljšanje mukocilijarnog klirensa (MCC) u dozama koje neće povećati nivo kalijuma u plazmi što bi eventualno dovelo do hiperkalijemije, ozbiljnog i opasnog stanja, nakon višestrukog doziranja. To se zato mora izbegnuti u ovoj klasi jedinjenja, za koja je poznato da povećavaju kalijum u plazmi ako se ona u značajnoj meri izlučuju putem bubrega. Da bi se procenio ovaj potencijal, korisno je da ima MCC aktivnostin vivoi da ne dovodi do povećanja nivoa kalijuma u plazmi u korisnoj dozi. Jedan model za procenu ovoga je model MCC na ovcama opisan u nastavku.
Kako se može videti iz tabele I i slike 7, ED50za uporedni primer 1 u modelu MCC na ovcama je približno 240 nmol/kg (3 mmol/1) primenom tri različite mere (nagib, AUC i maksimalni klirens). Pri ovoj dozi, koja bi bila klinički aktivna doza, uporedni primer 1 izaziva povećanje kalijuma u plazmi (slika 8) što će pri ponovljenom doziranju dovesti do hiperkalijemije. Zbog toga, uporedni primer 1 nije prihvatljiv za upotrebu kod ljudi dokjedinjenje (Ia)proizvodi bezbedan i efikasan MCC sa odnosom koristi i rizika većim od 1000 u ovom modelu.
Slika 1 grafički prikazuje procenat klirensa mukusa tokom vremena od stranejedinjenja33 i uporednog primera 1, kako je opisano u MCC modelu iznad.Jedinjenje33 je imalo daleko veći procenat klirensa mukusa pri 1000 puta manjoj dozi nego uporedni primer 1. Tako jejedinjenje33 dalo maksimalan efekat u klinički relevantnom opsegu doze bez povećavanja nivoa kalijuma.
Na slici 10 je prikazano značajno povećanje nivoa kalijuma u plazmi pri efikasnoj dozi, opaženo u plazmi ovaca koje su primile uporedni primer 1 u studiji MCC.Jedinjenje33 je više od 1000 puta potentnije u MCC ovaca nego uporedni primer 1 bez povećanja K u plazmi pri dozama čak i do 24 nmol/kg (1000 puta veće od ED50 doze), dok uporedni primer 1 ima povećanja K u plazmi na približnoj ED50 dozi od 3 mmol/1 (slike 7 i 8). Ovo ponovo pokazuje jedinstvenu i neočekivanu prednost u pogledu potentnosti i bezbednostijedinjenja33 kao što se vidi u tabeli J sa terapijskim indeksom u vidu više od 1000 puta veće bezbednosti po bubrege u odnosu na uporedni primer 1.
Druga jedinjenja ovog pronalaska imaju slične prednosti u pogledu bezbednosti i efikasnosti u odnosu na poznata jedinjenja kako je navedeno u primerima na slikama 11, 12, 13 i 14.

Claims (24)

1. Jedinjenje formule: naznačeno time što: Ar je izabran od: n je ceo broj izabran od 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; R<1>je izabran od vodonika, Ci-Cs alkil i polihidroksilovane alkil grupe koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika; R2 je vodonik ili polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika; R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
2. Jedinjenje patentnog zahteva 1 koje ima formulu: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
3. Jedinjenje patentnog zahteva 1 koje je: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
4. Jedinjenje patentnog zahteva 1 formule (II): naznačeno time što: nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; R<1>je izabran od vodonika, Ci-Cs alkil i polihidroksilovane alkil grupe koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika; R2 je vodonik ili polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika; R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
5. Jedinjenje patentnog zahteva 4 izabrano iz grupe koju čine: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
6. Jedinjenje patentnog zahteva 1 formule (III): naznačeno time što: nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; R<1>je izabran od vodonika, Ci-Cs alkil i polihidroksilovane alkil grupe koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika; R2 je vodonik ili polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika; R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
7. Jedinjenje patentnog zahteva 6 izabrano od: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
8. Jedinjenje patentnog zahteva 1 formule (IV): naznačeno time što: nje ceo broj izabran od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; R<1>je izabran od vodonika, Ci-Cs alkil i polihidroksilovane alkil grupe koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika; R2 je vodonik ili polihidroksilovana alkil grupa koja ima od 3 do 8 atoma ugljenika; R<3>i R<4>su svaki, nezavisno, vodonik ili C1-C3alkil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
9. Jedinjenje patentnog zahteva 8 izabrano od: ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
10. Farmaceutska kompozicija koja sadrži farmaceutski efikasnu količinu jedinjenja patentnih zahteva 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ili 9, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i farmaceutski prihvatljiv nosač ili pomoćnu materiju.
11. Farmaceutska kompozicija patentnog zahteva 10 naznačena time što je jedinjenje 3,5-diamino-N-(N-(4-(4-((S)-2-amino-3-(4-(3-(bis((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahidroksiheksil)amino)-propil)fenilamino)-3 -oksopropil)naftalen-1 - il}butil)karbamimidoil)-6-hloropirazin-2-karboksamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
12. Kompozicija u skladu sa patentnim zahtevom 10 ili 11, naznačena time što je navedena kompozicija pogodna za inhalaciju ili je rastvor za aerosolizaciju i primenu pomoću nebulizatora ili je pogodna za primenu pomoću inhalatora sa fiksnim dozama ili je suvi prašak koji je pogodan za primenu pomoću inhalatora sa suvim praškom.
13. Kompozicija u skladu sa patentnim zahtevom 10, 11 ili 12 dalje sadrži farmaceutski efikasnu količinu terapijski aktivnog agensa izabranog od CFTR modulatora, antiinflamatornih agenasa, antiholinergičkih agenasa, P-agonista, agonista P2Y2 receptora, agonista receptora aktiviranog proliferatorom peroksizoma, inhibitora kinaze, antiinfektivnih agenasa i antihistaminika.
14. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u metodu za pospešivanje hidracije površina sluznica ili ponovno uspostavljanje odbrane sluznice kod ljudi.
15. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u metodu za lečenje hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP) kod čoveka kojem je to potrebno.
16. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u metodu za lečenje cistične fibroze kod čoveka kojem je to potrebno.
17. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u metodu za lečenje bronhiektazija kod čoveka kojem je to potrebno.
18. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u metodu za lečenje primame cilijarne diskinezije kod čoveka kojem je to potrebno.
19. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u vidu leka.
20. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili kompozicija u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 10 do 13, 23 i 24, za upotrebu u lečenju bolesti povezane sa reverzibilnom ili ireverzibilnom opstrukcijom disajnih puteva, hronične opstruktivne bolesti pluća (HOBP), astme, bronhiektazija (uključujući bronhiektazije usled stanja koja nisu cistična fibroza), akutnog bronhitisa, hroničnog bronhitisa, postvirusnog kašlja, cistične fibroze, emfizema, pneumonije, panbronhiolitisa, bronhiolitisa povezanog sa transplantacijom, i traheobronhitisa povezanog sa upotrebom ventilatora ili prevenciji pneumonije povezane sa upotrebom ventilatora kod čoveka kojem je to potrebno.
21. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili kompozicija u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 10 do 13, 23 i 24, za upotrebu u lečenju suvih usta (kserostomije), suve kože, suvoće vagine, sinusitisa, rinosinusitisa, nazalne dehidracije, uključujući nazalnu dehidraciju izazvanu primenom suvog kiseonika, suvog oka, Sjogrenove bolesti, sindroma distalne intestinalne opstrukcije, zapaljenja srednjeg uha, primarne cilijarne diskinezije, sindroma distalne intestinalne opstrukcije, ezofagitisa, zatvora ili hroničnog divertikulitisa, ili izazivanje okularne ili kornealne hidracije, kod čoveka kojem je to potrebno.
22. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili kompozicija u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 10 do 13, 23 i 24, za upotrebu u metodu za prevenciju, ublažavanje i/ili lečenje determinističkih zdravstvenih efekata na respiratorni trakt i/ili druge telesne organe koje izaziva izlaganje aerosolima koji se mogu udahnuti a koji sadrže radionuklide kod čoveka kome je to potrebno.
23. Farmaceutska kompozicija koja sadrži farmaceutski efikasnu količinu jedinjenja patentnih zahteva 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ili 9, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i osmolit.
24. Farmaceutska kompozicija patentnog zahteva 23 naznačena time stoje osmolit hipertonični fiziološki rastvor ili manitol.
