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KR20070048700A - （ｓ，ｓ）－이성질체가 풍부한ｓ－아데노실－ｌ－메티오닌의 화학 합성 - Google Patents

（ｓ，ｓ）－이성질체가 풍부한ｓ－아데노실－ｌ－메티오닌의 화학 합성 Download PDF

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KR20070048700A
KR20070048700A KR1020077001552A KR20077001552A KR20070048700A KR 20070048700 A KR20070048700 A KR 20070048700A KR 1020077001552 A KR1020077001552 A KR 1020077001552A KR 20077001552 A KR20077001552 A KR 20077001552A KR 20070048700 A KR20070048700 A KR 20070048700A
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South Korea
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adenosyl
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tetrafluoroborate
acid
methionine
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Ceased
Application number
KR1020077001552A
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우다얌팔라얌 팔라니사미 센트힐쿠마르
라마르 파드마나브한
베누고팔 시바산카란
신가라벨 모한
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오키드 케미칼즈 앤드 파마수티컬즈 리미티드
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Publication date
Application filed by 오키드 케미칼즈 앤드 파마수티컬즈 리미티드 filed Critical 오키드 케미칼즈 앤드 파마수티컬즈 리미티드
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Abstract

본원 발명은 식 (I)의 S-아데노실-L-메티오닌(SAMe)의 산업상 제조를 위한 개선된 제조방법과 관련되는데, 상기 방법은 활성이 있는 (S,S)-이성질체가 풍부하도록 하는 S-아데노실-L-호모시스테인(SAH)의 입체선택적인 메틸레이션으로 구성된다.
S-아데노실-L-메티오닌, S-아데노실-L-호모시스테인, 메틸레이션

Description

（Ｓ，Ｓ）－이성질체가 풍부한 Ｓ－아데노실－Ｌ－메티오닌의 화학 합성{Chemical synthesis of S-Adenosyl-L-Methionine with enrichment of (S,S)-Isomer}
본원 발명은 S-아데노실-L-메티오닌(S-adenosyl-L-methionine, SAMe)의 산업상 제조를 위한 개선된 제조 방법에 관련되고, 상기 제조 방법은 활성이 있는 (S,S)-이성질체가 풍부하도록 하는 S-아데노실-L-호모시스테인(S-adenosyl-L-homocysteine, SAH)의 입체선택적인 메틸레이션으로 구성된다.
SAMe로 알려져 있는 S-아데노실-L-메티오닌은 메틸기들의 주요 생물학적인 공여체이고, 이것은 다수의 중요한 치료학적인 용도를 가지고 있다. 생물체에 존재하는 물질로서, SAMe는 허혈성 뇌의 에너지 상태 개선, 뇌의 에너지 대사 개선 및 허혈에 따르는 재순환된 혈류를 갖는 모델의 산증(acidosis)의 개선과 같은 다양한 약리 작용들을 가지고 있는 것으로 밝혀지고 있다. 허혈에 따르는 신경세포 사멸의 억제, 뇌의 포도당 이용도 개선, 뇌부종의 억제, EEG의 개선, 유발 전위(evoked potential)의 개선, 운동 기능에서 아메비오레이티브(amebiorative) 작용과 같은 다수의 다른 기능들을 소유하고 있어서, 뇌졸증을 위한 하나의 치료법으로서 중요하다고 보고되고 있다. 항산화 물질인 SAMe에 대해서는, 골 관절염, 간 보호 및 노인들에 있어서 노화를 억제하기 위한 용도가 또한 제안되어 있다. SAMe는 정상 세포 기능 및 세포의 생존에서 중요한 분자이다. SAMe는 세 개의 중대한 대사 경로인 메틸기 전이(trans-methylation), 황전이 반응(trans-sulfuration) 및 폴리아민 합성에서 사용된다. 메틸기 전이 반응에서, SAMe의 메틸기가 DNA, 인지질 및 단백질을 포함하는 다수의 수용체 기질로 공여된다. 황전이 반응에서, SAMe의 황화는 일련의 효소 단계를 거쳐, 주요한 세포 내 항산화 물질인 글루타치온과 타우린의 전구체인 시스테인으로 옮겨진다. 조직 기능에서 SAMe의 중요성을 부여하면서, 문헌 Int . J. Biochem . Cell Biol . (2000), 32(4), 391-395에서 언급되어 있는 바와 같이 이 분자가 다양한 임상 장애의 치료를 위한 가능성 있는 치료용 물질로 조사되고 있음은 놀랄만한 일이 아니다.
