[go: up one dir, main page]

PL201801B1 - Zastosowanie bakteryjnego szczepu CNCM I-1518 do wytwarzania kompozycji przeznaczonej do podawania doustnego - Google Patents

Zastosowanie bakteryjnego szczepu CNCM I-1518 do wytwarzania kompozycji przeznaczonej do podawania doustnego

Info

Publication number
PL201801B1
PL201801B1 PL358408A PL35840801A PL201801B1 PL 201801 B1 PL201801 B1 PL 201801B1 PL 358408 A PL358408 A PL 358408A PL 35840801 A PL35840801 A PL 35840801A PL 201801 B1 PL201801 B1 PL 201801B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
day
actimel
group
placebo
cells
Prior art date
Application number
PL358408A
Other languages
English (en)
Other versions
PL358408A1 (pl
Inventor
Eric Postaire
Benjamin Bonavida
Original Assignee
Gervais Danone Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=8850597&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL201801(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Gervais Danone Sa filed Critical Gervais Danone Sa
Publication of PL358408A1 publication Critical patent/PL358408A1/pl
Publication of PL201801B1 publication Critical patent/PL201801B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/125—Casei
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus
    • C12R2001/245—Lactobacillus casei

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Wynalazek dotyczy zastosowania bakteryjnego szczepu bakterii kwasu mlekowego CNCM I-1518 gatunku L. Ceasei do wytwarzania kompozycji przeznaczonej do podawania doustnego, zwi ek- szaj acej swoist a ogólnoustrojow a odpornosc na wirus grypy. W szczególno sci kompozycja ta mo ze mie c posta c artyku lu spo zywczego lub dodatku do zywno sci. Korzystniej, mo ze ona mie c posta c sfer- mentowanego produktu mlecznego. PL PL PL PL

