KR101135784B1 - 거대분자의 흡수 - Google Patents

Abstract

본 발명은 (a) 활성 거대분자 성분; 및 (b) 비복합 담즙산 또는 담즙산염; 및 (c) 프로필 갈레이트, 부틸 하이드록시 아니솔(BHA) 및 이들의 유사체 및 유도체, 또는 이의 혼합물 중에서 선택되는 첨가제의 혼합물을 함유하는 약학 조성물을 제공한다.

거대분자, 비복합 담즙산, 담즙산염, 프로필 갈레이트, 부틸 하이드록시 아니솔

Description

거대분자의 흡수{UPTAKE OF MACROMOLECULES}

본 발명은 약학 조성물, 및 장의 내강으로부터 장의 벽을 통과하여 주위 체내로 거대분자의 흡수 증강 효능이 있는 물질을 약물 제조시 사용하는 용도에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 본 발명은 지금까지 사용되어온 배합물에 비해 담즙산염의 성능(즉, 효능, 재현성 또는 안정성 측면의 성능)을 향상시키기 위한 방도로서 담즙산염과 다른 물질을 혼합한 배합물을 기술한다.

담즙산염은 장의 투과 증강제로서 매우 효과적이라는 것은 이미 잘 알려져 있다. 담즙산염은 세포의 인지질 막으로 쉽게 병입되어, 세포 행동과 형태에 다수의 변화를 유발할 수 있는 표면 활성 화합물이다. 작용의 정확한 기작은 알려져 있지 않지만, 가능한 1가지 작용 방식은 장세포 사이의 치밀한 연접부를 일시적으로 개방시켜, 부근의 물질을 이들 세포 사이를 거쳐 장세포층의 바닥에 존재하는 세포외액으로 유입시키는 것이다. 이러한 방식의 증거는 방해없이 전기를 전도할 수 있는, 세포 사이의 수성 채널의 형성을 나타내는, 장세포 세포 단층의 경상피(trans epithelial) 전기저항(TEER) 감소를 입증하는 연구실 실험을 통해 제시되어 있다.

장의 연동 작용은 약학 배합물이 보다 큰 표면적으로 신속 분산되는 것을 고무시키는 경향이 있으므로, 배합물 중의 담즙산염은 빠르게 용해되어야 하며, 담즙 산염의 국소 농도가 최대 효과를 발휘하기 위해 가능한 한 높게 유지되도록 용액 형태로 가능한 한 장기간 동안 유지되는 것이 중요하다. 이러한 이유로, 대부분의 연구원들은 타우로콜레이트 또는 타우로데옥시콜레이트와 같은 복합 담즙산염을 이용하였는데, 그 이유는 이러한 담즙산염들이 장에서 관찰될 수 있는 pH 3 정도의 낮은 pH를 비롯한 광범위한 pH에서 쉽게 용해되기 때문이다. 하지만, 이러한 담즙산염은 키노데옥시콜레이트(chenodeoxycholate) 또는 데옥시콜레이트와 같은 데옥시 담즙산염 등의 일부 비복합형이 종종 중성 훨씬 이하의 pH에서 불용성임에도 불구하고, 이러한 비복합형보다 효능이 떨어진다. 따라서, 비복합 담즙산염의 투과 증강제로서의 성능은 작용하는 장 부위의 pH에 따라 매우 가변적일 것으로 예상되며, 즉 담즙산염이 용액(유효성)인지, 침전물(불량한 유효성)인지의 여부를 측정해야 할 것이다.

재현성 부족의 문제점을 극복하기 위해서는, 담즙산염이 용해성 형태로 존재하도록 장의 pH를 7.5보다 높게 조정하는 제제와 담즙산염을 혼합하는 시도가 이루어져 있다. 하지만, 불행히도, 이러한 제제의 배합물 중으로의 첨가는 펩타이드 및 단백질과 같이 배합물에 함유된 민감한 활성물질의 안정성과 보전성에 악영향을 미칠 수 있다. 또한, 장 프로테아제의 최적 pH는 약 pH 8로 알려져 있어서, 상기 시도의 채택은 내인성 프로테아제 활성으로 인한 분해를 증가시킬 수 있다.

본 발명은 대안적 시도로서, 담즙산염을 첨가제, 즉 일반적으로 소장에서 관찰되는 pH값에 상응하는 7 이하의 pH 값에서 놀랍게도 상기 담즙산염을 용액으로 유지시킬 수 있는 첨가제와 혼합하는 시도에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 프로필 갈레이트 또는 유도체와 담즙산염의 공혼합, 또는 유기산염과 담즙산염의 공혼합이, 모의 장액에 다양한 비율로 첨가되었을 때 장액의 초기 pH가 pH 5 정도의 낮은 pH임에도 불구하고 쉽게 용해되는 고형분(solid powder)을 형성시킬 수 있음을 발견했다. 급식 또는 절식 상태의 장 내강 함유물의 모델로서 사용될 수 있는, 적당한 모의 장액에 대해서는 드레스맨과 동료(Dressman, B Jennifer & Reppas, Christos. European Journal of Pharmaceutical Sciences, 11 Suppl 2(2000) S73-S80, "In vitro-in vivo correlations for lipophilic, poorly water-soluble drugs")에 의해 기술된 바 있다.

