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KR101052816B1 - 화합물, 조성물 및 방법 - Google Patents

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KR101052816B1
KR101052816B1 KR1020047016771A KR20047016771A KR101052816B1 KR 101052816 B1 KR101052816 B1 KR 101052816B1 KR 1020047016771 A KR1020047016771 A KR 1020047016771A KR 20047016771 A KR20047016771 A KR 20047016771A KR 101052816 B1 KR101052816 B1 KR 101052816B1
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Abstract

본 발명은 KSP 활성의 조절작용으로 세포 증식성 질환 및 장애의 치료에 유용한 화합물에 관한 것이다.

Description

화합물, 조성물 및 방법{COMPOUNDS, COMPOSITIONS AND METHODS}
본 출원은 2002년 4월 17일에 출원된 미국 선출원발명 제 60/373,454호 및 2002년 9월 13일에 출원된 미국 선출원발명 제 60/410,682호에 대한 우선권의 이익을 향유하고자 한다. 상기의 각 선출원발명들은 본원에 결합된다.
본 발명은 유사분열 키네신(mitotic kinesin) KSP(kinesin spindle protein)의 저해제이자 세포증식성 질환, 예를 들면, 암(cancer), 과증식(hyperplasias), 재발협착(restenosis), 심장비대(cardiac hypertrophy), 면역장애(immune disorders), 진균성 장애(fungal disorders) 및 염증(inflammation) 등에 대한 치료에 유용한 조성물에 관한 것이다.
암 치료에 사용되는 약학적 제제 중 미세소관(microtubule)계에 작용하는 택산(taxane)과 빈카 알칼로이드(vinca alkaloid)가 있다. 미세소관은 유사분열 방추체(mitotic spindle)의 일차적인 구성요소이다. 유사분열 방추체는 세포분열의 결과인 두 개의 딸세포(daughter cell) 각각에 대한 게놈(genome) 복제 사본의 분배 를 담당한다. 이러한 약물에 의한 유사분열 방추체의 파괴는 암세포 분열을 억제하고, 암세포 사멸을 유도한다고 추측된다. 그러나, 미세소관은 신경작용(nerve process)의 세포내 전달을 위한 트랙(track)을 포함하는 다른 형태의 세포 구조를 형성한다. 이러한 약물들은 유사분열 방추체만을 특이적으로 표적으로 삼지 않기 때문에, 유용성을 제한하는 부작용(side effect)을 갖게된다.
암 치료에 사용되는 약물의 특이성 개선은 이러한 약물들의 투여와 관련된 부작용이 감소될 수 있다면 치료 목적의 현실화 될 수 있는 이익 때문에 관심의 대상이 되고 있다. 전통적으로, 암 치료에 있어서 효과적인 개선은 새로운 기전(mechanism)을 통해 작용하는 치료약물들의 확인과 관련이 있다. 이러한 예로는 택산 뿐만 아니라, 토포이소머라제 I(topoisomerase I) 저해제인 캄토테신 계열(camptothecin class)이 있다. 상기 두 가지 견지에서 볼 때, 유사분열 키네신은 새로운 항암제로서의 흥미로운 표적이 된다.
유사분열 키네신은 유사분열 방추체의 합성 및 기능에 필수적인 효소이지만, 신경작용에 있어서 다른 미세소관 구조의 일반적인 부분은 아니다. 유사분열 키네신은 모든 유사분열기(mitosis phase) 동안에 필수적인 역할을 한다. 이러한 효소들을 ATP의 가수분해(hydrolysis)에 의해 생성되는 에너지를 미세소관을 따라 세포물질들의 지향성 이동을 유발하는 기계적인 힘으로 전환시키는 "분자모터(molecular motor)"라 한다. 이러한 작업을 위한 충분한 촉매 도메인(catalytic domain)은 대략 340 아미노산(amino acid)으로 이루어진 조밀한 구조이다. 유사분열 동안, 키네신은 미세소관을 유사분열 방추체인 양극성(bipolar) 구조로 조직화 한다. 키네신은 특정 유사분열기와 연관된 유사분열 방추체에서 구조적 변화 뿐만 아니라 방추체 미세소관을 따라 이동하는 염색체(chromosome)의 움직임을 조절한다. 실험적으로 유사분열 키네신 기능을 억제시킬 경우, 유사분열 방추체의 기형(malformation) 또는 기능장애(dysfunction)가 유발 되는데, 그 결과, 빈번하게 세포주기 정지(cell cycle arrest) 및 세포사멸(cell death)을 초래한다.
유사분열 키네신 중 확인된 것은 KSP이다. KSP는 역평행 동종이량체(antiparallel homodimer)로 이루어진 양극성 동종사량체(bioplar homotetramer)로 조립된 양성(+) 말단 지향성 미세소관 모터의 진화학적으로 보존된 키네신 아과(subfamily)에 속한다. 유사분열 동안 KSP는 유사분열 방추체의 미세소관과 결합한다. 인간 세포에서 KSP에 대응되는 항체의 미세주입은 유사분열 전기(prometaphase) 동안에 일어나는 방추체 극단(pole) 분리를 방해하여 단일 극성(monopolar) 방추체를 증가시키고 유사분열 정지와 세포자살(programmed cell death)을 유발한다. 다른 비인간(non-human) 생명체에서 KSP와 관련 키네신은 역평행 미세소관을 묶고 서로에 대하여 상대적으로 미끄러지게 함으로써, 두개의 방추극을 분리시킨다. 또한, 유사분열 후기(anaphase) B 방추체 신장(elongation)과 방추극에서 미세소관의 응축을 조절한다.
인간 KSP(또는 HsEg5로 지칭)는 블란지 등의 문헌(Blangy, et al., Cell, 83:1159-69, 1995; Blangy, et al., J. Biol. Chem., 272:19418-24, 1997; Blangy, et al., Cell Motil Cytoskeleton, 40:174-82, 1998)); 화이트헤드 등의 문헌(Whitehead, et al., Arthritis Rheum., 39:1635-42, 1996); 갈지오 등의 문헌 (Galgio, et al., J. Cell Biol., 135:339-414, 1996); 화이트헤드와 라트너의 문헌(Whitehead and Rattner, J. Cell Sci., 111:2251-61, 1998); 카이저의 문헌(Kaiser, et al., JBC., 274:18925-31, 1999) 및 진뱅크 등록번호 X85137, NM004523 및 U37426(GenBank accession numbers: X85137, NM004523 and U37426)에 기재되어 있고, KSP 유전자(또는 TRIP5로 지칭)의 단편은 이 등의 문헌(Lee, et al., Mol. Endocrinol., 9:243-54, 1995) 및 진뱅크 등록번호 L40372(GenBank accession numbers: L40372)에 기재되어 있으며, 초파리의 KLP61 F/KRP1 30 외에도 제노푸스 KSP 상동체(Xenopus KSP homolog 또는 Eg5로 지칭)가 보고되어 있다.
KSP를 포함하는 유사분열 키네신은 새로운 항 유사분열 화합요법(antimitotic chemotherapeutic)의 발견과 개발에 흥미로운 표적이다. 따라서, 본 발명의 목적은 KSP의 억제에 유용한 화합물, 조성물 및 방법을 제공하는 것이다.
상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 세포 증식성 질환(cellular proliferative disease)의 치료에 사용 가능한 화합물을 제공한다.
상기 화합물은 KSP 억제제이며, 바람직하게는 인간 KSP 억제제(human KSP 유사분열 키네신)이다.
또한, 본 발명은 상기 화합물을 포함하는 조성물 및 세포 증식성 질환의 치료에 사용 가능한 상기 화합물 또는 조성물을 이용하는 방법을 제공한다.
본 발명은 세포 증식성 질환의 치료 및 KSP 활성의 억제에 의한 장애의 치료를 위한 방법에 관한 것이다. 상기의 방법은 단일 입체이성질체(single stereoisomer) 및 입체이성질체의 혼합물을 포함하는 하기 일반식 I로 기재되는 화합물을 이용한다:
Figure 112004047311217-pct00001
(일반식Ⅰ)
이때,
R1은 수소(hydrogen), 선택적으로 치환된 알킬(alkyl-), 선택적으로 치환된 아릴(aryl-), 선택적으로 치환된 아랄킬(aralkyl-), 선택적으로 치환된 헤테로아릴(heteroaryl-) 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬(heteroaralkyl-)로 구성된 군으로부터 선택되고;
R2 및 R2'은 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알콕시(alkoxy), 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로부터 독립적으로 선택되어지거나; 또는 R2 및 R2'은 하나로 합쳐져서 선택적으로 치환된 3 내지 7원환(membered ring)으로 형성되어지며;
R12는 선택적으로 치환된 이미다졸릴(imidazolyl), 선택적으로 치환된 이미다졸리닐(imidazolinyl), -NHR4; -N(R4)(COR3); -N(R4)(SO 2R3a); 및 -N(R4)(CH2R3b)로 구성된 군으로부터 선택되어지고;
R3는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬, R15O 및 R17-NH-로 구성된 군으로부터 선택되어지며;
R3a는 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬 및 R17-NH-로 구성된 군으로부터 선택되어지고;
R3b는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지며;
R4는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴(hetercyclyl-) 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지고;
R5, R6, R7 및 R8은 수소, 아실(acyl), 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알콕시, 할로겐(halogen), 하이드록실(hydroxyl), 니트로(nitro), 시아노(cyano), 디알킬아미노(dialkylamino), 알킬설포닐(alkylsulfonyl), 알킬설폰아미도(alkylsulfonamid), 알킬티오(alkylthio), 카르복시알킬(carboxyalkyl-), 카르복시아미도(carboxamido-), 아미노카르보닐(aminocarbonyl-), 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로부터 독립적으로 선택되어지며;
R15는 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지고; 및
R17은 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 또는 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬이며,
상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염;
상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물; 또는
상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물이다.
본 발명의 일 실시태양에 따르면, R2 또는 R2'에 있어서 어느 하나가 수소일 경우, 다른 하나는 수소가 아니다. 다른 실시태양에서, R2 및 R2'는 각각 수소이고, R1 은 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로부터 선택되어질 경우, R1 은 치환된 페닐기(phenyl)가 아니다.
한 가지 측면에서, 본 발명은 상기 일반식 I의 화합물을 유효투여량으로 투여하여 KSP를 억제함으로써 치료될 수 있는 세포 증식성 질환 및 그밖의 장애를 치료하기 위한 방법; 상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염; 또는, 상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물에 관한 것이다. 이때, 상기 질환 또는 장애는 암, 과증식, 재발협착, 심장비대, 면역장애, 진균성 장애 및 염증을 포함한다.
다른 측면에서, 본 발명은 KSP 키네신의 억제에 유용한 화합물에 관한 것이다. 본 발명의 화합물에는 상기 일반식 I로 나타내어지는 구조를 갖는 화합물, 상기 일반식 I의 화합물을 포함하는 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 상기 일반식 I의 화합물을 포함하는 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물이 포함된다. 또한, 본 발명은 적어도 하나 이상의 약학적 부형제(expicient)가 혼합된 상기 일반식 I, 상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물의 유효투여량을 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 또한, 상기 조성물은 본 발명의 화합물 외에 가능한 화학요법적 약물로 구성된다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 KSP 키네신에 결합하는 화합물, 예를 들어 본 발명의 화합물에 치환(displace) 또는 경쟁적으로 결합될 화합물을 검색(screening)하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 표지된 본 발명의 화합물, KSP 키네신 및 적어도 하나 이상의 후보물질의 결합 단계 및 상기 후보물질의 KSP 키네신으로의 결합 여부의 결정 단계를 포함한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 KSP 키네신 활성의 조절자(modulator)를 검색하는 방법을 제공한다. 상기 방법은 본 발명의 화합물, KSP 키네신 및 적어도 하나 이상의 후보물질의 결합 단계 및 KSP 키네신 활성에 대한 상기 후보물질의 효과를 결정하는 단계를 포함한다.
본 발명에서는 첨부되는 도면에 대한 추가적인 설명을 기재하여 본 발명의 이해를 돕는다.
도 1 및 2는 각각 제조예 A에서 제조된 염에 대한 XRPD 및 MDSC 스캔(scan)을 나타낸 도이고,
도 3은 제조예 B에서 제조된 염에 대한 XRPD 스캔을 나타낸 도이다.
정의
본 발명의 명세서에 사용되는 것으로서, 단어 및 어구는 일반적으로 다른 방법으로 나타내어지는 문맥의 범위를 제외하고, 하기에 기재된 의미로서 나타내어진 다. 하기의 약어 및 용어는 다음의 의미로 사용된다:
Ac = 아세틸(acetyl)
Boc = t-부틸록시 카르보닐(t-butyloxy carbonyl)
Bu = 부틸(butyl)
c- = 사이클로(cyclo)
CBZ = 카르보벤족시(carbobenzoxy) = 벤질옥시카르보닐(benzyloxycarbonyl)
DCM = 디클로로메탄(dichloromethane) = 메틸렌 클로라이드(methylene chloride) = CH2Cl2
DIEA = N,N-디이소프로필에틸아민(N,N-diisopropylethylamine)
DMF = N,N-디메틸포름아마이드(N,N-dimethylformamide)
DMSO = 디메틸 설록사이드(dimethyl sulfoxide)
Et = 에틸(ethyl)
HBTU = O-벤코드리아졸-1-일-N,N,N',N'-테트라메틸류로니움 헥사플루오로포스페이트(O-benzotriazol-1-yl-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate)
HMDS = 헥사메틸디실라잔(hexamethyldisilazane)
HOAc = 아세트산(acetic acid)
IPA = 이소프로필 알콜(isopropyl alcohol)
Me = 메틸(methyl)
Ph = 페닐(phenyl)
Py = 피리딘(pyridine)
rt = 실내온도(room temperature)
sat'd = 포화(saturated)
s- = 2차(secondary)
t- = 3차(tertiary)
TEA = 스리에틸아민(triethylamine)
TFA = 트리플루오로아세트산(trifluoroacetic acid)
THF = 테트라하이드로푸란(tetrahydrofuran)
Tf = 트리플레이트(triflate)
알킬은 포화된 또는 불포화 될 수 있는 구조를 지칭하며, 선형(linear), 분지형(branched) 또는 원형(cyclic) 지방족 탄화수소(aliphatic hydrocarbon) 구조 및 이들의 혼합형 구조를 포함한다. 저급(lower)-알킬은 탄소수(carbon atom) 1 내지 5, 바람직하게는 탄소수 1 내지 4의 알킬기를 지칭하는데, 예를 들어, 메틸(methyl), 에틸(ethyl), 프로필(propyl), 이소프로필(isopropyl), 부틸(butyl), s- 및 t-부틸 및 이와 유사한 화합물을 포함한다. 알킬기는, 바람직하게는 C20 또는 그 이하이고, 더욱 바람직하게는 C13 또는 그 이하이다. 사이클로알킬(cycloalkyl)은 알킬의 한 부분으로서, 탄소수 3 내지 13의 환형 지방족 탄화수소 그룹을 포함하 며, 예를 들어, c-프로필, c-부틸, c-펜틸(pentyl), 노르보닐(norbornyl), 아다만틸(adamantyl) 및 이와 유사한 화합물을 포함한다. 사이클로알킬-알킬은 알킬의 또다른 한 부분으로써, 비사이클로알킬을 통하여 모체에 부착된 사이클로알킬이며, 예를 들어, 사이클로헥실메틸(cyclohexylmethyl), 사이클로프로필메틸(cyclopropylmethyl), 사이클로헥실프로필(cyclohexypropyl) 및 이와 유사한 화합물을 포함한다. 본원에서는 알킬은 알카닐(alkanyl), 알케닐(alkenyl) 및 알키닐(alkynyl) 잔기를 포함하고, 이것은 비닐(vinyl), 알릴, 이소프레닐(isoprenyl) 및 이와 유사한 화합물이 포함되어진다. 알킬렌(alkylene), 알케닐렌(alkenylene) 및 알키닐렌(alkynylene)은 알킬과 같은 잔기를 포함하는 알킬의 다른 한 부분으로 화학구조에 2개의 부착부위를 갖는다. 예를 들어, 알킬렌은 에틸렌(ethylene, -CH2CH2-), 프로필렌(-CH2CH2CH2-), 디메틸프로필렌(dimethylpropylene, -CH2C(CH3)2CH2-) 및 사이클로헥실프로필렌(cyclohexylpropylene, -CH2CH2CH(C6H13)-)을 포함하고, 알케닐렌은 에테닐렌(-CH=CH-), 프로페닐렌(-CH=CH-CH2-) 및 사이클로렉실프로페닐렌(-CH=CHCH(C6H13)-)을 포함하며, 알키닐렌은 에티닐렌(-C=C-) 및 프로피닐렌(-CH=CH-CH2-)을 포함한다. 특이적인 탄소수를 갖는 알킬 잔기의 명명에서, 탄소수를 갖는 모든 기하학적 이성질체(geometric isomer)는 예를 들어, "부틸"은 n-부틸, sec-부틸, 이소부틸(isobutyl) 및 t-부틸을 의미하고, "프로필"은 n-프로필, 이소프로필 및 c-프로필을 포함한다.
알콕시 또는 알콕실은 바람직하게는 산소(oxygen), 즉, 알킬-O-(alkyl-O-)기를 통하여 원 구조에 부착되는 직선형(straight), 분지형(branched) 또는 환형(cyclic) 구조(configuration) 또는 이들의 혼합형 구조의 탄소수 1 내지 8의 알킬 기로, 예를 들어, 메톡시(methoxy), 에톡시(ethoxy), 프로폭시(propoxy), 이소프로폭시(isopropoxy), 사이클로프로필록시(cyclopropyloxy), 사이클로헥실록시(cyclohexy) 및 이와 유사한 화합물을 포함한다. 저급-알콕시는 탄소수 1 내지 4를 포함하는 알콕시기이다.
아실은 카르보닐 기능기를(carbonyl functionality)를 통하여 모체에 부착되는 직선형(straight), 분지형(branched) 또는 환형(cyclic) 구조(configuration) 또는 이들의 혼합형 구조의 탄소수 1 내지 8의 그룹으로서, 포화 또는 불포화되고, 지방족 또는 방향족(aromatic)일 수 있다. 아실 잔기에서 적어도 하나 이상의 탄소가 카르보닐에서 원래 위치의 부착 지점에 질소(nitrogen), 산소(oxygen) 또는 황(sulfur)에 의해 치환될 수 있다. 예를 들어 아세틸(acetyl), 벤조일(benzoyl), 프로피오닐(propionyl), 이소부티릴(isobutyryl), t-부톡시카르보닐(t-butoxycarbonyl), 벤질옥시카르보닐(benzyloxycarbonyl) 및 이와 유사한 화합물이 포함된다. 저급 아실은 탄소수 1 내지 4를 포함하는 아실기이다.
아미노(amino)는 -NH2기이다."치환된 아미노(substituted amino)"는 -NHR 또는 -NRR 그룹을 지칭하는데, 이때 각각의 R은 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알콕시, 선택적으로 치환된 아미노 카르보닐, 선택적으로 치환된 아릴, 선 택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴(geterocyclyl), 아실, 알콕시카르보닐(alkoxycarbonyl), 설파닐(sulfanyl), 설피닐(sulfinyl) 및 예컨데, 디에틸아미노(diethylamino), 메틸설포닐아미노(methylsulfonylamino), 푸라닐-옥시-설폰아미노(furanyl-oxy-sulfonamino)와 같은 설포닐(sulfonyl)로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되어진다.
아미노카르보닐은 -NRcCORb, -NRcCO2Rb 또는 -NRcCONRbRc 그룹을 지칭하는데, 이때, Rb는 수소 또는 선택적으로 치환된 C1 내지 C6 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-C1 내지 C4 알킬 또는 헤테로아릴-C1 내지 C4 알킬기이고, Rc는 수소 또는 C1 내지 C4 알킬이며, 각각 선택적으로 치환된 Rb 그룹은 독립적으로 치환되지 않거나, C1 내지 C4 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-C1 내지 C4-알킬, 헤테로아릴-C1 내지 C4-알킬, C1 내지 C4 할로알킬(haloalkyl), -OC1 내지 C4 알킬, -OC 1 내지 C4 알킬페닐, C1 내지 C4 알킬-OH, -C1 내지 C4 할로알킬, 할로겐(halogen), -OH, -NH2 , C1 내지 C4 알킬-NH2, -N(C1 내지 C4 알킬)(C1 내지 C4 알킬), -NH(C 1 내지 C4 알킬), -N(C1 내지 C4 알킬)(C1 내지 C4 알킬페닐), -NH(C1 내지 C4 알킬페닐), 시아노(cyano), 니트로(nitro), 헤테로아릴에 대한 치환기로서 옥소(oxo), -CO2H, -C(O)OC1 내지 C4 알킬, -CON(C1 내지 C4 알킬)(C1 내지 C4 알킬), -CONH(C1 내지 C4 알킬), -CONH2, -NHC(O)(C1 내지 C4 알킬), -NHC(O)(페닐), -N(C1 내지 C4 알킬)C(O)(C 1 내지 C4 알킬), -N(C1 내지 C4 알킬)C(O)(페닐), -C(O)C1 내지 C4 알킬, -C(O)C1 내지 C4 페닐, -C(O)C1 내지 C4 할로알킬, -OC(O)C1 내지 C4 알킬, -SO2 (C1 내지 C4 알킬), -SO2(페닐), -SO2(C1 내지 C4 할로알킬), -SO2NH2, -SO 2NH(C1 내지 C4 알킬), -SO2NH(페닐),-NHSO2(C1 내지 C4 알킬), -NHSO2(페닐) 및 -NHSO2(C 1 내지 C4 할로알킬)로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되어지는 적어도 하나 이상의 치환기로 치환된다.
항유사분열(antimitotic)은 유사분열 중기(metaphase) 정지(arrest)에 의한 유사분열을 억제 또는 저채하는 약물이다. 몇몇 항종양 약물은 세포 증식을 차단하고 항유사분열 약물로 간주된다.
아릴 및 헤테로아릴은 O, N 또는 S로 구성되는 군으로부터 각각 선택되어지는 0 또는 1 내지 4 이종원자(heteroatom)를 포함하는 방향족 또는 이종방향족(heteroaromatic) 5 또는 6원환계(ring system), O, M 또는 S로 구성된 군으로부터 각각 선택되어지는 0 또는 1 내지 4 또는 그 이상의 이종원자를 포함하는 이중환(bicyclic) 방향족 또는 이종방향족의 9 또는 10원환계 또는 O, M 또는 S로 구성된 군으로부터 각각 선택되어지는 0 또는 1 내지 4 또는 그 이상의 이종원자를 포함하는 삼중환(tricyclic) 방향족 또는 이종방향족의 12 내지 14원환계를 의미한다. 방향족 6 내지 14 원 탄소환(carbocyclic)은 예컨데, 페닐, 나프틸(naphthyl), 인다 닐(indanyl), 테트랄리닐(tetralinyl) 및 플루오레닐(fluorenyl)을 포함하고 5 내지 10원환 방향족 이종환은 예컨데, 이미다졸릴(imidazolyl), 피리디닐(pyridinyl), 인돌릴(indolyl), 티에닐(thienyl), 벤조피라노닐(benzopyranonyl), 티아졸릴(thiazolyl), 푸라닐(furanyl), 벤지미다졸릴(benzimidazolyl), 퀴놀리닐(quinolinyl), 이소퀴놀리닐(isoquinolinyl), 퀴녹시알리닐(quinoxalinyl), 피리미디닐(pyrimidinyl), 피라지닐(pyrazinyl), 테트라졸릴(tetrazolyl) 및 피라졸릴(pyrazolyl)을 포함한다.
아랄킬은 알킬 잔기에 의하여 원 구조에 부착되어진 아릴류(aryl moiety)의 잔기로서, 예컨데, 벤질, 페네틸(phenethyl), 페닐알릴(phenylallyl) 및 이와 유사한 화합물을 포함한다. 헤테로아랄킬은 알킬 잔기에 의하여 원 구조에 부착되어진 헤테로아릴류의 잔기로서, 예컨데, 푸라닐메틸(furanylmethyl), 피리디닐메틸(pyridinylmethyl), 피리미디닐에틸(pyrimidinylethyl) 및 이와 유사한 화합물을 포함한다.
아랄콕시(aralkoxy)는 -O-아랄킬기이다. 이와 유사하게, 헤테로아랄콕시(heteroaralkoxy)는 -O-헤테로아랄킬기이고, 아릴록시(aryloxy)는 -O-아릴기이며, 아실록시(acyloxy)는 -O-아실기이고, 헤테로아릴록시는 -O-헤테로아릴기이며, 헤테로사이클릴록시(heterocyclyloxy)는 -O-헤테로사이클릴(heterocyclyl), 즉, 산소를 통하여 원 구조에 부착되어진 아랄킬, 헤테로아랄킬, 아릴, 아실, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴기이다.
카르복시알킬(carboxyalkyl)는 -알킬-COOH기이다.
카르복시아미도(carboxamido)는 -CONRbRc 그룹을 지칭하는데, 여기서 Rb 는 수소 또는 선택적으로 치환된 C1 내지 C6 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-C1 내지 C4 알킬- 또는 헤테로아릴-C1 내지 C4 알킬기이고, Rc는 수소 또는 C1 내지 C4 알킬이며, 각각 선택적으로 치환된 Rb 그룹은 독립적으로 치환되지 않거나, C1 내지 C4 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-C1 내지 C4 알킬, 헤테로아릴-C1 내지 C4 알킬, C1 내지 C4 할로알킬(haloalkyl), -OC1 내지 C4 알킬, -OC1 내지 C4 알킬페닐, C1 내지 C4 알킬-OH, -C1 내지 C4 할로알킬, 할로겐(halogen), -OH, -NH2, C1 내지 C4 알킬-NH2, -N(C1 내지 C4 알킬)(C1 내지 C4 알킬), -NH(C1 내지 C4 알킬), -N(C1 내지 C4 알킬, (C1 내지 C4 알킬페닐), -NH(C1 내지 C4 알킬페닐), 시아노(cyano), 니트로(nitro), 헤테로아릴에 대한 치환기로서 옥소(oxo), -CO2H, -C(O)OC1 내지 C4 알킬, -CON(C 1 내지 C4 알킬)(C1 내지 C4 알킬), -CONH(C1 내지 C4 알킬), -CONH2, -NHC(O)(C1 내지 C4 알킬), -NHC(O)(페닐), -N(C1 내지 C4 알킬)C(O)(C1 내지 C4 알킬), -N(C1 내지 C4 알킬)C(O)(페닐), -C(O)C1 내지 C4 알킬, -C(O)C1 내지 C4 페닐, -C(O)C1 내지 C4 할로알킬, -OC(O)C1 내지 C4 알킬, -SO2(C1 내지 C4 알킬), -SO2(페닐), -SO2(C1 내지 C4 할로알킬), -SO2NH2, -SO2NH(C1 내지 C4 알킬), -SO2NH(페닐),-NHSO2(C1 내지 C4 알킬 ), -NHSO2(페닐) 및 -NHSO2(C1 내지 C4 할로알킬)로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되어지는 적어도 하나 이상의 치환기로 된다.
할로겐 또는 할로는 불소(fluorine), 염소(chlorine), 브롬(bromine) 또는 요오드(iodine)를 지칭하여, 불소, 염소, 브롬인 것이 바람직하다. 디할로아릴(dihaloaryl), 디할로알킬(dihaloalkyl), 트리할로아릴(trihaloaryl) 등은 각각 2, 2 및 3으로 지정된 다수의 할로겐으로 치환된 아릴 및 알킬을 지칭하여 동일한 할로겐일 필요는 없으며, 따라서, 4-클로로-3-플루오로페닐(4-chloro-3-fluorophenyl)은 디할로아릴의 범위 내에 있다.
헤테로사이클릴은 1 내지 4개의 탄소가 산소, 질소 또는 황과 같은 이종원자에 의해 치환되어지는 사이클로알킬 또는 아릴 잔기를 지칭한다. 예를 들어 헤테로사이클릴은 본 발명의 범위 내에서 아제티디닐(azetidinyl), 이미다졸리닐(imidazolinyl), 피롤리디닐(pyrrolidinyl), 피라졸릴, 피롤릴(pyrrolyl), 인돌릴, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 테트라하이드로이소퀴놀리닐(tetrahydroisoquinolinyl), 벤조푸라닐, 벤조디옥사닐(benzodioxanyl), 치환기로 표현될 때, 일반적으로 메틸렌디옥시페닐로 알려진 벤조디옥실(benzodioxyl), 테트라졸릴(tetrazolyl), 모르폴리닐(morpholinyl), 티아졸릴(thiazolyl), 피리디닐, 피리다지닐(pyridazinyl), 피페리디닐(piperidinyl), 피리미디닐, 티에닐(thienyl), 푸라닐, 옥사졸릴(oxazolyl), 옥사졸리닐(oxazolinyl), 이소옥사졸릴(isoxazolyl), 디옥사닐(dioxanyl), 테트라하이드로푸라닐 및 이와 유사한 화합물을 포함한다. "N-헤테로 사이클릴"은 질소 함유 헤테로사이클을 지칭한다다. 헤테로사이클릴은 헤테로사이클릴의 한 부분인 헤테로아릴을 포함하는 의미이다. 예를 들어, N-헤테로사이클릴 잔기는 아제티디닐, 4-모르폴리닐(morpholinyl), 4-티오모르폴리닐(thiomorpholiny), 1-피페리디닐, 1-피롤리디닐, 3-티아졸리디닐(thiazolidinyl), 피페라지닐(piperazinyl) 및 4-(3,4-디하이드로벤족사지닐)을 포함한다. 치환된 헤테로사이클릴은 예컨데, 4-메틸-1-피페라지닐 및 4-벤질-1-피페리디닐을 포함한다.
탈퇴(leaving) 기 또는 원자는 반응 표면하에서 개시물질로부터 절단됨으로써 특정 부위에서의 반응을 촉진하는 그룹 또는 원자이다. 상기 그룹의 적절한 예로는, 할로겐 원자, 메실록시(mesyloxy), p-니드로벤젠설포닐록시(p-nitrobenzensulphonyloxy) 및 토실록시(tosyloxy) 그룹을 들 수 있다.
"선택적" 또는 "선택적으로"라는 의미는 후술되는 결과 또는 상황이 발생 할 수도 있도 발생하지 않을 수도 있다는 것이고, 여기에는 결과 또는 상태가 일어나는 경우와 그렇지 않은 경우의 모두가 포함된다. 예를 들어, "선택적으로 치환된 알킬"은 본원에 기재된 "알킬" 및 "치환된 알킬"을 포함한다. 이것은 적어도 하나 이상의 치환기를 포함하는 어떤 그룹과 관련된 본 발명의 기술분야의 통상의 지식을 가진자에게 자명하다. 상기의 그룹은 배열상 비실현적(sterically impractical)이거나 합성적으로 실행 불가(synthetically non-feasible)하거나 본질적으로 불안정한(inherently unstable)한 어떠한 치환 또는 치환의 형태를 도입하고자 의도하는 것은 아니다.
