JPH0920792A

JPH0920792A - ヌクレオチドダイマー

Info

Publication number: JPH0920792A
Application number: JP7197113A
Authority: JP
Inventors: Koji Ijichi; 地知功史伊; Takeya Mori; 健也盛; Haruhiko Machida; 田治彦町; Shiro Shigeta; 田士郎茂; Masanori Baba; 場昌範馬; Masahisa Fujiwara; 原将寿藤; Tomoyuki Yokota; 田智之横
Original assignee: SOYAKU GIJUTSU KENKYUSHO KK
Current assignee: SOYAKU GIJUTSU KENKYUSHO KK
Priority date: 1995-07-11
Filing date: 1995-07-11
Publication date: 1997-01-21

Abstract

(57)【要約】（修正有）【課題】野生株はもとよりＡＺＴ耐性株および非核酸
系逆転写酵素阻害剤耐性株に対しても優れた抗ＨＩＶ活
性を有する新規なヌクレオチドダイマー及びこれを有効
成分とする医薬組成物を提供する。【解決手段】式（Ｉ）で表されるヌクレオチドダイマ
ー及びこれを有効成分とする医薬組成物に関する。〔式中、Ｒ^１〜Ｒ_３は水素又は低級アルキル基を示す〕

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、抗ＨＩＶ活性を有する
新規なヌクレオチドダイマー及びその用途に関するもの
である。

【０００２】

【従来の技術】３’−アジド−３’−デオキシチミジン
（ＡＺＴ）は優れた抗ＨＩＶ活性を有し、エイズ治療剤
として広く使用されている。しかし、ＡＺＴは、治療有
効量と毒性発生量との差が少なく、重篤な副作用を有す
るという欠点があった。かかる観点から、ＡＺＴに代わ
りうる抗レトロウイルス剤の開発が活発に行なわれた結
果、ＡＺＴ−Ｐ−ＤＤＩが優れた抗ＨＩＶ作用を有し、
かつ安全性も高いことからエイズ治療剤として有用であ
ることが報告されている（特公平５−４６３５８号公
報、米国特許第５１８７１６３号、AIDS RESEARCH AND
HUMAN RETROVIRUSES,4(6),449-455(1988)、ANTIMICROBIA
L AGENTS AND CHEMOTHERAPY,34(6),1061-1067(199
0)）。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、後述の
試験例でも明らかなようにＡＺＴ−Ｐ−ＤＤＩはＡＺＴ
耐性株に対して必ずしも満足できる抗ＨＩＶ活性を示さ
ないということが本発明者らの試験により明らかにされ
た。したがって、本発明は、この新しい知見に基づき、
ＡＺＴ野生株はもとよりＡＺＴ耐性株さらには非核酸系
逆転写酵素阻害剤耐性株に対しても優れた抗ＨＩＶ活性
を有する物質を得るという新規な課題を解決することを
主たる目的とするものである。

【０００４】

【発明の開示】本発明者らは、上記目的を達成するため
鋭意検討を重ねた結果、下記式（Ｉ）で表される新規な
ヌクレオチドダイマーが、野生株はもとよりＡＺＴ耐性
株さらには非核酸系逆転写酵素阻害剤耐性株に対しても
優れた抗ＨＩＶ活性を有することを見いだし、本発明を
完成させた。すなわち、本発明は、下記式（Ｉ）で表さ
れるヌクレオチドダイマーに関するものである。また、
本発明は、該ヌクレオチドダイマー（以下、本発明化合
物と称する。）を有効成分として含有する医薬組成物に
関するものである。

【０００５】

【化２】（式中、Ｒ¹〜Ｒ³は水素または低級アルキルを示す。）

【０００６】以下、本発明を詳細に説明する。（１）化合物本発明化合物は上記式（Ｉ）で表されるものである。式
中、Ｒ¹〜Ｒ³で表される低級アルキルとしては炭素数１
〜５程度のものを意味し、具体的にはメチル、エチル、
プロピルなどが例示される。また、Ｒ²およびＲ³の置換
位置は特に制限されるものではないが、活性の点からは
メタの位置が好ましい。このような本発明化合物の中で
好ましい化合物としては、例えば後述の実施例で合成さ
れた化合物などを例示することができる。また、本発明
化合物は塩の形態であってもよく、たとえば、ナトリウ
ム、カリウムなどアルカリ金属塩、カルシウム、マグネ
シウムなどのアルカリ土類金属塩などの各種金属塩を例
示することができる。