본 발명에 기술된 조성물은 장용 코팅 캡슐 또는 정제로서, 경구 투여용의 고체-용량 배합물을 제조할 때 특히 유리하다. 이러한 조성물의 고체 성분은 또한 비수성액 중의 분산물로서 약학 배합물에 포함될 수도 있다.

매우 수용성 물질인 프로필 갈레이트의 경우에는, 놀랍게도 키노데옥시콜레이트를 비롯한 담즙산염의 공혼합이 프로필 갈레이트의 수용해도, 특히 모의 장액에서의 프로필 갈레이트의 용해도를 현저하게 증강시킬 수 있음을 발견했다. 따라서, 키노데옥시콜레이트 및 프로필 갈레이트는 pH 7 이하의 pH 수준에서 각각의 수용해도를 상호적으로 증강시킬 수 있다. 프로필 갈레이트 자체는 심한 불수용성인 점을 감안할 때, 키노데옥시콜레이트에의 첨가를 통해 용해가 보다 쉬워진 배합물이 생성된다는 것은 예상하기 어려운 발견으로서 당업자는 이러한 절차를 시도하려는 동기를 얻은 바 없을 것이다.

본 발명은 (a) 활성 거대분자 성분; 및

(b) 비복합 담즙산 또는 담즙산염; 및

(c) 프로필 갈레이트 및 부틸 하이드록시 아니솔 및 이의 유사체 및 유도체, 또는 이의 혼합물 중에서 선택되는 첨가제

로 이루어진 혼합물을 함유하는 약학 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 약학 조성물에, 장벽을 따라 거대분자를 흡수시키는 증강제인, 프로필 갈레이트, BHA 및 이의 유사체 및 유도체 중에서 선택되는 첨가제, 또는 이의 혼합물과 함께 사용되는 비복합 담즙산 또는 담즙산염의 용도를 제공한다.

또 다른 구체예로서, 본 발명은 인간 또는 동물 신체로의 활성 거대분자 성분의 흡수를 증강시키기 위하여, 활성 거대분자 성분을 함유하는 약제의 제조에, 프로필 갈레이트 및 BHA와 이의 유사체 및 유도체 중에서 선택되는 첨가제 또는 이의 혼합물과 함께 사용되는 비복합 담즙산 또는 담즙산염의 용도를 제공한다.

본 발명의 영역에 속하는 활성 거대분자 성분에는 인체 또는 동물 체내에 흡수되었을 때, 특히 장벽을 통해 흡수되었을 때 유리한 효과를 나타낼 수 있는 모든 분자가 포함된다. 유리한 효과는 예컨대 치료 효과, 미용 효과 또는 예방 또는 피임과 같은 방지 효과일 수 있다. 활성 거대분자 성분은 천연(생물학적), 합성 및 반합성 기원일 수 있다.

거대분자는 1000Da 이상, 바람직하게는 2000Da 이상 및 가장 바람직하게는 3000Da 이상의 분자량을 갖는 분자로 바람직하게 정의된다. 활성 거대분자 성분을 포함한 거대분자의 예는 다음을 포함한다:

1. 인슐린; 칼시토닌; 인간 혈청 알부민; 성장 호르몬; 성장 호르몬 유리 인자; 갈라닌(galanin); 부갑상선 호르몬; 키노겐(kinogen), 프로트롬빈, 피브리노겐, 인자 VII, 인자 VIII, 인자 IX와 같은 혈액응고단백질; 에리스로포이에틴 및 의태 EPO; GCSF 및 GMCSF를 포함하는 집락 자극인자; 혈소판기원성장인자; 표피성장인자; 섬유모세포성장인자; 전환성장인자; GLP-1; GAG; 시토카인(cytokine); 인슐린유사성장인자; 뼈 및 연골 유도 인자; 향신경인자; IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12를 포함하는 인터루킨; 인터페론 감마, 인터페론-la, 인터페론 알파를 포함하는 인터페론; TNF 알파; TNF 베타; TGF 베타; 콜레라 톡신 A 및 B 절편; 대장균 장독소 A 및 B 절편; 세크레틴; 히스톤 디아세틸라아제, 수퍼옥시드 디스뮤타아제, 카탈라아제, 아데노신 디아미나아제, 티미딘 키나아제, 시토신 디아미나아제, 프로티아제, 리파아제, 카르보히드라아제, 뉴클레오티다아제, 폴리머라아제, 키나아제 및 포스파타아제를 포함하는 효소; 특히 비타민, 금속 이온, 아미노산 또는 지질 또는 지단백질에 결합 및/운반하는, 콜레스테롤 에스테르 운반 단백질, 인지질 운반 단백질, HDL 결합 단백질과 같은 운반 또는 결합 단백질; 콜라겐, 엘라스틴 또는 섬유결합소와 같은 결합조직단백질; 액틴, 미오신, 디스트로핀 또는 미니-디스트로핀과 같은 근육 단백질; 신경세포, 간, 심장 또는 지방세포 단백질; 세포독성 단백질; 시토크롬; 세포의 복제, 성장 또는 분화를 유발할 수 있는 단백질; 세포내 신호 단백질 또는 세포외 신호 단백질(예, 호르몬)과 같은 신호 분자; BDNF, CNTF, NGF, IGF, GMF, aFGF, bFGF, VEGF, NT3, T3 및 HARP와 같은 영양인자; 아포지단백질(apolipoprotein); 항체 분자; T-세포 수용체 및 시토키닌, 인터페론 또는 케모카인(chemokine)에 대한 수용체와 같은 가용성 형태의 수용체; 항원 에피토프 및 절편을 포함하는 단백질 또는 펩타이드; 및 상기 임의의 물질의 유사체, 접합체, 및 서열 변형체와 같은 폴리펩타이드 및 단백질.