치환된 알콕시는 알킬 성분이 치환된, 즉, -O-(치환된 알킬)인 알콕시이다. 보다 바람직한 치환된 알콕시기는 "폴리알콕시(polyalkoxy)" 또는 -O-(선택적으로 치환된 알킬렌)-(선택적으로 치환된 알콕시)이고, -OCH2CH2OCH3와 같은 기 및 폴리에틸렌글리콜(polyethyleneglycol) 및 x 가 2 내지 20, 바람직하게는 2 내지 10, 더욱 바람직하게는 2 내지 5의 정수인 -O(CH2CH2O)xCH3와 같은 글리콜에테르(glycol ether)의 잔기를 포함한다. 또 다른 바람직한 치환된 알콕시기는 하이드록시알콕시(hydroxyalkoxy) 또는 y가 1 내지 10, 바람직하게는 1 내지 4의 정수인 -OCH2(CH2)yOH이다.
예컨데, 알콕시, 아랄킬 및 헤테로아랄킬과 같은 선택적으로 치환된 알킬, 아릴 및 헤테로아릴기를 포함하는 어떠한 그룹의 치환된 알킬, 아릴 및 헤테로아릴기를 포함하는 치환된-알킬, 아릴 및 헤테로아릴은 각각 하나 또는 그 이상의(약 5까지, 바람직하게는 3까지의) 수소원자가 하기의 그룹으로부터 독립적으로 선택된 치환기에 의하여 치환된 알킬, 아릴 및 헤테로아릴기를 지칭한다 : -Ra, -ORb, 아릴 치환기로서 -O(C1 내지 C2 알킬)O-, -SRb, -NRbRc, 할로겐, 시아노, 니트로, -CORb, -CO2Rb, -CONRbRc, -OCORb, -OCO2R b, -OCONRbRc, -NRcCORb, -NRcCO2 Rb, -NRcCONRbRc, -CO2Rb, -CONRbRc, -NRcCORb, -SOR a, -SO2Ra, -SO2NRbRc 및 -NRc SO2Ra,
이때, Ra는 선택적으로 치환된 C1 내지 C6 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-C 1 내지 C4 알킬 또는 헤테로아릴-C1 내지 C4-알킬기이고, Rb는 수소 또는 선택적으로 치환된 C1 내지 C6 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-C1 내지 C4 알킬 또는 헤테로아릴-C1 내지 C4-알킬기이며, Rc는 수소 또는 C1 내지 C4 알킬기이며, Ra 그룹 및 Rb 그룹은 독립적으로 치환되지 않거나 C1 내지 C4 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아릴-C1 내지 C4-알킬, 헤테로아릴-C1 내지 C4-알킬, C1 내지 C4 할로알킬(haloalkyl), -OC1 내지 C4 알킬, -OC1 내지 C4 알킬페닐, C1 내지 C4 알킬-OH, -C1 내지 C4 할로알킬, 할로겐(halogen), -OH, -NH2, C1 내지 C4 알킬-NH2, -N(C1 내지 C4 알킬)(C1 내지 C4 알킬), -NH(C1 내지 C4 알킬), -N(C1 내지 C4 알킬)(C1 내지 C4 알킬페닐), -NH(C1 내지 C4 알킬페닐), 시아노(cyano), 니트로(nitro), 헤테로아릴에 대한 치환기와 같은 옥소(oxo), -CO2H, -C(O)OC1 내지 C4 알킬, -CON(C1 내지 C4 알킬)(C1 내지 C4 알킬), -CONH(C1 내지 C4 알킬), -CONH2, -NHC(O)(C1 내지 C4 알킬), -NHC(O)(페닐), -N(C1 내지 C4 알킬)C(O)(C1 내지 C4 알킬), -N(C1 내지 C4 알킬)C(O)(페닐), -C(O)C1 내지 C4 알킬, -C(O)C1 내지 C4 페닐, -C(O)C1 내지 C4 할로알킬, -OC(O)C1 내지 C4 알킬, -SO2(C1 내지 C4 알킬), -SO2(페닐), -SO2(C1 내지 C4 할로알킬), -SO2NH2, -SO2NH(C1 내지 C4 알킬), -SO2NH(페닐),-NHSO2(C1 내지 C4 알킬), -NHSO2(페닐) 및 -NHSO2(C1 내지 C4 할로알킬)로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되어지는 적어도 하나 이상의 치환기로 된다.
설파닐(sulfanyl)은 -S-(선택적으로 치환된 알킬), -S-(선택적으로 치환된 아릴), -S-(선택적으로 치환된 헤테로아릴) 및 -S-(선택적으로 치환된 헤테로사이클릴)인 기이다.
설피닐(sulfinyl)은 -S(O)-H, -S(O)-(선택적으로 치환된 알킬), -S(O)-(선택적으로 치환된 아릴), -S(O)-(선택적으로 치환된 헤테로아릴), -S(O)-(선택적으로 치환된 헤테로사이클릴) 및 -S(O)-(선택적으로 치환된 아미노)인 기이다.
설포닐(sulfonyl)은 -S(O2)-H, -S(O2)-(선택적으로 치환된 알킬), -S(O2 )-(선택적으로 치환된 아릴), -S(O2)-(선택적으로 치환된 헤테로아릴), -S(O2)-(선택적으로 치환된 헤테로사이클릴), -S(O2)-(선택적으로 치환된 알콕시), -S(O2)-(선택적으로 치환된 아릴록시), -S(O2)-(선택적으로 치환된 헤테로아릴록시), -S(O2)-(선택적으로 치환된 헤테로사이클록시) 및 -S(O2)-(선택적으로 치환된 아미노)인 기이다.
약학적으로 허용 가능한 염은 유리 화합물(free compound)의 생물학적 효능을 유지하고 생물학적으로 바람직한 염으로서, 적절한 산 또는 염기로 형성되고, 약학적으로 허용 가능한 산이 가해진 염 및 염기가 가해진 염을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 산이 가해진 염은 염산(hydrochloric acid), 브롬화수소산 (hydrobromic acid), 황산(sulfuric acid), 질산(nitric acid), 인산(phosphoric acid) 및 이와 유사한 산과 같은 무기산(inorganic acid) 및 아세트산(acetic acid), 프로피온산(propionic acid), 글리콜산(glycolic acid), 피루브산(pyruvic acid), 옥살산(oxalic acid), 말레산(maleic acid), 말론산(malonic acid), 숙신산(succinic acid), 푸마르산(fumaric acid), 타르타르산(tartaric acid), 시트르산(citric acid), 벤조산(benzoic acid), 신남산(계피산, cinnamic acid), 만델산(mandelic acid), 메탄술폰산(methanesulfonic acid), 에탄술폰산(ethanesulfonic acid), p-톨루엔술폰산(p-toluenesulfonic acid), 살리실산(salicylic acid) 및 이와 유사한 산과 같은 유기산(organic acid)으로부터 유도된 것을 포함한다.
약학적으로 허용가능한 염기가 가해진 염은 나트륨(sodium), 칼륨(potassium), 리튬(lithium), 암모니움(ammonium), 칼슘(calcium), 마그네슘(magnesium), 철(iron), 아연(znic), 구리(copper), 망간(manganese), 알루미늄(aluminum) 염기 및 이와 유사한 염기, 바람직하게는 암모니움, 갈륨, 나트륨, 칼슘 및 망간 염과 같은 무기염기로부터 유도된 것을 포함한다. 또한, 염기가 가해진 염은 1차, 2차 및 4차 아민(amine), 이소프로필아민(isopropylamine), 트리메틸아민(trimethlamine), 디에틸아민(diethylamine), 트리에틸아민(triethylamine), 트리프로필아민(tripropylamine) 및 에탄올아민(ethanolamine)과 같은 자연적으로 치환된 아민, 환형(cyclic) 아민 및 염기 이온 교환 수지를 포함하는 치환된 아민의 염을 포함하는 약학적으로 허용 가능한 유기 비독성 염기로부터 유도된 것을 포함한다.
보호원자단(protecting group)은 통상적으로 유기합성과 관련되어 사용된다. 즉, 화학반응이 다른 보호되지 않은 반응 위치상에서 선택적으로 수행될 수 있고 선택적 반응이 완료된 후 쉽게 제거될 수 있도록 다기능적 화합물(multifunctional compound)에서 적어도 하나 이상의 반응 위치를 선택적으로 차단하는 그룹을 지칭한다. 다양한 보호원자단은 본 문서 전체에 걸쳐 참고문헌으로 포함된 문헌(T.H. Greene and P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition, John Wiley & Sons, New York, 1999)에 그 예가 개시되어 있다. 예를 들어, 하이드록시 보호 형태(hydroxy protected form)는 하이드록시 보호그룹으로 보호되는 화합물 내에 적어도 하나의 하이드록실기(hydorxyl group)가 존재하는 형태이다. 마찬가지로, 아민 및 다른 반응기 또한 유사하게 보호될 수 있다.
용매화합물(solvate)은 용매와 상기 일반식 I로 나타내어지는 화합물 또는 이에 대한 염의 상호작용에 의해 형성되는 화합물이다. 상기 일반식 I로 나타내어지는 화합물의 적합한 용매화합물은 단일수산화물(monohydrate) 및 반수산화물(hemi-hydrate)을 포함하는 수산화물(hydrate)과 같은 약학적으로 허용 가능한 용매화합물이다.
본원에 기재된 많은 화합물들은 적어도 하나 이상의 비대칭 중심(asymmetric center)을 포함하는데, 예를 들어, R2가 R2'와 다른 위치에 부착된 R2 및 R2'인 탄소를 포함하고, (R)- 또는 (S)-로서 완전한 입체화학(stereochemistry)으로 정의될 수 있는 거울상입체이성질체(enantiomer), 부분입체이성질체(diastereomer) 및 또 다른 입체이성질체 형태(stereoisomeric form)가 나타날 수 있다. 본 발명에서는 라세미 혼합체(racemic mixture), 광학적으로 순수한 형태(optically pure form) 및 중간 혼합체(intermediate mixture)를 포함하는 모든 가능한 이성질체(isomer)를 포함한다. 임의의 활성 (R)- 및 (S)- 이성질체는 키랄 신톤(chiral synthon) 또는 키랄 시약(chiral reagent)을 사용하여 준비되거나, 통상적인 기술을 사용하여 용해될 수 있다. 본원에 기재된 화합물이 올레핀 이중 결합(olefinic double bond) 또는 기하비대칭(geometric asymmetry)의 중심을 포함하는 경우, 그 밖의 특이적인 사항이 없는 한, 화합물은 E 및 Z 기하이성질체를 포함한다. 또한, 모든 토토머화 형태(tautomeric form) 및 회전이성질체(rotational isomer)를 포함한다.
R- 및 S-이성질체를 제조하고자 하는 경우, 당업계에서 공지진 방법, 예를 들어, 결정화(crystallization)에 의해 분리될 수 있는 부분입체이성질 염 또는 복합체의 형성, 결정화, 가스-액체 또는 액체 크로마토그래피(chromatography)에 의해 분리될 수 있는 부분입체이성질 유도체의 형성, 조절 또는 비조절 거울상입체이성질체의 분리에 의한 효소적 산화 또는 환원을 하는 거울상입체이성질체 특이적 시약으로 1개의 거울상입체이성질체에 대한 선택적 반응 또는 키랄 리간드(ligand) 범위의 실리카와 같은 키랄을 보조하는 키랄 환경 또는 키랄 용매의 존재하에서 가스-액체 또는 액체 크로마토그래피에 의해 용해될 수 있다. 거울상입체이성질체를 제조하고자 하는 경우는 상기에 기재된 분리 과정 중 한 가지에 의하여 다른 화학적 물질로 전환되어진다는 것을 예상 할 수 있다. 더 향상된 단계로 제조되는 거울상입체이성질체 형태의 유리가 요구될 수 있다. 또는, 특이적인 거울상입체이성질 체는 임의의 활성 시약, 기질(substrate), 촉매제(catalyst) 또는 용매를 사용한 비대칭성 합성 또는 비대칭성 변형에 의해 한개의 거울상입체이성질체를 다른 거울상입체이성질체로 전환시키는 것에 의해 합성될 수 있다.
본 발명의 화합물
본 발명은 적어도 하나 이상의 유사분열 키네신 억제제인 벤조피란-4-온(benzopyran-4-one) 또는 크로멘-4-온(chromen-4-one)로 기재될 수 있는 신규한 계열의 화합물을 제공한다. 유사분열 키나제 및 다른 키네신, 예를 들어, 수송 키네신(transport kinesin)의 억제에 의하여, 세포 증식의 특이적 억제가 일어난다. 어떤 이론의 범주에 들어가지 않는다고 해도, 본 발명은 유사분열 키네신 기능의 혼란이 세포주기 정지 및 세포사멸의 빈번한 결과로 인한 유사분열 방추체의 기형 또는 장애의 원인이 된다는 발견을 이용한다. 본 발명의 구체적인 예에서, 본원에 기재된 화합물은 유사분열 키네신 KSP를 억제한다. 또다른 구체적인 예에서, 상기 화합물은 HSET(미국 등록특허 제 6,361,993호), MCAK(미국 등록특허 제 6,331,424호), CENP-E(PCT 국제공개특허 제 WO99/13061호), Kif4(미국 등록특허 제 6,440,684호), MKLP1(미국 등록특허 제 6,448,025호), Kifl5(미국 등록특허 제 6,335,466호), Kid(미국 등록특허 제 6,387,644호), Mppl, CMK게, KinI-3(미국 등록특허 제 6,461,855호), Kip3a(PCT 국제공개특허 제 WO01/96593호), Kip3d(미국 등록특허 제 6,492,151호) 및 RabK6으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상의 인간 유사분열 키네신을 조절하는 것은 물론, 유사분열 키네신 KSP을 억제한다.
인간 KSP 키네신의 억제 방법은 본 발명의 억제제를 키네신, 특이적인 인간 키네신, 바람직하게는 인간 KSP 또는 단편 및 이에 대한 변형체에 결합시키는 단계를 포함한다. 상기 억제는 KSP 키네신의 ATP 가수분해 활성 및/또는 유사분열 방추체가 파괴된다는 관점에서 유사분열 방추체 형성 활성일 수 있다. 또한, 감수분열 방추체도 파괴될 수 있다.
본 발명의 목적은 세포 증식과 관련된 장애의 치료를 위해 특이적인 KSP 및 필수적인 인간 KSP에서 유사분열 키네신의 억제제를 개발하기 위한 것이다. 종래의 세포 증식성 장애의 일종인 암의 치료에 있어서, 극적인 향상은 새로운 기전을 통해 작용하는 치료 약물을 확인하는데 있었다. 예를 들어, 미세소관 형성 작용을 나타내는 택산류의 약물 뿐만 아니라, 토포이소머라제Ⅰ억제제의 캄토테신(camptothecin)류가 포함된다. 본원에 기재된 화합물, 조성물 및 방법은 선택적으로 달라지고, 암에 한정되지 않을 뿐만 아니라, 과증식, 재발협착, 심장비대, 면역장애, 진균성 장애 및 염증을 포함하는 세포 증식성 질환의 치료를 위해 사용되는 것이 바람직하다.
따라서, 본 발명은 하기 일반식 I로 기재되는 화합물을 제조하는 방법에 관한 것이다:
Figure 112004047311217-pct00002
(일반식 I)
이때, 상기 일반식 I에 있어서,
R1은 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되고;
R2 및 R2'은 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알콕시, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로부터 독립적으로 선택되거나; 또는 상기 R2 및 R2'은 선택적으로 치환된 3 내지 7원환로 형성되어지며,
R12는 선택적으로 치환된 이미다졸릴, 선택적으로 치환된 이미다조리닐, -NHR4; -N(R4)(COR3); -N(R4)(SO2R3a); 및 -N(R4)(CH2R3b)로 구성된 군으로부터 선택되 어지고;
R3는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬, R15O 및 R17-NH-로 구성된 군으로부터 선택되어지며;
R3a는 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬 및 R17-NH-로 구성된 군으로부터 선택되어지고;
R3b는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지며;
R4는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지고;
R5, R6, R7 및 R8은 수소, 아실, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알콕시, 할로겐, 카르복시알킬, 카르복사마이도, 아미노카르보닐, 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로부터 독립적으로 선택되어지며;
R15는 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성 된 군으로부터 선택되어지고; 및
R17은 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 또는 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬이며,
그의 단일 입체이성질체 및 입체이성질체의 혼합물을 포함한다;
상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염;
상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물; 또는
상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물이다.
R12가 이미다졸일 경우, R12는 하기 일반식 Ⅱ의 형태를 갖는다:
Figure 112004047311217-pct00003
(일반식 Ⅱ)
이때, 상기 일반식 Ⅱ에 있어서,
R9는 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C8 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선 택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4 알킬, 선택적으로 치환된 헤테로-C1 내지 C4 알킬, 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4 알콕시, 선택적으로 치환된 헤테로C1 내지 C4 알콕시, 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택되어지고; R13 및 R13'은 각각 독립적으로 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C8 알킬, 선택적으로 치환된 아릴 또는 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4 알킬이다.
R12가 이미다졸린일 경우, R12는 하기 일반식 Ⅲ의 형태를 갖는다:
Figure 112004047311217-pct00004
(일반식 Ⅲ)
이때, 상기 일반식 Ⅲ에 있어서,
R9는 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C8 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4 알킬, 선택적으로 치환된 헤테로로 구성된 군으로부터 선택되어지고, R10, R10', R14 및 R14'는 각각 독립적으로 수소, 선택적으로 치 환된 C1 내지 C8 알킬, 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4 알킬이다.
본 발명의 일 실시태양에서, R1은 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지고,
R2 및 R2'는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알콕시, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬이며, 또는 R2 및 R2'는 만약 R2 또는 R2'이 수소이고, 다른 것이 수소가 아닐 경우 선택적으로 치환된 3 내지 7 원환를 형성하게 되고,
R12는 선택적으로 치환된 이미다졸릴, 선택적으로 치환된 이미다졸리닐, -NHR4, -N(R4)(COR3), -N(R4)(SO2R3a) 및 -N(R4)(CH3R3b)로 구성된 군으로부터 선택되어지며,
R3은 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬, R15O- 및 R17-NH-로 구성된 군으로부터 선택되어지고,
R3a는 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬 및 R17-NH-로 구성된 군으로부터 선택되어지며,
R3b는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지고,
R4는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지며,
R5, R6, R7 및 R8은 수소, 아실, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알콕시, 할로겐, 하이드록실, 니트로, 시아노, 디알킬아미노, 알킬설포닐, 알킬설폰아미도, 알킬티오(alkylthio), 카르복시알킬(carboxyalkyl), 카르복시아미도(carboxamido), 아미노카르보닐(aminocarbonyl), 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로부터 각각 독립적으로 선택되어지고,
R15는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지며,
R17은 입체이성질체 혼합체, 상기 일반식 I로 기재되는 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염, 상기 일반식 I로 기재되는 화합물의 약학적으로 허용 가능한 용매혼합물의 약학적으로 허용 가능한 용매혼합물 또는 상기 일반식 I로 기재되는 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매혼합물인 단일 입체이성질체를 포함하는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어진다.
또한, 구체적으로, R2 및 R2'는 수소이고, R1은 R1이 치환된 페닐기가 아닐 경우, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지고,
R12는 선택적으로 치환된 이미다졸릴, 선택적으로 치환된 이미다졸리닐, -NHR4, -N(R4)(COR3), -N(R4)(SO2R3a) 및 -N(R4)(CH3R3b)로 구성된 군으로부터 선택되어지며,
R3은 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬, R15O- 및 R17-NH-로 구성된 군으로부터 선택되어지고,
R3a는 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬 및 R17-NH-로 구성된 군으로부터 선택되어지며,
R3b는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지고,
R4는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지며,
R5, R6, R7 및 R8은 수소, 아실, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 알콕시, 할로겐, 하이드록실, 니트로, 시아노, 디알킬아미노, 알킬설포닐, 알킬설폰아미도, 알킬티오, 카르복시알킬, 카르복시아미도, 아미노카르보닐, 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 헤네로아릴로부터 각각 독립적으로 선택되어지고,
R15는 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬로 구성된 군으로부터 선택되어지며,
R17은 수소, 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아랄킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 또는 선택적으로 치환된 헤테로아랄킬이며,
그의 단일 입체이성질체 및 입체이성질체의 혼합물을 포함한다;
상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염;
상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물; 또는
상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물이다.
구체적으로 더욱 바람직하게, R2가 R2'와 다를 경우, R2 및 R2'가 부착되는 입체중심(stereogenic center)은 R 위치이다.
명명(Nomenclature)
상기 일반식 I로 기재된 화합물은 하기에 기재된 방식, 예를 들어, 각각 명명에 사용되는 IUPAC 시스템인 오토놈 버전 2.1(AutoNom version 2.1) 또는 ISIS-DRAW로 순서가 정해지고 명명될 수 있다.
예를 들어, 화합물:
Figure 112004047311217-pct00005
즉, R1이 벤질(benzyl), R2가 프로필, 바람직하게는 이소프로필, R2'가 수소, R12가 3,4-디메틸페닐-, R4가 3-아미노프로필-, R5, R6 및 R8이 수소 및 R7이 시아노인 일반식 I에 의한 화합물은 N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-3,4-디메틸-벤즈아마이드(N-(3-amino-propyl)-N-[1-(3-benzyl-7-cyano-4-oxo-4H-chromen-2-yl)-2-methyl-propyl]-3,4-dimethyl-benzamide)로 명명된다.
또한, 화합물:
Figure 112004047311217-pct00006
즉, R1이 3-메틸옥시-벤질, R2가 프로필, 바람직하게는 이소프로필, R2'가 수소, R12가 치환된 이미다졸린, R5, R6 및 R8이 수소, R7이 클로로, R9가 메틸렌디옥시페닐 및 R10, R10', R14 및 R14'가 수소인 일반식 I에 의한 화합물은 2-[1-(2-벤조[1,3]디옥솔-5-일-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-7-클로로-3-(3-메틸옥시-벤질)-크로멘-4-온(2-[1-(2-benzo[1,3]dioxol-5-yl-4,5-dihydro-imidazol-1-yl)-2-methyl-propyl]-7-chloro-3-(3-methoxy-benzyl)-chromen-4-one)로 명명된다.
일반식 I로 기재되는 화합물의 합성
일반식 I로 기재되는 화합물은 하기 반응 도식(reaction scheme) 또는 당업계에서 통상적으로 사용되어지는 기술을 참고하여 기재되는 과정을 통해 제조될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 참고문헌으로 이용되는 히라오 등의 문헌(Hirao, et al., Synthesis, 1076-1078, 1984) 및 코폴라 등의 문헌(Coppola, et al., Synthesis, 523-526, 1981)이 있다.
특이적인 사항 없는 한, "용매(solvent)","비활성 유기용매(inert organic solvent)" 또는 "비활성 용매"는 벤젠(benzene), 톨루엔, 아세토니트릴(acetonitrile), 테트라하이드로푸란(이하,"THF"로 약칭), 디메틸포름아마이드(이하,"DMF"로 약칭), 클로로포름(cholroform), 메틸렌 클로라이드 또는 디클로로메탄(methylene chloride 또는 dichloromethane), 디에틸 에테르(diethyl ether), 메탄올(methanol), 피리딘(pyridine) 및 이와 유사한 용매를 포함하는 반응 조건 하에서 비활성 용매를 의미한다. 이에 반하는 사항이 없는 한, 본 발명의 반응에서 사용되는 용매는 비활성 유기용매이다.
"q.s."의 의미는 최종 충족량(quantity sufficient)이 더해진다는 의미로, 예를 들어, 최종 부피(100%)의 용액을 만든다는 것이다.
일반적으로 카르복시산(carboxylic acid)의 에스테르(ester)는 통상적인 에스테르화(esterification) 과정에 의해 제조될 수 있으며, 예를 들어, 알킬 에스테르는 일반적으로 산성 조건하에서, 적절한 알카놀(alkanol)과 함께 필요한 카르복실산을 처리하는 것으로 제조될 수 있다. 또한, 아마이드는 통상적인 아미드화(amidation) 과정에 의해 제조될 수 있으며, 예를 들어, 적절한 아민과 함께 적절 한 카르복시산을 처리하는 것으로 제조될 수 있다. 선택적으로, 산에 대한 메틸 에스테르와 같은 저급-알킬 에스테르는 임의의 트리메틸알루미늄(trimethylalluminium)의 존재하에서 필요한 아마이드를 제공하기 위하여 아민과 함께 처리될 수 있다(Tetrahedron Lett., 48:4171-4172, 1977). 카르복실기는 알킬 에스테르에 의해 보호될 수 있다. 예를 들어, 에스테르가 카르보메톡시를 카르복실로 전환시키기 위한 통상적인 방법의 하나인 통상적인 과정을 사용하여 제조되고 제거될 수 있는 메틸 에스테르는 수성 리튬 하이드록시드를 사용하는 것이다.
본원에 기재된 염 및 용매화합물은 당업계에서 통상적인 방법에 의해 제조됨이 요구될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물이 산이라면, 제조되는 염이 가해진 염기는 1차, 2차 및 4차 아민과 같은 무기 또는 유기 염기, 알칼리 금속(alkali metal) 또는 알칼리 토 금속 하이드록시드(alkaline earth metal hydroxide), 또는 이와 유사한 염기와 함께 유리산(free acid)의 처리에 의해 제조될 수 있다. 적합한 염의 실질적인 예로, 나트륨, 칼슘, 칼륨, 마그네슘, 망간, 철, 구리, 아연, 알루미늄 및 리튬으로부터 유도된 무기염과 마찬가지로 글리신(glycine) 및 아르기닌(arginine)과 같은 아미노산으로부터 유도된 유기염, 암모니아(ammonia), 에틸렌디아민(ethylenediamine)과 같은 1차, 2차 및 4차 아민 및 사이클로헥실아민(cyclohexylamine), 피페리딘, 모르폴린 및 피페라진(piperazine)과 같은 환형 아민(cyclic amine)을 포함한다.
화합물이 염기일 경우, 제조되는 염이 가해진 산은 염산, 브롬화산, 황산, 질산, 인산 및 이와 유사한 산과 같은 무기산 또는 아세트산, 말레산, 숙신산, 만델산, 푸마르산, 말론산, 피루브산, 옥살산, 글리콜산, 살리신산, 글루쿠론산(glucuronic acid) 또는 갈락토론산(galacturonic acid)과 같은 피라노시딜산(pyranosidyl acid), 시트르산(citric acid) 또는 타르타르산과 같은 알파-하이드록시산(alpha-hydroxy acid), 아스파르트산(aspartic acid) 또는 글루타민산(glutamic acid)과 같은 아미노산, 벤조산(benzoic acid) 또는 신남산과 같은 아로마산(aromatic acid), p-톨루엔술폰산과 같은 술폰산, 메탄술폰산, 에탄술폰산 또는 이와 유사한 산과 함께 유리염기(free base)의 처리를 포함하는 당업계에서 통상적으로 알려진 적합한 어떤 방법으로든지 제조될 수 있다.
화합물의 분리(isolation)와 정제(purification) 및 본원에 기재된 중간생성물(intermediate)은 여과(filtration), 추출(extraction), 결정화, 컬럼 크로마토그래피(column chromatography), 박층 크로마토그래피(thin-layer chromatography) 또는 후층 크로마토그래피(thick-layer chromatography), 또는 이들 과정들의 복합과정과 같은 어떤 적합한 분리 또는 정제 과정에 의하여 효과적일 수 있다.
적합한 분리 및 분석 과정의 특별한 기재는 본원의 하기 예시를 참고할 수 있다. 또한, 어떤 당량(equivalent) 분리 또는 분석 과정도 사용 가능하다.
반응 도식의 설명(Brief decription of reaction schemes)
반응 도식 1은 일반식 I로 기재되는 화합물의 합성에서 중간생성물인 화학식 109의 화합물의 합성을 나타낸 것이고,
반응 도식 2는 R12가 -N(R4)(COR3)인 일반식 I로 기재되는 화합물의 합성을 나타낸 것이며,
반응 도식 3은 R7이 -OH인 일반식 I로 기재되는 화합물의 합성을 나타낸 것이고,
반응 도식 4는 R7이 -OCH3인 일반식 I로 기재되는 화합물의 합성을 나타낸 것이며,
반응 도식 5는 R12가 -N(R4)(COR3)인 일반식 I로 기재되는 화합물의 또 다른 합성을 나타낸 것이고,
반응 도식 6은 R12가 -N(R4)(SO2R3a)인 일반식 I로 기재되는 화합물의 합성을 나타낸 것이며,
반응 도식 7은 R12가 -N(R4)(CH2R3b)인 일반식 I로 기재되는 화합물의 합성을 나타낸 것이고,
반응 도식 8은 R12가 선택적으로 치환된 이미다졸릴인 일반식 I로 기재되는 화합물의 합성을 나타낸 것이며,
반응 도식 9는 R12가 선택적으로 치환된 이미다졸릴인 일반식 I로 기재되는 화합물의 또 다른 합성을 나타낸 것이고,
반응 도식 10은 R12가 선택적으로 치환된 이미다조리닐인 일반식 I로 기재되는 화합물의 합성을 나타낸 것이며,
반응 도식 11은 R12가 선택적으로 치환된 이미다조리닐인 일반식 I로 기재되는 화합물의 2차 합성을 나타낸 것이고,
반응 도식 12는 R12가 -N(R4)(COR3)이고, R3이 -OR15인 일반식 I로 기재되는 화합물의 또 다른 합성을 나타낸 것이며,
반응 도식 13은 R12가 -N(R4)(COR3)이고, R3이 -NHR17인 일반식 I로 기재되는 화합물의 또 다른 합성을 나타낸 것이고,
반응 도식 14는 일반식 I로 기재되는 화합물의 합성에서 중간생성물로 사용 될 수 있는 화학식 1407로 기재되는 화합물의 합성을 나타낸 것이며,
반응 도식 15는 일반식 I로 기재되는 화합물의 합성에서 중간생성물로 사용 될 수 있는 화학식 1505로 기재되는 화합물의 합성을 나타낸 것이다.
개시 물질(starting material)
선택적으로 치환된 화학식 101로 기재되는 화합물은 상업적으로 수득한다(Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI, USA). 또한, 다른 반응물질(reactant)들은 상업적으로 수득하거나 당업계에서 통상적으로 사용되는 합성 방법에 의하여 손쉽게 제조될 수 있다.
반응 도식 1
Figure 112004047311217-pct00007
화학식 103으로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 1에 따라, 단계 1에서, 동일 당량의 에틸 클로로포름산(ethyl chloroformate)의 당량은 아미노 보호원자단인 PG가 Boc 그룹인 것이 바람직한 화학식 101의 화합물과 트리에틸아민과 같은 염기가 THF와 같은 비극성 비양자성 용매(nonpolar aprotic solvent)에 용해된 0 내지 5℃ 용액에서 1분 이상 가한다. 약 15분 후, 바람직하게는 1.2 당량의 디메틸하이드록실아민 염산염과 트리에틸아민과 같은 염기의 혼합물이 과량의 THF와 같은 비극성 비양자성 용매에 용해된 용액을 5분 이상 가한다. 화학식 103으로 기재되는 화합물의 생성물을 분리하고 추가적인 정제 없이 사용한다.