RS20170066A 2012-12-17 2013-12-13 Derivati hloropirazin karboksamida korisni za lečenje bolesti kojima pogoduje nedovoljna hidracija sluznica RS55618B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261738248P 2012-12-17 2012-12-17
PCT/US2013/075108 WO2014099676A1 (en) 2012-12-17 2013-12-13 Chloro-pyrazine carboxamide derivatives useful for the treatment of diseases favoured by insufficient mucosal hydration

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55618B1 true RS55618B1 (sr) 2017-06-30

Family

ID=49883318

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170066A RS55618B1 (sr) 2012-12-17 2013-12-13 Derivati hloropirazin karboksamida korisni za lečenje bolesti kojima pogoduje nedovoljna hidracija sluznica

Country Status (33)

Country Link
US (3) US9593084B2 (sr)
EP (2) EP2931713B1 (sr)
JP (2) JP6392242B2 (sr)
KR (1) KR102258469B1 (sr)
CN (2) CN105073717B (sr)
AP (1) AP2015008556A0 (sr)
AU (2) AU2013363218B2 (sr)
BR (1) BR112015014349A2 (sr)
CA (1) CA2895512C (sr)
CL (1) CL2015001696A1 (sr)
CY (1) CY1118678T1 (sr)
DK (1) DK2931713T3 (sr)
EC (1) ECSP15025947A (sr)
ES (1) ES2619954T3 (sr)
GE (2) GEAP201813881A (sr)
HR (1) HRP20170060T1 (sr)
HU (1) HUE032891T2 (sr)
IL (2) IL239452B (sr)
LT (1) LT2931713T (sr)
MX (1) MX379300B (sr)
PE (1) PE20151054A1 (sr)
PH (1) PH12015501363B1 (sr)
PL (1) PL2931713T3 (sr)
PT (1) PT2931713T (sr)
RS (1) RS55618B1 (sr)
RU (1) RU2015129065A (sr)
SA (1) SA515360611B1 (sr)
SG (2) SG11201504799QA (sr)
SI (1) SI2931713T1 (sr)
SM (2) SMT201700107T1 (sr)
UA (1) UA120343C2 (sr)
WO (1) WO2014099676A1 (sr)
ZA (1) ZA201504559B (sr)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6858615B2 (en) 2002-02-19 2005-02-22 Parion Sciences, Inc. Phenyl guanidine sodium channel blockers
HRP20171044T1 (hr) 2011-06-27 2017-10-06 Parion Sciences, Inc. Kemijski i metabolički stabilni dipeptid s potentnom aktivnošću blokatora natrijevog kanala
AR086745A1 (es) 2011-06-27 2014-01-22 Parion Sciences Inc 3,5-diamino-6-cloro-n-(n-(4-(4-(2-(hexil(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)etoxi)fenil)butil)carbamimidoil)pirazina-2-carboxamida
BR112014029329A2 (pt) 2012-05-29 2017-06-27 Parion Sciences Inc aminoamidas semelhantes ao dendrímero possuindo atividade bloqueadora de canal de sódio para o tratamento de olho seco e outras doenças mucosais
HUE032891T2 (hu) 2012-12-17 2017-11-28 Parion Sciences Inc Klórpirazin-karboxamid-származékok nem kielégítõ nyálkahártya-hidratáció által elõsegített megbetegedések kezelésére
EP2931712B8 (en) 2012-12-17 2018-05-23 Parion Sciences, Inc. 3,5-diamino-6-chloro-n-(n-(4-phenylbutyl)carbamimidoyl) pyrazine-2- carboxamide compounds
WO2015026601A2 (en) 2013-08-23 2015-02-26 Johnson Michael R Dithiol mucolytic agents
US9102633B2 (en) 2013-12-13 2015-08-11 Parion Sciences, Inc. Arylalkyl- and aryloxyalkyl-substituted epithelial sodium channel blocking compounds
UY36034A (es) 2014-03-18 2015-09-30 Astrazeneca Ab Derivados de 3,5-diamino-6-cloro-pirazina-2-carboxamida y sales farmaceuticamente aceptables de estos
US9951051B2 (en) 2014-05-29 2018-04-24 Shionogi & Co., Ltd. Process for producing alkynylketone derivative
US20150376145A1 (en) 2014-06-30 2015-12-31 Parion Sciences, Inc. Stable sodium channel blockers
CN104402791B (zh) * 2014-12-15 2017-02-01 河南师范大学 一种奈拉西坦的制备方法
CN112321472A (zh) 2015-01-30 2021-02-05 帕里昂科学公司 新型单硫醇粘液溶解剂
AU2016255851A1 (en) 2015-04-30 2017-12-14 Parion Sciences, Inc. Novel prodrugs of dithiol mucolytic agents
EP3455203B1 (en) * 2016-05-12 2021-09-22 Research Triangle Institute Vinylogous phenethylamines as neurotransmitter releasers
GB201610854D0 (en) 2016-06-21 2016-08-03 Entpr Therapeutics Ltd Compounds
GB201619694D0 (en) 2016-11-22 2017-01-04 Entpr Therapeutics Ltd Compounds
GB201717051D0 (en) * 2017-10-17 2017-11-29 Enterprise Therapeutics Ltd Compounds
GB201808093D0 (en) 2018-05-18 2018-07-04 Enterprise Therapeutics Ltd Compounds
EP3858328A1 (en) * 2020-01-31 2021-08-04 MetrioPharm AG Use of 5-amino-2,3-dihydro-1,4-phthalazinedione in the inhalatory treatment of inflammatory pulmonary diseases

Family Cites Families (413)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3268406A (en) 1961-10-12 1966-08-23 Merck & Co Inc Compositions and method of using (3-amino-pyrazinoyl) guanidines
NL6409716A (sr) 1962-10-30 1965-10-01
DK109779C (da) 1962-10-30 1968-07-01 Merck & Co Inc Fremgangsmåde til fremstilling af 3-aminopyrazinamidoguanidinforbindelser eller syreadditionssalte heraf.
NL6409714A (sr) 1962-10-30 1965-10-01
US3316266A (en) 1964-03-31 1967-04-25 Merck & Co Inc 3-aminopyrazinoic acid derivatives and process for their preparation
BE639393A (sr) 1962-10-30
BE639386A (sr) 1962-10-30
US3274191A (en) 1963-11-15 1966-09-20 Merck & Co Inc N-(3-aminopyrazinoyl) benzamidines and process for preparing
US3240780A (en) 1963-12-23 1966-03-15 Merck & Co Inc Amino-pyrazinoyl guanidines
DE1245967B (de) 1964-03-31 1967-08-03 Merck &. Co., Inc., Rahway, N.J. (V. St. A.) Verfahren zur Herstellung von S.S-Diamino-o-chlor-pyrazincarbonsäurealkylestern
NL6501301A (sr) 1964-04-03 1965-10-04
US3249610A (en) 1964-09-08 1966-05-03 Merck & Co Inc Synthesis of 3-amino, 5-chloro, 6-substituted-pyrazinoates
DE1281818B (de) 1965-07-17 1968-10-31 Rheinische Kalksteinwerke Verfahren zum gleichzeitigen Mahlen mehrerer Rohstoffe unterschiedlicher Mahlbarkeit
US3318813A (en) 1965-08-16 1967-05-09 Dow Chemical Co Poly-alkylstyrene viscosity index improver
US3341540A (en) 1965-10-04 1967-09-12 Merck & Co Inc 3-amino-6-halopyrazinonitriles and their syntheses
US3274192A (en) 1965-10-04 1966-09-20 Merck & Co Inc Derivatives of pyrazine and a method for their preparation
US3361748A (en) 1965-11-22 1968-01-02 Merck & Co Inc Process for the preparation of pteridinones
US3305552A (en) 1965-11-22 1967-02-21 Merck & Co Inc 3-aminopyrazinoic acids and process for their preparation
US3361306A (en) 1966-03-31 1968-01-02 Merck & Co Inc Aerosol unit dispensing uniform amounts of a medically active ingredient
FR1525671A (fr) 1966-08-25 1968-05-17 Merck & Co Inc Procédé de préparation de (3, 5 - diamino - 6 - halogéno - pyrazinoyl) - guanidines et de (3, 5 - diamino - 6 - halogéno -pyrazinamido) guanidines
NL6707564A (sr) 1966-08-25 1968-02-26
FR1525670A (fr) 1966-08-25 1968-05-17 Merck & Co Inc Procédé de fabrication de guanidines substituées
IL27897A (en) 1966-08-25 1972-02-29 Merck & Co Inc Preparation of pyrazinoalguanides and pyrazinoamidoguanidines
US3660400A (en) 1966-11-17 1972-05-02 Merck & Co Inc Lower alkyl 3-hydroxy and 3-mercaptopyrazinoates
US3472848A (en) 1966-11-17 1969-10-14 Merck & Co Inc 3-hydroxy and 3-mercapto-pyrazinoyl-guanidines,corresponding ethers and thioethers and processes for their preparation
US3527758A (en) 1967-04-13 1970-09-08 Merck & Co Inc Process for the preparation of pyrazinoylguanidines from a pyrazinoic azide and a guanidine
US3507865A (en) 1967-04-27 1970-04-21 Merck & Co Inc 3-hydroxy- and 3-mercaptopyrazinamidoguanidines the corresponding ethers and thioethers and processes for their preparation
US3507866A (en) 1967-08-08 1970-04-21 Merck & Co Inc 1h - imidazo(4,5-b)pyrazin - 2 - one and processes for their preparation
US3487082A (en) 1967-09-28 1969-12-30 Merck & Co Inc 2,4 - diamino - 6 - halopteridines and processes for their preparation
US3503973A (en) 1967-11-07 1970-03-31 Merck & Co Inc Process for preparation of pyrazinoylguanidines
US3515723A (en) 1967-11-14 1970-06-02 Merck & Co Inc 2 - (5 - amino - 1h - 1,2,4 - triazol - 3 - yl)- 3-aminopyrazines and processes for their preparation
US3531484A (en) 1968-02-14 1970-09-29 Merck & Co Inc 1-(3-aminopyrazinoyl)-4,5,5-trisubstituted biguanide products
US3461123A (en) 1968-04-12 1969-08-12 Merck & Co Inc 1h-imidazo(4,5-b)pyrazin-2-ones and processes for their preparation
US3506662A (en) 1968-04-30 1970-04-14 Merck & Co Inc Process for preparation of pyrazinoyland pyrazinamidoguanidines
US3625950A (en) 1968-07-03 1971-12-07 Merck & Co Inc Certain halophenoxy alkanamides, hydrazides and derivatives thereof
US3575975A (en) 1968-07-25 1971-04-20 Merck & Co Inc Process for the preparation of 3-aminopyrazinoylureas
US3539569A (en) 1968-08-21 1970-11-10 Merck & Co Inc Preparation of pyrazinoylguanidines from pyrazinoylureas
US3544571A (en) 1968-09-04 1970-12-01 Merck & Co Inc Process for making pyrazinoylthiourea compounds
US3555023A (en) 1968-11-13 1971-01-12 Merck & Co Inc 1-(3 - aminopyrazinoyl) - 3 - substituted-3-thioisosemicarbazides and method for preparation
US3555024A (en) 1968-11-13 1971-01-12 Merck & Co Inc 1-(3-aminopyrazinoyl)semicarbazides,1-(3-aminopyrazinoyl) - thiosemicarbazides,and method for their preparation