2. 긴 사슬 직쇄 또는 원형 단일-, 이중- 또는 삼중-나선 DNA, 단일-, 이중-, 삼중-나선 RNA와 같은 폴리뉴클레이티드, 안티센스 DNA 또는 RNA와 같은 올리고뉴클레오타이드, 및 PNA 및 포스포티오에이트(phosphothioate) 유도체를 포함하는 그들의 유사체. 일 구체예에서, 본 발명에 사용되는 폴리뉴클레오타이드는 CpG 모티프를 함유하는 것이 바람직하다. 폴리뉴클레오타이드의 암호 서열은 치료 산물을 암호화할 수도 있으며, 특히 암호 서열은 세포외 단백질(예, 분비 단백질); 세포내 단백질(예, 세포질, 핵 또는 막 단백질); 세포 막에 존재하는 단백질; 응고 단백질(예, 키노겐, 프로트롬빈, 피브리노겐, 인자 VII, 인자 VIII 또는 인자 IX)과 같은 혈액 단백질; 이화, 동화 위장 효소, 대사(예, 해당작용 또는 크렙스 사이클) 효소 또는 세포 신호 효소, 지질, 지방산, 글리코겐, 아미노산, 단백질, 뉴클레오타이드, 폴리뉴클레오타이드(예, DNA 또는 RNA) 또는 탄수화물의 분해 또는 변형 효소(예, 프로티아제, 리파아제 또는 카르보히드라아제), 또는 단백질로부터 화학적 부(moiety)를 흡수 또는 첨가하는 효소와 같은 변형 효소(예, 키나아제 또는 포스파타아제)와 같은 효소; 운반 또는 결합 단백질(예, 비타민, 금속 이온, 아미노산 또는 지질을 결합 및/또는 운반하는 콜레스테롤 에스테르 운반 단백질, 인지질 운반 단백질 또는 HDL 결합 단백질 등); 결합조직단백질(예, 콜라겐, 엘라스틴 또는 섬유결합소); 근육 단백질(예, 액틴, 미오신, 디스트로핀 또는 미니-디스트로핀); 신경세포, 간, 심장 또는 지방세포 단백질; 세포독성 단백질; 시토크롬; 세포의 복제, 성장 또는 분화를 유발할 수 있는 단백질; 유전자의 전사 또는 해독을 보조하거나 전사 또는 해독을 조절하는 단백질(예, 전사인자, 또는 전사인자 또는 폴리머라아제에 결합하는 단백질); 분자내 신호 분자 또는 세포외 신호 분자와 같은 신호 분자(예, 호르몬); 항체, T 세포 수용체, MHC 분자, 시토카인(예, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, TNF-α, TNF-β, TGF-β), 인터페론(예, IFN-γ, IFN-1a, IFN-α), 케모카인(예, MIP-1, MIP-1, RANTES), 면역 수용체(예, 상기 언급된 시토카인, 인터페론 또는 케모카인 중 어느 하나의 수용체와 같은 시토카인, 인터페론 또는 케모카인의 수용체) 또는 세포 표면 마커(대식세포, T 세포, B 세포, NK 세포 또는 가지돌기 세포 표면 마커)(예, CD 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 16, 18, 19, 28, 40 또는 45; 또는 그들의 천연 리간드), 영양인자(예, BDNF, CNTF, NGF, IGF, GMF, aFGF, bFGF, VEGF, NT3, T5 및 HARP) 또는 아포리포단백질과 같은 면역계 단백질; 종양억제인자(예, p53, Rb, RaplA, DCC 또는 k-rev); 자살 단백질(티미딘 키나아제 또는 시토신 디아미나아제); 또는 유전자 억제인자를 암호화할 수도 있다. 본 발명에 유용한 폴리뉴클레오타이드에 의해 암호화된 이러한 단백질 및 펩타이드는 면역원성, 즉 면역계에 의해 생성되는 항체에 대응하는 단백질의 활성에 대한 특이적 항원을 포함할 수 있다.

이러한 폴리뉴클레오타이드는 암호 서열에 작동가능하게 연결된 조절 서열을 가질 수도 있다. 이러한 조절 서열은 전형적으로 임의의 진핵세포생물 또는 그러한 진핵세포생물을 감염시키는 바이러스의 조절 서열일 수 있다. 폴리뉴클레오타이드는 복제의 오리진(origin)을 포함할 수 있다.