다양한 규모에서 SAMe를 제조하기 위해 알려져 있는 수많은 방법들이 있으며, 모든 방법들은 효소에 의한 것이고 발효에 기초한다. 일본특허 제58036397호, 일본특허 제60070097호, 일본특허 제56099499호 및 일본특허 제54154774호는 효모를 사용하는 S-아데노실-L-메티오닌의 상기 제조 방법을 설명하고 있다. 이 제조 방법에서 효모 추출물은 수지에 흡착되어 있고 적절한 산들을 사용하여 SAMe가 용리되도록 하였다. 생성물의 그 희석 용액은 역 삼투를 사용하여 농축되고 상기 생성물은 분무-건조에 의해 단리되었다. 또 다른 방법으로, 루마니아특허 제63045호, 캐나다특허 제1057681호 및 독일특허 제2530898호에서는 발효된 덩어리로부터 상기 생성물의 단리를 위하여 피크롤린 산(picrolinic acid)을 사용하는 것이 제안되어 있다.
메티오닌 배지에서 배양시킨 사카로마이세스(Saccharomyces)의 이용, 메티오닌을 포함하는 배지에서 배양시킨 리조푸스 ( Rhizopus ) 슈도키네시스( pseudochinesis)의 세포들 및 다양한 원천의 다른 배양물의 이용이 일본특허 제48044491호, 일본특허 제47037038호, 일본특허 제53005399호 및 일본특허 제50082288호에서 보고되어 있다. 효모 또는 다른 곰팡이로부터 나온 효소 및 상기 효모 추출물을 포함하는 락토바실루스 (Lactobacillus) 불가리쿠스(bulgaricus)에 의해 촉매되는 아데노신 트리포스페이트(ATP)와 메티오닌과의 반응에 의한 S-아데노실-L-메티오닌의 미생물에 의한 제조가 일본특허 제57099199호, 일본특허 제57086297호 및 일본특허 제57086298호에서 개시되어 있다.
상기 모든 방법들에서, SAMe의 (S,S)-이성질체의 풍부함은 달성되었다.; 그러나, 그것만 유일하게 있는 것은 아니다. 보통은, HPLC 방법에 의해 분석되어진 SAMe 시료들에서 상기 (S,S)-이성질체를 위해 관측된 백분율은 60%부터 75%까지의 범위에 있었다. 다양한 이성질체 비율들은 생성물의 단리의 방법과 효소 반응이 영향을 받는 온도에 달려있다.
상기 모든 방법들이 하루 당 생산성에 대하여 여러 한계점을 가지고 있으며, 그리고 높은 투하 자본을 필요로 한다. 이러한 방법들과 관련되어 있는 문제점들 중 어떤 것들이 하기에 있다:
1. 효소의 천연 공급원으로부터 필요한 효소의 단리가 어렵고, 효소 몇 밀리그램을 위해서 다량의 세포들이 필요하다.
2. 효소에 의한 SAMe의 합성은 생성 저해(product inhibition)의 문제점을 나타내었다. 5 mM 및 10mM의 반응들은 심지어 SAMe 1mM을 생성하지 못한다. 고정된 효소의 경우도 마찬가지이다. 따라서, 문헌 Biotechnol . Appl . Biochem . (1987), 9(1), 39-52에서 보고되어 있는 바와 같이, 효소에 의한 합성에 있어서, 높은 농도에서는 SAMe 대 메티오닌의 비경쟁적 생성 저해가 상기 SAMe의 생성 속도의 감소를 초래하게 된다.