【０００７】（２）製造法本発明化合物の反応経路をフローチャートで示せば、次
のとおりである。

【０００８】

【化３】

【０００９】最初の工程は、ＡＺＴ−ＣＥＰ・ＴＥＡと
下記式（ＩＩ）で表されるＨＥＰＴ誘導体（ＨＥＰＴ）
とを縮合剤を用いて反応させてＡＺＴ−ＣＥＰ−ＨＥＰ
Ｔを調製する工程である。なお、反応に使用するＡＺＴ
−ＣＥＰ・ＴＥＡおよびＨＥＰＴは公知化合物であり、
常法により調製することができる（AIDS Research and
Human Retroviruses, 1988, 4, 449-455、 J.Med.Chem.,
1981,24,1177-1181、J.Med.Chem., 1981,24,1078-1083、
J.Med.Chem., 1991,34,349-357、J.Med.Chem.,1992,35,3
37-345、特公平７−５１５６７号公報）。

【００１０】

【化４】（式中、Ｒ¹〜Ｒ³は水素または低級アルキルを示す。）

【００１１】反応に使用する縮合剤としては、メシチル
スルホニルクロライド、トリイソプロピルベンゼンスル
ホニルクロライドなどの酸性触媒を例示することができ
る。縮合反応は、ピリジン、トリエチルアミンなどの塩
基性溶媒中、ＡＺＴ−ＣＥＰ・ＴＥＡ１モルに対し１
〜３倍モルのＨＥＰＴ及び０．５〜２倍モルの縮合剤を
用い、１０〜３０℃で１０〜５０時間程度撹拌混合させ
ることにより実施することができる。また、反応液中に
１−メチルイミダゾールなどの酸受容体を添加すること
により、縮合反応を効率的に進行させることができる。
得られた反応液の溶媒を留去し、さらに必要により上記
と同様の吸着樹脂を用いたカラムクロマトグラフィ−処
理に付してＡＺＴ−ＣＥＰ−ＨＥＰＴを精製し、次の工
程に供する。

【００１２】次の工程は、ＡＺＴ−ＣＥＰ−ＨＥＰＴと
アルカリとを反応させてシアノエチル基を除去し、本発
明化合物のＡＺＴ−Ｐ−ＨＥＰＴを調製する工程であ
る。反応に使用するアルカリとしては、アンモニア、水
酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウムな
ど通常の塩基性触媒を使用することができる。反応は、
たとえばアルカリとして水酸化ナトリウムを使用する場
合には、水酸化ナトリウム水溶液に上記ＡＺＴ−ＣＥＰ
−ＨＥＰＴを加え、２０〜５０℃で１〜２０時間程度反
応させることによりＡＺＴ−Ｐ−ＨＥＰＴのナトリウム
塩を得ることができる。

【００１３】かくして得られた本発明化合物は、後述の
試験例でも示されているように、野生株はもとよりＡＺ
Ｔ耐性株および非核酸系逆転写酵素阻害剤耐性株に対し
ても抗ＨＩＶ活性を有し、医薬品として優れた特性を有
するものである。従って、本発明化合物を有効成分とし
て含有する医薬組成物は、ＲＮＡウイルス、特にＨＩＶ
などのレトロウイルスの感染の予防または治療に有用で
あり、ヒトのウイルスの感染の予防または治療のために
（特にエイズの治療のために）使用されうる。本発明化
合物の投与方法は経口、経腸、非経口、局所投与などの
いずれの投与経路であってもよく、投与量は、患者の年
齢、病態、体重などに応じ適宜決定されるが、通常は１
日当たり０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましく
は１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲内から選ばれ、一回
または複数回に分けて投与される。

【００１４】本発明の医薬組成物は、通常医薬に使用さ
れる賦形剤、その他の添加剤を含む組成物として使用す
るのが普通である。これらの例として、固体状のものと
しては、乳糖、カオリン、ショ糖、結晶セルロース、コ
ーンスターチ、タルク、寒天、ペクチン、ステアリン
酸、ステアリン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナトリ
ウムなどが挙げられ、液体状のものとしてはグリセリ
ン、落花生油、ポリビニルピロリドン、オリーブ油、エ
タノール、ベンジルアルコール、プロピレングリコー
ル、水などが挙げられる。組成物の剤形としては任意の
形態を採ることができ、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、カ
プセル化剤、坐剤、トローチ剤などの固形製剤、シロッ
プ、乳液、軟ゼラチンカプセル、クリーム、ゲル、ペー
スト、スプレー、注射などの液状製剤が挙げられる。

【００１５】

【発明の効果】本発明化合物は、野生株はもとよりＡＺ
Ｔ耐性株および非核酸系逆転写酵素阻害耐性株に対して
優れた抗ＨＩＶ活性を有し、抗ＨＩＶ剤等の医薬品とし
て有用である。なお、本発明化合物は、耐性株の出現率
が現在の医薬品より低いと考えられる。

【００１６】

【実施例】次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明する
が、本発明にはこれに何ら限定されるものではない。合成例：ＡＺＴ−Ｐ−（Ｅ−ＨＥＰＵ−ｄＭ）ナトリウ
ム塩〔式（Ｉ）；Ｒ¹＝エチル、Ｒ²（３位）＝メチル、
Ｒ³（５位）＝メチル〕の調製