폴리뉴클레오타이드는 화학적으로 변형될 수 있다. 이것은 뉴클레아제에 대한 그들의 내성을 증강시킬 수 있거나 세포에 유입되는 능력을 증강시킬 수 있다. 예를 들어, 포스포로티오에이트 올리고뉴클레오타이드가 사용될 수 있다. 다른 데옥시뉴클레오타이드 유사체로는 메틸포스포네이트, 포스포아미데이트, 포스포로디티오에이트, N3'P5'-포스포아미데이트 및 올리고리보뉴클레오타이드 포스포로티오에이트 및 그들의 2'-O-알킬 유사체 및 2'-O-메틸리보뉴클레오타이드 메틸포스포네이트를 포함한다. 선택적으로 혼합 골격 올리고뉴클레오타이드(MBOs)가 사용될 수 있다. MBOs는 포스포티오에이트 올리고디옥시뉴클레오타이드의 분절 및 적절하게 위치한 변형 올리고디옥시 또는 올리고리보뉴클레오타이드의 분절을 포함한다. MBOs는 포스포로티오에이트 결합의 분절 및 비이온성이며 뉴클레아제에 대해 매우 내성인 메틸포스포네이트 또는 2'-O-알킬올리고리보뉴클레오타이드와 같은 다른 변형 올리고뉴클레오타이드의 다른 분절을 보유한다.

본 발명에서 사용하기 위한 바람직한 폴리뉴클레오타이드는 세포 또는 세포 물질, 원핵성 물질, 진핵성 물질, 핵 물질, 염색질 물질, 히스톤 또는 단백질 물질과 실질적으로 유리되거나 연합된 형태인 것이 바람직하다. 폴리뉴클레오타이드는 실질적으로 분리된 형태로 존재할 수 있거나 실질적으로 정제된 형태로 존재할 수 있는데, 이 경우에 폴리뉴클레오타이드는 일반적으로 제조물 중에 90% 초과, 예컨대 95% 이상, 98% 이상 또는 99% 이상의 폴리뉴클레오타이드 또는 건조 중량으로 존재한다. 따라서 폴리뉴클레오타이드는 '나출형 DNA(naked DNA)'의 형태로 존재할 수 있다.

3. 헤파린, 저분자량 헤파린, 폴리만노오스, 시클로덱스트린 및 리포폴리사카라이드와 같은 폴리사카라이드.

4. 전술한 각 성분 중 임의의 제제 또는 모든 제제, 또는 각각의 조합물 또는 추가 제제와의 조합물.

본 발명의 바람직한 구체예에 있어서, 흡수될 활성 거대분자 성분은 칼시토닌, 인슐린, 저분자량 헤파린, 에리스로포이에틴, 인간 성장 호르몬 및 부갑상선 호르몬 중에서 선택되는 것이다.

보다 바람직하게는, 거대분자 성분은 인슐린, 칼시토닌 또는 부갑상선 호르몬이다. 거대분자 성분이 인슐린인 경우에, 조성물은 인슐린 민감제를 추가로 함유하는 것이 적당하다. 인슐린 민감제는 흡수되는 인슐린에 대한 신체 반응을 증가시킬 수 있다. 적당한 민감제는 당업계에 공지되어 있고, 그 예에는 트로글리타존, 피오글리타존, 로시글리타존 및 글루타존류 분자에 속한 다른 구성원이 포함된다.

비복합 담즙산 또는 담즙산염은 키노데옥시콜린산, 데옥시콜린산, 콜린산 및 이의 나트륨 염들 중에서 선택되는 것이 적당하다. 담즙산염은 키노데옥시콜린산염인 것이 바람직하다.

첨가제는 프로필 갈레이트 및 부틸 하이드록시 아니솔 및 이의 유사체 및 유도체와, 유기산 또는 이의 약학적 허용성 염, 또는 이의 혼합물 중에서 선택되는 것으로서, 이러한 첨가제는 pH 5 내지 6.5 사이의 장액에 첨가되었을 때, 비복합 담즙산염을 용액으로 유지시킬 수 있고, 장에 도입되었을 때 장액의 pH를 pH 7.5 이상으로 상승시키지 않는 것이다.

첨가제는 프로필 갈레이트 또는 이의 유도체일 수 있다. 프로필 갈레이트의 적당한 유도체에는 갈산 에스테르가 있다. 이러한 에스테르는 직쇄 또는 분지쇄 C_1-12 알킬, C_{1 -12} 알킬옥시, C_{1 -12} 알킬티오 또는 C_{2 -12} 알케닐 에스테르일 수 있다. 이러한 화합물은 경우에 따라 할로겐, 직쇄 또는 분지쇄 C_1-12 알킬, C_1-12 알킬옥시, C_1-12 알킬티오 또는 C_{2 -12} 알케닐 에스테르로 치환된다.

첨가제는 BHA 또는 이의 유사체 또는 유도체일 수 있다. 적당한 유사체 또는 유도체에는, 방향족 고리에 결합된 메틸 기 또는 메톡시 기 및/또는 하이드록시 기에 대해 오르토 위치의 수소가, 임의의 위치에 특히 할로겐 원자에 의한 치환이 있거나 없는 직쇄 또는 분지쇄 C_{1 -12} 알킬, C_{1 -12} 알킬옥시, C_{1 -12} 알킬티오 또는 C_{2 -12} 알케닐로 치환된, 하이드록시 아니솔의 유사체 및 유도체가 포함된다.

담즙산염 대 첨가제, 예컨대 프로필 갈레이트의 비는 중량 기준으로 1:1 내지 5:1인 것이 바람직하고, 보다 바람직하게는 4:3 내지 5:2, 가장 바람직하게는 약 2:1인 것이다.

첨가제는 프로필 갈레이트가 바람직하고, 적당한 담즙산염 대 프로필 갈레이트의 비는 약 2:1(중량 기준)인 것이 가장 바람직하다.