3. 생성물의 단리가 장황하고, 분자량에 따른 차단에 의한 한외여과(ultra-filtration), 이온 교환 수지 컬럼 및 역 삼투와 같은 다양한 기법이 사용될 필요가 있다. 따라서, 하류 제조 공정 동안에 관련되는 중형 반응기의 점유 및 매우 묽히는 희석으로 인한 제한 이외에, 상기 방법들을 채택하는 것은 높은 투하 자본을 필요로 한다.
따라서, 종래 기술은 발효에 의한 SAMe의 생성을 개시하고 있다. 화학적으로 SAMe를 합성하기 위한 몇몇의 가끔 일어나는 시도들이 있었지만, 그들은 상업적인 규모에서 SAMe의 제조를 위해서는 거의 성공에 이르지 못하고 있다. 그 이유는 화학적 방법은 (R,S)-이성질체가 55-65%이고 필요한 (S,S)-이성질체가 35-45%가 되도록 하는 상기 (S,S)-이성질체의 필요 최소 농축물을 일반적으로 주지 못하기 때문이다. 상기 이용가능한 방법들은 메틸레이션에 민감한 S-아데노실-L-호모시스테인에 있는 복합 센터의 존재에 의해 많은 부산물을 생성한다.
문헌 Biotechnol . Appl . Biochem . (1987), 9(1), 39-52에서 공개되어 있는 조세(Jose) R. 마토스(Matos) et al .에 의한 보고서는 S-아데노실-L-호모시스테인의 메틸레이션을 위한 메틸 아이오디드 및 트리메틸술포늄 아이오디드(TMSI)의 사 용을 개시하고 있으며, [(R,S)-이성질체 : (S,S)-이성질체]가 60:40의 몰 비율로 주요 생성물로서 활성이 없는 이성질체의 형성을 보고하고 있다. 메틸 아이오디드의 반응은 85% 포름산에서 수행되었고, 완료시키기 위하여 3 내지 5일 동안 빛이 차단되는 곳에서 유지시켰다. 생성물은 앰버라이트(Amberlite) IRC-50 수지 컬럼을 사용하여 단리시켰고 동결건조시켰다. TMSI에 의한 상기 메틸레이션 반응은 그 반응에서 디메틸 설피드의 농도가 증가됨에 따라 디메틸레이션이 일어나는 단점을 가지고 있다. 어떤 단계에서는, 반응은 평형에 도달하게 되고 부산물의 형성이 압도적이 된다. 상기 방법들 모두 비대칭적으로 비-특이적인 접근방법, 오랜 반응 시간, 부산물의 형성 및 상기 필요한 이성질체의 낮은 수득율로 인하여 대규모 제조를 위해서는 유용하지 않다. 추가로, 상기 필요한 이성질체의 총량은 발효 방법에 의해 얻어지는 것보다 훨씬 작다.
동시 계류중인 우리의 출원에서 우리는 메틸화시키는 물질로서 트리메틸옥소늄 테트라플루오로보레이트(TMOTFB)를 사용하는, 활성이 있는 (S,S)-이성질체가 풍부하도록 하는 S-아데노실-L-메티오닌의 산업상 제조를 위한 일차 화학적 공정을 보고하였는데, 그 제조 방법은 디메틸 에테르 가스의 사용을 포함하며, 이것은 매우 인화성이 있는 가스이므로 따라서 상업적인 규모의 제조에서 처리하기 위해서는 투하 자본을 필요로 한다. 이 출원이 여러 개의 메틸화시키는 물질을 개시하고 있지만, 이 출원은 단지 TMOTFB의 실시예만을 들고 있으며, 이 출원은 본원 발명의 메틸화시키는 물질에 관해서는 개시하거나 또는 암시하고 있지 않다.
우리는 상기 활성이 있는 (S,S)-이성질체가 풍부하도록 더 큰 규모에서 재생 가능하고 높은 수득율을 보이는, S-아데노실호모시스테인의 메틸레이션을 위한 또 다른 메틸화시키는 물질을 동정하기 위하여 연구를 계속하여 왔으며, 그래서 디메틸 에테르와 같은 위험한 가스를 피하게 하는 메틸화시키는 물질을 동정하는데 성공하였다.