Description

Opis wynalazku
Wynalazek dotyczy zastosowania bakteryjnego szczepu bakterii kwasu mlekowego CNCM I-1518 gatunku L. Ceasei do wytwarzania kompozycji przeznaczonej do podawania doustnego, zwiększającej swoistą ogólnoustrojową odporność na wirus grypy.
Bakterie kwasu mlekowego (LAB) tradycyjnie są wykorzystywane do wytwarzania sfermentowanych produktów spożywczych, w szczególności przetworów mlecznych.
Wpływ bakterii kwasu mlekowego na zdrowie, początkowo sugerowany był w badaniach Metchnikoffa (The prolongation of life. Wydanie pierwsze, New York: GP Putman's Sons, 1908), i od tego momentu był przedmiotem wielu badań.
Obecnie ogólnie uznano, że różne bakterie kwasu mlekowego mogą odgrywać rolę korzystną dla zdrowia. Bakterie te nazywane są również „probiotykami”, a nazwa ta oznacza żywe drobnoustroje, które - jeśli są spożyte w wystarczającej ilości - wywierają dodatni wpływ na zdrowie, ponad konwencjonalne skutki odżywcze. Bakterie probiotyczne opisano w szczególności pośród gatunków należących do rodzajów Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus i Lactococcus, zwykle stosowanych w przemyś le mleczarskim.
Sądzi się, że probiotyki działają zwłaszcza na poziomie flory jelitowej, przez hamowanie rozwoju drobnoustrojów chorobotwórczych i/lub przez działanie bardziej bezpośrednie na układ odpornościowy. Zaobserwowano na przykład, że spożycie bakterii probiotycznych lub sfermentowanej żywności, takiej jak jogurt, zawierającej te bakterie prowadzi do zmniejszenia ilości bakterii chorobotwórczych. W kategoriach układu odpornościowego doniesiono o różnorodnych efektach: aktywacji komórek biorących udział w swoistej lub nieswoistej reakcji odpornościowej, takich jak limfocyty i makrofagi, wzrostu poziomu immunoglobulin, w szczególności IgA; wzrostu poziomu cytokin aktywujących układ odpornościowy, itd. (porównaj publikację przeglądową, na przykład Meydani i Ha, Am. J. Clin. Nutr.,71, 861-7217, 2000).
Ogólnie, badania przeprowadzone na różnych probiotycznych bakteriach kwasu mlekowego skłaniają do wniosku, że pewne gatunki, albo przynajmniej pewne szczepy tych gatunków, mają właściwości immunostymulacyjne. Z drugiej strony, pozostaje niepewny mechanizm (mechanizmy) leżący u podstaw tych wł a ś ciwoś ci i skł adniki ukł adu odpornościowego potencjalnie biorące w tym udział . Z tego powodu wydaje się konieczne wyjaśnienie tych aspektów, zwłaszcza w celu zaproponowania lepszego ukierunkowania zastosowań różnych gatunków lub szczepów bakterii probiotycznych.
Kilka badań przeprowadzonych na ludziach i zwierzętach sugeruje, że bakterie gatunku L. casei mają dobroczynny wpływ na zdrowie, zwłaszcza pozytywnie wpływają na układ odpornościowy.
Na przykładzie myszy wykazano, że spożywanie sfermentowanego mleka zawierającego szczep DN-114 001 L. casei zwiększa odporność na infekcję Salmonella typhimurium [PAUBERTBRAQUET i inni, Int. J. Immunother, 4:153, (1995)]. Jednocześnie obserwowano aktywację makrofagów i zwiększenie krążenia IgAs.
Szczep DN-114 001 złożono do depozytu 30 grudnia 1994, z CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes) [Narodowa Kolekcja Hodowli Drobnoustrojów] przechowywaną przez Instytut Pasteura, 25 rue du Docteur Roux, w Paryżu, pod numerem I-1518. Szczep ten i jego specjalne mieszaniny z zaczynem jogurtu, stosowane do wytwarzania sfermentowanych produktów mlecznych, opisano w publikacji zgłoszenia PCT WO 96/20607 należącego do COMPAGNIE GERVAIS DANONE.
W przeprowadzonych ostatnio badaniach na ludziach również stwierdzono, że spożywanie sfermentowanego mleka zawierającego szczep DN-114 001 L. casei wywołuje wzmocnienie odporności na Salmonella typhimurium. Efekt ten przypisano oddziaływaniu na odporność nieswoistą wrodzoną [YOON i inni, Int. J. Immunother, 15, 79-89 (1999)].
Autorzy wynalazku badali czy L. casei działa również na odporność adaptywną, rezultatem której jest, w przeciwieństwie do odporności wrodzonej, swoista reakcja odpornościowa w stosunku do określonego czynnika chorobotwórczego.
W tym celu autorzy wynalazku zbadali wpływ L. casei, podawanego doustnie in vivo, na stymulację ex vivo proliferacji komórek T, w odpowiedzi na antygeny reprezentujące różne rodzaje pospolitych środków chorobotwórczych: antygen bakteryjny (tężec); antygen pochodzenia grzybowego (drożdżaki) i antygen wirusowy (grypa).
Zauważyli oni, że dla każdego testowanego antygenu, spożywanie L. casei prowadzi do zwiększenia zdolności do proliferacji komórek T, zwłaszcza podpopulacji CD3+, w odpowiedzi na aktywację tym antygenem. Efekt ten manifestuje się w szczególności w przypadku antygenów grypy.
PL 201 801 B1
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie bakteryjnego szczepu CNCM I-1518 gatunku L. casei do wytwarzania kompozycji przeznaczonych do podawania doustnego, dla wzmocnienia swoistej ogólnoustrojowej reakcji immunologicznej skierowanej przeciwko drobnoustrojowi chorobotwórczemu, takiemu jak wirus grypy. Drobnoustrój ten jest czynnikiem chorobotwórczym rozsiewanym w powietrzu, zwłaszcza czynnikiem chorobotwórczym dróg oddechowych. Odnośnymi czynnikami chorobotwórczymi są w szczególności bakterie lub wirusy. Wśród tych ostatnich można wymienić wirusy nieżytu nosa, wirus oddechowy (RSV) i miksowirusy (ortomiksowirusy, takie jak wirusy grypy (grypy A, B lub C), albo paramiksowirusy, w szczególności grypy rzekomej).
To wzmocnienie reakcji immunologicznej jest skutkiem zwiększenia zdolności do proliferacji komórek T, specyficznych dla antygenów tego drobnoustroju chorobotwórczego.