본 발명의 바람직한 구체예에서, 비복합 담즙산염은 키노데옥시콜레이트이고 첨가제는 프로필 갈레이트이다.

본 발명의 조성물에 함유되는 비복합 담즙산염/첨가제(흡수 증강제) 및 활성 거대분자 성분의 양은, 흡수되었을 때 일반적으로 유리한 효과를 미칠 수 있는 적당한 양의 활성 거대분자 성분의 공존하에 흡수를 증강시키는 비복합 담즙산염/첨가제 흡수 증강제의 유효 농도가 장세포 장벽층(장 벽)에서 달성될 수 있도록 선택한다. 본 발명의 실시자는 치료 효능에 필수적인 관련 활성 거대분자 성분의 양(예컨대, 혈액 농도 수준)을 기준으로 비복합 담즙산염/첨가제 흡수 증강제 및 활성 거대분자 성분의 양을 선택할 수 있을 것이다. 예를 들어, 캡슐에 함유된 혼합물에서, 비복합 담즙산염/첨가제 흡수 증강제의 총 중량 대 활성 거대분자 성분의 중량비는 1:1 내지 200:1 범위가 바람직하고, 보다 바람직하게는 3:1 내지 100:1 범위, 가장 바람직하게는 5:1 내지 50:1 범위이다.

활성 거대분자 성분의 절대량은 사용된 투여량 섭생 및 관여 환자와 관련하여 일반적으로 유리한 효과를 발휘하는데 필요한 물질의 투여량을 기준으로 선택할 수 있다. 이러한 투여량의 결정은 본 발명의 실시자의 수행 범위에 속하는 것이다.

본 발명의 조성물은 추가로 1종 이상의 다른 흡수 증강제 화합물, 예컨대 중간쇄 모노글리세라이드, 킬레이트제 등을 함유할 수도 있다.

본 발명의 조성물은 추가로 의약물의 조제에 통상적으로 사용되는 임의의 첨가제를 선택적으로 포함할 수 있으며, 그 예에는 항산화제, 항미생물제, 현탁화제, 충전제, 희석제, 흡수제, 활주제(glidant), 결합제, 응결방지제, 윤활제, 붕해제, 팽창제, 점도 조절제, 가소화제 및 산도 조절제(구체적으로, 장 환경을 7 내지 7.5 사이로 조정하는 제제)가 포함된다. 적당한 팽창제에는 소듐 스타치 글리콜레이트, 사전젤라틴화된 전분, 미세결정형 셀룰로스, 크로스프로비돈 및 마그네슘 알루미늄 실리케이트 또는 이의 혼합물이 포함된다. 소듐 스타치 글리콜레이트 및 다른 다당류계 팽창제는 5 내지 10중량%의 양으로 존재할 수 있다. 크로스프로피돈은 5 내지 30중량%의 양으로 존재할 수 있다.

혼합물이 캡슐이나 정제에 함유되어 있는 본 발명의 조성물에서, 배합물은 실질적으로 무수물인 것이 바람직하다. 본 발명의 보다 바람직한 구체예에서, 전체 조성물은 실질적으로 무수물인 것이 좋다. 본 발명의 문장 중에서 실질적으로 무수물이란, 혼합물의 중량을 기준으로 5% 미만, 바람직하게는 1% 미만, 보다 바람직하게는 0.5% 미만의 물이 존재하는 것을 의미한다.

본 발명의 조성물은 사용된 활성 거대분자 성분에 따라서, 치료법에 의한 인간 또는 동물 신체의 다양한 증상 및 질환의 치료에 사용되거나, 또는 인간 또는 동물 신체의 질환 및 증상의 진단에 필수적인 거대분자의 도입에 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 약학 조성물 또는 미용 조성물인 것이 바람직하다.

본 발명의 조성물에서, 캡슐에 함유된 혼합물은 용액 형태 또는 마이크로미립자 분산액 형태인 액체, 반고체 또는 겔일 수 있다. 즉, 흡수될 활성 거대분자 성분은 용액 형태로 또는 마이크로미립자 분산액 형태로서 배합물에 혼입될 수 있다. 또는, 조성물은 고체 형태일 수 있다.

본 발명의 조성물은 활성 거대분자 성분과 담즙산염/첨가제 흡수 증강제의 실질적으로 무수물인 혼합물을 제조하는 단계, 이러한 혼합물을 미코팅 캡슐에 충전시키는 단계, 및 원하는 투과성이 달성되도록 상기 캡슐을 적당한 중합체 혼합물로 코팅하는 단계를 통해 제조되는 것이 바람직하다. 사용되는 부가 부형제의 성질에 따라서, 본 발명의 약학 조성물은 액체, 고체, 반고체 또는 겔 형태일 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 협측 및 설하 점막과 같은 여러 점막 조직, 비측 구개, 폐, 직장, 장관(대장 및 소장 포함) 및 질로 접근하는 모든 경로를 통해 투여하기에 적당하다. 액체, 반고체 또는 겔 배합물인 경우, 본 발명의 약학 조성물은 무수물 또는 가수물일 수 있다.