화학식 105로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 1에 따라, 단계 2에서, 그리그나드 시약(Grignard reagent)은 일반적으로 3 당량의 화학식 R1CH2Br로 기재되는 화합물 및 디에틸 에테르와 같은 비극성 비양자성 용매에서 전환되는 마그네슘의 혼합에 의해 제조된다. 약 90분 후, 그리그나드 반응은 일반적으로 종료된다. 에테르와 같은 비극성 비양자성 용매에서 화학식 103으로 기재되는 화합물의 용액에 그리그나드 시약을 첨가한다. 온도는 계속 관찰하면서 30℃가 넘지 않도록 한다. 화학식 105로 기재되는 화합물의 생성물을 분리하고 정제한다.
화학식 107로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 1에 따라, 단계 3에서, 3.3 당량인 리튬 비스아마이드(bisamide) 또는 트리메틸실리아마이드(trimethylsilyamide)는 THF와 같은 비극성 비양자성 용매에서 화학식 105로 기재되는 화합물의 -78℃ 용액에 3분 이상 천천히 가해진다. 상기 반응 용액 온도는 계속 관찰하면서 -54℃가 넘지 않도록 한다. 완전히 첨가된 후, 상기 용액을 -78℃에서 30분 동안 방치한다. 순수한 상태인 것이 바람직한 화 학식 106으로 기재되는 산 염화물(acid chloride)을 추가로 가한다. 반응 용액은 -78℃에서 30분 동안 방치한다. 생성물을 분리하고 추가적인 정제 없이 사용한다.
화학식 109로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 1에 따라, 단계 4에서, 임의적으로 보호원자단 PG는 아민으로부터 제거될 수 있다. 각각 다양한 보호원자단에 대한 제거 조건은 당업계의 가능한 어느 한 가지 기술을 사용할 수 있다. 상기의 조건들은 당업계에 통상적으로 알려진 것이며, 그린 등의 문헌(Green, et al., supra.)을 통하여 알 수 있다. PG가 Boc일 경우, 실온에서 액상 TFA 혼합물, 바람직하게는 TFA:H2O의 비율이 97.5:2.5인 액상 TFA 혼합물과 함께 화학식 107로 기재되는 화합물을 처리하여 제거될 수 있다. 화학식 109로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
임의의 활성 화합물의 제조
본 발명의 R2가 R2'와 다른 경우의 화합물에서, (R) 이성질체와 같은 특이적인 입체 형상은 R2 및 R2'가 부착되는 입체중심인 것이 바람직하다. 임의의 활성 화합물은 당업계에 통상적으로 알려진 방법에 의해 수행되는 것이 바람직하다. 예를 들어, 화학식 109로 기재되는 아민은 IPA와 같은 비활성 유기용매에서 용해되고, 60℃로 가열되는 것이 바람직하다. 디벤조일-D-타르타르산(dibenzoyl-D-tartaric acid)과 같은 용해된 시약을 분리용기에서 녹이고, 바람직하게는 동일한 따뜻한 용 매에서 녹이고, 재빨리 따뜻한 아민 용액을 저으면서 가한다. 반응 혼합물은 실온에서 16 시간 이상 계속해서 저으면서 냉각시켜 결정화 시킨다. 화학식 109로 기재되는 화합물의 (R) 이성질체와 같은 제조되는 이성질체를 분리하고 정제한다.
일반식 I로 기재되는 화합물의 합성에 대한 설명의 간략한 목적을 위해, 단일 이성질체 또는 이성질체 혼합물은 조합되는 생성물을 제공하기 위해 사용될 수 있다는 것을 알 수 있다.
반응 도식 2
Figure 112004047311217-pct00008
화학식 203으로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 2에 따라, 단계 1에서, 화학식 109로 기재되는 화합물의 용액은 R4'CH2-가 R4의 당량이고, R4가 상기에 기재되거나 (3-옥소-프로필)-카르밤산 tert-부틸 에스테르(3-oxo-propyl)-carbamic acid tert-butyl ester)인 치환기와 같은 전구물질로 보호되는 화학식 R4'CHO를 갖는 화합물인 R4'가 포함된 알데하이드(aldehyde) 및 소디움 트리아세톡시보로하이드라이드(sodium triacetoxyborohydrid)와 같은 환원된 시약에 대한 약간 초과, 바람직하게는 1.2 당량으로 가해진다. 상기 혼합물을 몇시간 동안 교반한다. 화학식 203으로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
화학식 205로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 2에 따라, 단계 2에서, 디클로로메탄(dichloromethane)과 같은 비극성 비양자성 용매에서 화학식 203으로 기재되는 화합물 및 디이소프로필에틸아민(diisopropylethylamine)과 같은 아민 염기의 용액에 R3가 상기에 기재된 것과 같은 Cl-C(O)-R3와 같은 R3 아실 염화물을 가한다. 상기 용액을 실온에서 몇시간동안 질소상태하에서 교반한다. 화학식 205로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
화학식 207로 기재되는 화합물의 제조
임의적으로 화학식 205로 기재되는 화합물에서 어떤 보호원자단들은 제거되어진다. 예를 들어, R4가 보호원자단이 Boc 그룹인 보호되는 아민을 포함할 경우, Boc 그룹은 실온에서 반응이 유지되는 동안, 디클로로메탄과 같은 비극성 비양자성 용매에서 트리플루오로아세트산(trifluoroacetic acid)와 같은 산과 함께 화학식 205로 기재되는 화합물의 처리에 의해 제거될 수 있다. 반응은 TLC에 의해 계속 관찰된다. 완성물에서, 화학식 207로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
반응 도식 3
Figure 112004047311217-pct00009
화학식 303으로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 3을 참고하여, 단계 1에서, THF와 같은 비극성 비양자성 용매에서 화학식 301로 기재되는 화합물의 용액에 수산화나트륨(sodium hydride)이 가해진다. 상기 용액은 약 45℃에서 5분 동안 교반하고, 1.4 당량의 알릴 알콜(allyl alcohol)을 피펫(pipette)을 이용하여 가해준다. 상기 용액을 12시간 동안 약 45℃에서 교반하고, 실온에서 냉각시킨다. 화학식 303으로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고, 추가적인 정제 없이 사용한다.
화학식 305로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 3에 따라, 단계 2에서, 아세토니트릴(acetonitrile)과 같은 비양자성 용매에서 화학식 303으로 기재되는 화합물의 실온 용액에 Pd(PPh3)4에 의한 모르폴린(morpholine)을 가한다. 상기 용액은 약 5분 동안 교반한다. 화학식 305로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
반응 도식 4
Figure 112004047311217-pct00010
반응 도식 4에 따라, 화학식 401로 기재되는 화합물은 메탄올에서 0.5M 소디움 메톡시드(sodium methoxide)로 용해시키고 약 70℃로 가열한다. 온도는 약 12시간 동안 약 70℃로 유지하고, 실온에서 냉각시킨다. 화학식 403으로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
반응 도식 5
Figure 112004047311217-pct00011
화학식 503으로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 5에 따라, 단계 1에서, CH2Cl2와 같은 비극성 비양자성 용매의 화학식 501로 기재되는 화합물 및 트리에틸아민과 같은 염기의 용액에 화학식 Cl-(CO)-CH2R1 당량을 실온에서 약 5분 이상 가한다. 약 30분 후, 화학식 503으로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 추가적인 정제 없이 사용한다.
화학식 505로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 5에 따라, 단계 2에서, 1.3 당량인 AlCl3을 화학식 503으로 기재되는 화합물에 140℃에서 약 15분 이상 천천히 가한다. 가스 방출을 정시킨 후, 반응 혼합물을 실온에서 냉각시킨다. 화학식 505로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
화학식 507로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 5에 따라, 단계 3에서, 화학식 505로 기재되는 화합물 및 아민 기가 보호원자단 PG, 바람직하게는 Boc 그룹으로 적절하게 보호되는 바람직하게는 1.1 당량의 화학식 506으로 기재되는 화합물인 아미노산의 용액, 바람직하게는 1.2 당량의 HBTU와 같은 짝지은 시약(coupling reagent), TEA와 같은 염기 및 CH2Cl2과 같은 비극성 비양자성 용매를 5시간 동안 실온에서 유지한다. 화학식 507로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
화학식 509로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 5에 따라, 단계 4에서, 화학식 507로 기재되는 화합물 및 칼륨 카보네이트(potassium carbonate)와 같은 염기의 혼합물을 DMF와 같은 극성 비양자성 용매에서 약 140℃에서 가열한다. 약 30분 후, 화학식 509로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
화학식 511로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 5에 따라, 단계 5에서, 아민 보호원자단 PG를 제거한다, PG가 Boc 일 경우, 실온에서 1시간 동안 TFA:H2O의 비율이 97.5:2.5인 것이 바람직한 액상 산과 함께 화학식 509로 기재되는 화합물을 처리하여 완성 할 수 있다. 유리 아민은 분리하고 추가적인 정제 없이 사용한다.
상기 생성물, R4'CH2-가 R4의 당량이고, R4가 상기에 기재되거나 바람직한 당량이 1.45인 (3-옥소-프로필)-카르밤산 tert-부틸 에스테르(3-oxo-propyl)-carbamic acid tert-butyl ester)인 치환기와 같은 전구물질로 보호되는 화학식 R4'CHO를 갖는 화합물인 R4'를 포함하는 알데하이드, Na(OAc)3BH와 같은 환원 시약 및 CH2Cl2와 같은 비극성 비양자성 용매는 실온에서 약 3시간동안 방치된다. 화학식 511로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
화학식 513으로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 5에 따라, 단계 6에서, 화학식 511로 기재되는 화합물, 디이소프로필에틸아민과 같은 염기 및 CH2Cl2와 같은 비극성 비양자성 용매의 용액에 실온에서 바람직하게는 2 당량의 화학식 R2COCl의 산 염화물을 가한다. 약 2시간 30분 후,화학식 513으로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
반응 도식 6
Figure 112004047311217-pct00012
반응 도식 6에 따라, 화학식 203으로 기재되는 화합물 및 디이소프로필에틸아민과 같은 아민 염기의 용액을 디클로로메탄과 같은 비극성 비양자성 용매의 용액에서 R3가 상기에 기재된 것과 같은 화학식 Cl-S(O)2-R3 또는 O-S(O) 2-R3a)2을 갖는 화합물을 가한다. 상기 용액은 몇시간 동안 실온에서 질소하에서 교반한다. 화학식 603으로 기재되는 화합물인 생성물을 정제하고 분리한다.
반응 도식 7
Figure 112004047311217-pct00013
반응 도식 7에 따라, 화학식 203으로 기재되는 화합물 및 디이소프로필에틸아민과 같은 아민 염기의 용액을 디클로로메탄과 같은 비극성 비양자성 용매의 용액에서 R3b가 상기에 기재된 것과 같고 X가 Br, Cl, 메실레이트(mesylate) 또는 토실레이트(tosylate)인 화학식 X-CH2-R3b을 갖는 화합물을 가한다. 상기 용액은 몇시간 동안 실온 또는 몇시간동안 열을 가하여 질소하에서 교반한다. 화학식 703으로 기재되는 화합물인 생성물을 정제하고 분리한다.
반응 도식 8
Figure 112004047311217-pct00014
화학식 803으로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 8에 따라, 단계 1에서, 칼륨 카보네이트와 같은 염기가 존재하는 DMF와 같은 극성 비양자성 용매에서 용해된 선택적으로 치환된 화학식 109로 기재 되는 화합물에 탈퇴그룹(leaving group), 바람직하게는 브로모아세트알데하이드 디메틸아세탈(bromoacetaldehyde dimethylacetal)과 같은 할로겐화물(halide)을 추가적으로 포함하는 선택적으로 치환된 적절하게 보호된 알데하이드의 1 당량을 가한다. 상기 용액은 TLC 등에 의해 반응의 완성을 관찰하면서 환류액(reflux)에서 열을 가한다. 반응 혼합물을 냉각시키고, 혼합된 화학식 803으로 기재되는 선택적으로 치환된 화합물을 정제하고 분리한다.
화학식 805로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 8에 따라, 단계 2에서, 트리에틸아민과 같은 아민염기의 1.5 몰 당량이 존재하는 디클로로메탄과 같은 비활성 용매에서 선택적으로 치환된 화학식 803으로 기재되는 화합물에 R9가 본원에 기재된 것과 같은 Cl-C(O)-R9와 같은 R9 산 염화물의 1.5 몰 당량을 가한다. 4 내지 24시간 이상 실온에서 교반하면 반응이 발생하고, 결과는 TLC등에 의해 관찰한다. 혼합된 화학식 805로 기재되는 화합물을 정제하고 분리한다.
화학식 807로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 8에 따라, 단계 3에서, 화학식 805로 기재되는 화합물 및 암모니움 아세테이트(ammonium acetate)의 잔여물의 용액을 아세트산에서 1 내지 4시간 동안 환류하면서 열을 가한다. 결과는 TLC등에 의해 관찰한다. 혼합된 화학식 807 로 기재되는 화합물을 정제하고 분리한다.
반응 도식 9
Figure 112004047311217-pct00015
화학식 903으로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 9에 따라, 단계 1에서, 화학식 109로 기재되는 화합물, X가 할로겐화물이고 R13이 본원에 기재된 것과 같은 화학식 R13'(CO)CH2X로 기재되는 알파-할로케톤 시약 및 칼류 카보네이트와 같은 염기의 당량에 대한 현탁액(suspension)을 DMF와 같은 극성 비양자성 용매에서 실온에서 교반한다. 반응은 물로 희석되고 고체 형태의 화학식 903으로 기재되는 화합물인 결과 화합물은 정제과정이 없는 저급 단계에 사용된다. 결과 화합물이 고체형태가 아닐 경우에는 표준 방법을 사용하여 분리하고 저급단계에서 사용한다.
화학식 905로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 9에 따라, 단계 2에서, 트리에틸아민과 같은 아민염기의 당량 및 화학식 R9-COCl로 기재되는 화합물과 같은 산 염과물의 당량에 대한 화학식 903으로 기재되는 화합물의 용액을 메틸렌 클로라이드(methylene chloride)와 같은 유기용매에서 몇시간 동안 실온에서 교반한다. 결과는 TLC등에 의해 관찰한다. 혼합된 화학식 905로 기재되는 화합물을 정제하고 분리한다.
화학식 907로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 9에 따라, 단계 3에서, 화학식 905로 기재되는 화합물 및 암모니움 아세테이트(ammonium acetate)의 잔여물의 용액을 아세트산에서 딘-스타르크 트 랩(Dean-Stark trap) 및 응결장치(condenser)를 사용하여 환류하면서 열을 가한다. 결과는 TLC등에 의해 관찰한다. 혼합된 화학식 907로 기재되는 화합물을 정제하고 분리한다.
화학식 909로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 9에 따라, 단계 4에서, R13이 아미노알킬 보호원자단을 포함하는 아미노 보호원자단이 제거된다. 예를 들어, 아미노 기가 혼합된 프탈이미드(phthalimide)로 보호되는 경우, 보호원자단이 제거된다. 화학식 907로 기재되는 화합물 및 무수 하이드라진(anhydrous hydrazine)의 잔여물의 용액을 에탄올과 같은 극성 양자성 용매에서 환류하면서 열을 가한다. 반응은 5℃에서 냉각시키고, 침전물을 여과한다. 여과물은 진공농축하고, 화학식 909로 기재되는 화합물을 수득하기 위하여 정제한다. 또 다른 조건에서 다른 보호원자단을 제거하기 위해 당업계에서 사용 가능한 한가지의 기술이 적절하게 사용 될 수 있다.
반응 도식 10
Figure 112004047311217-pct00016
화학식 1003으로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 10에 따라, 단계 1에서, 카르밤산 에스테르가 포함된 선택적으로 치환된 알데하이드와 함께 화학식 109로 기재되는 아민의 환원성 아미노화는 우레탄(urethane) 중간물(intermediate)을 제공한다. 더욱 구체적으로는 화학식 109로 기재되는 화합물 및 적절한 보호 알데하이드(Seki, et al., Chem. Pharm. Bull., 44:2061, 1996)의 당량에 대한 용액을 디클로로메탄에서 소디움 트리아세톡시브로하이드라이드(sodium triacetoxyborohyderide)와 같은 환원 시약의 잔여물을 조금씩 가한다. 결과물의 혼탁한 혼합물을 실온에서 방치한다. 결과는 TLC등에 의해서 관찰한다. 혼합된 화학식 1003으로 기재되는 화합물을 분리하고 정제과정 없이 저급단계에 사용한다.
화학식 1005로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 10에 따라, 단계 2에서, 아미노 보호원자단 PG가 제거된다. PC가 Boc 보호원자단 일 경우, 디클로로메탄과 같은 비극성 비양자성 용매에서 트리플루오로아세트산과 같은 강산과 함께 화학식 1003으로 기재되는 화합물의 용액을 처리하여 완성될 수 있다. 반응 용액은 하룻밤 동안 실온에 방치되고, 감압농축된다. 잔여물은 정제과정없이 저급단계에 사용되는 화학식 1005로 기재되는 화합물을 수득하기 위해 분리한다.
화학식 1007로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 10에 따라, 단계 3에서, 화학식 1005로 기재되는 화합물의 용액을 디클로로메탄과 같은 비극성 비양자성 용매에서 당량에 대한 잔여물, 바람직하게는 트리에틸아민과 같은 아민 염기의 2 당량 또는 화학식 R9-CO-Cl로 기재되는 산 염화물에 대한 적은 양의 잔여물을 가한다. 결과 용액은 약 3시간 동안 실온에서 교반한다. 결과는 TLC등에 의해 관찰한다. 혼합된 화학식 1007로 기재되는 화합물을 정제하고 분리한다.
화학식 1009로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 10에 따라, 단계 4에서, 화학식 1007로 기재되는 화합물의 용액을 산염화인(phosphorus oxychloride)의 잔여물에서 환류하면서 열을 가한다. 8시간 후, 반응 혼합물을 실온에서 냉각시키고, 감압 농축한다. 혼합된 화학식 1009로 기재되는 화합물을 정제하고 분리한다.
반응 도식 11
Figure 112004047311217-pct00017
화학식 1109로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 10의 단계 3 및 4의 어느 한 단계에서, 아세트산을 사이클화(cyclization)로 조절하는 화학식 1005로 기재되는 1차 아민의 아실화(acylation)는 화학식 1109로 기재되는 목표 화합물을 제공하는 중간물 아미드의 분리과정 없이 수행될 수 있다. 이 경로는 반응 도식 11에서 보여준다.
더욱 구체적으로, 화학식 1005로 기재되는 화합물의 용액을 디클로로메탄과 같은 비극성 비양자성 용매에서 화학식 R9-CO-Cl로 기재되는 산 염화물의 당량에 대한 잔여물, 바람직하게는 트리에틸아민과 같은 아민 염기의 2 당량을 가한다. 결과 용액은 약 2시간 동안 실온에서 교반한 다음, 감압농축한다. 고체 결과물에 빙초산(glacial acetic acid)을 처리하고, 부유 결과물은 약 48시간 동안 환류하면서 열을 가한다. 반응은 실온에서 냉각 시키고, 감압농축한다. 혼합된 화학식 1109로 기재되는 화합물을 정제하고 분리한다.
반응 도식 12
Figure 112004047311217-pct00018
반응 도식 12에 따라, 화학식 203으로 기재되는 화합물은 트리에틸아민과 같은 염기의 존재하에서 디클로로메탄과 같은 비극성 비양자서 용매에서 화학식 R15O(CO)Cl로 기재되는 화합물의 소량의 잔여물로 반응된다. 화학식 1203으로 기재되는 화합물인 생성물을 정제하고 분리한다.
반응 도식 13
Figure 112004047311217-pct00019
반응 도식 13에 따라, 화학식 203으로 기재되는 화합물은 트리에틸아민과 같 은 염기의 존재하에서 디클로로메탄과 같은 비극성 비양자서 용매에서 이소시아네이트(isocyanate) R17-N=C=O의 소량의 잔여물을 처리한다. 화학식 1303으로 기재되는 화합물인 생성물을 정제하고 분리한다.
반응 도식 14
Figure 112004047311217-pct00020
화학식 1403으로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 14에 따라, 단계 1에서, THF와 같은 비극성 비양자성 용매 및 선 택적으로 치환된 비닐 마그네슘 브로마이드 용액의 잔여물을 비극성 비양자서 용매, 더욱 바람직하게는, THF에서 선택적으로 치환된 비닐 마그네슘 브로마이드 1.0M 3 당량의 용액을 질소상태하에서 저으면서 -78℃에서 냉각시킨다. 상기 혼합물을 화학식 1401로 기재되는 화합물의 용액과 함께 THF와 같은 비극성 비양자성 용매에서 액적형(dropwise)으로 30분 이상 처리한다. 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반한 후, 냉각조(cooling bath)에서 제거하고, 반응 혼합물은 실온에서 하룻밤(약 15시간) 동안 천천히 열을 가한다. 화학식 1403으로 기재되는 화합물인 생성물을 정제하고 분리한다.
화학식 1405로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 14에 따라, 단계 2에서, 화학식 1403으로 기재되는 화합물의 용액을 아르곤(argon)과 같은 비활성 기체하에서 아세토니트릴(acetonitrile)과 같은 무수 비극성 비양자성 용매에서 R1'가 선택적으로 치환된 비닐, 선택적으로 치환된 아릴 또는 선택적으로 치환된 헤테로아릴이고 X가 I, Br 또는 OTfr와 같은 화학식 R1'-X로 기재되는 화합물의 당량 및 바람직하게는 0.025 당량의 팔디움 Ⅱ(palladium Ⅱ) 아세테이트에 의한 트리에틸아민과 같은 염기를 가한다. 상기 용액은 약 80℃로 가열된다. 약 15시간 후, 반응 혼합물은 실온에서 냉각된다. 화학식 1405로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고, 즉시 정제한다.
화학식 1407로 기재되는 화합물의 제조
화학식 1405로 기재되는 화합물의 용액에 질소상태하의 에틸 아세테이트와 같은 비극성 비양자성 용매에서 탄소의 10 wt % 팔라디움을 가한다. 질소를 수소의 둥근플라스크로 전환하고 플라스크의 잔여물을 제거한다. 3시간 후, 반응 플라스크의 질소를 제거하고, 에틸 아세테이트와 같은 용매로 헹군 셀라이트 판(celite pad)으로 여과한다. 화학식 1407로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 정제한다.
반응 도식 15
Figure 112004047311217-pct00021
반응 도식 15에 따라, 단계12에서, 카르보닐디이미다졸(carbonyldiimidazole)의 당량에 화학식 1501로 기재되는 화합물, 바람직하게는, 아미노 보호원자단 PG가 Boc인 실온 온도의 용액을 THF와 같은 비극성 비양자성 용매에서 천천히 가한다. 약 1시간 후, 화학식 1503으로 기재되는 화합물인 생성물을 분리하고 추가적인 정제 없이 사용한다.
화학식 1505로 기재되는 화합물의 제조
반응 도식 15에 따라, 단계 2에서, 그리그나드 시약은 THF와 같은 비극성 비양자성 용매에서 화학식 R1CH2Br로 기재되는 화합물 및 마그네슘 변환물(magnesium turnings)로부터 제조된다. THF와 같은 비극성 비양자성 용매에서 화학식 1503으로 기재되는 화합물의 용액을 0 내지 5℃로 냉각시킨다. 그리그나드 시약의 용액에 화학식 1503으로 기재되는 화합물의 0 내지 5℃ 온도의 용액을 주사기(syringe)를 이용하여 가한다. 온도는 내부 온도계에 의해 측정되고 15℃가 초과되지 않도록 한다. 반응 혼합물은 약 1시간 동안 0 내지 5℃로 유지된다. 화학식 1505로 기재되는 화합물의 생성물을 분리하고 정제한다.
바람직한 과정 및 최후 단계(Preferred Processes and Last Steps)
일반식 I로 기재되는 화합물은 염이 가해진 결합된 산 또는 염기를 형성한 약학적으로 이용가능한 산 또는 염기가 선택적으로 첨가된다.
일반식 I로 기재되는 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 가해진 산은 일반식 I의 유리 염기가 결합된 형태의 염기가 선택적으로 참가된다. 일반식 I로 기 재되는 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 가해진 염기 일반식 I의 유리 산이 결합된 형태의 산이 선택적으로 참가된다.
바람직한 화합물
R 2 또는 R 2 '가 수소가 아닐 경우, 바람직한 R 1
일반식 I로 기재되는 화합물의 경우, 바람직한 예로서, 한가지 또는 R2 또는 R2'가 수소가 아닐 경우, 더욱 바람직하게는 R2 또는 R2'의 한가지가 수소가 아닐 경우, R1은 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C8 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 헤테로아릴, 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4 알킬 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴-C1 내지 C4 알킬, 더 바람직하게는 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4 알킬로 구성된 군으로 구성된 군으로부터 더욱 구체적인 바람직한 예로, R1은 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 선택적으로 치환된 페닐-C1 내지 C4-알킬, 선택적으로 치환된 나프탈레닐메틸(naphthalenylmethyl), 선택적으로 치환된 페닐 및 나프틸(naphthyl)로 구성된 군으로부터 선택된다. 더 바람직하게는 R1은 선택적으로 치환된 페닐-C1 내지 C4 -알킬 또는 선택적으로 치환된 헤테로아릴-C1 내지 C4 알킬이다.
가장 바람직한 구체적인 예로서, R1은 나프틸, 페닐, 브로모페닐(bromophenyl), 클로로페닐, 메톡시페닐, 에톡시페닐, 톨릴(tolyl), 디메틸페닐, 클로로플루오로페닐, 메틸클로로페닐, 에틸페닐, 페네틸(phenethyl), 벤질, 클로로벤질(chlorobenzyl), 메틸벤질(methylbenzyl), 메톡시벤질(methoxybenzyl), 시아노벤질(cyanobenzyl), 하이드록시벤질(hydroxybenzyl), 디클로로벤질(dichlorobenzyl), 디메톡시벤질(dimethoxybenzyl) 또는 나프탈레닐메틸이다. 더 바람직한 R1은 벤질, 시아노벤질, 메톡시벤질 또는 나프탈레닐메틸이다. 가장 바람직한 R1은 벤질이다.
R 2 또는 R 2 '가 수소일 경우, 바람직한 R 1
구체적인 예로서, R2 또는 R2'가 모두 수소일 경우, 바람직하게는 R1은 R1이 치환된 페닐기가 아닐 경우로, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아릴 C1 내지 C8 알킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴-C1 내지 C4 알킬로 구성된 군으로부터 선택된다. 더욱 바람직하게는 R1은 선택적으로 치환된 아릴 C1 내지 C8 알킬 또는 선택적으로 치환된 헤테로아릴-C1 내지 C4 알킬이다. 더욱 바람직하게, R2 또는 R2'가 모두 수소일 경우, R1은 선택적으로 치환된 페닐-C1 내지 C4-알킬, 선택적으로 치환된 나프탈레닐메틸이다. R2 또는 R 2'가 모두 수 소일 경우의 더욱 바람직한 구체적인 예로서, R1은 벤질, 클로로벤질, 메틸벤질, 메톡시벤질, 시아노벤질, 하이드록시벤질, 디클로로벤질, 디메톡시벤질 및 나프탈레닐메틸로 구성된 군으로부터 선택된다. 더 바람직한 R1은 벤질, 시아노벤질, 메톡시벤질 또는 나프탈레닐메틸이다. 가장 바람직한 R1은 벤질이다.
바람직한 R 2
일반식 I로 기재되는 화합물의 경우, 당업계의 통상적인 기술로 적절하게 사용될 수 있는, 본원에 기재된 화합물은 R2 및 R2'가 부착된 탄소에 가능성있는 키랄 중심을 갖는다. R2 및 R2' 기는 같거나 다를 수 있는데, 다를 경우에는, 화합물은 키랄, 즉, 입체중심을 갖는다. R2 및 R2'가 다를 경우, 바람직한 구체적인 예로, R2'는 수소이고 R2는 수소이외의 것이다. 실제적으로 임의의 순수 거울상입체이성질체가 일반적으로 바람직하지만, 본 발명에서는 순수한 거울상이성질체 및 라세미 혼합물을 포함하는 거울상이성질체의 혼합물의 사용을 권장한다. "실제적인 임의의 순수" 또는 "거울상입체이성질체적 순수"라는 의미는 예상되는 거울상입체이성질체가 1% 이상의 단일 불순물이 없는 적어도 95% 정도, 바람직하게는 적어도 97.5%정도의 거울상입체이성질체 잔여물인 것을 의미한다. 바람직한 구체적인 예로서, R2 및 R2'가 부착된 입체중심은 R 구조이다.
구체적인 예의 한가지로서, R2가 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬이고 R2'가 수소 또는 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬이다. 더욱 바람직하게는, R2'가 수소이고, R2가 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬이다. 가장 바람직한 구체적인 예로, R2가 메틸, 에틸, 프로필, 바람직하게는 c-프로필 또는 이소프로필인, 부틸, 바람직하게는 t-부틸, 메틸티오에틸(methylthioethyl), 메틸티오메틸(methylthiomethyl), 아미노부틸, (CBZ)아미노부틸, 사이클로헥실메틸(cyclohexylmethyl), 벤질옥시메틸(benzyloxymethyl), 메틸설피닐에틸(methylsulfinylethyl), 메틸설피닐메틸(methylsulfinylmethyl) 및 하이드록시메틸로 구성되는 군으로부터 선택되어지고, R2'가 수소이다. 특히, R2'가 수소이고 R2가 에틸 또는 프로필, 바람직하게는 c-프로필 또는 이소프로필일 경우가 바람직하다. 더욱 바람직하게는 R2는 이소프로필이다. 더 바람직한 구체적인 예는 R2 및 R2'가 부착된 입체중심이 R 구조인 것이다.
R 12 가 -N(R 4 )(COR 3 )일 경우, 바람직한 R 3 기
R12가 -N(R4)(COR3)인 일반식 I로 기재되는 화합물의 경우, 바람직한 구체적인 예로서, R3가 선택적으로 치환된 C1 내지 C6 알킬, 선택적으로 치환된 아릴 C1 내지 C4 알킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴-C1 내지 C4 알킬, 선택적으로 치환된 헤 테로아릴, 선택적으로 치환된 아릴, R15가 선택적으로 치환된 C1 내지 C6 알킬 및 선택적으로 치환된 아릴로 구성된 군으로부터 선택되고, R17이 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C6 알킬 및 선택적으로 치환된 아릴로 구성된 군으로부터 선택되어지는 R15O 및 R17-NH로부터 구성된 군으로부터 선택된다. 바람직한 R3는 예를 들어, C1 내지 C6 알킬이 저급-알콕시로 치환된 선택적으로 치환된 C1 내지 C6 알킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴 및 선택적으로 치환된 아릴이다.
