KR102129005B1

KR102129005B1 - 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시키는 홍삼추출물 및 이의 제조방법

Info

Publication number: KR102129005B1
Application number: KR1020170161898A
Authority: KR
Inventors: 박종대; 신왕수; 양병욱; 이부용; 김귀진; 송지현; 최서윤; 고성권; 조순현; 임병옥; 윤석순; 함영태
Original assignee: 고려인삼연구 주식회사
Priority date: 2017-11-29
Filing date: 2017-11-29
Publication date: 2020-07-02
Anticipated expiration: 2037-11-29
Also published as: KR20190063080A

Abstract

본 발명은 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시키는 홍삼추출물 및 이의 제조방법에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 단순히 면역력을 개선시키는 것이 아니라 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시킴으로써 면역조절능력이 저하됨에 따라 유발될 수 있는 갑상선 면역 항진증, 후천성 용혈성 빈혈, 만성 관절 류머티즘 등의 자가면역질환이나 염증반응을 예방 또는 치료할 수 있는 홍삼추출물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

Description

고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시키는 홍삼추출물 및 이의 제조방법{Red ginseng extranct improving a decreased immunomodulating ability and method for preparing the same}

면역조절능력이 저하되는 첫번째 원인은 자율신경의 불균형, 즉 스트레스이다. 스트레스를 받으면 교감신경이 긴장하고, 면역조절능력이 저하됨으로써 면역력이 저하되거나 과잉 면역 상태로 자가면역질환, 염증반응 등을 유발하게 된다. 정신이 신경계에 영향을 미치고, 신경계가 다시 면역계에 영향을 미치는 것이다. 실제로, 모든 자가면역질환 환자들이 대부분 극심한 스트레스를 겪었다고 말한다.

이러한 면역조절능력의 저하는 단순히 면역력을 개선시키는 방법으로 치유되기 어렵고 면역조절능력이 저하되는 원인을 찾아 이를 바로잡는 원인치료인 자연치유는 시간이 오래 걸리고 치유 전 각종 합병증이 유발될 수 있는 문제가 있다.

한편, 고려인삼(Panax ginseng C. A. Meyer)은 한의학에서 장기복용이 가능하고 무독한 상약으로 분류되어 오랫동안 한약 또는 장수 건강식품으로 활용되어 왔다. 실험적으로도 고려인삼은 독성이 거의 없는 것으로 평가되었고 지금까지 많은 임상실험에서도 유의할만한 부작용은 발견되지 않았다.

중의학적으로 고려인삼은 양(陽), 미국삼은 음(陰)으로 분류되어 고려인삼은 열을 올리고 미국삼은 열을 내리는 효과가 있어 더운 지역에 사는 사람들에게 고려인삼보다 미국삼이 더욱 유용성이 있다고 인식되는 경향이 있다.

특히, 홍삼은 온성 약물로서 몸을 따뜻하게 해서 혈액순환을 촉진시켜 우리 몸의 신진대사를 촉진해주고, 이런 작용을 통해서 여러 가지 다양한 효과, 즉 항고혈압, 항당뇨, 항비만, 혈행개선, 노화방지, 방사선 방어, 학습능력개선 등의 효과를 나타낸다고 볼 수 있으나, 한방에서는 흔히들 열을 낸다고 하여 몸에 열이 많은 사람이나, 예를 들어 감기나 고열이 있을 때는 피하는 것이 좋다고 인식되어 있다.

또한, 홍삼농축액은 추출 방식 및 조건에 따라 농축액에 포함되는 사포닌의 종류 및 함량이 상이할 수 있고, 이에 따라 효능이 크게 상이할 수 있으며, 특히 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시켜 저하된 면역조절능력에 의해 유발되는 갑상선 면역 항진증, 후천성 용혈성 빈혈, 만성 관절 류머티즘 등의 자가면역질환이나 염증반응의 예방 또는 치료 효능을 갖는 사포닌 종류 및 함량에 대해서는 전혀 밝혀진 바가 없다.

따라서, 단순히 면역력을 개선시키는 것이 아니라 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시킴으로써 면역조절능력이 저하됨에 따라 유발될 수 있는 갑상선 면역 항진증, 후천성 용혈성 빈혈, 만성 관절 류머티즘 등의 자가면역질환이나 염증반응을 예방 또는 치료할 수 있는 홍삼추출물 및 이의 제조방법이 절실히 요구되고 있는 실정이다.