본 발명의 조성물을 작용시키고자 한 부위가 장인 경우에, 조성물은 위에서 견딜 수 있는 장용 코팅 내에 둘러싸여, 소장이나 결장의 조직에 도달할 때까지 배합물의 성분이 희석되지 않고 인접된 상태로 함께 유지되는 것이 바람직하다. 이러한 배합물은 무수물인 것이 적당하다. 이와 같이 고체 배합물이 장용 코팅 캡슐이나, 또는 정제 형태, 바람직하게는 장용 코팅 정제를 통해 투여될 수도 있으나, 액체 형태의 조성물이 장용 코팅 캡슐로서 투여되어도 좋다.

장용 코팅은 위의 자연 조건을 견뎌내고 장의 원하는 위치에서 투과성이 되는 것으로 적당히 선택한다. 이는, 장의 길이를 따라 변화되는 pH 조건하에서 측정되는 것이 바람직하다. 작용 부위가 소장이면, 장용 코팅은 pH 3 내지 7, 바람직하게는 5.5 내지 7, 보다 바람직하게는 5.5 내지 6.5에서 투과성이 되고 그 함유물을 방출시키는 것이 바람직하다. 목적 작용 부위가 결장이면, pH 6.8 또는 그 이상에서 장용 코팅이 투과성이 되어 그 함유물을 방출시키는 것이 바람직하다.

적당한 장용 코팅은 당업계에 공지되어 있고, 그 예에는 셀룰로스 아세테이트, 프탈레이트, 셀락 및, L 및 S 시리즈의 유드라지트, 구체적으로 Eudragit L12.5P, L12.5, L100, L100-55, L30 D-55, S12.5P, S12.5 및 S100 중에서 선택되는 것과 같은 폴리메타크릴레이트가 포함된다. 또한, 트리에틸 시트레이트 및 폴리소르베이트 80과 같은 적당한 습윤제 또는 가소제도 코팅 혼합물에 포함될 수 있다.

캡슐, 바람직하게는 HPMC 또는 젤라틴 캡슐에 적당한 코팅의 선택은 유드라지트 제품을 지원설명하는 입수용이한 문헌 및 당업자의 경험을 기반으로 당업자라면 용이하게 결정할 수 있다.

목적한 작용 부위가 비측 점막인 경우에, 배합물은 스프레이로서 투여될 수 있는 무수 분말 또는 수용액 형태일 수 있다.

목적한 작용 부위가 직장인 경우, 투여 방법은 캡슐 외피에 담겨있거나 또는 침식성 좌약의 기질에 혼입되어 있는 무수 액체 또는 고체 형태인 것이 적당하다.

질 투여용의 경우, 겔 형태의 배합물의 투여도 적당하다.

도면에서, 도 1A 및 도 1B는 모의 장액에서의 키노데옥시콜레이트/프로필 갈레이트 혼합물(도 1A) 및 키노데옥시콜레이트 단독물(도 1B)의 용해도를 도시한 것이다.

도 2는 모의 장액에서의 키노데옥시콜레이트/카프로에이트 혼합물의 용해도를 도시한 것이다.

도 3은 모의 장액에서의 데옥시콜레이트/프로필 갈레이트 혼합물의 용해도를 도시한 것이다.

도 4는 모의 장액에서의 콜레이트/소듐 카프로에이트 혼합물의 용해도를 도시한 것이다.

이하 실시예는 본 발명을 예시하는 것으로서, 한정적 의미로 해석되어서는 안된다.

실시예 1 활성 거대분자 성분으로서 인슐린을 함유하는 키노데옥시콜레이트/프로필 갈레이트 혼합물의 제조

가온하에, 키노데옥시콜린산 1g을 수산화나트륨 용액(30mg/ml) 3.4g에 용해시켰다. 수득된 용액을 실온으로 만든 뒤, 추가로 수산화나트륨 용액을 첨가하여 pH를 7.85로 조정했다. 그 다음, 프로필 갈레이트 500mg을 첨가하고, 실온에서 진탕하에 용해시켰다. pH를 7.45로 조정하고, 재조합 인간 인슐린 56.25mg을 37℃, 교반하에 첨가했다. 모든 고체가 용해된 후, 용액의 총 중량이 8g이 되도록 증류수를 보충하고, 동결시킨 뒤 하룻밤동안 동결건조하여 무수 결정 분말을 수득했다.

키노데옥시콜레이트만을 함유하는 조성물은 프로필 갈레이트를 적당한 부분에서 제외시키는 것 외에는 전술한 바와 같은 방식으로 제조했다. 전술한 바와 같이, 건조 전의 최종 용액의 pH는 7.4 내지 7.5 사이로 조정했다.

실시예 2 키노데옥시콜레이트/부틸화된 하이드록시 아니솔 혼합물의 제조

프로필 갈레이트 대신에 부틸화된 하이드록시 아니솔을 사용한 것을 제외하고는, 실시예 3에 기술된 바와 동일한 방법을 이용하였다.

실시예 3 모의 장액에서, 프로필 갈레이트의 존재 여부에 따른 키노데옥시콜레이트의 용해

모의 장액은 이하에 제시된 레시피에 따라 제조했는데, 여기서 '-', 'L' 및 'H'는 장액에 존재하는 염의 여러 농도, 즉 각각 0, 저농도 및 고농도를 의미한다.