US3668241A (en) 1968-11-25 1972-06-06 Merck & Co Inc Substituted 1-oxoinden-5-yloxy alkanoic acids
US3586688A (en) 1968-12-18 1971-06-22 Merck & Co Inc Certain aminopyridinecarbonyl guanidines
US3573305A (en) 1968-12-30 1971-03-30 Merck & Co Inc (3-amino-pyrazinoyl)sulfamides and their preparation
US3577418A (en) 1969-02-12 1971-05-04 Merck & Co Inc Pyrazinamide derivatives and processes for their preparation
US3565070A (en) 1969-02-28 1971-02-23 Riker Laboratories Inc Inhalation actuable aerosol dispenser
US3573306A (en) 1969-03-05 1971-03-30 Merck & Co Inc Process for preparation of n-substituted 3,5-diamino-6-halopyrazinamides
US3544568A (en) 1969-03-18 1970-12-01 Merck & Co Inc 3-amino-5,6-substituted pyrazinamides
US3660397A (en) 1970-04-17 1972-05-02 Merck & Co Inc Imidazo(4 5-b)pyrazines
US3864401A (en) 1970-12-23 1975-02-04 Merck & Co Inc Substituted 2-aminomethyl-4,6-dihalophenols
US3794734A (en) 1971-03-03 1974-02-26 Merck & Co Inc Methods of treating edema and hypertension using certain 2-aminoethylphenols
US3935313A (en) 1971-03-29 1976-01-27 Jan Marcel Didier Aron-Samuel Pharmaceutical composition containing N-(3-diethyl-aminopropyl)-4-nitro-1-oxide-pyridine-2-carboxamide and process for the treatment of hypertension therewith
US3948895A (en) 1971-09-28 1976-04-06 E. I. Du Pont De Nemours And Company Synthesis of 3,5-diaminopyrazinoic acid from 3,5-diamino-2,6-dicyanopyrazine and intermediates
BE791201A (fr) 1971-11-12 1973-05-10 Merck & Co Inc Indanyloxytetrazoles
US3953476A (en) 1971-12-27 1976-04-27 Merck & Co., Inc. 3-Amino-5-sulfonylbenzoic acids
US3894085A (en) 1972-09-19 1975-07-08 Ciba Geigy Corp New 2-halo nitrones, their manufacture and their use for the manufacture of N-substituted araliphatic aldehyde-nitrones
US4085219A (en) 1972-10-13 1978-04-18 Merck & Co., Inc. 1-Oxo-2,2-disubstituted-5-indanyloxy(or thio)alkanoic acids
US4081554A (en) 1972-10-13 1978-03-28 Merck & Co., Inc. 1-oxo-2,2-disubstituted-5-indanyloxy(or thio)alkano acids
US3984465A (en) 1972-10-13 1976-10-05 Merck & Co., Inc. 1-Oxo-2,2-disubstituted-5-indanyloxy(or thio)alkanoic acids
US3976686A (en) 1972-10-13 1976-08-24 Merck & Co., Inc. [1-Oxo-2,3-hydrocarbylene-5-indanyloxy(or thio)]alkanoic acids
US4091015A (en) 1972-10-27 1978-05-23 American Home Products Corporation 15-Substituted prostanoic acids
US4066692A (en) 1972-10-30 1978-01-03 Merck & Co., Inc. 11,12-secoprostaglandins
US4092356A (en) 1972-10-30 1978-05-30 Merck & Co., Inc. 11,12-Secoprostaglandins
US4055597A (en) 1973-01-26 1977-10-25 Merck & Co., Inc. 10-Aza-11,12-secoprostaglandins
US3987091A (en) 1973-04-12 1976-10-19 Merck & Co., Inc. 11,12-secoprostaglandins
US4091107A (en) 1973-04-25 1978-05-23 Merck & Co., Inc. 8-Aza-9-oxo(and dioxo)-thia-11,12-secoprostaglandins
US4033996A (en) 1973-04-25 1977-07-05 Merck & Co., Inc. 8-Aza-9-oxo(and dioxo)-thia-11,12-secoprostaglandins
US3894065A (en) 1973-04-27 1975-07-08 Merck & Co Inc Aryl-oxo-alkanoic acids
US4182764A (en) 1973-10-11 1980-01-08 Merck & Co., Inc. Tetrazole derivatives of [1-oxo-2-aryl or thienyl-2-substituted-5-indanyloxy(or thio)]alkanoic acids
US4177285A (en) 1973-10-11 1979-12-04 Merck & Co., Inc. [1-Oxo-2-thienyl-2-substituted-5-indanyloxy (or thio)]alkanoic acids and derivatives thereof
US3966966A (en) 1973-10-12 1976-06-29 Merck & Co., Inc. Pharmaceutical compositions and method of treatment employing 1,3-dioxo-2,2-disubstituted indanyloxy alkanoic acids
US3976681A (en) 1973-10-12 1976-08-24 Merck & Co., Inc. [1,3-Dioxo-2-substituted and 2,2-disubstituted- indanyloxy (or thio] alkanoic acids
US4012524A (en) 1973-10-12 1977-03-15 Merck & Co., Inc. [1-Hydroxy-5-indanyloxy (or thio)]-alkanoic acids
US3929872A (en) 1973-10-12 1975-12-30 Merck & Co Inc Indanacetic acid compounds
US4003927A (en) 1973-10-12 1977-01-18 Merck & Co., Inc. (1-Oxo-7,8-disubstituted-1,2,3,4-tetrahydro-6-naphthyloxy)- and (3,4-disubstituted-5-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-5H-benzocycloheptene-2-yloxy) acetic acids and derivatives
US4006180A (en) 1973-10-12 1977-02-01 Merck & Co., Inc. [1,3-Dihydroxy-2-substituted and 2,2-disubstituted-indanyloxy(or thio)]alkanoic acids
US3989749A (en) 1973-10-17 1976-11-02 Merck & Co., Inc. 11,12-Secoprostaglandins
US3991087A (en) 1973-12-13 1976-11-09 Merck & Co., Inc. 8-Halo-11,12-secoprostaglandins
US3979361A (en) 1974-02-20 1976-09-07 Merck & Co., Inc. 2-Aminomethyl-6-trihalo-methylphenols
US3914253A (en) 1974-03-04 1975-10-21 Merck & Co Inc 5-Oxo-6-substituted-cyclopent-{8 f{9 -indole-2-carboxylic acids
US3931239A (en) 1974-04-03 1976-01-06 Merck & Co., Inc. 6-Oxo-7-substituted-6H-indeno-[5,4-b]furan(and thiophene)-carboxylic acids
US3958004A (en) 1974-04-23 1976-05-18 Merck & Co., Inc. Phenoxyacetic acid derivatives as uricosuric agents
US3928624A (en) 1974-04-25 1975-12-23 Merck & Co Inc Phenol compounds in treating pain, fever and inflammation
US3956374A (en) 1974-05-03 1976-05-11 Merck & Co., Inc. Aryl-oxo-heptenoic acids
US3974212A (en) 1974-05-22 1976-08-10 Merck & Co., Inc. [1-Hydroximino-2,2-disubstituted-5-indanyloxy-(or thio)]alkanoic acids
AT351182B (de) 1974-06-25 1979-07-10 Merck & Co Inc Verfahren zur herstellung von neuen 9-thia-, 9-oxothia- und 9-dioxothia- 11,12-secoprosta- glandinen
PL98342B1 (pl) 1974-07-30 1978-04-29 Sposob wytwarzania kwasu 1-keto-2-arylo-/lub tienylo/-2-podstawionego-indanyloksy-/lub tio/-5-alkanokarboksylowego
US4020177A (en) 1974-08-30 1977-04-26 Merck & Co., Inc. Substituted phenoxy-tridecanoic acids
US3991106A (en) 1974-09-13 1976-11-09 Merck & Co., Inc. 16-Ethers of 8-aza-9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins
US4055596A (en) 1974-09-13 1977-10-25 Merck & Co., Inc. 11,12-Seco-prostaglandins
US3984552A (en) 1975-02-24 1976-10-05 Merck & Co., Inc. 6-Oxo-7-substituted and 7,7-disubstituted-6H-indeno-[5,4-b]furan (and thiophene) carboxylic acids
JPS51116341A (en) 1975-04-04 1976-10-13 Automob Antipollut & Saf Res Center Detection apparatus for oil pressure
US4018802A (en) 1975-04-09 1977-04-19 Merck & Co., Inc. 9-Thia- and oxothia- and 9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins and processes
US4097504A (en) 1975-04-23 1978-06-27 Merck & Co., Inc. 11,12-Secoprostaglandins
US4092414A (en) 1975-04-25 1978-05-30 Merck & Co., Inc. 3,4-Dihydrospiro-2H-1,3-benzoxazines and their use in treating edema, abnormal electrolyte retention, and inflammation
US4059602A (en) 1975-06-06 1977-11-22 Merck & Co., Inc. 8-Methyl-, phenyl-, or substituted phenyl-11,12-secoprostaglandins
US4059601A (en) 1975-06-06 1977-11-22 Merck & Co., Inc. 8-Halo-11,12-secoprostaglandins
US4061643A (en) 1975-06-18 1977-12-06 Merck & Co., Inc. Certain 16-aryloxy-11,12-seco-prostaglandins
US4087542A (en) 1975-07-09 1978-05-02 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-6,7-disubstituted-5-acyl benzofuran-2-carboxylic acids
US4296122A (en) 1975-07-09 1981-10-20 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-6,7-disubstituted-5-(acyl)benzofuran-2-carboxylic acids
US4181727A (en) 1975-07-09 1980-01-01 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-6,7-disubstituted-5-acyl benzofuran-2-carboxylic acids
US4044153A (en) 1975-08-01 1977-08-23 Merck & Co., Inc. Antiinflammatory 2-aminomethyl-6-trihalomethylphenols
US4203988A (en) 1975-11-12 1980-05-20 Merck & Co., Inc. Pyridinyl ureas and pharmaceutical use
US4029816A (en) 1975-11-25 1977-06-14 Merck & Co., Inc. Substituted 2-aminomethyl-6-iodophenols
US4085211A (en) 1975-12-15 1978-04-18 Merck & Co., Inc. Pyrazinecarboxamides and processes for preparing same
US4070464A (en) 1976-02-19 1978-01-24 Merck & Co., Inc. Method of treating autoimmune diseases
US4066675A (en) 1976-03-22 1978-01-03 Merck & Co., Inc. 9-thia- and oxothia- and 9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins and processes
US4128564A (en) 1976-03-22 1978-12-05 Merck & Co., Inc. 9-Thia- and oxothia- and 9-dioxothia-11,12-seco-prostaglandins
US4181661A (en) 1976-05-03 1980-01-01 Merck & Co., Inc. Derivatives of 2-iminothiazolidines and thiazolines
US4029803A (en) 1976-05-03 1977-06-14 Merck & Co., Inc. Method of treatment with 2-iminothiazolidines and thiazolines
US4022794A (en) 1976-05-24 1977-05-10 Merck & Co., Inc. Novel analogs of prostaglandins with 4-oxo-thiazolidinyl nucleus and method of preparation thereof
US4059587A (en) 1976-05-24 1977-11-22 Merck & Co., Inc. Certain thiazolidine compounds
NL7705652A (nl) 1976-06-15 1977-12-19 Merck & Co Inc 2-imino-3-aminothiazolidinen.