W kontekście realizacji wynalazku, szczepy L. casei mogą być stosowane oddzielnie lub w połączeniu z innymi bakteriami kwasu mlekowego gatunku L. casei lub innych gatunków. Mogą być stosowane w połączeniu z zaczynami jogurtu, a mianowicie Lactobacillus bulgaricus i Streptococcus thermophilus.
Szczepy te mogą być stosowane w postaci całych bakterii, które mogą być żywe lub nieżywe, albo w postaci bakteryjnego lizatu lub w postaci fragmentów bakterii.
Wytwarzane kompozycje mogą zawierać, co najmniej 105, na ogół pomiędzy 1x108 i 1,5x109 komórek L. casei na ml.
Jeśli L. casei jest stosowana z zaczynami jogurtów, kompozycje te mogą zawierać co najmniej 107, na ogół pomiędzy 2x108 i 1x109 komórek S. thermophilus na ml oraz co najmniej 5x105 na ogół pomiędzy 4x106 i 2x107 komórek L. bulgaricus na ml.
Korzystnie, kompozycje wytworzone zgodnie z wynalazkiem mogą być podawane w postaci artykułu spożywczego lub dodatku do żywności.
Korzystniej, są to na przykład produkty mleczne, w szczególności sfermentowane produkty mleczne. Mogą one zawierać, co najmniej szczep L. casei, ewentualnie w połączeniu z innymi bakteriami kwasu mlekowego, na przykład z zaczynami jogurtów.
Kompozycje te mogą być stosowane do zapobiegania i leczenia stanów chorobowych o podłożu infekcyjnym, w szczególności pochodzenia wirusowego, zwłaszcza grypy. W celu uzyskania optymalnych efektów, mogą być podawane, przez co najmniej tydzień, zazwyczaj, przez co najmniej 10 dni, w ilości odpowiadającej wchłanianiu, co najmniej 107, na ogół pomiędzy 109 i 1012 komórek L. Casei.
Wynalazek jest łatwiejszy do zrozumienia na podstawie dalszej części opisu, która odnosi się do przykładów ilustrujących zdolność szczepu Lactobacillus casei do wzmacniania swoistej reakcji na antygeny drobnoustrojowe.
P r z y k ł a d 1: Wpływ Lactobacillus casei na proliferację komórek T, w reakcji na stymulację antygenową.
W celu sprawdzenia wpł ywu spoż ywania sfermentowanego produktu mlecznego zawierają cego szczep Lactobacillus casei DN-114 001 (CNCM I-1518) na proliferację komórek T, w reakcji na stymulację antygenową, przeprowadzono podwójne badania „na ślepo”, w porównaniu z placebo.
Warunki badań były następujące:
Osobnicy poddani badaniom zdrowych osobników w wieku 18 do 50 lat zwerbowano z Oddziału Chorób Zakaźnych Washington Hospital Center (WHC)(Washington DC). Z badań wykluczono osobników z zapaleniem wątroby lub problemami nerkowymi, zaburzeniami układu krążenia, chorobami immunologicznymi i żołądkowo-jelitowymi, zaawansowaną astmą lub cukrzycą, osobników poddawanych leczeniu antybiotykami lub środkami immunosupresyjnymi w czasie krótszym niż 3 miesiące przed rozpoczęciem badań, osobników w przeszłości nadużywających alkoholu lub uzależnionych, osobników o znanym nietolerowaniu produktów mlecznych lub nadwrażliwości na te produkty, osobników na diecie niskokalorycznej, osobników zaszczepionych w poprzednim sezonie przeciwko grypie, jak również kobiety w ciąży i karmią ce piersią .
Sposób postępowania i warunki badań uzyskały zgodę Komitetu Badań WHC, jak również Instytutowej Komisji Kontrolnej (Institutional Review Board), kontrolującej badania prowadzone na ludziach.
Wybranych osobników podzielono losowo na 2 grupy:
- grupa 47 osobników (26 kobiet i 21 mężczyzn) otrzymywała 100 ml dziennie sfermentowanego produktu mlecznego o zawartości 2% tłuszczu, zawierającego zaczyny jogurtowe (L. bulgaricus i S. thermophilus) oraz szczep DN-114 001 Lactobacillus casei, rozprowadzanego na rynku przez firmę DANONE pod nazwą handlową ACTIMEL.
PL 201 801 B1
- grupa 41 osobników (22 kobiety i 19 mężczyzn) otrzymywał a placebo przez 28 dni: 100 ml na dzień mleka rozcieńczonego wodą (1/5, v/v) z dodatkiem cukru, dla uzyskania wartości kalorycznej równoważnej kaloryczności ACTIMEL.
Podczas trwania badań osobnicy obu grup byli proszeni o powstrzymanie się od spożywania jogurtu lub innych sfermentowanych produktów mlecznych.
Średnia wieku osobników (odchylenie standardowe podano w nawiasach) wynosiła 36 (7,3) i 32,7 (7,4), odpowiednio dla grupy spożywającej ACTIMEL i grupy spożywającej placebo.
Przed rozpoczęciem konsumpcji ACTIMEL-u lub placebo, od każdego osobnika obu grup pobrano próbkę krwi (55 ml), w celu oznaczenia wartości bazowych. W 9, 18 i 28 dniu badania każdy z osobników kontrolnie spotykał się z lekarzem i wypełniał krótki kwestionariusz dotyczący swojego zdrowia, możliwych działań ubocznych oraz rozwoju jakiejś choroby mogącej przeszkadzać interpretacji wyników. Podczas każdej wizyty pobierano próbkę krwi dla potrzeb eksperymentu immunologicznego.
Dla każdej próbki krwi przeprowadzono kompletne liczenie krwinek i analizę chemiczną krwi. Oprócz tego, metodą przepływowego liczenia komórek dokonano fenotypowej analizy leukocytów i ich podgrup (komórek T i ich podgrup, komórek B, monocytów i komórek NK).
Pomiary proliferacji komórek
Proliferacyjną reakcję komórek T u osobników z grupy spożywającej ACTIMEL i osobników spożywających placebo względem trzech drobnoustrojowych antygenów: drożdżaków, tężca i grypy oznaczono ex vivo przez pomiar inkorporacji 3HTdR, tak jak opisano to poniżej.
Preparowanie komórek:
ml heparynizowanej krwi z każdej pobranej próbki poddawano następującej obróbce: probówkę odwirowywano przez 10 minut, przy 1500 obr/min. Osocze krwi starannie przenoszono do oznaczonych krioprobówek i przechowywano je w 70°C [sic]. Krew przenoszono do 15 ml probówki wirówkowej i rozcieńczano ją PBS w stosunku 1:3. 10 ml fikolu (Ficoll-hypaque) dodawano do 50 ml probówki wirówkowej i pokrywano go 30 ml rozcieńczonej krwi. W temperaturze otoczenia probówkę odwirowywano przez 2 minuty przy 2000 obr/min. Odciągano górną warstwę PBS, zbierano komórki jednojądrowe i przenoszono je do 15 ml probówki wirówkowej. Dodawano 10 ml HBSS, wymieszano i odwirowywano przez 10 minut przy 1500 obr/min. Odcią gano supernatant i z pozostał ych grudek ponownie wytwarzano zawiesinę w 2-3 ml HBSS. Dodawano 8 ml HBSS i probówkę odwirowywano przez 6 minut przy 1500 obr/min. Taki sposób postępowania powtarzano dwukrotnie i z uzyskanych komórek ponownie wytwarzano zawiesinę w 1-2 ml PBS i intensywnie ją mieszano. Liczono komórki, badając ich żywotność metodą eliminacji błękitem trypanowym, a następnie korygowano ich stężenie do wartości 2 x 108/ml.
Preparowanie antygenów:
Antygen tężcowy: preparowanie przeprowadzano w dniu wykonywanie testu.
Roztwór wyjściowy wytwarzano przez rozcieńczanie toksoidu tężca (CONNAUGHT LABORATORY, Willowdale, Kanada) w PBS w stosunku 1:1000.
Antygeny Candida albicans: wyjściowy roztwór wytwarzano rozcieńczając antygeny Candida albicans (BAYER CO, Elkert, IN) w PBS w stosunku 1:1000.
Antygeny grypy: wyjściowy roztwór wytwarzano rozcieńczając antygeny preparatu wirusa grypy (NIBSC, Herts, Anglia) w PBS w stosunku 1:125.
Stosowano płytki do mikromiareczkowań (96 studzienkowe). W każdej studzience umieszczano 100 μΐ wyjściowego roztworu antygenów i 100 μl komórek o finalnym stężeniu 2 x 105 komórek na studzienkę. W kontrolnych studzienkach zamiast wyjściowego roztworu antygenów umieszczano 100 μl PBS. Płytki inkubowano przez 5 dni w 37°C, z 5% CO2. 18 godzin przed końcem inkubacji dodawano 20 μl 50 μθί/mi 3HTdR (NEW ENGLAND NUCLEAR, Boston, MA). Komórki ze studzienek każdej płytki zbierano na filtrach i filtry te liczono bezpośrednio w liczniku cząstek beta MATRIX 9600 (PACKARD INSTRUMENTS), w celu zmierzenia stopnia inkorporacji 3HTdR, wyrażonej w CPM (liczba impulsów na minutę).
Dla każdego osobnika z grupy otrzymującej ACTIMEL i dla każdego osobnika z grupy otrzymującej placebo, proliferację oceniano przez oznaczenie wskaźnika stymulacji (SI), zgodnie z poniższym wzorem:
średnie CPM komórek stymulowanych
SI = —————————————————————————————— średnie CPM komórek nie stymulowanych (studzienka kontrolna)
PL 201 801 B1
Analiza statystyczna
Dla podsumowania proliferacyjnej reakcji komórek T na działanie każdego antygenu stosowano statystykę opisową (średnia, odchylenie standardowe, mediana), dla każdej badanej grupy, w każdym momencie pomiaru. Ze względu na dystrybuantę obciążenia reakcji proliferacyjnej, dla danych dotyczących proliferacji stosowano transformację do logarytmów naturalnych.
Zmienność reakcji proliferacyjnej w porównaniu do wartości bazowej wykorzystywano do modelowania statystycznego [LITTELL i inni, SAS System for Mixed Model. North Carolina: SAS Institute Inc, (1996)]. Modyfikacje reakcji proliferacyjnej, w porównaniu do wartości bazowej w funkcji czasu, zaprezentowano stosując metodę wygładzania krzywej, tak jak opisali to DIGGLE i inni, [Analysis of Longitudinal Data. New York: University Press Inc, 1994].
Dla badania trajektorii reakcji proliferacyjnej opracowano mieszany model liniowy. Model ten umożliwia dostosowane danych proliferacyjnych do krzywej drugiego stopnia dla każdej grupy badanej.
Model ten zdefiniowano następującym równaniem:
Yjt = aij + pijT + e2jT2 + Sjt, i = j = 1,2, t = 1,2,3,4 w których:
Yijt = oznacza zmienność reakcji proliferacyjnej w porównaniu do wartości bazowej dla osobnika i, w iloczynie grupy j, w czasie t; transformację do logarytmów naturalnych zastosowano do każdej zmiennej, Yijt = log (proliferacja w czasie t) - log (wartość bazowa).
aj oznacza intercepcję dla osobnika i, w iloczynie grupy j. Odzwierciedla to model losowy, aj ~ MVN (0, G), G zawiera składniki wariancji w strukturze diagonalnej (MVN: multinormalny rozkład wariancji).
P1j i e2j są współczynnikami regresji T i T2 dla iloczynu grupy j;
T jest momentem pomiaru (dzień 0, 9, 18 lub 28), a T2 jest kwadratowym składnikiem T. ejjt jest współczynnikiem błędu:
ejjt ~ MVN (0, R) i R = σ2^, gdzie In oznacza macierz jednostkową n x n.
Przeprowadzono testy statystyczne dla następujących hipotez:
a) Test sprawdzający czy oszacowany współczynnik regresji wynosi 0.
H0: p1j = 0 vs. H1: p1j ϊ 0 (dla składnika liniowego) oraz H0: e2j = 0 vs. H1: e2j ϊ 0 (dla składnika kwadratowego)
Jeśli p1j i e2j nie są różne od 0, to nie ma trajektorii.
Jeśli e2j jest znacząco różne od 0, to jest trajektoria drugiego stopnia.
Jeśli tylko p1j jest znacząco różne od 0, to jest trajektoria liniowa.
b) Porównanie czy trajektorie dwóch grup są identyczne.
H0: p1j = e12.vs. H1: β11 ϊ β12 (dla składnika liniowego) i H0: β21 = β22 vs. H1: β21 ϊ β22 (dla składnika kwadratowego)
Dla przeprowadzenia analizy stosowano pakiet statystyczny SAS.
Wyniki
W poniższej tabeli 1 podano dane demograficzne dotyczące osobników i oszacowanie wartości bazowej dla proliferacji.
T a b e l a 1
Dane demograficzne i wartości Placebo ACTIMEL Porównanie placebo vs. ACTIMEL
bazowe
1 2 3 4 5
Płeć Kobiety 22 26 Test chi-kwadrat
Mężczyźni 19 21 p=0,826
Wiek Średnia (SD) 32,7 (7,4) 36,0 7,3 Test T
Mediana 31 37 p=0,038
Etniczność Biali 26 25 Test chi-kwadrat
Czarni 12 17 dokładna wartość
Inni 3 5 p=0,652
Leukocyty Średnia (SD) 5997 5810 TestT
(1451) (1399)
Mediana 5992 5990 P=0,540
PL 201 801 B1 cd. tabeli 1
1 2 3 4 5
Limfocyty Średnia (SD) 1932 (567) 2009 (554) TestT
Mediana 1812 1993 p=0,519
CD3+CD4+ Średnia (SD) 865(327) 907(325) Test T
Mediana 740 818 p=0,546