더 바람직한 구체적인 예로서, R3가 R17NH- 또는 R15O가 아닐 경우, R 3는 페닐, 할로, C1 내지 C4 알킬, 하이드록시, 예를 들어, 하이드록시메틸로 치환된 C1 내지 C4 알킬, C1 내지 C4 알콕시, C1 내지 C4 알콕시로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 니트로, 포르밀(formyl), 카르복시, 시아노, 메틸렌디옥시(methylenedioxy), 에틸렌디옥시(ethylenedioxy), 아실, 예를 들면, 아세틸, -N-아실, 예를 들면, N-아세틸 또는 트리플루오로메틸 중 적어도 하나 이상의 치환기로 치환된 페닐, 벤질, 페녹시메틸, 할로페녹시메틸, 페닐비닐, 헤테로아릴, C1 내지 C4 알킬 또는 CF3과 같은 할로로 치환된 C1 내지 C4 알킬로 치환된 헤테로아릴, C1 내지 C4 알콕시로 치환된 C1 내지 C4 알킬 및 벤질옥시메틸로 구성되는 군으로부터 선택된다.
가장 바람직한 구체적인 예로서, R3가 R17NH- 또는 R15O가 아닐 경우, R 3는 페 닐, 할로페닐, 디할로페닐, 시아노페닐, 할로(트리플루로오메틸)페닐, 하이드록시메틸페닐, 메톡시페닐, 에톡시페닐, 카르복시페닐, 에틸페닐, 톨릴, 메틸렌디옥시페닐, 에틸렌옥시페닐, 메톡시클로로페닐, 디하이드로-베조디옥시닐(dihydro-benzodioxinyl), 메틸할로페닐, 트리플루로오메틸페닐, 비스(트리플르루오메틸)페닐벤질, 푸라닐, 푸라닐로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 트리플루오로메틸푸라닐, 트리플루오로메틸푸라닐로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 벤조푸라닐(benzofuranyl), 티오페닐, 티오페닐로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 벤조티오페닐, 벤조티아디아졸릴(benzothiadiazolyl), 피리디닐(pyridinyl), 인돌릴, 메틸리리디닐(methylpyridinyl), 트리플루오로메틸피리디닐(trifluoromethylpyridinyl), 피롤릴(pyrrolyl), 퀴놀리닐(quinolinyl), 피콜리닐(picolinyl), 피라졸릴(pyrazolyl), 피라졸릴로 치환된 C1 내지 C4 알킬, N-메틸 피라졸릴, N-메틸 피라졸릴로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 피라지닐로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 이소옥사졸릴로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 벤조이소옥사졸릴, 모르폴리노메틸(morpholinomethyl), 메틸티오메틸(methylthiomethyl), 메틸옥시메틸(methoxymethyl), N-메틸 이미다졸릴 및 이미다졸릴로 구성된 군으로부터 선택된다.
더욱 바람직하게는, R3는 톨릴, 할로페닐, 할로메틸페닐, 하이드록시메틸페닐, 메틸렌디옥시페닐, 포르밀페닐 또는 시아노페닐이다.
더욱 바람직한 구체적인 예로서, R3가 R17NH-일 경우, R17은 수소, C1 내지 C4 알킬, 사이클로헥실, 페닐 및 할로, C1 내지 C4 알킬, C1 내지 C4 알콕시 또는 C1 내지 C4 알킬티오 치환된 페닐로 구성된 군으로부터 선택된다.
가장 바람직한 구체적인 예로서, R3가 R17NH-일 경우, 수소, 이소프로필, 부틸, 사이클로헥실, 페닐, 브로모페닐, 디클로로페닐, 메톡시페닐, 에틸페닐, 톨릴, 트리플루오로메틸페닐 또는 메틸티오페닐이다.
구체적인 예로서, R3가 R15O 일 경우, R15는 선택적으로 치환된 C1 내지 C8 알킬 및 선택적으로 치환된 아릴이다.
R 12 가 -N(R 4 )(SO 2 R 3a )일 경우, 바람직한 R 3a 기
바람직하게는, R12가 -N(R4)(SO2R3a)일 경우, R3a는 C1 내지 C13 알킬, 나프틸, 할로, C1 내지 C4 알킬, C1 내지 C4 알콕시, 시아노, 니트로, 메틸렌디옥시 또는 트리플루오로메틸로 치환된 페닐, 바이페닐릴 및 헤테로아릴로 구성되는 군으로부터 선택된다. 더 바람직하게는, R3a는 할로, C1 내지 C4 알킬, C1 내지 C4 알콕시, 시아노, 니트로, 메틸렌디옥시 또는 트리플로오로메틸로 치환된 페닐 및 나프틸로부터 선택된다.
R 12 가 -N(R 4 )(CH 2 R 3b )일 경우, R 3b 기
바람직하게는, R12가 -N(R4)(CH2R3b)일 경우, R3b는 C1 내지 C13 알킬, 치환된 C1 내지 C4 알킬, 페닐, 나프틸, 카르복시, 알콕시카르보닐 시아노, 할로, C1 내지 C4 알킬, C1 내지 C13 알콕시, 니트로, 메틸렌디옥시 또는 트리플루오로메틸로 치환된 페닐, 바이페닐릴, 벤질 및 헤테로사이클릴로부터 선택된다.
가장 바람직하게는 R3b는 할로페닐, 폴리할로페닐, 메틸할로페닐, 톨릴, 디메틸페닐, 메톡시페닐, 디메톡시페닐, 시아노페닐, 트리플루오로메틸페닐, 트리플루오로메톡시페닐, 비스(트리플루오로메틸)페닐, 카르복시페닐, t-부틸페닐, 메톡시카르보닐페닐, 피페리디닐 및 나프틸로 구성된 군으로부터 선택된다.
R 12 가 -NHR 4 , -N(R 4 )(COR 3 ) 또는 -N(R 4 )(CH 2 R 3b ) 일 경우, R 4 기
바람직한 구체적인 예로서, R12가 -NHR4, -N(R4)(COR3) 또는 -N(R4)(CH2R3b)일 경우, R4는 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C13 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4-알킬, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴-C1 내지 C4-알킬, 바람직하게는 수소 또는 선택적으로 치환된 C1 내지 C13 알킬로 구성된 군으로부터 선택된다.
더욱 바람직하게는, R4는 수소, C1 내지 C4 알킬, 사이클로헥실, 하이드록실, C1 내지 C4 알콕시 또는 C1 내지 C4 알킬로 치환된 페닐, 벤질, 헤테로아릴메틸, 헤테로아릴에틸, 헤테로아릴프로필 및 R16이 하이드록실, 디(C1 내지 C4 알킬)아미노, (C1 내지 C4 알킬)아미노, 아미노, C1 내지 C4 알콕시 또는 N-헤테로사이클릴, 바람직하게는 피롤리디노(pyrrolidino), 피페리디노 또는 이미다졸릴인 R16-알킬렌으로 구성된 군으로부터 선택된다.
더욱 바람직하게는, R4는 R16이 아미노, C1 내지 C4 알킬아미노, 디(C1 내지 C4 알킬)아미노, C1 내지 C4 알콕시, 하이드록시 또는 N-헤테로사이클릴인 R16-알킬렌이다. 바람직하게는 R16이 아미노이다.
가장 바람직한 구체적인 예로서, R12가 -NHR4, -N(R4)(COR3) 또는 -N(R4)(CH2R3b)일 경우, R4는 수소, 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 사이클로헥실, 카르복시에틸, 카르복시메틸, 메톡시에틸, 하이드록시에틸, 하이드록시프로필, 디메틸아미노에틸, 디메틸아미노프로필, 디에틸아미노에틸, 디에틸아미노프로필, 아미노프로필, 메틸아미노프로필, 2,2-디메틸-3-(디메틸아미노)프로필, 1-사이틀로헥실-4-(디에틸아미노)부틸, 아미노에틸, 아미노부틸, 아미노펜틸, 아미노헥실, 아미노에톡시에틸, 이소프로필아미노프로필, 디이소프로필아미노에틸, 1-메틸-4-(디에틸아미노)부틸, (t-Boc)아미노프로필, 하이드록시페닐, 벤질, 메톡시페닐, 메틸메톡시페닐, 디메틸페닐, 톨릴, 에틸페닐, (옥소피프롤리디닐)프로필, (메톡시카르보 닐)에틸, 벤질피페리디닐, 피리디닐에틸, 피리디닐메틸, 모르폴리닐에틸, 모르폴리닐프로필, 피페리디닐, 아제티디닐메틸, 아제티디닐에틸, 아제티디닐프로필, 피롤리디닐에틸, 피롤리디닐프로필, 피페리디닐메틸, 피페리디닐에틸, 이미다졸릴프로필, 이미다졸릴에틸, (에틸피롤리디닐)메틸, (메틸피롤리디닐)에틸, (메틸피페리디닐)프로필, (메틸피페라지닐)프로필, 푸라닐메틸 및 인돌릴에틸로 구성된 군으로부터 선택된다.
더욱 바람직하게, R4는 아미노에틸, 아미노프로필, 아미노부틸, 아미노펜틸, 아미노헥실, 메틸아미노에틸, 메틸아미노프로필, 메틸아미노부틸, 메틸아미노펜틸, 메틸아미노헥실, 디메틸아미노에틸, 디메틸아미노프로필, 디메틸아미노부틸, 디메틸아미노펜틸, 디메틸아미노헥실, 에틸아미노에틸, 에틸아미노프로필, 에틸아미노부틸, 에틸아미노펜틸, 에틸아미노헥실, 디에틸아미노에틸, 디에틸아미노프로필, 디에틸아미노부티일(diethylaminobutyyl), 디에틸아미노펜틸 또는 디에틸아미노헥실, 가장 바람직하게는 아미노프로필이다.
R 12 가 -N(R 4 )(SO 2 R 3a ) 일 경우, R 4 기
바람직하게는, R12가 -N(R4)(SO2R3a) 일 경우, R4은 C1 내지 C4 알킬, 사이클로헥실, 하이드록실, C1 내지 C4 알콕시 또는 C1 내지 C4 알킬로 치환된 페닐, 벤질, 헤테로아릴메틸, 헤테로아릴에틸, 헤테로아릴프로필, 헤테로아릴에틸, 헤테로아릴 프로필 및 R16이 하이드록실, 디(C1 내지 C4 알킬)아미노, (C1 내지 C4 알킬)아미노, 아미노, C1 내지 C4 알콕시 또는 N-헤테로사이클릴, 바람직하게는 피롤리디노(pyrrolidino), 피페리디노 또는 이미다졸릴인 R16-알킬렌으로 구성된 군으로부터 선택된다.
R 12 가 이미다졸일 경우
바람직하게는, R12가 이미다졸일 경우, R12는 하기의 일반식 Ⅳ로 기재되는 화학식을 포함한다:
Figure 112004047311217-pct00022
이때,
R9는 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C8 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4-알킬, 선택적으로 치환된 헤테로아릴-C1 내지 C4- 알킬, 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4-알콕시, 선택적으로 치환된 헤테로-C1 내지 C4-알콕시, 선택적으로 치환된 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 선택되어지고, R13 및 R13'은 각각 독립적으로 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C8 알킬, 선택적으로 치환된 아릴 또는 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4-알킬, 바람직하게는 선택적으로 치환된 아릴이다. 더 바람직하게는, R9는 C1 내지 C8 알킬, C1 내지 C8 알콕시, 및/또는 할로, 필수적으로, C1 내지 C8 알킬 및/또는 할로로 치환된 페닐, 페닐 또는 벤질이다. 더욱 더 바람직하게는, R9는 톨릴, 할로페닐 또는 할로메틸페닐이다.
바람직한 구체적 예로서, R13은 수소이고, R13'은 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬이다. 더 바람직하게는 R13은 수소이고, R13'은 아미노메틸, 아미노에틸, 아미노프로필, 아세틸아미노-메틸, 아세틸아미노-에틸, 벤질록시카르보닐아미노-메틸 또는 벤질록시카르보닐아미노-에틸이다.
R 12 가 이미다졸린일 경우
바람직하게는, R12가 이미다졸린일 경우, R12는 하기의 일반식 Ⅴ로 기재되는 화학식을 포함한다:
Figure 112004047311217-pct00023
이때,
R9는 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C8 알킬, 선택적으로 치환된 아릴, 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4-알킬 및 선택적으로 치환된 헤테로아릴로부터 선택되어지고, R10, R10', R14 및 R14'은 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C8 알킬, 선택적으로 치환된 아릴 및 선택적으로 치환된 아릴-C1 내지 C4-알킬로부터 각각 독립적으로 선택되어진다. 더 바람직하게는, R9는 메틸렌디옥시페닐, 페닐, C1 내지 C 4 알킬, C1 내지 C4 알콕시 및/또는 할로로 치환된 페닐, 또는 벤질이다. 바람직한 구체적 예로서, R9는 메틸렌디옥시페닐, 페닐 또는 메톡시, 할로 및/또는 메틸, 바람직하게는 할로 및/또는 톨릴을 포함하는 메틸로 치환된 페닐, 더욱 바람직하게는 메틸렌디옥시페닐 또는 상기의 치환된 페닐들이다. 또 다른 바람직한 구체적 예로서, R10, R10', R14 및 R14'은 각각 독립적으로 수소 또는 선택적으로 치환된 알킬, 바 람직하게는 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬이다. 더 바람직하게는, R10 및 R10'은 각각 독립적으로 수소 또는 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 더 바람직하게는 메틸 또는 아미노알킬을 포함하는 군으로부터 선택되어지고, R14 및 R14'은 수소이다.
바람직한 R 5 , R 6 , R 7 및 R 8 기
일반식 I로 기재되는 화합물의 경우, 바람직한 구체적인 예로서, R5, R6, R7 및 R8은 수소, 아실, 알킬, 알킬, 알콕시, 할로, 하이드록실, 니트로, 시아노, 디알킬아미노, 알킬설포닐, 알킬설폰아미도, 알킬티오, 카르복실알킬, 카르복시아미도, 아미노카르보닐, 저급-알킬아미노카르보닐, 예를 들어, 메틸아미노카르보닐 또는 에틸아미노카르보닐, 디(저급-알킬)아미노카르보닐, 예를 들어, 디메틸아미노카르보닐 또는 디에틸카르보닐, 아릴 또는 헤테로아릴로 치환된 알킬, 알콕시, 알킬, 아실, 알콕시, 할로, 하이드록실, 니트로, 시아노, 디알킬아미노, 알킬설포닐, 알킬설폰아미도, 알킬티오, 카르복시알킬, 카르복시아미도, 아미노카르보닐, 저급-알킬아미노카르보닐, 예를 들어, 메틸아미노카르보닐 또는 에틸아미노카르보닐, 디(저급-알킬)아미노카르보닐, 예를 들어, 디메틸아미노카르보닐 또는 디에틸카르보닐, 아릴 또는 헤테로아릴로 치환된 알콕시, 할로겐, 하이드록실, 니트로, 시아노, 디알킬아미노, 알킬설포닐, 알킬설폰아미도, 알킬티오, 카르복시알킬, 카르복시아미도, 아미노카르보닐, 아릴, 알킬, 아실, 알콕시, 할로, 하이드록실, 니트로, 시아노, 디알킬아미노, 알킬설포닐, 알킬설폰아미도, 알킬티오, 카르복시알킬, 카르복시아미도, 아미노카르보닐, 저급-알킬아미노카르보닐, 예를 들어, 메틸아미노카르보닐 또는 에틸아미노카르보닐, 디(저급-알킬)아미노카르보닐, 예를 들어, 디메틸아미노카르보닐 또는 디에틸카르보닐, 아릴 또는 헤테로아릴로 치환된 아릴, 헤테로아릴 또는 알킬, 아실, 알콕시, 할로, 하이드록실, 니트로, 시아노, 디알킬아미노, 알킬설포닐, 알킬설폰아미도, 알킬티오, 카르복시알킬, 카르복시아미도, 아미노카르보닐, 저급-알킬아미노카르보닐, 예를 들어, 메틸아미노카르보닐 또는 에틸아미노카르보닐, 디(저급-알킬)아미노카르보닐, 예를 들어, 디메틸아미노카르보닐 또는 디에틸카르보닐, 아릴 또는 헤테로아릴로 치환된 헤테로아릴로 구성된 군으로부터 각각 독립적으로 선택된다.
R5, R6, R7 및 R8은 수소, 아미노, 알킬아미노, 하이드록실, 할로겐, 바람직하게는 클로로 및 플루오로 할로겐, C1 내지 C4 알킬, 바람직하게는 메틸, C1 내지 C4 할로알킬, 바람직하게는 트리플루오로메틸, C1 내지 C4 알콕시, 바람직하게는 메톡시, C1 내지 C4 할로알콕시 및 시아노로 구성된 군으로부터 각각 독립적으로 선택된다. 더 바람직하게는, R5, R6, R7 및 R8은 메톡시, 수소, 시아노 또는 할로, 특히 Cl 및 F이다. 추가적으로 바람직한 각 치환기는, R5는 아미노, 알킬아미노, 트리플루오로메틸, 수소 또는 할로이고, R6은 수소, 알킬, 바람직하게는 메틸 또는 할로이 며, R7은 수소, 할로, 알킬, 바람직하게는 메틸, 알콕시, 바람직하게는 메톡시, 시아노 또는 트리플루오로메틸이고, R8은 수소 또는 할로이다. 더 추가적으로 바람직하게는 R5, R6, R7 및 R8 중에서 어느 하나가 수소가 아닌 화합물, 바람직하게는 R7이 수소가 아닌 화합물이다. 더 바람직하게는 R5, R6 및 R8이 수소이고 R 7이 시아노, 메톡시 또는 할로겐, 특히 Cl 및 F인 화합물이다.
바람직한 염의 형태
바람직한 화합물은 일반적으로 염이 가해진 산을 형성하는 것이 가능하다. 예를 들어, 염이 가해진 산을 형성하기 위하여 약학적으로 허용 가능한 산과 함께 반응하는 위치를 포함한다. 본 발명에서는 일반식 I로 기재되는 화합물에 대한 약학적으로 허용 가능한 염이 가해진 산을 포함한다. 본 발명의 화합물에 대한 염이 가해진 산은 원래의 화합물과 염산, 브롬화산, 황산, 인산, 아세트산, 말레산, 숙신산 또는 메탄술폰산과 같은 산의 잔여물로부터 적절한 용매를 가하여 표준적인 방법으로 제조된다. 바람직하게는 염의 형태는 특히 바람직한 염산염 형태와 함께 염산, 인산 및 옥살산 염이다.
약학적으로 허용 가능하지 않은 일반식 I로 기재되는 화합물의 염 및/또는 용매화합물은 일반식 I로 기재되는 화합물 또는 일반식 I로 기재되는 화합물 자체에 대한 약학적으로 허용 가능한 염 및/또는 용매화합물을 제조하는 중간물 및 본 발명의 또다른 형태로써 사용될 수 있다.
바람직한 아속(subgenus)
일반식 I로 기재되는 화합물의 바람직한 아속으로, R1은 벤질, 할로벤질, 메톡시벤질, 시아노벤질 또는 나프탈렌메틸이고, R2는 에틸 또는 프로필이며, R2'는 수소이고, R5는 수소이며, R6는 수소이고, R7는 할로, 시아노, 메톡시 또는 수소이며, R8은 수소이고, R12는 R3이 선택적으로 치환된 아릴, 바람직하게는 할로페닐, 할로메틸페닐, 메틸렌디옥시페닐, 메톡시페닐, 에톡시페닐, 시아노페닐 또는 저급-아실 또는 저급-알킬아미노카르보닐, 예를들어, 메틸아미노카르보닐 또는 에틸아미노카르보닐로 치환된 페닐로 치환된 아릴 또는 디(저급-알킬)아미노카르보닐, 예를들어, 디메틸아미노카르보닐 또는 디에틸아미노카르보닐로 치환된 페닐이고, R4가 R16이 하이드록실, 디(C1 내지 C4)알킬아미노, (C1 내지 C4 알킬)아미노, 아미노, 피롤리디노, 피페리디노, 이미다졸릴 및 모르폴리노인 R16-알킬렌인 -NR4(COR3)이다. 더 바람직한 구체적인 예로서, R1은 벤질, 할로벤질, 메톡시벤질, 시아노벤질 또는 나프탈렌메틸이고, R2는 프로필, 특히, i- 또는 c- 프로필이다.
일반식 I로 기재되는 화합물의 또 다른 바람직한 아속으로, R1은 벤질, 할로벤질, 메톡시벤질, 시아노벤질 또는 나프탈렌메틸이고, R2는 에틸 또는 프로필이며, R2'는 수소이고, R5는 수소이며, R6는 수소이고, R7는 할로, 시아노, 메톡시 또는 수소이며, R8은 수소이고, R12는 R4가 R16이 하이드록실, 디(C1 내지 C4)알킬아미노, (C1 내지 C4 알킬)아미노, 아미노, 피롤리디노, 피페리디노, 이미다졸릴 또는 모르폴리노인 R16-알킬렌이고, R3b가 선택적으로 치환된 아릴인 -NR4(CH2R3b)이다.
일반식 I로 기재되는 화합물의 더욱 바람직한 아속으로, R1은 벤질, 할로벤질, 메톡시벤질, 시아노벤질 또는 나프탈렌메틸이고, R2는 에틸 또는 프로필로부터 선택되어지고, R2'는 수소이고, R5는 수소이며, R6는 수소이고, R7는 할로, 시아노, 메톡시 또는 수소이며, R8은 수소이고, R12는 R10, R10', R14 및 R14'가 각각 독립적으로 수소 또는 선택적으로 치환된 알킬, 바람직하게는 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬이고, R9가 선택적으로 치환된 페닐, 바람직하게는 할로페닐, 할로메틸페닐, 톨릴 또는 메틸렌디옥시페닐인 상기 화학식으로 기재되는 선택적으로 치환된 이미다졸리닐이다.
더욱 바람직한 구체적 예로서, R1은 벤질, 메톡시벤질 또는 시아노벤질이고, R2는 프로필, 특히, i- 또는 c- 프로필이며, R16은 아미노이다.
일반식 I로 기재되는 화합물의 더욱 바람직한 아속으로, R1은 벤질, 할로벤질, 메톡시벤질, 시아노벤질 또는 나프탈렌메틸이고, R2는 에틸 또는 프로필로부터 선택되어지고, R2'는 수소이고, R5는 수소이며, R6는 수소이고, R7는 할로, 시아노, 메톡시 또는 수소이며, R8은 수소이고, R12는 R13이 수소이고, R13'가 수소 또는 선택적으로 치환된 알킬, 바람직하게는 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬이고, R9가 선택적으로 치환된 아릴, 바람직하게는 할로페닐, 할로메틸페닐, 톨릴 또는 메틸렌디옥시페닐인 상기 화학식으로 기재되는 선택적으로 치환된 이미다졸이이다. 더욱 바람직하게는, R13이 수소이고, R13'가 아미노메틸, 아미노에틸, 아미노프로필, 아세틸아미노메틸, 아세틸아미노에틸, 벤질옥시카르보닐아미노-메틸 또는 벤질옥시카르보닐아미노-에틸이다. 더 바람직한 구체적 예로서, R1은 벤질, 메톡시벤질 또는 시아노벤질이고, R2는 프로필, 특히, i- 또는 c- 프로필이며, R16은 아미노이다.
R12가 -N(R4)(SO2R3a)일 경우, R1은 C1 내지 C4 알킬, 벤질, 치환된 벤질 및 치환된 페닐이고, R2는 C1 내지 C4 알킬이며, R2'는 수소이고, R3a는 치환된 페닐 및 나프틸로부터 선택되어지며, R4는 R16-알킬렌이고, R7은 수소, 플루오로, 메틸 또는 클로로이며, R5, R6 및 R8은 수소이고, R16은 하이드록실, 디(C 1 내지 C4)알킬아미노, (C1 내지 C4 알킬)아미노, 아미노, 피롤리디노, 피페리디노, 이미다졸릴 및 모르폴리노로부터 선택되어진다.
R12가 -NHR4 또는 -N(R4)(CH2R3b)일 경우, 바람직하게는 R1은 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 선택적으로 치환된 벤질, 선택적으로 치환된 페닐 및 선택적으로 치환된 나프탈레닐메틸로 구성된 군으로부터 선택되어지고, R2는 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬이며, R2'는 수소이고, R3b는 선택적으로 치환된 알킬, 선택적으로 치환된 페닐, 비페닐일, 선택적으로 치환된 아랄킬 및 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴이고, R4는 수소, 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 사이클로헥실, 선택적으로 치환된 페닐, 선택적으로 치환된 벤질, 헤테로사이클릴, 헤테로아릴메틸, 헤테로아릴에틸 및 헤테로아릴프로필로 구성된 군으로부터 선택되어진다. 더욱 바람직하게는 R4는 R16이 하이드록실, 디(C1 내지 C4)알킬아미노, (C1 내지 C4 알킬)아미노, 아미노, C1 내지 C4 알콕시 또는 N-헤테로사이클릴인 R16-알킬렌이다.
R12가 -NHR4 또는 -N(R4)(CH2R3b)일 경우, 가장 바람직하게는 R1은 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 선택적으로 치환된 벤질 및 선택적으로 치환된 페닐, 더 바람직하게는 선택적으로 치환된 벤질, 예를 들어, 벤질, 시아노벤질로부터 선택되어지고, R2는 선택적으로 치환된 C1 내지 C4 알킬, 더 바람직하게는 프로필, 특히, i- 또는 c- 프로필이며, R2'는 수소이고, R3b는 선택적으로 치환된 페닐, 선택적으로 치환된 헤테로사이클릴 및 나프틸이며, R4는 수소, 선택적으로 치환된 벤질, 선 택적으로 치환된 헤테로사이클릴 및 R16-알킬렌으로부터 선택되어지고, R5 및 R7 은 할로, 시아노, 메톡시 또는 수소로부터 선택되어지며, R5 및 R8은 수소이고, R16 은 디(C1 내지 C4알킬아미노), (C1 내지 C4 알킬)아미노, 아미노, 피롤리디닐, 피페리디닐, 이미다졸릴 및 모르폴리닐로부터 선택되어진다.
일반식 I로 기재되는 화합물의 더욱 바람직한 아속으로, R1은 벤질, 할로벤질, 특히, Cl-벤질 및 F-벤질, 메톡시벤질, 시아노벤질 또는 나프탈렌메틸이고, R2는 에틸 또는 프로필이며, R2'는 수소이고, R5는 수소이며, R6는 수소이고, R7는 할로, 시아노, 메톡시 또는 수소이며, R8은 수소이고, R12는 R4가 수소, 더 바람직한 구체적 예로서, R1이 벤질, 할로벤질, 시아노벤질이고, R2가 프로필, 특히, 이소프로필 또는 c- 프로필인 -NHR4이다.
R3b가 존재할 경우, 가장 바람직하게는 할로, 메틸, 메톡시, 시아노, 트리플로오로메틸, 트리플루오로메톡시, 카르복시 및/또는 메톡시카르보닐 기, 예를들어, 할로페닐, 폴리할로페닐, 톨릴, 디메틸페닐, 메톡시페닐, 디메톡시페닐, 시아노페닐, 트리플로오로메틸페닐, 트리플루오로메톡시페닐, 비스(트리플루오로메틸)페닐, 카르복시페닐, t-부틸페닐, 메톡시카르보닐페닐로 구성된 군으로부터 적어도 하나이상의 치환기로 치환된 페닐, 피페리디닐 및 나프틸로부터 선택된다.
더욱 더 바람직하게는 하기의 화합물을 포함한다.