본원 발명의 목적
본원 발명의 주요 목적은 디메틸 에테르와 같은 위험한 가스를 피하게 하는, 메틸화시키는 물질을 사용하는 S-아데노실-L-호모시스테인(S-adenosyl-L-homocysteine, SAH)의 입체선택적인 메틸레이션을 위한 화학적인 접근법을 개발하는 것이다.
본원 발명의 또 다른 목적은 생산하기에 안전한 신규한 입체선택적인 메틸화시키는 물질들을 동정하고, (S,S)-이성질체가 58 내지 75%이고 (R,S)-이성질체가 25 내지 42%로 얻어지는 SAMe의 제조를 위하여 산업적인 규모에서 사용하는 것이다.
본원 발명의 또 다른 목적은 원하는 이성질체 비율을 얻기 위해서, 효소 또는 효모와 같은 생물학적인 공급원을 피하게 하는 상업적으로 실용가능하고 대규모 실행에서 적용가능한, SAMe의 제조를 위한 제조 방법을 개선하는 것이다.
또 다른 목적은 필요한 (S,S)-이성질체가 풍부한 SAMe를 얻기 위하여 S-아데노실-L-호모시스테인을 메틸화시키는 것이다.
본원 발명의 또 다른 목적은 분자량에 따른 차단에 의한 한외 여과, 이온 교환 수지 컬럼, 역 삼투 및 동결 건조기의 사용을 피하게 하는, 상기 수용성 배지로부터 S-아데노실-L-메티오닌의 단리를 위한 산업적으로 실행할 수 있는 방법을 개발하는 것이다.
본원 발명의 하나 이상의 구체화는 식 (III)의 옥소늄 염의 제조를 위하여 비용상 효과적인 제조 방법을 제공하는 것이다.
본원 발명의 요약
따라서, 본원 발명은 SAMe의 제조를 위한 입체선택적인 방법을 제공하는데, 상기 제조방법은 산이 있는 상태에서 또는 산이 없는 상태에서 식 (II)의 S-아데노실-L-호모시스테인 SAH를 식 (III)의 메틸화시키는 물질과 반응시킴으로써 (S,S)-이성질체가 58 내지 75%이고 (R,S)-이성질체가 25 내지 42%인 순수한 식 (I)의 S-아데노실-L-메티오닌을 얻는 단계를 포함하는데, 상기 식 (III)의 메틸화시키는 물질에서 R과 R1은 같거나 또는 다를 수 있고, 각각은 서로 독립적으로, 2 내지 8 개의 탄소 원자를 갖는 선형 또는 분지형의 알킬 라디칼 또는 상기 R과 R1에 결합되어 있는 O 원자와 함께, 0 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 추가로 포함할 수 있는 3 내지 8개의 원자로 구성되는 포화된 고리를 형성하도록 하는 2 내지 8 개의 탄소 원자를 갖는 선형 또는 분지형의 알킬 라디칼이다.
반응은 하기 주어진 반응식에서 도시되고 있다:
Figure 112007006369364-PCT00001
본원 발명의 상세한 설명
본원 발명의 구체화에서, 사용되는 상기 식(III)의 화합물은 1-메틸디옥사늄(1-methyldioxanium) 테트라플루오로보레이트, 1-메틸테트라히드로푸라늄(1-methyltetrahydrofuranium) 테트라플루오로보레이트, 1-메틸테트라히드로-2H-피라늄(1-methyltetrahydro-2H-pyranium) 테트라플루오로보레이트, 1-메틸옥시라늄(1-methyloxiranium) 테트라플루오로보레이트, 1-메틸옥세타늄(1-methyloxetanium) 테트라플루오로보레이트 및 그 등가물 또는 그 혼합물들로부터 선택된다.