US4025625A (en) 1976-06-15 1977-05-24 Merck & Co., Inc. Imidazothiazines
US4054652A (en) 1976-06-15 1977-10-18 Merck & Co., Inc. Dihydro- and tetrahydro- iminothiazines
US4087526A (en) 1976-07-23 1978-05-02 Merck & Co., Inc. (3-Amino-5-substituted-6-fluoropyrazinoyl or pyrazamido)-guanidines and their derivatives bearing substituents on the guanidino nitrogens
US4111877A (en) 1976-07-29 1978-09-05 Air Products & Chemicals, Inc. Allyl esters of n-alkyl-omega-(alkyleneureido) amic acids and their synthesis and use in aqueous emulsion polymer systems
US4067980A (en) 1976-08-16 1978-01-10 Merck & Co., Inc. Spirobenzoxazinium salts, method of use and compositions thereof as antihypertensive agents
US4085117A (en) 1976-10-18 1978-04-18 Merck & Co., Inc. 6,7-Disubstituted-5-(acyl)benzofuran-2-carboxylic acids
US4100294A (en) 1976-12-06 1978-07-11 Merck & Co., Inc. 5-(Hydroxy (substituted) methyl)-2,3-dihydrobenzo furan-2-carboxylic acid and its derivatives
US4150235A (en) 1976-12-17 1979-04-17 Merck & Co., Inc. Interphenylene 11,12-secoprostaglandins
US4175203A (en) 1976-12-17 1979-11-20 Merck & Co., Inc. Interphenylene 11,12-secoprostaglandins
US4105769A (en) 1977-01-24 1978-08-08 Merck & Co., Inc. Inhibition of indoleamine-N-methyl transferase by 2-iminopyridines
US4087435A (en) 1977-02-17 1978-05-02 Merck & Co., Inc. 8-Aza-9-dioxothiaprostanoic acids
US4115573A (en) 1977-03-04 1978-09-19 Merck & Co., Inc. N-pyrazinecarbonyl-N'-substituted-sulfamoylguanidine and processes for preparing same
US4208413A (en) 1977-03-04 1980-06-17 Merck & Co., Inc. N-Pyrazinecarbonyl-N'-alkoxycarbonyl and N',N"-bis(alkoxycarbonyl)guanidines and processes for preparing same
US4112236A (en) 1977-04-04 1978-09-05 Merck & Co., Inc. Interphenylene 8-aza-9-dioxothia-11,12-secoprostaglandins
US4108859A (en) 1977-06-06 1978-08-22 The Dow Chemical Company Microbicidal (pyridinylamino) alkyl guanidines
US4115402A (en) 1977-06-17 1978-09-19 Merck & Co., Inc. 2,3-Dichloro-4-[(substituted-sulfonyl)-phenoxy]-acetic acids
US4196292A (en) 1977-06-29 1980-04-01 Merck & Co., Inc. 6-Substituted amiloride derivatives
US4133885A (en) 1977-07-18 1979-01-09 Merck & Co., Inc. Substituted naphthyridinones
US4229456A (en) 1977-07-18 1980-10-21 Merck & Co., Inc. Substituted naphthyridinones and processes for their preparations
US4536507A (en) 1977-07-26 1985-08-20 Merck & Co., Inc. Prostaglandin antagonists
US4093728A (en) 1977-08-18 1978-06-06 E. R. Squibb & Sons, Inc. Triazoloisoindoles
US4140776A (en) 1977-09-16 1979-02-20 Merck & Co., Inc. N-pyrazinecarbonyl-N'-acylguanidines
US4130566A (en) 1977-10-27 1978-12-19 Sumitomo Chemical Company, Limited Process for producing 5-carboxy-2-acetylthiophene
US4127584A (en) 1977-11-11 1978-11-28 Merck & Co., Inc. 2,3-Substituted-1,2,5-thiadiazolium salt antimicrobials
US4292430A (en) 1977-11-23 1981-09-29 Merck & Co., Inc. 2,3-Substituted-1,2-isothiazolium salt antimicrobials
US4159279A (en) 1977-11-23 1979-06-26 Merck & Co., Inc. Nuclear substituted 2-hydroxyphenylmethanesulfamic acids
US4267341A (en) 1977-11-23 1981-05-12 Merck & Co., Inc. Process for preparing 2,3-substituted-1,2,-isothiazolium salt antimicrobials
US4166177A (en) 1977-12-27 1979-08-28 Merck & Co., Inc. Substituted 2,2-dioxo-1,2,3-benzoxathiazines
US4145551A (en) 1978-01-09 1979-03-20 Merck & Co., Inc. Pyrazine-2-carbonyloxyguanidines
US4401669A (en) 1978-01-27 1983-08-30 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-substituted-5-benzoyl benzofuran-2-carboxylic acids and their use in treating hypertension
US4189496A (en) 1978-02-16 1980-02-19 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-5-thienylmethyl and furylmethyl-6-substituted and 6,7-disubstituted-benzofuran-2-carboxylic acid
US4163781A (en) 1978-04-17 1979-08-07 Merck & Co., Inc. 3-Amino-N-[(phosphonoamino)iminomethyl]-6-halopyrazinecarboxamide compounds, compositions and methods of use
US4156005A (en) 1978-06-21 1979-05-22 Merck & Co., Inc. Derivatives of 1,2-benzisoxazoles
US4394515A (en) 1978-06-23 1983-07-19 Merck & Co., Inc. 10,11-Dihydro-11-oxodibenzo[b,f]thiepin compounds
US4263207A (en) 1978-08-01 1981-04-21 Merck & Co., Inc. 10,11-Dihydrodibenzo[b,f][1,4]thiazepine carboxylic acids esters and amides thereof
US4190655A (en) 1978-08-28 1980-02-26 Merck & Co., Inc. Amiloride citrate
US4226867A (en) 1978-10-06 1980-10-07 Merck & Co., Inc. 3,3-Substituted spiro-1,2,4-benzothiadiazines
US4178386A (en) 1978-10-11 1979-12-11 Merck & Co., Inc. Inhibitors of glycolic acid oxidase
US4207329A (en) 1978-10-11 1980-06-10 Merck & Co., Inc. Derivatives of glycolic and glyoxylic acid as inhibitors of glycolic acid oxidase
US4187315A (en) 1978-10-11 1980-02-05 Merck & Co., Inc. N-alkyl(and cycloalkyl)oxamic acid and derivatives as inhibitors of glycolic acid oxidase
US4390537A (en) 1978-11-16 1983-06-28 Merck & Co., Inc. 1-(Substituted-aminoalkoxyphenyl)-2-methylene-1-alkanones, compositions and use
US4342782A (en) 1978-11-16 1982-08-03 Merck & Co., Inc. 1-(Substituted-aminoalkoxyphenyl)-2-methylene-1-alkanones, compositions and use thereof
US4282365A (en) 1978-11-24 1981-08-04 Merck & Co., Inc. Dibenz[b,e]oxepin compounds
US4249021A (en) 1979-02-26 1981-02-03 Merck & Co., Inc. Indanacetic acid compounds
US4246406A (en) 1979-03-27 1981-01-20 Merck & Co., Inc. Heterocyclic substituted pyrazinoylguanidines
US4224447A (en) 1979-03-27 1980-09-23 Merck & Co., Inc. Novel pyrazinecarboxamides and processes for preparing same
US4221790A (en) 1979-04-16 1980-09-09 Merck & Co., Inc. Substituted 2,2-dioxo-1,2,3-benzoxathiazines
US4233452A (en) 1979-05-03 1980-11-11 Merck & Co., Inc. Derivatives of glycolic and glyoxylic acid as inhibitors of glycolic acid oxidase
US4220654A (en) 1979-06-04 1980-09-02 Merck & Co., Inc. Cyclic imidazole cyanoguanidines
US4537902A (en) 1979-06-11 1985-08-27 Merck & Co., Inc. 4-Substituted-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4256758A (en) 1979-06-11 1981-03-17 Merck & Co., Inc. 4-Substituted-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4431660A (en) 1979-06-11 1984-02-14 Merck & Co., Inc. (4'-Biphenylyloxy and-thio-oxy)-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-diones and a method of treating calcium oxalate renal lithiasis therewith
US4237144A (en) 1979-06-21 1980-12-02 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-2,6,7-trisubstituted-5-acylbenzofurans
US4291050A (en) 1979-06-21 1981-09-22 Merck & Co., Inc. 6,7-Disubstituted-2 or 2,2-substituted-5-substituted-1-indanones
US4237130A (en) 1979-06-21 1980-12-02 Merck & Co., Inc. 2,3-Dihydro-6,7-disubstituted-5-(substituted sulfonyl)benzofuran-2-carboxylic acids
JPS6034925B2 (ja) 1979-07-31 1985-08-12 帝人株式会社 持続性鼻腔用製剤およびその製造法
US4459422A (en) 1979-08-17 1984-07-10 Merck & Co., Inc. Substituted pyranone inhibitors of cholesterol synthesis
US4375475A (en) 1979-08-17 1983-03-01 Merck & Co., Inc. Substituted pyranone inhibitors of cholesterol synthesis
US4567289A (en) 1979-08-17 1986-01-28 Merck & Co., Inc. Substituted pyranone inhibitors of cholesterol synthesis
US4710513A (en) 1979-08-17 1987-12-01 Merck & Co., Inc. Substituted pyranone inhibitors of cholesterol synthesis
US4298743A (en) 1979-09-11 1981-11-03 Merck & Co., Inc. 4-(Substituted phenyl thiazolyl)-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-diones
US4296237A (en) 1979-09-11 1981-10-20 Merck & Co., Inc. 4-(Pyridyl, piperazinyl and thiazolyl substituted thiazolyl)-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-diones
US4379791A (en) 1979-09-11 1983-04-12 Merck & Co., Inc. 4-(Substituted thiazolyl)-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4377588A (en) 1979-09-11 1983-03-22 Merck Sharp & Dohme (I.A.) Corp. 4-(Substituted thiazolyl)-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4317922A (en) 1979-10-19 1982-03-02 Merck & Co., Inc. [(5,6,9a-Substituted-3-oxo-1,2,9,9a-tetrahydro-3H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic and cycloalkanoic acids and their analogs, esters, salts and derivatives