CD3+CD8+ Średnia (SD) 469 (205) 431 (181) TestT
Mediana 417 403 p=0,360
CD3+CD25+ Średnia (SD) 380 (200) 408 (182) TestT
Mediana 349 392 p=0,489
CD3+CD45+ Średnia (SD) 1384 (488) 1411 (434) TestT
Mediana 1354 1382 p=0,783
SD = odchylenie standardowe
Proliferacja komórek T w reakcji na swoiste antygeny drobnoustrojowe W poniż szej tabeli 2 zamieszczono ś rednie, odchylenia standardowe i mediany proliferacji ex vivo jednojądrowych krwinek krwi obwodowej (PBMCs), dla każdej grupy (ACTIMEL i placebo) w różnych czasach pobierania próbki.
T a b e l a 2
Antygen Placebo ACTIMEL
Dzień 0 Dzień 9 Dzień 18 Dzień 28 Dzień 0 Dzień 9 Dzień 18 Dzień 28
Droż-
dżaki
Średnia 2,3 2,7 2,9 1,9 3,0 3,2 4,3 2,3
SD 2,0 3,1 4,1 1,2 3,4 3,5 5,6 2,6
Mediana 1,5 1,7 1,6 1,6 1,7 1,7 2,0 1,4
Tężec Średnia 7,3 11,8 7,9 8,7 8,4 8,7 10,3 7,8
SD 7,8 12,3 8,0 8,1 15,8 10,4 11,8 8,2
Mediana 5,2 6,3 5.1 6,7 3,5 5,2 5,0 5,1
Grypa Średnia 14,2 21,7 17,0 17,3 13,0 19,7 20,3 13,9
SD 11,4 19,1 19,6 15,7 12,6 17,1 16,6 12,7
Mediana 11,1 16,5 9,8 12,0 9,6 16,9 17,0 11,0
SD = odchylenie standardowe
Nie ma znaczących różnic wartości bazowej (dzień 0) pomiędzy dwiema badanymi grupami dla reakcji proliferacyjnej, w stosunku do trzech antygenów drobnoustrojowych.
Fig. 1 ilustruje zmienność reakcji proliferacyjnej w czasie, dla każdego antygenu i dla dwóch badanych grup: grupa ACTIMEL: linia ciągła; grupa placebo: linia przerywana.
Wyniki modelowania statystycznego przedstawiono w poniższej tabeli 3.
PL 201 801 B1
T a b e l a 3
Antygen Zmienna Oszacowanie parametru Błąd standardowy Test H0 parametr=0 Porównanie 2 krzywych
Drożdżowce Placebo T 0,017 0,014 p = 0,232 H0: β11 = β12
T2 -0,0007 0,0005 p = 0,208 p = 0,540
ACTIMEL T 0,028 0,013 p = 0,030 H0: β21 = β22
T2 -0,0012 0,005 p = 0,013 p = 0,458
Tężec Placebo T 0,034 0,014 p = 0,022 H0: β11 = β12
T2 -0,0008 0,0005 p = 0,141 p = 0,630
ACTIMEL T 0,043 0,013 p = 0,001 H0: β21 = β22
T2 -0,0011 0,0005 p = 0,020 p = 0,626
Grypa Placebo T 0,022 0,017 p = 0,181 H0: β11 = β12
T2 -0,0004 0,0006 p = 0,475 p = 0,045
ACTIMEL T 0,068 0,015 p = 0,0001 H0: β21 = β22
T2 -0,0023 0,0006 p = 0,0001 p = 0,027
Drożdżowce (Candida):
W grupie ACTIMEL reakcja bazowa w dniu 0 wynoszą ca 3,0 ± 3,4 wzrosł a w dniu 9 do 3,2 ± 3,5 i w dniu 18 do 4,3 ± 5,6, następnie w dniu 28 spadła do 2,3 ± 2,6 (tabela 2).
2
Współczynniki oszacowane dla składnika liniowego T i składnika w drugiej potędze T2 wynosiły odpowiednio 0,028 i 0,0012 (tabela 3). Dwie wartości są statystycznie znacząco różne od 0 (odpowiednio p=0,030 i 0,013). Obserwacje te oznaczają, że istnieje znacząca pozytywna tendencja do zmiany reakcji proliferacyjnej w stosunku do antygenu drożdżowca. Reakcja proliferacyjna na początku rośnie, a następnie zmniejsza się, tak jak pokazano to na fig. 1a.
Grupa placebo wykazuje małą zmianę w okresie badania. Współczynniki regresji oszacowane dla T i T2 wynosiły 0,017 i 0,0007. Wartości te nie są znacząco różne od 0 (odpowiednio p = 0,232 i 0,208). Obserwacje te wskazują, że nie ma znaczącej zmiany w reakcji proliferacyjnej w okresie badania grupy kontrolnej. Jak pokazano na fig. 1a, krzywa dla grupy placebo jest bardziej płaska dla grupy placebo niż krzywa dla grupy ACTIMEL. Chociaż, w przeciwieństwie do grupy placebo, grupa ACTIMEL wykazuje znaczącą trajektorię, to różnica pomiędzy dwiema krzywymi nie osiąga poziomu statystycznie znaczącego (p = 0,540 dla T i p = 0,458 dla T2, tabela 3).
Tężec:
Dla grupy ACTIMEL reakcja stopniowo rośnie od poziomu bazowego aż do dnia 18, a następnie spada. Współczynniki regresji oszacowane dla T i T2 wynosiły odpowiednio 0,043 i 0,0011 (tabela 3). Te dwie wartości są statystycznie znacząco różne od 0 (odpowiednio p = 0,001 i 0,020). Tak jak w przypadku Candida, pozytywna zmiana reakcji proliferacyjnej w okresie badania jest znacząca dla grupy ACTIMEL. W grupie placebo średnia wartość wzrosła od 7,3 w dniu 0 do 11,8 w dniu 9, a następnie spadła do 7,9 w dniu 18 i ponownie zwiększyła się do 8,7 w dniu 28 (fig. 1b). Nawet przy nieznaczącym współczynniku dla składnika drugiego stopnia T2 (-0,0008, p = 0,141, tabela 3), znacząco oszacowany współczynnik T (0,034, p = 0,022, tabela 3) pokazuje efekt trajektorii. Jednakże, jeśli grupę ACTIMEL porównuje się z grupą placebo, to statystyczne testy nie wykazują żadnej znaczącej różnicy pomiędzy tymi dwiema krzywymi (odpowiednio p = 0,630 i 0,626 dla T i T2).
Grypa:
Grupa ACTIMEL wykazała klarowniejszą zmianę niż grupa placebo. Średnia wartość zwiększyła się z 13 ± 12,6 w dniu 0 do 19,7 ± 17,1 w dniu 9, pozostając na tym poziomie do dnia 18, a następnie zmniejszając się do 13,9 ± 12,7 w dniu 28 (fig. 1c). Dw współczynniki oszacowane dla T i T2 są znacząco różne od zera (p = 0,001). Statystyka ta wskazuje na to, że pozytywna zmiana w reakcji proliferacyjnej w okresie badania jest znacząca (tabela 2).
Grupa placebo wykazała zmiany podobne do obserwowanych w przypadku tężca. Średnie wartości zwiększały się do dnia 9, spadły do dnia 18 i ponownie wzrosły do dnia 28, tak jak zilustrowano to na fig. 1c. Dwa oszacowane współczynniki regresji nie są znacząco różne od 0 (wartości p wynoszą dla T i T2 odpowiednio 0,181 i 0,475), wskazując na to, że nie ma znaczącej trajektorii zmian dla reakcji proliferacyjnej na antygen grypy.
PL 201 801 B1
Jeśli porówna się parametry oszacowane dla grupy ACTIMEL i grupy placebo, to widoczne są znaczne różnice zarówno dla parametrów liniowych, jak i dla parametrów drugiego stopnia (p = 0,045 dla T i p = 0,027 dla T2) (tabela 3). Wnioski te wskazują na to, że zmiany reakcji proliferacyjnej znacząco różnią się pomiędzy obiema badanymi grupami.