본원 발명의 또 다른 구체화에서, 사용되는 상기 산은 트리플루오로아세트 산(TFA), 트리클로로아세트 산, 트리브로모아세트 산, 디클로로브로모아세트 산, 디클로로플루오로아세트 산, 및 펜타클로로프로피온 산과 같은 할로겐화된 지방족 카르복시 산; 펜타클로로벤조 산, 트리클로로디플루오로벤조 산, 펜타브로모벤조 산과 같은 할로겐화된 방향족 카르복시 산; 트리플루오로메탄술폰 산, 트리브로모메탄술폰 산, 디클로로브로모메탄술폰 산, 디클로로플루오로메탄술폰 산, 트리플루오로메탄술폰 산, 및 펜타클로로프로판술폰 산과 같은 지방족 또는 방향족 술폰 산; 및 HBr, HCl, HF, H2SO4, HClO4 및 H3PO4와 같은 무기산 및 그 등가물 또는 그의 혼합물들로부터 선택된다.
본원 발명의 또 다른 구체화에서, 본원 발명을 위한 상기 식(II)의 출발 물질 SAH는 종래 기술상에서 이용할 수 있는 방법에 따라 제조된다.
본원 발명의 또 다른 구체화에서, 본원 발명에 의해 제조되는 상기 식(I)의 SAMe는 종래 기술상에서 이용할 수 있는 방법에 따라 안정한 SAMe 및 그 등가물로 전환될 수 있다.
본원 발명의 또 다른 구체화에서 디설페이트 모노토실레이트, 디설페이트 디토실레이트, 부탄디술폰 산과 같은 염으로서의 SAMe의 단리는 종래 기술상에서 이용할 수 있는 방법에 따라 또는 우리의 미국 등록 특허 제6,881,837호에서 주어진 실시예에 의해 가능하다.
하나 이상의 구체화에서, 본원 발명은 R, R1 및 상기 R과 R1에 결합되어 있는 O 원자와 함께, 0 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 추가로 포함할 수 있는 3 내지 8개의 원소로 구성되는 포화된 고리를 형성하도록 하는 식 (III)의 옥소늄 염의 제조를 위한 방법을 제공하는데, 상기 방법은 유기 용매가 있는 상태에서 또는 없는 상태에서 식 (IV)의 화합물을 보론 트리플루오라이드 또는 그의 복합체 및 에피클로로히드린과 함께 반응시키는 단계를 포함하는데, 상기 식 (IV)의 화합물에서 X는 CH2 또는 O 또는 S를 나타내고, 'm'과 'n'은 독립적으로 0부터 6까지 변화할 수 있다.
Figure 112007006369364-PCT00002
Figure 112007006369364-PCT00003
본원 발명의 다른 구체화에서, 상기 식 (IV)의 화합물은 디글라임(diglyme), 1,2-디메톡시에탄, 1,5-디메톡시펜탄, 1,3-디메톡시프로판, 1,2-디메톡시프로판, 1,2-비스(메톡시메틸)벤젠, 1,4-디메톡시부탄, 및 그 등가물 또는 그의 혼합물들로부터 선택된다.
본원 발명의 하나 이상의 구체화에서 반응식 II 또는 I에서 서술되어 있는 상기 반응은 소정의 유기 용매가 있는 상태에서 수행될 수 있고, 상기 유기 용매는 상기 반응의 성질에 영향을 주지 않는다.
개시되어 있는 발명은 다른 방식으로 적용함으로써 또는 개시된 범위로 본원 발명을 변형시킴으로써 많은 다른 유익한 결과들이 얻어질 수 있다. 본원 발명은 하기 실시예들에 의해 추가로 설명되는데, 이들이 본원 명세서에서 구체화되어 있는 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 않 된다.
실시예 1
반응식 1에 의한 1- 메틸디옥사늄 테트라플루오로보레이트의 제조
디글라임(50 g), 보론 트리플루오라이드 디에틸에테레이트(17.6 g) 및 디클로로메탄의 혼합물로, 5℃ 미만에서 에피클로로히드린(13.7 g)을 천천히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물의 온도를 25℃까지 상승시켰고, 잘 교반하였다. 얻어진 생성물을 여과하였고, 디클로로메탄으로 세척하였으며, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 순수한 형태로 얻었다. 수득량: 9.7 g
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축(Conc.) H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에, 1-메틸디옥사늄 테트라플루오로보레이트(5 g)를 첨가하였고 잘 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 아니솔을 첨가하였다. 수용액 층을 분리시켰고, 0℃ 미만에서 메탄올로 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리시켰고, 추가로 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트-LA-2 처리하였다. 정량화한 후에 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 염으로 전환시키기 위하여 사용하였다.