US4356313A (en) 1979-10-19 1982-10-26 Merck & Co., Inc. [(5,6,9a-substituted-3-oxo-1,2,9,9a-tetrahydro-3H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic and cycloalkanoic acid esters and their analogs, the parent acids and their salts
US4337354A (en) 1979-10-19 1982-06-29 Merck & Co., Inc. [(5,6,9a-Substituted-3-oxo-1,2,9,9a-tetrahydro-3H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic and cycloalkanoic acids, their analogs, esters, salts, and derivatives
US4448786A (en) 1979-11-05 1984-05-15 Merck & Co., Inc. 4-Naphthyl and substituted naphthyl-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-diones and their use as inhibitors of glycolic acid oxidase
US4432992A (en) 1979-11-05 1984-02-21 Merck & Co., Inc. 4-[5(and 4)-Substituted-2-thienyl]-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4349561A (en) 1979-11-05 1982-09-14 Merck & Co., Inc. 4-Substituted-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4342776A (en) 1979-11-05 1982-08-03 Merck & Co., Inc. 4-Substituted-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4464363A (en) 1979-12-20 1984-08-07 Merck & Co., Inc. Ajuvants for rectal delivery of drug substances
US4260771A (en) 1979-12-20 1981-04-07 Merck & Co., Inc. Interphenylene 9-thia-11-oxo-12-azaprostanoic acid compounds
US4428959A (en) 1980-04-04 1984-01-31 Merck & Co., Inc. 4-Alkylsubstituted-3-hydroxy-3-pyrroline-2,5-dione inhibitors of glycolic acid oxidase
US4362724A (en) 1980-05-19 1982-12-07 Merck & Co., Inc. Method of treating edema and hypertension and pharmaceutical composition therefor in which the active ingredient comprises a novel substituted pyrazinyl-1,2,4-oxadiazole and a kaliuretic diuretic
US4309540A (en) 1980-05-19 1982-01-05 Merck & Co., Inc. Substituted pyrazinyl-1,2,4-oxadiazoles
US4356314A (en) 1980-06-30 1982-10-26 Merck & Co., Inc. [5,6,9A-Substituted-3-oxo-1,2,9,9a-tetrahydro-3H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic and cycloalkanoic acids, their analogs, esters, salts, and derivatives
US4277602A (en) 1980-07-02 1981-07-07 Merck & Co., Inc. 3-Amino-5-substituted-6-halo-N-(3,4-dihydro-6-substituted-1,3,5-truazin-2-yl)2-pyrazinecarboxamides
US4317822A (en) 1980-07-02 1982-03-02 Merck & Co., Inc. 3-Amino-5-substituted-6-halo-N-(3,4-dihydro-6-substituted-1,3,5-triazin-2-yl)2-pyrazinecarboxamides
US4272537A (en) 1980-07-02 1981-06-09 Merck & Co., Inc. 3-Amino-5-substituted-6-halo-N-(4,4-disubstituted-6-substituted-1,3,5-triazin-2-yl)-2-pyrazinecarboxamides
US4465850A (en) 1980-09-02 1984-08-14 Merck & Co., Inc. Treatment of brain injury due to gray matter edema with (indanyloxy) butanoic acids
US4389417A (en) 1980-09-05 1983-06-21 Merck & Co., Inc. Treatment of gray matter edema
US4312860A (en) 1980-10-24 1982-01-26 Regents Of The University Of California Lung surfactant compositions
US4394385A (en) 1980-11-21 1983-07-19 Merck & Co., Inc. Treatment of gray matter edema
US4316043A (en) 1980-12-19 1982-02-16 Merck & Co., Inc. [(5,6,9a-Substituted-3-oxo-1,2,9,9a-tetrahydro-3H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic and cycloalkanoic acids and their analogs, esters, salts and derivatives
US4337258A (en) 1980-12-29 1982-06-29 Merck & Co., Inc. 2,4-Dioxo-4-substituted-1-butanoic acid derivatives useful in treating urinary tract calcium oxalate lithiasis
US4431652A (en) 1980-12-29 1984-02-14 Merck & Co., Inc. 4-Hydroxy-5-substituted-3(2H)-isothiazolone-1,1-dioxide derivatives useful in treating urinary tract calcium oxalate lithiasis
US4336397A (en) 1980-12-29 1982-06-22 Merck & Co., Inc. 2,4-Dioxo-4-substituted-1-butanoic acid derivatives useful in treating urinary tract calcium oxalate lithiasis
US4428956A (en) 1980-12-29 1984-01-31 Merck & Co., Inc. 4-Hydroxy-5-substituted-3-(2H)-isothiazolone-1,1-dioxide derivatives useful in treating urinary tract calcium oxalate lithiasis
GB2112151B (en) 1981-01-09 1984-10-03 Plant Energy Syst Excess gas flow detectors
US4778897A (en) 1981-02-25 1988-10-18 Merck & Co., Inc. 6H-dibenz[b,e][1,4]oxathiepin compounds
US4582842A (en) 1981-02-25 1986-04-15 Merck & Co., Inc. Anti-asthmatic 6H-dibenz-[b,e] [1,4]oxathiepin derivatives, compositions, and method of use therefor
US4454132A (en) 1981-03-16 1984-06-12 Merck & Co., Inc. Pharmaceutical compositions of novel substituted pyrazinyl-1,2,4-oxadiazoles useful in the treatment of edema and hypertension
US4510322A (en) 1981-07-13 1985-04-09 Merck & Co., Inc. Indacrinone having enhanced uricosuric
US4420615A (en) 1981-08-24 1983-12-13 Merck & Co., Inc. Substituted pyridopyrimidines as gastric secretion inhibitors
US4463208A (en) 1981-12-30 1984-07-31 Merck & Co., Inc. Treatment of gray matter edema
US4425337A (en) 1981-12-30 1984-01-10 Merck & Co., Inc. Adjuvants for rectal delivery of drug
US4594349A (en) 1982-01-04 1986-06-10 Beyer Jr Karl H Hyperuretic agents
US4663322A (en) 1982-01-04 1987-05-05 Beyer Jr Karl H Antihypertensive hyperuretic and saluretic agent combinations
US4952582A (en) 1982-01-04 1990-08-28 Beyer Jr Karl H Pyrazinoylguanidine and derivatives thereof having few polar substituents and being useful as hyperuretic agents
US4389393A (en) 1982-03-26 1983-06-21 Forest Laboratories, Inc. Sustained release therapeutic compositions based on high molecular weight hydroxypropylmethylcellulose
US4440740A (en) 1982-04-26 1984-04-03 Merck & Co., Inc. α-Keto aldehydes as enhancing agents of gastro-intestinal drug absorption
US4540564A (en) 1982-05-18 1985-09-10 University Of Florida Brain-specific drug delivery
US4479932A (en) 1982-05-18 1984-10-30 University Of Florida Brain-specific drug delivery
US4501729A (en) 1982-12-13 1985-02-26 Research Corporation Aerosolized amiloride treatment of retained pulmonary secretions
JPS6032714A (ja) 1983-08-01 1985-02-19 Teijin Ltd 鼻腔粘膜に適用するための安定化された粉末状薬学的組成物
US4699917A (en) 1983-09-26 1987-10-13 Merck & Co., Inc. Anti-asthmatic tetrazolyl 6H-dibenz-[B,E]-[1,4]-oxathiepin derivatives, compositions, and method of use therefor
US4596821A (en) 1984-05-01 1986-06-24 Merck & Co., Inc. Treatment of gray matter edema with 3-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones
US4605664A (en) 1984-05-01 1986-08-12 Merck & Co., Inc. Use of substituted-3-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones for treatment of grey matter edema
US4680414A (en) 1984-05-01 1987-07-14 Merck & Co., Inc. Substituted-3-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones
US4604403A (en) 1984-05-01 1986-08-05 Merck & Co., Inc. Use of substituted-3(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones for treating grey matter edema
US4605663A (en) 1984-05-01 1986-08-12 Merck & Co., Inc. Use of substituted-3-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones, for treatment of grey matter edema
US4634717A (en) 1984-05-01 1987-01-06 Merck & Co., Inc. Substituted-3-(2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)-4-hydroxy-1H-pyrrole-2,5-diones, useful for treating persons with gray matter edema
US4604394A (en) 1984-10-01 1986-08-05 Merck & Co., Inc. Antiarrhythmic compositions and method
US4805811A (en) 1985-03-29 1989-02-21 Aktiebolaget Draco Dosage device
US4754061A (en) 1985-06-04 1988-06-28 Merck & Co., Inc. Substituted (2,3-dihydro-1-oxo-1H-inden-5-yl)alkanoic acids, their derivatives and their salts
US4579869A (en) 1985-08-02 1986-04-01 Merck & Co., Inc. Substituted [(2,3-dihydro-1-oxo-1H-inden-5-yl)amino]alkanoic acids, their derivatives and their salts
US4654365A (en) 1985-09-26 1987-03-31 Merck & Co., Inc. 2,3-dihydro-5-(3-oxo-2-cyclohexen-1-yl)-2-benzofurancarboxylic acids, and their salts useful in the treatment of brain injury
US4604396A (en) 1985-09-26 1986-08-05 Merck & Co., Inc. [(2,3,9,9a-tetrahydro-3-oxo-9a-substituted-1H-fluoren-7-yl)oxy]ethanimidamides and [(2,3,9,9a-tetrahydro-3-oxo-9a-substituted-1H-fluoren-7-yl)oxy]ethanimidic acid hydrazides, their derivatives and their salts
US4625047A (en) 1985-12-23 1986-11-25 Merck & Co., Inc. Substituted (2,3-dihydro-4-(3-oxo-1-cyclohexen-1-yl)phenoxy) alkanoic acids, their derivatives and their salts