낮은 pH 완충액 (급식 상태)
성분	pH 5.0/-	pH 5.0/L	pH 5.0/H
아세트산	8.65g	8.65g	8.65g
소듐 타우로콜레이트	8.12g	8.12g	8.12g	15mM
레시틴	2.8g	2.8g	2.8g	3.75mM
염화칼륨	-	7.7g	15.2g
증류수	1 리터	1 리터	1 리터
수산화나트륨	pH 5 조정량	pH 5 조정량	pH 5 조정량

낮은 pH 완충액 (단식 상태)
성분	pH 6.5/-	pH 6.5/L	pH 6.5/H
인산이수소칼륨	3.9g	3.9g	3.9g
소듐 타우로콜레이트	1.6g	1.6g	1.6g	3mM
레시틴	0.6g	0.6g	0.6g	0.75mM
염화칼륨	-	7.7g	15.2g
증류수	1 리터	1 리터	1 리터
수산화나트륨	pH 6.5 조정량	pH 6.5 조정량	pH 6.5 조정량

실시예 1에서 제조한 무수 분말 6x10mg을 편평 바닥형 96웰 미량역가 평판의 각 웰에 담고, 37℃에서 항온처리하에 15분 간격으로 SIF 25㎕씩을 연속 첨가했다. 부드럽게 혼합 후, 620nm 평판 판독기에서 웰 함유물의 광학 투명도를 측정하여 용해도를 평가했다. 도 1A 및 도 1B의 그래프에서 나타나는 광학 밀도의 증가(>0.5)는 침전물의 존재를 시사한다. 관찰되는 바와 같이, 10mg 키노데옥시콜레이트 10mg이 150㎕ 부피까지 희석되었을 때, 시험된 모든 조건마다 침전이 일어났으나, 키노데옥시콜레이트/프로필 갈레이트 혼합물에서는 침전이 일어나지 않고 시험된 모든 모의 장액 변형물에서 용해된 상태가 유지되었다.

실시예 4 모의 장액에서의 키노데옥시콜레이트/부틸화된 하이드록시 아니솔 혼합물의 용해

실시예 2에서 제조한 키노데옥시콜레이트/부틸화된 하이드록시 아니솔을 이용한 것을 제외하고는 실시예 3에서 이용한 것과 동일한 조건을 사용했다. 기술된 모든 장액 완충액 200㎕ 이하에서 10mg 희석시 거의 투명한 용액이 수득되었다.

실시예 5 모의 장액에서의 데옥시콜레이트/프로필 갈레이트 혼합물의 용해

키노데옥시콜린산 대신에 데옥시콜린산을 이용하고 담즙산염 대 프로필 갈레이트의 비를 1:1 wt:wt으로 사용한 것을 제외하고는 실시예 3에서 이용된 것과 동일한 조건을 사용했다. 소듐 데옥시콜레이트만이 이용된 조성물과 대조적으로, pH 6.5의 장액 완충액 200㎕ 이하로 10mg이 희석되었을 때 거의 투명한 용액이 수득되었다. 그 결과는 도 3에 도시했다.

실시예 6 어린 돼지에서의 키노데옥시콜레이트/프로필 갈레이트/인슐린 혼합물의 생체내 효능

실시예 1에서 제조한 배합물(인슐린 100iu, 키노데옥시콜린산 66mg 및 프로필 갈레이트 33mg을 함유하는 배합물 또는 인슐린 100iu 및 키노데옥시콜린산만을 함유하는 배합물)을 무수 압착 분말로서 기문을 통해 8마리 어린 돼지(각각 체중 약 40kg)의 공장으로 투여했다. 혈액의 포도당 농도는 6시간 이상의 간격으로 측정하고, 혈장 포도당의 AUC 평균 변화를 h.mmol/l로 계산했다. 이하에 정리한 데이터로부터 알 수 있듯이, 배합물에 PG의 함유는 재현성 및 효능을 높이는 역할을 한 다.

	반응체 수	AUC
인슐린/키노/PG	8/8	-3.23
인슐린/키노 단독	4/8	-1.40

실시예 7 어린 돼지에서의 키노데옥시콜레이트/프로필 갈레이트/칼시토닌 혼합물을 함유한 정제의 생체내 효능

실시예 1에서 제조한 배합물(연어 칼시토닌(sCT, 5000iu) 1mg, 키노데옥시콜린산 66mg, 프로필 갈레이트 33mg, 발연 실리카 1mg 및 크로스포비돈 20mg 함유)을 압착 정제로서 기문을 통해 8마리 어린 돼지(각각 체중 약 40kg)의 공장으로 투여했다. 혈액의 칼슘 농도는 6시간 이상의 간격으로 측정하고, 혈장 칼슘의 AUC 평균 변화를 h.mmol/l로 계산했다. 이하에 정리한 데이터로부터 알 수 있듯이, 상기 조성물은 대조군과 비교했을 때, sCT와 관련된 칼슘의 유의적 저하를 초래했다.