본 발명은 단순히 면역력을 개선시키는 것이 아니라 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시킬 수 있는 홍삼추출물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시키는 효능을 구현하는 특정 사포닌의 종류 및 함량에 의한 홍삼추출물의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은,

고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시키는 효능을 갖는 홍삼추출물로서, 진세노사이드 Rb1, Rg3(S), Rg2(S) 및 Re를 포함하고, 상기 홍삼추출물의 총 중량을 기준으로, Rb1의 함량이 1.74 내지 2.166 중량%, Rg3(S)의 함량이 1.162 내지 1.246 중량%, Rg2(S)의 함량이 0.497 내지 0.565 중량%, 및 Re의 함량이 0.109 내지 0.177 중량%인 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물을 제공한다.

여기서, 진세노사이드 Rg1을 추가로 포함하고, Rg1의 함량은 0.16 중량% 이하인 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물을 제공한다.

또한, 진세노사이드 Rg1의 함량은 0.05 내지 0.16 중량%인 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물을 제공한다.

나아가, 상기 홍삼추출물의 총 중량을 기준으로, Rb1의 함량이 1.80 내지 2.166 중량%, Rg3(S)의 함량이 1.00 내지 1.246 중량%, Rg2(S)의 함량이 0.50 내지 0.565 중량%, 및 Re의 함량이 0.109 내지 0.177 중량%인 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물을 제공한다.

그리고, 상기 홍삼추출물의 총 중량을 기준으로, 진세노사이드의 총 중량이 3.554 내지 5.513 중량%인 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물을 제공한다.

상기 홍삼추출물을 포함하는 건강식품을 제공한다.

한편, 홍삼을 물 또는 에틸알콜에서 추출하는 단계, 침전 후 침전조의 상등액을 농축시키는 단계, 농축액을 살균시키는 단계, 및 70 내지 110℃에서 40 내지 56시간 동안 농축액을 숙성시키는 단계를 포함하는, 상기 홍삼추출물의 제조방법을 제공한다.

여기서, 상기 농축액을 숙성시키는 단계는 90 내지 110℃에서 48 내지 56시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물의 제조방법을 제공한다.

또한, 상기 홍삼을 물로 추출하는 경우 원료인 홍삼 중량의 8배 이상에 해당하는 정제수로 추출되는 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물의 제조방법을 제공한다.

그리고, 상기 침전은 8 내지 10℃에서 12시간 이상 동안 수행되고, 상기 농축은 상기 상등액을 30 브릭스(Brix) 이상으로 1차 농축한 후 70 브릭스(Brix) 이상으로 2차 농축하는 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물의 제조방법을 제공한다.

본 발명에 따른 홍삼추출물은 특정 사포닌의 종류 및 함량의 조합을 통해 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시킴으로써 면역조절능력이 저하됨에 따라 유발될 수 있는 갑상선 면역 항진증, 후천성 용혈성 빈혈, 만성 관절 류머티즘 등의 자가면역질환이나 염증반응을 예방 또는 치료할 수 있는 우수한 효과를 나타낸다.

또한, 본 발명에 따른 홍삼추출물의 제조방법은 정밀하게 제어되고 조절된 공정조건에 의해 제조되는 홍삼추출물이 특정 사포닌의 종류 및 함량을 갖도록 하여 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시키는 효능을 구현하는 우수한 효과를 나타낸다.

도 1은 본 발명에 따른 홍삼추출물의 제조방법을 개략적으로 도시한 것이다.
도 2는 실시예에서 제조한 홍삼추출물에 대해 HPLC 크로마토그래피 분석에 의해 성분분석을 수행한 결과를 그래프이다.
도 3은 실시예에서 실험동물 마리당 6주간 동안 측정한 1일 평균 음수량 분석 결과를 도시한 그래프이다.
도 4는 실시예에서 혈액샘플 중 혈청 분석 결과를 도시한 그래프이다.
도 5는 실시예에서 혈액샘플 중 혈장 분석 결과를 도시한 그래프이다.

이하, 본 발명의 바람직한 실시예들을 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명된 실시예들에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 실시예들은 개시된 내용이 철저하고 완전해질 수 있도록, 그리고 당업자에게 본 발명의 사상이 충분히 전달될 수 있도록 하기 위해 제공되어지는 것이다.