US4719310A (en) 1985-12-23 1988-01-12 Merck & Co., Inc. Ester and amide substituted (2,3-dihydro-4-(3-oxo-1-cyclohexen-1-yl)phenoxy)alkanoic acids and their salts
US4731472A (en) 1986-03-03 1988-03-15 Merck & Co., Inc. (5,6-dichloro-3-oxo-9A-propyl-2,3,9,9A-tetrahydrofluoren-7-yl)alkanoic acids and alkanimidamides
US4835313A (en) 1986-03-03 1989-05-30 Merck & Co., Inc. (5,6-dichloro-3-oxo-9α-propyl-2,3,9,9α-tetrahydrofluoren-7-yl) alkanimidamides
US4777281A (en) 1986-03-03 1988-10-11 Merck & Co., Inc. [3,4-dichloro-6,7,8,8a,9,10-hexahydro-6-oxo-8a-substituted-2-phenanthrenyl)oxy]-alkanoic acids and -ethanimidamides
US4751244A (en) 1986-04-04 1988-06-14 Merck & Co., Inc. Compounds useful in treating sickle cell anemia
US4731381A (en) 1986-04-04 1988-03-15 Merck & Co., Inc. Method of treating a person for sickle cell anemia
US4731473A (en) 1986-04-04 1988-03-15 Merck & Co., Inc. Compounds useful in treating sickle cell anemia
US4699926A (en) 1986-04-04 1987-10-13 Merck & Co., Inc. Compounds useful in treating sickle cell anemia
US4675341A (en) 1986-08-13 1987-06-23 Merck & Co., Inc. [(5,6-dichloro-3-oxo-9a-propyl-2,3,9,9a-tetrahydrofluoren-7-yl)oxy]ethanol and its derivatives
US4937232A (en) 1986-09-15 1990-06-26 Duke University Inhibition of protein kinase C by long-chain bases
US4769370A (en) 1986-09-24 1988-09-06 Merck & Co., Inc. (1,2-dichloro-8-oxo-5a-substituted-5a,6,7,8-tetrahydrodibenzofuran-3-yl)alkanoic acids and alkanimidamides
US4797391A (en) 1986-09-24 1989-01-10 Merck & Co., Inc. ((5,6-dichloro-3-oxo-9,9a-disubstituted-2,3,9,9a-tetrahydrofluoren-7-yl)oxy)alkanoic acids and alkanimidamides
US4731470A (en) 1986-11-03 1988-03-15 Merck & Co., Inc. [(5,6-dichloro-3-oxo-2,9a-alkano-2,3,9,9a-tetrahydro-1H-fluoren-7-yl)oxy]alkanoic acids and alkanimidamides
US4731471A (en) 1986-11-03 1988-03-15 Merck & Co., Inc. (5,6-dichloro-3-oxo-2,3,9,9a-tetrahydrofluoren-7-yl)-alkanoic acids and alkanimidamides bearing novel functional 9a-substituents
US4782073A (en) 1986-12-24 1988-11-01 Merck & Co., Inc. Amides of [(5,6-dichloro-3-oxo-9-alpha-substituted-2,3,9,9-alpha-tetrahydrofluoren-7-yl-oxyl]acetic acids, and pharmaceutical compositions thereof
US4775695A (en) 1987-06-01 1988-10-04 Merck & Co., Inc. Substituted amidinoalkoxy and amidinoalkylamino indanones and salts thereof
US4771076A (en) 1987-06-01 1988-09-13 Merck & Co., Inc. [(2-substituted 1,2-dihydro-1-oxo-1H-inden-5-yl)oxy]alkanesulfonic acids and salts thereof
US5132296A (en) 1987-08-14 1992-07-21 Cherksey Bruce D Membrane NA+ channel protein and related therapeutic compounds
US5242947A (en) 1988-02-10 1993-09-07 New York University Use of polyamines as ionic-channel regulating agents
US4894376A (en) 1988-02-26 1990-01-16 Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods of treating diseases characterized by hyperexcitability of neurons
US4923874A (en) 1988-07-21 1990-05-08 G. D. Searle & Co. Use of 8-azapurin-6-one derivatives for control of hypertension
US5100806A (en) 1989-03-24 1992-03-31 Macri James N Method for detecting Edwards syndrome
US4955371A (en) 1989-05-08 1990-09-11 Transtech Scientific, Inc. Disposable inhalation activated, aerosol device for pulmonary medicine
CA2063273C (en) 1989-07-11 2002-09-24 Bradley J. Benson Surfactant compositions and methods
US5707644A (en) 1989-11-04 1998-01-13 Danbiosyst Uk Limited Small particle compositions for intranasal drug delivery
US5215991A (en) 1990-01-26 1993-06-01 Allergan, Inc. Combination of selective alpha-adrenergic agonists and Na+ /H+ ex
DE4003272A1 (de) 1990-02-03 1991-08-08 Boehringer Ingelheim Kg Neue treibgasmischungen und ihre verwendung in arzneimittelzubereitungen
US5449682A (en) 1990-02-13 1995-09-12 Merck & Co., Inc. Angiotensin II antagonists incorporating a substituted benzyl element
US5182299A (en) 1990-03-19 1993-01-26 Brigham And Women's Hospital Treatment of osmotic disturbance with organic osmolytes
AU654979B2 (en) 1990-10-05 1994-12-01 University Of North Carolina At Chapel Hill, The Method of administering amiloride
US5614216A (en) 1990-10-17 1997-03-25 The Liposome Company, Inc. Synthetic lung surfactant
EP0517573A1 (fr) 1991-06-05 1992-12-09 Synthelabo Compositions pharmaceutiques pour le traitement des affections des voies respiratoires
US5292498A (en) 1991-06-19 1994-03-08 The University Of North Carolina At Chapel Hill Method of treating lung disease with uridine triphosphates
ES2141108T3 (es) 1991-07-02 2000-03-16 Inhale Inc Metodo y dispositivo para proporcionar medicamentos en aerosol.
US7105152B1 (en) 1991-12-18 2006-09-12 3M Innovative Properties Company Suspension aerosol formulations
ATE204743T1 (de) 1991-12-18 2001-09-15 Minnesota Mining & Mfg Aerosolzusammensetzungen für arzneimittelsuspensionen
US5261538A (en) 1992-04-21 1993-11-16 Glaxo Inc. Aerosol testing method
US5312820A (en) 1992-07-17 1994-05-17 Merck & Co., Inc. Substituted carbamoyl and oxycarbonyl derivatives of biphenylmethylamines
DE4236237A1 (de) 1992-10-27 1994-04-28 Behringwerke Ag Prodrugs, ihre Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
EP0612723B1 (de) 1993-02-20 1997-08-27 Hoechst Aktiengesellschaft Substituierte Benzoylguanidine, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung als Medikament, als Inhibitoren des zellulären Na+/H+-Austauschs oder als Diagnostikum sowie sie enthaltendes Medikament
US5384128A (en) 1993-03-02 1995-01-24 University Of Alabama Research Foundation Method of and compounds for treatment for cystic fibrosis
US5512269A (en) 1993-06-09 1996-04-30 Burroughs Wellcome, Co. Method of treating retained pulmonary secretions
US6051576A (en) 1994-01-28 2000-04-18 University Of Kentucky Research Foundation Means to achieve sustained release of synergistic drugs by conjugation
AUPM411494A0 (en) 1994-02-25 1994-03-24 Central Sydney Area Health Service Method and device for the provocation of upper or lower airway narrowing and/or the induction of sputum
US6190691B1 (en) 1994-04-12 2001-02-20 Adolor Corporation Methods for treating inflammatory conditions
US5962477A (en) 1994-04-12 1999-10-05 Adolor Corporation Screening methods for cytokine inhibitors
US5538991A (en) 1994-09-14 1996-07-23 Merck & Co., Inc. Endothelin antagonists bearing 5-membered heterocyclic amides
US5522385A (en) 1994-09-27 1996-06-04 Aradigm Corporation Dynamic particle size control for aerosolized drug delivery
US5618557A (en) 1994-11-22 1997-04-08 E.R. Squibb & Sons, Inc. Prophylactic treatment of allergic contact dermatitis
US5622163A (en) 1994-11-29 1997-04-22 Iep Group, Inc. Counter for fluid dispensers
US5544647A (en) 1994-11-29 1996-08-13 Iep Group, Inc. Metered dose inhalator
US5656256A (en) 1994-12-14 1997-08-12 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods of treating lung disease by an aerosol containing benzamil or phenamil
NZ305787A (en) 1995-04-14 1999-07-29 Glaxo Wellcome Inc Metered dose inhaler for fluticasone propionate
US5908611A (en) 1995-05-05 1999-06-01 The Scripps Research Institute Treatment of viscous mucous-associated diseases
US5994336A (en) 1995-06-07 1999-11-30 Magainin Pharmaceuticals Inc. Method of inhibiting proliferation of cells by administering an aminosterol compound
US5635160A (en) 1995-06-07 1997-06-03 The University Of North Carolina At Chapel Hill Dinucleotides useful for the treatment of cystic fibrosis and for hydrating mucus secretions
US5628984A (en) 1995-07-31 1997-05-13 University Of North Carolina At Chapel Hill Method of detecting lung disease
US5855918A (en) 1995-09-12 1999-01-05 Genentech, Inc. Cystic fibrosis therapy
US6399585B1 (en) 1996-05-15 2002-06-04 Janet E. Larson In Utero treatment of CFTR-related deficiencies
US6015828A (en) 1996-05-31 2000-01-18 Cuppoletti; John Chemical modification of chloride channels as a treatment for cystic fibrosis and other diseases
US6071910A (en) 1996-12-05 2000-06-06 Mayo Foundation For Medical Education And Research Use of agents to treat eosinophil-associated pathologies
ES2264197T3 (es) 1997-02-06 2006-12-16 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Dinucleotidos y sus usos.