P r z y k ł a d 2: Wpływ Lactobacillus casei na proliferację podzbioru limfocytów T, w reakcji na stymulację antygenem grypy
Nie jest znany dokładny charakter podzbioru T reagującego in vitro na antygeny drobnoustrojowe. Albo każdy z specyficznych podzbiorów limfocytów T, takich jak podzbiory reprezentowane przez fenotypy CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+CD25+ i CD3+CD45+, może być uważany za głównego respondenta, albo te połączone podzbiory mogą wnosić wkład do sumarycznej reakcji proliferacyjnej na pobudzające antygeny.
Przy wstępnym założeniu, że specyficzne podzbiory limfocytów są głównymi respondentami na pobudzające antygeny, zastosowano model statystyczny opisany w powyższym przykładzie 1 i przeprowadzono analizy dla podzbioru komórek T CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+CD25+ i CD3+CD45+, w celu stwierdzenia czy reakcja proliferacyjna dla każdego z 4 podzbiorów różni się znacząco dla grupy ACTIMEL i grupy placebo.
W analizach tych wartości dla reakcji proliferacyjnej począ tkowo opartych na sumie PBMCs, przekształcono dla każdego podzbioru w nowe wartości, obliczone zgodnie z całkowitą częstością występowania komórek T CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+CD25+ i CD3+CD45+ w każdej próbce krwi. Następnie dla każdego podzbioru przeprowadzono analizę statystyczną, tak jak opisano to w powyższym przykładzie 1.
W poniższej tabeli 4 podano średnie, odchylenia standardowe i mediany dla grup placebo i ACTIMEL, dla czterech podzbiorów limfocytów.
T a b e l a 4
Podzbiór limfocytów Placebo ACTIMEL
Dzień 0 Dzień 9 Dzień 18 Dzień 28 Dzień 0 Dzień 9 Dzień 18 Dzień 28
CD3+CD4+
Średnia 101 149 113 125 87,4 131 133 107
SD 84,0 130 117 127 104 90,2 112 127
Mediana 72,8 111 74,5 91,0 63,0 103 92,0 64,5
CD3+CD8+
Średnia 192 268 251 251 230 301 365 244
SD 155 250 289 336 375 286 554 302
Mediana 167 218 140,5 168 105 180 214 126
CD3+CD25+
Średnia 250 377 260 354 177 267 310 270
SD 219 374 208 462 139 163 210 305
Mediana 185 263 228 247 159 262 251 177
CD3+CD45+
Średnia 63,5 87,6 73,0 76,2 52,1 78,7 87,1 69,1
SD 54,1 70,9 81,3 79,7 72,2 56,3 79,2 95,2
Mediana 47,5 66,6 43,1 51,4 34,4 64,0 67,8 41,0
SD = odchylenie standardowe
Różnice w wartościach bazowych pomiędzy dwiema badanymi grupami nie są statystyczne znaczące.
Wykorzystując model statystyczny opisany w powyższym przykładzie 1, zanalizowano zmiany proliferacji względem wartości bazowych, w reakcji na antygen grypy, dla każdego z czterech podzbiorów
PL 201 801 B1 limfocytów. Fig. 2 ilustruje zmiany proliferacji w skali logarytmicznej, dla każdego z tych podzbiorów i dla każ dej z dwóch badanych grup.
Wyniki modelowania statystycznego przedstawiono w poniższej tabeli 5.
T a b e l a 5
Podzbiór limfocytu Zmienna Oszacowanie parametru (SE) Test H0 parametr=0 Porównanie 2 krzywych
CD3+CD45+ Placebo T 0,015 (0,016) p=0,352 H0: β1 = β12
T2 -0,0003 (0,0006) p=0,597 p=0,015
ACTIMEL T T2 0,071 (0,015) -0,0024 (0,0006) p<0,001 p<0,001 H0: β21 = β22 p=0,016
CD3+CD25+ Placebo T 0,024 (0,016) p=0,144 H0: β11 = β12
T2 -0,0004 (0,0006) p=0,463 p=0,031
ACTIMEL T T2 0,071 (0,015) -0,0022 (0,0006) p<0,001 p<0,001 H0: β21 = β22 p=0,030
CD3+CD8+ Placebo T 0,014(0,017) p=0,410 H0: β11 = β12
T2 -0,0003 (0,0006) p=0,671 p=0,013
ACTIMEL T T2 0,070 (0,015) -0,0024 (0,0006) p<0,001 p<0,001 H0: β21 = β22 p=0,012
CD3+CD4+ Placebo T 0,022 (0,017) p=0,203 H0: β11 = β12
T2 -0,0005 (0,0006) p=0,436 p=0,028
ACTIMEL T T2 0,072 (0,015) -0,0025 (0,0006) p<0,001 p<0,001 H0: β21 = β22 p=0,024
SE = błąd standardowy
Reakcje proliferacyjne dla każdego z czterech podzbiorów limfocytowych są zgodne z reakcją obserwowaną dla sumy PBMCs. Podczas ekspozycji antygenem grypy, w grupie ACTIMEL zaobserwowano znaczne różnice dla czterech podzbiorów limfocytowych. Różnice te mogą być zaprezentowane jako kwadratowa funkcja czasu.
Niewielkie zmiany obserwowano dla czterech podzbiorów w grupie placebo.
Oprócz tego, różnice między grupami były znaczące dla wszystkich podzbiorów limfocytów.
Wnioski
Wyniki te pokazują, że dla 3 testowanych antygenów obserwuje się zwiększenie reakcji proliferacyjnej wywoływane antygenem, które jest większe w grupie ACTIMEL niż w grupie placebo. W przypadku antygenu grypy to zwiększenie w grupie ACTIMEL jest statystycznie znaczące, w porównaniu do grupy placebo, zarówno dla sumy PBMCs, jak i dla każdego podzbioru komórek T CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+CD25+ i CD3+CD45+.
Z tego względu wydaje się, że spożywanie ACTIMEL wywoływało u badanych osobników pobudzenie immunologiczne in vivo, które prowadziło do ex vivo reakcji ich komórek T na antygeny drobnoustrojowe, w szczególności na antygeny grypy, silniejszej od obserwowanego w grupie placebo.
To zwiększenie reakcji korelowało z częstością występowania i stanem aktywacji komórek CD3+ T i ich podzbiorów, u osobników z grupy ACTIMEL.
Oprócz tego, pozytywna korelacja z obecnością markera aktywacji CD25 sugeruje udział w aktywacji in vivo komórek T specyficznych w stosunku do grypy, eksprymujących receptory CD25 IL-2 i zdolnych do skuteczniejszej reakcji na antygeny grypy. Analiza podzbiorów komórek T sugeruje również, że w rekcji proliferacyjnej biorą udział prawdopodobnie zarówno podzbiory CD4+, jak i CD8+, odpowiadające antygenom grypy. Ważne znaczenie podzbioru CD3+/CD8+ w analizie proliferacji sugeruje możliwość pobudzania zbioru cytotoksycznych komórek CD8+, specyficznych; w stosunku do grypy.