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에, 1-메틸디 옥사늄 테트라플루오로보레이트(5 g)를 첨가하였고 잘 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 디이소프로필 에테르를 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올로 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리하였고, 추가로 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트-LA-2 처리하였다. 정량화한 후에 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 염으로 전환시키기 위하여 사용하였다.
실시예 2
반응식 1에 의한 1- 메틸옥시라늄 테트라플루오로보레이트의 제조
1,2-디메톡시에탄(50 g), 보론 트리플루오라이드 디에틸에테레이트(13.1 g) 및 디클로로메탄의 혼합물로, 5℃ 미만에서 에피클로로히드린(10.2 g)을 천천히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물의 온도를 25℃까지 상승시켰고, 교반하였다. 얻어진 생성물을 여과하였고, 디클로로메탄으로 세척하였으며, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 순수한 형태로 얻었다. 수득량: 10.5 g
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에, 1-메틸옥시라늄 테트라플루오로보레이트(6.4 g)를 첨가하였고 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 아니솔을 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올로 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리하였고, 추가로 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트 LA2 처리하였다. SAMe를 포함하는 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 그의 염으로 전환시키기 위하여 사용하였다.
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에, 1-메틸옥시라늄 테트라플루오로보레이트(6.4 g)를 첨가하였고 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 디이소프로필 에테르를 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올을 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리하였고, 추가로 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그리고 나서 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트LA2 처리하였다. SAMe를 포함하는 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 그의 염으로 전환시키기 위하여 사용하였다.
실시예 3
반응식 1에 의한 1- 메틸테트라히드로 -2H- 피라늄 테트라플루오로보레이트의 제조
1,5-디메톡시펜탄(10 g), 보론 트리플루오라이드 디에틸에테레이트(14.6 g) 및 디클로로메탄의 혼합물로, 5℃ 미만에서 에피클로로히드린(11.7 g)을 천천히 첨 가하였다. 상기 반응 혼합물을 25℃까지 가온하였고, 교반하였다. 얻어진 생성물을 여과하였고, 디클로로메탄으로 세척하였으며, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 순수한 형태로 얻었다. 수득량: 8.8 g
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에, 1-메틸테트라히드로-2H-피라늄 테트라플루오로보레이트(5.4 g)를 첨가하였고, 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 아니솔을 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올로 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리하였고, 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트-LA-2 처리하였다. 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 염의 제조를 위하여 사용하였다.
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에, 1-메틸테트라히드로-2H-피라늄 테트라플루오로보레이트(5.4 g)를 첨가하였고 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 디이소프로필 에테르를 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올을 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리하였고, 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디 클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트-LA-2 처리하였다. 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 염의 제조를 위하여 사용하였다.
실시예 4
반응식 2에 의한 1- 메틸디옥사늄 테트라플루오로보레이트의 제조
디글라임(125 g)의 디클로로메탄 용액에, 5℃ 미만에서 보론 트리플루오라이드 가스(52.6 g)를 투입하였고, 5℃ 미만에서 에피클로로히드린(86.2 g)을 천천히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물의 온도를 25℃까지 상승시켰고, 잘 교반하였다. 얻어진 생성물을 여과하였고, 디클로로메탄으로 세척하였으며, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 순수한 형태로 얻었다. 수득량: 103 g
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에, 1-메틸디옥사늄 테트라플루오로보레이트(5 g)를 첨가하였고 잘 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 아니솔을 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올을 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리하였고, 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트-LA-2 처리하였다. 정량화한 후에 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 염 전환을 위하여 사용하였다.
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에, 1-메틸디옥사늄 테트라플루오로보레이트(5 g)를 첨가하였고 잘 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 디이소프로필 에테르를 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올로 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리하였고, 추가로 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트-LA-2 처리하였다. 정량화한 후에 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 염 전환을 위하여 사용하였다.