US7223744B2 (en) 1997-02-10 2007-05-29 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical formulation comprising dinucleoside polyphosphates and salts thereof
US6818629B2 (en) 1997-02-10 2004-11-16 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical formulation comprising P1-(2'-deoxycytidine 5'-)P4-(uridine 5'-) tetraphosphate
US20010031244A1 (en) 1997-06-13 2001-10-18 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Pharmaceutical aerosol composition
ATE288273T1 (de) 1997-08-29 2005-02-15 Univ North Carolina Verwendung von uridin-5'-diphosphat und analoge zur behandlung von lungenerkrankungen
US6153187A (en) 1997-09-02 2000-11-28 Insight Strategy & Marketing Ltd. Use of glycosaminoglycans degrading enzymes for management of airway associated diseases
US6159968A (en) 1998-01-15 2000-12-12 University Of Cincinnati Activation of chloride channels for correction of defective chloride transport
US6291514B1 (en) 1998-02-09 2001-09-18 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl amidines, methylamidines and guanidines, preparation thereof, and use thereof as protease inhibitors
GB9807232D0 (en) 1998-04-03 1998-06-03 Univ Cardiff Aerosol composition
JP4633927B2 (ja) 1998-05-22 2011-02-16 インスパイアー ファーマシューティカルズ，インコーポレイティド 治療用ジヌクレオチドおよび誘導体
US6294188B1 (en) 1998-07-09 2001-09-25 Aviana Biopharm Inc. Methods involving changing the constitutive and stimulated secretions of the local reproductive system of women
CA2338680C (en) 1998-08-04 2008-10-14 Jago Research Ag Medicinal aerosol formulations
US6136294C1 (en) 1998-09-22 2002-09-24 Aeropharm Technology Inc Amino acid stabilized medical aerosol formulation
US6458338B1 (en) 1998-09-22 2002-10-01 Aeropharm Technology Incorporated Amino acid stabilized medicinal aerosol formulations
WO2000023023A1 (en) 1998-10-20 2000-04-27 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods of hydrating mucosal surfaces
AU775575B2 (en) 1998-10-27 2004-08-05 Yale University Conductance of improperly folded proteins through the secretory pathway
US6926911B1 (en) 1998-12-22 2005-08-09 The University Of North Carolina At Chapel Hill Compounds and methods for the treatment of airway diseases and for the delivery of airway drugs
US6329034B1 (en) 1999-01-18 2001-12-11 Roger L. Pendry Label having tab member and methods for forming, applying and using the same
US6116234A (en) 1999-02-01 2000-09-12 Iep Pharmaceutical Devices Inc. Metered dose inhaler agitator
AU3612600A (en) 1999-02-26 2000-09-14 Inspire Pharmaceuticals, Inc. Method of promoting mucosal hydration with certain uridine, adenine and cytidine diphosphates and analogs thereof
AU777278B2 (en) 1999-06-05 2004-10-07 Innovata Biomed Limited Delivery system
GB2353222B (en) 1999-06-23 2001-09-19 Cambridge Consultants Inhalers
US20040195160A1 (en) 1999-07-12 2004-10-07 Marine Desalination Systems, L.L.C. Hydrate-based reduction of fluid inventories and concentration of aqueous and other water-containing products
PT1196396E (pt) 1999-07-19 2008-05-14 Univ North Carolina Compostos farmacologicamente activos com dois princípios activos covalentemente ligados (bloqueador dos canais do sódio/agonista do receptor p2y2) para o tratamento de superfícies mucosas
GB9920839D0 (en) 1999-09-04 1999-11-10 Innovata Biomed Ltd Inhaler
AU1068401A (en) 1999-10-12 2001-04-23 Shl Medical Ab Inhaler
AUPQ344799A0 (en) 1999-10-15 1999-11-11 University Of Sydney, The Treatment of respiratory diseases and infections
US6297226B1 (en) 1999-10-15 2001-10-02 Neotherapeutics, Inc. Synthesis and methods of use of 9-substituted guanine derivatives
JO2178B1 (en) 1999-10-19 2003-04-23 اف . هوفمان لاروش ايه جي Treatment of invasive diseases, using selected anti-PAR materials
DK1223915T3 (da) 1999-10-29 2006-03-06 Nektar Therapeutics Törpulverpræparater med forbedret dispersivitet
US6204270B1 (en) 1999-11-12 2001-03-20 Eyal S. Ron Ophthalmic and mucosal preparations
GB9928265D0 (en) 1999-12-01 2000-01-26 Innovata Biomed Ltd Inhaler
US6476048B1 (en) 1999-12-07 2002-11-05 Inotek Pharamaceuticals Corporation Substituted phenanthridinones and methods of use thereof
SE9904706D0 (sv) 1999-12-21 1999-12-21 Astra Ab An inhalation device
WO2001055390A1 (en) 2000-01-28 2001-08-02 Human Genome Sciences, Inc. Human serpin polynucleotides, polypeptides, and antibodies
US7345051B2 (en) 2000-01-31 2008-03-18 Genaera Corporation Mucin synthesis inhibitors
US7171965B2 (en) 2000-02-01 2007-02-06 Valois S.A.S. Breath actuated dry powder inhaler and tape dose strip
US20040199456A1 (en) 2000-08-01 2004-10-07 Andrew Flint Method and apparatus for explaining credit scores
FR2813593B1 (fr) 2000-09-07 2002-12-06 Valois Sa Dispositif de distribution de produit fluide de type multidose
GB0026647D0 (en) 2000-10-31 2000-12-13 Glaxo Group Ltd Medicament dispenser
KR100831909B1 (ko) 2000-11-20 2008-05-26 바이오비트럼 에이비(피유비엘) 세로토닌 5-ｈｔ2 수용체의 안타고니스트로서의피페라지닐피라진 화합물
DE10101440B4 (de) 2001-01-15 2017-10-26 REMS-WERK Christian Föll und Söhne GmbH & Co. Preßzange
GB2377532B (en) 2001-07-11 2005-06-29 Sendo Int Ltd Communications devices operable to electronically process text data for representing characters of a text message, and methods for operating such devices
US20030135716A1 (en) 2002-01-14 2003-07-17 Gil Vinitzky Method of creating a high performance virtual multiprocessor by adding a new dimension to a processor's pipeline
US6858615B2 (en) 2002-02-19 2005-02-22 Parion Sciences, Inc. Phenyl guanidine sodium channel blockers
US6858614B2 (en) 2002-02-19 2005-02-22 Parion Sciences, Inc. Phenolic guanidine sodium channel blockers
US6889690B2 (en) 2002-05-10 2005-05-10 Oriel Therapeutics, Inc. Dry powder inhalers, related blister devices, and associated methods of dispensing dry powder substances and fabricating blister packages
ATE548354T1 (de) 2002-07-24 2012-03-15 Ptc Therapeutics Inc Ureido-substituierte benzoesäureverbindungen und ihre verwendung für die nonsense-suppression und behandlung von erkrankungen
US20050227974A9 (en) 2002-08-01 2005-10-13 Euro-Celtique S.A. Aminoalkyl-substituted aryl compounds and their use as sodium channel blockers
US6903105B2 (en) 2003-02-19 2005-06-07 Parion Sciences, Inc. Sodium channel blockers
ES2770035T3 (es) 2003-04-11 2020-06-30 Ptc Therapeutics Inc Compuesto de ácido 1,2,4-oxadiazol benzoico y su uso para la supresión sin sentido y el tratamiento de enfermedades
EP1488819A1 (en) 2003-06-16 2004-12-22 Rijksuniversiteit te Groningen Dry powder inhaler and method for pulmonary inhalation of dry powder
US7064129B2 (en) 2003-08-18 2006-06-20 Parion Sciences, Inc. Capped pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
EP1670474A4 (en) 2003-08-18 2008-08-06 Parion Sciences Inc BLOCKERS OF THE PYRAZINOYL-GUANIDINE SODIUM CHANNEL
US20050090505A1 (en) 2003-08-18 2005-04-28 Johnson Michael R. Methods of reducing risk of infection from pathogens
EP1670475A4 (en) 2003-08-18 2009-04-15 Parion Sciences Inc ALAPHATIC PYRAZINOYLGUANIDINE SODIUM CHANNEL BLOCKERS
US7745442B2 (en) 2003-08-20 2010-06-29 Parion Sciences, Inc. Methods of reducing risk of infection from pathogens
US20090253714A1 (en) 2003-08-20 2009-10-08 Johnson Michael R Methods of reducing risk of infection from pathogens
DE10339710A1 (de) 2003-08-22 2005-03-17 Siemens Ag Verfahren zur Zulassungsanfrage zu einem Datenzugriff auf Nutzungs- und Zustandsdaten von Mobilfunkteilnehmern in einem Mobilfunknetz
US7499570B2 (en) 2004-03-02 2009-03-03 Siemens Corporate Research, Inc. Illumination invariant change detection
US6887597B1 (en) 2004-05-03 2005-05-03 Prestone Products Corporation Methods and composition for cleaning and passivating fuel cell systems
US8354427B2 (en) 2004-06-24 2013-01-15 Vertex Pharmaceutical Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
US7375102B2 (en) 2004-06-28 2008-05-20 Amgen Sf, Llc Tetrahydroquinazolin-4(3H)-one-related and tetrahydropyrido[2,3-D]pyrimidin-4(3H)-one-related compounds, compositions and methods for their use
WO2006023573A2 (en) 2004-08-18 2006-03-02 Johnson Michael R Aliphatic amide & ester pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
WO2006023617A2 (en) 2004-08-18 2006-03-02 Johnson Michael R Cyclic amide & ester pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
US7399766B2 (en) 2004-08-18 2008-07-15 Parion Sciences, Inc. Soluble amide & ester pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
US20090324724A1 (en) 2004-08-18 2009-12-31 Parion Sciences, Inc. Soluble amide & ester pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
JP2008515992A (ja) 2004-10-13 2008-05-15 ピーティーシー セラピューティクス，インコーポレーテッド 体細胞変異に起因する疾患の阻止／治療用医薬を製造するための規定化合物の使用
JP2009221164A (ja) 2008-03-17 2009-10-01 Nitto Denko Corp 肺線維症処置剤
ATE551421T1 (de) 2005-01-07 2012-04-15 Alnylam Pharmaceuticals Inc Rnai modulation von rsv und deren therapeutische verwendungen
JP4964469B2 (ja) 2005-01-14 2012-06-27 ガジック・テクニカル・エンタープライゼス 磁気ヘッド及びディスクをテストするための真空チャック・スピンスタンド
US20070021439A1 (en) 2005-07-25 2007-01-25 Parion Sciences, Inc. Methods of reducing risk of infection from pathogens with soluble amide and ester pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