N-(3-아미노-프로필)-N-1-[3-(3-시아노-벤질)-7-하이드록시-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필-3-플루오로-4-메틸-벤즈아미드;
4-아세틸-N-(3-아미노-프로필-N- [1-(3-벤질-7-메톡시-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-벤즈아미드;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-p-톨릴-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-3-벤질-4-옥소-4H-크로멘-7-카르보니트릴;
3-벤질-2-[1-(4,4-디메틸-2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-yl)-2-메틸-프로필]-4-옥소-4H-크로멘-7-카르보니트릴;
벤조[1,3]다이옥솔-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-{1-[7-클로로-3-(3-시아노-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-클로로-3-(3-시아노-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-4-메틸-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(7-클로로-3-나프탈렌-1-일메틸-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-2-메톡시-아세트아미드;
4-아세틸-N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-클로로-3-(3-시아노-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-3-플루오로-4-메틸-벤즈아미드;
벤조[1,3]다이옥솔-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
벤조[1,3]다이옥솔-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
3-벤질-2-[1-(4,4-디메틸-2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-7-하이드록시-크로멘-4-온;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-3-플루오로-4-메틸-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-메톡시-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-3-플루오로-4-메틸-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-메톡시-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드;
3-벤질-2-[1-(4,4-디메틸-2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-7-메톡시-크로멘-4-온;
3-벤질-7-플루오로-2{1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,4-디메틸-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-크로멘-4-온;
3-벤질-2-[1-(4,4-디메틸-2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-7-플루오로-크로멘-4-온;
3-벤질-2{1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,4-디메틸-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-7-시아노-크로멘-4-온;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드;
4-아세틸-N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-3-플루오로-N-{1-[7-플루오로-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-4-메틸-벤즈아미드;
4-아세틸-N-(3-아미노-프로필)-N-1-[7-클로로-3-(3-시아노-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필-벤즈아미드;
(2-{1-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-2-p-톨릴-1H-이미다졸-4-일}-에틸)-카르밤산 벤질 에스테르;
2-[1-(2-벤조[1,3]디옥소l-5-일-4,4-디메틸-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7-시아노-크로멘-4-온;
4-아세틸-N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-3-플루오로-4-메틸-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-플루오로-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-4-메톡시-벤즈아미드;
벤조[l,3]다이옥솔-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-1-[7-플루오로-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필-아미드;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-p-톨릴-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-하이드록시-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-3-플루오로-4-메틸-벤즈아미드;
벤조[1,3]다이옥솔-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[l-(3-벤질-7-하이드록시-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-플루오로-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-2-메톡시-아세트아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-플루오로-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-4-메틸-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-사이클로프로필-메틸]-4-메틸-벤즈아미드;
2,3-디하이드로-벤조[1,4]다이옥신-6-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
N-(3-아미노-프로필)-3-플루오로-N-{1-[7-시아노-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-4-메틸-벤즈아미드;
3-벤질-7-클로로-2-[2-메틸-1-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-프로필]-크로멘-4-온;
3-벤질-7-플루오로-2-{1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-크로멘-4-온;
2-[1-(4-아미노메틸-2-p-톨릴-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온;
3-벤질-7-메톡시-2-[2-메틸-1-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-프로필]-크로멘-4-온;
2-[1-(2-벤조[1,3]디옥소l-5-일-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온;
4-아세틸-N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-벤즈아미드;
4-아세틸-N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-시아노-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-벤즈아미드;
3-벤질-7-클로로-2-{1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-크로멘-4-온;
3-벤질-7-플루오로-2-[2-메틸-1-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-프로필]-크로멘-4-온;
2-[1-(2-벤조[1,3]다이옥솔-5-일-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7-플루오로-크로멘-4-온;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-시아노-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-4-메틸-벤즈아미드;
벤조[1,3]다이옥솔-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-{1-[7-시아노-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-아미드;
3-(2-{1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-7-메톡시-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸)-벤조니트릴;
3-{7-클로로-2-[2-메틸-1-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-프로필]-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸}-벤조니트릴;
3-{7-메톡시-2-[2-메틸-1-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-프로필]-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸}-벤조니트릴;
3-{7-플루오로-2-[2-메틸-1-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-프로필]-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸}-벤조니트릴;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-클로로-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-3-플루오로-4-메틸-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[3-(3-시아노-벤질)-7-메톡시-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-4-메틸-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[3-(3-시아노-벤질)-7-메톡시-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-3-플루오로-4-메틸-벤즈아미드;
3-{2-[1-(2-벤조[1,3]디옥소l-5-일-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸-벤조니트릴;
3-벤질-2-{1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-4-옥소-4H-크로멘-7-카르보니트릴;
2-[1-(2-벤조[1,3]다이옥솔-5-일-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-3-벤질- 4-옥소-4H-크로멘-7-카르보니트릴;
3-(7-클로로-2-{1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸)-벤조니트릴;
3-{2-[1-(2-벤조[1,3]다이옥솔-5-일-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-7-메톡시-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸}-벤조니트릴;
3-(7-플루오로-2-1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸)-벤조니트릴;
벤조[1,3]다이옥솔-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-{1-[7-시아노-3-(3-시아노-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-아미드;
벤조[1,3]다이옥솔-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-{1-[3-(3-시아노-벤질)-7-메톡시-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-아미드;
벤조[1,3]다이옥솔-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-{1-[3-(3-시아노-벤질)-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[3-(3-시아노-벤질)-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-4-메틸-벤즈아미드;
벤조[1,3]다이옥솔-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-{1-[7-클로로-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-시아노-3-(3-시아노-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-4-메틸-벤즈아미드;
3-벤질-2-[2-메틸-1-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-프로필]-4-옥소-4H-크로멘-7-카르보니트릴;
2-[1-(2-벤조[1,3]다이옥솔-5-일-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7-메톡시-크로멘-4-온;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-클로로-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-2-메톡시-아세트아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[7-시아노-3-(3-시아노-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-3-플루오로-4-메틸-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-{1-[3-(3-시아노-벤질)-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-3-플루오로-4-메틸-벤즈아미드;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-p-톨릴-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-7-클로로-3-(3-메톡시-벤질)-크로멘-4-온;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-3-벤질-7-플루오로-크로멘-4-온;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-3-벤질-4-옥소-4H-크로멘-7-카르보니트릴;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-p-톨릴-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-3-벤질-7-플루오로-크로멘-4-온;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-7-클로로-3-(3-메톡시-벤질)-크로멘-4-온;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온;
3-벤질-2-{1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-7-메톡시-크로멘-4-온;
3-(2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-p-톨릴-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸)-벤조니트릴;
3-(2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸)-벤조니트릴;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-p-톨릴-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-7-플루오로-3-(3-메톡시-벤질)-크로멘-4-온;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-3-(3-시아노-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-7-카르보니트릴;
N-(3-아미노-프로필)-3-플루오로-N-{1-[7-하이드록시-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-2-일]-2-메틸-프로필}-4-메틸-벤즈아미드;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-p-톨릴-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-7-카르보니트릴;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-에톡시-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-6-트리플루오로메틸-니코틴아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-6-트리플루오로메틸-니코틴아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[l-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-이소니코틴아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-시아노-벤즈아미드;
4-아세틸아미노-N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-벤즈아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸- 프로필]-6-트리플루오로메틸-니코틴아미드;
벤조[1,2,3]티아디아졸-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
벤조[1,2,3]티아디아졸-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
4-아세틸아미노-N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-벤즈아미드;
벤조[1,2,3]티아디아졸-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-니코틴아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메톡시-벤즈아미드;
벤조[1,2,3]티아디아졸-5-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-메틸-피라진-2-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소- 4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-3-디메틸아미노-벤즈아미드;
2-[1-(2-벤조[1,3]다이옥솔-5-일-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-7-카르보니트릴;
7-클로로-3-(3-메톡시-벤질)-2-[2-메틸-l-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-l-일)-프로필]-크로멘-4-온;
7-클로로-2-{1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-3-(3-메톡시-벤질)-크로멘-4-온;
2-[1-(2-벤조[1,3]다이옥솔-5-일-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-7-클로로-3-(3-메톡시-벤질)-크로멘-4-온;
7-플루오로-3-(3-메톡시-벤질)-2-[2-메틸-1-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-프로필]-크로멘-4-온;
7-플루오로-2-{1-[2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필-3-(3-메톡시-벤질)-크로멘-4-온;
2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필-7-플루오로-3-(3-메톡시-벤질)-크로멘-4-온;
2-{1-[4-(2-아세틸아미노-에틸)-2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-이미다졸-1-일]-2-메틸-프로필}-3-(3-메톡시-벤질)-4-옥소-4H-크로멘-7-카르복실산 아미드;
3-(2-{1-[4-(2-아미노-에틸)-2-(3-플루오로-4-메틸-페닐)-이미다졸-l-일]-2-메틸-프로필}-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-3-일메틸)-벤조니트릴;
N-{1-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-2-p-톨릴-1H-이미다졸-4-일메틸}-아세트아미드;
벤조[b]티오펜-2-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소- 4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
1-메틸-1H-인돌-2-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-테르트-부틸-2-메틸-2H-피라졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
2,5-디메틸-2H-피라졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-시아노- 4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-테르트-부틸-2-메틸-2H-피라졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질- 7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
2,5-디메틸-2H-피라졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-클로로- 4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
2,5-디메틸-2H-피라졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-메틸-2H-피라졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-시아노-4- 옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-메틸-2H-피라졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4- 옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
푸란-2-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
푸란-2-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
2,5-디메틸-푸란-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[l-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
2,5-디메틸-푸란-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-메틸-티오펜-2-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소- 4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-메틸-티오펜-2-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-메틸-이소옥사졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-메틸-2-트리플루오로메틸-푸란-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-메틸-이소옥사졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-메틸-이소옥사졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
벤조[c]이소옥사졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
벤조[c]이소옥사졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
1-메틸-1H-피롤-2-카르복실산(3-아미노-프로필)-[1-(3-벤질-7-플루오로-4- 옥소-4H-크로멘-2-일-2-메틸-프로필]-아미드;
1-메틸-1H-이미다졸-4-카르복실산(3-아미노-프로필)-[(R)-1-(3-벤질-7- 아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
N-(3-아미노-프로필)-N-[(R)-1-(3-벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-3-디메틸아미노-벤즈아미드;
5-메틸-2-트리플루오로메틸-푸란-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[(R)-1-(3- 벤질-7-시아노-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
5-메틸-이소옥사졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[(R)-1-(3-벤질-7-시아노-4- 옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
1-메틸-1H-이미다졸-4-카르복실산(3-아미노-프로필)-[(R)-1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
1-메틸-1H-피롤-2-카르복실산(3-아미노-프로필)-[(R)-1-(3-벤질-7-플루오로-4- 옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드;
벤조[c]이소옥사졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[(R)-l-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드; 및
5-메틸-이소옥사졸-3-카르복실산(3-아미노-프로필)-[(R)-1-(3-벤질-7-플루오로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-아미드.
이용, 시험 및 투여(Utility, Testing and Administration)
일반적인 이용(General Utility)
본 발명에서 제조된 화합물은 유사분열의 변형을 포함하여 다양하게 사용된다. 당업계의 통상적인 기술에 적합한 것으로서, 유사분열은 다양한 방식으로 변형된다. 그 중 한가지 방법은 유사분열 경로에서 구성요소의 활성을 증가 또는 감소에 의해 유사분열에 영향을 줄 수 있다. 명백한 차이로서, 유사분열은 어떠한 구성요소를 억제시키거나 활성화 시킴으로써 균형을 불안하게 하여 방해될 수 있다. 유사한 방식들이 유사분열을 변형시키기 위해 사용될 수 있다.
바람직한 구체적 예로서, 본 발명의 화합물은 유사분열에서 세포주기 정지를 연장시키기 때문에 유사분열 방추체 형성을 억제하기 위해 사용된다. 상기에서 "억제(inhibit)"는 유사분열 방추체 형성을 감소 또는 방해하거나, 유사분열 방추체 장애의 원인이 되는 것을 의미한다. 본원에서 "유사분열 방추체 형성(mitotic spindle formation)"은 유사분열 키네신에 의한 양극성 구조에서 미세소관의 조직 화를 의미한다. 본원에서 "유사분열 방추체 장애(mitotic spindle dysfunction)"는 유사분열 정지 및 단일극성 방추체 형성을 의미한다.
본 발명의 화합물은 유사분열 키네신인 KSP에 결합하고/거나 KSP의 활성을 억제하는데 유용하다. 바람직한 실시태양에서, KSP는 인간 KSP 이지만, 본 발명의 화합물은 화합물이 다른 생물의 KSP 키네신에 결합하거나 KSP 키네신의 활성을 억제하는데 사용될 수 있다. 본 문서에서, "억제"는 방추극의 분리를 증가시키거나 감소시키는 것을 의미하는데, 이렇게 함으로써, 유사분열 방추극의 벌어짐을 유발하거나, 또는 유사분열 방추극의 형태상의 불균형을 유발한다. 또한, 상기 목적을 위한 KSP에는 KSP의 변이체 및/또는 단편이 포함된다. 이에 대한 참고문헌으로 본 문서에 포함된 미국 등록특허 제 6,437,115호에 이와 관련된 내용이 개시되어 있다. 본 발명의 화합물은 KSP에 대해 특이성을 보여준다. 그러나, 본 발명은 다른 유사분열 키네신에 결합하거나, 또는 그를 조절하기 위한 화합물의 사용을 포함한다.
본 발명의 화합물은 세포 증식성 질환의 치료에 사용된다. 상기의 본원에서 제공하는 화합물, 조성물 및 방법에 의해 치료될 수 있는 질환의 상태는 암(하기에 추가로 기재함), 자가면역 질환(autoimmune disease), 진균성 장애(fungal disorders), 관절염(arthritis), 이식편거부(graft rejection), 염증성장질환(inflammatory bowel disease), 의학적 시술 후 유도되는 세포증식(cellular proliferation induced after medical procedures)을 포함하나, 이에 한정되지 않으며, 상기 의학적 시술에는 외과적 수술(surgery), 혈관형성술(angioplasty) 및 이와 유사한 형태가 포함된나, 이에 한정되는 것은 아니다. 치료방법은 세포증식을 억제하는 치료 단계를 포함한다. 일부 경우에서는 세포가 비정상적인 상태가 아니지만, 여전히 치료가 요구되는 경우도 있음을 주지하여야 한다. 따라서, 본 발명의 일 실시태양에서, 본 문서에 포함된 발명은 상기의 질환 또는 특정 상태 중 어느 하나에 의하여 고통 받고 있거나 임박한 고통에 직면한 세포 또는 개체에 대한 적용을 포함한다.
본원에서 제공되는 화합물, 조성물 및 방법은 피부(skin), 유방(breast), 뇌(brain), 자궁경부암종(cervical carcinomas), 고환암종(testicular carcinomas) 등과 같은 고형종양(solid tumors)을 포함하는 암의 치료에 특히 유용하다. 보다 상세하게, 본 발명의 화합물, 조성물 및 방법에 의해 치료될 수 있는 암은 하기의 종류를 포함하나, 이에 한정되지 않는다 :
심장(cardiac): 혈관육종(angiosarcoma), 섬유육종(fibrosarcoma), 횡문근육종(rhabdomyosarcoma), 지방육종(liposarcoma)과 같은 육종(sarcoma), 점액종(myxoma), 횡문근종(rhabdomyoma), 섬유종(fibroma), 지방종(lipoma) 및 기형종(teratoma);
폐(lung): 편평세포(squamous cell), 미분화된 소형세포(undifferentiated small cell), 미분화된 거대세포(undifferentiated large cell), 선암종(adenocarcinoma)과 같은 기관지유래암종(bronchogenic carcinoma), 세기관지폐포암종(bronchioloalveolar carcinoma), 기관지선종(bronchial adenoma), 육종(sarcoma), 림프종(lymphoma), 연골종성 과오종(chondromatous hamartoma), 중피종 (mesothelioma);
위장(gastrointestinal): 식도(esophagus)의 편평세포암종(squamous cell carcinoma), 선암종, 평활근육종(leiomyosarcoma), 림프종(lymphoma),
위(stomach)의 암종(carcinoma), 림프종, 평활근육종,
췌장(pancreas)의 관선암(ductal adenocarcinoma), 인슐린종(insulinoma), 글루카곤종(glucagonoma), 가스트린종(gastrinoma), 카르시노이드 종양(carcinoid tumors), 혈관활성 장펩티드종(vipoma),
소장(small bowel)의 선암종, 림프종, 카르시노이드 종양, 카포지육종(Karposi's sarcoma), 평활근종(leiomyoma), 혈관종(hemangioma), 지방종, 신경섬유종(neurofibroma), 섬유종,
대장(large bowel)의 선암종, 관상선종(tubular adenoma), 융모선종(villous adenoma), 과오종(hamartoma), 평활근종;
비뇨생식관(genitourinary tract): 신장(kidney)의 선암종, 신장모세포종(nephroblastoma)인 빌름스 종양(Wilm's tumor), 림프종, 백혈병(leukemia),
방광(bladder) 및 요도(urethra)의 편평세포암종, 이행세포암종(transitional cell carcinoma), 선암종,
전립선(prostate)의 선암종, 육종,
고환(testis)의 고환종(seminoma), 기형종, 배아암종(embryonal carcinoma), 기형암종(teratocarcinoma), 융모막암종(choriocarcinoma), 육종, 세포간질성 암종(interstitial cell carcinoma), 섬유종, 섬유선종(fibroadenoma), 선양종양 (adenomatoid tumors), 지방종;
간(liver): 간세포암종(hepatocellular carcinoma)과 같은 간암(hepatoma), 담관암종(cholangiocarcinoma), 간모세포종(hepatoblastoma), 혈관육종, 간세포선종(hepatocellular adenoma), 혈관종;
뼈(bone): 골육종(osteogenic sarcoma 또는 osteosarcoma), 섬유육종, 악성섬유조직구종(malignant fibrous histiocytoma), 연골육종(chondrosarcoma), 유잉육종(Ewing's sarcoma), 세망세포육종(reticulum cell sarcoma)과 같은 악성림프종(malignant lymphoma), 다발골수종(multiple myeloma), 악성 거대세포 척삭종(malignant giant cell tumor chordoma), 골연골성외골증(osteochronfroma 또는 osteocartilaginous exostoses), 양성 연골종(benign chondroma), 연골모세포종(chondroblastoma), 점액연골섬유종(chondromyxofibroma), 유골골종(osteoid osteoma) 및 거대세포 종양(giant cell tumors);
신경계(nervous system): 두개골(skull)의 골종(osteoma), 혈관종, 육아종, 황색종(xanthoma), 뼈변형염(osteitis deformans),
뇌척수막(meninges)의 수막종(meningioma), 수막육종(meningiosarcoma), 신경아교종증(gliomatosis),
뇌(brain)의 성상세포종(astrocytoma), 속질모세포종(medulloblastoma), 신경아교종(glioma), 뇌실막세포종(ependymoma), 송과체종(pinealoma)과 같은 배아종(germinoma), 다형성아교모세포종(glioblastoma multiform), 희소돌기아교세포종(oligodendroglioma), 신경초종(schwannoma), 망막모세포종(retinoblastoma), 선천 성 종양(congenital tumors),
척수(spinal cord)의 신경섬유종, 수막종, 신경아교종, 육종;
부인과(gynecological): 자궁(uterus)의 자궁내막암종(endometrial carcinoma),
자궁경부(cervix)의 자궁경부암종, 선-종양 자궁경부 형성이상(pre-tumor cervical dysplasia),
난소(ovaries)의 장액낭선암종(serous cystadenocarcinoma), 점액낭선암종(mucinous cystadenocarcinoma), 미분류암종(unclassified carcinoma)과 같은 난소암종(ovarian carcinoma), 과립-힘줄 세포 종양(granulosa-thecal cell tumors), 세르톨리-라이디히 세포 종양(Sertoli-Leydig cell tumors), 미분화세포종(dysgerminoma), 악성기형종(malignant teratoma),
외음부(vulva)의 편평세포암종, 상피내암종(intraepithelial carcinoma), 선암종, 섬유육종, 흑색종(melanoma),
질(vagina)의 투명세포암종(clear cell carcinoma), 편평세포암종, 태아횡문근육종(embryonal rhabdomyosarcoma)과 같은 포도육종(botryoid sarcoma),
자궁관(fallopian tubes)의 암종;
혈액적(hematologic): 혈액(blood)의 급성(acute) 및 만성(chronic) 골수성 백혈병(myeloid leukemia), 급성 림프성 백혈병(acute lymphoblastic leukemia), 만성 림프구성 백혈병(chronic lymphocytic leukemia), 골수증식 질환(myeloproliferative diseases), 다발골수종(multiple myeloma), 골수형성이상증후 군(myelodysplastic syndrome), 호치킨씨 병(Hodgkin's disease), 악성 림프종(malignant lymphoma)과 같은 비-호치킨씨 림프종(non-Hodgkin's lymphoma);
피부(skin): 악성 흑색종(malignant melanoma), 기저세포암종(basal cell carcinoma), 편평세포암종, 카포지육종, 사마귀 형성이상 모반(moles dysplastic nevi), 지방종, 혈관종(angioma), 피부섬유종(dermatofibroma), 흉터종(keloids), 건선(psoriasis); 및
부신선(adrenal glands): 신경모세포종(neuroblastoma).
따라서, 본원에서 제공되는 "암성세포(cancerous cell)"라는 용어는 상기에 확인된 조건 중 어느 하나에 대해 고통을 주는 세포를 포함한다.
시험(Testing)
KSP-조절 활성의 검정을 위하여, 일반적으로 KSP 또는 본 발명의 화합물은 분리된 시료의 접수 부분, 예를 들어, 마이크로타이터 플레이트(microtiter plate), 어레이(array) 등을 갖는 불용성 지지체(insoluble supprot)에 비확산적(non-diffusably)으로 결합된다. 불용성 지지체는 시료를 결합 시킬 수 있는 어떠한 조성물로도 만들어질 수 있고, 용해될 수 있는 물질로부터 쉽게 분리될수 있으며, 또한, 검색(screening)의 전체적인 방법에서 호환될 수 있다. 상기 지지체의 표면은 고체 또는 다공성(porous)이거나 어떠한 편리한 형태일 수 있다. 예를 들어, 적합한 불용성 지지체는 마이크로타이터 플레이트, 어레이, 막(membrane) 및 비드(bead)를 포함한다. 이것들은 형태에 따라 유리, 폴리스티렌(polystyrene)과 같은 플라스틱, 다당류(polysaccharide), 나일론(nylon) 또는 니트로셀룰로스(nitrocellulose), 테플론(Teflon™)등으로 제작 할 수 있다. 마이크로타이터 플레이트 및 어레이는 적은 양의 시약과 시료를 사용하여 대량의 검정을 동시에 수행할 수 있기 때문에 특히 간편하다. 시료를 결합시키는 특정 방법은 본 발명의 시약과 전체적인 방법과 호환되고, 시료의 활성을 유지시키며, 비확산성인 한, 결정적인 욧는 아니다. 결합시키는 바람직한 방법으로는 단백질이 지지체에 결합할 경우, 리간드 결합 위치 또는 활성 서열을 공간적으로 차단하지 않는 항체의 사용, "점착성(sticky)" 또는 이온성(ionic) 지지체에 직접적인 결합, 화학적 교차결합(chemical crosslinking) 및 표면상에서의 단백질 또는 약물의 합성 등을 포함한다. 시료가 결합하는 경우, 여분의 비결합성 물질은 세척하여 제거한다. 시료가 받아지는 부분은 소 혈청 알부민(bovine serum albumin, BSA), 카제인(casein) 또는 다른 무독성(innocuous) 단백질 또는 다른 일부분과 함께 배양되는 것을 통하여 차단될 수 있다.
본 발명의 화합물은 유사분열 키네신, 특히, KSP의 활성을 억제하기 위해 그 자체로 사용될 수 있다. 본 발명의 일 실시태양에서, 본 발명의 화합물은 KSP에 결합되고, KSP의 활성이 검정된다. KSP를 포함하는 키네신의 활성은 당업계에 알려져 있으며, 적어도 하나 이상의 키네신 활성을 포함한다. 키네신의 활성은 ATP 가수분해, 미세소관의 동력(dynamic)에 영향을 주는 미세소관 결합, 이동 및 중합화(polymerization)/분해(depolymerization), 방추체의 다른 단백질로의 결합, 세포주기 조절에 관련된 단백질으로의의 결합, 키나아제(kinase) 또는 프로테아제 (protease)와 같은 효소에 기질로서 작용 및 방추극 분리와 같은 특정 키네신 세포 활성에 영향을 미치는 능력을 포함한다.
운동성 검정법(motility assay)을 수행하기 위한 방법은 당업계에 통상적으로 잘 알려져 있다(Hall, et al., Biophys. J., 71:3467-3476, 1996; Turner, et al., AnaL. Biochem., 242(1):20-25, 1996; Gittes, et al., Biophys. J., 70(1):418-429, 1996; Shirakawa, et al., J. Exp. BioL., 198:1809-1815, 1995; Winkelmann, et al., Biophys. J., 68:2444-2453, 1995; Winkelmann, et al., Biophys. J., 68:72S, 1995).
또한, ATPase 가수분해 활성을 측정하기 위하여 당업계에서 통상적으로 알려진 방법을 사용할 수 있다. 바람직하게는, 용액 기반의 검정법(solution based assay)이 사용된다. 본 문서에 참고문헌으로 포함된 미국 등록특허 제 6,410,254호에 상기의 검정법이 기재된다. 선택적으로, 통상적인 방법들도 사용 가능하다. 예를 들어, 키네신으로부터 Pi 방출을 정량화할 수 있다. 바람직한 하나의 실시태양에서, ATPase 가수분해 활성 검정법은 0.3M PCA(perchloric acid) 및 8.27mM 소디움 몰리브데이트 Ⅱ(sodium molybdate Ⅱ), 0.33mM 말라카이트 그린 옥살레이트(malachite green oxalate) 및 0.8mM 트리톤 X-100(Triton X-100)으로 구성된 말라카이트 그린 시약(malachite green reagent)을 사용한다. 상기 검정법을 수행하기 위하여, 반응 혼합물 10㎕를 차가운 0.3M PCA 90㎕로 진정시킨다. 인산 표준(phosphate standard)이 데이터(data)가 방출된 무기 인산을 mM로 전환시키는데 사 용된다. 모든 반응과 표준이 PCA에 의하여 진정될 때, 말라카이트 그린 시약 100㎕를 마이크로타이터 플레이트와 같은 적절한 웰에 가한다. 상기 혼합물을 10 내지 15분 동안 반응시키고, 상기 플레이트는 650nm 흡광도에서 판독된다. 인산 표준을 사용할 경우, 판독되는 흡광도는 mM Pi로 전환 시킬 수 있고, 시간에 대한 그래프로 나타낼 수 있다. 또한, 당업계에 알려진 ATPase 검정법은 루시퍼라제 검정법(luciferase assay)을 포함한다.
또한, 키네신 작동 도메인(kinesin motor domain)의 ATPase 활성은 약물의 효과를 관찰하기 위해 사용될 수 있으며, 당업계에 잘 알려져 있다. 구체적인 하나의 예로서, 키네신의 ATPase 검정법은 미세소관 결핍에서 수행된다. 또 다른 구체적인 예로서, ATPase 검정법은 미세소관 존재하에서 수행된다. 약물의 서로 다른 형태는 상기의 검정법으로 검색할 수 있다. 바람직한 구체적 예로서, 약물의 효과는 미세소관과 ATP의 농도에 따라 독립적이다. 또 다른 구체적 예로, 키네신 ATPase에 대한 약물의 효과는 ATP, 미세소관 또는 두가지 모두의 농도 증가에 의해 감소될 수 있다. 추가적인 또 다른 구체적 예로서, 약물의 효과는 ATP, 미세소관 또는 두가지 모두의 농도 증가에 의해 증가 된다.
시험관내(in vitro)에서 KSP의 생화학적 활성(biochemical activity)을 억제하는 화합물은 생체내(in vivo)에서 검색될 수 있다. 생체내 검색 방법은 세포주기 분할(cell cycle distribution), 세포 생존율(cell viability) 또는 유사분열 방추체의 존재, 형태(morphology), 활성, 분할 또는 수에 대한 검정법을 포함한다. 세 포 집단(cell population)에 대한 세포주기 분할을 관찰하는 방법, 예를 들어, 유세포분석법(flow cytometry)은 세포 생존율을 측정하는 방법으로써, 당업게에 잘 알려져 있다. 미국 특허 제 6,437,115호의 전체적 내용을 참고하여 구체화하였다. 방추체 형성 및 기형을 관찰하기 위한 현미경적 방법(microscopic method)은 당업계에 잘 알려져 있는 방법으로 전체적 내용을 참고하여 구체화하였다(Whitehead and Rattner, J. Cell Sci., 111:2551-2561, 1998; Galgio, et al., J. Cell Biol., 135:199-414, 1996).
본 발명이 화합물은 KSP 키네신을 억제한다. 억제의 측정은 KSP의 활성이 대조군에 대하여 50%로 감소되는 화합물의 농도인 IC50으로 한다. 바람직하게는 화합물들은 약 1mM보다 적은 IC50 수치를 갖는다. 바람직한 실시태양에서, 화합물들은 약 100uM보다 적은 IC50 수치를 갖는, 보다 바람직한 실시태양에서, 약 10uM보다 적은 IC50 수치를 갖는, 보다 더 바람직한 실시태양에서, 약 1uM보다 적은 IC50 수치를 갖는, 보다 더 바람직한 실시태양에서, 약 100nM보다 적은 IC50 수치를 갖는, 가장 바람직한 실시태양에서, 약 10nM보다 적은 IC50 수치를 갖는다. IC50 수치의 측정은 본원에 기재된 ATPase 검정법을 사용한다.
억제에 대한 또다른 측정은 Ki이다. 1uM보다 적은 IC50 수치를 갖는 화합물에 대하여, Ki 또는 Kd는 본 문서에 기재된 화합물과 KSP의 상호작용에 대한 해리 비율 상수(dissociation rate constant)로 정의된다. 바람직하게는 화합물들은 약 100uM 보다 적은 Ki 수치를 갖는, 보다 바람직한 실시태양에서, 약 10uM보다 적은 Ki 수치를 갖는, 보다 더 바람직한 실시태양에서, 약 1uM보다 적은 Ki 수치를 갖는, 보다 더 바람직한 실시태양에서, 약 100nM보다 적은 Ki 수치를 갖는, 가장 바람직한 실시태양에서, 약 10nM보다 적은 Ki 수치를 갖는다.
화합물에 대한 Ki은 세가지 가정(assumption)과 미카엘리스-멘텐 방정식(Michaelis-Menten equation)을 토대로한 IC50으로부터 측정된다. 첫 번째 가정은 단지 하나의 화합물 분자가 효소에 결합하고, 다른 협동은 없다는 것이다. 두 번째 가정은 측정된 활성 효소와 화합물의 농도는 알려져 있다는 것이다. 즉, 시료상에 유의한 수준의 불순물이나 불활성 형태가 없다는 것이다. 세 번째 가정은 효소-억제제 복합체의 효소 반응 속도는 0(zero)이다. 상기 속도, 즉, 화합물의 농도 데이터는 하기의 수학식 1에 적용된다 :
Figure 112004047311217-pct00024
이때, V는 측정된 속도이고, Vmax는 유리 효소(free enzyme)의 속도이고, I0 는 억제제의 농도이며, E0은 효소의 농도이고, Kd는 효소-억제제 복합체의 해리 상수(dissociation constant)이다.
억제에 대한 또다른 측정은 세포 성장률을 50%로 감소시키는 화합물의 농도로 정의되는 GI50이다. 바람직한 화합물은 약 1mM보다 적은 GI50 수치를 갖는것이고, 약 20uM보다 적은 GI50 수치를 갖는 화합물이 더욱 바람직하며, 약 10uM보다 적은 GI50 수치를 갖는 화합물이 보다 더 바람직하고, 약 1uM보다 적은 GI50 수치를 갖는 화합물이 보다 더 바람직하며, 약 100nM보다 적은 GI50 수치를 갖는 화합물이 보다 바람직하고, 약 10nM보다 적은 GI50 수치를 갖는 화합물이 가장 바람직하다. GI50 수치의 측정은 본원에 기재된 세포 증식 검정법을 사용한다. 상기 류의 화합물들은 세포 증식을 억제시키는 것으로 나타났다.
시험관내 조건에서 작은 분자 억제제들의 효능은 예를 들어, 인간 난소 암 세포(human ovarian cancer cell, SKOV3)를 화합물의 9회 희석물들(9-point dilution series)에 72 시간 동안 노출시킨 다음, 생존율을 측정하는 것으로 측정한다. 세포생존율은 상업적으로 유용한 시약인 MTS/PMS의 생체환원에 의해 형성되는 생성물인 포마존(formazon)에 대한 흡광도를 측정함으로써 결정된다. 용량 반응 곡선(dose-response curve)의 각 지점은 72시간 경과 후, 세포가 완전히 죽었을 때의 배경 흡광도를 뺀 화합물이 처리되지 않은 대조군 세포에 대한 백분율(%)로 계산된다.
암(암 화학요법)의 치료에 임상적으로 사용되는 항-증식성 화합물(anti-proliferative compound)은 매우 다양한 GI50 수치를 갖는다. 예를 들어, 미국 국립 암센터(National Cancer Institute, NCI)로부터 제공된 데이터에 의하면, A549 세포에서, 파클리탁셀(paclitaxel) GI50는 4nM이고, 독소루비신(doxorubicin)은 63nM이며, 5-플루오로우라실(5-fluorouracil)은 1uM이고, 하이드록시우레아(hydroxyurea)는 500uM이다(National Cancer Institute, Developmental Therapeutic Program, http://dtp.nci.nih.gov/). 그러므로, 세포 증식을 억제하는 화합물은 억제가 증명된 농도에 상관 없이, 유용할 수 있다.
KSP 키네신에 결합하는 화합물을 검색하는 방법에 본 발명의 화합물을 적용시키기 위하여, KSP는 지지체에 결합되고, 본 발명의 화합물이 검정법에 가해진다. 선택적으로, 본 발명의 화합물이 지지체에 결합되고, KSP가 가해질 수 있다. 검색될 신규한 약물 가운데, 어떤 종류의 화합물은 특이적 항체, 화학적 라이브러리(chemical libraries)의 검색에 의하여 비천연적(non-natural) 결합 약물 및 펩타이드 유사체(peptide analogs)를 포함한다. 특별히 관심의 대상이 되는 것은 인간 세포에 낮은 독성을 갖는 후보약물(candidate agent)들에 대한 검색방법들이다. 표지된 실험관내에서 단백질-단백질 결합법(labeled in vitro protein-protein binding assay), EMSA법(electrophoretic mobility shift assay), 단백질 결합에 대한 면역검정(immunoassay), 인산화 검정법(phosphorylation assay)등과 같은 기능적 검정법(functional assay) 및 이와 유사한 방법들을 포함하는 다양한 검정법 들은 이러한 목적을 위해 사용될 수 있다.