Claims (3)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Zastosowanie bakteryjnego szczepu CNCM I-1518 gatunku L. Casei do wytwarzania kompozycji przeznaczonej do podawania doustnego, zwiększającej swoistą ogólnoustrojową odporność na wirus grypy.
  2. 2. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że kompozycja ma postać artykułu spożywczego lub dodatku do żywności.
  3. 3. Zastosowanie według zastrz. 1 lub 2, znamienne tym, że kompozycja ma postać sfermentowanego produktu mlecznego.
PL358408A 2000-05-25 2001-04-27 Zastosowanie bakteryjnego szczepu CNCM I-1518 do wytwarzania kompozycji przeznaczonej do podawania doustnego PL201801B1 (pl)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0006679A FR2809312B1 (fr) 2000-05-25 2000-05-25 Utilisation de l. casei dans des compositions immunostimulantes

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL358408A1 PL358408A1 (pl) 2004-08-09
PL201801B1 true PL201801B1 (pl) 2009-05-29

Family

ID=8850597

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL358408A PL201801B1 (pl) 2000-05-25 2001-04-27 Zastosowanie bakteryjnego szczepu CNCM I-1518 do wytwarzania kompozycji przeznaczonej do podawania doustnego

Country Status (27)

Country Link
US (1) US7604809B2 (pl)
EP (1) EP1283714B1 (pl)
JP (1) JP2003534284A (pl)
CN (1) CN1194707C (pl)
AR (1) AR028626A1 (pl)
AT (1) ATE332143T1 (pl)
AU (2) AU5643501A (pl)
BG (1) BG65884B1 (pl)
BR (1) BR0111135A (pl)
CA (1) CA2410350C (pl)
CZ (1) CZ303600B6 (pl)
DE (1) DE60121327T2 (pl)
DK (1) DK1283714T3 (pl)
EA (1) EA005081B1 (pl)
ES (1) ES2267763T3 (pl)
FR (1) FR2809312B1 (pl)
HR (1) HRP20020935A2 (pl)
HU (1) HUP0302041A3 (pl)
IL (1) IL152980A0 (pl)
MA (1) MA25760A1 (pl)
MX (1) MXPA02011636A (pl)
NO (1) NO332369B1 (pl)
PL (1) PL201801B1 (pl)
PT (1) PT1283714E (pl)
SK (1) SK18272002A3 (pl)
WO (1) WO2001089541A1 (pl)
ZA (1) ZA200209087B (pl)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6800744B1 (en) * 1997-07-02 2004-10-05 Genome Therapeutics Corporation Nucleic acid and amino acid sequences relating to Streptococcus pneumoniae for diagnostics and therapeutics
GB0009294D0 (en) 2000-04-15 2000-05-31 Sec Dep For The Home Departmen Improvements in and relating to analysis of DNA samples
US9610347B2 (en) * 2001-04-30 2017-04-04 Cortcontrol Vaccination response for immunodeficiency or high cortisol
CN1317385C (zh) * 2003-05-30 2007-05-23 上海光明乳业股份有限公司 干酪乳杆菌Bd－II菌株及其在降低血脂方面的应用
US20050158294A1 (en) 2003-12-19 2005-07-21 The Procter & Gamble Company Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum
US8877178B2 (en) 2003-12-19 2014-11-04 The Iams Company Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals
PT1629850E (pt) * 2004-08-24 2007-08-14 Nutricia Nv Composição nutricional que compreende a administração de oligossacarídeos indigeríveis
ZA200705844B (en) * 2004-12-15 2008-09-25 Van Der Westhuzen Corne Floris Detoxifying and immunity-booster composition
EP1683425A1 (en) * 2005-01-21 2006-07-26 Compagnie Gervais Danone Use of a fermented milk containing L. Casei for the manufacture of a composition for the prevention or treatment of a delayed-type hypersensitivity reaction
ES2264368B1 (es) * 2005-02-11 2007-12-01 Francisco Exposito Mesa Complemento alimenticio o dietetico compuesto por productos procedentes del lisado de microorganismos.
WO2006130188A1 (en) 2005-05-31 2006-12-07 The Iams Company Feline probiotic bifidobacteria
JP4938005B2 (ja) 2005-05-31 2012-05-23 ザ・アイムス・カンパニー ネコ科動物プロバイオティックであるラクトバシラス
KR20170021375A (ko) 2006-09-10 2017-02-27 글리코토페 게엠베하 항체 발현을 위한 골수성 백혈병 기원의 인간 세포의 용도
FR2912657B1 (fr) * 2007-02-16 2009-04-17 Gervais Danone Sa Utilisation de lactobacillus casei pour renforcer la protection induite par la vaccination anti-grippale.
WO2009021585A1 (en) * 2007-08-13 2009-02-19 Dsm Ip Assets B.V. Probiotic bacteria for rducing the occurence of symptoms of winter infections
WO2009067000A1 (en) * 2007-11-20 2009-05-28 N.V. Nutricia Composition with synbiotics
EP2291086A1 (en) * 2008-05-13 2011-03-09 Glycotope GmbH Fermentation process
EP2119365B1 (de) 2008-05-13 2017-08-16 Glycotope GmbH Fermentationsprozess
US9771199B2 (en) 2008-07-07 2017-09-26 Mars, Incorporated Probiotic supplement, process for making, and packaging
EP2153837A1 (en) * 2008-08-14 2010-02-17 Compagnie Gervais Danone Compositions comprising Lactobacillus casei for improving resistance to common infectious diseases
FR2937252B1 (fr) 2008-10-17 2011-05-20 Pf Medicament Association d'un extrait de sureau et d'une souche de l. paracasei.
US10104903B2 (en) 2009-07-31 2018-10-23 Mars, Incorporated Animal food and its appearance
CN102858948B (zh) * 2010-01-08 2015-11-25 热尔韦·达诺尼公司 具有抗氧化作用的乳酸杆菌
WO2011110884A1 (en) * 2010-03-12 2011-09-15 Compagnie Gervais Danone Lactic acid bacteria for coeliac disease
EP2627198B1 (en) * 2010-10-15 2015-09-02 Chr. Hansen A/S Immunoadjuvant
EP2455092A1 (en) * 2010-11-11 2012-05-23 Nestec S.A. Non-replicating probiotic micro-organisms protect against upper respiratory tract infections
CN103814123A (zh) 2011-08-22 2014-05-21 葛莱高托普有限公司 携带肿瘤抗原的微生物
WO2014038929A1 (en) 2012-09-07 2014-03-13 N.V. Nutricia Probiotics for producing antiviral factors
BR112020023373A2 (pt) 2018-05-18 2021-02-09 Daiichi Sankyo Company, Limited conjugado, composição, e, uso de um conjugado ou de uma composição