실시예 5
반응식 2에 의한 1- 메틸옥시라늄 테트라플루오로보레이트의 제조
1,2-디메톡시에탄(125 g)의 디클로로메탄 용액에, 5℃ 미만에서 보론 트리플루오라이드 가스(78.4 g)를 투입하였고, 5℃ 미만에서 에피클로로히드린(128.3 g)을 천천히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물의 온도를 25℃까지 상승시켰고, 교반하였다. 얻어진 생성물을 여과하였고, 디클로로메탄(dichloromethane, MDC)으로 세척하였으며, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 순수한 형태로 얻었다. 수득량: 122 g
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트 리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에, 1-메틸옥시라늄 테트라플루오로보레이트(6.4 g)를 첨가하였고 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 아니솔을 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올로 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체 분리하였고, 추가로 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트LA2 처리하였다. SAMe를 포함하는 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 그의 염으로 전환하기 위하여 사용하였다.
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에, 1-메틸옥시라늄 테트라플루오로보레이트(6.4 g)를 첨가하였고 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 디이소프로필 에테르를 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올로 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리하였고, 추가로 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트LA2 처리하였다. SAMe를 포함하는 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 그의 염으로 전환하기 위하여 사용하였다.
실시예 6
반응식 2에 의한 1- 메틸테트라히드로 -2H- 피라늄 테트라플루오로보레이트의 제조
1,5-디메톡시펜탄(125 g)과 디클로로메탄의 혼합물에, 5℃ 미만에서 보론 트리플루오라이드 가스(53.5 g)를 투입하였고, 5℃ 미만에서 에피클로로히드린(87.6 g)을 천천히 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 25℃까지 가온시켰고, 교반하였다. 얻어진 생성물을 여과하였고, 디클로로메탄으로 세척하였으며, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 순수한 형태로 얻었다. 수득량: 108 g
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에 1-메틸테트라히드로-2H-피라늄 테트라플루오로보레이트(5.4 g)를 첨가하였고, 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 아니솔을 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올을 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리하였고, 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트-LA-2 처리하였다. 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 염 제조를 위하여 사용하였다.
S - 아데노실 - L -메티오닌의 제조
0℃ 미만에서 S-아데노실-L-호모시스테인(10 g)을 농축 H2SO4(7.36 g)과 트리플루오로아세트 산(60 ㎖)의 혼합물에 용해시켰다. 이 반응 혼합물에 1-메틸테 트라히드로-2H-피라늄 테트라플루오로보레이트(5.4 g)를 첨가하였고 반응이 완료될 때까지 교반하였다. 반응이 완료된 후에, 0℃ 미만에서 물과 디이소프로필 에테르를 첨가하였다. 수용액 층을 분리하였고, 0℃ 미만에서 메탄올로 첨가하였다. 여과에 의해 수득된 고체를 분리하였고, 물에서 용해시켰다. 상기 투명한 용액을 디클로로메탄으로 세척하였고, 그 다음에 디클로로메탄 용액에서 앰버라이트-LA-2 처리하였다. 상기 수용액 층을 통상적인 방법에 따라 염 제조를 위하여 사용하였다.
본원 발명의 장점 및 현저한 특징은:
1) 트리메틸옥소늄 테트라플루오로보레이트(TMOTFB)의 사용을 피하게 하고, SAMe를 제조하기 위한 입체선택적인 메틸레이션 반응을 수행하는 동안 디메틸 에테르 가스를 방출시키지 않고, 따라서 그와 관련된 위험을 피하게 한다.