본 발명의 화합물이 KSP에 결합하는 것을 측정하는 것은 여러 가지 방법으로 수행된다. 바람직한 실시태양에서, 화합물은 형광(fluorescent) 또는 방사성(radioactive) 물질로 표지되고, 결합은 직접적으로 측정된다. 예를 들어, 상기에서는 고체 지지체에 KSP의 전체 또는 일부를 부착시키고, 표지된 시험 화합물, 예를 들어, 적어도 하나 이상의 원소가 탐지될 수 있는 동위원소(isotope)로 전환된 본 발명의 화합물을 가하며, 시약의 잔여물을 세척하고 표지물이 고체 지지체에 존재하는 것을 측정하는 것에 의해 수행된다.
본원에서 "표지된(labeled)"은 화합물이 탐지 가능한 신호를 제공하는 표식, 예를 들어, 방사성동위원소(radioisotope), 형광 태그(fluorescent tag), 효소(enzyme), 항체, 자기 입자(magnetic particle), 화학발광 태그(chemiluminescent tag) 또는 특이적으로 결합되는 분자 등과 같은 입자들로 직접적 또는 간적적으로 표지된 화합물을 의미한다. 특이적인 결합 분자들은 비오틴(biotin)과 스트렙타비딘(streptavidin), 디곡신(digoxin)과 항-디곡신(antidigoxin) 등의 쌍을 포함한다. 특이적인 결합 인자들에 대하여, 상보적인 인자가 상기에 기재된 바와 같이, 공지된 과정에 따라 탐지를 위해 제공되는 분자들로 표지된다. 상기 표지는 직접적 또는 간접적으로 탐지신호를 제공 할 수 있다.
일부 실시태양에서, 구성요소들 중 오직 하나만이 표지된다. 예를 들어, 키네신 단백질은 125I 또는 형광성분(fluorophore)을 함께 사용하여 티로신(tyrosine) 위치에 표지될 수 있다. 또는 하나 이상의 요소가 항-유사분열(antimitotic) 약물에 대한 단백질 및 형광성분에 대하여 125I를 사용하여 각각 다르게 표지될 수 있다. 또한, 본 발명의 화합물은 추가된 약물 후보들에 대한 검색을 위해 경쟁자로서 사용될 수있다. "후보약물(candidate agent)" 또는 "약물 후보자(drug candidate)" 또는 본원에 사용된 문법적으로 동일한 용어들은 생체활성(bioactivity)을 시험하기 위한 단백질, 올리고펩타이드(oligopeptide), 작은 유기분자, 다당류, 폴리뉴클레오티드 등과 같은 어떤 분자로 기재된다. 상기의 분자들은 세포증식의 표현형(phenotype) 또는 핵산서열(nucleic acid sequence) 및 단백질 서열을 포함하는 세포증식 서열의 발현의 변화에 직접적 또는 간접적으로 작용할 수 있다. 다른 경우로, 세포증식성 단백질 결합 및/또는 활성의 변화가 탐색된다. 상기의 탐색은 미세소관이 존재하거나 존재하지 않는 상태에서 수행될 수 있다. 단백질 결합 또는 활성을 검색하는 경우에서, 바람직한 실시태양에서, 미세소관과 같은 중합체 구조와 ATP와 같은 에너지원에 대한 입자 단백질에 결합하는 것이 이미 알려진 분자들을 포함한다. 본원의 검정법에 대한 바람직한 실시태양에서, "외인성(exogenous)" 약물로써, 본원에 기재되는 내생적 자연 상태(endogenous native state)에서 세포증식 단백질에 결합되지 않는 후보약물들을 포함한다. 다른 바람직한 실시태양에서, 외인성 약물은 KSP에 대한 항체를 추가로 포함한다.
후보약물들은 유기분자, 바람직하게는 100 내지 2,500 달톤(dalton) 분자량을 갖는 작은 유기화합물에 대한 수많은 종류의 화학물질을 포함한다. 후보약물들 은 단백질과 구조적인 상호작용, 특히, 수소결합(hydrogen bonding) 및 친지성 결합(lipophilic binding)에 필요한 기능기(functional group)를 포함하는데, 여기에는 통상적으로 적어도 하나의 아민, 카르보닐, 하이드록실, 에테르 또는 카르복실 기, 바람직하게는 상기 기능기 중 적어도 두 개 이상이 포함된다. 후보약물들은 종종 상기의 기능기 중 적어도 하나 이상으로 치환된 환형탄소(cyclic carbon) 또는 이형환 구조 및/또는 방향성 또는 다방향성(polyaromatic) 구조를 포함한다. 또한, 후보약물들은 펩타이드, 당류(saccharide), 지방산(fatty acid), 스테로이드(steroid), 퓨린(purine), 피리미딘(pyrimidine), 유도체(derivative), 구조적 유사체(structural analog) 또는 이들에 대한 복합체를 포함하는 생체분자(biomolecule)들 중에서 발견된다.
후보약물들은 합성 또는 천연 화합물의 라이브러리들을 포함하는 다양한 출처들로부터 얻어진다. 예를 들어, 다수의 수단들이 무작위적인 올리고뉴클레오티드의 합성을 포함하는 다양한 유기 화합물과 생체분자들의 무작위적 및 유도된 합성에 이용될 수 있다. 박테리아성(bacterial), 진균성(fungal), 식물(plant) 및 동물(animal) 추출물의 형태에서 천연 화합물의 라이브러리들은 손쉽게 제조된다. 더구나, 천연 또는 합성적으로 제조된 라이브러리 및 화합물은 통상적인 화학적, 물리적(physical) 및 생화학적(biochemical) 수단을 통하여 쉽게 변형시킬 수 있다. 공지된 약학적 약물들은 구조적 유사체를 제조하기 위하여, 아실화(acylation), 알킬화(alkylation), 에스테르화(esterification) 및/또는 아미드화(amidification)와 같은 유도되거나 무작위적인 화학적 변형을 할 수 있다.
경쟁적 검색 검정법은 첫 번째 시료에서 KSP 및 후보약물의 결합에 의해 수행될 수 있다. 두 번째 시료는 KSP 및 후보약물인 본 발명의 화합물을 포함한다. 이것은 미세소관이 존재하거나 존재하지 않는 상태에서 수행될 수 있다. 후보약물의 결합은 두 가지 시료에 대해 측정되고, 두 가지 시료 사이의 결합에서 변화 또는 차이는 KSP에 결합하고 잠재적으로 그것의 활성을 억제할 수 있는 후보약물의 존재하에서 나타난다. 후보약물의 결합이 첫 번째 시료에 관련하여 두 번째 시료에서 달라질 경우, 후보약물은 KSP에 결합성이 있을 수 있다.
바람직한 실시태양에서, KSP에 대한 후보약물의 결합성은 경쟁적 결합 검정법을 사용하여 측정된다. 상기 실시태양에서, 경쟁자는 KSP에 결합하기 위한 항체, 펩타이드, 결합되는 짝, 리간드 등과 같은 공지된 결합인자이다. 특정 상태에서, 후보약물을 치환하는 결합인자와 함께 후보약물과 결합인자 사이에서 경쟁적으로 결합할 수 있다.
한 가지의 실시태양에서, 후보약물은 표지된다. 후보약물 또는 경쟁자 또는 이 두 가지 모두가 KSP가 존재하는 경우, 결합을 허용하기에 충분한 시간동안 KSP에 먼저 가해진다. 배양은 최상의 활성을 촉진할 수 있는 온도, 구체적으로 4 내지 40℃에서 수행될 수 있다.
배양 기간은 최상의 활성을 위해 선택되지만, 고속대량검색법(rapid high throughput screening)으로 최적화될 수 있다. 구체적으로 0.1 내지 1시간이 적합할 것이다. 잔여 시약은 일반적으로 제거되거나 세척된다. 두 번째 화합물이 가해지고 난 후, 표지된 요소가 존재하거나 존재하지 않는 것은 결합을 나타내기 위한 것이다.
바람직한 실시태양에서, 경쟁자가 먼저 가해지고, 이어 후보약물이 가해진다. 경쟁자의 분리는 후보약물이 KSP에 결합하고 있는 것을 나타내며, 이로써 KSP에 결합 가능하고, KSP의 활성을 잠재적으로 억제할 수 있음을 보여준다. 상기 실시태양에서, 구성요소들 중 어느 쪽이라도 표지될 수 있. 예를 들어, 경쟁자가 표지된 경우, 세척 용액에서 표지의 존재는 약물에 의한 치환을 나타난다. 반대로, 후보약물이 표지된 경우, 지지체에서 표지의 존재가 치환을 나타난다.
다른 구체적 실시태양에서, 경쟁자가 먼저 가해지고, 후보약물이 배양과 세척에 이어 가해진다. 경쟁자에 의한 결합의 부재는 후보약물이 더 높은 친화력이 있는 KSP에 결합하는 것을 나타낼 수 있다. 따라서, 후보약물이 표지될 경우, 경쟁자의 결핍과 짝을 이룬 지지체 위의 표지의 존재는 후보약물이 KSP에 결합할 수 있음을 나타낼 수 있다.
억제는 상기에 기재된 KSP와 후보약물을 결합시키는 단계 및 KSP의 생물학적 활성의 변화를 측정하는 단계를 포함하는 KSP의 활성을 억제하는 가능성이 있는 후보약물에 대한 검색방법에 의해 검정된다. 따라서, 상기 실시태양에서, 반드시 필요한 사항은 아니지만 후보약물이 KSP에 결합하고, 본 문서에 기재된 KSP의 생물학적 또는 생화학적 활성을 변화시킬 수 있다. 상기 방법은 전반적으로 상기에 기재된 것처럼, 세포주기 분할, 세포 생존율의 변화 또는 유사분열 방추체의 존재, 형태, 활성, 분포 또는 양에 대한 세포의 시험관내 검색 방법 및 생체내 검색 방법을 포함한다.
선택적으로, 분별 검색은 천연 KSP에 결합하지만 변형된 KSP에는 결합하지 않는 후보약물을 확인하기 위해 사용될 수 있다.
양성 대조군 및 음성 대조군이 검정법에서 사용될 수 있다. 바람직하게는 모든 대조군 및 검정용 시료는 통계학적으로 유의한 결과를 얻기 위해 적어도 세 번 이상(triplicate) 검정을 수행하게 된다. 모든 시료는 단백질에 약물이 결합하기 위한 적절한 시간동안 배양된다. 배양된 모든 시료는 비특이적으로 결합된 물질이 없도록 세척되고, 일반적으로 표지된, 결합된 약물의 양이 측정된다. 예를 들어, 방사성물질로 표지되었을 경우, 시료는 결합된 화합물의 양을 측정하기 위한 섬광 계수기(scintillation counter)로 계수된다.
다른 다양한 시약들이 탐색 검정법에서 포함될 수 있다. 상기의 시약들은 최적의 단백질-단백질 결합을 촉진하고, 또는, 비특이적 또는 기본적인 상호작용을 감소시키기 위해 사용될 수 있는 염, 알부민, 세정제(detergent)와 같은 중성 단백질(neutral protein)등과 같은 시약을 포함한다. 또한, 단백질 분해효소(protease) 억제제, 뉴클레아제(nuclease) 억제제, 항-미생물(anti-microbial)제 등과 같은 검정법의 효율을 향상시키는 시약이 사용될 수 있다. 상기 요소들의 혼합물은 필수적인 결합을 위해 제공될 목적으로 첨가될 수 있.
투여(administration)
본 발명의 화합물은 세포에 투여된다. 본 문서에서 "세포들(cells)"은 유사분열 또는 감수분열이 변형 될 수 있는 모든 세포를 의미한다. 본 문서에서 "투여되는(administered)"은 세포 배양 또는 환자에서의 세포에 대한 본 발명의 화합물의 유효투여량의 투여를 의미한다. 본원에서 "유효투여량(therapeutically effective dose)"은 투여에 의해 효과를 나타내는 투여량을 의미한다. 정확한 투여량은 치료 목적에 의존적이고, 당업계에 통상적인 지식을 가진자에 의해 확정될 수 있을 것이다. 당업계에 알려진 것으로서, 전신(systemic) 대 국소(localized) 투여의 조정, 투여 경로, 나이, 체중, 건강 상태, 성별, 식이, 투여 시간, 제제의 성질, 약물의 상호작용 및 치료 및 엄격한 관리에 요구되는 정확한 조건이 반드시 필요하고, 당업계의 통상의 지식을 가진자에 의하여 일정한 실험으로 확인될 수 있다. 그러나, 정맥투여(intravenous administration)에 의한 종양 성장(neoplastic growth)의 치료, 예를 들어, 대장암(colon carcinoma) 또는 유방암(breast carcinoma)의 치료를 위한 일반식 I로 기재되는 화합물의 유효량은 일반적으로 1주일에 1회 내지 1개월에 1회로 약물당 수용자(recipient)의 표면 면적 1m2 당 0.1 내지 100 ㎎, 바람직하게는 1m2 당 내지 100 ㎎의 범위가 되고, 일반적으로는 1주일에 1회 내지 1개월에 1회로 약물당 수용자(recipient)의 표면 면적 1m2 당 2 내지 30 ㎎가 된다. 일반식 I로 기재되는 화합물의 염, 용매화합물 또는 염에 대한 용매화합물은 일반식 I로 기재되는 화합물 자체의 효과적인 양의 비율로 측정된다. 본 문서에서 언급된 다른 질환에 대한 치료에 적절할 것이라고 예상할 수 있다.
본 발명의 목적을 위한, "환자(patient)"는 인간 및 동물, 바람직하게는 포유동물(mammal) 및 기타 생명체들을 포함한다. 따라서 상기 방법은 인간에 대한 치 료방법 및 수의학적인 적용에 적합할 수 있다. 바람직한 실시태양에서, 환자는 포유동물이고, 가장 바람직하게는 환자는 인간이다.
기대되는 약학적 활성을 갖는 본 발명의 화합물은 본 문서에서 기재된 바와 같이 투여 될 수 있다. 바람직하게는 약학적 부형제를 포함하는 약학적으로 허용 가능한 조성물의 형태로 환자에 투여될 수 있다. 투여 방법에 따라, 상기 화합물은 하기에 기재되는 다양한 방식으로 제형화될 수 있다. 제형에서 치료 효과적 화합물의 농도는 약 0.1 내지 100 중량%이다.
상기 약물은 단독으로 또는 다른 치료 방법, 즉, 방사선 또는 미세소관 형성에 작용을 나타내는 택산류 약물 또는 토포이소머라제 Ⅰ의 캄토테신류와 같은 다른 화학요법제와 복합적으로 투여될 수 있다. 사용될 때, 다른 화학요법제는 본 발명의 화합물의 투여 전, 동시 또는 투여 후에 투여될 수 있다. 본 발명의 한 가지 양상에서, 본 발명의 화합물은 적어도 하나 이상의 화학요법제와 함께 공동투여 된다. "공동투여(co-administer)"는 화합물이 실제로 동시에 투여되는 경우에 관계없이, 본 발명의 화합물이 공동투여되는 화합물과 마찬가지로 같은 시간에 환자의 혈류(bloodstream)에서 발견될 수 있도록 환자에게 투여되는 것을 의미한다.
본 발명에 대한 화합물 및 조성물의 투여는 경구(orally), 피하(subcutaneously), 정맥(intravenously), 비강내(intranasally), 피부관통(transdermally), 복강(intraperitoneally), 정맥(intramuscularly), 폐내(intrapulmonary), 질내(vaginally), 직장(rectally) 또는 안구내(intraocularly) 투여를 포함하는 다양한 방식으로 수행될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 일부 경우에는, 예를 들어, 상처 및 염증의 치료에 있어서, 화합물 또는 조성물은 용액 또는 스프레이(spray) 형태로서 직접적으로 적용될 수 있다.
약학적인 복용 제형는 일반식 I로 기재되는 화합물 또는 약학적으로 허용 가능한 염 또는 그의 용매화합물 및 적어도 하나 이상의 약학적 부형제를 포함한다. 당업계에 알려진 약학적 부형제는 다양한 복용 제형, 예를 들어, 정제(tablet), 캡슐(capsule) 및 액제(liquid)와 같은 경구형 제형, 피부(dermal), 안구(opthalmic) 및 귀(otic)에 투여하는 국소형 제형, 좌제(suppositories), 주사제(injectables), 흡입형 제형(respiratory) 및 이와 유사한 제형에서 약물 또는 치료제의 확산을 용이하게 또는 향상시키기 위한 기능의 2차적인 성분이다. 약학적 부형제는 비활성 성분, 상승제(synergist) 또는 활성 성분의 치료효과에 독립적으로 기여하는 화학제품(chemicals)을 포함한다. 예를 들어, 약학적 부형제는 통상적인 사용에 있어서 약물의 조작과 투여를 용이하게 하거나 생체이용율(bioavailability)을 조절하는 유동(flow)의 특이성, 생성물의 균등화(uniformity), 안정성, 풍미 또는 외형을 향상시키는 기능을 한다.
약학적 부형제가 보통 비활성으로 기재되는 반면, 약학적 부형제의 특성과 약학적 부형제가 함유된 복용 제형간의 관계는 당업계에서 적용된다.
적절한 담체 또는 희석제로 사용되는 약학적 부형제는 통상적으로 알려진 것이며, 다양한 제형에 사용될 수 있다. 예를 들어, 이와 관련하여 본 문서에 참고문언으로 포함된 게나로의 문헌(Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, A. R. Gennaro, Editor, Mack Publishing Company, 1990; Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, A. R. Gennaro, Editor, Lippincott Williams & Wilkins, 2000), 키브의 문헌( Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3rd Edition, A. H. Kibbe, Editor, American Pharmaceutical Association, and Pharmaceutical Press, 2000) 및 마이클과 아이렌 아쉬의 문헌(Handbook of Pharmaceutical Additives, compiled by Michael and Irene Ash, Gower, 1995)에 자세히 개시되어 있다.
정제와 같은 경구용 고형 제형은 원할한 제조과정 및 압축 특성을 갖추는 것을 돕거나, 정제에 부가적인 바람직한 물성을 제공하기 위하여 적어도 하나 이상의 약학적 부형제를 포함할 수 있다. 상기의 약학적 부형제는 희석제(diluents), 결합제(diluents), 유동화제(glidants), 활택제(lubricants), 붕해제(disintegrants), 착색제(colors), 풍미제(flavors), 감미제(sweetening agents), 중합체(polymers), 왁스성분(waxes) 또는 그밖의 용해억제제(other solubility-retarding materials)로부터 선택될 수 있다.
정맥 투여를 위한 조성물은 일반적으로 순환 시스템(circulatory system) 및 동화작용(assimilate)에 의해 용이하게 조작될 수 있는 유동액(fluid), 즉, 당질(sugar), 아미노산 또는 전해질(electrolyte)과 같은 간단한 화학약물에 대한 멸균용액(sterile solution)을 포함할 수 있다. 상기의 유동액은 미국 약전(United States Pharmacopoeia, USP)에 기재된 주사액에 대한 물(water)과 함께 제조된다.
보통 정맥투여(IV)에 사용되는 유동액은 전체 인용문이 제공된 게나로의 문헌(Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, A. R. Gennaro, Editor, Lippincott Williams & Wilkins, 2000)에 개시되어 있으며, 하기의 조성을 포함한다 :
5% 포도당의 "D/W(dextrose and water)"내의 알콜 또는 5% 포도당이 함유된 "NSS(normal saline solution)"내에 5% 포도당인 D/W 및 5% 알콜이고;
아미노신(Aminosyn), 프레아민(FreAmine), 트라바솔(Travasol)과 같은 합성 아미노산이 각각 3.5 또는 7, 8.5, 3.5 및 5.5 또는 8.5 % 이며;
염화암모늄(ammonium chloride)이 2.14%이고;
10% NSS 또는 10% D5/W 내의 덱스트란 40(dextran 40);
6% NSS 또는 6% D5/W 내의 덱스트란 70(dextran 70);
포도당(glucose) 및 D5/W가 함유된 2.5 내지 50 % 덱스트로즈(dextrose);
5 내지 20% 덱스트로즈 및 0.22 내지 0.9% 염화나트륨(NaCl);
하트만용액(Hartmann's)인 젖산염 수액용액(lactated Ringer's)이 NaCl 0.6%, KCl 0.03%, CaCl2 0.02%;
젖산염(lactate)이 0.3%;
10% 덱스트로즈가 선택적으로 혼합된 5% 만니톨(mannitol) 또는 15 내지 20% NaCI;
전해질, 덱스트로즈, 과당(fructose), NaCl 0.86%, KCl 0.03%, CaCl2 0.033%인 전환된 당질 수액용액이 다양하게 혼합된 다중 전해질 용액(multiple electrolyte solutions);
5% 중탄산나트륨(sodium bicarbonate);
0.45, 0.9, 3 또는 5% 염화나트륨;
1/6M 젖산나트륨(sodium lactate); 및
주사용 멸균수(sterile water for injection).
상기 유동액의 pH는 다양할 수 있으며, 전형적으로 당업계에서 알려진 바대로 3.5 내지 8 정도이다.
하기의 실시예들은 상술한 본 발명을 이용하는 방법을 보다 상세히 기재하기 위한 것이자 본 발명의 다양한 양상을 수행하기 위한 최적의 모드를 제공하기 위한 것이다. 상기 실시예는 본 발명의 진정한 범위를 제한하려는 의도가 아니라 설명을 위한 목적으로 기재된 것으로 이해되어야 한다. 본 명세서에서 인용된 특허 및 특허 출원을 포함하되 이에 제한되지 않는 모든 간행물들은 마치 각각의 개별적 간행물이 특별히, 그리고 개별적으로 본 문서에 포함된 것 처럼 본 문서에 참고문헌으로 포함되어 있다.
실험예(EXAMPLES)
모든 무수 용매(anhydrous solvent)은 SureSeal? 용기에 저장된 알드리치 케미컬사(Aldrich Chemical Company, USA)로부터 구입하여 사용하였다. 단일 또는 다 채널 피펫(single or multichannel pipettors)을 사용하여 시약을 가하고, 수용 액 추출(aqueous extractions)을 수행하였다. 여과(filtration)는 와트만/폴리필트로닉 24 웰, 10㎖ 여과 블럭(Whatman/Polyfiltronics 24 well, Whatman, UK)을 사용하여 수행하였다. 어레이로부터 휘발성 물질(volatile material)의 증발은 와류-기화기(vortex-evaporator, Labconco, USA) 또는 4 x 6 질소 매니폴드(nitrogen manifold)를 이용하여 수행되었다.
실험예 1
화합물의 합성반응 도식
Figure 112004047311217-pct00025
a) 3-페닐-프로피온산 3-클로로-페닐 에스테르
3-클로로페놀(상기 합성도식에서 1, 이하에서 숫자로만 표시함, 50.1g, 0.3 몰), 트리에틸아민(TEA, 85㎖) 및 CH2Cl2(500 ㎖)이 함유된 용액은 23℃에서 하이드로시나모일 염화물(2, 31㎖, 0.3몰)을 5분 이상 가하였다. 30분 후, 상기 반응 혼합물은 진공상태에서 농축되었다. 조현탁액(crude slurry)을 헥산:EtOAc=10:1 300 ㎖로 용해시키고, 1N NaOH 100㎖ 및 함수(brine) 100㎖로 세척한다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 실리카겔 충진제를 통하여 헥산:EtOAc=10:1 용매로 여과하였다. 용출물은 약한 황색 오일 형태로 78g이 수득되어 추가적인 정제과정 없이 사용되었다.
b)1-(4-클로로-2-하이드록시-페닐)-3-페닐-프로판-1-온
AlCl3(52g, 0.39몰)을 에스테르(3, 78g, 0.3몰)에 140℃에서 15분 이상 천천히 가하였다. 15분 경과 후, 가스전개(gas evolution)를 중단하고, 상기 반응 혼합물을 1L 비이커에 붓고, 실온에서 냉각하였다. 냉각된 고형물은 CH2Cl2 100㎖로 용해시키고, 1N HCl 200㎖으로 반응을 정지시켰다. 상기 혼합물은 EtOAc 600㎖로 희석시키고, 층을 분리시켰다. 유기용매층은 함수 100㎖로 세척하고, MgS04로 건조시켰으며, 여과하여 농축하였다. 조오일은 헥산:EtOAc=20:1 500㎖로 용해시키고, 실리카겔 충진제를 통하여 100% 헥산과 헥산:EtOAc=20:1 용매로 용출시켰다. 여과물은 가벼운 갈색 오일로 농축한 후, 플레쉬 컬럼 크로마토그래피(flash column chromatography)를 이용하여 헥산:EtOAc=50:1, 헥산:EtOAc=40:1, 헥산:EtOAc=30:1, 헥산:EtOAc=20:1의 용매조건으로 전개시켜, 흰색 고형물 4를 31.2 g(수득율 40%) 수득하였다.
c) 2-테르트-부톡시카보닐아미노-3-메틸-부티르산-5-클로로-2-(3-페닐-프로피오닐-페닐 에스테르
페놀(4, 23.18g, 89.1mmol), BOC-D-발린(5, 21.29g, 98.05 mmol), HBTU(40.57g, 107mmol), TEA(37㎖, 265mmol) 및 CH2Cl2(155㎖)이 함유된 용액을 23℃에서 5시간 동안 방치하였다. 상기 반응 혼합물을 EtOAc 500㎖로 희석시키고, 포화된 수성 NH4Cl 2x 100㎖ 및 함수 100㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 100% 헥산, 헥산:EtOAc=50:1, 헥산:EtOAc=40:1, 헥산:EtOAc=30:1, 헥산:EtOAc=20:1, 헥산:EtOAc=10:1의 용매조건으로 전개시켜, 황색 고형물 6을 35.7g(수득율 87%) 수득하였다.
d)[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르
에스테르(6, 35.55g, 79.17mmol), K2CO3(21.8g, 158.4mmol) 및 DMF(264㎖)의 혼합물을 140℃ 오일조(oil bath)에 방치시킨다. 30분 후, 반응 혼합물에 H20 300㎖ 을 가하고, Et2O(3x 200㎖)로 추출하였다. 유기용매층은 함수 100㎖로 세척하고, MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 상기 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=10:1로 전개시켜, 7을 3.5g (수득율 10.2%) 수득하였다.
e) 2-(1-아미노-2-메틸-프로필)-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온
크로메논(7, 1.8g, 4.18mmol) 및 TFA:H20(97.5:2.5, 30㎖)은 23℃에서 1시간 동안 방치하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 결과물을 EtOAc 100㎖로 용해시킨 다음, 1N NaOH 25㎖ 및 함수 25㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하여 무색의 오일을 수득하였으며, 추가적인 정제과정 없이 사용하였다.
f) N-{2-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필아미노]-1,1-디메틸-에틸}-4-메틸-벤즈아미드
크로메논(8, 72㎎, 0.22mmol), 알데하이드(9, 65㎎, 0.32mmol), Na(OAc)3BH(184㎎, 0.87mmol) 및 CH2Cl2 1㎖을 23℃에서 3시간 동안 방치하였다. 반응 혼합물을 EtOAc 20㎖로 희석시키고, 1N NaOH 5㎖ 및 함수 5㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로 마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=3:1의 용매조건으로 전개시켜, 흰색 고형물 10을 80㎎(수득율 70%) 수득하였다.
g) 3-벤질-7-클로로-2-[1-(4,4-디메틸-2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-크로멘-4-온
크로메논(10, 80㎎, 0.15mmol), POCl3(0.1㎖, 1.1mmol) 및 PhMe 1㎖을 110℃로 가열하였다. 3.5시간 후, POCl3(0.1㎖, 1.1mmol)을 가하였다. 1시간 후, 반응 혼합물을 EtOAc 20㎖로 희석시키고, 1N NaOH 10㎖ 및 함수 10㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 CHCl3:MeOH=20:1의 용매조건으로 전개시켜, 흰색 고형물 11을 50㎎(수득율 65%) 수득하였다.
실험예 2
화합물의 합성반응 도식
Figure 112004047311217-pct00026
a) {3-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필아미노]-프로필}-카르밤산테르트-부틸 에스테르의 제조
크로메논(8, 420㎎, 1.24mmol), 알데하이드(12, 280㎎, 1.6mmol), NaCN(OAc)3BH(790㎎, 3.7mmol) 및 CH2Cl2 4.1㎖을 23℃에서 3시간 동안 방치하였다. 반응 혼합물은 EtOAc 20㎖로 희석하고, 1N NaOH 5㎖ 및 함수 5㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=5:1, 헥산:EtOAc=3:1의 용매조건으로 전개시켜, 점성 오일 13을 460㎎(수득율 75%) 수득하였다.
b) {3-[[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-(4-메틸-벤조일)-아미노]-프로필}-카르밤산 테르트-부틸 에스테르의 제조
크로메논(13, 1.3g, 2.6mmol), 디이소프롤에틸아민(DIEA, 1.8㎖) 및 CH2Cl2 (7.5㎖)이 함유된 용액은 23℃에서 p-톨루오일 염화물(0.7㎖, 5.22mmol)을 가하였다. 2.5시간 후, 반응 혼합물을 EtOAc 100㎖로 희석하고, 포화된 NaHC03수용액(2x 20㎖) 및 함수 20㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=3:1의 용매조건으로 전개시켜, 무색 오일 14를 1.43g(수득율 89%) 수득하였다.
c) N-(3-아미노-프로필)-N-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드의 제조
크로메논(14, 1.43g, 2.32mmol) 및 TFA:H20=97.5:2.5 30㎖을 23℃에서 1시간 동안 방치한 후, 반응 혼합물을 농축하였다. 결과물은 EtOAc 100㎖로 용해시키고, 1N NaOH 25㎖ 및 함수 25㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과농축하여, 1H NMR 및 LCMS 분석을 통하여 95% 이상 순도의 흰색 고형물을 수득하였다.
상기 실험예 2에 상세히 기재된 것과 유사한 제조과정을 사용하여 하기 표 1의 화합물을 제조하였다.
Figure 112004047311217-pct00027
실험예 3
화합물의 합성반응 도식
Figure 112004047311217-pct00028
카르보닐디이미다졸(9.14g, 56.37mmol)을 실온의 BOC-D-발린(5, 12.25g, 56.37mmol) 및 THF 185㎖이 함유된 용액에 천천히 가한다. 1시간 후, 상기 용액은 50% NaCl 수용액 200㎖으로 세척한 후, 함수 200㎖로 2회 세척한다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과농축하여, 추가의 정제과정 없이 흰색 고형물을 수득하였다.