본 발명에 따른 홍삼추출물은 홍삼의 추출물로서 전분 등의 탄수화물, 생리활성 물질로서 트리테르페노이드(triterpenoid) 계통의 인삼 사포닌(saponins)인 진세노사이드(ginsenoside), 항암 작용을 갖는 폴리아세틸렌, 항산화 작용을 갖는 페놀계 화합물, 방사선 방어 작용을 갖는 인삼 단백질, 면역조절 작용을 하는 산성 다당체 등을 포함할 수 있다.

여기서, 상기 진세노사이드는 동경대학의 시바타(Shibata) 그룹에 의해 그 화학구조가 확인되었고, 고려인삼에 함유되어 있는 인삼 사포닌은 약 30여종으로 서양삼 14종과 삼칠삼(Panax notoginseng) 15종에 비해 월등히 많은 종류의 인삼 사포닌이 함유되어 있다.

상기 진세노사이드는 당부분(sugar)인 글리콘(glycone)과 비당부분(non-sugar)인 아글리콘(aglycone) 또는 게닌(genin)으로 구성되어 있는 배당체이고, 특히 진세노사이드의 비당부분은 사포게닌이라고 부르는데 진세노사이드는 이러한 비당부분의 골격 구조에 따라 4환성의 담마란(dammarane)계와 5환성의 올레아난(oleanane)계의 2가지로 크게 분류되며, 담마란계 진세노사이드는 다시 비당부분에 붙어 있는 수산기(-OH)의 수에 따라서 2개인 경우에는 프로토파낙사디올(protopanaxadiol) 진세노사이드, 3개인 경우에는 프로투파낙사트리올(protopanaxatriol) 진세노사이드로 나뉜다.

구체적으로, 진세노사이드의 종류별 약리작용을 살펴보면, 올레아난계 진세노사이드 Ro(Ro)는 항염증작용, 해독작용, 항트로빈 작용, 혈소판 응집억제작용, 항 간염작용, 대식세포 활성화 작용 등을 한다.

또한, 프록토파낙사디올계 진세노사이드로서 Rb1, Rb2, Rc, Rd, Rh2, Rg3(S), Rg5, Rk1 등이 포함될 수 있고, 이 중에서 Rb1은 중추신경억제 작용, 최면작용, 진통작용, 정신안정작용, 해열작용, 혈청 단백질 합성 촉진작용, 중성지방분해억제, 합성촉진(인슐린유사)작용, 콜레스테롤 생합성 촉진작용, 프라스민 활성화 작용, RNA 합성 촉진작용, 호르몬 분비촉진작용 등을 하고, Rb2는 중추신경억제 작용, DNA·RNA 합성 촉진작용, 프라스민 활성화 작용, 부신피질자극 호르몬 분비 촉진작용, 항당뇨작용 등을 하고, Rc는 중추신경억제 작용, RNA 합성억제 작용, 혈청 단백질 합성 촉진작용, 프라스민 활성화 작용, 부신피질자극 호르몬 분비 촉진작용 등을 하고, Rd는 부신피질 호르몬 분비 촉진작용 등을 하고, Rh2는 암세포 증식억제작용, 종양성장 억제작용 등을 하고, Rg3(S)는 암세포 전이억제작용, 혈관이완 작용, 뇌세포 손상 보호작용, 항암제의 내성억제 작용, 혈소판 응집억제 작용 등을 하고, Rg5는 암세포 증식억제 작용 등을 한다.

그리고, 프록토파낙사트리올 진세노사이드로서 Re, Rf, Rg1, Rg2(S) 등이 포함될 수 있고, 이 중에서 Re는 중추신경억제 작용, DNA·RNA 합성 촉진작용, 프라스민 활성화 작용, 부신피질 자극 호르몬 분비 촉진작용 등을 하고, Rf는 뇌신경세포와 관련한 진통작용 등을 하고, Rg1은 중추신경 흥분작용, 항피로작용, 피로회복작용, 기억/학습기능 개선작용, DNA·RNA 합성 촉진작용, 프라스민 활성화 작용 등을 하며, Rg2(S)는 혈관성 뇌손상에 의한 기억감퇴 개선, 기억합습 개선작용, 신경세포 보호작용, 혈관내피세포 중식 촉진작용 등을 한다.