【００１７】ＡＺＴ−ＣＥＰ・ＴＥＡ０．５ｇのピリジ
ン溶液（１０ｍｌ）にトリイソプロピルベンゼンスルホ
ニルクロライド６０５ｍｇを加え、室温で３０分間撹拌
し、１−メチルイミダゾール０．３５ｍｌを加え、室温
で３０分間撹拌した後、Ｅ−ＨＥＰＵ−ｄＭ〔式（Ｉ
Ｉ）；Ｒ¹＝エチル、Ｒ²（３位）＝メチル、Ｒ³（５
位）＝メチル〕３５０ｍｇを加え、室温で１時間撹拌し
てＡＺＴ−ＣＥＰ−（Ｅ−ＨＥＰＵ−ｄＭ）を合成し
た。反応液を水（５０ｍｌ）及び酢酸エチル（５０ｍ
ｌ）を用いて分配し、有機層を飽和食塩水（５０ｍｌｘ
２）で洗浄後、有機層を無水硫酸ナトリウムを用いて脱
水し、溶媒を乾固した。得られた残渣をシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィー（溶出溶媒：クロロホルム）で精
製後、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液（１．３ｍｌ）を加
え、４０℃で２時間加熱反応させた。反応後、イソプロ
パノールを用いて結晶化した後、エタノールにより再結
晶化してＡＺＴ−Ｐ−（Ｅ−ＨＥＰＵ−ｄＭ）ナトリウ
ム塩（３６２ｍｇ，５３．３％）を得た。

【００１８】ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）：８．３０
（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），７．７６（ｓ，１Ｈ，６Ｈ），
６．８１（ｓ，１Ｈ，フェニル−４），６．７６（ｓ，
２Ｈ，フェニル−２，６），６．１４（ｔ，１Ｈ，１’
−Ｈ），５．２７（ｓ，２Ｈ，ＮＣＨ₂Ｏ４），４．４
７（ｍ，１Ｈ，３’−Ｈ），３．９１（ｍ，１Ｈ，４’
−Ｈ），３．８０（ｍ，２Ｈ，５’−Ｈ），３．７８〜
３．５２（ｍ，４Ｈ，ＯＣＨ₂ＣＨ₂０），２．４３
（ｍ，３Ｈ，２’−Ｈ及び−ＣＨ₂−），２．３５
（ｍ，１Ｈ，２’−Ｈ），２．２０（ｓ，６Ｈ，−ＣＨ
₃×２），１．８０（ｓ，３Ｈ，−ＣＨ₃），０．８５
（ｔ，３Ｈ，−ＣＨ₃）

【００１９】試験例：ＨＩＶ感染の防止効果１０％牛胎児血清、１００ＵのペニシリンＧおよび１０
０μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ１
６４０培地中でＭＴ−４細胞（ＨＩＶの感染を受けると
死滅する）１×１０⁴個に、細胞１個当り０．０２個の
ＨＩＶを感染させ、直ちに本発明化合物を含む検体を所
定量添加し、３７℃で培養した。培養後５日後に生存細
胞数をＭＴＴ法により測定し、ＭＴ−４細胞の細胞死を
５０％防ぐのに要する化合物濃度（ＥＣ₅₀）を求めた。
また、ＨＩＶを感染させずに上記と同様に培養し、ＭＴ
−４細胞の５０％が死滅する化合物濃度（ＣＣ₅₀）を求
めた。

【００２０】

【表１】表１ＨＴＬＶ−ＩＩＩ_Bは、野性型ＨＩＶ−１を、ＨＴＬＶ
−ＩＩＩ_B/AZT及びＨＴＬＶ−ＩＩＩ_B-Rは夫々ＡＺＴ耐
性突然変異体及び非核酸系逆転写酵素阻害剤耐性突然変
異体を表わす。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者馬場昌範鹿児島県鹿児島市西陵７−10−16 (72)発明者藤原将寿福島県福島市蓬莱町３−４−16 (72)発明者横田智之福島県福島市飯坂町平野字北下里20−１

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（Ｉ）で表されるヌクレオチドダイ
マー。【化１】（式中、Ｒ¹〜Ｒ³は水素または低級アルキルを示す。）
【請求項２】Ｒ¹がエチル、Ｒ²およびＲ³がメチルで
ある、請求項１記載のヌクレオチドダイマー。
【請求項３】塩の形態である、請求項１記載のヌクレ
オチドダイマー。
【請求項４】請求項１に記載のヌクレオチドダイマー
を有効成分として含有する医薬組成物。
【請求項５】抗ＨＩＶ剤である、請求項４記載の医薬
組成物。
【請求項６】経口投与形態である、請求項４記載の医
薬組成物。