(2-브로모에틸)벤젠(2.51㎖, 18.38mmol), 마그네슘 전환물(magnesium turnings, 477㎎, 19.62mmol) 및 THF 20㎖을 60℃에서 1시간 동안 가열한 후, 실온에서 냉각하였다. 16(2.0g, 9.19mmol) 및 THF 20㎖이 함유된 용액을 0 내지 5℃에서 냉각시킨 다음, 페네틸 마그네슘 염화물에 0 내지 5℃의 발린 이미다졸 용액을 주사기를 통하여 첨가하였다. 온도는 내부 온도계를 통하여 15℃가 초과하지 않도록 관찰하였다. 반응 혼합물을 0 내지 5℃에서 1시간 동안 유지시킨 후, 포화된 수성 NH4Cl 20㎖을 처리하고, EtOAc 100㎖로 희석시킨다. 층을 분리시키고, 함수 30㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=10:1, 헥산:EtOAc=5:1의 용매조건으로 전개시켜, LRMS(MH-tBuOCO)m/z 206.1의 17을 0.15g(수득율 41%) 수득하였다.
LHMDS(1M THF, 9.53㎖, 3.3당량)을 -78℃의 케톤 17(882㎎, 2.89mmol)용액에 주사기를 통하여 천천히 가하였다. 완전히 첨가한 후, 밝은 오렌지색 용액인 결과물을 -78℃에서 40분 동안 방치하였다. 1.20 g/㎖ 밀도의 순수한 4-클로로-2플루오 로벤조일 염화물(18, 460ul, 2.89mmol)을 주사기를 통하여 주입하였다. 반응 용액은 오렌지색으로 변화되고, 40분 동안 방치하였다. 반응 용액은 포화된 수성 NH4Cl 20㎖을 처리하고, EtOAc 50㎖로 희석하였다. 층을 분리시키고, 함수 30㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=10:1의 용매조건으로 전개시켜, LRMS(MH-HF)m/z 442.1의 물성치를 갖는 19을 1.15g(수득율 86%) 수득하였다.
19(1.15g, 2.49mmol), K2CO3(420㎎, 3.04mmol) 및 DMF 12㎖의 혼합물을 실온에서 30분 동안 방치하였다. 황색의 반응용액에 함수 50㎖을 처리하고, Et20 50㎖로 희석시킨다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 2x 50㎖로 세척한다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=10:1의 용매조건으로 전개시켜, LRMS(MH)m/z 442.1의 물성치를 갖는 20을 수득하였다.
상기 실험예 2 및 3에 상세히 기재딘 것과 유사한 제조과정을 사용하여 하기 표 2의 화합물을 제조하였다.
Figure 112004047311217-pct00029
실험예 4
화합물의 제조를 위한 다른 방법
Figure 112004047311217-pct00030
에틸클로로포메이트(11.0㎖, 115mmol)을 0 내지 5℃의 BOC-D-발린 5(25.0g, 115mmol), 트리에틸아민(16.0㎖, 115mmol) 및 THF 145㎖이 함유된 용액에 질소기체하에서 1분 이상 가한다. 반응 용액의 내부 온도를 9℃로 상승하였다. 15분 후, 디메틸하이드록실아민 하이드로염화물(13.46g, 138mmol), 트리에틸아민(32.0㎖, 230mmol) 및 THF 110㎖을 5분 이상 가한다. 내부 온도를 17℃로 상승하였다. 완전히 반응된 후, 빙냉/H2O조에서 냉각시키고, 반응 용액을 23℃에서 1시간 동안 유지시킨 다음, 반응 용액을 농축시켰다. 조추출물을 EtOAc 200㎖로 용해시키고, 1N HCI 200㎖ 및 함수 100㎖로 세척한다. 유기용매층을 MgS04로 건조시키고, 여과농축 하여, 추가의 정제과정 없이 무색 오일 21 30g(수득율 약 100%)을 수득하였다.
(2-브로모에틸)벤젠(38.0㎖, 273mmol), 마그네슘 전환물(7.0g, 289mmol), 및 Et20 500㎖을 질소기체, 23℃의 환류냉각장치(reflux condenser)의 1L 둥근플라스크에서 혼합하였다. 약 10분 후, 반응 혼합물이 발열하기 시작하면, 반응 혼합물을 빙냉/H2O조에서 간헐적인 냉각으로 환류 과정을 거치게 하였다. 1.5 시간 후, 그리그나드 반응이 완료되고, 용액은 23℃로 냉각되었다. 21(18.0g, 82.7mmol) 및 Et20 200㎖이 함유된 용액을 20℃의 페네틸마그네슘 브로마이드 용액에 캐뉼러(cannula)관을 통하여 첨가한다. 내부 온도계를 통하여 온도가 약 30℃를 초과하지 않도록 조절하였다. 반응 혼합물의 온도는 내부 온도계를 통하여 관찰하고, 빙냉/H2O조에서 20 내지 30℃로 조절하였다. 23℃에서 1시간 후, 반응 혼합물에 1N HCl 300㎖을 처리하였다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 100㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=10:1의 용매조건으로 전개시켜, LRMS(MH-rBuOCO)m/z 206.1의 물성치를 갖는 17을 13.4g(수득율 53%) 수득하였다.
리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(LHMDS, THF 1.0M, 94.0㎖, 3.3당량)을 케톤(17, 8.74g, 28.62mmol) 및 THF 100㎖이 함유된 -78℃ 용액에 주사기를 통하여 약 3분 동안 천천히 가하였다. 반응 용액의 온도를 내부 온도계로 관찰하면서 -54℃를 초과하지 않도록 하기위해 적절한 비율의 염기를 첨가하였다. 처리가 완료된 후, 반응 용액은 30분 동안 -78℃로 방치하였다. 1.20 g/㎖의 밀도를 갖는 순수한 4-클로로-2-플루오로벤조일 염화물(18, 4.58㎖, 28.62mmol)을 -78℃에서 -59℃로 온도를 상승시키면서 주사기를 통하여 약 1분 동안 첨가하였다. 반응 용액을 30분 동안 -78℃로 유지하였다. 반응 용액에 1N HCl 100㎖을 처리하였다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 100㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 추가적인 정제과정 없이 사용되었다.
상기 조생성물, K2CO3(4.75g, 34.34mmol) 및 DMF 100㎖의 혼합물을 30분 동안 23℃에서 방치하였다. 반응 혼합물에 Et2O 200㎖ 및 함수 200㎖을 처리하였다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 200㎖로 2회 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물을 실리카겔(CH2Cl2)로 흡수시키고, 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=10:1의 용매조건으로 전개시켜, LRMS(MH)m/z 442.1의 물성치를 갖는 20을 11.5g(2단계에 대한 90% 수득율) 수득하였다.
실험예 5
Figure 112004047311217-pct00031
메틸마그네슘 염화물(82.5㎖, 3.0M THF, 247mmol)을 21(17.95g, 69.0mmol) 및 THF 200㎖이 함유된 0 내지 5℃ 용액에 질소기체하에서 5분 이상 가하였다. 반응 혼합물의 온도는 내부 온도계를 통하여 관찰하였고, -54℃를 초과하지 않도록 하기위해 적절한 비율의 그리그나드 시약을 첨가하였다. 처리가 완료된 후, 냉각조를 제거하고, 반응 용액을 2 시간 동안 23℃에서 방치하였다. 반응 용액에 1N HCl 100㎖을 처리하였다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 100㎖로 세척하였다. 유기용매층을 MgS04로 건조시키고, 여과농축하여, 1H NMR 분석을 통하여 95% 이상 순도의 흰색 고형물 22를 12.5g(수득율 84%) 수득하였다.
LHMDS(128㎖, THF에서 1.0M)을 케톤)22, 12.5g, 58.1mmol) 및 THF 200㎖이 함유된 -78℃ 용액에 주사기를 통하여 약 3분 동안 천천히 가하였다. 반응 용액의 온도를 내부 온도계로 관찰하면서 -58℃를 초과하지 않도록 하기위해 적절한 비율의 염기를 첨가하였다. 30분 후, a-브로모-m-톨루니트릴(23, 12.5g, 63.9mmol) 및 THF 50㎖을 온도를 -78℃에서 -60℃로 상승시키면서 30초 이상 처리하였다. 냉각조를 즉시 빙냉/H2O조로 교환하고, 반응 용액을 약 0℃에서 20분 동안 방치하였다. 반응 용액에 1N HCl 100㎖을 처리한다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 100㎖로 세척하엿다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=10:1의 용매조건으로 전개시켜, LRMS(MH-rBuOCO)m/z 231.1의 물성치를 갖는 24를 11.6g(수득율 60%) 수득하였다. 1H NMR 분석을 통하여 관찰한 결과, 24는 약 80%의 순도를 나타내었다. 그러나 추가적인 정제과정은 수행되지 않았다.
리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(LHMDS, THF에서 1.0M, 28.4㎖, 3.3당량)을 케톤(24, 2.84g, 8.6mmol) 및 THF 40㎖이 함유된 -78℃ 용액에 주사기를 통하여 천천히 가하였다. 반응 용액의 온도를 내부 온도계로 관찰하면서 -48℃를 초과하지 않도록 하기위해 적절한 비율의 염기를 첨가하였다. 처리가 완료된 후, 반응 용액은 30분 동안 -78℃로 방치하였다. 1.20 g/㎖의 밀도를 갖는 순수한 4-클로로-2-플루오로벤조일 염화물(18, 1.38㎖, 8.6mmol)을 주사기를 통하여 첨가하였다. 반응 용액은 오렌지색으로 변하였고, 30분 동안 방치하였다. 반응 용액에 1N HCl 20㎖을 처리한다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 20㎖로 세척한다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 추가적인 정제과정 없이 사용 되었다.
상기 조생성물, K2CO3(1.43g, 10.34mmol) 및 DMF 43㎖의 혼합물을 1시간 동안 23℃에서 방치하였다. 반응 혼합물에 Et2O 100㎖ 및 함수 200㎖을 처리한다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 200㎖로 2회 세척한다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물을 실리카겔(CH2Cl2)로 흡수시키고, 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=5:1의 용매조건으로 전개시켜, LRMS(MH)m/z 467.1의 물성치를 갖는 25를 2.7g(2단계에 대한 67% 수득율) 수득하였다. 1H NMR 분석을 통하여 관찰한 결과, 25는 약 80%의 순도를 나타내었다. 그러나 추가적인 정제과정은 수행되지 않았다.
크로메논(25, 2.71g, 5.80mmol) 및 TFA:H20=97.5:2.5 25㎖을 23℃에서 1시간 동안 방치한 후, 반응 혼합물을 농축하였다. 결과물은 EtOAc 100㎖로 용해시키고, 1N NaOH 25㎖ 및 함수 25㎖로 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=1:1, 헥산:EtOAc=1:2 및 헥산:EtOAc=1:4의 용매조건으로 전개시켜, LRMS(MH)m/z 367.1의 물성치를 갖는 26을 1.20g(수득율 56%) 수득하였다.
실험예 6
Figure 112004047311217-pct00032
리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(LHMDS, THF에서 1.0M, 23.5㎖, 3.3당량)을 케톤(17, 2.18g, 7.14mmol) 및 THF 20㎖이 함유된 -78℃ 용액에 주사기를 통하여 천천히 가하였다. 반응 용액의 온도를 내부 온도계로 관찰하면서 -50℃를 초과하지 않도록 하기위해 적절한 비율의 염기를 첨가하였다. 처리가 완료된 후, 반응 용액은 30분 동안 -78℃로 방치하였다. 순수한 2,4-디플루오로벤조일 염화물(27, 1.05㎖, 8.57mmol)을 주사기를 통하여 첨가하였다. 반응 용액은 오렌지색으로 변하였고, 30분 동안 방치하였다. 반응 용액에 1N HCl 20㎖을 처리하엿다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 20㎖로 세척하엿다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=10:1의 용매조건으로 전개시켜, 28을 2.16g(수득율 68%) 수득하였다. 1H NMR 분석을 통하여 관찰한 결과, 28은 약 85%의 순도를 나타내었다. 그러나 추가적인 정제과정은 수행되지 않았다.
28(2.16g, 4.9mmol), K2CO3(812㎎, 5.86mmol) 및 DMF 24㎖의 혼합물을 1시간 동안 23℃에서 방치하였다. 반응 혼합물에 함수 200㎖을 처리하고, Et2O 50㎖로 희석한다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 50㎖로 2회 세척하엿다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=10:1의 용매조건으로 전개시켜, LRMS(MH)m/z 426.2의 물성치를 갖는 29를 1.25g(60% 수득율) 수득하였다.
실험예 7
Figure 112004047311217-pct00033
리튬 비스(트리메틸실릴)아미드(LHMDS, THF에서 1.0M, 47㎖, 3.3당량)을 케톤)17, 4.37g, 14.31mmol) 및 THF 55㎖이 함유된 -78℃ 용액에 주사기를 통하여 천천히 가하였다. 반응 용액의 온도를 내부 온도계로 관찰하면서 -50℃를 초과하지 않도록 하기위해 적절한 비율의 염기를 첨가하였다. 처리가 완료된 후, 반응 용액 은 30분 동안 -78℃로 방치하였다. 4-시아노-2-플루오로벤조일 염화물(30, 1.38㎖, 8.6mmol) 및 THF 5㎖이 함유된 용액을 온도를 -78℃에서 -50℃로 상승시키면서 주사기를 통하여 빠르게 첨가하였다. 반응 용액은 검붉은색으로 변하였고, 30분 동안 방치하였다. 반응 용액에 1N HCl 20㎖을 처리한다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 20㎖로 세척하엿다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 추가적인 정제과정 없이 사용되었다.
상기 조생성물, K2CO3(2.40g, 17.17mmol) 및 DMF 70㎖의 혼합물을 1시간 동안 23℃에서 방치하였다. 반응 혼합물에 Et2O 200㎖ 및 함수 200㎖을 처리하였다. 층을 분리시키고, 유기용매층을 함수 200㎖로 2회 세척하였다. 유기용매층은 MgS04로 건조시키고, 여과하여 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc=10:1의 용매조건으로 전개시켜, LRMS(MH)m/z 433.2의 물성치를 갖는 31을 4.95g(2단계에 대한 80% 수득율) 수득하였다.
실험예 8
Figure 112004047311217-pct00034
7-플루오로-크로메논(32, 96㎎, 0.19mmol)은 메탄올 10㎖에 0.5M 소디움 메톡시드에서 용해하였고, 70℃로 가열하였다. 70℃로 12시간 동안 방치한 후, 실온에서 냉각하였다. 용매를 감압하에서 제거하였다. 상기의 결과물에 EtOAc 20㎖ 및 물20㎖을 가하엿다. 층을 분리하고, 물층은 EtOAc 15㎖을 3회 가하여 추출하였다. 유기용매층을 결합하여 함수 25㎖로 세척하고 Na2SO4로 건조시켰다. 진공 상태에서 농축하고, 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 DCM:MeOH=20:1의 용매조건으로 전개시켜, 비결성성의 흰색 고형물인 LRMS(MH)m/z 509.3의 물성치를 갖는 33을 92㎎(수득율 94%) 수득하였다.
실험예 9
Figure 112004047311217-pct00035
화합물 29(608㎎, 1.43mmol)를 메탄올 40㎖에 0.5M 소디움 메톡시드가 함유된 용액에서 용해하였다. 혼합물을 3시간 동안 또는 LC-MS에서 개시물질이 남지 않을때까지 환류가열하였다. 이후, 용매를 증발시켰다. 결과물을 디클로로메탄 200㎖에서 용해시키고, 물 200㎖을 가하고, 2N HCI 용액으로 혼합용액이 pH 9가 될 때까 지 조절하였다. 수집된 유기용매층은 황산나트륨으로 건조시켰다. 용매를 증발시킨 후,최종적으로 진공건조시켜 화합물 34를 580㎎(수득율92%) 수득하였다.
실험예 10
Figure 112004047311217-pct00036
DMF 5㎖에 32(56㎎, 0.11mmol)가 함유된 용액에 NaH(미네랄 오일에 60%로 희석된 것의 5㎎, 0.15mmol)를 가하였다. 결과 용액은 45℃에서 5분 동안 교반한 다음, 알릴 알콜(10㎕,0.15mmol)을 피펫으로 가하였다. 결과 용액은 45℃에서 12시간 동안 교반한 다음, 실온에서 냉각시켰다. EtOAc 50㎖ 및 물 15㎖을 첨가하고, 층을 분리시켰다. 물층은 EtOAc 15㎖로 3회 추출하였다. 유기용매층은 결합하여, 물 30㎖ 및 함수 30㎖로 각각 2회 세척하고, Na2SO4로 건조시켜 감압농축하였다. 추가적 인 정제과정 없이 비결성성 고형물인 LRMS(MH)m/z 535.0의 물성치를 갖는 35을 54㎎(수득율 91%) 수득하였다.
35(54㎎, 0.10mmol) 및 MeCN 5㎖가 함유된 실온 용액에 모르폴린(44㎕, 0.50mmol)을 가하고, 이어서, Pd(PPh3)4(5㎎, 10%)를 가하였다. 결과 용액을 5분동안 교반한 다음, 감압농축하였다. 남은 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 DCM:MeOH=20:1 및 DCM:MeOH=10:1의 용매를 단계적으로 전개시켜, 회색(off-white) 고형물인 LRMS(MH)m/z 495.2의 물성치를 갖는 36을 41㎎(수득율 81%) 수득하였다.
실험예 11
3-벤질-7-클로로-2-[2-메틸-1-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일)-프로필]-크로멘-4-온의 제조
a) 2-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필아미노]-에틸 카르밤산 테르트-부틸 에스테르
염화메틸렌 150㎖에 2-(1-아미노-2-메틸-프로필)-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온(6.0g, 18mmol) 및 (3-옥소에틸)카르밤산 테르트-부틸 에스테르(3.6g, 23mmol)가 함유된 용액에 소디움 트리아세톡시보로하이드리드(7.4g, 35mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반시키고, 이후, 1N 수산화나트륨 150㎖로 희석시키고, 2시간 동안 격렬하게 교반시켰다다. 유기용매층은 1N 수산화나크륨 100 ㎖ 및 함수 100㎖로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시켜 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 에틸 아세테이트/헥산 용매를 0%에서 50%로 단계적으로 전개시켜, MS(ES+)m/e 485[M+H]+의 물성치를 갖는 주 화합물(title compound)을 5.7g(수득율 67%) 수득하였다.
b) 2-[1-(2-아미노-에틸아미노)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온
염화메틸렌/트리플루오로아세트산 4:1(250㎖)에 2-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필아미노]-에틸-카르밤산 테르트-부틸 에스테르(5.7g, 12mmol)이 함유된 용액을 실온에서 1.5시간 동안 농축될 때까지 방치하였다. 결과물은 염화메틸렌 200㎖로 용해하였고, 10% 소디움 카보네이트, 포화된 소디움 바이카보네이트 및 함수로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시켜 농축하였다. 결과물(4.2g, 수득율 91%)은 추가적인 정제과정 없이 사용되었다.
c) N-{2-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필아미노]-에틸}-4-메틸-벤즈아미드
염화메틸렌 100㎖에 2-[1-(2-아미노-에틸아미노)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온(4.1g, 11mmol) 및 트리에틸아민(2.2㎖, 17mmol)이 함유된 0℃의 빙냉 용액에 염화메틸렌 20㎖에 p-톨루일 염화물(1.7g, 11mmol)이 함유된 용액 을 가한다. 반응은 0℃에서 2시간 동안 유지되었고, 이후, 에테르 250㎖로 희석시켰다. 결과 용액은 1N 염화수소 200㎖로 2회, 포화된 소디움 바이크보네이트 200㎖ 및 함수 150㎖로 세척하고, 황산마그네슘으로 건조시켜 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 에틸 아세테이트/헥산 용매를 0%에서 60%로 단계적으로 전개시켜, MS(ES+)m/e 503[M+H]+의 물성치를 갖는 주 화합물을 2.8g(수득율 50%) 수득하였다.
d) 3-벤질-7-클로로-2-[2-메틸-1-(2-p-톨릴-4,5-디하이드로-이미다졸-1-일) -프로필]-크로멘- 4-온
톨루엔 60㎖에 N-{2-[1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필아미노]-에틸}-4-메틸-벤즈아미드(2.8g, 5.5mmol) 및 포스포러스 옥시클로라이드(phosphorus oxychloride, 9.4㎖, 100mmol)이 함유된 혼합물을 85℃에서 7시간 동안 가열한 후, 1시간 동안 환류가열하였다. 반응물이 농축된 후, 잔여 포스포러스 옥시클로라이드를 톨루엔 공비혼합물(toluene azeotrope)로 제거하였다. 결과 잔류물은 에틸 아세테이트 100㎖로 희석시키고, 포화된 소디움 바이카보네이트 100㎖ 및 함수 100㎖로 세척하여 황산마그네슘으로 건조시켜 농축하였다. 결과물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 메탄올/염화메틸렌 용매를 0%에서 8%로 단계적으로 전개시켜, MS(ES+)m/e 485[M+H]+의 물성치를 갖는 주 화합물을 1.4g(수득율 50%) 수득하였다.
상기 실험예 1, 3 및 4에 기재된 것과 같은 유사한 제조과정을 사용하여 하기 표 3의 화합물을 제조하였다:
Figure 112004047311217-pct00037
실험예 12
2-[(R)-1-(4-아미노메틸-2-p-톨릴-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온의 제조
a) 2-[(R)-1-(3-프탈리미도-2-옥소-프로필아미노)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7- 클로로- 크로멘-4-온
DMF 10㎖의 2-((R)-1-아미노-2-메틸-프로필)-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온(0.5g, 1.5mMol) 및 K2CO3(0.21g, 1.5mMol)에 N-(3-브로모-2-옥소프로필) -프탈리마이드(0.45g, 1.5mMol)를 가하였다(Nair, et al., J. Org. Chem., 40:1745, 1975). 반응물은 실온에서 3시간 동안 교반시키고, 진공농축한 후, EtOAc를 처리하고 물 및 함수로 세척하였다. 이후, Na2SO4로 건조시키고 증발시켜, MS(ES+)m/e 543.2[M+H]+의 물성치를 갖는 황색 고형물인 주 화합물을 0.88g(수득율 100%) 수득하였다.
b) 2-{(R)-1-[N-톨루오일-(3-프탈리미도-2-옥소-프로필)아미노]-2-메틸-프로필}-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온
CH2Cl2 10㎖의 2-[(R)-1-(3-프탈리미도-2-옥소-프로필아미노)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온(0.88g, 1.5mMol)에 Et3N(0.23㎖, 1.6mMol) 및 톨루오일 염화물(0.21㎖, 1.6mMol)을 가하였다. 반응물은 실온에서 18시간 동안 교반시키고, 진공농축한 후, EtOAc를 처리하고 1N HCl 및 함수로 세척하였다. 이후, Na2SO4로 건조시키고 증발시켰다. 결과물은 실리카겔로 충진한 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 EtOAc/헥산 용매를 5%에서 15%로 단계적으로 전개시키고, 이어서, 페트로늄 에테르(pet. ether)와 함께 분쇄시켜, 여과하고 진공건조하여 MS(ES+)m/e 661.2[M+H]+의 물성치를 갖는 주 화합물을 0.89g(수득율 90%) 수득하였다.
c) N-{1-[(R)-1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-2-p-톨릴-1H-이미다졸-4-일메틸}-프탈리마이드
2-{(R)-1-[N-톨루오일-(3-프탈리미도-2-옥소-프로필)아미노]-2-메틸-프로필}-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온(0.88g, 1.3mMol) 및 NH40Ac(5.13g, 66.8mMol)에 HOAc 15㎖을 가하였다. 반응물은 교반하면서 155℃ 오일조에서 2.5시간 동안 환류가열하고, 실온에서 냉각한 후 진공농축하였다. 남은 잔류물은 EtOAc로 처리하여 모으고, 물 및 함수로 세척한 후, Na2SO4로 건조시키고 증발시켰다. 결과물은 실리카겔로 충진한 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 50% EtOAc/헥산 용매로 전개시키고, 이어서, Et2O/페트로늄 에테르(1:2)와 함께 분쇄시켜, 여과하고 진공건조하여 하기의 물성치를 갖는 황갈색 고형물인 주 화합물을 0.51g(수득율 61%) 수득하였다 :
1H NMR(400MHz, CDCl3)δ 8.11(d, J = 8.6Hz, 1H), 7.89(2d, 2H), 7.73(2d, 2H), 7.53(d, J = 1.8Hz, 1H), 7.52(s, 1H), 7.39(d, J = 8.0Hz, 2H), 7.36(dd, 1H), 7.32(d, J = 8.0Hz, 2H), 7.14(m, 3H), 6.74(d, J = 1.5Hz, 1H), 6.72(s, 1H), 5.04(d, J = 8.8Hz, 1H), 4.94(s, 2H), 4.01(d, J = 15.5Hz, 1H), 2.63(m, 1H), 2.46(s, 3H), 2.44(d, J = 15.5Hz, 1H), 0.95(d, J = 6.6Hz, 3H), 0.29(d, J = 6.7Hz, 3H);
MS(ES)m/e 642.0[M + H]+.
d) 2-[(R)-1-(4-아미노메틸-2-p-톨릴-이미다졸-1-일)-2-메틸-프로필]-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온
EtOH 15㎖의 N-{1-[(R)-1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-3,4-디하이드로-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-2-p-톨릴-1H-이미다졸-4-일메틸}-프탈리마이드(0.50g, 0.78mMol)에 하이드라진 모노하이드레이트(hydrazine monohydrate, 0.2㎖, 2.5mMol)을 가하였다. 반응물을 실온에서 72시간 동안 교반시키고, 불용성 침전물을 제거하기 위하여 여과지(Celite　, USA)로 여과한 후, EtOH로 헹궈주고, 증발건조시켰다. 결과물은 실리카겔로 충진한 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 MeOH에 5% NH4OH/CH2Cl2의 용매를 5%에서 10%로 단계적으로 전개시켜, 하기의 물성치를 갖는 흰색 고형물인 주 화합물을 364㎎(수득율 91%) 수득하였다 :
1H NMR(400MHz, CDCl3)δ 8.14(d, J = 8.6Hz, 1H), 7.63(d, J = 1.8Hz, 1H), 7.37(m, 6H), 7.15(m, 3H), 6.71(d, J = 1.7Hz, 1H), 6.69(s, 1H), 5.00(d, J = 10.9Hz, 1H), 4.07(d, J = 15.5Hz, 1H), 3.92(d, 1H), 3.88(d, 1H), 2.72(br s, 2H), 2.65(m, 1H), 2.49(s, 3H), 2.48(d, J = 15.5Hz, 1H), 0.93(d, J = 6.6Hz, 3H), 0.30(d, J = 6.7Hz, 3H);
MS(ES)m/e 512.2[M + H]+.
상기와 유사한 제조과정을 사용하여 하기 표 4의 화합물을 제조하였다:
Figure 112004047311217-pct00038
실험예 13
N-1-[(R)-1-(3-벤질-7-클로로-4-옥소-3,4-디하이드로-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-2-p-톨릴-lH-이미다졸-4-일메틸-아세트아미드의 제조
CH2Cl2 5㎖의 2-[(R)-1-(4-아미노메틸-2-p-톨릴-이미다졸-1-일)-2메틸-프로필]-3-벤질-7-클로로-크로멘-4-온(0.17g, 0.33mMol)에 피리딘(27㎕, 0.33mMol) 및 Ac20(63㎕, 0.67mMol)을 저으면서 가하였다. 실온에서 4시간동안 교반한 다음, 반응물을 진공농축하였다. 남은 잔류물을 Et2O/페트로늄 에테르=1:1 용매와 함께 분쇄하여, 여과하고 진공건조하여, 하기의 물성치를 갖는 흰색 고형물인 주 화합물을 163㎎(수득율 89%) 수득하였다 :
1H NMR(400MHz, CDCl3)δ 8.14(d, J = 8.6Hz, 1H), 7.59(d, J = 1.8Hz, 1H), 7.43(m, 6H), 7.17(m, 3H), 6.84(br s, 1H), 6.71(d, J = 2.2Hz, 1H), 6.69(s, 1H), 5.07(d, J = 10.9Hz, 1H), 4.50(2d, 1H), 4.43(2d, 1H), 4.07(d, J = 15.5Hz, 1H), 2.66(m, 1H), 2.51(s, 3H), 2.48(d, J = 15.5Hz, 1H), 2.00(s, 3H), 0.95(d, J = 6.6Hz, 3H), 0.34(d, J = 6.7Hz, 3H);
MS(ES)m/e 554.4[M + H]+.
실험예 14
Figure 112004047311217-pct00039
4-시아노-2-플루오로벤조산 1 25 g, DMF 0.1㎖ 및 티오닐 염화물 50㎖의 혼합물을 질소기체하의 환류냉각장치의 250㎖ 둥근플라스크에 넣고 30분 동안 90℃오일조에서 환류가열하였다. 환류냉각기를 증류헤드(distillation head)로 교체하고, 남은 티오닐 염화물은 반응용기에서 증류하였다. 오일조의 온도는 증류를 촉진하기 위하여 120℃로 상승시켰다. 2시간 후, 남은 잔류 티오닐 염화물을 제거하기 위하여, 반응용기를 90℃에서 20분동안 가열한 다음, 130℃에서 90분 동안 가열하였다. 반응용기를 23℃에서 냉각시키고, 약 0.2 토르(Torr)의 고압진공 상태에 방치하였다. 반응용기를 멸균증류헤드와 집수플라스크로 장착하였다. 용기를 137℃ 오일조에 위치시키고, 생성물을 반응용기(b.p.=107℃ @~0.2토르)에서 증류하였다. 증류된 고형물을 냉각시켜, 흰색 고형물인 2를 수득하였다.
4-클로로-2-플루오로벤조산(3, 25 g), DMF (0.1㎖) 및 티오닐 염화물 (50㎖) 의 혼합물을 질소기체하의 환류냉각장치의 250㎖ 둥근플라스크에 넣고 30분 동안 90℃오일조에서 환류가열하였다. 환류냉각기를 증류헤드로 교체하고, 남은 티오닐 염화물은 반응용기에서 증류하였다. 오일조의 온도는 증류를 촉진하기 위하여 120℃로 상승시켰다. 2시간 후, 반응용기를 23℃에서 냉각시키고, 약 25 토르로 감압하였다. 남은 잔류 티오닐 염화물을 제거하기 위하여, 반응용기를 90℃에서 20분동안 가열한 다음, 120℃에서 90분 동안 가열하였다. 반응용기를 23℃에서 냉각시키고, 멸균증류헤드와 집수플라스크로 장착하였다. 용기를 160℃ 오일조에 위치시키고, 생성물을 반응용기(b.p.=124℃ @~25토르)에서 증류하였다. 무색 오일형태인 4를 수득하였다.
실험예 15
Figure 112004047311217-pct00040
피페로닐로일 염화물(1, 7.8g, 42mmol)을 실온에서 2-아미노-2-메틸-1-프로파놀(4㎖, 42mmol), CH2l2 200㎖ 및 트리에틸아민(11.7㎖, 84mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 용액을 45분 후에 농축한 후, 결과 잔류물을 EtOAc 40㎖로 희석하고, 함수 30㎖로 세척하였다. 유기용매층을 MgS04로 건조시키고, 여과하여 밝은 갈색 오일형태를 수득하기 위해 농축하였다. 수득된 조추출물 2(8.8g)은 추가적인 정제과정 없이 사용되었다.