본 발명자들은 홍삼추출물에 함유된 진세노사이드 중 Rb1, Rg1, Rg3(S), Rg2(S), Re 등의 함량이 특정 함량으로 조절되는 경우 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시키는 효능이 유발되는 것을 실험적으로 입증함으로써 본 발명을 완성하였다.

즉, 인간이 고온스트레스를 받으면 시상하부에서 부신피질자극호르몬방출호르몬(corticotropin releasing hormone; CRH)이 분비되어 이에 의해 뇌하수체에서 부신피질자극호르몬(adrenocorticotropic hormone; ACTH)이 분비되고 이에 의해 부신에서 코르티솔(cortisol)이 혈액 내로 분비됨으로써 면역조절능력에 영향을 미치는데, 본 발명에 따른 홍삼추출물은 상기 부신피질자극호르몬(ACTH) 및/또는 코르티솔(cortisol)의 분비를 억제함으로써 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시켜 면역조절능력이 저하되는 경우 유발되는 갑상선 면역 항진증, 후천성 용혈성 빈혈, 만성 관절 류머티즘 등의 자가면역질환이나 염증반응을 예방 또는 치료할 수 있는 것으로 예측된다.

구체적으로, 본 발명에 따른 홍삼추출물은 이의 총 중량을 기준으로 진세노사이드 Rb1의 함량이 1.74 내지 2.166 중량%, 바람직하게는 1.80 내지 2.166 중량%, Rg3(S)의 함량이 1.162 내지 1.246 중량%, 바람직하게는 1.00 내지 1.246 중량%, Rg2(S)의 함량이 0.497 내지 0.565 중량%, 바람직하게는 0.50 내지 0.565 중량%, 그리고 Re의 함량이 0.109 내지 0.177 중량%일 수 있다. 또한, Rg1의 함량은 0.16 중량% 이하, 예를 들어, 0.05 내지 0.16 중량%일 수 있다.

그리고, 본 발명에 따른 홍삼추출물은 이의 총 중량을 기준으로 진세노사이드의 총 함량이 약 3.554 내지 5.513 중량%, 바람직하게는 3.554 내지 4.782 중량%일 수 있다.

본 발명에 따른 홍삼추출물은 앞서 기술한 바와 같이 상기 홍삼추출물에 포함된 진세노사이드의 종류별로 정밀하게 제어된 함량에 의해 홍삼이 갖는 본래의 효능을 유지하는 동시에, 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시키는 효능을 갖는 우수한 효과를 나타낼 수 있다.

도 1은 본 발명에 따른 홍삼추출물의 제조방법을 개략적으로 도시한 것이다. 도 1에 도시된 바와 같이, 본 발명에 따른 홍삼추출물은 아래 단계 a) 내지 d)가 순처적으로 수행되는 제조방법에 의해 제조될 수 있다.

a) 홍삼을 물 또는 에틸알콜에서 추출하는 단계

b) 침전 후 침전조의 상등액을 농축시키는 단계

c) 농축액을 살균시키는 단계

d) 70 내지 110℃에서 40 내지 56시간 동안 농축액을 숙성시키는 단계

상기 a) 단계에서, 추출 대상인 홍삼은 바람직하게는 4년근 이상의 홍삼일 수 있고, 상기 홍삼은 추출 전에 육안으로 식별 가능한 이물질이 제거되고, 또한 자력 10,000 gauss 이상의 마그네틱바(magnetic bar)로 철분 등이 제거될 수 있다.

또한, 상기 홍삼을 물로 추출하는 경우 원료인 홍삼 중량의 8배 이상에 해당하는 정제수로 추출하고, 80±2℃에서 24시간 동안 추출하는 공정을 3회 반복할 수 있다.

a) 단계에서 추출한 후 b) 단계에서 농축시키기 전에, 상기 추출물을 0.5 마이크로필터로 여과하고 자력 10,000 gauss 이상의 마그네틱바로 잔류 철분을 추가로 제거할 수 있다.