US7807834B2 (en) 2005-08-03 2010-10-05 Parion Sciences, Inc. Capped pyrazinoylguanidine sodium channel blockers
US20090306009A1 (en) 2005-12-06 2009-12-10 P2-Science Aps Modulation of the P2Y2 Receptor Pathway
GB0526240D0 (en) 2005-12-22 2006-02-01 Novartis Ag Organic compounds
GB0526244D0 (en) 2005-12-22 2006-02-01 Novartis Ag Organic compounds
EP1974212A1 (en) 2005-12-27 2008-10-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful in cftr assays and methods therewith
EP1981483A1 (en) 2006-01-24 2008-10-22 Nexbio, Inc. Technology for preparation of macromolecular microspheres
US7645789B2 (en) 2006-04-07 2010-01-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Indole derivatives as CFTR modulators
AU2007249269A1 (en) 2006-05-12 2007-11-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions of N-[2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-5-hydroxyphenyl)-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide
CA2653773A1 (en) 2006-06-09 2007-12-21 Parion Sciences, Inc. Cyclic substituted pyrazinoylguanidine sodium channel blockers possessing beta agonist activity
CA2653757A1 (en) 2006-06-09 2007-12-21 Parion Sciences, Inc. Aliphatic pyrazinoylguanidine sodium channel blockers with beta agonist activity
JP5254961B2 (ja) * 2006-06-09 2013-08-07 パリオン・サイエンシィズ・インコーポレーテッド ベータアゴニスト活性を有するフェニル置換ピラジノイルグアニジンナトリウムチャネル遮断薬
US7981898B2 (en) 2006-09-07 2011-07-19 Parion Sciences, Inc. Methods of enhancing mucosal hydration and mucosal clearance by treatment with sodium channel blockers and osmolytes
BRPI0716884A2 (pt) 2006-09-07 2013-10-15 Parion Sciences Inc Método de intensificação de hidratação mucosal e clearance mucosal através de tratamento com bloqueadores do canal de sódio e osmolitos
CN101534813A (zh) * 2006-09-07 2009-09-16 帕里昂科学公司 通过使用钠通道阻断剂和渗透调节剂的治疗来增加粘膜水化和粘液清除的方法
US8563573B2 (en) 2007-11-02 2013-10-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Azaindole derivatives as CFTR modulators
US7754739B2 (en) 2007-05-09 2010-07-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of CFTR
US8288391B2 (en) 2007-04-03 2012-10-16 Parion Sciences, Inc. Pyrazinoylguanidine compounds for use as taste modulators
US20080293740A1 (en) 2007-04-03 2008-11-27 Parion Sciences, Inc. Method of treating acid-sensing ion channel mediated pain, cough suppression, and central nervous system disorders
WO2008132723A2 (en) 2007-04-26 2008-11-06 Quark Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic delivery of inhibitory nucleic acid molecules to the respiratory system
DE602008005140D1 (de) 2007-05-07 2011-04-07 Novartis Ag Organische verbindungen
EP1997502A1 (en) 2007-06-01 2008-12-03 CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. Reconstituted surfactants having improved properties
RU2010102865A (ru) 2007-07-24 2011-08-27 НексБио, Инк. (US) Технология изготовления микрочастиц
EP2211956A4 (en) 2007-10-10 2014-07-09 Parion Sciences Inc DISPOSAL OF OSMOLYTES WITH A NOSE CANNULA
EP2217249A4 (en) 2007-11-06 2011-10-12 Benaroya Res Inst INHIBITION OF VERSICAN WITH SIRNA AND OTHER MOLECULES
AR069637A1 (es) 2007-12-10 2010-02-10 Novartis Ag Derivados de pirazinas
WO2009139948A1 (en) 2008-02-26 2009-11-19 Johnson Michael R Poly aromatic sodium channel blockers
NZ703814A (en) 2008-02-28 2016-06-24 Vertex Pharma Heteroaryl derivatives as cftr modulators
US8261047B2 (en) 2008-03-17 2012-09-04 Freescale Semiconductor, Inc. Qualification of conditional debug instructions based on address
EP2271621B1 (en) 2008-03-31 2013-11-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyridyl derivatives as cftr modulators
CA2723938A1 (en) 2008-05-13 2009-11-19 Novartis Ag 3,5-diamino-6-chloro-pyrazine-2-carboxylic acid derivatives and their use as epithelial sodium channel blockers for the treatment of airway diseases
WO2009150137A2 (en) 2008-06-10 2009-12-17 Novartis Ag Organic compounds
US20100074881A1 (en) 2008-07-11 2010-03-25 Parion Sciences, Inc. Multiple nebulizer systems
ES2406361T3 (es) 2008-10-23 2013-06-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Formas sólidas de la N-(4-(7-azabiciclo[2.2.1]heptan-7-il)-2-(trifluorometil)fenil)-4-oxo-5-(trifluorometil)-1,4-dihidroquinolin-3-carboxamida
US20100316628A1 (en) 2008-12-09 2010-12-16 The General Hospital Corporation Agents and methods for treating respiratory disorders
US8367660B2 (en) 2008-12-30 2013-02-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
US8247436B2 (en) 2010-03-19 2012-08-21 Novartis Ag Pyridine and pyrazine derivative for the treatment of CF
WO2011156355A1 (en) 2010-06-09 2011-12-15 Kainos Medicine, Inc. Production method of phenyl guanidine salts and their intermediates
KR20120017648A (ko) 2010-08-19 2012-02-29 삼성전자주식회사 디스플레이장치와, 디스플레이 패널의 구동방법
AR086745A1 (es) 2011-06-27 2014-01-22 Parion Sciences Inc 3,5-diamino-6-cloro-n-(n-(4-(4-(2-(hexil(2,3,4,5,6-pentahidroxihexil)amino)etoxi)fenil)butil)carbamimidoil)pirazina-2-carboxamida
HRP20171044T1 (hr) 2011-06-27 2017-10-06 Parion Sciences, Inc. Kemijski i metabolički stabilni dipeptid s potentnom aktivnošću blokatora natrijevog kanala
BR112014029329A2 (pt) 2012-05-29 2017-06-27 Parion Sciences Inc aminoamidas semelhantes ao dendrímero possuindo atividade bloqueadora de canal de sódio para o tratamento de olho seco e outras doenças mucosais
WO2014036445A2 (en) 2012-08-31 2014-03-06 Johnson Michael R Novel mucolytic agents
CA2891358C (en) 2012-11-15 2021-05-18 Bayer Pharma Aktiengesellschaft 5-fluoro-n-(pyridin-2-yl)pyridin-2-amine derivatives containing a sulfoximine group
EP2931712B8 (en) 2012-12-17 2018-05-23 Parion Sciences, Inc. 3,5-diamino-6-chloro-n-(n-(4-phenylbutyl)carbamimidoyl) pyrazine-2- carboxamide compounds
HUE032891T2 (hu) 2012-12-17 2017-11-28 Parion Sciences Inc Klórpirazin-karboxamid-származékok nem kielégítõ nyálkahártya-hidratáció által elõsegített megbetegedések kezelésére
WO2015026601A2 (en) 2013-08-23 2015-02-26 Johnson Michael R Dithiol mucolytic agents
US9102633B2 (en) 2013-12-13 2015-08-11 Parion Sciences, Inc. Arylalkyl- and aryloxyalkyl-substituted epithelial sodium channel blocking compounds
US20150376145A1 (en) 2014-06-30 2015-12-31 Parion Sciences, Inc. Stable sodium channel blockers

Also Published As

Publication number Publication date
GEP20186903B (en) 2018-10-25
US20170327472A1 (en) 2017-11-16
LT2931713T (lt) 2017-02-10
US20140171447A1 (en) 2014-06-19
DK2931713T3 (en) 2017-01-30
SI2931713T1 (sl) 2017-03-31
CA2895512C (en) 2021-10-19
GEAP201813881A (en) 2018-06-25
EP3150585A1 (en) 2017-04-05
HRP20170060T1 (hr) 2017-03-10
AU2018204305B2 (en) 2019-12-19
RU2015129065A (ru) 2017-01-25
SA515360611B1 (ar) 2017-12-24
UA120343C2 (uk) 2019-11-25
KR102258469B1 (ko) 2021-05-31
MX379300B (es) 2025-03-11
EP2931713B1 (en) 2016-10-19
JP2016503028A (ja) 2016-02-01
KR20150095871A (ko) 2015-08-21
AU2013363218A1 (en) 2015-07-02
ECSP15025947A (es) 2016-01-29
HUE032891T2 (hu) 2017-11-28
PT2931713T (pt) 2017-02-22
US20190084943A1 (en) 2019-03-21
CY1118678T1 (el) 2017-07-12
AP2015008556A0 (en) 2015-06-30
US10071970B2 (en) 2018-09-11
ES2619954T3 (es) 2017-06-27
US9593084B2 (en) 2017-03-14
CN105073717B (zh) 2018-05-22
CA2895512A1 (en) 2014-06-26
MX2015007796A (es) 2015-09-04
SMT201700107B (it) 2017-03-08
BR112015014349A2 (pt) 2017-07-11
JP6392242B2 (ja) 2018-09-19
PH12015501363A1 (en) 2016-02-01
PE20151054A1 (es) 2015-08-07
HK1215702A1 (en) 2016-09-09
PL2931713T3 (pl) 2017-06-30
PH12015501363B1 (en) 2016-02-01
AU2013363218B2 (en) 2018-03-15
JP2018199697A (ja) 2018-12-20
SMT201700107T1 (it) 2017-03-08
WO2014099676A1 (en) 2014-06-26
SG10201708931XA (en) 2017-12-28
CL2015001696A1 (es) 2015-10-02
CN108484513A (zh) 2018-09-04
ZA201504559B (en) 2019-10-30
CN105073717A (zh) 2015-11-18
EP2931713A1 (en) 2015-10-21
IL239452A0 (en) 2015-07-30
IL239452B (en) 2018-01-31
SG11201504799QA (en) 2015-07-30
AU2018204305A1 (en) 2018-07-05
IL256004A (en) 2018-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2018204305B2 (en) Chloro-pyrazine carboxamide derivatives useful for the treatment of diseases favoured by insufficient mucosal hydration
US10246425B2 (en) 3,5-diamino-6-chloro-N-(N-(4-phenylbutyl)carbamimidoyl) pyrazine-2-carboxamide compounds
US10233158B2 (en) Arylalkyl- and aryloxyalkyl-substituted epithelial sodium channel blocking compounds
EP3323812B1 (en) Arylalkyl-and aryloxyalkyl-substituted epithelial sodium channel blocking compounds
HK40003066A (en) 3,5-diamino-6-chloro-n-(n-(4-phenylbutyl)carbamimidoyl) pyrazine-2- carboxamide compounds
HK1236513A (en) Chloro-pyrazine carboxamide derivatives with epithelial sodium channel blocking activity
HK1236513A1 (en) Chloro-pyrazine carboxamide derivatives with epithelial sodium channel blocking activity
HK1215702B (en) Chloro-pyrazine carboxamide derivatives useful for the treatment of diseases favoured by insufficient mucosal hydration
OA17335A (en) Chloro-pyrazine carboxamide derivatives useful for the treatment of diseases favoured by insufficient mucosal hydration.
HK1215703B (en) 3,5-diamino-6-chloro-n-(n-(4-phenylbutyl)carbamimidoyl) pyrazine-2- carboxamide compounds