처치	AUC	표준 편차
거짓투여	-0.03	0.23
400iu 연어 칼시토닌 s.c.	-1.79	1.18
배합물 i.j.	-2.35	1.03

실시예 9 건강한 사람 지원자에서의 키노데옥시콜레이트/프로필 갈레이트/인슐린 혼합물의 생체내 효능

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활성물질과 부형제를 다음과 같은 비율로 함유하는 배합물을 실시예 1에서와 같이 제조했다:

인슐린 87iu

프로필 갈레이트 33mg

키노데옥시콜레이트 66mg

발연 실리카 1mg

소듐 스타치 글리콜레이트 0.5mg

170iu 및 340iu를 함유하는 배합물의 양을 증류수 2ml 및 4ml에 각각 용해하고, 코-공장 캐뉼라를 통해 건강한 지원자에게 투여했다. 투여 10분 이내에 인슐린 수준이 증가하는 것으로 관찰되었고, 처치군과 대조군에서 수득되는 최고 값은 이하 표에 제시한 바와 같다.

처치	평균 값(pmol/L)	s.d
대조군(모든 검체, 무처치)	6.0	1.7
170iu(3 검체)	25.0	3.6
340iu(2 검체)	553.5	283.5

Claims (25)

1. (a) 활성 거대분자 성분; 및

   (b) 비복합(non-conjugated) 담즙산 또는 비복합 담즙산염; 및

   (c) 프로필 갈레이트, 부틸 하이드록시 아니솔(BHA), 및 이의 혼합물 중에서 선택되는 첨가제

   의 혼합물을 함유하는 약학 조성물로서,

   상기 (a), (b), 및 (c)의 혼합물은 첨가제 (c)를 1중량% 이상 포함하는, 약학 조성물.
2. 제1항에 있어서, 조성물이 pH 3 내지 7에서 투과성이 되는 장용 코팅으로 코팅된 것인, 약학 조성물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 5중량% 미만의 물이 함유되어 있는 것이 특징인, 약학 조성물.
4. 삭제
5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 비복합 담즙산염/첨가제(b+c) 대 활성 거대분자 성분의 중량비가 적어도 5:1인 것이 특징인, 약학 조성물.
6. 제1항 또는 제2항에 있어서, 혼합물이 용액 또는 마이크로미립자 분산액 형태이거나, 혼합물이 고체 형태인 것이 특징인 약학 조성물.
7. 삭제
8. 제1항 또는 제2항에 있어서, 활성 거대분자 성분이 폴리펩타이드 또는 단백질, 폴리뉴클레오타이드, 폴리사카라이드 또는 이의 혼합물인 것이 특징인 약학 조성물.
9. 제8항에 있어서, 활성 거대분자 성분이 인슐린, 칼시토닌, 성장 호르몬, 부갑상선 호르몬 및 에리스로포이에틴 중에서 선택되거나,

   활성 거대 분자 성분이 GLP-1, GCSF, 또는 단일, 이중, 또는 삼중 나선 RNA인 것이 특징인, 약학 조성물.
10. 제9항에 있어서, 활성 거대분자 성분이 인슐린, 또는 칼시토닌, 또는 부갑상선 호르몬인 것이 특징인 약학 조성물.
11. 제10항에 있어서, 활성 거대분자 성분이 인슐린이고, 추가로 인슐린 민감제(insulin sensitizer)를 함유하는 것이 특징인 약학 조성물.
12. 제1항 또는 제2항에 있어서, 비복합 담즙산 또는 담즙산염이 키노데옥시콜레이트인 것이 특징인 약학 조성물.
13. 삭제
14. 삭제
15. 제1항 또는 제2항에 있어서, 인간 또는 동물 신체의 치료적 또는 진단적 처치에 사용되는 약학 조성물.
16. (a) 활성 거대분자 성분;

    (b) 비복합(non-conjugated) 담즙산 또는 비복합 담즙산염; 및

    (c) 프로필 갈레이트, 부틸 하이드록시 아니솔(BHA) 및 이의 혼합물 중에서 선택되는 첨가제

    를 첨가하는 단계를 포함하는,

    상기 (a), (b), 및 (c)를 함유하는 약학 조성물의 제조방법으로서,

    상기 첨가제 (c)는 (a), (b), 및 (c)의 혼합물의 중량을 기준으로 1중량% 이상으로 첨가되는, 약학 조성물의 제조방법.
17. 삭제
18. 제16항에 있어서, 흡수될 활성 거대분자 성분이 폴리펩타이드 또는 단백질, 폴리뉴클레오타이드, 폴리사카라이드 또는 이의 혼합물인 것이 특징인 제조방법.
19. 제18항에 있어서, 흡수될 활성 거대분자 성분이 인슐린, 칼시토닌, 성장 호르몬, 부갑상선 호르몬 및 에리스로포이에틴 중에서 선택되거나,

    흡수될 활성 거대 분자 성분이 GLP-1, GCSF, 또는 단일, 이중, 또는 삼중 나선 RNA인 것이 특징인, 제조방법.
20. 제19항에 있어서, 흡수될 활성 거대분자 성분이 인슐린, 또는 칼시토닌, 또는 부갑상선 호르몬인 것이 특징인, 제조방법.
21. 제20항에 있어서, 흡수될 활성 거대분자 성분이 인슐린이고, 추가로 인슐린 민감제(insulin sensitizer)가 존재하는 것이 특징인, 제조방법.
22. 제16항 및 제18항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 조성물이 5중량% 미만의 물을 포함하는 것이 특징인, 제조방법.
23. 제16항 및 제18항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 흡수될 활성 거대분자 성분을 용액, 마이크로미립자 분산액 또는 고체 형태로서 방향족 알코올에 첨가한 것임이 특징인, 제조방법.
24. 삭제
25. 삭제

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