상기 b) 단계는 예를 들어 추출액을 8 내지 10℃에서 12시간 동안 침전시킨 후 침전조의 상등액을 700 mmHg 및 60℃ 하에서 30 브릭스(Brix) 이상으로 농축하는 제1 농축 단계 및 제1 농축 단계에서 농축된 농축액을 다시 70 브릭스(Brix) 이상으로 농축하는 제2 농축 단계로 수행할 수 있다. 한편, 상기 c) 단계의 살균 공정은 예를 들어 90℃에서 2시간 동안 수행될 수 있다.

한편, 상기 d) 단계에서 농축액은 바람직하게는 90 내지 110℃에서 48 내지 56시간 동안 숙성시킬 수 있다.

본 발명에 따른 홍삼추출물은 액상이나 분말, 알약, 캡슐 등의 고상으로 제조될 수 있고, 차, 엑기스, 음료, 환, 당침 제품 등의 음료, 기능성식품, 건강식품 등으로 생산 및 유통되어 소비될 수 있다.

[실시예]

1. 제조예

본 발명에 따른 제조방법에 의해 실시예에 해당하는 홍삼추출물(점도 약 150,000 cPs, 고형분 약 61.56%, 색도는 진한 갈색, 명도가 22,47±2.82, 적색도가 2.26±1.08, 황색도가 15.87±1.59)을 제조했고, HPLC 크로마토그래피 분석에 의해 성분분석을 수행한 결과는 도 2 및 아래 표 1에 나타난 바와 같다.

진세노사이드	함량(중량%)
Rb1	1.953
Rg3(S)	1.204
Rg2(S)	0.531
Re	0.143
Rg1	0.032

2. 고온스트레스 및 이에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시키는 효능 평가

(1) 행동관찰 및 음수량 평가

실험동물로서 7주령 된 수컷 흰쥐(SD계)를 (주)오리엔트바이오로부터 25마리 구입한 후 1주일간의 적응기간을 거친 뒤 260mm×800mm×1,830mm 사이즈(체적 : 1,045 ℓ)의 고온환경 부가 장비를 이용하여 실험동물에 고온에 의한 스트레스를 부가한 후 실시예의 홍삼추출물을 투여하여 상기 홍삼추출물의 고온스트레스에 대한 방어효능을 평가했다.

구체적으로, 실험동물은 총 3군, 즉 1) 실온(24±1℃)군(RT) 5마리, 2) 고온에 의한 스트레스(40±1℃/2h/day) 비투여군(HS) 10마리, 3) 고온에 의한 스트레스(40±1℃/2h/day) 투여군(HS+JP5) 10마리로 구성하고, 3) 고온에 의한 스트레스 투여군에 대해서는 실시예의 홍삼추출물을 100 mg/kg/day(HS+JP5-L) 또는 300 mg/kg/day(HS+JP5-H)의 농도로 2㎖씩 경구투여했다.

행동관찰은 총 16일간 진행되었으며 음수량 평가는 총 6주간 진행되었다.

초기 0~8일간 행동관찰 결과는 아래 기재된 바와 같다.

- 고온에 의한 스트레스 시작 ~ 약 30분 : 2) 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS) 및 3) 고온에 의한 스트레스 투여군(HS+JP5) 대부분의 실험동물들이 가만히 웅크리고 있는 등 활동량이 감소하였다.

- 약 30분 ~ 약 1시간 : 물을 마시기 시작하고, 서로 싸우는 등의 공격적 행동이 관찰되었다.

- 약 1시간 ~ 약 1시간 30분 : 엎드린 형태의 평소 모습과는 달리 대부분의 실험동물들이 복부를 하늘로 향하여 쓰러져 있으며, 케이지 벽면에 무기력하게 기대어 있거나 방향성을 잃고 쓰러지는 것이 관찰되었다.

- 약 1시간 30분 ~ 2시간 : 음수를 마시는 것이 증가했을 뿐 아니라 턱에서부터 복부까지 물을 바르는 행동이 관찰되었으며, 대부분의 실험동물의 털에서 윤기가 사라져 거칠어지며 고르지 않게 뭉쳐짐이 관찰되었다.

- 고온에 의한 스트레스 2시간 부가 종료 후 : 2) 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS) 및 3) 고온에 의한 스트레스 투여군(HS+JP5)의 실험동물의 털 형태나 행동양태가 1) 실온군(RT)의 실험동물과 유사해질 때까지 회복에 약 2시간 소요되었다.