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH05236872A (ja) * 1992-02-27 1993-09-17 Takanashi Nyugyo Kk 乳酸菌含有食品
JP4112021B2 (ja) * 1994-02-16 2008-07-02 明治乳業株式会社 乳酸菌を用いた免疫賦活剤
DE69506002T2 (de) * 1995-01-02 1999-06-24 Compagnie Gervais Danone, Levallois-Perret Milchsäureferment, und ihre verwendung zur herstellung von antidiarrhöeprodrukten
TR200000451T2 (tr) * 1997-08-21 2000-06-21 New Zealand Dairy Board Bağışıklık arttırıcı laktik asit bakterileri.
US6699517B2 (en) * 1997-11-28 2004-03-02 Compagnie Gervais Danone Method for preparing food products by fermenting soy milk with streptococcus thermophilus
IT1298918B1 (it) * 1998-02-20 2000-02-07 Mendes Srl Uso di batteri dotati di arginina deiminasi per indurre apoptosi e/o ridurre una reazione infiammatoria e composizioni farmaceutiche
KR100324441B1 (ko) * 1999-02-08 2002-02-27 이은선 위염, 위궤양, 십이지장궤양 예방을 위한 식품

Also Published As

Publication number Publication date
MA25760A1 (fr) 2003-04-01
CN1194707C (zh) 2005-03-30
HRP20020935A2 (en) 2005-02-28
DE60121327T2 (de) 2007-07-26
BG107299A (bg) 2003-07-31
ATE332143T1 (de) 2006-07-15
NO332369B1 (no) 2012-09-03
NO20025595L (no) 2003-01-22
AR028626A1 (es) 2003-05-14
DE60121327D1 (de) 2006-08-17
PL358408A1 (pl) 2004-08-09
CA2410350A1 (fr) 2001-11-29
BG65884B1 (bg) 2010-04-30
JP2003534284A (ja) 2003-11-18
FR2809312B1 (fr) 2002-07-12
AU5643501A (en) 2001-12-03
EA005081B1 (ru) 2004-10-28
HUP0302041A2 (hu) 2003-09-29
AU2001256435B2 (en) 2006-06-29
US7604809B2 (en) 2009-10-20
FR2809312A1 (fr) 2001-11-30
ES2267763T3 (es) 2007-03-16
SK18272002A3 (sk) 2003-08-05
US20040029127A1 (en) 2004-02-12
NO20025595D0 (no) 2002-11-21
CZ303600B6 (cs) 2013-01-02
DK1283714T3 (da) 2006-10-30
EP1283714B1 (fr) 2006-07-05
WO2001089541A1 (fr) 2001-11-29
CA2410350C (fr) 2013-04-09
PT1283714E (pt) 2006-11-30
CN1430518A (zh) 2003-07-16
HUP0302041A3 (en) 2005-11-28
MXPA02011636A (es) 2003-05-14
EA200201248A1 (ru) 2003-06-26
IL152980A0 (en) 2003-06-24
EP1283714A1 (fr) 2003-02-19
ZA200209087B (en) 2004-06-30
CZ20024189A3 (cs) 2003-05-14
HK1055898A1 (en) 2004-01-30
BR0111135A (pt) 2003-04-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL201801B1 (pl) Zastosowanie bakteryjnego szczepu CNCM I-1518 do wytwarzania kompozycji przeznaczonej do podawania doustnego
CN103037876B (zh) 用于治疗免疫病症的包含益生菌的组合物
Sanders Probiotics: definition, sources, selection, and uses
Kadooka et al. Effect of Lactobacillus gasseri SBT2055 in fermented milk on abdominal adiposity in adults in a randomised controlled trial
PT1824500E (pt) Estirpes probióticas de lactobacillus para saúde vaginal melhorada
US8349315B2 (en) Use of Lactobacillus casei for increasing the protection provided by the influenza vaccine
Singh et al. Probiotic attributes of Lactobacillus rhamnosus of dairy origin and effectiveness of almond in stimulation of its growth in vitro
TWI779358B (zh) 加氏乳桿菌菌株及其組合物與用途
Kubota et al. Diversity of intestinal bifidobacteria in patients with Japanese cedar pollinosis and possible influence of probiotic intervention
Srinivasan et al. Comparative Antifungal Activity of Commercial Probiotics against Candida albicans–an Invitro Study
POPESCU et al. STUDY ON IMMUNOMODULATORY EFFECTS OF PROBIOTICS IN ASTHMA
HK1055898B (en) Use of lactobacillus casei in immunostimulatory peptides