2) 상기 입체선택적인 메틸레이션의 방법이 간단하고, 정방향으로 진행되어 제조용 규모에서 잘 수행될 수 있다;
3) 상기 방법은 효소 또는 효모를 위한 소정의 생물학적인 공급원을 필요로 하지 않아서 일관된 이성질체 비율을 준다;

Claims (7)

  1. 식 (I)의 S-아데노실-L-메티오닌(S-adenosyl-L-methionine, SAMe) 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염의 제조를 위한 입체선택적인 제조방법으로서:
    Figure 112007006369364-PCT00004
    상기 제조방법은 산이 있는 상태에서 또는 산이 없는 상태에서, 식 (II)의 S-아데노실-L-호모시스테인(S-adenosyl-L-homocysteine, SAH) 또는 그의 염과 식(III)의 메틸화시키는 물질을 반응시키는 단계를 포함하는 방법.
    Figure 112007006369364-PCT00005
    상기에서 R과 R1은 같거나 또는 다를 수 있고, 각각은 서로 독립적으로, 2 내지 8 개의 탄소 원자를 갖는 선형 또는 분지형의 알킬 라디칼, 또는 상기 R과 R1 에 결합되어 있는 O 원자와 함께, 0 및 S로 이루어진 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 추가로 포함할 수 있는 3 내지 8개의 원자로 구성되는 포화된 고리를 형성하도록 하는 2 내지 8 개의 탄소 원자를 갖는 선형 또는 분지형의 알킬 라디칼이다.
  2. 제1항에 있어서, 상기 식(III)의 화합물이 1-메틸디옥사늄 테트라플루오로보레이트, 1-메틸테트라히드로푸라늄 테트라플루오로보레이트, 1-메틸테트라히드로-2H-피라늄 테트라플루오로보레이트, 1-메틸옥시라늄 테트라플루오로보레이트, 1-메틸옥세타늄 테트라플루오로보레이트 또는 그 혼합물들로부터 선택되는 것인 방법.
  3. 제1항에 있어서, 상기 사용되는 산이 트리플루오로아세트 산(TFA), 트리클로로아세트 산, 트리브로모아세트 산과 같은 지방족 카르복시 산, 및 HBr, HCl, HF, H2SO4, HClO4 및 H3PO4와 같은 무기산 또는 그의 혼합물로부터 선택되고, 바람직하게는 농축 H2SO4와 트리플루오로아세트 산의 혼합물인 방법.
  4. 제1항에 있어서, 수득된 상기 식(I)의 화합물의 에난티오머 비율(enantiomer ratio)이 (S,S)-이성질체가 58 내지 75%이고 (R,S)-이성질체가 25 내지 42%인 방법.
  5. 상기 식(III)의 옥소늄 염의 제조를 위한 제조방법으로서, 상기 제조방법은 유기용매가 있는 상태에서 또는 유기용매가 없는 상태에서 식(IV)의 화합물과 보론 트리플루오라이드 가스 또는 그의 복합체 및 에피클로로히드린을 반응시키는 단계를 포함하는 방법.
    Figure 112007006369364-PCT00006
    상기에서 X는 CH2 또는 O 또는 S를 나타내고, 'm'과 'n'은 독립적으로 0부터 6까지 변화할 수 있다.
  6. 상기 식 (I)의 S-아데노실-L-메티오닌(S-adenosyl-L-methionine, SAMe) 또는 그의 약제학적으로 허용되는 염의 제조를 위한 입체선택적인 제조방법으로서:
    Figure 112007006369364-PCT00007
    상기 제조방법은 산이 있는 상태에서 또는 산이 없는 상태에서, 식 (II)의 S-아데노실-L-호모시스테인(S-adenosyl-L-homocysteine, SAH) 또는 그의 염과, 1- 메틸디옥사늄 테트라플루오로보레이트, 1-메틸테트라히드로푸라늄 테트라플루오로보레이트, 1-메틸테트라히드로-2H-피라늄 테트라플루오로보레이트, 1-메틸옥시라늄 테트라플루오로보레이트, 1-메틸옥세타늄 테트라플루오로보레이트 또는 그 혼합물들로부터 선택되는 메틸화시키는 물질과 반응시키는 단계를 포함하는 방법.
    Figure 112007006369364-PCT00008
  7. 제1항에 있어서, 상기 방법/제조방법이 상기 S-아데노실-L-메티오닌을 사용하여 약제학적으로 허용되는 염의 제조를 추가로 포함하는 것인 방법/제조방법.
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