이 후 8~16일간 행동관찰 결과는 아래 기재된 바와 같다.

- 0~3일 : 2) 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS)의 실험동물 대부분은 고온에 의한 스트레스 부가시작 후 짧은 시간 내에 드러눕듯 쓰러졌으며, 고온에 의한 스트레스 부가 종료 후에도 움직이지 못하고 쓰러져 있었으나, 3) 고온에 의한 스트레스 투여군(HS+JP5)의 실험동물은 일부만이 2) 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS)의 실험동물과 유사한 행동이 관찰되었다.

- 4~7일 : 2) 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS)의 실험동물 대부분은 고온에 의한 스트레스 부가시 활동량이 미미하고, 드러눕듯 쓰러지기 전 엎드린 상태로 있는 시간이 증가된 것이 관찰되었으나, 3) 고온에 의한 스트레스 투여군(HS+JP5)의 실험동물은 일부만이 2) 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS)의 실험동물과 유사한 행동이 관찰되었고, 고온에 의한 스트레스 부가 종료 후 털을 고르는 개체들도 관찰되었다.

- 8~11일 : 2) 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS)의 실험동물 대부분은 엎드린 상태 시간 증가 외에도 서로 싸우는 등 과격한 행동이 나타나는 케이지가 관찰되었으나, 3) 고온에 의한 스트레스 투여군(HS+JP5)의 실험동물은 일부만이 2) 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS)의 실험동물과 유사한 행동이 관찰되었다.

- 12~15일 : 2) 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS)의 실험동물과 3) 고온에 의한 스트레스 투여군(HS+JP5)의 실험동물 사이에 쓰러짐, 음수사용량, 고온에 의한 스트레스 부가 후 회복시간 등에서 반응강도의 차이가 뚜렷하게 관찰되었다.

음수량 분석 결과는 도 3에 나타난 바와 같다.

도 3에 나타난 바와 같이, 고온에 의한 스트레스 투여군(HS+JP5-L 및 HS+JP5-H)의 실험동물은 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS)의 실험동물에 비해 실험동물 마리당 1일 평균 음수량이 적은 것으로 확인됨으로써, 본 발명에 따른 실시예의 홍삼추출물은 오히려 고온에 의한 스트레스를 저감시켜, 결과적으로 고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시킬 것으로 예측되었다.

(2) 혈청 분석

실험동물로서 7주령 된 수컷 흰쥐(SD계)를 (주)오리엔트바이오로부터 154마리 구입한 후 1주일간의 적응기간을 거친 뒤 260mm×800mm×1,830mm 사이즈(체적 : 1,045 ℓ)의 고온환경 부가 장비를 이용하여 실험동물에 4주 동안 고온에 의한 스트레스를 부가한 후 실시예의 홍삼추출물을 투여하여 상기 홍삼추출물의 스트레스에 의한 면역불균형 해소 효능을 평가했다.

구체적으로, 실험동물은 총 4군, 즉 1) 실온(24±1℃)군(RT) 28마리, 2) 고온에 의한 스트레스(40±1℃/2h/day) 비투여군(HS) 14마리, 3) 고온에 의한 스트레스(40±1℃/2h/day) 저농도(100 mg/kg/day) 투여군(HS+JP5-L) 28마리, 4) 고온에 의한 스트레스(40±1℃/2h/day) 고농도(300 mg/kg/day) 투여군(HS+JP5-H) 28마리로 구성하고, 3) 고온에 의한 스트레스 저농도 투여군(HS+JP5-L)에 대해서는 실시예의 홍삼추출물을 100 mg/kg/day의 농도로 2㎖씩 경구투여했고, 4) 고온에 의한 스트레스 고농도 투여군(HS+JP5-L)에 대해서는 실시예의 홍삼추출물을 300 mg/kg/day의 농도로 2㎖씩 경구투여했으며, 홍삼추출물 투여 전 및 투여 1주일 후 채취한 안와채혈을 통해 혈액 샘플을 채취하여 혈청과 혈장을 분리한 후 각각 분석했다.