테트라프로필암모늄 퍼루테네이트(TPAP, 638㎎, 1.8mmol)을 질소기체하, 0℃조건에서 2(8.6g, 36.3mmol), CH2Cl2(73㎖, 2㎖/mmol), 4-메틸-모르폴린 N-옥사이드(6.4g, 54.5mmol) 및 4℃ 활성화 파우더(activated powder, 18g, 500㎎/mmol)인 분자 입자들의 혼합용액을 일정량으로 분할하여 첨가하였다. 반응은 실온에서 15분 동안 진행되었다. 1시간 후, TLC로 반응을 확인하고, EtOAc 100㎖을 전개시켜 실리카겔을 통해 여과한 후, 여과물을 농축하여 회색 고형물 3 7g을 수득하였다. 물질을 재결정화하기 위하여, EtOAc 30㎖, MeOH 10㎖ 및 헥산 1㎖을 가열 및 초음파 처리와 함께 가하였다. 이후, 냉각시키면서 헥산 100㎖을 가한 후, 가열하였다. 용액이 냉각되면 결정이 즉시 침전되기 시작하였다. 혼합물을 여과하고, 결정을 헥산 10㎖로 세척하여 회색 솜털모양의 결정인 3을 4.88g(수득율 57%) 수득하였다.
실험예 16
Figure 112004047311217-pct00041
2-아미노-2-메틸-1-프로파놀 (4㎖, 42mmol), CH2Cl2 (200 ㎖), 4-아세틸 벤조산(1, 6.9g, 42mmol), EDC(1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이마이드 HCl(12.1g, 63mmol), HOBT(N-하이드록시벤조트리아졸 H20, 6.4g, 42mmol) 및 허니그 염기(Hunig's base, 디이소프로밀에틸아민, 22㎖, 126mmol)의 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. TLC 및 LC/MS로 결과를 확인하여 반응 혼합물을 농축하고, 남은 잔류물을 EtOAc 50㎖로 희석하고, NaHC03 40㎖로 2회 및 함수 40㎖로 세척하였다. 유기용매층을 Na2SO4로 건조시키고 여과한 후, 여과물을 농축하였다. 조추출물은 2회 아실화된 물질(bisacylated material)을 제거하기 위하여 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 헥산:EtOAc:CH2Cl2=4:1:1, 헥산:EtOAc:CH2Cl 2=1:1:1 및 EtOAc:CH2Cl2=1:1의 용매조건으로 전개시겼다. 알콜 2는 5.36g(수득율 54%)가 수득되었다.
테트라프로필암모늄 퍼루테네이트(TPAP, 387㎎, 1.1mmol)을 질소기체하, 0℃조건에서 2(5.36g, 22.8mmol), CH2Cl2(46㎖, 2㎖/mmol), 4-메틸-모르폴린 N-옥사이드(4g, 34.2mmol) 및 4℃ 활성화 파우더(11.4g, 500㎎/mmol)인 분자 입자들의 혼합용액을 일정량으로 분할하여 첨가하였다. 반응은 실온에서 15분 동안 진행되었다. 1시간 후, TLC로 반응을 확인하고, EtOAc 100㎖을 전개시켜 실리카겔을 통해 여과한 후, 여과물을 농축하여 밝은 분홍색 고형물 3을 4.4g 수득하였다. 물질을 재결 정화하기 위하여, 헥산:EtOAc=1:1 5㎖, CH2Cl2 20㎖ 및 MeOH 10㎖을 가열 및 초음파 처리와 함께 가하였다. 이후, 냉각시키면서 헥산 100㎖을 가한 후, 가열하였다. 용액이 냉각되면 결정이 즉시 침전되기 시작하였다. 혼합물을 여과하고, 결정을 헥산 10㎖로 세척하여 회색 솜털모양의 결정인 3을 2.46g(수득율 46%) 수득하였다.
실험예 17
Figure 112004047311217-pct00042
옥살릴 염화물 5㎖에 4-아세틸 벤조산 500㎎이 함유된 용액을 2시간 동안 환류가열하였다. 남은 옥살릴 염화물을 회전-진공에 의해 증발시키고, 잔류물은 진공건조시켰다. 생성물의 수득률을 정량화 하였다.
실험예 18
Figure 112004047311217-pct00043
(( R )-1-이소프로필-2-옥소-부트-3-에닐)-카르밤산 테르트-부틸 에스테르
테트라하이드로푸란(THF, 100㎖) 및 THF(360㎖, 360mmol, 3.1당량)에 비닐 마그네슘 브로마이드가 함유된 1.0M 용액을 질소기체 하에서 교반하면서 -78℃로 냉각시켰다. 혼합물에 THF 50㎖에 [(R)-(메톡시-메틸-카바모일)-메틸-프로필]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르(30.3g, 116mmol, 1당량)이 함유된 용액을 30분 이상 조금씩 처리하였다. 반응 후, 어두운 황색 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반한 다음, 냉각조를 제거하고, 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤(15시간) 동안 천천히 열을 가하였다. 반응 혼합물에 1N 수성 염산 700㎖의 빙냉 용액을 천천히 흘려보낸 다음, 실온에서 열을 가하였다. 유기용매층은 에틸아세테이트 600㎖로 3회 추출하였고, 황산나트륨으로 건조시키고, 진공농축하였다. 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 5% 내지 10% 에틸아세테이트/헥산 용매로 정제하여, ESMS[M+H]+: 228.4의 물성치를 갖는 흰색 고형물 16.8g(수득율 64%)의 생성물을 수득하였다.
Figure 112004047311217-pct00044
[( R )-( E )-1-이소프로필-4-(3-메톡시-페닐)-2-옥소-부트-3-에닐]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르
건조 아테토니트릴 150㎖에 ((R)-1-이소프로필-2-옥소-부트-3-에닐)-카르밤산 테르트-부틸 에스테르(13.54g, 59.6mmol)이 함유된 용액에 아르곤 기체하에서 3-이오도아니졸(iodoanisole, 13.96g, 59.6mmol), 트리에틸아민(9.1㎖, 65.6mmol)을 가하고, 이어서, 팔라디움 (II) 아세테이트(335㎎, 1.49mmol)을 가하였다. 결과물인 분명한 황색 용액을 80℃로 가열하였다. 가열 후, 반응물은 어두운 색으로 변하고, 검은색 팔라디움 침전물이 생성되었다. 15시간 후, 반응 혼합물을 실온에서 냉각시키고, 물 150㎖을 가하고, 에테르 150㎖로 희석하였다. 에테르층은 함수 100㎖로 세척하고 합해진 물층은 에테르 50㎖로 2회 추출하였다. 추출물은 황산마그네슘으로 건조시키고 여과하여 감압농축하였다. 잔류물은 즉시 실리카겔 크로마토그래피를 이용하여 헥산/EtOAc=9:1의 용매로 정제하여, MS(ES+)m/e 334.0[M+H]+의 물성치를 갖는 황색 오일형태의 [(R)-(E)-1-이소프로필-4-(3-메톡시-페닐)-2-옥소-부트-3-에닐]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르 17.6g(수득율 88%)을 수득하였다.
[( R )-( Z )-4-(3-시아노-페닐)-1-이소프로필-2-옥소-부트-3-에닐]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르
상기에 기재된 과정에 이어서, [(R)-(E)-1-이소프로필-4-(3-메톡시-페닐)-2-옥소-부트-3-에닐]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르에 3-이오도벤조니트릴(5.50g, 24.0mmol, 1당량)을 추가하여, ESMS[M+H]+: 329.2의 물성치를 갖는 약 90%의 순도의 황색 고형물인 주 화합물을 7.4g 수득하였다.
Figure 112004047311217-pct00045
[( R )-( E )-1-이소프로필-4-(3-메톡시-페닐)-2-옥소-부틸]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르
에틸아세테이트 450㎖에 [(R)-(E)-1-이소프로필-4-(3-메톡시-페닐)-2-옥소-부트-3-에닐]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르(17.6g, 52.9mmol)를 함유하는 용액에 질소 기체하에서 탄소 300㎖이 첨가된 10 wt%의 팔라디움을 가하였다. 질소는 수소의 풍선형 플라스크로 교체하고, 플라스크를 세척하였다. 3시간 후, 반응 플라스크를 질소로 세척하고, 에틸아세테이트로 헹궈진 셀라이트 여과지를 통해 여과하였다. 여과물을 감압농축하고 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피를 이용하여 헥산/EtOAc=9:1의 용매로 정제하여, 하기의 물성치를 갖는 무색 오일형태의 [(R)-(E)-1-이소프로필-4-(3-메톡시-페닐)-2-옥소-부틸]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르 16.2g(수득율 91%)을 수득하였다:
MS(ES+)m/e 336.4[M+H]+;
[a]D 20 = +19.1(c = 0.755, MeOH);
1H NMR(400MHz, CDCl3)δ 7.21(m, 1H), 6.80-6.77(m, 2H), 6.75(s, 1H), 5.13(d,J= 8.4Hz, 1H), 4.28(dd, J= 8.8, 4.4Hz, 1H), 3.81(s, 3H), 2.93-2.88(m, 2H), 2.85-2.76(m, 2H), 2.14(m, 1H), 1.46(s, 9H), 1.00(d,J= 6.8Hz, 3H), 0.75(d, J = 6.8Hz, 3H).
Figure 112004047311217-pct00046
[( R )-4-(3-시아노-페닐)-1-이소프로필-2-옥소-부틸]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르
탄소(10% wt/wt Pd/C의 740㎎)에 함유된 팔라디움을 메탄올 200㎖에 [(R)-(Z)-4-(3-시아노-페닐)-1-이소프로필-2-옥소-부트-3-에닐]-카르밤산 테르트-부틸 에스테르(7.4g, 22.5mmol, 1당량)이 함유된 가스가 제거된 용액에 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물은 가스를 완전히 제거하고 수소가스를 다시 채웠다. 수소화 과정은 대기압하에서 2.5시간 동안 진행되었다. 가스가 제거된 반응 혼합물은 디에틸 에스테르 300㎖로 희석하고, 셀라이트 여과지로 여과한 다음, 에테르 100㎖을 가하여 2회 세척하였다. 진공 농축 시킨 후, 잔류물은 플레쉬 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 20% 에틸아세테이트-헥산 용매로 전개시켜, 하기의 물성치를 갖는 흰색 고형물인 케톤 생성물 5.9g(수득율 79%)을 수득하였다 :
ESMS[M+H]+:331.2;
1H NMR(400MHz, CDCl3)δ 7.51(m, 2H), 7.46(m, 1H), 7.41(m, 1H), 5.07(m, 1H), 4.24(m, 1H), 2.98(m, 2H), 2.86(m, 2H), 2.11(m, 1H), 1.45(s, 9H), 0.98(d, 3H, J= 6.76Hz), 0.74(d, 3H, J= 6.78Hz);
[a]D = +24.74(c = 0.95, CH30H).
실험예 19
상기와 유사한 제조과정을 사용하여 하기 표 5의 화합물을 제조하였다:
Figure 112004047311217-pct00047
Figure 112004047311217-pct00048
Figure 112004047311217-pct00049
실험예 20
정맥투여를 위한 약학적조성물은 하기의 방법으로 제조된다.
3.5% (w/v) 만니톨이 포함된 50mM 소디움 아세테이트 버퍼인 pH 5.0의 IV 용액 1 ㎎/㎖(무염기) :
성분* 제조단위 (㎎/㎖)
실험예 2의 화합물
유리염기 1.000
빙초산 1.081
소디움 아세테이트 트리하이드레이트 4.355
만니톨, 무발열 35.000
주사용 멸균 정제수(WFI) q.s. 1㎖
*활성 화합물이 아닌 모든 구성요소는 미국약전(USP) 또는 유럽 약전(European Pharmacopeia, Ph. Eur.)에 의한다.
적절한 화합 용기에 주사용 멸균 정제수를 전체 용액부피의 약 75%로 채웠다. 빙초산 1.081g, 소디움 아세테이트 트리하이드레이트 4.355g, 만니톨 35.000g 및 활설 화합물 1.000g을 각각 측정하여 화합 용기에 넣은 후, 구성성분들을 혼합기로 섞어 혼합하였다. 전체 용액의 pH를 측정하고 5N NaOH 또는 5N 빙초산으로 pH 5.0으로 보정하였다. 용액에 주사용 멸균 정제수를 가하여 최종부피를 1L로 채웠 다. 활성 화합물이 약학적으로 허용 가능한 염, 수화물 또는 수화물의 염, 예를 들어, 모노클로라이드 염 또는 모노클로라이드 염의 수화물일 경우, 유리염기에 활성 당량을 가하였다.
실험예 21
N-(3-아미노프로필)-N-[(R)-1-3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드에 대한 염화수소산 염의 제조
한 가지 실시태양으로서, 상기 실험예 2에서 제조된 것과 같은 N-(3-아미노프로필)-N-[(R)-1-3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드에 대한 염화수소산 염은 하기의 방법으로 제형화 된다.
HCl 염에 예를 들어, TBME, THF 및 에틸아세테이트로부터 적어도 하나 이상의 적절한 용매에 용해된 유리염기가 염산, 적합한 수성 염산 또는 그밖의 물과 함께 반응시켜 적절하게 제조하였다. 혼합물은 결정화를 돕기위해 HCl 염을 적절하게 가하였다. 결과 염은 여과 및 TBME, THF 및 에틸아세테이트로부터 적어도 하나 이상의 적절한 용매로 염을 세척하여 건조하는 같은 통상적인 기술을 사용하여 분리하였다.
보다 구체적인 실시태양으로서, 하기에 염의 제조과정을 기재하였다.
1. 실온에서 TBME 10 부피 및 THF 5부피에서 유리염기를 용해하는 단계;
2. 6.0M 또는 12.0M, 1.1 당량의 수성 HCl을 조금씩 첨가하는 단계;
3. 하기 제조예 B에 의해 제조된 HCl 염의 결정이 포함된 용액을 적절하게 첨가하는 단계;
4. 결정이 형성될 때까지 적절하게 교반하는 단계; 및
5. 여과, TBME와 같은 적절한 용매로 세척 및 건조하여 결정을 분리하는 단계.
보다 구체적 실시태양으로서, 염의 제조과정을 하기에 기재하였다:
제조예 A
교반자석(stir bar)이 담긴 바이알에 500㎎의 N-(3-아미노프로필)-N-[(R)-1-3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드 및 3㎖의 TBME를 가하고, 실온에서 TBME에 유리염기를 용해하엿다. 흰색 고형물이 형성될 때까지 약 30초 동안 HCl 가스에서 끓였다. 고형물을 500㎕의 TBME로 2회 여과하고 헹군 다음, 시험관으로 고형물을 이동시키고, 4㎖의 TBME와 교반자석을 넣고 실온에서 교반하였다(염은 용해되지 않았다.). 아르고너트 RS10 가열 블럭(Argonaut RS10 heating block, Argonaut Technologies, USA) 또는 이와 비슷한 장치로 혼합물이 들어있는 시험관을 이동시키고, 온도를 하기와 같은 순서로 조절하엿다:
1. 30분 동안 실온에 방치;
2. 30분 이상 40℃로 조절하고, 30분 동안 40℃로 유지;
3. 30분 이상 실온으로 조절하고, 30분 동안 실온으로 유지;
4. 30분 이상 10℃로 조절하고, 30분 동안 10℃로 유지
5. 30분 이상 실온으로 조절하고, 30분 동안 실온으로 유지; 및
6. 상기 2번에서 5번의 과정을 반복.
용매 증발 주기를 20시간으로 하면, 가장자리에 흰색 분말이 형성되고, 시험관 바닥에 용해된 것처럼 보이는 고형물이 형성되었다. 여기에 2㎖의 TBME를 첨가하엿다. 15일 후, 밝은 황색 고형물을 여과하고 0.5㎖의 TBME로 2회 세척한 다음, 1㎖의 헥산으로 2회 세척하였다. 실온의 진공 오븐에서 12 내지 24시간 동안 건조시켜, HCl 염 440㎎을 수득하였다.
도 1 및 2는 각각 제조예 A에서 제조된 염에 대한 XRPD 및 MDSC 스캔(scan)을 나타낸다.
제조예 B
THF 5 부피(21㎖)에 N-(3-아미노프로필)-N-[(R)-1-3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드 4.23g을 용해한다. TBME(tert-butyl methyl ether) 10부피(42㎖)를 첨가한 다음, 1회에 12N HCl(750㎕)의 1.1당량을 첨가하였다. 약 10분 이상의 간격으로 약 10㎎ 씩 3회에 걸쳐서 제조예 A에서 제조된 HCl 염을 가하였다. 혼합물을 하룻밤(약 12 내지 24시간) 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하여, TBME로 고형물을 세척하고, 실온의 진공 오븐에서 12 내지 24시간 동안 건조시켜, HCl 염 4.3g을 수득하였다.
도 3은 제조예 B에서 제조된 염에 대한 XRPD 스캔을 나타낸 도이다.
본 발명은 하기의 X-ray 회절 피크를 갖는 N-(3-아미노프로필)-N-[(R)-l-3- 벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드 하이드로클로라이드 염 결정체를 포함한다 :
약 4.8, 9.7, 14.7, 17.9, 18.3, 20.1, 20.9, 22.5, 23.2, 23.8, 26.1 및 26.9°2 θ(theta).
실험예 22
KSP 물질 및 용액으로 처리된 종양세포주에서 세포 생존율의 억제 :
ㆍ 세포주 : SKOV-3, 인간 난소암(human ovarian cancer).
ㆍ 배지 : 페놀 레드 프리 RPMI(phenol red free RPMI) + 5% 우태아 혈청(fetal bovine serum) + 2mM L-글루타민(L-glutamine).
ㆍ 세포 생존율 측정을 위한 비색정량 시약 : 프로메가 MTS 테트라졸리움 화합물(Promega MTS tetrazolium compound).
ㆍ 최대 세포 사멸에 대한 대조군 화합물 : 1uM 토포테칸(Topotecan)
실험 과정: 1일째 - 세포 배양:
부착된 SKOV3 세포를 lO㎖ PBS(phosphate buffered saline)로 세척하고, 2㎖의 0.25% 트립신(trypsin)을 처리하여 37℃에서 5분 동안 배양하였다. 세포를 배지(phenol red-free RPMI + 5% FBS) 8㎖로 헹군 다음, 새로운 플라스크로 이동시켰다. 세포 농도는 쿨터카운터(Coulter counter)로 측정하고, 1,000 세포/100㎕ 농도로 될 수 있는 세포의 예상 부피를 계산하였다. 1,000 세포/100㎕ 농도로 세포가 부유된 배지를 100㎕ 씩 96-웰 플레이트에 분주한 다음, 37℃, 습도 100% 및 5% CO2의 배양기에서 18 내지 24시간 동안 배양하여 플레이트에 세포가 부착되도록 하였다.
실험 과정: 2일째 - 화합물 처리:
고압멸균된 웰 플레이트의 각 웰에 최초의 시험 화합물을 최고 예상 농도인 400x로 2.5㎕를 처리하였다. 400x(400uM) 토포테칸 1.25㎕를 대조군 웰에 각각 처리하였다. 상기 대조군 웰의 광학 밀도는 죽은 세포들과 처리 시료에 의한 배경 흡광도를 공제하기 위해 사용되었다. DMSO가 첨가되지 않은 배지 500㎕를 시험 화합물이 함유된 각 웰에 처리하고, 토포테칸을 처리한 웰에는 250㎕를 처리하였다. 0.5% DMSO가 첨가된 배지 250㎕를 시험 화합물이 연속적으로 희석된 모든 웰에 처리하였다. 웰 플레이트의 열에 맞추어, 배지가 포함된 화합물을 검정 중인 웰 플레이트로부터 대응되는 세포 플레이트에 위치가 동일하도록 처리하였다. 세포 플레이트를 37℃, 습도 100% 및 5% CO2의 배양기에서 72시간 동안 배양하였다.
실험 과정: 4일째 - MTS 처리 및 OD 측정:
배양된 플레이트를 배양기에서 꺼내어 40㎕의 MTS/PMS를 각 웰에 처리한 다음, 37℃, 습도 100% 및 5% CO2의 배양기에서 120분 동안 배양하였다. 이후, 5분 동안 교반한 다음, 96-웰 분광광도계(spectrophotometer)를 이용하여 490nm의 흡광도로 OD값을 측정하였다.
결과 분석
대조군(배경 흡광도)에 대한 백분율(%)을 기준으로 하여 계산하였고, XLfit는 50%의 세포 억제율을 나타내는데 요구되는 화합물의 농도로부터 용량반응곡선(dose-response curve)을 제작하기 위해 사용하였다. 상기에 기재된 방법으로 시험할 경우, 본 발명의 화합물은 활성을 나타내었다.
실험예 23
거울상 입체이성질체 분리
크로메논 거울상 입체이성질체에 대한 R:S=3:1 혼합물은 하기의 조건으로 키랄 크로마토그래피(chiral chromatography)에 의해 순수한 거울상 입체이성질체로 분리되었다 :
컬럼(Column) - 키랄팍 AD(Chiralpak AD, 250x 4.6mm, Diacel Inc., Japan);
시료 - i-PrOH:헥산=1:1 용매조건에서 22.5㎎/㎖;
조건 - 헥산의 isocratic 50% i-PrOH에서 40분,(S)-거울상 입체이성질체는 18.35분에서 수집되었고, (R)-거울상 입체이성질체는 26.87분에서 수집되었다. 실험예 2의 화합물에서 (R)-거울상 입체이성질체가 (S)-거울상 입체이성질체 보다 더욱 유의적인 효능을 나타내었다.
실험예 24
KSP 억제제의 작용에 의한 단일극성 방추체 형성
인간 난소 종양 세포주인 SKOV-3 세포를 96-웰 플레이트에 웰당 4,000 세포의 밀도로 분주한 다음, 24시간 동안 부착하였다. 이후, 크로메논 화합물을 다양한 농도로 24시간 동안 처리하였다. 24시간 후, 세포를 4% 포름알데히드(formaldehyde)로 고정시키고, 항-튜블린 항체를 처리하고 형광(fluorescently) 표지된 2차 항체를 처리한 다음, DNA 염색 시약인 호키스트 염색액(Hoechst dye)으로 염색하였다.
광학적인 검사로 화합물이 유사분열 전기에서 세포주기 정지의 원인임을 관찰하였다. DNA가 응축되었고 방추체 형성이 개시되었으나, 중지된 세포들은 일정하게 방추체 극체 분리의 역제를 나타내는 단일극성 방추체를 나타내었다. 또한, 항-KSP 항체의 미세주입이 중지된 세포들이 단일극성 방추체를 나타내는 것과 함께 유사분열 중지의 원인임을 확인하였다.
실험예 25
KSP 억제제 처리에 의한 종양 세포주의 세포증식 억제
세포를 96-웰 플레이트에 1,000 내지 2,500 세포/웰의 밀도로 분주하고, 24시간 동안 부착 및 성장 시켰다. 상기 세포에 48 시간 동안 약물을 다양한 농도로 처리하였다. 화합물이 처리된 시간은 T0으로 나타내었다. 세포증식 검정 용액인 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-5-(3-카르복시메톡시페닐)-2-(4-설포페닐)-2H-테트라졸리움(MTS, 미국 등록특허 제 5,185,450호, #G3580, CeIlTiter96ㄾ AQueous, Promega, USA) 시약을 사용한 테트라졸리움을 바탕으로 한 검정법은 T0에서 살아 있는 세포수와 48시간 동안 화합물에 노출된 후 남아있는 세포수의 관찰에 사용되었다.
0.25% DMSO가 첨가된 부형입자만을 처리한 대조군 웰의 세포들의 48시간 이상의 성장율을 100%로 하여 화합물이 처리된 웰의 세포들의 성장률을 비교하였다.
Gi50은 화합물의 uM 농도와 세포 성장의 백분율(%)의해 계산되었다. 화합물에 대한 Gi50은 대조군에 비하여 50%의 성장 억제를 나타내는 예상 농도로서, 하기의 수학식 2에 적용하였다 :
Figure 112004047311217-pct00050
상기에 있어서, Treated48은 처리된 세포에 대해 48시간에서 측정한 것을 나타내고, Control48은 대조군 집단에 대해 48시간에서 측정한 것을 나타낸다.
화합물의 모든 농도는 2개의 웰씩 시험되었고, 대조군은 12개 이상의 웰에 대한 평균값이다. 96-웰 플레이트 배치와 Gi50 계산 표는 미국 국립암센터(National Cancer Institute)에서 사용되는 것과 매우 유사하다(Monks, et al., J. NatI. Cancer Inst., 83:757-766, 1991). 그러나, 미국 국립암센터에서는 세포수의 정량에 사용한 방법은 MTS법 대신, 다른 방법을 사용하였다.
상기 실험예 1 내지 13의 화합물은 인간 난소 종양 세포주인 SKOV-3 세포의 세포증식을 억제하였다.
실험예 26
IC 50 의 계산 :
KSP 활성에 대한 화합물의 IC50의 측정은 ATPase 검정법을 사용하였다.
사용되는 용액은 하기와 같다 :
용액 1(Solution 1)은 3mM 포스포에놀피루베이트 포타슘 염(phosphoenolpyruvate potassium salt, P-7127, Sigma, USA), 2mM ATP(A-3377, Sigma, USA), 1mM IDTT(D-9779, Sigma, USA), 5uM 파클리탁셀(T-7402, Sigma, USA), 10ppm 소포제(antifoam 289, A-8436, Sigma, USA), 25mM Pipes/KOH(pH 6.8, P6757, Sigma, USA), 2mM MgC12(JT400301, VWR, USA) 및 1mM EGTA(E3889, Sigma, USA)으로 구성된다.
용액 2(Solution 2)는 1mM NADH(N8129, Sigma, USA), 0.2㎎/㎖ BSA(bovine serum albumin, A7906, Sigma, USA), 피루브산 키나제(pyruvate kinase) 7U/㎖, L-젖산염 탈수소효소(L-lactate dehydrogenase) 10 U/㎖(P0294, Sigma, USA), 100nM KSP 모터 도메인(KSP motor domain), 50ug/㎖ 미세소관, 1mM DTT(D9779, Sigma, USA), 5M 파클리탁셀, 10ppm 소포제, 25mM Pipes/KOH, 2mM MgC12 및 1mM EGTA로 구성된다.
화합물은 용액 1을 사용하여 96-웰 마이크로타이터 플레이트(Corning Costar 3695, Corning-Costar, USA)에서 순차적으로 8 내지 12회로 두 배씩 희석하였다. 이어서, 각 웰 담긴 상기 희석액에 용액 1을 50㎕ 씩 첨가하였다. 반응은 각 웰에 용액 2를 각각 50㎕ 씩 처리하면서 시작하였다. 이 과정은 수동의 다채널 피펫을 이용하거나 자동 액체 조절 장치(automated liquid handling devices)를 사용하여 수행 될 수 있다. 마이크로타이터 플레이트를 마이크로플레이트 흡광도 측정기(microplate absorbance reader)로 이동시켜 340nm 흡광도에서 측정되는 다중 흡광도를 동역학 방식(kinetic mode)으로 각 웰에 대해 측정할 수 있다. 이때, ATPase 비율에 비례적으로 변화되는 비율로 화합물 농도의 기능으로서 나타내어진다. 표준 IC50 측정을 위해, 얻어진 데이터를 비선형 맞춤 프로그램(nonlinear fitting program), 예를 들어, 그래피트 4(Grafit 4)를 사용하여, 하기 수학식 3으로 기재되는 4가지 미지수를 갖는 방정식에 적용하여 계산하였다 :
Figure 112004047311217-pct00051
상기에 있어서, y는 측정된 비율이고, x는 화합물의 농도이다.

Claims (76)

  1. 하기 일반식 I의 구조를 갖는 화합물이되, 상기 화합물은 이의 단일 입체이성질체 또는 입체이성질체의 혼합물을 포함하는 것을 특징으로 하는 화합물:
    [일반식 I]
    Figure 112010007465580-pct00052
    이때,
    R1은 벤질, 시아노벤질, 및 메톡시벤질로 구성된 군으로부터 선택되고;
    R2'은 수소이고;
    R2는 C1 내지 C4 알킬이고;
    R12는 -N(R4)(COR3)이고;
    R3는 C1 내지 C4 알킬로 치환된 페닐이고;
    R4는 수소, 아미노프로필, 및 (t-Boc)아미노프로필로 구성된 군으로부터 선택되고;
    R5, R6, 및 R8은 수소이고;
    R7은 C1 내지 C4 알콕시, 할로겐 하이드록실, 및 시아노로 구성된 군으로부터 선택되고;
    상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염;
    상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물; 또는
    상기 일반식 I의 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제 1항에 있어서, 상기 R7은 시아노, 메톡시, 및 할로겐으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 약학적으로 허용 가능한 용매화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물.
  6. 제 5항에 있어서, R7은 염소(Cl)인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 약학적으로 허용 가능한 용매화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물.
  7. 삭제
  8. 삭제
  9. 제 1항, 제5항, 및 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R2는 에틸 또는 프로필인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 약학적으로 허용 가능한 용매화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물.
  10. 제 9항에 있어서, 상기 R2는 이소프로필인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 약학적으로 허용 가능한 용매화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물.
  11. 삭제
  12. 삭제
  13. 삭제
  14. 삭제
  15. 제 1항, 제 5항, 및 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R1은 벤질인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 약학적으로 허용 가능한 용매화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물.
  16. 삭제
  17. 삭제
  18. 삭제
  19. 삭제
  20. 삭제
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  22. 삭제
  23. 삭제
  24. 제 1항, 제 5항, 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R3는 톨릴인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 약학적으로 허용 가능한 용매화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물.
  25. 삭제
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  53. 삭제
  54. 제 1항에 있어서,
    R1은 벤질이고;
    R2는 이소프로필이며;
    R3은 p-톨릴이고;
    R4는 3-아미노프로필이며; 및
    R7은 염소(chloro)인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 약학적으로 허용 가능한 용매화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물.
  55. 삭제
  56. 삭제
  57. 삭제
  58. 제 1항, 제 5항, 제 6항, 및 제 54항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 R2 및 R2'는 각각 R-구조를 갖는 입체 중심에 부착되는 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 약학적으로 허용가능한 염, 약학적으로 허용 가능한 용매화합물, 또는 약학적으로 허용 가능한 염의 약학적으로 허용 가능한 용매화합물.
  59. 제 1항, 제 5항, 제 6항, 및 제54항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약학적으로 허용가능한 염은 염산, 인산 또는 옥살산 염인 것을 특징으로 하는 화합물.
  60. 삭제
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  71. 삭제
  72. N-(3-아미노프로필)-N-[(1-3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드 화합물.
  73. N-(3-아미노프로필)-N-[(1-3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드 염산염의 수화물.
  74. N-(3-아미노프로필)-N-[(R)-(1-3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드 염산염의 수화물.
  75. 파우더 XRPD 피크(2θ)가 4.8, 9.7, 20.0, 및 23.7로부터 선택되는 값을 갖는 것을 특징으로 하는 N-(3-아미노프로필)-N-[(R)-(1-3-벤질-7-클로로-4-옥소-4H-크로멘-2-일)-2-메틸-프로필]-4-메틸-벤즈아미드 염산염의 수화물.
  76. 삭제
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