상기 혈청 중 면역세포인 T-cell 및 Antigen presenting cell(APC)에서 분비되는 사이토카인 중 IL-2 및 TNF-α의 분비량, 그리고 B-cell에서 분비되는 면역글로블린 중 IgA, IgM 및 IgE의 분비량을 측정했고, 결과는 도 4a 내지 4e에 도시된 바와 같다. 고온스트레스에 의해 면역조절능력이 저하되면 체내의 항상성 유지를 위해 사이토카인 IL-2 및 TNF-α, 그리고 면역글로블린 IgA, IgM 및 IgE이 더 분비된다.

한편, 상기 혈장 중 대표적인 고온스트레스 반응 호르몬인 ACTH 및 Cortisol의 분비량을 측정했고, 결과는 도 5a 및 5b에 도시된 바와 같다. 고온스트레스를 받으면 스트레스에 대항하여 항상성을 유지하기 위해서 뇌하수체 및 부신에서 스트레스와 관련된 호르몬인 ACTH 및 Cortisol의 분비가 증가한다.

도 4 및 5에 도시된 바와 같이, 고온에 의한 스트레스 저농도 투여군(HS+JP5-L)의 실험동물 또는 고온에 의한 스트레스 고농도 투여군(HS+JP5-H)의 실험동물은 고온에 의한 스트레스 비투여군(HS)의 실험동물에 비해 사이토카인 IL-2 및 TNF-α, 그리고 면역글로블린 IgA, IgM 및 IgE의 분비량이 현저히 감소하였고, 호르몬 ACTH 및 Cortisol의 분비량이 크게 감소한 것으로 확인됨으로써, 본 발명에 따른 실시예의 홍삼추출물은 오히려 고온스트레스를 저감시키는 동시에 고온스트레스로 저하된 면역조절능력을 개선시키는 효능을 보유하는 것으로 확인되었다.

본 명세서는 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만, 해당 기술분야의 당업자는 이하에서 서술하는 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경 실시할 수 있을 것이다. 그러므로 변형된 실시가 기본적으로 본 발명의 특허청구범위의 구성요소를 포함한다면 모두 본 발명의 기술적 범주에 포함된다고 보아야 한다.

Claims

고온스트레스에 의해 저하된 면역조절능력을 개선시키는 효능을 갖는 홍삼추출물로서,
진세노사이드 Rb1, Rg3(S), Rg2(S) 및 Re를 포함하고,
상기 홍삼추출물의 총 중량을 기준으로, Rb1의 함량이 1.74 내지 2.166 중량%, Rg3(S)의 함량이 1.162 내지 1.246 중량%, Rg2(S)의 함량이 0.497 내지 0.565 중량%, 및 Re의 함량이 0.109 내지 0.177 중량%인 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물.
제1항에 있어서,
진세노사이드 Rg1을 추가로 포함하고, Rg1의 함량은 0.16 중량% 이하인 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물.
제2항에 있어서,
진세노사이드 Rg1의 함량은 0.05 내지 0.16 중량%인 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 홍삼추출물의 총 중량을 기준으로, Rb1의 함량이 1.80 내지 2.166 중량%, Rg3(S)의 함량이 1.00 내지 1.246 중량%, Rg2(S)의 함량이 0.50 내지 0.565 중량%, 및 Re의 함량이 0.109 내지 0.177 중량%인 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 홍삼추출물의 총 중량을 기준으로, 진세노사이드의 총 중량이 3.554 내지 5.513 중량%인 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 홍삼추출물을 포함하는 건강식품.
홍삼을 물 또는 에틸알콜에서 추출하는 단계,
침전 후 침전조의 상등액을 농축시키는 단계,
농축액을 살균시키는 단계, 및
70 내지 110℃에서 40 내지 56시간 동안 농축액을 숙성시키는 단계를 포함하는, 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 홍삼추출물의 제조방법.
제7항에 있어서,
상기 농축액을 숙성시키는 단계는 90 내지 110℃에서 48 내지 56시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물의 제조방법.
제7항에 있어서,
상기 홍삼을 물로 추출하는 경우 원료인 홍삼 중량의 8배 이상에 해당하는 정제수로 추출되는 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물의 제조방법.
제7항에 있어서,
상기 침전은 8 내지 10℃에서 12시간 이상 동안 수행되고,
상기 농축은 상기 상등액을 30 브릭스(Brix) 이상으로 1차 농축한 후 70 브릭스(Brix) 이상으로 2차 농축하는 것을 특징으로 하는, 홍삼추출물의 제조방법.